SI9500049A - Generator pulzirajočega magnetnega polja - Google Patents

Abstract

Predmet izuma je generator pulzirajočega magnetnega polja, ki z vzbujanjem magnetnega valovanja specifične oblike in frekvence omogoča terapevtske učinke pri lajšanju zdravstvenih težav. Čas trajanja posameznega magnetnega impulza t=55 με, pri tem doseže magnetni tok največjo vrednost Bt=250 μΤ v času tn=10 με. Generator omogoča izbiro frekvence magnetnih impulzov v mejah od 2 Hz do 24 Hz, skladno z zahtevami posameznega terapevtskega programa. Generator polzirajočega magnetnega polja vsebuje hibridno vezje (IC1), šestsegmentno DIL stikalo za izbiranje režima delovanja, LED diodo (D1) za kontrolo delovanja, tuljavo (L1), ki spreminja izhodne električne impulze iz hibridnega vezja (IC1) v ustrezno oblikovano magnetno polje ter baterijo (B1), ki napaja generator z električno energijo. Miniaturna izvedba generatorja omogoča uporabniku, da ga nosi v času terapije obešenega na vrvici okrog vratu ali si ga pritrdi neposredno na obolelo mesto.

Description

POSTOPEK ZA PRIPRAVO FIZIČNO STABILNE KRISTALNE γ-MODIFIKACIJE PARA-AMINOBENZENSULFANILAMIDA

Področje tehnike

Pričujoči izum se nanaša na organsko kemijo, bolj natančno na postopek za pripravo fizično stabilne kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfanilamida.

Stanje tehnike

Dobro je znano, da para-aminobenzensulfonilamid lahko kristalizira najmanj v treh polimorfnih modifikacijah, ki jih označujemo kot α-, β- in γ- oblike (Journal of Pharmaceutical Sciences, v. 59 No. 7, julij 1970, pp. 972-975; Journal of Pharmaceutical of Japan, 1942, m. 63, No. 11, pp. 17-19), od katerih v medicinski praksi uporabljamo samo α-obliko. Omenjene polimorfne modifikacije lahko pripravimo s kristalizacijo -in pretvorbo ene oblike v drugo.

Kristalno γ-modifikacijo para-aminobenzensulfonilamida lahko pripravimo z raztapljanjem β-modifikacije v amil alkoholu in nato s kuhanjem. Nastale kristale ločimo termalno, jih postopno ohladimo na sobno temperaturo in filtriramo, γmodifikacijo identificiramo z metodo rentgenostrukturne analize.

V stroki je znan tudi postopek za pripravo γ-modifikacije paraaminobenzensulfonilamida s pulverizacijo a- in β-modifikacij in kasnejšim segrevanjem nastalega praška pri 130-140°C v teku 1 ure. V tem primeru βmodifikacijo pretvorimo v γ-modifikacijo. Toda, γ-modifikacija para-aminobenzensulfonilamida, ki smo jo pripravili s zgoraj naznačenimi postopki, je pri sobni temperaturi nestabilna in se pretvori v β-modifikacijo, ki se nato spontano pretvori v α-modifikacijo. Ker je nastala γ-modifikacija nestabilna, njeno farmakološko aktivnost niso raziskovali. Omenjene postopke za pripravo γ-modifikacije paraaminobenzensulfonilamida niso uporablili v industrijskem obegu.

Odkritje

Predmet izuma je priskrbeti postopek s spremembo tehnoloških operacij, kar bo omogočilo pridobijanje fizično stabilne kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfonilamida, ki kaže antimikrobno in interferon-inducirajočo aktivnost.

Problem lahko razrešimo tako, da v postopku za pripravo fizično stabilne kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfonilamida, za katerega zahtevamo patentno varstvo, raztopino para-aminobenzensulfanilamida v vodi ali nekem organskem topilu ali v njihovi zmesi ohladimo s sredstvom za hlajenje pri hitrosti ne manjši od 2°C/min, da dovršimo njegovo kristalizacijo in nato ločimo nastale kristale ter jih posušimo.

Zaželeno je, da kot organsko topilo uporabimo nižje alkohole, prednostno etanol. Za povečanje dobitka želenega produkta je zaželeno, da kot sredstvo za hlajenje uporabimo tekoči dušik ali tekoči ogljikov dioksid ter da sušenje izpeljemo v vakuumu pri pritisku ne višjem kot 1,333 Pa. Postopek, za katerega zahtevamo patentno varstvo, omogoča da dobimo fizično stabilno kristalno γ-modifikacijo para-aminobenzensulfonilamida, ki je stabilna za časa shranjevanja pri sobni temperaturi in kaže višjo antimikrobno aktivnost kot je aktivnost β- in a- oblik, ki jih uporabljajo v medicinski praksi, ter kaže tudi visoko učinkovito aktivnost glede indukcije interferona. Postopek, ki je predmet zahtevkov, je značilen po enostavni tehnologiji in je primeren za industrijsko uporabo.

Izboljšava realizacije izuma

Postopek za pripravo fizično stabilne kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfonilamida, za katerega zahtevamo patentno varstvo, izpeljemo s hlajenjem raztopine para-aminobenzensulfanilamida v vodi ali nekem organskem topilu ali v njihovi zmesi s sredstvom za hlajenje pri hitrosti ne manjši od 2° C/min, da dovršimo njegovo kristalizacijo in nato ločimo nastale kristale ter jih posušimo. Sredstvo za hlajenje je lahko katerakoli snov, ki je sposobna znižati temperaturo snovi, katero hladimo, s hitrostjo najmanj 2°C/min. Optimalne snovi, ki jih uporabimo kot sredstvo za hlajenje, sta tekoči dušik ali tekoči ogljikov dioksid, čigar uporaba poveča dobitek želenega produkta s hitro nastavitvijo zaželene hitrosti hlajenja in njene nadaljne ohranitve.

Fizično stabilno kristalno γ- modifikacijo omenjene spojine lahko pripravimo pri hitrosti hlajenja najmanj 2°C/min. Postopek, ki ga izpeljemo pri hitrosti hlajenja nižji od 2°C/min, ne omogoča pridobijanja nove kristalne modifikacije. Zgornja hitrost hlajenja ni omejena.Pri katerikoli maksimalno dosegljivi hitrosti hlajenja začetne raztopine nastane nova kristalna modifikacija. Postopek hlajenja izpeljemo v vodi ali kateremkoli organskem topilu ali v njihovi zmesi, v katerih je začetna snov topna. Prednostna topila so voda in nižji alkoholi, prednostno etanol. V tem primeru dosežemo najvišji dobitek želenega produkta. Snov, ki je predmet zahtevkov, lahko dobimo neodvisno od koncentracije začetne snovi v raztopini. Pogoje sušenja pri pritisku višjem od 1,333 Pa smo izbrali ker vsebnost vlage končnega suhega produkta ne sme biti večja od 3%. Nastali želeni produkt - fizično stabilna kristalna γ-modifikacija para-aminobenzensulfanilamida, je bel fini prašek (kristali v obliki kolena, tipični za γ-modifikacijo). Analiza spektrov in rentgenogrami potrjujejo dejstvo, da je nastali želeni produkt γ-modifikacija omenjene spojine in je definirana s sledečimi vrednostimi za razdalje med ploskvami d in relativnimi intenzitetami refleksov I:

d, nm

1 I	2
0,763	31
0,661	73
0,628	8
0,600	3
0,564	30
0,490	71
0,451	100
0,427	4
0,419	5
0,380	98
0,366	30
0,356	32
0,347	4
0,336	4
0,323	8

1 !	2
0,320	12
0,313	13
0,304	30
0,299	25
0,281	13
0,267	2
0,264	3
0,262	2
0,253	5
0,249	10
0,246	6
0,233	9
0,225	6
0,222	4
0,221	4
0,217	4
0,216	4
0,214	4
0,212	8
0,211	9
0,199	5
0,197	6
0,193	4
0,192	5
0,191	5
0,188	5
0,186	4
0,184	3
0,182	4
0,180	5
0,177	3
0,175	3
0,1727	5

1 I	2
0,1618	4
0,1583	3
0,1566	4

Nastala fizično stabilna kristalna γ-modifikacija para-aminobenzensulfonilamida kaže antimikrobno in interferon-inducirajočo aktivnost.

Aktivnost nastale γ-modifikacije smo preiskovali v eksperimentih na živalih v primerjavi s farmakopejskim para-aminobenzensulfonilamidom (ki predvsem vsebuje α-modifikacijo), ki jo uporabljajo v zdravniški praksi.

Za raziskavo specifične antimikrobne aktivnosti smo uporabili metodo serijskih razredčitev. Začetne raztopine so bile 0,5% raztopine farmakopejskega paraaminobenzensulfonilamida in γ-modifikacija omenjene spojine v 0,1 M raztopini natrijevega hidroksida. Pripravili smo dvakratne razredčitve testnih raztopin v mesni peptonski juhi z dodatkom kulture Staphylococcus aureas. Seve smo hranili v termostatu 24 ur. Bakteriostatično koncentracijo smo določili vizualno.

Uporabili smo sterilne in nesterilne raztopine para-aminobenzensulfonilamida in γmodifikacije.

Eksperimente smo izvršili v treh serijah testnih raztopin s trikratnimi razredčitvami.

Rezultate podajamo v tabeli 1.

Analiza podatkov predstavljenih v tabeli 1 kaže na dejstvo, da antimikrobna aktivnost γ-modifikacije ni manjša od aktivnosti farmakopejskega paraaminobenzensulfanilamida.

Tabela 1

Št.	Testna učinkovina	Čas, dnevi	Rast (vizualno)
		0	1	2	3	Kontrola
1.	Sterilno topilo	Ni rasta	Rast	Rast	Rast	Rast
2.	Farmakopejski para-amino- benzensulfanil- amid	Ni rasta	Ni rasta	Ni rasta	Rast	Rast
3.	γ-modifikacija para-aminoben- zensulfanilamida	Ni rasta	Ni rasta	Ni rasta	Rast	Rast
4.	Nesterilno topilo	Ni rasta	Rast	Rast	Rast	Rast
5.	Farmakopejski para-amniobenzensulfanilamid (nesterilna učinkovina)	Ni rasta	Ni rasta	Ni rasta	Rast	Rast
6.	γ-modifikacija para-aminoben- zensulfanilamid (nesterilna učinkovina)	Ni rasta	Ni rasta	Ni rasta	Rast	Rast

Raziskava toksičnih učinkov γ-modifikacije para-aminobenzensulfoniiamida v primerjavi s farmakopejskim para-aminobenzensulfonilamidom je pokazala, da je γ-modifikacija manj toksična, namreč LD50 je 1918 mg/kg živalskega telesa kadar jo dajemo interperitonealno, medtem ko je LD50 farmakopejske učinkovine 1242 mg/kg živalskega telesa. Aktivnost γ-modifikacije paraaminobenzensulfonilamida glede indukcije interferona smo primerjali z aktivnostjo farmakopejskega para-aminobenzensulfonilamida na miših v in vivo eksperimentih.

V eksperimentih smo uporabili mišje samce seva CBA, ki so bili teški 10-12 g. Za celično kulturo smo uporabili dvakratni celični sev Z-929 mišjih fibroblastov. Celice smo gojili v plastičnih ploščah s 96 luknjami (37°C, 3,5% CO) v srednji Igli 2 HEM 10% govejega seruma. Kot virus smo izbrali virus mišjega encefalokardita (sev Columbia).

Farmakopejsko učinkovino in γ-modifikacijo para-aminobenzensulfonilamida smo dajali posamezno intraperitonealno (0,2 ml na eno miš) v odmerkih 50 in 150 mkg/0,2 ml. Kri smo odvzeli iz karotide po 5, 25 in 72 urah po dajanju učinkovin. Za vsak vzorec smo uporabili najmanj 5 živali. Titracijo interferona smo izvedli z določanjem supresije citopatskega učinka na celično kulturo, uporabljajoč mikrometodo.

Rezultate raziskav podajamo v tabeli 2.

Tabela 2

Dinamika tvorbe interferona v mišjem krvnem serumu za časa dajanja testnih učinkovin

Št.	Učinkovina	Čas odvzema krvi po dajanju učinkovine, ure	Titri interferona (enote/ml)
koncentracija učinkovine 50 mkg/miš	koncentracija učinkovine 150 mkg/miš
1.	Farmakopejski para-	5	<20	<20
	aminobenzensulfanil-	24	<20	<20
	amid	72	<20	<20
2.	γ-modifikacija para-	5	40-80	80
	aminobenzensulfanil-	24	160	320
	amida	72	<20	<20
3.	Kontrola	5	<20
		24	<20
		72	<20
4.	Mišji serumski interferon	-	640

Analiza rezultatov raziskav je pokazala, da farmakopejski paraaminobenzensulfanilamid ne kaže aktivnost glede indukcije interferona.

Istočasno γ-modifikacija te učinkovine inducira interferon v krvnem serumu miši tako zgodaj kot je to 5 ur po dajanju (zgodni interferon) z aktivnostjo 40-80 enot/ml, po 24 urah so pa titri interferona bili že tako visoki kot je to 160-320 enot/ml. Po končanih 72 urah je prišlo do znižanja titra interferona. Torej je kristalna γmodifikacija para-aminobenzensulfonilamida, ki jo dobimo po postopku, ki je predmet patentnih zahtevkov, fizično stabilna oblika, ki kaže visoko učinkovito antimikrobno in interferon-inducirajočo aktivnost.

Z namenom boljšega razumevanja pričujočega izuma smo priskrbeli sledeče primere priprave fizično stabilne kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfonilamida.

Primer 1

1,51 vodne raztopine para-aminobenzensulfonilamida, čigar koncentracija je 20 g/l, ohladimo s tekočim dušikom pri hitrosti hlajenja 2°C/min, da dovršimo njegovo kristalizacijo. Nastalo zmrznjeno maso prenesemo na plitve sklede in jih položimo v sublimator. Postopek sušenja izpeljemo pri pritisku 1,333 Pa, tako da je zaostala vsebnost vlage 3%. Dobitek želenega produkta je beli fini kristalni prašek. Nastalo snov karakteriziramo z vrednostimi razdalje med ploskvami d in relativnimi refleksi I, identičnimi z ustreznimi vrednostimi kristalne γ-modifikacije para-aminobenzensulfonilamida, podanimi zgoraj.

Primer 2

Postopek izpeljemo kot je opisano v primeru 1. V tem slučaju uporabimo 500 ml raztopine začetne učinkovine v zmesi voda/etanol (1:1), čigar koncentracija je 20 g/l. Dobitek želenega produkta je 96 utežnih %. Nastala učinkovina ima karakteristike, ki so podobne tistim, opisanim v primeru 1.

Primer 3

Postopek izpeljemo kot je opisano v primeru 1, pri hitrosti hlajenja 30°C/min. Dobitek želenega produkta je 98,2 utežnih %. Nastali produkt ima karakteristike, ki so podobne tistim, opisanim v primeru 1.

Primer 4

1,5 I raztopine para-aminobenzensulfonilamida v etanolu, čigar koncentracija je 10 g/l, ohladimo s tekočim dušikom pri hitrosti hlajenja 8°C/min, da dovršimo kristalizacijo raztopine. Nastalo zmrznjeno maso položimo v sublimator. Postopek sušenja izpeljemo pri pritisku 1,333x105 Pa. Dobitek želenega produkta je 95,6 utežnih %. Karakteristike nastale spojine so podobne tistim iz primera 1.

Primer 5

Postopek izpeljemo kot je opisano v primeru 1. Koncentracija začetne spojine v etanolu je 10 g/l, sredstvo za hlajenje je pa tekoči ogljikov dioksid. Dobitek želenega produkta je 96,8 utežnih %. Karakteristike nastale spojine so podobne tistim iz primera 1.

Industrijska uporabnost

Fizično stabilna kristalna γ-modifikacija, ki jo pridobimo s postopkom, ki je predmet patentnih zahtevkov, kaže visoko učinkovito antimikrobno in interferon-inducirajočo aktivnost in nahaja uporabo v zdravniški praksi kot aktivna sestavina zdravila.

Claims (4)

1. PATENTNI ZAHTEVKI

   1. Postopek za pripravo fizično stabilne kristalne γ-modifikacije paraaminobenzensulfonilamida, označen s tem, da raztopino paraaminobenzensulfonilamida v vodi ali nekem organskem topilu ali v njihovi zmesi ohladimo s sredstvom za hlajenje pri hitrosti najmanj 2°C/min, da dovršimo njegovo kristalizacijo in nato ločimo nastale kristale ter jih posušimo.
2. 2. Postopek po zahtevku 1, označen s tem, da organsko topilo vključuje nižje alkohole.
3. 3. Postopek po zahtevku 2, označen s tem, da je nižji alkohol etanol.
4. 4. Postopek po kateremkoli od zahtevkov 1-3, označen s tem, da je sredstvo za hlajenje tekoči dušik ali tekoči ogljikov dioksid ter da sušenje izpeljemo v vakuumu pri pritisku ne višjem kot 1,333 Pa.