SU1102603A1 - Способ получени фосфатидилхолина - Google Patents

Description

О 0 3

о

Изобретение относитс  к медицинской .промышленности, в частности к способам получени  фосфолипидов из животного сырь . Известен способ получени  фосфат дилхолина, включающий измельчение жи вотного сырь , его экстракцию органическим растворителем, очистку полу ченного экстракта от примесей и вьэде ление целевого продукта 1, Однако известный способ не позвол ет получить целевой продукт с достаточно высоким выходом. Кроме того в известном способе используетс  го ловной мозг сельскохоз йственных животных , представл ющий собой пищевой продукт, и спинной мозг, который  вл етс  субпродуктом 1 категории. Цель изобретени  - увеличение выхода целевого продукта и расширение сырьевой базы. Поставленна  цель достигаетс - тем что согласно способу получени  фосфатидилхолина , включающему измельчение животного сырь , его экстракцию органическим растворителем, очистку полученного экстракта от примесей и выделение целевого продукта, в качестве сырь  используют головной моз тюлен , экстракцию сырь  провод т неоднократно ацетоном при соотношении сырь  и ацетона (1:5)-(1:6) при температуре 2О-25°С, а очистку прово д т обработкой упаренного экстракта смесью хлороформа, этанола и воды, вз тых в соотношении 15:5:4, далее раствор повторно упаривают, образовавшийс  осадок раствор ют в смеси хлороформ-этанол, вз тых в соотноше НИИ (1:1)-(1:1,5) и выделение целевого продукта осуществл ют нанесением полученного раствора на силикагел с последующим дополнительным нанесением на него смеси хлороформ - этанол , вз тых в соотношении (1:1)- (1:1,5) в присутствии 8-10%-ного водного аммиака. Способ осуществл ют следующим образом. Замороженный натуральный мозг тюлен  дефростируют, измельчают при помощи м сорубки и экстрагируют 6-8 раз 5-б-кратными объемами ацетона при 20-25с. Экстракт упаривают досуха, остаток раствор ют в 15-20кратном объеме смеси хлороформ 96%-ный этанол, вз тых в соотношении 3:1, и раствор встр хивают с водой ( 20% от объема раствора). Нижнюю фаз образовавшейс  двухфазной системы упаривают досуха, остаток раствор ют в 2-3-кратном объеме смеси хлороформ 96%-ный этанол, вз тых в соотношении ( 1:1)-(1:1,5). Раствор нанос т на силикагель (5-6-кратное количество по отношению к весу остатка), помещенный в цилиндрическую фильтровальную воронку, силикагель промывают 10-12 объемами той же смеси р.астворйтелей , а затем 5-7 объемами этой же смеси, содержащей 8-10% концентрированного водного амьшака. После упаривани  аммиачного фильтрата и высушивани  остатка в вакууме получают чистый фосфатидилхолин. Выход целевого п коду к та 1,4-1,6% от веса натурального мозга, содержание основного вещества в препарате не ниже 95%, перекисное число Не выше 0,02, полнота извлечени  из мозга не менее . 90%. Пример . Используют головной мозг гренладского тюлен -белька, наход щегос  на вольерном содержании на побережье Белого мор  и забиваемого в возрасте 1 мес. Мозг, извлеченный из забитых животных, немедленно замораживают (-15°С), а через 10 сут 1 кг мозга дефростируют, измельчают в м сорубке, помещают в бутыль емкостью 10 л и заливают 5 л ацетона (квалификаци  ЧДА). Смесь перемешивают механической мешалкой 1 ч при 20с, после чего фильтруют через cтeкл kный пористый фильтр № 2, твердый остаток экстрагируют еще 6 раз описанным способом. Все полученные фильтраты объедин ют и упаривают досуха (здесь и L далее растворители отгон ют на роторном испарителе при 30°С и остаточном давлении 15 мм рт. ст.), добав л   в качестве пеногасител  10%н-бутанола . Остаток перемешивают . 30 мин с 600 мл смеси хлороформ 96%-ный этанол (3:1 по объему). . Смесь фильтруют, фильтрат встр хивают 5 мин с 120 мл воды и оставл ют дл  полного разделени  фаз. Нижнюю фазу отдел ют и упаривают досуха. Остаток раствор ют в 80 мл смеси хлороформ - 96%-ный этанол (1:1 по объему), раствор внос т в цилиндрическую фильтровальную воронку диаметром 40 мм с пористым стекл нным фильтром № 2, заполненную 50 г силикагел  КСК (Воскресенского химкомбината; размер частиц от 75 до 200 мкм) После слива через силикагель основной массы жидкости пропускают дополнительно 400 мл смеси хлороформ 96%-мый этанол (1:1 по объему), а затем силикагель промывают 250 мл этой же смеси, содержащей 20 мл концентрированного водного аммиака. Аммиачный фильтрат собирают отдельно и упаривают досуха. Остаток сушат 8 ч над безводным хлористым кальцием при и остаточном давлении О,2 мм рт. ст., получают 15,1 г (1,5% от веса натурального мозга) фосфатидилхолина . Содержание основного вещества в препарате 95,5%, перекисное число 0,016. При тонкослойной хроматографии на силикагеле продукт мигрирует в виде одного п тна и не

311026034

отличаетс  от заведомого образцарасчете на натуральный мозг, при фосфат дилхолина, полученного из моэ- зтом содержание целевого продукта

га быка.в препарате менее 20%, в качестве

Таким- образом в предлагаемом спо-примесей присутствуют токсичные весобе в качестве сырь  используютс щества, - продукты деструкции липинереализуемые отходы промысла, тогда5 дов и перекиси (перекисное число

как в известном спосббе сырьем слу-более 0/7), в предлагаемом способе

жат пищевые продукты - головной мозг. выход увеличен почти в 5 раз и соссельскохоз йственных животных и (или). тавл ет 1,4-1,6% пр  содертхании цевысокоценный субпродукт - спиннОйлевого продукта в препарате более

мозг тех же животных. Выход фосфати-10 95%, продукты деструкции липидов отдилхолина при его получении извест-сутствуют, перекисное число ниже

ным способом не превышает 0,33% в0,02.

Claims (1)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФОСФАТИДИЛХОЛИНА, включающий измельчение животного сырья, его экстракцию органическим растворителем^-очистку полученного экстракта от примесей и выделение целевого продукта, о т л и ч а ю. * щ и й с я тем, что, с целью увелйче-»· . *· ния выхода целевого продукта и расширения сырьевой базы, в качестве сырья используют головной мозг тюленя, экстракцию сырья проводят неоднократно ацетоном присоотношении сырья и ацетона (1:5)-(1:6) при температуре 2025°С, а очистку проводят обработкой упаренного экстракта смесью хлороформа, этанола и вода, взятых в соотношении 15:5:4, далее раствор повторно упаривают, образовавшийся осадок растворяют в смеси хлороформ -.этанол, взятых в соотношении (1:1)-(1:1,5) и выделение целевого продукта осуществляют нанесением полученного раствора на силикагель с последующим допрл-_ нательным нанесением на него смеси хлороформ - этанол, взятых в соотношении (1:1)-(1:1,5) в присутствии 8—10% водного аммиака.

   SU ...1102603