SE441752B - Sett att framstella peptider, som innehaller alfa-aminooxisyror och som har gastrinverkan - Google Patents
Sett att framstella peptider, som innehaller alfa-aminooxisyror och som har gastrinverkanInfo
- Publication number
- SE441752B SE441752B SE7714524A SE7714524A SE441752B SE 441752 B SE441752 B SE 441752B SE 7714524 A SE7714524 A SE 7714524A SE 7714524 A SE7714524 A SE 7714524A SE 441752 B SE441752 B SE 441752B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- mmol
- asp
- phe
- solution
- dissolved
- Prior art date
Links
- -1 AMINOXY ACIDS Chemical class 0.000 title claims description 32
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 21
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 75
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 71
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 42
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 42
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 38
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 29
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 16
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 16
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 13
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Substances CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N pentagastrin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1[C]2C=CC=CC2=NC=1)NC(=O)CCNC(=O)OC(C)(C)C)CCSC)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N 0.000 description 13
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 12
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108010079943 Pentagastrin Proteins 0.000 description 11
- 229960000444 pentagastrin Drugs 0.000 description 11
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 11
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 11
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentafluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 4
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-phenyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RRONHWAVOYADJL-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 2
- NQRKYASMKDDGHT-UHFFFAOYSA-N (aminooxy)acetic acid Chemical compound NOCC(O)=O NQRKYASMKDDGHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical class ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Substances CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 2
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- PHJDCONJXLIIPW-QMMMGPOBSA-N (2s)-4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C PHJDCONJXLIIPW-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- PTHGDVCPCZKZKR-UHFFFAOYSA-N (4-chlorophenyl)methanol Chemical compound OCC1=CC=C(Cl)C=C1 PTHGDVCPCZKZKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPRUWHFKPAVECD-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 3-o-(2,3,4,5,6-pentachlorophenyl) 2-aminooxypropanedioate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C(ON)C(=O)OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl ZPRUWHFKPAVECD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBZCYDBMSJILGD-UHFFFAOYSA-N 2-aminooxyacetic acid;hydrobromide Chemical compound Br.NOCC(O)=O WBZCYDBMSJILGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JUMSBOKRGDETHL-AWEZNQCLSA-N 4-o-tert-butyl 1-o-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanedioate Chemical compound N([C@@H](CC(=O)OC(C)(C)C)C(=O)ON1C(CCC1=O)=O)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 JUMSBOKRGDETHL-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 240000005589 Calophyllum inophyllum Species 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241001233242 Lontra Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009858 acid secretion Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- JTXJZBMXQMTSQN-UHFFFAOYSA-N amino hydrogen carbonate Chemical compound NOC(O)=O JTXJZBMXQMTSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethanol Chemical compound CCO.ClC(Cl)Cl UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQNGCCWBHLEQFN-UHFFFAOYSA-N chloroform;hexane Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCCCCC OQNGCCWBHLEQFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hexane Chemical compound CCOCC.CCCCCC ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 1
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001557 phthalyl group Chemical group C(=O)(O)C1=C(C(=O)*)C=CC=C1 0.000 description 1
- IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N pivalic acid Chemical compound CC(C)(C)C(O)=O IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000000979 retarding effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- RGYLYUZOGHTBRF-BIHRQFPBSA-N tetragastrin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)CCSC)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 RGYLYUZOGHTBRF-BIHRQFPBSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- UGZADUVQMDAIAO-UHFFFAOYSA-L zinc hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Zn+2] UGZADUVQMDAIAO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940007718 zinc hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 229910021511 zinc hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
- C07D207/404—2,5-Pyrrolidine-diones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. succinimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C291/00—Compounds containing carbon and nitrogen and having functional groups not covered by groups C07C201/00 - C07C281/00
- C07C291/02—Compounds containing carbon and nitrogen and having functional groups not covered by groups C07C201/00 - C07C281/00 containing nitrogen-oxide bonds
- C07C291/04—Compounds containing carbon and nitrogen and having functional groups not covered by groups C07C201/00 - C07C281/00 containing nitrogen-oxide bonds containing amino-oxide bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C53/00—Saturated compounds having only one carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or hydrogen
- C07C53/15—Saturated compounds having only one carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or hydrogen containing halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
|..l C.) '-3 \_v k” ag 77145244 IQ syraproduktionsaktiverande verkan är ungefär en storleksord in; mindre än hela hormonets. För syntesen av denna tetrapeptidamid finns ett fler- tal kända förfaranden: J.C. Anderson och medarbetare: J. Chem. Goa. C 108 (1967), Smirnow och medarbetare: Himija prirodni sojedinjenij 2 91 (1971), M lortelli, G. Renzi, G.E. Borin: Il Farmaco Ed.Sci. gg, 523 (1975), J.M. Davey och medarbetare: J. Chem. Soc. C 555 (1966), den ungerska patentskriften 155 299, M. Dabrowska med flera: Roczniki Chemii gå 1395 (1972). Senare har mer än hundra substituerade derivat pch ana- loger till denna tetrapeptidamid beskrivits (J.M. Davey m.fl.: J. Chem.
Soc. C 555 (1966), J.S. Morley: Proc. Roy. Soc- 21% 97 (1968), M. “for- telli och_G. Renzi: Il Farmaco Ed.Sci. 2§ 516 (1975), den ungerska pa- tentskriften 155 575). Av dessa har pentapeptidamiden BOC-3~Ala-Trp-Met- Asp-Phe-NH, (pentagastrin) visat sig vara den mest verksamma. Den finns under beteckningen Peptavlon i handeln och användes som diagnostikum för bestämning av magens maximala syraproduktionsförmâga.
Såväl av den ovan nämnda tetrapeptidamiden som av pentagastrin har talrika analoger beskrivits, i vilka enskilda aminosyror ersatts med andra: J. Morley: Proc. Roy. Soc. lzgâ 97 (1968), E Wfinsch och K.-H.
Deimerz Hoppe-Seylers Z. Physiol. Chem 555 1246 (1972), J. Morley m.fl.: J. Chem. Soc. C 522, 726, 910, 809, 715 (1968), Kenner m.fl.: J. Chem.
Soo. C 762 (1968), A.von Dungen m.fl.: Idebigs Ann. Chem. 860 (1976), de japanska patentskrifterna 71 17254 och 16 7115/1711. Alla dessa före- ningars verkan är mindre än pentagastrinets.
De peptider, som innehåller en a-(aminooxi)-karboxylsyra är be- ständiga gentemot talrika äggvitenedbrytande enzymer (L.Kisfa1udy, H.
Iöw, T. Dévênyi: Acta Biochem, Biophys. Acad. Sci. Hung. 6 595 /1971/).
Så beror exempelvis den retarderande verkan hos de A01.-analoger, som vid aminoänden innehåller en a-(aminooxi)-karboxylsyra, antagligen på att den vid aminoänden befintliga a-(aminooxi)-acylgruppen skyddar mole- kylen'gentemot enzymer av typen aminopeptidas (se den unfisrska patent- skriften 167 655).
Det har nu visat sig, att de pentagastrinanaloger, som vid amino- änden uppbär en (aminooxi)~karboxylsyra är mycket verksamma föreningar.
Speciellt verksamma är (aminooxi)-acetyl-, a-Ir och ~D~(aminooxi)- propionyl- och 3-(aminoxi)-propionyl-derivaten. Några av dessa derivat överträffar med avseende på effekten pentagastrinet.
Enligt uppfinningen framställes föreningar med den allmänna formeln A-Trp-B-Asp-Phe-NH-Y l genom att tetrapeptidamid med den allmänna formeln H-Trp-B-Asp-PhefNH-Y II där B och Y har ovan angivna betydelser, omsättes med en förening med Poon i ÛUÅUT 10 15 20 25 30 35 77145244 den allmänna formeln A1 - X, där A1 har samma betydelse som ovan angives för A med undantag av (aminooxi)-acylgruppen och X representerar en fenoxigrupp, som är substituerad med halogen, företrädesvis en 2,4,6-triklor-; 2,3,5- triklor-; pentaklor- eller pentafluorfenoxigrupp, varvid om man önskar en förening med formel I vari A är en (aminooxi)-acylgrupp, på i och för sig känt sätt avlägsnar t-butyloxikarbonylgruppen, och den så erhållna föreningen, om så önskas, omvandlas till ett fysiologiskt godtagbart syraadditionssalt eller ett komplex, eller ett annat salt eller ett inre salt, som är fysiologiskt godtagbart, framställes ur ett salt därav, eller den fria syran framställes ur ett salt.
De reaktionsbenägna föreningarna med den allmänna formeln A1-x är lämpligen en med pivalinsyra eller en kolsyrahalvester framställd aktiv ester. Bland aktiva estrar föredrages de halogen- erade fenylestrarna, i synnerhet pentaklor- och pentafluorfenyl- estrarna.
De som utgångsmaterial använda tetrapeptidamiderna med den allmänna formeln H-Trp-B-Asp-Phe-NH-Y framställes på i och för sig känt sätt genom fragmentkondensation eller genom stegvis kedjeförlängning med hjälp av azid-, den blandade anhydrid-, dicyklohexylkarbodiimid- eller aktivestermetoden eller medelst andra kända aktiveringsförfaranden.
De i reaktionen icke deltagande, funktionella grupperna skyddas, om så erfordras, i synnerhet med grupper, som kan avlägs- nas genom hydrolys, acidolys eller katalytisk hydrering. Karboxyl- grupperna kan exempelvis skyddas genom förestring med bensyl- alkohol, t-butanol eller p-klorbensylalkohol. För skydd av (aminooxi)- och aminogrupperna kan man använda följande grupper: formyl-, tosyl-, trityl-, trifluoracetyl-, o-nitrosulfenyl-, ftalyl-, p-klorkarbobensoxigrupper, men i synnerhet föredrages karbobensoxi- och t-butyloxikarbonylgrupper. Kväveatomen i trypto- fanens indolskelett kan från fall till fall skyddas medelst en formylgrupp.
Genom lämplig kombination av skyddsgrupperna kan man uppnå, att dessa på i och för sig känt sätt (exempelvis genom hydrolys, acidolys eller katalytisk hydrering) avlägsnas selektivt eller samtidigt.
Enligt en annan föredragen utföringsform av sättet enligt före- varande uppfinning tillämpas pentahalogenfenylestermetoden för in- föring av skyddade (aminooxi)-acylgrupper vid aminoänden; den i iiii niveau QUÅUTY 10 15 30 \N \fl 40 7714524--1 L» aktiva estern omsättes med den vid karboxyländen befintliga tetra- peptidamiden H-Trp-B-Asp-NH-Y.
För framställning av tetrapeptídamiderna med den allmänna formeln II, i vilka Y representerar väte, utgår man från Z-Phe-OH (Z = skydds- grupp), framställer därur på í och för sig känt sätt Z-Phe-EH, och uppbygger, sedan skyddsgruppen avlägsnats, tetrapeptidamiden ä-Prp-B- Asp-Phe-NH, stegvis med skyddade aminosyra-(N-hydroxysuccinimid)-estrar eller -(pentahalogenfenyl)-estrar.
-För framställning av tetrapeptidamider med den allmänna formeln Il, i vilka Y representerar -O-CH,-COOH, utgår man från H-lhe-Ošly-OH.
H-Ehe~OGly-OH-derivatet kan framställas genom att man acylerar (amino- oxi)-ättiksyra med den blandade anhydriden eller estern av Z-lhe-OH och ur den så erhållna produkten avlägsnar skyddsgruppen genom behand- ling med bromväte i ättiksyra.
Vid båda de ovan beskrivna synteserna kan man också utgå från BOC-Phe-OH. Ur BOC-Phe-NHÛ och BOC-Phe-OGly-OH kan BGC-skyddsgruppen avlägsnas genom mild, sur_behandling.
Esterbindningen, som skyddar ß-karboxylgruppen i asparaginsyran kan avlägsnas i dipeptid-, tripeptid- eller tetrapeptidfasen selektivt eller tillsammans med de grupper, som skyddar aminogruppen, genom acid- olys, när Y icke är OH genom katalytisk hydrogenolys.
Slutprodukterna kan renas genom omkristallisation, omfällning, kolonnkromatografering på kiseldioxidgel eller genom jonbytarkromato- grafering med karboximetylcellulosa.
De nya föreningarna erhålles beroende på vilken metod, som till- lämpas vid deras framställning, i form av fria syror eller salter. Be med organiska eller oorganiska syror bildade salterna kan ombildas på i och för sig känt sätt eller också kan de vid reningen omvandlas till inre salter. _ De enligt uppfinningen framställbara nya pentagastrinanalogernas biologiska verkan har undersökts enligt von Gosh och Schild (Br. J.
Eharmac, Chemoth. lå, 54 [l95&/) och enligt lai (Gut. 2, 27 Åïêßëï), varvid man tog hänsyn till modifieringen enligt Pissidis och Clark (Gut. §, 196 /l9627). Såsom framgått av djurförsök har de nya före- ningarna en syraproduktionsstegrande verkan (vid samma dosering), som i många fall är 20-80 % högre än den som erhålles med pentagastrin (användes som jämförelsesubstans). Speciellt anmärkningsvärt är det att de nya föreningarna även resorberas i tunntarmen, vilket icke är fallet med pentagastrin. I några fall är deras verkan vid en dos om 20_flS/100 g kroppsvikt större än den, som erhålles vid en dos om O,2_pg/100 g intravenöst applicerat pentagastrin, som vid enteral POOR o ÛUÅPITYl 15 \,\i V1 5 7714524-1 administration även i väsentligt större doser icke stimulerar syra- produktionen. Det är vidare anmärknings ärt, att några derivat vid resorption i tjocktarmen utövar en starkt aktiverande verkan på syra- sekretionen. Denna verkan är i några fall större än den som uppnås med pà liknande sätt resorberbart pentagastrin. Aktiveringens omfattning såväl vid resorption i tunntarmen som i tjocktarmen möjliggör en ny användning av föreningarna.
Tabell 1 Den stegring av syraproduktionen, som föreningarna enligt upp- finningen utövar vid enteral och parenteral administration uttryckt i procent av den verkan, som erhålles vid intravenös administration av 0,2 pg pentagastrin per 100 g kroppsvikt Förening Applikation och dos (pg/100 g) A B Y Ven Tunntarm Tjocktarm 0,- 2,0 20 20 Jls/loo aoc~oc1y Me: H 142 294 51* - s0c-0G1y Ieu H 124 272 6 es H-oely Met H 91 250 47* 2e1 Boc-ieoiie Met H se 94 59 55 Boc-D-olle Ieu H 140 240 55 49 Boo-Lolle Met o-c-ly-OH 56 - - 15 Boc-D-olle Met o-Giy-oæx 66 - - 104 BOC-OGly Met O-Gly-OH 25 - - -E Boc-ß-oila Met o-Gly-oïi 52 - - - + vid en administration av 10 flå/100 g kroppsvikt Med fysiologiskt godtagbara komplex avses i förevarande samman- hang sådana, som bildas genom omsättning av peptiderna enligt föreva~ rande uppfinning med bestämda, organiska eller oorganiska föreningar och som ger en prolongerad verkan av peptider. Som organiska föreningar lämpar sig exempelvis vissa gelatiner, karboximetylcellulosor, algin- syraestrar, po1y(floretinfosfat), aminosyrapolymerer och andra poly- merer och sampolymerer. Bland de oorganiska föreningarna ifràgakommer hydroxider av bestämda metaller, exempevis zinkhydroxid, liksom även svàrlösliga metallsalter, exempelvis fosfat och pyrofosfat. För att uppnå den prolongerade effekten lämpar sig vidare bestämda silikat, som med peptiderna likaledes bildar olösliga komplex av hittills icke Pñon i" nuAuTv e 10 15 kål CJ 40 7714524-1 e utforskad struktur.
De enligt förevarande uppfinning framställbara peptiderna liksom även salter och komplex därav kan användas i form av de inom farmacin vanliga läkemedelspreparaten. Dessa preparat innehåller de enligt före- varande uppfinning framställbara föreningarna tillsammans med för en- teral eller parenteral administration lämpliga bärare. Iäkemedelspre- paraten kan exempelvis vara fasta lyofílisat, vilka som bärare inne- håller med peptiderna icke reagerande föreningar, exempelvis kolhydrat.
Föreningarna enligt uppfinningen kan vidare beredas exempelvis i form av utspädda eller koncentrerade suspensioner eller emulsioner, vilka kan innehålla olika konserverings- och stabiliseringsmedel.
Iäkemedelspreparaten kan användas som diagnostika för bestämning av den maximala syraproduktionen i magen. Det är lämpligt att använda dem inom terapin, när syraproduktionsförmàgan hos magen minskat eller upphört. Sålunda kan man vid preatropisk gastrit och vid subacida be- svär vänta sig god verkan. Enär pentagastrin uppvisar en trofisk ver- kan, som gynnar regenereringen av magsäckens slemhinna, är användning av läkemedelspreparaten gynnsam även vid atrofíska processer i mag- säckens slemhinna.
Sättet enligt förevarande uppfinning belyses i närmare detalj i följande utföringsexempel. De i exemplen använda förkortningarna är gängse i den kemiska facklitteraturen (J. Biol. Chem 24 , 977 [ï972/).
För a-(aminooxi)-ättiksyra användes symbolen OGly, för d-(aminooxi)- propionsyra användes symbolen OAla. Ytterligare förkortningar är föl- jande: BGC = Dicyklohexylkarbodiimid PCPOH = Pentaklorfenol , PFPOH = Pentafluorfenol suoH i = :w-hydroxisuccinimia DNF = Dimetylformamid HNFA = Hexametylfosforsyratriamid Föreningarnas smältpunkt bestämdes med smältpunktsbestämnings- apparaten enligt Tottoli (Bïchi). Tunnskiktskromatogrammen upptogs på enligt Stahl framställda kiseldioxídgelskikt (handelsbeteckning: Kiesel- gel G). För framkallning av kromatogrammen användes följande lösnings- medelsblandningar: 1. Kloroformzfletanol 95: 2. Kloroform:Metanol 5. Kloroformzn-Hexan:Ättiksyra 4. Etylacetat:(Pyridin:Ättiksyra:Vatten=20:6:l) 5. Etylacetat2(Pyridin:Ättiksyra=Vatten=20:6:l) OÛGJCOQ IUI-J l-'tJUl !-' v Poon H i uuALlTYl “dl 15 io 7 7714524-3 6. Etylacetat2(lyridin:Ättiksyra=Vatten=20r6=l) *:f 7. Etylacetat:(Fyridin:Ättiksyra:Vatten=30:6:l) 5:? 8. Etylacetat:(Pyridin:Ättiksyra:Vatten=20:6:1) 1:1 9. Etylacetat:(1¶ridin:Ättiksyra:Vatten=20:6=1) 3:5 10. Etylacetat:(Iyridin:Ättiksyra=Vatten=20:6:l) 85:15 För framkallning av tunnskiktskromatogrammen användes ninhydrin~ lösning. Plattorna torkades efter besprutning vid lO5°C i ungefär 5 mi« nuter. Därpå infördes kromatogrammen i klorgas och behandlades efter luftning med o-toluidin-KI~1ösning.
För kolonnkromatografisk rening av substanserna användes kisel- dioxidgel (Kiselgel G) med en kornstorlek mellan 62 och 300 pm.
Exemgel_l: Steg 1. N-(Bensyloxikarbonyl)-Iffenylalanin-amid. 12,0 g (40 mmol) Z~Phe-OH löstes i 80 ml vattenfri tetrahydrofuran. lösningen försattes med 5,60 ml (40 mmol) trietylamin och kyldes till -lO°C. Vid denna temperatur tillsattes droppvis 5,80 ml (40 mmol) klorkolsyraetylester.
Suspensionen omrördes vid -10°C i lO minuter, varpå ammoniakgas genom- leddes under l timme samtidigt som reaktionsblandningen kyldes. På- följande dag indunstades reaktionsblandningen i vakuum och den kristal- liniska återstoden revs i 40 ml vatten med en temperatur av 40-50°“.
Råprodukten (8,84 g) omkristalliserades under klarning i en sjufaldig mängd etanol. Han erhöll pà detta sätt 6,55 g (55 b) Z-ïhe-NH, med en smältpunxt av 165-1ss°c. R? = o,75. ' Steg 2. l~Fenylalanin~anid-hydrobromid. 6,55 g (22 mmol) Z-Ehe-IH, (steg 1) löstes i 15 ml ättiksyra och lösningen försattes med 59 ml av en 5-normal lösning av HBr i ättiksyra. Reaktionsblandningen omrördes i 5 minuter och fick därefter stå i 1 timme, varpå suspensionen ut- spädes med vattenfri eter och filtrerades. Ràprodukten löstes i 3#0 ml etanol, lösningen klargjordes och utfälldes därefter med 740 ml eter. Éà detta sätt erhölls 4,90 8 (91 %) av en vit, kristallinisk, kremato- grafiskt enhetlig H-The-NH9.HBr (pà kromatogrammet syns två fläckar, nämligen produktens fläck och fläcken från HBr). Smältpunkt 249-250°C, R? = 0,50. R? för hydrobromiden = 0,55.
Steg 5: Ne(Bensyloxikarbonyl)-IfasQaragyl-2-(t-butylesterlïlffqgfli alanin-amid. 9,45 g (58,5 mmol) H-Phe-HH,.HBr (steg 2) suspenderades i 100 ml vattenfri tetrahydrofuran och den_fria syran frigjordes genom tillsats av 5,40 ml (58,5 mmol) trietylamin. Till suspensionen sattes därefter 16,2 ä (53,5 mmol) Z-Asp(OtBu)-0Su. Reaktíonsblandningen in- dunstades på följande dag i vakuum och återstoden löstes i 500 ml styl- acetat. lösningen urskakades tre gånger med 10 fi~ig citronsyra och 5 gånger med 5 %-ig natriumvätekarbonatlösning. Därefter klargjordes Pound QUALITY \;'1 10 15 40 7114524-1 8 lösningen i värme med aktivkol, torkades över natriumsulfat och filtre- rades. Filtratet indunstades i vakuum och den vid indunstningen utfäll- da substansen löstes på nytt i en volym av ungefär 200 ml och fick där- efter stå för utkristallisation. På detta sätt erhölls 15,17 g (84 J) kromatografiskt enhetlig Z-Asp(OtBu)-Phe-NH, med en smältpunkt av 160- 1e1°c. Råå = 0,70. _ Steg 4. I~Asparagyl-3-(t-butylester)-Iffenylalanin-amid. 15,17 5 (52,5 mmol) Z-Asp-(0tBu)-Phe-NH, (steg 5) löstes i 1,0 liter metanol och reducerades i närvaro av 2,0 g palladium-aktivkol under omrörning och genomledning av väte. Efter 2 timmar filtrerades suspensionen och filtratet indunstades i vakuum. Den fasta indunstningsàterstoden revs med diisopropyleter och suspensionen fick stå i kyla hela natten, var- på den filtrerades. Man erhöll på detta sätt 10,40 g (95,8 %) H-Asp- (0tBu)4Phe-NH2, som hade en smältpunkt av 121,0-121,5°C. R? = 0,55.
Steg 5. Nfít.-butyloxikarbonvl)-Ifmetionvl-Ieasgaragyl-ß-§t~hutv1esterl i-fonylaiaoin-omia. 10,4 g (51 mmol) H-Asp(o'°1au)-1>ho- m, (stog a) ooh 11,1 g (52 mmol) B00-Het-OSu löstes i 100 ml kloroform oöh lösningen fick stå hela natten. Påföljande dag urskakades den tre gånger med vat- ten. Den organiska fasen torkades och indunstades i vakuum. Den gelati- nösa återstoden revs med eter, fick stå i kyla och filtrerades därefter.
Man erhöll på detta sätt 14,5 g (82,7 %) av en vid 148-l49°C smältande ráprodukt. Denna löstes i 40 ml metanol och klargjordes med aktivkol.
Filtratet, ur vilken produkten började utfalla, utspäddes med 40 ml oter. Ivan erhöll pa detta sätt 12,80 g ('75 va) Boo-Ifxot-Aspwtsu)mao-WH,, som hade en smäitpuokt av 151-152 °c. n? = 0,65. _ Steg 6. Ifmetíonyl-Ifasbarasvl-Iffenvlalanin-amid-hydroklorid. 12,50 g 22,1 moi) B0c-Mot-lop(0'°1au)-Pho-NH2 (stog,- 5) löstes i värme i 25 m1 ättiksyra. Iösningen kyldes och försattes med 50 ml av en 7,4-normal lösning av H01 i etylacetat. Efter 5 minuter blev reaktionsblandningen grumlig och en olje utföll. Efter 10 minuter utspäddes reaktionsbland- ningen med eter och den erhållna suspensionen filtrerades. En mängd (l0,24 g) av ràprodukten som översteg den teoretiska, löstes i 40 ml metanol och utfälldes med 200 ml etylacetat. Den svàrfiltrerbara, oange- nämt gelatinösa produkten fick stå hela natten i kyla och filtrerades därefter. Man erhöll på detta sätt 9,0 g (91 fi) H-Het-Asp-Phe~NH,.HCl, som nano on omaltpunkt av 1a7-1e9°c. n? = 0,27. _ Steg 7. N-(t-butyloxikarbonyl)-IftryQtofyl-Ifmetionyl-Ifasparagyl-I~ fenylalanin-amid. 9,0 g (20,l mmol) H-Met-Asp-Phe~HH,HCl (steg 6) och 8,42 g (21 mmol) B00-Trp-0Su suspenderades i 150 ml dimetylformamid och suspensionen försattes med 2,85 ml (20,1 mmol) trietylamin. Reaktions- blandningen omrördes hela natten och hälldes därefter i en blandning av P OOR ÛUÅUTÅL 15 [O \Z'| \_>1 O 9 7714s24~1 l,0 liter isvatten och 5,75 ml ëttiksyra. Suspensionen fick stå, till dess att isen tinat, varpå den filtrerades. Den gelatinösa fällningen tvättades rikligt med vatten och därefter med eter. Ràprodukten (l5,j g 95 %), som hade en smältpunkt av 205-204°C, omkristalliserades två gång- er i en ungefär 50-faldig mängd 80 %-ig,vattenhaltig etanol under klar- ning. På detta sätt erhölls 9,67 g (69 É) BOC-Trp-Met-Asp-The-21,, som hade en smältpunkt av 212-2l4°C (sönderdelning). Rf = 0,45. _ §Lcs 8. Iftryptofyl-Ifmetionyl-Ifasparaæyl-Iffenylalanin-amid-mono- hxdrat. 9,25 5 (l5,2 mmol) BOC-Trp-Net~Asp-Ihe-NH, (steg Û) ströddas under omrörning vid 0°C i en blandning av 52 ml trifluorüttiksyra, 2 ml vatten och 4 ml anisol. Genom reaktionsblandningen leddes kväve i 2 timmar, varpå lösningen under kylning utspäddes med 270 ml eter. Sus- pensionen filtrerades, fällningen tvättades med en riklig mängd eter och torkades i exsickator. Ràprodukten löstes i 60 ml metanol och ut- fälldes som trifluoracetat med 240 ml eter. Det på detta sätt renade saltet löstes i en blandning av 540 ml vatten och 29 ml 1N-NaOH och den fria tetrapeptidamiden utfälldes med 15,2 ml ättiksyra. Suspen- sionen filtrerades efter att ha fått stå en kort stund och fällningen tvättades i en riklig mängd vatten. Man erhöll 6,70 g (82,4 ß) H-Trp- Met-Asp-Phe-NH2.H2O, som hade en smältpunkt av 235-258°C. R? = 3,55.
Analys för C29H56O6N6S.H20 (M = 6l4,725) %C ,§{ jflñ Beräknat: 56,6 6,2 13,7 Funnet: 59,4 6,2 15,6 Steg 9. t-Butyloxikarbonyl-aminooxiättiksyra-pentaklorfenylester. 8,0 g (4l,8 mmol) BOC-0Gly-OH och 11,1 g (42,0 mmol) pentaklorfenol löstes i 160 ml vattenfri dioxan. lösningen kyldes till under 5°C och försattes med 8,6 g (42,0 mmol) dicyklohexylkarbodiimid (DOG). Reak- tionsblandningen fick stå vid rumstemperaturen hela natten, varpå den utfällda dicyklohexylkarbamiden avfiltrerades. Filtratet indunstades i vakuum och den fasta återstoden omkristalliserades i en blandning av dioxan och etanol. Ia detta sätt erhölls 15,7 g (?4,5 A) 303-0G1y-C161, som hade en smältpunkt av 167-lG8°C. R? = 0,7. malys för clšzilgontcls (M = 459510) ,~ac :än a: so: Beräknat: 55, 52 _ 2,75 5, le to , 35 rann-ae; 55,57 2,90 3,51 40,12 Steg 10. (t-Butyloxikarbonylamingoxi)-acetyl-Iftryptofyl-lfmetionyl12; asparagyl-Irfenylalanin-amid. 1,79 g (3,0 mmol) H~Irp-Het-Asp~The-E39.
H50 (steg 8) och 1,18 g (5,5 mmol) 300-0Gly-OPCP (steß 9) omsattes med varandra i 50 ml dimetylformamid. Efter 4 timmar indunstades reaktions- QUAUTY KH 10 7714524~1 w blandningen i vakuum och den gelatinösa återstoden revs med etylacetat.
Råprodukten (2,ll g = 91 ß), som hade en smältpunkt av l78~l&4°C, lßs~ tes i 20 ml metanol, lösningen klargjordes och produkten utfälldes med vatten. Pâ detta sätt erhölls 1,50 g (64,8 %) kristallinisk, vit 300- 0Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH3, som hade en smältpunkt av 195-l94°C. nš = 0,10 12/D = -16,2° (6=1,o; 1 dimetylformamid).
Analys för c56H47olOn7s (M = 769,85) šác :ax ms Beräknat: 56,1 6,1 4,16 Funnee: 56,4 6,5 4,07 6 Exempel 2: (Aminooxi)-acetyl~Iftryptofyl-Ifmetionyl-Ifasparagyl-Iffenyl- alanin-amid. 1,0 g (1,5 mmol) BOC-OG1y-Trp-Met-Asp-Phe-NH, (exempel l, steg 10) ströddes under omrörning i en blandning av 4 ml trifluorättik- syra, l ml vatten och 0,5 ml anisol, Genom reaktionsblandningen leddes i 2 timmar kväve. Därpå utspäddes blandningen med 40 ml eter. l,02 g av det isolerade trifluoracetatet löstes i en blandning av 54 ml vatten och 2,9 ml lN#NaOH och den fria amiden utfälldes genom tillsats av 1,52 ml ättiksyra. Fällningen avfiltrerades och tvättades grundligt med vatten, varpå den torkades i exsickator. Man erhöll på detta sätt 0,6 g (69 %) H-0Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2, s0u1hade en smältpunkt av 185-l64°C.
R? = o,5, /ä/D = -51,6° (6=1,o; 1 aimeeylformamia).
Analys för C5lH59ïâN?S (M = 669,765) %H %N ßs Beräknat: 55,59 5,27 14,60 4,79 Funnet= 55,41 5,93 14,41 4,11 Exemgel §: Steg l. 2-(t-Butvloxikarbonvlaminooxi)-Ifpropionsyra-pentaklorfenyl- ggtgg. 4,10 g (20mmol) BOC-D-0Ala-OH och 5,52 g (20 mmol) pentaklor- fenol löstes i 20 ml dimetylformamid. lösningen kyldes till O°0 och försattes med 4,12 g (20 mmol) DCC. Reaktionsblandningen omrördes vid 0°C i 50 minuter och fick därefter stå hela natten vid rumstemperaturen.
Den utfällda DCU avfiltrerades, filtratet indunstades i vakuum och åter- stoden behandlades med vattenfri eter och avfíltrerades. Ràprodukten (6,25 g) omkristalliserades i etanol. Pâ detta sätt erhöll man 5,50g(ö5; B00-D-OA1a-OPCP, som hade en smältpunkt av 122-l24°C. R? = 0,35. [Ä/D = - 68,87° (c=l,0; i dioxan).
Analys för c H 0 NC15 14 14_5 360 ZíH /ßl Beräknat: 57,07 5,11 59,08 Funnet 57 ,22 5 , 07 59 , 27 POOR s* uuAuTv i \n 10 .WO ll 7714524-1 \ t-But loxikarbonvlaminooxi -lf rc ion* netionyl-Ifasparagyl-lffenylalanin-amid. 0,70 g (l,32 mmol) H-frp-ñet~ Asp-Phe~NH,.H90 (exempel 1, steg 8) och 0,59 g (l,50 mmol) 300~lf0Ala- UFC? Cexemnelwš, steg 1) omsattes med varandra i 50 ml dimetylfarmami; i närvaro av 0,55 ml (2,5 mmol) trietylamin. Fàföljande dag indunet ies reaktíonsblandningen i vakuum och den geletinösa återstoden filtreradcs med etylacetat. Råprodukten (0,69 g) uppkokades med 15 ml etylacetat och avfiltrerades ur den ännu heta suspensionen. Man erhöll på detta sätt 0,5 g renad produkt. Denna löstes i en liten mängd av lösnings- medelsblandningen 6 och lösningen hälldes i en kolonn av 40 g kiscldi- oxidgel. Eluering genomfördes med 1ösningsmedelsblandningen 5. Ur de rena fraktionerna utvanns 0,50 g kromatografiskt enhetlig BOC-lf0Ala- Trp-Met-Asp-Phe-NH2, som hade en smältpunkt av l99°C (sönderdelning). 1-ä:§;ï2§Q:m1~lf R? = 0,15. R; = 0,5.
Analys för C57H49OlON7S (H = 785,88) %C flfiï Zflï Beräknat: 56,69 6,50 12,51 Funneti 56,50 6,2 12,54 šësn2al_&¿ Steg 1. N-(Bensyloxikarbonyl)-Ifleucyl~Ifasparagyl-§;§§;§utvlesterL; Iffenylalanin-amid. 5,0 g (l4,9 mmol) H-Asp(0tBu)-Phe-NH, (exempel 1, steg 4) och 5,5 g (l5,2 mmol) Z-Ieu-OSu omsattes med varandra i 50 ml kloroform. Reaktionsblandningen var till att börja med en ren lösning, som senare undergick gelbildning. Den utspäddes med kloroform och om- rördes hela natten. Efter indunstning i vakuum revs indunstningsàter- stoden med vatten och avfiltrerades därefter. Ràprodukten (8,6 g med en smältpunkt av l70°C) omkristalliserades i 45 ml etanol. På detta sätt erhölls 7,26 g (85,5 %) Z-Ieu-Asp(OtBu)-Phe-NH,, som hade en smält- punkt av 180-l8l°C. R? = 0,6. /Q/D = -56,8° (o=1,0;_i etanol).
Analys för 05lH4207N¿ (M = 582,68) 2.30 Izïí fáN Beräknat: 65,90 7,27 9,63 Funnet 65,70 7,41 9,75 åtfieguå L-Ieucyl-L-asparagyl-ß-(t-butylester)-L-fen;ylalanin-amid. 6,76 g (ll,6 mmol) Z-Ieu~Asp(0tBu)-Phe-NH, (exempel 4, steg 1) löstes i 500 ml metanol och reducerades i närvaro av 1,0 g palladium/aktivkol under omrörning med väte. Efter 90 minuter avfiltrerades katalysatorn, filtre- tet indunstades och den geléartade återstoden isolerades med n_heXan_ få detta sätt erhölls 5,2 g (99,5 ß) H-:eu-Aapçotßu)-1he-nur qnfi = o,1), som utan ytterligare rening upparbetades. _ _ Steg_5¿__N-(t-Butyloxikarbonyl)-Irtryptofylïlflgug3lfL;a§Qaragvl-$- i~tP00R5l GUÅUIY 10 15 40 7714524r1 n (t-butylester)-Irfenylalanin-amid. 5,2 g (ll,5 mmol) H-leu-Asp(0t3u)- ïhe-NH2 (steg 2) och 4,82 g (l2,0 mmol) B00-Trp-0Su löstes i 300 ml DH? och lösningen ställdes undan. Pâföljande dag indunstades bland- ningen i vakuum, återstoden revs med vatten och avfiltrerades därefter.
En mängd överstigande det teoretiska utbytet av råprodukten (6,?5 g) omkristalliserades i 70 ml 70 %-ig etanol under klarning. Han erhöll på detta sätt 7,19 g (a4,5 m) Boc-Trp-:au-Asp(otBu)-Phe-NH,, som haae en smältpunkt av 176-l?7°C. R? = 0,65. För elementaranalysen omkristal- liserades en mindre mängd i den 10-faldiga mängden 80 h-ig etanol och hade efter denna omkristallisation en smältpunkt av 180-l¿2°C. [Ä/D = -55,5° (c=l,O; i dimetylformamid). 2 Analys %0 %H %N Beräknat: 65,74 7,41 11,44 Funnet 65,62 7,62 11,17 Steg 4. I-Tryptofyl-I-leucyl-Ifasparagïl-Iffeg1lalanin;amid, 6,59 g (9,0 mmol) BOC-Trp-Ieu-Asp(OtBu)-Phe-NH, (steg 5) ströddes i en bland- ning av 60 ml trifluorättiksyra och 6 ml anisol. Reaktionsblandningen omrördes i 2 timmar vid rumstemperaturen och utspäddes därefter med vattenfri eter. Den efter filtreringen erhållna, salvaliknande äter- stoden torkades i en exsickator över natriumhydroxid och fosforpentoxid.
Ràprodukten revs med vatten. På detta sätt erhölls 5,61 g trifluorace- tat, som hade en smältpunkt av 178-l86°G (sönderdelning). Saltet lös- tes i varmt vatten innehållande en ringa mängd etanol. Iösningens pH injusterades under kylning med lN-NaOH pà 7. Den bildade fällningen avfíltrerades och tvättades med vatten och etanol. Efter tvättningen med etanol löstes ràprodukten (4,0g) i 50 ml DNF och utfälldes ur lös- ningen med 60 ml metanol. Man erhöll på detta sätt 2,28 g kromatografisk enhetlig H-Trp-Ieu-Asp-Phe-NH,, som hade en smältpunkt av 227-2š0°C (sönderdelning). R? = 0,55. _ Analys för C5OH58NÉ06 (M = 578,67) 6,260 âáH f/fl * Beräknat: 62,26 6,62 14,52 Funnet: 62,02 6,80 14,58 Steg 5. 2-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-acetyl-Iftryptofyl-I-leucyl-lr asparagyl-I-fenylalanin-amid. 1,0 g (l,82 mmol) H-Trp-Ieu-Asp-Ehe-NH, (steg 4) och 0,88 g (2,0 mmol) BOC-0Gly-OECP löstes i 10 ml DEF och _ lösningen försattes med 0,27 ml (l,82 mmol) trietylamin. Reaktions- blandningen indunstades påföljande dag i vakuum, indunstningsàterstoden revs med eter, suspensionen fick stå i kyla och filtrerades slutligen.
Man erhöll på detta sätt 1,42 g ràprodukt (smältpunkt 102-l20°C (sön- derdelning)), som uppkokades i en lO-faldig mängd etylacetat och av- filtrerades i varmt tillstànd. Nan erhöll på detta sätt 1,06 g substans, ,2______________R 6 P0on a QALLTL \J'l 10 15 kn \J'\ 40 5 7714524~1 vilken löstes i lösningsmedelsblandningen 5. lösningen hälldes på en av 80 g kiseldíoxidgel framställd kolonn. Eluering jämfördes med 1ös~ ningsmedelsblandningen 10. Ur de rena fraktíonerna erhölls O,58gBOC-Ofilg Trp-Ieu-Asp-Phe-NH2, som smälte under sönderdelníng vid l87°C. /1/D = -24,9° (c=o,5; 1 dimetylformamia), H? = 0,7; eg = 0,15.
Analys för C57H¿90lON, (H = 751,85) 233 ;åI Jil Beräknat: 59,11 6,57 15,04 Funnet: 59,23 6,40 12,75 Essænel ål Steg 1. IfIeucYl~Ifasparagy1~Irfenylalanin-amid-hydroklorid. 6.21 g (15,4 mmol) H-leu-Asp(OtBu)~Phe-NH, (exempel A, steg 2) sattes till 50 ml av en HC1-lösning i ättiksyra. Efter 45 minuter utspäddes reak~ tionsblandningen med vattenfri eter, suspensionen fick stå en kort tid i kyla och fíltrerades därefter. Fällningen tvättades grundligt med vattenfri ever. Man erhöll 6,20 g (94 m) H-:eu-Asp-Phe-nH,.Hc1 som utan ytterligare rening användes för följande reaktion.
Steg 2. N-(§;Buty1oxikarbonyl)-Iftryptofyl-lfleucyl-Ifasparagy1~lf fgnylalanin-amid. 6,2 g (l4,5 mmol) H-Ieu-Asp-lhe-NH9.HCl (steg 1) och 6,42 g (l6,0 mmol) BOC-Trp-OSu omsattes i 70 ml DNF i närvaro av 2,24 ml (l6,0 mmol) trietylamin. Efter 4 timmar indunstades reaktionsblandníngen i vakuum, indunstningsàterstoden revs med vatten och avfiltrerades. hå- produkten (lO,6 g) uppkokades två gånger med en metanol~etylacetat- blandning och avfiltrerades därefter. Man erhöll på detta sätt 7,1 g (72,1 %) BOC-Trp-Ieu-Asp-Phe-NHQ, som hade en smältpunkt under sönder- delning av 218-22l°C. R? =O,4. šubstansen användes för följande steg utan ytterligare rening.
Steg 5. IfTryptofyl-I~leucy1-Ifaspgrag3l-I¿§enylalanin-amid. 7,1 5 (l0,5 mmol) BOC-Trp~Ieu-Asp-Phe-NH, (steg 2) sattes till 60 ml av en lösning av H01 i dioxan. Efter 5 minuter var reaktionsblandningen klar.
Efter 10 minuter utspäddes lösningen med vattenfri eter. Den utfällda, oljeartade produkten stelnade, varpå den avfiltrerades. Han erhöll på detta sätt hydroklorid (6,96 5) vilken löstes i 150 ml varmt vatten.
Iösningens pH injusterades pà 7 med fast natriumvätekarbonat under kyl- ning. Suspensionen filtrerades och fällningen tvättades med en riklig mängd vatten. Man erhöll 5,05 g (85,l 3) kromatografiskt enhetlis H-Prp- Ieu-Asp-Phe-NH, (exempel 4, steg 4), som hade en smältpunkt av 228-2šO°C (sönderdelning).
Steg 4. 2-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-D-propionsyraïpentaglgrfenylestqg 4,10 g(2O mmol) BOC-D-OAla-OH och 5,52 g (20 mmol) pentaklorfenol löstes i 20 ml dimetylformamid och lösningen sattes till en till O°G kyld i i POOR 2 QUALITY 15 \_,N O 55 7714524f1 M lösning av 4,13 g (20 mmol) DCC. Reaktionsblandningen omrördes vid 0°u i en halv timme, varpå den fick stå hela natten vid rumstemperaturen.
Den utfällda DCU avfíltrerades, fíltratet indunstades i vakuum och den kristalliniska återstoden behandlades med vattenfri eter, varpå den av- filtrerades. Råprodnkten (6,25 g) omkristalliserades i etanol och man erhöll 5,80 g (64 %) BOC-D-OAla-OPCP, som hade en smältpunkt av 12*-121° Rš = o,a5. ¿¿;D = +es,95° (c=1,o; 1 aioxan).
Analys för C14Hl4O5NCl5 (M = 455,557) }5C 'ÉÉH ïåCl Beräknat? 57,10 5,10 39,10 Funnetl 57,16 5,29 59,01 Steg 5. 2-D-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-prgpionyldbleucylïlgasparagyl- lzignllalanigzamid. 1,74 g (5,0 mmol) H-Trp-Ieu-Asp-Phe-NH2 (exempel 4, steg 4 och exempel 5, steg 5) och 1,50 g (5,5 mmol) B00-3-UÅ1fi~0PCP (exempel 5, steg 4) omsattes med varandra i 20 ml DNF i närvaro av 0,42 ml (5,0 mmol) trietylamin. Pàföljande dag indunstades reaktionsbland- ningen i vakuum och índunstningsåterstoden revs med eter. Mängden er- hàllen produkt översteg det teoretiskt beräknade utbytet. Substansen löstes i en ringa mängd av lösningsmedelsblandningen 5 och hälldes i en kolonn av 100 g kiseldioxidgel. Eluering genomfördes med lösningsmedels- blandningen 5. Den ur den rena fraktionen erhållna, kristalliniska åter- stoden omkristalliserades i 50 ml S0 ß~ig etanol och man erhöll 1,07 5 (46,7 %) BOC-D-0Ala~Trp-Ieu-Asp-Phe-NH,, som hade en sönderdelningspunkt av 21o°c. ¿@7¿ = -6,o° (c=1; 1 dimeeylšormamia), R? = 0,15; R? = 0,40.
Analys för c58H5lïàON7 (M = 765,88) / %H %N Beräknat: 59,59 6,71 12,80 Funnet: 59157 6,90 15,10 Exempel¿â¿ _ Steg 1. 2-/N%(t-Butyloxikarbonyl)-Iffenylalanyl-aminooxi7-ättiksyra. 6,9? g (40,5 mmol) Aminooxiättiksyra-hydrobromid och 14,63 g (40,5 mm:l) BOG~Ehe-OSu omsattes med varandra i 100 ml DHF i närvaro av 0,5 ml (45 mmcl) trietylamin. Pàföljande dag indunstades reaktionsblandningen i vakuum, den oljeartade indunstningsàterstoden löstes i 100 ml kloroíorm och lösningen urskakades med lN-H01 tre gånger. Den organiska fasen torkades och indunstades i vakuum. Den oljeartade återstoden stelades med diisopropyleter. Ràprodukten renades genom lösning i etylacetat och utfällning med diisopropyleter. Man erhöll på detta sätt 9,70 g (74 4) soc-she-oeiy-on, Sem hade en smäitpunkt av 15e-157°c. nå = 0,4. ¿a/L = -l?,8° (c=l,O; i etanol).
”FÜÖ-lï-x, uuAuTv a \~Y] 15 u.
XD 40 15 7714524r~1 Analys för Cl6H22O6N3 (H = 558,56) 230 f' bl; Beräknatr 56,80 6,55 8,28 Funnett 56,59 6,41 8,42 Steg 2¿_ N¿(§1§utyloxikarbonyl)-Lïasparaginsyra-ß-(t-butylester)-1- Qïïglïgrgfgggfgilfgdesterpuf-me g (ao mmol) ßoc-Asp-(otmn-oza.rain-sal: fördelades mellan 240 ml eter och 240 ml vatten innehållande 1,2 ml koncentrerad svavelsyra. Eterfasen tvättades, först med en blandning av 80 ml vatten och 0,4 ml koncentrerad svavelsyra och därefter med rent vatten, varpå den torkades och indunstades i vakuum. Den på detta sätt erhållna, oljeartade produkten BOC-Asp(OtBu)-OH (l1,45 5 = 59,7 mmol) löstes tillsammans med 4,6 5 (40 mmol) N-hydroxisuccinímid i 100 ml vattenfri díoxan. lösningen kyldes till utfrysning och försattes där» efter under ytterligare kylning med 8,25 g (40 mmol) D00. Reaktions- blandningen omrördes hela natten vid rumstemperaturen, varpå den ut- fällda DCU avfiltrerades och filtratet indunstades. Återstoden stelades med en blandning av n-hexan och diísopropyleter. Den erhållna ràproduk- ten (l5,8 g) hade en smältpunkt av 98-102°C. Den omkristalliserades i en trefaldig mängd ísopropanol och man erhöll 12,1 g (78,5 Ä) B00-Asp~ (Otßu)-0Su i form av en vit, kristallinisk substans med en smältpunkt av 105-105°C. [Q/D = -25,6° (c=l; i dioxan).
Analys för Cl7H2608N2 (M = 586,59) } %H %N Beräknat: 52,84 6,78 7,25 Funnet: 52,97 6,90 7,21 Snti â-__-.äLzFenylalanll:aminøßilzëttäfszzrarlnzdflzolzlOrid- 5,8 e (líäl mmol) B00-Phe-0Gly-OH (steg 1) löstes i 10 ml etylacetat och lösningen försattes med 60 ml av en 4-normal lösning av H01 i etylacetnt. B1and~ ningen omrördes i en timme, varpå lösningsmedlet avdekanterades från den oljeartade substansen. Den sistnämnda stelades i nytt etylacetat och man erhöll 4,55 3 (96.6 ß) H-Ihe-OG1y~0H.HCl. Denna substans är hygroskopisk och måste förvaras i exsickator. Smältpunkt 75-80°C. R? = 0,2. Produkten är kromatografiskt enhetlig.
Steg 4. 2-ÅN;(t-Butyloxikarbonyl)-Ifasparagyl~B-(t-buty1ester)¿l;§en1l¿ alagyl-aminooxif-ättiksyra. 7,0 g (25,5 mmol) H-Phe-0G1y-0H.HGl (steg 5) löstes i 150 ml DNF och lösningen försattes med 7,15 ml (51 mmol) tri- etylamin. Till suspensionen sattes 9,50 g (24 mmol) B00-Asp(Ct3u)-Oßu (steg 2) och sedan det hela gått i lösning fick reaktionsblandníngen stå hela natten. Pàföljande dag índunstades blandningen i vakuum och den oljeartade återstoden löstes i 150 ml kloroform. lösningen urskaka- des tre gånger med IH-H01 och med vatten och torkades därefter och ,,PO0R QUALITY 5.1 CD 15 55 -CLO 7714524r1 16 indunstades i vakuum. Ãterstoden stelades genom övergjutning med diisc- propyleter. Râprodukten (lO,55 g) omfälldes i eter-n-hexan två gånger.
Man erhöll på detta sätt 8,65 g (?0,7 %) B00-Asp(0tBu)-lhe-0Gly-OH, som hade en smältpunkt av 85-85°C under sönderdelning. ÅQID =-50,6” (c=l,56; i etanol). R; = 0,45. Små mängder föroreningar kunde påvisas kromatografiskt.
Steg 5. 2-(IfAsparagyl-Iffenylalanyl-amincoxi)-ättiksyga-hïgroklorid. 8,50 g (l6,7 mmol) B00-Asp(OtBu)-Phe-0Gly-OH (steg 4) infördes under omrörning i 70 ml (550 mmol) av en 5-normal lösning av H01 i etylacetat.
Substansen löste sig omedelbart och efter 5 minuter började hydroklori- den utkristallisera sig. Efter 75 minuter filtrerades suspensionen och fällningen tvättades med etylacetat. Man erhöll på detta sätt 6,23 g (95,8 %) kristallinisk H-Asp-Phe-0Gly-0H.H0l, som hade en smältpunkt ev 1eo-1e5°c. R? = 0,25. Å Steg 6. 2-¿N¿(t-Butylggikarbonyl)-Ifmetíonyl-Ifa§paragyl-Iffenvlalanyl- emineexi7-ätfiikeyre. e,1g (15,6 mmel) Hælep-ociy-oH.Hc1 (steg 5) iöecee i 50 ml DNF och lösningen försattes 6,55 ml (46,8 mmol) trietylamin.
Till den så erhållna suspensionen sattes 6,58 g (l5,6 mmol) BOC~Het-0Su.
Sedan denna löst sig fick reaktionsblandningen stå hela natten vid rums~- temperaturen. Därefter indunstades blandningen i vakuum och den olje- artade återstoden delades med diisopropyleter. Den genom filtrering er- hållna råprodukten (6,5 g = 69 %) löstes i en ringa mängd av lösnings- medelsblandningen 7 och lösningen hälldes i en kolonn av llO g kisel- dioxidgel. Elueringen genomfördes med lösningsmedelsblandningen 7 med en hastighet av 8-10 ml/timme. De rena fraktionerna uppsamlades och índunstades i vakuum. Den så erhållna, oljeartade substansen stelades med diisopropyleter och man erhöll 4,4 g ràprodukt. Denna löstes i 15 ml metanol och produkten utfälldes med en 10-faldig mängd vattenfri eter.
Men erhöll på detta sätt 5,26 a (55,? %) Boc-met-Aep~Phe-ociy-on, som var amorf och kromatografiskt enhetlig. R: = 0,50; ÄQZD = -5?,2° (c=l,0; i etanol).
Analys för C25H56OloN4S ”AC JáN ',í-.5 Beräknat: 51,56 6,21 9,58 5,48 Funnet: 51,50 6,0? 9,45 5,4? Steg 7. 2-(I~Metionyl-Ifasparagyl-Iffenylalanyl-aminooxi1-ättiksyra.§§l 0,50 g (O,85 mmol) B00-Met-Asp-Phe-0Gly-OH (steg 6) behandlades i en timme med 5 ml av en lösning av H01 i etylacetat. Suspensionen fi1trera~ des, fällningen tvättades grundligt med etylacetat och torkades därefter i exsickator. Man erhöll på detta sätt 0,41 å (91 %) H-Het-Asp~lhe-0Gly- oa.Hc1. R? f = 0,05, R? = 0,2. Irodukten är amorf och kromatogrammet QUALITY WW, en lO 15 C; KN' kn 40 17 7714524-1 uppvisar en ringa grad föroreningar.
Steg_8. 2- N-(t-Butyloxíkarbonyl)-lftryptofvl-Ifmeti9n1l¿;¿a§Qg3âü¿L; Iffenylalanyl-aminooxi/-ättiksyra. 5,0 g (4,?9 mmol) H-Met-Asp-íhe-O3ly- 0H.HCl (steg 7) suspenderades i 50 ml DNF och suspensionen försattes under omrörning med 1,4 ml (10 mmol) trietylamin och 2,55 g (5,0 mmol; BOC-Trp-OPFP. Efter 90 minuter indunstades reaktionsblandningen i vaxuur Ãterstoden löstes i etylacetat och lösningen urskakades med lä-H01 (5 gånger) och därefter med vatten. Den organiska fasen torkades, klar- gjordes och indunstades därefter i vakuum till 10 ml. Efter tillsats av vattenfri eter fick blandningen stå i kyla, varpå den filtrerades.
Man erhöll på detta sätt 5,04 g råprodukt, som löstes i 5 ml etanol och utfälldes med 200 ml eter. Ytterligare erhölls 2,17 g (50,& Q) 303- rrp-net-Asp-rhe-oeiy-on. R; = 0,5. ¿@/D = -1a,9° (c=o,?5; 1 dimeryi- formamid). Produkten är amorf och, såsom framgår av kromatogramnet, nå- got förorenad.
Steg 9. 2-(IfTryptofyl-lfmetionyl-Ifasparagyl-Iffenylalanïl-aminooxiL¿ ättiksyra. 2,17 g (2,8l mmol) BOC-Trp-Met-Asp-Phe-0G1y-OH (steg S) sat- tes under omrörning till en blandning av 8 ml trifluorättiksyra, 2 ml vatten och l ml anísol. Genom reaktionsblandningen leddes kväve i två timmar, varpå lösningen utspäddes med 60 ml eter. Den utfällda produk- ten avfiltrerades och torkades i exsickator. Man erhöll pà detta sätt 2,0 g trifluoracetat, som löstes i 8 ml 2N-Na0H och lösningens pH in- justerades med 10 %-ig saltsyra på 4. Fällningen avfiltrerades och tvättades med vatten. Man erhöll på detta sätt 1,54 g (71 %) H-Prp-Het- Asp-Ehe-OGly-OH. R; = 0,1. Produkten är amorf och, såsom framgår av kromatogrammet, lätt förorenad. Den vidarebearbetades utan ytterligare rening.
Steg 10. 5-Brompropionsyra. 44,0 g (O,49 mol) 3-alanin och 200 g (l,63 mol) KBr löstes i 1,0 liter 2,5 N-HQSO4. Till lösningen sattes vid rumstemperaturen portionsvis 42,4 g (0,76 mol) natriumnitrit. Reaktions- blandningen omrördes vid rumstemperatureni.Etimmarochurskakadesdärofte två gånger med 200 ml eter. Eterlösningen urtvättades tre gånger med vatten, torkades och indunstades i vakuum. Råprodukten (l9,ö g) on~ kristalliserades i 50 ml n-hexan under klargöring. Nan erhöll på detta sätt 18,1 g (24 ä) 5-brompropionsyra, som hade en smältpunkt av 5?-S0°G.
Steg ll. 5-(t-Butïloxikgrbonylamingggi2-propion§1ra;dig1Kl9¿hexy1; ammoniumgglä- 7,7 E (O,5O mol) metalliskt natrium löstes i &50 ml etanol och lösningen försattes med 26,6 g (O,2O mol)Nl(t-butyloxikarbonyl)- hydroxylamin i 165 ml etanol och 28,7 g (0,188 mol) 5-brompropionsyra (steg 10) i 165 ml etanol. Reaktionsblandningen omrördes i 2 dagar viå SO-55°C och indunstades därefter i vakuum. Återstoden löstes i 550 ml 10 15 40 7714524f1 m vatten, vattenlösningen urskakades med etylacetat (5xl00 ml) och in- justerades därefter på pH 5 med citronsyra. Därefter mättades lösningen med natriumklorid och urskakades med etylacetat (5xlO0 ml). De förenade etylacetatfaserna tvättades tre gånger med vatten, torkades och indunsta des i vakuum. Till den oljeartade återstoden (27,25 g) sattes under 100 ml n-hexan portionsvis 25,5 ml (118 mmol) dicyklohexylamin under oav- bruten kylning. Den fällningshaltiga lösningen fick stå i kyla och filtrerades därefter. Fällningen tvättades med eter och man erhöll 44,95 g ràprodukt, som hade en smältpunkt av 128-l55°C. Denna ràprodukt löstes i 50 ml metanol, lösningen klargjordes och produkten utfälldes med 200 ml eter. Man erhöll på detta sätt 25,0 5 (54 %) BOG-ß-0A1a-0H.- DCHA-salt, som hade en smältpunkt av 148-l49°“. R; = 0,5, saltets R? = 0,25. Ur moderluten kunde ytterligare 9,5 g (l2,8 %) produkt isoleras.
Denna hade en smältpunkt av 144-145°C. _ Analys för c,OH58o5N¿ (H = 586,52) 7 %C %H fifi Beräknat: 62,14 9,91 7,25 Funnet: 61,99 10,02 7,09 Steg 12. '5-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-prQpionsyra-Qentafluor-fenyl- §§t§g¿ 1,10 g (2,85 mmol) BGC-3-0Ala-0H.DCHA-salt (steg ll) fördelades mellan 40 ml eter och 5 ml 2H-H2SO4. Eterfasen urskakades ytterligare en gång med svavelsyra, de förenade svavelsyrafaserna urskakades med eter. Eterfaserna förenades, torkades och indunstades i vakuum. Man erhöll 0,54 g (l,66 mmol) av en oljeartad substans, som tillsammans med 0,51 g (1,8 mmol) pentafluorfenol löstes i 10 ml vattenfri dioxan.
Vid 5°C sattes till lösningen 0,57 g (1,8 mmol) DCC. Reaktionsbland- ningen omrördes vid rumstemperaturen i 90 minuter, varpå den utfällda DCU avfiltrerades och filtratet indunstades i vakuum. Återstoden lös- tes i n-hexan och lösningen urskakades tre gånger med 5 %-ig natrium- vätekarbonatlösning. Därefter torkades lösningen och indunstades i va- kuum. Den oljeartade återstoden delades med n-pentan. Han erhöll 0,55 3 (55 % utbyte räknat på syran) B00-3-OA1a-OPFP, som hade en smältpunkt av se-59°c. R; = 0,65.
Analys för Cl4Hl405NF5 (M = 571,27) : %C fiâï %N ! Beräknatl 45,29 5,80 5,77 ¶ Funnet= 45,45 5,65 5,90 Steg 15. 2-15-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-propionyl-Iftrygtgfyl-Q; ; ggt;pny1-I~asparagy1-Iffenylalanvi-aminooxií-ättiksyra. 0,52 g (o,4emm01 H-Trp-Met-Asp-Phe-0G1y-OH (steg 9) och 0,25 g (0,60 mmol) BOC-3-OAla- OPFP (steg 12) löstes i 10 ml dimetylformamid och lösningen försattes f_____ POOR .___ QUÅUTI- \n 10 15 \:J kn 19 7714524r1 med 0,14 ml (1,0 mmol) trietylamin. Efter 5,5 timmar indunstades reak- tionsblandningen i vakuum och återstoden delades med eter. Rêprodukten (O,5l g) löstes i en ringa mängd av lösningsmedelsblandningen 6 och hälldes i'en kolonn av 20 g kiseldioxidgel. Eluering genomfördes med lösningsmedelsblandningen 6 med en hastighet av 5 ml/timme. De rena fraktionerna indunstades i vakuum och återstoden isolerades med vatten- fri eter. Nan erhöll 0,14 g (54 %) BOC-ß-0Ala-Trp-Get-Asp-Phe-0G1y-OH.
R? = 0,1; R; = 0,5. Irodukten är kromatografiskt enhetlig och amorf.
Analys för C59H5l013N7S (M = 857,94) 211 ÄN Beräknat: 54,60 5,99 11,45 Funnet: 54,40 6,10 11,27 Exempel 7= 2-[É-(t-Butyloxíkarbonylaminooxi)-acetyl-Iftryptofyl-l- metionyl-I-asparagy1-I-fenylalanyl-amínooxi/-ättiksyra. 0.34 g H-frp- net-Asp-the-osly-on (exempel 6, steg 9) löstes i lo m1 Dnr och lös- ningen försattes med 0,14 ml (1 mmol) trietylamin och 0,28 g (0,6 mmol) B00-0Gly-OECI (exempel 1, steg 9). Efter tre timmar indunstades reak- tionsblandningen i vakuum och àterstodensteladesnæd eter. Ràprodukten (0,45 g) löstes i en ringa mängd av lösningsmedelsblandningen 6 och eluerades ur 20 g kiseldioxidgel med lösningsmedelsblandningen 5 med en hastighet av 10 ml/timme. De rena fraktionerna förenades och induns- tades i vakuum. Man erhöll 0,15 g (51 ß) B00-0Gly-Trp-Met-Asp-Ihe-0G1y- OH. R? = 0,4. Produkten är amorf.
Analys för c58H49ëà5N7s (M = s45,92) 7 Éfií $N Beräknat: 54,08 _ 5,85 11,61 Funnet= 55.95 5,97 11,70 Exempel 8: 2-[É-D-(t-Butyloxikarbonylaminooxi);Qrggionyl-I-tryptofy1- Ifmetionyl-Ifasparagyl-Iffenylalanyl-aminooxi/-ättiksyra. 0,25 g (O,60 mmol) B00-D-0Ala-OFCP (exempel 5, steg 4) och 0,54 5 (0,50 mnol) H-Irp- Met-Asp-Ihe-OGly-OH löstes i 10 ml DEF och lösningen försattes med 0,14 ml (1,0 mmol) trietylamin. Efter tre timmar indunstades reaktionsbland- ningen i vakuum, återstoden revs med eter och avfiltrerades. håproduk- ten (0,4l 5) löstes i en liten mängd av lösningsmedelsblandningen -, lösningen hälldes i en kolonn av 40 5 kiseldioxidgel och elucring ge- nomfördes med lösningsmedelsblandníngen 7 med en hastighet av 13 ml/tim- me. De rena fraktionerna indunstades i vakuum och återstoden isolerades med vattenfri eter. Nan erhöll 0,11 g (25,6 Q) BOC-D-OA1a-Trp-Het-Asp- the-oG1y-on. RE = 0,25. Irodukten är amorf.
Analys för C59H5l013N7S (M = 857,94) i QUALITY \m 10 \_N \.."| :lpO 7714524'1 æ fiC %H ÄN Beräknat! 54,60 5,99 11,45 Funnetl 54,41 5,87 11,52 §§emQgl_9¿__§¿¿É2-If(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-propiogyl-l~trypto- gylfIfmetignyl-Ifasparagyl-Iffenvlalanyl-aminooxi7-ättiksyra. Ur BGC- I~0Ala-OPCP (exempel 5, steg 1) framställdes på sätt som angives i exempel 8 den i rubriken till förevarande exempel angivna föreningen.
Genom rening av råprodukten (0,58 g) erhölls 0,15 g kromatografiskt enhetlig B00-IfOAla-Trp-Met-Asp-Phe-OGly-OH. R: = 0,25.
Analys för C59H51015N7S (M = 857,94) 7áC %II IáN Beräknat: 54,6o 5,99 11,45 Funnet: 54,47 6,04 11,41 Exempel 10: Steg 1. N>t¿Butyloxikarbonyl~Ifnorleucinfpentafluorfenylester. 10,0 g (24,5 mmol) B00-N1e~OH.DCHA-salt skakades i en blandning av 75 ml eter och 25 ml 2NLH2S04, till dess att hela saltmängden löst sig. Därefter åtskildes faserna, eterfasen urskakades på nytt, först med 25 ml 2N- H2SO4 och därefter med vatten. Eterlösningen indunstades i vakuum och den så erhållna, oljeartade produkten (5,44 g) löstes tillsammans med 4,42 g (24 mmol) pentafluorfenol i 50 ml etylacetat. lösningen kyldes till O°C och försattes med 4,65 g (22,5 mmol) dicyklohexylkarbodiimid.
Suspensionen fick stå i en timme i kyla, varpå den filtrerades. Filtra- tet indunstades i vakuum, återstoden löstes i 50 ml n-hexan och lös- ningen urskakades först med en 5 %~ig natriumvätekarbonatlösning (5x20ml och därefter med vatten (2x2O ml). Den organiska fasen torkades och in- dunstades i vakuum. Den oljeartade återstoden stelnade i kyla. Han er- höll 8,l2 g (91 %) B00-Nle-OPFP, som hade en smältpunkt av 55-57°C; za/D = -2e,e° (c=1,o; 1 dioxan), nå = o,so; R? = o,e5.
Analys för Cl7H2O04NF5 (M = 592,55) 'IáC ,áF Beräknat: 51,59 5,07 25,91 Funnet: 51,51 4,68 2Q,O6 §§eg”2. Mj-tfßutyloggkarbon1l¿I~norleuc1l~Lfasparagzlzß-(t¿§gtïlg§tgg¿; krenïialgginilgg. 1,62, g (5,0 mmol) H-ASIxotBLQ-Phe-Im, (exempel 1, steg 4) och 2,2 g (5,5 mmol) B00-Nle-OEET (exempel 10, steg 1) löstes i 10 ml DHF och lösningen försattes med 0,70 ml (5,0 mmol) trietylamin.
Efter tre timmar indunstades reaktionsblandningen i vakuum och den fas- ta återstoden filtrerades i kallt tillstànd med eter. Han erhöll 2,25 T (e1,a %) Boo-nle-Asp(otBu)-rhe-nn,, som hade en sma1tpunkt av 154-1c5~:.
Ett litet prov omkristalliserades-i etylacetat och hade därefter en smältpunkt av 165-l6?°C. R? = 0,70. [ä7L = -2,2° (c=l,0; i dimetylforma- míd>° _ ___, r__r Igtltlft -.,_ QUÅIJTY, \J1 LÜ 7714524-1 21 Analys för c38H44o?N4 (M = 546,66) í5C JH ßlí Beräknat: 61,29 8,08 10,24 Funnet: 61 , BIL 7 , 70 10,40 Steg 5. l¿§örleuqï1-Ifasparag11-Iffenïlalanin-amid¿hydr9g1gri¿. 1,92 Q (5,4? mmol) BOC-Nle-Asp(Otßu)-Phe~NH9 löstes i 15 ml av en 4-normal lösning av H01 i ättiksyra. Efter en_timme indunstades reaktionshlanš- ningen i vakuum och den fasta återstoden filtrerades med eter. Nan er~ höll 1,48 g (98 E) H-Ile-Asp-Phe-NH2.HCl, som sönderdelades vid 1 5°C.
ZQYD = -l5,4° (c=l,O; i dimetylformamid). R; = 0,55.
Steg 4.__E¿t¿BgtylQgiEarh9g1l-IftryptoIyl-lrnorleucy1-lfasggragïl¿1: ienylalanin-amid. 1,55 2 (5,15 mmol) H-Nle-Asp-Fhe-NH,.HCl och 1,26 5 (5,l5 mmol) BOC~Trp-OSu löstes i närvaro av 0,88 ml (ë,5 mmol) trietyl- amin i 40 ml DNF. Reaktionsblandningen omrördes hela natten och in- dunstades därefter i vakuum. Den oljeartade återstoden stelades med vatten innehållande en ringa mängd ättiksyra. Suspensionen filtrerades i kallt tillstånd och fällningen tvättades med vatten och därefter med eter. Pâ detta sätt erhölls 1,92 g (89,7 %) BOC-Trp-Nle-Asp-Ihe-RHD. sönderdelningspunkt 19e°o. [din = -2e,a° (@=1,o; 1 dimetylformamiiï.
R? = 0,50. Produkten vidarebearbetades utan ytterligare rening.
Steg 5. 1~Tryptofy1-Ifnorleucyl-Ifasparagyl-Iffignyla1anin-amíd-hydro- klorid. 1,85 g (2,75 mmol) BOC-Trp-Nle-Asp-lhe-NH, behandlades med 50 ml av en 8-normal lösning av HC1 i dioxan. Efter några timmar indunstades lösningen i vakuum och den geléartade återstoden filtrerades med aceton.
Man erhöll 1,17 g (69,7 %) H-Trp-Nle-Asp-Phe-NH,.HCl, vars sönderdel~ ningspunkfi var 255°c. ¿@7D e -2s,4° (c=1,o; 1 dšmetylformamid) (littera- tur: J.S.Morley och J.S.Smith, J.0hem.Soc. C726 ¿l96&]: Sönderdelnings- punkt 235%, 12x11, = -28,5°), 11,? = 0,55- Steg_§, 2-D-(t-Butyloxikarbonylaminooxi)-prppionyl-Ietryptoiy1~I- norleucyl-Ifasparagyl-Iffenylalanin-amid. 1,0 g (1,63 mmol) H-Trp-K1e- Asp-Phe-NH9.HCl och 0,74 g (1,62 mmol) 300-D-OA1a-CEST (exempel 5, steg 4) omsattes med varandra i 10 ml DNF i närvaro av 0,68 ml (4,86 mmol) trietylamin. Iàföljande dag indunstades reaktionsblandningen i vakuun och den geléartade återstoden filtrerades med eter, varpå den ttlttaiec med eter och därefter med vatten. Råprodukten (l,56 g) kromatogrnferaies på kiseldioxidgel med lösningsmedelsblandningen lO. De rena fraktionerna indunstades i vakuum. Den fasta återstoden filtrerades med 50 J-ig, vattenhaltig etanol. Man erhöll 0,25 g B00-D-OAla-Trp-Nle-Asp-íheïhfl,, som hade en smältpunkt av 217-218°C (sönderdelning). R? = 0,50; RÉU Ä 0,15. /1/D = +a,5° (c=1,o; 1 dimety1f0rmamid>.
Analys för C58H5l0lON7 (M = 755,33) _ i QUALITY 10 15 55 .ÉlQ 7714524r1 22 'ESC JáH HSN Beräknat: 59,59 6,71 12,8 Funnet= 59,40 6,55 12,85 š§snpel.ll¿ Steg l. N-t-Butyloxikarbonyl-I-norvalinïpentafluorfenylester. 2,0 5 (20 mmol) BOC-Eva-OH.DCHA-salt löstes under skakning i 60 ml eter och 20 ml 2H-HESOÄ. Eterlösningen tvättades med 20 ml EN-HÉSCÄ vatten. Sedan lösningen torkat indunstades den i vakuum och den som en återstod erhållna oljan löstes tillsammans med 5,70 5 (23 mmol) penta- fluorfenol i 25 ml etylaoetat. Till lösningen sattes vid Û°C 5,G2 g (19 mmol) DCC. Efter en timme filtrerades suspensíonen, filtratet in- och med dunstades i vakuum och den oljeartade återstoden löstes i 50 ml n-hexan. lösningen tvättades med en 5 3-ig natriumvätekarbonatlösning (5x2O ml), därefter med vatten (2x2O ml) och indunstades slutligen i vakuum. Den oljeartade återstoden krístalliserade i kyla. Han erhöll 6,21 g (81 Å) Boo-Nve-0PFP, som nade en emältpunkt ev eo-e2°c, R? = 0,70; ¿@/L = -52,5° (c=l,O; i dioxan).
Analys för clsnlsounrs (M = 385,52) %C %H %F Beräknat: 50,14 4,75 24,78 Funnet: 50,06 4,64 24,65 §teg 2. N-t-Buty1oxikarbonyl~Ifnorvalyl-Ifasparagy1-ß-(t-butylester)- gcgepïlelenln-emlg. 1,68 g (5,0 mmel) H-Aep(otBu)-Pne-HH, (exempel 1, steg 4) och 2,12 g (5,5 mmol) BOC-Nva-OPFP omsattes i lO~ml DNF i när- varo av 0,70 ml (5 mmol) tríetylamin. Efter fyra timmar indunstades reaktionsblandningen í vakuum och den oljeartade återstoden stelades med ever. men erhöll 2,50 g (ae,2 %) Boo-Nve-lep(otsd)-Phe-NH,, een hade en smältpunkt av 169-l70°C. R: = 0,65; [Q/D = -4l,6° (c=l,O; i metanol).
Analys för G27H420ZN¿ (M = 554,64) rv ïäï [ET Beräknat: 60,65 7,95 10,48 Funneti 60,60 7,7? 10,55 .3tegj._ L-Norvalyl-L-asparagyl-If-fenylalanin--amid-Ilydrqlglorid. Jfi-f» f; (5,55 mmel) B00-Nve-Aep(0tBd)-Phe-NH, behandlades 1 en timme med 19 ml av en 4-normal lösning av H01 i ättifisyra. Därefter indunstades lös- ningen, den fasta återstoden filtrerades med eter och man erhöll 1,45 3 (98,5 %) H-Nva-Asp-Phe-NH2.HCl. Sönderdelningspunkt 20#°C. ÅQYL = -l5,Q“ (c=l,O; i dimetylformamid), R; = 0,15.
N-t-Buty1oxikarbonyl-Iftr1ptg§yl;l¿ngrvalgl-Lïasgaragylzli geggleleplp-emid. 1,24 e (5,0 mmel) n-Nve-Asp-lhe-Nn,ucl och 1,20 g (5,0 mmol) BOC-Trp-OSu omsattes i 15 ml DNF i närvaro_av 0,84 ml (G,Um:o Steg 4.
QUALITY, KH 10 15 \N UI 40 23 77145244-1 trietylamin. Páföljande dag indunstades reaktionsblandningen i vakuam och återstoden stelades med vatten. Suspensíonen filtrerades och fäll- ningen tvättades grundligt med vatten. Den erhållna ráprodukten (2,C g) omkristalliserades i 80 %~ig etanol (50 ml). Nan erhöll 1,47 g (?5,9 Q) BOC-Trp-Nva-Asp-Phe-NHQ, som smälte vid 207-208°C. då = 0,55. [QXU = -45,4°
Claims (1)
1. 0 15 20 25 30 7714524- 'a 27 PATENTKRAV Sätt att framställa peptider med den allmänna formeln A-Trp-B-Asp-Phe-NH-Y I där A representerar en t-buty1oxikarbonylaminooxiacyl- eller (aminooxi)-acylgrupp, där "acyl" innefattar acetyl och propionyl, och B representerar en metionyl-, leucyl-, norleucyl-, norvalyl- eller 2- amino-dekanoylgrupp och Y representerar väte eller en karboxi-metoxigrupp, liksom även syraadditionssalter och komplex av dessa föreningar, k ä n n e t e c k n a t av att en tetrapeptid med den allmänna formeln II H-Trp-B-Asp-Phe-NH-Y II där B och Y har ovan angivna betydelser, omsättes med en förening med den allmänna formeln A1-X där A1 har samma betydelse som ovan angives för A med undantag av (aminooxi)-acylgruppen och X representerar en fenoxigrupp, som är substituerad med halogen, företrädes- vis en 2,4,6-triklor-; 2,3,5~triklor-; pentaklor- eller pentafluorfenoxigrupp, varvid, om man önskar en förening med formeln I vari A är en (aminooxi)-acyl~grupp, på i och för sig känt sätt avlägsnar t-butyloxi-karbonylgruppen, och den så erhållna föreningen, om så önskas, omvandlas till ett fysiologiskt godtagbart syra-additionssalt eller ett komplex, eller ett annat salt eller ett inre salt, som är fysiologiskt godtagbart, framställes ur ett salt därav, eller den fria syran framställes ur ett salt.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU76RI608A HU175152B (hu) | 1976-12-30 | 1976-12-30 | Sposob poluchenija peptidov s gastrin-aktivnost'ju, soderzhahhikh amino-oksi-kisloty |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE7714524L SE7714524L (sv) | 1978-07-01 |
| SE441752B true SE441752B (sv) | 1985-11-04 |
Family
ID=11001012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7714524A SE441752B (sv) | 1976-12-30 | 1977-12-20 | Sett att framstella peptider, som innehaller alfa-aminooxisyror och som har gastrinverkan |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4172130A (sv) |
| JP (1) | JPS53111060A (sv) |
| BE (1) | BE862406A (sv) |
| DE (1) | DE2759031A1 (sv) |
| FR (1) | FR2376127A1 (sv) |
| GB (1) | GB1541337A (sv) |
| HU (1) | HU175152B (sv) |
| NL (1) | NL7714582A (sv) |
| SE (1) | SE441752B (sv) |
| SU (1) | SU691082A3 (sv) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5815946A (ja) * | 1981-07-21 | 1983-01-29 | Eisai Co Ltd | 新規ヘプタデカペプタイド |
| CH664560A5 (fr) * | 1982-07-07 | 1988-03-15 | Orgamol Sa | Procede de preparation d'un ester dipeptide d'acide l-aspartique par deblocage reducteur. |
| FR2575164B1 (fr) * | 1984-12-20 | 1987-03-20 | Sanofi Sa | Esters de tri- et tetrapeptides inhibiteurs de la secretion gastrique, procede d'obtention et compositions pharmaceutiques les contenant |
| CN101970015B (zh) * | 2008-01-08 | 2014-05-07 | 兰休斯医疗成像公司 | 作为显像剂的n-烷氧基酰胺共轭物 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1042487A (en) * | 1964-06-25 | 1966-09-14 | Ici Ltd | Polypeptide derivatives |
| HU167655B (sv) * | 1972-08-18 | 1975-11-28 |
-
1976
- 1976-12-30 HU HU76RI608A patent/HU175152B/hu not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-12-20 SE SE7714524A patent/SE441752B/sv not_active IP Right Cessation
- 1977-12-26 FR FR7739181A patent/FR2376127A1/fr active Granted
- 1977-12-26 JP JP15575377A patent/JPS53111060A/ja active Granted
- 1977-12-28 BE BE183910A patent/BE862406A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-12-29 US US05/865,503 patent/US4172130A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-12-29 GB GB54170/77A patent/GB1541337A/en not_active Expired
- 1977-12-29 SU SU772560052A patent/SU691082A3/ru active
- 1977-12-30 NL NL7714582A patent/NL7714582A/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-12-30 DE DE19772759031 patent/DE2759031A1/de active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6121239B2 (sv) | 1986-05-26 |
| DE2759031A1 (de) | 1978-07-13 |
| HU175152B (hu) | 1980-05-28 |
| US4172130A (en) | 1979-10-23 |
| FR2376127B1 (sv) | 1980-04-04 |
| SU691082A3 (ru) | 1979-10-05 |
| GB1541337A (en) | 1979-02-28 |
| FR2376127A1 (fr) | 1978-07-28 |
| SE7714524L (sv) | 1978-07-01 |
| NL7714582A (nl) | 1978-07-04 |
| DE2759031C2 (sv) | 1988-07-21 |
| BE862406A (fr) | 1978-04-14 |
| JPS53111060A (en) | 1978-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4971978A (en) | Derivatives of D-glutamic acid and D-aspartic acid | |
| Colucci et al. | Synthesis of D-lysine8-cyclosporine A. Further characterization of BOP-Cl in the 2-7 hexapeptide fragment synthesis | |
| JPH0159278B2 (sv) | ||
| US4298523A (en) | Methods and compositions for preparation of H-ARG-X-Z-Y-TYR-R | |
| US5128346A (en) | Derivatives of D-glutamic acid and D-aspartic acid | |
| SE441752B (sv) | Sett att framstella peptider, som innehaller alfa-aminooxisyror och som har gastrinverkan | |
| NL8003767A (nl) | Op het centrale zenuwstelsel werkende tripeptideamiden en werkwijze voor de vervaardiging daarvan. | |
| JPH0647599B2 (ja) | ヘプタノイル―Ｇｌｕ―Ａｓｐ―Ａｌａ―アミノ酸系免疫賦活薬 | |
| US4250086A (en) | Method and composition for preparation of H-SAR-LYS-SAR-GLN-NH2 | |
| SE461042B (sv) | Peptider med tillvaextbefraemjande aktivitet jaemte veterinaera kompositioner innehaallande naemnda peptider | |
| US4369137A (en) | N-Protected pentapeptides useful as intermediates in the preparation of thymopoietin pentapeptide | |
| SE421790B (sv) | Sett att framstella biologiskt aktiva polypeptider innehallande asparaginylgrupper | |
| SU490284A3 (ru) | Способ получени пептидов с последовательностью актг-человека,содержащих в -конечном положении аминооксикислоту | |
| US3272790A (en) | Polypeptides | |
| US3417072A (en) | Intermediates in the synthesis of secretin | |
| SE441834B (sv) | Sett att framstella peptider, som innehaller fenylglycin och som har gastrinverkan | |
| US4339440A (en) | Enkephalin analogs and a process for the preparation thereof | |
| EP0311392B1 (en) | Solution synthesis of an octapeptide | |
| US3247180A (en) | Nonadecapeptides and intermediates for the preparation thereof | |
| CH654841A5 (de) | Appetitzuegelnde tripeptide und verfahren zur herstellung derselben. | |
| US3400118A (en) | Intermediates in the preparation of secretin | |
| CA1156220A (en) | Method and composition for preparation of h-sar-lys-sar-gln-nh.sub.2 | |
| US3795667A (en) | Novel peptide intermediates in the preparation of secretin | |
| SU1048702A1 (ru) | Циклический аналог энкефалина, обладающий пролонгированной анальгетической активностью | |
| Tesser et al. | Synthesis and biological activity of four analogues of β‐corticotropin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7714524-1 Effective date: 19901019 Format of ref document f/p: F |