SE464683B - Synergistisk farmaceutisk komposition foer behandling av leverrubbningar innehaallande 5-aminoimidazol-4-karboxamidoortofosfat (aica-fosfat) och vitamin b1 och/eller vitamin e - Google Patents

Description

464 683 2 10 15 20 25 30 35 Förutom många andra faktorer är huvudsakligen alkoholism ansvarig för denna intensiva spridning av leversjukdomar.

De vanligaste typerna av leverrubbningar är fettlever, al- koholisk hepatit och alkoholisk cirros.

Den terapeutiska behandlingen av leverrubbningar kan icke anses vara löst ¿örvosi netilap 112 386 /1971/; z. Ärztl.

Fortbildung, §§, 234 /1974/; Knoll: Gyögyszertan /1974/; Szekeres: Orvosi gyögyszertan /1980L]. 5 Den faktor som inducerar den leverskadande processen är ir- relevant; som fundamental princip kan sägas att resultatet av den patologiska processen bestämmes av jämvikten mellan den skadliga effekten av det skadliga ämnet, (virus, alko- hol) och den positiva effekten av levervävnadens regenere- rande aktivitet. Idag finns icke någon möjlighet att eli- minera de skadliga ämnena, speciellt när det gäller utveck- lade och framskridna leversjukdomar. Det enda realistiska mål som kan uppnås med den terapeutiska behandlingen är att för- bättra levervävnadens naturliga regenererande förmåga. Med kännedom om leverfunktionens komplexicitet kan denna be- handling icke ske i form av monoterapi. Framgången med po- lyterapeutiska behandlingar beror på om man kan finna en ledande farmakon för framställning av de farmaceutiska kom- binationer som är lämpliga att påverka den patologiska grundprocessen. Om man har tillgång till denna farmakon kan man utarbeta sådana kombinationer som är lämpliga för pla- nering av farmaceutiska kompositioner med flera “angrepps- punkter".

Förstadieföreningarna till aminosyror kan anses vara sådana farmakoner vid behandling av leverrubbningarlbtsch., Med., wschr., 1§ 1331 /1953/; ntsch., Med., wschr., gl 573 /1956/I.

Nukleotiderna eller nukleosiderna ifråga har emellertid i all- mänhet icke förmåga att penetrera genom cellmembranet och de är ofta även toxiska ÅÃngew. Che., 82. 730 /1970/; J. Med.

Chem. 15. 1334 /1972¿]. Problemet förvärras av det faktum att framställningen av nämnda föreningar är mycket kostsam 10 15 20 25 30 35 ß 464 683' och komplicerad. n Man har därför sökt efter sådana kemiska strukturer, som lätt kan penetrera in i cellen och där kan omvandlas till nekleotider.

Det är väl känt inom tekniken att den fettlever som induce- ras av alkohol och utmärkes av triglyceridackumulering och ATP-sänkning icke kan normaliseras genom administrering av guanin, GTP eller ATP ÅÄrch., Int. Pharmacodyn. 232, 302 /1978L]. Ehuru den på så sätt inducerade fettlevern och ATP-sänkningen kan normaliseras medelst intraperitoneal ad- ministrering av adenin (6-aminopurin), omvandlas en del av 6-aminopurinen till 8-oxiadenin- och 2,6-dioxiadeninmetabo- liter, som svårt skadar njurfunktionen LU. Pharmacol. exper.

Ther. 140. 20/19s2¿f.

Administreringen av nukleotidförstadieföreningen orotinsy- ra leder även till störningar i lipidmetabolismen i levern och resulterar i fettlever jfi. Biol. Chem. 238,2464 /1963L].

Denna fettlever liksom den fettlever som orskas av etionin kan normaliseras genom administrering av adenin (6-amino- purin) men denna behandling kan icke användas för terapeu- tiskt bruk till följd av ovan angivna nevrotoxiska verkan.

Purinförstadieföreningen 5-aminoimidazol-4-karboxamid (AICA) Åšcience, lig, 634 /1950/; J. Biol. chem. 196, 513 /1952/] har använts för terapeutisk behandling (J. Med.

Sci. 15, 171 /1964L] i form av sitt salt med orotinsyra un- der varunamnet Aicorat [Änn. Histochim. 14, 79 /1969Å].

Aicorat är icke terapeutiskt effektivt eftersom orotinsy- ran själv är ett leverskadande medel LU. Biol. Chem. 238, 2464 /1963ÅI; således upphäves i orotinsyrasaltet av AICA den fördelaktiga verkan av AICA av den skadliga verkan av den andra komponenten. 464 10 15 20 25 30 35 685 4 Syftetlmflidenna uppfinning har varit att finna sådana imid- azolkarboxamidderivat, som uppvisar de gynnsamma verkning- arna hos purinförstadieföreningar men som är fria från de negativa verkningar som har rapporterats i fallet med Aicorat.

Exp. Path. 15, 271-287 /1978/ beskriver de fördelaktiga farmakologiska egenskaperna hos 5-aminoimidazol-4-karbox- amidortofosfat (i det följande AICA-fosfat) vid behandling av lever, som artificiellt har skadats med koltetraklorid.

Det är känt inom tekniken att AICA-fosfat kan framställas genom omsättning av 2-amino-2-cyanoacetamid med formamidin- ortofosfat (ungerska patentet 164 397). Det på så sätt er- hållna råa AICA-fosfatet är icke lämpligt för terapeutiskt bruk.

I vårt ungerska patent 188 182 beskrives ett förfar- ande för framställning av rent AICA-fosfat, som är lämpligt för terapeutiskt bruk. Enligt nämnda förfarande kan AICA- -fosfat framställas med hög renhet genom omsättning av AICA- -bas med ortofosforsyra i ett vattenhaltigt alkoholiskt medium.

Sammanfattning av uppfinningen Vi har funnit att det enligt ovan framställda AICA-fosfatet och de kompositioner som innehåller AICA-fosfat och vitami- ner, företrädesvis vitamin B och E, med fördel kan användas vid behandling av alkoholisk fettlever och andra leverrubb- ningar av olika ursprung, vilka leder till cirroshepatit, eftersom de inhiberar det patologiska framskridandet av sjukdomarna.

Detaljerad beskrivning av uppfinningen Det högrena AICA-fosfat som användes för behandlingen upp- visar i sig följande egenskaper: 10 15 20 25 30 35 5 464 685' 1) Vid akuttoxicitetsprovningar inducerar föreningen vid administrering intraperitonealt eller intravenöst icke några toxiska symptom ens i större doser (LDSO > 5000 mg/kg vid oral administrering till råttor; LD5o > 1000 mg/kg vid intravenös administrerin9); därför kan AICA-fosfat betrak- tas som en ogiftig förening.

Provningar avseende kronisk toxicitet (6 månader) på gna- gare och andra djur har visat att icke ens en 15 - 20 - fal- dig mängd av den avsedda terapeutiska dosen resulterar i några toxiska symptom. 2) Vid undersökning av de allmänna farmakodynamiska verk- ningarna av AICA-fosfat kan konstateras att det icke har någon signifikant verkan på de övriga organen eller organsys- temen vid de klassiska farmakologiska provningarna och därför kan dess verkan på levern anses vara organspecifik. 3) vid undersökning av den leverspecifika effekten av för- eningen kan man konstatera att AICA-fosfat uppvisar flera fördelaktiga egenskaper. Enligt försök utförda under an- vändning av radioaktivt AICA-fosfat kunde en ökning av le- verserumkvoten observeras allteftersom behandlingstiden fortskred. Det radioaktiva AICA-fosfatet kan påvisas i RNS- -fraktionen i leverceller. Vid behandling med AICA-fosfat förbättras proteinsyntesen och mängden glykogen ökas i le- vercellerna. Den fettretrogradation av levern som orsakas av etionin reduceras väsentligt av AICA-fosfat. (Den lever- skada som orsakas av etionin är den som mest liknar human- fettlever orsakad av alkohol). Åšrends in Pharmacological Sciences 82. vor. 3. No. 9, sid. 365 - 36Zf. 4) Vid immunreaktioner ökar både antalet aktiva och antalet totala G Rosetta vid behandling med AICA-fosfat.

De kroniska leverrubbningarna utmärkes i allmänhet av från- varon av fosfatanjoner, närmare bestämt en patologisk minsk- 464 685 6 10 15 20 25 30 ning av den intracellulära koncentrationen av fosfatjoner.

Denna brist på fosfatjoner är ofta ett resultat av akut el- ler oftare kronisk alkoholism [Élin. Chem. Acta 78, 353 /1978L].

Effekten av andra AICA-salter, exempelvis AICA-hydroklorid, ' 1 AICA-pyrofosfat och AICA-orotat, på artificiellt skadad le- ver är icke lika god som verkan AICA-fosfat. En av förkla- ringarna till detta är att de fosfatjoner som administre- ras tillsammans med AICA-fosfat tar del i syntesen av 0(-D-ribofuranos-1-pyrofosfat-5-fosfat, som spelar en be- tydande roll vid uppbyggnaden av nukleotider utgående från förstadieföreningar. Med kännedom om grundeffekterna av AICA-fosfat har vi utarbetat en komposition, som icke endast är lämplig för att öka de leverskyddande (regenerativa) egen- skaperna hos levern utan även för symptomatisk liksom pato- gen behandling av alkoholisk fettlever.

Vi har funnit att verkan av AICA-fosfat signifikant kan ökas om det administreras i kombination med vitaminer, före- trädesvis med vitamin B eller E. L Aktiviteten av komponenterna och kombinationen har undersökts på lever, som har skadats med etionin. Aktiviteten av kombi- nationerna uttrycks genom angivande av leverns triglycerid- halt. Triglyceridhalten hos levern efter administrering av , 250 mg/kg etionin på andra dagen har tagits som utgångs- punkt; de resultat som anges i tabellen nedan är medelvär- den erhållna för 10 djur. CFY-råttor av hankön med en vikt om 200 g användes vid försöken. Resultaten är angivna i ta- bell I. 10 15 20 25 7 464 6.83 Tabell I Behandling Triglyceridhalt i Minskning /p.o./ levern, mmol/kg (D), % etionin, 250 mg/kg 0,042 - etionin, 250 mg/kg + AICA-fosfat, 200 mg/kg 0,031 26 etionin, 250 mg/kg + AICA-fosfat, 200 mg/kg + vit. B1, 0,1 mg/kg 0,022 47,7 etionin, 250 mg/kg +AICA-fosfat, 200 mg/kg + vit. E, 10 mg/kg 0,023 47,5 Data i tabell I ovan visàr klart att de använda vitaminerna signifikant ökar aktiviteten av AICA-fosfat.

Histologiska provningar visar att en diffus, kraftig dropp- formad degenerering av levern utvecklas som en följd av be- handlingen med 250 mg/kg av etionin på andra dagen efter behandlingen, medan på femte dagen den histologiska pato- grafin domineras av den fina droppformiga fettdegenere- ringen. 200 mg/kg av AICA-fosfat, som administreras per- oralt, hindrar levern från att bli fettlever och denna aktivitet intensifieras av vitamin B1 eller E.

Resultaten av de histologiska provningarna återges i tabell II nedan. 464 683 10 15 20 25 30 35 Têbeïï II Haïvkvantitativ utvärdering av ïeverfettbildning enligt oljeröd- Toxiskt ämne Behandling infärgning * etionin på 2:a dagen +++ på 5:e dagen ++ /+/ etionin AICA-fosfat = på 2:a dagen ++ /+/ på 5:e dagen + /+/ etionin AICA-fosfat = på 2:a dagen ++ + vitamin B1 på 5:e dagen + etionin AICA-fosfat = på 2:a dagen ++ + vitamin E på 5:e dagen + *) Medeivärden erhållna vid fem försök De administrerade doserna var: etionin: 250 mg/kg p.o.

AICA-fosfat: 200 mg/kg p.o. vitamin B1: 0,1 mg/kg p.o. vitamin E: 10 mg/kg p.o.

Uppfinningen avser synergistiska farmaceutiska kompositioner, som är lämpliga för behandling av leverrubbningar och vilka som aktiv beståndsdel innefattar 5-aminoimidazol-4-karbox- amidortofosfat och vitaminer, företrädesvis vitamin B1 el- ler E, eventuellt i kombination med andra farmaceutiska excipienter.

Kompositionen enligt uppfinningen innehåller företrädesvis 20 - 60 vikt% 5-amino-imidazol-4-karboxamidortofosfat och 0,01 - 20 vikt% vitaminer.

Kompositionen enligt uppfinningen kan beredas i en form, som (I 9 464 683' kan administreras oralt, exempelvis som tabletter, drageer eller kapslar. Tabletterna innehåller företrädesvis 100 el- ler 200 mg av den aktiva bestândsdelen.

Uppfinningen âskàdliggöres närmare medelst följande utför- ingsexempel.

Exemgel 1 AICA-fosfat 200 mg Tiaminklorid /vit. B1/ 5 mg Riboflavin /vit. B2/ 5 mg Piridoxyniumklorid /vit. B6/ 6 mg Di -(X-tokolferolacetat /vit. E/ 4 mg Talk 20 mg Laktos 50 mg Stärkelse 50 mg Stearin " 8 mg Luviscol /VA. 64/ 8 mg Mikrokristallin cellulosa /Avice1/ » 44 mg 400 mg Dragêöverdrag: Carbowax 6000 1,0 mg Titandioxid 4,0 mg Metylcellulosa 6,8 mg Luviscol /VA. 64/ 6,8 mg Talk 21,4 mg 40 mg AICA-fosfatet, stärkelsen och laktosen homogeniseras. Luvis- col och stearin upplöses i isopropanol och pulverblandning- en granuleras med den på så sätt erhållna blandningen. Gra- nulerna torkas vid 40 - 50°C. Därefter sker âtergranulering 464 683 ,0 10 15 20 25 30 35 på en sikt med maskvidden 16 mesh.

Därefter blandas de homogeniserade vitaminerna, laktosen och den mikrokristallina cellulosan med granulerna och den erhållna blandningen torkas till dess granulernas fukt- halt är 1,5 %. Bikonvexa dragêkärnor pressas av granulerna på konventionellt sätt. Överdraget appliceras i en övertrycksapparat enligt den kända tekniken för framställning av filmdragêer.

Exempel 2 första steget AICA-fosfat 200 mg Nikotinamid 9 mg Metionin 50 mg Folsyra 1 mg Luviscol /VA. 64/ 4 mg Stearin 4 mg andra steget Laktos 108 mg Stärkelse 12 mg Gelatin 2 mg 400 mg Första steget: Luviscol och stearin upplöses i isopropanol och därefter granuleras AICA-fosfatet. Granulatet torkas och âtergranu- leras därefter på en industrisikt med maskvidden 16 mesh och de övriga komponenterna i det första steget blandas med granulatet.

Andra steget: Gelatin upplöses i destillerat vatten på vattenbad vid 70°C efter svällning och blandningen av laktos och stärkelse vä- tes med denna lösning. Den vätta blandningen granuleras på 10 15 20 11 en sikt med maskvidden 16 mesh och tørkas därefter vid 464 685 ' 60°C under utnyttjande av fluidiseringsteknik. De granulat som har erhållits i det första steget och i det andra ste- get homogeniseras och bikonvexa dragékärnor pressas. Appli- cering av överdraget utföres enligt exempel 1.

Exemgel 3 Första steget Andra steget AICA-føsfat Metionin Ornityn-asparginat Luviscol /VA. 64/ Stearin Laktos Stärkelse Gelatin Dragën framställes enligt exempel 2. 200 50 25 mg mg 6 mg 4 mg 100 10 400 mg mg mg mg

Claims (4)

1. 464 683 10 15 20 25 1. Synergistisk farmaceutisk komposition för behandling av leverrubbningar, k ä n n e t e c k n a d därav, att den som aktiva beståndsdelar innehåller 20-60 vikt-8 S-aminoimidazol- 4-karboxamidortofosfat och 0,01-20 vikt-3 vitaminer innefat- tande vitamin B; och/eller vitamin E samt eventuellt farma- ceutiskt godtagbara excipienter.

2. Komposition enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d därav, att vitaminet år vitamin Bi.

3. Användning av S-aminoimidazol-4-karboxamidortofoefat till- sammans med vitaminer innefattande vitamin B1 och/eller vitamin E för framställning av en synergistisk farmaceutisk komposition för behandling av leverrubbningar, varvid nämnda komposition innehåller 20-60 vikt-I av 5-aminoimidazol-4- karboxanidortofosfatet och 0,01-20 vikt-X av ifrågavarande vitamin samt eventuellt farmaceutiskt godtagbara excipienter.

4. Användning enligt krav 3, där vitaminet är vitamin Bl. _.)