SE444686B - Silversalter av fosfanilsyra, forfarande for framstellning av dessa samt en antibakteriell komposition for lokal applicering - Google Patents

Description

f_' 7910160-8 Silversulfadiazin avslöjades uppenbarligen första gången i den amerikanska patentskriften 2 422 688; se även de ameri- kanska patentskrifterna 3 761 590 och 3 792 l6l. Olika kom- plex avslöjas i de amerikanska patentskrifterna 2 536 095 och 2 629 682. Silverderivat av pyrimidiner och pyriner av- slöjas i Farmdoc 69657R. Andra preparat och användningsområ- den avslöjas i Chemical Abstracts §l, l58672c, Farmdoc 04862X, den amerikanska patentskriften 4 020 150, Farmdoc 70776Y och Farmdoc 39520A. Kombinationer med andra nya metall- salter av sulfadiazin, exempelvis av zink och cerium, avslö- jas exempelvis i de amerikanska patentskrifterna 4 088 754 och 4 078 058 och i Farmdoc 63047Y, 73999X och 04l60A. A Silverzinkallantoinat avslöjas i den amerikanska D%tentskrif- ten 3 856 805 såsom en ny förening med baktericida och sårlä- kande egenskaper. Silverallantoinat har beskrivits för behand- ling av brännskador i den brittiska patentskriften l 346 544.

Se även de amerikanska patentskrifterna 3 830 824, 3 830 825, 3 830 908, som utvidgar begreppet till att omfatta andra sy- ror och metaller, såsom zink.

Silversulfadiazin saluförs såsom "SILVADENE" kräm av Marion Laboratories Inc., Kansas City, Missouri; se sidorna 1073- 1074 i den 32 upplagan av Physicians' Desk Reference, som utges av Medical Economics Company, Oradell, N.J. (1978).

Framställningen därav avslöjas i Farmdoc 39520A. Den antibak- teriella aktiviteten in vitro av silversulfadiazin har rappor- terats exempelvis av Carr et al i Antimicrobial Agents and Chemotherapy 4(5) (1973) 585-587.

Current Science (Indien) lå (1947) 223-225 rapporterar den antibakteriella aktiviteten in vitro av fosfanilsyra och vissa av dess derivat med avseende på E. coli, §. aureus, Typhi murium, C. xerosis och Boyd II.

I Current Science (Indien) ll (1948) 125-6 rapporteras blodni- våer och resultaten av toxicitetsstudier med fosfanilsyra på .sultaten av testning av olika sulfonamider, sulfoner och be- 7910160-6 laboratoriedjur. Resultaten antyder dålig absorption och låg toxicitet.

H. Bauer: J. Amer. Chem. Soc. ni (l94l) 2137-2138 avslöjar en syntes av fosfanilsyra liksom även G.O. Doak et al.: J. Ä Amer. Chem. Soc. li (1952) 753-754. Vissa salter avslöjas även i nämnda publikationer.

J. Pharmacol. Exp. Therap. li (1942) 163-173 rapporterar re- släktade fosforföreningar med avseende på experimentell tu- berkulos. Resultaten visar att fosfanilsyra har god tuberko- lostatisk aktivitet in ninnn men ingen effekt in ning, för- modligen till följd av låga blodkoncentrationer av fosfanil- syra.

Chemical Abstracts än (l96l) 2883g (från Texas Repts. Biol. and Med. i§ (1960) 379-394)rapporterar att fosfanilsyra har viss skyddande verkan vid testning på vita möss med avseende på en standardiserad infektion, som framkallas genom intrave- nös injektion av jästfasen av Histqplasma capsulatum.

Antibiotics and Chemotherapy i (1953) 256-264 rapporterar ak- tiviteten in ninnn av vissa aromatiska fosfon- och fosfinsy- ror med avseende på en mångfald bakteriearter. Fosfanilsyra anges allmänt vara den mest aktiva av de testade föreningarna.

Dess aktivitet närmar sig aktiviteten av sulfatiazol vid jäm- förelse på molär bas och dess antibakteriella spektrum lik- nar spektrumet av sulfanilamid. I artikeln anges även att en senare artikel i detalj skulle avslöja den upptäckten att fos- fanilsyra är effektiv in Kinn på möss infekterade med §. tynhosa, gg. fluorescens och Plasmodium berghei.

Den amerikanska patentskriften 3 159 537 avslöjar potentiering av olika tetracyklin-antibiotika genom blandning med (eller saltbildning med) olika oxifosforföreningar innefattande fos- fanilsyra. ““791o1eo-6 Ciencia (Mexico) ll (l957)'Hr73 rapporterar resultaten av studier av synergismen in vitro av blandningar av fosfanil- syra med neomycin eller streptomycin med avseende på olika kliniskt isolerade stammar av Salmonella, Shigella och Proteus liksom med avseende på koliformbakterier med förmåga att in- ducera jäsning av laktos. Kombinationen av fosfanilsyra och neomycin uppvisar synergism med avseende på Salmonella, Proteus och koliformbakterierna. Med avseende på Shigella erhålls emellertid endast en ringa synergism vid låga koncen- trationer och endast en additiv effekt eller ingen effekt alls vid måttliga och höga koncentrationer.' 3. »Detaljerad beskrivning av uppfinningen Ändamålet med föreliggande uppfinning är att tillhandahålla medel för terapeutisk behandling av brännskador, vilka bl.a. är i avsaknad av de olägenheter som är förknippade med silver- sulfadiazin. Ändamålet med föreliggande uppfinning uppnås genom tillhanda- hållandet av vissa silversalter, av fosfanilsyra, nänmwelæætämz monosilverfosfanilat och disilverfosfanilat.

Uppfinningen avser även ett förfarande för framställning avIMm0SiTWflP fosfanilat eller disilverfosfanilat, vilket förfarande innebär att man blandar, företrädesvis vid rumstemperatur, en vattenhaltig suspension av fosfanilsyra med en vattenlösning, som innehål- ler mræfäfliga1æmflnga1 en eller två mol silvernitrat per mol fosfanilsyra, för framställning av en blandning, som därefter blandas med ett med vatten blandbart organiskt lösningsmedel, företrädesvis aceton, och företrädesvis genom långsam till- sats till det organiska lösningsmedlet för utfällning av den önskade produkten, varvid en liten mängd ammoniumhydroxid eventuellt tillsätts.

I en typisk beredning är ett salt enligt föreliggande uppfin- ning, företrädesvis i mikroniserad form, införlivat med en / 7 ILJI OlJ“'O med vatten blandbar kräm, som företrädesvis är en hypoaller~ genisk kräm, i en koncentration av exempelvis l-100 mg och företrädesvis ca lO mg salt per gram krämbas. En lämplig krämbas utgörs av vitt vaselin USP, stearylalkohol USP, isopropylmyristat, sorbitanmonooleat, polyoxyl-40-stearat USP, propylenglykol USP och vatten med en tillsats av O,3% metylparaben USP såsom konserveringsmedel. Proportionerna av beståndsdelarna är de som vanligen används inom tekniken.

Vid användning rengörs och debrideras brännsåren och silver- fosfanilatkrämen appliceras med handen, försedd med en ste- ril handske. Brännsåren bör vara täckta med denna kräm vid alla tillfällen. Krämen appliceras bäst en till två gånger dagligen igen tjocklek av ca 1,6 mm. Om så erfordras bör krämen appliceras på nytt på sådana områden där den eventu- ellt har avlägsnats på grund av patientaktivitet. Behand- lingen med denna kräm bör fortsättas till dess en tillfreds- ställande läkning har inträtt eller till dess det brännska- dade området är klart för ympning. 4. Utföringsexempel Uppfinningen åskådliggörs närmare medelst följande utförings- exempel, vari temperaturangivelserna avser Celsiusgrader.

Exempel l C6H7NO3PAg 7 Syntes av monosilverfosfanilat m Till l,50 g (0,0087 mol) fosfanilsyra i 525 ml avjoniserat vatten vid 25° sattes 1,47 g (o,oo87 moi) siivernitrat, som i förväg hade upplösts i 75 ml avjoniserat vatten. Den 7910160-6 . _. .. -uwwhï-.éíí-...fi-w erhållna blandningen sattes långsamt till 600 ml aceton och 1,3 ml koncentrerad ammoniumhydroxid tillsattes. Efter om- röring vid 00 under en timme filtrerades reaktionsblandningen och precipitatet torkades i en vakuumugn vid 409 under 16 timmar. Efter torkning utgjordes materialet av ett grâvitt till rosafärgat kristallint pulver, som erhölls i ett utbyte av 1,90 g (78% utbyte). IR-data och elementaranalysdata var i överensstämmelse med den antagna strukturen. Produkten \ innehöll 2,48% vatten (enligt Karl Fischer). r 53:» a: *Jëäi íiíàë Analysdata Beräknat för C6H7NO3PAg C 25,74 H 2,53 N 5,00 Ag 38,53 Funnet: C 23,50 H 2,36 N 4,72 Ag 37,40.

Kristallform: Diamantformade kristaller och kristallfragment.

Det på så sätt erhållna kristallina silverfosfanilatet har visat sig ha en avsevärd antibakteriell aktivitet med avseen- de på Pseudomonas.

Exempel 2 / H C6H6NO3PAq2 7 HÛN ._OÄg Syntes av disilverfosfanilat Till lO0 mg (0,00058 mol) fosfanilsyra i 35 ml avjoniserat_ vatten vid 250 sattes 200 mg (0,00ll8 mol) silvernitrat, som i förväg hade upplösts i 5 ml avjoniserat vatten. Den erhåll- na blandningen sattes långsamt till 100 ml aceton, och två droppar koncentrerad ammoniumhydroxid tillsattes. Efter omrö- ring vid Oo under l timme filtrerades reaktionsblandningen Analysdata Beräknat för C6H6NO3PAg2 C l8,63 H l,57 N 3,62 Ag 55,77 ~ Funnet: C 18,83 H 1,50 N 3,74 Ag 54,00. 7910160-6 É å och precipitatet torkades i en vakuumugn vid 400 under 16 timmar. Efter torkning erhölls materialet i form av ett grå- vitt till rosafärgat kristallint pulver, som erhölls i ett utbyte av l50 mg (67% utbyte).

Kristallform: kristallfragment.

Produkten innehöll 0,40% vatten (enligt Karl Fischer).

Det på så sätt erhållna kristallina silverfosfanilatet har visat sig ha en avsevärd antibakteriell aktivitet med avseen- de på Pseudomonas. 5. Aktivitet in vitro Bakterier: organismerna, till största delen av färskt kliniskt ursprung, erhölls från talrika källor med bred geografisk för- delning. Erforderliga anaerober hölls i ägg-kött-medium (Difco) och Mycobakterium förvarades i Lowenstein Medium (Modifikation enligt Jensen från Difco). Tekniken för förva- ring av alla övriga organismer har tidigare beskrivits (Leitner et al.: BL-S640, A Cephalosporin with a Broad Spectrum of Antibacterial Activity: Properties in vitro, Antimicrob.

Agents Chemoter. 7:298-305 (1975)).

Antibiotiskt spektrum: den tillväxtinhiberande aktiviteten av föreningarna bestämdes medelst antibiotikautspädningstekniken.

Man förfor på följande sätt: Aeroba organismer (exklusive Mycobacterium). Med undantag för Haemophilus och Neisseria utfördes analysen i Müller-Hinton- ~'791o1so-6 medium (Difco). För fastidiosa organismer, dvs. Strepto- coccus, Listeria, Pasteurella, Bordetella och Vibrio, kom- pletterades mediet med 4% defibrinerat fårblod. Den anti- biotiska känsligheten hos Haemophilus och Neisseria bestäm- des i GC mediumbas (BBL), kompletterad med 1% hemoglobin (BBL) and 1% isovitalex (BBL).

Odlingskulturer av en exponentiellt växande kultur (Neisseria). som hade fått stå över natten, tjänade såsom ympningskälla.

En volym av ca 0,003 ml av den outspädda eller utspädda kul- turen applicerades på ytan av de antibiotikahaltiga agar- plattorna med en inokulator enligt Steers et al.: An Inocula Replicating Apparatus for Routine Testing of Bacterial Susceptibility to Antibiotics, Antibiot. Chemoter. 9:30?-311 (1959). Kulturer av Neisseria, Streptococcus pneumoniae, S. viridans och S. pyogenes användes utan spädning; kulturer av alla övriga organismer späddes 100 gånger. Inokulatet innehöll ca 103 levande celler för Neisseria, 105 för S. pneumoniae Qch S pyogenes, 106 för S. viridans och 104 för _ alla övriga arter. Kulturplattorna inkuberades vid 370 an- tingen över natten eller under 24 timmar (Haemophilus) och E de minsta inhiberade koncentrationerna (MIK), dvs. den lägsta koncentration av antibiotikumet som förhindrar synlig till- växt, registrerades.

MIK (pg/ml) Å Monosilver- L fosfanilat Silversulfa- ; Organism enl. exempel 1 diazin Str. pneumoniae V 32 32 ¿ 32 32 Str. pyogenes 16 32 š 32 32 Staph. aureus _ 8 8 i 8 8 Staph. aureus + 50% serum 63 763 63 )63 7910160-6 9 MIK (pg/ml) Monosilver- fosfanilat Silversulfa- Organism enl. exempel 1 diazin Staph. aureus (Pen-Res) >125 >125 _ >125 >125 Staph. aureus (Meth-Res) 16 8 16 8 Str. faecalis 8 8 E. coli 16 16 E. coli 16 8 16 8 K. pneumoniae 16 63 16 63 K. pneumoniae 16 16 16 16 Pr. mirabilis 8 8 8 8 Pr. mirabilis 4 8 4 8 Pr. morganii 4 8 8 8 Pr. rettgeri 8 8 4 8 Ser. marcescens 4 16 4 16 Ent. cloacae 16 16 _ 16 16 Ent. cloacae 63 32 ' 6883 32 Ps. aeruginosa 4 16 1 16 Ps. aeruginosa 8 8 4 8 ÅPs. aeruginosa 8 63 Ps. aeruginosa 2 8 7910160-6 10 MIK (pg/ml) Monosilver- fosfanilat Silversulfa- Organism enl. exempel l diazin Ps. aeruginosa 2 16 Ps. aeruginosa 4 16 Den antibakteriella aktiviteten av mono- och disilverfosfa- nilat jämfördes även med aktiviteten av silversulfadiazin med avseende på en utvald grupp grampositiva organismer, nämligen Enterobacteriaceae och Pseudomonas aeruginosa. Dessa föreningar testades i ett medium, som var i huvudsak fritt från fosfanilsyraantagonisten tymidin (Müller-Hinton-medium + 0,04 IE/ml tymidinfosforylas), medan de data som har an- givits ovan beträffande aktiviteten av monosilverfosfanilat erhölls i näringsvätska utan tillsatt enzym.

Tabellen nedan visar att disilverfosfanilat endast marginellt var aktivare än monosilverfosfanilat med avseende på gramposi- tiva stammar och mest med avseende på Enterobacteriaceae.

Dessutom var dess antibakteriella aktivitet ned avseende på Pseudomonas dubbelt så hög som aktiviteten av monosilverfos~ fanilat. ~ ff9TÖi¿ols ll MIK (pg/ml) Monosilver- Disilver~ Silver- Organism føsfanilat fosfanilat sulfadiazin S. pneumoniae 8 l6 S. pyogenes 8 l6 S. aureus 8 l6 S. aureus (Pen-res) l6 8 l6 S. aureus (Meth-res) 16 8 l6 S. faecalis 4 E. coli 4 E. cøli 4 4 K. pneumoniae 16 8 16 K. pneumoniae 8 4 16 P. mirabilis 8 4 16 P. vulgaris 4 4 4 P. morganii 4 4 4 P. rettgeri 4 4 4 S. marcescens 4 2 4 E. cloacae 4 4 8 E. cloacae 432 32 8 P. aeruginosa 4 2 4 P. aeruginosa V4 2 4 P. aerugincsa 4 2 8 ÃÅ P. aeruginosa 4 2 4 P. aeruginosa 4 2 8 P. aeruginosa 4 2 8 MIK-värdena bestämdes i Müller-Hinton-medium + 0,04 IE/ml tymidinfosforylas i samtliga fall med undantag för S. pneu- moniae och S. pyogenes, där 2% lacerat hästblod sattes till Müller-Hinton-mediet.

Claims (9)

7910160-6» 10 15 20 25 30 35 Patentkrav

1. Monosilverfosfanilat med formeln och disilverfosfanilat med formeln ty :nu och hydrater därav. Förfarande för framställning av monosilverfosfanilat k ä n n e t e c k -

2. eller disilverfosfanilat enligt krav 1, n a t därav, att man blandar en vattenhaltig suspension av fosfanilsyra med en vattenlösning, som innehåller unge- färligen antingen en eller två mol silvernitrat per mol fosfanilsyra, för framställning av en blandning, som där- efter blandas med ett med vatten blandbart organiskt lös- ningsmedel för utfällning av den önskade produkten.

3. Förfarande enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att blandningen av silvernitrat och fosfanilsyra blandas med det med vatten blandbara organiska lösnings- medlet genom långsam tillsats av blandningen till det orga- niska lösningsmedlet under samtidig tillsats av en liten mängd ammoniumhydroxid för utfällning av den önskade pro- dukten.

4. Förfarande enligt krav 3, k ä n n e t e c k n a t därav, att blandningen av silvernitrat och fosfanilsyra blandas med aceton vid rumstemperatur.

5. Förfarande för framställning av monosilverfosfanilat 10 15 20 25 30 35 13 7910160-6 enligt nagot av kraven 2-4, k ä n n e t e c k n a t därav, att man blandar en vattenhaltig suspension av ¥os¥alineyra med en vattenlösning, som innehaller ungefärligen en mol silvernitrat per mol fosfalinsyra.

6. Förfarande för +ramstäl1ning av disilver+osfanilat enligt nagot av kraven 2-4,_ k ä n n e t e c k n a t därav, att man blandar en vattenhaltig suspension av fosfalinsyra med en vattenlösning, som innehaller ungefärligen tva mol silvernitrat per mol fosfalinsyra.

7. Antibakteriell komposition för lokal applicering, k ä n n e- t e c k n a d därav, att den inne¥attar monosilverfosfanilat med formeln eller disilverfosfanilat med +ormeln .___ O / Q. HZN w eller ett hydrat därav enligt krav 1 : en mängd, som är tillräcklig +ör att inhibera tillväxten av bakterier, och en dermatologiskt godtagbar bärare.

8. Homposition enligt krav 7, k ä n n e t e c k n a d därav, att eilverealtet av fosfalineyra, som företrädesvis är Vmikroniserat. är närvarande i en mängd av 1~1OO mg per gram bärare.

9. Komposition enligt krav 7, k ä n n e t e c k_n a d därav, att bäraren är en med vatten blandbar kräm, företrädesvis en hypcallergenisk kräm.