SK242001A3 - Rdg mimetic compound, method for their producing and method for differentiation inhibiting of cell adhesion - Google Patents

Rdg mimetic compound, method for their producing and method for differentiation inhibiting of cell adhesion Download PDF

Info

Publication number
SK242001A3
SK242001A3 SK24-2001A SK242001A SK242001A3 SK 242001 A3 SK242001 A3 SK 242001A3 SK 242001 A SK242001 A SK 242001A SK 242001 A3 SK242001 A3 SK 242001A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
compound
naphthyl
nmr
mhz
mmol
Prior art date
Application number
SK24-2001A
Other languages
English (en)
Inventor
Kyriacos Costa Nicolaou
John Trujillo
Kelly Chibale
Bernd Jandeleit
Simon Goodman
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of SK242001A3 publication Critical patent/SK242001A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/20—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/215—Radicals derived from nitrogen analogues of carbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/52—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C247/00—Compounds containing azido groups
    • C07C247/02—Compounds containing azido groups with azido groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C247/04—Compounds containing azido groups with azido groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/08—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/16—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C07C311/19—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/44—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D233/48—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with acyclic hydrocarbon or substituted acyclic hydrocarbon radicals, attached to said nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/14—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/30—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical

Description

RGD mimetická látka, spôsob jej produkcie a spôsob na diferenčné inhibovanie bunkovej adhézie
Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka nepeptidových zlúčenín, ktoré majú RGD mimetickú aktivitu, a syntézy a biologickej aktivity nepeptidových zlúčenín, ktoré majú RGD mimetickú aktivitu. Hlavne sa predkladaný vynález týka nepeptidových RGD mimetických látok so základom nitroarylov a ich syntézy a biologickej aktivity.
Doterajší stav techniky
Integríny sú triedou extracelulárnych proteínov, ktoré uľahčujú adhéziu buniek medzi sebou a adhéziu buniek na podklad (Cheresh, D.A.; Mecham, R.P. Eds.; Academic Press: New York, 1994; Stromblad; S.; Cheresh, D.A. Chem. Biol. 1996, 3, 881). Tieto dôležité cieľové proteíny sú heterodimerické glykoproteíny, viazané v membráne, zloženej z α-podjednotiek a menších β-podjednotiek. Pomerná afinita a špecifikácia pre naviazanie ligandov je určená jedinečnou kombináciou rôznych a- a β- podjednotiek. Za členov tejto rodiny receptorov sú najviac študované ai^3. «δβ-ι, ανβ3 a ανβ5 . Množstvo známych prírodných ligandov pre tieto integríny, ako je fibronektín (vazianý na αδβι), fibrinogén (viazaný na αι^β3) a vitronektín (viazaný na ανβ3), obsahuje v natívnej sekvencií kľúčovú peptidovú sekvenciu Arg-Gly-Asp (RGD), ktorá je rozpoznaná väčšinou integrínov. Integrín αι^β3 sa ukázal ako výborný cieľový proteín na inhibíciu agregácie krvných doštičiek a niektoré skupiny už zverejnili návrh a syntézu silných väzbových látok s peptidovými a nepeptidovými štruktúrami (Ojima et al. Bioorg. Med. Chem., 1995, 337; Engleman et al. Ann. Rep. Med. Chem. 1996, 31, 191.
V súvislosti s angiogenézou sa ukázala byť dôležitá funkcia ανβ3 a ανβδ·
Cheresh a spolupracovníci ukázali, že in vivo inhibícia naviazanie týchto integrínov na ich RGD obsahujúce ligandy protilátkami alebo cyklickými peptidmi ruší
• · • 9 • • • • • • ··
• • • • ··· • • •
• • • • • e • • •
···· ···· ·· ·· • · ·· ·
angiogenéziu a indukuje nádorovú regresiu (Brooks et al. Science 1994 et al. Rosenfeld et al. Celí 1994, 79,1157). Navyše k závažnosti angiogenézy, ανβ3 mohla tiež hrať úlohu v sprostredkovaní adhézie osteoklastov na kostný podklad a v migrácii vaskulárnych buniek hladkého svalstva.
Antagonisti αν β3. teda sú predpovedané ako potencionálne liečebné látky na liečbu množstva chorôb, ako je diabetická retinopatia, rakovina, osteoporóza a restenóza (Van der Pluijm et al. Bone Minerals Res. 1994, 9, 1021; Helfrich et al. J. Bone Minerál Res. 1992, 7, 335; Horton et al. Exp. Celí Res. 1991,195, 368; Robey et al. Ann. Rep. Med. Chem. 1993, 28, 227; Choi et al. Surgery 1994, 19, 125; Matsuno et al. Circulation 1994, 90, 2203; Hammes et al. Náture Med. 1996, 2, 529; Friedlander et al. Prac. Natl. Acad. Sci., USA 1996, 93,9764..
Prvá malá molekula antagonistov αν β3 bola oznámená Kesslerem et al. (pr. 1, obrázok 1; Gurrath et al. Eur. J. Biochem. 1992, 210, 911; Muller et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1992, 31, 326; Aumailley et al. FEBS Lett. 1991, 291, 50; Pfaff et al. J. Biol. Chem. 1994, 269, 20233; Haubner et al. J. Am. Chem. Soc. 1996,118, 7461). Následné skupiny z Dupont - Merck (pr. 2, obrázok 1) a SmithKline Beecham (SKB) (pr. 3, obrázok 1) publikovali výsledky v odbore. Navyše ostatné RGD obsahujúce cyklické peptidy 4 a 5 (obrázok 1) boli syntetizované a dokázané ako aktívne Burgessem et al. a Goodmanem et al. (Bach et al. 3. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 293; Peishoff et al. J. Med. Chem. 1992, 35, 3962; Burgess et al. J. Med. Chem. 1996, 39,4520; Tran et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1997, 7, 997).
Nedávno množstvo skupín zverejnilo výsledky s vysokou afinitou ligandov pre av p3, ktoré majú štruktúru významne odlišnú od klasických peptidových kostier (napr. 6 až 9, obrázok 2). Tieto štruktúry obsahujú centrálnu kostru (napr. benzén, benzodiazepinovú štruktúru alebo močovinovú kostru), ku ktorej sú pripojené prívesky, nesúce karboxylovú alebo guanidínovú skupinu (Duggan et al. Abstracts of Papers, 211t.h ACS National Meeting, New Orleans, LA, March 24 - 28, 1996; Američan Chemical Society: Washington, DC, 1996, MEDI 234; Keenan et al. J.
• · · ♦ • · • · • ··· • · • · • • · •
• •
• • • · • · • · •
··· · • · · · • · ·· ·· ·· ·
Med. Chem. 1997,40 2289; Corbett et al. Bioorgan. Med. Chem. Lett. 1997,7,1371; Gadek et al. Abstracts of Papers, 211th ACS National Meeting, New Orieans, LA, March 24 - 28, 1996; Američan Chemical Society: Washington, DC, 1996, MEDI 235; Hirschmann et al. J. Am. Chem. Soc. 1996,115,12550).
Čo je nevyhnutné, sú synteticky dostupné RGD mimetické látky, ktoré majú stabilitu in vivo s vysokou aktivitou a selektivitou proti rôznym integrínovým cieľovým proteínom. Okrem toho je potrebná účinná a všeobecná metóda na produkciu týchto látok.
Podstata vynálezu
Vynález sa týka navrhnutia, syntézy a biologického vyhodnotenia rady RGD mimetických látok na základe nitroarylov. Čiastočne sa vynález týka zlúčenín, ktoré spájajú novú nitroarylovú sústavu s kostrou aryléter/a-aminokyselina/guanidínového typu, zverejneného v US patente č. 5 741 796, publikovaného 21. apríla 1998, zahrnutý je tu v odkazoch, napr. Merck compounds”.
Jeden aspekt vynálezu sa týka RGD mlmetickej látky, predstavovanej nasledujúcou zlúčeninou všeobecného vzorca:
Vo vyššie uvedenej zlúčenine je R1 vybrané z nasledujúcich radikálov:
• · • · • · • • · ·
• • • · ··· • ·
• • • · • · • ·
···· ···· ·· • · ·· ·
Tu je X diradikál, vybraný zo síry, -NH- a kyslíka. R2 je radikál, vybraný z C02rbutylu, -CO-arylu a -S02-arylu. Uprednostňované aryly zahŕňajú fenyl, 1-naftyl a 2-naftyl. Uprednostňovaný R2 radikál je -S02-aryl. Uprednostňovaná RGD mimetická látka je predstavovaná nasledujúcou zlúčeninou:
o o
Ostatné uprednostňované RGD mimetické látky sú predstavované nasledujúcimi zlúčeninami:
ΝΗ Ν02
• · • ··· • · · · ··· ··· • · · · ··· · · • · ······· ········ ·· ·· ·· ···
Ďalší aspekt vynálezu sa týka metódy na produkciu vyššie uvedených RGD mimetických látok. Najprv je získaný nitroarylový prekurzor, ktorý má fluoridovú skupinu, kovalentne naviazanú na nitroarylový kruh, predstavovaný nasledujúcou zlúčeninou všeobecného vzorca:
o
no2
Vo vyššie uvedenej zlúčenine je R3 skupina, chrániaca kyselinu. Potom je fluoridová skupina odstránená nukleofilom, ktorý má chránenú guanidínovú skupinu, použitím nukleofilnej aromatickej substitúcie za vzniku chránenej RGD mimetickej látky. Nakoniec je chránená RGD mimetická látka oddelená kyselinou za vzniku RGD mimetickej látky.
Iný aspekt vynálezu sa týka RGD mimetickej látky, predstavovanej nasledujúcou zlúčeninou všeobecného vzorca:
Vo vyššie uvedenej zlúčenine je R2 radikál, vybraný zo skupiny, skladajúcej sa z -CO2t-butylu a -Sífe-arylu. Uprednostňované aryly zahŕňajú fenyl, 1-naftyl a 2naftyl.
Ί
Vyššie uvedené RGD mimetické látky boli testované proti rôznym integrínom ανβ3ι αιΐϋβ3 a ανβδ) na zistenie ich schopnosti inhibovať bunkovú adhéziu a na určenie ich väzbovej selektivity. Vybrané látky boli tiež testované na zistenie ich schopnosti inhibovať angiogenézu in vivo v CAM (kuracia chorioalantoická membrána (chick chorioallantoic membráne)) meraniach. Vo všetkých látkach bola potvrdená inhibičná aktivita a selektivita proti vyššie uvedeným cieľom, zodpovedajúca ich aktivite ako inhibítorov angiogenézy.
Ďalší aspekt vynálezu sa týka postupu na diferenčné inhibovanie 0^3 bunkovej adhézie cez ανβ3 bunkovú adhéziu. Bunky, ktoré exprimujú α^β3 sú uvedené do roztoku, ktorý obsahuje vybrané RGD mimetické látky. Roztok má koncentráciu týchto RGD mimetických látok dostatočnú k inhibícii α^β3 bunkovej adhézie. Výsledkom je α^ββ bunková adhézia inhibovaná aspoň približne 100 krát viac než ανβ3 bunková adhézia. Uprednostňované RGD mimetické látky, použiteľné pre tento aspekt vynálezu, sú nasledujúce:
• · · · ··· ··· • · · · ··· · e • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ···
···· ··· ··· • · · · ··· · · * ········ ···· ···· ·· ·· ·· ·
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obrázok 1 znázorňuje vybrané štruktúry ανβ3 protilátok, založených na RGD peptidovej sekvencii.
Obrázok 2 znázorňuje vybrané nepeptidové RGD mimetické látky s vysokou afinitou k ανβ3.
Obrázok 3 znázorňuje cieľové nitroarylové étery (10 až 21) ako RGD mimetické látky a benzimidazol 22.
Obrázok 4 znázorňuje všeobecný vzorec nitroaryléterových RGD mimetických látok a retrosyntetickú analýzu.
Obrázok 5 znázorňuje syntézu aminoesterov 26, 29a a 29b s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) 1,1 podielu B0C2O, 1,0 podielu Na2C03, 1,4 - dioxán, H20, 25 °C, 88 %; (b) i) 20 % vodný roztok Cs2C03, H20 : MeOH (1 : 2,5), 25 °C, 4 hodiny, 100 %, ii) 1,1 podielu BnBr, DMF, 25 °C, 14 hodín, 88 %; (c) 1,5 podielu Phl (OCOCF3)2, DMF : H20 (1 :1), 2,0 podiely pyridínu, 25 °C, 3,5 hodiny, 41 %; (d) 1,1 podielu ÄrSO2CI, 2,25 podielu NaOH, dioxán : H20 (1: 2), od 0 do 25 °C, 3 hodiny, [71 % pre 27a, 66 % pre 27b]; (e) 1,3 podielu Br2, 9,2 podielu NaOH, H20, od 0 do 90 °C, [75 % pre 28a, 81 pre 28b]; (f) izobutylén, 2,8 podielu koncentrovanej H2S04, DME, od -78 do 25 °C, 48 hodín, [55 % pre 29a, 51 % pre 29b]. DME = dimetoxyetán; DMF = dimetylformamid; Ph = fenyl; 2-naftyl.
Obrázok 6 znázorňuje syntézu látok 10 až 13 s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) 5,0 podielov MeC(OMe)3, PhMe, 80 °C, 8 hodín, 98 %; (b) 1,1 podielu N3(CH2)2OTBS, 0,1 podielu TBAF, 4 Á MS, DMF, 25 °C, 4 hodiny, 73 %; (c) 2,0 podiely LiOH · H20, 3 : 1 dioxán : H20 (3:1), 25 °C, 4 hodiny, 99 %; (d) 1,0 podiel DCC, 0,2 podielu 4-DMAP, CH2CI2, 25 °C, 4 hodiny, 82 %; (e) 50 % TFA • · · · · · ·· • · · · ··· · · · • ········· · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ··· vCH2Cl2, 25 °C, 2 hodiny, 84 %; (f) 1,1 podielu PhSO2CI alebo 1-NaphSO2CI, 1,3 podielu i-Pr2NEt, CH2CI2, 25 °C, 4 hodiny, 38a (78 %) alebo 38b (57 %); (g) 2,0 podiely ΡΙΊ3Ρ, 44 podiely H2O, THF, 25 °C, 12 hodín, 80 %, približne 1 : 1 35a : 35b; 80 %, približne 1 : 1 39a : 41a; 81 %, približne 1 : 1 39b 41b; (h) 2,0 podiely LiOH · H20, THF : H2O (3:1), 25 °C, 4 hodiny, 93 až 99 % pre 36ab, 40ab, 42a; (i) 1,1 podielu 1H-pyrazol-1-karboxamidin · HCI, 1,1 podielu i-Pr2NEt, DMF, 25 °C, 16 hodín, 13 až 15 % pre 10, 11, 13; 50 °C, 16 hodín, 5 % pre 12, po HPLC. TFA = kyselina trifluórooctová; TBAF = fluoridtetra-n-butylamonný; DCC = dicyklohexylkarbodiimid.
Obrázok 7 znázorňuje syntézu derivátov guanidínu 51 až 56 s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) 1,0 podiel BtBMTP, 2,0 podiely Et3N, 1,0 podiel HgCI2, DMF, 25 °C, 4 hodiny, 98 %; (b) 1,0 podiel BtBMTP, DMF, 25 °C, 14 hodín, 95 %; (c) 1,0 podiel BtBCT, DMF, 25 °C, 14 hodín, 60 %; (d) 0,2 podielu BtBMTP, 2,0 podiely Et3N, 0,4 podiely Et3N 0,2 podielu HgCI2, DMF, 25 °C, 4 hodiny, 51 %; (e) 0,66 podielu o-NH2C6H4NH2, 5,5 N vodná HCI, zahrievané pod spätným chladičom, 24 hodín, 73 %; (f) 1,0 podiel DmPD · HBr, iPr2NEt, DMF, 25 °C, 11 hodín, 51 %. Boe = terciálny butoxykarbonyl; BtBCT = N, N'-bis-terciálna butoxykarbonyltiomočovina; BtBMTP = 1,3-bis(terciálny butoxykarbonyl)-2-metyl-2-tiopseudomočovina; DmPD · HBr = 2-(3,5-dimetylpyrazolyl)-4,5-dehydroimidazolhydrobromid.
Obrázok 8 znázorňuje syntézu látok 11 a 14 až 19 s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) 1,2 podielu (COCI)2, PhH, DMF, 0 °C, 6 hodín, 99 %; (b) 1,0 podiel 29a alebo 29b, 1,2 podielu E^N, CH2CI2, 0 °C, 2 hodiny, 58 (98 %) alebo 59 (96 %);
(c) pre 60: 2,2 podiely NaH, 2,2 podiely 51, DMF, 25 °C, 8 hodín, 66 %; pre 63: 4,0 podiely NaH, 1,2 podielu 51, DMF, 25 °C, 4 hodiny, 69 %; (d) 1,1 podielu 53, DMF, 25 °C, 4 hodiny, 73 %; pre 64: 1,9 podielu 53, NPM, 25 °C, 99 %; (e) pre 65: 2,2 podiely NaH, 2,5 podielu 54, DMF, 25 °C, 12 hodín, 23 %; (f) 1,1 podielu 52, DMF, 25 °C, 6 hodín, 83 %; pre 66: 2,0 podiely 52, DMF, 25 °C, 20 hodín, 99 %; (g) 50 % TFA v CH2CI2, 25 °C, 30 minút, 90 až 99 pre 11, 14 až 19 po RP-HPLC. Boe = terciálny butoxykarbonyl; TFA = kyselina trifluóroctová; NMP = N-metyl-2pyrolidinon; DMF = dimetylformamid.
···· · · · ··· • · · · ··· · · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ···
Obrázok 9 znázorňuje syntézu látok 20 a 21 s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) 1,0 podiel 55, 2,2 podielu Et3N, DMF, 25 °C, 16 hodín, 92 %; (b) 50 % TFA v CHZCIZ, 25 °C, 4 hodiny, 97 %; (c) 1,0 podiel 56, 2,2 podielu EtsN, DMF, 25 °C, 12 hodín, 120 % (hrubý výťažok); (d) 50 % TFA v CH2CI2, 25 °C, 4 hodiny, 83 % po RP-HPLC; TFA = kyselina trifluóroctová; DMF = dirnetylformamid.
Obrázok 10 znázorňuje syntézu látky 22 s nasledujúcimi činidlami a podmienkami: (a) NH3, DMF, 25 °C, 5 hodín, 93 %; (b) 10 % Pd/C, H2, MeOH, 25 °C, 8 hodín, 90 %; (c) 1,1 podielu PhNCS, EtOH, 14 hodín, 69 %; (d) 1,0 podiel HgCI2, 1,0 podiel Et3N, DMF, 4 hodiny, 81 %; (e) 50 % TFA vCH2CI2, 30 minút, 88 % výťažok, po RP-HPLC. TFA = kyselina trifluóroctová; DMF = dirnetylformamid.
Obrázok 11 ukazuje zostavenie údajov, ktoré ukazujú účinok nitroaryléterov na RGD - závislú ligandovú interakciu s integrínmi. Je ukázaná koncentrácia nevyhnutná na inhibíciu polovice maximálne možného naviazania ligandov (IC50). Peptid GRGDSPK a látka 1 boli zahrnuté do odkazov. Údaje boli usporiadané podľa hodnôt IC50 na ανβ3 (od najnižších do najvyšších). Hodnota 'cQ' ukazuje aktivitu NPE vzťahujúcu sa k aktivite látky 1. '>' ukazuje, že IC50 nebola dosiahnutá pri maximálnej testovanej koncentrácii 10 μΜ.
Obrázok 12 ukazuje zostavenie údajov, ktoré ukazujú účinok nitroaryléterov na RGD závislú bunkovú adhéziu na imobilizované ligandy. Je ukázána koncentrácia nevyhnutná na inhibíciu polovice maximálne možného naviazania ligandov (IC50)· 25000 buniek bolo použitých na naviazanie na imobilizované ligandy v prítomnosti nitroaryléterov ako je tu popísané. Je ukázaná výsledná koncentrácia pri inhibícii polovice maximálne možného naviazania ligandov (IC50)· Údaje boli usporiadané podľa IC50 na ανβ3 adhéziu M21 buniek (od najnižších do najvyšších).
·· • · • ·· • · • • • • e ·· ·· ·
• · • • • • • ·
• ···
• • • • • · • •
···· ···· ·· ·· ·· ··
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1: Návrh, syntéza a biologické vyhodnotenie nepeptidových antagonistov integrínov:
V tomto príklade je opísaný návrh, chemická syntéza a biologické vyhodnotenie rady RGD mimetických látok na základe nitroarylov. Obrázok 3 ukazuje cieľové látky (10 až 22). V úvahách, ktoré viedli k ich navrhnutiu, boli zahrnuté: (a) Výsledky Mercku, ukazujúce dôležitosť guanidín/aryl sulfoamidových funkčných skupín (Duggan et al. Abstracts of Papers, 211th ACS National Meeting, New Orleans, LA, March 24 - 28, 1996; Američan Chemical Society: Washington, DC, 1996, MEDI 234) a (b) ľahký vstup do takýchto štruktúr z o-nitro-arylfluoridov, ako je ukázané na obrázku 4. Navrhnuté molekuly spadajú do všeobecných štruktúr I (obrázok 4), ktoré môžu byť získané spojením centrálneho nitrofluóroaromatického systému II s fragmentárni III (nukleofily) a IV (aminokyselinové zložky).
Pre syntézu látok 10 až 22 (obrázok 3) boli potrebné aminokyselinové deriváty 26, 29a a 29b. Tieto medziprodukty boli získané z L-asparagínu (23) ako je načrtnuté na obrázku 5. Po konverzii 23 na jeho Boe derivát (24, 88 %) v štandardných podmienkach nasledovalo vytvorenie benzylesteru (Cs2C03-BnBr) na získanie 25 (88 % výťažok). Redukcia primárneho amidu Phl(OCOCF3)2 poskytla derivát 26 pri 41 % výťažku. Sulfoamidy 29a a 29b boli pripravené sulfonyláciou aminoskupiny na získanie 27a, nasledoval Hoffmannov prešmyk a esterifikácia výsledných aminokyselín (28a a 28b) izobutylénom (obrázok 5). Obrázok 6 zahŕňa počiatočný prístup k látkam 10 až 13. Tak 4-fluoro-o-nitrobenzoová kyselina (30) bola premenená na jej metylester (31, 98 %) reakciou s trimetylortoacetátom pri 80 °C a ten reagoval s N3(CH2)2OTBS v DMF v prítomnosti katalytického množstva TBAF s výsledným vznikom látky 32 (73 %; výťažky nie sú optimalizované). Zmydelnením 32 (LiOH, 99 % výťažok) sa získala karboxylová kyselina 33, ktorá kondenzovala s vytvorenou zlúčeninou 26 v prítomnosti DCC a 4-DMAP za získania kľúčového meziproduktu 34 (82 % výťažok). Pre syntézu 10 bola látka 34 redukovaná Ph3P v prítomnosti H2O za získania amínu 35a spoločne s prešmyknutým produktom 35b (80 % celkový výťažok), v ktorom heteroatómy v postrannom reťazci majú zmenené pozície (cez interný nukleofilný atak, viď.
• · · · • · · • · • e • ·· •
• • • · ···
• • • · • · • · •
• ·· · ···· • · ·· ·· ···
štruktúra 35a). Pri stálej teplote okolia bola vykonaná kvantitatívna konverzia primárneho amínu 35a na primárny alkohol 36b. Ničmenej bolo možné rýchle uskutočniť bázickú hydrolýzu látky (LiOH) a guaniláciu (1HPyrazol-1-karboxamidin · HCI) a získať cieľovú látku 10, aj keď v nízkom výťažku (15 po purifikácii RP-HPLC).
Pre syntézu sulfoamidových zlúčenín 11 až 13 bol odchránený spoločný medziprodukt 34 (TFA, 84 %) a uvoľnený amín (37) reagoval s vhodným sulfonylchloridom za vzniku látok 38a (78 %) a 38b (57 %). Redukciou azidovej funkčnej skupiny v 38a a 38b ΡΙΊ3Ρ-Η2Ο bola opäť získaná zmes zodpovedajúceho primárneho amínu (39a a 39b) a jeho prešmyknutého primárneho alkoholu (41a a 41b) v 80 % celkovom výťažku. Bázickou hydrolýzou 39a a 39b vznikli zodpovedajúce karboxylové kyseliny (40a a 40b, 93 až 99 výťažok), guanilácia, ktorá je popísaná vyššie, vznikli žiadúce látky 11 a 13 (13 až 15 výťažok). Podobne hydrolýza 41 a (LiOH, 96 % výťažok), nasledovaná guaniláciou, poskytla látku 12 v nízkom výťažku cez látku 42a.
Prešmykom, pozorovaným v priebehu redukcie azidoskupiny postranného reťazca, vysvetľujeme alternatívnu stratégiu na prípravu cieľových nitroaryléterových látok. Podľa nového plánu nukleofilná zlúčenina, obsahujúca celkom chránenú guanidínovú časť, bola použitá na odstránenie fluoridu z centrálneho nitroarylového systému. Pre tento účel nukleofily 51 až 56 (Poss et al. TetrahedronLett. 1992, 33, 5933; Iwanowicz et al. Synth. Commun. 1993, 23, 1443; Cherkaoui et al. Bull. Soc. Chim. F r. 1991, 255) boli pripravené za ľahko dostupných východzích látok a štandardnej chémie, ako je znázornené na obrázku 7. Inkorporácia týchto fragmentov do hlavného skeletu molekuly pomocou nukleofilnej aromatickej substitúcie a syntéza konečných produktov je ukázána na obrázku 8 (11,14 až 19) a obrázku 9 (21 a 22). Tak na kyselinu chlorečnú 57 (derivát karboxylovej kyseliny 30) boli naviazané amíny 29a a 29b v prítomnosti Et3N za vzniku amidov 58 (98 %) a 59 (99 %). Naviazanie nukleofilu 51 na 58 sa uskutočnilo v prítomnosti NaH v DMF za vzniku produktu 60 pri 66 % výťažku. Podobne 63 bol získaný naviazaním 51 na 59 (69 % výťažok). Amino látky 61 a 64 boli získány z 58 a 59 v 73 a 99 % výťažku reakciou s amínom 53 v DMF pri teplote okolia. Tioéter 62 bol získaný vystavením 58 tiolu 54 a NaH (DMF, 25 °C, 23 % výťažok). Reakcia látok 60 až 64 s TFA v
·· ·· ·· ·· ··
• · • · • • • • · ··
• • • • ··· • •
• • • • • · • •
···· ···· ·· ·· • e ··
CH2CI2 pri izbovej teplote dáva odchránenie guanidinovej a karboxylovej skupiny vo výbornom výťažku (90 až 99 % po purifikácii RP-HPLC). Piperazinové látky 16 a 19 boli pripravené rovnakým spôsobom z 58 a 59 najprv odstránením fluoridu nukleofilom 52, ďalej TFA indukovaným odchránením za vzniku derivátov 65 a 66, ako je zhrnuté na obrázku 8.
Syntéza látok 20 a 21 je ukázána na obrázku 9. Tak pri reakci 58 s 55 v prítomnosti CH2CI2 pri 25 °C v DMF vzniká látka 67 (92 % výťažok), ktorá bola vystavená TFA CH2CI2 (1:1) pri 25 °C za vzniku cieľového benzimidazolu 20 (97 % výťažok). Podobným spôsobom bola pripravená látka 21 cez medziprodukt 68 reakciou 58 s 56 (EÍ3N, DMF, 25 °C, 94 %), nasledovaná odchránením (83 % po purifikácii RP-HPLC).
Konečne príprava látky 22 je ukázána na obrázku 10. Tak kľúčový medziprodukt 57 reagoval s amoniakom v DMF za vzniku nitroanilínu 69 pri 93 % výťažku. Redukciou 69 H2 v prítomnosti 10 % katalyzátora Pd/C v MeOH vznikol 1,2 diamín 70 (90 %), ktorý reagoval s fenylizotiokyanátom v EtOH za vzniku tiomočoviny 70 (69 % výťažok). Reakciou 71 s HgCfe a ΕΐβΝ v DMF pri stálej teplote okolia vznikol guanidín 72 pri 81 výťažku. Rozštiepenie terciálneho butylesteru v 72 TFA v CH2CI2 patom viedlo k cieľovej látke 22 (80 % výťažok, po purifikácii RPHPLC).
Príklad 2: Všoobecne - Všetky reakcie boli vykonané pod argónovou atmosférou so sušenými, čerstvo destilovanými rozpúšťadlami za bezvodých podmienok, pokiaľ nie je uvedené inak. Tetrahydrofurán (THF) a dietyléter (éter) boli destilované z benzofenónu sodného a dimetyldichloridu (CH2CI2), benzén (PhH) a toluén z hydridu vápenatého. Bezvodé rozpúšťadlá boli tiež získané priechodom cez komerčne dostupné kolóny s aktívnym oxidom hlinitým. Výťažky sa vzťahujú na chromatograficky a spektroskopicky (1H NMR) homogénnej látky, pokiaľ nie je uvedené inak. Všetky rozpúšťadlá, použité pri pracovných postupoch, boli nasýtené, pokiaľ nie je uvedené inak. Všetky činidlá boli zakúpené v najvyššej komerčnej kvalite a použité bez ďalšieho čistenia, pokiaľ nie je uvedené inak.
• · • ·
Všetky reakcie boli sledované tenkovrstvou chromatografiou, vykonanou na 0,25 mm E. Merck silikagelových doskách (60 F - 254) použitím UV svetla ako vizuálneho činidla a 7 % etanolového roztoku kyseliny fosfomolybdénovej alebo panizaldehydu a tepla ako vyvíjajúcich činidiel. E. Merck silikagél (60, veľkosť častíc 0,040 - 0,063 mm) bol použitý pre strednotlakovú kolónovú chromatografiu.
Preparatívne tenkovrstvé chromatografické separácie boli vykonané na 0,25, 0,50 alebo 1 mm E. Merck silikagelových doskách (60 F - 254). HPLC s reverznou fázou bola vykonaná na HPLC prístroji Waters Model 600E s použitím kolóny Vydac 218TP 1022 s detekciou pri 254 nm použitím 90 : 10 A 40 : 60 H2O : CH3CN + 0,1 % TFA gradientu v čase 40 minút.
NMR spektrá boli zaznamenané na prístrojoch Bruker DRX - 600, AMX - 500, AMX-400 alebo AC-250 a kalibrované použitím zvyšného nedeuterovaného rozpúšťadla ako vnútorné porovnanie. Na vysvetlenie multiplicít boli použité nasledujúce skratky: s, singulet; d, dublet; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; pásmo, niektoré prekrývajúce sa signály; b, široký. IR spektrá boli zaznamenané na FT - IR spektrometri Perkin - Elmer 1600 sérií. Vysoko rozlišovacie hmotnostné spektrá (hight resolution mass spectra -HRMS) boli zaznamenané na hmotnostnom spektrometri VG ZAB - ZSE za rýchlych atomárnych bombardovacích (fast atóm bombardment - FAB) podmienok. Elektrorozprašovacie hmotnostné spektrá (electrospray mass spectra) boli zaznamenané na hmotnostnom spektrometri Perkin Elmer Science APIIII.
Syntéza aminokyselinového derivátu 25, ako je ukázané na obrázku 5. Látka 25 k roztoku t-butoxy-karbonyl-(L)-asparagínu 24 (12,6 g, SO mol; Aldrich) v MeOH (200 ml) bola pridaná voda (20 ml). Roztok bol zneutralizovaný 20 % vodným roztokom CS2CO3 (57 ml) a potom dosucha odparený. Výsledný zvyšok bol rozpustený v DMF (50 ml) a potom azeotropicky vysušený odparením do sucha. Soľ cézia potom bola rozpustená v DMF (125 ml), nasledoval prídavok benzylbromidu • · • · · · e · · • · · · ··· · · • · e······ ········ ·· ·· ·· ··· (6,5 ml, 55 mmol). Zmes sa miešala pri izbovej teplote 6 hodín, bola odparená do sucha a zvyšok rozdrvený vo vode (500 ml). Pevná látka bola rozpustená v etylacetáte (150 ml) a organická fáza bola premytá vodou (75 ml), vysušená Na2S04 a rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku. Surový ester bol rekryštalizovaný z etylacetátu/hexánu a bola získaná 25 (15,1 g, 88 %) ako bezfarebná pevná látka. IR (Kbr): nmax 3401, 3349, 3204, 2982, 2935, 1741, 1688, 1657, 1524, 1293, 1169, 1055 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 7,36 - 7,32 (m, 5 hodín, Ph), 5,73 (d, J =
8.5 Hz, 1 H, NHC02), 5,59 (bs, 1 H, CONHH), 5,40 (bs, 1H, CONHH), 5,20 (d, J=
12.5 Hz, 1 H, CHHPh), 5,17 (d, J= 12,5 Hz, 1 H, CHHPh), 4,56 (ddd, J = 4,0, 5,0, 8,5 Hz, 1 H, CHCH2), 2,95 (dd, J = 5,0, 16,5 Hz, 1 H, CHCHH), 2,76 (dd, J = 4,0, 16,5 Hz, 1 H, CHCHH), 1,42 (sd, 9 H, lBu); 13C NMR (150 Mhz, CDCI3): d 171,9, 171,2,
155,7, 135,4, 128,5, 128,3, 128,2, 80,1, 67,4, 50,3, 37,4, 28,3; FAB - HRMS (M + Na+) vypoč. 345,1426, nájdené 345,1421.
Syntéza látky 26, ako je ukázané na obrázku 5 : K miešajúcemu sa roztoku bis(trifluóracetoxy)fenyljodid (2,0 g, 4,7 mmol) v DMF : H20 (24 ml, 1 :1, objem.) bola pridaná látka 25 (1,0 gramu, 3,1 mmol) za izbovej teploty. Po 15 minútach bol pridaný pyridín (0,5 ml, 6,2 mmol) a miešanie pokračovalo 3 hodiny. Rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku a zvyšok bol rozpustený vo vode (30 ml). Roztok bol premytý éterom a vodná vrstva bola zalkalizovaná 1N NaOH a extrahovaná dichlórmetánom. Rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku do získania olejovitého zvyšku. Purifikáciou strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (10 % MeOH v CH2CI2) bol získaný amín 26 ako žltá olejovitá látka (0,37 gramov, 41 %). Rf = 0,11 (2,5 % metanol v etylacetáte); IR (tenký film): nmax 3366, 3313, 3064, 2979, 2934, 1688, 1518, 1501, 1456, 1393, 1368, 1324, 1254, 1204, 1166, 1055, 1002, 838, 800, 743, 692 cm’1; 1H NMR (S00 MHz, CDCI3) : d 7,36 - 7,28 (m, 5 H, Ph), 6,36 (bm, 2 H, NH2), 6,06 (d, J = 7,5 Hz, 1 H, NHC02), 5,18 (d, J = 12,0 Hz, 1 H, CHHPh), 5,13 (d, J = 12,0 Hz, 1 H, CHHPh), 4,52 - 4,43 (bm, 1 H, CHCH2), 3,35 (bdd, J = 12,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,24 (bdd, J = 6,5,12,5 Hz, 1 H, CHCHH), 1,32 (s, 9 H, ‘Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) d 170,0, 155,9, 134,8, 128,5, 128,4, 128,3,
80,6, 67,7, 52,9, 41,6, 28,0; FAB - HRMS (M + H+) vypoč. 295,1658, nájdené 295,1650.
• · • · • ···
Syntéza látky 27b, ako je ukázané na obrázku S. Látka 27b bola pripravená rovnakým postupom ako 27a, s použitím 2-naftalénsulfonylchloridu namiesto benzénsulfonylchloridu. Hrubý výťažok : 16,06g (66 %). IR (Kbr): nmax 3424, 3289, 2925, 1851, 1713, 1673, 1502, 1399, 1333, 1258, 1223, 1191, 1159, 1127, 1075, 1023, 964, 866, 822, 794, 714, 669, 638, 548, 477 cm'1; 1H NMR (500 MHz, DMSOd6): d 8,40 (d, J = 1,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,15 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, NHSO2), 8,12 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,07 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,01 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl),
7,81 (dd, J = 1,5, 8,8 Hz, 1 H, naftyl), 7,68 (ddd, J= 1,5, 6,8, 7,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,64 (ddd, J= 1,5, 6,8, 7,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,33 (bs, 1 H, CONHH) 6,87 (bs, 1 H, CONHH), 4,16 (bm, 1 H, CHCH2), 2,47 (dd, J = 7,0, 15,5 Hz, 1 H, CHCHH) 2,28 (dd, J = 6,5, 15,5 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) : d 172,0, 170,5,
138,4, 134,1, 129,2, 129,0, 128,6, 127,8, 127,4, 127,1, 122,6, 52,5, 38,0; FAB HRMS (M + H+) vypoč. 323,0702, nájdené 323,0708.
Syntéza látky 55(b), kde -NH2 substituent látky 55 je nahradený -OH.
Krok A : K roztoku 3-hydroxypropiónovej kyseliny (.073 g, 0,16 mmol, 1,0 podiel) bol pridaný DMF (0,5 ml, ,32M), imidazol (26,0 mg, 0,38 mmol, 2,4 dielu) a TBDPSCI (.046 ml, 0,19 mmol, 1,2 dielu.) a všetko bolo miešané 2,5 hodiny pri 25 °C. Roztok bol potom zriedený éterom (10 ml) a potom premytý nasýteným roztokom 5 % chlorovodíka (2x10 ml), vodou (2x10 ml), soľným roztokom (1x5 ml) a potom sušený MgS04- Látka bola purifikované strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (oxid kremičitý, 80 % éter v nizkovriacej frakcii petroléteru) a bola použitá v nasledujúcom kroku
Krok B : K roztoku fenyléndiamínu (1,08 g, 0,01 mol) v 5,5 N HCI (10 ml) bol pridaný chránený medziprodukt, vzniknutý v kroku 1 (1,125 g, 0,015 mol) pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola zahrievaná pod spätným chladičom 24 hodín a potom bola ochladená na izbovú teplotu. Rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za vzniku zrazeniny, ktorá bola sfiltrovaná a premytá éterom; a potom • ·
Krok C : TBDPS skupina bola odstránená nasledovne : Roztok meziproduktu z kroku B (7,481 mmol) v THF (0,1 M) bol ochladený na 0 °C a spracovaný azeotropickým sušením (benzén, 3 x 50 ml) TBAF (22,44 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pri 0 °C 10 hodín a ukončená nasýteným vodným roztokom NH4CI. Dve vrstvy boli oddelené a vodná fáza bola extrahovaná zmesou etylacetátu a etyléteru. Spojená organická fáza bola premytá soľným roztokom, vysušená a skoncentrovaná. Čistením kolónovou chromatografiou na silikagéli bola získaná čistá látka 55(b), kde -NH2 substituent látky 55 je nahradený -OH.
Syntéza látky 55(c), kde -NH2 substituent látky 55 je nahradený -SH. K roztoku fenylendiamínu (1,08 g, 0,01 mol) v 5,5 N HCI (10 ml) bola pridaná kyselina 3merkaptopropiónová (1,125 g, 0,015 mol) pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola zahrievaná pod spätným chladičom 24 hodín a potom bola ochladená na izbovú teplotu. Roztok bol odstránený za vákua za vytvorenia zrazeniny, ktorá bola sfiltrovaná a premytá éterom do získania čistej látky 55(c), kde -NH2 substituent látky 55 je nahradený -SH.
Syntéza látky 67 (b) a (c), kde -NH- skupina je substituovaná buď -S- alebo -Odiradikálom (-NH- prípad je znázornený na obrázku 9). K roztoku 57 (0,10 g, 0,20 mmol; syntéza vyššie) v DMF (8 ml) bol pridaný 55 (b) alebo (c) (0,038 g, 0,22 mmol; syntéza vyššie) a trietylénamín (0,06 ml, 0,44 mmol) pri izbovej teplote. Po miešaní pri 25 °C 16 hodín bola reakčná zmes zriedená EtOAc (10 ml) a vodou. Vrstvy boli oddelené a vodná vrstva bola extrahovaná etylacetátom (2 x 10 ml). Organické extrakty boli spojené a premyté vodou (2 x 10 ml) a soľným roztokom (20 ml) a sušené Na2S04. Po filtrácii a vysušení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou chromatografiou (oxid kremičitý, etylacetát) za získania látky 67 (b) alebo (c).
Syntéza látky 20 (b) alebo (c), kde -NH- skupina je substituovaná buď -Salebo -O-diradikálom (-NH- prípad je znázornený na obrázku 9). K roztoku 67 (b) • · • · alebo (c) (0,068 g, 0,11 mmol; syntéza vyššie) v CH2CI2 (2 ml) bola pridaná kyselina trifluóroctová (2 ml) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania olejovitej látky, z ktorej sa po RP-HPLC (C-18) získala 20 (b) alebo (c) ako žltá pevná látka.
• · • ···
Syntéza látky 28a, ako je zobrazené na obrázku 5. Do skúmavky s guľatým dnom, vybavenej magnetickým miešadlom, bol pridaný vodný roztok NaOH (11,15 g, 280,0 mmol) vo vode (50 ml) a ochladený na 0 °C. Bróm (2,60 ml, 50,0 mmol) bol prikvapkávaný počas 5 minút a reakčná zmes sa miešala ďalších 5 minút pri tejto teplote. Roztok chránenej aminokyseliny 27a (10,44 gramov, 38,0 mmol) v roztoku NaOH (3,10 gramov, 70,0 mmol, 30 ml H2O) bol pridaný naraz pri 0 °C. Miešanie pokračovalo pri tejto teplote 20 minút a po odstránení chladiaceho kúpeľa bola reakčná zmes zahriata na 90 °C na ďalších 30 minút. Po ochladení na 0 °C pH reakčnej zmesi bolo upravené na 7 koncentrovanou a 1M vodnou HCI. Výsledná bezfarebná zrazenina sa získala filtráciou. Zvyšok bol premytý vodou, sušený cez noc v sušiarni pri približne 50 °C za získania 28a bezfarebnej pevnej látky (6,95 gramov, 75 %). Surový produkt bol použitý bez ďalšieho čistenia. IR (KBr) : nmax 3509, 3299, 3058, 2936, 1636, 1596, 1522, 1446, 1413, 1355, 1340, 1300, 1246, 1163, 1094, 1028, 924 cm’1; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): d 7,84 - 7,82 (m, 2 H, Ph), 7,66 - 7,63 (m, 1 H, Ph), 7,60 - 7,56 (m, 2 H, Ph), 7,58 (bm, 1 H, NHS02Ph), 3,35 (bs, 2H, NH2), 3,17 (dd, J= 4,5, 9,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,01 (dd, J = 2,5, 12,0 Hz, 1 H, CHH), 2,80 (dd, J = 9,5,12,0 Hz, 1 H, CHH); 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6): d
169,4,139,1,132,7, 129,2,126,8, 52,7, 41,7; FAB-HRMS (M+Na+) vypoč. 245,0596, * nájdené 245,0599.
Syntéza látky 28b, ako je zobrazené na obrázku 5. Látka 28b bola pripravená rovnakým spôsobom ako 28a, s použitím 27b namiesto 27a. Hrubý výťažok : (11,88 gramov, 81 %) ako béžová zafarbená pevná látka. IR (KBr): n^x 3338, 3241, 3056, 2831,2601, 1651, 1604, 1513, 1463, 1404, 1382, 1335, 1151, 1076,1039, 985, 955, 931, 913, 855, 814, 787, 749, 657, 618, 550, 480 cm’1; 1H NMR (500 MHz, DMSOd6): d 8,48 (br. s, 1 H, naftyl), 8,16 - 8,10 (2 bd, 2 H, naftyl), 8,04 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,85 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,70 (ddd, J= 1,5, 7,0, 8,0 Hz, 1 H, ···· ··· ···· • · · · ··· · · · • ········· · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ··· naftyl), 7,66 (ddd, J= 1,0, 7,0, 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,45 (bm, 1 H, NHS04), 3,54 - 3,19 (bm, 2 H, NH2), 3,23 (dd, prekrytý, J = 4,5, 9,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,04 (dd, J = 4,5, 12,00 Hz, 1 H, CHCHH), 2,83 (dd, J = 9,5, 12,00 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) : d 169,3, 136,1, 134,3, 131,6, 129,4, 129,2, 128,9, 128,0, 127,8, 127,6,122,5, 52,7, 41,6; FABHRMS (M+H+) vypoč. 295,0753, nájdené 295,0761.
Syntéza látky 29a, ako je zobrazené na obrázku 5. Do uzatvárateľnej skúmavky s magnetickým miešadlom bolo pridané 28a (4,88 gramov, 20,0 mmol) a 75 ml bezvodého dimetoxyetánu. Po prídavku 3,0 ml koncentrovanej H2SO4 bola reakčná zmes ochladená na -78 °C pod argónovou atmosférou a 40,0 ml kvapalného izobutylénu sa pridalo do uzatvárateľnej skúmavky. Po uzavretí bol chladiaci kúpeľ odstránený a reakčná zmes bola miešaná 48 hodín pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola naliata do 100 ml ľadovej vody. Vodný roztok bol extrahovaný dietyléterom (40 ml) a potom pH vodnej fázy bolo upravené na 12 až 13 6 N vodným NaOH. Voľný amín bol extrahovaný etylacetátom (4 x 50 ml) a spojené organické extrakty boli postupne premyté nasýteným vodným roztokom NaHC03 (50 ml), 5 % vodným roztokom KHSO4 (50 ml) a soľným roztokom (50 ml). Organická fáza bola sušená MgS04, sfiltrovaná a rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za získania 29a (10,9 gramov, 55,5 %) sivastej pevnej látky. Surový produkt bol použitý bez ďalšieho čistenia. Rf = 0,27 (silikagél, etylacetát); IR (KBr) nmax 3372, 3295, 2981, 2932, 1726, 1452, 1337, 1261, 1161, 1094, 945, 898, 845, 753 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 7,86 - 7,84 (m, 2 H, Ph), 7,58 - 7,54 (m, 1 H, Ph), 7,51 - 7,48 (m, 1 H, Ph), 3,76 (dd, J = 4,0, 5,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,02 (dd, J = 9,0, 13,0 Hz, 1 H, CHH), 2,88 (dd, J = 5,5, 13,0 Hz, 1 H, CHH), 1,27 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 169,3, 139,7, 132,8, 129,1, 127,2, 82,8, 58,8, 44,9, 27,7; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 301,1222, nájdené 301,1211.
Syntéza 29b, ako je zobrazené na obrázku 5. Látka 29b bola pripravená rovnakým postupom ako 29a,s použitím 28b namiesto 28a. Hrubý výťažok : 4,56 g (51 %) sivastej pevnej látky. Rf = 0,25 (silikagél, etylacetát + 2 % objem. Et3N); IR (KBr) : nmax 3360, 3264, 3057, 2981, 2935, 2873, 2747, 1731, 1588, 1501, 1455, 1339, 1254, 1220, 1157, 1076, 952, 926, 823, 782, 747, 663, 619, 552, 481 cm'1; 1H • · · · ·· • · · · ··· ·· • · ·· ·· ···· • · ······ ···· ···· ·· ·· ··
NMR (500 Mhz, CDCI3): d 8,40 (bs, 1 H, naftyl), 7,92 (bd, J = 8,5 Hz, 2H, naftyl),
7,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H, naftyl), 7,82 (dd, J = 1,5, 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,64 - 7,55 (2 x ddd, prekrytý, J = 1,0, 7,0, 8,5 Hz, 2 H, naftyl), 3,84 (dd, J = 4,2, 5,8 Hz, 1 H, CHCH2), 3,30 - 2,60 (bm, prekrytý, 2 H, NH2), 3,03 (dd, J = 4,2, 13,4 Hz, 1 H, CHCHH), 2,88 (dd, J = 5,8,13,4 Hz, 1 H, CHCHH), 1,08 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCh) : d 169,2, 136,3, 134,9, 132,0, 129,5, 129,2, 128,9, 128,6, 127,8,
127,5, 122,4, 82,9, 58,6, 44,6, 27,5; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 351,1379, nájdené 351,1371.
Syntéza látky 31, ako je zobrazené na obrázku 6. K suspenzii kyseliny 30 (5,0 gramov, 27 mmol; Aldrich) v toluéne bol pridaný trimetylortoacetát (17 ml, 135 mmol). Zmes bola zahriatá na 80 °C počas 12 hodín a rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania 31, bezfarebnej pevnej látky (5,26 gramov, 98 %). Rf = 0,46 (silikagél, 25 etylacetát vhexáne); ÍR (KBr) : nmax 3061, 2960, 1714, 1614, 1542, 1438, 1351, 1297, 1262, 1233, 1130, 871, 755 cm’1; 1H NMR (5OOMHz, CDCh): d 8,74 (dd, J = 4J (1H -1H) = 2,0 Hz, 4J (1H - 19F) = 7,0 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 8,32 (ddd, 4J (1H - 1H) = 2,0 Hz, 4J (1H - 19F) = 4,5 Hz, 3J (1H - 1H) = 9,0, 1 H, 6-Ar-H), 7,39 (dd, 3J (1H - 1H) = 9,0 Hz, 3J (1H - 19F) = 10,5 Hz, 1 H, 5-Ar-H); 13C NMR (125 MHz, CDCh) : d 164,1, 159,1, 156,9, 136,5, 127,8, 118,8, 118,7, 52,9; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 200,0281, nájdené 200,0286.
Syntéza látky 32, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku 31 (4,0 gramov, 20 mmol) v DMF (10 ml) boli pridané cca 4 g 4 A molekulárneho sita a 4,46 g (0,00 mmol) N3(CH2)2OTBS pri izbovej teplote. Po 10 minutách boli pridané 2 ml (2,0 mmol) 1 M roztoku TBAF v THF. Zmes bola miešaná 4 hodiny pri izbovej teplote a potom sfiltrovaná cez krátku dráhu celíte® (short path of celíte®). Filtrát bol rozpustený v etylacetáte (100 ml) a postupne premytý vodou, nasýteným vodným roztokom NaHC03 a soľným roztokom. Organický extrakt bol sušený MgS04, sfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania žltej olejovitej látky. Strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 40 % etylacetát v hexáne) sa získala 32, žltá pevná látka (3,85 gramov, 73 %). Rf = 0,35 (silikagél, 40 % etylacetát vhexáne); IR (KBr) : nmax 2950, 2938, 2114, 1713, 1620, 1536, ·· ·· ···· · · · · · '· · · · ··· ·· • · · · · ·· ···· ···· ·· ···· ·
1438, 1349, 1303, 1276, 1247, 1161, 1136, 918, 760 cm·1; 1H NMR (500 MHz, CDCh): d 8,54 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,22 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,13 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,32 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, OCH2), 3,94 (s, 3 H, OCH3), 3,71 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CH2N3): 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 164,7, 154,7, 135,3, 127,3,
123,3, 114,0. 68,8, 52,5, 49,7; FAB-HRMS (M+Na+) vypoč. 289,0549, nájdené 289,0553.
Syntéza látky 33, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku 32 (3,85 gramov, 14,0 mmol) v 1,4-dioxán : voda (90 ml: 30 ml) bol pridaný LiOH · H20 (1,2 gramu, 28 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pri izbovej teplote 4 hodiny a potom bolo pridané 40 ml nasýteného vodného roztoku NH4. Organické rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania žltej suspenzie. Suspenzia bola rozpustená vo vode a okyslená vodným roztokom 1 M KHS04. Vodná vrstva bola potom extrahovaná CH2CI2 (3 x 70 ml). Spojené organické extrakty boli sušené MgS04, sfiltrované a rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania 33 ako žltej pevnej látky (3,50 gramov, 99 %). Rf = 0,10 (silikagél, 60 % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3087, 2964, 2877, 2659, 2539, 2120, 1699, 1616, 1534, 1429,1359,1282, 1163, 1138,1079,1039,1002, 929, 847, 763, 687, 642, 546 cm’1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,40 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,22 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,37 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,37 (t, J = 4,5 Hz, 2 H, OCH2), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CH2N3); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 167,4,156,0,140,9,136,4,
127,9, 124,9, 115,7, 70,3, 51,1; FAB-HRMS vypoč. 275,0392, nájdené 275,0395.
Syntéza látky 34, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku amínu 26 (0,33 gramov, 1,10 mmol) a kyseliny 33 (0,286 gramu, 1,10 mmol) v CH2CI2 (30 ml) bolo pridané katalytické množstvo DMAP (0,03 gramu, 0,22 rnol) a DCC (0,26 gramu, 1,1 mol) pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola miešaná 4 hodiny pri tejto teplote a zrazenina dicyklohexylmočoviny bola potom sfiltrovaná a filtrát premytý postupne vodou, nasýteným vodným roztokom NaHC03 a soľným roztokom. Organické rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania olejovitej látky, z ktorej bol po čistení strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 60 % etylacetát v hexáne) získaný amid 34, žltá pevná látka (2,48 gramov, 82 %). Rf = 0,28 (silikagél, ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · · ·· • · · ···· · · • · ······ ········ ·· ·· ·· % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3343, 2977, 2933, 2112, 1738, 1710, 1619, 1531, 1498, 1366, 1333, 1280, 1161, 1084, 1047 cm·1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,23 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,98 (dd, J = 2,0,11,0 Hz, 1 H, Ar), 7,40 (bt, 1 H, NHCO), 7,39 - 7,31 (m, 5 H, Ph), 7,09 (d, J = 11,0 Hz, 1 H, Ar), 5,67 (d, J = 8,OHz, 1 H, NHCO2), 5,21 (s, 2 H, CH2Ph), 4,60 - 4,50 (bm, 1 H, CHCH2), 4,30 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, OCH2), 3,95 - 3,85 (bm, 1 H, CHCHH), 3,78 - 3,70 (bm, prekrytý, 1 H, CHCHH), 3,70 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, CH2N3), 1,43 (s, 9 H, *Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 170,0, 164,9, 153,8, 139,8, 135,0, 133,0, 128,7, 128,6, 126,9, 124,6,
114,3, 81,0, 68,8, 67,9, 49,8, 33,8, 28,2, 25,5, 24,8; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 661,1023, nájdené 661,1050.
Syntéza látok 35ab, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku azidu 34 (50 mg, 0,095 mmol) v zmesi THF : H2O (8 ml THF : 0,04 ml H20) bol pridaný trifenylfosfín (50 mg, 0,19 mmol). Reakčná zmes bola miešaná pri izbovej teplote 14 hodín a rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku. Čistením surového zvyšku strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 20 % metanol v dichlórmetáne) boli získané dve hlavné frakcie (celkový výťažok 80 %). Frakcia 1 :17 mg (nažlltnutá olejovitá látka, 40 %), frakcia 2 : 17 mg (nažltnutá olejovitá látka, 40 %). Frakcia 1 bola pozitívna pri ninhydrínovom teste, zatiaľ čo frakcia 2 bola negatívna. Frakcia 1 35 a Rf= 0,48 (silikagél, 20 % metanol v dichlórmetáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,22 (m, 1 H, Ar), 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,43 - 7,30 (m, 6 H), 7,07 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 5,80 (d, J = 6,0 Hz, 1 H, NHBoc), 5,19 (s, 2 H, CH2Ph), 4,54 (bm, 1 H, CHNHBoc), 4,21 (bm, 2 H, CH2OAr), 3,87 - 3,76 (m, 2 H), 3,19 (s, 2 H, CH2NH2), 2,75 (bs, 2 H, NH2), 1,41 (s, 9 H, lBu); FAB-HRMS (M+H+) výpoč. 503,2142, nájdené 503,2162. Frakcia 2 35b : Rf = 0,86 (silikagél, 20 % metanolu v dichlórmetáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d = 8,46 (m, 1 H, Ar), 8,42 (t, J= 6,5 Hz, 1 H, NHAr), 7,79 (dd, J= 2,5, 11,0 Hz, 1 H, Ar), 7,38 - 7,28 (m, 5 H, Ar), 7,21 (m, 1 H, NHCO), 6,80 (d, J = 11,0 Hz, 1 H, Ar), 5,85 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, NHBoc), 5,19 (s, 2 H, CH2Ph), 4,53 (m, 1 H, CHNHBoc), 3,92 (t, J= 6,5 Hz, 2 H, CH2OH), 3,88 - 3,73 (m, 2 H, CHZNH(CO)), 3,52 - 3,38 (m, 2 H, CH2NHAr), 1,41 (s, 9 H, lBu); FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 635,118, nájdené 635,110.
·· • · ··
Syntéza látky 10, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku 35a (0,023 g, 0,046 mmol) v zmesi THF : H2O (6 ml: 2 ml) bol pridaný LiOH · H20 (4 ml, 0,092 mmol) pri izbovej teplote. Zmes sa miešala 4 hodiny a potom bola okyslená kyselinou octovou. Rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku a zvyšok bol použitý v ďalšom kroku bez ďalšieho čistenia. K roztoku surovej kyseliny v 2 ml bezvodého DMF bol pridaný N,N-diizopropyletylamín (9 ml, 0,05 mmol) a 1 H-pyrazolkarboxamidín · HCI (8 mg, 0,05 mmol). Po 16 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za zníženého tlaku a zvyšok bol čistený RP-HPLC (C-18) za získania 10 (3,25 mg, 13 %), nažltlej pevnej látky. Rf = 20,5 minút; 1H NMR (500 MHz, D2O): d 8,33 (d, 1 H, J = 2,0 Hz, Ar), 7,98 (dd, 1 H, J = 2,0, 9,0 Hz, Ar), 7,30 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,42 (m, 1 H, CHNHBoc), 4,34 (t, J = 4,0 Hz, 2 H, CH2NH(CO)), 3,82 (m, 2 H, NH2(C=NH)NHCH2,
3,63 (t, 2 H, J = 4,0 Hz, 2 H, CH20); FAB/HRMS (M+Cs+) vypoč. 587,0866, nájdené 587,0895.
Syntéza látky 37, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku 34 (0,10 gramu, 0,019 mmol) v CH2CI2 (4 ml) pri izbovej teplote bola pridaná trifluóroctová kyselina (4 ml). Zmes sa miešala 2 hodiny. Roztok bol odstránený za vákua za získania nažltlej olejovitej kvapaliny, z ktorej sa po strednotlakovej chromatografii (oxid kremičitý, 5 % metanol v dichlórometáne) získala 37, olejovitá látka (0,07 gramov, 84 %). Rf = 0,19 (oxid kremičitý, 5 % metanol v dichlórometáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,21 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 7,95 (dd, J = 2,0,11,0 Hz, 1 H, 6-Ar-H), 7,39 - 7,29 (m, 5 H, Ar), 7,21 (bm, 1 H), 7,05 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 5,16 (s, 2 H, CH2Ph), 4,27 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CH20Ar), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CH2N3), 3,95 - 3,78 (bm, 1 H, CHNH2), 3,65 3,52 (bm, 1 H, CHCHH), 4,32 - 4,31 (bm, 1 H, CHCHH); 13C (125 MHz, CDCI3): d 164,9, 153,7, 139,2, 135,1, 133,1, 128,6, 128,5, 128,4, 127,0, 124,6, 114,2, 68,7,
67,4, 49,7, 33,8, 25,5; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 561,0499, nájdené 561,0507.
Syntéza látky 38a, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku 37 (0,13 gramu, 0,30 mmol) v CH2CI2 (10 ml) bol pridaný N,N-diizopropyletylamín (0,07 ml, 0,39 mmol) a benzénsulfonylchlorid (0,034 ml, 0,33 mmol) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách bola reakčná zmes zriedená CH2CI2 (10 ml) a vodou (10 ml). Vrstvy boli oddelené a organická vrstva bola premytá nasýteným roztokom uhličitanu sodného a • · soľným roztokom a sušená (MgS04). Roztok bol odstránený za vákua za získania olejovitej látky, z ktorej sa po preparatívnej chromatografii na tenkej vrstve (oxid kremičitý, 60 % éter v hexáne) získala 38a, olejovitá látka (0,13 gramy, 78 %). Rf = 0,43 (oxid kremičitý, 60 % éter v hexáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,26 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 7,98 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, 6-Ar-H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 2 H, Ar), 7,53 (t, J = 8,0 Hz, 1 H, p-fenyl), 7,42 (t, J = 8,0 Hz, 2 H, m-fenyl), 7,31 - 7,30 (m, 3 H, Ar), 7,22 - 7,21 (m, 2 H, Ar), 7,08 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, S-Ar-H), 7,03 (t, J =
5,5 Hz, 1 H), 5,03 (d, J = 12,0 Hz, 1 H, PhCHH), 4,99 (d, J = 12,0 Hz, 1 H, PhCHH), 4,29 (t, J = 4,5 Hz, 2 H, CH2O), 4,16 (dd, J = 4,0, 7,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,92 - 3,87 (m, 1 H, CHCH2), 3,72 - 3,67 (m, prekrytý, 3 H, CHCHH, CH2Na); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 169,2, 165,2, 153,7, 139,3, 138,7, 134,3, 133,1, 132,9, 129,1,
128.4, 128,3, 126,9, 126,5, 124,9, 114,1, 68,7, 68,1, 55,4, 49,7, 42,4; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 701,0431, nájdené 701,0442.
Syntéza látky 38b, ako je ukázané na obrázku 6. Látka 38b bola pripravená rovnakým postupom ako 38a, s použitím 1-naftalénsulfonylchloridu namiesto benzénsulfonylchloridu. Výťažok : (0,031 g, 57 %), olejovitá kvapalina. Rf = 0,18 (5 % metanol v dichlórometáne); IR (tenký film): nmax 3277, 2930, 2112, 1740, 1652, 1618, 1523, 1496, 1348, 1280, 1162, 1125, 984, 910, 772 cm·1,1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,60 (d, J= 11,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,21 (dd, J= 2,0, 9,3 Hz, 1 H, naftyl), 8,03 (d, J= 2,9 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 8,01 (d, J = 10,4 Hz, 1 H, naftyl), 7,87 (d, J = 9,3 Hz, 1 H, naftyl), 7,81 (dd, J = 2,9, 11,0 Hz, 1 H, 6-Ar-H), 7,62 (ddd, J = 1,7, 8,7, 8,7 Hz, 1 H, naftyl), 7,54 (ddd, J = 1,3, 8,8, 8,8 Hz, 1 H, naftyl), 7,47 (dd, J = 9,4, 10,1 Hz, 1 H, naftyl), 7,28 7,22 (m, 3 H, Ph), 7,12 - 7,07 (m, 2 H, Ph), 6,98 (d, J = 11,0 Hz, 1 H, 5Ar-H), 6,69 (dd, J = 7,5 Hz, 1 H, NHCO), 6,22 (d, J = 9,5 Hz, 1 H, NHSO2), 4,89 (d, J = 15,0 Hz, 1 H, CHHPh), 4,83 (d, J = 15 Hz, 1H, CHHPh), 4,25 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, OCH2), 4,13 (ddd, J = 5,4, 9,4, 9,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,74 (ddd, J = 5,4, 7,4,17,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,69 (t, J = 6,1 Hz, 2 H, CH2N3), 3,67 (ddd, prekrytý, J = 7,5, 9,0,17,5 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, CDCI3): d 169,3,165,1,153,7, 139,1,134,8,
134.4, 134,0, 133,5, 132,9, 129,9, 129,0, 128,6, 128,5, 128,3, 127,7, 126,3, 124,8,
124,1, 114,0, 68,7, 67,9, 55,7, 49,8, 42,2; FAB-HRMS (M+Cs+ ) vypoč. 751,0587, nájdené 751,0599.
• ·
Syntéza látok 39a a 41a, ako je zobrazené na obrázku 6. Látky 39a a 41a boli pripravené rovnakým postupom ako 35ab, s použitím látky 38b namiesto 38a. Výťažok : (F1 = 0,029 gramu, F2 = 0,028 g), celkový výťažok (80 %). F2 bol pozitívny pri ninhydrínovom teste, zatiaľ čo F 1 nie. Rf (F 1) 41 a = 0,39 (oxid kremičitý, 10 % metanol v dichlorometáne); 1HNMR (500 MHz, CDCI3): d 8,35 (bs, 1 H, 2-Ar-H), 8,31 (bs, 1 H, CH2NHAR), 7,76 -7,60 (m, prekrytý, 3 H, Ar), 7,50 (bs, 1 H), 7,38 (t, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,28 (t, J = 9,0 Hz, 2 H, Ar), 7,26 - 7,13 (m, 5 H, Ar),
6,86 (d, J = 11,0 Hz, 1 H, Ar), 6,64 (d, J = 11,0 Hz, 1 H, NHSO2), 4,92 (d, J = 15,0 Hz, 1 H, PhCHH), 4,86 (d, J = 15,0 Hz, 1 H, PhCHH), 4,26 - 4,23 (m, 1 H, CHCH2), 3,80 - 3,67 (m, prekrytý, 4 H, HOCH2, CHCH2), 3,34 - 3,31 (bm, CH2NHAr), 2,92 (bs, CH20H); Rf (F2) 39a = 0,16 (oxid kremičitý, 20% metanol v dichlorometáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,24 (bs, 1 H, Ar), 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,80 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,49 (t, J = 8,0 Hz, 1 H, Ph), 7,40 (t, J = 8,0 Hz, 2 H, Ph), 7,30 - 7,28 (m, 3 H, Ar), 7,19 - 7,18 (m, prekrytý, 3 H, Ar, NH(CO)), 7,02 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 5,01 (d, J = 12,5 Hz, 1 H, PhCHH), 4,97 (d, J = 12,5 Hz, 1 H, PhCHH), 4,18 - 4,15 (m, prekrytý, 3 H, CHCH2, OCH2), 3,86 - 3,84 (m, 1 H, CHCHH, 3,70 - 3,68 (m, 1 H, CHCHH), 3,15 - 3,13 (bm, 2 H, OCH2NH2), 2,82 (bm, 2 H, NH2); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 169,5, 165,4, 154,4, 139,9, 138,8, 134,4, 133,0, 132,8, 129,0, 138,5,
128,4, 127,0, 126,3, 125,0, 114,1, 71,4, 68,0, 55,4, 42,3, 40,7; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 675,0526, nájdené 675,0546.
Syntéza látky 11, ako je znázornené na obrázku 6. Látka 11 bola pripravená rovnakým postupom ako 10, s použitím 40a namiesto 36b. Výťažok: (3,31 mg, 13 %). 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,26 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,04 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,82 - 7,80 (m, 2 H, Ph), 7,47 - 7,36 (m, 4 H, 5-ArH, Ph), 4,35 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, OCH2), 4,19 (dd, J = 4,0,14,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,75 (dd, J = 4,0, 14,0 Hz, 1H, CHCHH), 3,68 (t, J = 5,0 Hz, H, CH2NH(C=N)), 3,47 (dd, J = 11,0,14,0 Hz, 1 H, CHCHH).
Syntéza látky 12, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku benzylesteru 41a (0,10 gramov, 0,22 mmol) v THF : H20 (3 ml: 1 ml) bol pridaný LiOH · H20 (18,5 mg,
0,44 mmol) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách miešania bola reakčná zmes okyslená kyselinou octovou a rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za získania surovej
·· ·· ·· ·· ·
• · • · • · • • • •
• • • · ··· • ·
• • · • · • · • · •
• • • · • · • •
···· ···· ·· ·· ·· •
kyseliny 42a. K roztoku kyseliny 42a v DMF (5 ml) bol pridaný N.Ndiizopropyletylamín (38 ml, 0,22 mmol). Po 16 hodinovom miešaní pri 50 °C bolo rozpúšťadlo odstránené vo vákuu za získania olejovitej látky, z ktorej po RP-HPLC (C-18) bola získaná 12 (5,4 mg, 5 %), nažltnutá pevná látka. Rf = 14,9 minút; 1H NMR (600 MHz, CDCI3) : d 8,26 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,67 - 7,65 (m, 2 H, Ph),
7,64 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, Ar), 7,24 - 7,18 (m, 3 H, Ph), 7,06 (d, J = 9,0 Hz, Ar), 4,49 (t, J = 4,0 Hz, 2 H, CH2OH), 4,15 (dd, J = 6,0,10,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,86 (t, J = 4,0 Hz, 2 H, CH2N(C=N)NH2), 3,70 (dd, J = 6,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,35 (dd, J = 10,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (150 MHz, CDCI3) : d 167,6, 164,9, 147,2,
141.7, 132,4, 130,5, 129,6, 127,7, 126,8, 125,6, 125,5, 122,2, 112,5, 70,4, 42,6,
28.7, 23,2. Elektrorozprašovacie hmotnostné spektrum (electrospray mass spectrum) (M+H+) vypoč. 495, nájdené 495.
Syntéza látky 39b, ako je zobrazené na obrázku 6. K roztoku azidu 38b (0,031 gramov, 0,05 mmol) v THF : H20 (8 ml : 0,04 ml) bol pridaný trifenylfosfín (0,026 gramu, 0,1 mmol). Po 12 hodinách miešania pri izbovej teplote bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania bielej pevnej látky. Pevná látka bola čistená preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve (oxid kremičitý, 20 % metanol v dichlorometáne) za získania 39b, olejovitej látky (0,013 gramu, 44 %). Rf = 0,1 (silikagél, 10 % metanol v dichlórmetáne); IR (tenký film) : nmax 3361, 3282, 3070, 2922, 2851,1742,1650,1620,1527,1456,1349,1322,1280,1162,1126, 989, 910 cm·1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d = 8,63 (d, J = 10,8 Hz, 1 H, naftyl), 8,17 (dd, J = 1,0, 9,1 Hz, 1 H, naftyl), 8,02 (d, J = 2,5 Hz, 1 H, Ar), 7,92 (d, J = 10,3 Hz, 1 H, naftyl), 7,77 (d, J = 10,3 Hz, 1 H, naftyl),7,72 (dd, J = 2,6,11,0 Hz, 1 H, Ar), 7,58 (dd, J = 8,3, 8,3 Hz, 1 H, naftyl), 7,49 (dd, J = 7,3, 7,3 Hz, 1 H, naftyl), 7,41 (dd, J = 7,5,
7,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,23 7,16 (m, 3 H, Ph), 7,09 - 7,04 (m, 2 H, Ph), 6,84 (d, J = 11,1 Hz, 1 H, Ar), 4,83 (d, J = 15,2 Hz, 1 H, CHHPh), 4,76 (d, J = 15,2 Hz, 1 H, CHHPh), 4,23 (dd, J = 5,8, 9,1 Hz, 1 H, CHCHZ), 4,10 - 4,04 (bm, 2 H, OCH2), 3,95 - 3,61 (bm, 5 H, CH2NH2, CHCHH), 3,18 - 3,05 (bm, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 169,6, 165,3, 154,2, 146,9, 134,6, 134,5, 134,0, 133,9, 133,2, 129,8, 129,0, 128,6, 128,5, 128,4, 128,2, 127,8, 127,0, 125,9, 124,9, 124,2, 124,1, 114,3,
67,6, 55,9, 42,0, 40,5, 29,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 725,0682, nájdené 725,0695.
• · • · • ···
Syntéza látky 13, ako je zobrazené na obrázku 6. Látka 13 bola pripravená rovnakým postupom ako 10 použitím látky 40b namiesto 36b. Výťažok : (1,8 mg, 15 %), nažltnutá pevná látka. Rf = 21,2 minúty; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,63 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,17 (dd, J = 1,5, 7,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,94 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,88 (d, J= 2,5 Hz, 1 H, Ar), 7,76 - 7,70 (m, prekrytý, 2 H, 6-Ar-H, naftyl), 7,57 (ddd, J = 1,0, 6,5, 9,3 Hz, 1H, naftyl), 7,47 (dd, J = 7,5, 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,42 (ddd, J = 1,0, 7,0, 7,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,25 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,72 (t, J = 5,0 Hz, 1 H, CH20), 4,18 (dd, J = 4,5, 9,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,72 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CHzNH), 3,65 (dd, J = 4,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,41 (dd, J = 9,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH); Elektrorozprašovacie hmotnostné spektrum (electrospray mass spectrum) vypoč. (M+H+) 545, nájdené 545.
Syntéza látky 51, ako je znázornené na obrázku 7. K roztoku aminoetanolu (43) (1,0 ml, 16,0' mmol) v DMF (30 ml) bola pri izbovej teplote pridaná 1,3-bis-(terciálny butoxykarbonyl)-2-metyl-2-tiopseudomočovina (48) (4,81 gramu, 16,0 mmol), trietylamín (4,63 ml, 32,0 mmol) a dichlorid ortuťový (4,48 gramu, 16,0 mmol). Po 4 hodinách bola la reak ň š š š š š š š š š celite® (short path of celite®). Filtrát bol postupne premytý vodou (2 x 20 ml), soľným roztokom (20 ml) a sušený MgS04. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku bola surová látka čistená strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou za získania 51, bezfarebnej pevnej látky (4,95 gramu, 98 %). Rf = 0,43 (silikagél, 50 % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3329, 3142, 2977, 2934, 2870, 1724, 1644, 1443, 1412, 1360, 1299, 1103, 1052, 1027, 864, 809, 778 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,48 (bs, 1 H, NHCO2), 8,66 (m, 1 H, CH2NH), 4,54 (bs, 1 H, OH), 3,74 (t, J= 4,5 Hz, 2 H, CH2OH), 3,54 (dt, J '5,5, 5,5 Hz, 2 H, CH2NH), 1,47 (s, 9 H, ‘Bu), 1,45 (s, 9 H, ‘Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 162,8, 157,4, 153,1, 83,5, 79,2,
63,1,44,4, 28,2, 28,0; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 304,1872, nájdené 304,1878.
Syntéza látky 52, ako je zobrazené na obrázku 7. K roztoku piperazínu (44) (3,45 ml, 12,0 mmol) v DMF (10 ml) bola pri izbovej teplote pridaná 1,3-bis-(terciálny butoxykarbonyl)-2-metyl-2-tiopseudomočovina (0,87 gramu, 3,00 mmol). Po 14 hodinách reakčná zmes bola zriedená etylacetátom a vodou. Vrstvy boli oddelené a • · • · • ··· organická vrstva bola premytá postupne vodou (2 x 20 ml), soľným roztokom (20 ml) a sušená Na2S04. Rozpúšťadlo bolo odstránené za zníženého tlaku za získania 52, bezfarebnej pevnej látky (0,93 gramu, 95 %). Rf = 0,34 (silikagél, 10 % metanol v dichlórmetáne); IR (KBr) : nmax 3294, 2980, 2931, 2856, 1749, 1664, 1605, 1527, 1448, 1367, 1305, 1230, 1149, 1116, 1019, 893, 842, 730, 682 cm'1. 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 3,48 (t, J = 5,0 Hz, 4 H, (CH2)2N(C=N), 2,83 (t, J = 5,0 Hz, 4 H, CH2)2NH), 1,46 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4) d 154,4, 81,4, 48,2, 46,0, 28,6; FAB-HRMS (M+Na+) vypoč. 341,1226, nájdené 341,1235.
Syntéza látky 53, ako je zobrazené na obrázku 7. K roztoku aminoetanatiolu (45) (114 mg, 1,00 mmol) v DMF (5 ml) bola pridaná Ν,Ν'-bis-tercbutoxykarbonyltiomočovina (49) (276 mg, 1,00 mmol) a trietylamín (2,79 ml, 2,00 mmol) pri izbovej teplote. Po 14 hodinách bola reakčná zmes zriedená 5 ml H20 a extrahovaná etylacetátom (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty boli premyté soľným roztokom a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku bola surová látka purifikovaná strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 25 % dietyléter v hexáne) za získania 53, vzduchocitlivej (airsensitive) bezfarebnej pevnej látky (191 mg, 59,8 %). Rf = 0,16 (oxid kremičitý, 25 % dietyléter v hexáne); IR (KBr) : nmax 3327, 3132, 2978, 2931, 1726, 1643, 1565, 1431, 1363, 1329, 1280, 1227, 1133, 1088, 1058, 855, 809, 760, 606 cm'1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,45 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,61 (bt, J = 5, 9 Hz, 1 H, CH2NH), 3,74 (bdt, J = 6, 0, 6, 5 Hz, 2 H, CH2NH), 2, 8 5 (t, J = 6, 5 Hz, 2 H, CH2SH), 1,47 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 163,4, 156,1, 153,1, 83,2, 79,3, 39,2, 37,0, 28,3, 28,1; FAB-HRMS vypoč. pozorovaný len S-S-dimer!
Syntéza látky 54, ako je zobrazené na obrázku 7. K roztoku etylendiamínu (54) (3,45 ml, 51,6 mmol) v DMF (50 ml) bola pridaná 1,3-bis-(terciálny butoxykarbonyl)-
2-metyl-2-tiopseudomočovina(48) (3,00 gramy, 10,33 mmol), trietylamín (2,88 ml, 20,7 mmol) a chlorid ortuťnatý (2,81 gramu, 10,3 mmol) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách reakčná zmes bola zriedená 20 ml etylacetátu a sfiltrovaná cez krátku dráhu celíte® (short path of celíte®). Filtrát bol postupne premytý H20 (2 x 50 ml), soľným roztokom (50 ml) a sušený MgS04. Strednotlakovou kolónovou ···· ··· ··· • · · · ··· · · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ··· chromatografiou (silikagél, 20 % MeOH v etylacetáte + 2 % objem. Et3N) bola získaná 54, bezfarebná pevná látka (1,60 gramu, 51,2 %). Rf= 0,30 (silikagél, 20 % MeOH v etylacetáte + 2 % objem. EtsN); IR (KBr) nmax 3446, 3389, 3259, 2978, 2819,1728,1706, 1656, 1626,1521,1485,1365,1253, 1171,1093,1049, 888, 802, 738, 699, 562 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,38 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,61 (bt, 1 H, CH2NH(C=N)), 3,45 (bdt, J = 5,5, 5,5 Hz, 2 H, CH2NH), 2,85 (t, J= 5,5 Hz, 2 H, CH2NH2), 1,46 (s, 9 H, *Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3): d 163,4, 156,4,
153,1, 83,1, 79,2, 41,8, 40,9, 28,2; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 303,2032, nájdené 303,2037.
Syntéza látky 55, ako je zobrazené na obrázku 7. K roztoku fenylendiamínu (1,08 gramu, 0,01 mol) v 5,5 N HCI (10 ml) bol pridaný b-alanín (47) (1,125 g, 0,015 mol) pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola zahrievaná pod spätným chladičom 24 hodín a potom bola ochladená na izbovú teplotu. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu za získania zrazeniny, ktorá bola sfiltrovaná a premytá éterom (1,70 gramu, 73 %). Rf = 0,12 (20 metanol v dichlórmetáne); 1H NMR (500 MHz, D20): d 7,73 7,72 (m, 2 H, Ar), 7,55 - 7,53 (m, 2 H, Ar), 3,61 - 3,55 (m, 4 H, CH2CH2); 13C NMR (125 MHz, D20): d FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 162,1031, nájdené 162,1029.
Syntéza látky 56, ako je zobrazené na obrázku 7. K roztoku etylendiamínu (46) (1,0 ml, 0,015 mol) v DMF (10 ml) bol pridaný 2-(3,5-dimetylpyrazolyl)-4,5dehydroimidazol hydrobromid (50) (3,67 gramu, 0,015 mol) a N,Ndiizopropyletylamín (2,61 ml, 0,015 mol) pri izbovej teplote. Po 11 hodinách miešania bol do reakčnej zmesi pridaný éter (12 ml) a vytvorila sa biela zrazenina. Zrazenina bola sfiltrovaná a premytá éterom za získania 56 (1,59 gramu, 51 %). IR (KBr): nmax 3164, 1681, 1599,1484, 1287, 1211, 1137, 1069, 952 cm'1; 1H NMR (500MHz, D20) : d 3,54 (bs, 4 H, NHCH2CH2NH), 3,17 (t, J = 6,0 Hz, CH2NH), 2,65 (t, J= 6,0 Hz, CH2NH2); 13C NMR (125 MHz, D20): d 160,9, 45,3, 43,6, 40,3; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 129,1140, nájdené 129,1134.
···· · · · ··· • · · · ··· · · • ···· ··· ········ ·· ·· ·· ···
Syntéza látky 58, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 3-nitro-4fluórobenzoovej kyseliny (30) (1,59 gramu, 8,57 mmol; Aldrich) v benzéne (40 ml) bol pridaný DMF (0,03 ml, 0,40 mmol) a oxalylchlorid (3,73 ml, 20,2 mmol) pri 0 °C. Po 6 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua. Výsledná žltá viskózna olejovitá látka (1,73 gramu, 8,57 mmol) bola rozpustená v CH2CI2 (20 ml). Roztok bol ochladený na 0 °C a bol pridaný trietylamín (1,28 ml, 9,20 mmol). Bol pridaný roztok chráneného 2-aminoalanín terciálneho butylesteru 29a (2,32 gramu, 7,70 mmol) v CH2CI2 (40 ml). Po 4 hodinách bola reakčná zmes zriedená vodou a po oddelení fází bola vodná fáza extrahovaná dichlórmetánom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom NaHC03 a sušené MgSÚ4. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku bola surová látka čistená strednotlakovou kolónovou chromatografiou (silikagél, 45 % etylacetát v hexáne) za získania 58, žltej peny (3,90 gramu, 98 %). Rf = 0,19 (silikagél, 40 % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3286, 2980, 2936, 1730, 1653, 1619, 1537, 1493, 1448, 1349,1314,1159,1131, 1092 cm'1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): 8,56 (dd, 4J (1H-1H) = 2,5 Hz, 4J (1H-19F) = 7,5 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 8,12 (ddd, 4J (1H-1H) = 2,5 Hz, 4J (1H19F) = 4,0 Hz, 3J (1H-1H) = 9,0 Hz, 1 H, 6-Ar-H), 7,84 (d, J = 7, 5 Hz, 2 H, o-fenyl), 7, 58 (d, J = 7, 5 Hz, 1 H, p-fenyl), 7, 50 (t, J = 7, 5 Hz, 2 H, mAr), 7,34 (dd, 3J (1H-1H) = 9,0 Hz, 3J (1H-19F) = 10,0 Hz, Ar-H), 7,13 (t, J = 5,5 Hz, 1 H, (C=O)NH), 5,89 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, CHNHSO2Ph), 3,97 - 3,92 (m, 2 H, CHH, CHCH2), 3,60 - 3,54 (m, 1 H, CHH), 1,29 (s, 9 H, *Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3): d 168,1, 164,5, 158,1, 156,0,
138,6, 134,2, 134,1, 133,2, 130,9, 129,2, 127,2, 125,6, 118,9, 118,7, 84,2, 55,8,
42,5, 27,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 600,0217, nájdené 600,0195.
Syntéza látky 59, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 59 bola pripravená rovnakým postupom ako látka 58 použitím 2-naftalensulfonyl chloridu namiesto benzensulfonyl chloridu. Výťažok : (985 mg, 96 %), sivastá pevná látka. Rf = 0,24 (silikagél, 50 etylacetát v hexáne); IR (KBr) : n,™ 3395, 3297, 3083, 2981, 2937, 1734, 1671, 1620, 1534, 1494, 1460, 1345, 1264, 1156, 1128, 1079, 977, 918, 833, 750, 661, 617, 549, 479 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 8,46 (dd, 4J (1H-1H) =
2,5 Hz, 4J (1H-19F) = 7,0 Hz, 1 H, 2-Ar-H), 8,38 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, naftyl), 8,02 (ddd, 4J (1H-1H) = 2,5 Hz, 4J (1H-19F) = 4,0 Hz, 3J (1H- 1H) = 8,8 Hz, 1 H, 6-Ar-H), 7,90 (bd, prekrytý, J = 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,88 (bd, prekrytý, J = 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,83 (bd, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,79 (dd, J= 2,0, 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,62 (ddd, J= 1,0, 7,5, ···· ··· ··· • · · · ··· · · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ···
8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,58 (ddd, J = 1,0, 7,5, 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,27 (br. dd, J = 6,0,
8,5 Hz, 1 H, CONH), 7,18 (bdd, 3J (1H-1H) = 9,0 Hz, 3J (1H-19F) = 10,0 Hz, 1 H, 5-ArH), 6,15 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, NHSO2), 4,06 (ddd, J = 4,0, 5,5, 8,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,93 (ddd, J = 4,0, 6,0, 11,0 Hz, 1 H, CHCHH, 3,57 (ddd, J= 5,5 Hz, 8,5 Hz, 1 H, CHCHH), 1,17 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 168,3, 164,3, 158,0,
155,8, 135,5, 134,7, 134,1, 134,0, 131,8, 130,5, 129,5, 129,1, 128,6, 127,7, 125,4, 122,0, 118,6, 118,4, 83,9, 55,9, 42,3, 27,4; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 650,0373, nájdené 650,0358.
Syntéza látky 60, ako je znázornené na obrázku 8. Do skúmavky s guľatým dnom, vybavenej magnetickým miešadlom bol umiestený NaH (60 % suspenzia v minerálnom oleji) (0,16 gramu, 3,96 mmol) a THF (10 ml) pri 0 °C. K miešaniu sa suspenzie bol pridaný roztok 51 (0,55 gramu,1,80 mmol) v THF (5 ml). Miešanie pokračovalo pri tejto teplote ďalších 30 minút a výsledná šedá suspenzia bola pripravená na použitie. Skúmavka s guľatým dnom s magnetickým miešadlom bola naplnená aromatickým fluoridom 58 (0,1 gramu, 0,30 mmol) a DMF (10 ml). Roztok bol ochladený na 0 °C a bolo pridané 5,5 ml najprv pripravenej suspenzie prostredníctvom stiekačky. Po 8 hodinách pri 0 °C bola reakcia zastavená prídavkom vody (10 ml) a zriedená etylacetátom. Vodná fáza bola oddelená a extrahovaná etylacetátom (3 x 25 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne H20 (2 x 10 ml) a soľným roztokom (10 ml) a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (oxid kremičitý, 60 % etylacetát v hexáne) za získania 60, nažltnutej peny (0,15 gramu, 66 %). Rf = 0,18 (silikagél, 50 % etylacetát v hexáne); IR (KBr): nmax 3331,2978, 2951, 1733, 1645, 1619, 1532, 1367, 1319, 1277, 1144, 1051, 1025 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3) : d 11,43 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,76 (bt, J = 5,5 Hz, 1 H,
CH2NH(C=N)), 8,32 (d, J = 2,5 Hz, 1H, Ar), 8,00 (dd, J = 2,5, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,85 7,84 (m, 2 H, Ph), 7,58 (t, J = 8,0 Hz, 1 H, Ph), 7,49 (t, J = 8,0 Hz, 2 H, Ph), 7,20 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 6,95 (t, J = 8,0 Hz, 1 H, NHCO), 5,84 (d, J = 7,5 Hz, 1 H, HNSO2), 4,28 (t, J = 5,5 Hz, 2 H, CH20), 3,96 - 3,87 (m, prekrytý, 4 H, CHCH2,
CH2NH(C=N)), 3,60 - 3,54 (m, 1 H, CHCH2), 1,50 (s, 9 H, ’Bu), 1,48 (s, 9 H, lBu),
1,28 (s, 9 H, ‘Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3): d 168,2,165,0,163,3, 156,5,154,5,
154,1, 150,9, 139,4, 138,8, 133,1, 132,7, 129,2, 127,2, 126,5, 125,0, 114,5, 84,0,
• · • • · • • • • • • ··· • · • · • ·· •
• • • • • · • · •
···· ···· ·· ·· ·· • •e
83,4, 68,1, 55,9, 42,4, 39,4, 28,3, 28,0, 27,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 883,1949, nájdené 883,1970.
Syntéza látky 11, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 60 (30,0 mg, 0,04 mmol) v CH2CI2 (2 ml) bola privkapkaná trifluórooctová kyselina (2 ml). Reakčná zmes bola miešaná pri 25 °C 2 hodiny. Rozpúšťadlá boli odstránené za zníženého tlaku a zvyšok bol purifikovaný RP-HPLC (C-18) za získania 11 ako nažltlej pevnej látky (22,0 mg, 92 %). Rf = 12,2 minút; IR (KBr): nmax 3418,1679,1529,1433,1354, 1319, 1278, 1198, 1161, 1092, 1046, 932, 837, 802, 756, 688 cm·1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,26 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,04 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1H, Ar),
7,82 - 7,80 (m, 2 H, Ph), 7,47 - 7,36 (m, 4 H, Ar), 4,35 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, OCH2), 4,19 (dd, J = 4,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,75 (dd, J = 4,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,68 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, CHZNH(C=N)), 3,47 (dd, J = 11,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 167,7,155,0,142,2,140,7,134,5, 133,6,130,0,
128,2, 125,9, 115,7, 69,8, 43,3, 41,8, 25,2; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 495,1298, nájdené 495,1311.
Syntéza látky 61, ako je zobrazené na obrázku 8 : K roztoku 58 (100 mg, 0,20 mmol) v DMF (10 ml) bola pridaná 53 (68 mg, 0,22 mmol). Po 4 hodinách miešania pri izbovej teplote bola reakčná zmes zriedená vodou (10 ml) a vodná fáza bola extrahovaná etylacetátom (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne vodou (2 x 10 ml) a soľným roztokom (20 ml) a sušené Na2S04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 50 etylacetát v hexáne) za získania 61, nažltnutej peny (110 mg, 73 %). Rf = 0,48 (silikagél, 60 % etylacetát v hexáne); IR (film): nmax 3318, 2925, 1723, 1623, 1517, 1412, 1324, 1158 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3) : d
11,47 (bs, 1 H, (C=N)NH)C=O)), 8,59 (d, J = 2,5 Hz, 1 H, Ar), 8,56 (t, J = 10,0 Hz, 1 H, NH), 8,43 (t, J = 10,0 Hz, 1 H, NH), 7,93 (dd, J= 2,5 Hz, 10,0 Hz, 1 H, Ar), 7,84 (d, J= 9,0 Hz, 2 H, Ph), 7,53 (t, J= 10,0 Hz, 1 H, Ph), 7,46 (t, J = 10,0 Hz, 2 H, Ph), 7,21 (d, J = 10,0 Hz, 1 H, Ar), 6,81 (t, J = 10,0 Hz, 1 H, CONH), 5,87 (d, J = 10,0 Hz, 1 H, NHSO2), 3,98 - 3,93 (m, 1 H, CHCH2), 3,87 - 3,82 (m, 1 H, CHCHH), 3,72 - 3,55 (m, 5 H, CHCHH, NHCH2i CH2NH(C=N)), 1,52 (s, 9 H, lBu), 1,47 (s, 9 H, *Bu), 1,27 (s, 9
·· ·· ·· ·· ··
• · • • • • • • · ··
• • • • ··· e ·
• • • • • · • ·
···· ··· • ·· ·· ·· ··
H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 168,4, 165,7, 163,3, 156,6, 153,2, 146,9, 139,1, 134,7, 133,0, 131,4, 129,1, 127,2, 126,2, 121,0, 114,4, 83,7, 83,5, 79,5, 56,2,
42,4, 42,2, 39,0, 28,3, 28,0, 27,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 882,2109, nájdené 882,2129.
Syntéza látky 14, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 14 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 61 namiesto 60. Výťažok : (33,2 mg, 92 %) ako žltá pevná látka. Rf = 15,9 minút; IR (KBr): nmax 3364, 3245, 2998, 2584,1669, 1624, 1555, 1520, 1433, 1313, 1198, 1161, 923, 756, 722 cm·1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,61 (d, J - 2,5 Hz, 1 H, Ar), 7,92 (dd, J = 2,5, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,81 (d, J = 7,0 Hz, 2 H, Ph), 7,47 - 7,40 (m, 3 H, Ph), 7,11 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,19 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,72 (dd, J = 5,0,13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,67 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, NHCH2), 3,52 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, NHCH2), 3,46 (dd, J = 9,0, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4) : d 168,3, 159,0, 148,0, 142,1,
135,8, 133,6, 132,9, 130,0, 127,8, 125,0, 122,3, 114,8, 43,2, 42,5, 41,1, 31,1; FAB HRMS (M+H+) vypoč. 494,145 8, nájdené 494,1444.
Syntéza látky 62, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 54 (1,60 mg, 5,0 mmol) v THF (50 ml) bol pridaný NaH (60 % suspenzia v minerálnom oleji) (200 mg, 5,00 mmol) pri 0 °C. Po 15 minútach bol výsledný roztok tiolátu pripravený na použitie. K roztoku 58 (100 mg, 0,20 mmol) v DMF (10 ml) bol striekačkou pridaný roztok tiolátu (5,0 ml, 0,5 mmol). Po 12 hodinách pri izbovej teplote bola reakcia ukončená prídavkom vody (10 ml) a zmes bola zriedená etylacetátom. Po oddelení fáz bola vodná fáza extrahovaná etylacetátom (3 x 25 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne vodou (2 x 10 ml) a soľným roztokom (10 m1) a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou stĺpcovou chromatografiou (silikagél, 40 etylacetát v hexáne) za získania 62, nažltnutej peny (35 mg, 23 %). Rf = 0,32 (silikagél, 40 % etylacetát v hexáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,45 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,65 (bt, prekrytý, J = 4,5 Hz, 1 H, CH2NH(C=N)), 8,63 (d, prekrytý, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 8,15 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 2 H, Ar), 7,84 (d, J= 8,0 Hz, 2 H, Ph), 7,56 (t, J= 7,5 Hz, 1H, Ph), 7,48 (bdd, J= 7,0, 8,0 Hz, 2 H, Ph), 6,98 (t, J = 5,5 Hz, 1 H, CONH), 5,72 (d, J = 7,0 Hz, 1 H, NHSO2), 3,99 - 3,93 (bm, 1 H, CHCH2),
• · • · • • • • • • • ·
• • • • • • •
• • • · • · • • •
···· ···· ·· ·· • e ···
3,88 (ddd, J= 4,5, 5,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,70 - 3,58 (m, 3 H, CHCHH, CH2NH(C=N)), 3,26 (t, J = 8,0 Hz, 2 H, SCH2), 1,57 (s, 9 H, lBu), 1,50 (s, 9 H, *Bu), 1,30 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3); d 168,2,165,1,163,4, 156,3,153,1,
145,3, 141,0, 138,9, 133,1, 132,3, 130,3, 129,2, 127,7, 127,2, 124,7, 84,0, 83,5,
79.6, 55,9, 42,4, 39,2, 30,1, 28,4, 28,0, 27,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 899,1720, nájdené 899,1753.
Syntéza látky 15, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 15 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 62 namiesto 60. Výťažok : (23,0 mg, 92 %), žltá pevná látka. Rf = 16,0 minút; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,58 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,06 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,82 (d, J = 7,0 Hz, 2 H, Ph), 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ph), 7,48 - 7,41 (m, 3 H, Ar), 4,23 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,80 - 3,76 (m, 1 H, CHCHH), 3,56 (t, J = 6,5 Hz, 2 H, CH2NH(C=N)), 3,50 - 3,43 (m, 1 H, CHCHH), 3,34 (t, J= 6,5 Hz, 2 H, SCH2); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4) : d
167.6, 155,2, 142,1, 140,7, 133,5, 133,3, 132,5, 128,3, 128,0, 126,0, 43,4, 40,7, 32,3; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 511,1070, nájdené 511,1058.
Syntéza látky 65, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 58 (100 mg, 0,20 mmol) v DMF (10 ml) bola pridaná 52 (68 mg, 0,22 mmol). Po 6 hodinách bola reakčná zmes zriedená vodou (25 ml) a etylacetátom. Po oddelení fáz bola vodná fáza extrahovaná etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne vodou (2 x 20 ml) a soľným roztokom (20 ml) a sušené Na2S04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (silikagél, 40 A 50 etylacetát v hexáne) za získania 65, nažltnutej peny (120 mg, 83 %). Rf = 0,30 (silikagél, 40 % etylacetát v hexáne); IR (film): nmax 3266, 2977, 1743, 1621, 1520, 1451, 1367, 1304, 1158, 1130, 1094, 1014 cm·1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 10,22 (bs, 1 H, (C=N)HN(C=O)), 8,29 (d, J = 2,5 Hz, 1 H, Ar), 7,92 (dd, J = 2,5, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,85 - 7,84 (m, 2 H, Ph), 7,83 - 7,82 (m, 1 H), 7,56 (t, J = 7,0 Hz, 1 H, Ph), 7,48 (t, J = 7,0 Hz, 2 H, AR-H), 7,08 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, AR-H), 6,93 (t, J = 6,0 Hz, 1 H, CO(NH)), 5,85 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, NHSO2), 3,96 -
3,87 (m, 2 H, CHCH2, CHCHH), 3,80 - 3,70 (bm, 4 H, NH(CH2)2), 3,59 - 3,54 (m, 1 H, CHCHH), 3,23 - 3,21 (m, 4 H, N(CH2)2), 1,48 (s, 18 H, *Bu), 1,26 (s, 9 H, lBu); 13C • · • · • ··· • · • · ······ ···· ···· ·· ·· ·· ·
NMR (500 MHz, CDCI3): d 168,3, 165,3, 155,2, 147,5, 140,9, 138,8, 133,1, 132,0, 129,2, 127,2, 126,3, 126,0, 119,9, 84,0, 56,0, 50,3, 42,2, 28,1, 27,6; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 908,2265, nájdené 908,2233.
Syntéza látky 16, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 16 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 66 namiesto 65. Výťažok : (15,0 mg, 93 %), nažltnutá pevná látka. Rf = 15,3 minúty; IR (KBr) : nmax 3367, 3239, 2925, 2857, 1662, 1613, 1523, 1449, 1388, 1320, 1199, 1173, 1135, 1093, 992, 837, 802, 721 cm'1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,22 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,95 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,79 (m, 2 H, Ph), 7,47 - 7,38 (m, 3 H, Ph), 7,32 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 4,21 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,74 (dd, J = 5,0, 10,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,67 - 3,65 (m, 4 H, N(CH2)2), 3,49 - 3,44 (m, 1 H, CHCHH), 3,31 - 3,29 (m, 4 H, N(CH2)2); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 172,6, 167,9, 158,4, 148,3,
142,8, 142,2, 129,9, 56,6, 50,9, 46,3, 43,3; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 520,1614 nájdené 520,1630.
Syntéza látky 63, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 51 (130 mg, 0,43 mmol) v THF (5,0 ml) bol pridaný NaH (60 % suspenzia v minerálnom oleji) (70 mg, 1,74 mmol) pri 0 °C. Miešanie pokračovalo pri tejto teplote ďalších 15 minút a výsledná sivá suspenzia bola pripravená na použitie. K roztoku 59 (200 mg, 0,39 mmol) v DMF (20 ml) bol pridaný alkoxid (2,5 ml). Po 1 hodine miešania pri 0 °C bolo pridané zvyšných 2,5 ml alkoxidu. Po 3 hodinách pri 0 °C bola reakcia zastavená prídavkom 10 ml nasýteného vodného roztoku NH4CI a zriedená etylacetátom. Po oddelení fáz bola vodná fáza extrahovaná etylacetátom (3 x 25 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne H20 (2 x 10 ml) a soľným roztokom (10 ml) a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (silikagél, 50 etylacetát v hexáne) za získania 63, žltej pevnej látky (211 mg, 69 %). Rf = 0,16 (silikagél, 50 % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3330, 2979, 2934, 1728, 1620, 1570, 1531, 1416, 1329, 1281, 1156, 1079, 1023, 970, 916, 816, 753, 660, 618, 552, 477 cm'1; 1H NMR (500 MHz, CDCh): d 11.45 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,78 (bt, 1 H, CH2NH(C=N)), 8,37 (s, 1 H, Ar), 8,26 (d, J= 2,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,92 - 7,87 (2 x d, J = 8,0 Hz, 2 H, naftyl), 7,90 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,79 (dd, J = 2,0, 8,5 • · • · • ··· • · • · ······ ···· ···· ·· ·· ·· ·
Hz, 1 H, naftyl), 7,64 - 7,55 (2 x br. dd, 2 H, naftyl), 7,07 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 6,90 (dd, J = 5,5, 5,5 Hz, 1 H, CHaNH(C=O)), 5,95 (d, J = 7,5 Hz, 1 H, NHSO2), 4,22 (t, J = 5,3 Hz, 2 H, OCH2), 4,02 (ddd, J = 4,0, 7,5, 8,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,93 - 3,83 (m, prekrytý, 3 H, CHCHH, CH2NNH(C=N)), 3,55 (ddd, J = 5,5, 8,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH, 1,50 (s, 9 H, *Bu), 1,47 (s, 9 H, lBu), 1,17 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 168,3, 164,9, 156,4, 154,0, 152,9, 139,3, 135,6, 134,9, 132,6, 132,0,
129,6, 129,2, 129,1, 128,7, 127,8, 127,7, 127,6, 126,3, 125,0, 122,1, 114,4, 84,0,
83,5, 68,0, 56,1, 42,3, 39,5, 28,3, 28,0, 27,5; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 933,2105, nájdené 933,2116.
Syntéza látky 17, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 17 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 63 namiesto 60. Výťažok : (32,7 mg, 99 %), špinavo biela až našednutá pevná látka. Rf = 14,5 minút. IR (KBr): nmax 3421,2999, 2898, 1657, 1635, 1528, 1383, 1351, 1322, 1276, 1198, 1157, 1132, 1080, 1046, 979, 823, 754, 660, 550 cm·1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4) : d 8,15 (s, 1 H, naftyl), 7,93 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,72 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,69 - 7,58 (m, 4 H, naftyl, Ar), 7,42 - 7,35 (2 x ddd, prekrytý, 2 H, naftyl), 6,92 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,21 (dd, J = 4,5, 9,8 Hz, 1 H, CHCH2), 4,13 (t, J = 5,0 Hz, 2 H, OCH2), 3,61 (dd, J =
4,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,57 (t, J = 4,5 Hz, 2 H, CH2NH(C=N)), 3,28 (dd, J = 9,8 Hz, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 172,8, 167,1, 159,3,
154,9, 140,1, 139,5, 135,9, 134,1, 133,4, 130,3, 130,2, 129,5, 128,8, 128,7, 128,4,
127,3, 125,7, 123,5, 115,3, 69,7, 56,8, 43,1, 41,8; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 545,1455, nájdené 545,1471.
Syntéza látky 64, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 59 (50 mg, 0,10 mmol) v 1-metyl-2-pyrolidinónu (1 ml) bola pridaná 53 (58 mg, 0,19 mmol) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách bola reakčná zmes zriedená vodou (10 ml) a vodná fáza bola extrahovaná etylacetátom (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne vodou (2x5 ml) a soľným roztokom (5 ml) a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (silikagél, 50 etylacetát v hexáne) za získania 64, žltej pevnej látky (76 mg, 99 %). Rf = 0,22 (silikagél, 50 % etylacetát v hexáne); IR (KBr): nmax 3300, • · • · • · · • · ···
3065, 2975, 2931, 1734, 1660, 1620, 1535, 1497, 1347, 1261, 1159, 1129, 1079, 972, 917, 817, 751, 661, 551, 477 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,49 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,58 (bt, 1 H, CH2NH(C=N)), 8,47 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 8,41 (dd, J = 5,5 Hz, 1 H, NHCH2), 8,37 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,90 - 7,84 (m, prekrytý, 3 H, naftyl), 7,86 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,79 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,59 (ddd, J = 1,5 Hz, 7,0, 7,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,54 (ddd, J = 1,5 Hz, 7,0, 7,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,12 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 6,69 (t, J= 5,5 Hz, 1 H, CH2NH(C=O)), 5,89 (d, J= 8,0 Hz, 1 H, NHSO2), 4,03 (ddd, J = 4,0, 8,0, 8,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,85 (ddd, J = 4,0, 6,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,70 (bdt, J = 5,5, 5,5 Hz, 2 H, NHCH2), 3,61 - 3,50 (m, 3 H, CHCHH, CH2NH(C=N)), 1,52 (s, 9 H, ‘Bu), 1,47 (s, 9 H, ‘Bu), 1,18 (s, 9 H, ‘Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3): d 168,5,165,6,156,6,153,2,
146,9, 136,0, 134,8, 134,6, 132,0, 131,3, 129,6, 129,2, 128,9, 128,6, 127,8, 127,6, 126,0, 122,2, 120,8, 114,3, 83,8, 83,6, 56,4, 42,4, 42,2, 39,1, 28,3, 28,0, 27,6; FABHRMS (M+Cs+) vypoč. 932,2265, nájdené 932,2285.
Syntéza látky 18, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 18 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 64 namiesto 60. Výťažok : (81,7 mg, 90 %), oranžovožltá pevná látka. Rf = 12,4 minúty; IR (KBr): nmax 3364, 1676, 1624, 1556, 1520, 1426, 1315, 1241, 1200, 1158, 1133, 1076, 1025, 999, 824, 757, 719, 660, 549, 479 cm’1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,17 (bs, 1 H, naftyl), 8,14 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,72 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,68 - 7,65 (m, 2 H, naftyl), 7,57 (bd, prekrytý, J = 9,5 Hz, 1 H, naftyl), 7,55 (dd, prekrytý, J= 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,41 (ddd, J= 1,5, 7,0, 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,36 (ddd, J = 1,5, 7,0, 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 6,74 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,25 (dd, J = 4,5, 10,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,62 (dd, J = 4,5, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,52 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, NHCH2), 3,41 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, NHCH2), 3,30 (dd, J = 10,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 173,0,167,8,147,8,139,5,135,9,135,3,133,4,130,3, 130,2,129,3,
128,7, 128,6, 128,3, 127,2, 123,5, 121,5, 114,5, 57,0, 42,9, 42,5, 41,5; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 566,1434, nájdené 566,1453.
Syntéza látky 66, ako je zobrazené na obrázku 8. K roztoku 59 (150 mg, 0,29 mmol) v DM F (5 ml) bola pridaná 52 (190 mg, 0,58 mmol) pri izbovej teplote. Po 20
• · • · • · • • • • • ·
• • • · ··· • • •
• • • · • · • • •
···· • · · · • · ·· ·· ···
hodinách bola reakčná zmes zriedená vodou (25 ml) a etylacetátom. Po oddelení fáz bola vodná fáza extrahovaná etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty boli premyté postupne vodou (2 x 20 ml) a soľným roztokom (20 ml) a sušené MgS04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (silikagél, 40 % etylacetát v hexáne) za získania 66, žltej pevnej látky (240 mg, 99 %). Rf = 0,33 (silikagél, 50 % etylacetát v hexáne); IR (KBr) : nmax 3397, 2979, 2933, 1741, 1610, 1524, 1454, 1367, 1303, 1239, 1157, 1015, 975, 834, 752, 661, 615, 552, 477 cm’1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 11,49 (bs, 1 H, (C=N)NH(C=O)), 8,38 (bs, 1 H, naftyl), 8,24 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,90 (bd, J =
7.5 Hz, 1 H, naftyl), 7,87 (brd, J = 9,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,83 (dd, prekrytý, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,82 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,79 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1 H, naftyl),
7,64 - 7,55 (2 x bddd, prekrytý, 2 H, naftyl), 7,13 (bm, 1 H, NH(C=O)), 6,98 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,01 (ddd, J = 3,5, 8,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,88 (ddd, J = 4,0, 6,0,
13.5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,73 (bm, 4 H, NCH2), 1,48 (s, 18 H, *Bu), 1,15 (s, 9 H, ‘Bu); 13C NMR (125 MHz, CDCI3) : d 168,6, 165,1, 155,2, 147,3, 140,9, 135,6, 134,9, 132,0, 129,6, 129,2, 129,0, 128,7, 127,8, 127,7, 126,2, 126,0, 122,1, 119,8, 119,7,
83,9, 56,1, 50,3, 42,2, 28,2, 28,0, 27,3; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 958,2422, nájdené 958,2458.
Syntéza látky 19, ako je zobrazené na obrázku 8. Látka 19 bola pripravená rovnakým postupom ako 11, s použitím 66 namiesto 60. Výťažok : (31,9 mg, 93 %), nažltnutá pevná látka. Rf = 11,1 minúty; IR (KBr) : nmax 3401, 3297, 3251, 2996, 2928, 1659, 1613, 1523, 1451, 1385, 1323, 1199, 1157, 1138, 1078, 992, 808, 753, 720, 660, 549 cm·1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,19 (bs, 1 H, naftyl), 7,93 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,76 (bd, J= 9,0 Hz, 1 H, naftyl), 7,71 - 7,61 (m, prekrytý, 3 H, naftyl, Ar), 7,55 (dd, J= 2,0 Hz, 8,8 Hz 1 H, naftyl), 7,44 - 7,36 (2 x ddd, prekrytý, 2 H, naftyl), 6,91 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 4,21 (dd, J = 4,5, 9,5 Hz, 1 H, CHCH2), 3,61 (dd, J = 4,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,55 (m, 4 H, NCH2), 3,29 (dd, J= 9,5, 13,5 Hz, 1 H, CHCHH), 3,15 - 3,09 (m, 4 H, NCH2); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4) : d 167,6,
158,5, 148,2, 142,1, 139,4, 136,0, 133,5, 133,3, 130,4, 130,3, 129,7, 128,9, 128,5,
127,3, 126,7, 123,6, 121,2, 50,6, 49,6, 48,6, 46,4; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 702,0747, nájdené 702,0784.
• · • · • • • • • • ··
• • • • • é· • · •
• • • • • · • • •
···· ···· ·· ·· ·· • ·«
Syntéza látky 67, ako je zobrazené na obrázku 9. K roztoku 57 (0,10 gramu, 0,20 mmol) v DMF (8 ml) bola pridaná 55 (0,038 gramu, 0,22 mmol) a trietylamín (0,06 m1, 0,44 mmol) pri izbovej teplote. Po 16 hodinách miešania pri 25 °C bola reakčná zmes zriedená EtOAc (10 ml) a vodou (10 ml). Vrstvy boli oddelené a vodná fáza bola extrahovaná etylacetátom (3 x 10 ml). Organické extrakty boli spojené a premyté vodou (2 x 10 ml) a soľným roztokom (20 ml) a sušené Na2S04. Po filtrácii a odparení za zníženého tlaku bol zvyšok čistený strednotlakovou kolónovou chromatografiou (oxid kremičitý, etylacetát) za získania 67, nažltnutej pevnej látky (110 mg, 92 %). Rf= 0,43 (oxid kremičitý, etylacetát); 1H NMR (500 MHz, metanol-d4) : d 8,57 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,96 (bm, 1 H, Ar), 7,83 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,80 - 7,78 (m, 2 H, Ar), 7,48 - 7,39 (m, 4 H, Ar), 7,18 (dd, J = 4,0, 6,0 Hz, 2 H), 7,06 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,12 (dd, J = 6,0, 8,0 Hz, 1 H, CH2CH), 3,89 (t, J = 7,0 Hz, 2 H, CH2Ar), 3,65 (dd, J = 6,0,14,0 Hz, 1 H, CHHCH), 3,46 (dd, J = 8,0,14,0 Hz, 1 H, CHHCH, 3,26 (t, J = 7,0 Hz, 2 H, CH2NH), 1,22 (s, 9 H, *Bu); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 170,4, 168,1, 164,8, 153,6, 147,9, 142,2, 135,6, 133,6, 132,6,
132,4, 130,1, 128,1, 127,7, 123,5, 121,8, 114,9, 83,3, 57,3, 43,2, 42,3, 27,9; elektrorozprašovacie hmotnostné spektrum (electrospray mass spectrum) (M+H+) vypoč. 609, nájdené 609.
Syntéza látky 20, ako je zobrazené na obrázku 9. K roztoku 57 (0,068 gramu, 0,11 mmol) VCH2CI2 (2 ml) bola pridaná trifluóroctová kyselina (2 ml) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania olejovitej látky, z ktorej sa RP-HPLC (C-18) získala 20, žltá pevná látka (0,056, 97 %). 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,65 (d, J = 1,0 Hz, 1 H, Ar), 7,93 (dd, J = 1,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 2 H, Ph), 7,74 (dd, J = 3,0, 6,0 Hz, 2 H, Ar), 7,58 (dd, J = 3,0, 6,0 Hz, Ar), 7,48 (t, J = 7,0 Hz, 1 H, Ph), 7,43 (t, J = 8,0 Hz, 2 H, Ph), 7,16 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,20 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCHH), 4,04 (t, J = 6,5 Hz, 2 H, CH2Ar), 3,74 (dd, J = 5,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,54 (t, J = 6,5 Hz, 2 H, CH2NH), 3,45(dd, J = 9,0,14,0 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 172,6, 168,1, 152,6, 147,3, 142,0, 135,7, 133,5, 133,1, 132,4, 132,3, 130,0, 127,9,
127,8, 127,4, 122,5, 114,8, 114,6, 56,8, 43,2, 41,2, 27,2; FAB-HRMS (M+Cs+) vypoč. 685,0482, nájdené 685,0461.
···· ··· ··· • · · · ··· · · • · ·»····» ···· ···· ·· ·· ·· ···
Syntéza látky 68, ako je zobrazené na obrázku 9. K roztoku 57 (0,06 gramu, 0,13 mmol) v DMF (10 ml) bola pridaná 56 (0,03 gramu, 0,14 mmol) a trietylamín (0,04 ml, 0,29 mmol) pri izbovej teplote. Po 12 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania 68, surovej žltej olejovitej látky (0,09 gramu, 110 %). Rf = 0,23 (40 % metanol v dichlórmetáne); 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,63 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,93 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,82 (d, J = 6,5 Hz, 2 H, Ph), 7,48 - 7,42 (m, 3 H, Ph), 7,09 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,08 - 4,06 (m, 1 H, CHCHH), 3,68 - 3,62 (m, prekrytý, 5 H, NHCH2CH2NH, CHCHH), 3,50 - 3,44 (m, 1 H, CHCHH), 3,30 (t, J = 3,5 Hz, 2 H, CH2NHAr), 1,24 (s, 9 H, ‘Bu); elektrorozprašovacie hmotnostné spektrum (electrospray mass spectrum) vypoč. (M+H+) 573, nájdené 573.
Syntéza látky 21, ako je zobrazené na obrázku 9. K roztoku 68 (0,09 gramu, 0,14 mmol) v CH2CI2 (5 ml) bola pridaná trifluóroctová kyselina (5 ml) pri izbovej teplote. Po 4 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania olejovitej látky, z ktorej bola RP-HPLC (C-18) získaná 21, žltá pevná látka (0,07 gramu, 83 %). Rf = 14,0 minút; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,64 (bs, 1 H, Ar), 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,82 (d, J = 7,0 Hz, 2 H, Ph), 7,48 (t, J = 7,0 Hz, 1 H, Ph), 7,43 (t, J = 7,0 Hz, 1 H, Ph), 7,12 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,20 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CHCH2), 3,73 (dd, J = 5,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH), 3,70 - 3,66 (m, prekrytý, 7 H, NCH2CH2N, CH2N(C=N)), 3,52 (t, J = 6,0 Hz, 2 H, CH2NHAr), 3,45 (dd, J = 9,0, 14,0 Hz, 1 H, CHCHH); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4): d 172,7, 168,3, 161,6, 148,0,
142,1, 135,8, 133,5, 132,9, 130,0, 128,0,127,7, 122,3, 114,9, 56,7, 44,1,43,2, 42,9, 42,7; FAB-HRMS (M+H+) vypoč. 520,1614, nájdené 520,1630.
Syntéza látky 69, ako je zobrazené na obrázku 10. Roztokom fluoridu 57 (0,10 gramu, 0,20 mmol) v suchom DMF (10 ml) prebublával pri izbovej teplote 1 hodinu ΝΗ3(9). Po 4 hodinách miešania bola reakčná zmes zriedená etylacetátom a vodou. Vrstvy boli oddelené a organická vrstva bola premytá vodou (2 x 10 ml), soľným roztokom (20 ml) a sušená (Na2S04). Rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za získania 61, nažltnutej olejovitej látky (0,09 gramu, 93 %). Rf = 0,25 (oxid kremičitý, ···· · · · ··· • · · · ··· · · • · ······· ···· ···· ·· ·· ·· ··· % etylacetát v hexáne); IR (tenký film): nmax 3359,1729,1631,1516,1308,1258, 1158, 1093 cm'1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 8,54 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar),
7,83 - 7,81 (m, 2 H, Ar), 7,74 (dd, J = 2,0, 9,0 Hz, 1 H, Ar), 7,52 - 7,43 (m, 3 H, Ar), 6,97 (d, J = 9,0 Hz, 1 H, Ar), 4,12 (dd, J = 6,0, 8,0 Hz, 1 H, CH), 3,64 (dd, J = 6,0,
13,5 Hz,1 H, CHH), 3,47 (dd, J = 8,0,13,5 Hz, 1 H, CHA, 1,25 (s, 9 H, *Bu); 13C NMR (125 MHz, metanol-d4) d 170,5, 168,3, 149,4, 142,2, 134,8, 133,6, 131,7, 130,1,
128,1, 127,1, 122,2, 119,9, 83,4, 57,3, 43,2, 27,9; FAB-HRMS vypoč. (M+Cs+) 597,0420, nájdené 597,0439.
Syntéza látky 70, ako je zobrazené na obrázku 10. K roztoku amínu 69 (0,23 gramu, 0,50 mmol) v metanole (15 ml) bol pri izbovej teplote pridaný 10 % Pd/C (0,10 g) pod argónom. Skúmavka potom bola vybavená balónom s H2(g). Po 8 hodinách bola reakčná zmes sfiltrovaná cez podložku celite (pad of celíte) a rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za získania 70, nahnednutej až načervenalej olejovitej látky (0,19 gramu, 90 %). Rf = 0,11 (oxid kremičitý, 80 % etylacetát v hexáne); IR (tenký film) : nmax 3360, 2979, 1729, 1625, 1582, 1542, 1508, 1447, 1369, 1310, 1248, 1160, 1093, 758, 721, 688, 590 cm’1; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): 7,82 - 7,80 (m, 2 H, Ar), 7,53 - 7,49 (m, 1 H, Ar), 7,46 - 7,43 (m, 2 H, Ar), 7,11 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 7,05 (d, J = 2,0 Hz, 1 H, Ar), 6,64 (d, J = 8,5 Hz, 1 H, Ar), 4,08 (dd, J = 7,5, 14,5 Hz, 1 H, CH), 3,61 (dd, J = 6,0, 13,5 Hz,1 H, CHH),
3,47 (dd, J= 8,0,13,5 Hz, 1 H, CHH, 1,22 (s, 9 H, lBu); 13C NMR (125 MHz, metanold4) : d 170,8, 170,6, 142,1, 141,2, 134,8, 133,7, 130,1, 128,1, 124,5, 120,6, 116,5,
115,5, 83,3, 57,5, 43,1, 28,0; FAB-HRMS vypoč. (M+Na+) 43 5,1702, nájdené 434,1727.
Syntéza látky 71, ako je zobrazené na obrázku 10. K roztoku diamínu 70 (0,092 gramu, 0,20 mmol) v etanole (20 ml) bol pridaný trietylamín (0,032 ml, 0,22 mmol) a fenylizotiokyanát (0,028 ml, 0,22 mmol). Po 14 hodinách bolo rozpúšťadlo odstránené za vákua za získania hnedého zvyšku, z ktorého bola čistením preparatívnou tenkovrstvou chromatografiou (oxid kremičitý, 5 % metanol v dichlórmetáne) získaná 71, hnedá pevná látka (0,082 gramu, 69 %). Rf = 0,16 (oxid kremičitý, 5 % metanol v dichlórmetáne); IR (tenký film) : nmax 3316, 3061, 2978,
1729,1624,1504,1448,1368,1309,1252,1159,1092, 837, 733 cm'1; 1H NMR (500 MHz, CDCI3): 8,15 (bs, 1 H, NH), 7,81 (d, J = 7,5 Hz, 2 H, Ar), 7,56 - 7,03 (m, 14 H), 6,78 (bs, 1 H, NHC=O), 6,58 (d, J = 8,0 Hz, 1 H, HNSO2PH), 4,51 (bs, 1 H), 4,05 (bs, 1 H), 3,67 (bs, 1 H), 1,20 (s, 9 H, *Bu); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): d 180,3, 168,6,
167,4, 147,0, 143,3, 139,6, 137,6, 132,7, 129,0, 128,4, 127,1, 126,6, 125,4, 123,5,
116,1, 83,2, 60,3, 56,5, 42,0, 27,5; FAB-HRMS vypoč. (M+Cs+) 702,0821, nájdené 702,0797.
Syntéza látky 72, ako je zobrazené na obrázku 10. K roztoku tiomočoviny 71 (0,077 gramu, 0,14 mmol) v DMF (10 ml) bol pri izbovej teplote pridaný trietylamín (0,02 ml, 0,14 mmol) a chlorid ortuťnatý (0,04 gramu, 0,14 mmol). Po 4 hodinách bola reakčná zmes sfiltrovaná cez celit (celíte) a opláchnutá etylacetátom. Rozpúšťadlo bolo odstránené za vákua za získania 72, hnedého zvyšku (0,05 gramu, 81 %), ktorý bol použitý v ďalšom kroku. Rf = 0,32 (oxid kremičitý, 5 % metanol v dichlórmetáne); 1H NMR (500 MHz, CDCI3): 7,98 (m, 2 H, Ar), 7,53 - 6,90 (m, 15 H, Ar), 4,16 (m, 1 H, CH), 3,83 (bs, 1 H, CHH), 3,62 (bs, 1 H, CHH, 1,25 (bs, 9 H, *Bu); FAB-HRMS vypoč. (M+Cs+) 668,0944, nájdené 668,0923.
Syntéza látky 22, ako je zobrazené na obrázku 10. Látka 22 bola pripravená rovnakým postupom ako 10, s použitím 72 namiesto 36b. Výťažok: (0,04 gramu, 88 %). Rf = 14,8 minút; 1H NMR (500 MHz, metanol-d4): d 7,85 - 7,82 (m, 3 H, Ar), 7,75 (dd, J = 1,5, 8,5 Hz, 1 H, Ar), 7,56 - 7,41 (m, 9 H, Ar), 4,22 (dd, J = 5,0, 9,0 Hz, 1 H, CH), 3,78 (dd, J = 5,0, 13,5 Hz, CHH), 3,48 (dd, J = 9,0, 13,5 Hz, CHH; 13C NMR (150 MHz, metanol-d4) : d 171,9, 169,2, 150,7, 141,6, 136,2, 133,1, 131,2, 130,9,
130,6, 129,5, 128,3, 127,5, 124,6, 124,1, 111,9, 111,8, 56,1, 42,8; FAB-HRMS vypoč. (M+H+) 480,1342, nájdené 480,13 52.

Claims (18)

1. RGD mimetická látka, znázornená zlúčeninou všeobecného vzorca:
PATENTOVÉ NÁROKY kde R1 ie radikál vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá z nasledujúcich zlúčenín:
a X je diradikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá zo síry, -NH- a kyslíka; R2 3 4 je radikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá z -C02t-butylu, -CO-arylu a -SO2-arylu.
2. RGD mimetická látka podľa nároku 1, kde aryl je vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá z fenylu, 1-naftylu a 2-naftylu.
3. RGD mimetická látka podľa nároku 2, kde R2 je -SO2-aryl.
4. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
• · · · ··· ··· • · · β ··· · ·
5. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
6. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
7. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou jeelúčenina:
8. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
y oh
NHSO2Ph • · · · ··· ··· • · · · ··· · · • ········· • · ······ ···· ···· ·· ·· · ·
9. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
10. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
11. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
o o h2n
13. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
• · • ···
14. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
15. RGD mimetická látka podľa nároku 1, ktorou je zlúčenina:
16. Spôsob produkcie RGD mimetickej látky, vyznačujúci sa tým, že sa zlúčenina všeobecného vzorca: kde R1 je radikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá z nasledujúcich zlúčenín:
• · · · ·· • · · · ··· · · · • · · · · · · · · · · • · ······· ········ ·· ·· ·· ··· a X je diradikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá zo síry, -NH- a kyslíka; R2 je radikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skládá z -C02t-butyiu, -CO-arylu a -SO2 arylu;
podrobí nasledujúcim krokom krok 1: zaistenie nitroarylového prekurzora, který má fluoridovú skupinu kovalentne viazanú na nitroarylový kruh, znázorneného nasledujúcou zlúčeninou všeobecného vzorca:
o kde R3 je kyselinu chrániaca skupina; potom krok 2: odstránenie fluoridovej skupiny nukleofilom, ktorý má chránenú guanidínovú skupinu, využitím nukleofilnej aromatickej substitúcie na produkciu chránenej RGD mimetickej látky; a potom krok 3 : odchránenie chránenej RGD mimetickej látky kyselinou na produkciu RGD mimetickej látky.
17. RGD mimetická látka, ktorou je zlúčenina:
·· ·· kde R2 je radikál, vybraný zo skupiny, ktorá sa skládá z -CO2t-butylu, -COarylu a -SO2-arylu.
18. RGD mimetická látka podľa nároku 17, kde aryl je vybraný zo skupiny, ktorá sa skladá z fenylu, 1 -naftylu a 2-naftylu.
19. Spôsob pre diferenčné inhibovanie bunkovej adhézie cez ανβ3 bunkovú adhéziu, vyznačujúci sa tým, že obsahuje nasledujúci krok:
uvedenie buniek, exprimujúcich α^β3 do roztoku, ktorý obsahuje RGD mimetickú látku, vybranú z látok podľa nárokov 5, 7, 9, 11, 14 alebo 15, uvedený roztok má koncentráciu RGD mimetickej látky dostatočnú na inhibíciu otiibP3 bunkovej adhézie, kde ajjbp3 bunková adhézia je inhibovaná aspoň približne 100 krát viac než ανβ3 bunková adhézia.
SK24-2001A 1998-07-06 1999-07-06 Rdg mimetic compound, method for their producing and method for differentiation inhibiting of cell adhesion SK242001A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11088598A 1998-07-06 1998-07-06
PCT/US1999/015252 WO2000001383A1 (en) 1998-07-06 1999-07-06 Angiogenesis inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK242001A3 true SK242001A3 (en) 2001-10-08

Family

ID=22335452

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK24-2001A SK242001A3 (en) 1998-07-06 1999-07-06 Rdg mimetic compound, method for their producing and method for differentiation inhibiting of cell adhesion

Country Status (14)

Country Link
EP (1) EP1094812A4 (sk)
JP (1) JP2002519377A (sk)
KR (1) KR20010079497A (sk)
CN (1) CN1308534A (sk)
AU (1) AU4862599A (sk)
BR (1) BR9911885A (sk)
CA (1) CA2336774A1 (sk)
HU (1) HUP0104509A3 (sk)
ID (1) ID28125A (sk)
NO (1) NO20010085L (sk)
PL (1) PL345574A1 (sk)
SK (1) SK242001A3 (sk)
WO (1) WO2000001383A1 (sk)
ZA (1) ZA200007405B (sk)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9805655D0 (en) 1998-03-16 1998-05-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9814414D0 (en) 1998-07-03 1998-09-02 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9826174D0 (en) 1998-11-30 1999-01-20 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ATE375330T1 (de) 2000-04-17 2007-10-15 Ucb Pharma Sa Enamin-derivate als zell-adhäsionsmoleküle
US6486174B2 (en) 2000-08-07 2002-11-26 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid alkoxyguanidines as integrin antagonists
AU2003212558A1 (en) 2002-03-20 2003-09-29 Koninklijke Philips Electronics N.V. Active matrix electroluminescent display devices, and their manufacture
US8586033B2 (en) * 2003-12-03 2013-11-19 The Scripps Research Institute Integrin αIIbβ3 specific antibodies and peptides
WO2017090157A1 (ja) * 2015-11-26 2017-06-01 大和薬品株式会社 血管新生抑制剤
CN109535035A (zh) * 2019-01-08 2019-03-29 吉尔生化（上海）有限公司 一种n-苄氧羰基-3-氨基-丙氨酸叔丁酯的制备方法
CN113773260B (zh) * 2021-08-26 2023-09-22 华南师范大学 一种类共价有机材料及其制备方法和应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0664792B1 (en) * 1992-10-14 2000-01-05 Merck & Co. Inc. Fibrinogen receptor antagonists
JPH08504194A (ja) * 1992-12-01 1996-05-07 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド フィブリノーゲンレセプターアンタゴニスト
AU701776B2 (en) * 1994-05-27 1999-02-04 Merck & Co., Inc. Compounds for inhibiting osteoclast-mediated bone resorption
JP2000508319A (ja) * 1996-04-10 2000-07-04 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド αｖβ３拮抗薬

Also Published As

Publication number Publication date
ZA200007405B (en) 2001-09-21
PL345574A1 (en) 2001-12-17
AU4862599A (en) 2000-01-24
EP1094812A1 (en) 2001-05-02
NO20010085D0 (no) 2001-01-05
BR9911885A (pt) 2001-03-27
EP1094812A4 (en) 2003-04-16
ID28125A (id) 2001-05-03
WO2000001383A1 (en) 2000-01-13
KR20010079497A (ko) 2001-08-22
CA2336774A1 (en) 2000-01-13
NO20010085L (no) 2001-03-05
CN1308534A (zh) 2001-08-15
JP2002519377A (ja) 2002-07-02
HUP0104509A3 (en) 2002-05-28
HUP0104509A2 (hu) 2002-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU702487B2 (en) Meta-guanidine, urea, thiourea or azacyclic amino benzoic acid derivatives as integrin antagonists
Nicolaou et al. Design, synthesis and biological evaluation of nonpeptide integrin antagonists
JP4177484B2 (ja) 置換されたジアミノカルボン酸
KR100615760B1 (ko) 엔-알카노일페닐알라닌 유도체
EP1318978B1 (en) N-acylsulfonamide apoptosis promoters
DE69927050T2 (de) Biphenylverbindungen und biphenyl-analoge als intergrin-antagonisten
US6806365B2 (en) N-alkanoylphenylalamine derivatives
CA2250690A1 (en) Cinnamic acid derivatives and their use as integrin antagonists
EP0715623B1 (en) Platelet aggregation inhibitors
JP2000507952A (ja) ｍｅｔａ―置換フェニレンスルホンアミド誘導体
SK2152002A3 (en) Cell adhesion inhibitors and pharmaceutical compositions comprising them
SK242001A3 (en) Rdg mimetic compound, method for their producing and method for differentiation inhibiting of cell adhesion
CA2210746A1 (en) Platelet aggregation inhibitors
Sureshbabu et al. N-Urethane-protected amino alkyl isothiocyanates: synthesis, isolation, characterization, and application to the synthesis of thioureidopeptides
PL191149B1 (pl) Nowe związki heterocykliczne, sposób wytwarzania nowych związków heterocyklicznych, środek farmaceutyczny i zastosowanie związków heterocyklicznych
MXPA00012759A (en) Angiogenesis inhibitors
CZ20004656A3 (cs) RGD mimetická látka, způsob její produkce a způsob pro diferenční inhibování buněčné adheze
Yu et al. Solid-phase parallel synthesis of 2-aminoimidazolidin-4-ones
CA2373433C (en) Spiroimidazolidine derivatives, their preparation, their use and pharmaceutical preparations comprising them
Bui et al. Synthesis of sulfonylurea derivatives and their α-glucosidase inhibitory activity
Doughty et al. Neuropeptide Y (NPY) functional group mimetics: design, synthesis, and characterization as NPY receptor antagonists
WO2003051795A2 (de) Harzgebundene isonitrile
Suhs New guanidinium compounds for the molecular recognition of carboxylates and contributions to the synthesis of bivalent NPY Y1 receptor antagonists
MXPA01005395A (en) Benzimidazole compounds that are vitronectin receptor antagonists
MXPA00001743A (es) Derivados de n-alcanoilfenilalanina