SK3602000A3 - New npy antagonists - Google Patents

Description

-tsKvé antagonisty NPY

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka nových farmaceutický využiteľných zlúčenín, predovšetkým antagonistov neuropeptidu Y, použitia takýchto zlúčenín ako liečiv, farmaceutických kompozícií, ktoré ich obsahujú a syntetických spôsobov ich prípravy

Doterajší stav techniky

Neuropeptid Y (NPY) je peptid obsahujúci 36 aminokyselín. V posledných rokoch sa zistilo, že NPY je dôležitým ko-transmiterom v periferálnom sympatickom nervovom systéme.

Bol vyslovený postulát (pozri Pharmacological Reviews (1996), 48, 113), že účinky sympatickej nervovej aktivácie nie sú spôsobené len neuronálnym uvoľňovaním adrenalínu, ale môžu byť tiež výsledkom súbežného uvoľňovania NPY zo sympatických nervových zakončení.

Je známe, že uvoľňovaný NPY vyvoláva značné konštrikcie krvných ciev ako v srdci (koronárne artérie) tak i vo väčšine periférnych orgánov. Predpokladá že tento vazokonštriktívny účinok NPY je sprostredkovaný receptorom podtypu známeho ako Yv

Uvoľňovaný NPY môže pôsobiť tiež na autonómne nervové zakončenia, pričom inhibuje uvoľňovanie transmiterov a týmto znižuje vagálny charakter srdcového svalu ako následok zníženého uvoľňovania acetylcholínu. Jestvuje ,domnienka, že tento účinok NPY je sprostredkovaný receptorom podtypu známeho ako Y₂.

Boli definované ďalšie podtypy NPY receptora, zahrňujúce Y₃, Y₄, Y5 a Y₆. Presné funkcie týchto podtypov neboli identifikované vo všetkých detailoch, ale predpokladá sa, že podreceptor Y₅ sa podieľa výžive a regulácii prijímania potravy (pozri Exp. Opin. Invest. Drugs, 6, 437 (1997)).

Zvýšené koncentrácie NPY vplazme sa zistili pri závažných kardiovaskulárnych ochoreniach vrátane angíny pectoris, infarktu myokardu a hypertenzie.

-2Okrem toho sa ukázalo, že emočný stres spôsobuje signifikantné zvýšenie hladín NPY vplazme (pozri Circulation (1994) 90, I-268, Abstrakt No. 1445). Takéto pozorovania poukazujú na signifikantnú patogénnu rolu NPY pri myokardiálnom ischemickom srdcovom ochorení a hypertenzii. Navyše, spôsobím koronárnej vazokonštrikcie a zníženého vagálneho stavu NPY môže pacienta predisponovať k ventrikulárnej fibrilácii a náhlej srdcovej smrti.

Dalo by sa preto očakávať, že účinné antagonisty NPY budú využiteľné okrem iného pri liečbe kardiovaskulárnych ochorení.

Nepeptidové antagonisty NPY boli opísané v európskych patentových prihláškach EP 614 911, EP 747 357, EP 747 356 a EP 747 378, medzinárodných patentových prihláškach WO 94/17035, WO 97/19911, WO 97/19913, WO 97/19914, WO 96/22305, WO 96/40660, WO 96/12490, WO 97/09308, WO 97/20820, WO97/20821, WO 97/20822 a WO 97/20823 a amerických patentoch US 5,552,411 a US 5,567,714.

Európske patentové prihlášky EP 747 357, EP 747 356 a EP 747 378 opisujú dihydropyrídinové deriváty ako antagonisty podiečeptora Yi₄

Medzinárodné patentové prihlášky WO 96/12490, WO 97/09303 a americký patent č. US 5,567,714 opisujú deriváty benzotiofénu a indolu ako antagonisty pod receptora Yi.

Medzinárodná patentová prihláška WO 96/40660 opisuje deriváty benzylamínu ako antagonisty podreceptora Yi alebo parciálne antagonisty pod receptora Yi.

Americký patent č. U€ 5,552,411 opisuje deriváty chinolínu ako antagonisty podreceptora Υμ

Medzinárodné patentové prihlášky WO 97/20820, WO 97/20821, WO 97/20822 a WO 97/20823 opisujú deriváty chinazolínu a indolu ako aníagonicty podreceptora Y₅ a sú teda indikované na použitie pri liečení porúch stravovania.

Zlúčeniny opísané v medzinárodnej patentovej prihláške WO 96/22305 sú opísané ako antagonisty podreceptora Y₂ a sú taktiež indikované na použitie pri

-3liečení porúch stravovania. Spomedzi zlúčenín sú špecificky opísané fenylalanínamidové deriváty N-(difenylpropionyl)arginínu.

Či sú zlúčeniny opísané v európskej patentovej prihláške EP 614 911 a v medzinárodnej patentovej prihláške WO 94/17035 antagonistami podreceptora Yi alebo Y2 nie je uvedené.

Medzinárodná patentová prihláška WO 94/17035 opisuje určité deriváty aminokyselín, vrátane (R)-N²-(difenylaceíyl-N-[(4-hydroxyfenyl)metyl]arginín amidu, ako antagonisty NPY. Prítomnosť substituentov na atóme uhlíka, ktorý je v a-polohe vzhľadom na (4-hydroxy)-substituovanú fenylovú skupinu vo vyššie uvedenej molekule nie je spomenuté ani posúdené.

Prekvapujúco sme zistili, že nové analógy vyššie uvedených zlúčenín obsahujúce substituenty na atóme uhlíka, ktorý je v α-polohe vzhľadom na vyššie uvedenú fenylovú skupinu, sú pozoruhodne dobrými antagonistami NPY.

Podstata vynálezu

Vynález sa týka zlúčenín všeobecného vzorca I R^

{Il v ktorom

Ar¹ predstavuje štruktúrny fragment vzorca

-4alebo znamená 1- alebo 2-naftyl, pričom posledná uvedená skupina je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z OH, halogénu, alebo Cvy-alkoxylu;

R¹ predstavuje C(O)NH2, C^-alkyl (prípadne substituovaný alebo ukončený jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z hydroxyskupiny alebo aminoskupiny), alebo spolu s R⁷ (v Ar¹) tvorí C₂.3-alkylén;

R4 znamená H, C^y-alkyl alebo Ci.₄-alkylénfenyl (pričom v poslednej uvedenej skupine je fenylová skupina prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z OH alebo Ci-4-alkyloxylu);

R⁵ a R⁶ navzájom nezávisle od seba predstavujú vodík, OH, Ci.₄-alkyl, Ci^-alkoxy alebo halogén;

R⁷ znamená vodík, OH alebo spolu s R¹ tvorí C2-3-alkylén;

R⁸ predstavuje vodík, halogén, OH, Ci.₇-alkoxy, fenyl, fenoxy, benzyloxy, -(CH₂)_nC(O)N(R¹⁰)R¹¹, -(CH2)nN(H)C(O)N(R¹⁰)R¹¹, alebo -O(CH2)_nC(O)OR¹⁰,

R⁹ znamená vodík, halogén OH alebo C^y-alkoxy;

R², R³, R¹⁰ a R¹¹ navzájom nezávisle od seba predstavujú vodík alebo Ci_₇-alkyl; a n znamená 1,2,3 alebo 4;

alebo ich farmaceutický prijateľné deriváty (v ďalšom spolu uvádzané ako „zlúčeniny podľa vynálezu“).

Farmaceutický prijateľné deriváty zahrňujú solváty a soli. ŠpeQifické soli, ktoré možno uviesť zahrňujú soli kyseliny chlorovodíkovej a kyseliny gáforsulfónovej.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu vykazovať tautomérne vlastnosti. Všetky tautomérne formy a ich zmesi sú zahrnuté do rozsahu vynálezu.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu tiež obsahovať jeden alebo viac asymetrických atómov uhlíka a môže teda vykazovať optické a/alebo diasteroizomérne vlastnosti. Všetky diastereoizoméry sa môžu oddeliť s použitím

-5konvenčných postupov, napríklad pomocou chromatografie alebo frakčnej kryštalizácie. Rozličné stereoizoméry sa môžu izolovať oddelením racemickej alebo inej zmesi zlúčenín s použitím konvenčných metód, napríklad frakčnej kryštalizácie alebo HPLC. Požadované optické izoméry sa môžu pripraviť reakciou vhodných opticky aktívnych východiskových materiálov pri podmienkach, ktoré nespôsobujú racemizáciu alebo epimerizáciu. Požadované optické izoméry sa môžu získať tiež derivatizáciou, napríklad reakciou medziproduktu s homochirálnou kyselinou, oddelením diasíereoizomérnych derivátov pomocou konvenčných postupov (napríklad HPLC, chromatografia na oxide kremičitom) a spätnou konverziou na opticky čistý medziprodukt. Všetky stereoizoméry sú zahrnuté do rozsahu vynálezu.

Alkylové skupiny, ktoré môžu predstavovať R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ a R¹¹, môžu byť lineárne alebo rozvetvené, alebo môžu byť cyklické alebo acyklické, môžu byť nasýtené alebo nenasýtené a/alebo môžu byť prípadne prerušené kyslíkom. Alkoxylové skupiny, ktoré môžu predstavovať R⁵, R⁶, R⁸ a R⁹, a ktorými môžu byť substituované Ar¹ a R⁴, môžu byť lineárne alebo rozvetvené, alebo môžu byť cyklické alebo acyklické, môžu byť nasýtené alebo nenasýtené a/alebo môžu byť prípsdno prerušené kyslíkom. Alkylénová časť alkylénfenylových skupín, ktorú môže predstavovať R⁴, môže byť lineárna alebo rozvetvená, a/alebo môže byť nasýtená alebo nenasýtená. Alkylénové skupiny, ktoré môžu spolu predstavovať R⁴ a R⁷, môžu byť lineárne alebo rozvetvené, a/alebo môžu byť nasýtené alebo nenasýtené.

Halogénové skupiny, ktoré môžu predstavovať R⁵, R⁵, R⁸ a R⁹ a ktorými môže byť substituovaný Ar¹ zahrňujú fluór, chlór, bróm a jód.

Vlnovka na atóme uhlíka v štruktúrnom fragmente

Skratky sú uvedené na konci tohto opisu.

Výhodné zlúčeniny vzorca I zahrňujú zlúčeniny, v ktorých

-6R¹ znamená C(0)NH2, CH2OH, etyl alebo predovšetkým metyl;

R² predstavuje vodík;

R³ znamená vodík alebo metyl;

R⁴ predstavuje vodík;

R⁵ znamená OH, halogén, metyl, metoxy alebo predovšetkým vodík;

R⁶ predstavuje OH, halogén, metyl, metoxy alebo predovšetkým vodík;

R⁷ znamená vodík;

R⁸ predstavuje OCH_3l bróm, -CH₂C(O)NH2, -CH₂N(H)C(O)NH₂ alebo predovšetkým OH;

R⁹ znamená vodík;

R¹⁰ predstavuje vodík;

R¹¹ znamená vodík.

Výhodné zlúčeniny vzorca I zahrňujú také zlúčeniny, v ktorých atóm uhlíka, ktorý je v α-polohe vzhľadom na Ar¹ vo fragmente

je v:

(a) R konfigurácii, ak R¹ predstavuje C^- alkyl; a (b) S-konfigurácii, ak R¹ predstavuje C(O)NH₂ alebo CH2OH.

Vlnovka na atóme uhlíka vo vyššie uvedenom fragmente označuje väzbovú polohu fragmentu.

Výhodné zlúčeniny podľa vynálezu zahrňujú:

(R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)argínín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyíenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenyíacetyl)-(S)-N-['l-(4-meloxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]arginín amid;

- Ί (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(1 -fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyIetyl)arginín amid;

(R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-N-(1 -metyl-1 -fenyfetyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)arginín amid;

(R)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoyl-fenylmetyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid;

(R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-^4-cykiopropylmetoxyfenyl)etyl]argTnín amid; (R)-N²-(difenylacstyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyi)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R}-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyi]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-metylfenyl)fenylacetylj-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid;

(R)-N‘^>-(etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N^,’-(benzyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N‘^,l-(1-(4-hydroxyfenyl)etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etylJ-8arginín amid;

(R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid;

(R)-N²-(4,4^,-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid; a (R)-N²-{4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R_lS)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyljarginín amid.

Predovšetkým výhodné zlúčeniny podľa vynálezu zahrňujú:

(R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4“metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(4,4^,-dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; a (R)-N²-[(R,S)-2-(4-hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid.

Príprava

Vynález sa týka tiež spôsobu prípravy zlúčenín vzorca I, ktorý zahrňuje:

(a) Prípravu zlúčeniny vzorca I reakciou zlúčeniny vzorca II,

*1 *1 O *2 C C kde Ar, R , R , R , R a R sú definované vyššie, so zlúčeninou vzorca 111, R^aSC(=NR⁴)NH₂ (lll) alebo jej hydrogensíranovou soľou, kde R^a predstavuje C_M-alkyl (napríklad metyl a R⁴ má vyššie definovaný význam, napríklad pri laboratórnej teplote

-9v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad DiPEA alebo trietylamínu) a vhodného organického rozpúšťadla (napríklad DMF, THF alebo ich zmesi).

(b) Príprava zlúčeniny vzorca I, kde R⁴ predstavuje H, reakciou zlúčeniny vzorca II, definovanej vyššie, s 1H-pyrazol-1-karboxamidínom alebo jeho hydrohalogenidovou soľou, napríklad pri laboratórnej teplote v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad DiPEA alebo trietylamínu) a vhodného organického rozpúšťadla (napríklad DMF).

(c) Príprava zlúčeniny vzorca I reakciou zlúčeniny vzorca II, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca IV,

R^aOC(=NR⁴)NH₂ (IV) alebo jej hydrogensíranovou soľou, kde R^a a R⁴ majú vyššie definované významy, napríklad pri teplote medzi laboratórnou teplotou a 70 °C v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad DiPEA alebo trietylamínu) a vhodného organického rozpúšťadla (napríklad acetonitrilu alebo DMF).

(d) Príprava zlúčeniny vzorca I, kde R⁴ predstavuje H, «

ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca V, reakciou zlúčeniny vzorca II, (V),

kde m predstavuje 2 alebo 3, napríklad pri teplote od laboratórnej teploty po 70 °C v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad DiPEA alebo trietylamín) a vhodnom organickom rozpúšťadle (napríklad acetonitrile alebo DMF).

(e) Príprava zlúčeniny vzorca I reakciou zlúčeniny vzorca VI

-10kde R^b predstavuje Ci_4-alkyl (napríklad metyl) a Ar¹, R¹, R², R³, R⁵ a R⁶ majú významy definované vyššie, so zlúčeninou vzorca VII, r⁴nh₂ Qvii), kde R⁴ má vyššie uvedený význam, napríklad pri laboratórnej teplote v prítomnosti vhodného rozpúšťadla (napríklad DMF).

(f) Príprava zlúčeniny vzorca í reakciou zlúčeniny vzorca VIII 4

(VIII), kde Ar¹, R¹, R², R³ a R⁴ majú významy definované vyššie, so zlúčeninou vzorca IX,

β * ^w kde R a R majú výtnamy definované vyššie, napríklad pri teplote medzi -10 °C a teplotou refluxu (napríklad -10 až 30 °C) v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad trietylamínu alebo DiPEA) a vhodného organického rozpúšťadla (napríklad CH₂CI₂).

(g) Príprava zlúčeniny vzorca I reakciou zlúčeniny vzorca Vili, ktorá má vyššie definovaný význam, so zlúčeninou vzorca X,

kde R⁵ a R⁶ majú vyššie definované významy, napríklad pri laboratórnej alebo nižšej teplote v prítomnosti vhodnej zásady (napríklad DiPEA, pyridínu alebo hydrogénuhličitanu sodného) a vhodného rozpúšťadla (napríklad THF, EtOAc alebo CH2CI2, so stopami alebo bez stôp DMF):

(h) Príprava zlúčeniny vzorca I reakciou zlúčeniny vzorca Vili, ktorá je definovaná

6 kde R a R majú významy uvedené vyššie, napríklad pri laboratórnej alebo nižšej teplote v prítomnosti vhodného peptidového kopulačného systému (napríklad BOP reagentu), zásady (napríklad trietylamínu) a vhodného organického činidla (napríklad acetonitrilu).

Zlúčeniny vzorca II sa môžu pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XII,

112 3 kde Ar , R , R a R majú vyššie uvedené významy, so zlúčeninou vzorca IX, definovanou vyššie, napríklad pri podobných podmienkach ako sú opísané vyššie pre zlúčeniny vzorca I (krok (f))-12Zlúčeniny vzorca II sa môžu alternatívne pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XII, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca X, ktorá je definovaná vyššie, napríklad pri podobných podmienkach ako sú opísané vyššie pre zlúčeniny vzorca I (krok (g)).

Zlúčeniny vzorca II sa môžu alternatívne pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XII, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca XI, ktorá je definovaná vyššie, napríklad pri podobných podmienkach ako sú opísané vyššie pre zlúčeniny vzorca I (krok (h)).

Zlúčeniny vzorca VI sa môžu pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XIII,

(Xlll) kde Ar¹, R¹, R², R³, R⁵ a R⁵ sú definované vyššie, s vhodným alkyljodiom, napríklad pri laboratórnej teplote, v prítomnosti vhodného rozpúšťadlového systému (napríklad CH₂CI₂ alebo MeOH alebo ich zmesi).

Zlúčeniny vzorca VIII sa môžu pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XII, ktoré sú definované vyššie, so zlúčeninou vzorca III (alebo jej hydrogensíranovou soľou), 1Hpyrazoi-1-karboxamidínom (alebo jeho hydrohalogenidovou soľou) alebo zlúčeninou vzorca IV (alebo jej hydrogensíranovou soľou), napríklad ako je opísané vyššie pre syntézu zlúčenín vzorca I (kroky (a), (b) a (c)).

Zlúčeniny vzorca XII sa môžu pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XIV 3 ¹ R² rf

-Ar' (XIV),

R

- 13kde Ar¹, R¹, R² a R³ sú definované vyššie, s (R)-omitínom alebo jeho derivátom, napríklad pri laboratórnej teplote v prítomnosti vhodného peptidového kopulačného systému (napríklad BOP reagentu a HOBT alebo EDC), zásady (napríklad DiPEA, trietylamín alebo diizopropylamín) a vhodného organického rozpúšťadla (napríklad acetonitrilu, CH₂CI₂ alebo ich zmesi).

Zlúčeniny vzorca XII sa môžu alternatívne pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca XIV alebo jej hydrohalogenidovou soľou, ako je definované vyššie, s 2-nitrofenylesterom (R)-ornitínu napríklad pri laboratórnej teplote v prítomnosti vhodného organického rozpúšťadla (napríklad CH₂CI₂) a ak je zlúčenina vzorca XIV soľou, vhodnej zásady (napríklad trietylamínu alebo DiPEA).

Zlúčeniny vzorca XIII sa môžu pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca II, ktorá je definovaná vyššie, s izotiokyanátom alebo jeho derivátom (napríklad benzoylderivátom) napríklad pri laboratórnej teplote v prítomnosti vhodného organického rozpúšťadla (napríklad CH₂CI₂) a následne napríklad spracovaním s vodnou zásadou (napríklad uhličitanom draselným) vo vhodnom rozpúšťadle, ako je MeOH.

Zlúčeniny vzorca XIV sú buď komerčne dostupné, sú známe z literatúry alebo dostupné s použitím známych postupov. Napríklad, zlúčeniny vzorca XIV, kde R² a β

R obidva predstavujú vodík, sa môžu pripraviť redukčnou amináciou zodpovedajúcej zlúčeniny XV,

Ar¹

kde Ar¹ a R¹ sú definované vyššie, pri podmienkach ktoré sú pre odborníkov v odbore dobre známe. '

Opticky aktívne zlúčeniny vzorca XIV sa môžu izolovať podľa známych postupov a môžu sa následne použiť pri syntézach zodpovedajúcich zlúčenín vzorcov XII, II a I pri podmienkach, ktoré nespôsobujú racemizáciu alebo epimerizáciu, ako sú vyššie definované podmienky.

Zlúčeniny vzorcov 111, IV, V, VII, IX, X, XI, XV sú buď komerčne dostupné, sú známe z literatúry alebo sú dostupné s použitím známych metód, napríklad ako sú opísané vyššie.

- 14Substituenty na aromatickej skupine v zlúčeninách vzorcov I, II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV a XV sa môžu vnútorne konvertovať s použitím postupov, ktoré sú pre odborníkov v odbore dobre známe.

Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu izolovať zo svojich reakčných zmesí s použitím konvenčných postupov.

Odborníci v odbore si musia uvedomiť, že pri vyššie opísaných postupoch môže byť potrebné chrániť funkčné skupiny medziproduktov chrániacim skupinami.

Funkčné skupiny, ktoré je potrebné chrániť zahrňujú hydroxylovú skupinu, aminoskupinu, amidinoskupinu, guanidinoskupinu a karboxylovú kyselinu. Vhodnými chrániacimi skupinami pre hydroxylovú skupinu sú trialkylsilylová a diarylalkylsilylová skupina (napríklad terc-butyldimetylsilyl, terc-butyldifenylsilyl alebo trimetylsilyl) a tetrahydropyranyl. Vhodnými chrániacimi skupinami pre aminoskupinu, amidinoskupinu, guanidinoskupinu sú terc-butyloxykarbonyl, 9-fluorenylmetoxykarbonyl alebo benzyloxykarbonyl. Amidínové a guanidínové dusíky môžu byt buď mono- alebo dichránené. Vhodnými chrániacimi skupinami pre karboxylovú kyselinu sú Ci-e-alkylalebo benzyl estery.

Chránenie a deprotekcia funkčných skupín sa môže uskutočňovať pred alebo po ktoromkoľvek reakčnom kroku opísanom vyššie.

Chrániace skupiny sa môžu odstrániť s použitím postupov, ktoré sú pre odborníkov v odbore dobre známe a sú opísané vyššie.

Mnohé chránené deriváty vyššie opísaných medziproduktov sú komerčne dostupné.

•

Odborníci z odboru si budú uvedomovať,'že aby sa získali zlúčeniny vzorca I v alternatívnom, a v niektorých prípadoch vhodnejšom uskutočnení, jednotlivé kroky spôsobu uvedené vyššie sa môžu uskutočňovať v rozdielnom poradí a/alebo sa jednotlivé reakcie môžu uskutočňovať v odlišnom stupni celkového postupu (t.j. môžu sa pridať substituenty a/alebo uskutočňovať chemické transformácie, odlišné medziprodukty v porovnaní s vyššie opísanými v kombinácii s čiastkovými reakciami). Toto môže negovať, alebo nevyhnutne preukázať, potrebu chrániacich skupín

-15V súlade s uvedeným poradie a typ požadovaného chemického spôsobu bude diktovať potrebu a typ chrániacich skupín ako aj postupnosť uskutočnených syntéz.

Použitie chrániacich skupín je kompletne opísané v „Protective Groups in Organic Chemistry, Ed. J. W. F. McOmnie, Plénum Press (1973) a „Protective Groups in Organic Synthesis“ 2^nd edition, T, W. Greene & P. G. M. Wutz, WileyInterscience (1991).

Odborníci v odbore si taktiež musia uvedomiť, že hoci určité chránené deriváty zlúčenín vzorca I, ktoré sa môžu pripraviť pred finálnym stupňom deprotekcie, samotné nemusia vykazovať farmakologickú účinnosť, môžu sa podávať parenterálne alebo orálne a potom sa metabolizovať v tele za vzniku zlúčenín podľa vynálezu, ktoré sú farmakologicky účinné. Takéto deriváty môžu byť teda označené ako „prekurzory.

Všetky prekurzory zlúčenín vzorca I sú zahrnuté do rozsahu vynálezu.

Lekárske a farmaceutické použitie

Zlúčeniny podľa vynálezu sa využiteľné, pretože disponujú farmakologickou r

účinnosťou. Preto sú indikované ako liečivá.

Vynález sa ďalej teda týka zlúčenín vzorca I na použitie ako liečivá.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú predovšetkým účinnými antagonistami NPY, ako je demonštrované napríklad v nižšie uvedených testoch.

Predpokladá sa, že zlúčeniny podľa vynálezu sú využiteľné pri liečení ochorení/porúch, ktoré sú/môžu byť sprostredkované NPY, ako sú kardiovaskulárne ochorenia.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú teda určené na použitie pri liečení koronárnych srdcových ochorení, ako je angína pectoris, infarkt myokardu a syndróm X ako aj vysoký krvný tlak a srdcová nedostatočnosť.

Vynález sa ďalej tiež týka spôsobu liečenia kardiovaskulárnych ochorení, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vynálezu osobe trpiacej alebo náchylnej na takýto stav.

-16Zlúčeniny podľa vynálezu sú určené na použitie pri liečení ďalších ochorení, pri ktorých sa predpokladá, že NPY hrá patogénnu rolu, ako je chronické zlyhanie obličiek, nádorové ochorenia, ako je feochromocytóm, infekcie, migréna, hypertyreóza, ako aj obezita a cukrovka.

Zistilo sa, že zlúčeniny podľa vynálezu sú selektívnymi antagonistami podreceptora Yi, ako je napríklad demonštrované v nižšie uvedených testoch.

Zlúčeniny podľa vynálezu nachádzajú teda použitie pri inhibícii vazokonštrikcie a nimi charakterizovaných chorobných stavoch, ako je migréna, Hortonov syndróm, Raynauldova choroba, vazospazmus po subarachnoidálnej hemorágii, angína pectoris, koronárny infarkt, zlyhanie srdca, srdcová arytmia, hypertenzia, endotoxický šok a mŕtvica.

Vynález sa ďalej tiež týka spôsobu liečenia vazokonštrikcie, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vynálezu alebo jej farmaceutický účinného derivátu, osobe trpiacej alebo náchylnej na takýto stav.

Farmaceutické prípravky

Zlúčeniny podľa vynálezu sa bežne budú podávať orálne, intravenózne, subkutánne, bukálne, reklálne, dermálne, nasálne, tracheálne, bronchiálne, akoukoľvek inou cestou alebo pomocou inhalácie, vo forme farmaceutických prípravkov obsahujúcich účinnú zložku buď vo forme voľnej zásady alebo farmaceutický prijateľnej netoxickej organickej alebo anorganickej kyslej adičnej soli, vo farmaceutický prijateľnej dávkovej forme. V závislosti od ochorenia a pacienta, ktorý sa má liečiť, a spôsobu podávania sa kompozície môžu podávať v rozličných dávkach.'

Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu tiež kombinovať s ďalšími terapeutickými činidlami, ktoré sú využiteľné pri liečení kardiovaskulárneho ochorenia, napríklad antagonisty β-adenoreceptora, ACE-inhibítory, diuretiká a antagonisty vápnika.

Vynález sa ešte ďalej týka farmaceutického prípravku obsahujúceho zlúčeninu podľa vynálezu v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

-17Vhodné dávky zlúčenín podľa vynálezu pri terapeutickej liečbe ľudí predstavujú približne 0,1 až 1 mg/kg telesnej hmotnosti na deň pri perorálnom podávaní a 0,001 až 0,1 mg/kg telesnej hmotnosti za minútu pri parenterálnom podávaní.

Pozorovalo sa, že zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú výhodu, že produkujú menej vedľajších účinkov ako zlúčeniny známe z doterajšieho stavu techniky uvedeného vyššie.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu taktiež vykazovať výhodu v tom, že môžu byť účinnejšie, byť menej toxické, poskytovať dlhodobejší účinok, vykazovať širší rozsah účinku, byť účinnejšie, ľahšie sa absorbovať alebo vykazovať ďalšie užitočné farmakologické vlastnosti v porovnaní so zlúčeninami známymi z doterajšieho stavu techniky.

Biologické testy

Test A

Väzba k NPY Y-|/Y₂ receptorom in vitro (a) Príprava receptora obsahujúceho membrány (i) Receptory Y!

Na túto prípravu sa použil hlavný podiel mozgovej kôry potkanov. Potkany (samce alebo samice Sprague-Dawley potkanov, s hmotnosťou 150 až 250 g) sa usmrtili s použitím CO₂ s následným vykrvácaním. Mozog sa vyrezal a vložil sa do ľadovo chladného pufraj(0,3 M sukrózy, 5 mM Hepes; pH 7,4).

•

Materiál sa zriedil s 10 objemami ľadovo chladného pufra, narezal sa na menšie kúsky a homogenizoval najskôr vpolytróne a potom pri 10 rázoch pri maximálnej rýchlosti v homogenizátore Potter-Elvehjem.

Homogenizát sa ceníri'úgoval pri 650 x g pri teplote 4 °C počas 10 minút. Supernatant sa ďalej centrifúgoval pri 33 000 x g pri teplote 4 °C počas 19 minút. Granule sa jedenkrát premyli pri rozložení v pufre a posledný krok centrifúgovania sa opakoval. Finálne granule sa rozpustili v malom objeme (0,3 až 1 ml na gram tkaniva) pufra doplneného s 10 % (obj./obj.) glycerolu. Alikvotné podiely (« 200 μΙ) sa

-18rýchle zmrazili v MeOH a suchom ľade a skladovali sa pri teplote -80 °C až do použitia.

Koncentrácia proteínu sa stanovila podľa Bradforda (Anál. Biochem. (1976), 72, 248), s použitím kitu Bio-Rad. Preparáty Υί obsahovali približne 70 až 80 % receptorov Y_v (ii) Receptory Y₂

Táto príprava sa uskutočnila s použitím sleziny ošípaných z lokálneho bitúnka (Farmek Ekonomiks, Fôrening, Varberg, Švédsko). Spôsob prípravy bol rovnaký ako pre receptor Yi uvedený vyššie. Výsledné membrány obsahovali približne 80 až 90 % receptorov Yv (b) Skúšky väzby receptora

V typickom experimente sa 300 pg receptora Yi alebo Y₂ obsahujúceho membrány v rozličných koncentráciách zmiešalo s ³H-NPY a testovanou zlúčeninou. Membrány a ligandy sa zriedili v skúšobnom pufre (137 mM NaCI, 2,7 mM KCI, 2,1 mM MgCI₂, 1,8 mM CaCI₂, 0,2 % (hmot./obj.) albumín hovädzieho séra, 20 mM Hepes; pH 7,4). Vzorky sa inkubovali počas 60 minút pri teplote 30 °C a väzbová reakcia sa zastavila vložením skúmaviek do ľadu. Vzoiky sa prefiltrovaj na filtroch so skleneným vláknom s použitím filtračnej sústavy Millipore, aby sa oddelili neviazané a viazané izotopom značené ligandy. Rádioaktivita zachytená na filtroch sa stanovila detekciou pomocou kvapalného scintilačného počítača.

Nešpecifická väzbovosť (väzba nevzťahujúca sa k NPY) sa stanovila pri vysokej koncentrácii (0,1 μΜ) neznačenej NPY. Rozdiel medzi celkovou väzbovosťou (bez prítomnosti NPY/testovaná zlúčenina) a nešpecifickou väzbovosťou sa vyjadrila ako špecifická väzbovosť a použila sa pri maximálnej odozve v každom experimente.

Test B

Účinok testovaných zlúčenín na NPY pri anestetizovaných potkanoch

Použili sa samce potkanov Sprague-Dawley (300 až 400 g) z Charles River UK. Zvieratá sa na začiatku anestetizovali s pentobarbitónom sodným 70 mg/kg,

-19intravenózne. Anestézia sa udržiavala pomocou kontinuálnej infúzie do chvostovej artérie (12 až 20 mg/kg/hod.). Telesná teplota sa merala pomocou rektálneho snímania a udržiavala sa ohrievacím vankúšikom a ohrievacou lampou na teplote

37,5 až 38,0 °C. Potkany sa tracheotomizovali (PE 240), aby sa uľahčilo spontánne dýchanie. Zaviedli sa katétre (PE 25) do pravej a ľavej krčnej žily na infúziu NPY a testovanej zlúčeniny. Do chvostovej artérie sa zaviedol katéter (PE 25) na meranie krvného tlaku (BP) a na kontinuálnu infúziu anestézie. Priemerný arteriálny tlak sa meral s transduktorom (156PC) a srdcová frekvencia sa merala zo signálu pulzácie arteriálneho tlaku pomocou merača početnosti. Ľavá renálna artéria sa uvoľnila a malá vzorka sa umiestnila okolo artérie (Transonic 0,7 VB42), aby sa meral renálny prietok krvi.

Všetky signály sa zaznamenali na papierový záznamový diagram (Grass Polygraph) a digitalizovali sa s použitím PC. Rýchlosť odoberania vzoriek bola 10 vzoriek za sekundu a priemerná hodnota sa vypočítala a uložila každé 2 sekundy. Počítačový program potom vypočítal zmeny priemerného arteriálneho tlaku, srdcovej frekvencie a renálneho prietoku krvi z kontrolných hodnôt nameraných pred podaním liečiva.

Po vyššie uvedenej chirurgickej prípravy a stabilizačnom období počas 30 minút sa intravenózne podával NPY (4 pg/kg/20 sekúnd) v 20 minútových intervaloch. Po dvoch stabilných odčítaniach po podaní NPY sa testovaná zlúčenina podávala intravenózne vo zvýšených dávkach (0,625 až 40 [ig/kg/min.) počas 20 minút. Po 10 minútach sa podal ďalší NPY. Testovaná zlúčenina sa pokladala za účinnú, ak znižovala kardiovaskulárny účinok ďalšieho NPY ošetrenia v spôsobom závislým od dávky.

Vynález je ďalej ilustrovaný pomocou nasledujúcich príkladov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Všeobecne

Tenkovrsívová chromatografia s použitím silikagélu a s nasledujúcimi eiučnými systémami: CHCI₃ : MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (77 : 18 : 5) s platňami EM Science No. 5714-3 (systém A); MeOH : CH₂CI₂ (1 : 9) s platňami EM Science No. 5714-3 (systém B); CH₂CI₂ : MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny

-20(88,5 : 10 :1,5) s platňami Whatman No. 4450 555 (systém C); CHCl₃ MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (6 : 3 :1) s platňami Whatman No. 4420 222 (systém D); [pyridín :HOAc : voda (55 : 25 : 20)] : EtOAc (1 : 1) s platňami Whatman No. 4420 222 (systém E); [pyridín :HOAc : voda (55 : 25 : 20)]: EtOAc (1 : 2) s platňami Whatman No. 4420 222 (systém F). Na preparatívnu tenkovrstvovú chromatografiu sa použili platne Analtech Uniplate Silica Gel GF (20 x 20 cm, zošikmená vrstva; katalóg # 81013).

Príklad (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Do magneticky miešanej suspenzie N-Boc-N^ó-Cbz-(R)-ornitínu (3,6 g; 9,9 mmol), BOP reagentu (4,4 g; 9.9 mmol) a HOBT (1,3 g; 9,9 mmol) v 200 ml zmesi acetonitril : CH₂CI₂ (1 : 1) sa pri laboratórnej teplote pod dusíkom DiPEA (5,2 ml; 30 mmol). Po 5 minútach sa pevné látky rozpustili. K výslednému roztoku sa pridal (R)-4-meíoxy-a-5 metylbenzylamín (1,5 g; 9,9 mmol) v CH2CI2 (5 ml). Roztok sa miešal pri laboratórnej teplote počas 2 hodín, potom sa zahustil pri zníženom tlaku, pričom sa získal hustý olej. Zvyšok sa rozpustil v 500 ml EtOAc a následne sa premyl s 5 %-ným vodným roztokom kyseliny citrónovej (2 x 300 ml), vodou (300 ml), nasýteným vodným NaHCO₃ (2 x 300 ml) a soľankou (2 x 300 ml). Organická vrstva sa vysušila (Na2SO₄), prefiltrovala a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získalo 5,0 g (100 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme žltej pevnej látky.

- ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,39 (s, 9H), 1,40 -1,75 (m, 7H), 3,03 - 3,18 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 4,00 - 4,10 (m, 1H), 4,89 - 5,00 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 6,83 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 7,25 - 7,35 (m, 5H). ' (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (14,0 g; z kroku (a) uvedeného vyššie) v EtOAc (300 ml) sa nechal pri laboratórnej teplote reagovať s EtOAc nasýteným s chlorovodíkom(HCI/EtOAc; 300 ml) počas 5 hodín. Roztok sa zahustil, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny

-21 (12,9 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,45 (d, 3H), 1,70 -1,90 (m, 4H), 3,08 (t, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,87 (m, 1 H), 5,01 (m, 1H), 5,06 (s, 2H), 6,87 (d, 2H), 7,27 (d, 2H), 7,30 - 7,48 (m, 5H).

(c) 2-Nitrofenyldifenylacetát

Roztok kyseliny difenyloctovej (30,0 g; 141 mmol) a o-nitrofenolu (39.3 g; 282 mmol) v pyridíne (250 ml) sa ochladil na teplotu 0 °C. Pri teplote 0 °C sa pridal Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimid (27,6 g; 134 mmol). Roztok sa miešal pri 0 °C počas niekoľkých hodín, zahrial sa na laboratórnu teplotu a miešal sa cez noc. Výsledný heterogénny roztok sa zriedil s EtOAc a prefiltroval. Filtrát sa zahustil, čím sa získal hustý olej, ktorý sa rozpustil v minimálnom množstve teplého izopropanolu. Po ochladení začala z roztoku kryštalizovať zlúčenina uvedená v podnázve. Kryštály sa zachytili a vysušili vo vákuu, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (37,3 g; 82 %) vo forme bieleho prášku.

Teplota topenia 83 až 85 °C ¹H NMR (CDCI₃) δ 5,38 (s, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,20 - 7,45 (m, 11 H), 7,60 (t, 1H), 8,07 (d, 1H).

(d) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid (12,9 g;

29,6 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) a 2-nitrofenyldifenylacetát (9,5 g; 29,6 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) sa spojili v CH2CI2 (600 ml). Pridal sa trietylamín (4,5 g; 44,4 mmol). Výsledný žltý roztok sa miešal pri laboratórnej teplote počas 60 hodín. Keď sa kopulácia ukončila, ako sa stanovilo pomocou TLC, pridal sa jeden objem 0,5 N NaOH a roztok sa miešal počas niekoľkých minút. Organická vrstva sa oddelila a vodná vrstva sa dvakrát extrahovala s CH2CI2. Spojené organické podiely sa premyli so soľankou, vysušili nad bezvodým síranom sodným, prefiltrovali a zahustili pri vo vákuu, čím sa získal surový produkt vo forme svetložltej pevnej látky (16,6 g). Produkt sa rozpustil v zmesi CH2CI2, MeOH a EtOAc a zahustil sa až do vytvorenia pevnej látky. Pevné podiely sa zachytili a vysušili, čím sa získal produkt vo forme bielej pevnej látky (3,2 g). Filtrát sa zahustil, čím sa získala pevná látka, ktorá

-22sa chromatografovala na silikagéle s použitím zmesi EtOAc:CH₂CI₂ (1 : 3) ako elučného činidla. Zahustenie vhodných frakcií poskytlo ďalší čistý produkt vo forme bielej pevnej látky (8,8 g).

Rf 0,3 (EtOAc:CH₂CI₂ (1 : 3); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,38 (d, 3H), 1,20 - 1,58 (m, 2H), 1,62 - 1,80 (m, 2H), 3,03 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 4.,8 (m, 1H), 4,80 - 5,08 (m, 4H), 6,72 (d, 1H), 6,78 (d, 2H), 7,02 - 7,45 (m, 17H).

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Roztok (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]omitín amidu (5,7 g; 9,6 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie) a HCI (2 N; 6 ml) v MeOH (200 ml) sa prepláchli s dusíkom pred pridaním 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 530 mg). Heterogénny roztok sa krátko prepláchol s vodíkom a potom sa miešal pod 1 atmosférou vodíka počas 3 hodín. Keď bola deprotekcia ukončená, ako sa stanovilo analýzou pomocou TLC, roztok sa prefiltroval cez vrstvu Celitu, aby sa odstránil katalyzátor. Filtrát sa potom odparil pri zníženom tlaku, pričom sa získal surový produkt. Zvyšok po odparení filtrátu sa rozpustil vo vode (300 ml) a premyl sa s dietylétsrom (2 x 50 ml). Vodná vrstva sa upravila na pH 12 s koncentrovaným NH4OH, potom sa extrahovala s EtOAc (3 x 200 ml). Spojené organické extrakty sa premyli so soľankou (200 ml), potom sa vysušili (Na₂SO₄) a prefiltrovali. Filtrát sa odparil pri zníženom tlaku, čím sa získalo 4,2 g (95 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve (voľná zásada) vo forme bielej pevnej látky.

’ NMR (CD₃OD) δ 1,30 - 1,48 (m, 2H), 1,35 (d, 3H), 1,50 - 1,80 (m, 2H), 2,52 (t, 2H), 3,72 (s; 3H), 4,32 - 4,42 (m, 1 H), 4,85 - 4,95 (m, 1 H), 5,05 (s, 1 H), 6,82 (d, 2H), 7,18 (# 2H), 7,24 - 7,30 (m, 10H).

(f) (R)-N⁽“,N'”-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (voľná zásada z kroku (e) uvedeného vyššie; 3,26 g; 7,09 mmol) v DMF (35 ml) sa nechal reagovať s N,N¹-bis(Cbz)-S-metylizotiomočovinou(2,80 g, 7,80 mmol) a zmes sa miešala počas 60 hodín. Zahustenie vo vákuu poskytlo surový produkt (5,7 g stlačiteľnej

-23peny), ktorá sa chromatografovala na silikagéle eluovaním s CH2CI2, potom s EtOAc, pričom sa získala čistá zlúčenina vedená v podnázve vo forme bielej stlačiteľnej peny (5,4 g).

Rf 0,4 (CH2CI2: EtOAc (3 :1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,34 (d, 3H), 1,25 - 1,68 (m, 3H), 1,78 (m, 1H), 3,12 - 3,45 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,47 (m, 1H), 4,88 - 5,10 (m, 4H), 5,18 (s, 2H), 6,67 (d, 1H), 6,83 (d, 2H), 6,95 - 7,45 (m, 22H), 8,30 (m, 1H).

(g) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginin. amid hydrochlorid (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyi)etyl]arginin amid (5,40 g; 7,10 mmol; z kroku (f) uvedeného vyššie) v HOAc (300 ml) sa prepláchol dusíkom pred pridaním 10 % Pd/C (hmot./hmot. 1,10 g). Heterogénny roztok sa krátko prepláchol s vodíkom a potom sa miešal pod 1 atmosférou vodíka počas 4 hodín. Keď bola deprotekcia ukončená, ako sa stanovilo analýzou pomocou TLC, roztok sa prefiltroval cez vrstvu Celitu, aby sa odstránil katalyzátor. Filtrát sa odparil pri zníženom tlaku, pričom sa získal surový produkt. Surová acetátová soľ sa rozpustila v zmesi HCI/MeOH, spracovala s aktívnym uhlím, prefiltrovala, zahustil a sušila vo vákuu pri teplote 55 až 60 °C počas 5 hodín, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (3,47 g).

Teplota topenia 115 až 120 °C

R_f 0,4 (systém D) [a]_D ²⁵ = +53,2° (c = 0,98, MeOH) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,25 - 1,87 (m, 4H), 2,98 - 3,17 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,41 (m, 1H), 4,92 (m, IH), 5,14 (s, 1H), 6,84 (d, 2H), 7,08 - 7,45 (m, 12H).

¹³C NMR (CDsOD^Ô 23,8, 26,8; 30,5, 42,0, 49,8, 55,0, 56,2, 59,0, 115,2, 128,5, 129,8, 130,2, 137,2, 141,4, 158,8, 160,5, 173,0, 175,2.

Príklad 2 (R)-N²-(Difenyiacetyl)-(R,S)-N-(1 -fenylpropyljarginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R.S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid

-24Pripravil sa podľa spôsobu opísaného z príklade 1(a) uvedeného vyššie z N“Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (4,1 g; 11 mmol), BOP reagentu (4,9 g; 11 mmol), HOBT (2,9 g; 22 mmol) a DiPEA (12 ml; 67 mmol) v acetonitrile (200 ml; namiesto zmesi acetonitril : CH₂CI₂ (1 : 1)) a následne (R.S)-a-etylbenzylamínu (1,5 g; 11 mmol). Spracovanie poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve (5,4 g) vo forme hustého oleja, ktorý státím stuhol.

¹H NMR (CDCIs) δ 0,80 - 0,95 (m, 3H), 1,30 - 1,65 (m, 4H), 1,38 + 1,40 (s, 9H), 1,70 - 1,90 (m, 2H), 3,02 - 3,20 + 3,0 - 3,45 (m, 2H), 4,10 - 4,30 (m, 1 H), 4,25 -5,25 (m, 3H), 6,75-6,88 (m, 1H), 7,18-7,42 (m, 10H).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid hydrochlorid (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R.S)-N-(1-fenylpropyl)omitín amid (5,4 g; 11 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) sa suspendoval v EtOAc (30 ml) a potom sa pridala zmes HCI/EtOAc (100 ml). Zmes sa magneticky miešala pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny, potom sa odparila pri zníženom tlaku, pričom sa získala surová zlúčenina vo forme hustého oleja, ktorá bola vhodná na použitie v nasledujúcom kroku bez ďalšieho čistenia.

(c) (R)-N⁵- (Cbz)-N²-(Difenylacelyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid

Surový (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid hydrochlorid (z kroku (b) uvedeného vyššie) sa rozpustil v CH₂CI₂ (100 ml) a pridal sa difenylacetylchlorid (2,5 g; 12 mmol) vo forme pevnej látky. Banka sa ochladila na kúpeli ľad/voda, magneticky sa miešala a po kvapkách sa pod dusíkom v priebehu 1 minúty pridal DiPEA (6,0 ml; 33 mmol). Zmes sa zahriala na laboratórnu teplotu a miešala sa pri tejto teplote počas 1,5 hodín. Roztok sa zriedil so 100 ml CH₂CI₂ a postupne sa premyl s vodným nasýteným KHSO₄ (200 ml), vodou (200 ml), vodným nasýteným NaHCO₃ (200 ml) a soľankou (150 ml); potom sa vysušil (Na₂SO₄), prefiltroval a odparil pri zníženom tlaku, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (4,9 g; 77 %) vo forme pevného žltohnedej látky.

¹H NMR (CDCI3) δ 0,72 - 0,89 (m, 3H), 1,25 - 1,90 (m, 6H), 2,92 - 3,15 + 3,25 - 3,44 (m, 2H), 4,58 - 5,12 (m, 4H), 6.50 - 6,70 (m, 1H), 7,00 - 7,40 (m, 20H).

-25(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie, z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amidu (2,5 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (150 mg), 50 ml MeOH (bez pridania HCl), reakčný čas 2,5 hodín, pričom sa získal zlúčenina uvedená v podnázve (1,8 g; 95 %; voľná zásada) vo forme matnej bielej pevnej látky.

Rf 0,55 a 0,48 (systém A) ¹H NMR (CD₃OD) δ 0,75 - 0,90 (m, 3H), 1,30 - 1,90 (m, 6H), 2,10 - 2,30 (br s, 2H), 2,50 - 2,70 (m, 2H), 4,35 - 4,50 (m, 1H), 4,60-4,72 (m, 1H), 5,00 + 5,10 (s, 1H), 7,10-7,40 (m, 15H).

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amid hydrochlorid

Vzorka (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)ornitín amidu (z kroku (d) uvedeného vyššie) sa spracovala so zmesou HCI/EtOAc a potom sa odparila pri zníženom tlaku do konštantnej hmotnosti, čím sa získala vzorka hydrochloridu uvedeného v podnázve.

Teplota topenia 170 až 180 °C (rozklad) ¹H NMR (CD₃OD) δ 0,75 - 0,90 (m, 3H), 1,45 - 1,95 (m, 6H), 2,75 - 2,95 (m, 2H), 4,35 - 4,52 (m, 1H), 4,62 - 4,75 (m, 1H), 5,03 + 6,10 (s, 1H), 7,10 - 7,40 (m, 15H), 8,15-8,30 (m, 1H), 8,35 - 8,50 (m, 1H).

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)arginin amid hydrochlorid

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila analogicky podľa postupu známeho z literatúry (J. Org. Chem., 57, 2497 (1992)). Zmes (R)-N²-(difenylacetyl)- (R,S)-N-(1fenylpropyl)ornitín amid (0,78 g; 1.8 mmol; voľná zásada), 1H-pyrazol-1karboxamidín mcnohydrochlorid (0,27 g; 1,3 mmol) a DiPEA (1,2 ml; 7,0 mmol) v 3 ml suchého DMF sa magneticky miešalo pod dusíkom počas 18 hodín. Výsledný roztok sa zriedil so 40 ml CH₂CI₂ a po kvapkách sa pridal dietyléter, pokým sa roztok nezostal mierne zakalený. Roztok sa zaškrabol, aby sa vyvolala tvorba pevnej látky a výsledná pevná látka sa odfiltrovala, premyla s CH₂CI₂ a dietyléterom a potom vysušila pri teplote 40 °C vo vákuu, čím sa získalo 300 mg (33 %) hydrochloridu

-26uvedeného v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

Teplota topenia 112 až 114 °C

Rf = 0,24 (systém A) ¹H NMR (CD₃OD) δ 0,75 -0,90 (m, 3H), 1,40 - 1,90 (m, 6H), 3,06 - 3,10 + 3,10 -3,20 (m, 2H), 4,40 - 4,50 (m, 1H), 4,60 - 4,70 (m, 1H), 5,05 + 5,10 (s, 1H), 7,15-7,88 (m, 15H).

Príklad 3 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(a) uvedeného vyššie z N“Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (5,00 g, 13,6 mmol), (R,S)-4-hydroxy-oc-metylbenzylamínu (1,87 g, 13,6 mmol), BOP (9,0 g, 20,3 mmol) a trietylamínu (2,5 ml.; namiesto DiPEA) v acetón itrile (100 ml; namiesto zmesi acetonitril ; CH2CI2 (1 : 1)), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (6,12 g) vo forme bielej peny. Spektrum NMR pre tento materiál zodpovedalo zmesi diastereoizomérov.

(b) (R)-N^s-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-Hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedeného vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (6,1 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (150 ml) a zmesi HCI/EtOAc (150 ml), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (8.,6 g) vo forme bielej peny. Dáta NMR pre túto zlúčeninu zodpovedali zmesi diastereoizomérov.

W (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyi)etyl]ornitín amid hydrochlorid (6,0 g; 14,2 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) sa nechal reagovať s kyselinou difenyloctovou (3,32 g; 15,6 mmol), BOP (6,92 g; 15,6 mmol) a trietylamínom (4,36 ml; 31,3 mmol) v 300 ml acetonitrilu. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu a surový produkt sa chromatografoval na 100 g silikagélu eluovaním so zmesou EtOAc : hexány (2:1), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (4,1 g) vo

-27forme bielej peny. NMR pre túto zlúčeninu zodpovedalo zmesi diastereoizomérov.

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného vyššie v príklade 1(e), z (R)-N⁵-(Cbz)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyllornitín amidu (4,1 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (1,2 g), MeOH (300 ml) a koncentrovanej HCl (1 ml; namiesto 2 N HCl), pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (1,9 g) vo forme bielej pevnej látky. NMR pre tento materiál zodpovedalo zmesi diastereoizomérov.

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 2(f) z (R)-N²-(difenylacetyl)(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (voľná zásada; 150 mg; 0.311 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (45,6 mg, 0.311 mmol) a DiPEA (0,06 ml; 0,622 mmol) v 2 ml suchého DMF. Reakčná zmes sa zahustila a zvyšok sa naniesol na platňu preparatívnej TLC a eluoval sa so zmesou CH₂CI₂ : MeOH (90 : 10), čím sa získala zlúčenina uvedená v názve (50 mg). NMR tohto materiálu zodpovedali zmesi diastereoizomérov.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,36 (d, 3H), 1,9 - 1,36 (m, 4H), 3,15 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,86 (m, 1 H), 5,06 + 5,11 (s, 1H), 6,68 (d, 2H), 6,70 (d, 2H), 7,03 (d, 2H), 7,06 (d, 2H) 7,29 (m, 10H)

Príklad 4 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) o-Nitrofenylester N“-Boc-N⁶-Cbz-(R)ornitínu

Roztok N^re-Boc-N⁵-Cbz-(R)ornitínu (25,0 g; 68,2 mmol) a o-nitrofenolu (19,0 g; 136,4 mmol) v pyridíne (250 ml) sa ochladil na teplotu 0 °C. Pri teplote O °C sa pridal dicyklohexylkarbodiimid (13.4 g; 64,8 mmol). Roztok sa miešal pri teplote 0 °C počas niekoľkých hodín, zahrial sa na laboratórnu teplotu a miešal sa cez noc. Výsledný heterogénny roztok sa zriedil s EtOAc a prefiltroval sa. Filtrát sa zahustil pri zníženom tlaku, čím sa získal hustý olej. Olej sa rozpustil v minimálnom množstve teplého izopropanoiu a miešal sa. Výsledná zrazenina sa zachytila vákuovou filtráciou a

-28premyla sa s izopropanolom, potom s dietyléterom. Zahustením izopropanol/éterového filtrátu a kryštalizáciou z izopropanolu sa získal druhý výťažok. Spojené produkty sa rozpustili v EtOAc pri laboratórnej teplote a prefiltrovali sa. Odparením EtOAc sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme pevnej látky.

Teplota topenia 96 až 98 °C ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,48 (s, 9H), 1,60 - 1,90 (m, 4H), 2,00 - 2,15 (m, 1H), 3,22 (t, 2H), 4,35-4,42, (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,20-7,38 (m; 6H), 7,49 (t, 1H), 7,76 (t, 1H), 8.12 (d, 1H).

(b) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid o-Nitrofenylester N“-Boc-N⁸-Cbz-(R)ornitínu (33 g; 66,8 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) a (R)-4-hydroxy-a-metylbenzylamínu (9,3 g; 68,2 mmol) sa spojilo v CH2CI2 (600 ml). Výsledný žltý roztok sa miešal pri laboratórnej teplote počas 4 hodín. Keď sa kopulácia ukončila, ako sa stanovilo pomocou TLC, roztok sa zahustil vo vákuu, čím sa získal surový produkt. Surový materiál sa rozpustil v EtOAc, premyl sa s 0,5 N NaOH (2 x 300 ml), nasýteným KHSO₄ (2 x 300 ml), soľankou (2 x 300 ml), vysušila sa nad Na₂SO₄, prefiltroval a zahustil, čím sa získalo 30,1 g (61,9 mmol; 93 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Teplota topenia 64 až 105 °C [a]_D ²² = + 50,2° (c = 1,0, MeOH)

Rf 0,29 (2 :1 EtOAc/hexány; silikagéiové TLC platne)

MS 486 m/z ¹H NMR (CD3OD) δ 1,45 (s, 9H), 1,75 - 1,49 (m, 7H), 3,08 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 4,93 (m, 1H), 5,05 (m, 2H), 6,65 (m, 1H, NH), 6,72 (d, 2H), 6,95 (m, 1H, NH), 7,11 (d, 2H), 7,33 (m, 5H), 8,12 (d; 1H, NH) (c) (R)-N^s-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]omitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (b) vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (30,1 g; 61,.98 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), EtOAc (250 ml) a HCI/EtOAc (150 ml) pričom sa získala (po chromatografii na silikagéle, eluovaním so zmesou CH2CI2 : MeOH (80 : 20)) zlúčenina uvedená v podnázve (15.5 g; 60 %).

-29Teplota topenia 200 až 203 °C [a]_D ²¹ +39,7° (c =1,.0, MeOH)

MS 386 m/z

R_f 0,28 (CH₂CI₂/MeOH (80 : 20)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,48 (d, 3H), 1,89 - 1,48 (m, 4H), 3,09 (t, 2H), 3,80 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 4,95 (m, 1 H). 6,83 (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 7,33 (m, 5H) (d) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid (28,1 g;

66,6 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) sa rozpustil v THF (500 ml) a pomaly sa pridal pevný hydrogenuhličitan sodný (22,4 g; 266,4 mmol; 4 ekvivalenty). Potom sa pomaly po kvapkách v priebehu 30 minút pridal roztok difenylacetylchloridu (21,4 g; 66,60 mmol) v THF. Reakcia sa monitorovala pomocou TLC analýzy. Po zistení ukončenia reakcie sa rozpúšťadlo odstránilo vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v zmesi THF, EtOAc a MeOH a premyl sa s nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou, nasýteným KHSO4 a soľankou. Organické podiely sa vysušili nad Na₂SO₄, prefiltrovali a zahustili do sucha, pričom poskytli 29,2 g (0,050 mol; 76 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Teplota topenia 171 až 175 °C [a]_D ²² + 15,1 ⁰ (c = 1,0, DMF)

Rf 0,68 (CH2CI2 : MeOH (80 : 20); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,35 (d, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,60 (m, 1H), 1,74 (m, 1H), 3,03 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,95 (m, 1 H), 5,02 (s, 2H), 5,08 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 6,80 (m, 1H, NH), 7,10 (d, 2H), 7,3 (m, 15H), 8,1 (d, 1H, NH) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid acetát

Pripravil sa analogicky podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedeného vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)eíyl]ornitín amidu (26,8 g; 46,23 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (2,5 g) a HOAc (1 I; v protiklade ku zmesi HCI/MeOH), pričom sa získalo 24,3 g zlúčeniny uvedenej v podnázve (po azeotropickej destilácii s toluénom).

-30Teplota topenia 120 až 145 °C (za rozkladu) [a]_D ²³ + 57,1 ° (c = 1,0, MeOH)

MS 446 m/z

Rf 0,11 (systém B) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,35 (d, 3H), 1,.61 (m, 3H), 1,80 (m, 1H), 1,95 (s, 3H, HOAc), 2,81 (t, 2H), 4,40 (m, 1H), 5,09 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 7,08 (d, 2H), 7,28 (m, 10H) (f) (R)-NN^M'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa analogicky podľa spôsobu opísaného v príklade 1(f) uvedeného vyššie z (R)-N²-(difeny!acetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid acetátu (5,5 g; 11,8 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie) and N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (6,14 g; 17,1 mmol), ďalej s použitím DiPEA (4,0 ml; 22,9 mmol) v 100 ml DMF, pričom sa získalo 6,6 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej peny.

Teplota topenia 58 až 74 °C [«]_D ²² = + 35,3° (c = 1,0 v MeOH)

Rf0,88 (EtOAc) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,31 (d, 3H), 1,40 (m, 2H), 1,55 (m, 1H), 1,59 (m, 1H), 3,19 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,81 (q, 1H), 5,05 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 5,18 (s, 2H), 6,69 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,4 - 7,1 (m, 20H).

(9) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) vyššie z (Rj-N'^N¹'« bis(Cbz)-N²-(difeftylácetyl)-(R).-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (6,6 g; z kroku (f) uvedeného Vyššie), HOAc (160 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 1,1 g), čím sa získal výťažok 2,75 g zlúčeniny uvedenej v názve.

Teplota topenia 150 až 153 °C [a]_D ²³ = + 57,4° (c =1,0, MeOH)

Rf 0.44 (EtOAc : MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (47 : 47 : 6)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,.38 (d, 3H), 1,50 (m, 2H), 1,69 (m, 1H), 1,79 (m, 1H), 3,09 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,86 (q, 1H), 5,11 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 7,09 (d, 2H), 7,25

-31 (m, 10H), 8,15 (d, 1H, NH), 8,38 (d, 1H, NH).

Príklad 5 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]omitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N“-Boc-N⁵-Cbz-(R)-omitínu (14,0 g; 28,7 mmol) a (S)-4-metoxy-«metylbenzylamínu (5,0 g; 33,1 mmol) v CH2CI2 (400 ml), reakčný čas 60 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu s použitím 0,5 N NaOH, soľanky, vodného KHSO4 a soľanky. Organický roztok sa vysušil, prefiltroval a zahustil, pričom sa získala pevná látka (14,3 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Rf 0,50 (hexány : EtOAc (3 : 7); silikagélové TLC platne) (b) (R)-N²-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podlá spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (14,3 g; surový produkt, z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (300 ml) a zmesi HCI/EtOAc (300 ml), i aakčný čas 5 hodín. Roztok sa zahustil, čím sa získal surový produkt vo forme stlačiteľnej peny (13,3 g), ktorý sa použil bez dálšieho čistenia.

¹H NMR (CD3OD) δ 1,45 (d, 3H), 1,55 - 1,70 (m, 2H), 1,80 - 1,95 (m, 2H), 3,18 (t, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,84 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 6,88 (d, 2H), 7,28 (d, 2H), 7,28-7,38 (m, 5H).

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (d) uvedeného vyššie z (R)N²-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (13,3 g; 30,5 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (9,8 g; 30,5 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), trietylamínu (4,6 g; 45,8 mmol) a CH₂CI₂ (600 ml), reakčný čas 60 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu, vysušila sa prefiltrovala a zahustila, čím sa získal surový produkt vo forme pevnej

-32látky. Produkt sä rozpustil v CH2CI2 a zahustil sa, až pokým sa nezačala tvoriť pevná látka. Pridal sa dietyléter, aby sa vyzrážalo viac pevnej látky. Pevné podiely sa zachytili a vysušili, čím sa získal zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (13,5 g).

R_f 0,3 (EtOAc : CH₂CI₂ (1 : 3)) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,38 (d, 3H), 1,35 - 1,62 (m, 2H), 1,72 - 1,80 (m, 2H), 3,09 (m, 1H), 3,34 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,75 - 5,12 (m, 4H), 6,56 (d, 1H), 6,78 (d, 2H), 6,90 (d, 1H), 7,02 - 7,40 (m, 17H).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-N²(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (6,3 g; 10,6 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (3,2 g), MeOH (500 ml) a koncentrovanej HCI (20 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 60 hodín, pričom sa získal surový produkt vo forme pevnej látky (5,1 g). Pevná látka sa spracovala s hydroxidom amónnym, čím sa získala voľná zásada ako pevná látka (4,7 g), ktorá sa chromatografovala na silikagéle eluovanim so zmesou CH₂CI₂ : MeOH (80 : 20). Zahustením frakcií obsahujúcich produkt sa získala čistá zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (3,2 g).

Rf 0,4 (MeOH : hydroxid amónny (30 :1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,08 - 1,47 (m, 5H), 1,62 - 1,88 (m, 2H), 2,47 - 2,72 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,48 (m, 1H), 4.92 (s, 1 H), 4,97 (m, 1H), 6,78 (d, 2H), 6,95 - 7,45 (m, 12H);

(e) (R)-N^u),N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) vyššie z (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (voľná zásada; 1,75 g; 3,81 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S metylizotiomočoviny (1,50 g; 4,19 mmol) a dimetylformamídu (15 ml), reakčný čas 18 hodín. Zahustením vo vákuu sa získal surový produkt, ktorý sa chromatografoval na silikagéle eluovanim s CH₂CI₂, potom s EtOAc, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (2,3 g).

-33Rf 0,6 (hexán : EtOAc (3 : 7); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI₃) δ 1,15 - 1,72 (m, 3H), 1,37 (d, 3H), 1,85 (m, 1H), 3,15 - 3,40 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,49 (m, 1H), 4,85 - 5,07 (m, 4H), 5,18 (s, 2H), 6,68 - 6,82 (m, 3H), 6,95 - 7,45 (m, 22H), 8,32 (m, 1 H).

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) z (R)-N“N“'-bis(Cbz)-N²(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amidu (2,8 g; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (1,5 g) a, namiesto HOAc, MeOH (225 ml) a koncentrovanej HCI (21 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 18 hodín, pričom sa získal surový produkt (1,8 g). Kryštalizácia zo zmesi MeOH : dietyléter a potom zmesi izopropanol : dietyl-éter poskytla zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme bielej pevnej látky (0,75 g).

Teplota topenia 148 až 153 °C

Rf 0,3 (systém D) [a]₀ ²⁵ = -9,7° (c = 1,0, MeOH) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,45 - 1,92 (m, 4H), 3,15 (t, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,43 (t, 1 H), .4,88 (m, 1 H), 5,09 (s, 1 H), 6,80 (d, 2H), 7,17 {d, 2H), 7,15 - 7,38 (m, 10H) ¹³C NMR (CD3OD) δ 23,0, 26,8, 30,4, 42,4, 55,0, 56,2, 59,0, 115,4, 128,4, 130,0, 130,4, 137,0, 141,2, 159,0, 160,6, 173,2, 175,4

Príklad 6 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-['1-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]larginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1 -(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) vyššie z o-nitrofenylesteru N“-Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (4,4 g; 9,1 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie) a (-)-1 -(4-brómfenyl)etylamínu (2,0 g; 10,0 mmol) v CH2CI2, reakčný čas 18 hodín. Roztok obsahujúci produkt sa zahustil vo vákuu, pričom sa žltá pevná látka, ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

-34Rf 0,40 (hexány : EtOAc (3 : 7);. silikagélové TLC pílatne) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) vyššie zo surového (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amidu (9,1 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a zmesi HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas 2 hodiny. Roztok sa zahustil, čím sa získal surový produkt vo forme stlačiteľnej peny (5,4 g), ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,45 (d, 3H), 1,55 - 1,70 (m, 2H), 1,80 - 1,95 (m, 2H), 3,18 (t, 2H), 3,88 (t, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 7,28 (d, 1H), 7,28 - 7,45 {m, 5H), 7,48 {d, 2H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedeného vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (9,1 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (2,9 g; 9,1 mmol; pozri príklad 1(c) vyššie), trietylamínu (3,7 g; 36,4 mmol) a CH₂CI₂ (300 ml), reakčný čas 40 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu, vysušila sa s Ma₂SO4 prefiltrovala a zahustila, čim sa získal surový produkt vo forme pevnej látky (6,1 g). Produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou EtOAc : CH₂CI₂ (1 : 3). Zahustenie vhodných frakcií poskytlo čistý produkt vo forme bielej pevnej látky (4,2 g).

Rf. 0,3 (EtOAc : CH₂ČI₂ (1 : 3); silikagélové TLC platne) · « ¹H NMR (CDCI3) δ 1,34 (d, 3H), 1,35 - 1,95 (m, 4H), 3,08 (m, 1H), 3,32 (m, 1 H), 4,62 (m, 1 H), 4,75 -5,12 (m, 4H), 6,63 (d, 1 H), 6,85 - 7,45 (m, 19H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1 -(4-brómfenyl)etyI]ornitín amid (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid (0,50 g; 0,78 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) sa suspendoval v zmesi CH₂CI₂ : acetonitril (20 ml; 1 : 3) a ochladil sa na teplotu 0 °C. Pri 0 “C sa pridal trimetylsilyljodid (0,17 g, 0,86 mmol) a reakčná zmes sa miešala počas 2 hodín pri teplote 0 °C

-35(pevné podiely sa rozpustili počas uskutočňovania reakcie). Keď sa deprotekcia ukončila, ako sa stanovilo pomocou TLC analýzy, reakčná zmes sa rýchle ochladila vodou a zriedila sa s EtOAc. Organická vrstva sa oddelila a premyla sa vodou (1 x), 1 N tiosíranom sodným (1 x) a soľankou (2 x). Spojené vodné výplachy sa extrahovali s CH2CI2. Organické podiely sa spojili a pridal sa trietylamín (5 ml). Zmes sa nechala stáť počas 18 hodín, preniesla sa do oddeľovacieho lievika, premyla sa so soľankou (3 x), vysušila sa nad bezvodým síranom sodným, prefiltrovala sa a zahustila, čím sa získal surový produkt vo forme žltej pevnej látky (0,40 g). Surový produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou MeOH : CH2CI2 (3 : 7), potom so zmesou MeOH : CH2CI2 (1 : 1), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (voľná zásada) vo forme nie celkom bielej pevnej látky (0,25 g)

Rf 0,5 (systém D) ¹H NMR (CDCI3 + CD₃OD) δ 1,.41 (d, 3H), 1,30 - 1,54 (m, 2H), 1,.63 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 2,70 (t, 2H), 4,43 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 4,99 (s, 1H), 7,08 (d, 2H), 7,18 -7,42 (m, 12H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-brómfenyletyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 2(f) vyššie z (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amidu (voľná zásada; 0,20 g; 0,39 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazole-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,06 g; 0,39 mmol), trietylamínu (0,08 g; 0,78 mmol; namiesto DiPEA) a dimetylformamidu (1 ml), reakčný čas 5 hodín. Roztok sa zahustil vo vákuu a surový produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou MeOH : CHCI₃ : hydroxid amónny (3 :6:1). Konverzia eluovanej zlúčeniny na hydrochloridovú soľ poskytla zlúčeninu uvedenú v názve vo forme bielej pevnej látky (0,17 g).

Teplota topenia 136 až 140 °C

Rf. 0,4 (systém D) [a]_D ²⁵ =-15,3° (c= 1,0, MeOH) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,48 - 1,92 (m, 4H), 3,18 (t, 2H), 4,41 (m, 1H), 4,87 (m, 1 H). 5,08 (s, 1H), 7,18 (d, 2H), 7,10 - 7,38 (m, 10H), 7,36 (d, 2H)

Príklad 7

-36(R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-Brómfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1 -(4-Brómfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) vyššie z onitrofenylesteru N^a-Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (2,2 g; 4,5 mmol; pozri príklad 4(a) vyššie) a (+)-1-(4-brómfenyl)etylamínu (1,0 g; 5,0 mmol) v CH2CI2 (75 ml), reakčný čas 18 hodín. Roztok obsahujúci produkt sa zahustil vo vákuu, čím sa získala žltá pevná látka, ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Rf. 0,40 (hexány : EtOAc (3 : 7); silikagélové TLC platne) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Brómfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) vyššie zo surového (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Brómfenyl)etyl]ornitín amidu (2,46 g; 4,5 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (75 ml) a zmesi HCI/EtOAc (50 ml), reakčný čas 2 hodiny. Roztok sa zahustil, čím sa získal surový produkt vo forme žltej stlačiteľnej peny (2,4 g), ktorý sa použil bez ďalšieho čistenia.

¹H NMR (CD3OD) δ 1,48 (d, 3H), 1,65 - 1,90 (m, 4H), 3,12 (t, 2H), 3,90 (t, 1H), 5,00 (m, 1 H), 5,08 (s, 2H), 7,25 (d, 2H), 7,25 - 7,40 (m, 5H), 7,48 (d, 2H).

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (2,01 g; 4,5 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (1,4 g; 4,5 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), trietylamínu (1,8 g; 18,0 mmol) a CH₂CI₂ (300 ml), reakčný čas 40 hodín. Reakčná zmes*sa podrobila hydratačnému spracovaniu, vysušila sa Na₂SO₄, prefiltrovala a zahustila, čím ša získal surový produkt vo forme pevnej látky (2,9 g). Produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou EtOAc : CH₂CI₂ (1 :3). Zahustenie frakcií obsahujúcich produkt poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme bielej pevnej látky (2,5 g).

Rf 0,3 (EtOAc : CH₂CI₂ (1 : 3); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCb) δ 1,35 (d, 3H), 1,20 -1,98 (m, 4H), 3,03 (m, 1H), 3,32 (m, 1H),

-374,71 (m, 1H), 4,80 - 5,12 (m, 4H), 6,68 (d, 1H), 7,05 (d, 2H), 7,12 - 7,50 (m, 17H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(d) uvedeného vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]omitín amidu (1,00 g; 1,56 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), acetonitrilu (30 ml), CH2CI2 (10 ml) a trimetylsilyljodid (0,34 g, 1,70 mmol), reakčný čas 1,5 hodín, s následným pridaním ďalšieho trimetylsilyljodidu (0,14 g; 0,70 mmol), reakčný čas 5 hodín. Spracovanie s použitím trietylamínu (10 ml) poskytlo surový produkt vo forme oleja (1,00 g). Produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním s MeOH, potom so zmesou MeOH:hydroxid amónny (30 : 1), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (voľná zásada) vo forme bielej stlačiteľnej peny (0,57 g).

Rf 0,5 (MeOH : hydroxid amónny (30 :1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,22 -1,45 (m, 2H), 1,40 (d, 3H), 1,52 - 1,83 (m, 2H), 2,58 (t, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,91 (m, 1H), 5,07 (s, 1H), 7,11 - 7,35 (m, 12H), 7,43 (d, 2H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyi)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 2(f) uvedeného vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-brómfenyl)etyl]ornitín amidu (voľná zásada, 0,42 g; 0,83 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamid í n monohydrochloridu (0,13 g; 0,83 mmol), trietylamínu (0,17 g; 1,66 mmol; namiesto DiPEA) a DMF (4 ml), reakčný čas 18 hodín. Roztok sa zahustil za vákua a surový produkt sa chromatografoval na silikagéle s použitím zmesi MeOH : CHCI3 : hydroxid amónny (3:6:1). Konverzia na hydrochloridovú soľ poskytla zlúčeninu uvedenú v názve vo forme bielej pevnej látky (0,31 g).

Teplota topenia 115 až 120 °C

Rf. 0,4 (systém D) [a]_D ²³ =+49,8° (c=1, MeOH) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,40 (d, 3H), 1,75 - 1,88 (m, 4H), 3,02 - 3,17 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,14 (s, 1H), 7,18 (d, 2H), 7,13 - 7,50 (m, 10H), 7,43 (d, 2H)

Príklad 8

-38(R)-N²-(DifenylacetyI)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyI)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(3-Metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

DiPEA (5,4 ml; 31 mmol) sa za miešania pridala k zmesi EDC x HCI (6,0 g; 31 mmol), N-a-Boc-N-ô-Cbz-(R)-ornitínu (7,7 g; 21 mmol), (±)-3-methoxy-a-metylbenzylamínu (3,2 g; 21 mmol) v CH2C2 (100 ml). Zmes sa miešala počas 18 hodín pri laboratórnej teplote, potom sa zriedila s CH2CI2 (100 ml) a trikrát sa premyla so soľankou. Organická vrstva sa oddelila a vysušila nad síranom sodným. Po odparení rozpúšťadla sa získal bezfarebný olej, ktorý sa naniesol na kolónu vlhkého sílikagélu (kolóna: priemer 50 mm, výška 100 mm) a eluoval sa s 20 % EtOAc v hexánoch (500 ml), potom s 50 % EtOAc v hexánoch {500 ml) a napokon 100 % EtOAc (500 ml). Frakcie (každá 75 ml) 10 až 13 sa spojili a zahustili, čím sa získalo 10,1 g produktu vo forme bezfarebného skla (90 %).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-{3-Metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (10 g; 19,3 mmol; z kroku (a) uvedeného výššie), ktorý sa zbavil chrániacich skupín s použitím zmesi HCI/EtOAc (100 ml), čím sa získal výťažok 7,7 g (100 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-{3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (8,6 g; 19,3 mmol;

z kroku (b) uvedeného vyššie) a difenylacetylchloridu (4,85 g; 21 mmol), ktoré sa • * spojili v THF (75 ml) a zmes sa miešala pri teplote -5 °C. Pridal sa 1 M roztok Na2CO₃ (21 ml; 42 ekvivalentov) za intenzívneho miešania, potom sa zahrievala pri laboratórnej teplote počas 3 hodín. Zmes sa vliala do vody a extrahovala sa s EtOAc. Organický extrakt sa premyl s 5 %-ným roztokom kyseliny citrónovej a následne s nasýteným roztokom NaHCO₃, vysušil sa s Na₂SO4 a zahustil , čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (8,7 g; 73,7 %).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

-39Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2,3 g; 3,76 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), z ktorého sa odstránili chrániace skupiny v HOAc (namiesto MeOH). Zlúčenina sa rozpustila v zmesi HCI/MeOH a zahustila sa do sucha, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (1,8 g; 94 %) vo forme HCI soli z acetonitrilu a EtOAc.

Teplota topenia 173 až 175 °C ¹H NMR (CD₃OD; zmes diastereoizomérov) δ 6,7 - 7,4 (m, 14H), 5,1 (s, 1H),

4,9 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 3,72 (s, 3H), 2,9 (m, 2H), 1,5-1,9 (m, 4H), 1,38 (d, 3H) (e) (R)-N^IS,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z R)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (1,75 g; 3,4 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (1,33 g; 3,7 mmol) v DMF (2,5 ml) a 1,5 ekvivalentov DiPEA. Reakcia sa ukončila v priebehu 2 hodín, podľa TLC analýzy. Po chromatografii sa produkt uvedený v podnázve použil priamo v nasledujúcom kroku.

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)N“,N^I!,'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R_lS)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]arginín amidu (1,7 g; 2,2 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie) v HOAc (100 ml), čím sa získalo 1,1 g zlúčeniny uvedenej v názve vo forme surovej acetátovej soli. Soľ sa rozpustila v MeOH a pomaly sa až do bodu zakalenia pridala 1 N HCI. Vytvorili sa kryštály, ktoré sa zachytili a vysušili, čím sa získalo 0,55 g (46 %) zlúčeniny uvedenej v názve.

Teplota topenia 103 až 108 °C ¹H NMR (300 MHz) (CD₃OD) (zmes diastereoizomérov) δ 6,7 - 7,4 (m, 14H), 5,1 (s, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,1 (m, 2H), 1,35 - 1,9 (m, 4H), 1,32 (d, 3H)

Príklad 9

-40(R)-N^{1 2 * *}-(Difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R) N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(a) uvedenom vyššie z N^aBoc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 13 mmol), BOP reagentu (6,0 g; 13 mmol), HOBT (1,8 g; 13 mmol) a DiPEA (7,1 ml; 40,0 mmol) 100 ml zmesi acetonitril :CH₂CI₂ (1 : 1), a následne 1,8 ml (13 mmol) (R)-a-metylbenzylamínu, zmes sa potom miešala cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil prechodom cez vložku silikagélu s EtOAc, čím sa získalo 5,9 g (92 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme svetložltej pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,3 - 1,8 (m, 16H); 3,2 (m, 2H), 4,05 (m, 1H) 5,0-5,1 (m, 3H), 7,1-7,4 (m, 10H).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie z (R) N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid (5,9 g; 13 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (30 ml) potom zmesi HCI/EtOAc (100 ml), reakčný čas pre odstránenie chrániacich skupín 3,5 hodín, potom CH₂CI₂ {100 ml), difenyl-acetylchlorid (2,9 g; 13 mmol) a následne pyridínu (3,0 ml; 37 mmol; namiesto DiPEA), reakčný čas cez noc, zmes sa zriedila s CH₂CI₂ (100 ml) na spracovanie. Organická vrstva sa čiastočne zahustila pri zníženom tlaku, pri ktorom sa začala tvoriť zrazenina, ktorá sa odfiltrovala, čím sa získalo 1,7 g (24 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

¹H NMR (CD₃O.D) δ 1,4 (m, 5H), 1,6 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 3,05 (m, 2H), 4,4 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 5,02 (s, 2H), 5,08 (s, 1H), 6,9 (m (vymeniteľné), 1H), 7,1 - 7,4 (m, 20H), 8,25 (m (vymeniteľné), 1H) (c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)~N-(1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (1,7 g; 3,0 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HOAc (75 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na zlúčeninu uvedenú v podnázve a

-41 použila sa bez ďalšieho čistenia.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,6 (m, 3H), 1,8 (m, 1H), 2,85 (m, 2H), 4,45 (m, 1 H), 4,95 (m, 1 H), 5,1 (s, 1 H), 7,2 - 7,4 (m, 15H).

(d) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyietyl)ornitín amid hydrochloridu (0,50 g; 1,0 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,40 g; 1,1 mmol) a DiPEA (0,3 ml; 1,6 mmol), pričom sa získal výťažok 0,58 g (73 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podlá spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(dífenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amidu (0,6 g; 0,8 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 200 mg), HOAc (25 ml), reakčný čas cez noc..Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid, pričom sa získalo 0,4 g (99 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

Teplota topenia 111 až 116 °C

Rf 0,46 (systém D) [a]_D ²⁴ = + 51,0 ° (c = 0,65, MeOH) ¹H NMR (CD₃OD) δ 7,20 - 7,36 (m, 15H), 5,10 (s, 1H), 4,97 (q, 1H), 4,43 (t, 1H), 3,08 (m, 2H), 1,42 - 1,85 (m, 4H), 1,41 (d, 3H)

Príklad 10 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(1 -fény lety l)arg in in amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-(1-Fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedeného vyššie z N“Boc-N⁶-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 13 mmol), BOP reagentu (6,0 g; 13 mmol), HOBT (1,8 g; 13 mmol) a, DiPEA (7,1 ml; 40 mmol), 100 ml zmesi acetonitril : CH2CI2 (1 :1), a následne s (S)-a-metylbenzylamínom (1,8 ml; 13 mmol), zmes sa potom

-42miešala cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil prechodom cez vložku silikagelu s EtOAc, čím sa získalo 5,9 g (92 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme svetložltej pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,2 - 1,8 (m, 16H), 3,2 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 4,9 - 5,1 (m, 3H), 7,1-7,4 (m, 10H) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(1 -fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) z (R)-N²-(Boc)N⁵-(Cbz)-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (5,9 g; 13 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) EtOAc (30 ml), potom zmesi HCI/EtOAc (100 ml), reakčný čas pre odstránenie chrániacich skupín 3,0 hodín, potom CH2CI2 (100 ml), difenylacetylchlorid (3,0 g; 13 mmol) a následne s pyridínom (3,0 ml; 37 mmol; namiesto DiPEA) v priebehu jednej minúty, reakčný čas cez noc, zmes sa zriedila s CH₂CI₂ (100 ml) a spracovala sa. Kryštalizácia zo zmesi CH₂CI₂: EtOAc ; MeOH poskytla 3,4 g (47 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,35* (d, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,8 (m, 1H), 3,2 (m, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 5,02 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,1 - 7,4 (m, 20H) (c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (2,0 g; 3,5 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 150 mg), HOAc (100 ml; namiesto MeOH), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid uvedený v podnázve a tento sa použil bez ďalšieho čistenia.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,4 (d, 3H), 1,65 (m, 3H), 1,85 (m, 1H), 2,9 (m, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 5,05 (s, 1H), 7,15-7,4 (m, 15H) (d) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid hydrochloridu (0,50 g; 1,0 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S metylizotiomočoviny (0,40 g; 1,1

-43mmol) a DiPEA (0,3 m; 1,6 mmol), čím sa získal výťažok 0,59 g (74 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl!-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amidu (0,6 g; 0,8 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 200 mg), HOAc (25 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid, čím sa získalo 0,4 g (99 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

Teplota topenia 112 až 118 °C

Rf = 0,46 (systém D) [a]_D ²⁵=-2.6° (c =1,1, MeOH) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,41 (d, 3H), 1,49 - 1,90 (m, 4H), 3,18 (m, 2H), 4,46 (t, 1 H), 4,95 (q, 1 H), 5,06 (s, 1 H), 7,20 - 7,32 (m, 15H).

Príklad 11 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-Cyklopropyl-1-(4-metoxyfeny)metyl]ornitín amid

Pripravil sa analogicky podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z o-nitrofenylesteru N“-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (6,25 g; 12,8 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R,S)-a-cyklopropyl-4-metoxybenzénmetanamín hydrochloridu (3,01 g; J4,1 mmol) a DiPEA (1,99 g, 15,4 mmol) v CH2CI2 (200 ml), reakčný čas 3 hodiny, následne sa pridal ďalší DiPEA (1 ml) a (R,S)-a-cyklopropyl-4-metoxybenzénmetanamín hydrochlorid (0,50 g) a zmes sa miešala počas 15 minút. Reakčná zmes sa zahustila a rozpustila v EtOAc. EtOAc sa premyl vodou, nasýteným vodným hydrogensíranom draselným, vodou, nasýteným vodným uhličitanom sodným, soľankou a potom sa vysušil. Zahustenie organických podielov poskytlo žltú pevnú látku (7,40 g) vo forme zmesi diastereoizomérov. Surový materiál sa použil bez ďalšieho čistenia. Analytická vzorka sa pripravila kryštalizáciou zo zmesi EtOAc : dietyléter: hexány.

-44Teplota topenia 122 až 125 ^eC

Rf 0,50 (hexány : EtOAc (3 : 7); silikagéiové TLC platne) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R_lS)-N-[1-Cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie zo surového (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfeny)metyl]ornitín amidu (5,6 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a HCI/EtOAc (100 ml), reakčný čas 18 hodín. Hydrochloridová soľ sa vyzrážala pridaním dietyléteru, zachytila sa a vysušila, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme vo forme sivastej pevnej látky (3,8 g).

Rf 0,3 (CHCI3: MeOH : HOAc (9,0 :1,0 : 0,1); silikagéiové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD; komplexná zmes diastereoizomérov) δ 0,28 - 0,42 (m), 0,52 - 0,65 (m), 0,88 - 0,98 (m), 1,15 - 1,98 (m), 3,02 - 3,20 (m), 3,72 (s), 3,74 (s), 3,75 3,95 (m), 4,20 - 4,30 (m), 5,02 - 5,13 (m), 6,83 - 6,90 (m), 7,18 - 7,40 (m) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -cyklopropyl-1 -(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z R)N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid hydrochloridu (2,0 g; 4,3 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (1,4 g; 4,3 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), trietylamínu (0,7 g; 6,5 mmol) a CH2CI2 (150 ml), reakčný čas 18 hodín pri laboratórnej teplote a 4 hodiny pod refluxom. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu, vysušila sa, prefiltrovala a zahustila , čím sa získal surový produkt vo forme žltej pevnej látky (2,8 g). Produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou hexány : EtOAc (1 : 1 ), potom CH2CI2 : EtOAc (1:1). Zahustenie frakcií obsahujúcich produkt poskytlo čistú zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme svetložltej pevnej látky (2,2 g).

Rf 0,4 (hexány : EtOAc (1 :1), silikagéiové TLC platne) ¹H NMR (CD₃OD, komplexná zmes diastereoizomérov) δ 0,25 - 0,36 (m), 0,45 0,60 (m), 0,80 - 0,98 (m), 1,00 - 1,92 (m), 2,95 - 3,16 (m), 3,73 (s), 3,74 (s), 4,16 -4,28 (m), 4,38 - 4,50 (m), 4,70 - 4,85 (m), 4,98 - 5,08 (m), 6,72 - 6,87 (m), 7,05 - 7,40 (m).

-45(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedeného vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amidu (2,0 g; 3,23 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (1,0 g), MeOH (250 ml) a koncentrovanej HCI (5 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 60 hodín, pričom sa získal surový produkt. Pripravila sa voľná zásada, čím sa získala pevná látka (1,1 g), ktorá sa chromatografovala na silikagéle eluovanim so zmesou MeOH : hydroxid amónny (15 : 1). Zahustenie frakcií obsahujúcich produkt poskytlo čistú hydrochloridovú soľ uvedenú v podnázve vo forme nie celkom bielej pevnej látky (0,6 g; Rf0,4 (MeOH : hydroxid amónny (30 : 1), silikagélové TLC platne), ktorá sa spracovala so zmesou HCI/MeOH, čím sa získala hydrochloridová soľ uvedená v názve ako biela pevná látka.

Teplota topenia 190 až 197 °C ¹H NMR (CD3OD, zmes diastereoizomérov) δ 0,81 - 0,97 (m, 2H), 1,10-1,40 (m, 2H), 1,52 - 1,93 (m, 5H), 2,78 - 2,94 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,45 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,08 (s, 1H),5,12(s, 1H), 6,75-6,87 (m, 2H), 7,08-7,40 (m, 14H) (e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyljarginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid hydrochloridu (0,46 g; 0,88 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,35 g; 0,97 mmol), trietylamínu (0,27 g; 2,64 mmol; namiesto DiPEA) a THF (30 ml; namiesto DMQ* reakčný čas 18 hodín. Zahustenie pod vákuom poskytlo surový produkt, ktorý sa chromatografoval na silikagéle eluovanim so zmesou hexány : EtOAc (1:1), čím sa získala čistá zlúčenina uvedená v názve (0,24 g).

Rf 0,3 (hexány: EtOAc (1 :1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD, komplex zmesi diastereoizomérov) δ 0,77 - 0,90 (m), 1,08 1,94 (m), 3,12 - 3,42 (m), 3,77 (s), 3,78 (s), 4,38 - 4,55 (m), 4,73 - 4,87 (m), 4,88 5,22 (m), 6,62 - 6,87 (m), 6,90 - 7,48 (m), 8,22 - 8,40 (m).

-46(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyi)metyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amidu (0,24 g; 0,30 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (0,12 g) а, namiesto HOAc, MeOH (75 ml) a koncentrovanej HCl (1 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 15 hodín, pričom sa získal surový produkt, ktorý sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou MeOH : CHCI³ : hydroxid amónny (3:6:1), čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme pevnej látky (0,16 g).

Teplota topenia 105 až 115 °C

Rf 0,3 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD, zmes diastereoizomérov) δ 0,80 - 0,93 (m), 1,07 - 1,92 (m), 3,03 - 3,20 (m), 3,78 (s), 4,35 - 4,47 (m), 4,62 - 4,95 (m), 5,13 (s), 5,16 (s), 6,25 б, 88 (m), 7,08 - 7,45 (m), 8,10 - 8,26 (m)

13,

C NMR (CD3OD) δ 14,5, 21,0, 27,0, 30,5, 40,0, 42,2, 54,5, 55,2, 56,2, 59,0, 115,0,128,4,129,0, 129,8,130,2,136,2, 141,0, 158,8, 160,4, 173,2, 175,2.

Príklad 12 (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-(1 -metyl-1 -fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedeného vyššie z 0nitrofenylesteru N“-Bpc-N⁸-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 11,5 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie) a kumylamínu (1,55 g; 11,5 mmol) a 160 ml CH2CI2. Reakčná zmes sa zahrievala na reflux počas 2 hodín. Zmes sa zahustila do sucha, rozpustila sa v EtOAc a premyla s nasýteným vodným KHSO₄ a soľankou, vysušila s Na₂SO₄, prefiltrovala a zahustila, čím sa získalo 6,1 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme žltého oleja.

Rf 0,93 (systém B)

-47(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N-(1 -metyl-1 -fényletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie, z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)ornitín amidu (6,0 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), spracoval sa s EtOAc (100 ml) a zmesou HCI/EtOAc (50 ml), reakčný čas 24 hodín. Reakčná zmes sa zahustila do sucha a triturovala sa s éterom, čím sa získalo 3,68 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,95 - 1,5 (m, 4H), 1,64 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 3,14 (t, 2H) 3,89 (m, 1H), 5,06 (s, 2H), 7,45 - 7,1 (m, 10H).

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-N-(1 -metyl-1 -fényletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochloridu (3,6 g; 8,57 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (3,44 g; 10,8 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), a trietylamínu (1,5 ml; 10,8 mmol) v 100 ml CH2CI2. Reakčná zmes sa miešala počas 12 hodín a podrobila sa hydratačnému spracovaniu. Produkt sa chromatografoval eluovaním so zmesou EtOAc/hexány na 250 ml silikagélu, pričom sa získal výťažok 4,26 g zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)ornitín amidu (4,21 g; z kroku (c) uvedeného vyššie) s použitím 10 % Pd/C (200 mg) v 150 ml MeOH a 1 ml koncentrovanej HCI, pričom sa získal výťažok 3,88 g zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Teplota topenia 126 až 128 °C

MS(CI/izobôtán)W44 m/z

R_f. 0,53 (EtOAc : MeOH : NH4OH (47 :47 ; 6)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,48 (s, 3H), 1,58 (s, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,55 (m, 2H), 2,61 (t, 2H), 4,41 (m, 1 H), 5,05 (s, 1 H), 7,4 - 7,05 (m, 15H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(N‘’,N“')-bÍs(Cbz)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedeného vyššie z (R)-48N²-(difenylacetyl)-N-(1-metyl-1-fény letyl)ornitín amid hydrochloridu (2,0 g; 4,2 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-rnetylizotiomočoviny (2,4 g; 6,2 mmol), 1 ml DiPEA a 50 ml DMF, čím sa získal výťažok 1,1 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedeného vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(N“₎N“')-bis(Cbz)-N-(1-metyl-1-fenyletyl)arginín amidu (0,5 g; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10% Pd/C (0,1 g) a, namiesto HOAc, koncentrovanej HCI (0,4 ml) a MeOH (50 ml), pričom sa získal výťažok 62 mg zlúčeniny uvedenej v názve

Teplota topenia 140 až 143 °C

Rf 0,43 (EtOAc; MeOH ; kone. hydroxid amónny (46 : 46; 7)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,55 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 1,90 - 1,40 (m, 4H), 3,16 (m, 2H), 4,44 (m, 1H), 4,81 (m, 1 H), 5,08 (s, 1H), 7,4 - 7,0 (m, 15H) 8,0 (s, 1H, NH), 8,38 (d, 1H, NH)

Príklad 13 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-(1-indanyl)omitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedenom vyššie z N“Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (3,7 g; 10 mmol), BOP reagentu (4,4 g; 10 mmol), HOBT (2,7 g; 20 mmol) a DiPEA (5,0 ml; 30,0 mmol) v acetonitrile (200 ml; namiesto zmesi acetonitril : CH2CI2 (1 : 1)), a následne s (R,S)-1-indanamínu (1,3 mi; 10 mmol). Spracovanie poskytlo 4,0 g (83 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

¹H NMR (CDCb) δ 1,30 - 1,90 (m, 7H), 1,40 (s, 9H), 2,45 - 2,62 (m, 1H), 2,75 3,05 (m, 2H), 3,05 - 3,22 + 3,25 - 3,50 (m, 2H), 4,15 - 4,32 (m, 1H), 4,82 - 5,00 (m, 2H), 5,18 - 5,33 (m, 1H); 5,35 - 5,55 (m, 1H), 6,60 - 6,70 (m, 1 H). 7,05 - 7,40 (m, 9H) (b) (R)-N2-(Cbz)-N2-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amidu (1,6 g; 3,2 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) EtOAc (10 ml), potom zmesi HCI/EtOAc (125 ml), reakčný čas na odstránenie chrániacich skupín 1 hodina, potom CH2CI2 (125 ml), difenylacetylchlorid (0,74 g; 3,6 mmol), a následne s DiPEA (1,7 ml; 9,7 mmol) v priebehu jednej minúty, reakčný čas 1 hodina, zriedené s CH₂CI₂ (125 ml) na postup spracovania, získal sa výťažok 1,8 g (100 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

¹H NMR (CDCb) δ 1,40 - 1,90 (m, 7H), 2,40 - 2,55 (m, 1H), 2,72 - 2,96 (m, 2H), 3,00 - 3,18 + 3,25 - 3,53 (m, 2H), 4,55 - 4,72 (m, 1H), 4,75 - 4,96 (m, 2H), 5,25 - 5,95 (m, 1H), 6,55 - 6,65 + 6,78 - 6,95 (m, 1H), 7,05 - 7,40 (m, 19H).

(c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N2-(Cbz)-N2-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amidu (1,2 g; 2,2 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 500 mg), MeOH (100 ml; HCl sa nepridala) a reakčný čas 2,5 hodín, pričom sa získal výťažok 0,82 g (90 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme matnej bielej látky.

Rf. 0,54 (systém A) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,35 - 1,90 (m, 7H), 2,44 - 2,95 (m, 5H), 4,40 - 4,55 (m, 1H), 4,90 (s, 1H), 5,30-5,45 (m, 1H), 6,95-7,40 (m, 14 H).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amid hydrochlorid

Vzorka (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)ornitín amidu (z kroku (c) uvedeného vyššie) sa spracovala so zmesou HCI/EtOAc, potom sa odparila pri zníženom tlaku. Kryštalizácia zo zmesi MeOH: dietyléter poskytla hydrochlorid uvedený v podnázve.

Teplota topenia 220 až 225 °C (rozklad) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,60 - 2,00 (m, 7H), 2,30 - 2,50 (m, 1H), 2,72 - 3,00 (m, 4H), 4,35 - 4,98 (m, 1H), 5,12 (s, 1H), 5,25 - 5,35 (m, 1H), 7,05 - 7,40 (m, 14H), 7,95-8,12 (m 1H), 8,45-8,55 (m, 1H).

-50(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 2(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)omitín amidu (0,54 g; 1,3 mmol; voľná zásada z kroku (c) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,20 g; 1,3 mmol) a DiPEA (0,8 ml; 5 mmol). Produkt sa dodatočne prepláchol s EtOAc, čím sa získalo 0,19 g (28 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme bielej pevnej látky.

Teplota topenia 130 až 140 °C

Rf = 0,16 (systém A) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,50 - 1,95 (m, 7H), 2,35 - 2,52 (m, 1H), 2,75 - 3.00 (m, 2H), 3,08-3,20 (m, 2H), 4,35-4,45 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 5,28-5,38 (m, 1H), 7,05 -7,40 (m, 14H).

Príklad 14 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amid a (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmelyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(a) uvedenom vyššie N“Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (8,0 g; 22 mmol), BOP (9,7 g; 22 mmol), HOBT (3,0 g; 22 mmol) a DiPEA (11,3 ml; 65,0 mmol) v160 ml zmesi acetonitril : CH2CI2 (1 : 1), a následne s racemickým a-aminofenylacetamidom (3,3 g; 22 mmol), zmes sa potom miešala cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil prechodom cez vložku silikagélu s EtOAc, čím sa získalo 8,0 g (73 %) diastereoizomérnej zmesi zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amid a (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie zo zmesi (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amidu a (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amidu (8,0 g; 16 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (250 ml), potom so

-51 HCI/EtOAc (60 ml), reakčný čas na odstránenie chrániacich skupín 2 hodiny, potom CH2CI2 (100 ml), difenylacetylchlorid (3,7 g; 16 mmol), následne s pyridínom (12 ml; 0,15 mol; namiesto DiPEA) v priebehu 10 minút, reakčný čas cez noc, zriedené SCH2CI2 (100 ml) a malým množstvom EtOAc, na zlepšenie rozpustnosti počas postupu spracovania. Surový produkt sa prečistil rozpustením produktu v zmesi MeOH: HOAc a odfiltrovaním pevných podielov. Zahustenie filtrátu pri zníženom tlaku poskytlo 6,0 g (63 %) zmesi zlúčenín uvedených v podnázve vo forme pevnej látky.

¹H NMR (CD3OD) δ 1,45 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 3,05 (m, 2H), 4,4 (m, 1 H), 4,9 - 5,1 (m, 4H), 7,2 - 7,5 (m, 20H) (c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amid acetát

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedeného vyššie zo zmesi (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amidu a (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylnnetyl)ornitín amidu (6,0 g; 10 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 600 mg), HOAc (200 ml; namiesto MeOH), reakčný čas cez noc. Surový zmes produktu sa kryštalizovala zo zmesi HOAc : EtOAc, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (0.5 g; 94 %).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)ornitín amid

Matečný lúh z kroku (c) uvedeného vyššie sa nechal stáť cez noc, potom sa získal druhý výťažok kryštálov, ktorými bola zlúčenina uvedená v podnázve (0,42 g; 8 %). ' (e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²«(Difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(l-karbamoylfenylmetyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie, s tou výnimkou, že sa ako spolurozpúšťadlo pridal THF (5 ml), z (R)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)omitín amidu (0,4 g; 0,8 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,3 g; 0,8 mmol) a DiPEA (0,2 ml; 1,1 mmol). Surový produkt sa prečistil kryštalizáciou z EtOAc, ktorá poskytla

-520,40 g (64 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

(f) (R)-N2-(Difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)N“, N“ '-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-( 1 -karbamoylfenylmetyl)-arg inín amidu (0,25 g; 0,33 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HCI/MeOH (50 ml) pri reakčnej dobe cez noc. Surový produkt sa prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie s použitím zmesi CHCI₃ : MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (6:3:1), čím sa získalo 0,16 g (91 %) zlúčeniny uvedenej v názve.

Teplota topenia 110 až 150 °C

Rf = 0,58 (systém D)

Príklad 15 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfeny)metyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid a (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S alebo R)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedeného vyššie z N“Boc-N®-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 13 mmol), BOP reagentu (6,0 g; 13 mmol), HOBT (1,8.‘g; 13 mmol) a DiPEA (7,1 ml; 40 mmol) v 100 ml zmesi acetonitril:CH²CI² (1 :1), a následne s racemickou zmesou 4-metoxy-a-aminofenylacetamidu (2,5 g; 13 mmol), za miešania cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil kryštalizáciou zo zmesi EtOAc : MeOH, pričom sa získal výťažok 4,5 g (62 %) diastereoizomérnej zmesi zlúčenín uvedených v podnázve vo forme pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,43 (s, 9H), 1,49 - 1,85 (m, 4H), 3,12 (m, 2H), 3,76 a 3,79 (2s, 3H), 4,08 (m, 1H), 5,02 (s, 1H), 5,08 (s, 1H), 5,33 (m, 1 H), 6,89 (d, 2H), 7,32 (m, 7H).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid

-53hydrochlorid

Zmes (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyljornitín amidu a (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S alebo R)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amidu (4,5 g; 8,5 mmol) sa rozpustila v 25 ml MeOH a pridalo sa 100 ml HCI/EtOAc. Zmes sa magneticky miešala pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny, potom sa odparila pri zníženom tlaku, čím sa získala surová hydrochloridová soľ diastereoizomérov (R)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]omitín amidu a (R)-N⁵-(Cbz)-(S alebo R)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amidu. Kryštalizácia zo zmesi MeOH : EtOAc poskytla 1,3 g polárnejšieho diastereoizoméru uvedeného v podnázve (32 %).

Rf 0,36 (systém C) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,5 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 3,1 (m, 2H) 3,7 (s, 3H), 3,95 (m, 1H), 4,95 (d, 2H), 5,38 (s, 1H), 6,9 (d, 2H), 7,3 (m, 2H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-rnetoxyfenyl)metyljornitín amid

K zmesi (R)-N⁵-(Cbz)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid hydrochloridu (1,2 g; 2,6 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) a pyridínu (4 ml; 49 mmol) v CH2CI2 (80 ml) a DMF (2,5 ml) sa pridal difenylacetylchlorid (0,59 g;

2,6 mmol) a výsledná zmes sa miešala cez noc. Rozpúšťadlá sa odparili pri zníženom tlaku a zvyšok sa rozdelil medzi MeOH : EtOAc (1 ; 2) a zriedený roztok KHSO4. Organická vrstva sa oddelila a zahustila pri zníženom tlaku a výsledná pevná látka sa premyla vodou, aby sa odstránili anorganické soli. Takto sa získalo 0,95 g (59 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,45 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 3,08 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,4 (m, 1H), 5,0 - 5,1 (s, s, m, 4H), 5,28 (s, 1H), 6,85 (d, 2H), 7,15 - 7,4 (17H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid acetát

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedeného vyššie z (R)-'54N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1 -karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]-ornitín amidu (0,95 g; 1,4 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 120 mg), HOAc (100 ml; namiesto MeOH), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa kryštalizovala zo zmesi MeOH : EtOAc, čím sa získalo 0,84 g (99 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]ornitín amid acetátu (0,49 g; 1,0 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz}-Smetylizotiomočoviny (0,35 g; 0,99 mmol) a DiPEA (0,25 ml; 1,4 mmol). Produkt sa prečistil kryštalizáciou zo zmesi EtOAc : MeOH, ktorá poskytla 0,43 g (70 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)N,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1-karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amidu (0,42 g; 0,53 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie) 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HOAc (75 ml) pri reakčnom čase cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid, potom sa triturovala so zmesou MeOH : EtOAc, čím sa získalo 0,15 g (52 %) zlúčeniny uvedenej v názve.

Teplota topenia 140 až 158 °C

R_f = 0,56 (systém E) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,42 -1,91 (m, 4H), 3,12 (t, 2H), 3,79 (s, 3H), 4,41 (t, 1H), 5,08 (s, 1H), 5,31 (s, 1H), 6,82 (d, 2H), 7,18-7,35 (m, 12H)

Príklad 16 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid

-55Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie zonitrofenylesteru N^a-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (4,0 g; 9,22 mmol; pozri príklad 4(a) uvedeného vyššie) a (S)-(+)-fenylglycinolu (1,.26 g; 9,22 mmol; 1 ekvivalent.) a CH₂CI₂ (160 ml). Reakčná zmes sa miešala cez noc a potom sa premyla s nasýteným vodným KHSO4, nasýteným vodným Na₂CO3, soľankou, vysušila sa s Na₂SO₄, prefiltrovala a zahustila do sucha. Surový zvyšok sa trituroval s éterom, pričom sa získalo 3,8 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

Rf 0,48 (CH₂CI₂: MeOH (80 : 20); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (DMSO-de) δ 1,36 (s, 9H), 1,80 -1,37 (m, 4H), 2,95 (q, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,95 (m, 1H), 4,81 (m, 2H), 5,0 (s, 2H), 6,79 (d, 1H), 7,41 - 7,21 (m, 10H), 8,11 (d, 1H, NH) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amidu (3,2 g; 6,6 mmol; z kroku (a) uvedenom vyššie z ), 25 ml MeOH a 100 ml HCI/EtOAc, čím sa získal výťažok 2,0 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielych kryštálov.

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyi)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochloridu (2,0 g, 4,74 mmol; z kroku (b) uvedenom vyššie z ), 2-nitrofenyldifenylacetátu (1,67 g; 5,21 mmol; pozri príklad 1(c) vyššie) a trietylamínu (0,726 ml; 5,21 mmol) v 150 ml CH₂CI₂. Reakčná zmes sa zahrievala pod refluxom počas jednej hodiny, potom sa podrobila štandardnému hydratačnému spracovaniu, čím sa získal výťažok 1,78 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1,71-1,2 (m, 4H), 2,91 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,82 (m, 2H), 5,0 (s, 2H), 5,15 (s, 1H), 7,5-7,1 (m, 15H), 8,35 (m, 2H; NH).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie zo vsádzky (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1 -fényletyl)ornitín amidu

-56(1,78 g; z kroku (c) uvedenom vyššie z ) a 10 % Pd/C (200 mg) v 100 ml MeOH a 1,0 ml HCI (kone.), pričom sa získal výťažok 1,15 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej peny.

Rf 0,44 (EtOAc : hexány (4:1)) ’H NMR (DMSO-de) δ 1,52 (m, 3H), 1,62 (m, 1H), 2,70 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 4,43 (m, 1H), 5,19 (s, 1H), 7,25 (m, 15H), 8,51 (d, 1 H, NH), 8,61 (d, 1H, NH).

(e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amidu (0,5 g; 1,12 mmol; z kroku (d) uvedenom vyššie z ), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,603 g; 1,68 mmol), DiPEA (0,2 ml) a DMF (15 ml), čím sa získal výťažok 0,386 g zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(f) (R)-N2-(Difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amidu (0,250 g; z kroku (e) uvedenom vyššie z ), 10 % Pd/C (200 mg) a, namiesto HOAc, 50 ml MeOH s 1 ml koncentrovanej HCI, pričom sa získal výťažok 78 mg zlúčeniny uvedenej v názve.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,57 (m, 2H), 1,71 (m, 1H), 1,86 (m, 1H), 3,14 . (t, 2H), 3,70 (m, 2H), 4,53 (m, 1 H), 5,08 (s, 1H), 7,35 (m, 15H)

Príklad 17 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(2-Hydroxy-1 -fényletyI)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N“-Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 11,5 mmol; pozri príklad 4(a) uvedeného vyššie) , (R)-(-)-fenylglycinolu (1,58 g; 11,5 mmol) a 160 ml CH₂CI₂, pričom sa získal výťažok 3,9 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej

-57pevnej látky.

R_f 0,60 (CH₂CI₂: MeOH (80 : 20); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (DMSO-de) δ 1,66 - 1,25 (m, 4H), 1,40 (s, 9H), 2,95 (q; 2H), 3,56 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 4,82 (m, 2H), 5,05 (s, 2H), 6,85 (d, 1H, NH), 7,45 - 7,2 (m, 10H), 8,15 (d, 1H, NH).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade (b) uvedenom vyššie z (R)N^{1 2}-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amidu (3,8 g; 7,82 mmol; z kroku (a) uvedenom vyššie z ), 50 ml MeOH a 100 ml HCI/EtOAc, čím sa izolovalo 2,68 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielych kryštálov.

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1 -fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (d) uvedenom vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochloridu (2,6 g; 6,16 mmol; z kroku (b) uvedenom vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (2,37 g; 7,39 mmol; pozri príklad 1(c) vyššie) a trietylamínu (1,28 ml; 9,24 mmol) v 150 ml CI₂CH_2l pričom sa získal výťažok 2,5 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bieleho, kryštalického materiálu.

¹H NMR (DMSO-de) δ 1,38 (m, 2H), 1,51 (m, 1H), 1,67 (m, 1H), 2,99 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,81 (m, 2H), 5,02 (s, 2H), 5,10 (s, 1H), 7,40 7,05 (m, 15H), 8,2 (d, 1H, NH), 8,45 (d, 1H, NH) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie zo vsádzky (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amidu (2,5 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (200 mg), 100 ml MeOH a 1,0 ml koncentrovanej HCI, pričom sa získal výťažok 1,8 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej peny.

R_f 0,52 (EtOAc : hexány (4:1)) ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1,52 (m, 3H), 1,72 (m, 1H), 2,73 (m, 2H), 3,52 (m,

-582Η), 4,41 (m, 1H), 4,75 (m, 2H), 4,85 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 7,25 (m, 15H), 8,45 (d, 1H, NH), 8,55 (d, 1H, NH) (e) (Κ)-Ν^ω,Ν^ω-όΪ3(θυζ)-Ν^{1 2}-(Οΐίβηγΐ3θβίγΙ)-(Κ)-Ν-(2-ΐΊγάΓθχγ-1-ίβηγΙβΙγΙ)3Γ9Ϊηίη amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (f) uvedenom vyššie z (R)N^{2 *}-(difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)ornitín amid hydrochloridu (0,5 g; 1,12 mmol), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,603 g; 1,68 mmol), DiPEA (0,2 ml) a DMF (15 ml) pričom sa získal výťažok 0,351 g zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)-N“,N“-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amidu (0.250 g; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (200 mg) a, namiesto HOAc, 50 ml MeOH s 1 ml koncentrovanej HCI, pričom sa získal výťažok 69 mg zlúčeniny uvedenej v názve.

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,50 (m, 2H); 1,68 (m, 1H), 1,81 (m, 1H), 3,08 (m, 2H), 3,60 (m, 2H), 4,46 (m, 1H), 4,92 (m, 1 H). 5,11 (s, 1 H). 7,34 (m, 1SH).

Príklad 18 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyletyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyletyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 11 (a) uvedenom vyššie z 0nitrofenylesteru N“-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (4,83 g; 9,91 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie) s (S)-4-methoxy-a-hydroxymetylbenzylamín hydrochloridom (2,22 g; 10,90 mmol) a trietylamínom (1,50 g; 14,87 mmol; namiesto DiPEA) v CH2CI2 (150 ml), reakčný čas 18 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu s použitím vody, 1N HCI a soľanky. Organický roztok sa vysušil, prefiltroval a zahustil, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme žltej pevnej látky (4,0 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

-59Rf 0,4 (CH₂CI₂ : MeOH (90 :10); silikagélové TLC platne) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie zo surového (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyletyl]ornitín amidu (4,0 g; z kroku (a) uvedeného vyššie) , EtOAc (100 ml) a HCI/EtOAc (100 ml), reakčný čas 18 hodín. Hydrochloridová soľ sa vyzrážala pridaním dietyléteru, zachytila sa a vysušila, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (2,8 g).

¹H NMR (CD₃OD) δ 1,45 - 1,57 (m, 2H), 1,78 - 1,92 (m, 2H), 3,10 (t, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,68 - 3,82 (m, 2H), 3,98 (t, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 6,88 (d, 2H), 7,25 (d, 2H), 7,25 - 7,40 (m, 5H).

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (2,32 g, 5,13 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (1,81 g; 5,65 mmol; pozri príklad 1 (c) uvedený vyššie), trietylamínu (0,78 g, 7,70 mmol) a CH₂CI₂ (150 ml), reakčný čas 60 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu, vysušila sa, prefiltrovala a zahustila, čím sa získal surový produkt vo forme nie celkom bielej pevnej látky (3,39 g). Surový produkt sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : MeOH (98 : 2). Zahustenie vhodných frakcií poskytlo čistú zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme bielej pevnej látky (2,85 g).

Rf 0,4 (CH₂CI₂: MeOH (95 : 5); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,35 - 1,84 (m, 4H), 2,97 - 3,15 (m, 2H), 3,52 - 3,72 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,46 (m, 1 H), 4,88 (m, 1H), 5,04 (s, 2H), 5,09 (s, 1H), 6,84 (d, 2H), 7,12-7,45 (m, 17H).

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

-60Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2,85 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (1,40 g), MeOH (200 ml) a koncentrovanej HCI (2 ml) pod atmosférou vodíka počas 6 hodín, čím sa získal surový produkt vo forme pevnej látky (2,6 g). Čistá zlúčenina uvedená v podnázve sa získal kryštalizáciou zo zmesi MeOH : dietyléter, pričom sa získala biela pevná látka (1,58 g).

Teplota topenia 202 až 205 °C

Rf 0,50 (MeOH : hydroxid amónny (30 :1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,52 - 1,95 (m, 4H), 2,86 (t, 2H), 3,62 - 3,75 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,47 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,15 (s, 1H), 6,86, (d, 2H), 7,18 (d, 2H), 7,15-7,43 (m, 10H).

(e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl-(S)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (0,50 g; 0,98 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,38 g; 1,07 mmol) a trietylamínu (0,15 g; 1,46 mmol; namiesto DiPEA) a dimetylformamidu (10 ml), reakčný čas 18 hodín. Zahustenie vo vákuu poskytlo surový produkt, ktorý sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou CH2CI2 : EtOAc (3: 1), Čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (0,66 g).

Rf. 0,2 (CH2CI2 : EtOAc (3:1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,15 - 1,88 (m, 4H), 2,62 (t, 1H), 3,17 - 3,42 (m, 2H), 3,61 - 3,85 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,54 (m, 1H), 4,89 - 5,24 (m, 6H), 6,82 (d, 2H), 7,02 - 7,54 (m, 22H), 8,32 (m, 1H).

(f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyljarginín amidu

-61 (0,58 g; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (0,25 g) a HOAc (50 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 5 hodín. Surový produkt (0,42 g) sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou MeOH : CHCI3: hydroxid amónny (3:6: 1), čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme pevnej látky (0,15 g).

Teplota topenia 80 až 90 °C

Rf 0,4 (systém D) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,42 - 1,93 (m, 4H), 3,01 - 3,18 (m, 2H), 3,66 - 3,72 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,46 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 6,84 (d, 2H), 7,17 (d, 2H), 7,20-7,38 (m, 10H).

Príklad 19 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyi)etyl]omitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 11 (a) uvedenom vyššie z 0nitrofenylesteru N“-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (3,11 g; 6,38 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R)-4-metoxy-a-hydroxymetylbenzylamín hydrochloridu (1,43 g; 7,02 mmol) a trietylamínu (0,97 g; 9,57 mmol; namiesto DiPEA) v CH₂CI₂ (100 ml), reakčný čas 18 hodín. Reakčná zmes sa podrobila hydratačnému spracovaniu s použitím vody, 1N HCI a soľanky, potom sa vysušila, prefiltrovala a zahustila, pričom sa získala žltá pevná látka (3,69 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Rf 0,50 (systém B) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[2-hydroxy-4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie zo surového (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (3,7 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a zmesi HCI/EtOAc (100 ml), reakčný čas 18 hodín. Roztok sa zahustil, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v názve vo forme žltej stlačiteľnej peny (3,3 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín

-62amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R)-N-[2-hydroxy-4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (3,33 g; 7,37 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (2,60 g;

8,10 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), trietylamínu (2,23 g; 22,11 mmol) a CH2CI2 (200 ml), reakčný čas 60 hodín. Výsledný žltý roztok sa podrobil hydratačnému spracovaniu, vysušil sa, prefiltroval a zahustil, čím sa získal surový produkt vo forme nie celkom bielej pevnej látky (4,76 g). Surový produkt sa dvakrát chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : MeOH (98 : 2). Zahustenie frakcií obsahujúcich produkt poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme biele pevnej látky (0,63 g).

Rf 0,4 (CH₂CI₂; MeOH (95 : 5); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,44 - 1,90 (m, 4H), 3,02 - 3,18 (m, 2H), 3,55 - 3,70 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 4,48 (m, 1 H), 4,92 (m, 1H), 5,03 (s, 1H), 5,07 (s, 2H), 6,78 (d, 2H), 7,06-7,45 (m, 17H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,63 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (0,30 g), MeOH (100 ml) a koncentrovanej HCI (1 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 18 hodín, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (0,57 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Teplota topenia 208 až 212 °C

Rf 0,5 (MeOH : hydroxid amónny (30 : 1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,58 - 1,97 (m, 4H), 2,95 (t, 2H), 3,58 - 3,82 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,52 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,06 (s, 1H), 6,80, (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 7,12 7,42 (m, 10H) (e) (R)-N“,N“^,-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfeny)etyl]arginín amid

-63Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1 -(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (0,57 g; 1,11 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,44 g; 1,22 mmol), trietylamínu (0,17 g; 1,67 mmol; namiesto DiPEA) a dimetylformamidu (10 ml), reakčný čas 60 hodín. Zahustenie vo vákuu poskytlo surový produkt, ktorý sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂: EtOAc (3 : 1), potom zmesou CH₂CI₂: EtOAc (1 : 1), čím sa získala čistá zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (0,48 g).

Rf 0,3 (CH₂CI₂ : EtOAc (3:1); silikagélové TLC platne) ¹H NMR (CDCI₃) δ 1,42-1,98 (m, 4H), 2,85 - 3,02 (m, 1H), 3,15 - 3,37 (m, 2H), 3,55 - 3,86 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,56 (m, 1H), 4,82 - 5,23 (m, 6H), 6,78 (d, 2H), 6,92 - 7,54 (m, 22H), 8,36 (m, 1H) (f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfeny)etyl]arginín amidu (0,48 g; z kroku (e) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (0,25 g) a HOAc (50 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 18 hodín. Surový produkt (0,37 g) sa chromatografoval na silikagéle eluovaním so zmesou MeOH : CHCI3 : hydroxid amónny (3:6:1), pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme pevnej látky (0,11 g).

Teplota topenia 80 až 90 °C

Rf 0,4 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,50 - 1,95 (m, 4H), 3,16 (t, 2H); 3,58 - 3,77 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 4,50 (t, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,08 (s, 1H), 6,81 (d, 2H), 7,17 (d, 2H), 7,20 7,35 (m, 10H)

Príklad 20 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid

-64Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedenom vyššie z N“Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (5,34 g; 14,56 mmol), (S)-4-hydroxy-a-metylbenzylamínu (2,0 g; 14,56 mmol), BOP reagentu (9,67 g; 21,9 mmol), trietylamínu (2,5 ml; namiesto DiPEA) v acetonitrile (100 ml; namiesto zmesi acetonitril: CH2CI2 (1 : 1)), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve (6,7g) vo forme bielej peny. ¹H NMR bolo v súlade so štruktúrou.

b) (R)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (5,1 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), etylacetátu (100 ml) a zmesi HCI/EtOAc (100 ml) pričom sa, po izolácii, získal výťažok 3,3 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme žltohnedej pevnej látky.

(c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyIjornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 3(c) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (3,3 g; 7,8 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), kyseliny difenyloctovej (1,82 g, 8,6 mmol), BOP (3,79 g; 8,58 mmol) a trietylamínu (4,0 ml; 1,1 ekvivalentu) v 300 ml acetonitrilu, pričom sa získal výťažok 895 mg zlúčeniny uvedenej v podnázve.

¹H NMR (CD3OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,61 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 3,08 (m,2H), 4,40 (m, 1H), 4,89 (q, 1H), 5,03 (s, 1H), 5,04 (s, 2H), 6,68 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,4 (m, 15H), 8,08 (d, 1H, NH) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (895 mg; z kroku (c) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (300 mg) v metanole (100 ml) s HCl (0,5 ml), pričom sa získal výťažok 65 mg zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Rf 0,66 (EtOAc : MeOH : kone. hydroxid amónny (47 : 47 : 6)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,36 (d, 3H), 1,66 (m, 3H), 1,85 (m, 1H), 2,90 (m, 2H),

-654,41 (m, 1H), 5,07 (s, 1H), 6,68 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,3 (m, 10H), 8, (d, 1H, NH), 8,40 (d, 1H, NH).

(e) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (0,5 g; z kroku (d) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,4 g) a DiPEA (0,2 ml) v DMF (10 ml), pričom sa získal výťažok 0,526 g zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej peny.

Rf0,90 (EtOAc) (f) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(g) uvedenom vyššie z (R)N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (250 mg; z kroku (e) uvedeného vyššie), HOAc (1 Oml) a 10 % Pd/C (0,2 g) spracovaním s metanolom a etylacetátom nasýteným s HC, čím sa získalo 125 mg zlúčeniny uvedenej v názve.

Teplota topenia 146 až 148 °C

Rf 0,18 (EtOAc; MeOH :,koncentrovaný hydroxid amónny (47 : 47 : 6)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,35 (d, 3H), 1,55 (m, 2H), 1,66 (m, 1H), 1,.82 (m, 1 H),

3,11 (m, 2H), 4,41 (q, 1H), 4,90 (q, 1H), 5,07 (s, 1H), 6, 58 (d, 2H), 7,05 (d, 2H)

Príklad 21 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-metoxyfenyletyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedenom vyššie z N“Boc-N⁸-Cbz-(R)-ornitínu (2,5 g; 6,7 mmol), BOP reagentu (3,3 g; 7,4 mmol), HOBT (1,1 g; 7,4 mmol), DiPEA (5,8 ml; 33 mmol) a 100 ml zmesi acetonitril: CH2CI2 (1 :1) a následne (R,S)-4-metoxy-a-metylbenzylamín (1,0 g; 6,7 mmol; v 5 ml acetonitrilu). Po spracovaní sa surový produkt použil bez ďalšieho čistenia. Výťažok surovej zlúčeniny uvedenej v podnázve predstavoval 3,3 g (100 %).

-66’H NMR (CDCI₃) δ 1,38 - 1,72 (m, 5Η), 1,49 + 1,51 (s, 9H), 1,72 - 2,00 (m, 2H), 3,10 - 3,28 + 3,35 - 3,55 (m, 2H), 3,28 + 3,33 (s, 3H), 4,18 - 4,40 (m, 1H), 4,82 -5,25 (m, 3H), 6,68 - 6,80 (m, 1 H), 6,82 - 6,95 (m, 2H), 7,22 - 7,45 (m, 7H) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]omitín amid

Pripravil sa analogicky ku spôsobu opísanému v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyletyl]omitín amidu (3,3 g; 6,7 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), zmesi HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas na odstránenie chrániacich skupín 30 minút, potom s THF (200 ml; namiesto CH₂CI₂), difenylacetylchlorid (1,7 g; 7,4 mmol) a následne s DiPEA (4,7 ml; 27 mmol) v priebehu 5 minút, reakčný čas 1 hodina. Rozpúšťadlo sa odparilo pri zníženom tlaku a zostávajúci zvyšok sa rozpustil v CH₂CI₂ (300 ml) a spracoval sa. Surový materiál sa prečistil, čím sa získal výťažok 2,0 g (51 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme stlačiteľnej peny.

(c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2,0 g; 3,4 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 500 mg), etanolu (150 ml; namiesto metanolu) a koncentrovanej HCI (1 ml), reakčný čas 2 hodiny, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme peny (1,5 g; 87 %). Vzorka sa prekryštalizovala z acetonitrilu.

Teplota topenia 198 až 201 °C (d) (R)-N“,N'-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(f) z (R)-N²-(difenylacetyl)(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (1,08 g; 2,17 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,780 g; 2,17 mmol) a tríetylamínu (0,6 ml; 4,35 mmol) v THF (40 ml), pričom sa získal výťažok 720 mg zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky.

(e) (R)-N²-(Difenyiacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl] arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) z (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-67(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amidu (440 mg; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (100 mg), etanolu (20 ml) a koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej (0,2 ml) pod atmosférou vodíka, reakčný čas 18 hodín, pričom sa získal výťažok 174 mg zlúčeniny uvedenej v názve vo forme bielej pevnej látky.

[a]_D ²⁰ = +21,8° (c=2,0; metanol) teplota topenia = 84 až 88 °C R_f = 0,47 (CH₂CI₂: MeOH (80 : 20)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,62 (d, 3H), 1,62 - 2,20 (m, 3H), 3,42 (m, 2H), 4,05 (s, 3H), 4,48 (m, 1H), 5,20 (q, 1H), 5,38 (s, 0,5H), 5,41 (s, 0,5H), 7,10 (d, 2H), 7,13 (d, 2H), 7,48 (d, 2H), 7,51 (d, 2H), 7,68 až 7,51 (m, 10H)

Príklad 22 (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-metyl-(R)-N-(1 -fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(a) uvedenom vyššie z N“Boc-N⁸-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 13 mmol), BOP reagentu (6,0 g; 13. mmol), HOBT (1,8 g; 13 mmol), DiPEA (7,1 ml; 40 mmol) a zmesi acetonitril: CH₂CI₂ (1 : 1; 100 ml) a následne (R)-(+)-N,a-dimetylbenzylamínu (2,0 ml; 13 mmol), potom sa zmes miešala cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil pomocou chromatografie na silikagéle s EtOAc, čím poskytol 6,0 g (91 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (5,0 g; 10 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (75 ml), potom zmesi HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas na odstránenie chrániacich skupín 2 hodiny, potom sa pridal CH2CI2 (50 ml), difenylacetylchlorid (2,4 g; 10 mmol) a následne pyridín (3,0 ml; 37 mmol; namiesto DiPEA) v priebehu 1 minúty, reakčný čas cez noc, zmes sa zriedila sCH₂CI₂ (100 ml) a spracovala sa. Surový materiál sa prečistil pomocou chromatografie na silikagéle so zmesou EtOAc : hexány (1:1), čím sa získalo 1,6 g (26 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

-68(c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1 -fényletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (1,6 g; 2,8 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot; 100 mg), HOAc (75 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa prečistila pomocou chromatografie na silikagéle s EtOAc, potom so zmesou CHCI3: MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (6:3:1), čím sa získalo 1,2 g (98 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(N“,N“')-bis(Cbz)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (0,50 g; 1,1 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,40 g; 1,1 mmol), DiPEA (0,41 ml; 2,4 mmol) a THF (20 ml; namiesto DMF). Surový produkt sa prečistil pomocou chromatografie na silikagéle s CH2CI2, potom s EtOAc, čím sa získalo 0,62 g (79 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(e) (R)-N2-(Difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(N“,N^<B')-bis(Cbz)-N-metyl-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amidu (0,62 g; 0,89 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HOAc (50 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid, potom sa triturovala s metanolom, čím sa získalo 0,12 g (25 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

Teplota topenia 233 až 235 °C

Rf 0,50 (systém D) [a]_D ²¹=+109,7°(C=0,31, MeOH) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,46 a 1,66 (2d, 3H), 1,50- 1,90 (m, 4H), 2,59 a 2,73 (2s, 3H), 3,16 (m, 2H), 4,88 (m, 1H), 5,03 a 5,10 (2s, 1H), 5,38 a 5,88 (2m, 1H), 7,15 7,37 (m, 10H)

Príklad 23

-69(R)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-( 1 -fenyletyl)arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (a) uvedenom vyššie z N“Boc-N®-Cbz-(R)-ornitínu (5,0 g; 13 mmol), BOP reagentu (6,0 g; 13 mmol), HOBT (1,8 g; 13 mmol), DiPEA (7,1 ml; 40 mmol) a 100 ml zmesi acetonitril: CH₂CI₂ (1:1) a ďalej s použitím (S)-(-)-N,a-dimetylbenzylamínu (2,0 ml; 13 mmol), zmes sa potom miešala cez noc. Po spracovaní sa surový produkt prečistil pomocou chromatografie na silikagéle s EtOAc, čím sa získalo 5,5 g (83 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príkladoch 2(b) a 2(c) uvedených vyššie z (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (5,3 g; 11 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (75 ml), potom zmesi HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas na odstránenie chrániacich skupín 2,5 hodín, potom sa pridal CH₂CI₂ (50 ml), difenylacetylchlorid (2,6 g; 11 mmol) a následne pyridíne (3,0 ml; 37 mmol; namiesto DiPEA) v priebehu 1 minúty, reakčný čas cez noc, zmes sa zriedila s CH₂CI₂ (100 ml) a spracovala sa. Surový materiál sa prečistil pomocou chromatografie na silikagéle so zmesou EtOAc : hexán (1:1), čím sa získalo 1,9 g (30 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (1,9 g; 3,3 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HOAc (75 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa prečistila pomocou chromatografie na silikagéle s EtOAc, potom so zmesou CHCI3 : MeOH : koncentrovaný hydroxid amónny (6:3:1), pričom sa získalo 1,4 g (96 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

(d) (R)-(N“,N“')-bis(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(f) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)ornitín amidu (0,50 g; 1,1 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočoviny (0,40 g; 1,1 mmol),

-70DiPEA (0,41 ml; 2,4 mmol) a THF (20 ml; namiesto DMF). Surový produkt sa prečistil pomocou chromatografie na silikagéle s CH₂CI₂, potom s EtOAc, pričom sa získalo 0,71 g (91 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme pevnej látky.

(e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (g) uvedenom vyššie z (R)(N“,N“')-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amidu (0,70 g; 1,0 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg), HOAc (50 ml), reakčný čas cez noc. Surová acetátová soľ sa konvertovala na hydrochlorid, potom sa triturovala s metanolom, pričom sa získalo 0,15 g (28 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

Teplota topenia 251 až 253 °C

Rf 0,50 (systém D) [a]_D ²¹ =-21,2°(C=0,34; MeOH) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,40 a 1,51 <2d, 3H), 1,52 - 1,92 (m, 4H), 2,70 a 2,72 (2s, 3H), 3,03 - 3,24 (m, 2H), 4,90 (m, 1H), 5,05 a 5,08 (2s, 1H), 5,28 a 5.90 (2m, 1 H}, 7,17-7,39 (m, 10H)

Príklad 24 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cykloproylmetoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-Cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Roztok o-nitrofenyiesteru N“-Boc-N⁸-Cbz-(R)-ornitínu (0,9 g; 1,86 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R,S)-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etylamínu (0,48 g, 1,86 mmol), trietylamínu (0,39 ml, 2,79 mmol) v CH₂CI₂ (50 ml) sa miešal počas 5 hodín pri laboratórnej teplote. Výsledný žltý roztok sa zahustil vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : CH3OH (98 :2). Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili a zahustili vo vákuu, pričom sa získalo 0,67 g (67 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme stlačiteľnej peny.

-71 R_f 0,5 (CH₂CI₂ : CH₃OH (95 : 5)) ¹H NMR (CDCI3) δ 0,28 - 0,38 (m, 2H), 0,58 - 0,68 (m, 2H), 1,26 (m, 1H), 1,34 - 1,88 (m, 16H), 3,14 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,71 a 3,78 (d, 2H), 4,22 (m, 1H), 4,78 -5,27 (m, 5H), 6,68 (m, 1H), 6,79 - 6,87 (m, 2H), 7,21 (d, 2H), 7,26 - 7,41 (m, 5H) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-Cyklopropvlmetoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Roztok (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-cyclopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,67g, 1,30 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v EtOAc sa spracoval so zmesou HCI/EtOAc (10 ml). Po miešaní počas 5 hodín sa reakčná zmes zahustila vo vákuu, pričom sa poskytla 0,62 g (100 %) stlačiteľnej peny.

R_f 0,3 a 0,4 (CHCb: CH₃OH : AcOH (9 :1 : 0,1)) ¹H NMR (CD3OD) δ 0,28 - 0,37 (m, 2H), 0,52 - 0,65 (m, 2H), 1,21 (m, 1H),

1,38 - 1,53 (m, 3H), 1,55 - 1,68 (m, 2H), 1,71 - 1,93 (m, 2H), 3,02 - 3,22 (m, 2H), 3,69 - 3,90 (m, 3H), 4,89 - 5,11 (m, 3H), 6,79 - 6,88 (m, 2H), 7,16 - 7,38 (m, 7H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Roztok 2-nitrofenyldifenylacetátu (0,42 g, 1,30 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-cyklopropvlmetoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,62 g, 1,30 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) a trietylamínu (0,54 ml, 3,90 mmol) vCH₂CI₂ (50 ml) sa miešal pri laboratórnej teplote počas 18 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil vo vákuu a chromatografoval sa na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : EtOAc (5 : 1). Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili a zahustili, pričom sa získalo 0,71 g (86 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Rf.0,5 (CH₂CI₂: EtOAc (3:1))

1H NMR (CDCI3) ô 0,27 - 0,39 (m, 2H), 0,57 - 0,68 (m, 2H), 1,24 (m, 1H), 1,32 - 1,90 (m, 7H), 3,08 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 3,70 a 3,76 (d, 2H), 4,63 (m, 1 H), 4,79 -5,12 (m, 5H), 6,53 (m, 1 H), 6,79 (d, 2H), 6,88 (m, 1H) 7,13 (d, 2H), 7,14 - 7,41

-72(m, 15H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,71 g, 1,12 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) vacetonitrile (40 ml) sa pri teplote 0 °C pridal TMSI (0,21 ml, 1,46 mmol). Výsledný roztok sa miešal počas jednej hodiny za chladenia, potom sa rýchla pridala H2O. Pridal sa EtOAc a roztok NaHCO3. Etylacetátová vrstva sa oddelila, premyla sa s 1 M Na₂S2O₃ (jedenkrát) a so soľankou (dvakrát), vysušila sa nad Na₂SO4 a zahustila vo vákuu. Zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH2CI₂;CH₃OH:NH4OH (88,5 :10 : 1,5). Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili a zahustili vo vákuu a konvertovali sa na hydrochloridovú soľ, čím sa získalo 0,17 g (30 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve.

Rf 0,60 (systém C) ¹H NMR (CD3OD) δ 0,29 - 0,38 (m, 2H), 0,55 - 0,66 (m, 2H), 1,23 (m, 1H), 1,30 - 1,85 (m, 7H), 2,57 a 2,62 (t, 2H), 3,73 - 3,82 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,05 a 5,08 (s, 1H), 6,78 a 6,83 (d, 2H), 7,08-7,37 (m, 12H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,17 g; 0,34 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín hydrochloridu (0,05 g; 0,34 mmol) a trietylamínu (0,07 g; 0,68 mmol) v DMF (5 ml) sa miešal počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Roztok sa zahustil vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním s CHCI₃: CH₃OH : NH₄OH (6:3:1). Frakcie obsahujúce požadovanú zlúčeninu sa spojili a zahustili vo vákuu a potom sa konvertovali na hydrochloridovú soľ, čím poskytli 0,12 g (61 %) zlúčeniny uvedenej v názve vo forme pevnej látky.

Rf 0,5 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 0,32 - 0,38 (m, 2H), 0,57 - 0,66 (m, 2H), 1,24 (m, 1H),

1,38 (d, 3H), 1,41 - 1,89 (m, 4H), 3,05 - 3,18 (m, 2H), 3,78 (d; 2H), 4,41 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,07 a 5,12 (s, 1H), 6,77 a 6,82 (d, 2H), 7,11 - 7,17 (m, 2H), 7,18 -737,37 (m, 10H)

Príklad 25 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl] arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N“-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (3,11 g; 6,37mmol), (R)-4-benzyloxy-ametylbenzylamín hydrochloridu (1,68 g; 6,37 mmol), TEA (1,94 g; 19,10 mmol) a CH2CI2 (200 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve, ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

Rf 0,70 (systém B) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie zo surového (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amidu (6,37 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (200 ml) a zmesi HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas 3 hodiny. Výsledný heterogénny roztok sa zahustil na 100 ml, suspendoval sa v Et₂O a pevné podiely sa zachytili a vysušili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (2,5 g; 75 %).

R_f 0,30 (CHCI₃, CH₃OH, AcOH (9 :1 : 0,1 )) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,38 - 1,58 (m, 2H), 1,47 (d, 3H), 1,72 - 1,90 (m, 2H), 3,08 (t, 2H), 3,87 (t, 1H), 4,88 - 5,12 (m, 5H), 6,95 (d, 2H), 7,17 - 7,43 (m, 12H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-benzylfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (2,5 g; 4,88 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (1,6 g; 4,88 mmol; pozri príklad 1 (c) vyššie), TEA (1,5 g; 14,64 mmol) a CH2CI2 (200 ml) pri laboratórnej teplote, reakčný čas 18 hodín, s následným pridaním ďalšieho 2-nitrofenyldifenylacetátu (0,6 g) a TEA (0,7 g) pod refluxom, reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa zahustil a chromatografoval ma oxide kremičitom so zmesou CH2CI2: EtOAc (5:1),

-74čím sa získala čistá zlúčenina uvedená v podnázve (2,9 g).

Rf0,60 (CH2CI2, EtOAc (3:1)) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,27 - 1,59.(111, 6H), 1,75 (m, 1H), 3,04 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,78 - 5,06 (m, 6H), 6,58 (d, 1H), 6,87 (d, 2H), 6,95 (d, 1H), 7,16 (d, 2H), 7,18-7,43 (m, 20H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amidu (1,0 g; 1,49 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), trimetylsilyljodidu (0,33 g; 1,64 mmol) a CH₃CN (35 ml) pri teplote 0 °C, reakčný čas 2 hodiny. Výsledný heterogénny roztok sa podrobil hydratačnému spracovaniu a chromatografoval sa na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : MeOH : koncentrovaný NH₄OH (88,5: 10: 1,5), pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (0,7 g).

Rf 0,40 (systém C) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,22 -1,43 (m, 2H), 1,36 (d, 3H), 1,62 - 1,83 (m, 2H), 2,50 -2,67 (m, 2H), 4,49 (q, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,97 (t, 1H), 5,04 (s, 2H), 6,88 (d; 2H), 7,09 -7,45 (m, 17H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(e) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,38 g; 0,71 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,10 g; 0,71 mmol), TEA (0,14 g, 1,42 mmol) a DMF (5 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou MeOH: CHCI3: koncentrovaný NH4OH (3 : 6 : 1) a konvertoval sa na hydrochloridovú soľ, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,32 g).

Teplota topenia 148 až 152 °C

Rf 0,50 (systém D) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,41 -1,87 (m, 4H), 3,02 - 3,18 (m, 2H), 4,41

-75(t, 1H), 4,92 (q, 1H), 5,06 (s, 2H), 5,11 (s, 1H), 6,92 (d, 2H), 7,17 (d, 2H), 7,18 - 7,46 (m, 15H)

Príklad 26 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N^a-Boc-N^s-Cbz-(R)-ornitínu (3,0 g; 6,15 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R,S)-4-fenoxy-a-metylbenzylamínu (1,3 g; 6,15 mmol) a CH2CI2 (150 ml), reakčný čas 24 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂: MeOH (98 : 2 potom 95 : 5), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (2,6 g).

R_f 0,60 (CH₂CI₂, MeOH (95 : 5)) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-[1-(4-Fenoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2,6 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a zmesi HCI/EtOAc (50 ml), reakčný čas 22 hodín. Výsledný roztok sa zahustil, čím sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (2,4 g), ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

Rf 0,30 a 0,40 (CHCI₃: MeOH : AcOH (9 :1 : 0,1)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,42 - 1,54 (m, 4H), 1,63 (m, 1H), 1,75 - 1,96 (m, 2H), 3,10 (t, 1 H), 3,20 (t, 1H), 3,87 (m, 1H), 4,87 - 5,12 (m, 3H), 6,92 - 6,98 (m, 4H), 7,10 (m, 1H), 7,22-7,38 (m, 9H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R,S)-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (2,4 g; 4,82 mmol; krok (b) uvedený vyššie), 2-nitrofenyldifenyIacetát (1,5 g; 4,82 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), TEA (0,7 g, 7,23 mmol) a CH2CI2 (250 ml), reakčný čas 18

-76hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH2CI2: EtOAc (5 : 1 potom 3:1), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (2,4 g).

Rf0,50 (CH2CI2: EtOAc (3 :1)) ¹H NMR (CDCb) δ 1,12 - 1,63 (m, 6H), 1,78 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 4,78 - 5,13 (m, 4H), 6,67 (t, 1H), 6,82-7,43 (m, 24H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2.4 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), koncentrovanej HCI (2 ml), MeOH (200 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot., 0,5 g) pod jednou atmosférou vodíka, reakčný čas 4 hodiny. Výsledný roztok sa prefiltroval a zahustil, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (2,1 g), ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

Teplota topenia 190 až 195°C

Rf 0,50 (systém C) ’H NMR (CD3OD) δ 1,35 - 1,45 (m, 3H), 1,54 - 1,95 (m, 4H), 2,82 - 2,97 (m, 2H), 4,44 (m, 1H), 4,93 (m, 1H), 5,08 a 5,15 (s, 1H), 6,78 - 6,98 (m, 4H), 7,02 - 7,41 (m, 15H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(e) uvedenom vyššie z (R)N²-(dÍfenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]omitín amid hydrochloridu (0,50 g; 0,90 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1-H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,13 g; 0,90 mmol), TEA (0,36 g; 3,60 mmol) a DMF (7 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním s MeOH, CHCI₃ a koncentrovaným NH₄OH (3:6:1 ) a konvertoval sa na hydrochloridovú soľ, pričom sa získal zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,35 g).

Teplota topenia 87 až-95 °C

-77Rf 0,50 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,41 (d, 3H), 1,47 -1,90 (m, 4H), 3,08 - 3,19 (m, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,94 (m, 1 H), 5,10 a 5,17 (s, 1H), 6,82 - 6,98 (m, 4H), 7,04 - 7,38 (m, 15H)

Príklad 27 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1 -(4-fenylfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1 -(4-Fenylfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade (b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N“-Boc-N®-Cbz-(R)-ornitínu (3,0 g; 6,15 mmol), (R,S)-4-fenyl-ametylbenzylamínu (1,3 g; 6,77 mmol) a CH₂H₂ (150 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : MeOH (95 : 5), čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (3,4 g).

R_f 0,50 (CH2CI2, MeOH (95 : 5)) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-Fenylfenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]ornitín amidu (3,4 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa zahustil, čím sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (3,2 g), ktorá sa priamo užila v nasledujúcom kroku.

R_f 0,30 a 0,40 (CHCI₃ : MeOH : AcOH (9 :1 : 0,1)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,43 -1,57 (m, 4H), 1,65 (m, 1H), 1,77 -1,98 (m, 2H), 3,11 (m, 1 H), 3,20 (t, 1 H), 3,88 (m, 1H), 4,99 (s, 1H), 5,03 - 5,14 (m, 2H), 7,23 - 7,48 (m, 10H), 7,54-7,62 (m, 4H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (3,2 g; 6,53 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (2,1 g; 6,53 mmol; pozri

-78príklad 1(c) uvedený vyššie), TEA (1,7 g; 16,33 mmol) a CH2CI2 (250 ml), reakčný čas 60 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil, čím sa získala pevná látka. Digerovanie surových pevných podielov s horúcim CH₂CI₂, EtOAc a MeOH poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme pevnej látky (1,2 g). Ďalší materiál sa získal zahustením výsledného filtrátu a následne chromatografiou na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : EtOAc {5 : 1 potom 3:1), čím sa získala ďalšia zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (2,3 g).

RfO,5O (CH₂CI₂, EtOAc (3:1)) ¹H NMR (CDCI3) δ 1,33 - 1,68 (m, 6H), 1,78 (m, 1H), 3,02 - 3,23 (m, 2H), 4,48 (m, 1H), 4,93-5,11 (m, 4H), 7,18-7,49 (m, 24H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]omitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]ornitín amidu (1,2 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), koncentrovanej HCI (1 ml), MeOH (100 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 0,3 g) pod jednou atmosférou vodíka, reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa prefiltroval a zahustil, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (1,0 g), ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

Teplota topenia 205 až 210 °C

Rf 0,50 (systém C) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,44 (d, 3H), 1,58 - 1,97 (m, 4H), 2,84 - 2,98 (m, 2H), 4,48 (m, 1H),4,98 (m,1H), 5,13 a 5,19 (s, 1H), 7,12-7,61 (m, 19H) (e) (R)-N2-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(e) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]ornitin amid hydrochloridu (0,50 g; 0,92 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,13 g; 0,92 mmol), TEA (0,37 g; 3,68 mmol) a DMF (7 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou MeOH : CHCI₃: koncentrovaný . NH4OH (3:6:1) a konvertoval sa na hydrochloridovú soľ, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve

-79vo forme bielej pevnej látky (0,22 g).

Teplota topenia 100 až 105°C

Rf 0,50 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,45 (d, 3H), 1,46 - 1,93 (m, 4H), 3,04 - 3,20 (m, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,09 a 5,14 (s, 1H), 7,12-7,61 (m, 19H)

Príklad 28 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(2-naftyletyll]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedeného vyššie z 0nitrofenylesteru N“-Boc-N⁵-Cbz-(R)-ornitínu (3,0 g; 6,15 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R,S)-1-(2-naftyl)etylamínu (1,2 g; 6,77 mmol) a CH2CI2 (150 ml), reakčný Čas 18 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH2CI2: MeOH (95:5), pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme oleja (4,1 g).

R_f 0,40 (CH₂CI₂ : MeOH (95 : 5)) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(2-Naftyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (b) uvedenom vyššie z (R)N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(2-naftyletyll]ornitín amidu (4,1 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (100 ml) a HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa zahustil, čím sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (3,6 g), ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

R_f 0,30 a 0,40 (CHCI₃: MeOH : AcOH (9 :1 : 0,1)) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie zo surového (R)-N⁵-(Cbz)-(R,S)-N-[1-(2-Naftyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (3,6 g; 7,81 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (2,5 g; 7,81 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), TEA (2,0 g, 19,53 mmol) a CH₂CI₂ (250 ml), reakčný čas 60 hodín. Výsledný žltý roztok sa zahustil a chromatografoval

-80na oxide kremičitom eluovaním s CH₂CI₂ a EtOAc (5 : 1 potom 3:1), pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme pevnej látky (3,8 g).

Rf0,50 (CH₂CI₂: EtOAc (3:1)) ¹H NMR (CDCI³) δ 1,32 - 1,92 (m, 4H), 1,49 (d, 3H), 3,06 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 4,62 - 5,22 (m, 5H), 6,59 (m, 1H), 7,04 - 7,37 (m, 16H), 7,38 - 7,49 (m, 2H), 7,54 - 7,83 (m, 4H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1 (e) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]ornitín amidu (3,8 g; z kroku (c) uvedeného vyššie), koncentrovanej HCI (2 ml), MeOH (200 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 0,8 g) pod jednou atmosférou vodíka, reakčná čas 18 hodín. Výsledný roztok sa prefiltroval a zahustil, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (3,3 g), ktorá sa použila bez ďalšieho čistenia.

Teplota topenia 65 až 75 °C

Rf 0,50 (systém C) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,47 - 1,53 (m, 3H), 1,54 - 1,96 (m, 4H), 2,82 - 2,97 (m, 2H); 4,48 (m, 1H), 5,03 - 5,18 (m, 2H), 7,08 - 7,49 (m, 13H), 7,68 - 7,85 (m, 4H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(e) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (0,50 g; 0,97 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,14 g, 0,97 mmol), TEA (0,39 g; 3,88 mmol) a DMF (7 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou MeOH : CHCI₃: koncentrovaný NH₄OH (3 : 6 : 1) a konvertoval sa na hydrochloridovú soľ, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,31 g).

Teplota topenia 85 až 95 °C

Rf 0,50 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,32 - 1,93 (m, 7H), 2,98 - 3,17 (m, 2H), 4,43 (m, 1H),

-81 5,04 - 5,18 (m, 2Η), 7,07 - 7,49 (m, 13), 7,68 - 7,84 (m, 4H)

Príklad 29 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(1-Naftyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 4(b) uvedenom vyššie z onitrofenylesteru N^a-Boc-N⁸-Cbz-(R)-ornitínu (5,2 g; 10,6 mmol; pozri príklad 4(a) uvedený vyššie), (R)-1-(1-naftyl)etylamín hydrochloridu (2,0 g; 11,7 mmol) a CH₂CI₂ (50 ml), reakčný čas 48 hodín. Výsledný žltý. roztok sa zahustil, pričom sa získala surová zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (7,5 g), ktorá sa priamo použila v nasledujúcom kroku.

R_f 0,40 (CH₂CI₂ : MeOH (95 : 5)) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(1-Naftyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(b) uvedenom vyššie zo surového (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]omitín amidu (7,5 g; z kroku (a) uvedeného vyššie), EtOAc (150 ml) a HCI/EtOAc (75 ml), reakčný čas 6 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa zriedil s Et₂O a pevné podiely sa zachytili a vysušili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (4,8 g).

Rf 0,40 (CHCI₃ : MeOH : AcOH (9 :1 : 0,1)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,36 - 1,52 (m, 2H), 1,58 - 1,90 (m, 5H), 2,92 - 3,10 (m, 2H), 3,91 (m, 1H), 4,74 - 5,02 (m, 3H), 5,88 (m, 1H), 7,18 - 7,37 (m, 4H), 7,38 - 7,61 (m, 5H), 7,76 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 8,08 (d, 1H) (c) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 1(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (4,8 g; 10,46 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 2-nitrofenyldifenylacetátu (3,4 g; 10,46 mmol; pozri príklad 1(c) uvedený vyššie), TEA (2,7 g; 26,15 mmol) a CH₂CI₂ (200 ml), reakčný čas 60 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa prefiltroval Filtračný koláč sa premyl s Et₂O a vysušil sa, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky

-82(3.4 g).

Rf0,70 (CH₂CI₂: EtOAc (3 :1)) ¹H NMR (CDCb) δ 1,22 - 1,78 (m, 7H), 2,96 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 4,52 4,97 (m, 4H), 5,82 (m, 1H), 6,59 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 7,08 - 7,52 (m, 19H), 7,69 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,98 (d, 1H) (d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]ornitín amid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(d) uvedenom vyššie z (R)N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]ornitín amidu (1,0 g; 1,63 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), trimetylsilyljodidu (0,36 g, 1,79 mmol) a CH₃CN (60 ml) pri teplote 0 °C, reakčný čas 3,5 hodín. Výsledný heterogénny roztok sa podrobil hydratačnému spracovaniu a chromatografoval sa na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CH₂CI₂ : MeOH : koncentrovaný NH4OH (88,5:10:1,5), pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme pevnej látky (0,5 g).

Rf 0,50 (systém C) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,25 - 1,43 (m, 2H), 1,52 - 1,81 (m, 2H), 1,58 {d, 3H), 2,47 (t, 2H), 4,42 (m, 1H), 5,08 (s, 1H), 5,78 (q, 1H), 7,17 - 7,33 (m, 10H), 7,40 7,54 (m, 4H), 7,78 (d, 1H), 7,88 (d, 1H), 8,06 (d, 1H) (e) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Pripravil sa podľa spôsobu opísaného v príklade 6(e) uvedenom vyššie z (R)N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]ornitín amidu (0,42 g; 0,88 mmol; krok (d) uvedený vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín monohydrochloridu (0,14 g; 0,88 mmol), TEA (0,18 g; 1,76 mmol) a DMF (8 ml), reakčný čas 18 hodín. Výsledný roztok sa zahustil a chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou MeOH: CHCI3: koncentrovaný NH₄OH (3:6:1), pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,38 g).

Teplota topenia 128 až 135 °C

Rf 0,50 (systém D) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,37 - 1,85 (m, 4H), 1,58 (d, 3H), 2,94 - 3,14 (m, 2H),

-834,43 (t, 1H), 5,11 (s, 1H), 5,81 (q, 1H), 7,15 - 7,33 (m, 10H), 7,38 - 7,56 (m, 4H), 7,78 (d,1 H), 7,88 (d, 1H), 8,06 (d, 1H)

Príklad 30 (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid acetát (a) (R)-N²-(Boc)-(R)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid

Do roztoku (R)-N²-(Boc)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (66,26 g; -139 mmol; pozri príklad 4(b) uvedený vyššie) v metanole (400 ml) sa pridal 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 3,53 g). Po miešaní počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka sa reakčná zmes prefiltrovala cez celit, aby sa odstránil katalyzátor a filtrát sa zahustil pri zníženom tlaku, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej peny (43,2 g, 123 mmol).

Rf 0,2 (systém B) (b) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N2-(Boc)-(R)-N-[1 -(4-Hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Do roztoku (R)-N²-(Boc)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (11,47 g; 0,33 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v DMF (50 ml) sa pridala N,N'-bis(Cbz)-Smetylizotiomočovina (11,8 g; 0,33 mmol). Roztok sa miešal cez noc pri laboratórnej teplote a následne sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Výsledný olej sa chromatografoval na stĺpci silikagélu (7,5 cm x 12,5 cm) eluovaním najskôr s CH2CI2 (800 ml), aby sa odstránili nečistoty s vyššou hodnotou Rf. Potom sa ako elučné činidlo použil EtOAc (600 ml), na eluovanie zlúčeniny uvedenej v podnázve, vo forme bielej peny (14,67 g).

Rf 0,45 (EtOAc ; hexány (1 ; 1)) (c) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N2-(Boc)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (11,2 g; 16,4 mmol, z kroku (b) uvedeného vyššie) v EtOAc (300 ml) sa spracoval s HCI/EtOAc (300 ml) a miešal sa cez noc pri laboratórnej teplote. Produkt sa vyzrážal vo forme bieleho zvyšku, z ktorého sa rozpúšťadlá oddekantovali. Ku zvyšku sa pridal metanol (100 ml) a potom dietyléter (50 ml). Táto zmes sa

-84suspendovala a potom sa zahustila pri zníženom tlaku, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme stlačiteľnej peny (10,2 g; 100 %).

R_f 0,89 (EtOAc, CH₃OH, kone. NH₄OH (47 :47 : 6)) (d) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-Metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Hydroxyfenyl)etyl]arginín amid x hydrochlorid (0,5 g; 0,848 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) sa spracoval s (R,S)-2-(4-metoxyfenyl)fenylacetylchloridom (0,933 mmol; 1,1 ekvivalentu) v EtOAc (25 ml) a nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu (25 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 1,5 hodín pri laboratórnej teplote. Organická vrstva sa oddelila a premyla sa s roztokom KHSO₄ (25 ml) a soľankou (50 ml). Organické podiely sa vysušili s Na₂SO₄ a zahustili sa, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej peny (650 mg).

Rf 0,65 (EtOAc: hexány (1:1)) (e) (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid acetát

Do roztoku (R)-N“,N^<e'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N[1-(4-hydroxy-fenyl)etyl]arginín amidu (700 mg; 0,99 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie) v AcOH (50 ml) sa pridalo 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka a potom sa prefiltrovala cez celit, aby sa odstránil katalyzátor. Filtrát sa zahustil vo vákuu. Zlúčenina uvedená v názve sa izolovala vo forme bielej pevnej látky (560 mg, 0,97 mmol) po rozomletí vEtOAc:Et₂O (100 ml; 3: 1).

Rf 0,52 (EtOAc : CH₃OH : kone. NH₄OH (47 : 47 : 6))

Teplota topenia 136 až 142 °C ¹H NMR (CD3OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,41 - 1,89 (m, 4H), 1,90 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 4,39 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,05 (s, 1H), 6,69 (d, 2H), 6,82 (m, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,18-7,37 (m, 7H)

Príklad 31

-85(R)-N²-[(R,S)-2-(4-Metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid acetát (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-Metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid

Dvojfázový roztok (R)-N⁵-(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrochloridu (371 mg ; 0,880 mmol; z príkladu 1(b) uvedeného vyššie) v EtOAc (10 ml) a nasýtený roztok hydrogénuhličitanu (10 ml) sa spracovali s (R,S)-2-(4metylfenyl)fenylacetylchloridom (0,880 mmol; 1,0 ekvivalentu.) a zmes sa miešala počas 2 hodín pri laboratórnej teplote. Organické podiely sa oddelili a premyli s roztokom KHSO4 a soľankou. Organická vrstva sa vysušila s Na₂SO₄ a zahustila sa. Zvyšok sa kryštalizoval z horúceho etylacetátu, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (163 mg).

Rf0,48 (EtOAc : hexány (1 :1)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,33 (d, 3H), 1,41 - 1,81 (m, 4H), 2,25 (s, 3H), 3,01 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,05 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 6,9 - 7,37 (m, 12H) (b) (R)-N2-[(R,S)-2-(4-Metylfenyl)fenylacetyl-(R)-N-[1 -(4-hydroxyfeny)etyl]ornitín amid hydrochlorid

Pripravil sa podobným spôsobom ako v príklade 1(e) uvedenom vyššie. Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyljornitín amidu (160 mg; 0,262 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v metanole (100 ml) sa pridala 2 N HCI (5 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot., 100 mg). Reakčná zmes sa miešala pod jednou atmosférou vodíka počas 18 hodín. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez celit a filtrát sa zahustil, čím sa získala zlúčenina uvedená X v podnázve vo forme bielej peny (120 mg; 0,262 mmol).

Rf 0,20 (systém B) (c) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-Metylfenyl)feny(acetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Pripravil sa podobným spôsobom ako v príklade 1(f) uvedenom vyššie. Roztok (R)-N2-[(R,S)-2-(4-metylfenyl)fenylacetyl-(R)-N-[1-(4-hydroxyfeny)etyljornitín amid

-86hydrochloridu (120 mg; 0,262 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) v DMF (15 ml) sa spracoval s N,N'-bis(Cbz)-S-metylizotiomočovinou (0,120 g; 0,335 mmol) a DiPEA (2 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlá sa odstránili pri zníženom tlaku a zostávajúci zvyšok sa chromatografoval na silikagéle. Eluovanim najskôr s CH2CI2 a potom s EtOAc poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme bielej peny (160 mg).

R_f 0,65 (EtOAc: hexány (1:1)) (d) (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid acetát

Do roztoku (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (122 mg; 0,183 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie) v AcOH (50 ml) sa pridalo 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka, reakčná zmes sa prefiltrovala cez celit a filtrát sa zahustil, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej peny (101 mg).

Rf 0,50 (EtOAc: CH₃OH : kone. NH₄OH (47 : 47 ; 6))

Teplota topenia 110 až 116 ’C ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,33 (d, 3H), 1,41 - 1,89 (m, 4H), 1,90 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (s, 1H), 6,69 (d, 2H), 6,9 - 7,37 (m, 11 H}

Príklad 32 (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-Chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-(R)-N-[1-(4-Hydroxyfenyl)etyl]arginín amid x hydrochlorid (0,5 g; 0,848 mmol; pozri príklad 30(c) uvedený vyššie) sa spracoval s (R,S)-2-(4chlórfenyl)fenylacetylchloridom (1,27 mmol; 1,5 ekvivalentu) v etylacetáte (25 ml) a nasýtenom roztoku hydrogenuhličitanu (25 ml). Reakčná zmes sa miešala počas

-871,5 hodín pri laboratórnej teplote. Organická vrstva sa oddelila a premyla s KHSO₄ (25 ml) a soľankou (50 ml). Organické podiely sa potom vysušili s Na₂SO₄ a zahustili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej peny (674 mg; 100 %).

Rf 0,80 (systém B) (b) (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Do roztoku (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (670 mg; 0,84 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v CH3OH (50 ml) sa pridala 2 N HCl (1,0 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka a potom sa prefiltrovala cez celit, čím sa odstránil katalyzátor, a filtrát sa zahustil vo vákuu. Zlúčenina uvedená v názve sa izolovala vo forme nie celkom bielej pevnej látky (400 ~g, 0,72 mmol) po rozomletí v EtOAc: Et₂O (100 ml; 3:1).

R_f 0,51 (EtOAc, CH3OH, kone. NH₄OH (47 : 47 : 6)

Teplota topenia 120 až 125 °C ¹H NMR (CD3OD) δ 1,33 (d, 3H), 1,41 -1,89 (m, 4H), 3,08 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,90 (m, 1H), 5,08 (s, ,1 H), 6,70 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,1 -7,4 (m, 9H)

Príklad 33 (R)-N²-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-(4,4^,-Dichlórdifenylacetyl)-(R)-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Do bifázového roztoku (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochloridu (1,26 g; 2,1 mmol; z príkladu 30(c) uvedeného vyššie) v EtOAc a nasýtenom roztoku NaHCO₃ sa pridal 4,4'-dichIórdifenylacetylchlorid. Reakčná zmes sa miešala počas 3,5 hodín pri laboratórnej teplote. Organické podiely sa oddelili, premyli s roztokom KHSO₄ (100 ml) a soľankou (150 ml), vysušili

-88s Na₂SO₄, prefiltrovali a zahustili, pričom sa získal zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej peny (920 mg; 1,15 mmol).

Rf 0,80 (systém B) (b) (R)-N²-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Do roztoku (R)-N“_lN“'-bis(Cbz)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R)-[1 -(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (800 mg; 1,00 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v CH₃OH (40 ml) sa pridala 2 N HCI (1 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 100 mg). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez celit a filtrát sa zahustil, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (436 mg; 0,735 mmol) po rozomletí v EtOAc:Et₂O (100 ml; 3:1).

R_f 0,22 (EtOAc: CH₃OH : kone. NH₄OH (47 : 47 : 6))

Teplota topenia 141 až 146 °C ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,32 (d, 3H), 1,41 - 1,89 (m, 4H), 3,08 (m, 2H), 4,35 (m, 1H), 4,90 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 7,1 (d, 2H), 7,15-7,4 (m, 8H).

Prikiad 34 (R)-N^z-[(R,S)-2-(4-Hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R₁S)-2-(4-Hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Do roztoku (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochloridu (0,821 g; 1,39 mmol; pozri príklad 30(c) uvedený vyššie) v THF (40 ml) sa pridala kyselina (R,S)-2-(4-hydroxyfenyl)fenyloctová (0,188 g; 1,39 mmol), BOP (0,62 g; 1.39 mmol), HOBT (0,188 g; 1,39 mmol) a DiPEA (0,48 ml; 2,78 mmol). Reakčná zmes sa miešala cez noc pri laboratórnej teplote, potom sa THF odstránil vo vákuu. Zvyšok sa vytrepal do etylacetátu (100 ml) a premyl sa s roztokom KHSO₄ (100 ml) a soľankou (150 ml). Organické podiely sa vysušili s Na₂SO₄, prefiltrovali a

-89zahustili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej peny (480 mg; 0,566 mmol).

R_f 0,60 (EtOAc: hexány (1 :1)) (b) (R)-N²-[(R,S)-2-(4-Hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Do roztoku (R)-N“,N“'-bis(Cbz)-N²-[(R,S)-2-(4-hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N[4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (480 mg; 0,566 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v metanole (50 ml) sa pridala koncentrovaná HCI (5 kvapiek) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 40 mg). Reakčná zmes sa miešala počas 20 hodín pod jednou atmosférou vodíka. Reakčná zmes sa potom prefiltrovala cez celit a filtrát sa zahustil, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme nie celkom bielej pevnej látky (305, mg; 0,565 mmol) po rozomletí v EtOAc: Et20 (70 ml; 3:1).

Rf 0,35 (EtOAc; CH₃OH ; kone. NH₄OH <6:3:1))

Teplota topenia 129 až 136 °C ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,34 (d, 3H), 1,41 - 1,85 (m, 4H), 3,08 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 6,71 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,15-7,4 (m, 9H)

Príklad 35 (R)-N“-(Etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Benzoylaminotiokarbonyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]omitín amid

Do roztoku (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]ornitín amidu (2,0 g; 4,35 mmol; pozri príklad 4(e) uvedený vyššie) VCH2CI2 (50 ml) sa pridal benzoylizotiokyanát (0,59 ml; 4,35 mmol). Reakčná zmes sa miešala počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v EtOAc. Vyzrážaný produkt, vytvorený pridaním Et20 ku roztoku EtOAc, sa zachytil a vysušil, pričom sa získalo 2,25 g (83 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej pevnej látky. Výsledný materiál sa použil bez ďalšej charakterizácie.

Rf = 0,80 (systém B)

-90(b) (R)-N⁵-(Aminotiokarbonyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (R)-N⁵-(Benzoylaminotiokarbonyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyljornitín amid (2,25 g; 3,6 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie), metanol (250 ml,), voda (250 ml) a K₂CO₃ (1,49 g; 10,8 mmol) sa spojili a miešali počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa potom rozdelila medzi EtOAc (250 ml) a soľanku (250 ml). Etylacetátová vrstva sa oddelila a premyla so soľankou, vysušila nad Na₂SO₄ a zahustila vo vákuu, čím sa získalo 1,86 g (99 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve vo forme bielej peny.

Rf 0,55 (systém B) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,38 (d, 3H), 1,47 (m, 2H), 1,52 (m, 1H), 1,77 (m, 1H), 3,4 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 4,42 (m, 1H), 4,90 (q, 1H), 5,07 (s, 1H), 6,85 (d, 2H), 7,18 (d, 2H), 7,19-7,4 (m, 10H) (c) (R)-N⁵-[Metyltio(iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrojodid

Roztok (R)-N⁵-(aminotiokarbonyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyljornitín amidu .(1,46g; 2,81 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) a jódmetánu (0,21 ml; 3,38 mmol) v CH₂CI₂ (40 ml) a CH₃OH (40 ml) sa miešal počas 18 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v minimálnom množstve CH₃OH. Ku tomuto roztoku sa pridal EtOAc na iniciáciu kryštalizácie. Zachytilo sa 1,38 g (75 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve, ktorá sa použila v nasledujúcom kroku bez ďalšej charakterizácie.

Rf 0,15 (systém B) (d) (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[Metyltio(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (R)-N⁵-[Metyltio(iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid hydrojodid (1,38 g; 2,09 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), CH₂CI₂ (100 ml), Cbz-CI (0,75 ml, 5,22 mmol), voda (100 ml) a K₂CO₃ (1,16 g; 8,36 mmol) sa spojili a miešali počas 18 hodín pri laboratórnej teplote. Organická vrstva sa oddelila

-91 a premyla sa s roztokom KHSO₄ (dvakrát), roztokom NaHCO₃ (dvakrát) a so soľankou (dvakrát), vysušila sa nad Na₂SO₄ a zahustila vo vákuu. Zvyšok sa chromatografoval na kolóne oxidu kremičitého eluovaním so zmesou hexány: EtOAc (3:1). Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili a zahustili vo vákuu, čím sa získalo 0,65 g (39 %) zlúčeniny uvedenej v podnázve. Materiál sa použil bez ďalšej charakterizácie.

R_f 0,85 (CH₂CI₂ : CH₃OH (9:1)) (e) (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[Etylamino(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4metoxyfenyl)etyl]ornitín amid

Roztok (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[metyltio(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1(4-metoxy-fenyl)etyl]ornitín amidu (0,5 g; 0,63 mmol; z kroku (d) uvedeného vyššie) a etylamínu (70 % hmôt. vo vode; 0,.08 ml; 0,94 mmol) v DMF ( 10 ml) sa miešal počas jednej hodiny pri laboratórnej teplote. DMF sa odstránil vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v EtOAc. Etylacetátový roztok sa premyl s roztokom KHSO₄, potom s 0,5 N roztokom NaOH a napokon soľankou, vysušil sa nad Na₂SO₄ a zahustil vo vákuu, čím sa získalo 0,33 g zlúčeniny uvedenej v podnázve. Tento materiál sa použil priamo v nasledujúcom kroku.

(f) (R)-N“-(Etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[etylamino(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)N-[1-(4-metoxy-fenyl)etyl]ornitín amidu (0,21 g; 0,30 mmol; z kroku (e) uvedeného vyššie) VCH3OH (30 ml)sa pridala koncentrovaná HCI (2 kvapky) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 0,050 g). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka pri laboratórnej teplote a prefiltrovala sa cez celít. Filtrát sa zahustil vo vákuu, pričom sa získalo 0,15 g (90 %) zlúčeniny uvedenej v názve.

R_f 0,52 (EtOAc: CH₃OH : NH₄OH (47 :47 : 6)) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,17 (t, 3H), 1,38 (d, 2H), 1,50 (m, 2H), 1,59 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 3,11 (m, 2H),.3,17,(q, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,40 (m, H), 4,85 (q, 1H), 5,13 (s, 1H), 6,81 (d, 2H), 7,19 (d, 2H), 7,22-7,38 (m, 10H)

-92Príklad 36 (R)-N“-(Benzyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[Benzylamino(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4metoxyfenyl)etyl]omitín amid

Roztok (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[metyltio(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amid (0,25 g, 0,312 mmol; pozri príklad 35(d) uvedený vyššie) a benzylamín (0,05 ml; 0,476 mmol) v DMF (5 ml) sa miešal cez noc pri laboratórnej teplote. DMF sa odstránil vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v EtOAc. Etylacetátový roztok sa premyl s roztokom KHSO₄, s 0,5 N roztokom NaOH a soľankou, vysušil sa nad Na2SO₄ a zahustil vo vákuu, pričom sa získalo 0,25 g zlúčeniny uvedenej v podnázve. Tento materiál sa použil priamo v nasledujúcom kroku.

Rf0,74(EtOAc: hexány (1 :1)) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,35 (d, 3H), 1,45 - 1,79 (m, 4H), 3,42 (m, 2H), 3,64 (m, 3H), 4,29 (s, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 5,01 (s, 4H), 5,08 (s, 1H), 6,79 (d, 2H), 7,05 (d, 2H), 7,15-7,4 (m, 27H) (b) (R)-N“-(Benzyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N⁵-[benzylamino(Cbz-iminometyl)]-N²-(difenylacetyl)(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]ornitín amidu (0,248 g, 0,288 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v CH₃OH (50 ml) sa pridala koncentrovaná HCI (2 kvapky) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 0,080 g). Reakčná zmes sa miešala cez noc pod jednou atmosférou vodíka pri laboratórnej teplote, prefiltrovala sa cez celit a filtrát sa zahustil vo vákuu, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve (0,168 g, 98 %).

R_f 0,23 (EtOAc : CH₃OH : kone. NH₄OH (47 :47 : 6))

Teplota topenia 126 až 130 °C ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,32 (d, 3H), 1,41 -1,89 (m, 4H), 3,11 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,31 (s, 2H), 4,35 (m, 1H), 4,90 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 6,81 (d, 2H), 7,15 - 7,4 (m, 17H)

-93Príklad 37 (R)-N“-(1-(4-Hydroxyfenyl)etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid

Kyselina chlorovodíková (1 ml) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.;1,1 g) sa pridali roztoku (R)-N“,N'-bis(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amidu (6,6 g; 8,7 mmol; pozri príklad 4(f) uvedený vyššie) v metanole. Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pod jednou atmosférou vodíka, prefiltrovala sa cez celit a filtrát sa zahustil, pričom sa získala nie celkom biela pena. Tento materiál sa naniesol na kolónu oxidu kremičitého (5 cm x 20 cm) a eluoval sa so zmesou CHCI3: CH3OH: kone. NH4OH (6:3:1). Frakcie (každá 5 ml) sa odobrali a analyzovali sa pomocou HPLC. Frakcie obsahujúce zlúčeninu uvedenú v názve sa spojili a zahustili, čím sa získala biela pena (12 mg). Metóda HPLC použitá vyššie sa uskutočnila na kolóne Microsorb MV Cyano (25 cm x 4,6 mm) eluovaním so zmesou voda : CH₃CN : TFA (65 : 35 : 0,1) pri rýchlosti prietoku 1 ml/min., pri monitorovaní eluenta pri 254 nm. Zistilo sa, že zlúčenina uvedená v názve vykazuje retenčný čas 9,16 minút.

Rf 0,53 (systém D)

Teplota topenia 128 až 135 °C FAB MS m/z = 608 ¹H NMR (CD3OD) δ 1,35 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 1,51 (m, 2H), 1,60 (m, 1H), 1,72 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,90 (m, 1H), 5,12 (s, 1 H), 6,71 (d, 2H), 6,78 (d, 2H), 7,08 (d, 2H), 7,12 (d, 2H), 7,2 - 7,4 (m, 18H)

Príklad 38 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)ornitín

N NaOH (75 ml) sa za miešania pridal k suspenzii (R)-N5-(Cbz)ornitín hydrochloridu (7,5 g; 25 mmol) v THF (114 ml). Keď sa východiskový materiál rozpustil, pridal sa difenylacetylchlorid (6,7 g; 26,3 mmol). Reakčná zmes sa miešala

-94počas 3 hodín pri laboratórnej teplote, potom sa okyslila s chladnou 1 N HCI a extrahovala sa s EtOAc (3 x 75 ml). Etylacetátový extrakt sa premyl so soľankou, vysušil sa s Na₂SO₄ a zahustil, čím sa získal surový produkt. Prečistenie pomocou okamžitej chromatografie na oxide kremičitom eluovaním so zmesou EtOAc : hexány (1:1) poskytlo zlúčeninu uvedenú v podnázve (10,5 g; 91 %).

Rf. 0,22 (EtOAc: hexány (1 :1)) ’H NMR (CD₃OD) δ 1,53 (m, 2H), 1,71 (m, 1H), 1,79 (m, 1H), 3,09 (t, 2H), 4,40 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,09 (s, 1H), 7,12-7,45 (m, 15H).

(b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amid (R,S)-1-[4-(Aminokarbonylmetyl)fenyl]etylamín (0,72 g; 4,04 mmol), BOP reagent (1,79 g; 4,04 mmol), HOBT (0,55 g; 4,04 mmol) a DiPEA (1,4 ml; 8,08 mmol) sa pridali Do roztoku (R)-N²-(difenylacetyl)-N⁵-(Cbz)-ornitínu (1,86 g; 4,04 mmol, z kroku (a) uvedeného vyššie) v THF (200 ml). Reakčná zmes sa miešala cez noc pri laboratórnej teplote a potom sa zahustila vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v EtOAc (100 ml) a premyl sa s roztokom KHSO₄ (100 ml), 0,5 N NaOH (100 ml) a soľankou (100 ml). Organické podiely sa oddelili, vysušili s Na₂SO₄ a zahustili. Výsledný surový produkt sa kryštalizoval z EtOAc, pričom sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej kryštalickej pevnej látky (0,560 g; 0,90 mmol; 22 %).

Rf 0.69 (systém B) (c) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R_lS)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amid acetát

Kyselina octová (3,2 ml; 56,6 mmol) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 70 mg) sa za miešania pridala Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amidu (0,56 g; 0,90 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) v metanole (20 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 4 hodín pod jednou atmosférou vodíka, prefiltrovala sa cez celit, čím sa odstránil katalyzátor a filtrát sa zahustil, pričom sa získal zlúčenina uvedená v podnázve vo forme bielej pevnej látky (0,48 g; 0,84 mmol; 39 %).

Rf 0,10 (systém B)

-95(d) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amid acetátu (0,48 g; 0,88 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1karboxamidín x HCI (0,14 g; 0,97 mmol) a trietylamín (0,50 ml; 3,52 mmol) v DMF (15 ml) sa miešal počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CHCI3: metanol: koncentrovaný NH₄OH (6:3:1). Frakcie obsahujúce požadovanú zlúčeninu sa spojili a zahustili, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,34 g; 0,60 mmol; 68 %).'

Rf 0,36 (systém D) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,39 (m, 3H), 1,55 - 1,74 (m, 4H), 3,05 (m, 1H), 3,11 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 4,42 (q, 1H), 5,01 (s, 0,5H), 5,11 (s, 0,5), 7,15-7,45 (m, 14H)

Príklad 39 (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonyiaminometyl)fenyl)etyljornitín amid (R,S)-1-[4-(Aminokarbonylaminometyl)fenyl]etylamín (0,73 g; 3,77 mmol), BOP reagent (1,67 g; 3,77 mmol), HOBT (0,51 g; 3,77 mmol), DiPEA (1,3 ml; 67,54 mmol) a DMF (15 ml) sa pridali Do roztoku (R)-N²-(difenylacetyl)-N⁵-(Cbz)-ornitínu (1,74 g; 3,77 mmol; pozri príklad 38(a) uvedený vyššie) v THF (200 ml). Reakčná zmes sa miešala cez noc pri laboratórnej teplote a potom sa zahustila vákuu. Zvyšok sa rozpustil v EtOAc (100 ml) a premyl sa s roztokom KHSO₄ (100 ml), 0,5 N NaOH (100 ml) a soľankou (100 ml). Organické podiely sa oddelili, vysušili s Na2SO4 a zahustili, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme svetložltej pevnej látky (1,24 g; 1,95 mmol; 52 %).

Rf 0,59 (systém B) ¹H NMR {CD3OD) δ 1,45 (dd, 3H), 1,57 (m, 2H), 1,71 (m, 2H), 2,64 5 (m, 1 H),

-963,08 (m, 2H), 4,25 (s, 2H), 4,90 (q, 1 H), 5,111 (s, 1H), 5,45 (s, 2H), 7,0 - 7,4 (m, 19H) (b) (R)-N²-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]ornitín amid hydrochlorid

TMSI (0,36 ml; 2,54 mmol) sa za miešania pridal Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N²(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]ornitín amidu (1,24 g; 1,95 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v CH³CN (20 ml) a CH₂CI₂ (20 ml). Výsledný roztok sa miešal pri laboratórnej teplote počas 1,5 hodín a rýchle zriedil s 1 N HCI (10 ml). Zlúčenina uvedená v podnázve vykryštalizovala z roztoku vo forme bielej pevnej látky (0,52 g; 1,04 mmol; 53 %).

Rf 0,10 (systém B) (c) (R)-N₂-(Difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyljornitín amid hydrochloridu (0,52 g; 1,04 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidínu x HCI (0,152 g; 1,04 mmol) a trietylamínu (0,58 ml; 4,15 mmol) v DMF (8 ml) sa miešal počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CHCI₃ : CH₃OH : koncentrovaný NH4OH (6:3:1). Frakcie obsahujúce požadovanú zlúčeninu sa spojili a zahustili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,17 g; 0,30 mmol; 29 %).

Rf 0,44 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,37 (m, 3H), 1,55 - 1,74 (m, 4H), 3,05 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,39 (q, 1H), 5,05 (s, 0,5H), 5,09 (s, 0,5), 7,0 - 7,4 (m, 14H)

Príklad 40 (R)-N²-(4,4^,-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(4,4'-Dichlórdifenyl)ornitín

-970,2 N NaOH (200 ml) a 4,4^,-dichlórdifenylacetylchlorid (14,2 mmol) sa za miešania pridali Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-ornitín hydrochloridu (4,73 g; 15,6 mmol) v THF (250 ml). Po miešaní počas 18 hodín sa organická vrstva oddelila a zahustila. Zostávajúci zvyšok sa rozpustil v EtOAc a premyl sa s 1 N HCi (125 ml) a soľankou (125 ml). Organické podiely sa oddelili, vysušili s Na₂SO₄ a zahustili, pričom sa získal zlúčenina uvedená v podnázve vo forme žltej peny (4,79 g; 9,05 mmol; 64 %).

Rf 0,10 (systém B) (b) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(4,4^,-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amid (R,S)-1-[4-(Aminokarbonylmetyl)fenyl]etylamín (0,72 g; 4,04 mmol), BOP reagent (1,79 g; 4,04 mmol), HOBT (0,55 g; 4,04 mmol) a DiPEA (1,4 ml; 8,08 mmol) sa pridali Do roztoku (R)-N²-(4,4-dichlórdifenylacetyl)-N⁵-(Cbz)-ornitínu (2,14 g; 4,04 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v THF (200 ml). Reakčná zmes sa miešala cez noc pri laboratórnej teplote a potom sa zahustila vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v EtOAc (100 ml) a premyl sa s roztokom KHSO₄ (100 ml), 0,5 N NaOH (100 ml) a soľankou (100 ml). Organické podiely sa oddelili, vysušili s Na₂SO₄ a zahustili. Surový produkt vykryštalizoval z EtOAc, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme kryštalickej pevnej látky (0,88 g; 1,27 mmol; 34 %).

Rf 0,69 (systém B) (c) (R)-N²-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amid acetát

Kyselina octová (3,2 ml; 56,6 mmol) a 10 % Pd/C (hmot./hmot.; 70 mg) sa za miešania pridali Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]ornitín amidu (0,88 g; 1,27 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie) v metanole (20 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 4 hodín pod jednou atmosférou vodíka, prefiltrovala sa cez celit, čím sa odstránil katalyzátor a filtrát sa zahustil vo vákuu, pričom poskytol zlúčeninu uvedenú v podnázve vo forme bielej pevnej látky(0,56 g; 0,98 mmol; 44 %).

Rf 0,10 (systém B)

-98(d) (R)-N²-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]-ornitín amid acetátu (0,55 g; 0,89 mmol; z kroku (c) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidínu x HCI (0,14 g; 0,98 mmol) a trietylamínu (0.50 ml; 3.56 mmol) v DMF (15 ml) sa miešal počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CHCI₃ : metanol : koncentrovaný NH₄OH (6:3 :1). Frakcie obsahujúce požadovanú zlúčeninu sa spojili a zahustili, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,31 g; 0,49 mmol; 55 %).

Rf 0,30 (systém D) ¹H NMR (CD₃OD) δ 1,39 (m, 3H), 1,49 - 1,74 (m, 4H), 3,06 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 4,41 (q, 1H), 5,08 (s, 0,5H), 5,12 (s, 0,5H), 7,20-7,37 (m, 12H)

Príklad 41 (R)-N²-(4,4^,-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid hydrochlorid (a) (R)-N⁵-(Cbz)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]ornitín amid (R,S)-1-[4-(Aminokarbonylaminometyl)fenyl)etylamín (0..3 g; 3,77 mmol), BOP reagent (1,67 g; 3,77 mmol), HOBT (0,51 g; 3,77 mmol), DiPEA (1,3 ml, 67,54 mmol) a DMF (20 ml) sa pridali Do roztoku (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-N⁵-(Cbz)ornitínu (1,99 g; 3,77 mmol; pozri príklad 40(a) uvedený vyššie) v THF (200 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 18 hodín pri laboratórnej teplote a potom sa zahustila vo vákuu. Zvyšky sa rozpustili v EtOAc (100 ml) a premyli sa s roztokom KHSO4 (100 ml), 0,5 N NaOH (100 ml) a soľankou (100 ml). Organické podiely sa oddelili, vysušili s Na2SO₄ a zahustili, čím sa získala zlúčenina uvedená v podnázve vo forme svetložltej pevnej látky (1,60 g; 2,27 mmol; 60 %).

Rf 0,55 (systém B) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,45 (dd, 3H), 1,55 (m, 2H), 1,74 (m, 2H), 2,6 (m, 1H),

-993,04 (m, 2H), 4,22 (s, 2H), 4,90 (q, 1H), 5,01 {s, 1H), 5,50 (s, 2H), 7,0 - 7,4 (m, 17H) (b) (R)-N²-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyljornitín amid hydrochlorid

TMSI (0,42 ml; 2,95 mmol) sa za miešania pridal Do roztoku (R)-N⁵-(Cbz)-N²(4,4^,-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylamino-metyl)fenyl)etyl]ornitín amidu (1,6 g; 2,27 mmol; z kroku (a) uvedeného vyššie) v CH₃CN (20 ml) and CH2CI2 (20 ml). Reakčná zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 1,5 hodín a potom sa rýchle zriedila s 1 N HCl (10 ml). Zlúčenina uvedená v podnázve vykryštalizovala z roztoku vo forme bielej pevnej látky (0,52 g, 0,91 mmol, 41 %).

Rf 0,10 (systém B) (c) (R)-N2-(4,4'-Dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyljarginín amid hydrochlorid

Roztok (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]omitín amidu x HCl (0,52 g; 0,91 mmol; z kroku (b) uvedeného vyššie), 1H-pyrazol-1-karboxamidín x HCl (0,134 g; 0,91 mmol) a trietylamín (0,51 ml; 3,64 mmol) v DMF (8 ml) sa miešal počas 24 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na oxide kremičitom eluovaním so zmesou CHCI₃ : metanol : koncentrovaný NH₄OH (6:3:1). Frakcie obsahujúce požadovanú zlúčeninu sa spojili a zahustili, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme bielej pevnej látky (0,142 g; 0,218 mmol; 24 %).

Rf 0,43 (systém D) ¹H NMR (CD3OD) δ 1,39 (m, 3H), 1,50 - 1,77 (m, 4H), 3,05 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,41 (q, 1H), 4,90 (q, 1H), 5,01 (s, 0,5H), 5,11 (s, 0,5), 7,0 - 7,4 (m, 12H)

Príklad 42

Zlúčeniny uvedené v názvoch v príkladoch 1 až 41 sa testovali vo vyššie uvedenom teste A, pričom sa pre všetky zistilo, že vykazujú hodnotu IC₅o nižšiu ako 5,0 μΜ (Yf receptory).

-100Skratky

ACE = angiotenzín-konvertujúci enzým Boe = terc-butoxykarbonyl

BOP = 1-benzotriazolyloxytris(dimetylamino)fosfónium hexafluórfosfát

Cbz = benzyloxykarbonyl

DiPEA = diizopropyletylamín

DMF = Ν,Ν-dimetylformamid

DMSO = dimetylsulfoxid

EDC = 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid

Et₂O = dietyléter

EtOAc = etylacetát

HCI = kyselina chlorovodíková x HCI = hydrochloridová soľ

HCI/EtOAc ~ EtOAc nasýtený s chlorovodíkom

HCI/MeOH = MeOH nasýtený s chlorovodíkom

HOAc = kyselina octová

HOBT = N-hydroxybenzotriazol

MeOH = metanol

NMR = nukleárna magnetická rezonancia

NPY = neuropeptid Y

Pd/C = paládium na uhlíku

PE = polyetylén

TEA = trietylamín

TLC = tenkovrstvová chromatografia THF = tetrahydrofurán TMSI = trimetylsilyljodid

Claims (32)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Zlúčenina všeobecného vzorca I v ktorom

   Ar¹ predstavuje štruktúrny fragment vzorca alebo znamená 1- alebo 2-naftyl, pričom posledná uvedená skupina je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z OH, halogénu alebo Ci-z-alkoxylu;

   R¹ predstavuje C(O)NH_2l CM-alkyl (prípadne substituovaný alebo ukončený jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z hydroxyskupiny alebo aminoskupiny), alebo spolu s R⁷ (v Ar¹) tvorí C₂_

   3-alkylén;

   R⁴ znamená H, Ci_7-aikyl alebo CM-alkylénfenyl (pričom v poslednej uvedenej skupine je fenylová skupina prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými z OH alebo Ci^-alkyloxylu);

   R⁵ a R⁶ navzájom nezávisle od seba predstavujú vodík, OH, Ci^-alkyl, Cmalkoxy alebo halogén;

   -102R⁷ znamená vodík, OH alebo spolu s R¹ tvorí C2-3-alkylén;

   R⁸ predstavuje vodík, halogén, OH, Ci-7-alkoxy, fenyl, fenoxy, benzyloxy, -(CH₂)_nC(O)N(R¹⁰)R¹¹, -(CH2)nN(H)C(O)N(R¹⁰)R¹¹, alebo -O(CH2)nC(O)OR¹⁰,

   R⁹ znamená vodík, halogén OH alebo Ci.₇-alkoxy;

   R², R³, R¹⁰ a R¹¹ navzájom nezávisle od seba predstavujú vodík alebo Cvralkyl; a n znamená 1,2,3 alebo 4;

   alebo ich farmaceutický prijateľné deriváty.
2. 2. Zlúčenina vzorca I podľa nároku 1, kde R¹ znamená C(O)NH₂, CH₂OH, etyl alebo metyl.
3. 3. Zlúčenina vzorca I podľa nároku 2, kde R¹ znamená metyl.
4. 4. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R² znamená vodík.
5. 5. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R³ znamená vodík alebo metyl.
6. 6. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁴ znamená vodík.
7. 7. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁵ znamená vodík, OH, halogén, metyl alebo metoxy.
8. 8. Zlúčenina vzorca I podľa nároku 7, kde R⁵ znamená vodík.
9. 9. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁶ znamená vodík, OH, halogén, metyl alebo metoxy.
10. 10. Zlúčenina vzorca I podľa nároku 9, kde R⁶ znamená vodík.
11. 11. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁷ znamená vodík.

    - 10312. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁸ znamená OCH₃, bróm, -CH₂C(O)NH2, -CH₂N(H)C(O)NH₂ alebo OH.
12. 13. Zlúčenina vzorca I podľa nároku 12, kde R⁸ znamená OH.
13. 14. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R⁹ znamená vodík.
14. 15. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R¹⁰ znamená vodík.
15. 16. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R¹¹ znamená vodík.
16. 17. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde atóm uhlíka, ktorý je v α-polohe vzhľadom na Ar¹ vo fragmente je v R-konfigurácii ak R¹ predstavuje CM-alkyl.
17. 18. Zlúčenina vzorca I podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 16, kde atóm uhlíka, ktorý je v α-polohe vzhľadom na Ar¹ vo fragmente je v S-konfigurácii ak R¹ predstavuje C(O)NH₂ alebo CH₂OH.
18. 19. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-fenylpropyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid;

    -104(R)-N²-(d ifenylacetyl)-(S)-N-[1 -(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1 -(4-brómfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1 -(4-brómfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(3-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(1 -fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-cyklopropyl-1-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid;

    (R)-N²-(difenylacetyl)-N-(1 -metyl-1 -fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-(1-indanyl)arginín amid;

    (R)-N²-(difenylacetyl)-(S alebo R)-N-(1-karbamoylfenylmetyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R alebo S)-N-[1 -karbamoyl-(4-metoxyfenyl)metyl]arginín amid;

    (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-(2-hydroxy-1 -fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-(2-hydroxy-1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[2-hydroxy-1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(S)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(R)-N-(1 -fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-N-metyl-(S)-N-(1-fenyletyl)arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-cyklopropylmetoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-benzyloxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R}-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-fenylfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(2-naftyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(1-naftyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-metoxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyI)etyl]arginín amid;

    (R)-N²-[(R,S)-2-(4-metylfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfhenyi)etyl]arginín amid;

    (R)-N²-[(R,S)-2-(4-chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín

    -105 amid;

    (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-hydiOxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid;

    (R)-N“-(etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N“-(benzyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N“-(1-(4-hydroxyfenyl)etyl)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid;

    (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid;

    (R)-N²-(4,4'-dichlórdifenylacetyl)-(R,S)-N-[1-(4-(aminokarbonylmetyl)fenyl)etyl]arginín amid; alebo (R)-N²-{4,4^,-dichlórdifenylacetyl)-(R_IS)-N-[1-(4-(aminokarbonylaminometyl)fenyl)etyl]arginín amid.
19. 20. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-metoxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-(difenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; (R)-N²-[(R,S)-2-(4-chlórfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid;

    (R)-N²-(4_l4'-dichlórdifenylacetyl)-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid; alebo (R)-N²-[(R,S)-2-(4-hydroxyfenyl)fenylacetyl]-(R)-N-[1-(4-hydroxyfenyl)etyl]arginín amid.
20. 21. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu definovanú v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.
21. 22. Zlúčenina definovaná v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, na použitie ako liečivo.

    -106
22. 23. Zlúčenina definovaná v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, na použitie pri liečení ochorení, ktoré sú sprostredkované neuropeptidom Y.
23. 24. Zlúčenina definovaná v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, na použitie pri liečení kardiovaskulárneho ochorenia.
24. 25. Použitie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, na výrobu lieku na použitie pri liečení ochorenia, ktoré je sprostredkované neuropeptidom Y.
25. 26. Použitie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, na výrobu lieku na použitie pri liečení kardiovaskulárneho ochorenia.
26. 27. Spôsob liečenia kardiovaskulárneho ochorenia, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, osobe, ktorá trpí alebo je náchylná na takýto stav.
27. 28. Zlúčenina definovaná v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, na použitie pri liečení ochorenia, ktoré je sprostredkované podreceptorom Yi neuropeptidu Y.
28. 29. Zlúčenina definovaná v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľný derivát, na použitie pri liečení vazokonštrikcie.
29. 30. Použitie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, na výrobu lieku na použitie pri liečení ochorenia, ktoré je sprostredkované podreceptorom Yi neuropeptidu Y.
30. 31. Použitie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, na výrobu lieku na použitie pri liečení vazokonštrikcie.
31. 32. Spôsob liečenia vazokonštrikcie, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov

    -1071 až 20, alebo jej farmaceutický prijateľného derivátu, osobe, ktorá trpí alebo je náchylná na takýto stav.
32. 33. Spôsob prípravy zlúčenín vzorca I, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje (a) reakciu zlúčeniny vzorca II, kde Ar¹, R¹, R², R³, R⁵ a R⁶ sú definované v nároku 1, so zlúčeninou vzorca III, R^aSC(=NR⁴)NH₂ (lll) alebo jej hydrogensíranovou soľou, kde R^a predstavuje C^-alkyl a R⁴ je definovaný v nároku 1;

    (b) pre zlúčeniny vzorca I, kde R⁴ predstavuje H, reakciu zlúčeniny vzorca II, definovanej vyššie, s 1H-pyrazol-1-karboxamidínom alebo jeho hydrohalogenidovou soľou;

    (c) reakciu zlúčeniny vzorca II, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca IV,

    R^aOC(=NR⁴)NH₂ (IV) alebo jej hydrogensíranovou soľou, kde R^a je definované vyššie a R⁴ je definované v nároku 1 ;

    (d) pre zlúčeniny vzorca I, kde R⁴ predstavuje H, reakciu zlúčeniny vzorca II, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca V,

    S(O)_mH

    A ^M, m ^nh₂ ' kde m predstavuje 2 alebo 3;

    -108(e) reakciu zlúčeniny vzorca VI l VI), kde R^b predstavuje C^-alkyl a Ar¹, R¹, R², R³, R⁵ a R⁶ majú významy definované v nároku 1, so zlúčeninou vzorca VII,

    R⁴NH₂ (vii), kde R⁴ je'definované v nároku 1;

    (f) reakciu zlúčeniny vzorca VIII, kde Ar¹, R¹, R², R³ a R⁴ majú významy definované v nároku 1, so zlúčeninou vzorca IX,

    R

    - 109kde R⁵ a R⁶ majú významy definované v nároku 1;

    (g) reakciu zlúčeniny vzorca VIII, ktorá má vyššie definovaný význam, so zlúčeninou vzorca X, kde R⁵ a R⁵ sú vyššie definované v nároku 1; alebo (h) reakciu zlúčeniny vzorca VIII, ktorá je definovaná vyššie, so zlúčeninou vzorca XI, c e kde R a R majú významy uvedené v nároku 1