SK282945B6

SK282945B6 - Perorálny prípravok na prevenciu a liečbu infekčných gastroenteritíd prasiat

Info

Publication number: SK282945B6
Application number: SK237-99A
Authority: SK
Inventors: Petr Mi�An; Jan �T�P�Nek
Original assignee: Medipharm Cz, S. R. O.
Priority date: 1998-03-20
Filing date: 1999-02-24
Publication date: 2003-01-09
Also published as: CZ287989B6; CZ85998A3; SK23799A3; PL191391B1; EP0955061A1; PL332146A1

Abstract

Perorálny prípravok na prevenciu a liečbu infekčných gastroenteritíd prasiat, ktorý obsahuje aspoň jednu špecifickú protilátku proti prasačiemu rotavírusu, prasačiemu koronavírusu, enteropatogénnym a enterotoxickým kmeňom baktérií Escherichia coli, Clostridium sp., Salmonella sp., Serpulina sp. prvkom Isospora sp. a Cryptosporidium sp., získanú zo žĺtkov imunizovaných nosníc. Obsahuje rovnako aspoň jeden kmeň živých stabilizovaných kultúr laktacidoprodukčných baktérií. Spôsob výroby prípravku tým, že probiotická zložka prípravku sa vyrába oddelenou submerznou kultiváciou jednotlivých vybraných kmeňov laktacidoprodukčných baktérií Enterococcus faecium, Lactobacillus plantarum, ktoré sa po ukončení kultivačného procesu separujú od média, konzervujú lyofilizáciou a finálne zmiešajú jednotlivo alebo v kombinácii s protilátkami a nosnými látkami prípravku.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka prípravku určeného na prevenciu a liečbu infekčných ochorení gastroenterálneho traktu prasiat.

Doterajší stav techniky

Základným predpokladom determinujúcim úroveň ekonomiky produkcie prasiatok a jatočných prasiat je udržanie ich dobrého zdravotného stavu počas celého odchovu. Vzhľadom na to, že sa odchovný proces odohráva vo veľkovýrobných podmienkach, je dosiahnutie tohto efektu náročnou chovateľskou záležitosťou. Ustajnenie početných populácií zvierat v priestorovo obmedzenom prostredí vytvára neprirodzenú a neúmernú záťaž ich imunitného systému a je často sprevádzané znížením ich rezistencie proti infekciám. Súčasne umožňuje prežívanie i postupný nárast virulencie početných, predovšetkým fakultatívne patogénnych mikroorganizmov a ich trvalú prítomnosť v stajňovom prostredí so vzrastajúcimi koncentráciami.

Z epidemiologického hľadiska je možné tento stav charakterizovať ako umelé vytvorenie vhodných podmienok umožňujúcich vznik a rozvoj početných infekčných procesov postihujúcich predovšetkým gastroenterálny a respiračný trakt, ktoré sa v konečnej fáze manifestuje hromadným výskytom hnačkových alebo respiračných ochorení. Zvlášť významné sú gastroenteritídy, vzhľadom na to, že postihujú prasatá všetkých vekových skupín. Najčastejší a z chovateľského hľadiska najzávažnejší je ich výskyt u sajúcich prasiatkach a odstavčiat. Klinicky sa manifestujú jednotným obrazom, a síce hnačkou s rôznou intenzitou a charakterom, dehydratáciou, inapetenciou, stratou kondície a znížením hmotnostných prírastkov. U niektorých zvierat končí ochorenie úhynom. U sajúcich teliat a odstavčiat dosahuje mortalita až 20 alebo aj viac percent, ale aj u prasiat starších vekových kategórií sú straty vzniknuté úhynom v dôsledku gastroenteritíd významným negatívnym faktorom ekonomiky. Etiológia infekčných gastroenteritíd je veľmi rôznorodá a uplatňujú sa v nej početné mikroorganizmy, vírusy, baktérie a v menšej miere aj protozoa, samostatne alebo s rôznymi kombináciami. Najvýznamnejšie sú prasačí rotavírus, prasačí koronavírus (pôvodca transmisívnej gastroenteritidy - TGE), prasačí koronavírus (pôvodca epidemickej diarroey prasiat - PED), enterotoxické a enteropatogénne kmene E. coli (ETEC a EDEC, najmenej 4 sérotypy), Clostridium sp. (predovšetkým Clostridium perfringens typu A), Salmonella sp., Serpulina hydrosenteriae (pôvodca dyzentérie prasiat), Serpulina pilosicoli (pôvodca intestinálnej spirochetózy), Lawsonia intracellularis (pôvodca prasačej protiliferatívnej enteropatie), Isospora suis a Cryptosporidium (protozoa, ktorá sa objavuje ako sprievodná, komplikujúca invázia gastroenteritíd inej etiológie).

Príčinou rekurentných, endemických gastroenteritíd, ktoré sú z chovateľského hľadiska zvlášť významné, sú prasačí rotavírus, ETEC a Clostridium sp. u sajúcich prasiatok a odstavčiat, a ďalej potom Salmonella spp., Serpulina hydrodyseteriae a prasačí koronavírus (PED) u behúňov a starších prasiat.

Komplexná etiológia, fakultatívna patogenita pôvodcov a lokálny charakter infekčného procesu komplikujú profylaxiu endemických gastroenteritíd a obmedzujú jej účinnosť. Napriek tomu, vzhľadom na početnosť výskytu týchto ochorení, sú opatrenia zamerané na ich tlmenie esenciálnou súčasťou všetkých chovateľských zásahov.

V súčasnosti sa využívajú postupy zamerané na zníženie stupňa kontaminácie stajňového prostredia, vakcinácie, aplikácie antibiotík a podávania antibiotík.

Všeobecne zamerané protiinfekčné opatrenia, ako je priebežná asanácia prostredia, patrí síce k nevyhnutným profylaktickým zásahom, ale vzhľadom na schopnosť enteropatogénnych mikroorganizmov prežívať v organizme zdravých prasiat, majú len čiastočný a časovo obmedzený efekt.

Tiež účinnosť parenterálnej a perorálnej aplikácie antibiotík je len čiastočná, a to aj v prípade ich plošnej aplikácie a použitia vysokých liečebných dávok. Antibiotiká sú celkom neúčinné v prípade vírusových infekcií. Pri perorálnej aplikácii môžu pozitívne ovplyvniť rozmnožovanie a nasledovne aj priebeh bakteriálnych infekcií. Aj tento efekt antibiotík je však väčšinou časovo limitovaný časom aplikácie a je často sprevádzaný nežiaducimi súbežnými efektmi, a to dočasnou imunosupresiou ustajnených zvierať vznikom rezistentných bakteriálnych kmeňov a potlačením rastu kultúrnej, z hľadiska hostiteľa symbiotnej, črevnej mikroflóry.

Určitý, predovšetkým preventívny, pozitívny efekt má aplikácia probiotík, ktorá na princípe kompetitívnej inhibície potláča rozmnožovanie enteropategénnych, resp. enterotoxických baktérií a potencuje funkčnú aktivitu imunitného systému zvierat, predovšetkým lokálnych imunitných štruktúr gastrointestinálneho traktu.

Nedostatočne účinná je aj vakcinácia, predovšetkým preto, že skutočný efekt môžu mať len protilátky prítomné v črevnom lúmee, produkované buď imunitným systémom čreva, alebo pasívne prijímané perorálnou cestou. Lokálny typ imunity po parenterálnej vakcinácii nevzniká a vakcíny určené na perorálnu aplikáciu sú dosiaľ vo fázy vývoja. Čiastočný úspech sa zaznamenal len pri vakcínach určených na zvýšenie chránenia novorodených sajúcich teliat. Používajú sa na imunizáciu brezivých prasníc a vyvolávajú zvýšenie koncentrácie špecifických protilátok v kolostri a materskom mlieku. Tieto protilátky prijímané prasiatkami permanentne v priebehu sania chránia ich intestinálnu sliznicu tým, že neutralizujú enteropategénne organizmy priamo v lúmene čreva, a vytvárajú tak stav pasívnej lokálnej imunity, znemožňujúcej rozvoj a priebeh infekčného procesu. Nedostatkom vakcinácie prasníc je často neúplné antigénne spektrum príslušných biopreparátov a skutočnosť, že vylučovanie protilátok mliečnou žľazou je časovo limitované, a koncentrácia protilátok môže byť ovplyvnená početnými sprievodnými vplyvmi (mastitídy, agalakcia, nevhodné chovateľské zásahy atď.).

Tendencia využiť princíp pasívnej lokálnej imunity gastroenterálneho traktu všeobecne, t. j. založiť prevenciu a terapiu gastroenteritíd prasiat na permanentnom perorálnom prísune špecifických sérových protilátok (séroterapia pomocou hyperimúnnych a rekonvalescentných sér) sa ukázala ako nereálna. Rozhodujúci dôvod spočíva v tom, že sa ekonomicky únosným spôsobom nepodarilo zabezpečiť prípravu týchto látok v potrebnom množstve a v indikovanej polyvalentnej špecifickosti. Ďalšou nevýhodou je to, že v gastrointestinálnom trakte sa sérové protilátky rýchlo denaturujú. Existuje dostatok dôkazov o tom, že parenterálna aplikácia protilátok je, vzhľadom na patogenézu infekčných gastroenteritíd, celkom bezpredmetná.

Podstata vynálezu

Uvedené nedostatky do značnej miery odstraňuje perorálny prípravok na prevenciu a liečbu infekčných gastro enteritíd prasiat podľa vynálezu, ktorého podstata spočíva v tom, že na dosiahnutie potrebného preventívneho a terapeutického efektu sa kombinuje účinnosť dvoch profylaktických a liečebných princípov, to je špecifickou pasívnou imunoterapiou protilátok a nešpecifickou profylaktickou účinnosť stabilizovaných laktacidoprodukčných baktérií - probiotík. Špecificky účinnú zložku prípravku predstavujú špecifické protilátky proti jednotlivým enteropatogénnym mikroorganizmom, použité buď samostatne alebo v rôznych indikačných kombináciách, ktoré pôsobia priamo v lúmene gastroenterálneho traktu. Na základe neutralizácie povrchových antigénov (faktory patogenity) mikróbov blokujú ich adhéziu a permanentné množenie na povrchu sliznice (baktérie), alebo prienik a multiplikáciu v epiteliálnych bunkách (vírusy). Znemožňujú tak rozvoj a obmedzujú tak rozsah a intenzitu infekčného procesu. Ďalšiu účinnú zložku prípravku tvoria stabilizované kultúry laktacidoprodukčných baktérií Enterococcus spp., a/alebo vybavené schopnosťou kompetitívne inhĺbovať adherenciu, rast a množenie enteropatogénnych a enterotoxických sepsií, ale prospievajú k zachovaniu eubiotickej stability črevnej mikroflóry prasiatok aj v prípade vírusových infekcií. A tak potencujú lokálny účinok špecifických protilátok. Tieto základné synergicky pôsobiace komponenty prípravku sa môžu doplniť ďalšími podpornými látkami, ako napríklad vitamíny, a vhodnými nosnými substrátmi, ktoré zaisťujú štandardný obsah účinných látok, homogenitu zapracovania jednotlivých zložiek, dlhodobú stabilitu prípravku a ľahkú aplikovateľnosť.

Špecifické protilátky sa získavajú z vajec sliepok (nosníc) cielene imunizovaných antigénmi prasačieho rotavírusu (napríklad CAPM V-334), prasačieho koronavírusu (napr. kmene CAPM V-66, CAPM V-126, CAPM V-474), a pre prasatá enteropatogénnymi a enterotoxickými kmeňmi zárodkov E. coli (napr. CAPM 5051 - 5057), baktériami rodu Salmonella sp., napr. kmeňmi CAPM 5938, CAPM 5939, CAPM 5445), Clostridium sp. (napr. kmeňom CAPM 5744), Serpulina (napríklad kmeňmi CAPM 6033, CAPM 6163), a prípadne aj protozoy rodu lsospora a Cryptosporidium. Východiskové suroviny, v tomto prípade vaječná hmota, získané od imunizovaných nosníc sa po homogenizácii finálne spracovávajú sprejovým alebo fluidným sušením. Optimálnym spôsobom stabilizácie je však lyofilizačná technika, ktorá je najšetrnejšia a umožňuje zachovať plný biologický potenciál východiskových surovín. Výsledným produktom je žltobiely sypký prášok. Hladina špecifických protilátok v sušenom alebo lyofílizovanom vaječnom obsahu (žitku) musí dosiahnuť minimálny neutralizačný titer 16 na 100 TKID₅₀ (Tissue Culture Infection Dose, to je infekčná dávka pre tkanivovú kultúru) pri vírusových antigénoch a minimálny aglutinačný titer 20, alebo precipitačný titer 4 na 10⁸ inaktivovaných baktérií pri mikrobiálnych a protozoálnych antigénov v 1,00 g sušenej hmoty.

Ďalšiu podstatnú zložku prípravku tvoria živé stabilizované kultúry vybraných laktacidogénnych kmeňov Enterococcus spp., a/alebo Lactobacillus spp., napríklad Enterococcus faecium, napríklad kmeň M 74 - CCM 6226 alebo Lactobacillus casei, napríklad kmeň CCM 3775, prípadne Lactobacillus plantarum, napríklad kmeň CCM 3769. Táto probiotická časť prípravku sa vyrába cestou submerznej pulzačnej kultivácie. Po ukončení exponenciálnej rastovej fázy sa získaná bakteriálna biomasa separuje od rastového média, a po pridaní kryoprotektíva sa zahustená bakteriálna kultúra stabilizuje lyofilizáciou. Koncentrácia živých laktacidoprodukčných baktérií v 1 g suchého probiotického koncentrátu má dosiahnuť minimálny CFU: 50 x 10⁹/l g.

(CFU = Colonies Forming Units/ zárodky schopné vytvoriť kolóniu).

K zvýšeniu úrovne metabolizmu a k zvýšeniu celkovej odolnosti organizmu proti infekciám je výhodné obohatiť prípravok o vitamínový doplnok, zložený z koncentrátov vitamínov A, D₃, a E, a to buď v sypkej, olejovitej, alebo vodorozpustnej forme. Priemerná minimálna dotácia vitamínov na prasiatko a deň by mala obsahovať 1000 m. j. vitamínu A, 100 m. j. vitamínu D a 5 m. j. vitamínu E.

Vzhľadom na to, že prípravok je určený výlučne na perorálnu aplikáciu prasiatkam, odstavčatám i starším prasatám v rôznom období postnatálneho vývoja, zvolili sa dve základné aplikačné formy.

Aplikačná forma pasty je určená prevažne na parenterálnu aplikáciu prípravkov novorodeným a sajúcim prasiatkam odchovaným tradičným spôsobom pod prasnicami v individuálnych kotercoch. Prípravok vo forme pasty sa inkorporuje do špeciálnych plastových injektorov (aplikátorov), ktoré zabezpečujú presné a spoľahlivé dávkovanie bez rizika ašpirácie.

Oproti tomu ďalšia vodorozpustná a sypká, resp. práškovitá forma prípravku (pulvis, premix), umožňuje tak individuálne dávkovanie odmerkou, ako aj skupinové a hromadné podávanie prípravku vo vode a v kŕmnych zmesiach používaných počas celého odchovu prasiat (odstavčatá, behúne, výkrmové prasatá). Sypká forma sa indikuje aj na použitie v rehydratačných roztokoch určených na symptomatickú terapiu infekčných hnačiek prasiatok.

V aplikačnej forme pasty tvorí hlavné nosné komponenty kolodiálny silikónhydrolyzát a destilované monoglyceridy, ktoré spolu s kvalitným potravinárskym olejom vytvárajú konzistentnú pastu s molekulárnym sitom, ktoré zaisťuje rovnomerné a stabilné rozptýlenie účinných komponentov. Pri všetkých operáciách súvisiacich s výrobou pást je potrebné dodržiavať pravidlá aseptickej práce. Pri finálnej adjustácii sypkých foriem prípravku (pulvis, premix) sa ako nosiče využívajú sušené odtučnené mlieko, sušená srvátka v kombinácii so sacharózou, glukózou, sorbitolom alebo laktózou.

Rozhodujúca výhoda prípravku na prevenciu a liečbu gastroenteritíd prasiat podľa vynálezu spočíva v tom, že jeho účinnosť je založená na kombinácii dvoch samostatne funkčných preventívne liečebných postupov, a to na pasívnej imunoterapii špecifickými protilátkami a súčasne efektívne inhibičným účinkom probiotických bakteriálnych kultúr. V intestinálnom trakte prasiatok a prasiat je neutralizačný efekt špecifických protilátok posilňovaný kompetitívne inhibičnou aktivitou laktacidoprodukčných mikroorganizmov na celý rad enteropatogénnych zárodkov.

Skutočnosť, že protilátky potrebné na pasívnu imunizáciu prasiatok a prasiat sa pripravujú z vaječných žĺtkov imunizovaných sliepok (nosníc) má na praktické využitie rad nespochybniteľných výhod. Pri tomto spôsobe produkcie je možné získať veľké množstvo špecifických protilátok pri priaznivej hladine výrobných nákladov. Výhodná je aj vysoká špecifičnosť protilátok, ktorá umožňuje buď indikované individuálne použitie monovalentných protilátok, alebo následné stavebnicové skladanie polyvalentných prípravkov, ktoré svojou skladbou protilátok plne zodpovedajú spektru mikroorganizmov etiologicky sa podieľajúcich na vzniku gastrointestinálneho ochorenia.

Analogickým postupom, s použitím indikovanej skladby antigénov k imunizácii nosníc, je možné získať žítkovú masu obsahujúcu špecifickú polyvalentnú skupinu protilátok zodpovedajúcu špecifickej antigénnej štruktúre infektu, ktorý gastrointestinálne ochorenie vyvolal.

Výhoda vaječných protilátok spočíva v tom, že sú na rozdiel od sérových protilátok odolnejšie proti pôsobeniu nízkeho pH a proteolytických enzýmov, a v dôsledku toho si vaječné protilátky zachovávajú svoju funkčnú aktivitu aj v prostredí gastrointestinálneho traktu.

Prednosťou využitia vajec ako zdrojov protilátok, je aj to, že umožňuje realizovať výrobu prípravku len z biologických surovín, ktoré sú nutrične identické s bežnými proteínovými komponentmi využívanými vo výžive prasiat. Analogické výhody má aj probiotická zložka prípravku, kde je možné cielene voliť a využívať rôzne konkurenčné inhibičné, adherenčné, rastové a metabolické schopnosti jednotlivých kmeňov laktacidoprodukčných baktérii, ako sú napríklad Enterococcus faecium (kmeň M 74, CCM 6226), Lactobacillus plantarum (CCM 3769) alebo Lactobacillus casei (CCM 3775). Môžeme použiť buď len jeden vybraný bakteriálny kmeň alebo kombináciu dvoch alebo troch druhov baktérií. Vo všetkých prípadoch ide o baktérie apatogénne, ktoré vytvárajú významnú časť pozitívnej, symbiotickej črevnej mikroflóry zdravých prosperujúcich zvierat, napríklad prasiatok a prasiat. Z tohto dôvodu je teda vylúčené akékoľvek riziko neindikovaného použitia alebo predávkovania.

V prípade obidvoch zložiek prípravku, to znamená žítkových protilátok a probiotických kultúr, prakticky neexistuje žiadne nebezpečenstvo vedľajších účinkov súvisiacich s ich širokým použitím v praxi tak, ako je to bohužiaľ bežné pri využití antibiotík alebo chemoterapeutických látok.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Pre novorodené sajúce prasiatka je najefektívnejšia aplikácia prípravku vo forme pasty, ktorá umožňuje bezpečné a presné perorálne dávkovanie, bez rizika ašpirácie prípravku mláďaťom. Pri príprave pasty sa primáme miešajú jednotlivé účinné zložky, t. j. špecifické protilátky, napríklad antirotavírusové, antikoronavirusové a protilátky proti enteropatogénnym baktériám, spoločne s koncentrátom laktacidogénnych baktérií. Protilátky vo forme lyofilizovaných alebo sušených vaječných žĺtkov, pochádzajúcich od imunizovaných nosníc, sa homogénne zmiešajú s lyofilizovanými koncentrátmi baktérií Enterococcus faecium, prípravkov Lactobacillus casei, alebo aj Lactobacillus plantarum, a zmesou koncentrátov vitamínov A, D₃ a E. V ďalšom kroku sa táto zmes účinných zložiek prípravku postupne pridáva do dopredu homogénne zmiešaných nosných zložiek, ktoré tvoria kvalitný potravinársky olej, napríklad arašidový olej, koloidný siloid-hydrolyzát, napríklad CABOSIL a zmes destilovaných monoglyceridov, napríklad MYVEROL. Celá kompletná zmes sa finálne zapracuje vo vákuovom homogenizátore, a v konečnej fázy asepticky rozplní do plastových aplikátorov (injektorov) s objemom, napríklad 40 a 80 ml pasty. Priemerná perorálna dávka prípravku vo forme pasty predstavuje objem 1 ml až 5 ml na prasiatko a deň, v prípade akútneho ohrozenia nákazou je účelné dennú dávku zdvojnásobiť.

Tabuľka 1: Základné zloženie prípravku vo forme pasty v homogénnych percentách:

Nosné zložky pasty	hmotnosť v %
Kvalitný potravinársky olej (napríklad arašidový)	40-60
Koloidný siloid (napríklad CABOSIL)	3-7
Destilované monoglyceridy	1-3
Účinné zložky party
Sušené (lyofilizované) vaječné žĺtky od imunizovaných zvierat	18-40
Koncentrát laktacidoprodukčných baktérií CFU 200 x ÍO’/I g (Enterococcus faecium M 74, Lactobacillus plantarum)	4-5
Vitamínová prísada pasty
Zmes koncentrátov vitamínov A, Dj, E	1-2

Príklad 2

Sypká vodorozpustná forma prípravku (pulvis) sa pripravuje na štandardných miešacích zariadeniach (napríklad Nautamix), vybavených horizontálnym a vertikálnym systémom miešania komponentov. Základné sušené zložky - sušené (lyofilizované) vaječné žĺtky od imunizovaných zvierat, spoločne s koncentrátmi lyofilizovaných laktacidoprodukčných baktérií sa v malom množstve nosných zložiek primárne homogenizujú buď v menšom miešacom zariadení, a potom prepustia do finalizačného homogenizátora, alebo sa účinné zložky rozptýlia v menšom objeme nosičov, a až po dokonalom premiešaní sa finalizačné zariadenie doplní na plní obsah a miešanie sa dokončí. Prípravok podľa vynálezu sa následne plní do alufanových vrecúšok alebo plastových kontajnerov (napríklad alufanové vrecúška s obsahom 500 g alebo plastové kontajnery a vaky až do hmotnosti 25 kg).

V praktických podmienkach sa prípravok podľa vynálezu dávkuje individuálne 1,5 až 3 g prípravku na prasiatko a deň, alebo v dávke 500 - 2500 g na 1 t suchej mliečnej kŕmnej zmesi, prípadne aj kompletnej kŕmnej zmesi.

Tabuľka 2: Základné zložky prípravku podľa vynálezu finálne upraveného do formy sypkého solubilného prášku (pulvis/premix):

Nosné zložky	hmotnosť v %
Sušené instantné mlieko alebo sušená srvátka	16-40
Glukóza, laktóza, sorbitol, sacharóza (škrob)	16-40
Účinné zložky
Sušené (lyofilizované) vaječné žĺtky od imunizovaných zvierat	20-60
Koncentrátlaktacidoprodukčnýchbaktérií CFU: 5xlď/l g Enterococcris faecium	10-15

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Perorálny prípravok na prevenciu a liečbu infekčných gastroenteritíd prasiat, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje aspoň jednu špecifickú protilátku proti prasačiemu rotavírusu, prasačiemu koronavírusu, enteropatogénnym a enterotoxickým kmeňom baktérií Escherichia coli, Closíridium sp., Salmonella sp., Serpulina sp., prvokom Isospora sp. a Cryptosporidium sp., získanú zo žĺtkov imunizovaných nosníc.
2. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že rovnako obsahuje aspoň jeden kmeň živých stabilizovaných kultúr laktacidoprodukčných baktérií.
3. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že množstvo antivírusových protilátok dosahuje titer aspoň 16/100 TK1D₅o a množstvo antibakteriálnych protilátok dosahuje minimálny aglutinačný titer 20, alebo precipitačný titer 4 na 10⁸ inaktivovaných baktérií v 1 g prípravku.
4. Prípravok podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že živými stabilizovanými kultúrami laktacidoprodukčných baktérií sú kmene Enterococcus faecium, Lactobacillus casei a/alebo Lactobacillus plantarum.
5. Prípravok podľa nároku 4, vyznačujúci sa t ý m , že koncentrácia stabilizovaných živých kultúr laktacidoprodukčných baktérií je v rozsahu 5 x 10³ až 50 x x 1O¹⁰ živých kmeňov na 1 g prípravku.
6. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že rovnako obsahuje vitamíny a nosné látky.
7. Prípravok podľa nároku 6, vyznačujúci sa t ý m , že množstvo vitamínov zodpovedá pre vitamín A aspoň 1000 m. j., pre vitamín D₃ aspoň 100 m. j., a pre vitamín E aspoň 5 mg na prasiatko/deň.
8. Prípravok podľa nároku 6, vyznačujúci sa t ý m , že nosné látky obsahujú potravinársky olej s množstvom 40 až 60 hmotnostných %, koloidné siloidy s množstvom 3 až 7 hmotnostných %, a destilované monoglyceridy s množstvom 1 až 3 hmotnostných %.
9. Prípravok podľa nároku 6, vyznačujúci sa t ý m , že nosné látky obsahujú glukózu a/alebo sacharózu, a/alebo laktózu, a/alebo sorbitol s celkovým množstvom 16 až 45 hmotnostných %, spolu so sušeným mliekom, a/alebo sušenou srvátkou, s celkovým množstvom 16 až 40 hmotnostných %.
10. Spôsob výroby prípravku podľa nárokov 1 až 9, vyznačujúci sa tým, že probiotická zložka prípravku sa vyrába oddelenou submerznou kultiváciou jednotlivých vybraných kmeňov laktacidoprodukčných baktérií Enteroceccus faecium, Lactobacillus casei, prípadne Lactobacillus plantarum, ktoré sa po ukončení kultivačného procesu separujú od média, konzervujú lyofilizáciou, a finálne zmiešajú jednotlivo alebo v kombinácii s protilátkami a nosnými látkami prípravku.
11. Spôsob podľa nároku 10, vyznačujúci sa t ý m , že sa imunizujú nosnice antigény prasačieho rotavírusu, prasačieho koronavírusu, enterogénnych a enterotoxických kmeňov baktérií Escherichia coli, Clostridium sp., Salmonella sp. Serpulina sp., prípadne aj protozoálnymi kmeňmi Isospora sp. A Cryptosporidium sp., a to buď separované jednotlivými antigénmi, alebo indikovanými skupinami antigénov, načo sa žĺtky alebo celé obsahy vajec získané od imunizovaných nosníc finálne konzervujú fluidným alebo sprejovým sušením, prípadne lyofilizačnou technikou.
12. Spôsob podľa nároku 11, vyznačujúci sa t ý m , že prasačí rotavírus CAPM V-334, antigény prasačieho rotavírusu sú CAPM V-66, CAPM V-126, CAPM V-474, ďalej kmene baktérií Escherichia coli sú CAPM 5051, CAPM 5052, CAPM 5053, CAPM 5054, CAPM 5055, CAPM 5056, CAPM 5057, kmeň Clostridium sp. je CAPM 5744, kmene Salmonella sp. sú CAPM 5938, CAPM 5939, CAPM 5445, a kmene Serpulina sp. sú CAPM 6063 a CAPM 6163.