SK2532001A3 - Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors - Google Patents

Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors Download PDF

Info

Publication number
SK2532001A3
SK2532001A3 SK253-2001A SK2532001A SK2532001A3 SK 2532001 A3 SK2532001 A3 SK 2532001A3 SK 2532001 A SK2532001 A SK 2532001A SK 2532001 A3 SK2532001 A3 SK 2532001A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
group
formula
alkyl
amino
hydrogen atom
Prior art date
Application number
SK253-2001A
Other languages
English (en)
Inventor
Nagy Peter Literati
Balazs Sumegi
Kalman Takacs
Original Assignee
Gene Kutato Kft N
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from HU9802001A external-priority patent/HU9802001D0/hu
Priority claimed from HU9902927A external-priority patent/HUP9902927A3/hu
Application filed by Gene Kutato Kft N filed Critical Gene Kutato Kft N
Publication of SK2532001A3 publication Critical patent/SK2532001A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/50—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/58—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/04—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/084—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/088—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

Tento vynález sa vzťahuje na nové deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej, proces ich prípravy a farmaceutické kompozície obsahujúce tieto deriváty. Nové zlúčeniny vykazujú cenné farmaceutické aktivity, teda môžu byť použité, vďaka ich inhibičnému účinku na poly(adenozín difosfátribóza)polymerázu, vo stavoch spojených s bunkovým nedostatkom energie, pri diabetes komplikáciách, stavoch nedostatku kyslíku srdca a mozgu, pri neurodegeneratívnych ochoreniach rovnako tak ako pri liečbe autoimunitných a/alebo vírusových ochoreniach.
Presnejšie, tento vynález sa vťahuje na nové deriváty hydroxímovej kyseliny vzorca
kde
Ri reprezentuje C1.20 alkylovú skupinu, fenylovú skupinu substituovanú 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, Ci-2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (Ci-4alkyl)-amino skupiny, di(Ci_4alkyl)amino skupiny alebo di(Ci.4alkanoyl)-amino skupiny, ďalej Ri reprezentuje 5alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva dusíkové atómy alebo atóm síry ako heteroatóm a
R2 zastupuje atóm vodíka, alebo
Ri tvorí spoločne s R2 C5.7 cykloalkyl, voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom, ·
Y znamená atóm vodíka, hydroxy skupinu, C1.30 alkanoyloxy skupinu alebo C3. 22 alkenoyloxy skupinu ,
X je halogén, hydroxy skupina alebo amino skupina,
R3 reprezentuje C3.7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 znamenajú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvorí so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže tiež obsahovať atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, pričom heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C].2 alkoxy skupiny alebo halogénu, a ich farmaceutický vhodné adičné soli.
Doterajší stav techniky
Z HU-P č. 177 578 a ekvivalentu US-P č.4,308,399 je známe, že O-/3(substituovaná amino skupina)-2-hydroxy-l-propyl/-(substituované amidoxímy) sú vhodné na liečbu diabetickej angiopatie, pričom substituenty amidoxímu sú iné než alkenyl skupina.
Známe zlúčeniny a ďalšie príbuzné deriváty kyseliny hydroxímovej vykazujú tiež biologickú aktivitu. Teda sú vodné na prevenciu a liečbu ochorení mitochondriálneho pôvodu (PCT Prihláška č. WO 97/13504); zvýšenej hladiny molekulárnych stresových proteínov buniek (HU-P Prihláška č. P 95 03141) atď.
V PCT Prihláške č. WO 90/08131 je opísaný nový proces prípravy amidoxím derivátov vzorca
··· · · · ···· · · • ·· ·
NH (A) kde Ri reprezentuje skupinu majúcu 2-15 uhlíkových atómov, čo môžu byť okrem iného - nenasýtené a/alebo cyklické alkyly. V citovanom dokumente, zlúčeniny vzorca A sú používané ako známe, aj keď tieto zlúčeniny vzorca Λ kde Ri je alkenyl alebo cykloalkylidén sú zlúčeniny nové, ktoré ešte neboli pripravené a nie sú charakterizované identifikačnými údajmi. V príkladoch citovaného dokumentu sú opísané len zlúčeniny vzorca A kde Ri je pyridyl, chlórfenyl, benzyl alebo dimetoxybenzyl.
Podstata vynálezu
Cieľom tohto vynálezu je zaistiť zlúčeniny, ktoré môžu byť použité na efektivnu liečbu stavov spojených s bunkovým nedostatkom energie, diabetes komplikáciami, stavmi nedostatku kyslíka srdca a mozgu, pri neurodegeneratívnych ochoreniach rovnako tak ako pri liečbe autoimunitných a/alebo vírusových ochorení.
Bolo zistené, že vyššie uvedený cieľ je možné dosiahnuť vďaka novým derivátom nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I a ich farmaceutický vhodným adičných solí.
V opise patentových nárokov, Ci-2oalkyl je napr. metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, se£-butyl, íerí-butyl, izobutyl, n-pentyl, n-hexyl, n-heptyl, n-decyl, dodecyl, hexadecyl alebo oktadecyl atď.
Ci.2alkyl je metyl alebo etyl, zatiaľ čo Ci.2 alkoxy skupina je metoxy alebo etoxy skupina.
Halogén je v prvom rade atóm fluóru, chlóru alebo brómu, najlepšie potom atóm chlóru alebo atóm brómu.
C1.4 alkyl je metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, seA-butyl, tertbutyl alebo izobutyl ··
Ci-5 alkyl môže zahrnovať napr. n-pentyl a ďalej zlúčeniny uvedené ako Ci-4 alkyl.
Ci-4 alkanoyl je najlepšie formyl, acetyl, propionyl alebo butyryl skupina.
Ci-5 alkanoyl môže zahrnovať napr. n-pentanoyl a ďalej zlúčeniny uvedené ako Ci-4 alkanoyl.
5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atómu síry ako heteroatóm je napr. pyrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, tienyl, pyridyl, piperidyl, pirimidinyl, piperazinyl atď.
C3.7 cykloalkyl je, napr. cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl alebo cykloheptyl.
C5-7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný benzénovým kruhom je, napr. cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, indanyl alebo tetralinyl.
Ci-3o alkanoyloxy skupina je napr. formyloxy, acetoxy, propionyloxy, butyryloxy, palmityloxy alebo steryloxy skupina atď.
C3.22 alkenoyloxy skupina môže obsahovať 1 - 6 dvojnásobných väzieb a môže to byť, prednostne, linolenoyloxy, linoloyloxy, dokosakexaenoyloxy, eikosapentaenoyloxy alebo arachidonoyloxy skupina.
5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci atóm dusíka alebo dusík a atóm kyslíka ako heteroatóm je, napr. pyrolyl, pyridyl, piperidyl alebo morfolino skupina.
Farmaceutický vhodné soli derivátov nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I sa utvoria z farmaceutický vhodných anorganických solí ako je kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná atď., alebo z farmaceutický vhodných organických kyselín ako je kyselina octová, kyselina mravčia, kyselina mliečna, kyselina vínna, kyselina jantárová, kyselina jablčná, kyselina benzénsulfónová , kyselina p-toluénsulfónová atď.
• ·· ·· · ·· ···· · · · ·· • 99 9 9 9 9·9 ··· · · · 9999 9 ·· • 9 · 9 · ·9 ··· ·· ·· ··9
Vďaka dvojitým väzbám prítomným vo vzorci I, nové deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej tohto vynálezu môžu existovať vo forme geometrických izomérov tzn. trans alebo cis izomérov alebo ich zmesí. Tento vynález zahrnuje čisté geometrické izoméry a ich zmesi.
Ďalej potom, isté zlúčeniny vzorca I obsahujú jeden alebo viac chirálnych atómov uhlíka, z toho vyplýva, že môžu existovať tiež vo formách optických izomérov. Tento vynález zahrnuje tiež optické izoméry a ich zmesi.
Preferovaná podskupina derivátov nenasýtenej kyseliny hydoxímovej tohto vynálezu obsahuje zlúčeniny vzorca I, kde
X reprezentuje amino skupinu
Y je hydroxy skupina,
R.3 znamená C3.7 cykloalkyl alebo skupinu vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, C1.5 alkanoyl, ale jeden z nich môže byť tiež atóm vodíka, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý je kondenzovaný s benzénovým kruhom a môže tiež obsahovať atóm kyslíka, heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci-2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, a
Ri reprezentuje C14-20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkyl, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci_4 alkyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm
R2 je atóm vodíka, alebo
X znamená halogén alebo hydroxy skupinu,
Y je atóm vodíka, hydroxy skupina, C1-30 alkanoyloxy skupina alebo C3.22 alkenoyloxy skupina alebo,
R3 je C3.7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5 kde,
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl skupinu, C1.5 alkanoyl • skupinu, alebo . R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže obsahovať tiež atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, kde heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu,
Ri reprezentuje C1.20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupín, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(C]_4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci_4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm , a
R2 je atóm vodíka, alebo
Ri vytvorí spolu s R2 C5.7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom, *
ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo farmaceutický vhod. né adičné soli.
Vyhovujúce deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej tohto vynálezu sú zlúčeniny vzorca I, kde
Ri reprezentuje fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z metylu, metoxy skupiny alebo atómu chlóru, ďalej potom Rj reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka ako heteroatóm,
R2 je atóm vodíka, • ·· ·· · ··· ·· · · ······· · · ···· ··· • ··· · · · ···· · · ·· • ···· · ·· ··· ·· ·· · ·· ···
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 znamená skupinu vzorca -NR4R5 kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1-5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a Rj vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo farmaceutický vhodné adičné soli.
Špeciálne preferované deriváty nenasýtené kyseliny hydroxímovej sú zlúčeniny vzorca I, kde
Ri reprezentuje pyridyl alebo fenyl voliteľne substituovaný 1-3 metoxy skupinami,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 je pyrolidín, piperidín alebo morfolín, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo farmaceutický vhodné adičné soli.
Podľa ďalšieho aspektu tohto vynálezu, deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I sa pripravia následovne:
a) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X reprezentuje amino skupinu, Rj, R2,
R3 a Y sú ako bolo stanovené v súvislosti so vzorcom I, amidoxím vzorca
(II) kde, Ri a R2 sú ako bolo definované vyššie, reaguje so zlúčeninou vzorca
kde Z znamená odstupujúcu skupinu, najlepšie halogén, Y je ako bolo stanovené vyššie; alebo
b) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Y je hydroxy skupina, Ri, Ri a Rj sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, zlúčenina vzorca III, kde Z znamená odstupujúcu skupinu, najlepšie atóm chlóru, Y je ako bolo stanovené vyššie, reaguje s bázou a získaný oxiránový derivát vzorca
kde R3 je ako bolo stanovené vyššie reaguje s amidoxímom vzorca II, kde Ri a
R.2 sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
c) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X znamená amino skupinu , Rj, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, nitril karboxylovej kyseliny vzorca
kde Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s derivátom hydroxylamínu vzorca e ·· ·· · ··· ···· ··· · · ·· ··· · · · e · ·· • ··· · e · ···· · · ·· • ···· · · · ··· ·· ·· · ·· ···
kde Rj a Y sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
d) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, reaktívny derivát karboxylovej kyseliny vzorca
kde V je odstupujúca skupina, Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s derivátom hydroxylamínu vzorca VI, kde R3 a Y sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
e) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Y je hydroxy skupina, R3 je skupina vzorca -NR4R5, kde Ri, R2, R4 a R5 sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, amidoxím vzorca II, kde Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s epichlórhydrínom za prítomnosti bázy a vzniknutý epoxid vzorca
(VIII) kde Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s amínom vzorca HNR4R5, kde R4 aRs sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
f) pri príprave zlúčeniny vzorca I, kde X reprezentuje halogén, Rb R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, O-substituovaný oxím vzorca • ·· ·· · ·· ·· · · · · ·· • φ 9 · · · ·· • ··· · · · ···· ·· • · · · · · ··· ·· ·· · ·· ····
kde Ri, R2 a R3 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s halogenačným činidlom;
a ak je potreba, získaná zlúčenina vzorca I, kde X reprezentuje amino skupinu, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, je prevedená na korešpondujúcu zlúčeninu vzorca I, kde X je halogén soli získané diazotáciou a dekompozíciou v prítomnosti hydrogénhalogénu alebo získaná zlúčenina vzorca I, kde X je amino skupina, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, je prevedená diazotáciou a dekompozíciou získanej soli v prítomnosti fosforečnej kyseliny na zlúčeninu vzorca I kde X je hydroxy skupina a/alebo získaná zlúčenina vzorca I, kde Y je hydroxy skupina, Ri, R2, R3 a X sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, reaguje s acylačným činidlom za vzniku zlúčeniny vzorca I, kde Y reprezentuje C1.30 alkanoyloxy skupinu alebo C3.22 alkenoyloxy skupinu, a/aľebo získaná báza reaguje s anorganickou alebo organickou kyselinou za vzniku farmaceutický vhodnej adičnej soli alebo bázy vzorca I sa uvoľní z jej soli prostredníctvom bázy.
V procese a) tohto vynálezu reakcia amidoxímu vzorca II so zlúčeninou vzorca III prebieha v rozpúšťadle, ktoré je indiferentné z hľadiska reakcie v prítomnosti kyselín viežucého činidla. Rozpúšťadlo môže byť anorganické, ako je voda alebo organické protické rozpúšťadlo, ako sú alkoholy, napr. metanol alebo etanol alebo dipolárne aprotické rozpúšťadlo, ako je dietylformamid, dimetylsulfoxid atď. Najlepšie je použiť zmes alkoholov alebo vodný alkohol, pretože takéto zmesi dobre rozpustí silne polárne vstupné zlúčeniny. Anorganické alebo organické bázy môžu byť použité ako kyseliny viažuce činidlá. Ako anorganické bázy môžu byť použité, všeobecne hydroxidy, uhličitany, alkoholy, amidy alebo hydridy alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín, v prípade kedy sa uvažujú vlastnosti rozpúšťadla. V protickom rozpúšťadle môžu byť bázy tiež organokovové zlúčeniny pr. butyllítium, fenyllítium. Ako organické bázy môžu byť preferované použité terciárne amíny ako trietylamín alebo ďalšie otvorené reťazce alebo cyklické terciárne amíny.
··· · · · ···· · · · • · · · · · ·· ·· · ·· ·
Reakcia amidoxímu vzorca II so zlúčeninou vzorca III prebieha všeobecne za teploty medzi -20°C a +150°C za atmosférického alebo vyššieho tlaku. Objektívne aktuálna reakčná teplota záleží na teplote varu použitého rozpúšťadla. Po reakcii môže nasledovať tenkovrstvová chromatografia.
Časť vstupných amidoxímov vzorca II je známa. Nové zlúčeniny môžu byť pripravené spôsobom per sa reakciou nitrilu vzorca IV s hydroxylamínom.
Nové amidoxímy vzorca IV môžu tiež pripravené ďalšími metódami opísanými pri prípravách známych amidoxímov /Chem. Reviews, 62, 155 (1962)/
Ak je použitá ako vstupná zlúčenina látka vzorca III, kde Zje atóm chlóru alebo atóm brómu, môže sa do reakcie pridať katalyzátor ako jodid draselný alebo jodid sodný.
Ak je použitý reagent vzorca III, kde Z reprezentuje atóm chlóru alebo atóm brómu, ako vstupná látka, môže byť do reakčnej zmesi pridaný katalyzátor ako je jodid draselný alebo jodid sodný.
Reagent vzorca III, kde Z reprezentuje halogén, Y je hydroxy skupina, R3 znamená skupinu vzorca -NR4R5, môže reagovať s amidoxímom vzorca II bez separácie z reakčnej zmesi, ktorá sa utvorí reakciou korešpondujúceho amínu vzorca HNR4R5 s epihalogénhydrínom ako je epichlórhydrín. Amin vzorca HNR4R5 reaguje s epichlórhydrínom prednostne v chladenom alkoholickom roztoku, čím sa získa reagent vzorca III. Amidoxím vzorca II môže byť priamo pridaný do tohto roztoku.
Reakčná zmes sa spracuje spôsobom známym per sa. Vo väčšine prípadov sa reakčná zmes odparí a, z vodného alkalického média, produkt sa extrahuje vodou nemiešateľným organickým rozpúšťadlom. Z organického rozpúšťadla sa produkt separuje kryštalizáciou alebo odparením, potom sa prečistí rekryštalizáciou alebo utvorením soli pridaním kyseliny. Olejové produkty, ktoré netvoria žiadne kryštalické soli, môžu byť prečistené kolónovou chromatografiou.
V procese b) tohto vynálezu, vstupnou látkou je reagent vzorca III, kde Y je hydroxy skupina. Reagent reaguje s jednou z báz uvedenou v súvislosti • ·· ·· · ···· ······ ··· · · · ··· • ··· · · · ···· · · · • · · · ·· · ··· ·· ·· · ·· · 12 s procesom a), čím sa získa oxiránový derivát vzorca, kde R3 je ako bolo definované vyššie, a oxiránový derivát reaguje s amidoxímom vzorca II. Konečná reakcia môže tiež prebiehať v reakčnej zmesi v ktorej bol pripravený oxiránový derivát, alebo sa konečný derivát separuje /J. Am. Chem. Soc., 80, 1257 (1958)/ a reaguje s amidoxímom vzorca II v oddelenom kroku. Reakčná zmes sa spracuje a produkt sa separuje postupom opísaným v súvislosti s procesom a).
V procese c) tohto vynálezu, reakcia prebieha v indiferentnom organickom rozpúšťadle, najlepšie alkohole, s vhodnou teplotou varu použitého rozpúšťadla. Môžu sa použiť dipolárne aprotické rozpúšťadlá ako je dimetylformamid alebo dimetylsulfoxid. Hydroxylamíny deriváty vzorca IV sú známe zlúčeniny (publikovaná nemecká patentová prihláška č. 26 51 083). Reakčná zmes sa spracuje a produkt sa separuje postupom opísaným v súvislosti s procesom a).
V procesu d) tohto vynálezu, v prípade reaktívneho derivátu karboxylovej kyseliny vzorca VII, odstupujúca skupina V je najlepšie halogén alebo skupina vzorca -NH2, -SH, SR6 alebo -ORď, kde Re reprezentuje C1.4 alkyl. Reakcia prebieha v indiferentnom organickom rozpúšťadle, najlepšie alkohole. Reakčná zmes sa spracuje a produkt sa separuje ako bolo opísané v súvislosti s procesom a). Reaktívne deriváty karboxylovej kyseliny sú hojne opísané v literatúre.
V procese e) tohto vynálezu, reakcia amidoxímu vzorca II s epychlórhydrínom prebieha za prítomnosti bázy spomínanej v súvislosti s procesom a) v indiferentnom organickom rozpúšťadle. Reakcia sa chladí, aby nedošlo k žiadnej intramolekulárnej cyklizácii tvoriaceho sa epoxidu vzorca VII, kde intramolekulárna cyklizácia vedie k utvoreniu 1,2,4- oxadiazínu. Všeobecne epoxid vzorca VII sa neseparuje, ale reaguje priamo v reakčnej zmesi s amínom vzorca HNR4R5. Reakčná zmes sa spracuje a produkt vzorca I sa separuje postupom opísaným v súvislosti s procesom a).
V procese f) tohto vynálezu, O-substituovaný oxím vzorca IX sa halogenuje v roztoku použitím elementárneho halogénu, halogénanu, Nchlórsukcínimidu, N-brómsukcínimidu atď. ako halogenačného činidla. S výho- • ·· ·· · ·· · ···· ··· · · ·· ·· ···· ·· · • ··· · · · ···· · · · · • ···· ··· ··· ·· ·· · ·· ··· 13 dou sa používajú ako rozpúšťadla halogenované uhľovodíky, a reakcia všeobecne prebieha pri izbovej teplote. Reakčná zmes sa spracuje a produkt vzorca I sa separuje postupom opísaným v súvislosti s procesom a).
Zlúčenina vzorca I, kde X predstavuje amino skupinu, môže byť prevedená diazotáciou na korešpondujúcu zlúčeninu vzorca I, kde X je halogén, v prítomnosti prebytku hydrogénhalogenidu. Podľa procesov sa do roztoku amidoxímu v hydrogénhalogenidu pridáva dusitan sodný najlepšie pri teplote -5 až -15°C. Reakciou sa uvolňuje dusík a diazóniová soľ sa spontánne transformuje na zodpovedajúcu halogén zlúčeninu. Tiež organické dusitany ako izoamyldusitan alebo /erŕ-butyldusitan môžu byť použité pri diazotácii. Ak sa vstupný amidoxím vzorca II ťažko rozpúšťa v hydrogénhalogenide, rozpustnosť je možné zvýšiť prídavkom organického rozpúšťadla miešateľného s vodou ako je dioxán. Pri transformácii diazóniovej soli sa na dosiahnutie kompletnej transformácie reakčná zmes mieša a, ak je potreba, zahrieva. Potom, reakčná zmes je alkalická, sa produkt extrahuje organickým rozpúšťadlom nemiešateľným s vodou a roztok sa odparí alebo sa produkt kryštalizuje. Olejové produkty môžu byť prečistené kolónovou chromatografiou. V prípade zlúčenín vzorca I, kde postranný reťazec obsahuje bázickú skupinu, sa prídavkom vhodnej kyseliny oddelí soľ.
Ak diazotácia zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, prebieha za prítomnosti vodnej kyseliny fosforečnej, získa sa zlúčenina vzorca I, kde X predstavuje hydroxy skupinu.
Zlúčenina vzorca I, kde Y reprezentuje hydroxy skupinu, môže reagovať s vhodným acylačným činidlom, čím sa získa zlúčenina vzorca I, kde Y je C1.30 alkanoyloxy skupina alebo C3-22 alkenoyloxy skupina. Ako acylačné činidlo môže byť použitý zodpovedajúci karboxylhalogenid, anhydrid, azid atď. Acylačná reakcia prebieha za bezvodých podmienok v indiferentnom organickom rozpúšťadle, ktoré nereaguje s reaktantami. Ako kyselinu viažuce činidlo môže byť použitá anorganická alebo organická báza, najlepšie trietylamín alebo pyridín. Reakčná zmes sa spracuje ako bolo opísané v súvislosti s procesom a).
·· ·· · ·· ···· ··· ·· · ··· ······ • ··· · · · ···· ·· · • · · · · ·· ··· ·· ·· · ·· ·
Ak je potrebné, zlúčenina vzorca I môže byť prevedená na farmaceutický vhodnú soľ alebo uvoľnená z jej soli. Ak sa vo forme soli použijú opticky aktívne organické kyseliny ako kyselina gáfrová, kyselina gáforsulfónová, kyselina vínna alebo deriváty kyseliny vínnej môžu byť separované stereoizomérmi zlúčenín obsahujúcich chirálny uhlíkový atóm. Rozpustenie je uskutočnené spôsobom známym per sa kryštalizáciou solí utvorených s opticky aktívnou kyselinou.
Deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I ovplyvňujú stresové reakcie biologických systémov zapríčinené hypoxiou, intracelulárnou hypoglykémiou, diabetickými komplikáciami, reaktívnymi formami kyslíka a xenobiotikami dvoma odlišnými spôsobmi:
1. Prostredníctvom inhibicie jadrových enzýmov poly(ADP-ribóza)polymeráza a karnitínpalmitoyl transferáza.
2. Prostredníctvom modifikácie expresie génov citlivosti na kyslík regulovaných v prvom rade bHLH (basic helix-loop-helix) transkripčnými faktormi.
Biologické účinky inhibicie PARP
Je známe, že reaktívne formy kyslíka (ROS), (tj. hydroxyradikál, peroxid, peroxynitrit, peroxid vodíka) sa v živom organizme tvoria neustále/Richter, C., FEBS Lett. 241, 1-5(1988)/ a v malom množstve hrajú dôležitú úlohu pri kontrole dôležitých fyziologických procesov/Beck, K.F. at al., J. Exp. Biol. Med., 211, 1-6 (1996)/ (ako angiektáza, zhlukovanie doštičiek, adhézia leukocytov). Koncentrácia reaktívnych foriem kyslíka a oxidu dusnatého je výrazne vyššia u akútnych a chronických zápaloch, napríklad vo väčšine autoimunitných ochorení/Taraza, C. et al., Rom J. Intern. Med., 35, 89-98 (1997)/ v prípade postischemického zlyhania srdca, ischemickej mozgovej príhody. /Brain Patology, 9, 119-131 (1999)/ Zdroj ROS zahrnuje čiastočne normálne tkanivové bunky (endotel) vzhľadom na indukčný účinok zápalových cytokinov (ako je faktor alfa nekrózy nádorov).
··· ·· · ·· • · · ·· · • · · · ·· • · ········ • · · · · ·· ··· ·· ·· · ·· · 15
Reaktívne formy kyslíka okrem iného poškodzujú DNA. Poškodenie DNA vyvolá v bunke obranný a opravný proces. Dôležitou zložkou tohto procesu je aktivácia enzýmu poly(adenozíndifosfátribóza)polymerázy (PARP). PARP je enzým jadrového systému, je prítomný takmer vo všetkých bunkách vo veľkom množstve a katalyzuje transport jednotky adenozíndifosfátribózy z nikotínacidadeníndinukleotidu (NAD) na proteíny a tvorbu reťazcov poly(adenozíndifosfátribózy). Medzi hlavné substráty enzýmu patria /Gonzalez, R. et al., Mol Celí. Biochem., 138, 33-37 (1994)/jadrové proteíny, históny, topoizomerázy I a II, transkripčné faktory. Aktivita enzýmu PARP je zosilovaná takmer 500násobne v prípade zlomu v DNA reťazci /Mennisier de Murcia, J. et al., J. Mol. Biol., 210, 229-233 (1989)/. Extrémne vysoké poškodenie DNA vedie k aktivácii enzýmu PARP, ktorého dôsledkom je kritické zníženie koncentrácie NAD.
Ako dôsledok sa v bunke znižuje syntéza adenozíntrifosfátu (ATP) a súčasne sa spotreba ATP zvyšuje, pretože sa bunka snaží doplniť hladinu NAD z adenozíntrifosfátribózy a nikotínamidu s použitím ATP. Tieto biochemické procesy ťažko poškodzujú energetický stav buniek a môžu viesť k zničeniu buniek. Inhibícia enzýmu PARP je dôležitá pri liečbe rôznych ochorení, ako sú autoimunitné ochorenia/Szabó, C. a Co., Trends Pharmacol. Sci., 19, 287-98 (1988)/, ischemické choroby srdca a neurodegeneratívne ochorenia. Inhibíciou enzýmu PARP je možné vyradiť katabolizmus NAD znížením hladiny nikotínamidu a adenozíndifosfátribózy v bunkách a inhibíciu spotreby adenozintrifosfátu na syntézu NAD, čo znamená, že inhibíciou tohto enzýmu je možné odstrániť vyššie uvedené poškodenia buniek a ich smrť.
Experimentálna časť
Inhibícia PARP in vitro na izolovanom enzýme
Z krysích pečení bola izolovaná poly-ADP-ribózapolymeráza podľa článku Shah.G.M., Anál. Biochem, 227, 1-13 (1995).
999 • ·· ·· ·99 ···· 9 9 9 99
9 9 9 9 9 9 99
999 99 9 9999 999
9 9 9 9 99
999 99 99 999
Aktivácia PARP sa určí v 130 μΐ reakčnej zmesi, ktorá obsahuje: 100 mM Tris-HCI pufer, pH 8,0, 10 mM MgCh, 10 % glycerol, 1,5 mM DTT, 100 pg (32P) alebo (3H), NAD+, 10 pg histónu. Reakcia sa zastaví po 10 minútach 8 % kyselinou chloristou a proteín sa separuje centrifugáciou (10 minút, 10 000 x
g). Precipitát sa omyje 8 % kyselinou chloristou a rádioaktivita naviazaná na proteín sa zmeria v scintilačnom fotometry. Výsledky sú uvedené v Tabuľke 1.
Tabuľka 1
Zlúčenina PARP 10,5 mg/1
Príklad 1 4,0±2
Príklad 2 5,2±3
Príklad 3 2,4±2
Príklad 4 8,2±3
Príklad 5 17,7
Príklad 6 8±4
Príklad 7 7±3
Príklad 8 10±5
Príklad 9 13±5
Príklad 10 17+4
Príklad 11 18+6
Príklad 12 8+4
Príklad 13 12+5
Príklad 14 13±4
Príklad 15 19+7
Príklad 16 18±6
Príklad 17 15±5
Príklad 18 34,1
Príklad 19 18O±4O
Príklad 3 1 6+3
Príklad 33 7±4
• ·· ·· · ··· ···· ······· • · · ······ · • ··· · · · ···· · · · · • · · · ···· ··· ·· ·· » ·· ···
Vyššie uvedené výsledky sú uvádzané so štandardnou odchýlkou zo štyroch paralelných meraní.
Záver
Z Tabuľky 1 je zjavné, že väčšina týchto zlúčenín sú veľmi dobré inhibítory PARP (Io,5)<lO mg/1. Zvyšok týchto zlúčenín, s výnimkou príkladu 19, ktorý je veľmi slabým inhibítorom PARP, môže byť klasifikované ako dobré inhibítory spadajúce medzi Io,5=10-34 mg/1.
Účinok derivátov nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I na ischemické srdcové zlyhanie a reperfúznu arytmiu.
K poškodeniu srdcového svalu a smrti buniek srdcového svalu dochádza vo väčšina prípadov vďaka poruchám vyživovania. Najčastejšou formou porúch vyživovania je nedostatok kyslíka. Vzniknuté poškodenie srdcového svalu je ischémia srdcového svalu, ktorá sa môže vytvoriť vďaka akútnej hypoxii/anoxii, koronárnej oklúzií, spazmom alebo koronárnym ochorením. Ischemická časť akútneho infarktu srdcového svalu je nasledovaná fázou nadbytočného krvného toku nazývaného reperfúznou fázou. Jednou z nežiaducich a potenciálne smrteľných aspektov reperfúzie, obzvlášť v regionálnej ischémii myokardu, je výskyt arytmií indukovaných reperfúziou (zahrnujúcich ventrikulárnu tachykardiu a fibriláciu). Sú to prvé príznaky reperfúzneho poranenia. Odrazenie reperfúznych porúch srdcového svalu znamená prevenciu smrteľného nebezpečenstva predčasného postinfarktu.
Látky a metódy
Experimenty sa vykonávajú na krysích samcoch SPRD (prijateľná telesná hmotnosť: 300-350 g). Zvieratá sa anestetikujú pentobarbitalom sodným (NembutalR· 60 mg/kg intraperitoneálne) a ponechajú sa spontánne dýchať. Zvie18
• · · • · · • · • • • ·· • • ·
• •
• ··· • · • ···· • · •
• · • • • • •
·· ·· • · • • • ·
rata sa ventilujú respirátorom (MTA Kutesz) s použitím tracheálnej kanyly zavedenej po tracheotómii. Monitoruje sa štandardný zvod EKG II. Katetrizuje sa pravá femorálna tepna a pripojí sa na snímač tlaku (BPR-01, Experimetria, Maďarsko), predzosilovač a pulzomer (HG-M, Experimetria, Maďarsko) pre tepový krvný tlak a meranie srdcovej frekvencie. Vonkajšia jugulárna cieva sa kanyluje na zavedenie liečiva. Po otvorení hrudníka (torakotomii) sa pod ľavú prednú koronárnu tepnu (LAD) umiestni hodváb (spletané, poťahované 4-0). Po piatich minútach na stabilizáciu sa vykoná 5 minútová oklúzia LAD tepny, po ktorej nasleduje 10 minútové obdobie reperfúzie. Vyhodnotí sa miera prežitia. Získané výsledky sú uvedené v Tabuľke 2.
Tabuľka 2 f
Účinok rôznych zlúčenín na arytmiu indukovanú reperfúziou.
Zlúčenina Dávka Prežilo % prežitia
Príklad 1 1 mg/kg 7:10 70
Príklad 1 5 mg/kg 6:13 46
Príklad 3 5 mg/kg 4:10 40
Príklad 4 1 mg/kg 1:06 16,7
Príklad 4 5 mg/kg 9:11 81,8
Príklad 2 1 mg/kg 5:12 41,67
Príklad 2 5 mg/kg 9:09 100
Príklad 5 5 mg/kg 6:12 50
Príklad 7 5 mg/kg 5:12 42
Príklad 8 5 mg/kg 3:08 37,5
Príklad 11 5 mg/kg 2:10 20
Príklad 14 5 mg/kg 3:07 43
Príklad 32 5 mg/kg 5:07 71,43
Príklad 18 5 mg/kg 4:06 67
Kontrola - 8:52 15,38
Záver:
Z Tabuľky 2 je zjavné, že deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I zabraňujú arytmii spôsobenej reperfúziou. V experimentoch s reperfúznou arytmiou prežilo z 52 neliečených zvierat len 8, čo predstavuje 15 % mieru prežitia. Zo študovaných zlúčenín sa výrazne odlišuje Príklad 2, kde je miera prežitia 100 %. (Z 9 zvierat 9 prežilo arytmiu spôsobenú reperfúziou). Zlúčeniny opísané v Príklade 1, 4, 32 a 18 mali podobne výrazný účinok. Z týchto experimentov je možné učiniť záver, že deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I majú priaznivý účinok na ochorenia založené na ischemickom srdcovom zlyhaní, ako je infarkt myokardu.
Skúmanie účinku derivátov nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I na autoimunitné ochorenie.
Autoimunitné ochorenie je choroba, pri ktorej je imunitná reakcia spustená organizmom zameraná proti jeho normálnym zložkám/Ring, G.H. et al., Semin. Nephrol., 19, 25-33 (1999)/; Teofilopoulos, A.N., Ann. N.Y.Acad. Sci., 841, 225-35 (1998)/. Rôzne autoimunitné ochorenie sa od sebe líši v protilátke, ktorá proces spúšťa, viac-menej je možné dosiahnuť veľké podobnosti v tkanivovej kultúre poškodzované mechanizmom vyvinutého autoimunitného procesu /Szabo, C. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 3867-3872 (1998)/.
Medzi autoimunitné ochorenie v prvom rade patrí:
- hormonálne ochorenie: IDDM (inzulín dependent diabetes mellitus)
- pečeňové ochorenie: hepatitída
- kožné ochorenie: bulózny pemfigoid, všeobecný pemfigus, lupienka, sklerodermia, vitiligo
- ochorenie krvotvorných orgánov: sarkoidóza
- artropatia:
reumatická artritída • ·
- cievne ochorenie:
zápal ciev, takayasu arteritída, nodózna polyarteritída, ankylózna spondylitída,
- črevné ochorenie vredová kolitída, ochorenie svalového
a nervového systému: roztrúsená skleróza, ťažká myasténia, chronická zápalová demyelizačná polyneuropatia.
Skúmanie prevencie streptozotocínom (SZ) indukovaného autoimunitného diabetes mellitus typu I u myší
Inzulín, ktorý je hlavným regulátorom metabolizmu cukrov v tele, je produkovaný a do krvného riečiska predávaný bunkami Langerhansových ostrovčekov pankreasu. Poškodenie alebo zničenie β-buniek spôsobuje zníženie alebo zastavenie tvorby inzulínu, čo vedie ku vzniku diabetes mellitus typu I (na inzulínu závislý diabetes mellitus = IDDM). β-bunky sú obzvlášť citlivé na ROS a na toxické účinky NO. Štúdium poškodenia DNA spôsobených NO viedlo k predpokladu, že za smrť β-buniek je zodpovedná nadbytočná aktivácia enzýmu PARP a zníženie úrovne NAD/Heller, B. a Co., J. Biol.Chem., 270, 176-180 (1995)/. Podobným mechanizmom poškodzuje β-bunky produkujúci inzulín streptozotocín/2-deoxy-2-(3-metyl-3-nitrozoureido)-D-glukopyranóza/(SZ), čo sa ponúka ako model diabetu typu I na použitie v experimentoch na zvieratách /Yamamoto, H. a C., Náture, 294, 284-286 (1981)/. DNA je streptozotocínom poškodzovaná prostredníctvom alkylácie a tvorby NO, čo vedie k aktivácii enzýmu PARP, ako už bolo skôr uvedené.
Bolo skúmané, či by sa diabetu typu I vyvolanému u myší dalo zabrániť derivátmi nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, ktoré majú inhibičný účinok na PARP.
Experimenty boli uskutočnené na samiciach myší CD-1 viažucich 17-19 g (Charles River, Maďarsko). Zvieratá boli rozdelené do troch skupín. Každá skupina obsahovala 10 zvierat. Prvá skupina získala 160 mg/kg streptozotocínu, (Sigma), druhá skupina získala 160 mg/kg streptozotocínu a 200 mg/kg zlúčeniny z Príkladu 2, tretia skupina slúžila ako kontrola. Koncentrácia krvnej glukózy bola meraná tretí deň. Zvieratá boli utratené, boli odobraté vzorky séra na stanovenie inzulínu a zvieratám bol odstránený pankreas na histologické štúdie. Koncentrácie krvnej glukózy sú uvedené v Tabuľke 3.
Tabuľka 3:
Koncentrácia krvnej glukózy po aplikácii SZ a SZ + Príklad 2.
*=význačný rozdiel od kontroly
Tabuľka 3
Skupiny glukóza (stredná odch.)
Kontrola 4,78±2,13
SZ 13,03*±2,09
SZ + Príklad 2 8,16±0,65
SZ = streptozotocín
Z Tabuľky 3 je zrejmé, že zlúčenina Príkladu 2 značne znižuje koncentráciu krvnej glukózy zosilenej pridaním streptozotocínu. Preto sú zlúčeniny vzorca I vhodné na liečbu na inzulíne závislom diabetes mellitus.
Účinok nenasýtených derivátov kyseliny hydroxímovej vzorca I na neurodegeneratívne ochorenie.
Z literatúry je dobre známe a v predchádzajúcej opisnej časti je tiež uvedené, že enzým PARP je aktivovaný poškodením DNA spôsobenej ROS, po čom nasleduje uvoľňovanie NAD bunkami vedúce k ich smrti. Aktivácia PARP je pozorovateľná nielen počas odumierania neurónov spôsobeného ischemiou, ako je mozgová ischémia, ale jeho úloha bola potvrdená tiež u ďalších neurodegeneratívnych ochoreniach ako Alzheimerová choroba, Parkinsonová choroba a amyotropná laterálna skleróza (Love et. al., Neuropatol. appl. Neurobiol., 25, 98-108, 1999) (Eliasson et. al., Nat. Med., 10, 1089-1095, 1997).
• ·· ·· · ·· ·· ♦ · ··· · ·· • · · ······ • ··· · · · ··· <* ·· • · · · · ·· ··· ·· ·· ··· ·
Účinok na experimentálnu amyotropnú laterálnu sklerózu
Úvod
Amyotropná laterálna skleróza (ALS) je smrteľné progresívne neurodegeneratívne ochorenie. Najčastejšie sa vyskytuje u dospelých osôb v rozvojových zemiach na počiatku porúch motorických neurónov. ALS zahrnuje degeneráciu motorických neurónov v mozgovej kôre, mozgovom kmeni a mieche, čím spôsobuje atrofii kostrového svalstva, ochrnutie a smrť [Rowland, L.P. v Neurodegenerative diseases, str. 507-521, (1994)]. Približne 10-15% prípadov ALS sú familiálne. 20 % týchto familiálnych prípadov je spôsobených mutáciou s chybným zmyslom Cu/Zn superoxiddizmutázy-1 (SOD-1) [Deng, R.H. et al., Science, 261:1047, (1993)]. SOD-1, cytozolový enzým hojný v nervovom tkanive, hrá dôležitú úlohu v ochrane proti kyslíkovým radikálom indukovaným poškodením bunky. Mutovaný enzým udržuje takmer normálnu hladinu enzýmu. Štúdie in vitro ukazujú, že mutácie SOD-1 vedú ku zvýšeniu funkcie a posilneniu tvorby voľných radikálov. U myši transgénnej na mutovaný SOD-1 sa vyvíjajú symptómy podobné symptómom ALS. V transgénnych myšiach bolo dosiahnuté zvýšenie expresie niekoľkých ľudských génov, mutované SOD-1 (G93A, V148G) a vzniknuté modely ochorenia boli použité na testovanie liečiv proti ALS [Gurney, M.E.J. Neurol. Sci. 152: Suppl. 1 :S67-73(1997)].
Látky a metódy
V štúdii boli použité transgénne myši so zvýšenou expresiou ľudského génu pre mutovanú SOD-1 (G93A). Zvieratá boli nakúpené z Jackson Laboratory, USA. Liečba zlúčeninami vzorca I bola u zvierat zahájená pred výskytom symptómov tohto ochorenia vo veku 4 týždňov a zlúčeniny boli podávané raz denne orálne v 3 rôznych dávkach až do skončenia experimentu. Progresia ochorenia bola kontrolovaná raž týždne preskúšaním motorických funkcií (naťahovací reflex, loaded grid, rotarod test) do doby prežitia a po ukončení experi23 ··· ·· · ·· · ·· · · ··· ···· ··· · · · · ·· · • ··· · · · ···· · · · · • · · · · «·· ··· ·· ·· · ·· ··· mentu (120 dní) histologickým a biochemickým skúmaním oblastí motorických neurónov.
Výsledky
Zlúčeniny vzorca I viedli k miernemu zdržaniu výskytu deficitu reflexu, koordinácie a svalovej sily u transgénnych ALS zvierat. Tento účinok vykazoval závislosť na výške dávky. Tiež sa objavilo oneskorenie vo vzniku paralýzy a konečného štádia ochorenia. Výsledky histologických testov potvrdili pozorované klinické účinky liečby. Degenerácia a strata motoneurónov a čiernej hmoty neurónov bola menej rozsiahla u liečených zvierat než u kontrolnej skupiny.
Na základe týchto výsledkov je možné očakávať, že zlúčeniny vzorca I majú priaznivý liečebný účinok na ALS ochorenie.
Účinok na experimentálny model Parkinsonovej choroby (PD)
Úvod
Parkinsonova choroba je častá idiopatická neurodegenerativna porucha charakterizovaná trasom, bradykinézou, stuhlosťou a problémami s rovnováhou. Tieto motorické abnormality sú spôsobené vyčerpaním mozgového dopamínu, čo vedie k strate dopaminovaných neurónov v čiernej hmote pars compacta.
Analýza selektívnej neurotoxicity l-metyl-4-fenyl-l,2,3,6-tetrahydopyridínu (MPTP) vniesla svetlo do možného patologického mechanizmu PD. MPTP indukuje parkinsonovské motorické znaky u ľudí a zvierat [Dexter, A., et al., Ann. Neurol. 35:38-44 (1994)]. Liečba MPTP vedie tiež ku strate dopaminovaných neurónov v čiernej hmote pars compacta. V poškodených neurónoch sa objavujú Lewy body-like eozinofilové inklúzie a v týchto bunkách sa tiež znižuje aktivita mitochondriálneho komplexu I. Tieto zmeny sú charakteristické • ·· ·· · ·· · ·· ♦ · · · · ···· • · · · · · · · · • ··· · · · ···· · · · · • · · · 9 9 9 9 ··· ·· ·· · ·· ··· pre oxidatívny stres [Shapira, A., Adv. Neurol, 69:161-165 (1996)]. Biologicky aktívnym metaboiitom MPTP je MPP (l-metyl-4-fenyl-pyridímium). MPP inhibuje komplex I v mitochondriách, čo vedie k zvýšenej tvorbe superoxidových aniónov. Údaje ukazujú, že oxidatívny stres hrá ústrednú úlohu v patogenite prirodzenej forme PD a v PD indukovanej MPTP. Poly(ADP-ribóza)polymeráza (PARP) sa aktivuje oxidatívnym stresom a to hrá aktívnu úlohu v patologickom mechanizme PD. Myši s vyrazeným PARP génom vykazujú výrazne zníženú citlivosť na účinky MPTP indukujúce PD [Mandir, A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci, USA 96:5774-5779 (1999)]. Tieto zistenia naznačujú, že inhibícia PARP môže mať liečebný účinok na PD.
Látky a metódy
Zvieratá: samci myší C57BI boli nakúpení v Charles River, Maďarsko.
Indukcia PD u myší a liečba týchto zvierat:
Zvieratá vážiace 20 g boli ošetrené 4 dávkami MPTP v množstve 20 mg/kg podávanými v dvojhodinových intervaloch. Testované zlúčeniny boli podané 30 minút pred injekciami MPTP. Kontrolné zvieratá dostali liečbu vehikulom v rovnakej miere.
Sedem dní po injekcii MPTP boli zvieratá utratené, boli rýchle vybrané mozgy a striata bola oddelená na Petriho miske chladenej ľadom. Vybrané tkanivá boli okamžite zmrazené na suchom ľade a až do analýzy udržované pri teplote -80 °C. Vzorky tkaniva boli sonikované v 50 objemoch 0,1 M kyseliny chloristej. Po centrifugácii (14000xg, 10 min, 4°C), bolo 20 μΐ supernatantu injikovaných na reverznú fázu katecholamínového stĺpca (ESA, Bedford) a bol vyhodnotený obsah dopamínu.
·· • · · · · · ·· ♦ · * · 9 9 999
9 9 ···· ··· • ··· · · · ···· · ·t · • · · · · · ·9 • 99 ·· ·· · ·····
Meranie obsahu poly(ADP-ribóza)polyméru pomocou Western blotu.
Boli vybrané striata a ventrolaterálny stredný mozog (2 hodiny po poslednom podaní MPTP) a homogenizované v pufry (sacharóza/DTT) a centrifugované (14000xg, 5 min). Peleta bola resuspendovaná v pufry. Po stanovení koncentrácie proteínu (Bradford) boli na SDS/PAGE gél nanesené rovnaké vzorky. Z gélu bol proteín prenesený na nitrocelulózovú membránu a poly(ADP-ribózo)polymér je stanovený imunochemicky. Väzby špecifických protilátok sa vizualizujú chemiluminiscenciou.
Výsledky
Liečba pomocou MPTP spôsobila dramatické zníženie (80%) obsahu striatálneho dopamínu.
Testované zlúčeniny vzorca I čiastočne inhibovali (20-40 %) straty dopamínu indukované MPTP. Liečba pomocou MPTP viedla k prítomnosti aduktov poly(ADP-ribózo)polymér v striatálnej oblasti.
Sprievodná liečba testovanými zlúčeninami viedla k inhibícii tohto procesu (20-70 %). Preto je možné očakávať, že zlúčeniny vzorca I môžu mať liečebný účinok na PD.
Účinok zlúčenín vzorca I ako cytoprotektívneho činidla v neuredegeneratívnych procesoch indukovaných toxickými zlúčeninami
Úvod
Niektoré liečivá môžu pri neustálom či častom používaní spôsobovať poškodenie neurónov. Tento nepriaznivý účinok sa prejavuje neuropatiou. Z veľkého množstva liečiv, ktoré majú takýto nepriaznivý účinok (chlóramfenikol, dapson, disulfiram, dichlóracetát, etiónamid, glutetimid, hydralazín, izoniazid, lítium, metranidazol, nitrofurantoin, oxid dusný, platina, pyridoxín, vinkristín), sú najlepšie charakterizované a najviac prijímané neuropatie indukované izo·· ·· · ·· ·· · · ··· ··· ··· · · · · ·· • ··· · · · ···· · · · • · · · · · · •·· ·· ·· · ·· · niazidom, pyridoxínom, vinkristínom alebo cisplatínou. Chlórafenikol je liečivo, ktoré môže tiež neuropatiu vyvolať, ale tento nepriaznivý účinok môže po prerušení liečby vymiznúť. Vo väčšine klinických prípadov môže predčasné ukončenie chemoterapie zabrániť úspechu liečby a spôsobiť návrat ochorenia. Zvlášť veľké nebezpečenstvo predstavujú zmeny liečebného postupu vďaka vedľajším účinkom u protirakovinovej chemoterapie. Táto skutočnosť dáva veľkú dôležitosť takzvaným chemoprotektívnym látkam, ktoré môžu zmenšiť poškodzujúce nežiaduce účinky liečiv dôležitých na zachovanie života, bez toho aby akokoľvek znižovali účinok terapie. U pacientov s rakovinou, ktorí sú liečení cisplatínou (cPt), je najväčším nežiaducim toxickým účinkom obmedzujúcim veľkosť dávok poškodenia periferálnych nervov (periferálna neuropatia). Vznik týchto vedľajších účinkov môže brániť ukončeniu cisplatínovej liečby, môže ohroziť úspech tejto liečby a poškodzuje kvalitu života pacienta. Prítomnosť a stupeň poškodenia neurónov môže byť určený meraním rýchlosti nervového prenosu ako klinickými, tak experimentálnymi štúdiami. Neurotoxický účinok cisplatíny zahrnuje predné veľké myelínované periferálne nervy a prejavuje sa v poškodení zmyslových nervov (senzorová neuropatia). Niektoré posledné výskumy spomínajú ako sprievodný jav cPt liečby autonómnu neuropatiu a príležitostne tiež motorickú neuropatiu. Cisplatína môže spôsobiť prednostne poruchy funkcií zmyslových nervov priamym poškodením zadných koreňových ganglií.
U krýs vyvoláva chronická liečba cPt zmyslovú neuropatiu, ktorá sa prejavuje znížením rýchlosti prenosu zmyslových vzruchov (zmiešaného typu) ischiatického nervu. Prototyp zlúčenín vzorca I má cytoprotektívny potenciál a zabraňuje organotoxickým nepriaznivým účinkom protinádorových liečiv na bázi vyššie opísaného biochemického modelu pôsobení tým, že zabraňuje poškodeniam spôsobovaným voľnými radikálmi.
V experimentoch uskutočnených na krysiach bola cPt podávaná vo forme subkutánnej liečby (po dobu 10 týždňov) v dávkach 1 a 2 mg/kg. Bol sledovaný vývoj periferálnej neuropatie a ďalej ako rôzne dávky týchto zlúčenín ovplyvňujú poškodenie nervových funkcií (rýchlosť nervových prenosov).
• ·· ·· · · · ···· ··· ··· • · · ·*·· ·· « • ··· · · ····· · · · · • ···· ··· ··· ·· ·· · · ···
Metóda:
Poškodenie zmyslových a motorických nervov cPt bolo merané zazname/ návaním rýchlosti nervových prenosov upravenou Miyoshiho metódou. (Úprava metódy znamená, že rýchlosť nervových prenosov bola meraná pri izbovej teplote miesto pri teplote 37°C.) Rýchlosť nervových prenosov bola meraná pred liečbou cPt (ako kontrola), v piatom a desiatom týždni liečby. Počas meraní boli zvieratá mierne anestetikovaná éterom a na chvostový nerv boli umiestnené dve kolíkové elektródy vo vzdialenosti 50 mm od seba. Použitím stimulu o supramaximálnej sile boli zaznamenávané potenciály eferentných (motorických) a aferentných (zmyslových) nervových vzruchov. Rýchlosť nervových prenosov bola určená off-line spriemerovaním 10 akčných potenciálov nasledujúcim spôsobom v
NCV =----[m/sec], kde v = vzdialenosť [mm] medzi pármi elektród spúšťacia a registračná, = doba latencie [ms] vzniku akčného potenciálu
NCV = rýchlosť nervového prenosu [m/s]
Výsledky:
Desaťtýždenné podávanie 1 a 2 mg/kg cPt i.p. výrazne znížilo telesnú hmotnosť liečených zvierat v porovnaní s telesnou hmotnosťou kontrolných zvierat. Táto redukcia telesnej hmotnosti bola zaznamenaná tiež v prípade, kedy boli zvieratám podávané zlúčeniny tohto vynálezu. V bežnom správaní liečených a neliečených zvierat alebo zvierat liečených cisplatínou alebo touto novou zlúčeninou neboli žiadne rozdiely. V troch meraných časoch neboli zaznamenané žiadne rozdiely medzi rýchlosťou nervového prenosu zmyslových a motorických nervov u kontrolnej skupiny. U zvierat liečených cisplatínou sa • ·· ·· ·«e ·· · · ······ • · · · · · · ·· • ··· · · · ···· ·· · • · · · · ·· ··· ·· ·· · ·· · rýchlosť nervového prenosu jednoznačne a výrazne znížila v 5. a tiež v 10.týždni liečby 1 mg/kg cisplatínou. Po liečbe 2 mg/kg cisplatínou bolo zaznamenané ešte výraznejšie zníženie rýchlosti nervového prenosu. Neuropatia sa vyvinula taktiež v motorických nervoch.
Počas liečby cPt po dobu 10 týždňov sa rýchlosť nervového prenosu motorických nervov výrazne znížila ako u skupiny s dávkou 1 mg/kg cPt, tak u skupiny s dávkou 2 mg/kg cPt. Zníženie bolo závislé na veľkosti dávky. U skupiny liečenej kombináciou cPt v dávke 1 mg/kg a zlúčeninou vzorca I bolo zníženie vedenia nervového vzruchu na motorických nervoch výrazne nižšie než u skupiny liečenej len cPt v dávke 1 mg/kg, takže funkcia neurónov sa po kombinovanej liečbe zlepšila a stupeň tohto zlepšenia bol tým vyšší, čím vyšší bol stupeň poškodenia. U skupiny zvierat liečených ako cPt v dávke 2mg/kg, tak zlúčeninou vzorca I v rôznych dávkach, sa v 5 týždni zníženie rýchlosti nervových prenosov nelíšilo od skupiny zvierat liečených len 2mg/kg cPt. Viacmenej v 10 týždni bolo u skupiny zvierat liečených len 2 mg/kg cPt zníženie podstatne vyššie, zatiaľ čo u zvierat liečených kombináciou cPt a vyššie uvedených zlúčenín bolo zníženie v porovnaní so skupinou liečenou len 2 mg/kg cPt závislé na veľkosti dávok.
Zníženie rýchlosti eferentných nervových vzruchov bola na konci 10 týždňa nižšia zvlášť v porovnaní so skupinou zvierat liečených súčasne cPt a zlúčenín vynálezu.
Súhrnom je možné konštatovať, že poškodenie vedenia vzruchov zmyslových a motorických nervov spôsobené liečbou cPt bolo znížené súčasnou aplikáciou liečby zlúčeninou vzorca I, postupu tohto poškodenia (od 5. do 10. týždňa) bolo zabránené. Tento ochranný účinok bol u niektorých skupín závislý na veľkosti dávky. Neuroprotektívny účinok zlúčeniny vzorca I je možno demonštrovať ako na funkciách zmyslových, tak motorických nervov.
·· ·· ·e· ···· · · ···· ··· ···· ·e • ··· · · · ···· ·· · • · · · * ·· ··· ·· ·· · ·· ·
Biologický účinok karnitín-palmitoyltransferázy (CPTI)
CPTI je kľúčový enzým regulácie metabolizmu mastných kyselín. Pre estery (CoA) existujú dve možnosti:
1) syntéza triglyceridu reakciou s glycerolom alebo
2) oxidácia, ktorej prvým krokom je tvorba acylkarnitínu pôsobením enzýmu CPTI [viz (McGarry, JD., Woeltje, KF., Kuwajima, M. and Foster, D. (1980) Ann. Rev. Biochem. 49, 395-420.]. Enzým CPTI je umiestnený na vonkajšej strane vnútornej membrány mitochondrií (alebo na vonkajšej) a katalyzuje nasledujúcu reakciu:
FFA-CoA + L-karnitín * FFA-karnitín + CoA
Inhibícia oxidácie mastných kyselín vedie k zvýšeniu odbúravania a oxidácie glukózy. Toto je veľmi dôležité zvlášť u ischémie myokardu a diabetu. Obidva tieto patologické stavy majú vysokú úmrtnosť a chorobnosť. Pri ischemii myokardu a následnej reoxigenácii je zvýšená oxidácia mastných kyselín nebezpečná vzhľadom na vysokú potrebu kyslíka, tvorbu acylkarnitínu a jeho ničivému účinku na membránu (Busselen, P., Sercu, D. and Verdonck, F. (1988) J. Mol. Celí. Cardiol. 20, 905-916. Ford, DA., Han, X., Horner, CC. and Gross, R.W. (1996) Biochemistry, 35, 7903-790. Reeves, KA., Dewar, GH., Rad-Niknam, M., and Woodward, B. (1995) J. Pharm. Pharmacol. 48, 245-248). Na základe výsledkov experimentov je v súčasnosti prijímaný fakt, že aktivácia metabolizmu glukózy a súčasná inhibícia oxidácie mastných kyselín majú priaznivý účinok pokiaľ ide o znovunastolenie mechanickej funkcie myokardu a parametrov metabolizmu (uvoľňovanie enzýmov, peroxidácia lipidov). (Lopaschuk, GD., Spattford, MA., Davies NJ. a Wall SR. (1990) Circ. Res., 66, 546-553. Kennedy, JA. Unger, SA. and Horowitz, JD. (1996) Biochem. Pharmacol. 52, 273-280). Vplyv vyššie uvedenej selekcie substrátu myokardu, tj. výber medzi glukózou a mastnými kyselinami, môže byť dosiahnutý taktiež inhibítormi CPTI, čím sa zvýši využitie glukózy a zvýši sa energetika myokardu. (Lopaschuk, GD., Wall, SR., Olley, PM. and Davies, NJ. (1988) Circ. Res. 63, 103630 ·· ·· • ·· • ··· · •· ··· ·· ·· · • ·· • · ·· • ····· • ·· ·· · ·· · • ··· • ·· • · ·· • ·· ·····
1043. Carregal, M., Varela, A., Dalamon, V., Sacks, S. and Savino, EA. (1995) Árch. Phys. Biochem. 103, 45-49. Lopaschuk, GD. and Spafford, M. (1989) Circ. Res. 65, 378-387. Pauly, DF., Kirk, KA. and McMillin, JB. (1991) Circ. Res. 68, 1085-1094).
··
Určenie inhibície CPTI Tabuľka 4
Látky test CPTI v %
žiadna 100
príklad 1 60,1 ± 2,1
príklad 3 68,8 ± 3,2
Tieto údaje ukazujú, že enzým, ktorý katalyzuje rýchlosť limitujúcej reakcie oxidácie mastných kyselín, môže byť inhibovaný vyššie uvedenými látkami v rozsahu sub-milimolárnych koncentrácií. Tieto údaje tiež ukazujú, že testované zlúčeniny ovplyvňujú výber substrátu tkaniva srdcového svalu a iných tkanív a zmenou výberu substrátu ovplyvňujú tiež postischemické poškodenie tkaniva.
Biologická úloha génov citlivosti na kyslík regulovaných predovšetkým transkripčnými faktormi bHLH.
Ochrana proti škodlivým účinkom hypoxie vyžaduje rad organizovaných obranných reakcii ako na úrovni jednotlivých buniek, tak na úrovni celého organizmu. V regulácii expresie génov indukovaných hypoxiou hrá ústrednú úlohu transkripčný komplex HIF-l/ARNT. Koordinované regulované gény citlivosti na kyslík zahrnujú erytroproteín, ktorý stimuluje produkciu červených krviniek [Wang, G.L. a kol., PNAS 92:5510 (1995)], VEGF (vaskulárny endoteliálny rastový faktor), ktorý stimuluje tvorbu ciev [Goldberg, M.A. and Schneider, T.J., J. Biol. Chem., 269:4355-(1994)), glykolytické enzýmy ako GAPDH, LDH (laktátdehydrogenáza) [Rolfs, A. a kol., J. Biol. Chem., 272:200055 (1977)] a prenášač glukózy Glut-1.
Syntéza proteínov tepelného šoku (HSP) je indukovaná rôznymi stresami, ktoré na bunky pôsobia. HSP pomáhajú bunkám prežiť v nebezpečných situáciách a prispievajú k opravám všetkých poškodení [Cardkovascular Res., 578, (1993); Neurosci. Lett., 163.135-137 (1993)].
• ·· ·· · ·· ···· ······ • · · · · · ··· • ··· · · · ···· · · · • · · · ·· · ··· ·· ·· · ·· ·
Látky, ktoré môžu sprostredkovávať poplachovú reakciu v adaptácii na hypoxiu, na hypoxiu-reoxigenáciu a ktoré sú schopné obnoviť vyčerpanú adaptačnú reakciu sú potenciálne schopné znížiť poškodenie tkaniva spôsobené hypoxiou, hypoxiou-reoxygenáciou u ochorení ako infarkt, arteroskleróza a diabetes.
Experimentálna časť
Vyhodnotenie HSP-70
Aktivita HSP-70 bola študovaná testom reportérového génu tvoriaceho hybridnú DNA. K sekvencii promótora HSP-70 kódujúceho proteín teplotného šoku bol pripojený gén pre proteín, ktorý môže byť stanovený dobre merateľnou enzýmovou aktivitou. Boli použité biotechnologické procesy. Ako reportérový gén bol použitý gén pre luciferázu, ktorej aktivitu je možné ľahko stanoviť meraním luminiscencie. Ak je promótor génu enzýmu luciferázy nahradený promótorom génu HSP-70, koreluje zmena aktivity enzýmu luciferáza, tj. zmena frekvencie transkripcie tohto génu, s frekvenciou transkripcie génu HSP-70, ktorá za daných okolností prebieha. Týmto spôsobom môže byť účinok látky alebo procesu ovplyvňujúcich expresiu génu HJSP-70 študovaný meraním aktivity enzýmu luciferáza. V takomto experimentálnom systému bol testovaný účinok testovaných látok na expresiu HSP-70.
Usporiadanie experimentu
Na uskutočnenie týchto meraní bola zostrojená kruhová molekula dvojvláknovej DNA, tj. plazmid obsahujúci reportérový gén HSP-70. Ku kódujúcej sekvencii génu luciferázy získanej z Photymus pyralis bola pripojená takmer 600 bp dlhá sekvencia promotoru myšieho génu HSP-70 (v smere 5' od štartovného miesta génu). Použitá sekvencia promotoru obsahovala niekoľko väzbových miest pre proteíny sprostredkovávajúce expresiu génu HSP-70. Bol zostavený konštrukt heterológneho génu promótor-luciferáza v plazmidovom vektore založenom na pBR, ktorý môže byť selektovaný neomycínom. Tento plazmid ·· ·· ·· · ···· ··· ··*· • · · Φ··· ·· · • ··· · · · ···· · · · · • · · · · ··· ··· ·· ·· · ·· ··»
HSP-70-luciferáza bol trasfekovaný do myších fibroblastoidných buniek L929.
Test bol uskutočnený následovne.
Bunky L929 obsahujúce plazmid HSP-70-luc sa pestujú v DMEM médiu (Dulbeccovo Modifikované Eaglovo Médium) doplnenom 5 % FCS (fetálne teľacie sérum). Do jamiek 24-jamkovej kultivačnej doštičky Costar sa umiestni 104 buniek v 1 ml kultivačného média. Testované látky sa rozriedia PBS (fosfátom pufrovaný fyziologický roztok) na koncentráciu 10’2 M. Po priľnutí buniek (3-4 hodiny po vysiati) sa ku kultúre buniek pridá 10 μΐ roztoku a bunky sa inkubujú 30 minút v termostate pri 37 °C v atmosfére CO2. Kultivačné médium sa potom vymení za čerstvé (bez testovanej látky) a bunky sa ponechajú regenerovať po dobu 1 hodiny pri teplote 37 °C. Potom sa raz omyjú PBS. Po odstránení PBS sa k bunkám pridá 40 μΐ IX lyzovacieho pufru a vzorky sa ponechajú 30 minút na ľade. Potom sú vzorky prenesené do skúmaviek Eppendorf a centrifugované pri 14000 rpm 20 minút pri 4°C. 5 μΐ supernatantu sa pridá k 25 μΐ pufru luciferázového testu a v luminometry sa meria luminiscencia vzoriek 25 s. Výsledky sú zhrnuté v Tabuľke 5.
5X lyzovací pufer
125 mM Tris-H3PO4 pH 7,8 mM CDTA (trans-l,2-diamino-cyklohexán-N,N,N,'N'-tetraoctová kyselina) mM DTT % glycerol % Triton X-100
Pufer luciferázového testu mM (Tricín pH 7,8)
1,07 mM (MgCO3)4 Mg(OH)2 5H2O
2,67 mM MgSO4
0,10 mM EDTA
3,33 mM DTT ·· ·· · ·· · ···· ··· ···· • · · ···· ··· • ··· · · · ···· · · · · • · · · · ··· ··· ·· ·· · ·· ···
270 μΜ koenzýmA - lítna soľ
470 μΜ luciferín
530 μΜ ATP
Tabuľka 5
Látka Aktivita
kontrola 100
príklad 1 107
príklad 3 207
príklad 4 250
príklad 5 199
príklad 6 302
príklad 13 156
príklad 15 115
Štúdium génov citlivosti na hypoxii
Látky a metódy
Účinok látok vzorca I bol študovaný na expresii xenobiotických génov indukovanej hypoxie (1 % o2) v tkanivovej kultúre buniek Hepa a HepG2 na úrovni mRNA a proteínov. Bolo pozorované, že zlúčeniny vzorca I viedli k desaťnásobnému zvýšeniu expresie HSP-70 indukovanej metylcholantrénom v bunkách Hepa. Navyše zlúčeniny vzorca I zvyšujú expresiu génov citlivosti na hypoxiu ako VEGF, GAPDH a LDH ako odpoveď na liečbu hypoxie v bunkách Hepa a HepG2.
Zlúčeniny vzorca I zvyšujú v prípade hypoxie expresiu niekoľkých génov citlivosti na hypoxiu. To naznačuje, že tieto zlúčeniny ovplyvňujú bežné dráhy v regulácii génov citlivosti na kyslík. Zlúčeniny vzorca I sprostredkovávajúce adaptáciu na stres spôsobený hypoxiou a hypoxiou-reoxygenáciou sú vhodné na ochranu proti škodlivým účinkom hypoxie a hypoxie-reoxygenácie. Je možné očakávať, že tieto zlúčeniny poskytujú liečebný úžitok v podmienkach, kedy bolo poškodenie tkaniva spôsobené: narušením cirkulácie, zúžením a spazmom • ·· ·· · ·· ·· · · · · · ··· ··· · · · · ·· • ··· · · · ···· · · · .:. ..· ·..· : ·..· .
tepien, artériosklerózou, infarktom, embóliou, trombózou, nízkym krvným tlakom, šokom, popálením, omrznutím. Zlúčeniny tohto vynálezu môžu byť účinné taktiež pri sekundárnych hypoxických stavoch spojených s degeneratívnymi a metabolickými ochoreniami (Alzheimerova choroba, diabetes).
Účinok aktivity enzýmu LDH na bunky HepG2 vystavené hypoxii
Bunky HepG2 boli kultivované v DMEM médiu doplnenom 10 % FCS v 5 % CO2 a teplote 37°C. 105 buniek bolo umiestnených do jamiek 24-jamkovej kultivačnej doštičky Costar v 1 ml média. Nasledujúci deň boli bunky ošetrené testovanými látkami v koncentrácii 30 glg/ml, potom boli bunky vystavené hypoxii (1 % O2, 5 % CO2 v atmosfére dusíka) po dobu 24 hodín. Časť kontrolnej kultúry bola ošetrená vodou použitou ako rozpúšťadlo a ďalšia časť kontrolnej kultúry nebola vystavená hypoxii. Na konci hypoxického pôsobenia bolo odstránené médium a bunky dvakrát omyté studeným PBS. Bunkový lyzát bol pripravený v 0,05 % Triton X-100 obsahujúcom fosfátový pufer (0,05 M). Po centrifugácii (2 min pri 200000xg) bola stanovená aktivita supernatantu na základe spotreby NADH v prítomnosti substrátu pyruvátu sodného.
Použité hypotoxické ošetrenie spôsobilo u buniek trojnásobné zvýšenie obsahu LDH. Aktivita LDH buniek ošetrených testovanými zlúčeninami a jej porovnanie s aktivitou kontrolných kultúr vystavených hypoxii sú uvedené v Tabuľke 6.
Tabuľka 6
Zlúčenina Relatívny obsah LDH (%)
hypoxická kontrola 100
príklad 2 118
príklad 4 118
príklad 7 141
príklad 8 116
• ·· ·· · ·· ···« ··· · · · • ··· · · · ···· · · · · • · · · · · · · ··· ·· ·· · ·· ···
príklad 11 120
príklad 16 120
príklad 17 118
príklad 26 112
Antivírusový účinok
Génom retrovírusov obsahuje molekulu jednovláknovej RNA, ktorá sa replikuje pomocou intermediátovej dvojvláknovej DNA. Inzercia tejto dvojvláknovej DNA do hostiteľského genómu je kritickým okamžikom v životnom cykle vírusu. Mechanizmus inzercie je podobný mechanizmu transpozície. Enzým reverzná transkriptáza vytvára DNA kópiu vírusovej RNA. Táto dvojvláknová DNA sa syntetizuje v cytoplazme infikovanej bunky. Potom je lineárna DNA transportovaná do jadra a jedna či viac ich kópií sa integruje do genómu hostiteľskej bunky. Integráciu sprostredkováva enzým integráza. Hneď ako je provírusová DNA integrovaná, používa enzýmy hostiteľskej bunky na syntézu vírusovej RNA, ktorá slúži ako mRNA a ako genóm po zabalení do viriónov.
Pre proces replikácie vírusu je zásadné bezproblémové fungovanie reverznej transkriptázy. Inhibicia reverznej transkriptázy teda poskytuje účinný spôsob, ako inhibovať replikáciu retrovírusov. Časť anti-HIV liečiv v súčasnosti dostupných pôsobí cez inhibíciu reverznej transkriptázy. V súčasnosti je najúčinnejšia liečba HIV založená na kombináciách rôznych anti-HIV liečiv. Jedna alebo dve zlúčeniny týchto kombinácií sú inhibítory reverznej transkriptázy. Existujú dva hlavné typy inhibítorov reverznej transkriptázy. Jeden sa skladá z analógov nukleozidov. Dobre známym zástupcom tejto skupiny je azidotymidín, AZT. Tieto zlúčeniny inhibujú aktivitu enzýmu obsadením väzbového miesta nukleotidu. Nenukleotidové analógy predstavujú druhý typ inhibítorovej reverznej transkriptázy. Tieto zlúčeniny sa tiež viažu na enzým, ale nie na väzbové miesto nukleotidu. Väzba je špecifická, relatívne stabilná a výsledky deformácií aktívneho miesta enzýmu vedú k značným stratám aktivity enzýmu.
Usporiadanie experimentu
Výsledky testov ukazujú, že nové zlúčeniny tohto vynálezu majú inhibičný účinok na aktivitu reverznej transkriptázy. Tieto zlúčeniny môžu byť radené do skupiny nenukleotidových inhibítorov reverznej transkriptázy. Testy boli uskutočnené na reverznú transkriptázu vírusu Moloney myšej leukémie, ktorá je považovaná za dobrý model enzýmu reverznej transkriptázy HIV. Usporiadanie experimentu bolo nasledujúce:
Test meria inkorporáciu (3H)dTTP do cDNA pri použití poly(dA) ako templátu a oligo(dT)12-18 priméru. Reakcia bola uskutočnená v objeme 20 μΐ.
Zloženie reakčnej zmesi:
μΐ pufru 10X pg/ml templát-primér μΜ dTTP μεΐ (3H)dTTP testovaná látka: rozpustená v IX pufry Reakcia bola naštartovaná pridaním 5U reverznej transkriptázy.
Zloženie 10X pufru reverznej transkriptázy
500 mM Tris-HCl (pH 8,3) mM MgCU
300 mM KC1
100 mM DTT
Reakčná zmes bola inkubovaná 40 minút pri teplote 37 °C. Potom bolo 15 μΐ reakčnej zmesi nanesených na filtračný disk Whatman DE81 a filtre boli postupne omyté 5 % pufrom NaiHaPOíj, vodou a 96 % (v/v) etanolom. Po oschnutí boli filtre umiestnené do scintilačného koktailu (OptiPhase, HiSafe, Wallac) a rádioaktivita bola meraná v scintilátore Packard Tri-Carb 2200.
• · ··· ·· · • · · · • · · · · · · • · *······ · · • · · · ·> · * · ··· ·· ·· · ·· ···
Výsledky
Ako pozitívna kontrola boli použité dve zlúčeniny so známou inhibičnou aktivitou. AZT je nukleozidový analóg, zatiaľ čo zlúčenina Nevirapín je nenukleozidový typ inhibítora. Nevirapín sa viaže na takzvané benzodiazepínové väzbové miesto enzýmu. Použité koncentrácie testovaných zlúčenín boli v rozsahu koncentrácií 0,2-2 pg/ml.
Výsledky sú zhrnuté v Tabuľke 7.
Výsledky experimentov poskytujú nasledujúce závery:
Zlúčeniny tohto vynálezu inhibujú reverznú transkriptázu vírusu Moloney myšej leukémie. Inhibičná aktivita závislá na veľkosti dávky umožňuje konštatovanie, že inhibičný účinok zlúčenín príkladu 3, 4 a 5 je vyšší než inhi bičný účinok Nevirapínu, ale je nižší než účinok nukleozidového analógu AZT.
Pretože je použitý enzým považovaný za pravdivý model reverznej transkriptá zy HIV, môžu byť pozorované výsledky považované za anti-HIV účinky.
Tabuľka 7
Zlúčenina Koncentrácia μg/ml Inhibícia enzýmu, %
Nevirapín 0,2 21
2 26
AZT 0,2 84
0,8 93
Príklad 1 0,2 6
0,5 29
1,0 44
Príklad 3 0,5 7
1,0 45
2,0 70
• · ·· ·· · ·· · 9 9 9 99 ··· ····· · « ··· · · · ···· · · · • 9 · · ·· · ··· ·· ·· · ·· 39
Príklad 5 1,0 52
2,0 57
Údaje z poslednej doby ukazujú, že PARP je nevyhnutný na integráciu vírusového genómu do hostiteľskej bunky a že inhibícia PARP blokuje integráciu vírusového genómu do hostiteľskej DNA. Z tohto dôvodu môžu netoxické inhibítory PARP inhibovať virulentné retrovírusy a zastaviť množenie vírusov ako HIV a hepatídy iného typu než B.
Ako je vyššie uvedené, na inhibíciu PARP sú potrebné vhodné aktívne látky, ktoré nie sú toxické. Ako je vidno z Tabuľky 1, zlúčeniny tohto vynálezu sú silnými inhibítormi PARP.
Na základe vyššie uvedených výsledkov môže byť stanovené, že zlúčeniny tohto vynálezu - vďaka ich inhibičnému účinku na reverznú transkriptázu a PARP - môžu byť použité ako antivírusové aktívne látky majúce niekoľko možností pôsobenia.
Na základe vyššie uvedených výsledkov môžu byť nové deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej použité ako aktívne zložky farmaceutických kompozícií. Tak tento vynález zahrnuje farmaceutické kompozície obsahujúce deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I ako aktívnu zložku a jeden alebo viac konvenčných nosičov používaných vo farmaceutických kompozíciách.
Farmaceutická kompozícia tohto vynálezu obsahuje 0,1 až 95 % hmotnosných, prednostne 1 až 50 % hmotnostných, vhodne 5 až 30 % hmotnostných aktívnej zložky a je vhodná na liečenie ochorení založených na stavoch nedostatku kyslíka a energie a inhibície PARP, zvlášť potom pre autoimunitné a neurodegeneratívne a/alebo vírusové ochorenia.
Farmaceutická kompozícia tohto vynálezu je vhodná na perorálne, parenterálne alebo rektálne podanie alebo na lokálnu liečbu, pričom môže byť v tekutom alebo pevnom stave.
·· • · · • · · ···· ·· ··· · · · ···· · ·· « · · · · ·· ··· ·· ·· · ··
Pevnými farmaceutickými kompozíciami vhodnými na perorálne podávanie môžu byť púdry, kapsule, tablety, poťahované tablety, mikrokapsule atď. a môžu obsahovať spojivo ako želatína, sorbitol, poly(vinylpyrolidón) atď., plnidlo ako laktóza, glukóza, škrob, fosforečnan vápenatý atď., pomocné látky na tabletovanie ako je stearát horečnatý, mastenec, polyetylénglykol, oxid kremičitý atď.; zvlhčujúce látky ako je laurylsíran sodný atď. ako nosič.
Tekutými farmaceutickými kompozíciami na perorálne podávanie môžu byť roztoky, suspenzie alebo emulzie a môžu obsahovať napr. suspendujúce látky ako želatína, karboxymetylcelulóza atď., emuizifikátory ako sorbitan monooleát atď., rozpúšťadla ako voda, oleje, glycerol, propylénglykol, etanol atď, konzervačné prostriedky ako metyl alebo propyl p-hydroxybenzoát atď. ako nosič.
Farmaceutické kompozície vhodné na parenterálne podávanie všetky obsahujú sterilné roztoky aktívnych látok.
Formy dávok vymenované vyššie a ďalšie formy dávkovania sú známe per sa, napr. príručky ako Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. vydanie, Mack Publishing Co., Easton, USA (1990).
Farmaceutické kompozície tohto vynálezu všetky obsahujú jednotnú dávku. Typická denná dávka pre dospelých pacientov je 0,1 až 1000 mg zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický vhodnej adičnej soli, ktorej dávka môže byť podaná jednorázovo alebo vo viacerých dávkach. Skutočná dávka záleží na mnohých faktoroch a je určovaná lekárom.
Farmaceutická kompozícia tohto vynálezu sa pripravuje primiešaním zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický vhodnej adičnej soli k jednému alebo viacerým nosičom a prevedením takto získanej zmesi na farmaceutickú kompozíciu spôsobom známym per sa. Použiteľné metódy sú známe z literatúry, napr. príručka Remington's Pharmaceutical Sciences.
Farmaceutická kompozícia tohto vynálezu obsahuje deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, ďalej geometrický a/alebo optický izomér a/alebo ich farmaceutický vhodnú soľ ako aktívnu látku, pričom vo vzorci I • · ·· · · · • · · · ·· · • · · · · · · ·· • ··· · · 9 ···· · ·· • · · · · ··
999 99 99 9 999
X predstavuje aminoskupinu,
Y je hydroxy skupina,
R3 znamená C3.7 cykloalkyl alebo skupinu vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, C1.5 alkanoyl, ale jeden z nich môže byť tiež atóm vodíka, alebo
R4 a Rs vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý je kondenzovaný s benzénovým kruhom a môže tiež obsahovať atóm kyslíka, heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Cj-2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, a
Ri reprezentuje C14-20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkyl, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci.4 alkyl)-amino skupiny, ďalej potom Rj reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm
R.2 je atóm vodíka, alebo
X znamená halogén alebo hydroxy skupinu,
Y je atóm vodíka, hydroxy skupina, Cj.30 alkanoyloxy skupina alebo C3.22 al- kenoyloxy skupina alebo,
R3 je C3-7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5 kde,
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, Ci_5 alkyl skupinu, Ci.s alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže obsahovať tiež atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, kde heterocyklus a/alebo benzén mô42 žu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu,
Ri reprezentuje C1.20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupín, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Cj.4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci.4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm , a
R2 je atóm vodíka, alebo
Ri vytvorí spolu s R2 C5.7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom.
Preferovaná farmaceutická kompozícia tohto vynálezu obsahuje deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceutický vhodné soli ako aktívnu zložku, kde vo vzorci I
Ri reprezentuje fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z metylu, metoxy skupiny alebo atómu chlóru, ďalej potom Rj reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusík ako heteroatóm,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 znamená skupinu vzorca -NR4R5 kde
R4 a Rj reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus.
• · ·· • • · •
• · • • • • • • ·
• · • • • · • « •
··· · • • ···· · • ·
• • · • • • •
• ·· • · • • · • · ·
Špeciálne preferovaná farmaceutická kompozícia tohto vynálezu obsahuje deriváty nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceutický vhodné soli ako aktívnu zložku, kde vo vzorci I
Ri reprezentuje pyridyl alebo fenyl voliteľne substituovaný 1-3 metoxy skupinami,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 je pyrolidín, piperidín alebo morfolín.
Tento vynález zahrnuje metódy liečby, v ktorých je pacient trpiaci špecielne stavmi nedostatku bunkovej energie, diabetes komplikáciami, stavmi nedostatku kyslíku srdca a mozgu, neurodegeneratívnymi ochoreniami, autoimunitnými a/alebo vírusovými ochoreniami liečený netoxickou dávkou derivátu nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I alebo geometrickým izomérom a/alebo optickým izomérom alebo ich farmaceutický vhodnou soľou.
Ďalej tento vynález obsahuje použitie derivátu nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I alebo geometrického izoméru a/alebo optického izoméru alebo ich farmaceutický vhodnej soli na prípravu farmaceutickej kompozície vhodnej na liečbu stavov spojených s bunkovým nedostatkom energie zapríčineným inhibíiou PARP, diabetes komplikáciami, stavmi nedostatku kyslíka srdca a mozgu, neurodegeneratívnymi ochoreniami, autoimunitnými a/alebo vírusovými ochoreniami.
Vynález je ďalej objasnený prostredníctvom nasledujúcich príkladov.
• · · B e· · • · B · B · ·· ·· B · t · ··
BBB · · B ···· B BB
BB BB B BB ·
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Amidoxím dichlorid 0-(3-piperidino-propyl)škoricovej kyseliny
3,24 g (0,02 mol) amidoxímu škoricovej kyseliny sa rozpustí v roztoku
2,5 g hydroxidu sodného v 12,0 ml vody. Po rozpustení sa pridá 4,35 g (0,02 mol) l-chlór-3-piperidino-propán hydrochloridu v 8 ml metanolu. Reakčná zmes sa mieša po dobu 48 hodín pri izbovej teplote. Po pridaní 10 ml 10 % roztoku hydroxidu sodného sa zmes extrahuje 2 x 70 ml etylacetátu. Organické fázy sa spoja, sušia sa nad bezvodým síranom sodným, odfarbia sa dreveným uhlím a rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu. Zvyšok sa rozpustí v 5 ml izopropanole a roztok sa za stáleho chladenia ľadovou vodou okyslí na pH 3,5 prídavkom izopropanolu nasýteného kyselinou chlorovodíkovou. Precipitované biele kryštály sa sfiltrujú, premyjú ľadovým izopropanolom a sušia sa vo vákuu pri 40°C.
Získa sa 1,7 g amidoxím dihydrochlorid O-(3-piperidinopropyl)škoricovej kyseliny. Teplota topenia: 185°C.
’HNMR (CDC13, 200 MHz) δ = 1,4 ( 2H, m, piperidín 4-CH2), 1,6 (4H, m, piperidín 3- a 5-CH2), 1,93 (2H, O-CH2-CH2), 1,42 (4H, m, piperidín 2- és
6-CH2), 2,42 (2H, t, CH2-A), 4,1 (2H, t, -O-CH2-), 4,62 (2H, br, NH2), 6,5 (1H, d, Ar-CH=CH), 7,28-7,42 (5H, m, ArH).
Vstupná látka l-chlór-3-piperidino-propán hydrochlorid je komerčne dostupná. Amidoxím kyseliny škoricovej sa syntetizuje z nitrilu kyseliny škoricovej a hydroxylamínu metódou uvedenou v literatúre ( Chem. Reviews 62, 155 (1962)).
Príklad 2
Amidoxím hydrochlorid 0-(3-piperidino-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny • · · · · · • · · · · · · • e· · · · · · · · • ··· · · · ···· · · * · • ···· · · ····· ·· · ·· ···
Metódou opísanou v príklade 1 sa získa 2,62 g amidoxím hydrochloridu 0-(3-piperidino-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny reakciou 4,44 g (0,02 mol) amidoxímu 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny s 4,35 g (0,022 mol) 1-chlór3-piperidino-propán hydrochloridu.
Teplota topenia: 170-172°C ’H-NMR (DMSO-de) δ= 1,3-2,0 (6H, m, piperidín 3,4,5-CH2), 2,12 (2H, m, O-CH2-CH2-), 2,9 (2H, m, piperidín-CH2), 3,17 (2H, m, -CH2-N-), 3,4 (2H, m, piperidín-CH2), 3,79 (3H, s, OCH3), 3,80 (3H, s, OCH3), 4,1 (2H, t, O-CH2), 6,45 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,0 (1H, d, Ar-5H), 7,07 (1H, d, Ar-4H), 7,15 (1H, d, Ar-2H), 7,8 (1H, d, Ar-CH=CH-).
Amidoxím 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny použitý ako vstupný materiál sa pripraví reakciou nitrilu 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny s hydroxylamínom za obvyklých podmienok v roztoku etanol-voda. Nitril 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny sa získa z 3,4-dimetoxybenzaldehydu reakciou s kyanooctovou kyselinou v roztoku pyridínu. Metóda je opísaná v literatúre (J. Am. Chem. Soc. 65, 22 (1943)).
Príklad 3
Amidoxím hydrochlorid 0-(3-piperidino-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 1 sa získa 2,03 g amidoxímu hydrochloridu O-(3-piperidino-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny reakciou 3,26 g (0,02 mol) amidoxímu 3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny s 4,35 g (0,022 mol) hydrochloridu l-chlór-3-piperidino-propánu.
Teplota topenia:125-127°C.
’H-NMR (CDC13) δ=1,4 (2H, m. piperidín 4-CH2), 1,6 (4H, m, piperidín 3- a 5-CH2), 1,95 (2H, m, O-CH2CH2-), 2,42 (4H, m, piperidín 2- és 6-CH2), 2,42 (2H, t, =N-CH2-), 4,10 (2H, t, O-CH2CH2-), 4,7 (2H, s, NH2), 6,52 (1H, d, ··· β · · ·e ···· ···e··· • · · · · · · ·é • ·· · · · ···· 9 9 99 · · · · a ·· ··· ·· ·· · ·· 999
Ar-CH=CH-), 6,8 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,28 (1H, m, Ar-5H), 7,78 (1H, m, Ar4H), 8,5 (1H, dd, Ar-6H), 8,62 (1H, d, Ar-2H).
Amidoxím 3-(3-pyridyl)akryIovej kyseliny sa pripraví reakciou 3-(3pyridyl)akrylonitrilu s hydroxylamínom za obvyklých podmínek v roztoku etanol-voda. 3-(3-pyridyl)akrylonitrilu sa získa reakciou nikotínaldehydu s kyselinou kyanooctovou v roztoku pyridínu. Metóda je opísaná v literatúre (J. Am. Chem. Soc. 65,22 (1943)).
Príklad 4
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny
3,56 g (0,022 mol) amidoxímu kyseliny škoricovej sa rozpustí v roztoku
3,7 g hydroxidu draselného v 4 ml vody. Za stáleho miešania pri teplote 10°C sa do roztoku prikvapká roztok hydrochloridu l-chlór-3-piperidino-2-propanolu rozpusteného v 4 ml metanolu. Reakčná zmes sa mieša pod dusíkom pri izbovej teplote po dobu 48 hodín. Po pridaní 10 ml 10 % roztoku hydroxidu sodného sa reakčná zmes extrahuje 2 x 70 ml metylacetátu. Organické fázy sa spoja, sušia sa nad bezvodým síranom sodným, odfarbia sa dreveným uhlím a rozpúšťadlo sa odparí. Zvyšok sa za stáleho miešania a chladenia rozpustí v 5 ml izopropanolu, okyslí sa na pH 2,5 prídavkom izopropanolu nasýteného kyselinou chlorovodíkovou. Precipitované kryštály sa sfiltrujú, premyjú studeným izopropanolom a sušia sa pri 40 °C vo vákuu. Získa sa 2,4 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny.
Teplota topenia: 160-162 °C.
’H-NMR (DMSO-de) δ= 1,4-1,9 (6H, br, piperidín-CHj), 3,0 (2H, br, piperidín-CHj), 3,16 (1H, dd, propyl-CH), 3,24 (1H, d, propyl-CH), 3,4 (2H, br, piperidín-CH2), 3,84 (1H, dd, propyl-CH), 4,16 (1H, dd, propyl-CH), 4,5 (1H, br, propyl-CH), 6,2 (1H, br, OH), 7,1 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,48 (3H, m, ArH), 7,72 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,76 (2H, m, Ar-H).
• ·· ··· ·· • · ι« · ··· · · · • ··· · · · ···· · · · · a · · · · · · · ··· ·· ·♦ · ·· ···
Príklad 5
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3pyridyl)akrylovej kyseliny
a. Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 3,1 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny reakciou
3,58 g (0,022 mol) amidoxímu 3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny s 5,6 g (0,026 mol) hydrochloridom l-chlór-3-piperidino-2-propanolu.
Teplota topenia: 165-167°C ’H-NMR (DMSO-de) δ=1,4-2,0 (6H, m, piperidín-CH2), 2,9-3,6 (6H, m, 2 piperidín-CHí és propyl-CH2), 3,95 (2H, m, propyl-CH2), 4,36 (1H, m, propylCH), 6,9 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,60 (IH, d, Ar-CH=CH-), 8,02 (1H, dd, ArH), 8,67 (1H, dt,ArH), 8,82 (1H, d, ArH), 9,02 (1H, d, ArH).
b. Do 3 ml metanolového roztoku 1,88 g (0,02 mol) epichlórhydrínu sa za stáleho miešanis a chladenia prikvapká 1,74 g (0,02 mol) piperidínu, teplota reakčnej zmesi sa udržuje pod 20°C. Miešanie pokračuje pri izbovej teplote po dobu 2 hodín, v 15 minútach sa pridá v atmosfére dusíka pri 40°C roztok 2,8 g (0,017 mol) amidoxímu 3-(3-pyridil)akrylovej kyseliny v hydroxidu draselnom (pripraveného z 1,25 g hydroxidu sodného a 4 ml vody). Potom sa mieša pri 40 °C pod dusíkom, reakčná zmes sa extrahuje etylacetátom a roztok sa odparí. Surová báza sa prečistí kolónovou chromatografiou (Kieselgel, etylacetátmetanol 5:1). Získa sa 0,9 g čistej bázy, ktorá sa rozpustí v 5 ml izopropanolu a roztok sa okyslí roztokom izopropanol-kyselina chlorovodíková na pH 2. Precipituje 0,88 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny, čo je rovnaký produkt ako opísaný produkt v príklade 5a.
Teplota topenia: 165-167 °C
Príklad 6
Amidoxím O-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-škoricovej kyseliny
·· ·
Metodou opísanou v príklade 4 bez utvorenia soli sa získa 0,76 amidoxímu O-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-škoricovej kyseliny ako olejového produktu reakciou 3,56 (0,022 mol) amidoxímu škoricovej kyseliny s 5,25g (0,026 mol ) hydrochloridu l-chlór-3-t.butylamino-2-propanolu.
’H-NMR (CDCh+DMSO) δ= 1,1 (9H, s, t.butyl-CH3), 2,71 (2H, d, -CH2NH-t.Bu), 3,98 (1H, dd, O-CH2-), 4,08 (1H, dd, O-CH2), 4,10 (1H, m, CH-OH), 6,9 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,15 (1H, d, Ar-CH=CH-)> 7,2-7,6 (5H, m, ArH), 10,7 (1H, br, HC1).
Príklad 7
Amidoxím 0-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 3,24 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny reakciou 3,56 g (0,002 mol) amidoxímu škoricovej kyseliny s 5,62 g (0,026 mol) hydrochloridu 1chlór-3-morfolino-2-propanolu.
Teplota topenia: 176-180°C ’H-NMR (DMSO-dc) δ= 3,15-3,20 (3H, m, CH2), 3,37-3,43 (3H, m, CH2), 3,82-4,02 (6H, m, CH2), 4,40-4,46 (lH,m, -CH-OH), 6,60 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,67 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,40-7,47 (3H, m, ArH), 7,53-7,57 (2H, m, ArH).
Príklad 8
Amidoxím dihydrochlorid
O-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-3,4dimetoxyškoricovej kyseliny
Metodou opísanou v príklade 4 sa získa 1,5 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny reakciou 4,88 g (0,022 mol) amidoxímu 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny s 5,25 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-t.butylamino-2-propanolu.
• ·· · · · · · ·· · · · · · ·· · • « · · · · Λ *· • «·· · · « ·Λ· · · * • · · · · ·· «·· ·» ·♦ · ·· ·
Teplota topenia: 204-205°C.
^-NMRCCDCh+CHsOD) δ= 1,45 (9H, s,CH3), 3,12-3,26 (2H, m, CH2NH),3,90 (3H, s, OCH3), 3,95 (3H, s, OCH3), 4,24-4,30 (2H, m, O-CH2), 6,9 (1H , d, Ar-CH=CH-), 6,9 (1H , s, ArH), 7,24-7,28 (2H, m, Ar-H), 7,6 (1H , d, Ar-CH=CH-).
Príklad 9
Amidoxím hydrochlorid O-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)-3,4dimetoxyškoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 2,1 g amidoxím hydrochloridu 0-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxy škoricovej kyseliny reakciou 4,88 g (0,022 mol) amidoxímu 3,4-dimetoxiškoricovej kyseliny s 5,62 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chloro-morfolino-2-propanolu.
Teplota topenia: 139-142°C.
’H-NMRÍDMSO) δ=3,2-3,35 (4H, m, 2CH2), 3,65-4,15 (9H, m, 4CH2, CH-OH), 3,76 (3H, s, OCH3), 3,80 (3H, s, 0CH3), 6,3 (1H , d, Ar-CH=CH), 6,95-7,10 (3H, m, ArH), 7,12 (1H, d, Ar-CH=CH-).
Príklad 10
Amidoxím hydrochlorid O-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 1,85 g amidoxím hydrochloridu 0-(3-morfoiino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyi)-akrylovej kyseliny reakciou
3,58 g (0,022 mol) amidoxímu 3-(3-pyridyl)-akrylovej kyseliny s 5,62 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chIór-3-morfolino-2-propanolu.
Teplota topenia: 114-117 °C.
··· · · · · ·· • ··· · · · á··· · ·· • · · · · ·· e·· ·· ·· ··· ’H-NMR (DMSO-CDC13) 5=3,17-3,25 (4H, m, 2CH2), 3,92-4,08 (8H, m, 4CH2), 4,40-4,50 (1H, m, CH-OH), 6,82 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,58 (1H, d, ArCH=CH-), 7,90 (1H, dd, 65-ArH), 8,51-8,55 (1H, m, 4-ArH), 8,78 (1H, dd, 6ArH), 8,97 (1H, d, 2-ArH).
Príklad 11
Amidoxím dihydrochlorid 0-(3-( 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxypropyl] škoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 1,77 g amidoxím dihydrochloridu O-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxy-propyl]škoricovej kyseliny reakciou 3,56 g (0,022 mol) amidoxímu škoricovej kyseliny s 6,81 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chloro-3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2propanolu.
Teplota topenia: 204-206 °C.
'H-NMR (CDCh+MeOD) 5=3,4-3,6 (4H, m, 2CH2), 4,2-4,7 (7H, m, 3CH2, CH-OH), 6,62 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,82 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,19 (1H, s, izochinolín-ArH), 7,25 (1H, s, izochinolín-ArH), 7,29-7,32 (2H, m, izochinolín-ArH), 7,4-7,65 (5H, m, 5-fenyl-H).
Príklad 12
Amidoxím dihydrochlorid 0-(3-( 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxypropyl]-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 3,62 g amidoxím dihydrochloridu 0-(3-( 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochi no lyl)-2-hydroxy-propyl]-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny reakciou 4,88 g (0,022 mol) amidoxímu 3,4dimetoxyškoricovej kyseliny s 6,81 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlor-3(1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-propanolu.
• ·· ··-/< ·· • · · · · ·· · ··· · > · · f· • ··· · · ····· · ·· • · · · · ·· ··· ·· ·· · ·· ·
Teplota topenia: 193-195°C.
’H-NMR (CDCh+MeOD) 5=3,4-3,6 (4H, m, 2CH2), 3,9 (6H, s, 2-OCH3), 4,2-4,3 (7H, m, 3CH2, CH-OH), 6,48 (1H, d, Ar-CH=CH-), 6,94 (1H, d, 5ArH), 7,18 (1H, d, 6-ArH), 7,74 (1H , d, Ar-CH=CH), 7,15-7,35 (4H, m, izochinolin-ArH).
Príklad 13
Amidoxím dihydrochlorid 0-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxypropyl]-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 1,5 g amidoxím dihydrochloridu 0-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxy-propyl]-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny reakciou 3,58 g (0,022 mol) amidoxímu 3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny s 6,81 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-(l,2,3,4-tetrahydro-2izochinolyl)-2-propanolu.
Teplota topenia: 163-165°C.
’H-NMR (DMSO-d6) 5=3,0-5,0 (6H, m, izochinolín 3CH2), 4,04 (1H, dd, propyl CH2-N=), 4,07 (1H, dd, propyl CH2-N=), 4,40 (2H, dd, -O-CH2-), 4,72 (1H, m, CH-OH), 7,6 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,98 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,1-7,9 (4H, m, ArH), 8,70-9,60 (4H, m, ArH).
Príklad 14
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-t. butylamino-2-hydroxy-propy 1)-3-(3pyridyl)akrylovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 2,17 g amidoxím dihydrochloridu
0-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny reakciou
3,58 g (0,022 mol) amidoxímu 3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny s 5,25 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-t. butylamino-2-propanolu.
• ·· ·· · ·· ···· ··· · · ··· ···· · · • ··· · · · ···· · · · • · · · · · · ··· ·· ·· · ··
Teplota topenia: 164-166°C.
’H-NMR (CDCh+MeOH) δ=1,44 (9H, s, 3CH3), 3,05 (1H, dd, -HN-CH2), 3,23 (1H, dd, -NH-CHj-), 4,23 (1H, dd, -O-CH2), 4,26 (1H, dd, OCH2), 4,42 (1H, m, -CH-OH), 7,18 (1H, d, Ar-CH=CH-), 8,04 (1H, d, Ar-CH=CH-), 8,13 (1H, t, Ar-6H), 8,82 (1H, d, Ar-5H), 8,98 (1H, d, Ar-4H), 9,33 (1H, s, Ar-2H).
Príklad 15
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 0,80 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny reakciou 3,56 g (0,022 mol) amidoxímu škoricovej kyseliny s 5,2 g (0,026 mol) hydrochloridu 1-chlór3-pyrolidino-2-propanolu.
Teplota topenia: 171-175°C.
*H-NMR (CDCh+DMSO) 5=2,05 (4H, m, pyrolidin 3,4-CH2), 3,15-3,6 (4H, m, pyrolidin 2,5-CH2), 3,7 (2H, m, -CH2-N=), 4,11 (2H, m, O-CH2-), 4,46 (1H , m, CH-OH), 6,67 (1H , d, Ar-CH=CH-), 8,04 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,4-
7,6 (5H, m, ArH).
Príklad 16
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)-3,4dimetoxyškoricovej kyseliny
Metodou opísanou v príklade 4 sa získa 3,89 g amidoxím dihydrochloridu
0-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny reakciou
4,88 g (0,022 mol) amidoxímu 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny s 5,2 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-pyrolidino-2-propanolu.
·· ·· · • · · ··· · · • ···· • ·· ··
Teplota topenia:186-188 °C.
’H-NMR (DMSO) δ=1,95 (4H, m, pyrolidín 3,4-CH2), 3,0-3,25 (4H, m, pyrolidín 2,5-CH2), 3,40-3,90 (4H, m, OCH2-,s N-CH2), 3,8 (6H, s, 2-OCH3),
4,3 (1H , m, CH-OH), 6,65 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,70 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,0-7,17 (3H, m, ArH).
Príklad 17
Amidoxím hydrochlorid O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 4 sa získa 2,65 g amidoxím hydrochloridu 0-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny reakciou
3,58 (0,022 mol) amidoxím hydrochloridu 3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny s 5,2 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-pyrolidino-2-propanolu.
Teplota topenia: 125-127°C.
’H -NMR (DMSO+CDCI3) δ=2,07 (4H, m, pyrolidín 3- a 4- CH2), 3,13,25 (4H, m, pyrolidín 2- a 5- CH2), 3,70-4,20 (4H, m OCH2, N-CH2), 4,4 (1H , m, CH-OH), 7,06 (1H, d, Ar-CH=CH-), 8,0 (1H , d, Ar-CH=CH-), 8,05 (1H, t, Ar-5H), 8,68 (1H, d, Ar-4H), 8,88 (1H, d, Ar-6H), 9,07 (1H, s, Ar-2H).
Príklad 18
Amidoxím O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxy škoricovej kyseliny
Z 10,5 g (0,047 mol) amidoxímu 3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny sa metódou opísanou v príklade 5.b bez utvorenia soli získa 5,4 g amidoxímu O(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny. Dihydrochlorid produktu sa precipituje z izopropanolového roztoku prídavkom kyseliny chlorovodíkovej rozpustenej v izopropanole.
··
Teplota topenia: 190°C.
’H-NMR (CDCh+DMSO-dó) δ=1,7-2,1 (6H, m, piperidín 3,4,5-CH2), 3,0-3,7 (6H, m, -CH2-N-(CH2)2), 3,9 (6H, s, OCH3), 4,1 (2H, d, -O-CH2-), 4,56 (1H, m, O-CH<), 6,58 (1H, d, Ar-CH=CH-), 6,87 (1H, m, ArH), 7,12 (1H, m, ArH), 7,16 (1H , m, ArH), 7,85 (1H , d, Ar-CH=CH-), 8,9 (2H, br, NH2), 10,2 (1H, br, NH).
Príklad 19
Acetamidoxím O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)cyklohexylidénu
Metódou opísanou v príklade 4 sa získajú bez utvorenia soli 3 g olejového surového produktu reakciou 3,39 g (0,022 mol) acetamidoxímu cyklohexylidénu s 5,6 g (0,026 mol) hydrochloridu l-chlór-3-piperidino-propanolu. Surová báza sa prečistí kolónovou chromatografiou (Kieselgel, chloroform-metanol 9:1). 1,6 g acetamidoxímu 0-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)cyklohexylidénu sa získa vo forme bezfarebného oleja.
'H-NMR (CDC13) 5=1,45-1,72 (12H, m, 5 cyklohexán-CH2 a piperidínCH2), 2,0-2,06 (2H, m, N-CH2), 2,5-2,6 (4H, m, piperidín-CH2), 2,65-2,75 (4H, m, piperidín-CH2), 4,10-4,17 (2H, m, OCH2), 4,6 (1H , m, CH-OH), 7,2 (1H , m, =CH-).
Amidoxím cyklohexylidénu použitý ako vstupný materiál sa pripraví z acetonitrilu cyklohexylidénu a hydroxylamínu za bežných podmienok v roztoku etanol-voda. [Chem. Reviews 62, 155 (1962)]. Acetonitril cyklohexylidén sa získa z kyseliny kyanooctovej metódou opísanou v literatúre [J. Am. Chem. Soc. 65, 22 (1943)].
Príklad 20
N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-fenyl-akrylimidoylchlorid ·· ·· ·· · ·· • · · · · · · ··· · · · ···· · · • ·· • · · · · ·· ·· · ·«
3,78 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-morfolino-2-hydroxypropyl)škoricovej kyseliny (produkt Príkladu 7) sa rozpustí v 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej pri 5°C a po pridaní 5 ml dioxánu sa reakčná zmes ochladí na 0 °C. Za stáleho miešania sa do roztoku prikvapká po dobu 1,5 hodiny 1,38 g (0,02 mol) dusitanu sodného. Miešanie pokračuje po dobu 4 hodín pri izbovej teplote a hodnota pH sa upraví na 11 prídavkom 10% roztoku hydroxidu sodného. Po extrakcii 2x50 ml etylacetátu sa organické vrstvy spoja a sušia sa nad bezvodým síranom sodným, odfarbia sa dreveným uhlím a odparia.
Získa sa 1,13 g N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-fenylakrylimidoylchloridu ako olejového produktu.
’H-NMR (CDCls) δ=2,45 (4H, m, morfolín CH2), 2,65 (2H, m, =N-CH2-), 3,73 (4H, m, morfolín CH2), 4,09 (1H, m, CH-OH), 4,28 (2H, m, O-CH2), 6,85 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,30 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,32-7,50 (5H, m, ArH).
Príklad 21 N-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxy-propoxy]-3fenylakrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa zo 4,24 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu N-[3-( 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinoly l)-2-hydroxypropyl)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 11) 0,78 g N-[3-(l,2,3,4tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxy-propoxy]-3-fenylakrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
’H-NMR (CDCH) δ=2,68 (2H, m, izochinolín CH2), 2,90 (2H, m, izochinolín CH2), 2,84 (2H, m, =N-CH2-), 3,80 (2H, m, izochinolín CH2) 4,21 (1H, m, CH-OH), 4,30 (2H, m, OCH2), 6,85 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,35 (1H, d, ArCH=CH-), 7,15-7,50 (9H, m, ArH).
·· · ·· •· •·
9· •· • · ···
Príklad 22
N-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)-2-hydroxy-propoxy]-3-(3,4dimetoxyfenyl)-akrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 19 sa získa z 1,84 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-[3-( 1,2,3,4-tetrahy dro-2-izochinoly l)-2-hydroxy-propy 1]-
3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny 1,2 g N-[3-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolyl)2-hydroxy-propoxy]-3-(3,4-dimetoxyfenyl)-akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
’H-NMR (CDC13) δ=2,65 (2H, m, izochinolín CH2), 2,90 (2H, m, izochinolín CH2), 2,92 (2H, m, =N-CH2), 3,90 (2H, m, izochinolín CH2), 3,91 (3H, s, OCH3), 3,97 (3H, s, OCH3), 4,21 (1H , m, CH-OH), 4,30 (2H, m, OCH2), 6,74 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,2 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,0-7,3 (7H, m, ArH).
Príklad 23
N-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3,4-dimetoxyfenyl)akrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 19 sa získa z 4,24 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu 0-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny (produkt príkladu 8) 0,3 g N-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propoxy)-3(3,4-dimetoxyfenyl)-akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
’H-NMR (DMSO+CDCI3) δ=1,35 (9H, s, 3CH3), 3,1 (2H, m, N-CH2-), 3,80 (3H, s, OCH3), 3,85 (3H, s, OCH3), 4,05 (1H , m, CH-OH), 4,3 (2H, m, 0CH2), 6,92 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,60 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,0-7,3 (3H, m, ArH).
Príklad 24
N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3,4-dimetoxyfenyl)akrylimidoylchlorid
Metodou opísanou v príkladu 19 sa získá z 4,02 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny (produkt príkladu 9) 1,08 g N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3,4dimetoxyfenyl)-akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
’H -NMR (CDCh) δ=2,45 (4H, m, morfolín CH2), 2,68 (2H, m, =N-CH2), 3,72 (4H, m, morfolín CH2), 3,90 (6H, s, OCH3), 4,1 (1H , m, CH-OH), 4,25 (2H, m, OCH2), 6,70 (1H , d, Ar-CH=CH-), 6,85 (1H , d, ArH), 7,0-7,08 (2H, m, ArH), 7,22 (1H, d, Ar-CH=CH).
Príklad 25
N-(3-pyrrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3,4-dimetoxyfenyl)akrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 19 sa získa z 1,22 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)-3,4-dimetoxyškoricovej kyseliny (produkt príkladu 16) 1,18 g N-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3(3,4-dimetoxyfenyl)-akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
'H-NMR (CDCI3) 5=1,75 (4H, m, pyrolidín CH2), 2,42-2,55 (4H, m, pyrrolidín CH2), 2,75 (2H, m, =N-CH2), 3,92 (6H, s, OCH3), 4,08 (1H , m, CHOH), 4,25 (2H, m, -OCH2), 6,74 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,20 (1H , d, ArCH=CH-), 6,9-7,1 (3H, m, ArH).
Príklad 26
N-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3-fenylakrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 19 sa získa z 3,62 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 15) 1,03 g N-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3fenylakrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
·· ·· · ·· · ···· ··· · · ·· • · · ···· 9 99
999 99 9 9999 9999
9 9 9 9 9 99
999 99 99 9 99999 ’H-NMR (DMSO) δ=1,85 (4H, m, pyrolidín CH2), 2,75-3,60 (6H, m, NCH2), 4,0-4,2 (3H, m, OCH2, CH-OH), 7,0 (1H , d, Ar-CH=CH), 7,63 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,2-7,7 (5H, m, ArH).
Príklad 27
N-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3-pyridyl)akrylimidoyIchlorid
Metódou opísanou v príklade 19 sa získa z 3,27 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-pyroiidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyi)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 17) 1,98 g N-(3-pyrolidino-2-hydroxy-propoxy)-3(3-pyridyl)akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
]H-NMR (CDC13) 5=1,79 (4H, m, pyrolidín CH2), 2,40-2,70 (6H, m, =NCH2-, pyrolidín-CHj), 4,06 (1H , m, CH-OH), 4,27 (2H, m, OCH2), 6,92 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,3 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,25 (1H , m, ArH), 7,80 (1H , d, ArH), 8,50 (1H, m, ArH), 8,70 (1H, s, ArH).
Príklad 28
Amidoxím dihydrochlorid O-(3-piperidinopropyl)-4-fluór-škoricovej kyseliny
Metódou opísanou v príklade 1 sa získa 1,66 g amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidinopropyl)-4-fluór-škoricovej kyseliny reakciou 1,80 g (0,01 mol) amidoxímu 4-fluór-škoricovej kyseliny s 2,18 g (0,011 mol) hydrochloridu 1chlór-3-piperidino-propánu.
Teplota topenia: 192-194°C.
’H-NMR (CDCh+DMSO-dó) 5=1,5-2,1 (6H, m, piperidín 3,4,5-CH2), 2,4 (2H, m, O-CH2-CH2-), 2,9-3,6 (4H, m, piperidín-CH2), 3,4 (2H, t, -CH2-N<),
4,2 (2H, t, O-CH2-), 6,65 ,(d, Ar-CH=CH-), 7,12 (2H, m, Ar-H), 7,58 (2H, m, Ar-H), 7,9 (1 H, d, Ar-CH=CH-)
e· 4· • • 4 e
• · • • • 4 · • e
• · • • • 4 • 4 4
··· • · • ···· • e • •
• • • • • • •
• ·· • · 4 ·· ···
Príklad 29
N-(3-piperidino-propoxy)-3-fenyl-akrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa z 3,60 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-propyl)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 1) 1,43 g N-(3-piperidino-propoxy)-3-fenyl-akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
*H-NMR (CDCh) δ=1,4 (2H, m, piperidín 4-CH2), 1,6 (4H, m, piperidín
3-, s 5- CH2), 1,95 (2H, m, O-CH2-CH2-), 2,4 (6H, m, CH2-N-(CH2-)2), 4,3 (2H, t, O-CH2), 6,85 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,25 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,3 (3H, m, ArH), 7,45 (2H, m, ArH).
Príklad 30
N-(3-piperidino-2-hydroxy-propoxy)-3-fenyl-akrylimidoylchlorid
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa z 3,76 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 4) 1,28 g N-(3-piperidino-2-hydroxy-propoxy)-3-fenylakrylimidoylchloridu.
Teplota topenia: 91-92 °C.
'H-NMR (CDCh) 5=1,4 (2H, m, piperidín 4-CH2), 1,55 (4H, m, piperidín 3- a 5-CH2), 2,4 (4H, m piperidín-2,6-CH2), 2,6 (2H, m, CH2-N), 4,1 (1H , m, CH-OH), 4,25 (2H, m, O-CH2), 6,85 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,25 (1H , d, ArCH=CH-), 7,35 (3H, m, ArH), 7,45 (2H, m, ArH).
Príklad 31
Hydrogénmaleinát N-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3-pyridyl)akrylimidoylchloridu • ·· ·· · ·· · ···· · · · ···· ··· ···· ·· · • ··· · · · ···· · · · · • ···· ··· ··· ·· ·· · ·· ···
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa z 3,65 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyrodyí)akrylovej kyseliny (produkt príkladu 14) 1,40 g N-(3-t.butylamino-2-hydroxy-propoxy)3-(3-pyridyl) akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
Hydrogénmaleinát produktu sa precipituje z izopropanolového roztoku s kyselinou maleínovou.
Teplota topenia: 114-116°C.
‘H-NMR (CDCh+DMSO-dó) δ=1,35 (9H, s, butyl-CH), 3,35 (2H, m,
CH2-NH), 4,17 (1H, m, CH-OH), 4,27 (2H, m, O-CH2), 6,10 (2H, s, kyselina maleínová-CH), 7,10 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,35 (1H , d, Ar-CH=CH), 7,40 (1H, m, Ar-6H), 8,08 (1H , m, Ar-5H), 8,55 (1H, m, Ar-4H), 8,80 (1H, s, Ar2H).
Príklad 32
Hydrogénmaleinát N-(3-pipendino-propoxy)-3-(3-pyridyl)akrylimidoylchloridu
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa z 3,61 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu O-(3-piperidino-propyl)-3-(3-pyridyl)akrylovej kyseliny (produkt príkladu 3) 1,65 g N-(3-piperidino-propoxy)-3-(3pyridyl)akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
Hydrogénmaleinát produktu sa precipituje z izopropanolového roztoku s kyselinou maleínovou.
Teplota topenia: 91-92 °C.
’H-NMR (CDC13) δ= 1,8 (6H, m, piperidin 3,4,5-CH2), 2,2 (4H, m piperidín 2,6-CH2), 2,5 (2H, m, propyl-CH2), 3,05 (2H, m, CH2-N<), 4,25 (2H, m, OCH2-), 6,2 (2H, s, kyselina maleínová -CH2), 6,8 (1H, d, Ar-CH=CH), 7,25 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,30 (1H, m, Ar-6H), 7,75 (1H, m, Ar-5H), 8,5 (1H , m, Ar4H), 8,65 (1H, s, Ar-2H).
• ·· ·· · ·· · ···· ······· • · · ······ · φ · · · ···· · · ·· • ···· ··· •·· ·· ·· · ·· ···
Príklad 33
Hydrogénmaleinát N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3-pyridyl)akrylimidoylchloridu
Metódou opísanou v príklade 20 sa získa z 3,42 g (0,01 mol) amidoxím dihydrochloridu 0-(3-morfolino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)akryIovej kyseliny (produkt príkladu 10) 1,26 g N-(3-morfolino-2-hydroxy-propoxy)-3-(3pyridyl)akrylimidoylchloridu vo forme olejového produktu.
Hydrogénmaleinát produktu sa precipituje z izopropanolového roztoku s kyselinou maleínovou.
Teplota topenia: 120-124 °C.
’H-NMR (CDCl3+DMSO-d6) 0=3,1 (6H, m, 3CH2), 3,8 (4H, m, 2CH2),
4,3 (3H, m, CH2, CH), 6,15 (2H, s, kyselina maleinová-CH), 7,05 (1H , d, ArCH=CH), 7,25 (1H , d, Ar-CH=CH-), 7,40 (1H, m, Ar-6H), 8,0 (1H , m, Ar5H), 8,55 (1H, m, Ar-4H), 8,75 (1H, s, Ar-2H).
Príklad 34
Amidoxím O-(3-piperidino-2-palmitoyloxy-propyl)škoricovej kyseliny
Do 400 mg (1,33 mol) amidoxím O-(3-piperidino-2-hydroxypropyl)škoricovej kyseliny (produkt príkladu 4) rozpustených v 5 ml chloroformu sa prikvapkáva 0,4 g palmitoylchloridu. Reakcia sa mieša po dobu 1 hodiny pri izbovej teplote, refluxuje 0,5 hodiny, po ochladení sa premyje hydrogénuhličitanom sodným a potom vodou. Sušia sa nad bezvodým síranom sodným a odparí sa rozpúšťadlo, čím sa získa 0,46 g amidoxím O-(3-piperidino-2palmitoyloxy-propyl)škoricovej kyseliny vo forme olejového produktu.
’H-NMR (CDCh) δ=0,9 (3H, t, CH3), 1,3-2,3 (34H, m, palmitoyl-CH2, piperidín 3,4,5-CH2), 2,55 (4H, m, piperidín 2 a 6-CH2), 2,71 (2H, m, N-CH2-),
4,13 (2H, m, O-CH2-), 4,75 (2H, br, NH2), 5,40 (1H, m, CH-O), 6,46 (1H , d,
Ar-CH=CH-), 6,82 (1H, d, Ar-CH=CH-), 7,28-7,43 (5H, m, 5ArH).
Príklad 35
0-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)-propén-2-hydroxímová kyse lina
1,52 (0,005 mol) amidoxímu O-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3pyridyl)akrylovej kyseliny (produkt príkladu 5) sa rozpustí v 10 ml ľadom chladenej 10% kyseline fosforečnej, po pridaní 4 ml dioxánu chladeného na 2 °C. Pri tejto teplote sa do reakčnej zmesi prikvapkáva roztok 0,95 g dusitanu sodného v 3 ml vody. Mieša sa 1 hodinu pri 5°C a 2 hodiny pri izbovej teplote a roztok sa zalkalizuje prídavkom 10% roztoku hydroxidu sodného. Extrahuje sa 2x40 ml etylacetátu. Organické fázy sa sušia nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí.
Získa sa 0,8 g 0-(3-piperidino-2-hydroxy-propyl)-3-(3-pyridyl)-propén2-hydroxímovej kyseliny vo forme olejového produktu.
• · · • · · • · • • · • • • ·
• •
• ··· • · • ···· • · •
• · • • • • •
• · ·· • · • ·· • ·

Claims (11)

1. Derivát nenasýtenej hydroxímovej kyseliny vzorca I (I) kde
Ri reprezentuje C1.20 alkylovú skupinu, fenylovú skupinu substituovanú 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny,(Cj.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci_4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci_4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva dusíkové atómy alebo atóm síry ako heteroatóm a
R2 zastupuje atóm vodíka, alebo
Ri tvorí spoločne s R2 C5-7 cykloalkyl, ktorý môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom,
Y znamená atóm vodíka, hydroxy skupinu, C1.30 alkanoyloxy skupinu alebo C3.22 alkenoyloxy skupinu,
X je halogén, hydroxy skupina alebo amino skupina,
R3 reprezentuje C3.7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 znamenajú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo ·· • ·· ·· · ···· · · · · · Μ ··· ···· ·· · • ··· · · · ···· · · · · • ···· ··· ··· · ·· · ·· ···
R.4 a Rs vytvoria so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže tiež obsahovať atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, pričom heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceu ticky vhodné adičné soli.
2. Deriváty hydroxímovej kyseliny podľa nároku 1, pričom vo vzorci I
X reprezentuje amino skupinu,
Y je hydroxy skupina,
R3 znamená C3.7 cykloalkyl alebo skupinu vzorca -NR4Rs, kde
R4 a Rs reprezentujú, nezávisle, C1.5 alkanoyl, ale jeden z nich môže byť tiež atóm vodíka, alebo
R4 a Rs vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý je kondenzovaný s benzénovým kruhom a môže tiež obsahovať atóm kyslíka, heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, a
Ri reprezentuje C14.20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkyl, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci.4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci-4 alkynoyl)-amino skupiny ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm ·· ·
R2 je atóm vodíka, alebo
X znamená halogén alebo hydroxy skupinu,
Y je atóm vodíka, hydroxy skupina, C1.30 alkanoyloxy skupina alebo C3.
22 alkenoyloxy skupina,
R3 je C3-7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5 kde,
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl skupinu, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže obsahovať tiež atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, kde heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci-2 alkylu, Ci-2 alkoxy skupiny alebo halogénu,
Ri reprezentuje C].2o alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej zCi.2 alkylu, Cj.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci-4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci-4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm , a
R2 je atóm vodíka, alebo
Ri vytvorí spolu s R2 C5-7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceutický vhodné adičné soli.
3. Deriváty kyseliny hydroxímovej podľa nároku 1, pričom vo vzorci I ·· ·· ·
B B B BB • ·Β·Β · ··
B B ·· • BB ·
Ri reprezentuje fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z metylu, metoxy skupiny alebo atómu chlóru, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka ako heteroatóm,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 znamená skupinu vzorca -NR4R5 kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a Rs vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceutický vhodné adičné soli.
4. Deriváty kyseliny hydroxímovej podľa nároku 3, kde vo vzorci I
Ri reprezentuje pyridyl alebo fenyl voliteľne substituovaný 1-3 metoxy skupinami,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 je pyrolidín, piperidín alebo morfolín, ďalej potom geometrické a/alebo optické izoméry a/alebo ich farmaceutický vhodné adičné soli.
• ·· ·· · ·· ·· · · ··· ··· • ··· · · · ···· · · · · • ···· β · · ··· ·· ·· · ·· ···
5. Spôsob prípravy derivátov nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde Ri, R2, R3, X a Y sú ako bolo definované v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že
a) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X reprezentuje amino skupinu, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo stanovené v súvislosti so vzorcom I, amidoxím vzorca II (II) kde, Ri a R2 sú ako bolo definované vyššie, reaguje so zlúčeninou vzorca
III kde Z znamená odstupujúcu skupinu, najlepšie halogén, Y je ako bolo stanovené vyššie; alebo
b) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Y je hydroxy skupina,Ri, R2 a R3 sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, zlúčenina vzorca III, kde Z znamená odstupujúcu skupinu, najlepšie atóm chlóru, Y je ako bolo stanovené vyššie, reaguje s bázou a získaný oxiránový derivát vzorca V kde R3 je ako bolo stanovené vyššie, reaguje s amidoxímom vzorca II, kde Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
• ·· • · • ·· • ·· · · • · • • • • · • · · • • • · • · • • ··· · • • ···· · • • • • · • • • • · • ··· ·· ·· • ·· ···
c) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X znamená amino skupinu, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, nitril karboxylovej kyseliny vzorca IV kde Rj a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s derivátom hydroxylamínu vzorca VI kde R3 a Y sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
d) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, reaktívny derivát karboxylovej kyseliny vzorca VII kde V je odstupujúca skupina, R] a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s derivátom hydroxylamínu vzorca VI, kde R3 a Y sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
e) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X je amino skupina, Y je hydroxy skupina, R3 je skupina vzorca -NR4R5, kde Rb R2, R4 a R5 sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, amidoxím vzorca II, kde Ri a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s epichlórhydrínom za prítomnosti bázy a vzniklý epoxid vzorca VIII • ·· ·♦ · ·· · ·· · · · · · · · '· • · · · · · · ·· · • ·♦· · · · ···· · · · · • · · · · · · · ··· ·· ·· · ·· ··· kde R] a R2 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s amínom vzorca HNR4R5, kde R4 aRs sú ako bolo stanovené vyššie; alebo
f) v príprave zlúčeniny vzorca I, kde X reprezentuje halogén, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, 0substituovaný oxím vzorca IX kde Ri, R2 a R3 sú ako bolo stanovené vyššie, reaguje s halogenačným činidlom;
a ak je potreba, získaná zlúčenina vzorca I, kde X reprezentuje amino skupinu, Ri, R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, je prevedená na korešpondujúcu zlúčeninu vzorca I, kde X je halogén soli získanej diazotáciou a dekompozíciou v prítomnosti hydrogénhalogénu alebo získaná zlúčenina vzorca I, kde X je amino skupina, R], R2, R3 a Y sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, je prevedená diazotáciou a dekompozíciou získanej soli v prítomnosti fosforečnej kyseliny na zlúčeninu vzorca I kde X je hydroxy skupina a/alebo získaná zlúčenina vzorca I, kde Y je hydroxy skupina, Rj, R2, R3 a X sú ako bolo definované v súvislosti so vzorcom I, reaguje s acylačným činidlom za vzniku zlúčeniny vzorca I, kde Y reprezentuje C1.22 alkanoyloxy skupinu alebo C3-22 alkenoyloxy skupinu, a/alebo získaná báza reaguje s anorganickou alebo organickou kyselinou za vzniku farmaceutický vhodnej adičenej soli alebo bázy vzorca I sa uvoľní z jej soli prostredníctvom bázy.
• ·· ·· · ·· · ···· ··· · ··· ··· · · · · ··· • ··· · · · ···· · · ·· • · · · · · ·· ··» ·· ·· · ·· ···
6. Farmaceutická kompozícia vyznačujúca sa tým, že obsahuje derivát nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
Ri reprezentuje C1.20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupín, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci-4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci_4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm , a
R2 je atóm vodíka, alebo
Ri vytvorí spolu s R2 C5.
7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom,
Y je atóm vodíka, hydroxy skupina, C1.30 alkanoyloxy skupina alebo C3.
22 alkenoyloxy skupina,
X je halogén, hydroxy skupina alebo amino skupina,
R3 reprezentuje C3-7 cyklalkyl alebo skupinu vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 znamenajú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže obsahovať tiež atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, kde heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, Ci-2 alkoxy skupiny alebo halogénu, alebo geometrický izomér a/alebo optický izomér alebo ich farmaceutický vhodná adičná soľ ako aktívna prísada alebo ďalší konvenčný nosič (nosiče).
·· ·· ·· · ·· · · · · ···· ··· ······ • ··· · · · ···· · · · • · · · ·· · ··· ·· ·· · ·· ·
Ί. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 6, vyznačujúca sa tým, že obsahuje deriváty kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
X reprezentuje amino skupinu,
Y je hydroxy skupina,
R3 znamená C3.7 cykloalkyl alebo skupinu vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, C1.5 alkanoyl, ale jeden z nich môže byť tiež atóm vodíka, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý je kondenzovaný s benzénovým kruhom a môže tiež obsahovať atóm kyslíka, heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci.2 alkylu, Ci.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, a
Ri reprezentuje C14-20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci.2 alkylu, Ci.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(C]-4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci-4 alkanyol)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíky alebo atóm síry ako heteroatóm
R2 je atóm vodíka, alebo
X znamená halogén alebo hydroxy skupinu,
Y je atóm vodíka, hydroxy skupina, C1.30 alkanoyloxy skupina alebo C3.
22 alkenoyloxy skupina,
R3 je C3-7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5 kde,
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, Cj.5 alkyl skupinu, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo • ·· ·· · ·· · ·· · · ··· ♦ · · · ··· ···· ·· · • ··· · · · ···· · · · · • ···· · · · ··· ·· ·· · ·· ···
R.4 a Rs vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže obsahovať tiež atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, kde heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu,
Ri reprezentuje C1.20 alkyl, fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny, (C1.4 alkyl)-amino skupiny, di(C].4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Cj_4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej potom Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka alebo atóm síry ako heteroatóm , a
R2 je atóm vodíka, alebo
Ri vytvoria spolu s R2 C5.7 cykloalkyl voliteľne kondenzovaný s benzénovým kruhom, alebo geometrický izomér a/alebo optický izomér alebo ich farmaceutický vhodnú adičnú soľ ako aktívnu prísadu.
8. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 7 vyznačujúca sa tým, že obsahuje derivát kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
Ri reprezentuje fenyl voliteľne substituovaný 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej sa z metylu, metoxy skupiny alebo atómu chlóru, ďalej potom R] reprezentuje 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva atómy dusíka ako heteroatóm,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu, ··
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R.3 znamená skupinu vzorca -NR4R5 kde
R4 a R5 reprezentujú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria spolu so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, alebo geometrický izomér a/alebo optický izomér alebo ich farmaceutický vhodnú soľ ako aktívnu prísadu.
9. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 8 vyznačujúca sa tým, že obsahuje derivát kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
Ri reprezentuje pyridyl alebo fenyl voliteľne substituovaný 1-3 metoxy skupinami,
R2 je atóm vodíka,
X znamená amino skupinu,
Y je atóm vodíka alebo hydroxy skupina,
R3 je pyrolidín, piperidín alebo morfolín, alebo geometrický izomér a/alebo optický izomér alebo ich farmaceutický vhodnú soľ ako aktívnu prísadu.
10. Farmaceutické použitie derivátov nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, zahrnujúce aplikáciu netoxického množstva derivátu nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
Ri reprezentuje Ci-2o alkylovú skupinu, fenylovú skupinu substitouvanú 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Ci.2 alkylu,
Ci_2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny,(Ci.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci-4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci.4 alkanoyl)-amino skupiny, ďalej R] reprezentuje 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva dusíkové atómy alebo atóm síry ako heteroatóm a
R2 zastupuje atóm vodíka, alebo
Ri tvorí spoločne s R2 C5.7 cykloalkyl, ktorý môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom,
Y znamená atóm vodíka, hydroxy skupinu, Ct.30 alkanoyloxy skupinu alebo C3-22 alkenoyloxy skupinu ,
X je halogén, hydroxy skupina alebo amino skupina,
R3 reprezentuje C3.7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5, kde
R4 a R; znamenajú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1-5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže tiež obsahovať atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, pričom heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituovaný jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, Ci.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, alebo geometrického izoméru a/alebo optického izoméru alebo ich farmaceutický vhodnej adičnej soli, pacientovy trpiacemu stavmi spojenými s bunkovým nedostatkom energie zapríčineným inhibíciou PARP, diabetes komplikáciami, stavmi nedostatku kyslíka srdca a mozgu, neurodegeneratívnymi ochoreniami, autoimunitnými alebo vírusovými ochoreniami.
·· • ·· ·· · ·· · · · · ····· ··· ······ · • ··· · · · ···· · ·· I • · · · ···· ··· ·· ·· · ·· ···
11. Použitie derivátu nenasýtenej kyseliny hydroxímovej vzorca I, kde
Ri reprezentuje C1.20 alkylovú skupinu, fenylovú skupinu substitouvanú 1-3 substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z Cj-2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny, halogénu, amino skupiny,(Ci.4 alkyl)-amino skupiny, di(Ci-4 alkyl)-amino skupiny alebo di(Ci_4 alkanoyl)-amino skupiny, • ďalej Ri reprezentuje 5- alebo 6-členný, nasýtený alebo nenasýtený heterocyklus obsahujúci jeden alebo dva dusíkové atómy alebo atóm síry ako
V heteroatóm a
R2 zastupuje atóm vodíka, alebo
Ri tvorí spoločne s R2 C5.7 cykloalkyl, ktorý môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom,
Y znamená atóm vodíka, hydroxy skupinu, C1.30 alkanoyloxy skupinu alebo C3.22 alkenoyloxy skupinu ,
X je halogén, hydroxy skupina alebo amino skupina,
R3 reprezentuje C3.7 cykloalkyl alebo skupiny vzorca -NR4R5, kde
R4 a R5 znamenajú, nezávisle, atóm vodíka, C1.5 alkyl, C1.5 alkanoyl skupinu, alebo
R4 a R5 vytvoria so susedným atómom dusíka 5- alebo 6-členný, nasýtený • alebo nenasýtený heterocyklus, ktorý môže tiež obsahovať atóm kyslíka a môže byť kondenzovaný s benzénovým kruhom, pričom heterocyklus a/alebo benzén môžu byť substituované jedným alebo dvoma substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z C1.2 alkylu, C1.2 alkoxy skupiny alebo halogénu, alebo geometrického izoméru a/alebo optického izoméru a/alebo ich farmaceutický vhodnej soli na prípravu farmaceutickej kompozície na liečbu stavov spojených s bunkovým nedostatkom energie zapríčineným inhibíciou PARP, diabetes komplikáciami, stavmi nedostatku kyslíka srdca a ·· • ·· ·· · ···· · · · ·· ··· ···· ·· • ··· · · · ···· · β · • · · · · · · ··· ·· ·· · ·· ··· mozgu, neurodegeneratívnymi ochoreniami, autoimunitnými a/alebo vírusovými ochoreniami.
SK253-2001A 1998-09-03 1999-09-02 Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors SK2532001A3 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9802001A HU9802001D0 (en) 1998-09-03 1998-09-03 New unsaturated hydroximic acid derivatives, process for producing them, and pharmaceutical compositions containing them
HU9902927A HUP9902927A3 (en) 1999-08-31 1999-08-31 New unsaturated hydroxym-acid-derivatives, process for their production and medicaments containing them
PCT/HU1999/000062 WO2000014054A1 (en) 1998-09-03 1999-09-02 Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK2532001A3 true SK2532001A3 (en) 2001-08-06

Family

ID=89999161

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK253-2001A SK2532001A3 (en) 1998-09-03 1999-09-02 Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors

Country Status (25)

Country Link
US (1) US6500823B1 (sk)
EP (1) EP1115697B1 (sk)
JP (1) JP2002524439A (sk)
KR (1) KR100632522B1 (sk)
CN (1) CN1211353C (sk)
AT (1) ATE258916T1 (sk)
AU (1) AU771782B2 (sk)
BR (1) BR9913425A (sk)
CA (1) CA2342898A1 (sk)
CZ (1) CZ2001705A3 (sk)
DE (1) DE69914614T2 (sk)
DK (1) DK1115697T3 (sk)
ES (1) ES2215400T3 (sk)
HK (1) HK1040700A1 (sk)
IL (2) IL141756A0 (sk)
MX (1) MXPA01002315A (sk)
NO (1) NO20011091L (sk)
NZ (1) NZ510933A (sk)
PL (1) PL194275B1 (sk)
PT (1) PT1115697E (sk)
RU (1) RU2220953C2 (sk)
SK (1) SK2532001A3 (sk)
TR (1) TR200100645T2 (sk)
UA (1) UA65635C2 (sk)
WO (1) WO2000014054A1 (sk)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1268407T3 (da) * 2000-03-20 2004-09-06 N Gene Res Lab Inc Propencarboxylsyreamidoximderivater, fremgangsmåde til deres fremstilling samt lægemidler indeholdende disse
CA2452558C (en) * 2001-07-17 2009-12-22 N-Gene Research Laboratories Inc. A synergistic pharmaceutical combination for the prevention or treatment of diabetes
CN1870991A (zh) * 2003-09-04 2006-11-29 安万特药物公司 作为多聚(adp－核糖)聚合酶(parp)抑制剂的被取代的吲哚类化合物
HUP0303584A3 (en) 2003-10-30 2009-12-28 Cytrx Corp Use of a hydroximic acid halide derivative in the treatment of neurodegenerative diseases
KR20070027747A (ko) * 2004-06-30 2007-03-09 콤비네이토릭스, 인코포레이티드 대사 질환의 치료 방법 및 시약
US20080262062A1 (en) * 2006-11-20 2008-10-23 Bipar Sciences, Inc. Method of treating diseases with parp inhibitors
US7763601B2 (en) * 2006-11-02 2010-07-27 N-Gene Research Laboratories, Inc. Prevention and treatment of obesity
US10874641B2 (en) 2016-07-28 2020-12-29 Mitobridge, Inc. Methods of treating acute kidney injury
CN110300600A (zh) 2016-11-02 2019-10-01 伊缪诺金公司 利用抗体-药物缀合物和parp抑制剂的组合治疗
MX2023005954A (es) 2020-11-19 2023-09-04 Zevra Denmark As Procesos para preparar citrato de arimoclomol e intermediarios del mismo.
CN113354557B (zh) * 2021-06-07 2022-06-28 大连理工大学 一种3-苯基-2-丙烯-1-酮o-正丁基肟的制备方法及应用
MX2024003892A (es) * 2021-09-28 2024-05-23 Zevra Denmark As Oximas y su uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con gba.

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997004771A1 (en) 1995-08-02 1997-02-13 Newcastle University Ventures Limited Benzimidazole compounds
US4308399A (en) 1977-08-30 1981-12-29 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt. O-(3-Amino-2-hydroxy-propyl)-amidoxime derivatives, process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing same
HUT54347A (en) 1989-01-10 1991-02-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Improved process for producing amidoximes
HU213421B (en) * 1993-04-09 1997-06-30 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar New basic ethers, pharmaceutical compns. containing the said compds. and process for prepg. them
DE19756236A1 (de) 1997-12-17 1999-07-01 Klinge Co Chem Pharm Fab Neue piperazinylsubstituierte Pyridylalkan-, alken- und -alkincarbonsäureamide

Also Published As

Publication number Publication date
KR20010085760A (ko) 2001-09-07
AU771782B2 (en) 2004-04-01
DE69914614T2 (de) 2005-01-05
US6500823B1 (en) 2002-12-31
PT1115697E (pt) 2004-06-30
IL141756A (en) 2006-08-01
KR100632522B1 (ko) 2006-10-09
NZ510933A (en) 2003-01-31
CZ2001705A3 (cs) 2001-08-15
DK1115697T3 (da) 2004-06-07
EP1115697B1 (en) 2004-02-04
CN1211353C (zh) 2005-07-20
PL194275B1 (pl) 2007-05-31
WO2000014054A1 (en) 2000-03-16
NO20011091D0 (no) 2001-03-02
AU5753799A (en) 2000-03-27
CN1322193A (zh) 2001-11-14
EP1115697A1 (en) 2001-07-18
ATE258916T1 (de) 2004-02-15
ES2215400T3 (es) 2004-10-01
JP2002524439A (ja) 2002-08-06
NO20011091L (no) 2001-05-02
BR9913425A (pt) 2001-11-27
DE69914614D1 (de) 2004-03-11
IL141756A0 (en) 2002-03-10
HK1040700A1 (en) 2002-06-21
UA65635C2 (uk) 2004-04-15
MXPA01002315A (es) 2002-05-08
PL346547A1 (en) 2002-02-11
TR200100645T2 (tr) 2001-06-21
CA2342898A1 (en) 2000-03-16
RU2220953C2 (ru) 2004-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7151175B2 (en) Propenecarboxylic acid amidoxime derivatives, a process for the preparation thereof, and pharmaceutical compositions containing the same
SK2532001A3 (en) Unsaturated hydroximic acid derivatives as parp inhibitors
WO1998033501A1 (en) 2-benzoylamino-3-phenylpropenamide derivatives and methods of using the same
US20050203176A1 (en) Carbamates as HIV anti-viral agents
WO2000029375A1 (fr) Composes bysaryle et medicaments contre le cancer contenant lesdits composes
HU227116B1 (en) New propenecarboxylic acid amidoxime derivatives, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US4094871A (en) 1,3,4-Benzotriazepine-2-thiones
US4168310A (en) Psychoactive 1,3,4-benzotriazepine-2-thiones and a method for treating central nervous system depression and anxiety
UA73557C2 (en) Amideoxyme derivatives of propenecarboxylic acid, a method for the preparation thereof and a pharmaceutical composition based thereon
EP3152193A1 (en) Tetrahydroisoquinolinone derivatives and their use in the inhibition of the hsp70 protein