SU1213974A3 - Способ получени антигена вируса @ @ дл диагностики опухолей - Google Patents
Способ получени антигена вируса @ @ дл диагностики опухолей Download PDFInfo
- Publication number
- SU1213974A3 SU1213974A3 SU802918702A SU2918702A SU1213974A3 SU 1213974 A3 SU1213974 A3 SU 1213974A3 SU 802918702 A SU802918702 A SU 802918702A SU 2918702 A SU2918702 A SU 2918702A SU 1213974 A3 SU1213974 A3 SU 1213974A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- herpes simplex
- simplex virus
- rpm
- diagnosis
- buffer
- Prior art date
Links
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 title claims abstract description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 241000700198 Cavia Species 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000010750 Metalloproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063312 Metalloproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 244000309466 calf Species 0.000 claims 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 claims 1
- HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N methyl alpha-D-mannoside Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 abstract 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 abstract 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 108091005996 glycated proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56994—Herpetoviridae, e.g. cytomegalovirus, Epstein-Barr virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2474/00—Immunochemical assays or immunoassays characterised by detection mode or means of detection
- G01N2474/20—Immunohistochemistry assay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/803—Physical recovery methods, e.g. chromatography, grinding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
- Y10S436/813—Cancer
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
37°С
Изобретение относитс к медицине , в частности к иммунологии.
Целью изобретени вл етс создание промышленного способа получени антигена вируса простого герпеса, используемого дл диагностики опухолей .
Пример. У морских свинок в возрасте двух недель удал ют почки . Почки освобождают от оболочек и рыхлого сло и растирают, затем добавл от трипсин в количестве приблизительно 200 мл на каждые 10 по чек в присутствии лактальбумина и тел чьей сыворотки.
Эту сусйензию выдерживают 1 ч при в услови х первмешивани о Затем суспензию центрифугируют в течение 10 мин при скорости 1500 . Жидкость над осадком удал ют, а осевшие клетки промывают с добавлением питательной среды (лактальбу шна) в ту же самую пробирку, затем провод т другое центрифугирование. Снова удал ют жидкость над осадком, а клетки суспендируют в 10 ми питательной среды в той же самой пробирке. После этого суспензию помео ают в меньшую пробирку дл центрифугировани , которое провод т со скоростью 1000 об/мин.
Из осадка клеток готов т разведение в соотношении с использованием питательной среда тел( чьей сыворотки, вз той в концентраг ки 10%, Затем суспензию перенос т во вращающиес колбы, которые nocuie этого помещают в термостат с температурой 37°С на 2/3 сут. В течение этого периода питательную среду об™ новл ют один раз. Затем суспензию центрифугируют со скоростью 2000 об/м в течение 10 ин, пока на дне про бирки не получитс осадок образуго™ щий клеточную лепешку. Последшою
помещают во вращающуэосй колбу,, затем добавл ют вирус простого герпеса (ВПГ) , перемешива содержимое со скоростью 50-60 в течение 3 ч при 37°С. В течение этого периода образуетс антиген, который далее будет назьшатьс ТАР, в конце этой стадии получают клеточную лепешку,
ВНИИПИ Заказ 788/63 Тираж 659 Подписное Филиал ПИП Патент, г Ужгород, ул.Проектна , А
ii
0
5
0
5
Клеточную лепвЕшу хран т в зильнике при -80 С, из которого
содержащую ТАГ в необработанном виде . Из 10 морских свинок можно получить 1,5 мл клеток. К этим клеткам добавл ют 1,5 мл трис -буфера дл получени 50%-ной клеточной лепешки.
мороее
можно достать дл того, чтобы начать очистку ТАР, содержащегос в 3 мл
0 смеси, от примесей. Дл этого клетки дезинтегрируют путем замораживани - оттаивани , повтор эти процедуры трижды, и обработкой ультразвуком (0,9 общих капоциклов, 3 раза
5 по 3 мин). Центрифугированием при 27000 об/мин отдел ют жидкую фазу, добавл ют к ней 20 мМ три с -HCf буферного раствора, рН 72, до го объемного насьщег-ш ,, смесь вновь
0 центрифугируют при 50000 об/мин,
супернатант насыщают до 80% порошко- образньм сульфатом аммони . Полученную смесь центрифугируют при 15000 об/мин. К образовавшемус осадку добавл ют тотже буфер, суспензию пропускают через колонку, заполненн5по ДЕАЕ-сефадексом Д 50, «ри комнатной температуре, элюируют трис -HCf буфером. Затем пропускают через колонку, заполненную сефадек- сом G-100 5 и элюируют буферной смесью 7рис -HCf (20 &1оль/л) j далее хроматографируют на ДЕАЕ-сефа- дексе А 60, промывают раствором трис -НС (20 ммоль/л), элюируют раствором NaCj в трис -НС (30 ьшоль/л), удал ют NaC5 из элюи- рованной йзедкости с использованием, диализной CHCTiaMbi ДС-2, удал ют не гликозированные протеины с помощью афинной хроматографии на колонке, заполненной смолой сефарозы, св занной с конканавалином А посредством металлопротеина в присутствии 3%-но- го водного раствора oL -метип-О-ман- нозида, диализуют дл удалени пос- .леднего и вьщел ют целевой продукт..
По завершении процесса из 10 морских свинок получают 288 мкг TAF с мол. м, 70000 дальтон, добавл ют дистиллированную воду и полученный раствор лиофилизируют.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ВИРУСА HERPES SIMPLEX ДОЯ ДОАГНОСТИ- 'КИ ОПУХОЛЕЙ, заключающийся в том, что почки морских свинок обрабатывают трипсином в присутствии лактальбумина и телячьей сыворотки, полученные клетки культивируют в динамическом состоянии в питательной среде, затем заражают вирусом Herpes Simplex с добавлением основной среды Игла и культивируют при интенсивном перемешивании со скоростью 50-60 об/мин в течение 3 ч, далее клетки дезинтегрируют последовательным замораживанием и оттаиванием, и ультразвуковой обработкой, отделяют жидкую фа зу, добавляют к ней 20 мМ трис -НС? буферного раствора, pH 7,2 до 40%ного объемного насыщения, полученную смесь центрифугируют при 50000 об/мин, супернатант насыщают до 80% порошкообразным сульфатом аммония, смесь центрифугируют при 15000 об/мин, к полученному осадку добавляют тот же буфер, пропускают через колонку, заполненную ДЕАЕ-сефадексом А 50, при комнатной температуре, элюируют трис-НС? буфером, затем пропускают через колонку, заполненную сефадексом G-100, и элюируют тем же буфером с добавлением NaCl, полученный в элюат диализуют, удаляют не гликозироваиные протеины с помощью афинной хроматографии на колонке, заполненной смолой сефарозы, связанной |с конкаиавалином А посредством металлопротеина в присутствии 3%-ного С водного раствора -метил-Д-маннозида при последовательном удалении последнего и выделяют гликопротеин мол. м. 70000 дальтон.12131 >
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IT4908279A IT1117218B (it) | 1979-05-18 | 1979-05-18 | Procedimento per la produzione di un prodotto per la diagnosi dei tumori delle parti molli o carcinomi e prodotto ottenuto |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1213974A3 true SU1213974A3 (ru) | 1986-02-23 |
Family
ID=11269590
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU802918702A SU1213974A3 (ru) | 1979-05-18 | 1980-05-13 | Способ получени антигена вируса @ @ дл диагностики опухолей |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4391911A (ru) |
EP (1) | EP0016735B1 (ru) |
JP (1) | JPS55158559A (ru) |
AT (1) | ATE10102T1 (ru) |
BR (1) | BR8003165A (ru) |
CA (1) | CA1172562A (ru) |
DE (1) | DE3069536D1 (ru) |
EG (1) | EG14898A (ru) |
ES (1) | ES8104404A1 (ru) |
IL (1) | IL59539A (ru) |
IT (1) | IT1117218B (ru) |
SU (1) | SU1213974A3 (ru) |
ZA (1) | ZA802935B (ru) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IT1117218B (it) * | 1979-05-18 | 1986-02-17 | Depa Sas | Procedimento per la produzione di un prodotto per la diagnosi dei tumori delle parti molli o carcinomi e prodotto ottenuto |
US4452734A (en) * | 1980-02-11 | 1984-06-05 | Merck & Co., Inc. | Herpes subunit vaccine |
US4572896A (en) * | 1980-08-27 | 1986-02-25 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides |
JPS6051120A (ja) * | 1983-08-31 | 1985-03-22 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 単純ヘルペスサブユニットワクチン |
WO1986002733A1 (en) * | 1984-10-31 | 1986-05-09 | Alcon Laboratories, Incorporated | Sandwich immunoassay of antigens involved in ophthalmic disorders |
US4786590A (en) * | 1985-01-15 | 1988-11-22 | California Institute Of Technology | Diagnostic and therapeutic aspects of receptor-mediated leukemogenesis |
ATE236271T1 (de) * | 1993-04-30 | 2003-04-15 | Wellstat Biologics Corp | Verwendung der ndv zur herstellung eines medikaments zur krebsbehandlung |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1535317A (en) * | 1976-02-20 | 1978-12-13 | Mun Hon Ng W | Anti-cancer vaccines |
IT1117218B (it) * | 1979-05-18 | 1986-02-17 | Depa Sas | Procedimento per la produzione di un prodotto per la diagnosi dei tumori delle parti molli o carcinomi e prodotto ottenuto |
-
1979
- 1979-05-18 IT IT4908279A patent/IT1117218B/it active
-
1980
- 1980-01-14 EP EP19800830003 patent/EP0016735B1/en not_active Expired
- 1980-01-14 DE DE8080830003T patent/DE3069536D1/de not_active Expired
- 1980-01-14 AT AT80830003T patent/ATE10102T1/de not_active IP Right Cessation
- 1980-01-25 US US06/115,375 patent/US4391911A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-03-06 IL IL5953980A patent/IL59539A/xx unknown
- 1980-04-24 CA CA000350584A patent/CA1172562A/en not_active Expired
- 1980-05-13 SU SU802918702A patent/SU1213974A3/ru active
- 1980-05-15 JP JP6346480A patent/JPS55158559A/ja active Pending
- 1980-05-16 ES ES491553A patent/ES8104404A1/es not_active Expired
- 1980-05-16 ZA ZA00802935A patent/ZA802935B/xx unknown
- 1980-05-18 EG EG31080A patent/EG14898A/xx active
- 1980-05-19 BR BR8003165A patent/BR8003165A/pt unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ZA802935B (en) | 1981-06-24 |
EP0016735B1 (en) | 1984-10-31 |
US4391911A (en) | 1983-07-05 |
IL59539A (en) | 1983-10-31 |
EP0016735A3 (en) | 1981-04-15 |
EP0016735A2 (en) | 1980-10-01 |
IT1117218B (it) | 1986-02-17 |
BR8003165A (pt) | 1980-12-30 |
JPS55158559A (en) | 1980-12-10 |
CA1172562A (en) | 1984-08-14 |
IT7949082A0 (it) | 1979-05-18 |
ES491553A0 (es) | 1981-04-16 |
EG14898A (en) | 1985-06-30 |
ATE10102T1 (de) | 1984-11-15 |
IL59539A0 (en) | 1980-06-30 |
ES8104404A1 (es) | 1981-04-16 |
DE3069536D1 (en) | 1984-12-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Skeggs Jr et al. | The purification of hypertensin I | |
US3869436A (en) | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers | |
JPH07501937A (ja) | 精製キチンデアセチラーゼ | |
Gilbert et al. | The chemistry of xanthine oxidase. 9. An improved method of preparing the bovine milk enzyme | |
SU1213974A3 (ru) | Способ получени антигена вируса @ @ дл диагностики опухолей | |
Mirsky et al. | The isolation and crystallization of human insulin | |
JPH05500603A (ja) | 天然産キモシンの回収工程 | |
DE2363201B2 (de) | Verfahren zur Isolierung und Reinigung von Kallikrein aus biologischem Material | |
US4065445A (en) | Pregnancy-specific β1 -glycoprotein and process for isolating it | |
EP4361252A1 (en) | Commercial purification method for high-purity bacterial extracellular vesicles | |
JPS6034916A (ja) | 第1x因子および他のビタミンk依存性タンパク質の高純度精製 | |
Shimada et al. | Removal of neuraminic acid from H-2 alloantigens without effect on antigenic reactivity | |
CN1020734C (zh) | 提取超氧化物歧化酶复合物的方法 | |
US4610815A (en) | Process for producing and obtaining anaphylatoxin- and cocytotaxin-containing leucotaxine preparations and of anaphylatoxin and cocytotaxin proteins in molecularly homogeneous, biologically active form | |
US2893920A (en) | Pro-elastase and preparation thereof | |
US2886489A (en) | Preparation of elastase | |
Porath | Bioaffinity chromatography-methodology and application | |
RU2068267C1 (ru) | Способ получения гиалуронидазы | |
US4588685A (en) | Process for the preparation of a new-type active substance selectively inhibiting food intake | |
Lundblad et al. | Purification of cathepsin B from oocytes and mature eggs of the sea urchin Brissopsis lyrifera by means of gel filtration | |
US5004818A (en) | Method for preparation of nephritogenoside | |
RU2068693C1 (ru) | Способ получения с1-инактиватора человека | |
SU1187824A1 (ru) | Способ получени иммуностимул тора | |
SU411867A1 (ru) | ||
SU1137098A1 (ru) | Способ выделени пропердина из сыворотки крови |