SA519400856B1 - أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22‏ - Google Patents

أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22‏ Download PDF

Info

Publication number
SA519400856B1
SA519400856B1 SA519400856A SA519400856A SA519400856B1 SA 519400856 B1 SA519400856 B1 SA 519400856B1 SA 519400856 A SA519400856 A SA 519400856A SA 519400856 A SA519400856 A SA 519400856A SA 519400856 B1 SA519400856 B1 SA 519400856B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
antibody
receptor
interleukin
sequence
amino acid
Prior art date
Application number
SA519400856A
Other languages
English (en)
Inventor
بيرجيت اورسو،
كريستوف فريديريك جيروم بلانشيتوت،
مالين بيرتيلسين،
هارد، جوانيس جوزيف ويلهيلموس دى
مايكل ساونديرس،
نيلسين، تين سكاك-
دير ونينج، سيباستين فان
Original Assignee
ارجينكس بى فى بى ايه
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ارجينكس بى فى بى ايه filed Critical ارجينكس بى فى بى ايه
Publication of SA519400856B1 publication Critical patent/SA519400856B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة ‏antibodies‏ وشظايا ‏fragments‏ منها رابطة لمولد الضد ‏antigen‏ التي ترتبط بمستقبل ‏receptor‏ السيتوكين ‏cytokine‏ مستقبل إنترلوكين-22 ‏interleukin-‎‎22 receptor‎‏ (‏IL-22R‎‏)، على وجه التحديد مستقبل إنترلوكين-22 بشري. يتعلق الاختراع أيضًا ‏بتركيبات صيدلانية تشتمل على الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد منها المذكورة، وطرق ‏لمعالجة الصدفية ‏psoriasis، أو التهاب المفاصل الصدفي ‏psoriatic arthritis‏ أو التهاب الجلد ‏التأتبي ‏atopic dermatitis‏.‏ شكل 1‏

Description

أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين -22 ‎ANTI-IL-22R ANTIBODIES‏ الوصف الكامل
خلفية الاختراع
يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة ‎antibodies‏ وشظايا ‎fragments‏ منها رابطة لمولد الضد ‎antigen‏ interleukin-22 receptor ‏مستقبل إنترلوكين-22‎ cytokine ‏السيتوكين‎ receptor ‏يرتبط بمستقبل‎ Cus
(1-22)؛ وبخاصة مستقبل إنترلوكين-22 البشري. تتميز الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22
وشظايا ريط ‎Age‏ الضد ‎antigen binding fragments‏ الخاصة بالاختراع بخواص مميزة» وبخاصة توليفة
مميزة من الخواص؛ بالمقارنة بالأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 الموصوفة في الفن السابق.
مستقبل إنترلوكين-22 (المعروفة باسم مستقبل إنترلوكين-22 1 1 ‎IL-) interleukin-22 receptor‏
‎(22R1‏ ومستقبل إنترلوكين-22 أ ‎((IL-22RA) interleukin-22 receptor A‏ عبارة عن مستقبل سيتوكين
‏من النوع الثاني الذي يتم التعبير عنه بشكل انتقائي على خلايا الجلد والخلايا الظهارية ‎epithelial cells‏ 0 وبتوسط هذا المستقبل إرسال الإشارات عبر ثلاثة سيتوكينات: إنترلوكين 22 22 ‎¢(IL-22) interleukin‏
‏إنترلوكين 20 20 ‎(IL-20) interleukin‏ وإنترلوكين 24 24 ‎interleukin‏ (11-24). وبتطلب إرسال
‏إشارات السيتوكين عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 تكوين معقدات_ثنائية الوحدات غير متجانسة
‎heterodimeric complexes‏ على سطح الخلية. وكما يتضح في الشكل 1؛ فإن إنترلوكين 22 يريط
‏ويرسل إشارات عن طريق معقد يتكون من مستقبل إنترلوكين-22 ومستقبل إنترلوكين-10-بيتا ‎(IL-10RP) interleukin-10 receptor-beta 5‏ (المعروف باسم مستقبل إنترلوكين -2-10 ‎interleukin-10‏
‎¢(IL-10R2) receptor-2‏ بينما إنترلوكين 20 وإنترلوكين 24 يربط ويرسل إشارات عبر معقد ثنائي غير
‏متجانس يتكون من مستقبل إنترلوكين -22 ومستقبل إنترلوكين -20-بيتا ‎interleukin-20 receptor-beta‏
‎-((IL-20R2) interleukin-20 receptor-2 2-20 - ‏(المعروف باسم مستقبل إنترلوكين‎ (IL-20RP)
‏يعتبر الإنترلوكين- 22 سيتوكين تعبر عنه الخلايا المناعية ‎dmmune cells‏ وبخاصة الخلايا المتغصنة ‎dendritic cells 0‏ النشطة والخلايا 1 ‎cells‏ 1. وعندما يتم إنتاجه عن طريق الجهاز المناعي ‎immune‏
‎22- ‏فإن إنترلوكين 22 يظهر تأثيراته الحيوي عن طريق الارتباط مع وتنشيط مستقبل إنترلوكين‎ system
‏على الخلايا الظهارية. ويؤدي تنشيط معقد مستقبل إنترلوكين-22-مستقبل إنترلوكين-10-بيتا بعد ريط
‏إنترلوكين 22 إلى استجابات غير التهابية ‎«pro-inflammatory responses‏ إدخال بروتينات مضادة
للجراثيم ‎anti-microbial proteins‏ وهي ضرورية لدفاع العائل ضد الممرضات الجرثومية ‎bacterial‏ ‎«pathogens‏ وتأثيرات وقائية في بعض الأعضاء كالرثتين ‎lungs‏ والكبد ‎liver‏ كما كانت هناك دلائل على إنترلوكين 22 في الاعتلالات المرضية؛ وبخاصة في ظهور الاضطرابات الالتهابية ‎inflammatory‏ ‎fie disorders‏ الصدفية ‎psoriasis‏ التهاب الجلد الصدفي ‎psoriatic arthritis‏ والتهاب الجلد التأتبي ‎Immunol. ¢Ma et al.
J Clin.
Invest. 118: 597-607 (2008)) atopic dermatitis 5‏ ل ‎Van Belle et al.‏ ‎Sabat et al.
Nat.
Rev.
Drug Discov. 13(1):21-38 (2014¢188(1):462-9 (2012)¢Jan 1‏ (( . لقد تم حل البنية البلورية لإنترلوكين 22 في المعقد مع نطاق خارج الخلية ‎extracellular domain‏ لإنترلوكين 22؛ وقد ‎jag‏ ذلك فهماً ‎Lage‏ لكيفية ارتباط هذا الجزيء الرابط ‎ligand‏ مع مستقبله ‎(Jones et‏ ‎Lal Structure 16(9): 1333-1344 )2008(‏ وتتضمن المنطقة خارج الخلية من إنترلوكين 22 نطاقي 0 فيبرونكتين من النوع الثالث 111 ‎D1) (FBNII) fibronectin type‏ و02) متجهين بزاوبتين قائمتين تقريباً تجاه بعضهما. وهناك خمس حلقات موجودة عند السطح البيني لهذين المجالين هي المسئولة بشكل رئيسي عن تعشق الوحدات البنائية لإنترلوكين 22 في معقد جزيء الربط- المستقيل ‎ligand-receptor‏ ‏«001. تتجمع الوحدات البنائية لإنترلوكين 22 التي تساهم في ربط المستقبل في موقعين في جزيء ‎dal)‏ الموقع 1آ؛ والموقع 2ب. لقد كشف فهم الوحدات البنائية الحيوية التي يساهم فيها كل من المستقبل ‎bl sas‏ عن كيف يمكن إيقاف هذا التفاعل لإلغاء إشارات إنترلوكين 22 كإحدى الاستراتيجيات العلاجية. يتم التعبير عن الإنترليوكين- 20 والإنترليوكين- 24 عن طريق الخلايا الأحادية ‎monocytes‏ والخلايا الكرياتينية ‎keratinocytes‏ ويشبهان إنترلوكين 22؛ وقد ثبت أن هذه السيتوكينات تلعب دوراً في تجانس استقرار ‎homeostasis‏ الجلد واعتلاله. وبستلزم ذلك؛ أن استراتيجيات تثبيط أو خفض إرسال الإشارات 0 بعد مستقبل إنترلوكين-22 عن طريق إعاقة جزيئات الريط التي تنشط هذا المستقبل قد تكون ذات فائدة علاجية؛ وبخاصة في علاج حالات الجلد مثل الصدفية والتهاب الجلد التأتبي. لقد تم تطوير أجسام مضادة ترتبط بمستقبل إنترلوكين-22 وتعيق التفاعل بين إنترلوكين 22 ومستقبل إنترلوكين-22. على سبيل ‎Joa‏ براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011 تتناول براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011 جسم مضاد مستقبل إنترلوكين-22 متوافق مع البشر تم إنتاجه من الجسم 5 المضاد وحيد النسيلة ‎monoclonal antibody‏ الفأري المضاد للبشر الموصوف أساساً في براءة الاختراع الدولية رقم 047249/2006. وهذا الجسم المضاد المتوافق مع البشرء الذي ستتم الإشارة إليه في الوثيقة
الحالية على أنه ‎“280-346-TSY”‏ ثبت أنه يثبط إرسال إشارات إنترلوكين 22 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 أ في تجرية تكائر خلية؛ وثبط التهاب الأذن ‎ear inflammation‏ بسبب إنترلوكين 23 ‎(L-23) Interleukin-23‏ في نموذج ‎old‏ خاص بالصدفية. الوصف العام للاختراع يحسن الاختراع الحالي من حال الفن السابق عن طريق توفير أجسام مضادة؛ أو شظايا منها رابطة لمولد ‎Cus call‏ يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22؛ ويتميز بخواص مختلفة عن الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الموصوفة في الفن السابق. تتميز الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد نمطياً بتوليفة من الخواص مختلفة وفي حالات معينة أفضل من خواص الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 للفن ‎(lull‏ وبخاصة الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 المتوافق مع البشر الموصوف في الطلب الدولي لبراءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011. قد تكون خواص هذه الأجسام المضادة مميزة جداً في فيما يتعلق باستخدامها في العلاج ‎(gill‏ وبخاصة في ‎le‏ ‏حالات مثل الصدفية؛ التهاب الجلد الصدفي والتهاب الجلد التأتبي. في سمة ‎Jol‏ يوفر الاختراع الحالي جسما ‎alias‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎die‏ حيث يرتبط ب مستقبل إنترلوكين-22 البشري؛ حيث يرتبط الجسم المضاد أو شظية ‎die‏ رابطة ‎Algal‏ الضد بقمة لاصقة 5 داخل بروتين ‎protein‏ مستقبل إنترلوكين-22 الذي لا يحتوي على تيروسين 60 60 ‎tyrosine‏ (1:760). في نماذج معينة؛ تتميز الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد بواحدة أو أكثر من الخواص الإضافية التي يتم اختيارها مما يلي: (1) القدرة على ربط ‎dad‏ لاصقة ‎epitope‏ من مستقبل إنترلوكين-22 البشري الموجودة جزئياً على الأقل في النطاق 72 للبروتين مستقبل إنترلوكين-22؛ 0 (1) القدرة على ربط مستقبل إنترلوكين-22 بشري بألفة عالية؛ )3( القدرة على إعاقة ارتباط إنترلوكين 22 بمستقبل إنترلوكين -22 البشري؛ )4( القدرة على تثبيط تنشيط مستقبل إنترلوكين-22 المعتمد على إنترلوكين 22؛ (5) القدرة على تثبيط تنشيط مستقبل إنترلوكين-22 المعتمد على إنترلوكين 20؛ (6) القدرة على تثبط تنشيط مستقبل إنترلوكين-22 المعتمد على إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20؛ و 5 (7) نقص التفاعلية التبادلية ‎cross-reactivity‏ مع مستقبل إنترلوكين-22 الفأري. قد تتميز الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد بتماثل بشري عالي؛ كما تم تعريفها في مكان آخر
من الوثيقة الحالية. في نماذج معينة؛ تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎(VH) heavy chain variable domain‏ ونطاق متغير خفيف السلسلة ‎light‏ ‎Cua (VL) chain variable domain‏ النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة أو واحدة أو أكثر من مناطق تحديد التمامية ‎complementarity determining regions‏ ‎(CDRs) 5‏ منها تكون مستمدة من حيوان من عائلة الجمليات ‎Camelidae family‏ أي مستمدة من الجمل ‎.camelid-derived‏ تتميز الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد بتماثل بشري عالي أو يكون بها واحدة على الأقل متوالية منطقة تحديد التمامية المستمدة من الجمليات؛ نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة قد تكون متوافق مع البشر أو صورة سلالة جرثومية لنطاقات نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة من أجسام مضادة مأخوذة من الجمليات تقليدية؛ حيث أن
0 المصطلحات ‎Gis‏ مع البشر" ‎ADL‏ جرثومية 800011060" هي كما تم تعريفها في مكان آخر من الوثيقة الحالية. في نماذج غير مقيدة يوفر الاختراع التالية أجساما مضادة؛ أو شظايا منها رابطة لمولد الضد؛ يتم تعريفها عن طريق الإشارة إلى خصائص بنائية معينة؛ أي متواليات حمض أميني معينة إما لمناطق تحديد التمامية (واحدة أو أكثر من المتواليات أرقام: 2 4 6 9 11 13 34 36 41 43 (مناطق
تحديد التمامية ثقيلة السلسة) أو المتواليات أرقام: مل 18 20 23 25 27 47 ‎S54‏ 57 59 (مناطق تحديد التمامية) خفيفة السلسة) أو كل النطاقات المتغيرة (واحدة أو أكثر من المتواليات أرقام: 29 31 63 65 (نطاقات متغيرة ثقيلة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 30 32 62 64 66 (نطاقات متغيرة خفيفة السلسلة)). ترتبط كل هذه أجسام مضادة بمستقبل السيتوكين البشري مستقبل إنترلوكين -22.
0 في نماذج معينة؛ قد تتميز الأجسام المضادة التي تحددها الخصائص البنائية التالية بتماثل بشري عالي؛ كما تم تعريفها في الوثيقة الحالية. قد تكون الأجسام المضادة أجسام مضادة وحيدة النسيلة يتم إنتاجها عن طريق وسائل عودة الارتباط الجيني. مناطق تحديد التمامية الخاصة بالأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 التالية قد تكون مستمدة من الجمليات؛ أي مستمدة من أجسام مضادة تقليدية ناشئة عن تحصين ‎immunisation‏ الجمليات ‎llama WOU)‏ بصفة خاصة). يوفر الاختراع أيضاً صور بشرية أو
5 متوافقة مع البشر سلالة جرثومية؛ صور ألفة وصور تحتوي على استبدالات حمض أميني محافظة؛ كما تم تعريفها في الوثيقة الحالية.
سيتم ‎Wa‏ وصف نماذج الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع بالإشارة إلى الخصائص البنائية. في أحد النماذج؛ يتم توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضد؛ حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظية رابطة لمولد ضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على منطقة تحديد التمامية 3 ‎complementarity determining region‏ 3 ) ثقيلة السلسلة يتم اختيارها من: المتوالية رقم: 6 ‎[VGFSGTYYSES]‏ أو صورة متوالية منها المتوالية رقم: 13 ‎([PPGPFKAHYNGMKY]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 43 ‎[PPGPFKAHYNGAKY]‏ أو صورة متوالية منهاء 0 حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المتال استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة. على نحو بديل أو إضافي قد يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد أو شظية منه ‎da‏ لمولد الضد على منطقة تحديد التمامية 2 2 ‎(CDR2) complementarity determining region‏ ثقيلة السلسلة يتم اختيارها من: 5 المتوالية رقم: 4 ‎[STYNDGSNTAYSDSVKG]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 11 ‎[GIHISGGITYYLDSVKG]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 36 ‎([STYNDASNTAYSDSVKG]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 41 ‎[GIHISGGITYYTDSVKG]‏ أو صورة متوالية منهاء حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل 0 المثال استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة. على نحو بديل أو إضافي قد يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد أو شظية منه ‎da‏ لمولد الضد على منطقة تحديد التمامية 1 1 ‎(CDR1) complementarity determining region‏ ثقيلة السلسلة يتم اختيارها من: المتوالية رقم: 2 ‎[SYDMS]‏ أو صورة متوالية منهاء 5 المتوالية رقم: 9 ‎[SYFMS]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 34 ‎[SYDMN]‏ أو صورة متوالية منهاء
حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني ‎amino acid‏ (على سبيل المثال استبدالات محافظة»؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ألفة ‎(affinity variants‏ في المتوالية المذكورة. بديلاً عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ قد تشتمل الأجسام المضادة أو شظية منه رابطة لمولد الضد؛ ‎Gua‏ ‏5 ترتبط بمستقبل السيتوكين ‎cytokine receptor‏ مستقبل إنترلوكين-22؛ على نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على منطقة تحديد التمامية 3 خفيفة السلسلة يتم اختيارها من: المتوالية رقم: 20 ‎JQSGSSSANAV]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 27 ‎JASYRLYADYV]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 54 ‎JQSGSSSSNAV]‏ أو صورة متوالية منهاء 0 حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المتال استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة. على نحو بديل أو إضافي قد يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد على منطقة تحديد التمامية 2 خفيفة السلسلة يتم اختيارها من: المتوالية رقم: 18 ‎JGNNNRPS]‏ أو صورة متوالية منها المتوالية رقم: 25 ‎[KVNTRSS]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 47 ‎JGQNNRPS]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 59 ‎JEVNKRSS]‏ أو صورة متوالية منهاء حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المتال استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة. 0 على نحو بديل أو إضافي قد يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد على منطقة تحديد التمامية 1 خفيفة السلسلة يتم اختيارها من: المتوالية رقم: 16 ‎[QGGYYAH]‏ أو صورة متوالية منها المتوالية رقم: 23 ‎[TGTSRDIGDYNYVS]‏ أو صورة متوالية منهاء المتوالية رقم: 57 ‎[TGTSSDIGSYNYVS]‏ أو صورة متوالية منهاء 5 حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المتال استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة.
في نماذج ‎die‏ يتم توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يشتمل الجسم المضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد على توليفة من منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎variable heavy chain complementarity‏ ‎«(HCDR3) determining region 3‏ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎variable heavy‏ ‎(HCDR2) chain complementarity determining region 2 5‏ و منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة 1 ‎Gus )]10011( variable heavy chain complementarity determining region‏ يتم اختيار التوليفة من المجموعة المكونة من: (1) منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 36؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة 0 ثيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 34؛ )2( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 43؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 41؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 9؛ (3) منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 4؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎Cua‏ تشتمل على المتوالية رقم: 2؛ و )4( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 13؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 11؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 9. 0 بديلاً عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ فإن الأجسام المضادة أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث ترتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 قد تشتمل على توليفة من منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة 3 ‎«(LCDR3) variable light chain complementarity determining region‏ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة ‎variable light chain complementarity determining‏ ‎(LCDR2) region 2‏ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة ‎variable light chain‏ ‎(LCDR1) complementarity determining region 1 5‏ يتم اختيارها من المجموعة المكونة من: (1) منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث تشتمل على المتوالية رقم: 54؛ منطقة تحديد
التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 47؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة
السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 16؛
)2( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم:؛ 27؛ منطقة تحديد التمامية
2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 59؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 57؛
)3( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم:؛: 20؛ منطقة تحديد التمامية
2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 47؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة
تشتمل على المتوالية رقم: 16؛
)4( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم:؛: 20؛ منطقة تحديد التمامية
0 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 18؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 16؛ و
)5( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم:؛ 27؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على المتوالية رقم: 25؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 23.
5 في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساما مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد ‎us call‏ ترتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد على توليفة من منطقة تحديد التمامية 3 ‎ALE spite‏ السلسلة» منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة و منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة و منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة طبقاً
0 للنماذج الموصوفة أدناه. في أحد النماذج؛ يتم في الوثيقة الحالية توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 ويشتمل على توليفة متواليات منطقة تحديد التمامية ‎(CDR) complementarity determining region‏ لنطاق ‎patie‏ ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد
5 التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 36؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 34؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث
يشتمل على المتوالية رقم: 54؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 47؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 16. في أحد النماذج؛ يتم في الوثيقة الحالية توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 ويشتمل على توليفة متواليات منطقة تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎Cus‏ ‏يشتمل على المتوالية رقم: 43؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 41؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎Gua‏ يشتمل على المتوالية رقم: 9؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم؛: 27؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 59؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة 0 حيث يشتمل على المتوالية رقم: 57. في أحد النماذج؛ يتم في الوثيقة الحالية توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 ويشتمل على توليفة متواليات منطقة تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث يشتمل على المتوالية 5 رقم: 4؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎Cua‏ يشتمل على المتوالية رقم: 2؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 20؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 47؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 16. في أحد النماذج؛ يتم في الوثيقة الحالية توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط 0 بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 ويشتمل على توليفة متواليات منطقة تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 4؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 2؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 20؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة 5 خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 18؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 16.
في أحد النماذج؛ يتم في الوثيقة الحالية توفير جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يرتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 ويشتمل على توليفة متواليات منطقة تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 13؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 11؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 9؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 27؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 25؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 23. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضدء حيث ترتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد تشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة يتم اختيارها مما يلي: (1) نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 9 أو 31 )2 صورة ألفة ‎affinity variant‏ أو صورة سلالة جرثومية ‎germlined variant‏ بشرية من نطاق متغير 5 ثيل السلسلة حيث تشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 29 أو 31؛ أو (3) نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية حمض أميني بها على الأقل 0 على الأقل 785( على الأقل 790 على الأقل 795( على الأقل 797 على الأقل 798 على ‎JAY)‏ 799 كنسبة تطابق مع متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 29 أو 31. بديلاً عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد قد تشتمل على نطاق 0 متغير خفيف السلسلة يتم اختيارها مما يلي: (1) نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 0 أو 62 (2) صورة ألفة أو صورة سلالة جرثومية بشرية من نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث تشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 30 32 أو 62؛ أو 5 (3) نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية حمض أميني بها على الأقل 0 على الأقل 785( على الأقل 790 على الأقل 795( على الأقل 797 على الأقل 798 على
الأقل 799 كنسبة تطابق مع متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 30 32 أو 62. في النماذج حيث يتم تعريف نطاقات الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية ‎reference sequence‏ قد يحتفظ النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة بمتواليات منطقة تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية
بحيث يكون التباين موجوداً فقط داخل المناطق الإطارية ‎.(FRs) framework regions‏ في نماذج معينة؛ قد تشمل الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع نطاق ثابت ‎Jai‏ السلسلة 1 ‎heavy‏ ‎chain constant domain 1‏ (111©)؛ المنطقة المفصلية ‎hinge region‏ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 ‎«(CH2) heavy chain constant domain 2‏ ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 ‎heavy chain constant‏ ‎(CH3) domain 3‏ جسم مضاد بشري ‎human antibody‏ بصفة خاصة الجلوبيولين المناعي جاما1
‎immunoglobulin Gammal 0‏ (1801)» الجلوبيولين المتاعي جاما2 ‎immunoglobulin Gamma2‏ ‎(1gG2)‏ الجلوبيولين المناعي جاما3 ‎immunoglobulin Gamma3‏ (1803) أو الجلوبيولين المناعي جاما4 4منتصة6 ‎(IgG4) immunoglobulin‏ بشري . وفيما يلي وصف لأجسام مضادة وفقاً للاختراع الحالي مفضلة بشكل خاص.
‏2009 وأجسام مضادة متعلقة به
‏5 في نماذج معينة؛ يتم توفير جسم مضاد معزول؛ أو شظية ‎die‏ رابطة ‎call algal‏ حيث يريط تحديداً مستقبل إنترلوكين-22» حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظية رابطة لمولد ضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة ثقيلة السلسلة هي المتوالية رقم: ‎[VGFSGTYYSESI6‏ أو صورة متوالية منها؛
‏0 متوالية منطقة تحديد ‎Adal‏ 2 المتغيرة ثقيلة السلسلة هي المتوالية رقم: ‎[STYNDASNTAYSDSVKGI36‏ أو صورة متوالية منها؛ ومتوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة ‎ali‏ السلسلة هي المتوالية رقم: 34 ‎[SYDMN]‏ أو صورة متوالية منهاء ‎Cus‏ تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل ‎(Jha‏ استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة.
‏5 قد يشتمل الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد كذلك على نطاق متغير خفيف ‎AL‏ حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة خفيفة السلسلة هي المتوالية رقم: 54 ‎[QSGSSSSNAV]‏ أو
صورة متوالية منها؛ متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة خفيفة السلسلة هي المتوالية رقم: ‎[GQNNRPSH7‏ أو صورة متوالية منها؛ و متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة هي المتوالية رقم: 16 ‎[QGGYYAH]‏ أو صورة متوالية منهاء حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المثال؛ استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ألفة) في المتوالية المذكورة. في نماذج معينة؛ يتم توفير جسم مضاد معزول؛ أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يربط تحديداً مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظية رابطة لمولد ضد على نطاق 0 متغير ثقيل السلسلة حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[VGFSGTYYSES]6‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[STYNDASNTAYSDSVKG]36‏ ‏5 متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 34 ‎¢[SYDMN]‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 54 ‎{[QSGSSSSNAV]‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎{{GQNNRPS]47 0‏ و متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 16 ‎.[OGGYYAH]‏ ‏قد تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 63 واختيارياً نطاق متغير خفيف السلسلة حيث 5 يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 64. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساما مضادة وحيدة النسيلة أو شظايا منها رابطة ‎coal) algal‏ حيث تشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة و
نطاق متغير خفيف السلسلة؛ حيث يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة على متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق ‎lige‏ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 63 و/ أو حيث يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة على نطاق متغير خفيف السلسلة به على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 64.في النماذج حيث يتم تعريف نطاقات الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ قد يحتفظ النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة بمتواليات 0 منطقة تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط داخل المناطق الإطارية. في نماذج ‎Cus dies‏ تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا ريط مولد الضد على نطاقات متغيرة ثقيلة السلسلة و/ أو نطاقات متغيرة خفيفة السلسلة تُعرف على أنها تحتوي على نسبة مئوية معينة كنسبة تطابق مع المتواليات أرقام: 63 و 64؛ على الترتيب سوف تحتوي على منطقة تحديد التمامية التالية: 5 متوالية منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ‎ALE‏ السلسة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[VGFSGTYYSES]6‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[STYNDASNTAYSDSVKG]36‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 34 ‎¢(SYDMN] 0‏ متوالية منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 54 ‎{[QSGSSSSNAV]‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 07 !؛ و 5 متوالية منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 16 ‎.[OGGYYAH]‏
قد تشتمل الأجسام المضادة التي ترتبط تحديداً بمستقبل إنترلوكين-22 على سلسلة ثقيلة واحدة على الأقل لجلوبيولين ‎elie‏ كامل الطول و/ أو سلسلة خفيفة لامدا أو ‎LIS‏ تامة الطول واحدة على الأقل . في نماذج ‎dies‏ تشتمل الأجسام المضادة على سلسلة ثقيلة تشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 67 وسلسلة خفيفة تشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 68. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة وحيدة النسيلة تشتمل على سلسلة ثقيلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 67 و/ أو سلسلة خفيفة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة 0 تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 68. في النماذج حيث يتم تعريف سلاسل الأجسام المضادة حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ فإن السلسلة الثقيلة و/ أو الخفيفة قد تحتجز متواليات منطقة تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط خارج مناطق منطقة تحديد التمامية. 5 ر أجسام مضادة متعلقة به 5 في نماذج معينة؛ يتم توفير جسم مضاد معزول؛ أو شظية ‎die‏ رابطة ‎call algal‏ حيث يريط تحديداً مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظية رابطة لمولد ضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة ثقيلة السلسلة هي المتوالية رقم: ‎[PPGPFKAHYNGAKY43‏ أو صورة متوالية منها؛ متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة ثقيلة السلسلة هي المتوالية رقم: 0111150011777710517160[41] أو صورة متوالية منها؛ و متوالية منطقة 0 تحديد التمامية 1 المتغيرة ثقيلة السلسلة هي المتوالية رقم: 57771845[9] أو صورة متوالية منهاء و حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المثال؛ استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ألفة) في المتوالية المذكورة. قد يشتمل الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد كذلك على نطاق متغير خفيف السلسلة حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة خفيفة السلسلة هي المتوالية رقم: ‎[ASYRLYADYVI27‏ أو 5 صورة متوالية منها؛ متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة خفيفة السلسلة هي المتوالية رقم: 59 ‎[EVNKRSS]‏ أو صورة متوالية منها؛ و متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة هي
المتوالية رقم: 57 ‎[TGTSSDIGSYNYVS]‏ أو صورة متوالية منهاء و حيث تشتمل صورة المتوالية على واحد أو اثنين أو ثلاثة من استبدالات الحمض الأميني (على سبيل المثال؛ استبدالات محافظة؛ استبدالات متوافقة مع البشر أو صور ‎(Al‏ في المتوالية المذكورة. في نماذج معينة؛ يتم توفير جسم مضاد معزول؛ أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضدء حيث يربط تحديداً مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظية رابطة لمولد ضد على ‎Gai‏ متغير ثقيل السلسلة حيث: متوالية منطقة تحديد التمامية 3 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ¢{[PPGPFKAHYNGAKY]43 متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{{[GIHISGGITYYTDSVKGH4 1 10‏ متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 19 متوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 77707 قهم]؛ ‏5 متوالية منطقة تحديد التمامية 2 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 59
[21710110855]؛ ومتوالية منطقة تحديد التمامية 1 المتغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 57 ‎[TGTSSDIGSYNYVS]‏ ‏قد تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 65 واختيارياً نطاق متغير خفيف السلسلة حيث ‏20 يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 66. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة وحيدة النسيلة أو شظايا منها رابطة ‎coal) algal‏ حيث تشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة؛ حيث يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة على متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق ‎lige‏ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية ‏5 الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 65 و/ أو ‎Cus‏ يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة على نطاق متغير خفيف السلسلة به على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790
نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 66. في النماذج حيث يتم تعريف نطاقات الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ قد يحتفظ النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة بمتواليات منطقة تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط داخل المناطق الإطارية. في نماذج ‎Cus dies‏ تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا ريط مولد الضد على نطاقات متغيرة ثقيلة السلسلة و/ أو نطاقات متغيرة خفيفة السلسلة تُعرف على أنها تحتوي على نسبة مئوية معينة كنسبة تطابق مع المتواليات أرقام: 65 و66؛ على الترتيب سوف تحتوي على منطقة تحديد التمامية التالية: 0 متوالية منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ‎ALE‏ السلسة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[PPGPFKAHYNGAKY]43‏ ‏متوالية منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: ‎¢{[GIHISGGITYYTDSVKG} 1‏ متوالية منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 19 متوالية منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 77707 قهم]؛ متوالية منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من المتوالية رقم: 59 ‎([EVNKRSS]‏ ومتوالية منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة تشتمل على أو تتكون من 0 المتوالية رقم: 57 ‎[TGTSSDIGSYNYVS]‏ ‏قد تشتمل الأجسام المضادة التي ترتبط تحديداً بمستقبل إنترلوكين-22 على سلسلة ثقيلة واحدة على الأقل لجلوبيولين ‎elie‏ كامل الطول و/ أو سلسلة خفيفة لامدا أو ‎LIS‏ تامة الطول واحدة على الأقل . في نماذج ‎dies‏ تشتمل الأجسام المضادة على سلسلة ثقيلة تشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 69 وسلسلة خفيفة تشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 70. في ‎gia‏ ‏5 معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة وحيدة النسيلة تشتمل على سلسلة ثقيلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛
أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 69 و/ أو سلسلة خفيفة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 70.
في النماذج حيث سلاسل الأجسام المضادة يتم تعريفها حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ فإن السلسلة الثقيلة و/ أو الخفيفة قد تحتجز متواليات منطقة تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط خارج مناطق منطقة تحديد التمامية. عند تحديد أن أجساماً مضادة؛ أو مناطق ربط مولد الضد؛ على أنها تشتمل على توليفة من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو سلسلة ثقيلة؛ التي تحددها الإشارة إلى متوالية حمض أميني معين؛ و نطاق متغير
0 خفيف السلسلة أو سلسلة خفيفة؛ أيضاً تحددها الإشارة إلى متوالية حمض أميني معين؛ فإنه لكل نطاق متغير ثقيل السلسلة / نطاق متغير خفيف السلسلة معين أو توليفة من السلسة ‎[ALN‏ الخفيفة المذكورة (مالم ‎SY‏ خلاف ذلك) يمكن اعتبار أن ذلك التعريف يشمل أجساماً مضادة؛ أو مناطق ربط مولد ضد؛ مكونة من توليفة لنطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة / سلسلة ثقيلة بها على الأقل 785 على الأقل 0. على الأقل 795 على الأقل 797 أو على الأقل 799 كنسبة تطابق متوالية مع متوالية حمض 5 أميني لنطاق متغير ثقيل السلسلة / السلسلة الثقيلة المذكور ونطاق متغير خفيف السلسلة/ سلسلة خفيفة به على الأقل 775 على الأقل 780؛ على الأقل 785 على الأقل 790؛ على الأقل 795 على الأقل 797؛ أو على الأقل 799 كنسبة تطابق متوالية مع متوالية الحمض الأميني لنطاق متغير خفيف السلسلة/ السلسلة الخفيفة المذكورة. في كل ‎Alla‏ فإن النطاقات/ السلاسل التي يتم تعريفها بالنسبة المئوية لتطابق متوالية مع متواليات حمض أميني للنطاق/ السلسلة المذكورة قد تحتفظ بمتواليات منطقة تحديد 0 التمامية مطابقة لتلك الموجودة في النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة/ نطاق متغير خفيف السلسلة المذكور أو متواليات الحمض الأميني ثقيلة/ خفيفة السلسلة؛ بينما تتميز بتباين متوالية الحمض الأميني داخل المناطق الإطارية أو مناطق أخرى خارج منطقة تحديد التمامية. مالم يذكر خلاف ذلك في الطلب الحالي؛ يمكن تحديد النسبة المئوية لتطابق متوالية بين اثنين من متواليات حمض أميني عن ‎Goh‏ مقارنة هاتين المتواليتين المحاذيتين بطريقة مثالية وحيث أن متوالية 5 الحمض الأميني المراد مقارنتها قد تشتمل على إضافات أو حذوفات بالنسبة إلى المتوالية المرجعية من أجل المحاذاة ‎Jal‏ بين هاتين المتواليتين. ويتم حساب النسبة المئوية للتطابق بتحديد عدد المواضع
المتطابقة التي تكون فيها الوحدة البنائية للحمض الأميني متطابقة بين المتواليتين» وبقسمة هذا العدد من المواضع المتطابقة على إجمالي عدد المواضع في نافذة المقارنة وضرب الناتج في 0 للحصول على النسبة المثوية للتطابق بين هاتين المتواليتين. على سبيل المثال؛ من الممكن استخدام برنامج ‎(BLAST‏ ‎"Blast 2 sequences - a new tool for comparing protein «"BLAST 2 sequences” (Tatusova et al‏ ‎Microbiol Lett. 174:247-250)<and nucleotide sequences” 5‏ 78115 _ المتوفر_ على الموقع ‎Cua chittp://www.nebi.nlm.nih.gov/ gorf/bl2.html‏ تكون المتغيرات المستخدمة هذ تلك الافتراضية ‎diay)‏ خاصة للمتغيرات "إعاقة الفجوة ‎se lal‏ 5؛ و" ‎Ale]‏ فجوة الامتداد": 2؛ حيث يكون القالب المختار؛ على سبيل المثال هو القالب "62 ‎"BLOSUM‏ الذي يقترحه البرنامج) ؛ حيث يتم حساب النسبة ‎dy gill‏ للتطابق بين المتواليتين مباشرة عن طريق البرنامج. 0 .قد تتميز كل الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد التي توفرها الوثيقة الحالية بواحدة أو أية توليفة؛ من الخواص / السمات التالية: -قد يرتبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد بقمة لاصقة ‎epitope‏ داخل البروتين مستقبل إنترلوكين 22-7 البشري الذي لا يحتوي على تيروسين 60؛ -قد يرتبط الجسم المضاد أو شظية ‎da)‏ لمولد ضد بقمة لاصقة موضوعة جزثياً على الأقل في النطاق 02 للبروتين مستقبل إنترلوكين-22 البشري؛ حيث يكون النطاق 172 عبارة عن الوحدات البنائية للحمض الأميني من 125 إلى 288 للمتوالية رقم: 71؛ -قد يرتبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد بمستقبل إنترلوكين-22 بشري بآلفة عالية؛ -قد يعيق الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد ارتباط إنترلوكين 22 بمستقبل إنترلوكين -22؛ -قد يثبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل 0 إنترلوكين-22؛ -قد يثبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين -22؛ -قد يثبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين -22 وتنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22؛ 5 .-قد لا يتفاعل الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد تفاعلاً تبادلياً مع مستقبل إنترلوكين -22 الفأري. وبفضل أن تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد التي توفرها
الوثيقة الحالية باثنين أو أكثر من الخواص/ السمات التالية: -يرتبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد بقمة لاصقة داخل بروتين مستقبل إنترلوكين -22 بشري لا يحتوي على تيروسين 60؛ -يرتبط الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد بمستقبل إنترلوكين-22 بشري بألفة عالية؛ -يتميز الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد بتنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين - 2 و تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين -22. قد تكون الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22؛ أو شظايا منها رابطة لمولد الضد؛ التي توفرها الوثيقة الحالية أجساما مضادة خيمرية. في نماذج معينة؛ تحتوي الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد على المنطقة المفصلية؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 و/ أو نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 للجلوبيولين 0 المناعي جاما ‎(IgG) immunoglobulin gamma‏ بشري. في نماذج معينة؛ تتميز الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة ‎algal‏ الضد بتشابه عالي للجلوبيولين المناعي ‎Lila‏ بشري؛ ويفضل الجلوبيولين المناعي جاما1 بشري؛ حيث أن ‎lal‏ البشري العالي” هو كما تم تعريفه في مكان آخر من الوثيقة الحالية. في نماذج معينة؛ تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد على نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة حيث يكون النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة أو واحدة أو ‎JST‏ من مناطق تحديد التمامية منها مستمدة من حيوان من عائلة الجمليات أي مستمدة من الجمل؛ وبفضل أن يكون حيوان الجمليات هو اللاما. في سمات ‎(gal‏ يوفر الاختراع ‎Load‏ جزيئات البولي نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ التي تشفر الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد السابق ذكرهاء إضافة إلى نواقل التعبير ‎expression vectors‏ التي تشتمل على البولي نيوكليوتيدات؛ الخلايا العائلة ‎host cells‏ التي تحتوي على النواقل وطرق التعبير عن/ 0 إنتاج الأجسام المضادة الناتج عن عودة الارتباط الموصوفة في الوثيقة الحالية. في سمة ‎coal‏ يوفر الاختراع تركيبة صيدلانية تشتمل على أي من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية؛ ومادة ناقلة ‎carrier‏ ‏مقبولة صيدلانياً أو سواغ ‎.excipient‏ ‏تتعلق سمة أخرى خاصة بالاختراع بطرق علاج طبي باستخدام الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين - 5 22أو ‎Was‏ منها رابطة لمولد الضد السابق ذكرهاء وبخاصة في الوقاية من و/ أو معالجة حالات ‎Jie‏ ‏الصدفية؛ التهاب الجلد الصدفي والتهاب الجلد التأتبي.
سوف تتضح هذه النماذج وغيرها من نماذج الاختراع عند النظر إليها مع الوصف التالي والرسومات المصاحبة. إلا أنه من الواجب الوضع في الاعتبار أن الوصف التالي؛ رغم أنه يدل على العديد من نماذج الاختراع والعديد من تفاصيله؛ إلا أنه قد ورد على سبيل المثال لا الحصر. ومن الممكن إجراء العديد من الاستبدالات؛ و/ أو التعديلات؛ و/ أو الإضافات»؛ و/ أو ‎sale)‏ الترتيب داخل نطاق الاختراع الحالي دون الابتعاد عن جوهره؛ وأن الاختراع يشمل كل تلك الاستبدالات؛ و/ أو التعديلات؛ و/ أو الإضافات؛ و/ أو إعادة الترتيب. شرح مختصر للرسومات الشكل 1 يوضح مختلف معقدات المستقبل التي تتوسط ‎Jul‏ الإشارات عن ‎Gob‏ السيتوكينات إنترلوكين 22 إنترلوكين 20 وإنترلوكين 24. ويكون مستقبل إنترلوكين-22 قادراً على تكوين معقد ثنائي 0 الوحدات غير متجانس ‎heterodimeric complex‏ مع شريكين مستقبلين» مستقبل إنترلوكين -10-بيتا (أو مستقبل إنترلوكين-2-10) ومستقبل إنترلوكين-20-بيتا (أو مستقبل إنترلوكين-2-20)؛ وتنشيط هذه المعقدات المختلفة عن طريق إرسال الإشارات المحفزة لريط جزيء ‎Jal‏ عبر مسارات بعدية داخل الخلية ‎.intracellular downstream pathways‏ الشكل 2 يوضح متوالية حمض أميني كاملة الطول من مستقبل إنترلوكين-22 البشري(المتوالية رقم: 5 71( الشكل 3 يوضح متوالية نيوكليوتيد كاملة الطول تشفر مستقبل إنترلوكين-22 بشري (المتوالية رقم: 72). الشكل 4 يوضح تثبيط إنترلوكين 22 والإشارات التي يتوسطها إنترلوكين 20 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 في تجارب تكاثر معتمدة على الخلية. (أ) يتم عرض تأثيرات مستقبل إنترلوكين-22 جسم مضاد أحادي النسيلة ‎(mAbs) monoclonal antibodies‏ على تكاثر سلالة الخلايا بي دبليو ‎“BW‏ ‏0 مستقبل إنترلوكين-22 البشري. تعبر الخلايا ‎Jia BW‏ إنترلوكين-22 البشري بثبات عن مستقبل إنترلوكين-22 البشري وبتم تثبيط/ إيقاف النمو استجابة لجزيء الريط إنترلوكين 22. وتخفف الأجسام المضادة القادرة على إعاقة التفاعل بين إنترلوكين 22 ومستقبل إنترلوكين-22 البشري الذي يتوسط ربط مستقبل جزيء الريط ‎ligand-receptor binding‏ (ب) تظهر تأثيرات مستقبل إنترلوكين -22 جسم مضاد أحادي النسيلة على تكاثر سلالة ‎—Baf3 WAN‏ مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 5 اب ‎interleukin20 receptor b‏ (ط11208). وتعبر الخلايا ‎—Baf3‏ مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب بثبات عن مكونات معقد المستقبل مستقبل إنترلوكين-22/ مستقبل انترلوكين
0 ب بحيث تتكاثر ‎WAN‏ في وجود إنترلوكين 20. تثبط الأجسام المضادة القادرة على إعاقة التفاعل بين إنترلوكين 20 وهذا المعقد المستقبل التكاثر الحادث عن ‎Gob‏ ريط جزيء الريط. الشكل 5 يوضح محاذاة نطاق مستقبل إنترلوكين-22 خارج الخلية من العديد من الأنواع. (أ) يوضح متواليات علامات متوالية تم التعبير عنها ‎(EST) expressed sequence tags‏ الجزئية المتاحة من بنك الجينات ‎¢Genbank‏ (ب) يوضح متواليات تم تحديدها بعد انتساخ مستقبل إنترلوكين-22 من قرود الرياح ‎cynomolgus‏ والقرد الهندي ريسوس ‎rhesus‏ ومن مكتبة الحمض النووي دي أوكسي رببوزي المكمل ‎(cDNA) complement deoxyribonucleic acid‏ لقرد الرياح. الشكل 6 يوضح تتائج تجارب مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإتزيم ‎enzyme linked‏ ‎(ELISA) immunosorbent assay‏ التنافسية التي تم تنفيذها لتوضيح خربطة القمم اللاصقة ل مستقبل 0 إنترلوكين-22 جسم مضاد أحادي النسيلة. تم تحديد عدد متنوع من القمم اللاصقة للأجسام المضادة من عائلات من نطاق متغير ثقيل السلسلة؛ 8-1؛ 10 11( 19 و22.تم تجميع القمم اللاصقة طبقاً لما إذا كانت الأجسام المضادة (1) تعيق ارتباط إنترلوكين 22 في الكائن الحي وتقوم بمعادلة إشارة إنترلوكين 2 في اختبار يعتمد على الخلية ‎cell-based assay‏ (الجزء التربيعي الأيسر السفلي)؛ (2) إعاقة ارتباط إنترلوكين 22 في المعمل ولكن لا يكون لها نشاط متعادل في اختبار يعتمد على الخلية ‎gall)‏ التربيعي 5 الأيمن العلوي)؛ أو (3) لا تعيق ارتباط إنترلوكين 22 في المعمل ولكنها لا تشتمل على نشاط تعادلي في اختبار يعتمد على الخلية ‎all‏ التربيعي الأيمن السفلي). الشكل 7 يوضح البنية البلورية لمستقبل إنترلوكين-22 في معقد مع إنترلوكين 22. (أ) تسهم نطاقات ‎SDI‏ 02من مستقبل إنترلوكين-22 في الوحدات البنائية بالنسبة للواجهة الخاصة بجزيء الربط إنترلوكين 2ب) تكون 2760 في نطاق ‎She DI‏ عن وحدة بنائية من مستقبل إنترلوكين-22 هامة تسهم في 0 التفاعل مع موضع ‎Al‏ من جزيء الربط إنترلوكين 22. الشكل 8 يوضح تثبيط الإشارات التي يتوسطها إنترلوكين 20 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 في تجرية تكاثر تعتمد على الخلية. تم اختبار العديد من مستقبل إنترلوكين-22 جسم مضاد أحادي النسيلة لمعرفة قدرتها على تثبيط تكاثر إنترلوكين 20 المستحث بخلايا ‎—Baf3‏ مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب. 5 الشكل 9 يوضح تثبيط إنترلوكين 22 والإشارات التي يتوسطها إنترلوكين 20 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 في الاختبارات المعتمدة على الخلية. (أ) تم توضيح تأثير مستقبل إنترلوكين-22 جسم
مضاد أحادي النسيلة على تكاثر سلالة الخلية ‎Jie BW‏ إنترلوكين-22 البشري. تقوم خلايا ‎“BW‏ ‏مستقبل إنترلوكين-22 البشري بالتعبير الثابت عن مستقبل إنترلوكين-22 البشري ويتم تثبيط النمو /إيقافه في استجابة للمركب جزيء الربط إنترلوكين 22.إن الأجسام المضادة القادرة على إعاقة التفاعل بين إنترلوكين 22 ومستقبل إنترلوكين-22 البشري تعمل على تخفيف تثبيط النمو الذي يتوسطه ارتباط جزيء الريط - المستقبل.لأ) تم توضيح تأثير مستقبل إنترلوكين-22 جسم مضاد أحادي النسيلة على تكاثر سلالة الخلية ‎Baf3‏ مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب. تقوم الخلايا 3 مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب بالتعبير بصورة ثابتة عن مكونات من معقد مستقبل إنترلوكين-22 / مستقبل انترلوكين 20 ب بحيث أن الخلايا تتكاثر في غياب إنترلوكين 0. إن الأجسام المضادة القادرة على إعاقة التفاعل بين إنترلوكين 20 ومعقد المستقبل الخاص به تعمل 0 على تثبيط التكاثر المستحث ‎dary‏ جزيء الريط. الشكل 10 يوضح بشكل تخطيطي تتائج تجارب تخطيط القمم اللاصقة للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين -22للسلالة الجرثومية ‎230C9‏ و22305. وتكون ‎"Zymo" NB‏ مكافئة ل 157-346-280. الشكل 11 يوضح التفاعلية التبادلية لأجسام مضادة من سلالة جرثومية وذلك لمستقبل إنترلوكين-22 البشري ومن قرد الرياح كما تم تحديد ذلك من خلال تفاعل عد ‎WA‏ التحفق ‎Flow cytometry‏ ‎(FACS) 5‏ يتفاعل الجسم المضاد ل23009 بشكل تفاعلي مع مستقبل إنترلوكين-22 بشري ومستقبل إنترلوكين-22 ‎eyno‏ (اللوحات على الجانب الأيمن) حيث إن الجسم المضاد ل22305 يرتبط مع مستقبل إنترلوكين-22 البشري ولكنه لا يتفاعل بشكل تشابكي مع مستقبل إنترلوكين-22 من قرد الرياح (اللوحات على الجانب الأيمن). الشكل 12 يوضح بيانات حركيات دوائية ‎pharmacokinetic data‏ لمستقبل إتترلوكين -22 الجسم المضاد 0 23009. تم حقن قرود الرياح عن طريق الوريد بجرعة منفردة 10 مجم/كجم من الجسم المضاد. تم أخذ العينات عند نقاط زمنية مختلفة وتم اختبارها لتركيز ‎LDL‏ في الجسم المضاد بواسطة مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم. تم اكتشاف أن الجسم المضاد لذ 23009 له فترة نصف عمر حوالي 19.4 يوم. الشكل 13 يوضح بيانات حركيات دوائية للجسم المضاد مستقبل إنترلوكينذ-22 من 23009 عند جرعات ‎Aide 5‏ وعند الجرعات الأعلى (> 10 مجم/كجم) عندما تكون قدرة استعداد العقار الذي يتوسطه المستهدف
‎(TMDD) target mediated drug disposition‏ قد تم تشبعهاء فإن ‎ad‏ الخلوص تقترب من الخلوص ‎(Cl) clearance‏ غير المحدد بواسطة ‎des‏ شبكية بطانية ‎(RES) Reticuloendothelial System‏ ب- خلوص 23009-2970 في 35 الرياح. إن قيمة الخلوص الإجمالية تمثل مجموع 1) استعداد العقار الذي يتوسطه المستهدف التي هي غير خطية والقابلة للتشبع و2) الخلوص غير الخطي والذي يكون خطياً ويرجع إلى جملة شبكية بطانية. يكون لنصف عمر البلازما علاقة عكسية مع الخلوص مما يؤدي لفترة نصف ‎jee‏ أطول عند الجرعات العالية وفترة نصف عمر أقصر عند الجرعات المنخفضة نتيجة الخلوص الذي يتوسطه المستهدف. يوضح الشكل 14 تأثر الحركيات الدوائية من الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 من 23009.تم تعريض قرد الرياح ل 2300©9عند جرعات مختلفة وتم تقييم التأثيرات الخاصة ‎skin section all gia‏ 0 الذي تمت معالجته بإيميكيومود ‎imiquimod‏ (110) وجزء الجلد الطبيعي من القرود. تم اكتشاف الجرعات المتزايدة من الجسم المضاد ل 23009 على سُمك البشرة (أ) وتقليل التركيز الخاص بالنويات ‎nuclei‏ لموجبة ل16:67 (ب) في ‎gj‏ الجلد الذي تمت معالجته بإيميكيومود. الشكل 15 يوضح تأثير الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 من 9© ‎(ARGX-112)‏ على مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول ‎(mRNA) massanger ribonucleic acid‏ ل21.02 .التي يتم تنظيمها 5 بإنترلوكين 22-في خزعات ثقبية من الجلد. تم إعطاء قرود الرباح جرعات منفردة عن طريق التسريب ‎infusions‏ في الوريد ‎vein‏ للجسم المضاد ل23009 عند جرعات مختلفة:1 مجم/كجم؛ 5مجم/كجم؛ و30 مجم/كجم (3 حيوانات لكل جرعة). ‎ash‏ إنترلوكين 22 البشري ناتج عودة الارتباط بتقليل مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول ‎FLG2Y‏ في الجلد حيث أن هذا التأثير يتم عكسه بواسطة الجسم المضاد ل 23009. يوضح المحور ‎y‏ التعبير النسبي ل71.02 بالمقارنة مع الجين المرجعي. تم توضيح 0 المقارنات الإحصائية بين المجموعات بواسطة الخطوط عند الجزء العلوي من المخطط مع فواصل الثقة ‎confidence intervals‏ كما يلي: * ‎>P‏ 0.05؛ ** ‎>p *** «0.01>p‏ 0.001.إن النسبة المئوية الموضحة (764.760؛ 760؛ على الترتيب)؛توضح النسبة المئوية للتثبيط الخاص بالعينة. الشكل 16 يوضح تأثير الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 من ‎(ARGX-112)230C9‏ على تعبير ‎DEFB4 (pall‏ الذي ينظم إنترلوكين 22 في غرسات جلدية ‎skin explants‏ خارج جسم الكائن الحي. 5 تمت معالجة الغرسات الجلدية البطنية ‎Abdominal skin explants‏ باستخدام تركيزات متزايدة من الجسم المضاد ل23009 قبل الحث باستخدام 20 نانو جرام/مل من إنترلوكين 22 ‎rh‏ كان الجسم المضاد
ل23009 قادراً على عكس الزيادة التي يتوسطها إنترلوكين 22- في مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول ل01734 في طريقة تعتمد على الجرعة. يوضح المحور « التعبير النسبي ل ‎DEFB4‏ بالمقارنة مع الجين المرجعي. تشير 1100 إلى مستوي منخفض من الحساب الكمي. الشكل 17 يوضح تأثير الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 من ‎(ARGX-112)230C9‏ على تعبير الجين ‎FLG25 LOR‏ الذي ينظم إنترلوكين 22 في غرسات جلدية خارج جسم الكائن الحي من قرد الرياح. تمت معالجة خزعات من الجلد باستخدام تركيزات متزايدة من الجسم المضاد ل23009 قبل الحث باستخدام 20 نانو جرام/مل من إنترلوكين 22 ربسوبسي.كان الجسم المضاد ل23009 قادراً على عكس النقص الذي يتوسطه إنترلوكين 22- في مستويات الحمض النووي الريبوزي الرسول ‎FLG2Y‏ من () مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول ‎LOR‏ (ب) في طريقة تعتمد على الجرعة. توضح المحاور ‎y‏ ‏0 التتعبير النسبي ل11.62 5 ‎LOR‏ بالمقارنة مع الجين المرجعي. يوضح الشكل 18 تأثير الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 من ‎(ARGX-112)230C9‏ على الخلايا الكيراتينية ‎Keratinocytes‏ البشرية الأساسية. تمت معالجة الخلايا الكيراتينية بصورة مسبقة باستخدام الجسم المضاد ل 23009 ويعد ذلك تم ‎Gall‏ باستخدام خليط من إنترلوكين-4 ‎(IL-4) interleukin-4‏ وانترلوكين - 13 ‎(TL-13) interleukin-13‏ و إنترلوكين 22 وإنترفيرون -جاما ‎IFN-) interferon-gamma‏ 5 ,). تمت معالجة خليط عينة المقارنة باستخدام خليط من إنترلوكين -4 وانترلوكين -13 وإنترفيرون-جاما. أوضح الجسم المضاد ل23009 تثبيط يعتمد على الجرعة ‎dose-dependent inhibition‏ من إفراز المركب الترابطي كيموكين (باعث سي-سي) 2 2 ‎chemokine (C-C motif) ligand‏ (02)). الوصف التفصيلي: أ-التعريفات 0 "لجسم المضاد” أو "الجلويولين المناعي ‎Immunoglobulin‏ وكما تم استخدامه هنا يشتمل المصطلح "جلويولين مناعي" على بولي ببتيد به توليفة من اثنين من السلاسل الثقيلة واثنين من السلاسل الخفيفة سواء أكانت مشتملة أو غير مشتملة على أي تفاعل مناعي ‎immunoreactivity‏ 63( صلة. يشير المصطلح "أجسام مضادة” إلى تلك التجميعات التي لها نشاط تفاعلي مناعي نوعي معروف بصورة كبيرة في مضادة مولد الضد محل الاهتمام (على سبيل ‎(Jal‏ مستقبل سيتوكين مستقبل إنترلوكين-22).تم 5 استخدام المصطلح “أجسام مضادة مستقبل إنترلوكين-22" هنا لكي تشير إلى الأجسام المضادة التي تعرض خاصية مناعية بالنسبة لبروتين مستقبل إنترلوكين-22 بما في ذلك مستقبل إنترلوكين -22وفي
بعض الحالات الأنواع المتجانسة منها. تشتمل الأجسام المضادة والجلوبولينات المناعية على السلاسل الثقيلة والخفيفة مع أو بدون رابطة تساهمية بداخل الخلية ‎interchain covalent linkage‏ بينها. يتم الفهم الجيد لبنيات الجلويولين المناعي الأساسية في أنظمة الفقاريات ‎vertebrate systems‏ ويشتمل المصطلح العام "جلوبولين مناعي" على خمسة فئات متمايزة من الجسم المضاد والتي يمكن أن يتم تمييزها بصورة كيميائية حيوية. تكون كل الفئات الخمسة من الأجسام المضادة في مجال الاختراع الحالي. سوف يتم توجيه المناقشة التالية بصفة عامة إلى فئة الجلوبيولين المناعي جاما من جزيئات الجلوبولين المناعي. وفيما يتعلق بالجلوبيولين المناعي جاماء تشتمل الجلوبولينات المناعية على اثنين من سلسال البولي ببتيد الخفيفة المتمايزة من الوزن الجزيئي الذي يكون تقريباً 23000 دالتون واثنين من السلاسل الثقيلة المتمايزة من والتي لها وزن جزيئي من 70000-53000.يتم ربط أريعة سلاسل بواسطة 0 روابط ثنائية الكبربتيد ‎disulfide bonds‏ في التصميم ”7” حيث إن قوس السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة يبدا عند بداية ‎"Y"‏ وبستمر خلال المنطقة المتغيرة ‎.variable region‏ تم تصنيف السلاسل الخفيفة من الجسم المضاد إما في شكل ‎kappa LIS‏ أو لامدا ‎lambda‏ (©؛ 7).يمكن ‎of‏ يتم ربط كل فئة لسلسلة قيقة مع إما سلسلة كابا أو سلسلة لامدا خفيفة. وبصفة عامة فإن السلاسل الخفيفة والثقيلة من لامدا ترتبط بشكل تساهمي مع بعضها البعض وبتم ريط أجزاء "الذيل من 5 اثنين من السلاسل الثقيلة مع بعضها البعض بواسطة روابط ثنائية الكبريتيد ‎disulfide linkages‏ أو روابط غير تساهمية ‎non-covalent linkages‏ عندما يتم إنتاج الجلويولينات المناعية إما من خلال تقنية الورم الهجين ‎hybridomas‏ أو باستخدام ‎B cells B WAN‏ أو عن طريق المعالجة الجينية للخلايا العائلة. في السلسلة الثقيلة فإن متواليات الحمض الأميني يتم تسييرها من الطرف ‎N-terminus N‏ من الأطراف المتفرعة من التصميم الذي على شكل حرف 7 إلى الطرف © ‎C-terminus‏ عند الجزءِ السفلي 0 .من كل سلسلة. سوف يدرك الماهرون في المجال أن السلاسل الثقيلة يتم تصنيفها في شكل جاما ‎¢gamma‏ وميو ‎emu‏ وألفا ‎delta Gay calpha‏ أو إبسيلون ‎«Seat cu ¢y) epsilon‏ 8( مع بعض الفئات لفرعية بينها (على سبيل المثال» 47-17).إنها طبيعة تللك السلسلة بأن تقوم بتحديد الفئة" من الجسم المضاد_مثل الجلوبيولين المناعي جاماء الجلوبيولين المناعي ميق ‎«(IgM) immunoglobulin Mu‏ الجلوبيولين المناعي ألما ‎((TgA) immunoglobulin alpha‏ الجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin Gh‏ ‎(IgD) Delta 5‏ أو الجلوبيولين المناعي إيبسلون ‎(IgE) immunoglobulin Epsilon‏ على الترتيب. تم وصف الفئات الفرعية من الجلويولينات المناعية (الصور المتماثلة 8©م/100)؛ على سبيل المثال؛
الجلوبيولين المناعي جاما1 والجلوبيولين المناعي جاما2 والجلوبيولين المناعي جاما3 و الجلوبيولين المناعي جاما4 و الجلوبيولين المناعي ألفا 1 بشكل جيد وهي معروفة بأنها تمنح التخصص الوظيفي. تكون النسخ المعدلة لكل من تلك الفئات والصور المتماثلة واضحة بسهولة للشخص ذي المهارة العادية في المجال في ضوء الكشف الحالي ونتيجة ذلك فإن تلك الصور تكون في مجال الاختراع الحالي.
وكما تم توضيحه أعلاه؛ فإن المنطقة المتغيرة من الجسم المضاد تسمح للجسم المضاد بأن يتم التعرف عليه بصورة خاصة ‎alg‏ ربطه بكل محدد بالقمم اللاصقة على مولدات الضد. أي أن نطاق متغير خفيف السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد يندمج لكي يقوم بتشكيل المنطقة المتغيرة ‎Ally‏ تحدد ثلاثة من مواضع ربط مولد الضد الاتجاهية. تقوم بينة الجسم المضاد الرياعية المذكورة بتشكيل موضع ربط مولد الضد عند نهاية كل ذراع من ل7. وبصورة أكثر تحديداً فإن موضع ربط مولد
0 الضد يتم تحديده بواسطة ثلاثة من مناطق تحديد التمامية على كل من سلاسل نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة. 'مستقبل إنترلوكين-22"- كما تم استخدامه؛ عبارة عن المصطلح 'مستقبل إنترلوكين-22" الذي يعني النوع ]لمن مستقبل السيتوكين الذي يتسوط نقل الإشارة من خلال المركبات الترابطية إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 وإنترلوكين 24. يكون مستقبل إنترلوكين-22 قادراً على تشكيل معقدات دايمرية غير 5 متجانسة عند سطح الخلية مع مستقبل إنترلوكين-2-10 ومستقبل إنترلوكين-2-20. يمكن أيضاً أن تتم الإشارة إلى مستقبل إنترلوكين-22 هنا بأنه مستقبل إنترلوكين-22 ومستقبل إنترلوكين-22 1 ومستقبل إنترلوكين 22 1 ومستقبل إنترلوكين 22 أ ومستقبل إنترلوكين-22 أ 5 ‎CRF2-9‏ و11 «مان7.يكون المصطلح 'مستقبل إنترلوكين-22 1" له المعنى الشامل بصورة كافية لاحتواء الصورة البشرية من المستقبل والأنواع المتجانسة. تم توضيح متوالية الحمض الأميني كاملة الطول من مستقبل إنترلوكين - 0 22بواسطة المتوالية بهوية رقم: 71 ‎Ally‏ تشفر متوالية النيوكليوتيد والتي تم تمثيلها بواسطة المتوالية بهوية رقم: 72 (انظر الشكل 2 ورقم 3). تكون تلك المتواليات مناظرة لما تم إيداعه في قاعدة بيانات ‎SwissProt‏ في شكل الوحدة الفرعية لمستقبل بروتين إنترليوكين البشري -22 برقم وصول 0811677. “موقع ريط" كما يتم استخدامه - في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح ‎alse’‏ ربط" يشتمل على منطقة من البولي ببتيد مسئولة عن الارتباط بشكل انتقائي بمولد ضد مستهدف معين (على سبيل المثال مستقبل 5 إنترلوكين-22) .تشتمل نطاقات ‎ball‏ على موقع ربط واحد على الأقل . نطاقات ‎ball‏ التمثيلية تشمل نطاق متغير للجسم المضاد. قد تشتمل جزيئات الجسم المضاد الخاصة بالاختراع على موقع ريط واحد
أو عدة مواقع ‎ayy‏ ‎adi”‏ من” - كما يتم استخدامه في الوثيقة ‎dad)‏ فإن مصطلح بروتين معين 'مستمد من" (على سبيل المثال جسم مضاد جملي أو شظية رابطة لمولد ضد منها) يشير إلى أصل البولي ببتيد أو متوالية الحمض الأميني. في أحد النماذج؛ البولي ببتيد أو متوالية حمض أميني التي تكون مستمدة من بولي ببتيد بادئ معين تكون عبارة عن متوالية منطقة تحديد التمامية أو متوالية مرتبطة بها. في أحد النماذج؛ متوالية الحمض الأميني التي تكون مستمدة من بولي ببتيد بادئ معين غير مجاور. على سبيل المثال؛ في أحد النماذج؛ واحدة؛ أو اثنين؛ أو ثلاثة؛ أو أريعة أو خمسة أو ستة مناطق تحديد التمامية تكون مستمدة من جسم مضاد بادئ. في أحد النماذج؛ يحتوي البولي ببتيد أو متوالية حمض أميني التي تكون مستمدة من بولي ببتيد بادئ معين أو متوالية حمض أميني بها متوالية حمض أميني متطابقة إلى حد 0 كبير مع المتوالية البادئة؛ أو ‎gia‏ منها حيث يتكون ‎shall‏ من 5-3 حمض أميني على الأقل ¢ 10-5 حمض أميني على الأقل ؛ 20-10 حمض أميني على الأقل ¢ 30-20 حمض أميني على الأقل ؛ أو 50-0 حمض أميني على الأقل ؛ أو قد يكون معروفاً للشخص صاحب المهارة العادية في المجال باعتباره له أصل في المتوالية البادئة. في أحد النماذج؛ يتم تغيير الواحدة أو أكثر من متواليات منطقة تحديد التمامية المستمدة من الجسم المضاد البادئ لإنتاج صورة متواليات منطقة تحديد التمامية + على 5 سيل المثال صورة ‎All‏ حيث تحافظ صورة متواليات منطقة تحديد التمامية على نشاط ربط ‎Age‏ الضد المستهدف. “مستمدة من الجمليات” - في نماذج معينة مفضلة؛ الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع تشتمل على متواليات حمض ميني إطارية و/ أو متواليات حمض أميني منطقة تحديد التمامية مستمدة من جسم مضاد جملي تقليدي ناشئة عن التحصين النشط لحيوان من فصيلة الجمليات. مع ذلك؛ فإن أجسام 0 مضادة الخاصة بالاختراع التي تشتمل على متواليات حمض أميني مستمدة من الجمليات يمكن تعديلها لتشتمل على متواليات إطارية و/ أو مناطق ثابتة مستمدة من متوالية حمض أميني بشري (أي جسم مضاد بشري) أو أنوع ثديية أخر غير جملية. على سبيل ‎(Jal‏ منطقة إطارية من الإنسان أو أحد الرئيسيات غير الإنسان» ويمكن إدراج جزء ثقيل السلسلة؛ و/ أو ‎gia‏ مفصلي في الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 المذكورة. في أحد النماذج؛ قد يوجد واحد أو أكثر من حمض أميني غير جملي 5 في المنطقة الإطارية لجسم مضاد “مستمد من الجمليات”؛ على سبيل المثال؛ قد يشتمل إطار من متوالية حمض أميني لأحد الجمليات على واحدة أو أكثر من طفرات الحمض الأميني توجد فيها وحدة الحمض
الأميني البنائية المناظرة أو من أحد الرئيسيات غير الإنسان. علاوة على ذلك؛ فإن نطاقات نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو صورها المتوافقة مع البشر؛ قد ترتبط بالنطاقات الثابتة من أجسام مضادة بشرية لإنتاج جزيء خيمري؛ كما تم وصفه في مكان آخر من الوثيقة الحالية.
"ستبدال الحمض الأميني المحافظ"- يعد "استبدال الحمض الأميني المحافظ" هو الاستبدال الذي يتم فيه استبدال وحدة بنائية للحمض الأميني بوحدة بنائية للحمض الأميني لها نفس السلسلة الجانبية. ولقد تم تعريف عائلات الوحدات البنائية للحمض الأميني التي لها نفس السلاسل الجانبية في المجال؛ مثل السلاسل الجانبية الأساسية ‎basic side chains‏ (مثل الليسين ‎clysine‏ الأرجينين ‎carginine‏ والهيستدين ‎«(histidine‏ والسلاسل الجانبية الحامضية ‎acidic side chains‏ (مثلاً حمض الأسبارتيك ‎aspartic‏
‎acid 10‏ وحمض الجلوتاميك ‎«(glutamic acid‏ والسلاسل الجانبية القطبية ‎polar side chains‏ غير المشحونة (مثل الجليسين ‎glycine‏ الأسباراجين ‎asparagine‏ والجلوتامين ‎glutamine‏ والسيرين ‎¢serine‏ والثريونين ‎cthreonine‏ والتيروسين ‎ctyrosine‏ والسيستين ‎«(cysteine‏ والسلاسل الجانبية غير القطبية ‎nonpolar side chains‏ (مثل ألاتين ‎calanine‏ والفالين عصتلة»» والليوسين ‎deucine‏ وأيزو ليوسين ‎cisoleucine‏ والبرولين ‎cproline‏ والفينيل ألانين ‎¢phenylalanine‏ والميثيونين ‎emethionine‏ والتريتوفان ‎«(tryptophan 5‏ والسلاسل الجانبية المتفرعة بيتا ‎beta-branched side chains‏ (مثل الثريونين» والفالين؛ وأيزو ليوسين) والسلال الجانبية العطرية ‎aromatic side chains‏ (مثل التريوسين ‎٠»‏ والفيتيل ألانين» والتريتوفان» والهستيدين). ‏ لذلك؛ من الممكن استبدال وحدة بنائية للحمض الأميني غير أساسية ‎nonessential amino acid‏ في بولي ببتيد جلوبيولين مناعي بوحدة بنائية أخرى للحمض ‎١‏ لأميني من نفس عائلة السلسلة الجانبية. في نموذج آخرء يمكن استبدال سلسلة أحماض أمينية بسلسلة شبيهة بنائياً
‏0 تختلف في ترتيب و/ أو تركيبة أفراد عائلة السلسلة الجانبية. “جز ثقيل السلسلة” - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “جزءِ ثقيل السلسلة” يشمل متواليات حمض أميني مستمدة من النطاقات الثابتة من سلسلة ثقيلة جلوبيولين مناعي. يشتمل البولي ببتيد الذي يشتمل على جزءٍ ثقيل السلسلة على واحد على الأقل مما يلي: نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1؛ نطاق مفصلي ‎lo)‏ سبيل ‎(Jd)‏ منطقة مفصلية ‎(lle‏ و/ أو ‎Tang‏ و/ أو سفلى)؛ نطاق ثابت ثقيل 5 السلسلة 2؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3؛ أو صورة أو شظية منه. في أحد النماذج؛ قد يشتمل جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد الخاصة بالاختراع على ‎ga‏ شظية قابلة للتبلور من سلسلة ثقيلة
لجلوبيولين مناعي (على سبيل المثال؛ ‎gia‏ مفصلي؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 3). في نموذج آخرء قد يفتقر جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد الخاصة بالاختراع إلى جزء على الأقل من نطاق ثابت (على سبيل المثال؛ كل أو ‎eda‏ من نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2). في نماذج معينة؛ يكون واحد على الأقل؛ و يفضل ‎(JS‏ النطاقات الثابتة مستمدة من سلسلة ثقيلة لجلوبيولين مناعي بشرية. على سبيل المثال؛ في أحد النماذج المفضلة؛ الجزء ثقيل السلسلة يشتمل على نطاق ‎hinge domain lade‏ بشري تماماً. في نماذج مفضلة أخرى؛ الجزءٍ ‎LE‏ السلسلة يشتمل على ‎ga‏ ‏شظية قابلة للتبلور ‎(Fe) crystallizable fraction‏ بشري تماماً (على سبيل ‎(Jl‏ نطاق مفصلي » نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 متواليات جلوبيولين مناعي بشري). في نماذج معينة؛ النطاقات الثابتة المشكلة ‎jal‏ السلسلة الثقيلة تكون من جزيئات جلوبيولين مناعي 0 مختلفة. على سبيل المثال؛ قد يشتمل ‎ja‏ ثقيل السلسلة من البولي ببتيد على نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 مستمد من جزيء الجلوبيولين المناعي جاما1 ومنطقة مفصلية مستمدة من جزيء الجلوبيولين المناعي جاما3 أو الجلوبيولين المناعي جاما4. في ‎(gal pila‏ تكون المناطق الثابتة هي مناطق خيمرية تشتمل على أجزاء من جزيئات جلوبيولين مناعي مختلفة. على سبيل ‎(JB‏ قد تشتمل مفصلة على جزء أول من جزيء الجلوبيولين المناعي جاما1 ‎(SU ging‏ من جزيء الجلوبيولين المناعي جاما3 أو 5 الجلوبيولين المناعي جاما4.كما سبق ‎wily‏ سيتضح للشخص صاحب المهارة العادية في المجال أنه يمكن تعديل النطاقات الثابتة من ‎gall‏ ثقيل السلسلة بحيث تتباين في متوالية حمض أميني من جزيء الجلوبيولين المناعي الطبيعي (النوع البري ‎(wild-type‏ بعبارة أخرى؛ قد تشتمل البولي ببتيدات الخاصة بالاختراع التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية على تغييرات أو تعديلات على واحد أو أكثر من النطاقات الثابتة ثقيلة السلسلة (نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1؛ مفصلي؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 أو 0 نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3) و/ أو إلى نطاق المنطقة الثابتة خفيف السلسلة ‎light chain constant‏ ‎(CL) region domain‏ تشمل التعديلات التمثيلية الإضافات؛ أو الحذوفات أو الاستبدالات لواحد أو أكثر من حمض أميني في واحدة أو أكثر من النطاقات. 'خيمري ‎"Chimeric‏ يشتمل البروتين "الخيمري" على متوالية حمض أميني أولى مرتبطة بمتوالية حمض أميني ثانية والتي لا ترتبط بها في الطبيعة. وقد توجد متواليات الحمض الأميني بشكل طبيعي في 5 بروتينات منفصلة يتم جمعها في بولي ببتيد اندماج أو قد توجد طبيعياً في نفس البروتين ولك يتم وضعها في ترتيب جديد في بولي ببتيد الاندماج. ويمكن إنشاء بروتين خيمري ‎cchimeric protein‏ على سبيل
المثال؛ بالتخليق الكيميائي ‎«chemical synthesis‏ أو بإنشاء وترجمة بولي نيوكليوتيد يتم فيه تشفير مناطق الببتيد في العلاقة المطلوية. الأجسام المضادة الخيمرية التمثيلية الخاصة بالاختراع تشمل بروتينات اندماج تشتمل على نطاقات نطاق متغير ‎Jaf‏ السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو صورها المتوافقة مع البشر؛ المدمجة بالنطاقات الثابتة من جسم مضاد بشري؛ على سبيل المثال الجلوبيولين المناعي ‎Ills‏ الجلوبيولين المناعي جاما2,؛ الجلوبيولين المناعي جاما3 أو
الجلوبيولين المناعي جاما4 بشرية. 'منطقة متغيرة" أو ‎Glad‏ متغير" - يتم استخدام المصطلحين 'منطقة متغيرة" و ‎Gla‏ متغير" في الوثيقة الحالية بشلك تبادلي ويهدفان إلى معنى متكافئ. وبشير مصطلح "متغير" إلى أن أجزاء معينة من النطاقين نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة تختلف بشدة في الترتيب بين الأجسام 0 المضادة ويتم استخدمها في ربط ونوعية كل جسم مضاد معين لمولد الضد الهدف الخاص به. ومع ذلك؛ فإن التغيرية غير موزعة بانتظام على النطاقات المتغيرة للأجسام المضادة. وإنما تتركز في ثلاثة أقسام تُسمى "حلقات مفرطة التغير ‎(HVS) hypervariable loops‏ في كل من نطاق متغير خفيف السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة حيث تشكل جزءِ من موقع ربط مولد الضد. من المفضل الإشارة إلى حلقات مفرطة التغير الأولى والثانية والثالثة للنطاق خفيف السلسلة لامدا نطاق متغير خفيف السلسلة ‎VLambda light chain domain 5‏ في الوثيقة الحالية على أنها ‎«LIV‏ (120 و (130 و يمكن تعريفها على أنها تشتمل على وحدات بنائية 33-24 ((110؛ تتكون من 9 10 أو 11 من الوحدات البنائية للحمض الأميني)؛ 53-49 ((120؛ تتكون من 3 وحدات بنائية) و 96-90 ((130؛ تتكون من 5 وحدات بنائية) في نطاق متغير خفيف السلسلة )2000( 20:267-279 ‎«(Morea et al., Methods‏ تتم الإشارة إلى حلقات مفرطة التغير الأولى والثانية والثالثة للنطاق خفيف السلسلة ‎V‏ كابا في الوثيقة الحالية 0 على أنها 1160» ©1206 و1360 ويمكن تعريفها على أنها تشتمل على وحدات بنائية 33-25 (1160؛ تتكون من 6 7« 8 11 12 أو 13 وحدات بنائية)» 53-49 (1260؛ تتكون من 3 وحدات بنائية) و97-90 (1360؛ تتكون من 6 وحدات بنائية) في نطاق متغير خفيف السلسلة ...له ‎(Morea et‏ ‎(Methods 20:267-279 (2000‏ تتم الإشارة إلى حلقات مفرطة التغير الأولى والثانية والثالثة لنطاق متغير ثقيل السلسلة في الوثيقة الحالية على أنها ‎HI‏ 112 و113 ويمكن تعريفها على أنها تشتمل على 5 وحدات بنائية 33-25 ‎HI)‏ تتكون من 7؛ 8 أو 9 وحدات بنائية) 56-52 (12؛ تتكون من 3 أو 4 وحدات بنائية) و 105-91 (13؛ عالية التغير من حيث الطول) في نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎(Morea‏
‎.et al., Methods 20:267-279 (2000))‏ مالم يذكر خلاف ذلك؛ فإن المصطلحات ‎(L1‏ 12 و13 على الترتيب تشير إلى حلقات مفرطة التغير الأولى ‎ly‏ والثالثة لنطاق متغير خفيف السلسلة؛ وتشمل حلقات مفرطة التغير يتم الحصول عليها من كل من أنماط مشابهة ل ‎.Viambdas Vkappa‏ تشير المصطلحات ‎HI‏ 112 و113 على الترتيب إلى حلقات مفرطة التغير الأولى والثانية والثالثة لنطاق متغير ثقيل السلسلة؛ وتشمل حلقات مفرطة التغير يتم الحصول عليها من أي من الأنماط المثيلة سلسلة المعروفة بما في ذلك ‎sha 6d ce oy‏ الحلقات مفرطة التغير 1-آ؛ 12؛ 1.3 ‎HI‏ 112 و113 قد تشتمل كل ‎Wie‏ على جزء من 'منطقة تحديد التمامية"» كما تم تعريفها أدناه. المصطلحان "حلقة مفرطة التغير ‎hypervariable loop‏ (117)" و 'منطقة تحديد التمامية" ليسا مترادفين تماماً لأنه يتم تعريف الحلقات مفرطة التغير على أساسي البنية؛ بينما يتم 0 تعريف مناطق تحديد التمامية على أساس تغير المتوالية ‎Sequences of Proteins of «(Kabatet al.‏ ‎National Institutes of Health¢ 5th Ed.
Public Health Service<Immunological Interest‏ ¢ ‎MD.<Bethesda‏ ¢)1983 وقد تكون حدود حلقات مفرطة التغير ومناطق تحديد التمامية مختلفة في بعض نطاقات نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة. من الممكن تعريف مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير خفيف السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة نمطياً 5 على أنها تشتمل على الأحماض الأمينية التالية: الوحدات البنائية 34-24 (منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة)»؛ 56-50 (منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة) و 97-89 (منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة) في النطاق المتغير خفيف السلسلة؛ والوحدات البنائية 35-31 أو 35-31ب (منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة)» 56-50(منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة) و 102-95 (منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة) في النطاق المتغير ثقيل 0 السلسلة؛ ‎5th Ed.
Public Health » Sequences of Proteins of Immunological Interest¢(Kabatet al.‏ ‎MD. (1991))¢ Bethesdac National Institutes of Health«Service‏ . لذلك؛ قد تدخل حلقات مفرطة التغير في مناطق تحديد التمامية المناظرة ويجب تفسير الإشارة في الوثيقة الحالية إلى "'حلقات مفرطة التغير" من نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة على أنها تضم أيضاً مناطق تحديد التمامية المناظرة والعكس صحيح؛ مالم ‎SY‏ خلاف ذلك. 5 شمى الأجزاء الأكثر محافظة من النطاقات المتغيرة بالمنطقة الإطارية؛ كما سيتم تعريفها. وتشتمل النطاقات المتغيرة ذات السلاسل الثقيلة والخفيفة على ‎af‏ مناطق إطارية (المنطقة الإطارية 1
3 ‏المنطقة الإطارية‎ ¢((FR2) framework region 2 2 ‏المنطقة الإطارية‎ ¢(FR1) framework region 1
‎¢(FR3) framework region 3‏ والمنطقة الإطارية 4 4 ‎¢(FR4) framework region‏ على الترتيب)؛
‏حيث تأخذ إلى حد كبير شكل رقاقة ‎of‏ متصلة بثلاث حلقات مفرطة التغير. وبتم احتجاز الحلقات
‏مفرطة التغير في كل سلسلة معاً متجاورة عن طريق مناطق إطارية وياستخدام الحلقات مفرطة التغير من
‏5 السلسلة ‎(AY)‏ تساهم في تكوين موقع ربط ‎alge‏ ضد للأجسام المضادة. وقد كشف التحليل البنيوية
‏للأجسام المضادة عن العلاقة بين المتواليات وشكل موقع الريط المتكون بفعل مناطق تحديد التمامية
‎215:175-¢ J.
Mol. 1016 Tramontanoet al.¢ J.
Mol.
Biol. 227: 799-817 (1992))«Chothiaet al.
‏)1990( 182. وعلى الرغم من تباينها العالي في المتواليات؛ إلا أن الحلقات من الخامسة إلى السادسة
‏تتخذ ‎Slaw‏ صغيراً من هيئات السلسلة الرئيسية؛ يُسمى "البنيات القياسية". وتتحد هذه الهيئات قبل أي 0 يشيء بطول السلاسل ثم بوجود وحدات بنائية أساسية في مواضع معينة في الحلقات وفي المناطق
‏الإطارية التي تحدد الهيئة من خلال تجميعهاء أو روابط الهيدروجين؛ أو القدرة على افتراض هيئات غير
‏طبيعية للسلسلة الرئيسية.
‏"منطقة تحديد التمامية" - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح "منطقة تحديد التمامية"
‏يعني مواقع دمج مولد الضد غير متجاورة موجودة داخل المنطقة المتغيرة لكل من البولي ببتيد ثقيلة السلسلة وخفيف السلسلة. وقد تم وصف هذه المناطق المعينة عن طريق ‎J.
Biol.
Chem.
Kabatet al.‏
‎Sequences of protein of immunological interest. » Kabatet ‏ويلة‎ 6609-6616 2
‎MacCallumet ‏وكذلك من جانب‎ J.
Mol.
Biol. 196:901-917 (1987)«Chothiaet al. ‏وكذلك‎ (1991)
‎J.
Mol.
Biol. 262:732-745 (1996)al.‏ حيث تتضمن التعريفات تداخل أو مجموعات فرعية من
‏الوحدات البنائية للحمض الأمين مقارنة ببعضها. وقد تم توضيح الوحدات البنائية للحمض الأميني التي 0 تضم مناطق تحديد التمامية كما تم تعريفها في كل من المراجع السابقة بهدف المقارنة. ومن المفضل؛
‏أن يشير مصطلح "منطقة تحديد التمامية" إلى منطقة تحديد التمامية كما عرفها كابات ‎(Kabat)‏ بناء
‏على مقارنة المتواليات.
‏الجدول 1: تعريف منطقة تحديد التمامية
‏تعريفات منطقة تحديد التمامية
نطاق متغير ثقيل السلسلة منطقة 35-1 32-6 35-0 تحديد التمامية 1 نطاق متغير ثقيل السلسلة منطقة تحديد 65-50 55-53 58-47 التمامية 2 نطاق متغير ثقيل السلسلة منطقة تحديد 102-95 101-96 101-93 التمامية 3 نطاق متغير خفيف السلسلة منطقة تحديد 34-24 32-6 36-0 التمامية 1 نطاق متغير خفيف السلسلة منطقة تحديد 56-50 52-50 55-46 التمامية 2 نطاق متغير خفيف السلسلة منطقة تحديد 97-9 96-91 96-9 التمامية 3 1ترقيم الوحدات البناثية يتبع تسمية ‎Kabatet al., supra‏ 2ترقيم الوحدات البناثية يتبع تسمية ‎Chothiact al., supra‏ 3ترقيم الوحدات البناثية يتبع تسمية ‎MacCallumet al., supra‏ “منطقة إطارية” - المصطلح “منطقة إطارية” كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ يشمل الوحدات البنائية للحمض الأميني التي تشكل جزءاً من المنطقة المتغيرة؛ لكنها ليست جزءاً من مناطق تحديد التمامية (على سبيل المثال؛ باستخدام تعريف كابات لمناطق تحديد التمامية). لذلك؛ فإن إطار منطقة متغيرة يتراوح بين حوالي 120-100 حمض أميني من حيث الطول لكنه يشمل فقط تلك الأحماض الأمينية التي تقع خارج مناطق تحديد التمامية. لمثال معين من نطاق متغير ثقيل السلسلة ولمناطق
تحديد التمامية كما عرفها ‎(Kabatet al‏ فإن المنطقة الإطارية 1 تناظر نطاق المنطقة المتغيرة التي تضم الحمض الأميني 50-1؛ المنطقة الإطارية 2 تناظر نطاق المنطقة المتغيرة التي تضم الحمض الأميني 49-6؛ المنطقة الإطارية 3 تناظر نطاق المنطقة المتغيرة التي تضم الحمض الأميني 94-66؛ والمنطقة الإطارية 4 تناظر نطاق المنطقة المتغيرة للحمض الأميني 103 إلى نهاية المنطقة المتغيرة. وبالمثل يتم فصل المناطق الإطارية للسلسلة الخفيفة بكل من مناطق تحديد التمامية للمنطقة المتغيرة خفيفة السلسلة. بالمثل» باستخدام تعريف مناطق تحديد التمامية ‎Chothiaet ald‏ أو ‎(McCallum et al.‏ يتم فصل حدود المنطقة الإطارية عن طريق نهايات مناطق تحديد التمامية المناظرة كما سبق وصفه. في نماذج مفضلة تكون مناطق تحديد التمامية هي كما عرفها ‎Kabat‏ ‏في الأجسام المضادة الطبيعية؛ تكون الست مناطق تحديد التمامية الموجودة على كل جسم مضاد 0 مونومري ‎monomeric antibody‏ عبارة عن متواليات قصيرة غير متجاورة لأحماض أمينية موضوعة تحديداً لتكوين موقع ربط مولد الضد حيث يتخذ الجسم المضاد ثلاث هيئات بعدية في البيئة المائية. وتتميز باقي المناطق المتغيرة الثقيلة والخفيفة بقدر أقل من التغاير داخل الجزيء ‎inter-molecular‏ ‎variability‏ في متواليات الحمض الأميني وتُسمى بالمناطق الإطارية. وتتخذ المناطق الإطارية إلى حد كبير شكل الرقاقة 8 8-4066 وتكون مناطق تحديد التمامية حلقات تتصل؛ وفي بعض الحالات تشكل 5 جزءاً ‎ce‏ بنية الرقاقة ‎LB‏ لذلك؛ تعمل هذه المناطق الإطارية على تكوين سلسلة جزيئات متجاورة توفر تحديد موضع مناطق تحديد التمامية الست في الاتجاه الصحيح حسب التفاعلات غير تساهمية التكافؤ داخل السلسلة. ويحدد موقع ربط مولد الضد المتكون عن طريق مناطق تحديد التمامية التي تم تحديد موضعها سطحاً مكملاً للقمة اللاصقة على مولد الضد التفاعلي المناعي. ويعزز هذا الوسط المكمل ‎Ll‏ غير تساهمي التكافؤ_للجسم المضاد_بالقمة اللاصقة ‎dod‏ الضد_التفاعلي المناعي ‎immunoreactive antigen epitope 0‏ ومن السهل على الشخص صاحب المهارة العادية في المجال تحديد موضع مناطق تحديد التمامية. “المنطقة المفصلية” - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “المنطقة المفصلية” يشمل ‎ein‏ جزيء ثقيل السلسلة ثقيلة يريط نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1 بنطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 . وهذه المنطقة المفصلية تشتمل على تقريباً 25 وحدة بنائية وتكون مرنة؛ مما يسمح بتحرك منطقتي ربط مولد 5 ضد طرفية 17 بشكل مستقل. يمكن تقسيم المناطق المفصلية إلى ثلاث نطاقات مختلفة: نطاق مفصلي علوي» وأوسط وسفلي.1998 161:4083-90 ‎et al.
J.
Immunol.‏ .11كا ‎(Roux‏ ). قد تحتوي الأجسام
— 6 3 — المضادة الخاصة بالاختراع المشتملة على منطقة مفصلية “بشرية تماماً” على واحدة من متواليات المناطق المفصلية المبينة فى الجدول 2 أدناه. الجدول 2: المتواليات المفصلية ‎Lyall‏ ‏الجلوييولين المفصلة العليا المفصلة الوسطى المفصلة المناعى جاما السفلى الجلوبيولين ‎APELLGGP CPPCP EPKSCDKTHT‏ المناعي المتوالية رقم: 82) | (المتوالية رقم: 83 المتوالية رقم: : (المتوالية رقم: 82) | (المتوالية رقم: 83( (المتوالية رقم: الجلوبيولين ‎APELLGGP CPRCP | ELKTPLGDTTHT‏ ‎3(EPKSCDTPPPCPRCP)‏ ‏المناعي ‎I‏ (المتوالية رقم: 85) | (المتوالية رقم: 86( (المتوالية رقم: 87( الجلوبيولين ‎APEFLGGP CPSCP ESKYGPP‏ المناعي المتوالية رقم: 88) | (المتوالية رقم: 89 المتوالية رقم: : (المتوالية رقم: 88) | (المتوالية رقم: 89) (المتوالية رقم: الجلوبيولين ‎APPVAGP CCVECPPPCP ERK‏ المناعى (المتوالية رقم: 91) | (المتوالية رقم: 92) (المتوالية رقم: جاما42 93( ‎Gla‏ ثابت ثقيل السلسلة 2" - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ ‎Gl‏ مصطلح "نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 يشمل ‎gia‏ سلسلة ثقيلة ‎odie‏ على سبيل المثال؛ من ‎dea‏ الوحدة البنائية 244 إلى الوحدة ‎dst)‏ 360 من جسم مضاد باستخدام مخططات الترقيم التقليدية (الوحدات البنائية 244 إلى 360 نظام ترقيم كابات؛ والوحدات البناثية 231- 340؛ بنظام الترقيم ‎١‏ لأوربي؛ ‎Kabat EA et al.
Sequences‏ ‎Proteins of Immunological Interest.Bethesda‏ لعلف ‎US Department of Health and Human‏ ‎1991¢Services‏ .10111 ). ويعد نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 فريداً في أنه لا يقترن بشكل وثيق مع نطاق 0 آخر. وإنماء تتوسط سلسلتان كريوهيدرات ‎carbohydrate chains‏ متفرعتان مربوطتين ‎Na‏ بين اثنين من
نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 لجزيء الجلوبيولين المناعي جاما أصلي سليم. كما تم توثيق أن نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 يمتد من نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 إلى الطرف © في الجزيء الجلوبيولين المناعي جاما ويشتمل تقريباً على 108 وحدة بنائية. “شظية” - المصطلح “شظية”؛ كما يتم استخدامه في سياق للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع» يشير إلى جزءِ من جسم مضاد أو سلسلة الجسم المضاد يشتمل على عدد أقل من الوحدات البنائية للحمض الأميني من الجسم المضاد أو سلسلة الجسم المضاد السليمة أو الكاملة. يشير المصطلح ‎Bhs‏ رابطة ‎algal‏ ضد” إلى شظية بولي ببتيد للجلوبيولين المناعي أو الجسم المضاد الذي يريط مولد ضد أو يتنافس مع جسم مضاد سليم ( أي مع جسم مضاد سليم مستمدة ‎(die‏ لربط ‎alge‏ الضد (أي خاص بالارتباط بمستقبل إنترلوكين-22). كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “شظية"' جزيء الجسم 0 المضاد يشمل شظايا ربط مولد الضد للأجسام المضادة؛ على سبيل المثال؛ نطاق متغير خفيف السلسلة لجسم مضاد؛ء نطاق متغير ثقيل السلسلة لجسم مضادء جسم مضاد وحيد السلسلة ‎single chain‏ ‎«(scFv) antibody‏ شظية 2)80(2؛ شظية ‎«Fab‏ شظية ‎Fd‏ شظية ‎Fy‏ وشظية نطاق فردي لجسم مضاد ‎(DAD) single domain antibody fragment‏ يمكن الحصول على الشظاياء على سبيل المثال؛ عن طريق المعالجة الكيميائية ‎chemical treatment‏ أو المعالجة الإنزيمية ‎enzymatic treatment‏ لجسم 5 المضاد أو سلسلة الجسم المضاد سليمة أو تامة أو بوسائل عودة الارتباط الجيني. “التكافؤ ‎"Valency‏ - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “التكافؤ” يشير إلى عدد مواقع الربط المستهدفة المحتملة في بولي ببتيد. ويربط كل موقع ربط مستهدف تحديداً جزيء مستهدف واحد أو موقع معين على جزيء مستهدف. عندما يشتمل بولي ببتيد على أكثر من موقع ربط مستهدف؛ فإن كل موقع ربط مستدف قد يربط تحديداً نفس الجزيء أو جزيئات مختلفة (على سبيل المثال» قد يرتبط 0 ججزبئات ربط مختلفة أو مولدات ضد مختلفة؛ أو قمم لاصقة مختلفة على نفس مولد الضد). “النوعية ‎"Specificity‏ - يشير مصطلح “النوعية” إلى القدرة على ربط ‎Jo)‏ سبيل المثال؛ التفاعل ‎oo lial‏ مع) هدف معين؛ على سبيل المثال؛ مستقبل إنترلوكين-22. قد يكون بولي ببتيد أحادي النوعية ويحتوي على واحدة أو أكثر من مواقع ربط ترتبط تحديداً بهدف أو قد يكون بولي ببتيد متعددة النوعية ويحتوي على اثنين أو أكثر من مواقع ‎das)‏ التي ترتبط تحديداً بنفس الهدف أو أهداف مختلفة. ‎alas 5‏ - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح ‎"lad‏ بالنسبة إلى البولي ببتيدات يشمل البولي ببتيدات التي تشتمل على متوالية حمض أميني غير طبيعي. على سبيل المثال» تكون
البولي ببتيدات غير الطبيعية صورا معدلة من البولي ببتيدات الطبيعية (على سبيل المثال؛ التي تشتمل على طفرة مثل إضافة استبدال أو حذف) أو تشتمل على متوالية حمض أميني أولى (قد يكون طبيعياً أو غير طبيعي) تكون مربوطة في متوالية مستقيمة من حمض أميني بمتوالية حمض أميني ثاني (قد يكون طبيعياً أو غير طبيعي) لا ترتبط بها في الطبيعة.
“مهندس أو معدل” - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ ‎GB‏ مصطلح “مهندس” ‎dally‏ معالجة جزيئات حمض نووي أو بولي ببتيد بوسائل تخليقية (على سبيل المثال باستخدام طرق عودة الارتباط الجيني؛ أو تخلق الببتيد في المعمل؛ أو الاقتران ‎ani)‏ أو الكيميائي للتبدضات أو توليفة ما من هذه الطرق). من المفضل؛ هندسة الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع؛ ‎La‏ في ذلك على سبيل ‎(Ja‏ ‏أجسام مضادة متوافقة مع البشر و/ أو خيمرية؛ و أجسام مضادة تمت هندستها أو تعديلها لتحسين واحدة
0 أو أكثر من خواصها مثل ربط مولد الضدء أو الثبات/ عمر النصف أو وظيفة المؤثر. “الجسم المضاد المعدل ‎"Modified antibody‏ - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “الجسم المضاد المعدل” يشمل صورا تخليقية من أجسام مضادة يتم تعديلها بحيث لا تحدث في الطبيقة؛ مثل الأجسام المضادة التي تشتمل على اثنين على الأقل جزيئات ثقيلة السلسلة لكن ليس سلسلتين ثقيلتين تامتينة (مثل ‎١‏ لأجسام المضادة محذوفة المناطق ‎domain deleted antibodies‏ أو الأجزاء
5 المضادة الصغيرة ‎¢(minibodies‏ صور متعددة النوعية لأجسام مضادة ‎Jeo)‏ سبيل المثال» ثنائية النوعية؛ ثلاثية النوعية؛ الخ.) معدلة للارتباط باثنين أو أكثر من مولدات الضد المختلفة أو بقمم لاصقة مختلفة على مولد ضد واحد)؛ جزيئات ثقيلة السلسة مربوطة بجزيئات جسم مضاد وحيد السلسلة وما إلى ذلك. وتعتبر جزيئات جسم مضاد وحيد السلسلة معروفة في المجال وتم وصفها على سبيل المثال؛ في براءة الاختراع الأمريكية 5892019. إضافة إلى ذلك؛ فإن المصطلح “الجسم المضاد المعدل” يشمل
0 صوناً عديدة التكافؤ لأجسام مضادة ‎Jo)‏ سبيل ‎(JE)‏ أجسام ثلاثية ‎ely ll‏ التكافؤ» الخ؛ ترتبط بثلاث نسخ أو أكثر منفس مولد الضد). في نموذج ‎OAT‏ يكون الجسم المضاد المعدل الخاصة بالاختراع عبارة عن بروتين اندماج ‎Cus‏ يشتمل على جزء سلسلة ثقيلة واحد على الأقل ليس به نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 وحيث يشتمل على نطاق ربط بولي ببتيد يشتمل على ‎ga‏ ربط أحد أعضاء زوج جزيء ربط مستقبل.
5 المصطلح “الجسم المضاد المعدل” قد يتم استخدامه في الوثيقة الحالية أيضاً للإشارة إلى صور متواليات الحمض الأميني للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع كما تم تعريفها بنائياً في الوثيقة الحالية. سيتضح
للشخص صاحب المهارة العادية في المجال أنه يمكن تعديل جسم مضاد لإنتاج جسم مضاد مغاير مختلف في متوالية حمض أميني مقارنة بالجسم المضاد الذي تكون مستمدة منه. على سبيل المثال؛ قد تتم استبدالات النيوكليوتيد أو حمض أميني التي تؤدي إلى استبدالات محافظة أو التغيرات عند وحدات بنائية للحمض الأميني ”غير أساسية" (على سبيل المثال؛ في مناطق تحديد التمامية و/ أو وحدات بنائية إطارية). قد تشمل استبدالات الحمض الأميني استبدال واحد أو أكثر من الأحماض الأمينية بحمض
أميني طبيعي أو غير طبيعي. “استبدالات متوافقة مع البشر” - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “استبدالات متوافقة مع البشر” يشير إلى استبدالات حمض أميني فيها يتم استبدال وحدة الحمض الأميني البنائية الموجودة في موضع معين في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد (على
سبيل المثال جسم مضاد مستقبل إنترلوكين-22 مستمد من الجمليات) بوحدة بنائية لحمض أميني تحدث عند موقع مكافئ في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة بشري مرجعي. قد تكون نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة البشري المرجعي هو نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة تشفره سلالة جرثومية بشرية. قد تتم استبدالات متوافقة مع البشر في المناطق الإطارية و/ أو مناطق تحديد التمامية للأجسام المضادة؛ المعرفة في الوثيقة الحالية.
5 "صور متوافقة مع البشر ‎"Humanising substitutions‏ - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “صورة متوافقة مع البشر” يشير إلى جسم مضاد مغاير يحتوي على واحد أو أكثر من “استبدالات متوافقة مع البشر” مقارنة بجسم مضاد مرجعي؛ حيث يحتوي ‎gla‏ من الجسم المضاد المرجعي (على سبيل المثال نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة أو أجزاء منه على واحدة على الأقل منطقة تحديد التمامية) على حمض أميني مستمد من نوع غير بشري؛ و تحدث
0 “الاستبدالات المتوافقة مع البشر” داخل متوالية الحمض الأميني مستمد من نوع غير بشري. “صور جرثومية السلالة ‎"Germlined variants‏ - المصطلح “صورة جرتومية السلالة” يتم استخدامه في الوثيقة الحالية تحديداً للإشارة إلى “صور متوافقة مع البشر” فيها تؤدي “استبدالات متوافقة مع البشر” إلى استبدال واحدة أو أكثر من الوحدات البنائية للحمض الأميني الموجودة في موقع (مواقع) معين في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد (على سبيل المثال جسم مضاد
5 مستقبل إنترلوكين-22 مستمد من الجمليات) بوحدة بنائية لحمض أميني تحدث عند موقع مكافئ في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة بشري مرجعي تشفره السلالة الجرثومية
البشرية. من النمطي لأية “صورة سلالة جرثومية”؛ أخذ الوحدات البنائية للحمض الأميني المستبدلة بصورة سلالة جرثومية فقطء أو بشكل سائد؛ من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة مشفر بسلالة جرثومية بشرية. المصطلحات “صورة متوافقة مع البشر” و ‎Ba’‏ جرثومية السلالة” غالباً ما يتم استخدامها بشكل تبادلي في الوثيقة الحالية. إدخال واحدة أو أكثر من “استبدالات متوافقة مع البشر” في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة مستمد من الجمليات (على سبيل المثال مستمد من اللاما) يؤدي إلى إنتاج “صورة متوافقة مع البشر” من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة المستمد من الجمليات (اللاما). إذا كانت الوحدات البنائية للحمض الأميني المستبدلة مستمدة بشكل سائد أو حصر من متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة مشفر بسلالة جرثومية بشرية؛ فإن النتيجة قد تكون ‎Boe’‏ سلالة جرثومية بشرية" 0 من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة المستمد من الجمليات (اللاما). “صور ألفة” - كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “صورة الألفة” يشير إلى جسم مضاد مغاير حيث يتميز بواحدة أو أكثر من التغيرات في متوالية حمض أميني مقارنة بجسم مضاد مرجعي؛ حيث تتميز صورة الألفة بألفة متغيرة لمولد الضد المستهدف مقارنة بالجسم المضاد المرجعي. على سبيل ‎Jl)‏ قد تتميز صور ‎Al‏ بألفة متغيرة لمستقبل إنترلوكين-22؛ مقارنة بالجسم المضاد المرجعي لمستقبل إنترلوكين-22. ومن المفضل أن تتميز صورة الألفة بألفة محسنة لمولد الضد المستهدف»؛ على سبيل المثال مستقبل إنترلوكين-22؛ مقارنة بالجسم المضاد المرجعي. تتميز صور ألفة نمطياً بواحدة أو أكثر من التغيرات في متوالية حمض أميني في مناطق تحديد التمامية؛ مقارنة بالجسم المضاد المرجعي. قد تؤدي تلك الاستبدالات إلى استبدال الحمض الأميني الأصلي الموجود في موضع معين في مناطق تحديد التمامية بوحدة بنائية مختلفة للحمض الأميني؛ حيث قد تكون وحدة بنائية لحمض أميني طبيعي 0 أو وحدات بنائية لحمض طبيعي غير طبيعي. قد تكون استبدالات الحمض الأميني محافظة أو غير محافظة. ‎Jil‏ بشري عالي ‎"High human homology‏ - يمكن اعتبار جسم مضاد يشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة به تماثل بشري عالي إذا كانت النطاق نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة؛ معاً؛ تتميز بنسبة تطابق متوالية حمض أميني 790 على الأقل مع أكثر متواليات نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة جرثومية بشرية تطابقاً. قد تشمل الأجسام المضادة ذات التماثل البشري العالي أجساما مضادة تتضمن نطاق متغير ثقيل السلسلة
ونطاق متغير خفيف السلسلة لأجسام مضادة أصلية بشرية غير بشرية تتميز بنسبة تطابق مرتفعة بشكل كاف مع متواليات سلالة جرثومية بشرية؛ بما في ذلك على سبيل المثال أجسام مضادة تشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة للأجسام المضادة التقليدية المستمدة من الجمليات؛ وكذلك صورة متوافقة مع البشر معدلة بشكل خاص أو سلاسلة جرثومية من تلك الأجسام المضادة و ‎Lad‏ أجسام مضادة “بشرية تماما”. في أحد النماذج قد يتميز نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد به ‎Bla‏ بشري عالي بحمض أميني نسبة تطابق متوالية أو تشابه متوالية قدره 780 أو أكبر مع واحد أو أكثر من نطاق متغير ثقيل السلسلة بشرية عبر المناطق الإطارية المنطقة الإطارية 1» المنطقة الإطارية 2؛ المنطقة الإطارية 3؛ والمنطقة الإطارية 4. في نماذج أخرى قد يكون تطابق متوالية الحمض الأميني أو تشابه متواليات بين 0 نطاق متغير ثقيل السلسلة للبولي ببتيد الخاصة بالاختراع وأكثر جرثومية بشرية مطابقة نطاق متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة 785 أو أكثرء؛ 790 أو أكثرء 795 أو أكثرء 797 أو أكثرء أو حتى799 أو حتى 100 7. في أحد النماذج قد يحتوي نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد به ‎Bla‏ بشري عالي على واحدة أو أكثر من (على سبيل المثال 1 إلى 10) متوالية حمض أميني لا تتوافق عبر المناطق الإطارية 5 المنطقة الإطارية 1 المنطقة الإطارية 2 المنطقة الإطارية 3( والمنطقة الإطارية ‎of‏ مقارنة بأقرب متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة بشري متوافقة. في نموذج آخر قد يتميز نطاق متغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد به تماثل بشري عالي بتطابق متوالية أو تشابه متوالية قدره 780 أو أكبر مع واحد أو أكثر من نطاق متغير خفيف السلسلة البشرية عبر المناطق الإطارية المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2 المنطقة الإطارية 3؛ والمنطقة الإطارية 0 4. في نماذج أخرى قد يكون تطابق متوالية الحمض الأميني أو تشابه متواليات بين نطاق متغير خفيف السلسلة للبولي ببتيد الخاصة بالاختراع و أكثر جرثومية بشرية مطابقة متوالية نطاق متغير خفيف السلسلة 85 7 أو أكبر 790 أو أكثرء 795 أو أكثرء؛ 797 أو أكثرء أو حتى 99 7 أو حتى 7100. في أحد النماذج قد يحتوي نطاق متغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد به تماثل بشري عالي على واحدة أو أكثر من (على سبيل المثال 1 إلى 10) متوالية حمض أميني لا تتوافق عبر المناطق الإطارية 5 المنطقة الإطارية 1 المنطقة الإطارية 2 المنطقة الإطارية 3( والمنطقة الإطارية ‎of‏ مقارنة بأقرب متوالية نطاق متغير خفيف السلسلة بشرية مطابقة.
وقبل تحليل النسبة المئوية للتطابق للمتوالية بين الجسم المضاد ذي التشابه البشري المرتفع والسلالة الجرثومية البشرية لنطاق ‎sie‏ ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة؛ يتم حساب الطيات المخروطية والتي تسمح بتعريف عائلة من أجزاء السلالة الجرثومية البشرية مع توليفة متطابقة من الطيات المخروطية الخاصة ب ‎HI‏ و112 أو1.1 و 12 (و13).وبعد ذلك يتم اختيار عضو عائلة السلالة الجرثومية البشرية الذي له درجة عالية من التجانس في المتوالية مع المنطقة المتغيرة نم الجسم المضاد محل الاهتمام وذلك لغرض تصنيف التطابق في المتوالية. يمكن إجراء عملية تحديد الفئات المخروطية من كوثيا التي لها حلقات مفرطة التغير من11آ؛ 12 13 111 و112 باستخدام أدوات التشكيل الحيوية المتاحة بصورة عاملة على صفحة ‎ull‏ تحت عنوان: ععدم لاط متط مطء/وطم/عاد.ع018.مصاما./».إن ‎ZA‏ من هذا _البرنامج يوضح متطلبات الوحدة 0 البنائية الأساسية في ملف البيانات. في ملف البيانات المذكور فإن واضع الوحدة البنائية يتم توضيحها مع الأحماض الأمينية التي تم السماح لها عند كل موضع. تم إعطاء متوالية المنطقة المتغيرة الخاصة بالجسم المضاد محل الاهتمام في شكل مدخلات وتتم محاذاتها أولاً مع متوالية الجسم المضاد التوافقية ‎la‏ لما هو موجود في مخطط ترقيم كابات. يستخدم تحليل الطيات المخروطية مجموعة الصور الأساسية الخاصة بالوحدة البنائية الأساسية التي تم اشتقاقها بواسطة الطريقة الآلية التي تم تطويرها
5 بواسطة ‎and Thornton (Martin et al.‏ متصما/ا»1996) 263:800-815 ‎Mol.
Biol.‏ .1 )). وباستخدام جزه 17 من السلالة الجرثومية البشرية المعينة 7 المعروف بأنه يستخدم نفس التوليفة من الطيات المخروطية من ‎HI‏ و112 ‎Lil‏ و12 (و13) فإنه يمن تحديد عضو العائلة الخاصة بالتوافق الجيد في سياق التشابه الخاص بالمتوالية. وياستخدام أدوات المعلومات الأحيائية يمكن تحديد النسبة المئوية لتطابق المتوالية بين متواليات الحمض الأميني الإطارية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير 0 خفيف السلسلة من الجسم المضاد محل الاهتمام والمتواليات المناظرة التي تم تشفيرها باستخدام السلالة الجرثومية البشرية ولكن قد يتم بالفعل استخدام عملية المحاذاة اليدوية للمتواليات أيضاً. يمكن أن يتم تحديد متواليات الجلويولين المناعي البشرية من العديد من قواعد بيانات البروتين ‎(fie‏ قاعدة بيانات ‎(/http://vbase.mre-cpe.cam.ac.uk) VBase‏ أو قاعدة بيانات ‎(Pluckthun/Honegger(http ://www .bioc.unizh.ch/antibody/Sequences/Germlines‏ .ولكي تتم 5 مقارنة المتواليات البشرية مع المناطق ‎V‏ من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة في خوازم محاذاة المتوالية . محل الاهتمام. مثل تلك المتاحة . في مواقع الويب . مثل
‎Allswww.expasy.ch/tools/#align‏ يمن استخدامها ‎(Sly‏ يمكن استخدام المحاذة اليدوية مع إمكانية تنفيذ مجموعة محدودة. تم اختيار متواليات السلسلة البشرية الجرثومية الثقيلة والخفيفة من العائلات التي لها نفس التوليفات من الطيات المخروطية ومع نفس الدرجة من التشابه مع المناطق الإطارية 1؛ 2 و3 من كل سلسلة تم اختيارها وتمت مقارنتها مع المنطقة المتغيرة محل الاهتمام؛ وأيضاً فإن المنطقة الإطارية 4 يتم فحصها في مقابل المناطق الجرثومية البشرية ‎JK 5 TH‏ أو ‎JL‏ ‏لاحظ أنه في حساب التشابه في النسبة المئوية الإجمالية للوحدات البنائية من المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2 المنطقة الإطارية 3 فإنه يتم التقييم باستخدام متوالية الطابق الأقرب من عائلة السلالة الجرثومية البشرية مع توليفات متطابقة محددة من الطيات المخروطية. يتم فقط وضع الوحدات ‎dsl)‏ المختلفة من التطابق الأقرب أو الأعضاء الأخرى من نفس العائلة مع نفس التوليفات من 0 الوحدات المخروطية في درجات ‎NB)‏ - استثناء أي اختلافات مشفرة للبادئ ‎(primer‏ وعلى الرغم من ذلك ولغرض المعالجة البشرية فإن الوحدات البنائية في المناطق الإطارية المطابقة لأعضاء من عائلات السلالات الجرثومية الأخرى والتي ليس لها نفس التوليفة من الطيات المخروطية يمكن أن يتم اعتبارها بأنها ‎ddd‏ على الرغم من حقيقة أن تلك الوحدات قد تم إعطاؤها درجة ‎"ald‏ طبقاً للشروط المحكمة التي تم وصفها أعلاه. تعتمد تلك الفرضية على طريقة "الخلط والتوافق” الخاصة بالمعالجة 5 البشرية والتي يكون بها كل من المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2« المنطقة الإطارية 3 والمنطقة الإطارية 4 قد تمت مقارنتها بصورة منفصلة بالنسبة لمتوالية ‎ADL‏ الجرثومية البشرية المتطابقة وجزء معالج بشرياً وبالتالي تشتمل على توليفة من المناطق الإطارية كما تم إجراؤه بواسطة ‎Qu‏ وزملاؤه ‎Qu)‏ ‎Clin.
Cancer Res. 5:3095-3100 (1999¢et la.‏ (( ومن وزملاؤة ‎Mol.
Immunol. «Ono et al.)‏ 1999( 36:387-395(( + ويمكن أن يتم تحديد حدود المناطق الإطارية الفردية باستخدام نظام ترقيم آي ام جي تي ‎IMGT‏ والذي يكون عبارة عن تعديل لنظام الترقيم من كوثيا ‎et al.)‏ عمة0م209-1. :27 ‎NAR‏ ‎٠ imgt.cines.fr).¢212 (1999)‏ قد تشتمل أجسام مضادة بها تماثل بشري عالي على حلقات مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية بها طيات بشرية أو غير بشرية قياسية؛ كما ستتم مناقشته بالتفصيل ‎Lad‏ يلي. في أحد النماذج عالي يمكن الحصول على حلقة مفرطة التغير واحدة على الأقل أو منطقة تحديد 5 التمامية إما في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد الذي به تماثل بشري أو تكون مستمدة من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة لجسم مضاد
غير بشري؛ على سبيل المثال جسم مضاد تقليدي من أحد أنواع فصيلة الجمليات؛ وتتميز ببنية طيات قياسية متوقعة أو فعلية حيث تكون مطابقة إلى حد كبير لبنية طيات قياسية ‎lly‏ تحدث في أجسام مضادة بشرية. من الثابت في المجال أنه على الرغم من أن متواليات الحمض الأميني الرئيسية ذات الحلقات فائقة التغير الموجودة في كل من نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة التي تشفرها سلالة جرثومة بشرية؛ هي بحكم التعريف؛ عالية التغيرء إلا أن جميع الحلقات مفرطة التغير؛ باستثناء منطقة تحديد التمامية 113 لنطاق متغير ثقيل السلسلة؛ تتخذ عدداً قليلاً من الهيئات البنيوية؛ التي تسمى الطيات القياسية ‎Tramontano et al.
Proteins 6:382-¢ J.
Mol.
Biol. 196:901-917 (1987)«(Chothia et al.‏ )1989( 94 والتي تعتمد على كل من طول الحلقة مفرطة التغير ووجود ما يُسمى بوحدات الحمض الأميني القياسية ‎Mol.
Biol. 196:901-917 (1987))«(Chothia et al.‏ .1 . ومن الممكن تحديد البنيات القياسية الفعلية للحلقات فائقة التغير في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة السليمة عن طريق التحليل البنيوي ‎structural analysis‏ (مثل التصوير البلوري بالأشعة السينية ‎Xray‏ ‎٠ (crystallography‏ ولكن من الممكن أيضاً ‎gall‏ بالبنية القياسية ‎canonical structure‏ على أساس الوحدات البنائية الأساسية للحمض الأميني التي تميز بنية معينة ‎WS)‏ سيلي بيانه). وفي الحقيقة؛ فإن 5 النمط المحدد للوحدات البنائية الذي يحدد كلبنية قياسية يشكل 'توقيعاً” يتيح التعرف على البنية القياسية في الحلقات مفرطة التغير لنطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة لبنية غير معروفة؛ وبالتالي يمكن التنبؤ بالبنيات القياسية حسب متوالية الحمض الأميني فقط. من الممكن تحليل بنيات الطيات القياسية ‎Lind)‏ بها لحلقات فائقة التغير لأية متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة في جسم مضاد به ‎Bla‏ بشري ‎Je‏ وذلك باستخدام أنظمة حسابية متوفرة للعامة | من المواقع | ‎«www.bioinf.org.uk/abs/chothia.html‏ .و ‎«www.biochem.ucl.ac.uk/~martin/antibodies.html‏ و ‎.www.bioc.unizh.ch/antibody/Sequences/Germlines/Vbase_hVk.html‏ وهذه الأدوات تستح ببحث متواليات نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة المراد محاذاتها ضد متواليات نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة البشري لبنية قياسية معروفة؛ والتنبؤ بالبنية القياسية 5 لللحلقات فائقة التغير للمتوالية محل التساؤل. وفي ‎Alls‏ نطاق متغير ثقيل السلسلة؛ فمن الممكن تسجيل الحلقتين 111 و112 على أنهما يتميزان ببنية
طي قياسية 'مطابقة إلى حد كبير" لبنية طي قياسية معروفة بحدوثها في الأجسام المضادة البشري إذا
تحقق المعيار الأول على الأقل من المعيارين التاليين» ويفضل تحققهما معاً:
1- طول مشابه؛ محدد بعدد الوحدات البنائية؛ لأقرب فئة بنيوية قياسية بشرية.
‎Gildas -2‏ بنسبة 733 على ‎(JY)‏ ويفضل 750 على الأقل مع الوحدات البنائية الأساسية للحمض الأميني الموصوفة للفئات البنائية القياسية المناظرة 111 و112 البشرية.
‏(تجدر الإشارة إلى أنه لتحقيق أهداف التحليل السابق فإنه تتم معالجة الحلقتين ‎HI‏ و112 ‎SIS‏ على حده
‏ومقارنة كل منهما مع أقرب فئة بنيوية قياسية بشرية).
‏يعتمد التحليل السابق على ‎gol)‏ بالبنية القياسية للحلقات 111 و112 للجسم المضاد المعني. فإذا كانت
‏البنيات الفعلية للحلقات 111 و112 في الجسم المضاد المعني معروفة؛ على سبيل المثال بناء على
‏0 التصوير البلوري بالأشعة السينية؛ فإن الحلقات ‎HI‏ و112 في الجسم المضاد المعني يمكن تسجيلها كذلك على أن لها بنية طيات قياسية 'مطابقة إلى حد كبير” لبنية الطيات القياسية المعروفة بحدوثها في أجسام مضادة بشرية إذا كان طول الحلق يختلف عن طول أقرب 43 بنائية قياسية بشرية موافقة (نمطياً ب 1+ أو +2 حمض أميني) لكن البنية الفعلية لحلقات 111 و112 في الجسم المضاد المعني تطابق بنية الطية البشرية القياسية.
‏5 الوحدات البنائية الأساسية للحمض الأميني الموجودة في الفئات البنيوية القياسية البشرية للحلقات مفرطة التغير الأولى والثانية لنطاقات متغير ثقيل السلسلة بشري ‎(2H HI)‏ التي وصفها ‎J. «Chothia et al.‏ ‎(Mol.
Biol. 227:799-817 (1992‏ التي تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية بكاملها كمرجع. بصفة خاصة؛ الجدول 3 في صفحة 802 من ‎et al‏ منطا0©؛ التي تندرج في الوثيقة الحالية كمرجع؛ حيث تورد الوحدات البنائية المفضلة للحمض الاميني عند الموقع الأساسي للبنيات القياسية ل111 الموجودة في
‏0 السلالة الجرثومية البشرية؛ بينما يضم الجدول 4 في صفحة 803 أيضاً المدرج كمرجع؛ الوحدات البنائية المفضلة للحمض الأميني عند المواقع الأساسية للبنيات القياسية لمنطقة تحديد التمامية 112 الموجودة في السلالة الجرثومية البشرية. في أحد النماذج؛ تتميز كل من 111 و211 في نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد الذي به تماثل بشري ‎Je‏ ببنية طيات قياسية متوقعة أو فعلية حيث تكون مطابقة إلى حد كبير ببنيات الطيات
‏5 القياسية والتي تحدث في أجسام مضادة بشرية. قد تشتمل أجسام مضادة بها ‎Bla‏ بشري عالي على نطاق متغير ثقيل السلسلة فيه الحلقات مفرطة
التغير 111 و112 تشكل توليفة من بنيات طيات قياسية مطابقة لتوليفة من البنيات القياسية المعروفة بحدوثها في نطاق متغير ثقيل السلسلة سلالة جرثومية بشرية واحدة على الأقل. وقد لوحظ أن توليفات معينة فقط من بنيات طيات قياسية عند 111 و112 تحدث بالفعل في نطاقات متغير ثقيل السلسلة التي تشفرها السلالة الجرثومية البشرية. في نموذج يمكن الحصول على 111 و112 في النطاق ‎VH‏ من الجسم المضاد تتميز بتماثل بشري عالي من نطاق متغير ثقيل السلسلة من نوع غير بشري؛ على سبيل المثال أحد أنواع فصيلة الجمليات؛ ‎Lady‏ تشكل توليفة من بنيات الطيات القياسية المتوقعة أو الحقيقية المطابقة لتوليفة من بنيات الطيات القياسية المعروفة بحدوثها في سلالة جرثومية بشرية أو نطاق متغير ثقيل السلسلة مطفر جمدياً. في نماذج غير مقيدة يمكن الحصول على ‎HI‏ و112 في نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد الذي به ‎Bla‏ بشري عالي من نطاق متغير ثقيل السلسلة لنوع غير بشري؛
0 على سبيل المثال أحد أنواع فصيلة الجمليات؛ وتشكل واحد من التالية توليفات طيات قياسية: 1-1 1- 2< 3-1 احي 4-1 2-ل 1-3 و 5-3 قد يحتوي جسم مضاد به تماثل بشري عالي على نطاق متغير ثقيل السلسلة يتميز بكل من نسبة تطابق متوالية عالية/تشابه متوالية مع نطاق متغير ثقيل السلسلة بشري؛ وحيث يحتوي على حلقات مفرطة التغير يتميز بتشابه بنيوي مع نطاق متغير ثقيل السلسلة بشري.
5 قد يكون مميز للطيات القياسية الموجودة في111 و112 في نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد الذي به ‎Bila‏ بشري عالي؛ وتوليفة منهاء كي تكون "صحيحة بالنسبة ل متوالية سلالة جرثومية لنطاق متغير ثقيل السلسلة بشري تمثل أقر بتطابق مع نطاق متغير ثقيل السلسلة من الجسم المضاد الذي به تماثل بشري ‎le‏ من حيث إجمالي نسبة تطابق متوالية الحمض الأميني الأساسي. فعلى سبيل المثال؛ إذا كانت أقرب تطابق متوالية هو مع نطاق متغير ثقيل السلسلة 3 3 ‎heavy chain variable domain‏
‎(VH3) 0‏ جرثومة بشرية؛ فقد يكون من المميز ل111 و112 تشكيل توليفة من الطيات القياسية التي تحدث أيضاً بشكل طبيعي في نطاق متغير ثقيل السلسلة 3 بشري. قد يكون لذلك أهمية خاصة عندما تحتوي الأجسام المضادة التي بها تماثل بشري عالي المستمدة من نوع غير بشري؛ على سبيل المثال أجسام مضادة تحتوي على نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة التي تكون مستمدة من أجسام مضادة مأخوذة من الجمليات تقليدية؛ وبخاصة أجسام مضادة تحتوي على نطاقات متغير ثقيل
‏5 السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة الجملية المتوافق مع البشر. لذلك؛ في أحد النماذج قد يتميز نطاق متغير ثقيل السلسلة للجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 الذي
به ‎Sila‏ بشري عالي بتطابق متوالية أو تشابه متوالية قدره 780 أو أكثرء 785 أو ‎ST‏ « 790 أو أكثر؛ أو أكثرء 797 أو أكثرء أو حتى799 أو حتى 7100 مع نطاق متغير ثقيل السلسلة البشري عبر المناطق الإطارية المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2؛ المنطقة الإطارية 3 والمنطقة الإطارية 4؛ و إضافة إلى ذلك يتم الحصول على 111 و 112 في نفس الجسم المضاد من نطاق متغير ثقيل السلسلة 5 غير بشري (على سبيل المثال مستمد من أحد أنواع فصيلة الجمليات)؛ لكن تشكل توليفة من بنيات الطيات القياسية المتوقعة أو الحقيقية التي تكون نفس توليفة الطية القياسية المعروفة بحدوثها بشكل طبيعي في نفس نطاق متغير ثقيل السلسلة البشري. في نماذج أخرى؛ يتم الحصول على كل من ‎LI‏ و 12 في نطاق متغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد به تماثل بشري عالي من نطاق متغير خفيف السلسلة لنوع غير بشري (على سبيل المثال نطاق 0 متغير خفيف السلسلة مستمد من الجمليات)؛ و يتميز كل منها ببنية طيات قياسية متوقعة أو فعلية ‎Cus‏ ‏تكون مطابقة إلى حد كبير إلى بنية طيات قياسية والتي تحدث في أجسام مضادة بشرية. كما هو الحال مع النطاقات متغير ثقيل السلسلة؛ فإن الحلقات مفرطة التغير لنطاق متغير خفيف السلسلة لكل من الأنواع 7120:5028 ‎VKappas‏ قد تتخذ عددا محدداً من الأشكال أو البينات القياسية؛ والتي تتحدد جزئياً حسب الطول و أيضاً حسب وجود الوحدات البنائية الأساسية للحمض الأميني في 5 مواضع قياسية معينة. داخل الجسم المضاد المعني الذي به تماثل بشري عالي؛ فإن الحلقات 11آ؛ 12 و13 يتم الحصول عليها من نطاق متغير خفيف السلسلة لنوع غير بشري؛ على سبيل المثال أحد أنواع فصيلة الجمليات؛ يمكن تسجيلها على أنها تتميز ببنية طيات قياسية 'مطابقة إلى حد كبير” لبنية طيات قياسية معروفة بحدوثها في أجسام مضادة بشرية إذا تحقق المعيار الأول على الأقل ويفضل كلا المعيارين التاليين: 0 1. طول مشابه؛ يحدده عدد الوحدات البنائية؛ لأكثر فئة بنائية بشرية مطابقة. 2. نسبة تطابق 733 على ‎(JY)‏ ويبفضل نسبة تطابق 750على الأقل مع الوحدات الأساسية البنائية للحمض الأميني الموصوفة للفئات البنيوية القياسية ل 1.1 أو ‎(L2‏ إما من سجل ‎Lambda‏ أو 008ه1716. (تجدر الإشارة إلى أنه لتحقيق أهداف التحليل السابق تتم معاملة 1,1 و12 كلا على حده ومقارنة كل منها مقابل أقرب فئة بنائية قياسية بشرية توافقاً) 5 يعتمد التحليل السابق على التنبؤ بالبنية القياسية للحلقات 1.آ؛ و12 و13 في نطاق متغير خفيف السلسلة من الجسم المضاد المعني. إذا كانت البنية الفعلية للحلقات 1.1آ؛ و12؛ و13 معروفة؛ على سبيل
المثال بناءً على التصوير البلوري بالأشعة السينية؛ فإنه يمكن تسجيل الحلقات 1.1 12؛ أو 13 المستمدة من الجسم المضاد المعني أيضاً على أنها تتميز ببنية طيات قياسية 'مطابقة إلى حد كبير” لبنية طيات قياسية معروفة بحدوثها في أجسام مضادة بشرية إذا كانت طول الحلقة يختلف عن طول أكثر فئة بنائية قياسية بشرية تطابقاً (نمطياً بمقدار 12 أو +2 حمض أميني) لكن البنية الفعلية لحلقات فصيلة الجمليات تطابق طية بشرية قياسية. لقد تم وصف الوحدات البنائية الأساسية للحمض الأميني الموجودة في الفئات البنائية القياسية البشرية لمنطقة تحديد التمامية لنطاقات ‎VKappa 3 VLambda‏ بشرية في ‎267-<Morea ct al.
Methods‏ :20 ‎J.
Mol.
Biol.« Martin et al. 3 279 (2000)‏ ¢)1996( 263:800-815 . كما تم وصف السجل البنائي لنطاق ‎VKappa‏ في )1995( 14:4628-4638 ‎«Tomlinson et al.
EMBO J.‏ وسجل نطاق ‎VLambda‏ ‏10 في ‎(1996)«Williams et al.
J.
Mol.
Biol.‏ 264:220-232 . ومحتويات جميع هذه الوثائق تندرج في الوثيقة الحالية بكاملها كمرجع. قد تشكل 11 و12 في نطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد التي بها تمائل بشري عالي توليفة من بنيات طيات قياسية متوقعة أو حقيقية؛ المطابقة لتوليفة بنيات الطيات القياسية المعروفة بحدوثها في نطاق متغير خفيف السلسلة سلالة جرثومية بشرية. في نماذج غير مقيدة قد يشكل 1.1 و 12 في النطاق 5 710000 للجسم المضاد الذي به تماثل بشري عالي ‎Je)‏ سبيل ‎JU‏ جسم مضاد يحتوي على نطاق متغير خفيف السلسلة مستمد من الجمليات أو صورة متوافقة مع البشر منها) واحداً من توليفات الطيات القياسية التالية: 7-11 ‎12-11¢B)¢ 14-7(AC)eBeA)7=13‏ »14-11 و 12-12 (كما تم تعريفها في ‎(1996)Williams et al.
J.
Mol.
Biol. 264:220 -32‏ و كما تظهر في ‎(http://www .bioc.uzh.ch/antibody/Sequences/Germlines/VBase_hVK html‏ . في ‎zo‏ غير مقيدة قد تشكل 1.1 و 12 في النطاق ‎Vkappa‏ واحدة من توليفات الطيات القياسية التالية: 1-2 1-3 1-4 و 1-6 ‎WS)‏ تم تعريفها في 1995( 14:4628-38 ‎(Tomlinson et al.
EMBO J.‏ و كما تظهر ‎http://www .bioc.uzh.ch/antibody/Sequences/Germlines/VBase_hVK.html)‏ في نموذج ‎HAT‏ ¢ قد تتميز جميع ‎(LI‏ 12 و13 ‎ADEN‏ في نطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد التي بها تماثل بشري عالي ببنية بشرية إلى حد كبير. من المفضل أن يتميز نطاق متغير خفيف السلسلة 5 .من الجسم المضاد الذي به تماثل بشري عالي بكل من نسبة تطابق متوالية عالية/تشابه متوالية مع نطاق متغير خفيف السلسلة بشري؛ كما أن الحلقات مفرطة التغير في نطاق متغير خفيف السلسلة تتميز
بتشابه بنيوي مع نطاق متغير خفيف السلسلة بشري.
في أحد النماذج؛ قد يتميز نطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 الذي به
تماثل بشري عالي بتطابق متوالية 780 أو أكثرء 785 أو أكثر؛ 790 أو أكثرء 795 أو أكثرء 797 أو
أكثر؛ أو حتى799 أو حتى 7100 مع نطاق متغير خفيف السلسلة بشري عبر المناطق الإطارية
المنطقة الإطارية 1» المنطقة الإطارية 2 المنطقة الإطارية 3؛ والمنطقة الإطارية 4؛ و إضافة إلى ذلك
قد يشكل 1,1 لحلقة مفرطة التغير و12 حلقة مفرطة التغير تليفة من بنيات الطيات القياسية المتوقعة أو
الحقيقية التي تكون هي نفس توليفة الطيات القياسية المعروفة بحدوثها بشكل طبيعي في نفس نطاق
متغير خفيف السلسلة البشري.
لذلك بالطبع من الممكن أن يتميز نطاق متغير ثقيل السلسلة بنسبة تطابق متوالية عالية/تشابه متوالية مع 0 نطاق متغير ثقيل السلسلة بشري؛ و أيضاً تشابه بنيوي مع حلقات مفرطة التغير لنطاق متغير ثقيل
السلسلة بشري حيث يمكن دمجه مع نطاق متغير خفيف السلسلة تتميز بنسبة تطابق متوالية عالية/تشابه
متوالية مع نطاق متغير خفيف السلسلة بشري؛ وأيضاً تشابه بنيوي مع حلقات مفرطة التغير ‎Gail‏
متغير خفيف السلسلة بشري لتوفير أجساماً مضادة بها تماثل بشري عالي يحتوي على أزواج نطاق
متغير ثقيل السلسلة/ نطاق متغير خفيف السلسلة (على سبيل المثال أزواج نطاق متغير ثقيل السلسلة/ 5 نطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات) بأقصى تشابه بنيوي مع أزواج نطاق متغير ثقيل
السلسلة ‎lay‏ متغير خفيف السلسلة المشفرة البشرية.
“جسم مضاد وحيد السلسلة” أو “شظية جسم مضاد وحيد السلسلة- ” جسم مضاد وحيد السلسلة أو شظية
جسم مضاد وحيد السلسلة تعني شظية متغيرة وحيدة السلسلة. جسم مضاد وحيد السلسلة عبارة عن
بروتين اندماج نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة للجسم المضاد المتصلة عن 0 طريق رابط.
ب. أجسام مضادة مستقبل إنترلوكين -22
يتعلق الاختراع ‎Mall‏ بأجسام مضادة وشظايا منها رابطة لمولد الضد التي ترتبط تحديداً بمستقبل
إنترلوكين-22 البشري. تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا الجسم المضاد الموصوفة
في الوثيقة الحالية بخواص؛ وبخاصة توليفة من الخواص» المميزة وفي حالات معينة تفوق الأجسام 5 المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالفن السابق. سيتم الآن وصف هذه خواص والخصائص بمزيد
من التفاصيل.
القمم اللاصقة لمستقبلات إنترلوكين-22 ترتبط الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي بقمة لاصقة داخل البروتين مستقبل إنترلوكين-22 البشري الذي لا يحتوي على وحدة الحمض الأميني البنائية تيروسين 60 أو 7760 حيث يتم تعريف موضع الحمض الأميني هذا بالإشارة إلى متواليات مستقبل إنترلوكين-22 المبينة في الشكل 2 (المتوالية رقم: 71). لقد سبق تعريف هذه الوحدة البنائية المكشوفة السطح من مستقبل إنترلوكين-22 باعتبارها ضرورية لربط جزيء الربط وكما ورد في الوثيقة الحالية (راجع بصفة خاصة المثال 8). يرتبط الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 280.346.7537 الخاص بالفن السابق (كما تم وصفه في براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011) بقمة لاصقة بما في ذلك هذه الوحدة البنائية. ترتبط الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا ربط ‎alge‏ الضد وفقاً للاختراع 0 الحالي على نحو مدهش بقمة لاصقة لا تحتوي على هذه الوحدة البنائية الأساسية؛ ومع ذلك في نماذج معينة؛ تكون قادرة على إعاقة ارتباط إنترلوكين 22 و/ أو تثبيط إنترلوكين 22 و/ أو إرسال إشارات يتوسطه إنترلوكين 20 عبر مستقبل إنترلوكين -22. ترتبط الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية بقمة لاصقة لا تحتوي على تيروسين 60. كما سبق الإشارة ‎cad]‏ تيروسين 60 موجودة داخل الحلقة 12 في النطاق ‎D1‏ ‏5 للمستقبل. في نماذج معينة؛ القمة اللاصقة التي بها الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو ‎Was‏ ‏ربط مولد الضد ترتبط توجد ‎Loja‏ على الأقل في النطاق 02 لمستقبل إنترلوكين-22 أي بين الوحدات ‎dsl‏ 125 و228 للمتوالية رقم: 71. في نماذج معينة؛ ترتبط القمة اللاصقة التي بها الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا ربط مولد الضد يشتمل على واحدة على الأقل؛ اثنين على الأقل ؛ ثلاثة على الأقل الوحدات البنائية للحمض الأميني الموجودة داخل النطاق 72 للبروتين مستقبل 0 إنترلوكين-22. تم تصنيف سطح الارتباط البيني بين النطاق خارج الخلية مستقبل إنترلوكين -22 وجزيء ‎all‏ الخاص به إنترلوكين 22 في ((2008) 1333-1344 :)16(9 ‎Cus Jones et al. (Structure‏ تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية بكاملها. ويتكون النطاق خارج الخلية -11 من خمس حلقات (12-1.6)؛ وهناك وحدات بنائية معينة منها ضرورية لتوسط التفاعلات مع الوحدات البنائية مكشوفة السطح على جزيء الريط 5 (إتترلوكين 22. يوضع تيروسين 60 داخل الحلقة 12 التي تكونها الوحدات البنائية التي في النطاق ‎D1‏ ‏للبروتين مستقبل إنترلوكين-22. في معقد إنترلوكين 22/ مستقبل إنترلوكين-22 القابل للذويان» تدخل
الوحدة البنائية تيروسين 60 في تجويف صغير على إنترلوكين 22 المتكون داخل الموقع 1 من جزيء ‎al‏ وبشكل أكثر ‎dass‏ يتم إنشاء هذا التجويف عند تقاطع الحلزون و والحلقة ‎of‏ وهما بنيتين ثانويتين مميزتين موجودتين في جزيء الربط إنترلوكين 22. تشكل الوحدات ‎Lys162 dill)‏ و610166 للحلزون و على جزيء ‎ball‏ روابط هيدروجينية ‎hydrogen bonds‏ مع ‎OH‏ لتيروسين 60 الخاص بمستقبل إنترلوكين-22 ومن ثم يعتبر تيروسين 60 وحدة بنائية أساسية تتوسط التفاعل بين الموقع [أ
على جزيء الريط والنطاق 71 للمستقبل. ترتبط الأجسام المضادة والشظايا الرابطة لمولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية بقمة لاصقة لا تشمل تيروسين 60. وكما سبق الإشارة ‎cad]‏ فإن تيروسين 60 يوضع داخل الحلقة 12 في النطاق ‎DI‏ ‏للمستقبل. وفي نماذج معينة؛ توضع القمة اللاصقة التي ترتبط بها الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين -
0 22 أو شظاياها الرابطة لمولد الضد ‎Lida‏ على الأقل في النطاق ‎D2‏ لمستقبل إنترلوكين-22؛ أي بين الوحدتين البنائيتين 125 و228 للمتوالية رقم: 71. ‎Ay‏ نماذج معينة؛ تشتمل القمة اللاصقة التي ترتبط بها الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظاياها الرابطة لمولد الضد على واحدة على الأقل؛ أو اثنين على الأقل ؛ أو ثلاثة على الأقل من الوحدات البنائية للحمض الأميني الموجودة داخل النطاق ‎D2‏ ‏للبروتين مستقبل إنترلوكين-22.
5 يعتقد المخترعون أن حقيقة أن الأجسام المضادة وشظاياها الرابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع الحالي ترتبط بقمة لاصقة لا تتضمن تيروسين 60 مرتبطة بحالة تأثيرها. فمن المعتقد أن الأجسام المضادة وشظاياها الرابطة لمولد الضد تتفاعل مع النطاق 02 لمستقبل إنترلوكين 22 من بين عدة أمور أو بالإضافة إلى التفاعل مع النطاق 01. ومن المعروف أن النطاق 02 مستقبل إنترلوكين 22 يدخل في التفاعل مع المستقبل المشترك. ودون الرغبة بالتقيد بنظرية معينة؛ فإن المخترعين يعتقدون أن جزيئات
0 الجسم المضاد الخاصة بالاختراع الحالي قد تكون لها حالتي من حالات التأثيرء منع الارتباط بجزيء الريط ومنع التفاعل مع المستقبل المشترك. قد تكون القمة اللاصقة التي ترتبط بها الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع عبارة عن قمة لاصقة مستقيمة (أي قمة لاصقة تتكون من متوالية مستقيمة من حمض أميني داخل مولد الضد المستهدف) أو قمة لاصقة تصاوغية ‎gl)‏ قمة لاصقة تتكون من حمض أميني ولا تتجاور
5 بالضرورية في مولد الضد المستهدف). ألفة الارتباط
في نماذج معينة؛ ترتبط أجسام مضادة وشظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع بمستقبل إنترلوكين-22
بشري بألفة عالية.
كما يتم استخدامه في الوثيقة ‎clad)‏ فإن مصطلح “الألفة” أو “ألفة الارتباط” يجب تفسيره حسب المعنى
المعتاد في المجال في سياق ربط الجسم المضاد؛ء ويعكس قوة و/ أو ثبات الريط بين مولد ضد و موقع
ربط على جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد.
يمكن تحديد ألفة ارتباط جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد لمولد الضد الخاص به بطريقة
‎danas‏ باستخدام الطرق المعروفة في المجال. على سبيل المثال؛ تقيس أجهزة ‎BIACORE‏ الألفة حسب
‏ثبات بروتين مستهدف ‎target protein‏ أو مولد ضد على شريحة مستشعر حيوي ‎biosensor chip‏ بينما
‏يتم إمرار الجسم المضاد أو شظية الجسم المضاد فوق الهدف المثبت تحت ظروف تدفق معينة. وتنتج 0 هذه التجارب قياسات ‎kon‏ و.1؛ يمكن ترجمتها إلى قيم ‎Kp‏ حيث ‎Kp‏ هو ثابت الاتزان لاتفصال مولد
‏الضد مع جسم مضاد أو شظيته. وكلما قلت ‎(Kp dad‏ كلما زادت ‎dad‏ تفاعل الريبط بين الجسم المضاد
‏ومولد الضد المستهدف له.
‏كما سبق الإشارة إليه؛ ألفة جسم مضاد يمكن تحديد عن طريق ‎(BIACORE‏ على سبيل المثال باستخدام
‏البروتوكول الموصوف في مكان آخر من الوثيقة الحالية (راجع ‎JB‏ 6). يمكن تحديد ألفة الجسم 5 المضاد أو شظية رابطة ‎algal‏ ضد لمستقبل إنترلوكين-22 البشري؛ كما تم قياسه باستخدام ‎(BIACORE‏
‏باستخدام ‎Line‏ مستقبل إنترلوكين-22 كامل الطول ناتج عن ‎sae‏ الارتباط كما تم وصفه على سبيل
‏المثال» في المثالين 3 و6.
‏قد تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع
‏بمعدل استبعاد 0127816 ‎(opr)‏ لمستقبل إنترلوكين-22 أقل من 2 ‎x‏ 10 -3 ث 1 أقل من 1.5 ‎x‏ 10 0 -3 ث ا أقل من 1.2 »3-10 ث ! عند اختبارهما كجسم مضاد أحادي النسيلة؛ على سبيل المثال
‏عندما ألفة نطاق متغير ثقيل السلسلة مقترن مع نطاق متغير خفيف السلسلة يتم اختيار في سياق لجزيء
‏الجلوبيولين المناعي جاما1. في نماذج مفضلة؛ الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها
‏رابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع يتميزان بمعدل استبعاد ‎(Kor)‏ لمستقبل إنترلوكين-22 أقل من 2.5
‎x‏ 10 -4 ث ل وبفضل أقل من 1.5 ‎x‏ 10 *ث © والأفضل أقل من 1 ‎x‏ 10 ح*ث ! عند 5 اختبارهما كجسم مضاد أحادي النسيلة؛ على سبيل المثال عندما يتم اختيار ألفة نطاق متغير ثقيل
‏السلسلة مقترن مع نطاق متغير خفيف السلسلة في سياق جزيء الجلوبيولين المناعي جاما1.
قد تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع بمعدل استبعاد ‎(kor)‏ لمستقبل إنترلوكين-22 يتراوح من 1 ‎x‏ 10 "ث -1 إلى 2 »10 ثث ل وبفضل يتراوح من 1 ‎X‏ 10 ”*ث ' إلى 2.5 » 10 ‎T&T‏ والأفضل يتراوح من ‎x1‏ 10 5 ث ‎٠‏ ‏إلى 1 »10 ح4اث !.
قد تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع بقيمة ‎Kp‏ أقل من 3 ‎Vga * 10 X‏ أقل من 2.5 ‎Ysa * 10 X‏ ¢ أقل من ‎XT‏ 10 * مولار. في نماذج مفضلة؛ الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع تتميز بقيمة ‎Kp‏ أقل من 5 ‎«oe !" 10 X‏ وفضل أقل من 2 »* 10 "! ‎Noe‏ « ويفضل أقل من 1.5 ‎x‏ 10" مولار.
0 تثيط ربط إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 وإرسال الإشارات البعدي في نماذج معينة؛ ترتبط أجسام مضادة وشظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع بمستقبل إنترلوكين-22 بشري وتثبط ارتباط جزيء الربط بهذا المستقبل. وهذا أمر مدهش وبخاصة لأن الأجسام المضادة الموصوفة في الوثيقة الحالية ترتبط بقمة لاصقة لا تحتوي على تيروسين 60. كما سبق وصفه.؛ فإنه قد تم تحديد تيروسين 60 لقد على أنه وحدة بنائية ضرورية لربط جزيء الربط ولذلك فإن الأجسام المضادة
5 مستقبل إنترلوكين-22 و شظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي مدهشة في قدرتها على تثبط ربط جزيء الربط و في نماذج معينة؛ تثبط إرسال الإشارات بعد مستقبل إنترلوكين-22. قد تربط الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد مستقبل إنترلوكين-22 بشري وتثبط ارتباط إنترلوكين 2 أو تثبط ربط إنترلوكين 20. من المفضل ‎of‏ تثبط الأجسام المضادة ‎Lady‏ ربط مولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية ربط إنترلوكين 22 و إنترلوكين 20 بمستقبل إنترلوكين -22.
0 يحدث ارتباط جزيء ‎Tall‏ بمستقبل إنترلوكين-22 على الخلايا التي تعبر إما عن المستقبل المشترك مستقبل إنترلوكين-2-10 أو مستقبل إنترلوكين-2-20 تغيراً شكلياً في معقد المستقبل بحيث يتم تنشيط مسارات إرسال الإشارات بعد المستقبل. قد يثبط الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد كما تم وصفها في الوثيقة الحالية تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين-22 أو قد تثبط تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح
5 "تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين -22” يجب اعتباره أنه يعني سلسلة إرسال الإشارات تحدث بعد معقد مستقبل إنترلوكين-22 عند ارتباط جزيء الريط إنترلوكين 22 بالمعقد مستقبل
إنترلوكين -22/ مستقبل إنترلوكين-2-10. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح “تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22” يجب اعتباره أنه يعني سلسلة إرسال الإشارات تحدث بعد مستقبل إنترلوكين-22 عند ارتباط جزيء الريط إنترلوكين 20 بالمعقد مستقبل إنترلوكين -22/ مستقبل إنترلوكين -2-20. يمكن قياس التنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين-22 في الخلايا أو سلالات الخلايا المعبرة عن كل من مستقبل إنترلوكين-22 و المستقبل المشترك مستقبل إنترلوكين-2-10؛ على سبيل المثال سلالة الخلايا 31- مستقبل إنترلوكين-22 البشري الموصوفة في ‎Dumoutieret al.J Biol‏ ‎<284(39):26377-84¢Chem. 2009 Sep 25‏ التي تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية بكاملها. إنترلوكين 2 يحدث إيقافاً للنمو في سلالة الخلايا ‎“BW‏ مستقبل إنترلوكين-22 البشري ولذلك يمكن تحديد تنشيط 0 إتترلوكين 22 المعتمد على مستقبل إنترلوكين 22 في سلالة الخلايا هذه بقياس تكاثر الخلايا ‎CBW‏ ‏مستقبل إنترلوكين-22 البشري؛ على سبيل المثال كما تم وصفه في المثال 6. في نماذج معينة؛ الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية يتميزان ب 1650 (التركيز الذي يتحقق عنده 750 تثبيط التنشيط) في تجرية تكاثر خلية معتمدة على إتترلوكين 22 أقل من 650بيكو مولار؛ ويفضل أقل من 600بيكو مولار. من المفضل أن تكون تجربة التكاثر المعتمدة على الخلايا تجرية تشمل 5 سلالة الخلايا 18177-مستقبل إنترلوكين -22 البشري كما تم وصفها في الوثيقة الحالية. يمكن قياس تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22 في الخلايا أو سلالات الخلايا المعبرة عن كل من مستقبل إنترلوكين-22 والمستقبل المشترك مستقبل إنترلوكين-2-20؛ على سبيل المثال سلالة ‎WA‏ 19063 -مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب الموصوفة في الوثيقة الحالية و أيضاً في 25 ‎«284(39):26377-84¢Dumoutieret al.J Biol Chem. 2009 Sep‏ التي 0 تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية بكاملها. إنترلوكين 20 يحدث ‎AS‏ في سلالة الخلايا ‎~Baf3‏ ‏مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب و لذلك يمكن تحديد تنشيط إنترلوكين 20 المعتمد على مستقبل إنترلوكين 22 في سلالة ‎WIAD‏ هذه بقياس تكاثر الخلايا 19083 مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب؛ على سبيل المثال كما تم وصفه في المثال 6. في نماذج معينة؛ الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد الموصوفة في الوثبقة الحالية يتميزان ب ‎ICs0‏ ‏5 (لتركيز الذي يتحقق عنده 750 من تثبيط التنشيط) في الخلية تجرية تكاثر ‎WIA‏ معتمدة على إنترلوكين 0 أقل من 1 نانو مولار؛ ويفضل أقل من 800 بيكو مولار. من المفضل أن تكون ‎das‏ التكاثر
المعتمدة على ‎DAN‏ تجرية ‎dedi‏ سلالة الخلايا ‎Baf3‏ -مستقبل إنترلوكين-22 البشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب كما تم وصفها في الوثيقة الحالية. إضافة إلى تجارب تكاثر السابق وصفهاء يمكن قياس التنشيط ال معتمد على إنترلوكين 22 و/ أو إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22 باستخدام تجارب خلوية ‎dba‏ على سبيل المثال تجرية فسفرة ‎STAT3 phosphorylation 5‏ كما تم وصفها في براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011. في نماذج مفضلة؛ ترتبط الأجسام المضادة أو شظايا ربط ‎alge‏ الضد وفقاً للاختراع الحالي بمستقبل إنترلوكين-22 بشري وتثبط كل من تنشيط إنترلوكين 22 المعتمد على مستقبل إنترلوكين-22 وتنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22. في تلك النماذج؛ قد يكون النشاط المثبط أو "المعادل" للأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد مكافئ الفاعلية لكل من التنشيط المعتمد على إنترلوكين 22 0 وترلوكين 20. بديلاً عن ذلك؛ فإن النشاط المتبّط أو المعزّل للأجسام المضادة أو شظايا ريط مولد الضد قد يكون أكبر لتنشيط مستقبل إنترلوكين-22 الذي يتوسطه واحد من جزيئات الريط بالمقارنة بتنشيط مستقبل إنترلوكين-22 الذي يتوسطه جزيء الربط ‎AY)‏ في نماذج معينة؛ قد تتميز الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع بنشاط ‎(geil‏ مثبط لتنشيط إنترلوكين 22 المعتمد على مستقبل إنترلوكين-22 عن تنشيط إنترلوكين 20 المعتمد على مستقبل إنترلوكين-22. مع ذلك؛ في "تك النماذج. النشاط التثبيطي للجسم المضاد أو شظية رابطة ‎algal‏ ضد لتنشيط المعتمد على إنترلوكين 2 لمستقبل إنترلوكين-22 سيكون ‎Whaat‏ أقل من 5 أضعاف؛ ويفضل أقل من 4 أضعاف؛ والأفضل أقل من ضعفي النشاط التثبيطي للجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد لتنشيط معتمد على إنترلوكين 0 لمستقبل إنترلوكين-22. التفاعلية التبادلية ‎Cross-reactivity‏ ‏0 في نماذج معينة؛ قد تتفاعل الأجسام المضادة أو شظايا ربط ‎alge‏ الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية التي تريط مستقبل إنترلوكين-22 بشري تبادلياً مع واحدة أو أكثر من مماثلات نوعية من مستقبل إنترلوكين-22؛ على سبيل المثال متمائلات مستقبل إنترلوكين -22 ذات أصل من الرئيسيات. في نماذج معينة؛ فإن الأجسام المضادة أو شظايا ربط ‎alge‏ الضد ‎Gy‏ للاختراع الحالي لا ‎delim‏ تفاعلا متبادلاً مع مستقبل إنترلوكين-22 الفأري. بديلاً عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ قد ترتبط الأجسام 5 المضادة أو شظايا ربط مولد الضد بواحدة أو أكثر من متماثلات مستقبل إنترلوكين-22 ذات أصل من الرئيسيات؛ على سبيل المثال بروتينات مستقبل إنترلوكين-22 من قرود الريسوس والرياح. قد تكون
— 6 5 — التفاعلية التبادلية مع متماثلات أنوع أخرى مميزة جداً في تطوير واختبار أجسام مضادة علاجية. على سبيل المثال» تم دائماً إجراء اختبارات السمية قبل الإكلينيكية للأجسام المضادة علاجية في أنواع من الرئيسيات بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر قرود الريسوس والرياح. التفاعلية التبادلية مع هذه المتمائلات النوعية قد تكون مميزة فى تطوير أجسام المضادة كمرشحات إكلينكية. أجسام مضادة مستمدة من الجمليات في نماذج معينة الخاصة بالاختراع» قد تشتمل الأجسام المضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد الموصوفة في الوثيقة الحالية على حلقة مفرطة التغير أو منطقة تحديد تمامية واحدة على الأقل يتم الحصول عليها من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة من أحد الأنواع في عائلة فصيلة الجمليات. بصفة خاصة؛ فإن الجسم المضاد أو شظية رابطة لمولد ضد قد تشتمل على نطاقي 0 نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو ‎ov‏ أو مناطق تحديد التمامية لهاء يتم الحصول عليها عن ‎Gob‏ ‏التحصين النشط للجمليات ‎cae LY)‏ على سبيل المثال اللاماء بمولد ضد مستقبل إنترلوكين-22 أو شظية منه. المقصود ب "حلقة مفرطة التغير أو منطقة تحديد تمامية يتم الحصول عليها من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة من أحد الأنواع في فصيلة الجمليات" أن حلقة مفرطة التغير أو 5 1 منطقة تحديد التمامية تحتوي على متوالية ‎aan‏ أمينى تكون مطايقة 3 أو مطايقة إلى حد كبير 3 مع متوالية الحمض الأمينى لحلقة مفرطة التغير أو منطقة تحديد التمامية يشفرها جين جلوبيولين مناعى جملي. في هذا السياق فإن "جين الجلوبيولين المناعي" يشمل جينات سلالات جرثومية؛ جينا جلوييولين مناعى يخضعان ‎sale‏ الترتيب؛ و ‎Load‏ جينات مطفرة جسدياً. لذلك؛ فإن متوالية الحمض الأمينى لحلقة مفرطة التغير أو منطقة تحديد التمامية التي يتم الحصول عليها من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو 0 نطاق متغير خفيف السلسلة لأحد أنواع فصيلة الجمليات قد تكون مطابقة لمتوالية الحمض الأميني لحلقة مفرطة التغير أو منطقة تحديد التمامية الموجودة في جسم مضاد تقليدي من حيوان ناضج من فصيلة الجمليات. المصطلح "التي يتم الحصول ‎"gle‏ في هذا السياق تتضمن علاقة بنيوية؛ بمعنى أن حلقات مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية للجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 تجسد متوالية حمض أميني (أو صور مصغرة منها) تم تشفيرها في الأساس بجين جلوبيولين مناعي من فصيلة الجمليات. مع ذلك؛ 5 فإن ذلك لا يعني بالضرورة وجود علاقة معينة تتعلق بعملية الإنتاج المستخدمة في تحضير الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين -22.
— 5 7 —
قد تكون الأجسام المضادة المستمدة من الجمليات مستقبل إنترلوكين-22 مستمدة من أي نوع من
الجمليات بما في ذلك اللاماء والجمل العربي ‎cdromedary‏ الألبكة ‎calpaca‏ الوير ‎cvicuna‏ والغوناق
‎<guanaco‏ والجمل.
‏نمطياً تكون الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 التي تشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو مناطق تحديد التمامية لهاء عبارة عن بولى ببتيدات
‏معبر عنها بعودة الارتباط الجيني؛ وقد تكون بولي ببتيدات خيمرية. وبيشير مصطلح "بولي ببتيد خيمري
‎Was ‏بتجاور شظيتين أو أكثر من‎ Lay ‏إلى بولي ببتيد صناعي (غير طبيعي)‎ "chimeric polypeptide
‏الببتيد التي لا تحدث بشكل متجاور. وبشمل هذا التعريف على بولي ببتيدات خيمرية ‎lel"‏ تنشا
‏بتجاور شظايا ببتيد التي يشفرها نوعين أو أكثرء على سبيل المثال جمليات وبشر.
‏0 قد تشتمل مناطق تحديد التمامية المستمدة من الجمليات على واحدة من متواليات مناطق تحديد التمامية التى تظهر على أنها المتواليات أرقام: 6 و 13 (منطقة تحديد التمامية 3 ثقيلة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 4 و 11 (منطقة تحديد التمامية 2 ثقيلة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 2 و 9 (منطقة تحديد التمامية 1 ثقيلة السلسلة) أو واحد من متواليات مناطق تحديد التمامية التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 20 و 27 (منطقة تحديد التمامية 3 خفيفة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 18 25 و 47 (منطقة
‏5 تحديد التمامية 2 خفيفة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 16 و 23 (منطقة تحديد التمامية 1 خفيفة السلسلة). في أحد النماذج يمكن الحصول على كل نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو كل نطاق متغير خفيف السلسلة من نوع في عائلة فصيلة الجمليات. في نماذج معينة؛ قد يشتمل نطاق متغير ثقيل السلسلة المستمد من الجمليات على متوالية حمض ‎Jed‏ يتم اختيارها من المتواليات أرقام:29 و31؛ بينما قد
‏0 تشتمل نطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات على متوالية حمض أميني يتم اختيارها من المتواليات أرقام: 30 32 و 62. ثم يمكن تعريض نطاق متغير ثقيل السلسلة المستمد من الجمليات و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة المستمد من الجمليات إلى هندسة البروتين» حيث يتم إدخال واحد أو أكثر من استبدالات إدراجات أو حذوفات الحمض الأميني؛ في متوالية الحمض الأميني الجملية. من المفضل أن ‎Jods‏ هذه التغيرات المعدلة استبدالات حمض أمينى بالنسبة للمتوالية الجملية. وتشمل تلك
‏5 التغيرات "التوافق مع ‎"dull‏ أو "عمل سلالة جرثومية 8000110108" حيث يتم استبدال واحدة أو أكثر من الوحدات البنائية للحمض الأميني في نطاق مشفر من الجمليات نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق
متغير خفيف السلسلة بوحدات بنائية مكافئة من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة متجانس بشري مشفر. في نماذج معينة؛ نطاق متغير ثقيل السلسلة المستمد من الجمليات قد تتميز ب 790 795 797 798 أو 799 على ‎JY)‏ نسبة تطابق مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 29 أو 31. ‎Shy‏ عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ نطاق متغير خفيف السلسلة المستمد من الجمليات قد تتميز ب 790» 795 797 798 أو 799 على الأقل نسبة تطابق مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 30 32 أو 62. يمكن استخدام نطاقات متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة الجملية المعزولة يتم الحصول عليها عن طريق التحصين النشط لحيوان من فصيلة الجمليات (على سبيل المثال اللاما) بمولد ضد مستقبل إنترلوكين-22 بشري كأساس لهندسة البولي ببتيدات الرابطة لمولد الضد وفقاً للاختراع. بدءاً من 0 نطاقات متغير ثقيل السلسلة الجملية السليمة ونطاق متغير خفيف السلسلة من الممكن تعديل واحدة أو أكثر من استبدالات؛ إدراجات أو حذوفات الحمض الأميني التي تبتعد عن المتوالية الجملية البادئة. في نماذج معينة؛ تلك قد توجد الاستبدالات؛ إدراجات أو حذوفات في المناطق الإطارية لنطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة. ويكمن الهدف من تلك التغيرات في متوالية الحمض الأميني الرئيسية في خفض الخواص غير المرغوبة (على سبيل المثال توليد المناعة في عائل بشري (ما يُسمى 5 بالتوافق مع ‎of dll‏ مواقع عدم تجانس منتج محتملة أو عدم ثباته (إدخال جليكوزيل ‎«glycosylation‏ ‏إزالة أميد ‎«deamidation‏ أزمرة ‎cisomerisation‏ الخ.) أو لتعزيز خاصة أخرى مطلوية للجزيء (كقابلية الذويان» الثبات؛ الإتاحة الحيوية ‎(bioavailability‏ في نماذج ‎(Sa ga]‏ هندسة التغيرات في متوالية حمض أميني رئيسية في واحدة أو أكثر من حلقات مفرطة التغير ‎of)‏ مناطق تحديد التمامية) لنطاقات متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة جملية يتم الحصول عليها عن طريق التحصين 0 النشط. تلك يمكن إدخال التغيرات من أجل تعزيز ألفة ارتباط مولد الضد و/ أو لخفض الخواص غير المرغوبة؛ على سبيل المثال توليد المناعة في عائل بشري (ما يُسمى بالتوافق مع البشر)؛ مواقع عدم تجانس منتج محتملة أو عدم ثباته؛ إدخال جليكوزيل» إزالة ‎cand‏ أزمرة؛ الخ.؛ أو لتعزيز خاصة أخرى مطلوية للجزيء كقابلية الذويان؛ الثبات؛ الإتاحة الحيوية؛ الخ. لذلك؛ في أحد النماذج؛ يوفر الاختراع صورة الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 ‎Cua‏ يحتوي على 5 استبدال حمض أميني واحد على الأقل في منطقة إطارية أو منطقة تحديد التمامية لأي من نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة مقارنة بنطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف
السلسلة مستمد من الجمليات؛ من أمثلتها على سبيل المثال لا الحصر نطاقات متغير ثقيل السلسلة الجملية التي تشتمل على متواليات حمض أميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 29 و 31؛ ونطاق متغير خفيف السلسلة الجملية التي تشتمل على متواليات حمض أميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 30 32 أو 62.
في نماذج أخرى؛ يتم توفير جزيئات جسم مضاد ‎"grad!‏ يشتمل على نطاقات متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات (أو صورة مهندسة منها) و واحدة أو أكثر من النطاقات الثابتة من جسم مضاد غير جملي؛ على سبيل المثال نطاقات ثابتة مشفرة بشرية (أو صور مهندسة منها). في تلك النماذج من المفضل أن يتم الحصول على كل من نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة من نفس النوع من فصيلة الجمليات؛ على سبيل المثال قد تكون كل من
0 نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مأخوذ من لاما جلاما أو يكون كل من نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة قد تكون من لاما باكوس (قبل إدخال تبان متوالية الحمض الأميني المعدلة). في تلك النماذج قد يكون كل من نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمداً من حيوان واحد؛ وبخاصة حيوان واحد تم تحصينه تحصيناً نشطاً بمولد ضد مستقبل إنترلوكين -22.
5 كبديل عن التغيرات الهندسية في متوالية الحمض الأميني الرئيسية لنطاقات نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو ‎V‏ فصيلة الجمليات؛ يمكن ‎Jie‏ حلقات مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية فردية مستمدة من الجمليات؛ أو توليفات منهاء من نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة جملية ونقلها إلى إطار بديل (أي من غير الجمليات)؛ على سبيل المثال إطار نطاق متغير ثقيل السلسلة / نطاق متغير خفيف السلسلة بشري؛ عن طريق تطعيم مناطق تحديد التمامية. ‎diay‏ خاصة؛ في نماذج
0 غير مقيدة قد يتم اختيار مناطق تحديد التمامية المستمدة من الجمليات من مناطق تحديد التمامية المحتوية على متواليات حمض أميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 6 و 13 (منطقة تحديد التمامية 3 ثقيلة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 4 و 11 (منطقة تحديد التمامية 2 ثقيلة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 2 و 9(منطقة تحديد التمامية 1 ثقيلة السلسلة) أو واحد من متواليات مناطق تحديد التمامية التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 20 و 27 (منطقة تحديد التمامية 3 خفيفة السلسلة)؛ أو
5 المتواليات أرقام: 18 25 و 47 (منطقة تحديد التمامية 2 خفيفة السلسلة) أو المتواليات أرقام:16 و 23 (منطقة تحديد التمامية 1 خفيفة السلسلة).
قد تتخذ الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 التي تشتمل على نطاقات متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو مناطق تحديد التمامية لها نماذج مختلفة حيث يوجد كل من نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة. المصطلح "الجسم المضاد " يتم استخدامه في الوثيقة الحالية بأعم معانيه ويشمل على سبيل المثال لا الحصر؛ أجسام مضادة وحيدة النسيلة (بما في ذلك أجسام مضادة تامة الطول وحيدة النسيلة)؛ أجسام مضادة متعددة النسائل؛ أجسام مضادة متعددة النوعية (على سبيل ‎(Jd)‏ أجسام مضادة ثنائية النوعية)؛ طالما تميزت بالنوعية المناعية المناسبة لبروتين مستقبل إنترلوكين-22. المصطلح "الجسم المضاد وحيد النسيلة" كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية يشير إلى جسم مضاد يتم الحصول عليه من مجموعة من أجسام مضادة متجانسة إلى حد ‎nS‏ ‏أي الأجسام المضادة الفردية تشتمل على المجموعة وتكون متطابقة باستثناء الطفرات الممكنة التي قد
0 توجد بكميات بسيطة. تكون الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عالية النوعية؛ حيث تتوجه ضد موقع مولد ضد وحيد. فضلاً عن ذلك؛ على العكس من تحضيرات الأجسام المضادة التقليدية (متعددة النسائل ‎(polyclonal‏ التي تشمل نمطياً أجسماً مضادة مختلفة تتجه ضد محددات ‎aed)‏ لاصقة) مختلفة على مولد الضد؛ فإن كل جسم مضاد أحادي النسيلة يتجه ضد محدد أو ‎dad‏ لاصقة واحدة على مولد الضد. تشتمل ‎LAE‏ الجسم المضاد" على ‎gia‏ من جسم مضاد كامل الطول؛ بصفة ‎dele‏ رابط لمولد الضد أو
5 نطاق متغير منه. أمثلة شظايا الجسم المضاد تشمل ‎Fab’s (F(ab)2 Fab’ (Fab‏ ثنائية النوعية؛ ‎Fv Lad,‏ أجسام مضادة ثنائية؛ أجسام مضادة مستقيمة؛ جزئيات أجسام مضادة وحيدة السلسلة؛ شظية متغيرة وحيدة السلسلة و أجسام مضادة متعددة النوعية متكونة من شظايا الجسم المضاد (راجع ‎Nature Biotechnol. 23:1126-36 (2005¢Holliger and Hudson‏ ( حيث تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية كمرجع).
0 في نماذج غير مقيدة؛ قد تشتمل الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 المشتملة على نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو مناطق تحديد التمامية لها على نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1 و/ أو نطاق المنطقة الثابتة خفيف السلسلة؛ حيث تكون متوالية الحمض الأميني لها بشرية تماماً أو بشرية إلى حد كبير .حيث يكون البولي ببتيد الرابط لمولد الضد الخاصة بالاختراع هو جسم مضاد لاستخدام علاج بشري؛ وهو نمطي لكل منطقة ثابتة من الجسم المضاد؛ أو
5 على الأقل جزءِ منهاء بحيث يحتوي على متوالية حمض أميني بشرية تماماً أو إلى حد كبير. لذلك؛ واحدة أو أكثر من أو أية توليفة من نطاق ثابت تقيل السلسلة 1؛ المنطقة المفصلية؛ نطاق ثابت تقيل
السلسلة 2 نطاق ‎cul‏ ثقيل السلسلة 3 و نطاق المنطقة الثابتة خفيف السلسلة (ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 4 4 ‎(CH4) heavy chain constant domain‏ إن وجد) قد تكون بشرية بالكامل أو إلى حد كبير بالنسبة إلى متوالية الحمض الأميني الخاصة بها. على نحو مميزء فإن تطاق ثابت ثقيل السلسلة 1؛ المنطقة المفصلية؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 ونطاق المنطقة الثابتة خفيف السلسلة (ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 4 إن وجد) قد تحتوي جميعاً على متوالية حمض أميني بشرية بالكامل أو إلى حد كبير. في سياق المنطقة الثابتة من جسم مضاد متوافق مع البشر أو خيمري؛ أو شظية جسم مضاد؛ فإن المصطلح ‎Ana‏ إلى حد كبير" يشير إلى مطابقة متوالية حمض أميني قدرها على الأقل 790؛ أو على الأقل 92 أو على الأقل 795( أو على الأقل 97 أو على الأقل 799 مع منطقة ثابتة بشرية. المصطلح “متوالية حمض 0 أميني بشري” في هذا السياق يشير إلى متوالية حمض أميني يشفرها جين جلوبيولين مناعي بشري؛ يشمل سلالة جرثومية؛ وجينات معاد ترتيبها ومطفرة جسدياً. كما يشمل الاختراع أيضاً بولي ببتيدات تشتمل على نطاقات ثابتة لمتوالية ‎"dd‏ تم تعديلها. عن طريق واحدة أو أكثر من الإضافات؛ أو الحذوفات أو استبدالات الحمض الأميني بالنسبة لمتوالية بشرية؛ باستثناء النماذج التي تنص صراحة على وجود منطقة مفصلية “بشرية تماماً”. 5 وجود منطقة مفصلية “بشرية تماماً” في الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع قد يكون مفيدا لتقليل إلى أقصى حد تولد المناعة ولأمثلة ثبات الجسم المضاد. كما تم ‎aly‏ في مكان ‎AT‏ من الوثيقة ‎Adal)‏ من الممكن إدخال واحدة أو أكثر من استبدالات؛ إدراجات أو حذوفات الحمض أميني المنطقة الثابتة ثقيلة السلسة و/ أو خفيفة السلسلة؛ وبخاصة داخل المنطقة شظية قابلة للتبلور. قد تؤدي استبدالات الحمض الأميني إلى استبدال الحمض الأميني بحمض 0 أميني مختلف طبيعي؛ أو غير طبيعي حمض أميني معدل. كما يتم السماح بتعديلات بنيوية أخرى؛ ‎Jie‏ ‏التغيرات في نمط المعالجة بالجليكوزيل (مثلاً بإضافة أو حذف مواقع إدخال الجليكوزيل المربوطة ‎Na‏ أو ©0). وحسب الاستخدام المطلوب للجسم المضاد قد يكون المطلوب تعديل الجسم المضاد الخاص بالاختراع بالنسبة لخواص ربطه بمستقبلات شظية قابلة للتبلور؛ مثلاً لتعديل وظيفة المؤثر. على سبيل ‎JU‏ يمكن إدخال وحدة (وحدات) السيستين البنائية في المنطقة شظية قابلة للتبلورء ومن ثم السماح 5 بتكوين رابطة ثاني كبريتد بين السلاسل في هذه المنطقة. وقد يتميز الجسم المضاد متجانس الوحدات المنتج بهذه الطريقة بتحسن القدرة على الاستبطان ‎internalization capability‏ و/ أو زيادة قتل الخلايا
الذي يتوسطه المكمل ‎complement-mediated cell killing‏ وسمية الخلية المعتمدة على الجسم المضاد ‎.(ADCC) antibody-dependent cellular cytotoxicity‏ راجع ‎J.
Exp.
Med. 176:1191 «Caron et al.‏ 1195- و ‎J.
Immunol. 148:2918-2922 (1992)¢ Shopes‏ .3 . كما يشمل الاختراع الحالي مترافقات مناعية تشتمل على جسم مضاد كما تم وصف في الوثيقة الحالية مقترناً بعامل سام للخلية مثل عامل علاج مناعي؛ توكسين (مثل التوكسين ‎toxin‏ من أصل بكتيري ‎¢bacterial‏ أو طحلبي ‎«fungal‏ ‏نباتي؛ أو شظية منه)ء أو نظير مشع ‎Jie)‏ مترافق مشع ‎(radioconjugate‏ كما ‎(Say‏ تعديل مناطق شظية قابلة للتبلور لزيادة ‎(Chall jee‏ كما تم وصفه في ‎Nature Reviews: «Chan and Carter‏ ‎Immunology‏ الجزء 10؛ الصفحات 316-301 2010 المدرجة في الوثيقة الحالية كمرجع. في نموذج آخرء يتم تعديل منطقة شظية قابلة للتبلور لزيادة قدرة الجسم المضاد على توسط سمية الخلايا 0 المعتمدة على الجسم المضاد و/ أو لزيادة ألفة الجسم المضاد لمستقبل شظية قابلة للتبلور جاما ‎y‏ عن طريق تعديل واحد أو أكثر من الأحماض الأمينية. وفي نماذج بديلة. يمكن تعديل المنطقة شظية قابلة للتبلور بحيث لا توجد وظيفة المؤثر. وقد يكون الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 الخالي من وظيفة المؤثر شظية قابلة للتبلور مفيداً جداً كعامل إعاقة مستقبل. وفي نماذج معينة؛ قد تحتوي الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع على منطقة شظية قابلة للتبلور مستمدة من نمط متمائل الجلوييولين المناعي 5 جاما له وظيفة مؤثر منخفضة؛ مثل الجلوبيولين المناعي جاما4. كما يمكن تعديل مناطق شظية قابلة للتبلور المستمدة من الجلوبيولين المناعي جاما4 لزيادة الفائدة العلاجية؛ ‎Sle‏ عن طريق إدخال تعديلات تقلل تبادل الأذرع بين جزيئات الجلوبيولين المناعي جاما4 في جسم الكائن الحي. في نموذج آخرء يتم تعديل المعالجة بالجليكوزيل على الجسم المضاد. على سبيل المثال؛ يمكن تحضير جسم مضاد غير معالج بالجليكوزل (أي جسم مضاد يفتقر إلى المعالجة الجليكوزيل). ويمكن تعديل 0 المعالجة بالجليكوزيل ‎Sie‏ لزيادة ‎all‏ الجسم المضاد لمولد الضد المستهدف. ويمكن تحقيق هذه التعديلات الكريوهيدراتية» على سبيل ‎(JB‏ عن طريق تعديل واحد أو أكثر من مواقع المعالجة بالجليكوزيل داخل متوالية الجسم المضاد. على سبيل ‎(Jil‏ يمكن إجراء واحد أو أكثر من استبدالات الحمض الأميني التي تؤدي إلى إزالة واحد أو أكثر من مواقع المعالجة بالجليكوزيل لإطار منطقة متغيرة ومن ثم إزالة المعالجة بالجليكوزيل عند ذلك الموقع. ويمكن أن تؤدي هذه المعالجة بالجليكوزيل إلى زيادة 5 ألفة الجسم المضاد لمولد الضد. كما يتضمن الاختراع صور أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22 ذات نوع معدل من المعالجة
بالجليكوزيل؛ ‎Jie‏ جسم مضاد به نقص فوسكوزيل ‎fucosyl‏ به كميات منخفضة من الوحدات البنائية للفوسكوزيل أو جسم مضاد مزال منه الفوسكوزيل ‎LS‏ أو ‎Wa‏ (كما تم وصفه في ‎«Natsumeet al.‏ ‎Design Development and Therapy‏ عط 701.3 007-166 2009 ) أو جسم مضاد به ‎aL)‏ في بنيات عه601071 المتفرعة. لقد ثبت أن تلك الأنماط المعدلة الخاصة بالمعالجة بالجليكوزيل تزيد من نشاط سمية الخلية المعتمدة على الجسم المضاد للأجسام المضادة؛ وتنتج نمطياً تعزيزاً يصل إلى 10 أضعاف سمية الخلية المعتمدة على الجسم المضاد بالنسبة للجسم المضاد المكافئ المشتمل على نطاق شظية قابلة للتبلور بشري ‎Leal‏ ويمكن تحقيق تلك التعديلات الهيدروكربونية؛ على سبيل ‎«JB‏ عن طريق التعبير عن الجسم المضاد في خلية عائلة بآلة إنزيمية ‎enzymatic machinery‏ للمعالجة بالجليكوزيل المعدلة ‎WS)‏ وصفه ‎¢Yamane-Ohnuki and Satoh‏ جسم مضاد أحادي النسيلة 1: 3 236-230 0 2009). ومن أمثلة الأجسام المضادة غير المعالجة بالفوسكوزيل ذات وظيفة سمية الخلية المعتمدة على الجسم المضاد المعززة تلك التي يتم إنتاجها باستخدام تقنية ‎BioWa Incd Potelligent™‏ . قد يشمل الاختراع؛ في نماذج ‎dime‏ أجسام مضادة خيمرية من فصيلة الجمليات/ بشرية؛ و بصفة خاصة الأجسام المضادة الخيمرية التي يكون فيها نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة من متوالية جملية بالكامل (على سبيل المثال اللاما أو الألبكة) و باقي الجسم المضاد من 5 متوالية بشرية تماماً. قد تشمل الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أجساماً مضادة تشتمل على صور 'متوافقة مع البشر" أو "جرثومية السلالة" لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة مستمدة من الجمليات؛ أو مناطق تحديد التمامية لهاء و يتم الحصول على الأجسام المضادة الخيمرية الجملية/ البشرية؛ التي يحتوي فيها النطاقان نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة على واحد أو أكثر من استبدالات حمض أميني في المناطق الإطارية مقارنة بنطاقات متغير ثقيل 0 السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة الجملية عن طريق التحصين النشط لحيوان من فصيلة الجمليات بمولد ضد مستقبل إنترلوكين-22 أو شظية منه. ويعمل هذا "التوافق مع البشر" على زيادة نسبة تطابق المتوالية مع نطاقات متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة لسلالة جرثومية بشرية عن طريق استبدال الوحدات البنائية للحمض الأميني غير المتطابقة في نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة بادئ من فصيلة الجمليات بالوحدة البنائية المكافئة الموجودة في نطاق متغير ثقيل 5 السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة مشفر سلالة جرثومية بشرية. كما أن الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 قد تكون أيضاً أجساما مضادة مطعمة بمنطقة تحديد
التمامية حيث يتم تطعيم مناطق تحديد التمامية (أو حلقات مفرطة التغير) مستمدة من جسم مضاد ‎las‏ أو التي يشفرها جين جملي؛ على إطار نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة بشري؛ حيث يكون باقي الجسم المضاد أيضاً من أصل بشري تماماً. وقد تحتوي تلك الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 على مناطق تحديد التمامية المحتوية على متواليات حمض أميني التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 6 و 13 (منطقة تحديد التمامية 3 ثقيلة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 4 و 1 (منطقة تحديد التمامية 2 ثقيلة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 2 و 9 (منطقة تحديد التمامية 1 ثقيلة السلسلة) أو واحد من متواليات منطقة تحديد التمامية التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 20 و 27 (منطقة تحديد التمامية 3 خفيفة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 18 25 و 47 (منطقة تحديد التمامية 2
خفيفة السلسلة) أو المتواليات أرقام:16 و 23 (منطقة تحديد التمامية 1 خفيفة السلسلة).
0 .من السهل إنتاج الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخيمرية والمطعمة بمنطقة تحديد التمامية كما سبق وصفهاء وبخاصة أجسام مضادة تشتمل على حلقات مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية مستمدة من التحصين ‎hall‏ للجمليات؛ عن طريق معالجة الحمض النووي دي أوكسي ‎Gis‏ ‎(DNA) deoxyribonucleic acid‏ تقليدي ناتج عن عودة الارتباط الجيني وطرق التعبير؛ باستخدام خلايا عائلة ‎prokaryotic ily‏ وحقيقية ‎eukaryotic‏ معدلة لإنتاج البولي ببتيد المعني بما في ذلك على سبيل
5 المثال لا الحصر ‎WIA‏ البكتريا ‎bacterial cells‏ وخلايا الخميرة ‎cyeast cells‏ والخلايا الثديية ‎cmammalian cells‏ وخلايا الحشرات وخلايا النبات؛ حيث أن بعضها كما تم وصفه في الوثيقة الحالية وموضح في الأمثلة المصاحبة.
الأجسام المضادة المستمدة من الجمليات مستقبل إنترلوكين-22 تشمل صوباً حيث يتم الحصول على حلقة (حلقات) مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير
خفيف السلسلة من جسم مضاد جملي تقليدي ناشئ ضد مستقبل إنترلوكين-22 البشري؛ لكن حيث واحدة على الأقل من الحلقات مفرطة التغير المذكورة (مستمدة من الجمليات) حلقات أو مناطق تحديد التمامية يكون قد تم تعديلها لتشمل واحداً أو أكثر من استبدالات حمض أميني؛ إضافات أو حذوفات بالنسبة للمتوالية المشفرة بجين جملي. تلك التغيرات تشمل “التوافق مع البشر” للحلقات مفرطة التغير/ مناطق تحديد التمامية. ولا تزال حلقات مفرطة التغير / مناطق تحديد التمامية المستمدة من الجمليات التي تم
5 تعديلها بهذه الطريقة تتميز بمتوالية حمض أميني 'متطابقة إلى حد كبير" مع متوالية الحمض الأميني لحلقة مفرطة التغير / مناطق تحديد التمامية مشفرة من حيوان من فصيلة الجمليات. في هذا السياق؛
فإن "التطابق إلى حد كبير" قد لا يمسح بأكثر من واحد أو اثنين من حالات عدم تطابق متوالية الحمض الأميني مع حلقة مفرطة التغير / مناطق تحديد التمامية المشفرة بجين جملي. قد تحتوي نماذج خاصة للجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 على صور متوافقة مع البشر لمتواليات مناطق تحديد التمامية التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 6 و 13 (منطقة تحديد التمامية 3 ثقيلة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 4و 11 (منطقة تحديد التمامية 2 ثقيلة السلسلة) أو المتواليات أرقام: 2 و 9 (منطقة تحديد التمامية 1 ثقيلة السلسلة) أو واحد من متواليات مناطق تحديد التمامية التي تظهر على أنها المتواليات أرقام: 20 و 7 (منطقة تحديد التمامية 3 خفيفة السلسلة)؛ أو المتواليات أرقام: 18 25 و 47 (منطقة تحديد التمامية 2 خفيفة السلسلة) أو المتواليات أرقام:16 و 23 (منطقة تحديد التمامية 1 خفيفة السلسلة). قد تكون الأجسام المضادة المستمدة من الجمليات مستقبل إنترلوكين-22 التي توفرها الوثيقة الحالية من 0 أي نمط متماثل. ونمطياً قد تكون الأجسام المضادة المراد استخدامها لعلاج البشر من نوع الجلوبيولين المناعي ألفاء الجلوبيولين المناعي دلتاء الجلوبيولين المناعي إيبسلون؛ الجلوبيولين المناعي جاماء الجلوبيولين المناعي ميوء الجلوبيولين المناعي جاماء وفي هذه الحالة قد تنتمي إلى أي من الفئات الفرعية الأربعة الجلوبيولين المناعي جاما1؛ الجلوبيولين المناعي جاما2 أ و بء؛ الجلوبيولين المناعي جاما3 أو الجلوبيولين المناعي جاما4. داخل كل من هذه الفئات الفرعية يُسمح بإجراء واحد أو أكثر من 5 استبدالات؛ إدراجات أو حذوفات الحمض الأميني داخل جزءِ شظية قابلة للتبلورء أو إجراء تعديلات بنائية أخرى؛ على سبيل المثال لتعزيز أو خفض الوظائف المعتمدة على شظية قابلة للتبلور. الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 المفضلة - مستقبل إنترلوكين-22 -23009 و05223 وأجسام مضادة متعلقة بها الأجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا منها رابطة لمولد الضد وفقاً للاختراع الحالي 0 هي صور متوافقة مع البشر وصورة سلالة جرثومية من الأجسام المضادة المستمدة من الجمليات الموصوفة في الوثيقة الحالية. تتميز الصورة متوافق مع البشر وسلالة جرثومية بتماثل بشري عالي؛ ويفضل أن تتميز بتشابه ‎Mo‏ لجزيئات الجلوبيولين المناعي جاما البشري؛ والأفضل الجلوييولين المناعي جاما1. في نماذج معينة؛ تشتمل الأجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي على حلقات مفرطة التغير أو مناطق تحديد التمامية بها طيات بشرية أو غير 5 بشرية قياسية؛ كما تم وصفه في مكان ‎AT‏ من الوثيقة الحالية. قد تتميز الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وفقاً للاختراع الحالي بنسبة تطابق متوالية
الحمض الأميني قدرها 793 أو أكثر مع واحد أو أكثر من نطاقات متغير ثقيل السلسلة بشري؛ وبخاصة عبر المناطق الإطارية المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2؛ المنطقة الإطارية 3 والمنطقة الإطارية 4 بديلاً عن ذلك أو بالإضافة إلى ذلك؛ قد تتميز الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 بنسبة تطابق متوالية الحمض الأميني قدرها 796 أو أكثر مع واحد أو أكثر من نطاق متغير خفيف السلسلة البشرية؛ وبخاصة عبر المناطق الإطارية المنطقة الإطارية 1؛ المنطقة الإطارية 2؛ المنطقة الإطارية 3 والمنطقة الإطارية 4. قد تتميز الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وفقاً للاختراع الحالي بنسبة تطابق متوالية الحمض الأميني قدرها 793 أو أكثر مع واحد أو أكثر من نطاقات متغير ثقيل السلسلة بشري؛ ونسبة تطابق مدمجة لمتوالية الحمض الأميني قدرها 793 أو أكثر مع واحد أو أكثر من نطاقات متغير ثقيل السلسلة بشري و واحدة أو أكثر من نطاق متغير ثقيل السلسلة البشرية؛ 0 وبخاصة حيث يتم تحديد نسبة تطابق متوالية عبر المناطق الإطارية. بسبب التماثل البشري العالي؛ تتميز الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 التي توفرها الوثيقة الحالية بانخفاض تولد المناعة؛ كما دل على ذلك برنامج ‎lonza’sEpibaseTM platform‏ (درجة دي ‎Jl‏ ‏بي-1 ‎(DRB-1‏ باستخدام إعدادات ‎“HLA class II - Caucasian v3.0”‏ في نماذج معينة؛ تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع بدرجة ‎DRB-1‏ أقل من 950؛ وبفضل أقل من 850؛ والأفضل أقل من 750 الأكثر تفضيلاً أقل من 650. الأجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع هي أجسام مضادة وحيدة النسيلة تحتوي على منطقة مفصلية؛ نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 ونطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 من الجلوبيولين المناعي جاما بشري؛ ويفضل الجلوبيولين المناعي جاما1. في نماذج معينة؛ لا تحتوي منطقة شظية قابلة للتبلور للجسم المضاد وحيد النسيلة على وظيفة مؤثر أي تكون خالية. وهذا ‎wie‏ جداً في أجسام 0 المضادة إعاقة العلاجية. تتميز الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع بتوليفة من خواص تجعلها أفضل من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الموصوفة في الفن السابق. قد تتميز الأجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 وشظايا ربط مولد الضد الخاصة بالاختراع بالمجموعة التالية خواص: 5 (1) الارتباط بقمة لاصقة داخل بروتين مستقبل إنترلوكين-22 الذي لا يحتوي على تيروسين 60؛ (2) الارتباط بقمة لاصقة الموجودة جزئياً على الأقل في النطاق 02 للبروتين مستقبل إنترلوكين -22؛
(3) ارتباط عالي الألفة بمستقبل إنترلوكين -22 البشري؛ )4( تثبيط تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل إنترلوكين -22 وتنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22؛ (5) عدم التفاعلية التبادلية مع مستقبل إنترلوكين-22 الفأري؛ و (6) التفاعلية التبادلية مع مستقبل إنترلوكين-22 ربسوسي و/ أو رياحي. قد ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع بقمة لاصقة لا تحتوي على الوحدة البنائية الأساسية تيروسين 60. قد ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع بقمة لاصقة موجودة ‎Wise‏ على الأقل في النطاق 02 من مستقبل إنترلوكين-22؛ حيث يتراوح النطاق 02 من الحمض الأميني 125 إلى الحمض الأميني 228 للمتوالية رقم: 71. قد 0 ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع أيضاً بمستقبل إنترلوكين-22 بشري بألفة عالية؛ حيث تتميز نمطياً بمعدل استبعاد ‎Gus)‏ م1 يتم قياسه عن طريق ‎(BIACORE‏ ‏لمستقبل إنترلوكين-22 بشري أقل من 2.5 ‎x‏ 10 -4 ث -1 عند قياسها كجسم مضاد أحادي النسيلة. في نماذج معينة؛ ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع بمستقبل إنترلوكين-22 بشري ‎dally‏ عالية يتميز بمعدل استبعاد (حيث ‎kor‏ يتم قياسه عن طريق ‎(BIACORE‏ ‏5 لمستقبل إنترلوكين -22 بشري يتراوح من 1 * 10 -6 ث -1 إلى ‎x25‏ 10 -4 ث -1. في ‎gia‏ ‏معينة؛ ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين -22 الخاصة بالاختراع بمستقبل إنترلوكين- 2 بشري يتميز بقيمة ‎Kp‏ أقل من 5 ‎X‏ 10 -10 مولار. قد تثبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 أيضاً كل من إنترلوكين 22 وتنشيط إنترلوكين 0 المعتمد على مستقبل إنترلوكين-22؛ و نمطياً تتميز بنشاط مثبط لتنشيط معتمد على إنترلوكين 20 0 يكون أقل من أربع مرات أكبر من النشاط التثبيطي الظاهر للتنشيط المعتمد على إنترلوكين 22. قد ترتبط الاجسام المضادة المفضلة مستقبل إنترلوكين-22 بمستقبل إنترلوكين-22 بشري بألفة عالية وتتفاعل تبادلياً مع متماثلات أنواع مستقبل إنترلوكين-22 من قرود الريسوس والرياح؛ لكنها لا تتفاعل ‎Melis‏ متبادلاً مع مستقبل إنترلوكين-22 الفأري. في نماذج معينة؛ تشتمل الأجسام المضادة المفضلة وشظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي على 5 نطاق متغير ثقيل السلسلة واحد على الأقل و نطاق متغير خفيف السلسلة واحد على الأقل حيث نطاق متغير ثقيل السلسلة يشتمل على:
- منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎[VGFSGTYYSES]‏ المتوالية رقم: 6؛ - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([STYNDASNTAYSDSVKG]‏ المتوالية رقم: 36؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([SYDMN]‏ المتوالية رقم: 34؛ ونطاق متغير خفيف السلسلة يشتمل على: - منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([QSGSSSSNAV]‏ المتوالية رقم: 54؛ 0 - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎(GQNNRPS]]‏ المتوالية رقم: 47؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([QGGY YAH]‏ المتوالية رقم: 16. قد تشتمل الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد بها متواليات مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير 5 ثيل السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة كما تم تحديده أعلاه على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من المتوالية رقم: 63 و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من المتوالية رقم: 64. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد ‎call‏ حيث يشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة؛ حيث يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة على متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق 0 متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 63 و/ أو حيث يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة على نطاق متغير خفيف السلسلة به على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض 5 الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 64. في النماذج حيث يتم تعريف نطاقات الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد حسب نسبة تطابق
المتوالية مع متوالية مرجعية؛ قد يحتفظ نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة بمتواليات مناطق تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط داخل المناطق الإطارية. قد تشتمل الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد بها متواليات مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة كما تم تحديده أعلاه على سلسلة ثقيلة لجلوبيولين مناعي كامل الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 67 و/ أو سلسلة خفيفة لجلوبيولين مناعي تام الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 68. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة تشتمل على سلسلة ثقيلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو 0 على الأقل 197 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 67 و/ أو سلسلة خفيفة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 68. في النماذج ‎Cus‏ سلاسل الأجسام المضادة يتم تعريفها حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ 5 قد تحتجز السلسلة الثقيلة و/ أو الخفيفة متواليات مناطق تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط خارج مناطق تحديد التمامية. في نماذج معينة؛ تشتمل الأجسام المضادة المفضلة وشظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي على نطاق متغير ثقيل السلسلة واحد على الأقل و نطاق متغير خفيف السلسلة واحد على الأقل حيث نطاق متغير ثقيل السلسلة يشتمل على: 0 - منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([PPGPFKAHYNGAKY]‏ المتوالية رقم: 43؛ - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([GIHISGGITYYTDSVKG]‏ المتوالية رقم: 41؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎[SYFMS] 5‏ المتوالية رقم: 9 ونطاق متغير خفيف السلسلة يشتمل على:
- منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎(JASYRLYADYV]‏ المتوالية رقم: 27 - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎(EVNKRSS]]‏ المتوالية رقم: 59؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([TGTSSDIGSYNYVS]‏ المتوالية رقم: 57. قد تشتمل الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد بها متواليات مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة كما تم تحديده أعلاه على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من المتوالية رقم: 65 و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على أو 0 يتكون من المتوالية رقم: 66. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد ‎call‏ حيث يشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة و نطاق متغير خفيف السلسلة؛ حيث يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة على متوالية نطاق متغير ثقيل السلسلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها 5 المتوالية رقم: 65 و/ أو ‎Gus‏ يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة على نطاق متغير خفيف السلسلة به على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 66. في النماذج حيث يتم تعريف نطاقات الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد حسب نسبة تطابق 0 المتوالية مع متوالية مرجعية؛ قد يحتفظ نطاق متغير ثقيل السلسلة و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة بمتواليات مناطق تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط داخل المناطق الإطارية. قد تشتمل الأجسام المضادة وشظايا ربط مولد الضد بها متواليات مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير ثقيل السلسلة كما تم تحديده أعلاه على سلسلة ثقيلة لجلوبيولين مناعي كامل 5 الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 69 و/ أو سلسلة خفيفة لجلوبيولين مناعي تام الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 70.
في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة تشتمل على سلسلة ثقيلة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 69 و/ أو سلسلة خفيفة بها على الأقل 785 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 790 ‎5S‏ نبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 795 نسبة تطابق متوالية؛ أو على الأقل 797 798 أو 799 نسبة تطابق متوالية؛ مع متوالية الحمض الأميني التي تظهر على أنها المتوالية رقم: 70. في النماذج ‎Cus‏ سلاسل الأجسام المضادة يتم تعريفها حسب نسبة تطابق المتوالية مع متوالية مرجعية؛ قد تحتجز السلسلة الثقيلة و/ أو الخفيفة متواليات مناطق تحديد التمامية مطابقة لتلك الموجودة في المتوالية المرجعية بحيث يكون التباين موجوداً فقط خارج مناطق تحديد التمامية. 0 أجسام مضادة متنافسة تبادلياً كما يشمل الاختراع الحالي (وحيدة النسيلة) أجسام مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد 'تتنافس ‎Las‏ مع الأجسام المضادة أو شظايا ربط مولد الضد التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية. بصفة خاصة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضدء ‎Cus‏ ترتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 و وتتنافس تبادلياً مع أجسام مضادة أو شظايا منها رابطة 5 .ا لمولد الضدء ‎dua‏ يشتمل على توليفة من منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة و منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يتم اختيار التوليفة من المجموعة المكونة من: (1) منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 43؛ منطقة تحديد 0 التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 41؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 9؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 27؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 59؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة ‎Gua‏ يشتمل على المتوالية رقم: 57؛ و )2( منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ‎ALE‏ السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 13؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 11؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 9؛ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث
يشتمل على المتوالية رقم: 27؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 25؛ منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 23. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية أجساماً مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضدء حيث ترتبط بمستقبل السيتوكين مستقبل إنترلوكين-22 و وتتنافس تبادلياً مع أجسام مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد حيث يشتمل على نطاق متغير ثقيل السلسلة واحد على الأقل و نطاق متغير خفيف السلسلة واحد على الأقل حيث نطاق متغير ثقيل السلسلة يشتمل على: - منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([PPGPFKAHYNGAKY]‏ المتوالية رقم: 43؛ - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎[GIHISGGITYYTDSVKG] 0‏ المتوالية رقم: 41؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎[SYFMS]‏ المتوالية رقم: 9< ونطاق متغير خفيف السلسلة يشتمل على: - منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض 5 الأميني ‎JASYRLYADYV]‏ المتوالية رقم: 27 - منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎(EVNKRSS]]‏ المتوالية رقم:59؛ - منطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني ‎([TGTSSDIGSYNYVS]‏ المتوالية رقم: 57. 0 المتنافسة تبادلياً أجسام مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد قد تتنافس مع أجسام مضادة أو شظايا ربط مولد الضد المحتوية على نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من المتوالية رقم: 5 و/ أو نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على أو يتكون من المتوالية رقم: 66. المتنافسة تبادلياً أجسام مضادة أو شظايا منها رابطة لمولد الضد قد تتنافس مع أجسام مضادة ذات سلسلة ثقيلة لجلوبيولين مناعي كامل الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 5 69 و/ أو سلسلة خفيفة لجلوبيولين ‎elie‏ تام الطول حيث يشتمل على أو يتكون من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 70.
في سياق وفقاً للاختراع الحالي؛ الأجسام المضادة المتنافسة تبادلياً هي تلك التي تريط مستقبل إنترلوكين - 2 عند موقع (مواقع) عندها ترتبط الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الحالية. ويمكن تحديد تنافس الأجسام المضادة (وحيدة النسيلة) أو شظايا منها رابطة لمولد الضدء على سبيل ‎Jad‏ عن طريق تجرية تنافس جسم مضاد. على سبيل المثال قد يرتبط ‎alge‏ ضد مستقبل إنترلوكين-22 أو شظية منه بدعامة صلبة. ثم تتم إضافة جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد الضد وفقاً للاختراع الحالي وجسم مضاد وحيد النسيلة أو شظية رابطة لمولد ضد منه مشكوك في قدرته على التنافس مع الجسم المضاد الخاص بالاختراع. ويتم ترقيم أحد الجزيئين. فإذا ارتبط المركب المرقم وغير المرقم لفصل وتمييز مواقع على مولد الضد لإنترلوكين 22؛ فإن المركب المرقم سيرتبط بنفس المستوى سواء وجد المركب المشكوك في تنافسه أم لم يوجد. مع ذلك؛ فإذا كانت مواقع التفاعل متشابهة (أو متداخلة)؛ فإن المركب 0 غير المرقم سيتنافس؛ وستقل كمية المركب المرقم المرتبط بمولد الضد. فإذا وجد المركب غير المرقم بكمية كبيرة؛ أو قليلة ‎dan‏ إن وجدء فإن المركب المرقم سوف يرتبط. ولتحقيق أغراض الاختراع الحالي؛ فإن الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المتنافسة أو شظاياها الرابطة لمولد الضد هي تلك التي تقلل من ارتباط الأجسام المضادة الحالية ب مستقبل إنترلوكين-22 بحوالي 750؛ حوالي 760؛ حوالي 7270 حوالي 780 حوالي 785 حوالي 790؛ حوالي 795؛ أو حوالي 799. تعد تفاصيل إجراءات تلك 5 التجارب التنافسية معروفة في المجال وقد توجد» على سبيل المثال» في (1988) ‎Harlow and Lane‏ ‎Cold Spring ¢ Cold Spring Harbor Laboratory Press¢ A Laboratory Manual¢Antibodies‏ ‎ISBN 0-87969-314-¢ pages 567-569¢ New York¢Harbor‏ . وقد تكون تلك التجارب كمية حسب استخدام الأجسام المضادة المنقاة. ويتم إنشاء منحنى قياسي عن طريق معايرة جسم مضاد مقابل ذاته؛ أي؛ يتم استخدام نفس الجسم المضاد في كل من المرقم والمتنافس. تتم معايرة قدرة الجسم المضاد وحيد 0 النسيلة المتنافس غير المرقم أو شظية مولد الضد ‎die‏ على تثبيط ارتباط الجزيء المرقم بالطبق. ويتم عمل رسم بياني بالنتائج» وتتم مقارنة التركيزات اللازمة لتحقيق الدرجة المطلوية من تثبيط الارتباط. البولي نيوكليوتيدات المشفرة للأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 يوفر الاختراع أيضاً جزيئات البولي نيوكليوتيد تشفر الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع أو شظايا منهاء ‎Lad‏ نواقل التعبير يحتوي على متواليات النيوكليوتيد المذكورة الخاصة 5 بالاختراع المرتبط بقوة بالمتواليات المنظمة التي تسمح بالتعبير عن الأجسام المضادة أو ‎Was‏ منها في خلية عائلة أو نظام تعبير خالي من ‎(WAY‏ وخلية عائلة أو نظام تعبير خالي من الخلايا يحتوي على
ناقل التعبير هذا. في نماذج معينة؛ قد يشتمل البولي نيوكليوتيد الذي يشفر الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع على واحدة أو أكثر من متواليات البولي نيوكليوتيد التي تظهر على أنها المتواليات أرقام:52؛ 3 5 76 77 78 79 80 أو 81 التي تشفر متوالياتها نطاقات متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22. في نماذج معينة؛ قد يشتمل البولي نيوكليوتيد الذي يشفر الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع على صورة متوالية تشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة أو نطاق متغير خفيف السلسلة وظيفي للجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22؛ حيث تتميز صورة المتوالية ب 80 85 90 795« 797 أو 799 على الأقل نسبة تطابق متوالية عندما تتحاذي بشكل مثالث مع أي من المتواليات أرقام: 52؛ 0 713( 74 75 76 7 78 79 80 أو 81. في هذا السياق؛ يمكن تحديد النسبة المئوية لتطابق متوالية بين متواليات البولي نيوكليوتيد عن ‎Gob‏ ‏مقارنة هاتين المتواليتين المحاذيتين بطريقة مثالية وحيث يمكن أن تشتمل متوالية البولي نيوكليوتيد المراد مقارنتها على إضافات أو حذوفات بالنسبة لمتوالية مرجعية من محاذاة مثالية بين المتواليتين. يتم حساب نسبة التطابق بتحديد عدد المواضع المطابقة للوحدة البنائية للنيوكليوتيد بين المتتاليتين؛ بقسمة هذا العدد 5 لمواضع المتطابقة على إجمالي عدد المواضع في نافذة المقارنة ويضر الناتج في 0 للحصول على النسبة الهوية للتطابق بين هاتين المتواليتين. على سبيل المثال؛ من الممكن استخدام برنامج ‎BLAST‏ ‎"Blast 2 sequences - a new tool for comparing protein «"BLAST 2 sequences” (Tatusova et al‏ ‎FEMS Microbiol Lett. 174:247-250)«and nucleotide sequences”‏ - المتوفرة ‎Je‏ الموقع ‎Cus hitp://www.ncbi.nlm.nih.gov/ gorf/bl2.html‏ تكون المتغيرات المستخدمة هي الافتراضية 0 (بصفة خاصة للمتغيرات "إعاقة الفجوة ‎se lal‏ 5؛ و" ‎Ale]‏ فجوة الامتداد": 2؛ حيث يكون القالب المختار؛ على سبيل المثال هو القالب "62 ‎"BLOSUM‏ الذي يقترحه البرنامج) ؛ حيث يتم حساب النسبة ‎dy gill‏ للتطابق بين المتواليتين مباشرة عن طريق البرنامج. في نماذج معينة؛ يتم تشفير النطاق المتغير ثقيل السلسلة والنطاق المتغير خفيف السلسلة للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا ربط مولد الضد وفقاً للاختراع الحالي بتوليفة من متواليات بولي 5 نيوكليوتيد أولى وثانية؛ حيث يتم اختيار متواليات البولي نيوكليوتيد الأولى والثانية من الأزواج التالية: (1) بولي نيوكليوتيد أول يشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 52 وثاني
بولي نيوكليوتيد تشفر نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 73؛
(2) بولي نيوكليوتيد أول يشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 74 وثاني
بولي نيوكليوتيد تشفر نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 75؛
(3) بولي نيوكليوتيد أول يشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 76 وثاني بولي نيوكليوتيد تشفر نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 77؛
(4) بولي نيوكليوتيد أول يشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 78 وثاني
بولي نيوكليوتيد تشفر نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 79؛ أو
(5) بولي نيوكليوتيد أول يشفر نطاق متغير ثقيل السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 80 وثاني
بولي نيوكليوتيد تشفر نطاق متغير خفيف السلسلة حيث يشتمل على المتوالية رقم: 81.
0 تشمل جزيئات البولي نيوكليوتيد التي تشفر الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع» على سبيل المثال؛ جزيئات الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي ‎dail‏ عن ‎sae‏ الارتباط الجيني. كما يتم استخدام المصطلحات "حمض نووي"» “بولي نيوكليوتيد” أو "جزيء بولي نيوكليوتيد " في الوثيقة الحالية وتشير إلى أي جزيء الحمض النووي دي أوكسي ‎Sis)‏ أو الحمض النووي الريبوزي ‎ribonucleic acid‏ ‎(RNA)‏ سواء وحيد أو مزدوج الجديلة؛ ‎og‏ إن كان وحيد الجديلة» جزيء متواليته المتممة. في مناقشة
5 جزيئات الحمض النووي؛ ‎(Sa‏ وصف جزيء حمض نووي معين في الوثيقة الحالية حسب العرف السائد لتوفير المتوالية في الاتجاه 5' إلى3'. وفي بعض تجسيدات الاختراع؛ يتم ‎“Jie”‏ نيوكليوتيدات الأحماض النووية. ويشير هذا المصطلح؛ عند تطبيقه على جزيء حمض نووي؛ إلى جزيء حمض نووي يتم فصله عن المتواليات التي يتماس معها مباشرة في الجينوم الطبيعي للكائن الحي المأخوذ منه. على سبيل المثال؛ قد يشتمل "الحمض النووي المعزول" على جزيء الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي مدخل في
0 تاقلء مثل بلازميدة أو ناقل فيروسي؛ أو مدمج في الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي الجينومي لخلية بدائية أو حقيقية أو كائن عائل غير بشري. وعند تطبيقه على الحمض النووي ‎(Ghoul‏ فإن مصطلح ‎of‏ نيوكليوتيد معزول" يشير بشكل رئيسي إلى جزيء الحمض النووي الريبوزي يشفره جزيء الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي معزول كما سبق تعريفه. على نحو بديل؛ قد يشير المصطلح إلى جزيء الحمض النووي الريبوزي تمت تنقيته/ فصله عن أحماض نووي أخرى قد ترتبط بها في الحالة الطبيعية
5 (ي؛ في خلايا أو أنسجة). وقد يمثل البولي نيوكليوتيد المعزول (سواء الحمض النووي دي أوكسي رببوزي أو الحمض النووي ‎(Gout)‏ كذلك جزيثاً تم إنتاجه مباشرة عن طريق وسيلة حيوية أو تخليقية
وتم فصله عن مكونات أخرى موجودة أثناء إنتاجه. للإنتاج الناتج عن عودة الارتباط لجسم مضاد طبقاً للاختراع» يمكن تحضير بولي نيوكليوتيد ناتج عن عودة الارتباط يشفره (باستخدام الطرق الحيوية الجزيئية التقليدية) وإدخاله في ‎JB‏ قابل للانتساخ للتعبير في خلية عائلة معينة؛ أو نظام تعبير خالي من الخلايا. وقد تكون الخلايا العائل المناسبة عبارة عن خلايا بدائية؛ أو خميرة؛ أو خلايا حقيقية ‎oof‏ خاصة ‎WIA‏ تدييات. ومن امثلة سلالات الخلايا العائلة الثديية المفيدة؛ سلإلة ‎CVI‏ لخلايا كلى ‎monkey kidney all‏ المتحولة عن ‎Gh‏ 581740 005-7؛ ‎¢ATCC CRL 1651)‏ وسلالة خلايا كلى جنيني ‎embryonic kidney line‏ بشري )293 أو 293 خلية منتسخة للنمو في مزرعة ‎¢(Graham et al., J.
Gen.
Virol. 36:59 (1977) «Glas‏ خلايا كلى ‎kidney‏ ‎cells‏ صغير الهامستر ‎WIA ¢(BHK, ATCC CCL 10) hamster‏ مبيض هامستر ‎DHFR [ua‏ 0 .لمك طسملما ‎Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 77:4216 (1980))«(CHO,‏ ؛ خلايا سيرتولي ‎sertoli cells‏ فأرية ))1980( 23:243-251 ‎¢«(TM4, Mather, Biol.
Reprod.‏ خلايا ورم نخاعي ‎myeloma cells‏ ‎(ATCC CRL 1581, ATCC CRL 8287) SP2/0-AG14‏ أو ‎NSO‏ (مجموعات المزرعة ‎HPA‏ رقم 3 خلايا كلية قرد )70 ‎«(CVI ATCC CCL‏ خلايا كلى قرد أفريقي أخضر ‎«(VERO-76‏ ‎LIA ¢ATCC CRL-1587)‏ سرطانة عنق ‎cervical carcinoma cells‏ بشري ‎ATCC CCL 2¢(HELA‏ ؛ 5 سرطان كلى كلب ‎liver cells 2S WIA ¢(MDCK, ATCC CCL 34) canine kidney cells‏ جرذ جاموسي )1442 ‎WIA (BRL 3A, ATCC CRL‏ رئة ‎lung cells‏ بشرية )75 ‎{(W138, ATCC CCL‏ خلايا كبد بشري )8065 ‎¢(Hep G2, HB‏ ورم ثديي فأري ‎{MMT 060562, ATCC CCL51)‏ خلايا ‎TRI‏ ‎¢FS4 WIA (MRC 5 WIA ¢ Annals N.Y.
Acad.
Sci. 383:44-68 (1982))«(Mather et al.‏ وسلالة ورم كبدي ‎hepatoma‏ بشري ‎«(Hep G2)‏ وكذلك سلالة ‎L&DSM’s PERC-6 WIA‏ أن التعبير عن 0 النواقل المناسبة لاستخدامها في كل من هذه الخلايا العائلة من الأمور المعروفة بصفة عامة في المجال. تجدر الإشارة إلى أن مصطلح "خلية عائلة" يشير بصفة عامة إلى سلالة خلايا مزروعة. من الواضح أنه يتم استبعاد البشر الذين تم فيهم إدخال ناقل تعبير يشفر بولي ببتيد رابط لمولد ضد طبقاً للاختراع من تعريف "الخلية العائلة". إنتاج الجسم المضاد 5 في إحدى السمات الهامة؛ يوفر الاختراع أيضاً طريقة إنتاج أجسام مضادة الخاصة بالاختراع حيث يشتمل على زراعة خلية عائلة (أو نظام التعبير الخالي من الخلايا) يحتوي على بولي نيوكليوتيد (على
سبيل المثال ناقل تعبير) يشفر الجسم المضاد تحت ظروف التي تسمح بالتعبير عن الجسم المضاد؛ و استعادة الجسم المضاد المعبر عنه. يمكن استخدام عملية التعبير هذه الناتجة عن عودة الارتباط على ‎Glas‏ كبير لإنتاج أجسام مضادة؛ بما في ذلك الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 وفقاً للاختراع؛ بما في ذلك أجسام مضادة وحيدة النسيلة لاستخدامها في علاج البشر. النواقل المناسبة المستخدمة في علاج ‎al‏ تستخدم نواقل مناسبة؛ سلالات ‎WDA‏ وعمليات إنتاج على نطاق كبير لتصنيع أجسام مضادة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني تناسب الاستخدام العلاجي داخل جسم الكائن الحي وهي متوفرة بصفة عامة في المجال وسيعرفها الشخص صاحب المهارة في المجال. الاستخدام العلاجي للأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين -22 يمكن استخدام الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 التي توفرها الوثيقة الحالية كأدوية؛ وبخاصة 0 الاستخدامها في معالجة أو الوقاية من الاضطرابات حيث يرجع سبب المرض إلى اختلال إرسال الإشارات عبر معقدات مستقبل إنترلوكين-22 على سطح الخلية. وقد يرتبط هذا الخلل في إرسال الإشارات بفرط التعبير عن أو فرط إنتاج أي من السيتوكينات إنترلوكين 22؛ إنترلوكين 20 و/ أو إنترلوكين 24. المقصود بمصطلح "علاج” أو 'معالجة' هو إبطاء؛ أو وقف؛ أو ‎cal)‏ أو مكافحة؛ أو خفض شدة أحد 5 الأعراض؛ أو الاضطرابات؛ أو ‎abel)‏ ولكن ذلك لا يشمل بالضرورة التخلص الكامل من أعراض المرض»؛ أو الحالات أو الاضطرابات. ومصطلح ‎"LEG‏ يعني منع ظهور الاضطراب؛ أو الحالة؛ أو المرض» أو منع ظهور الأعراض المرتبطة بالاضطراب أو الحالة أو المرض. لقد وجدت جزيئات الربط التي ترسل الإشارات عبر مستقبل إنترلوكين-22 في عدد من الأمراض ونظراً لأنه يتم التعبير الانتقائي عن مستقبل إنترلوكين-22 على خلايا الجلد والخلايا الظهارية؛ فإن الأمراض 0 الأساسية هي تلك الأمراض التي تصيب الجلد والظهارة ومنها على سبيل المثال لا الحصر الصدفية؛ التهاب المفاصل الصدفيء والتهاب الجلد التأتبي. وقد وجدت مستويات مرتفعة من مستقبل إنترلوكين -22 في لويحات الصدفية ‎ClinExpImmunol. 150: 407-415 (2007))«(Boniface et al.‏ كما ثبت وجود هذا السيتوكين في اعتلال الصدفية بالتجارب على نماذج ‎Ll‏ لالتهاب الجلد ‎J Clin Invest. «(Ma et al.‏ ‎Van Belle et al.J Immunol.
Jan 1¢118: 597-607 (2008)‏ ¢)2012( 188)1(:462-9. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية طرقاً لعلاج أمراض التهاب الجلد. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية طرقاً لعلاج أمراض التهاب الجلد يتم اختيارها من الصدفية؛ التهاب الجلد الصدفي؛ التهاب الجلد
بالتماس أو التهاب الجلد التأتبي لدى خاضع للعلاج بشري. الطرق تشتمل على إعطاء المريض الذي بحاجة إلى ذلك كمية فعالة علاجياً من أي من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا ربط مولد الضد كما تم تعريفها في مكان آخر من الوثيقة الحالية. يمكن تطبيق جميع نماذج الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 لشظايا ريط مولد الضد كما تم وصفها في الوثيقة الحالية على حد سواء في طرق العلاج وفقاً للاختراع الحالي. في نماذج معينة؛ توفر الوثيقة الحالية طرق لعلاج متلازمة سجورجن ‎«Sjorgen syndrome‏ أو السرطانات ‎cancers‏ التي يتم اختيارها من سرطان الكبد ‎chepatocarcinoma‏ السركومة الشحمية ‎cdiposarcoma‏ سرطان الخلايا الحرشفية الفموية ‎squamous cell carcinoma‏ ل0:ه»سرطان القولون والمستقيم ‎colon and colorectal cancer‏ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ سرطان الرئة صغير 0 دوكبيري ‎and large-cell lung cancer WAN‏ -للقصس»ي» سرطان الثدي ‎<breast cancer‏ ورم أرومي دبقي ‎cglioblastoma‏ سرطان الغدد اللمفاوية ‎ccutancous T-cell lymphoma T LIAN‏ ورم الغدد اللمفاوية ‎LIAN‏ الكبيرة ‎canaplastic large cell lymphoma‏ الوم الليمفاوي للخلية الردائية ‎mantle cell‏ ‎dlymphoma‏ لدى خاضع للعلاج بشري حيث تشتمل الطرق على إعطاء المريض الذي بحاجة إلى ذلك كمية فعالة ‎Ladle‏ من أي من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 أو شظايا ربط مولد الضد كما تم 5 تعريفها في مكان ‎AT‏ من الوثيقة الحالية. جميع نماذج الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 لشظايا ربط مولد الضد كما تم وصفها في الوثيقة الحالية يمكن استخدامها جميعاً في طرق العلاج وفقاً للاختراع الحالي . للاستخدام في علاج البشر يمكن إعطاء الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع الحالي لخاضع للعلاج من البشر بحاجة إلى "كمية فعالة". ويشير مصطلح 'كمية فعالة" إلى كمية جرعة 0 -من الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22؛ عند الإعطاء الفردي أو المتعدد للجرعة لخاضع للعلاج من البشري؛ توفر فاعلية علاجية في معالجة المرض. وقد تشتمل الكميات الفعالة علاجياً من الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 على كمية تتراوح من حوالي 0.1مجم/ كجم إلى حوالي 20 مجم/ كجم لكل جرعة فردية. وقد تختلف كمية الجسم المضاد التي يتم إعطاءها في نقطة زمنية معينة بحيث يتم إعطاء الكميات المثلى من الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22» سواء بمفرده أو بالاشتراك مع أي عامل 5 علاجي ‎AT‏ في أثناء مدة العلاج. كما يمكن إعطاء الجسم المضاد مستقبل إنترلوكين-22 الوارد في الوثيقة الحالية؛ أو تركيبات صيدلانية
تشتمل على تلك الأجسام المضادة؛ بالاشتراك مع أي علاج آخر مناسب للأمراض المذكورة أعلاه؛ كعلاج مشترك. تركيبات صيدلانية يشمل نطاق الاختراع تركيبات صيدلانية؛ تحتوي على واحد أو أكثر من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 الخاصة بالاختراع؛ أو شظايا منها رابطة لمولد ‎call‏ حيث تتم صياغتها مع واحد أو أكثر من مواد ناقلة مقبولة صيدلانياً أو سواغات. قد تشمل تلك التركيبات واحدا أو أكثر من (على سبيل ‎(JU‏ اثنين مختلفين أو أكثر) من الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22. وتعد طرق صياغة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للاستخدام في علاج البشر من الأمور المعروفة في المجال وتمت مراجعتهاء على سبيل المثال في ‎et al.‏ عصد5016026650777 ‎ppl-¢ Vol.96¢ Journal of Pharmaceutical‏ 200726« التي تندرج محتوياتها في الوثيقة الحالية بكاملها. في نماذج معينة؛ تتم صياغة تركيبات صيدلانية لإعطاءها لخاضع للعلاج عن طريق مناسب بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الحقن في العضل؛ أو داخل الوريد؛ أو داخل الأدمة؛ أو داخل الغشاء البريتوني؛ والإعطاء تحت الجلدء وفوق الجافية؛ وفي الأنف؛ وفي الفم؛ وفي المستقيم؛ وموضعياً؛ وبالاستنشاق وفي غشاء الفم (مثل تحت اللسان)؛ وعبر الأدمة. ‎dg‏ النماذج المفضلة؛ تتم صياغة 5 التتركيبة للإعطاء تحت ‎lal‏ ‏الإدراج كمرجع وردت العديد من المنشورات المختلفة في الوصف السابق ‎Play‏ الأمثلة ‎call‏ وكل منها يندرج في الوثيقة الحالية بكامله كمرجع. الأمثلة 0 سيتم وصف الاختراع بالإشارة إلى التالية أمثلة غير مقيدة. المثال 1 تحصين اللاما تم تحصين اثنين من حيوان اللاما بخليط من بروتين مستقبل إنترلوكين-22 بشري ناتج عن عودة الارتباط (أنظمة ‎(R&D‏ و7014 - شظية قابلة للتبلور بشري طبقاً لجدول التحصين المبين في الجدول 5 التالي. ويعد ست حقنات أسبوعية بالبروتين الناتج عن ‎sage‏ الارتباطء تم جمع عينات الدم ‎blood‏ ‏5 واستخدام المصل ‎sera‏ من اللاما المحصنة في قياس الاستجابة المناعية الخلطية ‎humoral immune‏ ضد مستقبل إنترلوكين-22 عن طريق الكشف عن وجود أجسام مضادة ضد مولد الضد المحصن قبل
— 0 8 — التحصين وبعده. وقد أنتج كلا حيواني اللاما استجابة مناعية واضحة ومحددة ضد مستقبل إنترلوكين - 22 الجدول 5 جدول تحصين لكل حيوان لاما 0مل لكل دم ‎pre- (pass‏ ‎immune blood‏ (مصل) مستقبل إنترلوكين-22 (80 ميكروجم) ‎FR‏ قابلة ‎K 2 110147 /9 129‏ 9 ]10 للتبلور )80 ميكروجم) مستقبل . إنترلوكين-22 (40 ميكروجم) ‎FR‏ قابلة ‎sas 17 /10 7‏ : 0 ]10 للتبلور (40 ميكروجم) مستقبل إنترلوكين-22 (40 ميكروجم) ‎FR‏ قابلة ‎sas 17 N10 4‏ : 1 ]10 5 اللتبلور )40 ميكروجم) مستقبل . إنترلوكين-22 (40 ميكروجم) ‎FR‏ قابلة ‎sas 17 N10 1‏ : 2 ]10 2 ا للتبلور )40 ميكروجم) مستقبل . إنترلوكين-22 (40 ميكروجم)) 8 10/ 3 10 و2 | +2014-شظية ‏ قابلة
للتبلور (40 ميكروجم) ‎da‏ إنترلوكين-22 (40 ميكروجم) 4 1 +1014-شظية قابلة 4 |10 6 اللتبلور )40 ميكروجم) 1108م 0م دم محصن |10 40 0 مل دم محصن (بلازما) المثال 2 تكوين واختيار المجموعة بعد التحصين؛ تم حصد خلايا الدم الطرفية أحادية التواأة ‎peripheral blood mononuclear cell‏ ‎(PBMCs)‏ واستخلاص الحمض النووي الرببوزي. تم إجراء تخليق الحمض النووي دي أوكسي رببوزي المكمل أولي عشوائي وتم تضخيم أجزاء جين اللاما نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1 711 ‎«VACA‏ و»7»0 5 بتفاعل سلسلة بوليمراز ‎(PCR) polymerase chain reaction‏ تم استخدام طريقتين لتضخيم السلاسل الخفيفة بتفاعل سلسلة بوليمراز. استخدمت الطريقة الأولى تضخيم تفاعل سلسلة بوليمراز رئيسي ببادئات بدون روابط لموقع التقييد؛ تلي ذلك تضخيم ‎Jeli‏ سلسلة بوليمراز ببادئات مرقمة بمواقع التقييد ‎ApaLl)‏ ‏و8©1م). وللطريقة الثانية؛ تم استخدام بادئات مرقمة في تضخيم الحمض النووي دي أوكسي رببوزي المكمل مباشرة. تم ‎oly‏ مجموعات نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1 ‎VH‏ باستخدام تفاعل سلسلة بوليمراز على 0 خطوتين» حيث تم إجراء 25 دورة ببادئات غير مرقمة تلاها 10 دورات بنسخ مرقمة من هذه البادئات (تحتوي على مواقع التقييد 511 و1001 ) (راجع براءة الاختراع الدولية رقم 001251/2010). تم اهتضام سلاسل خفيفة مضخمة بتفاعل سلسلة بوليمراز باستخدام ‎Ascly ApaLl‏ بينما تم اهتضام السلاسل الثقيلة المضخمة بتفاعل سلسلة بوليمراز باستخدام ‎Noth SI‏ ؛ ودمجها في مجموعة ‎Fab‏ عن طريق انتساخ وليجة مجموعة السلسلة الخفيفة في ناقل 0133م لمجموعة السلسة الثقيلة باستخدام مواقع 5 التقييد ‎Asclg Apall‏ . وجد أن مجموعات ‎Fab‏ النهائية ذات تنوع مستلزمات أكبر من 10 * نسيلة بعد إنشاء المجموعة؛ تم إنتاج الملتهمات وإجراء اختيار عرض الملتهمات ‎phage‏ على مستقبل إنترلوكين -22 البشري ‎(Biotechne, 2770-LR)‏ ولاختيار نسائتل خاصة بمستقبل إنترلوكين-22؛ (1) تم
-7ع8- تغليف مستقبل إنترلوكين -22 البشري مباشرة بطبق ‎¢(Nunc MaxiSorp™‏ أو (2) احتجازه بجسم مضاد مستقبل إنترلوكين-22 ‎slime‏ للبشر غير تنافسي ‎R&D systems)«(MAB2770‏ ؛ أ (3) احتجازه بنوترافيدين بعد إدخال البيوتين. عادة ما تم تغليف واحتجاز مستقبل إنترلوكين-22 بتركيزين مختلفين؛ مثلاً 5 ميكروجم/ مل و0.1ميكرو ‎fan‏ مل.
بعد الجولة الأولى من الاختيار لم يلاحظ أي تخصيب واضح ولكن بعد الجدول الثانية ‎ally‏ لوحظت تخصيبات معتمدة على الجرعة؛ وصلت إلى 100 ضعف بعد الجدول الثانية و10 ‎YT‏ ضعف بعد الجولة الثالثة. وجد أن التخصيبات على الجسم المضاد المحتجز إنترلوكين-22 أعلى من تلك التي على إنترلوكين-22 المغلف بشكل مباشر. وقد يرجع ذلك إلى أن إنترلوكين-22 هو فقط 25 كيلو دالتون ‎ly‏ ‏التغليف المباشر يؤثر على هيئته ويحد من القمم اللاصقة المتاحة. ‎GUA‏ تم إجراء حملة انتقاء ثالثة
0 باستخدام إنترلوكين -22 معالج بالبيوتين. بالإضافة إلى الانتقاءات السابق ذكرهاء تم إجراء جولتين إضافيتين من الانتقاءات مستقبل إنترلوكين -22 فأري معالج بالبيوتين ناتج عن عودة الارتباط الجيني بعد الول الأولى من الانتقاء على مستقبل إنترلوكين -22 بشري محتجز ب10/832770 . وقد تم هذا الانتقاء لتحديد ‎Fab‏ المتفاعلة تبادلياً مع مستقبل إنترلوكين -22 الفأري. وكعينة مقارنة موجبة على الانتقاءات»؛ تم إجراء انتقاء على مستقبل إنترلوكين -22 5 بشري محتجز بالنوترافيدين - بيوتين على التوازي. وكانت عملية الانتقاء إجمالاً ناجحة مع تخصيب واضح ملحوظ لروابط مستقبل إنترلوكين -22 ‎Fab‏ . المثتال 3 فحص ‎Fabs‏ الخاصة بمستقبل إنترلوكين -22 بعد الانتقاء الناجح لعرض الملتهمة؛ تم اختبار ‎Fabs‏ الموجودة في محيط البلازما لمعرفة قدرتها على إعاقة ارتباط إنترلوكين 22 بمستقبل إنترلوكين-22. بالإضافة إلى ذلك»؛ تم إجراء الفحص لتحديد ارتباط 0 النسيلة بمستقبل إنترلوكين-22 1 الفأري. ظهرت طريقة جديدة تعتمد على الرنين السطحي البلازموني ‎Cus (SPR) surface plasmon resonance‏ تسمح باختبار كل من تنافس جزيء ‎all‏ والألفة للتفاعلية المتبادلية البشرية والفأرية في منخل واحد. تم ‎Calas‏ مختلف قنوات شريحة ‎(CM5) Biacore‏ ب: 1- لا شيء (فارغة) 5 2- إنترلوكين 22 ‎(3000RU)‏ لاختبار النشاط التنفاسي ‎(CMS)‏ (عندما يتم الحقن المشترك لمستقبل إنترلوكين -22)
3- مستقبل إنترلوكين -22 البشري ‎(3000RU)‏ لاختبار الارتباط بالهدف
4- مستقبل إنترلوكين-22 الفأري ‎(2500RU)‏ لاختبار التفاعلية التبادلية
لاختبار تنافس جزيء الريط» تم الخلط المسبق لتركيز جديد من مستقبل إنترلوكين-22 1 قابل للذويان
(0.2 ميكرو جم/ ‎(Je‏ مع المستخلصات المحيطة بالبلازما قبل الحقن. وبهذه الطريقة؛ يمكن قياس قدرة ‎Fab 5‏ على إعاقة تفاعل جزيء ‎boll‏ - المستقبل على القناة 2. تم فحص المستخلصات المحيطة
بالبلازما لمعرفة ارتباطها بمستقبل إنترلوكين -22 البشري (القناة 3) ومستقبل إنترلوكين -22 الفأري (القناة
(4
تكمن ميزة هذه الطريقة مقارنة بمقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم التقليدي (المرتبط أو
التنافسي) في اختبار عدة خصائص ‎Fabl‏ في نفس الوقت: 1) الارتباط ب مستقبل إنترلوكين-22 البشري
0 المستهدف؛ 2) النشاط التنافسي» و3) التفاعلية التبادلية. علاوة على ذلك؛ فإن قياس معدلات الاستبعاد يعطي دلالة قوية على ألفة ‎Fabs‏ التي يتم اختبارها. باستخدام طريقة الفحص البديلة هذه؛ تم تحديد وتصنيف ‎Fabs‏ بجميع الخصائص الممكنة حسب معدل الاستبعاد الخاص بها: » التنافس أو عدم التنافس
«* التفاعلية التبادلية وعدم التفاعلية التبادلية ‎o‏ التنافس والتفاعلية التبادلية ‎o‏ عدم التنافس والتفاعلية التبادلية ثم تم إرسال مختلف النسائل لعمل المتواليات المثال 4 تحليل المتواليات ‎Fabsd‏ مستقبل إنترلوكين -22
0 .تتم عمل متواليات النسائل التي حددها تحليل ‎Biacore‏ (مثل تنافس جزيء ‎can‏ وأقصى ارتباط ومعدل الاستبعاد المنخفض أو التفاعلية التبادلية الفأرية). ثم تم تجميع النسائل حسب تطابق منطقة تحديد التمامية 3 لتكوين عائلات من نطاق متغير ثقيل السلسلة. إجمالاً؛ تم تحديد 67 نطاق متغير ثقيل السلسلة مختلف ينتمي إلى 13 عائلة نطاق متغير ثقيل السلسلة مختلفة. وتم تحديد عدد أكبر من عائلات خفيفة السلسلة (أكثر من 80 متوالية ‎V‏ لامدا وكابا). ‎Jug‏
5 التباين الكبير في المتوالية ووظيفة ‎Fabs‏ على أن التحصين والانتقاء ‎BS‏ ناجحين جداً. تظهر متواليات الحمض الأميني لنطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة لنسائل ذات
— 8 4- .9 ‏وتظهر متواليات البولي نيوكليوتيد في الجدول‎ dll 8 -6 ‏أهمية خاصة في الجداول‎
Fabs) ‏الجدول 6 المناطق الإطاربة ومتواليات مناطق تحديد التمامية لنطاقات متغير ثقيل السلسلة‎ ‏مستقبل إنترلوكين-22‎ ‏الذ | المتط | الم | مذ | الم | الم | الم | منط | المت | المتنط | الم | مذ | الم | الم | الم‎ ‏طة توا نط توا‎ | Ws] ‏سيا أقة أتوا |طة أتوا أنط أتولاأقة أولد أقة‎ ‏الية‎ asf ad| s 5 ‏اتحد ]8 االإطا‎ Lf ‏اليةاقة‎ sf dd ‏ة االإطا‎ ‏اتح ارق |الا |رقم ايد ارقم |رية 3 |رقم: اتح |رقم|الإ ار‎ Bf [ ‏رية‎ ‎tal Woof 2 :| ‏لتم‎ | :| Wa) ‏ام:‎ wa ‏م:‎ ‏التم رية امية د رد‎ all 2 2 dl 4 ‏ما‎ 5 ‏م‎ 1 5 3 7| Vv 5| RFT 4| SI] 3|771 2 S| 1 QV] 15
G G ISR YN 7 Y QLV | 7
Q F DN DG R D ESG | ‏يم‎ ‎G S AK SN Q M GGL
T G NTL TA A S VQP
Q T YLQ YS P GGS
Vv Y MN DS G LRL
T Y SLK VK K SCA
Vv S SED G G ASG
S E TAV L FTF
S S YYC E S
AK Ww v
S
17| 1| P| 12] RFT 11] GI| 1| S QV] 16 41 G| | © ISR HI| of V Y QLV | ‏م‎ ‎K G DN SG R F ESG GS
G P AK GI Q M GGL
T F NTL TY A S VQP
L K YLQ YL P GDS
— 8 5 —
Vv A MN DS G LRL
T H NLK VK K SCA
Vv Y PED G G ASG
S N TAV PE FTF
S G YYC Ww G
M VT Vv
K S
Y
Fabs! ‏الجدول 7 المناطق الإطارية ومتواليات مناطق تحديد التمامية لنطاق متغير خفيف السلسلة‎ ‏مستقبل إنترلوكين-22‎ ‏الم | اذ | الم‎ dane | ‏الذ | المنطقة | الم | منطة | الم | المذ | ال | مذ | الم | المنطة | ال‎ ‏|م | توا‎ I] ‏م اقة‎ 5 lg] ba ae] ‏|الإطارية اتوا 5 توا اطقة‎ 2
A | ‏لية | تحدي | لية | الإط | وا | قة | لية | الإطار | تو | تحدي | لية اذ‎ 1| a 3, L 3, ‏ية 3 ا د‎ 3, al A 4) 3, ‏د‎ 3, ‏ام:‎ | ia all] ‏بِ‎ ta] 2] ‏م: | التمام | م: 2 ة‎ ‏ية 1 رق اد ة أمية‎ ‏م: | الد ,31 ا‎ ‏ما 3 ل‎ ‏ار‎ : 8 3 2 8 4 20F 2 QS{T| NTA| 1{ G1] ‏ا"‎ 1| QG| 1| NFML| 1 11G| of GS|{o| TLTI| g| N| 7| YQ| ¢| GY| | TQPS| 5
G SS SGA N QK YA AVSV 7
G AN QAE N PG H SLGQ A
T AV DEA R QA TAKI 2
H EYY p PV TC
L 0 5 LV
T IY v
L
21F 2 AS{2| NTA| 2 K|2| ‏ا‎ 2|TGT| 2| NEML | 1 81G| 7| YR|[g| SLTI| 5] ‏|4ا7‎ 7790| 3|SRD| ‏اد‎ TQPP| ¢
G LY SGL N QL IGD SVSG 6
G AD QSE T PG YN TLGK G
T YV DEA R LA YV TVTIS 8
H DYY S PK S 0
L 0 5 LLI
T Y v
— 7 8 — 1 | لل ل لل لاعلا
— 8 8 — 22- ‏مستقبل إنترلوكين‎ Fabsd ‏الجدول 8 متواليات النطاقات المتغيرة‎
Al ial} ‏السلسلة المتوالدٍ نطاق متغير خفيف السلسلة‎ adh ‏النسدٍ نطاق متغير‎ ‏رقم : 0 رقم:‎ 0 pA | NEMLTQPSAVSVSLG 29 | QVQLVESGGGLVQPGGS | 157
QTAKITCQGGYYAH LRLSCAASGFTFSSYDMS | ‏دم‎ ‎WYQQKPGQAPVLVI WVRQAPGKGLEWYVSSIY
YGNNNRPSGIPERES NDGSNTAYSDSVKGRFTI
GSSSGNTATLTISGA SRDNAKNTLYLQMNSLK
QAEDEAEYYCQSGSS SEDTAVYYCAKVGFSGT
SANAVFGGGTHLTV YYSESWGQGTQVTVSS
L
32 | NFMLTQPPSVSGTLG 31 | QVOQLVESGGGLVQPGDS | 166
KTVTISCTGTSRDIGD LRLSCAASGFTFGSYFMS G8
YNYVSWYQQLPGLA WVRQAPGKGPEWVSGIH
PKLLIYKVNTRSSGTP ISGGITYYLDSVKGRFTIS
DRFSGSKSGNTASLTI RDNAKNTLYLQMNNLKP
SGLQSEDEADYYCAS EDTAVYYCVTPPGPFKA
YRLYADYVFGGGTH HYNGMKYWGKGTLVTV
LTVL SS
_— 9 8 _— الجدول 9 متواليات البولي ببتيد ‎Fabs]‏ مستقبل إنترلوكين-22 ‎wall‏ | نطاق متغير ثقيل السلسلة المتوالد ا نطاق متغير خفيف السلسلة | المتوالدٍ ‎A‏ 8 رقم : 8 رقم: ‎73 | AATTTTATGCTGACT 52 | CAGGTGCAGCTCGTGGA | 157 ‎CAGCCCTCCGCGGT GTCTGGGGGAGGCTTGG | ‏دم‎ ‎GTCCGTGTCTTTGGG TGCAGCCTGGGGGTTCT
ACAGACGGCCAAGA CTGAGACTCTCCTGTGC
TCACCTGCCAAGGG AGCCTCTGGATTCACCT
GGCTATTATGCTCA TCAGTAGCTACGACATG
CTGGTACCAGCAGA AGCTGGGTCCGCCAGGC
AGCCAGGCCAGGCC TCCAGGGAAGGGGCTG
CCTGTGTTGGTCATC GAGTGGGTGTCCAGTAT
TATGGAAATAATAA TTATAATGACGGTAGTA
TAGGCCCTCAGGGA ACACAGCCTATTCAGAC
TCCCTGAGCGCTTCT TCCGTGAAGGGCCGATT
CTGGCTCCAGTTCTG CACCATCTCCAGAGACA
GGAACACAGCCACC ACGCCAAGAACACGTTG
CTGACCATCAGCGG TATCTGCAAATGAACAG
GGCCCAGGCTGAGG CTTGAAATCTGAGGACA
ACGAGGCCGAGTAT CGGCCGTGTATTACTGT
TACTGTCAGTCAGG GCAAAAGTTGGCTTTAG
AAGCAGTAGTGCTA TGGTACTTACTACAGTG
ATGCTGTGTTCGGC AATCATGGGGCCAGGG
GGAGGGACCCATCT GACCCAGGTCACCGTGT
G CCTCA
‎75 | ACCGTCCTGAATTTT 74 | CAGGTGCAGCTGGTGGA | 166 ‎ATGCTGACTCAGCC GTCTGGGGGAGGCTTGG | G8
TCCCTCCGTGTCTGG TGCAGCCTGGGGATTCT
AACTCTGGGAAAGA CTGAGACTCTCCTGTGC
CGGTCACCATCTCCT AGCCTCTGGATTCACCT
GCACTGGAACCAGT TCGGAAGCTATTTCATG
CGTGACATTGGGGA AGCTGGGTCCGCCAGGC
CTATAACTATGTCTC TCCAGGAAAGGGGCCC
CTGGTATCAACAGC GAGTGGGTCTCAGGTAT
TCCCAGGATTGGCC TCATATTAGTGGTGGTA
CCCAAACTCCTGAT TTACATACTACTTAGAC
CTATAAAGTCAACA TCCGTGAAGGGCCGATT
CTCGATCCTCAGGG CACCATCTCCAGAGACA
ACCCCTGATCGCTTC ACGCCAAGAACACGCTG
TCTGGCTCCAAGTC TATCTGCAAATGAACAA
AGGCAACACGGCCT CCTGAAACCTGAGGACA
— 9 0 —
CCCTGACCATCTCTG CGGCCGTGTATTATTGT
GGCTCCAGTCTGAG GTAACACCCCCGGGCCC
GACGAGGCTGATTA CTTTAAGGCCCATTACA
TTACTGTGCCTCATA ATGGCATGAAGTACTGG
TAGACTGTACGCCG GGCAAAGGGACCCTGGT
ATTATGTGTTCGGC CACCGTCTCCTCA
GGAGGGACCCATCT
GACCGTCCTG rr]
Fabs ‏خصائص‎ 5 JU ‏انتساخ النسائل ذات أفضل معدلات استبعاد إلى 054 والتعبير عنها وتنقيتها‎ sale) ‏تمت‎ ‏باستخدام‎ Ga) ‏.تم اختبار هذه النسائل مرة‎ «(Talon from Clonentech) IMAC ‏باستخدام‎
‎.BIACORE‏ وتظهر نتائج خصائص ‎Fab‏ الأخرى في الجدول 10 التالي. الجدول 10 تصنيف ‎Fabs‏ الرابطة لمستقبل إنترلوكين -22
‏عائلة
‏نطاق الارتباط بمستقبل | الارتباط بمستقبل | إعاقة
‏متغير | النسيلة | إنترلوكين-22 | إترلوكين-22 | بردو | ‎PU‏ ‎Jui‏ البشري الفأري 22
‏السلسلة
— 2 9 — ‎4.3E-‏ ‎16oH7 | 5‏ نعم لا نعم ‎SU‏ ‎SE-‏ ‎os‏ 8 ‎1.2E-‏ ‏د 7 ‎.GE-‏ ‎woo‏ ‎4.8E-‏ ‎woo‏ ‏ا ‎2.9E- :‏ ‎9.7E- :‏ + ‎7.3E- : :‏ ‎6.1E- :‏ ‎8E-‏ ‏= 7 ‎3.5E- :‏ * لوحظت مرة واحدة فقط مع ‎Fab‏ المثقاة (غير محبطية أو جسم مضاد أحادى النسيلة) مما ‎Ju‏ ‏مرة وا مع غير محيطية أو جسم ي ‎tl)‏ 2 على ألفة ضعيفة جداً حسب التباين في عائلة نطاق متغير ثقيل السلسلة؛ ونشاط التنافس والألفة (المقاسة باستخدام نم1 الناتج في ‎(BIACORE‏ تم انتقاء واحدة أو عدة نسائل من كل عائلة وإعادة تنسيقها في أجسام مضادة وحيدة النسيلة لمزيد من التصنيف . المثال 6 تصنيف جسم مضاد أحادي النسيلة الرابطة لمستقبل إنترلوكين-22 كما سبق الإشارة إليه؛ تم إنتاج نسائل انتقائية لكل عائلة ‎Gla‏ متغير ثقيل السلسلة في ‎Soa‏ ‏الجلوبيولين المناعي جاما1. وبعد ‎sale)‏ انتساخ المناطق المتغيرة للسلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة إلى نواقل تعبير ‎pUPE‏ منفصلة تحتوي على نطاقات ثابتة بشرية؛ تم نقل العدوى إلى ‎HEK293E‏ ‏0 بشكل مؤقت باستخدام اثنين من البلازميدات؛ تشفر إحداهما كل السلسلة الثقيلة وتشفر الثانية
السلسلة الخفيفة. تم السماح بالخلايا التي تم نقل العدوى إليها بالتعبير عن الأجسام المضادة أثناء فترة زراعة ‎WA‏ استغرقت 6 أيام. وبعد تنقية الجسم المضاد من المادة الطافية لمزرعة الخلايا باستخدام كربات البروتين مستقبل إنترلوكين-22؛ تم اختبار الأجسام المضادة المنقاة لمعرفة قدرتها على معادلة إرسال إشارات إنترلوكين -22 البشري والفأري باستخدام سلالات الخلايا التالي وصفها. - سلالة خلايا مستقبل إنترلوكين-22: مستمدة من سلالة ‎BW WIA‏ وتتميز بتعبير ثابت عن مستقبل إنترلوكين-22 البشري الذي يدخل إيقاف نمو معتمد على مستقبل إنترلوكين-22. لذلك فإن الخلايا ستتكاثر فقط عند إعاقة تفاعل إنترلوكين-22-مستقبل إنترلوكين-22. وسوف يسمح جسم مضاد قوي بتعزيز التكاثر عند تركيز جسم مضاد منخفض. ‎aig‏ قياس التكاثر بإدخال
التيميدين.
0 - سلالة خلايا ‎—Baf3‏ مستقبل إنترلوكين-22 الفأري: مستمدة من سلالة الخلايا ‎Baf3‏ وتتميز بتعبير ثابت عن مستقبل إنترلوكين-22 الفأري الذي يزيد من التكاثر المعتمد على مستقبل إنترلوكين-22. سوف يعيق الجسم المضاد المعادل لمستقبل إنترلوكين-22 الفأري التكاثر بطريقة تعتمد على تركيز الجسم المضاد. - سلالة ‎—Baf3 WAN‏ مستقبل انترلوكين 22 بشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب: مستمدة من
5 سلالة الخلايا ‎Baf3‏ ولكنها تعبر تعبيراً مشتركاً عن مستقبل انترلوكين 22 بشري حيث يسمح مستقبل انترلوكين 20 بيتا بشري بتكاثر ‎WAY‏ في وجود 1120. وسوف يعيق الجسم المضاد الذي يعادل مستقبل انترلوكين 22 بشري تكاثر ‎LIAN‏ المحفزة ب120 . تظهر نتائج اختبار مختلف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة مستقبل انترلوكين 22 ضد سلالة خلايا 817-مستقبل انترلوكين 22 بشري وتظهر سلالة خلايا ‎—Baf3‏ مستقبل انترلوكين 22 بشري
0 / مستقبل انترلوكين 20 ب في الشكل 4 والجدول 11. في الشكل 4 تتضح تأثيرات الأجسام المضادة المعادلة لمستقبل انترلوكين 22 في استعادة تكاثر سلالة الخلايا مستقبل إنترلوكين -22. وفي الشكل 4ب تتضح تأثيرات الأجسام المضادة المعادلة لمستقبل إنترلوكين-22 في تثبيط تكاثر إنترلوكين 20 لسلالة الخلايا المعبرة عن مستقبل إنترلوكين-22. وقد اندرج الجسم المضاد لمستقبل إنترلوكين-22 في براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011 (280.346.1537) في التارب كجسم
5 مضاد مستقبل إنترلوكين-22 مرجعي. بالإضافة إلى القوة على الخلاياء تم قياس حركيات الارتباط في المعمل ونشاط إعاقة الأجسام
المضادة المنقاة في ‎BIACORE‏ (3000). ولقياس ‎daly)‏ تم تغليف مستقبل إنترلوكين-22 الناتج عن عودة الارتباط الجين على شريحة 0145© ‎BIACORE‏ عند 200 ‎RU‏ باستخدام بروتوكول تغليف قياسي ‎standard coating protocol‏ (يتم حقن مستقبل إنترلوكين-22 بمعدل 10 ميكرو جم/ مل في محلول منظم من الأسيتات برقم هيدروجيني 4.5). تم حقن الأجسام المضادة التي تم اختبارها بمدى تركيزات وتحضيرها في محلول منظم اتش بي اس إيه بي ‎HBSEP‏ عند رقم هيدروجيني 7.4 ‎(BIACORE)‏ عند 30 ميكرو جم/ الدقيقة لمدة 60 ثانية وغسلها بمحلول منظم ‎HBSEP‏ عند رقم هيدروجيني 7.4 ‎sad‏ 10- 20 دقيقة. تم تحليل مخططات الاستشعار ‎sensograms‏ الناتجة ببرنامج تقييم بي أي أيه ‎BIA‏ وتم تحديد الحركيات ‎kinetics‏ باستخدام
الملائمة القياسية (لانجموير ‎Langmuir‏ 1: 1 مع انتقال الكتلة).
0 ا ‎&ley‏ النشاط باستخدام 3000 ‎(BIACORE‏ تم تغليف إنترلوكين-22) الناتج عن ‎sage‏ الارتباط الجيني ‎(RnD System)‏ عند 2000 ‎RU‏ على شريحة 0115. تم الاحتضان المسبق لنطاقات ريط مولد الضد (الجلوبيولين المناعي جاما المنقى؛ ‎Fabs‏ المنقاة؛ أو مستخلص حول البلازما يحتوي على ‎(Fabs‏ مع إنترلوكين-22) بشري ناتج عن عودة الارتباط الجيني (بتركيز بين 0.2 و1 ميكرو جم) قبل الحقن في قناة مغلفة بإنترلوكين-22 بشري. وقد دل الكشف عن الارتباط (مستقبل
5 إتترلوكين-22: إنترلوكين-22) أن نطاق ربط مولد الضد لم يكن تنافس عند عدم رصد أي ارتباط (مستقبل إنترلوكين-22: إنترلوكين-22)؛ ‎Jug‏ ذلك على أن نطاقات ربط مولد الضد كانت تعوق تفاعل مستقبل إنترلوكين-22: إنترلوكين-22 في المعمل. وبتم تلخيص نتائج تجارب ‎Biacore‏ ‏والتكاثر في الجدول 11 التالي. الجدول 11 ملخص خصائص مجموعة الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين -22 بشري
الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 | إعاقة مستقبل | القوة في تجرية تكاثر بشري في ‎Biacore‏ إنترلوكين- | ‎ICs0‏ (بيكو مولار) 22- إنترلوكين - 22 عائلة ‏ | النسيلة ‎Kd | /1)Ka‏ هه | ‎BaF3 BW | BIACORE‏ نطاق ملي نم أ(لات) | ‎G9‏ مستقبل | مستقبل . (معدل انترلوكين | انترلوكين
— 9 5 — ‏ثقيل‎ ‏السلسلة‎ ‎- 170B2 60 1.2E- 1 9.3E-05 | 7.6E+05 #200 ‏نعم‎ 10 1
A el 6E-05 160E2 2 1406 ‏لا‎ ‎-80 ] 4 28E 1.1E-03 | 3.9E+05 157A2 *130 ‏نعم‎ 09 -0 5 2E-03 159B8 #200 ‏نعم‎ ‎-10 ] 5 22-- ١ ١ 0E-04 | 9.2E+06 1660 *50 ‏نعم‎ 11 -5 5 16901 (ol :90 ‏نعم‎ ‎1174 ‎/ 5.4E-05 157GS8 2090 ‏نعم‎ ‎7 ‎3 8 «000 1 9:000 BEER SAE | em 7 x20-5| =-500 3E-05 158H4 #310 | #14600 ‏لا‎ ‎11 ‏لا‎ 3.1E-06 165B8 5.7E- 10 ‏سا‎ dN 22 fe] [oe] | wel = 2.4E- 280.346. TSY | ui ‏ياري‎ ‎-10 -20 ‏إلى نعم‎ 645205 | 27E+05 ‏ري‎
110* | 50* * المدى الملاحظ عبر عدة تجارب تتميز الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين -22 و 15782 و16668 بقوة بيكومولارية. ‎Jal‏ 7 التفاعلية التبادلية بين أنواع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لمستقبل إنترلوكين-22 ومستقبل إنترلوكين-22 من الرئيسيات غير الإنسان.
5 .لم يكن الحمض النووي دي أوكسي رببوزي المكمل لمستقبل إنترلوكين-22 الرياحي متاحاً ولم يكن هناك ‎dala‏ لاستخلاصة من مجموعات الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي المكمل الرياحي. تم تخصيص البادئات حسب قاعدة بيانات إن سي بي آي ‎NCBI‏ العامة. وقد توفرت العديد من المتواليات لمستقبل إنترلوكين -22 النطاق خارج الخلية ‎(ECD) extracellular domain‏ من قاعدة البيانات العامة ‎(Genbank, NCBI)‏ واحتوت إما إدراج؛ أو حذف؛ أو كليهما (راجع الشكل 5). وقد
0 برر عدم اليقين بشأن متوالية مستقبل إنترلوكين-22 الرياحية الحقيقية الانتساخ من مستقبل إنترلوكين-22 الرياحي. تم تضخيم مستقبل إنترلوكين-22 النطاق خارج الخلية الرياحي عن طريق تفاعل سلسلة بوليمراز من مجموعة الحمض النووي دي أوكسي ‎(gion)‏ المكمل وانتساخه في إطار بعد ببتيد إشارة الجلوبيولين المناعي جاما ‎(IgGkappa) immunoglobulin gamma kappa WS‏ وقبل شظية قابلة لتبلور البشرية في ‎Jib‏ 1701م. ‎(Jeg‏ الرغم من أن الحمض النووي دي أوكسي ريبوزي المكمل المستخدم كان مستمداً من ‎rll‏ إلا أن عمل متواليات نسائل مختلفة قد أثبت أنه قد تم أيضاً انتساخ مستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي. تميز مستقبل إنترلوكين-22- النطاق خارج الخلية الريسوسي بغياب الحذف والإدخال الموجودين في الرياحي (في المريع في الشكل 5) ويوجود اختلافين للحمض الأميني بين مستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي والرياحي (بالخط الغليظ في 0 الشكل 5). بعد إنتاج وتنقية شظية ‎ALB‏ للتبلور مستقبل إنترلوكين-22 الرياحي وشظية قابلة للتبلور مستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي تم اختبار نوعية الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 النطاق خارج الخلية ‎cab‏ والريسوسي والفأري لجميع الأجسام المضادة من الانتقاء الرئيسي في مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم وياستخدام الرنين السطحي البلازموني (8180012. تم 5 شراء مستقبل إنترلوكين -22 الفأري المونومري من ‎(cat 4248-MR) R&D Systems‏ والنتائج
ملخصة في الجدول 12. الجدول 12 التفاعلية التبادلية للأجسام المضادة وحيدة النسيلة مستقبل إنترلوكين-22 1 عائلة نطاق متغير ثقيل النسيلة بشري فأري رياحي رسوسي السلسلة احا ‎170B2 1‏ نعم لا اختباره ا احا ‎170D6 1‏ نعم لا اختباره ‎KN‏ ‎EN‏ ‎EN‏
22 16608 نعم لا نعم نعم
‎=nt‏ لم يتم اختباره
‎JU‏ 8 تعيين القمة اللاصقة
‏تم استخدام طريقتين لتعديد ومقارنة القمم اللاصقة المربوطة بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة
‏مستقبل إنترلوكين-22: مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم التنافسية وعد خلايا
‏5 التدفق.
‏1-8 تعيين القمة اللاصقة باستخدام مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم التنافسية
‏تمت مقارنة القمم اللاصقة التي تعرفت عليها الأجسام المضادة ببعضها باستخدام مقايسة
‏الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم التنافسية. تم تغليف جسم مضاد وحيد النسيلة واحد على
‏الأقل ممثل لعائلة نطاق متغير ثقيل السلسلة في طبق 140150:0. بعد ذلك؛ تمت إضافة مستقبل 0 إنترلوكين-22 بشري معالج بالبيوتين في وجود كمية كبيرة من الجسم المضاد لاختبارها. تم الكشف
‏عن ارتباط مستقبل إنترلوكين-22 المعالج بالبيوتين بالجسم المضاد المغلف باستخدام ستريتافيدين
‎streptavidin‏ مترافق مع اتش آر بي ‎HRP‏ وفي حالة عدم رصد مستقبل إنترلوكين-22 المعالج
‏بالبيوتين ‎cbiotin‏ وهو ما يعين أن الجسم المضاد القابل لذويان قد ‎aie‏ الارتباط بالجسم المضاد
‏وحيد النسيلة المغلف؛ تقرر أن كلا الجسمين المضادين أحادي النسيلة يرتبط بنفس القمة للاصقة؛ أو لديهما قمة لاصقة متداخلة. كما تم الارتقاء بتحديد القمة اللاصقة باستخدام ‎Fabs‏ بدلاً من
‏الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. وقد سمحت شظايا ‎Fab‏ الأصغر بتمييز القمم اللاصقة القريبة
‏جداً.
‏تم تحديد العديد من القمم اللاصقة للأجسام المضادة من عائلات نطاق متغير تقيل السلسلة 8-1؛
‏0» 11« ¢19 و22. وقد أظهر تحديد القمة اللاصقة تغطية قمة لاصقة واسعة جداً لمثل هذا 0 البروتين الصغير (25 كيلو دالتون). وكما يتضح في الشكل 6؛ فإنه قد تم تجميع القمم اللاصقة
‏حسب ما إذا كانت الأجسام المضادة (1) قد أعاقت ارتباط إنترلوكين 22 في المعمل وإرسال
‏إشارات إنترلوكين 22 المعادلة في تجرية تعتمد على الخلية (الريع الأيسر السفلي)؛ (2) قد أعاقت
‏ارتباط إنترلوكين 22 في المعمل ولكن بدون معادلة النشاط ‎all)‏ الأيمن العلوي)؛ أو (3) لم تعق
إرسال إشارات إنترلوكين 22 في المعمل ولكن مع وجود نشاط معادلة في تجربة تعتمد على الخلية ‎al)‏ الأيمن السفلي). ثبت وجود ستة قمم لاصقة متداخلة ولكن متمايزة تعوق وتعادل (راجع الريع الأيسر السفلي) ومن بين هذه القمم اللاصقة الست؛ توجد اثنين منها (جسم مضاد أحادي النسيلة من العائلة 4 و22) متداخلة مع الجسم المضاد المعياري (280.346.1537؛ راجع طلب براءة الاختراع الدولية رقم 061119/2011). لم تكن القمة اللاصقة متطابقة مع المعيار لأن هذه الأجسام المضادة وحيدة النسيلة (من العائلة 4 و22) كانت قادرة على التنافس ‎Lad‏ مع جميع جسم مضاد أحادي النسيلة من العائلات 1؛ 5؛ 6؛ و7 على الرغم من أنها لم تكن قادرة على التنافس مع الجسم المضاد المعياري. وتخلص هذه البيانات إلى وجود مجموعتي قمم لاصقة مختلفتين» إحداها مكونة من الجسم المضاد المعايري والأخرى مكونة من جسم مضاد أحادي 0 النسيلة من العائلات 1( 5 6؛ و7 وهناك مجموعة ثالثة (جسم مضاد أحادي النسيلة من العائلة 24)) تتداخل مع المجمعتين (الشكل 6). كما يتضح في ‎all‏ الأيمن العلوي في الشكل 6؛ فإنه قد تم تحديد أجسام مضادة ترتبط بإنترلوكين-22 ولكها لا تعوق ارتباط إنترلوكين-22 أو نشاط المعادلة في داخل جسم الكائن الحي. ومن المحتمل أن هذه الأجسام المضادة تربط مناطق إنترلوكين-22 التي لا تدخل في ريط 5 جزيء الربط أو تنشيط إرسال الإشارات ويمكن استخدامها في الكشف النقي. وقد كانت الأجسام المضادة الثلاثة المبينة في ‎all‏ الأيمن السفلي من الشكل 6 غير طبيعي في أنها تعادل نشاط إنترلوكين-22 في جسم الكائن الحي ولكنها لا تعوق إنترلوكين-22 في المعمل؛ مما يدل على قمة لاصقة وظيفية جديدة ونموذج تأثير غير متوقع. 2-8 تعيين القمة اللاصقة باستخدام تحليل عد خلايا التدفق 0 ورد في ))2008( 1333-1344 :)16(9 ‎Jones et al. (Structure‏ بنية إنترلوكين 22 المرتبط بنطاق خارج الخلية من مستقبل إنترلوكين-22 1. وفي هذه الورقة البحثية؛ أثبت المؤلفون أن نطاقي مستقبل إنترلوكين-22 المسميين ‎(D235 DI‏ يتفاعلان مع جزيء الريط إنترلوكين 22 عند الموقع 11 والموقع ‎cal‏ على الترتيب (راجع الشكل 7). والوحدتين البنائيتين الأساسيتين في مستقبل إنترلوكين -22- ‎DI‏ اللتين تدخلان في التفاعل المباشر مع الموقع 1آ لإنترلوكين-22 هما الليسين ‎(K58) 58 5‏ والتيروسين 60 (760). ويدخل التريبتوفان 208 ‎(W208)‏ لمستقبل إنترلوكين- 12-22 بشكل مباشر في التفاعل مع الموقع ‎Ql‏ لإنترلوكين-22 (انظر الشكل 7).
تم اختبار ارتباط الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 والجسم المضاد المعياري (280.346.257) بخلايا الضد البيضاء مفرطة التعبير عن مختلف طفرات مستقبل إنترلوكين -22. تحتوي طفرات مستقبل إنترلوكين-22 على تطفير الأحماض الأمينية المعروفة اشتراكها في تفاعل إنترلوكين 22/ مستقبل إنترلوكين 22. وفى هذا الإعداد؛ تمت معالجة الأجسام المضادة بالبيوتين؛ وإضافتها إلى الخلايا وتم رصد ارتباط الجسم المضاد بمستقبل إنترلوكين-22 باستخدام ستريتافيدين مرقم وباستخدام عد ‎WIA‏ التدفق. وبلخص الجدول 13 النتائج التي تم الحصول عليها. الجدول 13 ارتباط الجسم المضاد بالخلايا المعبرة عن طفرات مستقبل إنترلوكين -22 طفرات نط مستقبل اق إنترلوكين | مد -22 < بشري ‎J‏ ‏شٍّ 0 2 ‎K5|T20|‏ |76 نا ‎E9| T8‏ |11 0 ّ ه08 7 اهة احه احد | ‎9A‏ احخه ‎TA|‏ ‎A D‏ ‎J‏ ‏الم ‎Ld‏ ‏8 ‎Fa‏ ‎m‏ ‏موقع ربط ‎1A/ .‏ إنترلوكين ‎IA|1A|1A| 15| 1B| 1B‏ اخااهااى ‎IB|‏ ‏-22 ‎RXR] [AR‏ .280.346 يرا ‎fle x] ee]‏ ‎198A1‏ ‎166GS‏ ‏19787 ‎196F8‏
4 |8 )+ اج + ‎le] + a) el‏ + اخ += الريط؛ ‎X‏ = التطفير في + يؤدي إلى فقد ارتباط الجسم المضاد. توضح نتائج عد ‎WDA‏ التدفق بوضوح أن الجسم المضاد المعياري ‎TSY‏ .280346 يتفاعل مع الوحدات البنائية للنطاق 01 ‎K58)‏ و760). ونفس الأمر ينطبق على جسم مضاد مستقبل إنترلوكين-22 مقارنة ثانية؛ ‎CAMR22‏ على الرغم من أن القمة اللاصقة ليست واحدة ‎lela‏ لأن تطفير 21128 ‎jig‏ على ريط ‎LAMR22‏ وكما هو متوقع من اختبار مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم فإن تعيين القمة اللاصقة الذي يوضح أن أجسام مضادة معينة من ‎LOU‏ لا تتنافس مع ‎TSY‏ .280.346 فإن الأجسام المضادة الأخرى التي تم اختبارها لم تتأثر بالتطفيرات التي تؤثر في ربط /7ا280.346.18 بمستقبل إنترلوكين-22. وقد أكد هذا على أن الأجسام المضادة تستهدف قمة لاصقة أخرى؛ ريما تتضمن الوحدات البنائية في النطاق 02.إن 0 تطفير 2090م في النطاق 02 لمستقبل إنترلوكين -22 قد لغى ربط 19881 مما يؤدي أن 19881 والجسم المضاد من العائلة 5 يرتبطان بالنطاق 02 لمستقبل إنترلوكين-22 (راجع الشكل 7ب). من المثير للدهشة أن الجسم المضاد ‎(166G8‏ الذي يشترك تماماً في نفس نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎(198AT Jie‏ ولكن لديه نطاق متغير خفيف السلسلة مختلف؛ لا يتأثر بتطفير ‎A209D‏ ‏مما يدل على أن نطاق متغير خفيف السلسلة يدخل في التفاعل. ومن المفترض أن نطاق متغير 5 خفيف السلسلة ل16668 يسمح بوحدة بنائية كبيرة في الموضع 209؛ بينما نطاق متغير خفيف السلسلة ل19881 لا يسمح بذلك. وبتأكد هذا الفرض بنوعية الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي. ففي الريسوس» يحتوي مستقبل إنترلوكين-22 على سيرين عند الموضع 209. ونظراً لأن 16608 يسمح بحمض أميني كبير عن ذلك الموضع؛ فإنه قد يريط مستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي بينما 19881 لا يستطيع ربط مستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي لأنه لا يسمح بودات 0 بنائية كبيرة. المثال 9 معادلة إرسال إشارات إنترلوكين 20 وإنترلوكين 24 24 ‎interleukin‏ (1124) في ‎Lyd‏ ‏تعتمد على الخلية تم اختبار الأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 لمعرفة قدرتها على إعاقة إرسال الإشارات المعتمد على إنترلوكين 20 وإنترلوكين 24 في الخلايا التي تعبر بشكل مشترك عن مستقبل
إنترلوكين-22 ومستقبل انترلوكين 20 ب. وهناك اختلاف ميكانيكي بين تنشيط مستقبل يعتمد على إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 وإنترلوكين 24. ومن المعتقد أن إنترلوكين 22 يحدث إشارات عن طريق ارتباط أول بمستقبل إنترلوكين-22؛ مما يحفز استخدام المستقبل المشترك مستقبل إنترلوكين ‎(IL10R2) interleukin 10 receptor 2 2 0‏ وتنشيط المعقد ثلاثي الوحدات. بالنسبة لإنترلوكين من المعتقد أن هذا السيتوكين يريط أولاً المستقبل المشترك مستقبل إنترلوكين 20 2 ‎(IL20R2) interleukin 20 receptor 2‏ قبل استخدام مستقبل إنترلوكين -22 وتنشيط المعقد ‎GN‏ ‏الوحدات. وأخيراً بالنسبة لإنترلوكين 24؛ فليس من الواضح كيفية استخدام معقد المستقبل وتنشيطه؛
ولا مكان ريط إنترلوكين 24.
1-9 إرسال إشارات إنترلوكين 24
0 تتم استخدام العديد من سلالات الخلايا لاختبار إرسال الإشارات المعتمد على إنترلوكين 24؛ 3- مستقبل إنترلوكين -22 بشري /20 2 أو ‎—Baf3‏ مستقبل إنترلوكين -22 فأري/ 20 2. وقد أحدث إنترلوكين 24 تكاثر سلالات الخلايا هذه مع نافذة واضحة تم قياسها عن طريق مستوى هيكوسامينديناز ‎hexosaminidase‏ (القراءة المستخدمة في عد الخلايا) والذي تراوح من ‎OD‏ 0.17 إلى 1.5 ‎—Baf3 WAN‏ مستقبل إنترلوكين-22 بشري/ 20 ب وتراوح من 0.15 إلى 0.8 لخلايا
‎—Baf3 5‏ مستقبل إنترلوكين-22 فأري/ 20 ب. ولم يكن لأي من الأجسام المضادة التي تم اختبارها تأثير على التكاثر الحادث بسبب إنترلوكين 24. وتدل النتائج على أنه إما إنترلوكين 24 له نموذج مختلف ‎Lala‏ من تتنشط إنترلوكين 24 عن طريق الارتباط بموقع مختلف جداً عن إنترلوكين-22 وإنترلوكين 20« أو أن إنترلوكين 24 لا يدخل في إرسال إشارات إنترلوكين 24 في سلالة الخلية التي تم اختبارها (التجرية لا تتنباً بنشاط المعادلة).
‏0 2-9 إرسال إشارات إنترلوكين 20 يتم أخذ سلالة الخلايا ‎—Baf3‏ مستقبل إنترلوكين -22 بشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب من سلالة الخلية ‎Baf3‏ ولكنها تعبر تعبيراً مشتركاً عن مستقبل إنترلوكين-22 بشري مع مستقبل إنترلوكين - 0 بيتا مما يسمح بتكاثر الخلايا في وجود إنترلوكين 20. ويمكن للجسم المضاد الذي يعادل مستقبل إنترلوكين-22 بشري أن يعيق تكاثر الخلية المحفز بإنترلوكين 20. ويوضح الشكل 8
‏5 النتائج التي أنتجت اختبارات أجسام مضادة مأخوذة من اللاما مع الجسمين المضادين المعياريين ‎AMR2 5 202467‏ .
تم اختبار تكاثر إنترلوكين 20 على ‎—Baf3‏ مستقبل انترلوكين 22 بشري / مستقبل انترلوكين 20 ب بالتوازي مع تجرية تكاثر إنترلوكين 22 ‎BWI‏ - مستقبل انترلوكين 22 بشري؛ ما سمح بمقارنة
جيدة بين نوعي السيتوكين. والنتائج حتى ثلاثة تجارب مستقلة موضحة في الجدول 14. الجدول 14 فاعلية الأجسام المضادة في إعاقة إرسال إشارات إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 عبر
مستقبل إنترلوكين 22 عائلة نطاق م1 إعاقة م1 إعاقة متغير ثقيل إنترلوكين 22 (بيكو | إنترلوكين 20 (بيكو السلسلة مولار) مولار) ‎EE‏ ‎em [TL]‏ ‎205A5‏ 1200-500 1 توزيعها * المدى الملاحظ عبر عدد يصل إلى ثلاث تجارب )2250 2292 2301 لإنترلوكين 20 و2253؛ 2292 230162428 لإنترلوكين 22)؛ ‎ine‏ غير تنافسي؛ ‎int‏ غير مختبر؛ ‎ies‏ سلسلة معاد توزيعها. من الممكن استنتاج أن جميع الأجسام المضادة من العائلات أرقام 1 و4؛ و5 كانت قادرة على 0 إعاقة كل من إنترلوكين 20 وإنترلوكين 22. ومن الصعب مقارنة الفعالية بين التكاثر المحفز بإنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 بسبب اختلاف الحساسية؛ التي تعتمد على تركيز السيتوكين؛ ورقم المستقبل والتباين الحيوي داخل الخلية. مع ذلك؛ فقد ثبت أن معظم الأجسام المضادة أكثر فاعلية
في إعاقة إشارات إنترلوكين 22 من إعاقة إشارات إنترلوكين-2 ‎(IL-2) interleukin-2‏ وكان الاستثناء المثير هو 15782 حيث كانت له نفس فعالية الإعاقة لكل من إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 المتال 10 اختيار الأجسام المضادة القائدة وعمل سلالات الخلايا كما تحسنت ألفة معظم الأجسام المضادة المعنية (معادلة إشارات إنترلوكين-22) بإعادة توزيع السلسلة الخفيفة. وفي أثناء إعادة توزيع السلسلة الخفيفة تم دمج نطاق ثابت ثقيل السلسلة 1 نطاق متغير ثقيل السلسلة للجسم المضاد المختار مع مجموعة السلسلة الخفيفة من نفس حيوان اللاما الذي أخذ منه نطاق ثابت ثقيل السلسلة نطاق متغير ثقيل السلسلة. ثم تم إجراء عدة جولات من انتقاء عرض الملتهمة لمعدل الاستبعاد لتحديد أزواج نطاق ثابت ثقيل السلسلة نطاق متغير ثقيل 0 السلسلة: نطاق متغير خفيف السلسلة نطاق المنطقة الثابتة خفيف السلسلة ذات أفضل ألفة. وفي ‎dlls‏ الجسم المضاد 16608؛ وجدت العديد من النسائل ذات حركيات ربط محسنة مثل 19881؛ ولكن للأسف؛ فإن هذه النسيلة فقدت معظم تفاعليتها التبادلي الررسويسية ومن ثم ظلت 166068 أكثر المرشحات جاذبية في العائلة رقم 5 للتطوير. وفي حالة 15782 (من العائلة رقم 4)؛ تم تحديد العديد من ‎Fab‏ (مثل ‎(218A7‏ ذات ألفة محسنة مقارنة ب15782. تم نقل الأجسام المضادة 5 التالية إلى مزيد من التطوير. وتم انتقاء هذه الأجسام المضادة بناء على الفعالية؛ والتفاعلية المتبادلة للأنواع والقمة اللاصقة وحالة التأثير. ‎218A7‏ (صورة محسنة من 15782؛ العائلة رقم 4)- ثبت أن لهذا الجسم المضاد فعالية جيدة ضد إنترلوكين 22 و إنترلوكين 20 (تحت نانو مولار)؛ ويتميز بالتفاعلية المتبادلة مع مستقبل إنترلوكين-22 المأخوذ من رئيسيات غير الإنسان ‎aly‏ لا ‎Jolin‏ تبادلياً مع مستقبل إنترلوكين- 0 22 الفأري. وقد ثبت أن 15782 له قمة لاصقة على مستقبل إنترلوكين-22 مختلفة ولكنها متداخلة مع الجسم المضاد المعياري 280.346.151. 66688 (العائلة رقم 5)- ثبت أن لهذا الجسم المضاد فعالية عالية (أقل من بيكو مولار) وبتميز بتفاعلية تبادلية لبعض الأنواع» لأنه يرتبط بمستقبل إنترلوكين-22 الريسوسي (ولكنه ليس مع مستقبل إنترلوكين -22 الرباحي» ولا الفأري). 5 يلخص الجدول 15 التالي خصائص الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 المأخوذة. الجدول 15 خصائص أجسام مضادة مستقبل إنترلوكين-22 المأخوذة من اللاما المنتقاة للسلالات
الجرثومية القمة التفاعلية التبادلية الفاعلية اللاص قة عائلة الفعالية نطاق ‎١‏ تمد 0 إنترلوكين | إنترلوكين ‎١‏ النسبية ‎J Fo a LT‏ بشر | ريا فارا ‏ 22 20 | إتترلوكين 0 و إنترلو ‎os 0"‏ ايا لك | | 22مقبل ~= مر . مولار) | مولار) إنترلوكين كين ‎OE Ld)‏ | 22 20 ‎a‏ ‎D1/D 1.09 -184 -131 ++ | ++ | ++ 4 157‏ ‎A2‏ + + + 70 5 545 2 218 ++ | ++ | ++ 0- غير ‎D1/D‏ ‎AT‏ 4 + + + 2 360 مختبر 60 - ‎D2 | 3.67 84-6 + Hog | 100‏ ‎G8‏ + 70 1 .280 ‎°F‏ | 22- | 280- ‎DI | 5 LTT 346.‏ ‎YY + TSY‏ | + | 250 800 ‎١‏ - بشري؛ ‎cyno‏ = = 4 0 ربسوسي؛ ‎=m‏ فأري ‎JU‏ 11 عمل السلالات الجرثومية من الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 ‎166G8 218A7‏ تم عمل السلالات الجرثومية كما تم وصفه في طلب براءة الاختراع الدولية رقم 080350/2011 والذي تندرج محتوياته في الوثيقة الحالية بكامله كمرجع. تم تطفير مناطق تحديد التمامية لإزالة التعديلات بعد الترجمة المحتملة مع مواضع أخرى ‎dine‏ حيث ثبت أن تختف في الأجسام المضادة عن نفس عائلتى نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة ذواتى إقران مشابه. تم تقييم نطاقات متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة للأجسام المضادة
جرثومية السلالة التي تم إنتاجها من أجسام مضادة مأخوذة من ‎LUI‏ 218/87 و166068 لمعرفة تطابقها مع المتواليات البشرية. كما تم إجراء مقارنة مع الجسم المضاد المعياري ‎TSY‏ .280.346 والنتائج مبينة في الجدول 16 التالي. الجدول 16 التطابق البشري للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 جرثومية الخلايا الناتجة من ‎218A7 5‏ و16668 7 نسبة تطابق # نسبة ‎١‏ 7 نسبة | لنطاق معدل معدل تطابق تطابق متغير الاستبعاد الاستبعاد لنطاق | لنطاق ‎١‏ ثقيل لمستقبل | لرسوس اسم النسيلة متغير | متغير | السلسلة + | إنترلوكين- | مستقبل ثقيل | خفيف | نطاق | 22 البشري | إنترلوكين- السلسلة | السلسلة | متغير 1 122 السلسلة 0 ا ااه
2.73E-0.3 | 1.25E-0.3 93.5 949 92 227G10 17 7 0816-1 01E-04¢4 | 4 98.7 100 230H2 1
2715-1 > 30 2715-1 24E-04¢4 | 1 96.2 100 232F5 11 30 3214-1 © 30 33E-«¢1 35E-04¢4 | 98.2 97.5 98.9 231E12 30 2514-1 © 30
‎32E-¢1‏ ‎45E-04¢4 | 98.8 98.7 98.9 230D5 2‏ 360 ‎32E-¢1‏ ‎55E-04¢4 | 98.2 97.5 98.9 231B11 4‏ 360 م ممع | ممع 08-65 16 2201 97.7 97.5 6 | 77-044 360 3514-1 ‎30E-04¢5 | 98.2 97.5 98.9 231F12 7‏ 360 ‎97E-¢1‏ ‎95E-04¢5 | 97.6 97.5 97.7 228A4 17‏ 360 ‎85E-¢2 4814-1‏ ‎231A8 15‏ 97.7 97.5 97.6 30 360 ‎30E-¢3 86E-¢1‏ ‎229G2‏ 98.9 97.5 98.2 30 360 8 204677 | 788.50 | 7100 | 19430 - | - * محددة لشظايا ‎Fab‏ ‏الجسم المضاد 23009 تم اختياره كصورة سلالة جرثومية للجسم المضاد7م2188 ؛ والجسم المضاد 5م اختياره كصورة سلالة جرثومية للجسم المضاد 16668. متوالات نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة للأجسام المضادة21887 ¢ ‎230C9‏ و22305 موضحة في الجداول 21-17أدناه. (متواليات 16608 موضحة في الجداول 9-6 ‎(Del‏ ‏الجدول 17 متواليات مناطق إطارية ومناطق تحديد التمامية لنطاق متغير ثقيل السلسلة ‎218A7 J‏ 009و 223065
‏الم | المذ | الم | مذ | الم | الم | الم‎ ١ ‏الذ | المذ | الم | مذ | الم | الم | الم | مذ‎ ‏اة الية اقة | لية‎ af ‏لية |الإط‎ sl Ql] a) spd ‏لة |الإط‎ 3, ‏ل‎ J 3, Aah 3, 4) 3, ‏ل ,3 تحد‎ J 3, Aah 3, 4) ta | Wa ‏م: |ديدام:‎ 3 tau] ‏م: |ديدام: أطاام:‎ 1 ‏رد‎ all ‏رد التم‎ all ‏ما 5 امد ما‎ 4 ‏م‎ 2s 2 ‏م‎ ‎0 0 3 1 7١ 7 VI 5| ‏ا397 |51 |4 ا"‎ 2 S| 1| 071 0 0 TIS Y 7 Y QL| 8
Q F RD N R D VE| A
G S NA D Q M SG| 7
T G KN GS A S GG
Q T TL NT P LV
7 Y YL A G QP
T Y 011 YS K GG 7 5 NS DS G SL
S E LK 7 L RL
S S SE K E SC
DT G Ww AA
AV 7 SG
YY S FTF
CA S
K
3| W VI 3| RF] 3] 51| 3(W{| 3 S| ‏ا3‎ 07| 3 ‏اع‎ G Gl 71 TIS| ‏الا أو‎ 5| V| 4 | ‏اد‎ QL] 0
Q F RD N R D VE| ©
G S NS D Q M SG| 9
T G KN AS A N GG
L T TL NT P LV
7 Y YL A G QP
T Y 011 YS K GG 7 5 NS DS G SL
S E LR 7 L RL
S S AE K E SC
DT G Ww AA
AV Vv SG
YY S FTF
CA S
K
47| 41 P| 4| RF| 4] GI| 4| S| ‏ا3‎ 07| 2 41 Gl 1| 2 TIS| 1| HI| ‏ان‎ V Y| gf QL| 3
K G RD SG R F VE| G
G P NA GI Q M SG| 5
T F KN TY A S GG
L K TL YT P LV
7 A YL DS G QP
T H QM 7 K GG
Vv Y NS K G SL
S N LR G P RL
S G AE E SC
A DT Ww AA
K AV Vv SG
Y YY S FTF cv S
T
الجدول 18 متواليات مناطق إطارية ومناطق تحديد التمامية لنطاق متغير خفيف السلسلة ل21887؛ 2206569 ‎af‏ | المنط | الم | مذ | الم | المتط | اذ | مذ | الم | المنطة | ال ١م ‎١‏ الم | ال | ال سد اقة توا ‎ak]‏ أتوا اقة |متاطة|توا اأة مد اذ | ‎ef wf Ne]‏ ‎a‏ |الإطا أليةأة آل |الإطا|وا ‎sf‏ الية | الإطار | وال اط اية اذ | وا ‎B14‏ اتح |ة | ‎d‏ اتح |رقماية 3 ‎Ea]‏ |رقم اط اية م: ‎5H wa‏ 2 ة |ديد ‎dl‏ رق اة |: 31 ار ‎A‏ م ,3 ‎A‏ م 3 0 م ما م: | ما ‎a‏ ‏م م 2 ل 8 8 د ‎L‏ ‏1 2 ال ار ‎J a‏ = 8 ا 4 د 8 3 ‎AF] 210] 4 NTA 4] Gla] WY]| 1| Qf 4] pv] 2‏ ‎o| S| g| TLTI| 7| Ql | 00| ¢| G| |1190| 1‏ اتاو ‎G G SGA N KP G PSA | 8‏ ‎G S QAE N GQ Y VSV | A‏ ‎T S DEA R AP Y SLG| 7‏ ‎K S EYY 9 VL A QTA‏ ‎L A 0 S VIY H RIT‏ ‎T N 0‏ ‎A‏ %\ ‎L \%‏
5+" ‏|0ا5‎ 5| NTA| ‏ا4‎ G|5| WY| 1] 0| ‏ا5‎ SYE| 2 0| ‏ا|5ا4‎ |1111| 7| 0| 1| QQ] ¢| 6| o| LTQ| 3 0 0 SRA N KP G PSS | 0
G S QAE N GQ Y VSv | C
T S DEA R AP Y ALG | 9
K S DYY P VL A QTA
L S 0 S VIY H RIT
T N 0
Vv A
L Vv 6|F| 211A NTA| 5 E| 5| WY | 5| 1| 5] QSA| 2 1161] 71S SLTI| ‏اع ا او‎ 00| 7] G| ¢| LTQ| 2
G Y SGL N LPG T PPS | 3
G R QAE K KA SS VSG | G
T L DEA R PKL DI SPG| 5
Q Y DYY S LIY G QSV
L A C S S TIS
T D Y 0
Vv Y N
L 7 Y 7
S
223G5 23009 218A7 ‏الجدول 19 متواليات نطاق متغير ل‎ ‏النسدٍ | نطاق متغير ثقيل السلسلة المتوالية | نطاق متغير خفيف السلسلة المتوالية‎ : ‏رقم : رقم‎ A 62 | LPVLTQPSAVSVSLGQT 29 | QVQLVESGGGLVQPGGSLR | 218
ARITCOQGGYYAHWYQQ LSCAASGFTESSYDMSWVR | ‏بط‎ ‎KPGQAPVLVIYGQNNRP QAPGKGLEWVSSIYNDGSN | 230
SGIPERFSGSGAGNTATL TAYSDSVKGRFTISRDNAK | C9
TISGAQAEDEAEYYCQS NTLYLQMNSLKSEDTAVYY
GSSSANAVFGGGTKLTV CAKVGFSGTYYSESWGQGT
L QVTVSS
64 | SYELTQPSSVSVALGQT 63 | QVOLVESGGGLVQPGGSLR | 223
ARITCOQGGYYAHWYQQ LSCAASGFTFSSYDMNWVR | G5
KPGQAPVLVIYGQNNRP QAPGKGLEWYVSSIYNDASN | 218
SGIPERFSGSGAGNTATL TAYSDSVKGRFTISRDNSKN | A7
TISRAQAEDEADYYCQS TLYLOQMNSLRAEDTAVYYC
GSSSSNAVFGGGTKLTV AKVGFSGTYYSESWGQGTL
L VTVSS
QSALTQPPSVSGSPGQS 65 | QVQLVESGGGLVQPGGSLR | 230
VTISCTGTSSDIGSYNYV LSCAASGFTFSSYEMSWVR | C9
SWYQQLPGKAPKLLIYE QAPGKGPEWVSGIHISGGIT
VNKRSSGVPDRFSGSKS YYTDSVKGRFTISRDNAKN
GNTASLTISGLQAEDEA TLYLOQMNSLRAEDTAVYYC
DYYCASYRLYADY 16 VTPPGPFKAHYNGAKYWG
GGTQLTVL KGTLVTVSS
223G5 5230C9 ‏الجدول 20 متواليات ثقيلة السلسلة وخفيفة السلسلة ل‎ ‏النسيا | سلسلة ثقيلة المتو ا خفيف السلسلة المد‎ ‏الية والية‎ 8 ‏رقم: رقم:‎
SYELTQPSSVSVALGQT | 67| QVQLVESGGGLVQPG | 230
ARITCQGGYYAHWYQ GSLRLSCAASGFTFSSY | C9
QKPGQAPVLVIYGQNN DMNW VRQAPGKGLE
RPSGIPERFSGSGAGNT WVSSIYNDASNTAYSD
ATLTISRAQAEDEADY SVKGRFTISRDNSKNT
YCQSGSSSSNAVFGGG LYLQMNSLRAEDTAV
TKLTVL YYCAKVGFSGTYYSES
GQPKAAPSVTLFPPSSE WGQGTLVTVSS
ELQANKATLVCLISDFY ASTKGPSVFPLAPSSKS
PGAVTVAWKADSSPV TSGGTAALGCLVKDY
KAGVETTTPSKQSNNK FPEPVTVSWNSGALTS
YAASSYLSLTPEQWKS GVHTFPAVLQSSGLYS
HRSYSCQVTHEGSTVE LSSVVTVPSSSLGTQT
KTVAPTECS YICNVNHKPSNTKVDK
KVEPKSCDKTHTCPPC
PAPELLGGPSVFLFPPK
PKDTLMISRTPEVTCV
VVDVSHEDPEVKFNW
YVDGVEVHNAKTKPR
EEQYQSTYRVVSVLTV
LHQDWLNGKEYKCKV
SNKALPAPIEKTISKAK
GQPREPQVYTLPPSRD
ELTKNQVSLTCLVKGF
YPSDIAVEWESNGQPE
NNYKTTPPVLDSDGSF
FLYSKLTVDKSRWQQ
GNVFSCSVMHEALHN
HYTQKSLSLSPGK
70 | QSALTQPPSVSGSPGQS QVQLVESGGGLVQPG | 223
VTISCTGTSSDIGSYNY GSLRLSCAASGFTFSSY | G5
VSWYQQLPGKAPKLLI FMSWVRQAPGKGPEW
YEVNKRSSGVPDRFSG VSGIHISGGITYYTDSV
SKSGNTASLTISGLQAE KGRFTISRDNAKNTLY
DEADYYCASYRLYAD LQMNSLRAEDTAVYY
YVFGGGTQLTVL CVTPPGPFKAHYNGA
GQPKAAPSVTLFPPSSE KYWGKGTLVTVSS
‎ELQANKATLVCLISDFY ASTKGPSVFPLAPSSKS‏ ‎PGAVTVAWKADSSPV TSGGTAALGCLVKDY‏ ‎KAGVETTTPSKQSNNK FPEPVTVSWNSGALTS‏ ‎YAASSYLSLTPEQWKS GVHTFPAVLQSSGLYS‏ ‎HRSYSCQVTHEGSTVE LSSVVTVPSSSLGTQT‏ ‎KTVAPTECS YICNVNHKPSNTKVDK‏ ‎KVEPKSCDKTHTCPPC‏ ‎PAPELLGGPSVFLFPPK‏ ‎PKDTLMISRTPEVTCV‏ ‎VVDVSHEDPEVKFNW‏ ‎YVDGVEVHNAKTKPR‏ ‎EEQYQSTYRVVSVLTV‏ ‎LHQDWLNGKEYKCKV‏ ‎SNKALPAPIEKTISKAK‏ ‎GQPREPQVYTLPPSRD‏ ‎ELTKNQVSLTCLVKGF‏ ‎YPSDIAVEWESNGQPE‏ ‎NNYKTTPPVLDSDGSF‏ ‎FLYSKLTVDKSRWQQ‏ ‎GNVFSCSVMHEALHN‏ ‎HYTQKSLSLSPGK‏ ‏الأجزاء المظللة من المتوالية تمثل المناطق الثابتة للسلاسل الثقيلة والخفيفة. وتمثل الوحدة البنائية ‎al 0”“‏ تظهر بالخط الغليظ فى المنطقة الثابتة من السلسلة الثقيلة طفرة ‎CN” Ce‏ الجدول 21 متواليات البولى نيوكليوتيد التى تشفر متواليات النطاق المتغير /المتواليات ثقيلة السلسلة وخفيفة السلسلة لكل من ‎218A7‏ 23009 و22365 ‎wall‏ | نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎gill‏ | نطاق متغير خفيف السلسلة المتوا a ‏الية‎ a رقم: رقم: 77 | CTGCCTGTGCTGACTC | 76١ CAGGTGCAGCTCGTG | 218
AGCCCTCCGCGGTGTC GAGTCTGGGGGAGGC | A7
CGTGTCTTTGGGACAG TTGGTGCAGCCTGGG
ACGGCCAGGATCACCT GGTTCTCTGAGACTCT
GCCAAGGGGGCTATTA CCTGTGCAGCCTCTG
TGCTCACTGGTACCAG GATTCACCTTCAGTA
CAGAAGCCAGGCCAG GCTACGACATGAGCT
GCCCCTGTGCTGGTCA GGGTCCGCCAGGCTC
TCTATGGACAGAATAA CAGGGAAGGGGCTGG
TAGGCCCTCAGGGATC AGTGGGTGTCCAGTA
CCTGAGCGCTTCTCTG TTTATAATGACGGTA
GCTCCGGCGCTGGGAA GTAACACAGCCTATT
CACAGCCACCCTGACC CAGACTCCGTGAAGG
ATCAGCGGGGCCCAG GCCGATTCACCATCT
GCTGAGGACGAGGCT CCAGAGACAACGCCA
GAGTATTACTGTCAGT AGAACACGTTGTATC
CAGGAAGCAGTAGTG TGCAAATGAACAGCT
CTAATGCTGTGTTCGG TGAAATCTGAGGACA
CGGAGGGACCAAGCT CGGCCGTGTATTACT
GACCGTCCTC GTGCAAAAGTTGGCT
TTAGTGGTACTTACTA
CAGTGAATCATGGGG
CCAGGGGACCCAGGT
CACCGTGTCCTCA
79 | TCCTACGAACTGACTC | 78 | CAGGTGCAGCTCGTG | 230
AGCCCTCCTCGGTGTC GAGTCTGGGGGAGGC | C9
CGTGGCGTTGGGACAG TTGGTGCAGCCTGGG
ACGGCCAGGATCACCT GGTTCTCTGAGACTCT
GCCAAGGAGGCTATTA CCTGTGCTGCCTCTGG
TGCACACTGGTACCAG ATTCACCTTCAGTAG
CAGAAGCCAGGCCAG CTACGACATGAACTG
GCCCCTGTGCTGGTCA GGTCCGCCAGGCTCC
TCTATGGACAGAATAA AGGGAAGGGGCTGGA
TAGGCCCTCAGGGATC GTGGGTGTCCAGCAT
CCTGAGCGCTTCTCTG TTATAACGACGCCAG
GCTCCGGCGCTGGGAA TAACACAGCCTATTC
CACAGCCACCCTGACA AGACTCCGTGAAGGG
ATCAGCCGCGCCCAGG CCGATTCACCATCTCC
CTGAGGACGAGGCTG AGAGACAACTCAAAG
ACTATTACTGTCAGTC AACACGTTGTATCTG
AGGAAGCAGTAGTTCT CAAATGAACAGCCTG
AATGCTGTGTTCGGCG AGAGCTGAGGACACG
GAGGGACCAAGCTGA GCCGTGTATTACTGT
CCGTCCTC GCGAAAGTTGGCTTT
AGTGGTACTTACTAC
AGTGAATCATGGGGC
CAGGGGACCCTCGTC
ACTGTCTCCTCA
81 | CAGTCTGCCCTGACTC CAGGTGCAGCTCGTG | 223
AGCCTCCCTCCGTGTC GAGTCTGGGGGCGGC | G5
TGGATCTCCTGGACAG TTGGTGCAGCCTGGG
TCTGTCACCATCTCCT GATTCTCTGAGACTCT
GCACTGGAACCAGTA CCTGTGCAGCCTCTG
‎GTGACATTGGGTCCTA GATTCACCTTCAGTA‏ ‎TAACTATGTCTCCTGG GCTATTTCATGAGCT‏ ‎TATCAACAGCTCCCAG GGGTCCGCCAGGCTC‏ ‎GAAAGGCCCCCAAAC CAGGAAAGGGGCCCG‏ ‎TCCTGATCTATGAGGT AGTGGGTCTCAGGTA‏ ‎CAACAAGCGATCCTCA TTCATATTAGTGGTG‏ ‎GGGGTCCCTGATCGCT GTATTACATACTACA‏ ‎TCTCTGGCTCCAAGTC CGGACTCCGTGAAGG‏ ‎AGGCAACACGGCCTCC GCCGATTCACCATCT‏ ‎CTGACCATCTCTGGGC CCAGAGACAACGCAA‏ ‎TCCAGGCTGAGGACG AGAACACGCTGTATC‏ ‎AGGCTGATTATTACTG TGCAAATGAACAGCC‏ ‎TGCCTCATATAGACTG TGAGAGCTGAGGACA‏ ‎TACGCCGATTATGTGT CGGCCGTGTATTATT‏ ‎TCGGCGGAGGGACCC GTGTAACACCCCCGG‏ ‎AACTGACCGTCCTC GCCCCTTTAAGGCCC‏ ‎ATTACAATGGCGCGA‏ ‎AGTACTGGGGCAAAG‏ ‎GGACCCTGGTCACTG‏ ‎TCTCCTCA‏ ‏المثال 12 تصنيف الأجسام المضادة جرثومية السلالة ‎223G5 5 230C9‏ 1-2 ألفة ارتباط الأجسام المضادة وحيدة النسيلة جرثومية السلالة تم قياس ‎dill‏ الأجسام المضادة 23009 ‎223G55‏ باستخدام_الرنين السطحي البلازموني ‎(BIACORE 300)‏ وباختصارء تم تغليف 250 ‎RU‏ من مستقبل إنترلوكين-22 البشري ‎(Biotechne, 2770-LR) 5‏ على شريحة ‎CMS‏ باستخدام الطرق القياسية (اقتران النطاق الخارجي للخلية لمستقبل إنترلوكين-22 بتركيز 2 ميكروجم/ مل في محلول أسيتات منظم برقم هيدروجيني 5). ثم تم حقن تركيزات مختلفة من الجسم المضاد في ‎HBSEP‏ + محلول منظم (رقم هيدروجيني 7.4( ‎sad‏ دقيقتين. تمت مراقبة الارتباط ‎Load‏ أثناء ‎sad Jue‏ 10 دقائق ‎.(HBSEP+)‏ ‏0 الجدول 22 ألفة ارتباط الأجسام المضادة جرثومية السلالة فب ‎ka‏ (1/ ملي ث) | ‎kd‏ ث) | م6ا(ملار) ‎6E- 1 1 ¢ 1 01-04 ¢ 1 6+6 ¢ 6 223 G5‏ ‎1E- 1 1 ¢ 1 8E-05 <9 3E+06 «9 2244‏ ‎3E- 10¢ 1 9E-05 «8 SE+05 <6 23009‏
لقد أظهر الجسمان المضادان 22365 5 ‎224C4‏ (كلاهما صور جرثومية السلالة من ‎(166G8‏ ألفة عالية جداً ل مستقبل إنترلوكين-22 (10- 20 بيكو مولار) بينما كانت ألفة الجسم المضاد ‎230C9‏ ‏ألفة 0.13 نانو مولار. وقد أظهرت كل الأجسام المضادة جرثومية السلالة ألفة أعلى من الجسم المضاد المرجعي ‎TSY‏ .280.346 (0.69 نانو مولار).
ونظراً لتأثير الشره المحتمل الملاحظ عند استخدام جزيء ثنائي التكافؤ كجزيء ربط أثناء قياس الألفة؛ تم اختبار إعداد تجرية عكسي. وفي هذا الإعداد تم تغليف الأجسام المضادة إلى 250 ‎RU‏ ‏باستخدام الطرق القياسية. تمت إضافة مستقبل إنترلوكين-22 بشري مونومري بتركيزات مختلفة؛ الألفة التي تم حسابها باستخدام برنامج ‎BlAevaluatio‏ واستخدام لانجموير 1: 1 مبنية في الجدول 3 التالي.
0 الجدول 23 ألفة ارتباط 23009 بمستقبل إنترلوكين-22 البشري 000 "ل سم سب ث) | ‎(Ns)Kp‏ ‏&( ‎230C9‏ | إنترلوكين-22 | 284059 ‎2E-04¢2‏ 2868-2 بشري مع الأسف فقد تم تثبيط الجسم المضاد 22365 عن طريق عملية التغليف ولم يمكن تحديد أية ألفة باستخدام هذا الإعداد. تتوافق ألفة 23009 مستقلة عن إعداد قياس ‎ddl]‏ مما يدل على التغليف المنخفض المستخدم في كلتا الحالتين كاف لخفض تأثير الشره. 5 2-12 تثبيط تنشيط وإرسال إشارات مستقبل إنترلوكين-22 1 المعتمد على إنترلوكين 22 ‎vs‏ ‏تم اختبار الأجسام المضادة 21887 (ليس جرثومية ‎(AD‏ و23009 (المكافئ جرثومي السلالة) مع أجسام مضادة جرثومية أخرى السلالة لمعرفة قدرتها على معادلة إرسال الإشارات الذي يتوسطه إنترلوكين 22 وإنترلوكين 20 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 1. تم إجراء الاختبار باستخدام تجارب التكاثر المعتمدة على الخلية الموصوفة في المثالين 6 و9. 0 يوضح الشكل 19 قدرة 21887 و23009 على معادلة تنشيط معتمد على إنترلوكين 22 لمستقبل
إنترلوكين-22 1. يوضح الشكل 9ب قدرة دفعات مختلفة من 23009 على معادلة تنشيط معتمد على إنترلوكين 20 لمستقبل إنترلوكين-22 1. الفعالية النسبية للأجسام المضادة التي تم اختبارها موضحة في الجدولين 24 و25 أدناه. الجدول 24 فعالية الأجسام المضادة 21887 و23009 في إعاقة إرسال إشارات إنترلوكين 22 عن طريق مستقبل إنترلوكين 22 (سلالة الخلايا ‎BW‏ -مستقبل إنترلوكين 22 بشري) 0 إعاقة الفعالية النسبية الس ى 0 (نانومولار) 06 0 الجدول 24 فعالية 23009 في إعاقة إرسال إشارات إنترلوكين 20 عن طريق مستقبل إنترلوكين-22 (سلالة الخلايا ه38 - مستقبل إنترلوكين-22 بشري/ مستقبل انترلوكين 20 ب) م1 إعاقة الفعالية النسبية إلى © ل (نانومولار) * دفعات تثقية مختلفة من الجسم المضاد ‎230C9‏ ‏2- 3 تعيين القمم اللاصقة التأكيدية 0 "تم إجراء تعيين القمم اللاصقة التأكيدية للأجسام المضادة جرثومية السلالة 23009 و22305 باستخدام تحليل عد خلايا التدفق؛ كما تم وصفه في المثال 2-8. ثبت تنافس الجسم المضاد 230©9على الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 1 مع الجسم المضاد المعياري 280.346.157وأيضاً
5. لم يتنافس الجسم المضاد 223065على الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 1 مع الجسم المضاد المعياري 280.346.151. تم دمج نتائج تحليل عد خلايا التدفق مع نتائج تجارب التكاثر السابق وصفها والنتائج الخاصة بالقمم اللاصقة مبينة في الشكل 10. كما ‎rai‏ فإنه ‎(Se‏ استنتاج أن (1) الجسم المضاد 23009 يرتبط بقمة لاصقة مختلفة لكن متداخلة بالمقارنة بالقمم اللاصقة المريوطة ‎¢280.346.TSY-‏ و )2( الجسم المضاد 223065 يرتبط بقمة لاصقة مختلفة عن 280.346.1517. تم أيضاً إجراء تحليل عد خلايا التدفق كما تم وصفه في المثال 2-8 لدراسة ارتباط الأجسام المضادة جرثومية السلالة بمختلف طفرات مستقبل إنترلوكين -22. النتائج موضحة في الجدول 26 أدناه. 0 الجدول 26 ارتباط الجسم المضاد بالخلايا المعبرة عن طفرات مستقبل إنترلوكين -22 طفرات ‎-BW‏ مستقبل | 2090م ه7208 ‎Y60A|‏ م112 ‎es‏ ا +/—= تعرف ‎dhs‏ على طفرة بها 1112/8 تؤكد النتائج أنه الأجسام المضادة 23009 و22305 ترتبط بقمة لاصقة لا تتضمن 760. وثبت أن تطفير 82090 يؤثر في ربط 22305 ‎Law‏ لم يتأثر ربط الجسم المضاد 16668 المأخوذ من اللاما بهذا التغير. وقد يرجع ذلك إلى الصعويات في رصد حساسية 16668 لتطفير 82090 (تم 5 اختبار 16668 مرة واحدة فقط)؛ ‎Lays‏ يرجع إلى التغيرات الطفيفة في متواليات مناطق تحديد التمامية أثناء تكوين السلالة الجرثومية من 16668. وتؤكد هذه البيانات على أن 280.346.1557 يرتبط ب11 لمستقبل إنترلوكين-22» وأن 22305 يرتبط ب02 لمستقبل إنترلوكين-22 وأن 23009 له قمة لاصقة متداخلة ولكنها مختلفة. 4-2 التفاعلية التبادلية للأنواع لأجسام المضادة جرثومية السلالة 0 - يرتبط الجسم المضاد 23009 بمستقبل إنترلوكين-22 البشري ولكنه لا يتميز بتفاعلية تبادلية لمستقبل إنترلوكين-22 المأخوذ من ‎Sl‏ والجرذء والأرنب. وهذا يتوافق مع تميز 23009بقمة لاصقة مختلفة مقارنة بالجسم المضاد المعياري ‎—280.346.TSY‏ راجع 3-12 أعلاه.
تم اختبار قدرة الأجسام المضادة على الارتباط بمستقبل إنترلوكين-22 ‎all‏ عند التعبير عنه على الخلايا عن طريق إنشاء منشآت خيمرية من النطاق خارج الخلية لمستقبل إنترلوكين-22 من مختلف الأنواع حيث يدمج مع نطاقات بشرية عابرة للغشاء وبشري داخل الخلية (10). وعلى الرغم من أن كفاءة نقل العدوى المؤقت لم تكن كبيرة؛ إلا أن تحليل عد خلايا التدفق قد أثبت أن الجسم المضاد ‎230C9-N297Q‏ وليس ‎223G5-N297Q‏ قد ارتبط بالنطاق خارج الخلية لمستقبل إنترلوكين = ‎humanTM_humanICD—=22‏ الرياحي كما دل على ذلك وجود قمة واسعة على مخطط عد خلايا التدفق (راجع الشكل 11 حيث تدل الأسهم على القمم الأوسع). فضلاً عن ذلك؛ عندما يتم نقل العدوى بشكل مشترك ‎Lad‏ للمنشآت الخيمرية بجين مبلغ ‎STAT3‏ ‏في خلايا ‎(HEK‏ يمكن قياس نشاط مستقبل إنترلوكين-22 بعد إضافة إنترلوكين-22 البشري في 0 وجود أو غياب الجسم المضاد المعادل. تدل النتائج الموضحة في الجدول 27 التالي أن جميع الأجسام المضادة التي تم اختبارها استطاعت معادلة مستقبل إنترلوكين-22 البشري ‎ols‏ (23009 و280.346.157) المتفاعلة تبادلياً من الرئيسيات هي فقط التي استطاعت الارتباط وإعاقة نشاط الخيمرات الرياحية والريسوسية مما يدل على أن هذه الأجسام المضادة قد تكون وظيفية في دراسات الرئيسيات. 5 الجدول 27 التفاعلية المتبادلة للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 مع مستقبل إنترلوكين-22 البشري» والريسوسي والرباحي ع (نانومولار) | 0 (نانومولار) | و50 (نانومولار) بشري النطاق | ريسوسي النطاق | ‎aby‏ النطاق خارج الخلية خارج الخلية خارج الخلية 5-2 تحليل التولد المناعي تم تقييم التولد المناعي للأجسام المضادة جرثومية السلالة باستخدام أدوات التنبؤ. بصفة خاصة؛ تم تقييم وجود الببتيدات المحتملة المولدة للمناعة في النطاقات المتغيرة باستخدام برنامج ‎(DRB-1 score) nza’sEpibase™ 0‏ وباستخدام إعدادات ”3.0 ‎HLA class II - Caucasian‏
يحلل هذا البرنامج نوعيات ارتباط مستضد الكريات البيضاء البشري ‎human leukocyte antigen‏ ‎awa! (HLA)‏ الببتيدات عشارية الوحدات المستمدة من متواليات نطاق متغير ثقيل السلسلة ونطاق متغير خفيف السلسلة. تم جمع الخواص على مستوى النمط ‎AY)‏ لكل من 15 ‎DRB1‏ ‎«DQ 12 + 6‏ و7 ‎DP‏ أي 40 مستقبل لمستضد الكريات البيضاء البشري من الفئة الثانية إجمالاً. تم تحديد روابط قوية ومتوسطة ‎DRBIJ‏ و0883/4/5 ؛ وكذلك روابط قوية من القمم اللاصقة ‎DP DQ‏ . تم عد القمم اللاصقة بشكل منفصل لروابط 0131 قوية ومتوسطة الألفة. تم عد الببتيدات المرتبطة بعدة أنماط أليلية من نفس المجمعة على أنها واحدة. تم حساب درجة تقريبية تعبر عن ‎Toul‏ خطوة مولدة للمناعة كما يلي: الدرجة- 3 (عدد القمم اللاصقة + تكرار النمط الأليلي 708ام1له). بعبارة أخرى»؛ يتم ضرب عدد القمم اللاصقة المؤثرة في النمط 0 الأليلي معين لمستضد الكريات البيضاء البشري في عدد الأليل للنمط الأليلي المتأثر. بالنسبة لمتوالية معينة؛ تم جمع المنتجات لجميع 0881 الأنماط الأليلية المستخدمة في الدراسة والموجودة بنسبة 72 أو أكثر من المجموعة القوقازية. النتائج ‎die‏ في الجدول 28 التالي. الجدول 28 درجات 0831 للأجسام المضادة مستقبل إنترلوكين-22 جرثومية ‎ADL‏ مقارنة 5 بمختلف الأجسام المضادة التجارية الأخرى درجة ‎DRBI‏ (نطاق المصدر متغير ثقيل السلسلة + نطاق متغير خفيف السلسلة) أداليموماب 830 بشري (عرض الملتهمة) ‎ee‏ ‏تراستوزوماب 959 متوافق مع البشر ‎Trastuzumab‏ (هيرسبتين ‎(Herceptin‏
باليفيزوماب 983 متوافق مع البشر ‎Palivizumab‏ (سيتاجيز ‎(Synagis‏ ‏ألمتوزوماب 1409 متوافق مع البشر ‎Alemtuzumab‏ (كامباث ‎(Campath‏ ‏ربتوكسيماب ‎Rituximab‏ 1769 خيمري (ردتوكسان ‎(Rituxan‏ ‏إنفليكسيماب ‎Infliximab‏ 1873 خيمرية (ربميسياد ‎(Remicade‏ ‏كما يتضح من الجدول 28 يتميز الجسم المضاد 23009 بدرجة ‎DRBI‏ منخفضة جداً؛ أقل بكثير من باقي الأجسام المضادة التجارية بينما يتميز 22305 بدرجة ‎DRBI‏ منخفضة مقارنة بباقي الأجسام المضادة التجارية البشرية أو المتوافقة مع البشر. وتدل هذه البيانات على أن 23009 (و22365) قد يتميز بخاصية مميزة لتوليد المناعة. المثال 13 دراسة الحركيات الدوائية ‎(PK) Pharmacokinetic‏ في قرود الرياح للجسم المضاد ‎230C9-N297Q‏ ‏تم إجراء تحليل الحركيات الدوائية لنسيلة الجسم المضاد ‎.230C9‏ تم حقن قردين رياح داخل الوريد بجرعة واحدة 10مجم/ كجم من الجسم المضاد لمدة ساعتين. تم أخذ العينات في نقاط زمنية مختلفة واختبار تركيز البلازما ‎plasma‏ للجسم المضاد وحيد النسيلة باستخدام مقايسة الامتصاصية 0 المناعية المرتبطة بالإنزيم. تحديداً تم تغليف طبق عياري دقيق ‎(Maxisorb microtiterplate‏ ‎Nunc)‏ ب 2 ميكروجم/ مل من مستقبل إنترلوكين-22 البشري الناتج عن ‎sage‏ الارتباط الجيني ‎cat 2770-LR)¢(Biotechne‏ في المحلول الملحي المنظم بالفوسفات ‎Phosphate Buffered Saline‏ ‎(PBS)‏ طوال الليل عند 4 م. تم غسل الطبق 3 مرات بالمحلول الملحي المنظم بالفوسفات - توين ‎tween‏ وإعاقته لمدة ساعتين ب250 ميكرو لتر المحلول الملحي المنظم بالفوسفات - 71 كاسين
08. ويعد 3 غسلات بالمحلول الملحي المنظم بالفوسفات - توين؛ تم وضع العينات. تم إجراء جميع التخفيفات في بلازما مجمعة 71 (هذه تجميعة من 3 قرود ‎daly‏ سليمة). تم السماح بارتباط العينات ‎sad‏ ساعتين عند درجة حرارة الغرفة. ثم تم غسل الأطباق 5 مرات بالمحلول الملحي المنظم بالفوسفات - توين وتم وضع أجسام مضادة مأخوذة من الماعز معالجة بالبيوتين مضادة للبشر الجلوبيولين المناعي جاما متعددة النسائل ممتصة بالقرد ومقترنة ‎HRP:‏ بتخفيف 0 ألف مرة ‎(Bethyl, catno: A80-319P)‏ والسماح لها بالارتباط لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. تم غسل الأطباق 5 مرات بالمحلول الملحي المنظم بالفوسفات - توين وإضافة الموهن ‎#sTMB-W) s(HS)TMB‏ ,501). تم السماح بالتلطيخ لمدة 10 دقائق ثم إيقافه ب 1 (ع) 11:50 بعدها تم قياس الكثافة الضوئية عند الطول الموجي 450 نانو متر. تم تحلل العينات 3 مرات 0 واستخدام ‎230C9-N297Q‏ (من نفس الدفعة التي تم حقها في الحيوانات) في رسم منحنى قياسي. تظهر متغيرات الحركيات ذات الصلة لنموذج تسربب في الوريد في حجرتين في الجدول 29. وتظهر خصائص الحركيات الدوائية للجسم المضاد ‎23009-N297Q‏ بشكل بياني في الشكل 12 (النتائج المعروضة هي متوسط نتيجة اثنين من القرود). وتدل هذه البيانات بشكل واضح على أن الجسم المضاد له متوسط زمن بقاء ‎(MRT) mean residency time‏ طويل. ومن المثير للدهشة؛ 5 أنه على الرغم من أن الجسم المضاد يحتوي على منطقة الجلوبيولين المناعي جاما1 شظية قابلة للتبلور غير معالجة بالجليكوزيل بدون أي تعديل لتحسين عمر النصف؛ إلا أن عمر نصف ‎230C9-N297Q‏ ازداد بشكل مدهش. تحديداً؛ فإن عمر نصف ‎230C9-N297Q‏ بلغ حوالي 19.4 يوماً. لذلك؛ فإن عمر النصف الممد للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع ‎Mall‏ يبدو أنه يرجع إلى خواص مناطق ‎‘Fab‏ ‏0 الجدول 29 متغيرات الحركيات الدوائية نصف متوسط © عند العمر زمن بق 171 ‎V2‏ التصفية | ‎Cmax K21‏ 0 ‎half-‏ ‎life‏ ‎(TV2)‏
‎Ly | Ls‏ كجم كجم مل/ ميكرو جم/ | ميكرو اليوم مل جم/ مل تم إجراء دراسة أخرى في قرود الرياح» عن طريق إعطاء جرعة واحدة في الوريد )0.1 1 3؛ 0 و30 مجم/ كجم) من ‎230C9-N297Q‏ لعشر قرود في الإجمالي. أظهرت الحركيات في قرود الرياح حركيات غير خطية مزدوجة الحجرات. وفي الجرعات الأقل من 10 مجم/ كجم؛ زادت التصفية مع انخفاض الجرعة مما أدى إلى زيادة عن الانخفاض النسبي للجرعة في التعرض (المساحة تحت المنحنى ‎(AUC) area under curve‏ مع انخفاض الجرعات. وهذه ظاهرة معروفة للأجسام المضادة وحيدة النسيلة (راجع الجدول 30 والشكل 13). الجدول 30 متغيرات الحركيات الدوائية بناء على قردين/ جرعة و5 مجموعات جرعات ‎Or‏ ‏إن وضع تلك المتغيرات في مقاييس متدرجة لكي يتم ‎sal)‏ بالحركيات الدوائية البشرية ينتج عنه 0 مخطط بشري مشابه لما تم توقعه بالاعتماد على الاكتشافات التجريبية من جزيئات الجلوبيولين المناعي جاما1 البشرية الأخرى بما في ذلك تقدير النقطة من فترة نصف العمر (126) من حوالي 8 يوماً من التوافق مع تقرير الدراسة السابقة أعلاه. المثال 14 تأثيرات الحركيات الدوائية ‎(PD) Pharmacodynamic‏ الخاصة بالجسم المضاد 23009 2970 في قرد الرياح 5 .تم تحليل تأثير الحركيات الدوائية للجسم المضاد ل ‎(ARGX-112)‏ 102970 23009 في قرد الرياح من خلال إعطاء القرد 23009 عن طريق الوريد في جرعات مختلفة (0.3؛ 1ء 3 10 30 مجم/كجم). تمت معالجة مقطع من الجلد من القرد باستخدام إيميكيومود لكي يتم اختبار تأثيرات
‎N297Q‏ 23009 على التهاب الجلد. تم تقرير أن إيميكيومود يعمل على حث الالتهاب في الجلد لدى الفئران ‎J Immunol.
Jan 1¢Van Belle et al.2012)‏ 188(1):462-9¢(¢ وأوضح واحد أو أكثر من التقارير تأثيرات مشابهة في الرئيسيات غير البشرية ‎ExpDermatol. « 2016¢Poirier et al)‏ ‎J Immunol.
Jan 1+ 2016 Poirier et al¢25(3):233-4¢Mar‏ ¢)¢196(1):274-83 وفي البشر ‎Br J Dermatol.
Feb¢ 2015¢(Vinteretal 5‏ 172(2):345-53¢(. وبعد 5 أيام من معالجة إيميكيومود؛ تم أخذ خزعة من المساحة غير المعالجة بإيميكيومود من الجلد والمساحة المعالجة بإيميكيومود من الجلد لكي يتم اختبار التأثيرات من 230091802970 على التأثيرات المستحثة بإيميكيومود. تم اختبار التأثيرات بواسطة مقارنة ‎dled‏ البشرة والتردد الخاص بالأحماض النووية للتكاثر في البشرة (والتردد ‎¢(Ki67‏ وتم توضيح النتائج في الشكل 14. تكون 0 الجرعات المتزايدة من الجسم المضاد 142970 23009 قابلة لجعل شمك البشرة الطبيعية (الشكل 4) والتردد أقل من النويات الموجبة من ‎Ki67‏ (الشكل 14ب). كانت قيمة ‎ECso‏ تقريباً 3 مجم/كجم. المثال 15 الحركيات الدواثية من المصل وعلاقة استجابة الحركيات الدوائية بعد تسريب ‎(Sy‏ من ‎N297Q‏ 23009 في قرود الرياح 5 .تم فحص ارتباط مستهدف الجلد في قرود الرباح التي تم إعطاؤها التسريب عن طريق الوربد لمدة دقيقة )5 مل/كجم) من الجسم المضاد 142970 23009. تم ترك إناث القرود إما غير معالجة أو تم تعريضها إلى 1؛ 5؛ أو 30 مجم/كجم 23009 في يوم الاختبار 1 (ثلاثة حيوانات في المجموعة). تم تجميع الدم من كل الحيوانات التي تم إعطاؤها الجرعة )3 7 150 ميكرو لتر) عند نقاط زمنية مختلفة باستخدام العينة الأخيرة التي تم سحبها عند اليوم 7. تم اختبار عينات المصل 0 (21 حجم/حجم) التي تتعرض ل 230091702970 بواسطة مقايسة الامتصاصية المناعية المرتبطة بالإنزيم. تم أخذ خزعات مثقوبة من الجلد )3 ‎(ae‏ عند اليوم -1 (قبل الجرعة) واليوم 7 من كل حيوان وتمت الحضانة في وجود (اليوم ‎(I=‏ واليوم 7) أو غياب (اليوم 7) إنترلوكين 22 ريسوسي لمدة 4 ساعة عند 37 م في الهواء الرطب / ثاني أوكسيد الكريون ‎(COs) carbon dioxide‏ )795( 5 45( قبل قياس مستويات الحمض النووي الريبوزي الرسول ‎FLG2‏ بواسطة بتفاعل سلسلة بوليمراز كمي. تم توضيح النتائج في الشكل 15.
إن الحث بواسطة إنترلوكين-22 ربسويسي ينتج ‎die‏ 5 أضعاف من النقص في مستويات الحمض النووي الريبوزي الرسول ل71.02 الإجمالي في الجلد. تمت استعادة النص في الانتساخ ل ‎FLG2‏ ‏الذي يتوسطه إنترلوكين 22 بشكل كبير في الحيوانات التي تمت معالجتها ب ‎N297Q‏ 23009 مما يوضح تعرض الجلد لكل مجموعات الجرعة.
المثال 16 تأثير ‎N297Q‏ 23009 في غرسات الجلد خارج الكائن الحي من قرود ‎Zl‏ والغرسات البشرية القابلة للنمو تم استخدام أجزاء من جلد البطن من مصدر حديث من مانحين بشريين أصحاء لكي يتم اختبار قدرة الجسم المضاد ل 23009102970 لكي يتم تثبيط إنترلوكين 22 ريسوسي الذي يحث مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول ل111734.
0 "تم وضع خزعات مثقوية من الجلد (3مم) في موضع علوي في أطباق نسيج بها 96 ‎Lue‏ وتمت الزراعة في وسط بيني بين السائل والهواء في 100 ميكرو لتر من وسط ‎Epilife‏ الذي تم تزويده بإضافة من خاصة بتمو الخلية الكيراتينية البشرية ‎Human Keratinocyte Growth Supplement‏ ‎(HKGS)‏ بدون هيدروكورتيزون ‎-(Invitrogen) hydrocortisone‏
تمت حضانة ‎Glial)‏ باستخدام مستويات متزايدة من الجسم المضاد لذ 230091802970 لمدة 24
5 ساعة عند 37 م في هواء رطب/ ثاني أوكسيد الكريون )795 75) قبل الحث باستخدام 20 نانو جرام/مل من إنترلوكين 22 ريسوسي ( ‎(R&D Systems‏ وذلك لمدة 24 ساعة إضافية عند 7 درجة مئوية. تم تحديد مستويات التعبير الجيني النسبية ل ‎DEFB4‏ في نواتج التحلل من الجلد بواسطة بتفاعل سلسلة ‎Sheds‏ الكمي في ‎Gell‏ الفعلي باستخدام اختبارات التعبير الجينية الموضحة ‎(Applied Biosystems)‏ ونظام اكتشاف متوالية 7900117 ‎.ABI PRISM®‏
0 يوضح الشكل 16 النقص الذي يعتمد على الجرعة من مستويات الحمض النووي الرببوزي الرسول 4 المستحدثة بإنترلوكين 22 ررسويسي من تجرية توضيحية واحدة على الأقل ‎ECs)‏ ‎95CI]‏ 7] = 4 نانو مولار [ 29-0.5 نانو مولار]؛ 4 مانحين). تم الحصول على فعالية مشابهة إذا كانت الزيادة في زمن الحضانة المسبق ‎pre-incubation time‏ من 23009112970 بالنسبة ل 5 ساعة تقترح تعادل الربط مستقبل إنترلوكين-22 أ الذي تم الوصول إليه. لا يكون للجسم
5 المضاد من عينة المقارنة من النمط المتماثل أي تأثير على الزيادات التي يتوسطها إنترلوكين 22 ريسوسي في مستويات الحمض النووي الريبوزي الرسول ‎.DEFB41‏
وفي خزعات الجلد المعزولة حديثاً )3 مم) من قرود الرياح ‎¢(MacacaFascicularis)‏ لم يتم تنظيم جين ‎DEFBA‏ بواسطة إنترلوكين 22 ريسوسي. وعلى التقيض من ذلك فإن كل من 81/62 و ‎LOR‏ يتم تقليله بصورة متحكم فيها بعد الحضانة لمدة 24 ساعة باستخدام إنترلوكين 22 رريسوسي الذي يستخدم نفس البروتوكول كما تم وصفه بالنسبة لإعدادات غربسة الجلد البشري. تمت إعاقة تلك الاستجابات لمدة 24 ساعة من الحضانة المسبقة باستخدام الجسم المضاد 1 ‎230C9‏ ‎=ECs0)N297Q‏ 11 نانو مولار؛ لكل من الجينين) كما هو موضح في الشكل 17. المثال 17 فعالية 23009102970 في الخلايا الكيراتينية البشرية تم تصميم الاختبار لكي يقوم باختبار فعالية الأجسام المضادة لمستقبل إنترلوكين-22 في الاختبار الوظيفي في الخلايا الكيراتينية البشرية الرئيسية. تم حث الخلايا بإستخدام خليط من 0 السيتوكين من إنترلوكين-4 وإنترلوكين-13 و إنترلوكين 22 (كلها 10 انو جرام/مل) و إنترفيرون-جاما و 1 نانو جرام/مل لمدة 48ساعة وبعد ذلك تم قياس مستوي المركب الترابطي كيموكين (باعث سي-سي) 2 في المادة الطافية من المزرعة باستخدام برنامج ام اس دي 1480 . تم تعليق الخلايا الكيراتينية في وسط ‎(EpiLife (Life Technologies‏ باستخدام مواد الإضافة الخاصة بالنمو التالية التي تمت إضافتها وهي: إيه جي اف ‎‘EGF‏ وبي بي اف ‎BPE‏ والأنسولين 5 وترانسفيرين ‎Transferrin‏ وجيميستيبين ‎[Gentamicin‏ أمفوتيريسين ‎Amphotericin‏ تمت زراعة الخلايا في أطباق بيروكسي ‎proxy‏ بيضاء بها 384 ‎(Perkin Elmer ( tue‏ وتمت الحضانة لمدة 2 ساعة عند 37 م؛ 75 من ثاني أوكسيد الكريون و795 من الهواء. تم بعد ذلك معالجة الخلايا باستخدام الجسم المضاد 80 نانو مل (عند تركيزات مختلفة كما هو موضح في الشكل 18) أو المادة الناقلة. وعد ذلك تمت إضافة 40 ميكرو لتر من خليط الحث (إنترلوكين-4؛ إنترلوكين- 0 13,؛ وإنترلوكين 22 (أنظمة ‎(R&D systems‏ كلها بها 10 نانو جرام/ل من التركيز النهائي) وإنترفيرون-جاما (أنظمة ‎RED‏ 1 نانو جرام/ل من التركيز النهائي)) وتمت حضانة الأطباق عند 037 25 من ثاني أوكسيد الكريون و795 من الهواء لمدة يومين. تمت معالجة ‎Ope‏ عينة المقارنة باستخدام خليط من إنترلوكين-4 و إنترلوكين-13 (كل منها 10 نانو جرام/ل) وإنترفيرون-جاماء 1 نانو جرام/مل؛ وتم التحديد لتثبيط يصل إلى 7100 لإشارة إنترلوكين 22. تم 5 قياس تركيز المركب الترابطي كيموكين ‎el)‏ سي-سي) 2 في مادة الإضافة من المزرعة باستخدام طقم المركب الترابطي كيموكين (باعث ‎MSD 2 (mmo‏ ( #لم ‎Mesoscale‏
‎(KI151AYB-2‏ تم قياس قابلية النمو ‎LIAL‏ بواسطة عامل الكشف ‎®PrestoBlue‏ ‏تم اختبار فعالية 230091802970 في 5 تجارب وتم توضيح التثبيط المعتمد على الجرعة لمستويات المركب الترابطي كيموكين (باعث سي-سي) 2 من خلال قيم »8 من 0.10 نانو مولار [0.042- 0.24 نانو مولار]. تم توضيح النتائج التجريبية التوضيحية من واحدة من التجارب في الشكل 18. لا يقتصر مجال الاختراع الحالي على النماذج المحددة التي تم وصفها هنا. وبالفعل فإن العديد من التعديلات من الاختراع؛ بالإضافة إلى ما تم وصفه هناء سوف تصبح واضحة لذوي المهارة في المجال من خلال الوصف السابق والأشكال المصاحبة. ‎sally‏ من تلك التعديلات أن تقع في مجال عناصر الحماية اللاحقة. وعلاوة على ذلك فإن كل النماذج الموصوفة هنا يتم اعتبارها بأنها 0 قابلة للتطبيق بصورة عامة وقابلة للاندماج مع أي أو ‎JS‏ من النماذج المتوافقة الأخرى طبقاً لما هو مناسب. قائمة التتابع: التكاثر (خلية/دقيقة) ب" تركيز الجسم المضاد [نانو مولار] 5 "ج التكاثر (الكثافة الضوئية) د" 1981 "و" 16604 ‎197B7 i)‏ ‎196F8 "3‏ ‎280-346-TSY "=" 20‏ ‎SW‏ ‎IT‏ ‎EOE‏ ‎"J‏ المتوالية رقم ع 0 تدخل الوحدة البنائية مباشرة في ربط 1122 ان" الحلقة 6 ‎¢PTW)‏ ربط ‎IL22‏ بعد الذف في ‎(cyIL22R'‏
‎"od‏ عدم تنافس في المعمل ‎a‏ تنافس في المعمل اف" عدم وجود تأثير في جسم الكائن الحي "اص" المعادلة في جسم الكائن الحي اق" ‎BM‏ ‎"yy‏ الحلقة 1[ب اش" الموقع 1أ ات" الموقع ‎al‏ ‏اث" 1 ‎W208‏ ‏10 "حم ‎Zymo‏ ‏3 كثافة ضوئية (450 نانو متر) ‎sil Td‏ مولار أجسام مضادة ‎157A2 "17‏ ‎"1d‏ 2م157 ‎AM22R1.1 "lz" 5 ‏تأثير 1122 على المعادلة‎ "a 218A7 "14 230C9 "14
H2230 "13 ‎230D5 ‏"ح1"‎ 20 23087 "14 280.346. TSY "lg mAb230C9-N297Q (#1) ‏ك1"‎ ‎mAb230C9-N297Q #2) "1 ‏25 18" تجربة حيوية معملية للمعادلة ان 1" تجرية فيزيائية حيوية لتنافس 11-22
‎"lo‏ مقارنة "ع1" | قمم لاصقة حيوية معملية للمعادلة 'ف1' 22365 ‎loa‏ زائف ق1" ‎hIL22R+‏ ‎"lJ‏ 22365112970 ‎230CON297Q "li‏ ‎Tl‏ معايير إلى الوضع ث1" ‎PE-A‏ ‏0 "خا" ‎hIL22RID+‏ 12250 ‎1d‏ ملاحظ ‎bie "1a‏ 21 الزمن (باليوم) ‎72d‏ التركيز (ميكروجم/مل)؛ المتنباً (ميكروجم/مل) ‎2z" 5‏ 0 ‎IPRED, DV "24‏ 28 مجم/كجم ‎IVAR "24‏ 23" 205 (ميكروجم/مل) "22" سمك الجلد (متوسط/581<1) ‎IMQ "2k‏ 28 طبيعي 248 الجرعة (مجم/كجم) ‎"2J‏ تكرار نوى ‎ki67‏ (متوسط/5211) 24°" اليوم 7 ‎IMQ‏ سمك الجلد أن2" تكرار نوى 16:67 )7(
FLG2 "20 2 ‏ع2 لوغ‎
Delta Ct (Ctref-ctTOI) "2 ‏جرعة قبلية‎ +1122 "2a" 1122 ‏وجود‎ pe "23 5 +1122 ARGX112 ‏حدم وجود‎ "2 1 ‏مجم/كجم‎ +1122 ARGX112 "204 ‏مجم/كجم‎ +1122 ARGX112 |. ‏ات2'‎ ‎30 ‏مجم/كجم‎ +1122 ARGX112 ‏ث2"‎ ‎ARGX-112 ‏"خ2'‎ 0 ‏جسم مضاد مقارنة بنمط متمائل‎ "xy
LLOQ "20a +1hIL22 ‏نانوجم/مل‎ 20 3 ‏نانو مولار‎ "3
LOR "3z" 5 1122 ab 230C9-IhH1-N297Q "3 ‏إفراز 0012 لعينة المقارنة‎ 7 "3a"
SEQUENCE LISTING
<110> argenx BVBA <120> ANTI-IL-22R ANTIBODIES <130> P144494WO0O00 5
<150> GB1612337.4 <151> 2016-07-15 <160> 101 <170> Patentln version 3.5 <210> 1 5 <211> 30 <212> PRT <213> llama glama <400> 1
GIn Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 10 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> llama glama
>400< 2
Ser Tyr Asp Met Ser 1 5 5 <210> 3 <211> 14 <212> PRT 10 <213> llama glama <400> 3
Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 15 1 5 10 <210> 4 <211> 17 <212> PRT
<213> llama glama <400> 4
Ser lle Tyr Asn Asp Gly Ser Asn Thr Ala Tyr Ser Asp Ser Val Lys 5 1 5 10 15
Gly <210> 5 <211> 32 <212> PRT 15 <213> llama glama <400> 5
Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 60 1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys ‏كايا فاح‎ 5 20 25 30 <210> 6 <211> 11 10 <212> PRT <213> llama glama <400> 6
Val Gly Phe Ser Gly Thr Tyr Tyr Ser Glu Ser 1 5 10
<210> 7 <211> 11 <212> PRT <213> llama glama <400> 7
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 8 <211> 30 <212> PRT <213> llama glama 15 <400> 8
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly 5 <210> 9 <211> 5 <212> PRT 10 <213> llama glama <400> 9
Ser Tyr Phe Met Ser 5 1 5 <210> 10
<211> 14 <212> PRT <213> llama glama <400> 10 5
Trp Val Arg GIn Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser 1 5 10 <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> llama glama <400> 11
Gly lle His lle Ser Gly Gly lle Thr Tyr Tyr Leu Asp Ser Val Lys 1 5 10 15
Gly <210> 12 <211> 32 <212> PRT <213> llama glama 10 <400> 12
Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin 1 5 10 15 15
Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Thr
<210> 13 <211> 14 <212> PRT 5 <213> llama glama <400> 13
Pro Pro Gly Pro Phe Lys Ala His Tyr Asn Gly Met Lys Tyr 10 1 5 10 <210> 14 <211> 11 15 <212> PRT <213> llama glama <400> 14
Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 15 <211> 22 <212> PRT <213> llama glama <400> 15
Asn Phe Met Leu Thr Gin Pro Ser Ala Val Ser Val Ser Leu Gly GIn 1 5 10 15
Thr Ala Lys lle Thr Cys
<210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> llama glama 5 <400> 16
Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala His 1 5 10 <210> 17 <211> 15 <212> PRT 15 <213> llama glama <400> 17
Trp Tyr Gln GIn Lys Pro Gly GIn Ala Pro Val Leu Val lle Tyr 1 5 10 15 <210> 18 5 <211> 7 <212> PRT <213> llama glama <400> 18 10
Gly Asn Asn Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 19 <211> 20 <212> PRT <213> llama glama
>400< 9
Asn Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Gly Ala GIn Ala Glu Asp Glu Ala 1 5 10 15 5
Glu Tyr Tyr Cys 20 <210> 20 <211> 10 <212> PRT <213> llama glama 15 <400> 20
Gln Ser Gly Ser Ser Ser Ala Asn Ala Val
1 5 10 <210> 21 <211> 10 5 <212> PRT <213> llama glama <400> 21
Phe Gly Gly Gly Thr His Leu Thr Val Leu 1 5 10 <210> 22 15 <211> 22 <212> PRT <213> llama glama
>400< 2
Asn Phe Met Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Leu Gly Lys 1 5 10 15
Thr Val Thr lle Ser Cys 20 <210> 23 <211> 14 <212> PRT <213> llama glama <400> 23
Thr Gly Thr Ser Arg Asp lle Gly Asp Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10
<210> 4 <211> 5 <212> PRT 5 <213> llama glama <400> 24
Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Leu Ala Pro Lys Leu Leu lle Tyr 10 1 5 10 15 <210> 25 <211> 7 15 <212> PRT <213> llama glama <400> 25
Lys Val Asn Thr Arg Ser Ser 1 5 <210> 26 <211> 20 <212> PRT <213> llama glama <400> 26
Asn Thr Ala Ser Leu Thr lle Ser Gly Leu GIn Ser Glu Asp Glu Ala 1 5 10 15
Asp Tyr Tyr Cys
<210> 27 <211> 10 <212> PRT <213> llama glama 5 <400> 27
Ala Ser Tyr Arg Leu Tyr Ala Asp Tyr Val 1 5 10 10 <210> 28 <211> 10 <212> PRT 15 <213> llama glama <400> 28
Phe Gly Gly Gly Thr His Leu Thr Val Leu 1 5 10 <210> 29 5 <211> 120 <212> PRT <213> llama glama <400> 29 10
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
Asp Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Ser lle Tyr Asn Asp Gly Ser Asn Thr Ala Tyr Ser Asp Ser Val 5 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 10
Leu GIn Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Val Gly Phe Ser Gly Thr Tyr Tyr Ser Glu Ser Trp Gly Gin 100 105 110
Gly Thr GIn Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 30 <211> 103 <212> PRT <213> llama glama <400> 30
Asn Phe Met Leu Thr Gin Pro Ser Ala Val Ser Val Ser Leu Gly GIn 1 5 10 15
Thr Ala Lys lle Thr Cys GIn Gly Gly Tyr Tyr Ala His Trp Tyr GIn
Gln Lys Pro Gly ‏مي‎ Ala Pro Val Leu Val lle Tyr Gly Asn Asn Asn 35 40 45
Arg Pro Ser Gly lle Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn 60
Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Glu 10 65 70 75 80
Tyr Tyr Cys GIn Ser Gly Ser Ser Ser Ala Asn Ala Val Phe Gly Gly 85 90 95 15
Gly Thr His Leu Thr Val Leu 100
<210> 1 <211> 3 <212> PRT 5 <213> llama glama <400> 31
GIn Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val 60 Pro Gly Asp 10 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ser Tyr 15
Phe Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
Ser Gly lle His lle Ser Gly Gly lle Thr Tyr Tyr Leu Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu GIn Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Val Thr Pro Pro Gly Pro Phe Lys Ala His Tyr Asn Gly Met Lys Tyr 15 100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 <210> 2 <211> 110 5 <212> PRT <213> llama glama <400> 32
Asn Phe Met Leu Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Leu Gly Lys 1 5 10 15
Thr Val Thr lle Ser Cys Thr Gly Thr Ser Arg Asp lle Gly Asp Tyr 15
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr GIn Gin Leu Pro Gly Leu Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu lle Tyr Lys Val Asn Thr Arg Ser Ser Gly Thr Pro Asp Arg Phe 50 55 60 5
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lle Ser Gly Leu 65 70 75 80
Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Tyr Arg Leu Tyr 85 90 95
Ala Asp Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr His Leu Thr Val Leu 100 105 110
<210> 3 <211> 30 <212> PRT <213> llama glama <400> 33
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30 <210> 34 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence
<220> <223> Germlined antibody fragment <400> 34 5
Ser Tyr Asp Met Asn 1 5 <210> 35 <211> 14 <212> PRT <213> llama glama <400> 35
Trp Val Arg GIn Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 1 5 10
<210> 6 <211> 7 <212> PRT 5 <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 36
Ser lle Tyr Asn Asp Ala Ser Asn Thr Ala Tyr Ser Asp Ser Val Lys 1 5 10 15
Gly
<210> 7 <211> 2 <212> PRT <213> Artificial Sequence 5 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 37 10
Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin 1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys
<210> 38 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 38
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 39 15 <211> 30 <212> PRT <213> llama glama
>400< 9
Gln Val 60 Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30 <210> 40 <211> 14 <212> PRT <213> llama glama <400> 40
Trp Val Arg GIn Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser 1 5 10
<210> 41 <211> 17 <212> PRT 5 <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 41
Gly lle His lle Ser Gly Gly lle Thr Tyr Tyr Thr Asp Ser Val Lys 1 5 10 15
Gly
<210> 2 <211> 2 <212> PRT <213> Artificial Sequence 5 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 42 10
Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu GIn 1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Thr
<210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 43
Pro Pro Gly Pro Phe Lys Ala His Tyr Asn Gly Ala Lys Tyr 1 5 10 <210> 44 15 <211> 11 <212> PRT <213> llama glama
>400< 4
Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 45 <211> 22 <212> PRT <213> llama glama 10 <400> 45
Leu Pro Val Leu Thr GIn Pro Ser Ala Val Ser Val Ser Leu Gly Gin 1 5 10 15 15
Thr Ala Arg lle Thr Cys
<210> 46 <211> 15 <212> PRT 5 <213> llama glama <400> 46
Trp Tyr Gln GIn Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lle Tyr 10 1 5 10 15 <210> 47 <211> 7 15 <212> PRT <213> llama glama <400> 47
Gly GIn Asn Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 48 <211> 20 <212> PRT <213> llama glama <400> 48
Asn Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Gly Ala GIn Ala Glu Asp Glu Ala 1 5 10 15
Glu Tyr Tyr Cys
<210> 9 <211> 10 <212> PRT <213> llama glama 5 <400> 49
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 1 5 10 10 <210> 50 <211> 22 <212> PRT 15 <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence
>400< 0
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Ser Ser Val Ser Val Ala Leu Gly 07 1 5 10 15 5
Thr Ala Arg lle Thr Cys 20 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> llama glama 15 <400> 1
Trp Tyr Gln GIn Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lle Tyr
1 5 10 15 <210> 52 <211> 360 5 <212> PRT <213> llama glama <400> 52
Cys Ala Gly Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Thr Cys Gly Thr Gly Gly 1 5 10 15
Ala Gly Thr Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Cys Thr Thr 15
Gly Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Thr
35 40 45
Thr Cys Thr Cys Thr Gly Ala Gly Ala Cys Thr Cys Thr Cys Cys Thr 50 55 60 5
Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Cys Thr Cys Thr Gly Gly Ala Thr Thr 65 70 75 80
Cys Ala Cys Cys Thr Thr Cys Ala Gly Thr Ala Gly Cys Thr Ala Cys 85 90 95
Gly Ala Cys Ala Thr Gly Ala Gly Cys Thr Gly Gly Gly Thr Cys Cys 100 105 110
Gly Cys Cys Ala Gly Gly Cys Thr Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala 115 120 125
Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Gly Thr Gly Gly Gly Thr Gly 5 130 135 140
Thr Cys Cys Ala Gly Thr Ala Thr Thr Thr Ala Thr Ala Ala Thr Gly 145 150 155 160 10
Ala Cys Gly Gly Thr Ala Gly Thr Ala Ala Cys Ala Cys Ala Gly Cys 165 170 175
Cys Thr Ala Thr Thr Cys Ala Gly Ala Cys Thr Cys Cys Gly Thr Gly 180 185 190
Ala Ala Gly Gly Gly Cys Cys Gly Ala Thr Thr Cys Ala Cys Cys Ala 195 200 205
Thr Cys Thr Cys Cys Ala Gly Ala Gly Ala Cys Ala Ala Cys Gly Cys 210 215 220
Cys Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Cys Gly Thr Thr Gly Thr Ala Thr 10 225 230 235 240
Cys Thr Gly Cys Ala Ala Ala Thr Gly Ala Ala Cys Ala Gly Cys Thr 245 250 255 15
Thr Gly Ala Ala Ala Thr Cys Thr Gly Ala Gly Gly Ala Cys Ala Cys 260 265 270
Gly Gly Cys Cys Gly Thr Gly Thr Ala Thr Thr Ala Cys Thr Gly Thr 275 280 285
Gly Cys Ala Ala Ala Ala Gly Thr Thr Gly Gly Cys Thr Thr Thr Ala 290 295 300
Gly Thr Gly Gly Thr Ala Cys Thr Thr Ala Cys Thr Ala Cys Ala Gly 305 310 315 320
Thr Gly Ala Ala Thr Cys Ala Thr Gly Gly Gly Gly Cys Cys Ala Gly 15 325 330 335
Gly Gly Gly Ala Cys Cys Cys Ala Gly Gly Thr Cys Ala Cys Cys Gly
340 345 350
Thr Gly Thr Cys Cys Thr Cys Ala 355 360 5 <210> 53 <211> 20 <212> PRT 10 <213> Artificial Seqence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 53
Asn Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Arg Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala 1 5 10 15
Asp Tyr Tyr Cys 20 <210> 54 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence 10 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 54 15
Gln Ser Gly Ser Ser Ser Ser Asn Ala Val 1 5 10
>210< 5 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence 5 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 55 10
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 1 5 10 <210> 56 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence
<220> <223> Germlined antibody sequence <400> 56 5
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly GIn 1 5 10 15
Ser Val Thr lle Ser Cys <210> 57 15 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence
<220> <223> Germlined antibody sequence <400> 57
Thr Gly Thr Ser Ser Asp lle Gly Ser Tyr Asn Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 58 10 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 15 <223> Germlined antibody sequence <400> 58
Trp Tyr Gln GIn Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lle Tyr 1 5 10 15 <210> 59 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 10 <223> Germlined antibody sequence <400> 59
Glu Val Asn Lys Arg Ser Ser 5 1 5 <210> 60
<211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 5 <223> Germlined antibody sequence <400> 60
Asn Thr Ala Ser Leu Thr lle Ser Gly Leu GIn Ala Glu Asp Glu Ala 10 1 5 10 15
Asp Tyr Tyr Cys 15 <210> 1 <211> 10
<212> PRT <213> llama glama <400> 61
Phe Gly Gly Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu 1 5 10 <210> 62 10 <211> 103 <212> PRT <213> llama glama <400> 62 15
Leu Pro Val Leu Thr GIn Pro Ser Ala Val Ser Val Ser Leu Gly Gin 1 5 10 15
Thr Ala Arg lle Thr Cys GIn Gly Gly Tyr Tyr Ala His Trp Tyr 0 20 25 30
Gln Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lle Tyr Gly Gin Asn Asn
Arg Pro Ser Gly lle Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Asn 10 60
Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Glu 65 70 75 80 15
Tyr Tyr Cys GIn Ser Gly Ser Ser Ser Ala Asn Ala Val Phe Gly Gly 85 90 95
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 <210> 63 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence 10 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 63 15
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30
Asp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 5 35 40 45
Ser Ser lle Tyr Asn Asp Ala Ser Asn Thr Ala Tyr Ser Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 15
Ala Lys Val Gly Phe Ser Gly Thr Tyr Tyr Ser Glu Ser Trp Gly Gin 100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 64 <211> 103 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence 10 <400> 64
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Ser Ser Val Ser Val Ala Leu Gly GIn 1 5 10 15 15
Thr Ala Arg lle Thr Cys GIn Gly Gly Tyr Tyr Ala His Trp Tyr 0
Gln Lys Pro Gly ‏ماي‎ Ala Pro Val Leu Val lle Tyr Gly Gin Asn Asn 35 40 45
Arg Pro Ser Gly lle Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Asn 5 50 55 60
Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Arg Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp 65 70 75 80
Tyr Tyr Cys GIn Ser Gly Ser Ser Ser Ser Asn Ala Val Phe Gly Gly 85 90 95
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100
>210< 5 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 65
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 15
Phe Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly lle His lle Ser Gly Gly lle Thr Tyr Tyr Thr Asp Ser Val 50 55 60 5
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Val Thr Pro Pro Gly Pro Phe Lys Ala His Tyr Asn Gly Ala Lys Tyr 100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 66 5 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 10 <223> Germlined antibody sequence <400> 66
GIn Ser Ala Leu Thr GIn Pro Pro Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 1 5 10 15
Ser Val Thr lle Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp lle Gly Ser Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gin ‏ما‎ Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 5
Leu lle Tyr Glu Val Asn Lys Arg Ser Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lle Ser Gly Leu 65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Tyr Arg Leu Tyr 85 90 95
Ala Asp Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr GIn Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 67 5 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 10 <223> Germlined antibody sequence <400> 67
GIn Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 5
Ser Ser lle Tyr Asn Asp Ala Ser Asn Thr Ala Tyr Ser Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Val Gly Phe Ser Gly Thr Tyr Tyr Ser Glu Ser Trp Gly Gin 100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 5 115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 10
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175
Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr GIn Thr Tyr lle Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 10 210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 15
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle 245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu GIn Tyr Gln Ser Thr Tyr Arg 290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu ‏50م‎ Gly Lys 15 305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lle Glu
325 330 335
Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr 340 345 350 5
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn GIn Val Ser Leu 355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp 370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415
Lys Ser Arg Trp ‏ماك ما‎ Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 5 420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 10
Gly Lys 450 <210> 68 <211> 209 <212> PRT
<213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 68
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Ser Ser Val Ser Val Ala Leu Gly Gin 1 5 10 15
Thr Ala Arg lle Thr Cys GIn Gly Gly Tyr Tyr Ala His Trp Tyr 0 20 25 30
Gln Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lle Tyr Gly Gin Asn Asn
Arg Pro Ser Gly lle Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Asn 50 55 60
Thr Ala Thr Leu Thr lle Ser Arg Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp 5 65 70 75 80
Tyr Tyr Cys GIn Ser Gly Ser Ser Ser Ser Asn Ala Val Phe Gly Gly 85 90 95 10
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly GIn Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val 100 105 110
Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gin Ala Asn Lys Ala Thr 115 120 125
Leu Val Cys Leu lle Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala 130 135 140
Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr 145 150 155 160
Pro Ser Lys GIn Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser 10 165 170 175
Leu Thr Pro Glu Gin Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys GIn Val 180 185 190 15
Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys 195 200 205
Ser <210> 69 <211> 453 <212> PRT <213> Artificial Sequence 10 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 69 15
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30
Phe Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
Ser Gly lle His lle Ser Gly Gly lle Thr Tyr Tyr Thr Asp Ser Val 10 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 15
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Val Thr Pro Pro Gly Pro Phe Lys Ala His Tyr Asn Gly Ala Lys Tyr 100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly 130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 15 145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 5
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr lle Cys Asn Val 195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys 210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu 225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250 255
Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 5 260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 275 280 285 10
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 60 Tyr Gln Ser 290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His GIn Asp Trp Leu 305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 325 330 335
Pro lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro 340 345 350
GIn Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 60 10 355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala 370 375 380 15
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp GIn Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr GIn Lys Ser Leu Ser 435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys 5 450 <210> 70
<211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 5 <223> Germlined antibody sequence <400> 70
GIn Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly 60 10 1 5 10 15
Ser Val Thr lle Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp lle Gly Ser Tyr 15
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr GIn Gin Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
Leu lle Tyr Glu Val Asn Lys Arg Ser Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lle Ser Gly Leu 65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Tyr Arg Leu Tyr 85 90 95
Ala Asp Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Gin Leu Thr Val Leu Gly GIn 15 100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu GIn Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu lle Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 5
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys 145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu GIn Trp Lys Ser His 180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys 60 Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 5 210 215 <210> 71 <211> 574 10 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 71
Met Arg Thr Leu Leu Thr lle Leu Thr Val Gly Ser Leu Ala Ala His 1 5 10 15
Ala Pro Glu Asp Pro Ser Asp Leu Leu GIn His Val Lys Phe Gin Ser 20 25 30
Ser Asn Phe Glu Asn lle Leu Thr Trp Asp Ser Gly Pro Glu Gly Thr 5 35 40 45
Pro Asp Thr Val Tyr Ser lle Glu Tyr Lys Thr Tyr Gly Glu Arg Asp 50 55 60 10
Trp Val Ala Lys Lys Gly Cys GIn Arg lle Thr Arg Lys Ser Cys Asn 65 70 75 80
Leu Thr Val Glu Thr Gly Asn Leu Thr Glu Leu Tyr Tyr Ala Arg Val 85 90 95
Thr Ala Val Ser Ala Gly Gly Arg Ser Ala Thr Lys Met Thr Asp Arg 100 105 110
Phe Ser Ser Leu GIn His Thr Thr Leu Lys Pro Pro Asp Val Thr Cys 115 120 125 lle Ser Lys Val Arg Ser lle Gin Met lle Val His Pro Thr Pro Thr 10 130 135 140
Pro lle Arg Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Phe 145 150 155 160 15
His Asp Leu Phe Tyr His Leu Glu Leu Gln Val Asn Arg Thr Tyr 60 165 170 175
Met His Leu Gly Gly Lys GIn Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr 180 185 190
Pro Asp Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp 195 200 205
Ala Lys Glu Ser Ala Pro Tyr Met Cys Arg Val Lys Thr Leu Pro Asp 210 215 220
Arg Thr Trp Thr Tyr Ser Phe Ser Gly Ala Phe Leu Phe Ser Met Gly 15 225 230 235 240
Phe Leu Val Ala Val Leu Cys Tyr Leu Ser Tyr Arg Tyr Val Thr Lys
245 250 255
Pro Pro Ala Pro Pro Asn Ser Leu Asn Val Gin Arg Val Leu Thr Phe 260 265 270 5
Gln Pro Leu Arg Phe lle GIn Glu His Val Leu lle Pro Val Phe Asp 275 280 285
Leu Ser Gly Pro Ser Ser Leu Ala Gin Pro Val 60 Tyr Ser Gin lle 290 295 300
Arg Val Ser Gly Pro Arg Glu Pro Ala Gly Ala Pro Gin Arg His Ser 305 310 315 320
Leu Ser Glu lle Thr Tyr Leu Gly GIn Pro Asp lle Ser lle Leu 0 325 330 335
Pro Ser Asn Val Pro Pro Pro Gin lle Leu Ser Pro Leu Ser Tyr Ala 5 340 345 350
Pro Asn Ala Ala Pro Glu Val Gly Pro Pro Ser Tyr Ala Pro GIn Val 355 360 365 10
Thr Pro Glu Ala Gin Phe Pro Phe Tyr Ala Pro Gin Ala lle Ser Lys 370 375 380
Val GIn Pro Ser Ser Tyr Ala Pro Gln Ala Thr Pro Asp Ser Trp Pro 385 390 395 400
Pro Ser Tyr Gly Val Cys Met Glu Gly Ser Gly Lys Asp Ser Pro Thr 405 410 415
Gly Thr Leu Ser Ser Pro Lys His Leu Arg Pro Lys Gly 60 Leu GIn 420 425 430
Lys Glu Pro Pro Ala Gly Ser Cys Met Leu Gly Gly Leu Ser Leu Gin 10 435 440 445
Glu Val Thr Ser Leu Ala Met Glu Glu Ser 0 Glu Ala Lys Ser Leu 450 455 460 15
His GIn Pro Leu Gly lle Cys Thr Asp Arg Thr Ser Asp Pro Asn Val 465 470 475 480
Leu His Ser Gly Glu Glu Gly Thr Pro Gin Tyr Leu Lys Gly Gin Leu 485 490 495
Pro Leu Leu Ser Ser Val GIn lle Glu Gly His Pro Met Ser Leu Pro 500 505 510
Leu GIn Pro Pro Ser Arg Pro Cys Ser Pro Ser Asp GIn Gly Pro Ser 515 520 525
Pro Trp Gly Leu Leu Glu Ser Leu Val Cys Pro Lys Asp Glu Ala Lys 15 530 535 540
Ser Pro Ala Pro Glu Thr Ser Asp Leu Glu Gln Pro Thr Glu Leu Asp
545 550 555 560
Ser Leu Phe Arg Gly Leu Ala Leu Thr Val 60 Trp Glu Ser 565 570 5 <210> 72 <211> 1725 <212> DNA 10 <213> homo sapiens <400> 72 atgaggacgc tgctgaccat cttgactgtg ggatccctgg ctgctcacge ccctgaggac 60 15 ccctecggatc tgctccagca cgtgaaattc cagtccagca actttgaaaa catcctgacg 120 tgggacagcg ggccggaggg caccccagac acggtctaca gcatcgagta taagacgtac 180 ggagagaggg actgggtggc aaagaagggc tgtcagcgga tcacccggaa gtcctgcaac 240 5 ctgacggtgg agacgggcaa cctcacggag ctctactatg ccagggtcac cgctgtcagt 300 gcgggaggcc ggtcagccac caagatgact gacaggttca getctctgca gcacactacc 0 360 ctcaagccac ctgatgtgac ctgtatctcc aaagtgagat cgattcagat gattgttcat 420 cctaccccca cgceccatcecg tgcaggcegat ggccaccgge taaccectgga agacatcttc 5 480 catgacctgt tctaccactt agagctccag gtcaaccgca cctaccaaat gcaccttgga 540 gggaagcaga gagaatatga gttcttcggc ctgacccctg acacagagtt ccttggcacc 600 atcatgattt gcgttcccac ctgggccaag gagagtgccc cctacatgtg ccgagtgaag 660 5 acactgccag accggacatg gacctactcc ttctccggag ccttcetgtt ctccatggge 720 ttcctcgtcg cagtactctg ctacctgage tacagatatg tcaccaagcc gectgcacct 780 10 cccaactccc tgaacgtcca gcgagtcctg actttccage cgcetgegctt catccaggag 840 cacgtcctga tccctgtctt tgacctcage ggccccagea gtctggecca gectgtccag 5 900 tactcccaga tcagggtgtc tggacccagg gagcctgcag gagctccaca gcggcatage 960 ctgtccgaga tcacctactt agggcagcca gacatctcca tcctccagece 19 1020 ccacctcccc agatcctcete cccactgtce tatgccccaa acgcetgecee tgaggtcggg 1080 5 00060831001 atgcacctca ggtgacccecc gaagctcaat tcccattcta cgecccacag 1140 gccatctcta aggtccagcec ttcctectat geccectcaag ccactccgga cagetggect 10 1200 ccctectatg gggtatgcat ggaaggttct ggcaaagact cccccactgg gacactttct 1260 agtcctaaac accttaggcc taaaggtcag cttcagaaag agccaccagc tggaagctgc 1320 atgttaggtg gcctttctct gcaggaggtg acctecttgg ctatggagga atcccaagaa 1380 20 gcaaaatcat tgcaccagcc cctggggatt tgcacagaca gaacatctga cccaaatgtg 1440 ctacacagtg gggaggaagg gacaccacag tacctaaagg gccagctccc cctectctce 1500 5 tcagtccaga tcgagggcca ccccatgtec ctcectttge aacctccttc 001608191 1560 tcceectcgg accaaggtee aagtceectgg ggcectgetgg agteccttgt gtgtcccaag 1620 10 gatgaagcca agagcccagc ccctgagacc tcagacctgg agcagcccac agaactggat 1680 tctcttttca gaggcectggce cctgactgtg cagtgggagt 8 1725 15 <210> 73 <211> 309 <212> DNA 20
<213> llama glama
<400> 73 aattttatgc tgactcagcc ctccgeggtg tcegtgtctt tgggacagac ggccaagatce 60 acctgccaag ggggctatta tgctcactgg taccagcaga agccaggcca ggcccctgtg
120 ttggtcatct atggaaataa taataggccc tcagggatcc ctgagcgctt ctctggctee 180 agttctggga acacagccac cctgaccatc agcggggecc aggctgagga cgaggccgagd
240 tattactgtc agtcaggaag cagtagtgct aatgctgtgt tcggcggagg gacccatctg 300 15 accgtcctg 309 <210> 74 20
<211> 9 <212> DNA <213> llama glama <400> 74 5 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggce ttggtgcage ctggggattc tctgagactce 60 tcctgtgcag cctetggatt caccttcgga agctatttca tgagetgggt ccgeccaggct 120 ccaggaaagg ggcccgagtg ggtctcaggt attcatatta gtggtggtat tacatactac 180 ttagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa cacgctgtat 240 15 ctgcaaatga acaacctgaa acctgaggac acggccgtgt attattgtgt aacacccccg 300 ggccccttta aggcccatta caatggcatg aagtactggg gcaaagggac cctggtcacc 360 gtctcctca 369
<210> 75 <211> 330 <212> DNA <213> llama glama 10 <400> 5 aattttatgc tgactcagcc tcccteegtg tctggaactc tgggaaagac ggtcaccatce 60 tcctgcactg gaaccagtcg tgacattggg gactataact atgtctcctg gtatcaacag 120 15 ctcccaggat tggcccccaa actcctgatc tataaagtca acactcgatc ctcagggacc 180 cctgatcgct tctetggcete caagtcagge aacacggcect 6010380081 ctetgggcte 240 cagtctgagg acgaggctga ttattactgt gcctcatata gactgtacgc cgattatgtg 300 ttcggcggag ggacccatct gaccgtectg 330 <210> 6 <211> 360 10 <212> DNA <213> llama glama <400> 6 caggtgcagc tcgtggagtc tgggggaggce ttggtgcagce ctgggggttc tctgagactc 5 60 tcctgtgcag cctetggatt caccttcagt agctacgaca tgagetgggt ccgeccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtgtccagt atttataatg acggtagtaa cacagcctat 180 tcagactccg tgaagggcecg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa cacgttgtat 240 5 ctgcaaatga acagcttgaa atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aaaagttgge 300 tttagtggta cttactacag tgaatcatgg ggccagggga cccaggtcac cgtgtcctca 10 360 <210> 7 <211> 309 15 <212> DNA <213> llama glama <400> 7 ctgcctgtgce tgactcagece cteccgeggtg tecgtgtett tgggacagac ggccaggatce 60 acctgccaag ggggctatta tgctcactgg taccagcaga agccaggcca ggcccctgtg 120 5 ctggtcatct atggacagaa taataggccc tcagggatcc ctgagcgctt ctctggctee 180 ggcgctggga acacagccac cctgaccatc agcggggccc aggctgagga cgaggctgag 0 240 tattactgtc agtcaggaag cagtagtgct aatgctgtgt tcggcggagg gaccaagctg 300 accgtcctc 309 <210> 78 <211> 360 20
<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence 5 <400> 78 caggtgcagc tcgtggagtc tgggggaggc ttggtgcagce ctgggggtte tctgagactc 60 tcctgtgetg cctctggatt caccttcagt agctacgaca tgaactgggt ccgccaggcet 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtgtccagce atttataacg acgccagtaa cacagcctat 180 tcagactccg tgaagggcecg attcaccatc tccagagaca actcaaagaa cacgttgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggccgtgt attactgtgc 0388011006 300 20 tttagtggta cttactacag tgaatcatgg ggccagggga ccctcgtcac 1-1668 360 <210> 79 5 <211> 309 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> 10 <223> Germlined antibody sequence <400> 79 tcctacgaac tgactcagcc ctccteggtg tcegtggegt tgggacagac ggccaggatce 60 15 acctgccaag gaggctatta tgcacactgg taccagcaga agccaggcca ggcccctgtg 120 ctggtcatct atggacagaa taataggccc tcagggatcc ctgagcgctt ctctggctce 180 ggcgctggga acacagccac cctgacaatc 38060000006 8002103008 cgaggcetgac 240 5 tattactgtc agtcaggaag cagtagttct aatgctgtgt tcggcggagg gaccaagctg 300 accgtcctc 309 10 <210> 80 <211> 369 <212> DNA 15 <213> Artificial Sequence <220> <223> Germlined antibody sequence
<400> 0 caggtgcagc tcgtggagtc tgggggceggc ttggtgcagce ctggggattc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctetggatt caccttcagt agctatttca tgagcetgggt ccgccaggcet 120 5 ccaggaaagg ggcccgagtg ggtctcaggt attcatatta gtggtggtat tacatactac 180 acggactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgcaaagaa cacgctgtat 0 240 ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggccgtgt attattgtgt aacacccccg 300 ggccccttta aggcccatta caatggcgeg aagtactggg gcaaagggac cctggtcact 360 gtctcctca 369
<210> 1 <211> 330 <212> DNA <213> Artificial Sequence 5 <220> <223> Germlined antibody sequence <400> 81 10 cagtctgccc tgactcagcc tccctcegtg tetggatcte ctggacagte tgtcaccate 60 tcctgcactg gaaccagtag tgacattggg tcctataact atgtctcctg gtatcaacag 120 ctcccaggaa aggcccccaa actcctgatce tatgaggtca acaagcgatc ctcaggggtc 5 180 cctgatcgct tctetggcete caagtcagge aacacggcect cecctgaccat ctetgggcte 240 caggctgagg acgaggctga ttattactgt gcctcatata gactgtacgc cgattatgtg 300 ttcggcggag ggacccaact gaccgtcctc 330 <210> 82 <211> 10 <212> PRT <213> homo sapiens 10 <400> 82
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 1 5 10 15 <210> 83 <211> 5
<212> PRT <213> homo sapiens <400> 83
Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 <210> 84 10 <211> 8 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 84 15
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 1 5
>210< 5 <211> 2 <212> PRT <213> homo sapiens 5 <400> 85
Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr 1 5 10 10 <210> 86 <211> 50 <212> PRT 15 <213> homo sapiens <400> 86
Cys Pro Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys 1 5 10 15
Pro Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro 5 20 25 30
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg 35 40 45 10
Cys Pro 50 <210> 87 <211> 8 <212> PRT
<213> homo sapiens <400> 87
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 5 1 5 <210> 88 <211> 7 10 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 88
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 1 5
<210> 9 <211> 5 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 9
Cys Pro Ser Cys Pro 1 5 <210> 90 <211> 8 <212> PRT <213> homo sapiens 15 <400> 90
Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
1 5 <210> 91 <211> 3 5 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 91
Glu Arg Lys 1 <210> 92 15 <211> 10 <212> PRT <213> homo sapiens
>400< 2
Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Pro Cys Pro 1 5 10 <210> 93 <211> 7 <212> PRT <213> homo sapiens 10 <400> 93
Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 1 5 15 <210> 94 <211> 78
<212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> EST sequence 5 <400> 94
Val Arg Ser lle Gln Met lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg 1 5 10 15 10
Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Phe His Asp Leu 20 25 30
Phe Tyr His Leu Glu Leu Gin Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met His Leu
Gly Gly Lys ‏0اى‎ Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr 50 55 60
Glu Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ala 65 70 75 <210> 95 0 <211> 78 <212> PRT <213> macaca mulatta <400> 95 15
Val Arg Ser lle Gln Met lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg 1 5 10 15
Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Phe His Asp Leu 20 25 30
Phe Tyr His Leu Glu Leu GIn Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met His Leu
Gly Gly Glu Gin Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr 60 10
Glu Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ser 65 70 75 >210< 96 5 <211> 9 <212> PRT <213> macaca fascicularis
<400> 96
Val Arg Ser lle Gln Met lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg 1 5 10 15
Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Tyr Asp Leu Ser
Tyr His Leu Glu Leu GIn Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met Val Asn His 10
Leu Gly Gly Lys GIn Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp 60
Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ser 15 65 70 75 <210> 7
<211> 9 <212> PRT <213> macaca fascicularis <400> 97 5
Val Arg Ser lle Gln Met lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg 1 5 10 15
Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Tyr Asp Leu Ser 10 20 25 30
Tyr His Leu Glu Leu GIn Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met Val Asn His 35 40 45
Leu Gly Gly Lys GIn Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp 60
Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ser
65 70 75 <210> 98 <211> 7 <212> PRT 5 <213> macaca fascicularis <400> 98
Val Arg Ser lle Gin Met lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg 10 1 5 10 15
Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lle Tyr Asp Leu Ser 20 25 30
Tyr His Leu Glu Leu GIn Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met His Leu Gly
Gly Lys Gin Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr Glu
50 55 60
Phe Leu Gly Thr lle Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ser 65 70 75 <210> 99 <211> 293 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 99
Leu Arg Leu Glu Tyr Leu lle Arg Leu Thr lle Gly Tyr Arg Leu Asn 1 5 10 15
Gly Thr Ala Ala Thr Met Gly Trp Ser Cys lle lle Leu Phe Leu Val
Ala Thr Ala Thr Gly Val His Ser Pro Glu Asp Pro Ser Asp Leu Leu
35 40 45 ‏ماك‎ His Val Lys Phe GIn Ser Ser Asn Phe Glu Asn lle Leu Thr Trp 50 55 60
Asp Ser Gly Pro Glu Gly Thr Pro Asp Thr Val Tyr Ser lle Glu Tyr 65 70 75 80
Lys Thr Tyr Gly Glu Arg Asp Trp Val Ala Lys Lys Gly Cys GIn Arg 85 90 95 10 lle Thr Arg Lys Ser Cys Asn Leu Thr Val Glu Thr Gly Asn Leu Thr 100 105 110
Glu Leu Tyr Tyr Ala Arg Val Thr Ala Val Ser Ala Gly Gly Arg Ser 15 115 120 125
Ala Thr Lys Met Thr Asp Arg Phe Ser Ser Leu Gin His Thr Thr Leu 130 135 140
Lys Pro Pro Asp Val Thr Cys lle Ser Lys Val Arg Ser lle Gin Met 145 150 155 160 lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg Ala Gly Asp Gly His Arg 5 165 170 175
Leu Thr Leu Glu Asp lle Phe His Asp Leu Phe Tyr His Leu Glu Leu 180 185 190
Gln Val Asn Arg Thr Tyr Gin Met His Leu Gly Gly Lys GIn Arg Glu 195 200 205
Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle 210 215 220 15
Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ala Lys Glu Ser Ala Pro Tyr Met Cys 225 230 235 240
Arg Val Lys Thr Leu Pro Asp Arg Thr Trp Thr lle Glu Gly Arg Asp 245 250 255
Met Asp Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 260 265 270 5
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Arg Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 275 280 285
Pro Lys Asp Thr Leu 10 290 <210> 100 <211> 293 <212> PRT 15 <213> macaca mulatta <400> 100
Leu Arg Leu Glu Tyr Leu lle Arg Leu Thr lle Gly Tyr Arg Leu Asn 1 5 10 15
Gly Thr Ala Ala Thr Met Gly Trp Ser Cys lle lle Leu Phe Leu Val 20 25 30 5
Ala Thr Ala Thr Gly Val His Ser Pro Glu Asp Pro Ser Asp Leu Leu 35 40 45
GIn His Val Lys Phe ‏صو‎ Ser Asn Asn Phe Glu Asn lle Leu Thr Trp 10 50 55 60
Asp Ser Gly Pro Glu Gly Thr Pro Asp Thr Val Tyr Ser lle Glu Tyr 65 70 75 80
Lys Thr Tyr Gly Glu Arg Asp Trp Val Ala Lys Lys Gly Cys GIn Arg 85 90 95 lle Thr Arg Lys Ser Cys Asn Leu Thr Val Glu Thr Gly Asn His Thr
100 105 110
Glu Leu Tyr Tyr Ala Arg Val Thr Ala Val Ser Ala Gly Gly Arg Ser 115 120 125
Ala Thr Lys Met Thr Asp Arg Phe Asn Ser Leu GIn His Thr Ala Leu 130 135 140
Lys Pro Pro Asp Val Thr Cys lle Pro Lys Val Arg Ser lle Gin Met 145 150 155 160 10 lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg Ala Gly Asp Gly His Arg 165 170 175
Leu Thr Leu Glu Asp lle Phe His Asp Leu Phe Tyr His Leu Glu Leu 15 180 185 190
Gln Val Asn Arg Thr Tyr Gin Met His Leu Gly Gly Glu Gln Arg Glu 195 200 205
Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle 210 215 220
Met lle Cys Val Pro Thr Trp Ser Lys Lys Ser Ala Pro Tyr Met Cys 5 225 230 235 240
Arg Val Arg Thr Leu Pro Asp Arg Thr Trp Thr lle Glu Gly Arg Asp 245 250 255
Met Asp Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 260 265 270
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 275 280 285 15
Pro Lys Asp Thr Leu 290
<210> 101 <211> 292 <212> PRT <213> macaca fascicularis <400> 101
Leu Arg Leu Glu Tyr Leu lle Arg Leu Thr lle Gly Tyr Arg Leu Asn 1 5 10 15
Gly Thr Ala Ala Thr Met Gly Trp Ser Cys lle lle Leu Phe Leu Val
Ala Thr Ala Thr Gly Val His Ser Pro Glu Asp Pro Ser Asp Leu Leu 15
Gln His Val Lys Phe GIn Ser Asn Asn Phe Glu Asn lle Leu Thr Trp 60
Asp Ser Gly Pro Glu Gly Thr Pro Asp Thr Val Tyr Ser lle Glu Tyr 65 70 75 80
Lys Thr Tyr Gly Glu Arg Asp Trp Val Ala Lys Lys Gly Cys GIn Arg 85 90 95 5 lle Thr Arg Lys Ser Cys Asn Leu Thr Val Glu Thr Gly Asn His Thr 100 105 110
Glu Leu Tyr Tyr Ala Arg Val Thr Ala Val Ser Ala Gly Gly Arg Ser 10 115 120 125
Ala Thr Lys Met Thr Asp Arg Phe Asn Ser Leu GIn His Thr Ala Leu 130 135 140
Lys Pro Pro Asp Val Thr Cys lle Pro Lys Val Arg Ser lle Gin Met 15 145 150 155 160 lle Val His Pro Thr Pro Thr Pro lle Arg Ala Gly Asp Gly His Arg 165 170 175
Leu Thr Leu Glu Asp lle Tyr Asp Leu Ser Tyr His Leu Glu Leu 07 180 185 190
Val Asn Arg Thr Tyr Gin Met His Leu Gly Gly Lys GIn Arg Glu Tyr 195 200 205 5
Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr Glu Phe Leu Gly Thr lle Met 210 215 220 lle Cys Val Pro Thr Trp Ser Lys Lys Ser Ala Pro Tyr Met Cys Arg 10 225 230 235 240
Val Arg Thr Leu Pro Asp Arg Thr Trp Thr lle Glu Gly Arg Asp Met 245 250 255
Asp Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 260 265 270
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
275 280 285
Lys Asp Thr Leu 290

Claims (1)

  1. عناصر الحماية
    1. جسم مضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎Cus antigen-binding fragment‏ يرتبط ببروتين ‎protein‏ مستقبل إنترلوكين -22 ‎(IL-22R) interleukin-22 receptor‏ بشري؛ حيث يشتمل الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎antigen binding fragment‏ على نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎(VH) heavy chain variable domain‏ ونطاق متغير خفيف السلسلة ‎light‏ ‎¢(VL) chain variable domain 5‏ يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة ‎heavy chain variable‏ ‎(VH) domain‏ على توليفة من متواليات مناطق تحديد التمامية ‎complementarity determining‏ ‎(CDR) regions‏ متغيرة ثقيلة السلسلة ‎variable heavy chain‏ منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة ثقيلة السلسلة 3 ‎(HCDR3) variable heavy chain complementarity determining region‏ تشتمل على المتوالية رقم: 6؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎variable heavy chain‏ ‎(HCDR2) complementarity determining region 2 0‏ تشتمل على المتوالية رقم: 36؛ ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة ثقيلة السلسلة ‎variable heavy chain complementarity determining‏ ‎(HCDRI1) region 1‏ تشتمل على المتوالية رقم: 34؛ و توليفة من متواليات مناطق تحديد التمامية متغيرة خفيفة السلسلة ‎(LCDRs) variable light chain complementarity determining region‏ : منطقة تحديد التمامية 3 متغيرة خفيفة السلسلة ‎variable light chain complementarity‏ ‎(LCDR3) determining region 3 5‏ تشتمل على المتوالية رقم: 54؛ منطقة تحديد التمامية 2 متغيرة خفيفة السلسلة 2 ‎(LCDR2) variable light chain complementarity determining region‏ تشتمل على المتوالية رقم: #47 ومنطقة تحديد التمامية 1 متغيرة خفيفة السلسلة ‎variable light‏ ‎(LCDR1) chain complementarity determining region 1‏ تشتمل على المتوالية رقم: 16. 0 0 2. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد الضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يكون نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎heavy chain variable domain‏ و/أو نطاق متغير خفيف السلسلة ‎light chain variable domain‏ عبارة عن صورة متوافقة مع البشر ‎humanised variant‏ أو صورة سلالة جرثومية ‎germlined variant‏ لنطاق متغير ثقيل السلسلة ‎heavy chain variable domain‏ أو نطاق متغير خفيف السلسلة ‎light chain variable domain‏ مستمد من الجمليات ‎.camelid-derived‏
    3. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية ‎dh,‏ لمولد الضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 ‎Cum‏ يحتوي على المنطقة المفصلية ‎region‏ 1088 نطاق ثابت ثقيل السلسلة ‎(CH2) heavy chain constant domain 2 2‏ و/أو نطاق ثابت ثقيل السلسلة 3 ‎heavy chain‏ ‎(CH3) constant domain 3 5‏ للجلوبيولين المناعي ‎(IgG) immunoglobulin gamma la‏ البشري.
    4. تركيبة صيدلانية تشتمل على الجسم مضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد الضد ‎antigen‏ ‎binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 ومادة حاملة ‎carrier‏ مقبولة صيدلانياً واحدة على الأقل أو سواغ ‎.excipient‏
    ‏5. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية ‎dh,‏ لمولد الضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة ‎heavy chain variable domain‏ على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 790 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض ‎١٠ 5‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 63.
    6. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية ‎dh,‏ لمولد الضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 ‎Gus‏ يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة ‎heavy chain variable domain‏ على متوالية الحمض أ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 63.
    7. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية ‎dh,‏ لمولد الضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1( ‎Gus‏ يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة ‎light chain variable domain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 790 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 64.
    8. الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎antigen binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة ‎light chain variable domain‏ على متوالية الحمض أ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 64.
    9. جسم مضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎Cus antigen-binding fragment‏ يرتبط ببروتين ‎protein‏ مستقبل إنترلوكين -22 ‎(IL-22R) interleukin-22 receptor‏ بشري؛ حيث يشتمل الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ضد ‎antigen binding fragment‏ على سلسلة ثقيلة وسلسلة ‎(dads‏ حيث تشتمل السلسلة الثقيلة على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للمتوالية ‎ad)‏ 67 وحيث تشتمل السلسلة الخفيفة على متوالية الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ 0 لمتوالية رقم: 68.
    0. تركيبة صيدلانية تشتمل على جسم مضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة لمولد ‎antigen ca‏ ‎binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 9 ومادة حاملة ‎carrier‏ مقبولة صيدلانياً واحدة على الأقل أو سواغ ‎.excipient‏ ‏15
    ‏1. جسم مضاد ‎antibody‏ يرتبط ببروتين ‎protein‏ مستقبل إنترلوكين-22 ‎interleukin-22‏ ‎(IL-22R) receptor‏ بشري؛ ‎Gus‏ يشتمل الجسم المضاد ‎antibody‏ على سلسلة ثقيلة تشمل نطاق متغير ثقيل السلسلة ‎(VH) heavy chain variable domain‏ وسلسلة خفيفة تشمل نطاق متغير خفيف السلسلة ‎¢(VL) light chain variable domain‏ يشتمل النطاق المتغير ثقيل السلسلة ‎heavy‏ ‎(VH) chain variable domain 0‏ على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 63 ويشتمل النطاق المتغير خفيف السلسلة ‎(VL) light chain variable domain‏ على متوالية الحمض لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 64.
    2. الجسم المضاد وفقاً لعنصر الحماية 11؛ يشتمل إضافيا على المنطقة المفصلية ‎hinge‏ ‏25 «منوع» نطاق ثابت ثقيل السلسلة 2 2 ‎(CH2) heavy chain constant domain‏ و/أو نطاق ثابت
    ثقيل السلسلة 3 3 ‎heavy chain constant domain‏ (603)_للجلوبيولين المناعي جاما ‎(IgG) immunoglobulin gamma‏ البشري.
    3. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11( حيث تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain 5‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 790 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67.
    4. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11( حيث تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 795 على ‎JN‏ مع متوالية 0 الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67.
    5. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 ‎Gus‏ تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 798 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67.
    6. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 ‎Gus‏ تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 799 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67.
    17. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11( ‎Gus‏ تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain‏ على متوالية الحمض أ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67.
    8. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 ‎Gus‏ تشتمل السلسلة الخفيفة ‎light chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 790 على الأقل مع متوالية الحمض ‎bo 25‏ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 68.
    9. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11( حيث تشتمل السلسلة الخفيفة ‎light chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 795 على الأقل مع متوالية الحمض لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 68.
    20. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 حيث تشتمل السلسلة الخفيفة ‎light chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 798 على الأقل مع متوالية الحمض لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 68. 21 الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 حيث تشتمل السلسلة الخفيفة ‎light chain‏ 0 على متوالية الحمض أ لأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 65.
    2. الجسم المضاد ‎antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 ‎Gus‏ تشتمل السلسلة الثقيلة ‎heavy‏ ‎chain‏ على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 795 على ‎JN‏ مع متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 67 وحيث تشتمل السلسلة الخفيفة ‎light chain‏ على 5 متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ بها نسبة تطابق 795 على الأقل مع متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للمتوالية رقم: 68.
    3. تركيبة صيدلانية تشتمل على الجسم المضاد ‎antibody‏ أو شظية رابطة ‎Algal‏ الضد ‎antigen‏ ‎binding fragment‏ وفقاً لعنصر الحماية 11 ومادة حاملة ‎carrier‏ مقبولة صيدلانياً واحدة على 0 الأقل أو سواغ ‎.excipient‏ zo ie vy a eee Saga Mowe ‏ا‎ ‏ل حب‎ Tex as TE ‏ل‎ ‎Gamma Rng ‏ا‎ ‎5 BR Na ‏الي المي‎ ّ ً ‏ا‎ a & 3 3 a RE S oN Co + “Ne ae “a ‏لجسي اسع‎ >> ‏المي لنت‎ IIE RR 8 \ Coa aa \ 3 REE A i SEER 1 1 LE FR } 0 0 5 3 3 adie Py Smal nd Sa Sos Ram Wc Pode A Soha i ye oon 3 REY MER Cini RE son A . iE ‏سانا‎ ‎0 MEE ‏سا سس اا‎ EEE EEE 8 ‏ا‎ 8 0 ‏ل ا‎ Saab
    CE. Hay Na Yara XN a aay Sa NEE Yaa Ra SEER AR 5 ‏ا‎ ‎ERR a x Ym Gad La LD Te RR EERE RON a RN ay SEE > Le ey - SEER ‏الع‎ wy 3 8 ‏اي ا جوع 55-5 ات‎ SEE = Ve, wy Ty 8 ‏د ا‎ 2 ١ a ThE > ‏ل‎ ‏ا‎ 8 ay Yaa SEINE Yaa EEE Ni EEE Ni SEY Yaa EE To Sn LE Vid NEESER 3 ‏ا ٍ تتا‎ ٍ > ‏حير .+ سوال‎ ag 3 %¥ ¥ ‏من‎ ‎wp ‏اطي الوا‎ Tepe sXe ‏لت‎ J ¥ ao AR \ Sat
    ١ METILTILTY ‏د«ممععمديه‎ PEDLLOHVEF QISNFPENILT WDSPECTED SY TYYSIEYETY GERIWVARES OORITRESCN LTVETGNLTE LYVARVIAYS ‏كنا‎ AGGRIATAMT DRESSLOHTT ‏لاج لج معد‎ SVRESIQMIVE PTRTEIRAGD Y 2% GHRLTLEDIF KOLEFYHLELD VNRTYOMHELG GROREVEFFE LTPDTEFLGT ‏نا‎ IMICVPTWAX ESLZPYMURVE TLPORTYTYE ‏امومع دعق‎ TLVAVLOYLE YoY YRYVEEPEPAF PNSLNVQRVL TPQPLRFIJE ‏ممح قدت معي لدم بج ودج‎ ‏امع مع وو بببٍ‎ EFAGAFORHS ‏اودر ع تمه‎ DISILOPENY ‏اوقا‎ ‏بو‎ YAFRAAPEVE ‏عدب موده‎ ERQFFFYAPC ‏عومد ع مود القع وف‎ ¢, 4 ‏معي 7ع‎ GRDEPTGTLS BERHLEPRGY LOFEPPAGEC MISGLOLOEY fay TELAMEESQE ARSLACPLGI UTDRTSDPNY LHSGEEGTED YIRGQLELLE 2+} SVEISGHIME LELOPFSREC SPSDUSESEN GLLESLVCOIK DEARSELPET
    ‎SOLEQPTELD SLFEGLALTY ORES‏ نمه
    ‎poi” st
    ‏الشكل ؟
    ‏لأ
    موحت ومس مجممممعممص وماد قاد ‎TEOTHACIAT CTTGROTETES‏ لصوتت موق ‎١‏ ‎TEOTODAGCS COTOARSTTO CRCTOCASCA AOTTTOIAAS CATOUDSROS‏ معموجه ممعة ‎TY‏ ‎SOATOSLETE TARSICSTEY‏ الف ودج مع ‎CAQUOCRGES‏ مدعت ‎fay TOSGADDRGTD‏ ‎STIOTSCRAD‏ ممص ممع ‎AANCHXGEEC TETONBOGER‏ عممموعج7 صم تقد ‎Vid‏ ‏وح ‎CORGHITOAD‏ عمدت مما ومو كدت جد لصوو ‎UTHLRORSTES‏ ب وم عات مضع ‎GECASSTICE SUTOTOTECE‏ اص و موده جم ممع مجع ‎Wy GUSEEATEI0‏ ل ع ع ل ا ات ا ع ا ا ع م اصح دق موي اصع وداه بوث جوج جمد رع روج ومو دمع ‎THORTAOGAT SECORICSAT‏ لفوت وو مصعم توي ‎17١‏ ‏لوجع مومع ‎OOTIICSEAT‏ ومو معدا موجمج جاع اماق مود لصحتت ‎$Y‏ ‏مجو ووجم دوج وح دمج مومع مومودمه ‎CAGRATATCR CSTTOTIOARY‏ دحج مودي ‎SLY‏ ‏ومممعووومه ‎SAGAGTEOLNS COTICATETE‏ ع ومموعمعوو ‎GY ATCATHATTT SOSTTOOUAD‏ ‎OTOUATEESC‏ جاجح ومو ‎TTOTOOSGAS‏ المعو و ضورق موي توق ‎TAY ACAROTSOCAR‏ وج مجج وتوم ‎TOAUCARSCD‏ معممعجوعوومودة مووع مرج ‎CASTARCTOTE‏ مسد تا وجب مد مومه ‎OGOTSUSOTT‏ جوع جاجع رع ‎TOARCHTOOR SOSASTIITE‏ طحق عمد تجلا ورت جوع وطاق . ممع وج المموعو ةمدصو ممع جرت ووروع” لوطع اطي ا ب اب دوقعم ‎AY‏ ‏مج دعجمم مد ‎SIGTCTEIAE SXGCTOCACS‏ مو مد ممموجمع جومم ‎FY TRAOTOCONGZE‏ ‎CTIORRDETGE‏ ممعوه موود ‎SROATOTOCA‏ ممععدع ودج ‎FY OTHTOCSESAE TOADOTRCTT‏ حا حرم جد ال عت ات ع باصعا دي اسع ومع اوضرع اصح موت إلا ا ا الح اع تع ‎SALGOTCRAT‏ اط ع العامة وحوعوق. ‎CTOOTATOOT‏ خخ ءا ل ل ات حت ا ات تت اح ‎ TTOOTOOTAT‏ امود مجوجع . تومو ودع 3 ‎SHCROTTTOT‏ وجوت وموومه ‎GSCRRASICT‏ الوح فوع جوع عجوت لوعت موجن .لذ مسج مود ‎IAGOORIORGET‏ ممق قح تمص خدضوسد د ججقمى؟ بجوم جصددع ‎ACTCOTIEALS‏ نجواة ‎ATOOORLGAR‏ موجمج يرود الوحت وضع مجعوح فدح اوضق : ‎SUCTTTOTOT‏ دوعو ومووجج ‏ ذلا مجع مقصمة ‎SLACATOTES‏ مضع عم موه م( دحج عدا ‎TECACCAGCY‏ سدممقحقمعة ‎YEAY‏ ‏ممص مود ‎GRCATOACES TACOCTLLASE SOCAGOTOLD‏ موف اودوع ‎OTLOACASTS‏ 1:41 ‎COnTOCATET‏ لوجع صو ‎TORSTOUAGE TORASGENCS COUCCETSTOC OTCOOTTTEC‏ بصلا مح صتطوصووع ‎ACCAAGETOC DRSTOOOTES BECOTEOTAE RETOOOTTET‏ لوصوم ‎Yay Sort‏ ‎LORATTEERT‏ مضخ مومع جو+ حو وضع ‎37١ SaToANGOND SGASOCTEGS COUTSASRTC‏
    ‎OOTSR‏ جمدمومععوي ‎SRSSCOTOSC CCTSLOTETS‏ مصجح ومصممدع ‏ الخ
    ‏إل ا ™ ‎J‏
    { ay, Xow Hx ‏بي ب‎ ‏الها‎ ‎#& ‏زد‎ ‎* ‏ا‎ i ‏ل ؟‎ wow J ‏الا‎ 4 5 ‏ا الع‎ IN 8 ‏ا‎ ‎1 : 0 ‏ع‎ . es SRR = Negeri ‏أ" 8 المح‎ ‏ار نه‎ ely 2» 0" ‏د 8 سم ا ل‎ £8 ir oo FY NN - = SET ee g & Se N W ‏انم‎ SL 3 rd Sa ‏اي‎ & & oF A & = ‏الي و3‎ wa ‏م 0 ص الي‎ ‏مج‎ a PE = RB oi os op Ce we ‏الا ا‎ ‏ا‎ ‏شر‎ ِ ! : ’ yew 43 ‏ؤي«‎ ved A Yow LE I 8 ‏ب ب‎ * ‏مر‎ ‎8 sk 3 a & 3 ‏ب‎ 8 $m PE Re Rh Terme 3 mn : 3 1 ‏الح‎ ssn? Bang NE 8 0 * ‏ال‎ AS ‏ذا م 8 يك ال ا‎ ‏م‎ Fo LEAN Ne wn BO WN ‏اله‎ % ES wy % Ne ١ ٍ 3 Re Ty 0 00 HA ٠ 5 ES ho ©,» ‏ل“‎ Sa > ‏جا باج‎ # oR ‏ل‎ ٠ ‏ميخ اا‎ 3 ‏جب‎ on Nn EN on . I rn TER oe &§ 3 ‏نت‎ ‎-ٍ ‏الشكا ؛‎ ‏يا‎
    : ‏س0‎ [A BOCEEITRLE ES TN VR TFT RL RS I LE ST ‏لا‎ LO RE EP PL TP OTE PLOT I NE IVE TG 5% J Sagan EE TI VRE DFT Rr RAE LR TLE OTE Hy HE NS TN ~ RL So RE TE PRET PRIS PLIST INE TVET ¥ wy IT2IRR EL ‏تفع رذ م‎ ee ‏تج‎ ee rae ‏عا رع‎ er aaa eer ean ee mae a aia ea TT ue ae ‏حت عات ءاي رج عع وجي‎ aes mr ‏ال‎ CL Sra ‏8ص ا‎ 5 a. ‏ال“‎ ‏ا‎ 3 I ET EE EE EET Te re eB ‏ا‎ ee Ue We a ed eae eR i A ‏لاما الي ع ةما اماج م عام لاما راج 3 م ال حي‎ is Hl ‏را نو 43 3 اكات ا اع و ار رك‎ FRITTERS td JER re cr eee ci 00D 130 ‏ب‎ ‎FTLACAGIT ‏ب . ّ بلسي عا‎ i ‏سل ل‎ 1 ‏د ل لانت ا اج ا ا‎ irra a BRR hd FRATEEGE ‏يم‎ cn nee nero ae ET Bas eae ee ET es rs eas ne see 8 ‏ا"‎ ‎wn + ‏ب‎ ‎* ‎#] 3% +: os 0 : LEE ETLIRLTI SUE LNE TAA TMENGC I ALY LA TA TA EE BE A TS TE LIN EE ST SLT A TE UN TCE SONAR IR TRY £ cen tan ‏وم ما لاط ام‎ Van ‏وا لال‎ vane ces ‏الام واو وا الا اح‎ Cen va 0 HR 3 @y ou % QAI mE aT my dar ‏دا ات دجا اك‎ bn ‏ات ارج جه خا يح‎ ER ‏ات ايج‎ em eve = ib ‏تعد عابت ا لب ف أ‎ AR TA ‏ا اا اا لتاقت لبد تا لكات عشت‎ I TV HE TE TR I BACT ‏ا ابي‎ DI FHL FY LE OVER T YON ws ‏ل‎ rman enone Nios Besse enB Bop Ym a EEN Rahn EE ‏عام‎ rds he Fd Led x T wn 1 ‏ان‎ hey * : ; » ‏حرم‎ Boe Br snes cen Fre sig enor ‏و افا جا‎ rn nen SH Bra ‏احا وا‎ 2 ‏ل‎ ‎Fr ‏ا‎ Pau # i Le Vo Ry ‏او‎ TL TIE FL TIN CV UTR SE IMPOR ‏تالجع‎ DTH IE IR SEL LOREEN ‏ب 4 تييع يج‎ an vo = SEE FAR 2 ‏ةماعب اناج د ادي‎ Loh RAV ELFEN DIL v a he ‏ا ا‎ 5 3 3 Lay Tey wap ‏ما الم جا لاي عام عر ع‎ Bale cn ‏وم‎ Rc vie ‏ممعت ءا لام مج ايام‎ eva ae ‏.ءام‎ vee 48 ‏نب‎ ‏ل‎ ‎a {Sad fet ١ i. 3# 0 ‏جح‎ WH f Po ener t — PHAR SMa, ABE) dle hale oe >
    I. ¥ ‏لمت اك‎ * : ed ‏ماد‎ ١ ‏اتات ممص ل‎ + + : ‏خخ‎ | / \ EE | + 8 1 1 ‏ا ب‎ + { LEY ‏للستت‎ * * i id bw ‏الح ا‎ se | ‏م‎ ‎i ‎] 1 ¥ sey 1 ‏ذا‎ + t YA eet |] + : ) ts ‏ااانا ا‎ ‘ ‏أ‎ i FIR 3 ‏أ‎ A dR - % 1 ‏ب‎ . i un 3 18588 1 ٍُ ‏ا ً ا‎ f i - nt LASS Fo
    . oN
    & . 4 i he ‏رك ابا اب د‎ OL “ i. Wi Shes 3 y ‏ا الس يري‎ ‏وار ل ١ر7 ل ا‎ Fa Ray ik > Py ¥ fou? & OB a fa : RE Re © To eT vid NEERE TI ww Ve & BH 8 ona ae gt ad & 4 aN ! 5 ‏؟‎ WE ‏ب"‎ = NN § TNE TR OC Le Ya ‏ا‎ Ha ‏ا‎ 4 NN A Sell NL { ‏م‎ Ln LLG = RN ‏اس‎ RRC RNY 8 EER RR RE ranean ‏اي‎ § CE SRE ¥ oem ERR FoR Sa i 3 3 BR Ne am ARE 2 BN FERRE SF Si : ‏م حر الس اا الا 0 الاق 8 سي‎ 8 : . a AM ‏لاب ين‎ a 1 FOE ‏ا ا‎ Sif ! T NW Reba la ‏في‎ cen WANT wl ‏ا بن را‎ ‏ل ا‎ ia PURE Ea EE EER NSE 5 3 ‏بي‎ HEN BENE aaa ‏ا مام الا الا تمي للد‎ 0 ‏ب"‎ ne Wy 4 ‏اا‎ aE AR IY 2 ‏الها ا‎ Se 8 ‏ل‎ 3 { ; 0 Ste NS Noh ‏ا‎ XR IR 0 t a 3 CART Ned, A ‏ا«‎ BL LOA ‏م ل‎ Na £ DEEN So NRE SRE ON ‏الحا ب‎ aaiEass 0 Sig ‏الى كل ا لال‎ 00 ™ ‏باس وا‎ Pa ey ‏يل“‎ » 8 ‏ا‎ = RE 10%, Eatsnaes 3 Tun ‏راشي‎ Tae a & BONY NR OTR ٠ CI ‏اليا‎ > ers se i he ‏أبن ؟ ال‎ * : 0 he a Y ~ ‏اد لكا ذال سنا‎ Na 0 Nani oP SU % hs 8 Te NG ' ‏الشكا‎ ‏ب‎
    ‏الي‎ ‎= ‎X ‎5 8 8 ‏متسس امس‎ wii ‏قل قد‎ ‏لاتحت سدح سس ا اا‎ : = ER SE — cng Ee I ‏كك‎ Wo “> ‏د ال‎ Eg > TRAIN a ‏ب اح‎ x ‏وا سلا‎ 8 ‏المي‎ EI ‏الا لي امسو‎ Ue : 1 ‏امد ا ال أي‎ NT penn in \ Na 8 % 8 ‏م‎ wy fo 3 : Bar ene SOR REN 1 oe BS BON & TR ‏الست الحا‎ HY LR ‏با‎ ٍِ 3S Ny Ng 8 <4 8 * 3# : bd 8 > ‏و هذ ا‎ 8 0 ‏سخ ا‎ 3 x 3 ‏ااا اح‎ 8 : : ‏ين ا 8 ا كا ال‎ ‏نوا‎ Ne & 5 . Ni, ‏ل‎ 7 = WW ‏ل‎ Ty ‏ا ا‎ Ba Re By ed Nell B® a A VOW yO 8 ‏ا‎ ‏حا > 4 ا‎ = ‏متا ام‎ ‏مما‎ = a sss 5 0 ١ + ‏ا‎ : 3 0 x 3 x ‏ب لا‎ 3 hE % vy ‏أ‎ Ye Yorn BW ‏هي‎ ‎A ‏الشكا‎ ‎R ‏ب‎ 7
    Ww 1 I 3 Yee ove 8 ‏لحي‎ ‎َ Tas o> A SOP 3 ‏عست‎ ‏لات عي ع‎ > ‏اي ل را ا‎ ‏ا “يا كينا‎ Te ‏تت‎ ‎Hy J oF “A & = \ oo &R TW B SIE SIA CEA [RY 21 ‏ا‎ A = FEES ww ‏الت‎ ‎Bawa Ql sw 33 ‏و‎ ‎3 SEH > ] A Rs Mp 1 WM 2 07 8 1 3 ‏ل‎ ‎7 0 CSE we ThE ATE . * Si WN eae BLY + ‏لحب‎ A SA ‏فى د«‎ ‏ا‎ 5 oS RE SRR . 3 4 ‏كحي‎ : no error E————————————— < 3 + ْ ti 4 } X % 4 Ea 8": 1 Ta ES ‏مب‎ ‎0 ‎Yon & x : ‏ص‎ ‏يي ا ا ل‎ i ‏ااا‎ oo RE Fi SE a Soi wm Hy al ‏خا‎ RE wy bie w Ny ‏أبية ا احج ا‎ N, ‏اا‎ ‏لحف ان‎ 0 NE > RAT > y ‏نب‎ ‏قا‎ wa, 3 RH Ree ‏با د ليم‎ ‏كي‎ ‏ا‎ ‏جاه‎ NEY 3 2 ‏يح‎ ‎Ry ‎NS 8 ‏لا‎ ‎ON, ‎al ‏سمت‎ ‏ة‎ ‎TUE ‎pv ee ‏معي جه ةبح اج‎ #4 eh % a fen Naas Woo ‏لس‎ ‎- ‏الشكل؟‎ ‏ب‎
    3 yo» 4 i ‏نه‎ ‏أ‎ : \ 4 i 3 | \ i % 1" : i 8 ‏ا‎ i #4 oo i Cf | i * Alyy A ‏و7‎ ‏ئ‎ 3 $5 ‏ب‎ , 4 po 8 5 ; \ ‏صر‎ ' > ‏رد بعل‎ ١و‎ 4 ¥ ad i
    Hy EM wy ox 3 LL 3 } Yaw : Yow ew i 3 : 7 2 { 3 & v v 3 i i x i 3 8 1 + ‏ا‎ : + 1G { 1 : FIRE : 8 : ‏يي‎ i Syne HY : Noe HY 1 RN : 7 § i 8 + y ¥ 4 4 ‏؟:‎ 8 : 1 : Pon : wc ; { od Pook : ‏اخ‎ = < § 1 Tot 8 : to ‏لبا‎ eh 3% 1 . ‏ما‎ : bs 3 ‏بع‎ SI 3 4 i 4 ‏ا‎ ١ { & fo { 1 1 ‏د‎ : ; § OB Fy em § : Hy en i yon 1 ! ‏لبة‎ : 0 i ١ ‏لبا‎ : yi { = 5 8 : ‏ِب‎ 8 3 3% 3 i ‏؟‎ 0) { ; ion { fos Pol : ‏ل‎ : 1 : 0 : = i i 1 i A : 3 3 i 8 8: kK { 5 § 8 1 2 + 3 3 i 5 § § { od 3 x 3 . ¥ 3 i dove ¥ 08 : + 8 § { § § % 8 0 3 A { : 8 { 3 § 8 1 4 § ‏ا‎ : 2 3 2 1 $ 1 0 { 3 3 8 : ٍ ‏ب‎ { i 3 8 : ‏ب + ال‎ i 3 Bed Sh ‏جه يو الا وبحي وجي ص امس و رحد و اتا ادم عرو‎ pe q - -~ 3 I) we va © ‏ف‎ i T ia To ¥ & Yo ‏عن‎ Yok $a 6 Noa ‏و ل م + اشن‎ 7 ‏م‎ ‎Yi wy wm RE : ‏جم الجا‎ : : 3 { 3 & 8 I & { 3 A : 3 3 1 3 A : : £3 } * 1 8 : 4 SY { Sad #3 3 a EY { wad 8 : ‏دا ايلم‎ 1 Av FA : . Ser I 1 3 1 : wom i § A \ x fod 3 ‏الها‎ 4 HY oe } N 3 ‏تي : يلا : م[‎ : = od yy : . ‏ا م 7 !5ك‎ ‏نت" مك‎ + i ! 4 7 ‏الجر‎ Hoa { 3 1 : i a : EO { 1 ios : 4 ‏ات 5 ل‎ 4# { HA od go ; Yh i Poon 1 ad 4 8 i ! d + iE i : Ne Nu T = & 8 i i : &, 0 i 1 ‏ال مح‎ : fos Po + 3 3h : 2 8 1% 1 i i 3h : : 3 yi { 3 8 No : 7 § Yn { 2 ¥ + : 53 ‏ب‎ § XE 3 J 5 Yon 3 + ‏ا‎ : ‏م‎ : Xo 3 NL ag & Yo { Te N 3 + 8 ‏الل‎ 3 YY { & i ‏ا ؟‎ : 3 3 PR { 3 § NE t : § 1 i + 3 ‏ل‎ : a 5 ‏ا‎ : 8 8 5 : : ¥ vO { L008 § ‏الل 8 4 0 : انب‎ { my 0 © ‏ا‎ : A AY ‏لي‎ 1 6 Ni ‏ل‎ ‏نات تددو جاو ددهي أ الا #بحقي‎ grates ‏اهيا واملي د رف نيلي‎ eA eR pp ¥ wy ¥ LE $ . ‏ا‎ 4 a z ¥ T 2 x ‏اماج‎ & ‏لنت 5 مع‎ > Tin ‏مشي‎ Ya % ‏اه ال و‎ $a vo Yor wr 11 He nH wy sm : : 1 ‏دا اجا‎ { Noa ad i : 3 : a 2 1 3 84 : + iu 3 $ = : 2 8 { 3 Fi ; : HE { La 3 i 8 1 8 ‏أ ٍِ جا‎ an ‏ا‎ ‏ال‎ 8 { Aye $3 i + ‏كا‎ 3 i ‏؟‎ : :ٍ ‏خا‎ 3 T Py } + ‏؟ 7< : ل‎ + 1 4 YOR 8 i Poy 1 ‏ابا‎ Pon : : = : FE 1 Re 8 1 : Hoy 2 1 PRES : ٍ { : i : 5 : FE { “ 3 1 : yw ~ i } i Bye 8# FR : en Hye io 1 ! ‏ب‎ i ‏؟‎ : 1 : i i 1 FE] i 3 8 ‏لا‎ i i 1 ‏ع انا‎ 7 : Loam § 1 1 3 § 3 : 3 1 : [I : . N ‏ا‎ ‎a 3 1 : * 5 ‏ا‎ ‎: 2 ‏اذا‎ i : § > 1 > : TT : 20 : > : x ns 3 ‏ا : الل‎ : 5 1 3 x 3 “ T . ‏ا > 3 ل‎ i LE : + 3 8: 4 § ‏ا‎ : 2 : } : § 1 : 8 0 : 3 { t 8 % 5 : : $ 8 : 3 3 ‏ب‎ : & 2 3 8 3 2 ‏ل‎ : . : 5 ES { ‏مر‎ RC SPENT IY YS ‏تمق واب‎ PE ‏الي و رات ووب لج << جمدي جور‎ 3 & 3 ‏سر‎ 34 ‏با‎ = + $ po) - : 3 ¥ 2 Tox ie 3 2 s ho t 2 Tow ‏م‎ 3. Loa Ne LI ‏شير‎ Loa Nw i A 3 JR 8 3} ‏بي‎ ‏لا‎
    4 ‏اي‎ ‎aoa F ‏حي ضر‎ ٍ i SS SEA LIE “3 ‏ل‎ % <5 . & » Ou Yi 3 | a 7 8 A 2 A “ Ly 8 i heat i Ay i ; 3 “Xx SN Vor band NG EE ood : ‏ب‎ A 0 ‏اللا‎ £5 3 SUR RS =~ ET a : OATS ; : ON Ro So. 3 0 ang, § RE Te a ‏حبق‎ Yo Yk ‏الخ‎ + ‏لين‎ ‏بج لام‎ ١؟لكشلا‎ TT ‏يا‎ i 134 X had } ar Ya A 8 ‏ان‎ EN & 3 ‏ا‎ ‏ولاس ا ا‎ ‏ب سيك السو دا الأ ا‎ ‏ا ب امسا الع ا ا ل‎ © ‏الس الكت اي ا‎ ¥ AEE wR Ce ve XA ‏وج‎ ‏ا‎ En 8 ‏ا‎ Nang Aa = el ey, 3 Sg, hogy ‏اا‎ wo ‏ب«‎ ‎® CT ‏"م . مسا‎ 0 _- 88 TONE 3 A % RR A ty TR eo RR UTE When ‏ا اك القن‎ SR WN 1 We 8 eg 0 ‏يا‎ ‎3 ¥ WF TENE ‏مط‎ MT ‏يل‎ : « ٍ : £8 DUR 0 0 wy ‏الي‎ od ‏ب 3 ا ا ا & ب‎ fy nS “ng a “nL Oh Ww “Na 4 J 3 Ry 88
    5 . nu, pc an ‏تت‎ ‎: } ‏ب‎ ‎7 ‏ا يد‎ i ¥ 0 ry at hel i. Vi ٍ ‏ا ب ا‎ 3
    + . 2 0 ٍ
    >. * ‏الح‎ 2 oy 0 + ٍ X % a ! : i : ’ : 3 3 ; 8 i ; . ‏يج‎ ox = ‏ل ارتب‎ Ta 1 ‏ب‎ : aw ¥ i ‏اما‎ \ i ar i ; © 8 ‏ا‎ ‎; Yor z { { { { { { - { ‏مويق‎ { 3 { 3 { 3 { 3 { 3 { 3 \ 1 1 ‏ااا ايا يا ايا يا‎ YY ‏يا يا يا‎ YY i FR ‏ااا م‎ \ { OR { in ¥ In ; 3 a \ 3 ‏وجل‎ J Ud ae dees ١ TI + ‏إْ‎ ‎{ 2# ْ { 1 1% { I ¥ IR i food 33 aa ol { Apt Fens . Mm Co ‏خوك‎ ‎{ 3 ; 3 Anais We ¥ TR i = 1X EE EE RR, i { Fp? BeBe: \ i ‏إْ ا‎ { TN { i ‏ب‎ ‏مب ل‎ i 3 8 Na, ee NIN 1 ‏م مم مس ل‎ RRR i = 3 A ‏حيو تت تت حت‎ \ ¥ 3 ‏حب‎ 1 : 3 { i { i \ : viii i i 3 LLL LLL LLL LL } i § Ch \ Voted ¥ 3 { i { i { i { i y 3 eerie assesses ase; . : i Sop Boke : \ { ; , i ‏ب«‎ ona Yo, La i + 3 ¥ ; 3 ; ‏اتح‎ ‎i ERLE LARA RR RR RRR % LA EARL EARLE RR RRR RR RRs ‏تسسا‎ ‎3 { 7 : + or
    { wy c 0 + 8 rE 8 ‏اي بج«‎ ‏مج‎ ‎wy ~ $ & 2 * ‏يه‎ ‏ل‎ 1 § 8 ‏ّج‎ ‏فر‎ . A 3 : % A oid 1 ‏تيك د‎ wy SF ‏ب‎ ‎wy 0
    3 . : & “LR ‏ض‎ 8 wo ‏تي‎ ‏م‎ X ul : roo ¢ $ 8 « ‏بي‎ * ٍ ‏صر‎ Jensen ‏ل‎ ‏ال صقن‎ 3 Xe Youn ny Sp ١ ‏الشكلء‎ ‏بح‎ i * Rid fy 4 g a a x ‏ال‎ ٍِ 1 ts ‏د‎ ‎i A ‏ااا‎ ‎i ‎s i ‏صق‎ ssn ody 1 1 ~ { FRE i i i i ‏فى ال‎ : ‏ب‎ 8 i RS i 2 Ea ‏تع‎ ‎{ : : Sy oo ‏ارق‎ ‎w } “ ‏#ج‎ ET Be ~ x x fq SU \ ‏سكل‎ ‎: + & napa cd R 3 0 od Fs pe See 3 i & RW ‏سبيت سس‎ ِ . { 0 .ً si ‏ب‎ v.48 { + ‏محتقي‎ : 0
    !.. ‏فظنا * : ِ اليب‎ ‏ل‎ 1 5 : 8 > BF = ‏مس‎ Bn od BE ; ES 3 “#8 * ‏بين‎ ‎i RR B® i i - i 1 ‏لد‎ 8 i { R i i i i i i Yo \ { i i i . i Fas - 3 { ~ - § waded 4 = 2 + : | ‏امس ا ا‎ i ‏لشسشنميسمسيسسسمسسسيسسمسسسسيسمسسسسسسييسسسسسسس سل باع ا‎ So ‏ل‎ ‎i + 1 ‏ا‎ : TE ‏لاج‎ ‎ٍ : 1 ‏اي‎ Hy ‏اا‎ ‏لي‎ Hp WY an Xoo Ved vo ‏الشكا‎ ‎yo 1
    ب 1 جِِ ان
    كا .* ‎y a wy ow‏ بالا 0 ْ . * تك 3 فى 2 . - * ‎Yi‏ ‏5 © . ‎ie » * » ~ ©‏ ‎x‏ ‎Rl‏ ‎i ®‏ 5« 01 2 ب * يه ‎A= * * : *‏ ‎٠‏ * 5 ‎A ye fa‏ ايلا ‎HY a AF‏ الخ اع و ا ا ا ليا ا ا سام م ا ا اف 0 3 ‎Rm ١‏ وك ا ‎EN We Wes 3 Me‏ " 183 ‎eT‏ لاب ا كم أب 2 تايا اما ب : ‎aa Ha a‏ ايخ : ‎x‏ 4 ¥ واج كه ‎vou‏ ين ‎wy A" BX EY‏ ‎El Ser 2 3 0 a‏ ا" ب ‎hood‏ ‏ب ‏الشكا + لشكل ‎١+‏
    £ By oH wy ‏و‎ ‎1 ‏ها‎ ‎4 ‏ب‎ ‎i = vi ¥ Poe w oy el at ; ‏ا سد‎ * * * ‘ a oa & * . “ra ‏ا‎ . : : ٠ ١ o* * Yo *. ‏م إٍْ‎ ‏بج‎ ‎= ‎as ‏ل‎ wy Iss es as i - ‏م‎ av 3 : 8 ‏بد‎
    ‎. POTEET IT LE TRE ‏تي‎ ‎wees ‎1 ‏مج‎ ‎Y ‏نيا‎ ‎3 ‏جنوج‎ 5 ® 48 2 "43 Vz 3 * ‏د‎ * ° By = ne # * ® ® Ye a a * . ‏ا‎ * w ¥ i. . To *“« % — ‏جح‎ 1 a i So 9 _— ‏ااا ااي يغ‎
    > . CAEN ‏اميم 1 اتيرام‎ - SLD TRE LO rE Tah Teh +H ¥ x Z Ly Sad Ld
    ته ‎Ye {‏ 3 3 ا + ‎y‏ % ‎PY 6 a‏ ‎ae‏ ‎of Tn &‏ * 3 ‎i Nn‏ #7 إْ > مب ‎gq‏ ‏ا 3 ‎i :‏ ‎one AN‏ ‎Ww oat i 1 \‏ ‎i ٍ‏ : ب سل ‎es‏ إْ 2 3 ب ‎Pr Su &‏ ا ‎N‏ ‎on Ft N‏ ‎ig‏ 3 ‎ow >‏ ‎i “‏ ‎i &‏ ‎x Fe ® Mn *‏ ‎New,‏ 3 ‎Nn‏ 3 ‎RE ev‏ ‎Yo! TE‏ ‎i‏ ‏3 ‎(EA‏ ‎x SEE EE: YAY +: a 3 8 8 i i Ra 8 8 : ST‏ ‎spd 4 x Xe Yew‏ ححيء " ‎n wt”‏ ‎A 1‏ ا ‎A‏ 3
    الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية ‎Swed Authority for intallentual Property pW‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < ‎Ne‏ ‎ge‏ ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام ‎TEE‏ ‏ببح ةا ‎Nase eg‏ + ‎Ed - 2 -‏ 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ uo‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA519400856A 2016-07-15 2019-01-10 أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22‏ SA519400856B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1612337.4A GB201612337D0 (en) 2016-07-15 2016-07-15 Ant-il-22r antibodies
PCT/EP2017/067923 WO2018011420A1 (en) 2016-07-15 2017-07-14 Anti-il-22r antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA519400856B1 true SA519400856B1 (ar) 2022-10-25

Family

ID=56890507

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA519400856A SA519400856B1 (ar) 2016-07-15 2019-01-10 أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22‏

Country Status (27)

Country Link
US (4) US10696741B2 (ar)
EP (2) EP3484921B1 (ar)
JP (1) JP7163275B2 (ar)
KR (2) KR102571012B1 (ar)
CN (1) CN109641966B (ar)
AU (1) AU2017296094B2 (ar)
BR (1) BR112019000788A2 (ar)
CA (1) CA3024370A1 (ar)
CY (1) CY1125041T1 (ar)
DK (1) DK3484921T3 (ar)
ES (1) ES2903412T3 (ar)
GB (1) GB201612337D0 (ar)
HR (1) HRP20220197T1 (ar)
HU (1) HUE057615T2 (ar)
IL (1) IL264262A (ar)
LT (1) LT3484921T (ar)
MX (1) MX2019000539A (ar)
MY (1) MY197821A (ar)
PL (1) PL3484921T3 (ar)
PT (1) PT3484921T (ar)
RS (1) RS62884B1 (ar)
RU (1) RU2758721C2 (ar)
SA (1) SA519400856B1 (ar)
SG (1) SG11201900128XA (ar)
SI (1) SI3484921T1 (ar)
UA (1) UA125585C2 (ar)
WO (1) WO2018011420A1 (ar)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201612337D0 (en) 2016-07-15 2016-08-31 Argen-X N V Ant-il-22r antibodies
MX2020013243A (es) * 2018-06-05 2021-05-12 Bioatla Inc Anticuerpos anti-il-22, fragmentos de anticuerpo, sus inmunoconjugados y usos de los mismos.
CN110302363B (zh) * 2019-07-04 2020-10-09 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院） Il-22作为制备治疗pcos药物的应用及药物制剂
WO2023232789A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 Leo Pharma A/S Liquid formulation of il-22r antibody

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5892019A (en) 1987-07-15 1999-04-06 The United States Of America, As Represented By The Department Of Health And Human Services Production of a single-gene-encoded immunoglobulin
EA009026B1 (ru) * 2003-03-24 2007-10-26 Займоджинетикс, Инк. Антитела против il-22ra, их партнеры по связыванию и способы их применения при воспалениях
MX2007004770A (es) * 2004-10-22 2007-11-22 Zymogenetics Inc Anticuerpos anti-il-22ra y moleculas y metodos para usarlos en inflamacion.
JP2009518314A (ja) * 2005-12-02 2009-05-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｉｌ−２２に結合する抗体およびｉｌ−２２ｒに結合する抗体を含む、サイトカインシグナリングに関連する疾患および障害の処置のための組成物および方法
GB2461546B (en) 2008-07-02 2010-07-07 Argen X Bv Antigen binding polypeptides
CA2778864C (en) 2009-11-19 2017-06-27 Merck Serono S.A. Humanized antibodies against human il-22ra
GB2476681B (en) 2010-01-04 2012-04-04 Argen X Bv Humanized camelid VH, VK and VL immunoglobulin domains
GB2504139B (en) * 2012-07-20 2014-12-31 Argen X Bv Antibodies to highly conserved targets produced by the immunisation of Camelidae species
US9580501B2 (en) * 2011-12-16 2017-02-28 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Anti-TNF alpha monoclonal secretory IgA antibodies and methods for treating inflammatory diseases
IN2015DN00140A (ar) 2012-08-31 2015-06-12 Argen X Bv
WO2014133728A2 (en) * 2013-03-01 2014-09-04 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Hhla2 as a novel inhibitor of human immune system and uses thereof
CN105601739B (zh) * 2016-02-22 2019-01-18 王晨辉 一种人源化抗白介素22基因工程抗体及其应用
GB201612337D0 (en) 2016-07-15 2016-08-31 Argen-X N V Ant-il-22r antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
MX2019000539A (es) 2019-10-04
US10696741B2 (en) 2020-06-30
AU2017296094A1 (en) 2018-12-13
BR112019000788A2 (pt) 2019-07-02
RU2758721C2 (ru) 2021-11-01
SG11201900128XA (en) 2019-02-27
US11261246B2 (en) 2022-03-01
AU2017296094B2 (en) 2024-02-01
US11447544B2 (en) 2022-09-20
HUE057615T2 (hu) 2022-05-28
IL264262A (en) 2019-02-28
HRP20220197T1 (hr) 2022-04-29
RU2019103991A (ru) 2020-08-17
EP3484921B1 (en) 2021-11-17
DK3484921T3 (da) 2022-02-07
PL3484921T3 (pl) 2022-03-28
UA125585C2 (uk) 2022-04-27
RS62884B1 (sr) 2022-03-31
MY197821A (en) 2023-07-18
KR20190026766A (ko) 2019-03-13
PT3484921T (pt) 2022-01-26
CA3024370A1 (en) 2018-01-18
RU2019103991A3 (ar) 2021-04-29
CN109641966A (zh) 2019-04-16
WO2018011420A1 (en) 2018-01-18
GB201612337D0 (en) 2016-08-31
US20190127459A1 (en) 2019-05-02
KR102571012B1 (ko) 2023-08-24
SI3484921T1 (sl) 2022-02-28
LT3484921T (lt) 2022-01-10
EP4023674A2 (en) 2022-07-06
US20230088269A1 (en) 2023-03-23
KR20230128137A (ko) 2023-09-01
EP3484921A1 (en) 2019-05-22
US20200157207A1 (en) 2020-05-21
EP4023674A3 (en) 2022-10-05
CN109641966B (zh) 2022-08-23
JP7163275B2 (ja) 2022-10-31
JP2019528046A (ja) 2019-10-10
ES2903412T3 (es) 2022-04-01
CY1125041T1 (el) 2023-03-24
US20200216528A1 (en) 2020-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11912763B2 (en) Antibody targeting CLDN18.2, bispecific antibody, ADC, and CAR, and applications thereof
TWI781108B (zh) 抗ｇｐｒｃ５ｄ抗體、結合ｇｐｒｃ５ｄ與ｃｄ３之雙特異性抗原結合分子及其用途
US11365260B2 (en) Agonistic 4-1BB monoclonal antibody
CN102939305B (zh) 对cd122的抗体
TWI823895B (zh) 抗b7-h4抗體、其抗原結合片段及其醫藥用途
SA519400856B1 (ar) أجسام مضادة لمستقبل إنترلوكين-22‏
CN104220456A (zh) 结合并阻断髓样细胞表达的触发受体-1 (trem-1)的抗体
CN110494453A (zh) 抗类胰蛋白酶抗体、其组合物及其用途
KR102488214B1 (ko) 신규 항-인간 Igβ 항체
CA3230761A1 (en) Anti-human tslp monoclonal antibody and use thereof
CN104203977A (zh) 结合肽聚糖识别蛋白1的抗体
US7935793B2 (en) Treatment of inflammatory bowel diseases with anti-IP-10 antibodies
TW202210520A (zh) 標靶ｒｏｒ１的抗體或其抗原結合片段及製備方法和應用
CN112480254B (zh) 抗人白细胞介素-33受体的抗体及其制备方法和应用
EP1708961B1 (en) Anti-ip-10 antibodies
US20220340657A1 (en) Antibody and bispecific antibody targeting lag-3 and use thereof
CN110724193A (zh) 人单克隆抗il-32抗体、多核苷酸、载体、宿主细胞、制备方法、组合物及应用
US9371391B2 (en) Anti-human IL-23 receptor antibody and encoding polynucleotides
US20230036655A1 (en) Anti-gdf15 antibody
CN112759647B (zh) 一种抗pd-l1的抗体及其制药用途
CN113307874A (zh) 一种抗lag3的抗体及其应用
US11078266B2 (en) Anti-human IL-3 antibodies, their use in treatment of a disease or malfunction associated with elevated expression or levels of IL-3, and their use in a method to detect human IL-3
WO2023143534A1 (zh) 一种特异性识别4-1bb的抗体、其制备方法及其用途
TWI833227B (zh) 靶向pd-l1和cd73的特異性結合蛋白及其應用
WO2024077777A1 (zh) 多功能重组抗体及其制备方法和应用