SE464708B - Nya apovinkaminol-derivat, foerfarande foer framstaellning daerav och farmaceutiska kompositioner innehaallande desamma - Google Patents
Nya apovinkaminol-derivat, foerfarande foer framstaellning daerav och farmaceutiska kompositioner innehaallande desammaInfo
- Publication number
- SE464708B SE464708B SE8501993A SE8501993A SE464708B SE 464708 B SE464708 B SE 464708B SE 8501993 A SE8501993 A SE 8501993A SE 8501993 A SE8501993 A SE 8501993A SE 464708 B SE464708 B SE 464708B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- hydrogen
- formula
- trimethoxyphenyl
- carbon atoms
- mmol
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D461/00—Heterocyclic compounds containing indolo [3,2,1-d,e] pyrido [3,2,1,j] [1,5]-naphthyridine ring systems, e.g. vincamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
464 708
10
15
20
25
30
R2 i betydelsen en alkylgrupp med 1-20 kolatomer är
företrädesvis en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med
1-15 och i synnerhet 1-6 kolatomer, exempelvis en
metyl-, etyl- eller pentadecylgrupp. I definitionen av
R2 är fenyl eventuellt substituerad företrädesvis med
en eller flera nitro- och/eller metoxigrupper.
Föreningarna med formeln (I) är nya. Strukturellt be-
släktade föreningar avslöjas exempelvis i de belgiska
patentskrífterna 892 069, 891 991 och 892 070, där
apovinkaminol beskrivs, och 892 070, där apovinkaminol
och 17,18-dehydroapovinkaminoltrimetoxibensoater och
9-nitro-, ll-nitro-, 10-brom-, 11-brom- och 10-metoxi-
apovinkaminoltrimetoxibensoaterna beskrivs. Enligt
litteraturen inhiberar dessa föreningar effektivt
aktiviteten hos enzymet fosfodíesteras och är i
synnerhet lämpliga för behandling av hudsjukdomar
ätföljda av patologisk cellproliferatíon.
Föreningarna enligt uppfinningen kan även användas för
terapi av olika hudsjukdomar och förutom att de upp-
visar en utmärkt aktivitet har de den fördelen att
deras fotostabilítet är avsevärt bättre än hos hit-
tills kända föreningar. Det är känt att hudsjukdomar,
som åtföljs av en patologisk proliferation av epi-
dermis, är relativt vanliga och innefattar både
benigna och maligna sjukdomar. Vissa sjukdomar är
karaktäristiska för människor medan andra även kan
observeras på djur.
Eftersom en del av de hudsjukdomar som åtföljs av en
patologisk cellproliferatíon icke uppträder hos djur, ex.
10
15
20
25
30
35
3 464 708
psoriasis, kan den antipsoriatiska aktiviteten hos före-
ningarna endast påvisas indirekt genom djurförsök.
Voorhees et al. (Arch. Derm. 123, 359-365 (1971)) har
fastställt att den patologiska proliferationen åtföljs
av en minskning av nivån av cykliskt adenozinmonofosfat
(c-AMP). Såsom är väl känt alstras c-AMP av adenylcyklas
och sönderdelas av fosfodiesteras. Voorhees påverkade
med framgång psoriasis genom medel, som stimulerar akti-
viteten hos adenylcyklas (exempelvis norefinefrin) eller
inhiberar aktiviteten hos fosfodiesteras (exempelvis
papaverin).
Vid våra modellförsök har vi verifierat att de föreningar
som in vitro uppvisar en inhibition av fosfodiesterasakti-
viteten har visat sig vara effektiva vid klinisk behand-
ling av psoriasis.
Modellförsöken utfördes medelst fosfodiesteras, som hade
isolerats från djurvävnad (råtthjärna, nötkreaturshjärna,
nötkreaturshjärta). Enzymet isolerades medelst den teknik
som har beskrivits av J. Schroder och H.V. Richenberg
(Biochem. Biphys. Acta ägg, 50 (1973)), varefter det iso-
lerade fosfodiesteraset renades enligt den metod som har
beskrivits av J. G. Hardman och E.W. Sutherland (J. Biol.'
Chem. 250, 3704 (1965)), och aktiviteten hos det renade
enzymet uppmättes medelst en radioisotopmetod, som har
utvecklats av G. Poch, i en inkubator, först utan den
inhiberande substansen och därefter i närvaro av test-
substansen som ett inhiberande medel, efter en inkubations-
tid av 20 minuter (N.S. Arch. Pharmacol. åâå, 272 (1971)).
Av testföreningarna framställdes en förrådslösning med
koncentrationen 1 mmol med en vattenlösning av klorväte-
syra och olika mängder av förrådslöâningen saštes till -5
enzympreparaten motsvarande 5 x 10 , 1 x 10 och 5 x 10
mol/liter av testföreningen. En lösning av papaverin an-
464 708
10
15
vändes som referensförening och sattes till enzymprepara-
tet på analogt sätt.
Aktiviteten hos lösningarna av testföreningen och papa-
verin uttrycktes i procent av kontrollprovet (enzymlös-
ning utan någon inhiberande substans, 100%).
Försöken med ett enzym isolerat från nötkreaturshjärna
respektive nötkreaturshjärta utfördes på analogt sätt.
På basis av de erhållna resultaten uppritades i ett dia-
gram enzymaktiviteten som funktion av logaritmen av kon-=
centrationen av enzyminhibitor (mikromol) och med ledning
av kurvan avlästes den inhibitorkoncentration som resul-
terade i en 50 %-ig minskning av enzymaktiviteten (I50).
De erhållna resultaten visas i tabell 1.
464 708
mmcxmw æudfl u .m.¶
mm .ä 3 2.3 än __ m2 ...woäaoumåoššoå
E E. mm S? ....ü ä. äowcmn
åäpmfiußJ m _ . __ _ _ mnfiofiåëfiâmënfo P
8 m» mm 8.8 Bm mo. »mowän
åäumñfiï _ m _ _ .___ _ .måonëæånäå
8 mm 8 38 Sw m3 umomcmnnfiouåäfi
... m. å. .måofiswäïomølofiä¿v
S; m2 oï S? 8- 2: »momäåoñsmënšå
Hmmsficwunwwwflwuwmsmh
N m m m .Exoäšs Écww m »mownwn
.Aëfi5»» Lxouwiuu! m _ _ .__ .Tfioøëæx
Lflïm |5>RmflxoëæTQwQ 22
S 02 oä m _ daöäš: dfims m “Epwomflofiåx
Lnâßflxowmåß- Qwï S2
mN om om m dfiwum|o| dfiwa m Bmumumöåocäæx
|ñ>ommåwuwum|o| Qwï Sa
N m 9 mëfiëfinwæfig Éäw Bi: \ »Sååå
Luöuøšfl» LvSJ m _ _ v _ .måoqëfifiâm
Lflïm .oë>fiw..míï|øbä..ï\ mmm
m S om mfiëñnwödš draw øfiÉ Bmownåäpënfi
åäpæfifl» .. _ __. _ _ w _ _ måofiååhâw
.ëïm uoëaüw|wñü|oufiaà\ www
.w.U .w.© om mcfln©Cflnm:wHm> flæumš Ouuflc \.umu®0mH0:fiEmxcfi>OQm
bë>nww|2§TofiÉ|C\ Em
.m6 .m6 om mfiëfinmcåmš üfiws ofiÉ bßwumfiocfiäšëmm
öë>zwø|wñßvlouufls|m\ m3
om oo F om P | wfluøfixoäæslfiumšmmmm
wuhmfinwä» mfiwfinwä» mšmfi: f mm Nm J
Lmwümm: ...Bäræc Lä» É Hæšow. mnfiqwuwmpmwa
.HQÃ .EH H Hwnofläfifiwwuäøßfimåw Hwasšëom
P Hfiwßmfi
464 708
10
15
20
25
30
35
De i tabellerna angivna resultaten visar klart att de
nya föreningarna enligt uppfinningen vid användning på
ett enzym, isoleras från nöfikreaturshjärna, nötkreaturs-
hjärta respektive råtthjärna, var flera gånger effektivare
än papaverin, som används som referenssubstans.
De första kliniska försöken utfördes med preparat för
utvärtes bruk (exempelvis salvor, krämer, lösningar,
tinkturer, pastor, aerosoler, etc), som innehöll de nya
föreningarna enligt uppfinningen som aktiv beståndsdel.
Närmare bestämt användes krämer, som innehöll 2%, 1%,
0,5%, 0,25% respektive 0,11% aktiv beståndsdel.
Kliniska försök utfördes på patienter, som led av psoria-
sis. Under försöken har patienterna icke erhållit någon
systemisk, exempelvis immunosupressiv, cytostatisk eller
glukokortikoid behandling för sin bassjukdom.
Grupper om 5 undersöktes medelst den s.k. plack-metoden.
En sida av symmetriska hudskador behandlades med en kräm,
som innehöll denaktiva beståndsdelen i önskad koncentra-
tion, medan placebo applicerades på den andra sidan. De
övriga psoriatiska ställena på huden underkastades olika
andra utvärtes behandlingar, exempelvis med salvor inne-
hållande flumetasonpivalat och salicylsyra som aktiv
beståndsdel, vilka har vidsträckt användning för behand-
ling av psoriasis.
Försöken igångsattes med krämer med en hög koncentration
av aktiv beståndsdel och därefter behandlades ytterligare
patienter med preparat, som innehöll den lägsta koncentra-
tionen av aktiv beståndsdel. Huden behandlades tvâ till
tre gånger dagligen till dess symptomen försvann eller
avsevärt förbättrades (1-6 veckor).
Effektiviteten utvärderades genom observation av tre
symptom: inflammation, infiltration och deskvamation
10
15
20
25
30
35
464 708
(avfjällning). Intesiteten hos symptomen kvalificerades
med poängvärden mellan 0 och 3. Resultaten underkastades
matematiska-statistiska metoder.
Resultaten visar otvetydigt att kompositionerna med
framgång kan användas för behandling av psoriasis. Inga
biverkningar observerades vid något av försöken.
Enligt en aspekt av uppfinningen tillhandahâlles ett
förfarande för framställning av nya apovinkaminol-derivat
med formeln (I)
(I)
vari substituenterna har ovan angivna betydelser, och
syraadditionssalter därav genom att man
a) omsätter ett apovinkaminol-derivat med formeln (II)
464 708 8
10
15
20
25
30
vari substituenterna har de i samband med formel (I)
angivna betydelserna, med en syra med formeln (III)
R2
coon (III)
eller ett reaktivt derivat därav, vari R2 har ovan an-
givna betydelse,
och, om så önskas, omvandlar en erhållen förening med
formeln (I) till ett syraaddítíonssalt därav.
Enligt en annan aspekt av uppfinningen tillhandahålles
farmaceutiska kompositioner med fosfodiesteras inhibe-
rande aktivitet, i synnerhet för behandling och profylax
av hudsjukdomar åtföljda av en patologisk cellprolifera-
tion, vilka kompositioner som aktiv beståndsdel inne-
fattar en farmaceutiskt effektiv mängd av en förening
med formeln (I) eller ett farmaceutiskt godtagbart syra-
additionssalt därav tillsammans med minst en farmaceu-
tiskt inert bärare eller utspädningsmedel och eventuellt
ytterligare farmaceutiskt aktiva substanser.
De föreningar med formeln (II) som användes som utgångs-
material vid förfarandet enligt uppfinningen är delvis
nya och delvis kända inom tekniken. Föreningar med for-
meln (II), vari R1 är väte eller nitro eller brom och
R3 och R4 är en dubbelbindning är kända och avslöjas i
de belgiska patentskrifterna 891 991, 892 069 och
892 070. Framställningen av de nya föreningarna med
formeln (II) àskádliggöres pà ett uttömmande sätt i
föreliggande beskrivning.
10
15
20
25
30
464 708
Föreningarna med formeln (III) är kända inom tekniken.
Lämpliga derivat innefattar syrahaliden.
Acyleringen enligt uppfinningen utföres i närvaro av
ett organiskt lösningsmedel, företrädesvis bensen eller
en homolog därav, klorerade kolväten eller alifatiska
ketoner eller pyridin.
Om reaktionen utföres med ett lämpligt derivat av syran
med formeln (III), exempelvis med en 3,4,5-trimetoxi-
bensoylhalid, sättes ett syrabindande medel till reak-
tionsblandningen i en mängd, som är ekvivalent med den
vid reaktionen bildade halogensyran eller i ett ringa
överskott. Som syrabindande medel kan exempelvis användas
alkalimetallkarbonater, alkalimetallvätekarbonater eller
organiska basiska aminer, såsom pvridin. Om reaktionen
utföres med syran med formeln (III), företrädesvis 3,4,5-
trimetoxibensoesyra, sättes en katalytisk mängd av en
syra, företrädesvis klorvätesyra eller svavelsyra, eller
en karboxylaktivator och/eller ett dehydratiseringsmedel
till reaktionsblandningen. Som karboxylaktivator kan man
exempelvis använda halogenerade fenoler, företrädesvis
pentaklorfenol, och som dehydratiseringsmedel exempelvis
N,N'-dicyklohexylkarbodiimid. Acyleringen utfördes vid
en temperatur mellan -20°C och reaktionsblandningen kok-
punkt, företrädesvis mellan 20°C och 60°C.
Produkten isoleras från reaktionsblandningen i allmänhet
genom extraktion och/eller indunstning.
Om så önskas kan den erhållna produkten omvandlas till
ett syraadditionssalt därav. Föredragna oorganiska syra-
10
464 708
10
15
20
25
30
35
additionssalter är exempelvis hydroklorid-, sulfat- och
fosfatsalterna. Föredragna organiska syraadditionssalter
innefattar vätetartrat-, succinat-, citrat- och askorbat-
salterna. Salterna framställes exempelvis genom att man
sätter en alkoholisk, eterhaltig eller acetonhaltig lös-
ning av syrakomponenten till produkten med formeln (I).
Framställningen av salterna utföres företrädesvis vid
pH-värden mellan 3 och 6.
De farmaceutiska kompositionerna enligt uppfinningen inne-
håller 0,1-8,0 vikt-%, företrädesvis 0,2-2,0 vikt-%
aktiv beståndsdel. Kompositionerna innehåller eventuellt
även ytterligare farmaceutiskt aktiva beståndsdelar,
exempelvis antibiotika, cytostatiska medel, prostaglandiner,
ditranol, salicylsyra, tjära, antiinflammatoriska medel,
immunosupressiva medel och glukokortikoider och, när det
gäller parenteral administrering, lokalbedövningsmedel.
Som glukokortikoid användes företrädesvis triamcinolon-
acetonid. Kompositionerna färdigställes företrädesvis som
beredningar lämpliga för utvärtes lokal applicerinq, exem-
pelvis krämer, salvor, lösningar, gelëer, aerosoler,
aerosolskum, plåster, etc.
Den aktiva bestândsdelen införlivas företrädesvis med
en kräm, som är lätt att tvätta bort.
Krämer framställes genom att man upplöser den aktiva be-
stândsdelen i ett alkoholiskt lösningsmedel, företrädes-
vis propylen- eller dipropylenglykol eller en blandning
därav med vatten, och därefter blandar den erhållna
lösningen med en väl smetbar, hudkompatibel fettfas.
Fettfasen kan innehålla cetyl-, stearyl- och cetostearyl- '
alkohol, paraffinolja, glycerolmonostearat, etc.
Krämerna kan vidare innehålla emulgeringsmedel, före-
trädesvis polyoxietylensorbitanmonooleat eller -mono-
10
15
20
25
30
35
11 464 7Û8
stearat, och konserveringsmedel, exempelvis olika bensoe-
syraderivat, företrädesvis p-hydroxibensoesyrametylester.
Krämerna innehåller företrädesvis 0,25-2,0 vikt-% aktiv
beståndsdel, 45-50 vikt-% glykol, 23-27 vikt-% paraffin-
olja, 11-15 vikt-% stearylalkohol och ytterligare till-
satsmedel upptill 100%.
Den aktiva beståndsdelen kan beredas som en salva, som
icke kan borttvättas med vatten. I detta fall införlivas
den aktiva beståndsdelen direkt med fettfasen.
Lösningar kan framställas exempelvis med 20-40 vikt-%
propylenglykol eller dipropylenglykol, 40-55 vikt% 96 %-ig
etanol och destillerat vatten upptill 100%.
Aerosolberedningar framställes genom att man tillsätter
en lösning av den aktiva beståndsdelen i propylenglykol,
ett fett, företrädesvis isopropylmyristat, och ett lämp-
ligt drivmedel, företrädesvis freon.
Ett aerosolskum kan exempelvis framställas genom att man
sätter en alkoholisk lösning av den aktiva beståndsdelen
till en blandning av 0,5-1,5 vikt-% cetostearylalkohol,
1-3 vikt-% bensylalkohol, 15-20 vikt-% polyoxietylen-
sorbitanmonooleat eller -monostearat och 25-30 vikt-%
vatten, följt av en tillsats av freon.
För parenteral administrering framställes företrädesvis
injektionslösningar, som är lämpliga för subkutan eller
intrakutan administrering. För detta ändamål upplöses
ett salt av den aktiva beståndsdelen i en 0,72 %-ig vatten-
lösning av natriumklorid och lösningens pH inställes på
5.
Uppfinningen åskâdliggöres närmare medelst följande ut-
föringsexempel, som icke på något sätt är avsedda att
464 708
10
15
20
25
30
35
12
begränsa uppfinningens omfång.
Exemgel 1
9-nitro-17,18-dehydroapovinkaminolacetat
A) 9-nitro-17,18-dehydroapovinkamin
15 g (45 mmol) 17,18-dehydroapovinkamin (framställd
såsom beskrives i den belgiska patentskriften 892 069)
upplöses i en blandning av 75 ml isättika och 75 ml torr
acetonitril och lösningen kyles, till -SOC. Som nitre-
ringsmedel blandas 60 ml rykande salpetersyra med 30 ml
isättika och 30 ml torr acetonitril, blandningen kyles
till -5°C medan de nitrösa gaserna avdrives genom att
kvävgas får bubbla genom blandningen.
Nitreringsblandningen sättes droppvis till lösningen av
dehydroapovinkamin under kraftig omröring och kylning med
is/salt under 10 minuter, varvid man tillser att tempera-
turen håller sig mellan -5°C och OOC. Omröring och kyl-
ning fortsättes därefter under 15 minuter, varefter reak-
tionsblandningen hälles på 600 g is och neutraliseras
genom omsorgsfull tillsats av fast natriumkarbonat. De
utfällda baserna extraheras med kloroform, kloroformlös-
ningen extraheras genom skakning med vatten, torkas över
natriumsulfat och indunstas till torrhet. Som återstod
erhålles 17,5 g av en råbasblandning.
Som indunstningsåterstod av den första eluatfraktionen
erhålles 5,4 g (14,2 mmol; 31,7%) 9-nitro-17,18-dehydro-
apovinkamin, som därefter omkristalliseras ur etanol.
Formel: C21H21O4N3 (molvâkt: 379)
Smältpunkt: 140 till 142 C
[Eg]š0= +456° (kloroform)
U.V.-spektrum (metanol) Åmax: 217, 247 och 293 nm.
10
15
ZQ
25
30
35
” 464 708
Indunstning av den följande eluatfraktionen ger 4,8 g
(12,7 mmol; 28%) 11-nitro-17,18-dehydroapovinkamin,
som därefter omkristalliseras ur alkohol.
Formel: C21H2104N3 (molvikt: 379)
smältpunkt; 153 till 1s4°c
[O<_7š0= +81O (kloroform)
U.V.-spektrum (metanol) fimax: 218, 258 och 333 nm.
B) 9-nitro-17,18-dehydraoapovinkaminol
1,5 g (4 mmol) 9-nitro-17,18-dehydroapovinkamin upplöses
i 50 ml absolut etanol, 1,5 g litiumborhydrid sättes till
lösningen och blandningen får stå vid rumstemperatur över
natten. Lösningen spädes med 250 ml vatten, varefter de
utfällda baserna extraheras med 3 50-ml portioner bensen.
De kombinerade bensenlösningarna âterextraheras med vatten,
torkas över natriumsulfat och indunstas. Som återstod
erhålles 1,32 g av en râprodukt, som därefter kromatogra-
feras pâi en aluminiumoxidkolonn med Brockmann-II-aktivi-
tet. Genom eluering med en blandning av bensen och absolut
etanol i volymförhållandet 98:2 separeras den fraktion
som innehåller ren 9-nitro-17,18-dehydroapovinkamincloch
indunstas till ett utbyte av 105 g (3 mmol; 75%) av en
amorf produkt.
Formâä: C20Hå1O3N3 (molviktz 351)
[MJD = -127 (metanol),
U.V.-spektrum (metanol) Ähax: 217, 279 och 288 nm.
C) 9-nitro-17,18-dehydroapovinkaminolacetat
0,9 g (2,8 mmol) 9-nitro-17,18-dehydroapovinkaminol upp-
löses i 60 ml absolut kloroform, 5 ml absolut pyridin och
2,4 g acetylklorid tillsättes och blandningen får stå över
natten. Den hälles därefter på 200 ml isvatten och alkali-
seras under kylning. Faserna separeras och den alkaliska
vattenfasen extraheras med två ytterligare 40-ml portio-
ner av kloroform. De kombinerade kloroformfaserna åter-
14
464 708
10
15
20
25
30
35
extraheras genom skakning med 50 ml vatten, torkas över
natriumsulfat och indunstas till torrhet. Som återstod
erhåller man 1,04 g (2,65 mmol, 94%) 9-nitro-17,18-de-
hydroapovinkaminolacetat Produkten kristalliseras ur
etanol.
Formâà: C22Hå3O4N3 (molvikt: 393),
[kjæ = +88 (kloroform),
U.V.-spektrum (metanol): Ä = 217, 280 Och 287 nm
max
smältpunkt: 164 till 166°c
Exempel 2
9-nitro-17,18-dehydroapovinkamio}3',4',5'-trimetoxi-
bensoat
1,05 g (3 mmol) 9-nitro-17,18-dehydroapovinkaminolupplös-
es i 40 ml absolut bensen, 1 ml absolut pyridin och 1,0 g
3,4,5-trimetoxibensoylklorid tillsättes (4,3 mmol) och
blandningen får stå 2 timmar vid 40QC. Reaktionsblandningen
spädes med bensen till tvâ gånger sin ursprungliga volym
och skakas« med 20 ml av en 1 n natriumhydroxidlösning,
som i förväg har kylts med is. Vattenfasen skakas med
40 ml bensen, de kombinerade bensenlösningarna âterextra-
heras med 30 ml vatten och produkten torkas och kromato-
graferas på en kolonn fylld med 20 g aluminiumoxid. In-
dunstning av det eluat som innehåller den renade produk-
ten ger 0,75 g (1,38 mmol; 46%) 9-nitro-17,18-dehydroapo-
vinkaminoltrimetoxibensoat.
Formâà: C3OHå1O7N3 (molekylvikt: 545),
[bcjn = +38 (kloroform),
U.V.-spektrum (metanol) Ämaxz 215 och 284 nm.
Exempel 3
11-nitroapovinkaminodacetat
1,05 g (3 mmol) 11-nitroapovinkaminol (framställd i enlig-
het med den belgiska patentskriften 891 991) acetyleras
såsom beskrivits i exempel 2 för erhållande av 1,1 g
10
15
20
25
30
35
15
464 708
(2,8 mmol) 11-nitroapovinkaminolacetat som därefter
kristalliseras ur etanol.
Formåà: C22H2åO4N3 (molekylvikt: 393)
[ß¿]D = -150 (kloroform)
smä1tpunkt= 155 till 15e°c
U.V.-spektrum (metanol) Ämax:208, 248 och 259 nm.
Exempel 4
18ß-0-acetoxiapovinkaminolacëtat
A) 189-hydroxiapovinkamin
11,1 g (30 mmol) 18P-hydroxivinkamin upplöses i 200 ml
absolut kloroform och myrsyra sättes till lösningen, som
därefter dehydratiseras med acetylklorid. Indunstning av
reaktionsblandningen ger 11 g råprodukt, som i huvudsak
innehåller den önskade dihydroxiföreningen och i mindre
mängd det acetylerade derivatet därav. Blandningen upp-
löses i 150 ml absolut etanol, som innehåller 2 g ny-
framställt natriumetylat, och desacetyleras genom att
den får stå 1,5 timmar vid rumstemperatur. Den desacety-
lerade blandningen indunstas till 20 ml, hälles på 200 ml
isvatten och extraheras med fem portioner om vardera 50
ml bensen. De kombinerade bensenfaserna skakas med 50 ml
vatten, torkas över natriumsulfat och avfärgas genom att
de får passera en kolonn fylld med 50 g aluminiumoxid.
Adsorbenten tvättas omsorgsfullt med bensen. Indunstning
av den avfärgade bensenlösningen ger 9,37 g ren 189-
hydroxiapovinkamin (26,6 mmol; 88,6%) som en amorf produkt.
Formel: C21H2403N2 (molvikt: 352)
[Y¥]š0 : +134° (kloroform)
Utgående från en 1 n lösning av basen framställes dess
hydroklorid på sedvanligt sätt.
Formel: C21H24O3N2 - HClo
Smältpunkt: 120 till 122 C
/imjšo = +1oo° (etanol)
U.V.-spektrum (metanol) ÄmaX= 2041 223, 274 0Ch 314 nm
464 708 16
10
15
20
25
30
35
B) 18ß-hydroxiapovinkaminol och hydrokloriden därav.
7,0 g (20 mmol) 180-hydroxiapovinkamin reduceras med
litiumaluminiumhydrid i en absolut eterlösning såsom
beskrivits i exempel 1. Som indunstningsåterstod er-
hålles 6,15 g (19 mmol; 95%) 18P-hydroxiapovinkaminol.
Smältpunkt (efter omkristallisation ur bensen): 10500
(sönderdelning).
Formel: C20H24O2N2 (molvikt: 324).
Produkten omvandlas därefter till sin hydroklorid med 1 n
klorvätesyra.
Formel: C20H2402N2 ' HCl
smältpunkt: 190 :in 19z°c (söncm
U.V.-spektrum (metanol) Ämaxz 224, 256, 301 och 312.
C) 1fiß-acetoxiapovinkaminolacetat
1,62 g (5 mmol) 185-hydroxiapovinkaminol upplöses i 50 ml
absolut kloroform, 2 ml pyridin och 1,6 g (20 mmol) acetyl-
klorid tillsättes och blandningen får stâ vid rumstempera-
tur över natten. Lösningen hälles därefter på 200 ml is-
vatten, vattenfasen alkaliseras och de tvâ faserna skakas
flera gånger. Vattenfasen separeras och skakas med två
portioner om vardera 30 ml kloroform, de kombinerade kloro-
formfaserna âterextraheras genom skakning med 20 ml vatten,
torkas över natriumsulfat och indunstas till torrhet. Som
indunstningsâterstod erhålles 1,75 g av en amorf produkt,
som upplöses i bensen och avfärgas genom att den fâr pas-
sera en kolonn fylld med 10 g aluminiumoxid.
Indunstning av benseneluatet ger 1,6 g (3,92 mmol; 78%)
rent 185-acetoxiapovinkaminolacetat,som därefter kristalli-
seras ur alkohol.
Formel: C24H2804N2 (molgiktz 408)
Smältpunkt: 122 till 124 C
[Njšu = +18° (kloroform)
U.V.-spektrum (metanol) Qmax ; 223, 251, 301 och 311 nm.
10
15
20
25
30
35
17 464 708
ExemEel_§
A) 180-acetoxiapovinkaminolacetat
1,62 g (5 mmol) 185-hydroxiapovinkaminolacyleras med 1,2
g (15 mmol) acetylklorid i enlighet med det förfarande
som beskrives i exempel 4 C). Produkten kromatograferas
på en kolonn fylld med 100 g aluminiumoxid (Brockmann-II-
aktivitet) under användning av bensen för eluering. Som
benseneluat erhålles 0,84 g (2,06 mmol; 41%) 18ß-acetoxi-
apovinkaminolacetat.
Elueringen fortsättes därefter med en blandning av bensen
och etanol i volymförhållandet 98:2. Indunstning av den
första eluatfraktionen som erhålles ger 0,28 g (0,77 mmol;
15%) 18ß-acetoxiapovinkaminol,vars struktur kunde verifie-
ras även medelst masspektrometri.
Formel: C22H2603N2 (molvikt: 266) 0
Smältpunkt (efter kristallisation ur etanol): 119 - 120 C.
Lfi{]š0 = Oo (etanol)
Acetylhalt: 12%
U.V.-spektrum (metanol) Ämax: 225, 257, 302 och 313 nm.
B) 1ñß-hydroxiapovinkaminolacetat
1,62 g (5 mmol) 18ß -hydroxiapovinkaminol acyleras med
0,66 g (8,4 mmol) acetylklorid genom att följa det för-
farande som beskrives i exempel 4 C). Produktblandningen
kromatograferas därefter på en kolonn fylld med 100 g
aluminiumoxid med Brockmann-II-aktivitet.
Efter eluering med bensen isoleras 0,5 g (1,23 mmol; 24,5%)
18ß-acetoxiapovinkaminolacetat.
Elueringen fortsättes med en blandning av bensen och eta-
nol i volymförhållandet 98:2. Genom indunstning av den
första eluatfraktion som erhålles med denna blandning er-
18
464 708
10
15
20
25
30
35
hâlles 0,17 g (0,46 mmol; 9,3%) 180-acetoxiapovinkaminol.
Indunstning av nästa eluatfraktion ger 0,85 g (2,32 mmol;
46,5%) 18ß-hydroxiapovinkamindL44,acetat.
Formel: C22H2603N2 (molvikt: 366)
[x]š0 = -ZOO (etanol)
acetylhalt: 11,9%
nm.-spektrum (metanol) fimax: 225, 257, 302 och 31-3 nm.
Exempel 6
18ß-hydroxiapovinkamindbß',4',5'-trimetoxibensoat
2,27 g (7 mmol) 18ß-hydroxiapovinkaminolacyleras med 1,10
g (14 mmol) 3,4,5-trimetoxibensoylklorid medelst det för-
farande som beskrives i exempel 4.
Produktblandningen fraktioneras på en kromatografisk kolonn
fylld med 100 g aluminiumoxid. Efter eluering med bensen
och därefter med en blandning av bensen och etanol i volym-
förhâllandet 98:2 erhålles 1,05 g (2,03 mmol; 29%) 18P-
hydroxiapovinkamüxflrimetoxibensoat, följt av 1,34 g
(4,14 mmol; 59%) av oförändrat utgângsmaterial.
18ß-hydroxiapovinkaminotrimetoxibensoat är en amorf
produkt.
Formššz C3gH34O6N2 (molvikt: 518)
[bg]D = 0 (metanol, c = 0,5),
U.V.-spektrum (metanol) Ämaxz 215, 258, 301 och 312 nm.
Exempel 7
17,18-dehydroapovinkamindbp-nitrobensoat
5,0 g 17,18-dehydroapovinkaminol (16,3 mmol), som hade
framställts i enlighet med den belgiska patentskriften
892 069, upplöses i 30 ml absolut pyridin. 4,5 g (24 mmol)
p-nitrobensoylklorid tillsättes och blandningen får stå
tre timmar vid rumstemperatur. Den större delen av pyridinen
10
15
20
25
30
35
19 464 708
avdestilleras under reducerat tryck, återstoden kombineras
med 200 ml isvatten, alkaliseras med natriumhydroxidlös-
ning och extraheras med tre portioner om vardera 50 ml
kloroform. Kloroformfasen skakas med vatten, torkas över
natriumsulfat och indunstas. Återstoden upplöses i bensen
och avfärgas genom att den får passera en kolonn fylld
med 200 g aluminiumoxid, under användning av bensen för
eluering. 5,1 g p-nitrobensoat erhålles genom indunstning
av eluatet (11,2 mmol; 69%). Produkten kristalliseras ur
en blandning av 10 ml bensen och 50 ml etanol för erhållande
av 4,4 g kristallint 17,18-dehydroapovinkaminol-p-nitro-
bensoat.
Formel: C27H25O4N3 (mglviktz 455)
Smältpunkt: 175 - 176 C
[$(]š0 = Oo (kloroform)
U.V.-spektrum (metanol) Ämaxz 227, 260, 303 och 314 nm.
Exempel 8
189-O-palmitoylapovinkaminolpalmitat
0,66 g 18ß-hydroxiapovinkaminol (2,03 mmol), som hade
framställts såsom beskrivits i exempel 4 B), upplöses i
40 ml kloroform och 2,8 ml absolut pyridin och 2,8 g
palmitinsyraklorid tillsättes och blandningen får stå vid
rumstemperatur under två dagar. Lösningen skakas därefter
med 20 ml av en 2 n vattenlösning av natriumhydroxid och
därefter med två portioner om vardera 20 ml vatten, tor-
kas och indunstas till torrhet. Indunstningsåterstoden
avfärgas med 50 g aluminiumoxid i en bensenlösning. In-
dunstning av den avfärgade lösningen ger 4,58 g (1,98
mmol; 97%) palmitat, som därefter omkristalliseras ur
10 ml aceton för erhållande av 1,28 g renat 18-O-palmitoyl-
apovinkaminolpalmitat. '
Formel: C52H84O4N2 šmolvikt: 800)
Smältpunkt: 56 - 58 C
[odšo = OO (kloroform)
U.V-spektrum (metanol) )m : 224, 258, 301 och 312 nm.
ax
r
20
464 708
10
15
20
25
36
35
Exempel 9
1Sß-0-bensgylapovinkaminolbensoat
Genom att följa det i exempel 8 beskrivna förfarandet
men använda bensoesyraklorid i stället för palmitinsyra-
klorid erhålles den önskade föreningen.
Formâå: C34Hå304N2 (molvikt: 533)
[WD = +59 (kloroform)
U.V.-spektrum (metanol) )hax: 224, 257, 301, 312 nm.
Exempel 10
18ß-acetoxiapovinkaminohacetat 2 g
propylenglykol 50 g
paraffinolja 26 g
polyetylenglykol 400 5 g
stearylalkohol I 15 g
glycerolmonostearat 2 g
Den aktiva bestândsdelen upplöses i propylenglykol på
vattenbad, vars temperatur icke överstiger 50°C. De övriga
komponenterna smältes och kyles därefter till 40-45°C under
kontinuerlig omröring. Därefter sättes lösningen av den
aktiva beståndsdelen till smältan under omröring och den
erhållna krämen omröres till dess den har kylts till rums-
temperatur.
Exempel 11
11-nitroapovinkaminolacetat 1,0 g
triamcinolonacetonid 0,1 g
glycerolmonostearat 3,0 g
polyetylenglykol 400 5,0 g
stearylalkohol 13,0 g
paraffinolja 24,9 g
propylenglykol 53,0 g
10
15
2“ 464 708
Det i exempel 10 beskrivna förfarandet följes med undan-
tag av att de tvâ aktiva beståndsdelarna upplöses i pro-
pylenglykol.
Exempel 12
9-nitro-17,18-dehydroapovinkaminol
3',4',5'-trimetoxibensoat 1 %
propylenglykol 30 %
96 % etanol 69 %
Utgående från ovan angivna beståndsdelar framställes en
tinkturlösning.
Claims (4)
1. Apovinkamínolderivat med formeln (I) vari R1 är väte eller 9- eller 11-nitro; R2 är en alkylgrupp med 1-20 kolatomer, fenvl, 4-nitrofenyl eller 3,4,5-trimetoxifenyl: R3 är väte, hydroxi, alkanoyloxi med 1-20 kolatomer eller bensoyloxi; R4 är väte; eller R3 och R4 tillsammans bildar en valensbíndning; med det förbehållet att, om R2 står för 3,4,5-trimetoxifenyl, R3 ej betecknar väte, och syraadditionssalter därav. 23 464 708
2. Farmaceutisk beredning, k ä n n e t e c k n a d därav, att den som aktiv beståndsdel innehåller en farma- ceutiskt effektiv mängd av minst en förening med formel (I) enligt krav l vari R1 är väte eller 9- eller 11-nitro; R2 är en alkylgrupp med 1-20 kolatomer, fenyl, 4-nitro- fenyl eller 3,4,S-trimetoxifenyl; R3 är väte, hydroxi, alkanoyloxi med 1-20 kolatomer eller bensoyloxi; R4 är väte; eller R3 och R4 tillsammans bildar en valensbindning; med det förbehållet att, om R2 står för 3,4,5-trimetoxifenyl, R3 ej betecknar väte, eller ett farmaceutiskt godtagbart syraadditionssalt därav tillsammans med minst en farmaceutisk inert bärare eller utspädningsmedel och eventuellt ytterligare farmaceutiskt aktiva beståndsdelar. 464 708 411
3. Förfarande för framställning av nya apovinkaminolderivat enligt krav 1 med formeln (I) 'ÖJ vari R1 är väte eller 9- eller ll-nitro; R2 är en alkylgrupp med 1-20 kolatomer, fenyl, 4-nitro- fenyl eller 3,4,5-trimetoxifenyl; R3 är väte, hydroxi, alkanoyloxi med 1-20 kolatomer eller bensoyloxi: R4 är väte; eller R3 och R4 tillsammans bildar en valensbindning; med det förbehållet att, om R2 står för 3.4.5-trimetoxífenyl, R3 ej betecknar väte, eller syraadditionssalter därav, k ä n n e t e c k n a t därav, att man omsätter ett apovinkaminolderivat med formeln (II) if 464 708 vari substituenterna har de i samband med formel (I) ovan angivna betydelserna, med en syra med formeln (III) 122 coon (III) eller ett reaktivt derivat därav, vari R2 har ovan angivna betydelse, och, om så önskas, omvandlar en erhållen förening med formeln (I) till ett syraadditionssalt därav.
4. Förfarande enligt krav 3, k ä n n e t e c k n a t därav, att reaktionen utföres i närvaro av ett organiskt lösningsmedel.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU841582A HU192013B (en) | 1984-04-25 | 1984-04-25 | Process for production of new aporincavinol esther derivatives |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE8501993D0 SE8501993D0 (sv) | 1985-04-24 |
SE8501993L SE8501993L (sv) | 1985-10-26 |
SE464708B true SE464708B (sv) | 1991-06-03 |
Family
ID=10955131
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE8501993A SE464708B (sv) | 1984-04-25 | 1985-04-24 | Nya apovinkaminol-derivat, foerfarande foer framstaellning daerav och farmaceutiska kompositioner innehaallande desamma |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4680397A (sv) |
JP (1) | JPS60260575A (sv) |
AR (1) | AR242387A1 (sv) |
AT (1) | AT389307B (sv) |
BE (1) | BE902259A (sv) |
CA (1) | CA1265520A (sv) |
CH (1) | CH665418A5 (sv) |
DE (1) | DE3514669A1 (sv) |
DK (1) | DK183385A (sv) |
FI (1) | FI851612L (sv) |
FR (1) | FR2563520B1 (sv) |
GB (1) | GB2158066B (sv) |
HU (1) | HU192013B (sv) |
IT (1) | IT1208533B (sv) |
NL (1) | NL8501178A (sv) |
SE (1) | SE464708B (sv) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
HU192013B (en) * | 1984-04-25 | 1987-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for production of new aporincavinol esther derivatives |
HU191938B (en) * | 1984-07-11 | 1987-04-28 | Andras Vedres | Process for production of new derivatives of 9 and 11 nitro-apovincamin acid |
CN107595843A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-01-19 | 南京中医药大学 | 一类长春胺衍生物及其治疗2型糖尿病的用途 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2035784A1 (en) * | 1969-03-27 | 1970-12-24 | Olivier Louisette | Vincamine derivs with therapeutic propert- - ies |
BE790837A (fr) * | 1971-11-03 | 1973-02-15 | Richter Gedeon Vegeon Vegyesze | Nouveaux esters alcaloides utiles comme vasodilatateurs cerebraux et leur procede de preparation |
US4035370A (en) * | 1971-11-03 | 1977-07-12 | Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. | Alkaloid esters |
HU166476B (sv) * | 1972-12-15 | 1975-03-28 | ||
HU170888B (hu) * | 1975-06-10 | 1977-09-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Sposob poluchenija novykh, opticheski aktivnykh proizvodnykh eburnameninov |
HU171662B (hu) * | 1975-07-18 | 1978-02-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Sposob poluchenija novykh, opticheski aktivnykh proizvodnykh apovinkaminola i ikh kislotnykh adduktov |
US4285949A (en) * | 1978-12-11 | 1981-08-25 | Omnichem Societe Anonyme | Vincamine derivatives, their preparation and therapeutical use |
HU183326B (en) * | 1981-02-11 | 1984-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for preparing new apovincaminol-3',4',5'-trimethoxy-benzoates substituted in the a ring and acid addition salts thereof |
HU183323B (en) * | 1981-02-11 | 1984-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing 17,18-dihydro-apovincaminol-3-comma down comma aaove-4-comma down comma above-5-comma down comma aaove-trimethoxy-benzoate and acid additional salts thereof |
HU183324B (en) * | 1981-02-11 | 1984-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for preparing new apovincaminol-3',4',5'-trimethoxy-benzoate and acid addition salts thereof |
SE449863B (sv) * | 1981-02-11 | 1987-05-25 | Richter Gedeon Vegyeszet | Apovinkaminolderivat, framstellning och farmaceutisk beredning derav |
HU183325B (en) * | 1981-02-11 | 1984-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for preparing new apovincaminol-3',4',5'-trimethoxy-benzoates substituted with a nitro group |
HU192013B (en) * | 1984-04-25 | 1987-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for production of new aporincavinol esther derivatives |
-
1984
- 1984-04-25 HU HU841582A patent/HU192013B/hu not_active IP Right Cessation
-
1985
- 1985-04-22 CH CH1720/85A patent/CH665418A5/de not_active IP Right Cessation
- 1985-04-23 CA CA000479869A patent/CA1265520A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-23 BE BE0/214892A patent/BE902259A/fr not_active IP Right Cessation
- 1985-04-23 FR FR8506123A patent/FR2563520B1/fr not_active Expired
- 1985-04-23 NL NL8501178A patent/NL8501178A/nl not_active Application Discontinuation
- 1985-04-23 DE DE19853514669 patent/DE3514669A1/de not_active Withdrawn
- 1985-04-24 AT AT0122885A patent/AT389307B/de not_active IP Right Cessation
- 1985-04-24 SE SE8501993A patent/SE464708B/sv not_active IP Right Cessation
- 1985-04-24 IT IT8520483A patent/IT1208533B/it active
- 1985-04-24 FI FI851612A patent/FI851612L/fi not_active Application Discontinuation
- 1985-04-24 GB GB08510370A patent/GB2158066B/en not_active Expired
- 1985-04-24 DK DK183385A patent/DK183385A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-04-24 JP JP60086607A patent/JPS60260575A/ja active Pending
- 1985-04-24 AR AR85300172A patent/AR242387A1/es active
- 1985-04-25 US US06/727,130 patent/US4680397A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS60260575A (ja) | 1985-12-23 |
CH665418A5 (de) | 1988-05-13 |
DK183385D0 (da) | 1985-04-24 |
FI851612L (fi) | 1985-10-26 |
DE3514669A1 (de) | 1985-10-31 |
SE8501993L (sv) | 1985-10-26 |
HU192013B (en) | 1987-04-28 |
GB8510370D0 (en) | 1985-05-30 |
NL8501178A (nl) | 1985-11-18 |
SE8501993D0 (sv) | 1985-04-24 |
FR2563520B1 (fr) | 1988-11-18 |
US4680397A (en) | 1987-07-14 |
IT1208533B (it) | 1989-07-10 |
GB2158066B (en) | 1988-04-07 |
BE902259A (fr) | 1985-08-16 |
AR242387A1 (es) | 1993-03-31 |
ATA122885A (de) | 1989-04-15 |
GB2158066A (en) | 1985-11-06 |
FI851612A0 (fi) | 1985-04-24 |
HUT37428A (en) | 1985-12-28 |
IT8520483A0 (it) | 1985-04-24 |
DK183385A (da) | 1985-10-26 |
AT389307B (de) | 1989-11-27 |
FR2563520A1 (fr) | 1985-10-31 |
CA1265520A (en) | 1990-02-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CH645642A5 (fr) | Derives de d-6-n-propylergolines, leur procede de preparation et compositions pharmaceutiques en contenant. | |
US4130568A (en) | 8-Methoxypsoralen derivatives | |
US4528289A (en) | Corynantheine derivates, processes for their preparation, and their use | |
SE464708B (sv) | Nya apovinkaminol-derivat, foerfarande foer framstaellning daerav och farmaceutiska kompositioner innehaallande desamma | |
HU191714B (en) | Process for the production of new 4-phenyl-4-oxo-2-butene carboxylic acid-derivatives | |
US4307113A (en) | Anthranilic acid derivatives | |
US4424223A (en) | Polycyclic compounds containing a double bond in the D-ring pharmaceutical compositions containing them, and methods of treating psoriasis with them | |
US4108996A (en) | (-)-Apovincaminol lauric acid ester and cerebral vasodilatory composition thereof | |
EP0079639B1 (en) | A new anti-inflammatory drug | |
US4353899A (en) | Novel 16α-methyl-pregnane | |
JPH0378392B2 (sv) | ||
US4432982A (en) | Polycyclic compounds substituted on the A-ring, pharmaceutical compositions containing them, and methods of treating psoriasis with them | |
CA1215061A (en) | 17-18-dehydro-apovincaminol and process therefor | |
FI70215B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara apovinkaminolderivat och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter daerav | |
HU183325B (en) | Process for preparing new apovincaminol-3',4',5'-trimethoxy-benzoates substituted with a nitro group | |
JPS6372627A (ja) | 子宮内膜症治療薬 | |
JPH01316397A (ja) | 11β,17α,21―トリヒドロキシ―1,4―プレグナジエン―3,20―ジオン 21―〔(E,E)―3,7,11―トリメチル―2,6,10―ドデカトリエノアート〕及びこれを含有する抗炎症剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8501993-3 Effective date: 19931110 Format of ref document f/p: F |