SU1261705A1

SU1261705A1 - Способ получени модифицированного макропористого кремнезема

Info

Publication number: SU1261705A1
Application number: SU853867209A
Authority: SU
Inventors: Виктор Николаевич Постнов; Анатолий Валерьевич Брыкалов; Ирина Михайловна Гиманова
Original assignee: Ленинградский Ордена Ленина И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.А.А.Жданова
Priority date: 1985-01-07
Filing date: 1985-01-07
Publication date: 1986-10-07

Abstract

Изобретение относитс к макропористьм кремне мным сорбентам дл выделени и очистки биологически активньпс соединений и позвол ет повысить емкость модифицированного кремнеземного сорбента дл получени jf-глобулина. 10 г макропористого кремнезема сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 10%-ного растворар-фенилэтилтрихлорсилана в бензоле при 80&deg;С в течение 2 ч в присутствии 0,23 мл триэтиламина. Продукт промывают сухим хлороформом, гидролизуют гор чей водой и сушат под вакуумом 6 ч при 130 С. Полученный образец заливают метилхлорметиловым эфиром и нагревают при 60 С в течение 2 ч в присутствии каталитических количеств четыреххлористого олова. После экстракции диоксаном в присутствии сухого хлористого водорода образец сушат под ё вакуумом 5 ч при 130 С. Затем просл дукт обрабатывают 1%-ным раствором имидазола в этипацетате 2 ч при 77с, промывают этилацетатом, 10%-ным раствором тризтиламина в хлороформе и хлороформом. Целевой продукт содержит 0,14 ммоль/г остатков имидазольных групп.

Description

Изобретение относитс к сорбентам дл выделени и очистки биологически активных соединений и может быть использовано в синтезе аффинных сорбентов дл получени гамма-глобулина. Цель изобретени - повышение емкости модифицированного кремнезема. П р и м е р 1. 10 г макропористого кремнезема ( 12 нм, 5цо 120 ), очищенного от ио.нов железа , сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 10%-ного раствора /3 -фенилэтилтрихлорсилана в бензоле при 80 С в течение 2 ч. Перед проведением реакции р реакционную смесь добавл ют 0,23 мл триэтиламина. Непрореагировавшие реагенты удал ют с образца сухим хлоро формом. После, этого образец гидролизуют гор чей водой, а затем сушат под вакуумом 6 ч при t 130 С. Хлорметилирование провод т в среде метил хлорметилового эфира в присутствии четыреххлористого олова как катализатора при 60 С в течение 2 ч. После окончани реакции образец помещают в аппарат Сокслета с диоксаком, в который подают сухой хлористый водород . После удалени четыреххлорис $1-онч-cb$i- ( (CH,)

$i-OHCl

(О того олова образец отмывают от хлористого водорода диоксаном и сушат под вакуумом 5 ч при . Продукт содержит 0,37 ммоль/г хлорметильных групп. Анализ на хлор провод т модифицированным методом Фольгарда с использованием предварительной обработки пиридином (при в течение 2 ч). Затем образец обрабатывают 1%-ньм раствором имидазола в этилацетате 2 ч при t 77°С, промывают этилацетатом , 10%-ным раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом. Полученный образец содержит ммоль/г остатков имидазольных групп. Содержание имидазольных групп на поверхности определ ют по адсорбции красител кислотный рко-оранжевый Ж SO.H Процесс получени модифицированного кремнезема можно представить следующей схемой;

,о:: Cl

2$i-0-.. ,„ , /7Л CH oCHgCl sSi-O-.. „.

.Si-( ,&i- СН,), ОН -CHjOH 2 Ш,С1 „,C№lf f Si-lCH,),сн .сн 2

По емкости полученный продукт в два раза превосходит известный.

П р и м е р 2. Полученный модифицированный кремнезем используют в качестве сорбента дл аффинной хроматографии при очистке-плацентарного гамма-глобулина человека от гемопигментов .

.СН2С1.

(3)

Claims

В хроматографическую колонку 1,5x30 см помещают 2 г сорбента, полученного предлагаемым способом, уравновешивают фосфатным буфером (рН 7,0) и нанос т 1 мл 10%-ного плацентарного гамма-глобулина, содержащего 6-10 мг гемопигментов. фракции по 5 мл элюируют из кслонки (.-{ (2) он Isio SKCH.ifXgbCHrK 3 30 мл фосфатного буфера рН 7,0. Все операции провод т при 4°С. Выход очищенного от гемопигментов гаммаглобулина составл ет 80%. Гаммаглобулин полностью очищен от гемопигментов . Гомогенность полученного препарата подтверждают электрофорезом в полиакриламидном геле. Регенерацию носител провод т пр использовании 0,01 н. NaOH. Регенерированный носитель отмывают водой от NaOH до рН 7,0, уравновешивают фосфатным буфером и используют дл очистки новой порции гамма-глобулин При этом выход гамма-глобулина составл ет 80%, он полностью очищен от гемопигментов. После п тикратног использовани модифицированного кре 054 незема в пропущенном через колонку гамма-глобулине по вл ютс йримеси гемопигмептов (1-5%). Формула изобретени Способ получени модифицированного макропористого кремнезема, включающий последовательную обработку кремнезема кремннйорганическим модификатором , галогенсодержащим соединением и азотсодержащим лигандом, отличающийс тем, что, с целью повышени емкости продукта, в качестве модификатора используют р-фенилэтилтрихлорсилан, в качестве 1алогенсодержащего соединени - метилхлорметиловый эфир и в качестве лиганда - имидазол.