SK14302003A3 - Kombinácia agonistu adenozín A2a receptora a anticholinergického činidla na ošetrovanie obštrukčných chorôb dýchacích ciest - Google Patents

Description

Kombinácia agonistu adenozín A_2a receptora a anticholinergického činidla pre ošetrovanie obštruktivnych chorôb dýchacích ciest ⁰dlasť techniky

Vynález sa týka inhalovatelnej kombinácie selektívneho agonistu adenozín Ä_2a receptora a anticholinergického činidla, pokial však anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová sol. Vynález sa tiež týka farmaceutických prostriedkov a zariadení na podávanie takých kombinácií.

Doterajší stav techniky

Kombinácia selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla je užitočná pre ošetrovanie obštruktivnych chorôb dýchacích ciest, ako sú zvlášť obštruktívne astmatické choroby dýchacích ciest, chronická inštruktívna plúcna chc-roba (COPD) a iné obštruktívne choroby dýchacích ciest exacerbované zosilenými bronchiálnymi reflexami, zápalmi, bronchiálnou hyperreaktivitou a bronchospazrnom. Kombinácia je zvlášť užitočná pre ošetrovanie COPD.

Ako príklady chorôb, ktoré sa môžu ošetrovať kombináciou podľa vynálezu, sa uvádzajú respiračné choroby astmy, vrátane respiračného stresového syndrómu, chronické pľúcne zápalové choroby, bronchitída, chronická bronchitída, chronické obštruktívne pľúcne choroby (dýchacích ciest) a silikózy a choroby imunitného systému, ako sú alergická nádcha a chronický zápal spoj iviek.

Adenosín má široký obor fyziologických účinností vrátane imunitnej a zápalovej odozvy, ktorá je sprostredkovávaná receptorom a zahrnuje interakciu s aspoň štyrmi typmi plazmových membránových receptorov. Tieto receptory sa bežne označujú Αχ, Ä_2a,

Ä₂t a A₃. Zistilo sa, že adenosín a jeho spektrom proti zápalových aktivít, ktoré rozličnosť imunitných a zápalových buniek, a eozínofiiov. Aktivácia A_2a receptorov na k potlačeniu produkcie reaktívnych oxidantov zápalu, ako je elasnáza, týmito bunkami a k i ľi L S j X1 ľi O V .

analógy majú široké zahrnujú v ý z n amn ú vrátane neutrofilcv neutrofiioch vedie

Čí inVCh ľfLS ύΐ é. ÍL C ľ c v poklesu expresie β₂Je známe, že A_2a receptory sú na lvmfocytoch, neutrofiioch, eozínofíloch, bazofiloch, monocytoch/makrofágoch, epiteliálnych bunkách a na vaskulárnom endoteliálnom tkanive, s ktorými môžu vzájomne pôsobiť. Väzba adenosína na A_2a receptory môže znižovať zápal ovplyvňovaním aktivít mnohých týchto bunečných typov. Napríklad agonisti A_2a receptora výrazne inhibujú oxidačné species vyvolané fyziologickými stimulantami, ako sú neutrofilné chemoatraktanty, cytokíny a lipidové produkty.

Obsadenie adenosínových A_2a receptorov stimuluje neutrofilnú adenyiylcykiázu, čo vedie k vzrastu medzibunečnej cyklickej AMP. Zvýšená neutrofilná cyklická AMP potom vedie k potlačeniu stimulovanej neutrofilnej oxidatívnej aktivity. Vplyvom príbuzného pôsobenia na radu iných zápalových bunečných typov rozširujú sa protizápalové vlastnosti agonistov A_2a s inhibičnou aktivitou na neutrofily. Adenosín znižuje tiež endotoxínom stimulované uvoľňovanie monocyt/makrofágového TNFa a bolo pozorované, že endogénny adenosín rovnako ako adenosínové analógy redukuje produkciu ľudského monocytu TNFcz väzbou na receptory Ä_2a.

Endotoxínom stimulované uvoľňovanie interleukínu-6 (TL-6) a interleukínu-8 (IL-8) sa znižuje rádovo adenosínovými analógmi, čo oripomína receptorovú aktivitu adenosína A_2a. Interleukín-10 (IL-10) má protizápalové pôsobenie ako dôsledok svojej schopnosti znižovať endotoxínom stimulované uvoľňovanie TNFa z monocytov, inhibovať oxidatívne aktivity a znižovať expresiu leukocytových

J adhesných molekúl. Adenosín ulahčuje produkciu stimulovaného ľudského monocytu IL-10; preto podporuje väzba adenosína na receptory A_2a rozlíšenie akejkoľvek nastupujúcej zápalovej odozvy, ktorá prichádza v úvahu.

Aktivované eozínofily prenikajú do tkanív a spôsobujú poškodzovanie buniek a zápaly pri ochorení, ako je alergická a nealergická astma, alergická nádcha a atopický zápal kože. Adenosín a agonistové analógy receptora adenosína A_2a inhibujú väzbou receptorov A_2a na eozínofily stimulované uvolňovanie reaktívnych kyslíkových species, čo je odozva, ktorá je súbežná s inhibičným pôsobením receptorov A_2a na neutrofily.

Inhalovaní agonisti A_2a inhibujú novotvorbu eozínofilov do pľúc senzitizovaných morčiat pôsobením v pľúcach (WO-A-99/67263). To je významné, pretože agonisti A_2a rozširujú krvné cievy a znižujú krvný tlak u živočíchov a proti zápalové pôsobenie agonistov A_2a sa ideálne vytvára inhalovateľným činidlom, ktoré má vysoký terapeutický index pre aktivitu v pľúcach v porovnaní s periférnou oblasťou.

Anticholinergické činidlá zabraňujú účinkom pochádzajúcim z prenikania impulzov parasympatickými nervami. Výsledkom tohto pôsobenia je ich schopnosť inhibovať činnosť neurotransmiterového acetylcholína blokovaním jeho väzby na muskarínové cholinergické receptory. Existujú aspoň tri typy muskarínových receptorových subtypov. Receptory Μχ sú hlavne v mozgu a v ostatných tkanivách centrálneho nervového systému, receptory M₂ sú v srdci a v ostatných kardiovaskulárnych tkanivách a receptory M₃ sú v hladkom svalstve a v žľazových tkanivách. Muskarínové receptory sú na neuroefektorových miestach, napríklad hladkého svalstva a obzvlášť sú M₃ muskarínové receptory v hladkom svalstve dýchacích ciest. Preto je možné považovať anticholinergické činidlá tiež za antagonistov muskarínových receptorov.

Farasymapatetický nervový systén má hlavnú úlohu v regulovaní bronchomotorického naoätia a bronchokonštrikcie je veľkou mierou výsledkom refelexných nárastov spôsobených súborom rozmanitých činidlá s ú dlho známe ore použitie j¹ pa r asym.pat etickí podnosov. Anti.

t r 1 η c Ác ' <-· H v-. aktcvitv : h o 1 i n o r gické dýchacích cl dýchacích c Ϊ charakterizovaných čiastočne dKu je COPD . y · í 1 ' . . ! ; - ' ;

dm zužovaním astma a používali sa ako brcnchodilatátory pred nástupom epinefrís.u. Potom boli potlačené β-adrenergickými činidlami a zavedenie ipratropiumbromidu metylxan.tínami. Avšak nedávne viedlo k oživeniu používania anticholinergickej terapie pri liečbe dýchacích porúch. Na periférnych systémoch orgánov, ako sú slinné žľazy a črevá, sú ancagonisti systemicky aktívnych muskarínových receptorov, a preto je používanie systematicky aktívnych antagonistov muskarínových receptorov obmedzené vedľajšími účinkami, ako je suchosť v ústach a zápcha. Bronchodilatačné a ďalšie priaznivé pôsobenie antagonistov muskarínových receptorov je teda ideálne vytvárané inhalovaným činidlom, ktoré má vysoký terapeutický index pre pôsobenie v porovnaní s periférnymi oblasťami.

Anticholinergické činidlá tiež čiastočne antagonizujú bronchokonštrikciu vyvolanú histamínom, bradykinínom alebo prostaglandínom F₂cu o ktorých sa má za to, že reflektujú zúčastňovanie sa parasympatetických následkov v bronchiálnych reflexoch vyvolaných týmito činidlami.

S prekvapením sa teraz zistilo, že kombinácia selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla priaznivo pôsobí v liečbe obštruktívnych chorôb dýchacích ciest a ďalších zápalových ochorení v porovnaní s liečbou kcoroukolvek touto látkou samotnou. Výhodou kombinácie je zaistenie optimálneho ovládania svetlosti dýchacích ciest mechanizmom najvhodnejším na chorobnú patológiu, menovite muskarínový receptorový antagonizmus, spolu s účinným potlačovaním nevhodného zápalu. Kombináciou

anrimuskarínovej a agonistovej zlúčeniny A2a	inhalačnou	cestou sa
uskutočnia	prednosti každej triedy týchto	látok	bez n	ežiadúcich
vedľajších	účinkov. Výsledkom kombinácie	je	tiež	synergická
koordinácia	, vytvárajúca väčšiu účinnosť	aS Z	pri	maximálne
prípustných	dávkach ktorejkoľvek triedy	č i	n w 2 3	i -v ί -r- m -U

samostatne .

Vynález preto poskytuje inhalovatelnú kombináciu selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla, pokiaľ nie je anticholinergickým činidlom tiotropná soľ.

Vynález ďalej poskytuje inhalovatelnú kombináciu selektívneho agonistu adenosín A₂a receptora a anticholinergického činidla na použitie ako liečiva, pokial nie je anticholinergickým činidlom tiotropná soľ.

Vynález ďalej poskytuje kombináciu selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla, pre súčasné, postupné alebo oddelené podávanie inhalačnou cestou pri liečení obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo inej zápalovej chorooy, pokial nie je anticholinergickým činidlom tiotropná soľ.

Vynález sa týka ďalej farmaceutického prostriedku pozostávajúceho zo selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla a farmaceutický prijateľného excipier.ta, riedidla alebo nosiča, na podávanie inhalačnou cestou pri liečení obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo inej zápalovej choroby, pokiaľ nie je anticholinergickým činidlom tictrooná soľ.

Vynález sa týka ďalej použitia farmaceutického prostriedku obsahujúceho selektívny agonist adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo na výrobu liečiva pre súčasné, postupné alebo oddelené podávanie inhalačnou cestou pri liečení obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo inej zápalovej choroby, pokial nie je anticholinergickým činidlom tiotropná sci.

nacicu sa ďalej týka liečenia obštruktívnych chorôb t - alebo i ne ί zá.oalov6“í chorob^v inhalačnou cestou cicavcov, ktorí tc potrebujú, podávaním súčasným., postupným alebo n c, i v, ./ u jc.iy..

agonistu aaenosm A_2ä receptora a anticholinergíckého činidla a farmaceutický prijateľného excipienta, pokiaľ nie je anticholinergickým činidlom tiotropná sol.

Vynález sa ďalej týka inhalačného zariadenia pre súčasné, postupné alebo oddelené podávanie inhalačnou cestou pri liečení obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo inej zápalovej choroby, pokial nie je anticholinergickým činidlom tiotropná soľ.

Selektívny agonist adenosín A_2a receptora má väčšiu afinitu k adenosínovému receptorovi Ä_2a než všetky ostatné známe adenosínové receptory. S výhodou je afinita takého selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora aspoň 100 x väčšia u adenosínového receptora A_2a v porovnaní s jeho afinitou k ostatným adenosínovýn receptorom.

Vhodní selektívni agonisti adenosín A_2a receptora pre použitie podlá vynálezu zahrnujú zlúčeniny obecne a špecificky popísané vo svetových patentových spisoch číslo WO-A-OO/23457, WO-A-00/77018, WO-Ά-01/27Ϊ31, WO-A-01/27130 , WO-A-1/60835, WO-A-02/00676 a WO-A01/94368.

Svetový patentový spis číslo WO-A-OO/23457 popisuje za prvé zlúčeninu obecného vzorca I

kde znamená OH

R¹ skupinu alkylovú alebo cyklopropylmetylovú,

R² skupinu fenylalkylenovú alebo naftylalkylenovú, pričom je alkylénový reťazec poprípade ďalej substituovaný skupinou fenylovou alebo naftylovou a každá skupina fenylová alebo naftylová je poprípade substituovaná jedným alebo niekoľkými substituentami na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu alkylovú, alkoxyskupinu, atóm halogénu a kyanoskupinu, n 1 alebo 2,

A skupinu -NR^a, -NR^aC(O), -NR^aC (0) NR^a, -NR^aC(0)0,

-0C(0)NR^a, -C(0)NR^a, -NR^aS02, -S02NR^a, O, S alebo -SO2/

R^a atóm vodíka, skupinu alkylovú alebo benzylovú poprípade substituovanú v kruhu jedným alebo niekoľkými substituentami na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu alkylovú, alkoxyskupinu, atóm halogénu a kyanoskupinu,

R³ skupinu -(CH₂)_PR^P-B, s

o C, 1 alebo 2,

R^p väzbu, skupinu alkylénovú, cykloalkylenovú, fenylenovú alebo naftyienovú, pričom sú skupiny cykloalkylenovú, fenylenovú alebo nafzylenová poprípade substituované jedným alebo niekolkvmi substituentami na sebe nezávisle volenými zo· súboru zahrnujúceho skupinu alkylovú, alkoxyskupinu, atóm halogénu a skupinu alxoxyalkylenovú,

B (i) atóm vodíka, skupinu -NR^bR^b, -R^bR^bN-alkylenovú, -0R^b,

-COOR^b, -OCOR^b, -SO₂R^b, -CN, (ii) -SO₂NR^bR^b, -NR^bCOR^b, -NR^b-SO₂R^b alebo -CONR^bR^b, kde každé R^b znamená na sebe nezávisle atóm vodíka, skupinu alkylovú, fenylovú alebo benzylovú za podmienky (a) ak znamená B skupinu -OCOR^b, -SO2R^b, -NR^bCOR^a alebo -NR^b-SO2NR^b, neznamená koncový R^b atóm vodíka, (b) R^? znamená väzbu, p 0 a 3 atóm vodíka, ak A znamená skupinu -NR^a, -NR^aC(O)NR^a, -OC(O)NR^a, -C(CúNR^a, SO₂NR^a, 0 alebo S, (iii) N-viazanú skupinu azetidinylovú, pyrrolidinylovú, piperrdinylovú, piperazinylovú alebo morfolinylovú, ktoré sú poprípade substituované jednou alebo niekolkými skupinami alkylovými, za podmienky, že skupinou -(CH₂)_PR^p alebo skupina -CH₂- a pokra! znamená A skupinu -NR^a, -C(O)NR^a, -OC(O)NR^a alebo -SO₂NR^a, R³ a R³ spolu dohromady s atómom dusíka, na kzorý sú viazané, môžu vytvárať skupinu azetidinovú, pyrrolidinovú, piperioinovú, piperazinovú, pričom sú tieto skupiny poprípade substituované jednou alebo niekolkými skupinami alkylovými, a jej farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO--A-00/23457 popisuje za druhé zlúčeninu obecného vzorca I, zhora uvedeného, kde znamená

R¹ skupinu C¹-C⁶ alkylovú alebo cyklopropylmetylovú,

R² skupinu fenyl (Ci-C₅) alkylénovú alebo naf tyl (Cd-CJ alkylénovú, pričom je C₂-Cg alkylénový retazec poprípade ďalej substituovaný skupinou fenylovou alebo naftylovou a každá skupina fenylová alebo naftylová je poprípade substituovaná jedným alebo niekoľkými substituentamí na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-Cg alkylovú, C1-C5 alkoxyskupinu, atóm halogénu a kyanoskupinu, n 1 alebo 2,

A skupinu -NR^a, -NR^aC(O), -NR^aC(O)NR^a, -NR^a C(O)O, -OC(O)NR^a, -C(O)NR^a, NR^aSO₂, SO₂NR\ 0, S alebo S0₂,

R^a atóm vodíka, skupinu (Όχ-Οβ) alkylovú alebo benzylovú poprípade substituovanú v kruhu jedným alebo niekoľkými substituentamí na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu C₁-C₅ alkylovú, Ci-C₆ alkoxyskupinu, atóm halogénu a kyanoskupinu,

R³ skupinu -(CH₂)_PR^P-B, p 0, 1 alebo 2,

R^p väzbu, skupinu Ci-Cg alkylénovú, C₃-C₇ cykloalkylenovú, fenylenovú alebo naftylenovú, pričom sú skupiny C3-C7 cykloalkylenová, fenylenová alebo naftylenová poprípade substituované jedným alebo niekoľkými substituentamí na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-Cg alkylovú, C_x-Cg alkoxyskupinu, atóm halogénu a skupinu (Ci-Cg) alkoxy (Ci-C_s) alkylénovú, (i) atóm vodí ka, skupinu -NR^bR^b, -R^bR.^bN- (Ci-C₆) alkylénovú,

-OR^b, -COOR^b, -OCOR^b, -SO₂R^b, -CN, iii) -S0₂NR^bR^b, -NR^bCOR^b, -NR^b-SO₂R^b alebo -CONR^bR^b, kde každé R^b znamená na sebe nezávisle atóm vodíka, skupinu

CY - Cty 3±t'ylovú_z fenylovú slebo benzylovú zn podmienky (a) ak znamená B skupinu -OCOR^b, -SO2R^b, -NR^bCOR^b alebo -NR^b-SO2NR^b, neznamená koncový R^b atóm vodíka, a (b) R^p znamená väzbu, p O a B atóm vodíka, ak A znamená skupinu ,NR^a, -NR^aC(O)NR^a, -OC(O)NR^a, -C(O)NR^a, -SO₂NR^a, O alebo S, (i) poprípade substituovanú, plne alebo čiastočne nasýzenú alebo nenasýtenú, monocyklickú alebo bicyklickú héterocyklickú skupinu, ktorá je viazaná na R^p atómom uhlíka kruhu alebo (ii) N-viazanú skupinu azetidinylovú, pyrrolidínylovú, piperidinylovú, piperazinylovú aiebo morfolinylovú, ktoré sú poprípade substituované jednou alebo niekoľkými skupinami C₁-C₆ alkylovými, za podmienky, že skupinou -(CH₂)_P-R^P nie je skupina -CH₂- a pokiaľ znamená A skupinu NR^a, C(O)NR^a, OC(O)NR^a alebo SO2NR^a, R^a a R³ spolu dohromady s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, môžu vytvárať skupinu azetidinovú, pyrrolidinovú, piperidínovú, prperazinovú, pričom sú tieto skupiny poprípade substituované jednou alebo niekoľkými skupinami Ci-Cs alkylovými, a jej farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO-A-OO/23457 popisuje za tretie zlúčeninu obecného vzorca I, zhora uvedeného, kde znamená

R¹ skupinu alkylovú alebo cyklopropylmetylovú,

R² skupinu fenylalkylenovú alebo naftylalkylenovú, pričom je aikylenový reťazec poprípade ďalej substituovaný skupinou metylovou, etylovou, fenylovou alebo naftylovou, n 1 alebo 2,

A skupinu -NR^a, -NR^aC (O) , ~NR^aC(O)NR^a, -NR^aC(G)O, -OC(O)NR^a,

C(O)NR^a, -NR^aSO2, -SO2NR^a, O, S alebo -SO2, kde znamená R^a atóm vodíka alebo skupinu alkylovú,

R³ skupinu -(CH₂)_PR^P-B, kde znamená p 0, 1 alebo 2,

R^p väzbu, skupinu alkylénovú, poprípade alkylovú skupinu substituovanú skupinu cykloalkylenovú, fenylenovú alebo naftylenovú a

B (i) (ii) atóm vodíka, skupinu -NR^bR^b, -OR°, -COCR^D, -OCOR^D, -SO₂R^D,

-CN, -SO₂NR^bR^b, NR^dCOR^d, alebo -CONR^DR^D, kde každé R^D znamená na sebe nezávisle atóm vodíka alebo skupinu alkylovú, za podmienky (a) ak znamená B skupinu -SO₂R^b, -NR^bCOR^b neznamená koncový R^b atóm vodíka, a (b) R^p znamená väzbu, p 0 a B atóm vodíka, ak A znamená skupinu -NR^a, -NR^aC(O)NR^a, -C (O) NR^a,

-SO₂NR^a, O alebo S, poprípade substituovanú, plne alebo čiastočne nasýtenú alebo nenasýtenú monocyklickú alebo bicyklickú héterocykiickú skupinu, pričom je každá viazaná prostredníctvom atómu uhlíka kruhu, a jej farmaceutický prijatelné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO-A-00/7701S popisuje zlúčeninu ;o e c ne n o vzorca T

R³ kde znamená atóm vodíka alebo skupinu Ci-C₆ alkylovú poprípade substituovanú jedným alebo dvomi substituentami na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu fenylovú a naftylovú, pričom skupiny fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Cú-Cg alkylovou, Ci~C₆ alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, atóm vodíka alebo skupinu Ci-C₆alkylovú, skupinu C₂-C₆ alkylenovú,

R^J atóm. vodíka, skupinu alkylovú, -COOR⁴, -CN,-CONR⁴R⁴,

C₃-C₃ cykloalkylovú, fenylovú alebo naftylovú, pričom, skupiny C₃-C₈ cykloalkylová, fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Cf-Cs alkylovou, fenylovou, CR-Cs alkoxy (Ci-CA alkylovou, R⁴R⁴N (Cý-Cs) alkylovou, halogén (Ci-C₆) alkylovou, f luór (Ci-C₆) alkoxyskupinou, skupinou C₂-C₅ alkanoyiovou, atómom; halogénu, skupinou -OR⁴, kyanoskupinou, skupinou -CGOR’, (ii) (iv)

C₃-C₈ cykloalkylovou, -S(O)_nR⁵, -NR⁴R⁴, -SO₂NR⁴R⁴, -CONR⁴R⁴,

-NR⁴COR⁵ alebo -NR⁴SO₂R⁵, alebo ak znamená A skupinu Οχ-Cg alkylénovú, znamená skupinu NR⁴R⁴,. -OR⁴, -OCOR⁵, -SO2R⁵, -SO2NR⁴R⁴ alebo -NR/COR⁵, alebo

C-vrazanú štvorčlennú až jedenásťčlennú, monocyklickú alebo bicyklickú, héterocyklickú skupinu buď s 1 až 4 atómami dusíka v kruhu alebo s 1 alebo s 2 atómami dusíka asi atómom kyslíka alebo s 1 atómom síry, poprípade substituovanú na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho oxoskupinu, skupinu Οχ-Cg alkoxy(ΟχCg) alkylovú, -R°R^SN (Cx-Cg) alkylovú, halogén (Οχ-Cg) alkylovú, f luór (Οχ-Cg) alkoxyskupinu, skupinu fluór (C2-C5)alkanoylovú, atóm halogénu, kyanoskupinu, skupinu -OR⁶, -R⁷, -COR⁶, -NR⁶R⁶, -COOR⁶, -S(O)raR⁷, -SO2NR⁶R⁶, -CONR^SR^S, NR⁶SO2R⁷ a -NR⁶COR⁷ a poprípade substituovanú na atóme dusíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Οχ-Cg alkoxy (Οχ-Cg) alkylovú, -R⁶R⁶N (C2-Cg) alkylovú, halogén (C2Cg) alkylovú, f luór (C2-C2) alkanoylovú, R⁷, -COR⁶, -COOR⁷, -SO2R⁷, -SO₂NR^sR^s, -CONR⁶R^s, alebo pokial znamená A skupinu C₂-C_s alkylénovú, prostredníctvom atómu dusíka viazanú skupinu azetidinylovú, pyrrolidinvlovú, piperidinylovú, piperazinylovú, homopiperazinylovú alebo morfolinylovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Οχ-Cg alkylovú, fenylovú, Cx-C_s alkoxy (Οχ-Cg) alkylovú, R⁴R⁴N (Οχ-Cg) alkylovú, halogén (Οχ-Οβ) alkylovú, fluór(Cx-Cg)alkoxyskúpinu, (C₂-C₆)alkanoylovú, atóm halogénu, skupinu -OR⁴, kyanoskupinu, -COOR⁴, C-C8 cykloalkylovú, S(O)mR⁵, -NR⁴R⁴, -SO2NR⁴R⁴, -CONR⁴R⁴, -NR⁴COR⁵ a -NR⁴SO₂R⁵, a skupiny piperazinylová, homopiperazinylová sú poprípade substituované na atóme dusíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Cl-C₆ alkylovú, fenylovú,

Cy-Cs alkoxy (CR-Cd alkylovú, -PÓR⁴-N (C₂-C₆) α 1 kýlovú , í luór (Ci-Cg) alkylovú, C₂-C₅ alkanoylovú, -COGPk, C₃-C₈ cykloalkylovú, -SO₂R⁵, -SO₂NR⁴R⁴ a -CONR⁴R⁴,

R⁴ atóm vodíka, skupinu Ci-C_s alkylovú, C₃~C₈ cykloalkylovú alebo· fenylovú,

R⁵ skupinu Cý-Cg alkylovú, C₃-C_s cykloalkylovú alebo fenylovú,

R⁶ atóm vodíka, skupinu Ci~C₆ alkylovú, C₃-C_s cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het,

R⁷ skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₉ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het,

0, 1 alebo 2 a het ako význam R⁵ a R⁷ prostredníctvom atómu C viazanú skupinu pyrrolylovú, imidazolylovú, triazolylovú, tienylovú, furylovú, tiazolylovú, oxazolylovú, tiadiazolylovú, oxadiazolylovú, pyridinylovú, pyrimidinylovú, pyridazinylovú, pyrazinylovú, indolylovú, ízoindolylovú, chinolinylovú, izochinolinylovú, benzimidazolylovú, chinazolinylovú, ftalazinylovú, benzoxazolylovú alebo chinoxalinylovú, pričom je každá táto skupina poprípade substituovaná skupinou Ci-C₆ alkylovou, Cý-Cg alkoxyskupinou, kyanoskupinou alebo atómom halogénu, a jej farmaceutický prijatelné soli a solváty.

kde znamená

R atóm vodíka alebo skupinu C_r-C₆ alkylovú poprípade substituovanú jedným alebo dvomi substituentami na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu fenylovú a naftylovú, pričom skupiny fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C₆ alkylovou, Ci-C₆ alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou,

A väzbu alebo skupinu C1-C3 alkylénovú

R² (i) atóm vodíka, skupinu Ci-C6 alkylovú, C3-C7 cykloalkylovú, fenylovú alebo naftylovú, pričom skupiny C3-C7 cykloalkylové, fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Ci-Cs alkylovou, fenylovou, Ci-Cs alkoxy (CJ-Cé) alkylovou, R³R³N (Ci-C6) alkylovou, fluór (Ci-C₆) alkylovou, f luór (Ci-C_s) alkoxyskupinou, skupinou C₂-C₅ alkanoylovou, atómom halogénu, skupinou -OR³, kyanoskupinou, skupinou -COOR³, C3-C7 cykloalkylovou, S(O)mR⁴, -NR³R³, -SO²NR³R³, -CONR³R³, -NR³COR⁴ alebo NR³SO2R⁴, za podmienky, že R² neznamená atóm vodíka, pokial A znamená väzbu, alebo (ii) (iii) ak značená A skupinu C₂-C₃ alkylénovú, znamená skupinu -NR⁸R⁹, -OR³, -COOR³, -OCOR⁴, -SO2R⁴, CN, SO2NR³R³, -NR³COR⁴ alebo -CONR³R³, alebo jedenásťčlennú,

C-viazanú štvorčlennú až monocyklickú alebo bicyklickú skupinu buď s 1 až 4 atómami dusíka v kruhu alebo s 1 alebo s 2 atómami dusíka asi atómom kyslíka alebo s 1 atómom síry, poprípade substituovanú na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho oxoskupinu, skupinu Ci-C_s alkoxy (Ci-C_s) alkylovú, R³R³N (Ο₂-Ο₆) alkylovú, fluór (Ο₂-Ο₆) alkylovú, fluór (CáC₆) alkoxyskupinu, skupinu fluór(C₂-C₅)alkanoylovú, atóm halogénu, kyanoskupinu, skupinu -OR⁵, -R⁶,

-COR⁵, -NR⁵R⁵, -COOR⁵, -S(O)mR^s, -SO2NR⁵R⁵, -CONR⁵R⁵,

-NR⁵SO₂R⁶ a

-NR^SCOR^S a poprípade substituovanú na atóme dusíka skupinou zo súboru skupinu Ci-C₆ alkoxy (Ci~C₆) alkylovú, alkylovú, fluór(Ci-Cs)alkylovú, alkanoylovú, R^s, -COR⁵, -COOR⁵, -S(O)mR⁶, -SO2NR⁵R⁵, CONR⁵R⁵, alebo zahrnuj úceho -R³R³N(C2-C6) fluór (C2-C5) R³ atóm vodíka, skupinu Ci-Cs alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R⁴ skupinu 0₃-0₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R⁵ atóm vodíka, skupinu C^-C₅ alkylovú, C₂C₇ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het,

R⁶ skupinu Ο₂-Ο₆ alkylovú, na frylovú alebo het, c₃-c₇ cykloalkylovú, fenylovú, m 0,1 alebo 2 a het ako význam R⁵ a R^s prostredníctvom atómu C viazanú skupinu pyrrolylovú, imidazolylovú, triazolyiovú, tienylovú, furylovú, tiazolylovú, oxazolylovú, tiadiazolylovú, oxadiazolylovú, pyridinylovú, pyrimidinylovú, paridaz i nvlovú ora z in.vlovú r*h i nn 1 i ~ V mn'i benzimidazolylovú, chinazolinylovú, ftalazinylovú, benzoxazolylovú alebo chinoxalinyiovú, pričom je každá táto skupina poprípade substituovaná skupinou Ci~C₆ alkylovou, Ci-C₆ alkoxyskupinou, kyanoskupinou alebo atómom halogénu,

R⁷ skupinu metylovú, etylovú alebo cyklopropylmetylovú a buď R⁸ a R⁹ spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, znamená skupinu azetidiínylovú, pyrrolidinylovú, piperidinylovú, morfolinylovú, piperazinylovú, homopiperidinylovú, homopiperazinylovú alebo tetrahydroizochinolinylovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme uhlíka kruhu skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu C!-C₆ alkylovú, C₃-C_s cykloalkylovú, fenylovú,

Ci-C₆ alkoxy (Cx-Cg) alkylovú, alkylovú, substituované

-CONR³R³, na

-COOR , atóme

R³R³N (Ci-C₅) alkylovú, fluór (Ci-C₆) C₂-C₅ alkanoylovú, a poprípade uhlíka kruhu nepriliehajúcemu k atómu dusíka kruhu fluór(0_χ-0₆)alkoxyskupinou, atómom halogénu, skupinou -OR³, kyanoskupinou, -S(O)mR⁴, -NR³R³, -SO₂NR³R³, -NR³COR⁴ alebo -NR³SO2R⁴ a skupiny piperazín-l-ylová, homopíperazín-l-ylová sú poprípade substituované na atóme dusíka kruhu neviazaného na skupinu A, skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-C6 alkylovú, fenylovú, Ci-Cg alkoxy (C₂-C_s) alkylovú, -R³R³N (C2-C6)-alkylovú, f luór (Ci-C6) alkylovú, C2-Cs alkanoylovú, -COOR⁴, C3-C₈ cykloalkylovú, -SO₂R⁴, -SO₂N-R³R³ a -CONR³R³, alebo R⁸ atóm vodíka, skupinu Ci-Cs alkylovú, C8-Cg cykloalkylovú, fenylovú alebo benzylovú, a R⁹ atóm vodíka, skupinu Ci-C6 alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú, fenylovú, benzylovú, fluór-(C₂-C_s)alkylovú, CONR³R³, -COOR⁴, C2-C5 alkanoylovú alebo -SO₂NR³R³, a jej farmaceutický prijatelné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO-A-01/27130 popisuje zlúčeninu obecného vzorca I

H

N. .A „ </

O 0 kde znamená atóm vodíka alebo substituovanú jedným nezávisle volenými zo skupinu Ci-C_s alkylovú poprípade alebo dvomi substituentami na sebe súboru zahrnujúceho skupinu fenylovú a naftylovú, pričom skupiny fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Ci~Cg alkylovou, Cý-Cg alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, väzbu alebo skupinu Ci-C₃ alkylénovú,

R² (i) atóm vodíka, skupinu Ch-Cg alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú alebo naftylovú, pričom skupiny 0₃-C₇ cykloalkylová, fenylová a naftylová sú poprípade substiované skupinou CR-Cg alkylovou, fenylovou, Ci~C_s alkoxy (Cý-Cg) alkylovou, -R³R³N (Ci-C₅) alkylovou, fluór (ΟχC₆ ialkylovou, fluór(Ci-C₆)alkoxyskupinou, skupinou C₂-C₅ alkanoylovou, atómom halogénu, skupinou -OR³, kyanoskupinou, skupinou -COOR³, C3-C7 cykloalkylovou, S(O)raR⁴, -NR³R³, -SO2NR³R³, -CONR³R³, -NR³COR⁴ alebo 19

	KR3SO2R4, za podmienky, že pokial A znamená väzbu, alebo	R2 neznamená atóm	vodíka,
i 1 )	ak znamená A skupinu C2-C3	alkylenovú,	znamená	skupinu
	-NR7R8, -OR3, -COOR3,	-OCOR4,	-SO2R4,	- OKT « !

-SO²NR³R³, -NR³COR⁴ alebo -CONR³R³, alebo (iii) C-viazanú štvorčlennú až jedenásťčlennú, monocyklickú alebo bicyklickú, héterocyklickú skupinu buď s 1 až 4 atómami dusíka v kruhu alebo s 1 alebo s 2 atómami dusíka asi atómom kyslíka alebo s 1 atómom síry, poprípade substituovanú na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho oxoskupinu, skupinu Ci-C₆ alkoxy(C_x-Cs)alkylovú, R³R³N (Ci-C₆) -alkylovú, fluór (C_x-C₆) alkylovú, fluór (C_xC₆)alkoxyskupinu, skupinu fluór(C₂-C₅)aikanoylovú, atóm halogénu, kyanoskupinu, skupinu -OR⁵, -R⁶,

-COR⁵, -NR⁵R⁵, -COOR⁵, -S(O)nR⁶, -SO2NR⁵R⁵, -CONR⁵R⁵, -NR⁵SO2R^s a -NR^SCOR^S a poprípade substituovanú na atóme dusíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-C6 alkoxy (Ci-C₆) alkylovú, -R³R³N(C₂-C₆) alkylovú, fluór (Ci-C_e) alkylovú, f luór (C₂-C₅) aikanoylovú, -R⁶, a -CONR⁵R⁵, alebo

-COR⁵, -COOR⁵, ~S(O)mR⁵, -SO2NR⁵R

R³ atóm vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R⁴ skupinu Ci-C_s alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R⁵ atóm vodíka, skupinu Ο₂-Ο₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het,

R^e skupinu Οχ-Cg alkylovú, C₃-C₇cykloalkýlovú, fenylovú, naftylovú alebo het, vane, známi buď ?' a R~ spolu s atómom dusíka, na ktorý sú skupinu azetidinylovú, pyrrolidinylovú, norfolinylovú, piperazinylovú, homopiperidinylovú, homopiperazinylovú alebo tetrahydroizochinolinylovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme uhlíka kruhu skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Cx~Cg alkylovú, C₃-C_g cykloalkylovú, fenylovú, Ci-Cg alkoxy (Cú-Cg) alkylovú,-R³R³N (Cd-Cg) alkylovú, fluór (Cx-C6) -COOR³, C2-C₅ alkanoylovú, a poprípade atóme uhlíka kruhu nepriliehajúcemu alkylovú, -CONR³R³, substituované na k atómu dusíka kruhu fluór(Cx-C₆)alkoxyskupinou, atómom halogénu, skupinou -OR³, kyanoskupinou, -S (O) roR⁴,-NR³R³, -SO2NR³R³, -NR³COR⁴ alebo -NR³SO2R⁴ a skupiny piperazín-l-ylová, homopiperazín-l-ylová sú poprípade substituované na atóme dusíka kruhu, neviazaného na skupinu A, skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-Cs alkylovú, fenylovú, C_x-Cg alkoxy (C₂-C_s) alkylovú, -R³R³N (C2-C5) -alkylovú, fluór (Cx-Cs) alkylovú, C2-C5 alkanoylovú, -COOR⁴, C3-C₈ cykloalkylovú,

SO₂R⁴, -SO₂N-R³R³ a

-CONR³R³, alebo R⁷ atóm vodíka, skupinu Cx-C5 alkylovú, C3-C8 cykloalkylovú, fenylovú alebo benzylovú, a R⁸ atóm vodíka, skupinu Cx-Cs alkylovú, C₃-C₃ cykloalkylovú, fenylovú, benzylovú, fluór(Ci-C_s) alkylovú, -CONR³R³, -COOR⁴, C₂-C₅ alkanoylovú, -S0₂NR³R³,

0, 1 alebo 2 a het ako význam R pyrrolylovú, furylovú, ‘ a R⁶ prostredníctvom atómu C viazanú skupinu imidazolvlovú, tríazolvlovú, tienylovú, tiazolylovú, oxazolylovú, oiadiazolylovú, oxadiazolylovú, pyridinylovú, pyrimidinylovú, pyridazinylovú, orazinylcvú, chinolinylová, zolylovú, chinazolinylovú, izochinolinylová, benzimidaftalazinylovú, benzoxazolylovú alebo chinoxalinylovú, pričom je každá táto skupina poprípade substituovaná skupinou C-Cg alkylovou, C^-Cg alkoxyskupinou, kyanoskupinou alebo atómom halogénu, a jej farmaceutický prijatelné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO-A-01/60835 popisuje zlúčeninu obecného vzorca I

kde znamená

R¹ atóm vodíka, skupinu Ci-C_s alkylovú alebo C₃-C₇ cykloalkylovú poprípade substituované jedným alebo dvomi substituentami na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu hydroxylovú, fluórenylovú, fenylovú a naftylovú, pričom skupiny fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C_s alkylovou, Ci-C_s alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou,

A väzbu alebo skupinu Οχ-Cg aikylenovú,

R² (i) atóm vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú alebo naftylovú, pričom skupiny C₃-C₇ cykloalkylové, fenylová a naftylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C₆ alkylovou, fenylovou, Ci-C₆ alkoxy ÍCrCj alkylovou, amino (Cx-C₆) -alkylovou, .uor (CiCl ) al kýlovou, fluór {C]_-C₆) al koxy skupinou, skupinou C₂-C₅ alkanoylovou, kyanoskupinou, -3 (O) „R⁴, -NR³COR⁴ alebo atornom skupinou halogénu, s Kucinou

-COOR³, C3-C7 cykloalkylovou,

-NR³R³,

SO²NR³R³

-NR³SO₂R⁴, za podmienky, že neznamená atóm vodíka, pokiaľ A znamená väzbu, alebo (ii) ak znamená A skupinu C₂-C_s alkylénovú, znamená skupinu

NR³ R³,

-OR³,

-COOR , ,3,

-OCOR ,

-S0₂R⁴,

-CN,

-SO₂NR³R³, -NR³SO₂R⁴, -NR³COR⁴ alebo -CONR³R³, alebo _ii)C-viazanú štvorčlennú až jedenásťčlennú, monocyklickú alebo bicyklickú, héterocyklickú skupinu buď s 1 až 4 atómami dusíka v kruhu alebo s 1 alebo se 2 atómami dusíka asi atómom kyslíka alebo s 1 atómom síry, poprípade substituovanú na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho oxoskupinu, skupinu Ci-C_e alkoxy(CjC₆) alkylovú, amino (0_χ-0₆) alkylovú, fluór (Cx-Cg) alkylovú, fluór (Ci-C₆) alkoxyskupinu, skupinu fluór (C₂-C₅) alkanoylovú, aróm halogénu, kyanoskupinu, skupinu -OR⁵,

-R⁶, -COR⁵, -NR⁵SO₂R^s a

-NR⁵R⁵, -COOR⁵, -S(O)nR^b, -SO2NR⁵R⁵, -C0NR⁵R⁵,

NR COR a poprípade substituovanú na atóme dusíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Cx-C₆ alkoxy (Cx-Cs) alkylovú, amino (C₂-C₆) alkylovú, fluór(Cx-C_s) alkylovú, fluór (C₂-C₅) alkanovlovú, -R⁶, -COR⁵, -COOR⁵, -SO2R⁵, -S02NR⁵R^s a -CONR⁵R⁵, alebo s kupinu dusíka

C₂-C₆ alkylénovú, viazanú skupinu (iv) pokiaľ znamená A prostredníctvom atómu azetidinylovú, pyrrolidinylovú, morfolinylovú, tetrahydroizochinolinylovú, piperidinylovú alebo piperazfnylovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme uhlíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu

Cx-C₆ alkylovú, fenylovú, 0χ-0₅ alkoxy (Cx~C₆) alkylovú, amino (Cx-Cg) alkylovú, fluór (Cx-C_s) alkovú, f luór í Ci-C₆) alkoxyskupinu, skupinu (C₂-C₅) alkanovlovú, atóm. halogénu, skupinu -OR³, kyanoskupinu, -COOR³, C3-C7 cykloalkylovú, S(O)nR⁴, -NR³R³, -SO2NR³R³, -CONR³R³, -NR³COR⁴ a -NR³SO2R⁴ a skupina piperazinylová je poprípade substituovaná na atóme dusíka skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Cľ-Cs alkylovú, fenylovú, Ci-Cg alkoxy (C₃-Cg) alkylovú, amino (C₂-C_s) alkylovú, fluór-(Ci-Cg) alkylovú, 0₂-C₅ alkanoylovú, -COOR⁴, C3-C7 cykloalkylovú, -SO2R⁴, -SO2NR³R³ a -CONR³R³,

R³ vždy na sebe nezávisle atóm vodíka, skupinu Ci-C_s alkylovú, fenylovú alebo pyridinylovú,

R⁴ skupinu Ci-Cg alkylovú, alebo fenylovú

R⁵ atóm vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het,

R⁶ skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú alebo het, m 0, 1 alebo 2,

R⁷ atóm vodíka, skupinu Ci~C_s alkylovú, C₃-C₇ cykloalkylovú, fenylovú, naftylovú, azetidín-3-ylovú, pyrrolidín-3-ylovú, piperidín-3-ylovú, piperidín-4-ylovú alebo het, pričom skupiny azetídín-3-ylová, pyrrolidín-3-ylová, piperidín-3yiová, píperidín-4-ylová sú poprípade substituované skupinou Ci-Cg alkylovou,

R³ atóm vodíka alebo skupinu Ci-Cg alkylovú a het ako význam R⁵, R⁶ a R⁷ prostredníctvom atómu C viazanú skupinu pyrrolylovú, imidazolylovú, tríazolylovú, tienylovú, furylovú, tiazolylovú, oxazolylovú, tiadiazolylovú, oxa24 diazolylovú, pyridinylovú, pyrimidinylovú, pyridazinylovú, prazinylovú, chinolir.ylovú, i zochinolinylovú, benzimidazoiylovú, chinazolinylovú, ftalazinylovú, benzoxazolylovú alebo chinoxalinylovú, pričom je každá táto skupina poprípade substituovaná skupinou Cd-Cg alkylovou,. Cd-C_£ alkoxyskupínou, kvanoskupinou alebo atómom, halogénu, a jej farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Svetový patentový spis obecného vzorca I číslo WO-A-02/00676 popisuje zlúčeninu

kde znamená

R¹ (i) atóm vodíka, (ii) skupinu Ci-C₆ alkylovú poprípade substituovanú jedným alebo dvomi substituentamí na sebe nezávisle volenými zo súboru zahrnujúceho skupinu fenylovú, naftylovú a fluórenylovú, pričom skupiny fenylová, naftylová a fluórenylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C₆ alkylovou, Cd-C₆ alkoxyskupínou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, alebo (iii) skupinu fluórenylovú,

R^z atóm vodíka alebo skupinu Cj-Cg alkylovú,

R³ a R⁴ spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, znamenajú skupinu azetidinylovú, pyrrolidinylovú, piperidinylovú, piperazinylovú, homopiperidinylovú, homopiperaziínyiovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme dusíka alebo uhlíka, kruhu skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C_a cykloalkylovú, a poprípade na atóme uhlíka kruhu, nepriliehajúeemu k atómu dusíka kruhu skupinou -NR^SR⁷ alebo -OR⁹, alebo znamená

R³

atóm vodíka	alebo skupinu	C1-C5 alkylovú,	c3-c,
cykloalkylovú	alebo benzylovú,	pričom skupina	Cx-C.
alkylová je	poprípade substi	tuovaná skupinou	c3-c;
cykloalky1ovou	a

R⁴ (a) skupinu Ci-C₆ alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú alebo R¹⁵, pričom skupina Ci-C_s alkylová je poprípade substituovaná skupinou R¹⁵, alebo (b) skupinu - (C₂-C₆) alkylén)-R⁸ alebo (c) skupinu -( Ci-C₆) alkylén) -R¹³,

R⁵ skupinu -CH₂OH alebo -CONR¹⁴R¹⁴,

R⁵ a R⁷ na sebe nezávisle atóme vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú alebo spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, skupinu azetidinylovú, pyrrolidinylovú alebo piperidinylovú, pričom skupiny azetidinylová, pyrrolidinylová a piperidinylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C₆ alkylovú,

R⁸ (i) skupinu azetidín-l-ylovú, pyrrolidín-l-ylovú, piperidín1-ylovú, morfolín-4-ylovú, piperazín-l-ylovú, homopiperidín-l-ylovú, homopiperazín-l-ylovú alebo tetrahydroizoochinolíin-l-ylovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná na atóme uhlíka kruhu skupinou 0-0 alkylovou, C₃-C_s cykloalkylovou, fenylovou,

0-C_s alkoxy (Ci - C₆) alkylovou, R⁹R⁹N- (0-0) alkylovou, f luór (0-0) alkylovou, -CONR^SR⁹, a 1 kar.cylovou, a poprípade subsrituovan kruhu neoriliehajúcerau k atómu dusíka } alkoxyskupinou, atómom halogénu, kyanoskupinou, skupinou ľOOR⁹ alebo 0-0 11 a a r ome u n 1 r k a

U- f 1 ilí'vr t r. _ o.o NR COR alebo -NR⁹SO₂R¹⁰ skupinou -GR , /~i í \ t—> — 0 ->, τ t-) 91—. 9 z—i /-s >T) 9 9 o (O, _mK _t -i\R m , - £>O2NR k , a skupina piperazín-l-ylová a homopiperazín-l-ylová je poprípade substituovaná na atóme dusíka neviazaného na C₂-C₆ alkylénovú skupinu, skupinou 0_χ-0₆ alkylovou, fenylovou, Ci-C_salkoxy (0-C₆)alkylovou, R⁹R⁹N-(C₂-C_s) alkylovou, f luór (Ο₃-0) alkylovou,

9_π9

C₂-C₅ alkanoylovou, -COOR^iU, 0-C₃ cykloalkylovou,

S(O)₂R¹⁰, -SOsNR^R* alebo -CNR^aR^a, alebo (ii)

-NR^UR¹²,

R9	atóm vodíka, skupinu Oi-Cs alkylovú, C3-C8 fenylovú,	cykloalkylovú alebo
R10	skupinu Cr-Cg alkylovú, C3-C8 cykloalkylovú	alebo fenylovú,
R11	skupinu θ!-θ6 alkylovú, C3-C8 cykloalkylovú	alebo benzylovú,

R¹² skupinu Ci-Cs alkylovú, C3-C8 cykloalkylovú, fenylovú, benzylovú, f luór (Ci-CJ alkylovú, -CONR⁹R⁹, -COOR¹⁰, -COR¹⁰, SO²R¹⁰ alebo -SO2NR⁹R⁹, pričom skupina 0-C_s alkylová je poprípade substituovaná fenylovou skupinou, skupinu fenylovú, pyridín-2-ylovú, pyridín-é-ylovú, ktoré sú poprípade Ci-C₆ alkylovou, 0-0 alkoxyskupinou, kyanoskupinou, pyridín-3-ylovú alebo substituované skupinou atómom halogénu alebo

R¹⁴ atóm vodíka, skupinu Cx-C₆ alkylovú poprípade substituovanú skupinou cyklopropylovou,

R¹⁵ skupinu azetidíη-3-ylovú, pyrnciidiη-3-ylovú, piperidín-3ylovú, piperidín-4-ylovú, homopiperidín-3-ylovú alebo homopiperidín-4-ylovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná skupinou R¹³, Cj-Cg alkylovou, C₃-C_B cykloalkylovou alebo benzylovou, m 0, 1 alebo 2,

X skupinu -CH₂-, alebo -CH₂-CH₂- a

Y skupinu CO, CS, SO₂ alebo C=N(CN), a jej farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Svetový patentový spis číslo WO-A-Ol/94368 popisuje zlúčeninu obecného vzorca I

,15

R² R³ \_r4 (I) kde znamena

R¹ atóm vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú alebo fluorenylovú, pričom je skupina Ci~C₆ alkylová poprípade substituovaná jedným alebo dvomi substituentami na sebe nezávisle volenými zo úboru zahrnujúceho skupinu fenylovú, naftylovú a skupiny fenylová naftylová su poprípade substituované skupinou

C;-C_s alkylovou, Cý-C₆ alkoxyskupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou,

ÍA) atóm vodíka alebo skupinu C-i-Cg alkylovú,

R^x5 atóm vodíka alebo skupinu Ci-Cg alkylovú a

X (i) buď nerozvetvená skupinu C₂-C₃ alkylénovú poprípade substituovanú skupinou Ci-C_s alkylovou alebo Ci-C₆ cykloalkylovou alebo (ii) skupinu vzorca. - (CH₂) _n-W- (CH₂) _p, kde znamená

W skupinu C5-C7 cykloalkylénovú poprípade substituovanú skupinou Ci~C_s alkylovou, n 0 alebo 1 a p 0 alebo 1 alebo (B) R¹⁵ atóm vodíka alebo skupinu Ci-C₆ alkylovú a

R² a X spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, skupinu azetidín-3-ylovú, pyrrolidín-3-ylovú, piperidín-3-ylovú, oiperidín-4-ylovú, homopiperidín-3-ylovú alebo homopiperídín-4-ylovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná skupinou Ci.-C_s alkylovou, alebo (C) R² atóm vodíka alebo skupinu Cý-Cg alkylovú,

R¹⁵ a X spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, skupinu azetidín-3-ylovú, pyrrolidín-3-ylovú, piperidín-3-ylovú, piperidín-4-ylovú, homopiperidín-3-ylovú alebo homopiperidín-i-vlovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná skupinou Ci-Cs alkylovou, alebo

R³ a R⁴ spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, znamenajú skupinu azetidínylovú, pyrrolidínylovú, piperidínylovú, piperazínyiovú, homopiperidínylovú, homopiperazínylovú, ktoré sú poprípade substituované na atóme dusíka alebo uhlíka kruhu skupinou zo súboru zahrnujúceho skupinu Ch-Cg alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú, a poprípade na atóme uhlíka kruhu, nepriliehajúcemu k atómu dusíka kruhu skupinou -NR^SR⁷, alebo znamená

R³ atóm vodíka alebo skupinu Ci.-C₆ alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú alebo benzylovú, a

R⁴ a) skupinu azetidín-3-ylovú, pyrrolidín-3-ylovú, piperidín3-ylovú, piperidín-4-ylovú, homopiperidín-3-ylovú alebo homopiperidín-4-ylovú pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná skupinou Ci-C₆ alkylovou, C₃-C₈ cykloalkylovou, fenylovou, benzylovou alebo het, alebo (b) skupinu - (C₂-C₆) alkylén) -R⁸, (c) skupinu - (Ci-Cg) alkylén)-R¹³ alebo (d) skupinu Ci-C₆ alkylovú alebo C₃-C₈ cykloalkylovú,

R⁵ skupinu -CH₂OH alebo -CONR¹⁴R¹⁴,

R⁶ a R⁷ na sebe nezávisle atóm vodíka, skupinu Ci-C₆ alkylovú alebo spolu s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, skupinu azetídinylovú, pyrrolidinylovú alebo piperidinylovú, pričom skupiny azetidinylová, pyrrolidinylová a piperidiínylová sú poprípade substituované skupinou Ci-C_s alkylovou,

R⁸ (i) skupinu azetidín-l-ylovú, pyrrolidín-l-ylovú, piperidín1-ylovú, morfolín-4-ylovú, piperazín-l-ylovú, homopiperidín-l-ylovú homopiperazín-l-ylovú alebo tetrahydroizochinolín-l-ylovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná na atóme uhlíka kruhu skupinou Ci-Cg alkylovou, C3-C8 cykloalkylovou, fenylovou, Ci-C6 alkoxy (Ci-Cg) alkylovou, -R⁹R⁹N- (Ci-Cg) alkylovou, fluór (Ci-Cg) alkylovou, -CONR⁹R⁹, -COOR⁹ alebo C2-C₅ alkanoylovou, a poprípade substituovaná na atóme uhlíka kruhu nepriliehajúcemu k atómu dusíka kruhu fluór(C^-Cg)alkoxyskupinou, atómom halogénu, skupinou -OR⁹, kyanoskupinou, skupinou -S(O)mR¹⁰, -NR⁹R⁹, -SO2NR⁹R⁹,

NR⁹COR¹⁰ alebo -NR⁹SO₂R¹⁰ a skupina piperazín-l-ylová a honopiperazín-l-ylová je poprípade substituovaná na aróme dusíka neviazaného na C₂-C₆ alkylénovú skupinu, skupinou Ci-C; alkylovou, fenylovou, Cp-Cg alkoxyÍC₂-C₆) alkylovou, -RkR⁹N- (C2-C5) alkylovou, fluór !Ch-Cs) alkylovou, C2-C5 alkancylovou, -COOR¹⁰, C3-C₈ cyní oalkylovou, -S(O)₂R^1C, -SO₂NR⁹R⁹, alebo -CONR⁹R⁹, alebo (ii) -NR¹⁴R¹²,

R⁹ atóm vodíka, skupinu Ο_χ-Ο₆ alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R¹⁰ skupinu Ci-Cg alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú alebo fenylovú,

R¹¹ atóm vodíka, skupinu Ci-C_s alkylovú, C₃-C₈ cykloalkylovú alebo benzylovú,

R¹² atóm vodíka, skupinu Ci-C6 alkylovú, C3-C8 cykloalkylovú, fenylovú, benzylovú, f luór (Οχ-Cg) alkylovú, -CONR⁹R⁹, -COOR¹⁰, C2-C₅ alkanoylovú alebo -SO₂NR⁹R⁹,

R“³ a) skupinu fenylovú, pyridín-2-ylovú, pyridín-3-ylovú alebo pyridín-4-ylovú, ktoré sú poprípade substituované skupinou -Ci-C_s alkylovou, -Ο].-Ο₆ alkoxyskupinou,-(Ci~C₃ aikylén)-(C!-C_s alkoxyskupinou), atómom halogénu, kyanoskupinou, - (C1-C3 alkylén)kyanoskupinou, skupinou CO₂H, - (Ci-C₃ alkylén)-CO₂K, -CO₂(Ci-C_s alkylovou), - (Ci-C₃ alkylén)-CO₂ (CR-Cs alkylovou), - (Ο₃-Ο₃ alkylén)-NR¹⁴R¹⁴, CONR¹⁴R¹⁴ alebo - (Ο₃-Ο₃ alkylén) -CONR¹⁴R¹⁴ alebo znamená (b) skupinu azetidíη-2-ylovú, azetidíη-3-ylovú, pyrrolidín-2 ylovú, pyrrolidín-3-ylovú, piperidín-2-ylovú, piperidín3-ylovú, piperidín-4-ylovú, homopiperidín-2-ylcvú, nomopiperidín-3-ylovú alebo homopiperidín-4-ylovú, pričom každá táto skupina je poprípade substituovaná skupinou

Cx-Cg alkylovou, C₃-C₈ cykloalkylovou, fenylovou, benzylovou, alebo het,

R¹⁴ atóm vodíka, skupinu Cx-C₆ alkylovú poprípade substituovanou skupinou cyklopropylovou, m 0, 1 alebo 2,

Y skupinu CO, CS, SO₂ alebo C=N(CN), het ako význam R⁴ a R¹³ prostredníctvom atómu C viazanú štvorčlennú až šestičlennú héterocyklickú skupinu buď s 1 až 4 atómami dusíka ako heteroatómy kruhu alebo s 1 alebo 2 atómami dusíka asi atómom kyslíka alebo s 1 atómom síry ako heteroatómy v kruhu poprípade substituovanú skupinou Cx~C₆ alkylovou, C₃-Cg cykloalkylovou, Cx-C₆ alkoxyskupinou, C₃-C₈ cykloalkoxyskúpinou, skupinou hydroxylovou, oxoskupinou alebo atómom halogénu, a jej farmaceutický prijatelné soli a solváty.

Ako výhodní selektívni agonisti adenosín A_2a-receptora pre použitie podľa vynálezu sa uvádzajú:

N-({9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(metoxymetyl)tetrahydro-2furanyl]-6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9H-puríη-2-yl}metyl) -2-metyl1-propansulfonamid (príklad 15 spisu WO-A-OO/23457) ;

cis-(2R,3R,4S,5R)-2 - (6 - [(2,2-difenyletyl)amino] -2 - { [(4-izopropylcyklohexyl)amino]metyl}-9H-purín-9-yl) -5-(metoxymetyl)tetra-hydro3,4-furandiol a trans-(2R,3R,4S,5R)-2-(6-[(2-difenyletyl)amino] -2{ [(4-izopropylcyklohexyl)amino]metyl]-9H-purín-9-yl)-5-(metoxymetyl )tetrahydro-3,4 - furandiol (príklad 17 spisu WO-A-OO/23457);

N- (<, 9 - ί (2R,3R,4S,5R) - 3,4 -dihydroxy-5 - (hydroxymetyl) tetrahydro - 2 furanyl]-6-((2,2-difenyletyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)-2-metyl

1-propansulŕonamid (príklad í spisu WO-A-01/2713C) ;

(2S,3S,4R,5R)-5 - (6- [ (2,2-difenyletyl)amino]- 2 -{ [ (i zopropyl-sulfo nyl)amino]metyl}-9H-purín-9-yl)-N-etyl-3,4-dihydroxy-tetrahydrofurankarboxamid (príklad 3 spisu WO-A-Ol/27131);

9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5 -(hydroxymetyl)tetrahydro-2-fúra nylj-6-[(2,2-difenyletyl)amino]-N-[2-(1-piperidínyl)etyl]-9Hpurín-2-karboxamid (príklad 1 spisu WO-A-OO/77018) ;

-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{(2R,3R,4S,5S) - 5-[(etylamino)karbonyl ] - 3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-[2 - í 1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karboxamid (príklad 1 spisu WO-A-01/60835);

N-({9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5 -(hydroxymetyl)tetrahydro-2furanyl]-6-[ (2,2-difenyletyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)-N'-[2(diizopropylamino)etyl]močovina (príklad 1 spisu WO-A-02/00676) ; a

6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{(2R,3R,4S,5S) - 5-[(etylamino)-karbo nyl] - 3 ,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 - [({ [1- (2-pyridinyl) 4-piperidinyl]amino}karbonyl)amino]etyl}-9H-purín-2-karboxamid (príklad 8 a 35 spisu WO-A-Ol/94368) ;

a ich farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Ako obzvlášť výhodní selektívni agonisti adenosín receptora pre použitie podlá vynálezu sa uvádzajú:

9- [(2R,3R,4S,5R)-3,4 -dihydroxy-5 -(hydroxymetyl) tetrahydro-2 -furanyl ] - 6- ľ(2,2-difenyletyl)amino]-N-[2 -(1-piperidinyl)etylj -9H-purín-2-karboxamid a 6- [ (2,2-difenvletyl)amino]-9 - { (2R,3R,-4S,5S)-5[(etylamino)karbonylJ-3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 [(([1 -(2-pyridinyl)-4-piperidinyl]amino}karbonyl)amino]-etyl} - 9Hpurín-2-karboxamid a ich farmaceutický prijatelné soli a solváty. Najvýhodnejší je 6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{(2R,3R,4S,5S)-5[(etylamino)karbonyl]-3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 [({ [1-(2-pyridinyl)-4-piperidinyl]amino}karbonyl) -amino]etyl}-9Hpurín-2-karboxamid a jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty.

Akc> vhodné anticholinergické činidlá pre použitie podlá vynálezu sa uvádzajú ipratropiové a oxítropiové soli a ich solváty.

Tiopropiová sol (evropský patentový spis číslo EP 418716 Bl) má obecný vzorec 1.1

kde znamená X-fyziologícky prijateľný anión.

'pratropiová sol (evropský patentový spis

EP ,3094 6i bi,’· ma ooecny v .

kde znamená X-fyziologicky prijateľný anión.

Oxitropiová soľ (evropský patentový spis číslo EP 579615 BI) má obecný vzorec 1.3

kde znamená X-fyziologicky prijateľný anión.

Ako príklady vhodných foriem ipratropiovej a oxitropiovej soli sa uvádzajú fluorid, F-; chlorid, C1-; brómid Br-; jódid, J-; mecansulfonát, CH₃S(=O)₂O-; etansuifonát, CH₃CH₂S(=0)₂O-; mecylsulfát, CH₃OS (=0) ₂0-; benzénsulfonát, C₆H₅S (=0)₂0-; a ptoluénsulfonát, 4-CH₃-C₆H₅S (=0)₂0-. Výhodná soľ je brómid.

Ako výhodné špecifické kombinácie selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla podlá vynálezu sa uvádzajú:

9-[(2R, 3R, 4S, 5R)-3,4-díhyaroxy-5 -(hydroxymetyl) tetrahydro-2-furanyl ]-6 - [ (2,2-difenyletyl)amino]-N-[2 -(1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karboxamid jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty a ipratropiová sol alebo jej solvát;

- [ (2,2-difenyletyl)amino]-9-{(2R,3R,4S,5S) - 5-[(etylamino)-karbonyl] - 3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 -[({[1-(2-pyridinyl)4-piperidinyl]amino}karbonyl)amino]etyl}-9H-purín-2-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijatelné soli a solváty a ipratropiová sol alebo jej solvát;

9- [ (2R, 3R, 4S , 5R) -3,4-dihydroxy-5- (hydroxymetyl) tetrahyd.ro-2-f uranyl] -5-[(2,2-difenyletyl)amino]-N-[2 -(1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karboxamid jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty a oxitropiová soľ alebo jej solvát;

6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{(2R,3R, 4S, 5S)-5-[(etylamino)-karbonyl] -3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 -[({[1-(2-pyridinyl)4-piperidinyl]amino}karbonyl)amino]etyl}-9H-purín-2-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijatelné soli a solváty a oxitropiová sol alebo jej solvát;

Selektívni agonisti adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo, používané podľa vynálezu, sa môžu používať vo forme farmaceutický prijateľných solí alebo solvátov. Takými sólami môžu byť adičné solí s kyselinou alebo zásadité soli.

Vhodné adičné soli s kyselinou sa pripravujú z kyselín, ktoré vytvárajú netoxické soli a ako príklady takých solí sa uvádzajú hydrochlóridová, hydrobrómidová, hydrojódidová, sulfátová, h y ci r o g é n s u 1 f á t o v á, t o v a _r s a c n a r a i o v ú , b e r: z é n s u 1 f o n á r, o v á, tartrátová, citrátová, glukonátová, sukcinábenzoátová, metansulfonétová, etansulfonátová, o-toluénsulfcnátová a pamoátová soľ.

Vhodné soli zásad, sa pripravujú zo zásad, ktoré vytvárajú netoxické soli a ako príklady takých soli sa uvádzajú soli sodné, draselné, hlinité, vápenaté, horečnaté, zinočnaté a dietynolaminové.

Prehiady vnodrých Berge a kol., J. Pharm.

solí sa uvádzajú v literatúre Sci. 66, str. 1 až 19, 1977).

(napríklad

Ako farmaceutický p adenosín A_2a receptora a podľa vynálezu, alebo ich rijateľné solváty selektívneho anticholinergického činidla, soli sa uvádzajú hydráty.

agonistu používané

Selektívni agonisti adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlá môžu byť v jednej alebo v niekoľkých polymorfných formách.

Selektívni agonisti adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlá môžu mať jeden alebo niekoľko asymetrických atómov uhlíka, a preto môžu byť vo dvoch alebo v niekoľkých stereoizomerných formách. Pokial taká zlúčenina obsahuje skupinu alkenylovú alebo alkenylenovú, môže existovať tiež cis/trans (alebo E/Z) izomerizmus. Vynález sa týka všetkých jednotlivých stereoizomérov zlúčenín podľa vynálezu a poprípade ich jednotlivých tautomerných foriem spolu s ich zmesami.

Delenie stereoizomérov alebo cis a trans izomérov je možné o sebe známymi spôsobmi, napríklad frakčnou kryštalizáciou, chromatografiou alebo· H.P.L.C. stereoizomérnou zmesou zlúčeniny podľa vynálezu alebo jeho vhodného derivátu. Jednotlivý enantiomér zlúčeniny podľa vynálezu sa tiež môže pripraviť z odpovedajúceho opticky čistého medziproduktu alebo šciepením, napríklad H.P.L.C., odpovedajúceho racemátu pri použití vhodného chirálneho nosiča alebo frakčnej kryštalizácie diastereomerných solí vytvorených poprípade reakciou odpovedajúceho racemátu s vhodnou opticky aktívnou kyselinou alebo zásadou.

Vynález zahrnuje tiež všetky vhodné izotopické varianty zlúčeniny podľa vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľné soli. Izotopickou variantou zlúčeniny podlá vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnou soľou sa mieni varianta, v ktorej je aspoň jeden atóm uhlíka nahradený atómom majúcim to isté atómové číslo avšak inú atómovú hmotnosť odlišnú od atómovej hmotnosti bežnej v prírode. Príklady izotopov, ktoré je možné začleniť do zlúčenín podlá vynálezu alebo do ich farmaceutický prijatelných solí, zahrnujú izotopy vodíka, uhlíka, dusíka, kyslíka, fosforu, síry, fluóru a chlóru, ako sú ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F a ³⁶C1. Určité izotopové varianty zlúčenín podľa vynálezu alebo ich farmaceutický prijateľných solí, napríklad varianty, v ktorých je začlenený rádioaktívny izotop ³H alebo ¹⁴C, sú užitočné v droge a/alebo pre štúdie rozptýlenia drogy v substrátovom tkanive. Tritiované izotopy, to je ³H, a uhlík-14, to je ^l4C, sú obzvlášť výhodné pre svoju ľahkú pripraviťelnosť a stanovitelnosť. Substitúcie izotopov, ako je deuteriuu, to je ²H, môžu poskytovať určité terapeutické prednosti plynúce z väčšej metabolickej stability, napríklad pre zvýšenie in vivo polčasu alebo pre možnosť použitia menších dávok, a tým je v niektorých prípadoch výhodná.

Typy chorôb, ktoré je možné ošetrovať kombináciou podľa vynálezu, sú príkladne, teda bez zámeru na akomkoľvek obmedzení, astma, chronická alebo akútna bronchokonštrikcia, chronická bronchitída, malá obštrukcia dýchacích ciest, empysema, chronické obštruktívne pľúcne ochorenie (COPD) , COPD majúce chronickú bronchitídu, pľúcna empysema alebo dusnosť s nimi spojená a COPD, charaktrizovaná ireverzibilnou, progresívnou obštrukciou dýchacích ciest .

Astma

Jednou z najvýznamnejších dýchacích porúch, liečiteľných kombináciou terapeutických činidiel podľa vynálezu, je astma, čo je chronické, zväčšujúce sa mierou v celom svete vyskytujúce ochorenie, charakterizované prerušovanou vratnou obštrukciou dýchacích ciest, dýchacou precitlivelosťou a zápalom. Príčina astmy nebola doposiaľ zistená, avšak najčastejším prejavom astmy je zápal dýchacích ciest, ktorý môže byť významný i v dýchacích cestách pacientov s miernou astmou. Tento zápal vyvolává reflexné dýchacie príhody, ktoré vedú k výronu plazmového proteínu do okolných tkanív, dusnosť a zúženie priedušiek. Na základe štúdií bronchiálnej bicpsie a výplachov bolo zreteľne dokázané, že astma zahrnuje infiltráciu kmeňových buniek, eozínofilov a T-lymŕocytov do pacientových dýchacích ciest. Bronchoalveolárny výplach (BAL) u atooických astmatikov ukazuje aktiváciu Interleukínu (IL)-3, IL4, IL-5 a stimulačného faktoru granulocyt/makrofágová kolónia (GMCSF) , ktorý naznačuje prítomnosť populácie T-buniek podobných buniek označovaných ako T-pomocníkové bunky (T-helper, Th-2)). 2 (Th-2).

Kombinácia zerapeutických činidiel podľa vynálezu sa hodí na liečenie atopickej i neatopickej astmy. Výraz atopický sa týka genetickej predispczície na rozvinutie hypersenzitívnvch reakcií typu I (bezprostredných) proti bežným antigénom prostredia. Najobvyklejším klinickým prejavom je alergická nádcha, zatiaľ čo bronchiálna astma, atopická dermatitída a alergia na stravu sa vyskytujú menej často. Podľa toho je výrazom atopická astma tu mienené synor.ýmne označenie alergická astma, teda bronchiálna astma, ktorá je alergickým prejavom: u senzitízovane j osoby. Tu použité označenie neatopická astma má znamenať všetky ostatné druhy astmy, obzvlášť význačnej alebo pravej astmy, ktorá je vyvolávaná rozmanitými faktormi, vrátane prudkého cvičenia, dráždivých častíc, psychlogických stresov a podobne.

Slokovacia choroba dýchacích ciest COPD

Kombinácia terapeutických činidel podľa vynálezu sa hodí na liečenie COPD alebo COAD vrátane chronickej bronchitídy alebo s ňou súvisiace rozdutie pľúc (pulmonárna empysema) alebo dusnosti (dyspnea). COPD je charakterizovaná zle vratnou progresívnou obštrukciou dýchacích ciest. Chronická bronchitída je spojená s hyperplaziou a hypertrofiou mukóznych žliaz submukóz vo velkých chrupkovitých dýchacích cestách. Pohárovitá bunečná hyperplazia, mukózna a submukózna zápalová bunečná infiltrácia, otoky, fibróza, hlenová zátka a zväčšené hladké svalstvo sa vždy vyskytujú v koncových a respirátorných bronchiolách. Je známe, že priedušinky sú hlavným miestom obštrukcie dýchacích ciest. Rozdutie pľúc je charakterizované deštrukciou alveoárnych stien a stratou pružnosti plúc. Rada rizikových faktorov bola tiež definovaná ako súvisiaca s COPD. Dobre známa je väzba medzi fajčením tabaku a COPD. Ako iné rizikové faktory sa uvádzajú expozície uholnému prachu a rôzne genetické faktory (Sandford a kol., Genetic risk factors for chronic obstructive pulmonary disease, Eur. Respir. J. 10, str. 1380 až 1391, 997). Výskyt COPD vzrastá a predstavuje významné ekonomické zaťaženie spoločnosti v industralizovaných zemiach. COPD sa prejavuje tiež klinicky v širokej rozmanitosti od jednoduchej chronickej bronchitídy bez neschopnosti až k pacientom so silne neschopným stavom s chronickou dýchacou poruchou.

COPD je charakterizovaná zápalom dýchacích ciest, ako v prípade astma, avšak v zápalových bunkách, ktoré boli nájdené v bronchoaveolárnom výplachu a v spute pacientov, sú neurofily a makrofágy skôr než eozínofily. Zvýšené hladiny zápalových nediátorcv sa nachádzajú tiež u COPD pacientov, vrátane IL-8, LTB₄ a TKľ-oc a zistilo sa, že povrchový epitel a subepitel bronchov takých pacientov je infiltrovaný l'-lymfocytami a makrofágni. áymfsvat i oký profil COPD pacientov nože byť získaný použitím βaoonistu a anticholinergických bronchodilátorov, avšak postuo caoroby zostáva nezmenený. COPD bola liečená teofiiínom, avšak bez veikého úspechu v dôsledku výskytu nežiadúcich účinkov. Steroidy tiež zlyhali ako príslub úspéšných, liekov COPD, pretože sú pomerne neúčinné ako protizápalové činidlá.

Preto predstavuje použitie kambinácie terapeutických činidiel podía vynálezu na ošetrovanie COPD a s ňou spojených obštrukčných chorôb dýchacích ciest významný pokrok stavu techniky. Vynález nie je viazaný na žiadny mechanizmus pôsobenia a na žiadnu hypotézu ako cesty, ktorou boli dosiahnuté žiadúce terapeutické zámery použitím kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu.

Bronchitída a bronchiektázia

V súvislosti so zvláštnymi a odlišnými zhora popísanými inhibičnými účinkami sa kombinácia terapeutických činidiel podľa vynálezu hodí na liečenie bronchitídy akéhokoľvek typu, etiológie alebo patogenézie, vrátane napríklad akútnej bronchitídy, ktorá má krátky, ale závažný priebeh a je spôsobená vystaveniu chladu, vdychovania dráždivých látok, alebo akútnej infekcie; katarovej bronchitídy, ktorá je formou akútnej bronchitídy s hojným vývinom hlenohnísavej hmoty; chronickej bronchitídy, ktorá je dlhodobou formou bronchitídy s viac alebo menej výrazným sklonom k opätovnému výskytu po stavoch ukludnenia vplyvom opakovaných záchvatov akútnej bronchitídy alebo chronických celkových ochorení, charakterizovaných záchvatmi kašľa s očakávaním miernych alebo hlbokých a sekundárnych zmien v plúcnom tkanive; suchej bronchitídy, ktorá je charakterizovaná miernou sekrécíou hustého spura; infekčnej astmatickej bronchitídy, ktorá je syndrómom vyznačeným vývojom príznakov bronchospazmu, po infekciách dýchacieho traktu u osôb s astmou; produktívnej bronchitídy, ktorá je bronchitídou spojenou s produktívnym kašľom.

Použitie kombinácií terapeutických činidiel pódia vynálezu na liečenie atopickej astmy alebo neatopickej astmy, COPD alebo iných, chronických zápalových chorôb dýchacích ciest môže byť dokázané a predvedené použitím rady rôznych modelov známych v obore inhibície reflexných príhod v dýchacích cestách vrátane plazmového extravazátu a bronchospazmolytických ďalej popísaných modelov.

Bronchodilatačné pôsobenie cAMP sa týka nielen relaxácie hladkého svalstva, ale vykonáva tiež celkový inhibičný vplyv na proliferácii hladkého svalstva dýchacích ciest, pričom obe pôsobenia môžu viesť k aktivácii receptorov A_2a zložkou podľa vynálezu. Hypertrofia a hyperplazia hladkého svaltva dýchacích ciest môže byť modulovaná cAMP a tieto stavy sú spoločnými morfologickými znakmi chronickej astmy.

Broncnospazmolytické pôsobenie in vitro

Schopnosť kombinácií terapeutických činidiel podlá vynálezu spôsobovať relaxáciu tracheálneho hladkého svalstva morčaťa je demonštrovaná následujúcim testom. Morčatá o hmotnosti 350 až 500 g sa usmrtia nátriumpentotalom (100 mg/kg živej hmotnosti). Trachea sa vyjme a nareže sa na kúsky v dĺžke 20 až 30 mm. Trachea sa rozreže v priečnej rovine v rôznych chrupkovitých plátkoch na získanie tkaninových prstencov v hrúbke 3 až 5 mm. Predné a zadné prstence sa vyhodia. Jednotlivé prstence sa pripútajú zvisle na nosiče z nerezavejúcej oceli, z ktorých jeden je upevnený na dne organového kúpeľa, zatial čo iný je pripevnený k izometrickému trsnsduceru- Prstence sa namočia do Krebsového roztoku (zloženie v μΜ: hydrogénuhličitan sodný 25; chlorid sodný 113; chlorid draselný 4,7; heptahydrát síranu horečnatého 1,2; kaliumbibydrogériŕosŕát i,2; chlorid vápenatý 2,5; glukóza 112,7) o r i t θ ό -i c/ í g 3 ľ ° C v z iľ>e s i k y s 1 i k n n oxidu u H1 i č i t é d o ( 9 5 5 objemové). Takto pripravené prsoence sa zmršťujú szímuláciou poľa. Na posúdenie spazmolytickej aktivity sa rozpustia testované kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu vo fyziologickej selanke a pridávajú sa v rastúcom množstve do orgánového kúpeľa v päťminútových intervaloch na získanie krivky účinku kumulatívnej koncentrácie.

V uvedenom skúšobnom modele inhibujú kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu polom stimulovanej kontrakcie tracheálnych morčatových prstencových preparátov pri kontrakciách v rozmedzí 0,001 až 1,0 μΜ.

Relaxácia ľudskej priedušnice

Vzorky ľudských pľúc, vyoperovaných behom chirurgického výkonu pri rakovine, sa získajú behom troch dní po vyjmutí. Priedušinky (so svetlosťou približne 2 až 5 mm) sa vyoperujú a rozrežú sa na segmenty a ponoria sa do 2 ml ampulí so suchým dusíkom naplnených zárodočným telacím sérom (FCS) obsahujúcim 1,8 M dimetylsulfoxidu (DMSO) a 0, IM sacharózy ako krvptotektínového sa umiestnia do polystyrolovej krabice a pomaly sa zmrazia strednou ochladzovacou rýchlosťou približne 0,6 °C za minútu v mrazáku, udržovanom na teplote -70 °C. Po 3 až 15 minutách sa ampule prenesú do tekutého dusíka (-196 °C), kde zostanú uložené až do použitia. Pred použitím sa tkanivá vystavia na 30 až 60 minút teplote -70 °C pred roztopením behom 2,5 minút vnorením ampulí do vodného kúpeia s teplotou 37 °C. Potom, sa bronchiálne segmenty opláchnu ponorením do misky obsahujúcej Krebs-Henseleitov roztok (μΜ: chiórid sodný činidla. Ampule (110x110x220 mm)

118; chlorid draselný 4,7; síran hotečnatý 1,2, chlorid vápenatý

2,2; kaliumdihydrogénfosfát 1,2; hydroaénuhličitan sodný 25;

glukóza 11; EDTA 0,03), rozrežú sa na prstence a zavesia sa v 10 ml orgánových kúpeľoch pre izomecrické napätie zaznamenávané pri predbežnom zaťažení približne 1 g. Ďalšie nárasty napätia sa vyvolajú aplikáciou poľnej stimulácie o ktorej je vyvoláva aktiváciu nervov vo vzorke dýchacej cesty napätie cestou uvoľňovania acetylcholína a ostatných nervove odvodených mediátorov. Krivky závislosti koncentrácia-odozva sa získajú kumulatívnymi prísadami, pričom každá koncentrácia sa pridá, keď bol dosiahnutý maximálny účinok predchádzajúcej koncentrácie. Ku koncu krivky závislosti koncentrácia-odozva sa pridá papaverín (300 μΜ) na vyvolanie úplnej relaxácie bronchiálnych prstencov. Tento efekt je považovaný za 100 % relaxáciu.

známe, ze a vyvolajú

V uvedenom testovacom móde]e vyvolávajú kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu na koncentráciu závislú relaxácii prstencov ľudskej priedušnice pri koncentráciách v rozmedzí 0,001 až 1,0 μΜ, pričom najvýhodnejšie uskutočnenie je aktívne pri koncentráciách v rozmedzí 5,0 nM až 500 nM.

Potlačenie bronchokonštrikcie vyvolanej capsaicínom

Samci Dunkin-Hartleyových morčiat (400 až 800 g) majúci voľný prístup k strave a vode pred pokusom, sa anestetizujú fenobarbitaiom sodným (100 mg/kg živej hmotnosti [intraperitoneálne] ) . Zvieratá, udržované pri teplote 37 °C na vyhrievanej podložke meranej rektálnym teplomerom, sa prevzdušňujú tracheálnou kanylou (približne 8 ml/kg, 1 Hz) zmesou vzduchu a kyslíka (objemové 45:55). Ventilácia sa sleduje na trachee pneumotachografom spojeným s diferenciálnym meničom tlaku lineárne zapojeným s respiračným ventilátorom. Zmeny tlaku v toraxe sa sledujú priamo cestou intratoálnej kanyly, pomocou diferenciálneho .aku ;k, že rozdiel tlaku medzi tracheou toraxom môž;

byť meraný o r i e t c k v z d l (R_lcIr.HO₂/l/s) a naly z á t o r om zaznamenávaný. Z týchto meraní sa vypočítavajú ha a transpulmonérr.y tlak, odpor dýchacej cesty súhlas (Cddyr.) digitálnym elektronickým respiračným 02ΓΘ kŕižciy Σό s p í 2ľ ä čn ý cyklus. Tiskov·/?· ľľčuičor? ss zaznamenáva tlak krvi a pulz z karotidovej artérie.

Keď sú hodnoty bazálneho odporu a súhlasu ustálené, vyvolá sa akútna príhoda bronchokonštrikcie intravenóznym bolusom capsaicína. Capsaicín sa rozpustí v 100 % etanole a zriedi sa fosfátom pufrovanou solankou. Testovacia kombinácia terapeutických činidiel podľa vynálezu sa podáva, keď je odozva na capsaicín ustálená, čo je podlá výpočtu po dvoch až troch takých podaniach v 10 minútových intervaloch. Návrat bronchokonštrikcie sa posudzuje behom jednej až ôsmich hodín pre incratracheálne tak pre intraduodenálne nakvapkanie alebo intravenóznu injekciu bolusa. Brencmospazmolytická aktivita sa vyjadruje ako percento inhibície počiatočného, maximálneho odporu (R_o) nasledujúceho po infúzii capsaicína. Hodnoty ED₅₀ predstavujú dávku, ktorá spôsobí 50 % zníženie nárastu odporu vyvolaného capsaicínom. Trvanie pôsobenia je definované ako doba v minútach, ked je bronchokonštrikcia znížená o 50 alebo viac percent. Účinky tlaku krvi (BP) a tepu (HR) sú charakterizované hodnotami ED₅₀, teda dávkami, ktoré znížia BP alebo HR o 20 %, merané päť minút po podaní.

V uvedenom testovacom modele kombinácie terapeutických činidiel podlá vynáiezu vyvolávajú bronchodilatorové pôsobenie pri dávkách v rozmedzí 0,001 až 0,1 mg/kg i.t. [intratracheálne] . Ďalej kombinácia podaná i. t. vyvoláva aspoň aditívny účinok na bronchospazmus, pričom každá zložka samotná je schopná inhibovať viac než 50 % pozorovanej kontrolnej odozvy.

LPS vyvolaná pľúcna neutrofília

Nábor a aktivácia neutrofilov v pľúcach sa považuje za významný patologický jav v COPD a v závažnej astme. Preto inhibície buď jedného alebo oboch týchto koncových bodov v živočíchoch poskytuje podporný dôkaz užitočnosti vynálezu.

Po krátkej všeobecnej anestézii sa predbežne ošetria samci krýs Wistar-Albino (150 až 250 g) alebo samci morčiat DunkinHartley (400 až 600 g) samotnými testovacími prostriedkami alebo kombináciou inhalácie alebo intratracheálnym (i.t.) vkapkávanim. Jednu až 24 hodín po podaní zlúčeniny sú zvieratá nútené k inhalácii aerosólu bakteriálneho liopolysacharidu (LPS) postačujúceho na vyvolanie behom 1 až 24 hodín výraznej pľúcnej neutrofílíe. Neutrofília sa posudzuje sčítaním buniek v bronchiálnych výteroch alebo stanovením neutrofílnych produktov v pľúcnom výplachu alebo v pľúcnom tkanive. V testovacom systéme m’kazujó terapeutické činidlá podľa vynálezu protizápalové pôsobenie v dávkach v rozmedzí 0,0001 až 0,1 mg/kg i. t. Neočekávane kombinácia dodanej i.t. vykonáva aspoň aditívny účinok na zápal, nezávisle na skutočnosti, že jedna zo zložiek sama o sebe nemá postačujúci protizápalový účinok. Ďalej je možné pozorovať rovnocenné proti zápalové pôsobenie vysokej dávky jednej zo zložiek s nižšími dávkami, ak je jedna zo zložiek použitá v kombinácii podľa vynálezu, a tak minimalizuje systemické nežiadúce účinky.

Test alergie u morčiat

Test vyhodnotenia terapeutického dopadu kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu na príznaky dusnosti a bronchospazmu, teda obtíažného alebo pracného dýchania a zvýšeného odporu v pľúcach a na príznak zápalu, teda pľúcnej neunrofílie a eozinofílie sa používajú morčatá Dunkin-Hartley (400 až 600 g nelesnej hmotnosti) .

Vaječný albumín (EA) druhu V, kryštalizovaný a lyofilizovaný, hydroxid hlinicý a mepyraminmaleét, použitých v tomto teste, sú obchodne dostupné. Vynútenie a následné dýohaooe číoanie sa uskutočnia v priesvitnej plastovej krabie: s vnútornými rozmermi 254x152,4x101,6 mm. Hlavová a telová sekcia krabice sú oddeliteľné. Pri použití sa oboje pevne drží svorkami a vzduchotesný uzáver medzi komorami zaručuje mäkké pryžové tesnenie. Stredom hlavovej komory je zavedený rozprašovač vzduchotesným tesnením a každý koniec krabice má výstup. Do jedného konca krabice je vložený pneumotachograf a je spojený s objemovo metrickým tlakovým meničom, ktorý je spojený s dynografom vhodnými spojkami. Pri aerosolovaní antigéna sú výstupy otvorené a pneumotachograf je od komory izolovaný. Výstupy sa potom uzavrú a pneumotachograf a komora sú spojené behom záznamu dýchacieho obrazca. Na vyvolanie sa do každého rozprašovača vnesú 2 ml 3 % roztoku antigénu v solanke a aerosol sa vytvorí prúdom vzduchu z malej membránovej pumpy pracujúcej s tlakom 69 kPa a s prietočnou rýchlosťou 8 1/min.

Morčatá sa senzitizujú subkutánne a i.p. 1 ml suspenzia obsahujúca 1 mg EA a 200P mg hydroxidu hlinitého v solanke. Použijú sa 12 až 24 dní po senzitizácii. Aby sa vylúčila histamínová zložka odozvy, sú morčatá predbežne ošetrené i. p. 30 minút ored vyvolaním aerosolom 2 mg/kg mepyramína. Potom sa morčatá vystavia pôsobeniu aerosólu 3 % EA v solanke presne minútu, potom sa behom ďalších 30 minút zaznamenávajú dýchacie profily. Následne sa po usmrtení v období 1 až 48 hodín stanoví zápal· pľúc. Trvanie priebežnej dusnosti sa mena z dýchacích záznamov.

Testové kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu sú obecne podávané i. t. alebo aerosolom 0,5 až 4 h pred vyvolaním. Kombinácia zlúčenín sa rozpustí buď v solanke alebo v biokomoatibilných rozpúšťadlách. Aktivita zlúčenín sa stanoví na báze buď schopností znižovať velkosť a trvania príznakov dusnosti a bronchospazmu a/alebo rozsahu zápalu pľúc v porovnaní so skupinou kontrol ošetrených iba nosičom. Testy kombinácií terapeutických činidiel podľa vynálezu sa vyhodnocujú na sériách dávok a odvodí sa ED_S0, ktorý je definovaný ako dávka (mg/kg), ktorá inhibuje z 50 % trvania príznakov.

Prozizápalové pôsobenie

Protizápalové pôsobenie kombinácií terapeutických činidiel podľa vynálezu je doložené inhibíciou eozinofílnej alebo neutrofílnej aktivácie. V tomto teste sa zhromaždia vzorky krvi od neatopických dobrovoľníkov s eozinofílným počtom od 0,06 až 0,47 xlO⁹ L-l. Cievna krv sa naplní do odstredivkových skúmaviek obsahujúcich 5 ml trizodiumcitrátu (3,8 %, hodnota pH 7,4).

Proti zrážanlivosti upravená krv sa zriedi (objemovo 1:1) fosfátom pufrovanou solankou (PBS, neobsahujúcou vápnik ani horčík) a nanesie sa na 15 ml izotonického Percollu (hustota v rozmedzí 1,082 až 1,085 g/ml, hodnota pH 7,4) v 50 ml odstredivkovej skúmavke. Po odstredení (30 minút lOOOxg, 20 °C) sa opatrne odsajú mononukleárne bunky na rozhraní plazma/Percoli a vyhodia sa.

Neutrofílna/eozinofílna/erytrocytová peleta (objemovo približne 5 ml) sa mierne resuspenduje v 35 ml izotonického roztoku chloridu amónneho (chlorid amónny 165 mM; hydrogénuhličitan draselný 10 mM; EDTA 0,1 mM; 0 až 4 °C) . Po 15 minútach sa bunky dvakrát premyjú (10 min, 400xg, 4 °C) v PBS obsahujúcom zárodočné teľacie sérum (2 %, FCS).

K oddeleniu eozínofilov a neutrofilov sa použije systém magnetickej separácie. Systém je schopný oddeliť bunky v suspenzii podlá povrchových markerov a má permanentný magnet, do ktorého je

umiestený stĺpec	obsahujúci magnetizovatelnú	oceľovú	ma tri s1 u.
Pred použitím sa	stĺpec vyváži	jednu hodinu	systémom	PBS/FCS,
opláchne sa ľadovo	studeným systémom P3S/FCS na	retrograc	(ovej oáze
2 0 m 1 i n i e k č n o u	striekačkou.	K podstave s	t s o c a s a	o r i o o j í
hypoder.mi c ká ihla	21G a . ihlou sa	i nechá o r ú d i t	1 až 2	ro , _L 2.;'1' 'h V ý
s t údený ou f e r.
Po odstredení	granulocytov,	sa supernatant	odsaje a	bunky sa
opatrne resuspendujú so 100 μΐ	magnetických	častíc (	anti-CDl6

monoklonálne protilátky napojené na superparamagnetické častice). Zmes magnetických častíc systému eozínofil/neutrofil/anti-CD16 sa inkubuje 40 minút na ľade a potom sa zriedi na 5 ml ľadovo studeným systémom PBS/FCS. Bunečná suspenzia sa zavedie na vrch stĺpca a uzáver sa otvorí k pomalému prúdeniu buniek do oceľovej matrice. Stĺpec sa potom premyje systémom PBS/FCS (35 ml), ktorý sa opatrne vnesie na vrch stĺpca tak, aby nenarušoval magneticky označené neutrofily už zachytené na oceľovej matrici. Neoznačené eozínofily sa zhromaždia v 50 ml odstredivkovej skúmavke a premyjú sa (10 minút, 400xg, 4 °C). Výsledná peleta sa resuspenduje v 5ml Bankovom vyváženom soľnom roztoku (HBSS) tak, že počty buniek a čistota sa môže posúdiť pred použitím. Separačný stĺpec sa vvjme z magnetu a neutrofílna frakcia sa eluuje. Tento stĺpec sa potom premyje PBS (50 ml) a etanolom (absolútnym) a uloží sa pri teplote 4 °C.

Všetky bunky sa spočítajú mikrobunečným čítacom. Kvapka lysogenického roztoku sa pridá do vzorky, ktorá sa po 30 sekundách znovu spočíta na posúdenie kontaminácie erytrocytami. Na Shandon Cytospin 2 cytospmneru sa pripraví cytospínový výter (100 pl vzorky, 3 minúty, otáčky 500/min). Tieto preparáty sa vyfarbia a ustanovia sa počty buniek svetelnou mikroskopiou, zaberajúcou aspoň 500 buniek. Pohyblivosť buniek sa posudzuje vylúčením trypanovej modrej.

Eozínofily a neutrofily se zriedia v HBSS a pipetou sa prenesú do 96-jamkovej mikotitračnej doštičky (MTP) pri 1 až lOxlO³ buniek na jamku. Každá jamka obsahuje 200 pl vzorky, obsahujúcej:

100' pi bunečnej suspenzie, 50 pl HBSS, 10 ul lucigenína, 20 ul aktivačného stimulu a 20 pl testovanej zlúčeniny.

Vzorky se inkubujú s testovanou zlúčeninou alebo s nosičom 10 minút pred prísadou aktivačného stimulátoru fMLP (1 až 10 pM) alebo C5a (1 až 100 nM) rozpusteného v dimetylsulf oxide, potom sa zriedi v pufre tak, že najvyššia použitá koncentrácia je 1 % (pri 100 pM testovanej zlúčeniny). MTP sa miešajú na uľahčenie zmiešania s bunkami a médiom a MTP sa umiestni do luminometra. Chemiluminiscencia a časový profil každej jamky sa meria súčasne behom 20 minút a výsledky sú vyjadrené ako dohodnuté jednotky alebo ako percentá fMLP-vyvolanej chemiluminiscencie v neprítomnosti testovanej zlúčeniny. Výsledky sa dosadia do Híllovej rovnice a automaticky sa vypočítajú hodnoty IC₅₀.

Kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu sú aktívne v zhora uvedenej skúšobnej metóde pri koncentráciách od 0,001 pM do 0,5 pM, pričom výhodné uskutočnenia sú aktívne pri koncentráciách v rozsahu 0,1 nM do 100 nM.

Protizápalové pôsobenie kombinácií terapeutických činidiel pódia vynálezu je ďalej doložené inhibíciou plazmovej extravasácie v krysích dýchacích cestách. Pri tomto teste sa vyjme tracheálne tkanivo a stanoví sa rozsah unikania plazmy. Tento test sa týka tiež i iných chronických zápalových chorôb dýchacích ciest príkladne, teda bez zámeru na akomkoľvek obmedzení, COPD a nie je preto v cejto stati opakovaný.

Krysy Wistar-Albino (150 až 200 g) alebo morčatá DunkínHartley (450 až 600 g) sa anestetizujú pentobarbitonom sodným a zavedú sa žilné a arteriálne kanyly. Intravenózne sa aplikuje

farbivo Evans Blue	na	viazanie plazmového	proteína	(30	mg/kg). Po
10 minútach sa pod	ajú	testované činidlá i	. t. a po	10	minútach sa
podá capsaicír. i.	v -	í 3 ug/kg) . Po 3 0	minútach	sa	tracheälne
tkanivo odsírení, ;	s x t r	ahuj e sa cez noc vo	f ormamide	e a	absorbancia
s a o d p o č í t a o r i	6 2 U	nm. v nie kio r ýc 1	h p O k u. S O	3 o	S ä p O Γ d d 1 G
dávkovania prehodí	tal	<, že zlúčeniny sa	podajú p	red	Evans Blue

a pred stimulami zápalu.

V uvedenom skúšobnom modele vykazujú kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu protizápalové pôsobenie pri dávkách v rozmedzí 0,001 až 0,1 mg/kg i.t.

Z uvedeného je patrné, že kombinácie terapeutických činidiel podľa vynálezu sú vhodné na obštruktívnych porúch dýchacích zahrnujúcich obštrukciu dýchacích liečenie bronchiálnej astmy.

liečenie zápalových alebo ciest alebo iných stavov ciest. Najmä sa hodia na

Vzhľadom k protizápalovému pôsobeniu k vplyvu na hyperreaktivitu dýchacích ciest, sú kombinácie terapeutických činidiel podía vynálezu vhodné na ošetrovanie obzvlášť na profylaktické ošetrovanie obštruktívnych porúch alebo zápalových chorôb dýchacích ciest. Súvislé a pravidelné podávanie behom dlhších časových období kombináciou terapeutických činidiel podľa vynálezu je vhodné na zaistenie preventívnej ochrany proti opätovnému výskytu bronchokonštrikcie alebo iných symptomatických záchvatov majúcich v dôsledku obštruktívne alebo zápalové poruchy dýchacích ciest. Kombinácia terapeutických činidiel podľa vynálezu sa tiež hodí na riadenie, zlepšovanie alebo odvracanie bazálneho stavu takých chorôb.

Vzhľadom k pôsobeniu na rozširovanie priedušiek sú kombinácie terapeutických činidiel podlá vynálezu vhodné ako bronchodilatátory, napríklad na ošetrovanie chronických alebo akútnych zúžení priedušiek a na symptomatické ošetrovanie obštruktívnych alebo zápalových porúch dýchacích ciest.

O'oštruktívne alebo zápalové poruchy dýchacích ciest, ku ktorým sa podlá vynálezu počíta astma, pneumoconiosis, chronický eozinofílný zápal piúc, chronická obštrukcia dýchacích ciest alebo pľúcne ochorenie (COAD alebo COPD) a syndróm respiračného distresu dospelých (ARDS) rovnako ako exacerbácia hyperreaktivity dýchacích ciest v dôsledku terapie inými drogami, napríklad aspirínom alebo β-agonistami.

Selektívni agonisti adenosín A_2a receptora a anticholinergické zlúčeniny podlá vynálezu sa môžu podávať samotné alebo v kombinácii, avšak vždy spolu s farmaceutický prijatelnýmí excipientami, riedidlami alebo nosičami.

Selektívni agonisti adenosín A_2a receptora a anticholinergické zlúčeniny podía vynálezu se podávajú s výhodou inhalačné a sú vhodne podávané vo forme suchého prášku (buď samotné alebo v zmesi, napríklad v zmesi s laktózou) z práškového inhalátora alebo aerosolového spreja z tlakovaného rozprašovača, pumpy, spreja, atomizéra (s výhodou atomizéra používajúceho elektrohydrodynamiku na vytvorenie jemnej mlhoviny) alebo nebuiizátora s použitím alebo bez použitia vhodného hnacieho prostriedku, napríklad dichlórdifluórmetanu, trichlórfluórmetanu, dichlórtetrafluóretanu a hydrofluóralkanu, ako je 1,1,1,2tetrafluóretan ako je 1,1,1,2-tetrafluóretan (HFA 134A (obchodná značka) alebo 1,1,1,2,3,3,3-heptafluórpropan (HFA 227EA (obchodná značka), oxid uhličitý a ďalší perfluórovaný uhľovodík ako je Perflubrón (obchodná značka) alebo iný vhodný plyn. V prípade tlakovaného aerosólu môže byť jednotková dávka určovaná ventilom na uvoľňovanie odmeraného množstva. Tlakovaný kontejnér, pumpa, sprej, atomizátor alebo nebulizátor môžu obsahovať roztok alebo suspenziu účinnej látky, napríklad zmes etanolu (prípadne vodného etanolu) alebo vhodné činidlo pre dispergovanie, rozpúšťanie alebo rozptýlené uvoľňovanie a hnacie činidlo ako rozpúšťadlo, ktoré môže prídavné obsahovať mazadlo, napríklad sorčiuantnoleát. Tobolky, blistry a patróny (zhotovené napríklad zo želatíny alebo z HPMC) na použitie v inhalátore alebo insulfátore .môžu byť formulované tak, že obsahujú práškovú zmes zlúčeniny podľa vynálezu, vhodné práškovité bázy, ako je laktóza alebo škrob, a modifikátory úžitkovosti, ako je 1-leucín, mannit alebo stearát horečnatý.

Pred použitím práškovej alebo suspenznej formulácie pre inhaláciu sa zlúčeniny podlá vynálezu rozomelú na veľkosť vhodnú pre podávanie inhaláciou (obvykle častice menšie než 5 mikrometrov). Rozomletie sa môže dosiahnuť rôznymi spôsobmi, napríklad špirálnym tryskovým mletím, mletím vo vznose alebo použitím superkritickej fluidnej kryštalizácie.

Vhodná formulácia roztoku na použitie v rozprašovači s využitím elektrohydrodynamiky na vytvorenie jemnej mihy môže obsahovať 1 pg až 10 mg zlúčeniny podľa vynálezu na aktivizáciu a aktivizačný objem môže byť 1 až 100 μΐ. Typickú formuláciu môže tvoriť zlúčenina podľa vynálezu, propylenglykol, sterilná voda, etanol a chlorid sodný. Môžu sa použiť alternatívne rozpúšťadlá namiesto propylenglykola, napríklad glycerol alebo polyetylénglykol.

Aerosoiové alebo suché práškové formulácie sa s výhodou prioravujú tak, aby každá odmeraná dávka fúknutie obsahovala 1 až 4000 ug zlúčeniny podlá vynálezu na podanie pacientovi. Celková denná dávka v prípade aerosólu je v rozmedzí 1 pg až 20 mg, a môže sa podávať naraz alebo obvyklejšie v rozdelených dávkach behom dňa.

Vhodný hmotnostný pomer selektívneho agonistu adenosín A₂.s receptora a anticholinergického činidla závisí na príslušnej skúšanej kombinácii. To je dané rozdielnosťami mocnosti jednotlivých zložiek. Lekár v každom prípade určí skutočné dávkovanie každej zložky, ktorá je najvhodnejšia pre príslušného pacienza a táto dávka sa mení v závislosti na faktoroch, ako sú vek, hmotnosť a odozva príslušného pacienta.

Ošetrovaním sa tu vždy mieni ošetrovanie kuratívne, palliatívne a profylaktické.

Priemyselná využiteľnosť

Zmes selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla pre výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo iných zápalových ochorení.

Claims (16)

1. š A T E N T O V É N Á R O K Y

   I . 1nhalovsíelná kombinácia v y z n a č u j ú c a s a t ý m, že obsahuje seiektivneta soonistw adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo za podmienky, že anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová soľ.
2. 2. Inhalovateľná kombinácia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že obsahuje selektívny agonist adenosín A_2a receptora obecne a špecificky popísaný vo svetových patentových spisoch číslo WO-A-OO/23457, WO-A-00/77018 , WO-A-O1/27131, WO-A01/27130, WO-A-01/60835, WO-A-02/00676 a WO-A-01/94368.
3. 3. Inhalovateľná kombinácia podľa nároku 2, vyznačujúca sa t ý m, že obsahuje selektívny agonist adenosín A_2a receptora zo súboru zahrnujúceho

   N- ({9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(metoxymetyl)tetrahydro-2ŕuranyl] -6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)-2-metyl1- propansulfónamid (príklad 15 spisu WO-A-OO/23457);

   cis-(2R,3R,4S,5R)-2 - (6 - [(2,2-difenyletyl)amino] - 2-{[(4-izopropy1cyklohexyl)amino]metyl) -9H-purín-9-yl)-5-(metoxymetyl)tetra-hydro3,4-furandiol a trans-(2R,3R,4S,5R)-2-(6- [(2-2-difenylety1)amino]2- { [(4-izopropylcyklohexyl)amino]metyl}-9H-purin-9-yl)-5-(metoxymetyl) tetrahydro-3,4-furandíol (príklad 17 spisu WO-A-OO/23457);

   N- ( { 9 -[(2R,3R,4S,5R) - 3 ,4-dihydroxy-5 -(hydroxymetyl) tetrahydro-2 ŕuranyl·]-6-L(2,2-difeny1etyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)-2-metvl1-propansulfónamid (príklad i spisu WO-A-Q1/27130) ;

   (2S,3S,4R,5R)-5 - (β - [ (2,2-difenyletyl)amino]-2-{ [ (izopropylsulfonyl)amino]metyl}-9H-purín-9-yi)-N-etyl-3,4-dihydroxy-tetrahydro-2furankarboxamid (príklad 3 spisu WO-A-Ol/27131);

   9- [(2R, 3R, 4S,5R)-3,4-dihydroxy-5 -(hydroxymetyl)tetrahydro-2-furanyl] -6- [(2,2-difenyletyl)amino]-N-[2-(1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karboxamid (príklad 1 spisu WO-A-00/77018);

   6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{ (2R,3R,4S,5S)-5-[(etylamino)-karbonyl] -3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N- [2- (1-piperidinyl) etyl]-9H-purín-2-karboxamid (príklad 1 spisu WO-A-01/60835) ;

   N- ({9-[(2R, 3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymetyl)tetrahydro-2furanyl]-6- [(2,2-difenyletyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)N'-[2-(diizopropylamino)etyl]močovina (príklad 1 spisu WO-A-02/00676); a

   6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{ (2R,3R,4S,5S)-5-[(etylamino)karbo/ nyl] -3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N- {2 - [ ({ [1- (2-pyridinyl) 4-piperidinyl]amino]karbonyl)amino]etyl}-9H-purín-2-karboxamid (príklad 8 a 35 spisu WO-A-Ol/94368);

   6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9-{ (2R,3R,4S,5R)-5-[(etylamino)karbonyl] -3,4-dihydroxytetrahydro-2-furány1}-N-[2-(1-piperidinyl)etyl] -9H-purín-2-karboxamid (príklad 1 spisu WO-A-01/60835);

   N-({3-[(2R,3R,4S,5R) -3,4-dihydroxy-5 - (hydroxymetyl)tetrahydro-2furanyl]-6-[(2,2-difenyletyl)amino]-9H-purín-2-yl}metyl)N'-[2-(diizopropylamino)etyl]močovina (príklad 15 spisu WO-A-02/00676); a

   6-[(2,2-difenyletyl)amino]- 9 - {(2R, 3R, 4S , 5R)-5-[(etylamino)karbonyl ] -3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 - [({ [1- (2-pyridinyl)4-piperidínyl} amino j karbonyl) amino) etyl} -9H-purí.n-2-karboxamid (príklad í a 35 spisu WO-A-01/S4368);

   a ich farmaceutický prijatelné soli a solváty.
4. 4. I.ohalovatelná kombinácia podlá nároku 3, vyznačujú c a sa t ý m, že obsahuje selektívny agonist adenosín A receptora zo súboru zahrnujúceho

   9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5 -(hydroxymetyl) tetrahydro-2 -furanyl ] -6-[(2,2-difenyletyl)amino]-N-[2-(1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karboxamid alebo 6-[ (2,2-difenyletyl)amino]-9-{ (2R,3R,4S
5. 5S) - 5 -[(etylamino)karbonyl]-3,4-dihydroxytetrahydro-2-furanyl }-N{2 - [ ({ [ 1 -(2-pyridinyl)-4-piperidinyl]amino jkarbonyl)-amino]etyl} 9i-prrín-2-karboxamid alebo ich farmaceutický prijatelné sol a solváty.

   5. Inhalovateľná kombinácia podľa nároku 1 až 4, vyznaču júca sa tým, že obsahuje ako anticholinergické činidl ipratropiovú sol alebo oxitropiovú sol alebo ich solvát.
6. 6. inhalovateľná kombinácia podľa nároku í, vyznačuj ú c a sa t ý m, že obsahuje ako selektívny agonist adenosín A_2a receptora 9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4 dihydroxy-5-(hydroxymetyl)tetrahydro-2-furanyl] -6-[(2,2-difenyletyl)amino]-K -[2-(1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karbox-amid ale bo jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty a ako ako anti cholinergtcké činidlo ipratropiovú sol alebo jej solvát, ako selektívny agonist adenosín A_2a receptora 6- [(2,2 difenyletyl)amino]-9-í (2R,3R,4S,5S)-5-[(etylamino)karbonyl]-3,457

   -díhydroxytetrahydro-2-furanyl}-N-{2 -[({[1-(2-pyridinyl)-4-piperidinyl ] amino} karbonyl) aminc] etyl} -9H-purín-2-karboxamic. alebo jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty a ako ako anticholinergické činidlo ipraoropiovú soľ alebo jej solvát, ako selektívny agonist adenosín A_2a receptora 9-[ (2R,3R,4S,5R)-3,4dihydroxy-5- (hydroxymetyl) tetrahydro-2- furanyl] -6- [(2,2 -difenyletyl)amino]-N-[2- (1-piperidinyl)etyl]-9H-purín-2-karbox-amid alebo jeho farmaceutický prijatelné soli a solváty a ako ako anticholinergické činidlo oxitropiovú soľ alebo jej solvát, ako selektívny agonist adenosín A_2a receptora 6-[(2,2difenyletyl)amino]-9 - { (2R,3R,4S,5S)-5 - [ (etylamino)karbonyl]-3,4-dihydroxytetrahydro-2- furanyl}-N-{2 - [ ({ [1- (2-pyridinyl) -4- piperidinyl ] amino}karbonyl)amino]etyl]-9H-purín-2-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty a ako ako anticholinergické činidlo oxitropiovú soľ alebo jej solvát.
7. 7. Inhalovatelná kombinácia podľa nároku 1 až 6 pre použitie ako liečivo.
8. 8. Inhalovatelná kombinácia podľa nároku 1 až 6 pre súčasné, postupné alebo oddelené podávanie pri ošetrovaní obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo pre ošetrovanie iných zápalových ochorení.
9. 9. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m, že obsahuje ako účinnú látku kombináciu selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo a farmaceutický prijatelný excipient, riedidlo alebo nosič na inhalačné podanie pre ošetrovanie obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo pre ošetrovanie iných zápalových ochorení, za podmienky, že anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová sol.
10. 10. Farmaceutický prostriedok podlá nároku S, v y z n a č u j ú c i sa t ý m, že obsahuje selektívny agonist adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo pódia ktoréhokoľvek nároku 2
11. 11. Použitie selektívneho agonistu adenosín A_Za receptora a anticholinergického činidla na výrobu liečiva pre súčasné, postupné alebo oddelené podávanie oboch účinných látok inhaláciou pri ošetrovaní obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo pre ošetrovanie iných zápalových ochorení, za podmienky, že anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová sol.
12. 12. Použitie podlá nároku 11, pričom selektívny agonist adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo sú definovaní v ktoromkoľvek nároku 2 až 6.
13. 13. Spôsob ošetrovania obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo pre ošetrovanie iných zápalových ochorení, vyznačujúci sa t ý m, že sa podáva súčasne, postupne alebo oddelene inhalačné cicavcom účinné množstvo selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla za podmienky, že anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová soľ.
14. 14. Spôsob podľa nároku 13, vyznačujúci sa tým, že sa podáva selektívny agonist adenosín A_2a receptora a anticholinergické činidlo podľa ktoréhokoľvek nároku 2 až 6.
15. 15. Inhalačné zariadenie pre súčasné, postupné alebo oddelené podanie selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla pre ošetrovanie obštruktívnych chorôb dýchacích ciest alebo pre ošetrovanie iných zápalových ochorení, za podmienky, že anticholinergickým činidlom nie je tiotropiová sol.
16. 16. Inhalačné zariadenie podlá nároku 15 pre podanie selektívneho agonistu adenosín A_2a receptora a anticholinergického činidla podlá ktoréhokoľvek nároku 2 až 6.