SK281861B6

SK281861B6 - Spôsob racemizácie opticky čistého substrátu 2-terc-butylkarboxamidpiperazínu alebo substrátu bohatého na 2-terc-butylkarboxamidpiperazín, alebo jeho solí a substrát na racemizáciu

Info

Publication number: SK281861B6
Application number: SK1006-96A
Authority: SK
Inventors: Kai Rossen; David Askin; Paul Reider; Richard J. Varsolona; Ralph P. Volante
Original assignee: Merck & Co., Inc.
Priority date: 1994-02-04
Filing date: 1995-01-30
Publication date: 2001-08-06
Also published as: WO1995021162A1; EP0741712B1; CA2180947A1; SK100696A3; FI112218B; RO118292B1; FI963054A; HU9602143D0; FI963054A0; CZ227296A3; EP0741712A1; DE69523038D1; UA46730C2; AU691878B2; AU1696795A; MX9603218A; RU2135482C1; TW472047B; KR100337579B1; HUT76303A

Abstract

Spôsob racemizácie opticky čistého substrátu 2-terc- butylkarboxamidpiperazínu alebo substrátu bohatého na 2-terc- butylkarboxamidpiperazín všeobecného vzorca (IX) alebo (X), alebo jeho solí, ktorý spočíva v tom, že sa substrát nechá reagovať s racemizačným činidlom zo skupiny silná báza, bezvodá soľ kovu alebo karboxylová kyselina, v rozpúšťadle a pri teplote miestnosti až teplote 250 °C. Získané deriváty sú kľúčovými medziproduktmi na prípravu inhibítorov HIV-proteázy.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka spôsobu racemizácie opticky čistého alebo obohateného 2-íerc-butylkarboxamidpiperazinového substrátu a substrátu na uskutočňovanie tohto spôsobu. Ide o cenný medziprodukt na výrobu inhibítorov HlV-proteázy.

Doterajší stav techniky

Je známy celý rad inhibítorov proteázy HIV, najmä ide o zlúčeninu, ktorá sa uvádza ako „zlúčenina J“ v EP 541 168 z 12. mája 1993, rovnako je možné použiť aj farmaceutický prijateľné soli tejto látky.

Uvedené látky je možné použiť na prevenciu infekcie HIV, na liečenie tejto infekcie a tiež na liečenie získaného syndrómu deficiencie imunitného systému, AIDS, ktorý vzniká na podklade tejto infekcie.

Retrovírus, označovaný HIV, je príčinou vzniku komplexného ochorenia, pri ktorom dochádza k progresívnej deštrukcii imunitného systému a degenerácii centrálneho a periférneho nervového systému, AIDS. Vírus bol skôr označovaný tiež LAV, HTLV-III alebo ARV. Spoločnou vlastnosťou replikácie retrovírusov je extenzívne posttranslačné spracovanie prekurzorových polyproteínov proteázou, pre ktorú je vírus kódom, za vzniku vírusových bielkovín, nevyhnutných pre funkciu vírusu. V prípade, že dôjde k inhibícii uvedeného spracovania, nemôže vzniknúť normálny infekčný vírus. Napríklad v publikácii Kohl N. E. a ďalší, Proc. Natl. Acad. Sci., 85, 4686, 1988 sa dokazuje, že genetická inaktivácia proteázy, pre ktorú je kódom HIV má za následok produkciu nezrelých, neinfekčných častíc vírusu. Výsledok teda dokazuje, že inhibícia proteázy HIV predstavuje perspektívny postup na liečenie AIDS a prevenciu alebo liečenie infekcie HIV.

V nukleotidovom reťazci HIV je v jednom z otvorených čítacích rámcov prítomný gén pol podľa publikácie Ratner L. a ďalší, Náture, 313, 277, 1985. Homológia reťazca aminokyselín dokazuje, že reťazec génu pol je kódom pre reverznú transkriptázu, endonukleázu a HIV-proteázu podľa publikácií Toh H. a ďalší, EMBO J., 4, 1267,1985, Power M. D. a ďalší, Science, 231, 1567, 1986, Pearl L. H. a ďalší, Náture, 329, 351, 1987. Výsledné produkty vrátane zlúčeniny J, ktoré je možné pripraviť z nových medziproduktov, sú inhibítory proteázy uvedenej v EP 541 168.

Až dosiaľ sa zlúčenina J a príbuzné látky pripravujú postupom v dvanástich stupňoch, pri ktorom sa vychádza z dihydro-5(5)-hydroxymetyl-3(2//)-furanónu s chránenou hydroxyskupinou, táto látka sa alkyluje a odštiepiteľná skupina na alkylovanom furanóne sa nahradí piperidínovou skupinou. Produkt sa potom hydrolyzuje na otvorenie furanového kruhu za vzniku hydroxykyseliny, ktorá sa potom nechá reagovať s 2(R)-hydroxy-l(S)-aminoindánom. Tento postup je opísaný v EP 541 168. Tento postup prebiehajúci v dvanástich stupňoch je veľmi nákladný na čas a na prácu a okrem toho vyžaduje použitie nákladných reakčných činidiel a nákladné východiskové látky. Bolo by preto potrebné navrhnúť hospodárnejší postup.

V EP 541 168 sa uvádza tiež modifikovaný postup na výrobu zlúčeniny J a príbuzných látok. Tento postup je založený na diastereoselektívnej alkylácii cnolátu, odvodeného od N-(2(R)-hydroxy-l(5)-indán-2V,O-izopropylidenyl)-3-fenylpropánamidu, v ktorom bola zavedená skupina s obsahom 3 až 5 atómov uhlíka ako alylová skupina a neskoršie bola oxidovaná. Niektoré problémy spojené s týmto postupom spočívajú v tom, že a) sú potrebné 4 stupne na zavedenie glycidylového fragmentu, obsahujúceho 3 uhlíkové atómy, b) v priebehu postupov sa používa vysoko toxický oxid osmičelý a c) pri dihydroxylačnom stupni je možné dosiahnuť len malú diastereoselektivitu. Bolo by teda potrebné navrhnúť postup, pri ktorom by bolo možné zaviesť priamo jednotku s obsahom 3 uhlíkových atómov v správnej chirálnej oxidovanej forme.

Okrem toho je možné uskutočniť syntézy chirálneho piperazínového produktu z kyseliny 2-pyrazinkarboxylovej v postupe, uskutočňovanom v 6 stupňoch, aj pri tomto postupe je však nutné použiť nákladné reakčné činidlá, ako sú BOC-ON a EDC. Bolo by preto žiaduce mať k dispozícii kratší postup bez použitia nákladných reakčných činidiel. V priebehu syntézy chirálneho piperazínového medziproduktu však vzniká požadovaný (Sj-piperazínkarboxylátový enantiomér, to znamená prekurzor 2(S)-karboxamidpiperazínových medziproduktov, ako aj nežiaduci (R)-enantiomér, takže je potrebné oddeliť požadovaný (Y)-enantiomér, ktorý sa potom spracováva na výslednú zlúčeninu J. Vzhľadom na to, že nie je k dispozícii ľahký postup na premenu (Ä)-antipódu na (S)-antipód, je táto látka odkladaná do odpadu, čím sa možná účinnosť v tomto stupni znižuje na 50 %. Bolo by teda veľmi žiaduce mať k dispozícii postup, ktorým by bolo možné zvýšiť výťažok (S)-medziproduktu.

V poslednom čase je navrhovaný kratší postup na prípravu látok, opísaných v EP 541 168, najmä na prípravu zlúčeniny J. Pri tomto novom postupe sa pripravuje 1-((//)-2',3'-epoxypropyl-(S)-2-ŕerc-butylkarbonylpiperazin, ktorý sa potom nechá reagovať s V-(2(R)-hydroxy-l(S)-indán-V,O-izopropylidenyl)-3-fenylpropánamidom za vzniku produktu vzorca (8).

Po odstránení ochrannej skupiny BOC z dusíkového atómu piperazínového kruhu sa potom zlúčenina s nechráneným piperazínovým kruhom nechá reagovať s 3-pikolylchloridom za vzniku zlúčeniny J.

Rovnako ako pri skôr opísanom spôsobe výroby inhibítorov HIV proteázy podľa EP 541 168 vedie výroba kľúčového chirálneho piperazínového medziproduktu pri tomto novom postupe stále ešte k získaniu zmesi enantiomérov, z ktorých je potrebné oddeliť (S)-enantiomér, ktorý sa potom spracováva na výsledný produkt. V neprítomnosti použiteľného postupu na premenu nežiaduceho (A)-antipódu na požadovaný (S)-antipód sa opäť látka odkladá do odpadu a možná účinnosť klesá na 50 % a súčasne sa zvyšujú náklady na odvoz a spracovanie odpadu. Bolo by teda veľmi žia2 duce mať k dispozícii postup, ktorým by bolo možné zvýšiť výťažok (S)-piperazínového medziproduktu a znížiť tak náklady na syntézu zlúčeniny J a náklady na vyriešenie problémov so životným prostredím, ktoré vznikajú v dôsledku produkcie veľkého množstva nepoužiteľnej organickej soli.

Racemizácia amidov a peptidov za bázických podmienok je známa a je možné ju uskutočniť deprotonáciou asymetrického atómu uhlíka za vzniku enolátu s následnou reprotonáciou podľa rovnice (1).

V prípade amidov nesúcich heteroatóm v polohe 2 je známe, že k racemizácii môže dôjsť elimináciou heteroatómu, následnou readíciou Michaelovho typu na heteroatóme nenasýtenej časti, ako je zrejmé z nasledujúcej rovnice (2)

X-OR, SR, NR'R,...

Vzhľadom na to, že táto nenasýtená skupina je monomér schopný polymerizácie, získajú sa nízke výťažky racemizovaného produktu, ako je tiež zrejmé z publikácie Advances in Protein Chemistry, Anson M. L., Edsall J. T. a ďalší, zv. IV, Academic Press, New York, 1948, 344 až 356.

Podmienky, ktoré sa typicky používajú na racemizáciu peptidov, nie je možné použiť v prípade 2-/erc-butylkarboxamidpiperazínových derivátov podľa vynálezu vzhľadom na to, že atóm vodíka v polohe a na uhlíkovom atóme piperazínového kruhu sa ťažko odstráni, pretože jeho povaha je len slabo kyslá. Nebolo možné predpokladať, že racemizácia bude účinne a rýchlo uskutočniteľná za týchto miernych podmienok.

Teraz sa neočakávane zistilo, že výťažok požadovaného (Yl-piperazínového medziproduktu vzorca (X), ktorý sa používa pri príprave zlúčeniny J, je možné zvýšiť racemizáciou opticky čistého alebo obohateného 2-íerc-butylkarboxamidpiperazínu a jeho derivátov pôsobením silnej bázy za inak miernych podmienok. Vzhľadom na to, že opticky aktívny 2-terc-butylkarboxamidpiperazín je možné pripraviť rozdelením zodpovedajúcich racemátov, predstavuje racemizácia nežiaduceho antipódu spôsob, ktorým je možné tento antipód vrátiť do postupu na získanie požadovaného antipódu a tým zvýšiť výťažok, znížiť množstvo odpadu a tým znížiť aj celkové náklady na celý postup. Vynález si kladie za úlohu navrhnúť výhodnejší spôsob výroby inhibítorov HÍV-proteázy obsahujúcich 2(S)-karboxamidpiperazínovú skupinu pri vyššom výťažku výsledných látok, zvlášť zlúčeniny J za súčasného zvýšenia podielu požadovaného 2(5)-karboxamidpiperazínového medziproduktu.

Vynález teda navrhuje nové syntetické postupy na výrobu uvedených medziproduktov nevyhnutných na výrobu inhibítorov HÍV-proteázy.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je spôsob racemizácie opticky čistého alebo obohateného 2-terc-butylkarboxamidpiperazínového substrátu všeobecného vzorca (IX) alebo (X), alebo jeho solí

(IX)(X) >

kde

R¹ a R² sa nezávisle volia zo skupiny atóm vodíka, R,

OO

IIII

-C-R _ai_eb₀ -C-OR a

R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl, -CH₂-heteroaryl, aryl a trifluórmetyl, v ktorom sa na substrát všeobecného vzorca (XI) alebo (X), kde substituenty majú uvedený význam, alebo na jeho soľ pôsobí racemizačným činidlom zo skupiny silná báza, bezvodá soľ kovu alebo karboxylová kyselina v rozpúšťadle pri teplote miestnosti až teplote 250 °C.

Vo výhodnom uskutočnení R² znamená atóm vodíka alebo

O

II skupinu -C-OR a R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CHj-aryl alebo -CH₂-heteroaryl.

V ďalšom možnom uskutočnení sa ako racemizačné činidlo použije silná báza zo skupiny alkyllítium, lítiumamid, hydroxid alebo alkoxid alebo Schwesingerova báza.

Výhodnými silnými bázami sú terc-butoxid lítia, sodíka alebo draslíka, n-propoxid lítia, sodíka alebo draslíka, metoxid sodíka alebo draslíka a etoxid sodíka alebo draslíka.

Ako racemizačné činidlo je možné použiť tiež bezvodú soľ kovu zo skupiny chlorid horečnatý, bromid horečnatý, chlorid zinočnatý, chlorid železitý alebo chlorid titaničitý.

V ďalšom možnom uskutočnení môže byť racemizačným činidlom karboxylová kyselina zo skupiny kyselina octová, propiónová, maslová alebo izomaslová.

Postup je možné uskutočňovať vo všetkých prípadoch pri teplote v rozmedzí 50 až 120 °C.

Ako rozpúšťadlo je možné použiť éter, alkán, cykloalkán, alkohol, aromatické zlúčeniny alebo tiež zmes uvedených rozpúšťadiel.

V ďalšom možnom uskutočnení sa rozpúšťadlá volia zo skupiny tetra-hydroíurán THF, cyklohexán alebo propanol, alebo zmes týchto rozpúšťadiel.

V ďalšom možnom uskutočnení sa substrát na reakciu volí zo skupiny

SK 281861 Β6

alebo soli týchto zlúčenín.

Z uvedených látok je možné ako substrát použiť najmä nasledujúce zlúčeniny:

alebo soli týchto zlúčenín.

V ďalšom možnom uskutočnení sa substrát vo forme soli volí zo solí kyseliny pyroglutámovej alebo zo solí kyseliny ga&osulfónovej.

Ďalším príkladom môže byť postup, pri ktorom sa ako substrát použije soľ kyseliny bis-(L)-pyroglutámovej.

Ako ďalší príklad tohto uskutočnenia je možné uviesť postup, pri ktorom sa v prídavnom stupni izoluje (S)-enantiomér 2-íerc-butylkarboxamidpiperazínového derivátu z racemátu.

Ďalším príkladom tohto uskutočnenia môže byť spôsob racemizácie opticky čistého alebo obohateného 2-terc-butylkarboxamidového substrátu všeobecného vzorca (IX) alebo solí tohto substrátu

kde

R¹ je atóm vodíka alebo terc-butyloxykarbonyl a

R² znamená atóm vodíka, v ktorom sa na substrát pôsobí alkoxidom v 1-propanole pri teplote v rozmedzí 50 až 120 °C.

V špecifickom uskutočnení tohto postupu sa použitý alkoxid volí zo skupiny n-propoxid sodíka, draslíka alebo lítia.

Tento n-propoxid sodíka, draslíka alebo lítia je možné pripraviť in situ azeotropným vysušením hydroxidu sodného, draselného alebo lítneho v 1-propanole.

Pri jednom z možných uskutočnení tohto spôsobu sa ako soľ racemizačného činidla použije soľ kyseliny (L)-pyroglutámovej.

Postup dobre prebieha za uvedených podmienok pri teplote v rozmedzí 85 až 120 °C.

Ďalej vynález poskytuje zlúčeniny všeobecného vzorca (XI) a ich soli n c^_nh—

Ŕ^Z O kde

R¹ a R² sa nezávisle volia zo skupiny atóm vodíka, R,

O O ii n

-C-R _ai_eb₀ -C-OR a

R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl, -CH₂-heteroaryl, aryl a trifluórmetyl.

V druhom uskutočnení sa vynález týka racemizácie zlúčenín, v ktorých

O

II

R¹ znamená vodík, R alebo skupinu -C-OR,

O II

R² znamená atóm vodíka alebo skupinu vzorca -G-OR a R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl alebo -CH₂-heteroaryl.

V ďalšom príklade tohto uskutočnenia sa racemizujú zlúčeniny, v ktorých

R² znamená atóm vodíka a

R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka alebo -CH₂-heteroaryl, za predpokladu, že R¹ a R² neznamenajú súčasne atómy vodíka a R¹ má význam odlišný od íerc-butyloxykarbonylovej skupiny.

Ako podskupinu je možné uviesť nasledujúce zlúčeniny a ich soli.

Ďalej budú uvedené niektoré skratky používané v priebehu prihlášky.

Ochranné skupiny:

BOC, Boe Zerc-butyloxykarbonyl

CBZ, Cbz benzyloxykarbonyl, karbobenzoxyskupina TBS, TBDMS íerc-butyldimetylsilyl

Aktivačné skupiny:

Ts, tosyl, tosilát p-toluénsulfonyl

Ns, nosyl, nosylát 3-nitrobenzénsulfonyl

Tf, triflyt, triflát trifluórmetánsulfonyl

Ms, mesyl, mesilát metánsulfonyl

Väzbové činidlá:

BOB	benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfát
BOP-C1	bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosflnchlorid
EDC	l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimid- hydrochlorid
Ostatné: BOC-ON	2-(íerc-butylkarbonyloxyimino)-2-fenylacetonitril
(BOC)₂O alebo
Boc₂0	di-íerc-butyldikarbonát
n-Bu₄N⁺F’ tetrabutylamóniumfluorid
nBuLi, n-Buli	w-butyllítium
(S)-CSA	kyselina (15)-(+)-10-gafrosulfóno vá
DI	deionizovaný
DIEA alebo
DIPEA	diizopropyletylamín
DMAP	dimetylaminopyridín
DME	dimetoxyetán
DMF	dimetylformamid
Et₃N	trietylamín
EtOAc	etylacetát
h	hodina
IPA	2-propanol
KF	Karí Fischerova titrácia na vodu
LDA	lítiumdiizopropylamid
LHMDS	litiumhexametyldisilazid
L-PGA	kyselina (L)-pyroglutámová
r. t.	teplota miestnosti
TFA	kyselina trifluóroctová
TG	tepelná gravimetria, strata teplom
THF	tetrahydrofurán
TLC	chromatografía na tenkej VTstve

V priebehu syntézy zlúčenín schopných spôsobiť inhibíciu HlV-proteázy a zvlášť zlúčeniny J tak, ako sú opísané v EP 541 168, je kľúčovým medziproduktom chirálna zlúčenina, (S)-2-/erc-butylkarboxamidpiperazín vzorca (11) a ich deriváty, to znamená zlúčeniny všeobecného vzorca (X) alebo ich soli. Piperazín vzorca (11) je možné pripraviť z kyseliny 2-pyrazínkarboxylovej vzorca (12) tak, že sa najskôr vytvorí chlorid tejto kyseliny a ten sa potom nechá reagovať s /erc-butylamínom za vzniku pyrazín-2-terc-butylkarboxamidu vzorca (13). Táto látka sa potom hydrogenuje, čím vznikne racemický 2-fórc-butylkarboxamidpiperazín vzorca (14). V tomto stupni je nutné oddeliť od seba enantioméry (S) a (R) tak, aby bolo možné oddeliť požadovaný (Sj-antipód na spracovanie na inhibítor HľV-proteázy podľa uvedeného európskeho patentového spisu, zvlášť na spracovanie na zlúčeninu J. Enantioméry je možné od seba oddeliť známym spôsobom, napríklad pomocou chirálnej HPLC. Oba enantioméry je možné od seba oddeliť tiež tak, že sa pripraví soľ kyseliny bis-(S)-gafrosulfónovej vzorca (15) alebo kyseliny (L)-pyroglutámovej vzorca (16) s použitím racemického 2-íerc-butylkarboxamidpiperazínu vzorca (14).

Pokiaľ nebola k dispozícii praktická metóda na premenu (Ä)-antipódu na požadovaný (S)-antipód, bola táto látka odkladaná do odpadu a možný výťažok tohto stupňa klesal na 50 %. Vynález poskytuje možnosť reakcie tohto antipódu so silnou bázou, bezvodou soľou kovu a/alebo karboxylovou kyselinou za miernych podmienok podľa nasledujúcej schémy 1, čím sa získa vo vysokom výťažku racemát. Po jeho vzniku je opäť možné požadovaný (S)-antipód oddeliť známym spôsobom alebo ďalej uvedeným spôsobom a tak zvýšiť účinnosť a výťažok zlúčeniny J.

Schéma 1

(ix)

Substráty na racemizáciu zahrnujú zlúčeniny

kde R je alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl, -CH₂-heteroaryl, aryl alebo trifluórmetyl.

Výhodnými substrátmi sú nasledujúce látky a ich soli

SK 281861 Β6

Najvýhodnejšími substrátmi sú nasledujúce látky

a ich soli.

Racemizáciu je možné uskutočniť použitím racemizačného činidla, napríklad bezvodej soli horčíka, zinku, železa alebo titánu, karboxylovej kyseliny alebo silnej bázy. Ako príklad bezvodých solí kovov, ktoré je možné pri tomto postupe použiť, je možné uviesť bezvodý chlorid alebo bromid horečnatý, chlorid zinočnatý, chlorid železitý alebo chlorid titaničitý. Z použiteľných karboxylových kyselín je možné použiť kyselinu octovú, propiónovú, maslovú a izomaslovú. Výhodne sú použité silné bázy, napríklad alkyllítium, ako metyllítium, seŕ-butyllítium alebo terc-butyllítium, fenyllítium, amidy lítia, napríklad LDA, LHMDS, hydroxidy, napríklad hydroxid lítny, sodný alebo draselný, alkoxidy alebo Schwesingerove bázy. V prípade, že sa ako silná báza použije hydroxid, je výhodné použitie roztokov vodných hydroxidov v alkoholoch. Ako príklady použiteľných alkoxidov je možné uviesť Zerc-butoxid lítia, sodíka alebo draslíka, n-propoxid lítia, sodíka alebo draslíka, metoxid sodíka alebo draslíka a etoxid sodíka alebo draslíka. Najvýhodnejšie je použitie íerc-butoxidu lítia, sodíka alebo draslíka alebo n-propoxidu lítia, sodíka alebo draslíka. Vo výhodnom uskutočnení sa alkoxid vytvorí in situ azeotropným vysušením roztoku hydroxidu sodného, draselného alebo lítneho spôsobom podľa nemeckého patentového spisu č. DRP 558 469, 1932, v ktorom sa opisuje príprava alkoxidov sodíka azeotropným vysušením roztokov hydroxidu sodného v alkohole.

Z rozpúšťadiel, kompatibilných s reakčnými podmienkami je možné uviesť étery, alkány, alkoholy, cykloalkány a aromatické látky, alebo zmesi týchto rozpúšťadiel. Výhodné sú najmä étery, alkány, alkoholy a ich zmesi. Najvýhodnejšími rozpúšťadlami sú THF, cyklohexán a propanol a ich zmesi.

Racemizáciu je možné uskutočniť pri teplotnom rozmedzí medzi teplotou miestnosti a 250 “C. Výhodné teplotné rozmedzie je 50 až 120 °C, najvýhodnejšie teplotné rozmedzie je 85 až 120 °C.

Racemizáciu podľa vynálezu je možné uskutočniť aj použitím solí uvedených substrátov. Je možné použiť napríklad soľ kyseliny vínnej, dibenzoylvínnej, mandľovej, mliečnej, gafrosulfónovej a pyroglutámovej. Výhodná je najmä soľ kyseliny (5)-gafrosulfónovej alebo kyseliny (L)-pyroglutámovej, najvýhodnejšie sú soli kyseliny (L)-pyroglutámovej.

Praktické uskutočnenie spôsobu podľa vynálezu bude vysvetlené nasledujúcimi príldadmi.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Pyrazín-2-íerc-butylkarboxamid vzorca (13)

Kyselina 2-pyrazínkarboxylová oxalylchlorid

Zerc-butylamín (KF = 460 pg/ml) etylacetát (KF = 56 pg/ml) DMF

1-propanol (12) 3,35 kg, 27 mol

3,46 kg, 27,2 mol

9,36 1,89 mol

271

120 ml

301

Karboxylová kyselina vzorca (12) sa uvedie do suspenzie v 27 litroch etylacetátu a 120 ml DMF v nádobe s objemom 72 litrov s tromi hrdlami a mechanickým miešadlom pod dusíkom a vzniknutá suspenzia sa ochladí na 2 °C. Potom sa pridá oxalylchlorid, pričom teplota zmesi sa udržuje v rozmedzí 5 až 8 °C.

Pridávanie je skončené v priebehu 5 hodín. V priebehu exotermickej reakcie sa vyvinie oxid uhoľnatý a uhličitý. Kyselina chlorovodíková, ktorá sa v priebehu reakcie vytvorí, zostáva prevažne v roztoku. Tvorbu chloridu kyseliny je možné dokázať zmiešaním bezvodej vzorky zmesi s terc-butylamínom. Týmto spôsobom bolo zistené, že po skončení reakcie zostáva v zmesi menej než 0,7 % kyseliny vzorca (12).

Reakciu je možné sledovať pomocou HPLC s použitím stĺpca Dupont Zorbax RXC8 s výškou 25 cm pri prietoku 1 ml/min., detekcia pri 250 nm. Použije sa lineárny gradient 98 % 0,1 % vodnej kyseliny fosforečnej a 2 % metylkyanidu až 50 % vodnej kyseliny fosforečnej a 50 % metylkyanidu v priebehu 30 minút. Čas retencie je 10,7 minút pre kyselinu vzorca (12) a 28,1 minút pre amid vzorca (13).

Reakčná zmes sa nechá stáť jednu hodinu pri teplote 5 °C. Výsledná suspenzia sa ochladí na 0 °C a pridáva sa terc-butylamín takou rýchlosťou, aby vnútorná teplota zmesi zostávala na hodnote nižšej než 20 °C.

Pridávanie trvá 6 hodín vzhľadom na to, že reakcia je veľmi exotermická. V priebehu pridávania sa vylúči malý podiel vytvoreného tor-butylamóniumchloridu z reakčnej zmesi ako vločkovitá biela tuhá látka.

Zmes sa nechá stáť ešte 30 minút pri teplote 18 °C. Vyzrážané amóniové soli sa odfiltrujú. Filtračný koláč sa premyje 12 litrami etylacetátu. Organické fázy sa spoja, premyjú sa 6 litrami trojpercentného hydrogenuhličitanu sodného a 2 x 2 litrami nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. K organickej fáze sa pridá 200 g aktívneho uhlia Darco G60, potom sa organická fáza prefiltruje cez vrstvu Solka Flok a filtračný koláč sa premyje 4 litrami etylacetátu. Týmto spracovaním zmesi pomocou aktívneho uhlia je možné účinne odstrániť purpurové zafarbenie výsledného produktu.

Roztok etylacetátu vzorca (13) sa zahustí pri tlaku 1 kPa až na 25 % pôvodného objemu. Pridá sa 30 litrov 1-propanolu a v destilácii sa pokračuje až do dosiahnutia konečného objemu 20 litrov.

Vnútorná teplota pri tejto výmene rozpúšťadiel je nižšia než 30 °C. Roztok zlúčeniny vzorca (13) v zmesi 1-propanolu a etylacetátu je stály pri atmosférickom tlaku niekoľko dní pri teplote varu pod spätným chladičom.

Odparením podielu zmesi sa získa špinavobiela tuhá látka s teplotou topenia 87 až 88 °C.

¹³C-NMR (75 MHz, CDClj, ppm): 161,8, 146,8, 145,0, 143,8,142,1,51,0,28,5.

Príklad 2

Racemický 2-terc-butylkarboxamidpiperazín vzorca (14)

H;>ZPd(OH)₂

CONHt-Bu (13)

CONHt-Bu ^H (14)

Materiály

2,4 kg, 13,4 mol pyrazín-2-terc-butylkarboxamidu vzorca (13) vo forme roztoku v 12 litroch 1-propanolu, 16 % hmotnostných 20 % hydroxidu paladnatého na aktívnom uhlí, 144 g vody.

Roztok pyrazín-2-terc-butylkarboxamidu vzorca (13) v 1-propanole sa vloží do autoklávu s objemom 18 litrov. Pridá sa katalyzátor a zmes sa hydrogenuje pri teplote 65 °C a tlaku vodíka 0,3 MPa.

Po 24 hodinách reakcie dochádza k príjmu teoretického množstva vodíka a plynovou chromatografiou GC je možné dokázať menej než 1 % východiskovej látky vzorca (13). Zmes sa ochladí, prepláchne sa dusíkom a katalyzátor sa odstráni filtráciou cez vrstvu Solka Flok a potom sa premyje 2 litrami teplého 1-propanolu.

Reakcia sa sleduje pomocou GC s použitím stĺpca Megabore s dĺžkou 30 m pri teplote stúpajúcej od 100 do 160 °C vždy 10 °C/minútu, potom sa teplota udržuje 5 minút, potom opäť stúpa o 10 °C/minútu až do teploty 250 °C. Čas retencie je 7,0 minút pre východiskovú látku vzorca (13) a 9,4 minút pre produkt vzorca (14). Reakciu je tiež možné sledovať pomocou chromatografie na tenkej vrstve, tlc s použitím zmesi etylacetátu a metanolu v pomere 50 : 50 ako rozpúšťadla v ninhydríne ako vyvíjacieho činidla.

Po odparení podielu zmesi sa získa produkt vzorca (14) ako biela tuhá látka s teplotou topenia 150 až 151 °C. ^I3C-NMR (75 MHz, D₂O, ppm): 173,5, 59,8, 52,0, 48,7, 45,0,44,8, 28,7.

Príklad 3

Soľ (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s 2 molekulami kyseliny (S)-gafrosulfónovej, vzorec (15)

A

N CONHt-Bu H (147

2(+)-CSA

(+)-CSA

CONHt-Bu )

Materiály

Racemický 2-íerc-butylkarboxamid-piperazín (14) 4, v 1-propanole ako rozpúšťadle kyselina (S)-(+)-10-gafrosulfónová 1-propanol acetonitril voda kg, 22,12 mol

25,5 kg

10,0 kg, 43,2 mol

121

391

2,41

Roztok amínu vzorca (14) v 1-propanole sa vloží do nádoby s objemom 100 litrov, vybavenej zariadením na zahustenie zmesi. Roztok sa odparuje pri teplote nižšej než °C a tlaku 1 kPa až na objem približne 12 litrov.

Po dosiahnutí tohto objemu sa začne produkt zrážať z roztoku, ale po zahriatí zmesi na 50 °C sa opäť rozpustí.

Pridá sa 39 litrov acetonitrilu a 2,4 1 vody, čím vznikne číry hnedastý roztok.

Kyselina (S)-10-gafrosulfónová sa pridá v priebehu 30 minút pri teplote 20 °C v 4 podieloch. Po skončenom pridaní stúpne teplota zmesi na 40 °C. Po niekoľkých minútach sa vytvorí masívna biela zrazenina. Biela suspenzia sa zahreje na 76 °C, čím dôjde k rozpusteniu všetkých tuhých súčastí a hnedastý roztok sa potom nechá 8 hodín ochladiť až na 21 °C.

Pri teplote 62 °C sa začne produkt zrážať. Vzniknutý produkt sa po dosiahnutí teploty 21 °C odfiltruje bez ďalšieho státia zmesi a filtračný koláč sa premyje 5 litrami zmesi metylakyanidu, 1-propanolu a vody v pomere : 8 : 1,6. Potom sa filtračný koláč suší pri teplote 35 °C pod dusíkom vo vákuu, čím sa získa výsledný produkt vzorca (15) ako biela kryštalická tuhá látka s teplotou topenia 288 až 290 °C za rozkladu.

[a]_D ^2í= 18,9, (c = 0,37, voda).

¹³C-NMR (75 MHz, D₂O, ppm): 222,0, 164,0, 59,3, 54,9, 53,3, 49,0, 48,1, 43,6, 43,5, 43,1, 40,6, 40,4, 28,5, 27,2, 25,4,19,9,19,8.

Prebytok diastereoméru, de, bol 95 % podľa nasledujúceho výsledku HPLC. Podiel 33 mg produktu vzorca (15) sa uvedie do suspenzie v zmesi 4 ml etanolu a 1 ml trietylamínu. Pridá sa 11 mg Boc₂O a reakčná zmes sa nechá 1 hodinu stáť. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu a odparok sa rozpustí v približne 1 ml etylacetátu a prefiltruje cez Pasteurovu pipetu s obsahom oxidu kremičitého, ako elučné činidlo sa použije etylacetát. Frakcia produktu po odparení sa znova rozpustí v hexánoch v množstve približne 1 mg/ml. Enantioméry sa oddelia na stĺpci Daicel Chiracel AS s použitím zmesi hexánu a IPA v pomere 97 : 3, rýchlosť prietoku je 1 ml/minútu, detekcia pri 228 nm. Čas retencie je 7,4 minút pre antipód S a 9,7 minút pre antipód R.

Príklad 4

Príprava (6)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazínu vzorca (1) zo soli vzorca (15)

SK 281861 Β6

Soľ (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s dvoma molekulami kyseliny (L)-pyroglutámovej vzorca (16) ^NS *2{+)-CSA (_Boc)₂q

CONHt-Bu

H (15)

Materiály

Soľ(S)-2-/erc-butylkarboxamidpiperazínu s 2x (Ý)-(+)-CSA vzorca (15), 95 % ee 5,54 kg, 8,53 mol di-terc-butyldikarbonát 1,86 kg, 8,53 mol trietylamín 5,95 1,42,6 mol etanol, presne 200 proof 55 1 etylacetát 21

K soli (5)-CSA vzorca (15) v nádobe s objemom 100 litrov s tromi hrdlami a s pridávacím lievikom sa pod dusíkom vloží etanol a pri teplote 25 °C sa pridá trietylamín. Tuhý podiel sa rýchlo rozpustí po pridaní trietylamínu. Boc₂O sa rozpustí v etylacetáte, vloží do pridávacieho lievika a pridáva sa k zmesi takou rýchlosťou, aby teplota bola udržovaná pod 25 °C. Pridávanie trvá 3 hodiny. Po skončenom pridávaní sa zmes nechá stáť ešte 1 hodinu.

Priebeh reakcie je možné sledovať pomocou HPLC s použitím stĺpca Dupont Zorcax RXC8 s výškou 25 cm pri prietoku 1 ml/minútu a detekcii pri 228 nm, ako rozpúšťadlo sa použije zmes metylkyanidu a 0,1 M dihydrogenfosforečnanu draselného 50 : 50 po úprave pH na 6,8 pridaním NaOH. Čas retencie produktu vzorca 1 je 7,2 minút. Chirálna skúška bola vykonávaná rovnako ako v predchádzajúcom stupni. Priebeh reakcie je možné sledovať aj pomocou TLC s použitím 100 % etylacetátu, Rf = 0,7.

Roztok sa potom zahustí na približne 10 litrov pri vnútornej teplote nižšej než 20 °C a pri tlaku 1 kPa. Výmena rozpúšťadla sa uskutoční tak, že sa zmes pomaly vleje do 20 litrov etylacetátu a potom sa znova zahustí na približne 10 litrov. Potom sa zmes premyje v extrakčnom zariadení 60 litrami etylacetátu. Organická fáza sa premyje 16 litrami 5 % vodného roztoku uhličitanu sodného, 2 x 10 litrami deionizovanej vody a 2 x 6 1 nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Vodné podiely sa spoja, spätne sa extrahujú 20 litrami etylacetátu, organická fáza sa potom premyje 2x3 litrami vody a 2 x 4 litrami nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Spojené etylacetátové extrakty sa zahustia pri tlaku 1 kPa pri vnútornej teplote pod 20 °C v koncentračnom zariadení s objemom 100 litrov na objem približne 8 litrov. Rozpúšťadlo sa nahradí cyklohexánom vliatím zmesi do 20 litrov cyklohexánu a opätovným zahustením na približne 8 litrov. K vzniknutej suspenzii sa pridá 5 litrov cyklohexánu a 280 ml etylacetátu, zmes sa zahreje na teplotu varu pod spätným chladičom, čím sa tuhý podiel rozpustí. Roztok sa ochladí a pridá sa pri teplote 58 °C celkom 10 g výslednej látky ako očkovacieho materiálu, suspenzia sa potom ochladí v priebehu 4 hodín až na 22 °C a po jednej hodine státia pri tejto teplote sa produkt odfiltruje. Filtračný koláč sa premyje 1,8 litrami cyklohexánu a potom sa suší vo vákuu pod dusíkom pri teplote 35 °C, čim sa získa produkt vzorca (1) vo forme špinavobieleho prášku, plocha pod krivkou pri HPLC je viac než 99,9 %, obsah izoméru R je pod hranicou detekcie. [a]_D ²⁵ = 22,0, (c = 0,20, metanol), teplota topenia 107 °C. ^I3C-NMR (75 MHz, CDClj, ppm): 170,1, 154,5, 79,8, 58,7, 50,6,46,6,43,6,43,4,28,6,28,3.

Príklad 5

H

CONHt-Bu

H (14)

L-PGA

H

*2 L-PGA

CONHt-Bu

H (16)

Materiály

Racemický 2-terc-butylkarboxamid· piperazín vzorca

1-propanol ako rozpúšťadlo kyselina L-pyroglutámová voda

0,11 mol 21,1 g

155 ml g, 0,21 mol ml

Roztok racemického 2-rerc-butylkarboxamidpiperazínu vzorca (14) v 1-propanole sa vloží do nádoby s okrúhlym dnom s objemom 500 ml, vybavenej spätným chladičom, mechanickým miešadlom a prívodom na dusík. Spolu s kyselinou L-pyroglutámovou sa pridá voda a vzniknutá suspenzia sa zahreje na teplotu varu pod spätným chladičom. Vznikne homogénny žltý roztok, ktorý sa potom ochladí na 50 °C a pridá sa 50 mg soli R-amidu s kyselinou (L)pyroglutámovou ako očkovací materiál. Okamžite sa začne tvoriť tuhý podiel. Roztok sa ďalej ochladí až na 25 °C a pri tejto teplote sa nechá stáť 16 hodín. Tuhý podiel sa odfiltruje pri teplote 22 °C a filtračný koláč sa premyje 35 ml chladného 1-propanolu s 1 % vody. Filtračný koláč sa potom suší pod dusíkom vo vákuu pri teplote 35 °C, čím sa vo výťažku 48 % získa 23,74 g soli (R)-2-fórc-butylkarboxamidpiperazínu s 2 molekulami kyseliny (Z)-pyroglutámovej. Materiál mal ee 98 % podľa chirálnej HPLC, vykonanej už uvedeným spôsobom. Žltý materský lúh obsahoval vo výťažku 46 % celkom 22,6 g soli (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s 2 molekulami tej istej kyseliny vzorca (16), produkt mal ee 95 % podľa chirálnej HPLC. Materský lúh bol odparený a priamo použitý na postup v príklade 6.

Príklad 6

Príprava (S)-2-terc-butylkíarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazínu vzorca (1) zo soli vzorca (16)

CONHt-Bu (16) ^{2 L}’^PGA (Boc)₂O

Boe

Q

N CONHt-Bu

H (D

Materiály soľ (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s 2x kyselinou (L)-pyroglutámovou, 95 % ee di-terc-butyldikarbonát trietylamín

-propanol etylacetát

22,6 g, 50,1 mmol 11,1 g, 50,1 mmol

35,5 ml, 0,254 mol 226 ml ml teplotu varu pod spätným chladičom. Analýzou vzorky je možné dokázať pokles ee na 50 %.

K soli (5)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s 2 molekulami kyseliny (L)-pyroglutámovej sa v nádobe s objemom 500 ml s tromi hrdlami a s pridávacím lievikom pod dusíkom pridá 1-propanol. Potom sa pridá ešte trietylamín, čím dôjde k rozpusteniu vzniknutej tuhej gumovitej látky. Potom sa v priebehu 2 hodín pri teplote 22 °C pridá roztok Boc₂O v etylacetáte a po skončenom pridávaní sa zmes ešte 1 hodinu nechá stáť.

Priebeh reakcie je možné sledovať pomocou HPLC a TLC rovnakým spôsobom, ako pri premene zlúčeniny vzorca (15) na výsledný produkt vzorca (1).

Roztok sa zahustí a rozpúšťadlo sa nahradí 200 ml etylacetátu. Reakčná zmes sa premyje 50 ml 7 % vodného roztoku uhličitanu sodného, 2 x 30 ml vody, vysuší sa síranom sodným a prefiltruje sa. Etylacetátový roztok sa zahustí a rozpúšťadlo sa nahradí 60 ml cyklohexánu. Pridá sa 1 ml etylacetátu a zmes sa varí pod spätným chladičom na rozpustenie všetkých tuhých látok. Potom sa zmes ochladí a po dosiahnutí teploty 52 °C sa pridá 50 mg očkovacieho materiálu. Vzniknutá suspenzia sa v priebehu 2 hodín ochladí až na 22 °C a po 1 hodine státia pri tejto teplote sa produkt odfiltruje. Filtračný koláč sa premyje 8 ml cyklohexánu a suší sa vo vákuu pod dusíkom pri teplote 35 °C, čím sa získa produkt vzorca (1) ako špinavobiely prášok, plocha pod krivkou pri HPLC je väčšia než 99,9 %, množstvo izoméru R je pod hranicou detekcie.

Príklad 7

Racemizácia (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazínu vzorca (1) pôsobením silnej bázy

(D

A. Použitím terc-butoxidu draselného ako racemizačného činidla (5)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazín, 99,4 % ee 0,416 g

M terc-butoxid draselný v terc-butanole 0,04 ml cyklohexán 7,3 ml

K suspenzii enantioméme čistého piperazínového derivátu vzorca (1) v cyklohexáne sa pridá terc-butoxid draslíka a zmes sa 1 hodinu varí pod spätným chladičom. Po ochladení na teplotu miestnosti sa vytvorí biela zrazenina, ktorá sa odfiltruje, čím sa získa 405 mg racemického 2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazínu.

B. Použitím n-butyllítia ako racemizačného činidla (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazín, 99,4 % ee 0,421 g

2,0 M n-butyllítium v cyklohexáne 0,37 ml cyklohexán 7,5 ml

K suspenzii enantioméme čistého piperazínového derivátu vzorca (1) v cyklohexáne sa pomaly a za chladenia ľadom pridá roztok n-butyllítia. Zmes sa zahrieva cez noc na

C. Použitím Schwesingerovej bázy (5)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazín, 99,4 % ee

M l-terc-oktyl-4,4,4-tris-(dimetylamino)-2,2-bis[tris-(dimetylamino)fosforanylidénamino]-2,4-katenadi(fosfazén) v hexáne (Schwesingerova báza) metylcyklohexán

0,342 g

0,09 ml

6ml

Enantioméme čistý piperazínový derivát vzorca (1) sa varí pod spätným chladičom 14 hodín so Schwesingerovou bázou. Analýzou vzorky je možné dokázať, že prebytok enantioméru sa zníži na 52 %.

Príklad 8

Racemizácia (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazínu vzorca (1) pôsobením karboxylovej kyse-

Použitie kyseliny octovej ako racemizačného činidla (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazín, 99,4 % ee 0,441 g kyselina octová 7,73 ml

Enantioméme čistý piperazínový derivát vzorca (1) sa zahrieva 12 hodín v kyseline octovej na teplotu 100 °C. Po ochladení na 22 °C sa kyselina octová odstráni odparením vo vákuu, čím sa získa 430 mg bielej tuhej látky. Stanovením hodnoty ee je možné dokázať pokles na 68 %.

Príklad 9

Racemizácia (S)-2-rerc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazínu vzorca (1) bezvodou soľou kovu

(1)

Použitie chloridu horečnatého ako racemizačného činidla (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butyloxykarbonylpiperazín, 99,4 % ee 0,430 g bezvodý chlorid horečnatý 0,03 g etylénglykoldietyléter 50 ml

Enantioméme čistý piperazínový derivát vzorca (1) a bezvodý chlorid horečnatý sa zahrievajú 12 hodín na teplotu 100 °C v etylénglykoldietyléteri. Odstránením podielu reakčnej zmesi a jeho analýzou je možné dokázať, že došlo k poklesu ee na 97 %.

Príklad 10

Racemizácia (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínu s dvoma molekulami kyseliny (S)-gafro-10-sulfónovej silnou bázou

(14) (15)

Použitie íerc-butoxidu draslíka ako racemizačného činidla (Ä)-2-rerc-butylkarboxamid-4-furopikolylpiperazín, 99,3 % ee 1,87 g

1,7 M ŕerc-butoxid draslíka v THF 0,02 ml

THF 25 ml

Použitie /erc-butoxidu draslíka ako racemizačného činidla soľ vzorca 15,99,3 % de 0,559 g

1,72 M íerc-butoxidu draslíka v THF 1,25 ml metylcyklohexán 9 ml

Diastereoméme čistá soľ piperazínového derivátu s kyselinou gafrosulfónovou vzorca (15) sa uvedie do suspenzie v metylcyklohexáne a pridá sa roztok terc-butoxidu draslíka v THF. Potom sa reakčná zmes zahrieva 12 hodín na teplotu 80 °C. Analýzou vzorky je možné dokázať, že čistota enantioméru piperazínového derivátu poklesla na 32 %.

Príklad 11

Racemizácia soli kyseliny (15)-gafro-10-sulfónovej s (S)-2-terc-butylkarboxamidpiperazínom vzorca (15) pôsobením karboxylovej kyseliny

(15)

-CSA (1)116°C AcOH (2) NaOH

Použitie kyseliny octovej ako racemizačného činidla soľ (S)-íerc-butylkarboxamidpiperazínu s kyselinou (lAj-gafro-lO-sulfónovou vzorca(15), 99%de 2,14 g ľadová kyselina octová 10 ml

Diastereoméme čistá soľ piperazínového derivátu s kyselinou gafrosulfónovou vzorca (15) sa zohrieva 66 hodín v kyseline octovej na 116 °C. Po ochladení na 25 °C sa zmes zriedi 30 ml THF, pH sa upraví na 9,5 pridaním 50 % NaOH a zmes sa extrahuje 3 x 50 ml etylacetátu. Spojené organické fázy sa vysušia bezvodým síranom horečnatým a odparia na voľnú bázu vzorca (14). Je možné dokázať pomocou HPLC pokles ee na 71 %.

Príklad 12

Racemizácia (R)-2-rerc-butylkarboxamid-4-furopikolylpiperazínu pôsobením silnej bázy

Enantioméme čistý (Ä)-2-/erc-butylkarboxamid-4-furopikolylpiperazín sa rozpustí v THF a pridá sa terc-butoxid draslíka. Roztok sa 3 hodiny varí pod spätným chladičom, po tomto čase je možné pomocou chirálnej HPLC dokázať, že materiál je v racemickej forme.

Príklad 13

Racemizácia (7?)-2-ŕerc-butylkarboxamid-4-(3-pikolyl)piperazínu pôsobením silnej bázy

Použitie (erc-butoxidu draslíka ako racemizačného činidla (R)-2-/erc-butylkarboxamid-4-(3-pikolyl)-piperazín, 99,3 % ee 0,67 g

1,7 M Zerc-butoxid draslíka v THF 0,01 ml

THF 21 ml

Enantioméme čistý (R)-2-íerc-butylkarboxamid-4-(3-pikolyljpiperazín sa rozpustí v THF a pridá sa íerc-butoxid draslíka. Roztok sa 4 hodiny varí pod spätným chladičom, po tomto čase je možné pomocou chirálnej HPLC dokázať, že materiál je už v racemickej forme.

Príklad 14

Kombinácia racemizácie soli (R)-2-íerc-butylkarboxamidpiperazínu s dvoma molekulami kyseliny (L)-pyroglutámovej a delenie zmesi

A. Racemizácia v zmesi cyklohexánu a THF

Soľ (Ä)-2-íerc-butylkarboxamid-piperazínu s kyselinou (L)-pyroglutámovou, 17

97,9 % R, 1,03 % S, 3,4 % TG % vodný NaOH

214,98 g, 0,468 mol ml

1-propanol voda ml ml

Je tiež možné dosiahnuť túto racemizáciu pridaním roztoku propoxidu sodíka alebo draslíka v 1-propanole.

Príklad 15

Kombinácia racemizácie soli (R)-2-íerc-butylkarboxamidpiperazínu s kyselinou (L)-pyroglutámovou vzorca (17) a delenie tetrahydrofiirán nasýtený vodný roztok uhličitanu draselného

M terc-butoxid draslíka v íerc-butanole

700 ml ml

12,1mi

Nežiaduci (Ä)-enantiomér soli vzorca (17) z príkladu 5 sa rozpustí v zmesi 1-propanolu, vody a hydroxidu draselného v deliacom lieviku. K dvojfázovému systému sa pridá 700 ml THF a vodná fáza sa oddelí. Organická fáza sa premyje 2 x 25 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu draselného. Organický roztok sa prenesie do nádoby s objemom 1 liter s tromi hrdlami s mechanickým miešadlom a destilačným zariadením. Za atmosférického tlaku sa THF nahradí cyklohexánom zahustením na 250 ml a pridaním 700 ml cyklohexánu s opätovným zahustením na 250 ml. Po pridaní 150 ml THF a ŕerc-butoxidu draslíka sa svetlá suspenzia 7 hodín varí pod spätným chladičom. Potom sa suspenzia v priebehu 2 hodín ochladí až na 2 °C, prefiltruje sa a prvý podiel sa premyje 2 x 40 ml cyklohexánu. Vo výťažku 96 % sa získa 82,94 g bieleho kryštalického prášku (99,7 % hmotnostných, 50,8 % R, 49,2 % S).

Racemický materiál je možné rozdeliť s použitím

1,8 ekvivalentu kyseliny (L)-pyroglutámovej v zmesi 1-propanolu a vody podľa príkladu 5.

B. Racemizácia v 1-propanole

Soľ (R)-2-íerc-butylkarboxamid-piperazínu s kyselinou (L)-pyroglutámovou, % vodný roztok NaOH voda

1-propanol nasýtený vodný roztok uhličitanu draselného

1,72 M terc-butoxid draslíka v THF

29,62 g, 64,6 mmol

11,7 ml

11,7 ml ml

10ml l,15ml

Amín vo forme soli vzorca (17) sa rozpustí v deliacom lieviku v zmesi vody a 1-propanolu zahriatím na 40 °C. Po pridaní hydroxidu sodného sa vytvorí druhá fáza. Vodná fáza sa premyje 2 x 5 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu draselného.

Pomocou HPLC je možné dokázať, že 95 % amínu bolo extrahovaných do organickej fázy.

Roztok amínu v 1-propanole sa vloží do destilačnej banky a pridá sa 200 ml bezvodého propanolu. Roztok sa destiluje za atmosférického tlaku tak dlho, až teplota rozpúšťadla prekročí 98 °C a hodnota KF odobratého podielu poklesne na 0,350 mg/ml.

Destilačné zariadenie sa nahradí spätným chladičom a pridá sa 1,15 ml, 1,72 M roztoku rerc-butoxidu draslíka. Roztok sa varí pod spätným chladičom. Chirálnou analýzou je možné dokázať, že po 17 hodinách varu pod spätným chladičom je amín racemický (50 % R, 50 % S). Racemický materiál je možné rozdeliť s použitím 1,8 ekvivalentu kyseliny (L)-pyroglutámovej v zmesi 1-propanolu a vody rovnako ako v príklade 5.

Racemizácia v 1-propanole prípravou alkoxidu in situ

Soľ (L)-piperazín-2-terc-butylkarboxamidu s kyselinou L-pyroglutámovou vzorca (17)

1-propanol vodný roztok hydroxidu sodného 50 % hmotn.

voda

188,9 g, 0,42 mol (TG = 3,4 %)

950 ml

250 g

300 g

Soľ vzorca (17) sa rozpustí v zmesi 1-propanolu, hydroxidu sodného a vody v deliacom lieviku. Vytvorí sa ešte spodná fáza, ktorá sa oddelí.

Spodná fáza obsahovala väčšinu L-PGA, zatiaľ čo horná fáza v 1-propanole obsahovala 79,0 g piperazínu podľa HPLC pri výťažku 100 %. V organickej fáze bolo obsiahnutých tiež 4,5 % molámych L-PAG a 33 % molámych NaOH podľa titrácie kyselinou chlorovodíkovou.

Organická fáza bola azeotropne vysušená až do hodnoty KF 0,259 mg/ml. V tomto okamihu už bolo možné dokázať, že materiál je racemický (50 % R, 50 % S).

Potom bolo pri teplote 60 °C k roztoku pridaných 13,9 g tuhého hydrogenuhličitanu draselného a 50 ml vody a roztok bol ešte 30 minút miešaný. Došlo k vylúčeniu tuhej fázy, ktorá bola odfiltrovaná.

Zvyšný 1-propanolový roztok bol zbavený akejkoľvek silnej bázy a je možné uskutočniť delenie za opísaných podmienok, napríklad podľa príkladu 5.

Príklad 16 l-((R)-2',3'-epoxypropyl)-(S)-2-terc-butylkarboxamid-4-íerc-butoxykarbonylpiperzín vzorca (3)

ΒοονΆ r4^SA- ΒοονΆ _n ‘v ^h Aľi α<ϊ t-Bu-NH^O t-Bu-NH^O (1) ^í3)

SK 281861 Β6

Materiály (ó')-2-/erc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazín vzorca (1) 11,0 g, 3 8,4 mmol (2S)-(+)-glycidyl-3-nitrobenzénsulfonát 2 9,96 g, 3 8,4 mmol diizopropyletylamín 5,5 ml, 42,2 mmol

DMF 38 ml

Piperazín vzorca (1) a (2S)-(+)-glycidyl-3-nitrobenzénsulfonát vzorca (2) sa rozpusti v banke s objemom 250 ml pod dusíkom s použitím magnetického miešadla v zmesi DMF a DIEA. Výsledný homogénny roztok sa zohrieva 9 hodín na teplotu v rozmedzí 60 až 62 °C.

Pomocou TLC s použitím 100 % etylacetátu ako elučného činidla a ninhydrínu ako farbiva je možné dokázať úplnú spotrebu piperazínu vzorca (1).

Reakcia sa ukončí pridaním 30 ml 5 % vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Reakčná zmes sa extrahuje 400 ml izopropylacetátu. Organická fáza sa premyje 3 x x 50 ml vody a 1 x 50 ml nasýteného vodného roztoku chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí, čím sa získa žltý olej. Tento olej sa podrobí rýchlej chromatografii na stĺpci oxidu kremičitého s rozmerom 4 x 20 cm, na elúciu sa použije gradient etylacetátu a hexánu 30 : 70 až 60 : 40 a frakcia s obsahom produktu sa odparí, čím sa vo výťažku 71 % získa 9,24 g produktu vzorca (3) vo forme oleja.

[ajo²⁵ = 17,7 (c = 0,12, metanol).

¹³C-NMR (100 MHz, CDClj, ppm pre hlavný rotamér): 170,0, 154,1, 80,2, 66,7, 56,3, 51,7, 50,8, 50,2, 47,0, 44,0,

41,9,28,3,28,1.

Príklad 17

Príprava epoxidu vzorca (3) z piperazínu vzorca (1) a (S)-glycidolu vzorca (4)

BocN'^Z'^X| l-Bu-NH^O

2) TsCI

3) NaH (D

2,00 g, 7,00 mmol piperazínu vzorca (1) a 930 mikrolitrov, 14,0 mmol (S)-glycidolu vzorca (4) sa varí pod spätným chladičom 17 hodín v izopropanole a potom sa zmes delí medzi 100 ml etylacetátu a 50 ml vody. Vrstvy sa oddelia, etylacetátová vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a odparí na 2,4 g gumovitého materiálu. Podiel 241 mg tohto materiálu sa nechá reagovať s 2 ml pyridínu a 130 mg, 0,68 mmol p-toluénsulfonylchloridu cez noc, potom sa zmes odparí na olej, ktorý sa delí medzi 25 ml etylacetátu a 10 ml vody. Etylacetátová vrstva sa premyje nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a odparí na olej. Tento surový olej sa rozpustí v 2 ml THF a spracováva sa pôsobením 100 mg 60 % disperzie hydridu sodíka v oleji. Po jednej hodine sa zmes delí medzi 50 ml etylacetátu a 10 ml vody. Etylacetátová vrstva sa vysuší síranom horečnatým a odparí sa, čím sa získa požadovaný epoxid vzorca (3), spektrálne údaje sú už uvedené.

Príklad 18

Príprava naviazaného produktu vzorca (8) z amidu vzorca (7) a epoxidu vzorca (3)

Roztok 216 mg, 0,67 mmol acetonidu vzorca (7) (ktorý je možné vyrobiť podľa postupu z US patentového spisu č. 5 169 952 z 8. decembra 1992) a 229 g, 0,67 mmol, 1,0 ekvivalentu .V-Boc-piperazínepoxidu vzorca (3) v 3,5 ml THF (KF = 22 mikrogramov/ml, ide o Karí Fischerovu titráciu vody) v banke s objemom 100 ml s okrúhlym dnom, vybavenej teplomerom, magnetickým miešadlom a prívodom na dusík sa pod dusíkom ochladí až na -78 °C. Potom sa pridá roztok 0,9 ml, 1,6 M, 2,1 ekvivalentu n-butyllítia v hexánoch, pričom v priebehu pridávania sa vnútorná teplota zmesi udržuje v rozmedzí -78 až -73 °C. Reakčná zmes sa ešte 1 hodinu mieša pri teplote -76 °C a potom sa v priebehu 1 hodiny nechá otepliť na -25 °C. Potom sa zmes mieša ešte 2,5 hodiny pri teplote -25 až -22 °C. Po tomto čase sa k zmesi pridá 5 ml deionizovanej vody pri teplote -15 °C, potom sa pridá 20 ml etylacetátu na rozdelenie zmesi. Zmes sa premieša a vrstvy sa oddelia. Etylacetátový extrakt sa premyje 10 ml nasýteného vodného roztoku chloridu sodného a potom sa odparí za zníženého tlaku 4 kPa, čím sa získa surový produkt, ktorý sa chromatografúje na stĺpci silikagélu s použitím zmesi etylacetátu a hexánu v pomere 3 : 2, čím sa vo výťažku 20 % získa 84 mg naviazaného produktu vzorca (8) vo forme svetložltého sirupu.

^I3C-NMR (CDCIj, 75,4 MHz): 172,6, 170,2, 154,6, 140,8, 140, 4, 139,6, 129,5, 128,8, 128,1, 127,2, 126,8, 125,6,

124,1, 96,7, 80,4, 79,2, 65,9, 65,8, 62,2, 51,3, 50,1, 45,3, 39,5,39,1,36,2,28,8,28,4,26,5,24,2.

Príklad 19

SK 281861Β6

K roztoku 5,79 g, 8,73 mmol zlúčeniny vzorca (8) v 25,5 ml izopropanolu sa pri teplote 0 °C pridá 20 ml 6 M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a po 15 minútach ešte 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Po 1 hodine sa zmes zahreje na 20 °C a pri tejto teplote sa nechá stáť 4 hodiny. Potom sa zmes ochladí na 0 °C a pH sa upraví na 12,5 pridaním 13 ml 50 % vodného roztoku hydroxidu sodného, pričom teplota sa udržuje na hodnote najviac 29 °C. Potom sa zmes extrahuje 2 x 80 ml etylacetátu, extrakty sa vysušia síranom horečnatým a odparia sa, čím sa získa 5,46 g produktu vzorca (9) vo forme bezfarebnej peny.

^l3C-NMR (75,4 MHz, CDC1₃): 175,2, 170,5, 140,8, 140,5, 139, 9, 129,1, 128,5, 127,9, 126,8, 126,5, 125,2, 124,2, 73,0, 66,0, 64,8, 62,2, 57,49, 47,9, 46,4, 45,3, 39,6, 39,3, 38,2,28,9.

Príklad 20

Príprava monohydrátu zlúčeniny J

Zlúčenina J

K roztoku zlúčeniny vzorca (9) v etylacetáte (10,5 1, KF = 10 mg/ml) z predchádzajúceho stupňa sa pridá 20 litrov DMF, sušeného pomocou molekulového sita (KF je nižšie než 30 mg/1) a zmes sa zahrieva na parnom kúpeli vo vákuu na oddestilovanie vody a/alebo akéhokoľvek zvyšného izopropanolu alebo etylacetátu. Konečný objem koncentrátu bol 13,5 litrov (KF = 1,8 mg/ml). Potom bolo k roztoku pri teplote 25 °C pridaných 2,86 1, 20,51 mol trietylamínu a potom ešte 1287 g, 96 % 3-pikolylchloridhydrochloridu (7,84 mol). Výsledná suspenzia bola zahriata na68°C.

Postup reakcie bol sledovaný pomocou HPLC za tých istých podmienok ako v predchádzajúcom stupni. Bolo možné dokázať nasledujúce časy retencie:

Čas retencie (min.) Zlúčenina _ __

4,2 3-pikolylchtorid

4,8 zlúčenina J

9,1 výsledná látka vzorca 9

Zmes bola ponechaná pri teplote 68 °C tak dlho, až bolo možné pomocou HPLC dokázať zlúčeninu vzorca (9) v množstve nižšom než 0,3 % plochy pod krivkou. Pre HPLC bol použitý stĺpec Dupont C8-RX s výškou 25 cm, zmes acetonitrilu a 10 mM zmesi dihydrogenfosforečnanu a hydrogenfosforečnanu draselného 60 : 40, prietok 1,0 ml/min., detekcia pri 220 nm.

Zmes bola miešaná pri 68 °C celkom 4 hodiny, potom bola ochladená na 25 °C a rozdelená medzi 80 litrov etylacetátu a zmes 24 litrov nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 14 litrov destilovanej vody. Po premiešaní zmesi pri teplote 55 °C boli vrstvy oddelené. Etylacetátová vrstva bola pri teplote 55 °C premytá 3 x 201 vody a potom odparená za atmosférického tlaku na konečný objem 30 litrov. Na konci tohto zahustenia bolo k horúcemu roztoku pridaných 560 ml vody a zmes bola ochladená na 55 °C, potom bolo pridané malé množstvo monohydrátu zlúčeniny J ako očkovací materiál. Zmes bola ochladená na 4 °C a produkt bol odfiltrovaný a premytý 2x3 litrami chladného etylacetátu a potom vysušený vo vákuu pri teplote 25 °C. Týmto spôsobom bolo vo výťažku 70,7 % získaných 2905 g monohydrátu zlúčeniny J ako bielej tuhej látky.

Bola vykonaná krivka pre monohydrát zlúčeniny J v diferenciálnom kalorimetri DSC pod dusíkom pri vzostupe teploty 10 °C za minútu, bolo možné pozorovať pomerne širokú a plytkú endotermickú krivku s vrcholom približne pri 65 °C a potom kombináciu endotermického a exotermického priebehu medzi 129 až 134 °C a nakoniec hlavný endotermický priebeh pri topení pri 158 °C, ktorý začína pri 155 °C a zodpovedá teplu spotrebovanému pri topení 49 J/g.

Príklad 21

Kinetické delenie (S7R)-2-/erc-butylkarboxamid-4-/erc-bu· toxykarbonylpiperazínu vzorca (17) na produkt vzorca (1)

Boe

CONHt-Bu (17)

CONHt-Bu

Materiály surový (S7Ä)-2-terc-butylkarboxamid-4-terc-butoxykarbonylpiperazín, 17 1,40 g (S)-2-terc-butylkarboxamid-4-íerc-butoxykarbonylpiperazín 1, >99,5 % ee 4 x 0,14 g metylcyklohexán s 2 % obj. etylacetátu 14 ml

Surový gumovitý produkt vzorca (17) sa rozpustí v 14 ml zmesi rozpúšťadiel zahriatím na 90 °C. Roztok sa nechá ochladiť a v intervaloch 10 °C sa ako očkovací materiál pridá 0,14 g produktu vzorca (1) s čistotou ee vyššou než 99,5 %. Pri teplote 55 °C sa štvrtý podiel 0,14 g očkovacieho materiálu už nerozpustí a pri ďalšom pomalom ochladení až na teplotu miestnosti sa vytvorí biely kryštalický materiál. Reakčná zmes sa prefiltruje, materiál sa premyje 3 ml zmesi metylcyklohexánu a etylacetátu a súši sa pod dusíkom vo vákuu, čím sa získa 0,95 g bielej tuhej látky. Stanovením enantiomémej čistoty na stĺpci Chiracell AS je možné dokázať 93 % ee.

Postupy uvedené v priebehu prihlášky a získané medziprodukty je možné využiť na prípravu výsledných zlúčenín, ktoré sú vhodné na inhibíciu HlV-proteázy, na prevenciu alebo liečenie infekcie vírusom ľudskej imunodeficiencie HIV a na liečenie dôsledkov tejto infekcie, patologických stavov, napríklad AIDS. Výsledné látky a ich schopnosť spôsobiť inhibíciu HlV-proteázy boli opísané v EP 541 168 z 12. mája 1993. Liečenie AIDS alebo prevencia, alebo liečenie HIV zahrnuje aj liečenie širokej škály štádií tejto in13 fekcie, ako AIDS, ARC (komplex, spojený s AIDS), a to s príznakmi aj dosiaľ bez príznakov vrátane už uskutočnenej alebo potenciálnej expozície vírusu HIV. Výsledné produkty, ktoré je možné získať spôsobom podľa vynálezu a z medziproduktov podľa vynálezu je teda možné využiť na liečenie infekcie HIV a predpokladanému vystaveniu infekcii HIV v minulosti napríklad v prípade krvnej transfúzie, transplantácie orgánov, výmeny telových tekutín, po pohryznutí, po náhodnom poranení injekčnou ihlou alebo po vystavení pôsobeniu krvi chorého v priebehu chirurgického zákroku.

Inhibítory HlV-proteázy, ktoré je možné získať týmto spôsobom, sú využiteľné aj na vyhľadávanie nových protivírusových zlúčenín. Ich pomocou je napríklad možné izolovať mutanty enzýmu, ktoré sú veľmi vhodné na vyhľadávanie účinnejších protivírusových zlúčenín. Okrem toho je možné uvedené látky použiť aj na dôkaz miesta väzby iných protivírusových látok na HlV-proteázu, napríklad kompetitívnou inhibíciou. Je teda zrejmé, že výsledné látky, ktoré je možné získať na základe spôsobu podľa vynálezu a s použitím medziproduktu podľa vynálezu, sú cenné produkty, ktoré bude v budúcnosti možné plne využiť a bežne dodávať.

Inhibítory HlV-proteázy, ktoré je možné pripraviť z medziproduktov podľa vynálezu a pomocou spôsobu podľa vynálezu, sú ako už bolo uvedené, opísané v EP 541 164.

Inhibítory proteázy HIV je možné podávať chorým v prípade potreby vo forme farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú príslušný farmaceutický nosič a účinné množstvo inhibítora alebo niektorej z jeho farmaceutický prijateľných solí. V EP 541 164 sú opísané vhodné farmaceutické prostriedky, spôsob ich podania, vhodné typy solí a tiež dávkovanie uvedených inhibítorov.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu obsahovať stredy asymetrie a môžu sa teda vyskytovať ako racemáty, racemické zmesi a jednotlivé diastereoméry alebo enantioméry, pričom všetky tieto izoméme formy patria do rozsahu vynálezu.

V prípade, že sa akákoľvek z uvedených skupín, napríklad aryl, heterocyklická skupina, R, R¹, R², n, X a podobne vyskytuje v akejkoľvek zložke alebo vo vzorcoch (I) až (XI) viac než raz, je význam takejto skupiny pri každom ďalšom výskyte nezávislý od významu predchádzajúceho. Prípustné sú aj kombinácie substituentov a/alebo skupín v prípade, že pri ich použití vznikajú stále látky.

V prípade alkylových skupín sa pod týmto pojmom rozumejú nasýtené alifatické uhľovodíkové skupiny s priamym a rozvetveným reťazcom s uvedeným počtom uhlíkových atómov, Me = metyl, Et = etyl, Pr = propyl, Bu = butyl, t-Bu = /erc-butyl. Arylovou skupinou môže byť fenyl (Ph) alebo naftyl. Pod pojmom „heteroaryl“ sa rozumie 6-členný aromatický heterocyklický kruh alebo stály 8- až 10-členný nenasýtený bicyklický heterocyklický systém, v ktorom kruh alebo bicyklický systém je tvorený atómami uhlíka a jedným až troma heteroatómami zo skupiny dusík, kyslík alebo síra. Heteroarylovou skupinou môže byť teda napríklad niektorá z nasledujúcich skupín:

Vynález bol opísaný v súvislosti s radom výhodných uskutočnení. Je však zrejmé, že by bolo možné navrhnúť ešte celý rad bežných zmien, úprav alebo modifikácií, ktoré by tiež patrili do oblasti vynálezu. To znamená, že vynález nemôže byť obmedzený na uvedené príklady výhodných uskutočnení.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. Spôsob racemizácie opticky čistého substrátu 2-/erc-butylkarboxamidpiperazínu alebo substrátu bohatého na 2-zerobutylkarboxamidpiperazín všeobecného vzorca (IX) alebo (X), alebo jeho solí (IX)

CX) kde

R¹ a R² sa nezávisle volia zo skupiny atóm vodíka, R,

O O n II

-C-R ajebo -C-OR a

R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl, -CH₂-heteroaryl, aryl alebo trifluórmetyl, kde aryl znamená fenyl alebo naftyl a heteroaryl sa volí zo skupiny pričom miestom väzby je ktorýkoľvek uhlíkový atóm heteroarylovej skupiny, vyznačujúci sa tým, že sa na substrát všeobecného vzorca (IX) alebo (X), kde substituenty majú uvedený význam, alebo na jeho soľ pôsobí racemizačným činidlom vybraným zo skupiny silná báza, bezvodá soľ kovu alebo karboxylová kyselina, v rozpúšťadle a pri teplote miestnosti až teplote 250 °C.

2. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa t ý m , že sa nechá reagovať substrát, v ktorom R² znamená atóm vodíka alebo skupinu

O II -C-OR,

R znamená alkyl s 1 až 5 atómami uhlíka, -CH₂-aryl alebo -CH₂-heteroaryl, kde aryl znamená fenyl alebo naftyl a heteroaryl sa volí zo skupiny pričom miestom väzby je ktorýkoľvek uhlíkový atóm heteroarylovej skupiny.

3. Spôsob podľa nároku 2, v y z n a č u j ú c i sa t ý m , že ako racemizačné činidlo sa použije silná báza zo skupiny alkyllítium, lítiumamid, hydroxid alebo alkoxid a Schwesingerovo činidlo.

4. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že silná báza sa volí zo skupiny terc-butoxid lítia, sodíka alebo draslíka, n-propoxid lítia, sodíka alebo draslíka, metoxid sodíka alebo draslíka, alebo etoxid sodíka alebo draslíka.

5. Spôsob podľa nároku 2, v y z n a č u j ú c i sa t ý m , že ako racemizačné činidlo sa použije bezvodá soľ kovu zo skupiny chlorid horečnatý, bromid horečnatý, chlorid zinočnatý, chlorid železitý alebo chlorid titaničitý.

6. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že ako racemizačné činidlo sa použije karboxylová kyselina zo skupiny kyselina octová, propiónová, maslová alebo izomaslová.

7. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že reakcia sa uskutočňuje pri teplote 50 až 120 °C.

8. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že ako rozpúšťadlo sa použije éter, alkán, cykloalkán, alkohol, aromatická zlúčenina alebo ich zmesi.

9. Spôsob podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že ako rozpúšťadlo sa použije tetrahydroftirán, cyklohexán, propanol alebo ich zmesi.

10. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že substrát sa volí zo skupiny a zo solí týchto látok.

12. Spôsob podľa nároku 11, vyznačujúci sa t ý m , že sa zo získaného racemátu izoluje (5)-enantiomér 2-terc-butylkarboxamidpiperazínového derivátu.

13. Spôsob podľa nároku 11, vyznačujúci sa t ý m , že soľ sa volí zo solí kyseliny pyroglutámovej alebo kyseliny gafŕosulfónovej.

14. Spôsob podľa nároku 13, vyznačujúci sa t ý m , že sa použije soľ s 2 molekulami kyseliny (L)-pyroglutámovej.

15. Spôsob podľa nároku 1 až 14 na racemizáciu opticky čistého alebo obohateného 2-/erc-butylkarboxamidpiperazínového substrátu všeobecného vzorca (IX) alebo jeho solí vyznačujúci sa tým, že sa na substrát alebo jeho soľ pôsobí alkoxidom v 1-propanoíe pri teplote v roz15 medzí 50 až 120 °C, pričom R¹ znamená atóm vodíka alebo terc-butyloxykarbonyl a R² znamená atóm vodíka.

16. Spôsob podľa nároku 15, vyznačujúci sa t ý m , že alkoxid sa volí zo skupiny n-propoxid sodíka, draslíka alebo lítia

17. Spôsob podľa nároku 16, vyznačujúci sa t ý m , že sa n-propoxid sodíka, draslíka alebo lítia pripraví in situ azeotropným sušením hydroxidu sodného, draselného alebo lítneho v 1-propanole.

18. Spôsob podľa nároku 17, vyznačujúci sa t ý m , že sa na racemizáciu použije soľ substrátu všeobecného vzorca (IX) s 2 molekulami kyseliny (L)-pyroglutámovej.

19. Spôsob podľa nároku 16, vyznačujúci sa t ý m , že sa reakcia uskutočňuje v rozmedzí 85 až 120 °C.

20. Zlúčenina vzorca alebo jej soli ako substrát na racemizáciu.