RU99104591A - Модифицированная ацил-аср десатураза - Google Patents

Модифицированная ацил-аср десатураза

Info

Publication number
RU99104591A
RU99104591A RU99104591/13A RU99104591A RU99104591A RU 99104591 A RU99104591 A RU 99104591A RU 99104591/13 A RU99104591/13 A RU 99104591/13A RU 99104591 A RU99104591 A RU 99104591A RU 99104591 A RU99104591 A RU 99104591A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
desaturase
acp
acyl
amino acid
mutant
Prior art date
Application number
RU99104591/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2228356C2 (ru
Inventor
Джон Шанклин
Гюнтер ШНЕЙДЕР
Илва ЛИНДКВИСТ
Эдгар КАХУН
Original Assignee
БРУКХЕЙВЕН САЙЕНС АССОШИЭЙТС, ЭлЭлСи
Каролинска Инновэйшнз Аб
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/689,823 external-priority patent/US5705391A/en
Application filed by БРУКХЕЙВЕН САЙЕНС АССОШИЭЙТС, ЭлЭлСи, Каролинска Инновэйшнз Аб filed Critical БРУКХЕЙВЕН САЙЕНС АССОШИЭЙТС, ЭлЭлСи
Publication of RU99104591A publication Critical patent/RU99104591A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2228356C2 publication Critical patent/RU2228356C2/ru

Links

Claims (35)

1. Способ модифицирования длины цепи и специфичности расположения двойных связей растворимой десатуразы растительных жирных кислот, включающий модифицирование аминокислотных контактных остатков в канале, связывающем субстрат, в растворимой десатуразе жирных кислот, которые контактируют с жирной кислотой.
2. Способ по п. 1, в котором растворимая десатураза растительных жирных кислот представляет собой ацил-АСР-десатуразу.
3. Способ по п. 2, в котором ацил-АСР-десатураза является Δ9-десатуразой.
4. Способ по п. 3, в котором Δ9-десатуразу получают с помощью растений, выбранных из группы, состоящей из Thunbergia alata или Ricinus communis.
5. Способ по п. 4, в котором аминокислотные контактные остатки выбирают из группы, состоящей из остатков 114, 115, 117, 118, 179, 181, 188 и 189.
6. Способ модифицирования длины цепи и специфичности расположения двойных связей ацил-АСР-десатуразы, включающий:
а) предоставление первичной аминокислотной последовательности ацил-АСР-десатуразы;
b) выравнивание первичной аминокислотной последовательности ацил-АСР-десатуразы с первичной аминокислотной последовательностью Δ9-десатуразы Ricinus -communis для максимального сохранения последовательности;
с) построение трехмерной модели ацил-АСР-десатуразы на основе консервативной последовательности Δ9-десатуразы Ricinus communis;
d) идентификацию аминокислотных контактных остатков внутри канала связывающего субстрат, моделированной на стадии с) структуры; и
е) создание мутантной ацил-АСР-десатуразы, имеющей модифицированную длину цепи и особенности расположения двойных связей, путем замещения одного или нескольких аминокислотных контактных остатков, идентифицированных на стадии d), на другой аминокислотный остаток.
7. Мутантная ацил-АСР-десатураза, которая характеризуется способностью катализировать образование двойной связи в первой жирной кислоте и во второй жирной кислоте, причем первая и вторая жирные кислоты отличаются длиной цепи, и скорости образования двойных связей в первой и второй жирных кислотах различаются не более, чем приблизительно в 4 раза.
8. Мутантная ацил-АСР-десатураза по п. 7, которая которая содержит точечную мутацию в аминокислотном контактном остатке в канале, связывающем субстрат.
9. Мутантная ацил-АСР-десатураза по п. 7, в которой первая жирная кислота имеет длину цепи 16:0, а вторая жирная кислота имеет длину цепи 18:0.
10. Мутантная ацил-АСР-десатураза, которая имеет аминокислотное замещение в контактном остатке внутри канала, связывающего субстрат.
11. Мутантная ацил-АСР-десатураза по п. 10, которая характеризуется изменениями в длине цепи и специфичностью расположения двойных связей по сравнению с копией ацил-АСР-десатуразы природного типа.
12. Мутантная ацил-АСР-десатураза, по п. 11, в которой ацил-АСР-десатураза является Δ9-ацил-АСР-десатуразой и контактные остатки в пределах канала, связывающего субстрат, выбирают из группы, состоящей из 114, 115, 117, 118, 179, 181, 188 и 189.
13. Мутантная ацил-АСР-десатураза по п. 11, в которой Δ9-ацил-АСР-десатуразу получают посредством мутагенеза нуклеиновой кислоты, клонированной из Thunbergia alata или Ricinus communis.
14. Последовательность нуклеиновых кислот, кодирующая мутантную ацил-АСР-десатуразу, которая характеризуется способностью катализировать образование двойной связи в первой жирной кислоте и во второй жирной кислоте, причем первая и вторая жирные кислоты отличаются длиной цепи, и скорости образования двойных связей в первой и второй жирных кислотах различаются не более, чем приблизительно в 4 раза.
15. Последовательность нуклеиновых кислот по п. 14, в которой мутантная ацил-АСР-десатураза содержит точечную мутацию в аминокислотном контактном остатке в канале, связывающем субстрат.
16. Последовательность нуклеиновых кислот по п. 15, в которой (мутантная) ацил-АСР-десатураза является Δ9-десатуразой.
17. Последовательность нуклеиновых кислот по п. 16, в которой аминокислотные контактные остатки выбирают из группы, состоящей из остатков 114, 115, 117, 118, 179, 181, 188 и 189.
18. Конструкция экспрессии ДНК, включающая в экспрессируемой форме последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую мутантную ацил-АСР-десатуразу, которая характеризуется способностью катализировать образование двойной связи в первой жирной кислоте и во второй жирной кислоте, причем первая и вторая жирные кислоты отличаются длиной цепи, и скорости образования двойных связей в первой и второй жирных кислотах различаются не более, чем приблизительно в 4 раза.
19. Конструкция экспрессии ДНК по п. 18, в которой мутантная ацил-АСР-десатураза содержит точечную мутацию в аминокислотном контактном остатке в канале, связывающем субстрат.
20. Конструкция экспрессии ДНК по п. 19, в которой ацил-АСР-десатураза является Δ9-десатуразой.
21. Конструкция экспрессии ДНК по п. 20, в которой аминокислотные контактные остатки выбирают из группы, состоящей из остатков 114, 115, 117, 118, 179, 181, 188 и 189.
22. Клетка, трансформированная конструкцией экспрессии ДНК, включающая в экспрессируемой форме последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую мутантную ацил-АСР-десатуразу, которая характеризуется способностью катализировать образование двойной связи в первой жирной кислоте и во второй жирной кислоте, причем первая и вторая жирные кислоты отличаются длиной цепи, и скорости образования двойных связей в первой и второй жирных кислотах различаются не более, чем приблизительно в 4 раза.
23. Клетка по п. 22, в которой мутантная ацил-АСР-десатураза содержит точечную мутацию в аминокислотном контактном остатке в канале, связывающем субстрат.
24. Клетка по п. 23, в которой ацил-АСР-десатураза является Δ9-десатуразой.
25. Клетка по п. 24, в которой аминокислотные контактные остатки выбирают из группы, состоящей из остатков 114, 115, 117, 118, 179, 181, 188 и 189.
26. Клетка по п. 22, которая является прокариотической клеткой.
27. Клетка по п. 22, которая является эукариотической клеткой.
28. Клетка по п. 27, которая является растительной клеткой.
29. Химерная ацил-АСР-десатураза, которая характеризуется способностью катализировать образование двойной связи в первой жирной кислоте и во второй жирной кислоте, причем первая и вторая жирные кислоты отличаются длиной цепи, и скорости образования двойных связей в первой и второй жирных кислотах различаются не более, чем приблизительно в 4 раза.
30. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 29, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 172-201 заменены аминокислотами 178-207 из Δ9-18:0-АСР-десатуразы.
31. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 29, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 172-196 заменены аминокислотами 178-202 из Δ9-18:0-АСР-десатуразы.
32. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 29, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 176, 183, 184, 200, 201 и 202 заменены, соответственно, аминокислотами 181, 188, 189, 205, 206 и 207 из Δ9-18:0-АСР-десатуразы.
33. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 29, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 183 и 184 заменены, соответственно, аминокислотами 188 и 189 из Δ9- 18:0-АСР-десатуразы.
34. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 32, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 176 и 195 заменены, соответственно, аминокислотами 181 и 200 из Δ9- 18:0-АСР-десатуразы.
35. Химерная ацил-АСР-десатураза по п. 32, содержащая Δ6-16:0, в которой аминокислоты 176, 195, 200, 201 и 202 заменены, соответственно, аминокислотами 181, 200, 205, 206 и 207 из Δ9-18:0-АСР-десатуразы.
RU99104591/13A 1996-08-14 1997-08-01 Модифицированная ацил-аср десатураза RU2228356C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/689823 1996-08-14
US08/689,823 US5705391A (en) 1996-08-14 1996-08-14 Modified acyl-ACP desaturase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU99104591A true RU99104591A (ru) 2001-01-20
RU2228356C2 RU2228356C2 (ru) 2004-05-10

Family

ID=24770011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99104591/13A RU2228356C2 (ru) 1996-08-14 1997-08-01 Модифицированная ацил-аср десатураза

Country Status (15)

Country Link
US (3) US5705391A (ru)
EP (1) EP0934332A4 (ru)
JP (1) JP2000516092A (ru)
AU (1) AU718200B2 (ru)
BR (1) BR9711078A (ru)
CA (1) CA2263281C (ru)
EE (1) EE04020B1 (ru)
HU (1) HUP9904364A3 (ru)
IL (1) IL128498A0 (ru)
NO (1) NO990669L (ru)
NZ (1) NZ334616A (ru)
PL (1) PL331616A1 (ru)
RU (1) RU2228356C2 (ru)
UA (1) UA72180C2 (ru)
WO (1) WO1998006735A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2461624C2 (ru) * 2006-03-21 2012-09-20 Монсанто С.А.С. Fad-2-мутанты и растения с высоким содержанием олеиновой кислоты

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6310194B1 (en) 1994-09-26 2001-10-30 Carnegie Institution Of Washington Plant fatty acid hydroxylases
US5705391A (en) * 1996-08-14 1998-01-06 Associated Universities, Inc. Modified acyl-ACP desaturase
AU3862099A (en) * 1998-04-16 1999-11-01 Brookhaven Science Associates Llc Interconversion of plant fatty acid desaturases and hydroxylases
US7323335B2 (en) * 1999-01-19 2008-01-29 Brookhaven Science Associates, Llc Mutant fatty acid desaturase and methods for directed mutagenesis
US6686186B2 (en) * 1999-01-19 2004-02-03 Brookhaven Science Associates Llc Mutant fatty acid desaturase
EP1214334B1 (en) * 1999-06-09 2006-10-11 Brookhaven Science Associates LLC Mutant fatty acid desaturase
US6200500B1 (en) 1999-08-20 2001-03-13 Streck Laboratories, Inc. Hematology control and system for multi-parameter hematology measurements
US6221668B1 (en) 1999-08-20 2001-04-24 Streck Laboratories, Inc. Hematology control and system for multi-parameter hematology measurements
US6780405B1 (en) * 2000-04-28 2004-08-24 Avant Immunotherapeutics, Inc. Regulated antigen delivery system (RADS)
US6872547B1 (en) 2000-10-11 2005-03-29 Washington University Functional balanced-lethal host-vector systems
US20040137003A1 (en) * 2001-04-30 2004-07-15 Curtiss Iii Roy Regulated antigen delivery system (rads)
US6653137B2 (en) 2001-12-03 2003-11-25 Streck Laboratories Inc. Hematology reference control
US6723563B2 (en) 2001-12-03 2004-04-20 Streck Laboratories Inc. Hematology reference control
EP2216405A1 (en) 2002-05-03 2010-08-11 Monsanto Technology LLC Speed specific USP promoters for expressing genes in plants
US7078234B2 (en) 2002-12-18 2006-07-18 Monsanto Technology Llc Maize embryo-specific promoter compositions and methods for use thereof
BRPI0408896A (pt) 2003-03-28 2006-04-25 Monsanto Technology Llc promotores de planta para uso no desenvolvimento precoce de sementes
WO2006089950A2 (en) 2005-02-26 2006-08-31 Basf Plant Science Gmbh Expression cassettes for seed-preferential expression in plants
US8034994B2 (en) * 2005-04-19 2011-10-11 Basf Plant Science Gmbh Starchy-endosperm and/or germinating embryo-specific expression in mono-cotyledonous plants
CA2605393A1 (en) 2005-04-20 2006-10-26 Basf Plant Science Gmbh Expression cassettes for seed-preferential expression in plants
US7790873B2 (en) 2005-05-10 2010-09-07 Basf Plant Science Gmbh Expression cassettes for seed-preferential expression in plants
CA2675926A1 (en) 2007-02-16 2008-08-21 Basf Plant Science Gmbh Nucleic acid sequences for regulation of embryo-specific expression in monocotyledonous plants
CA3020943A1 (en) 2009-04-22 2010-10-28 Basf Plant Science Company Gmbh Whole seed specific promoter
AU2010270309A1 (en) 2009-07-10 2012-02-02 Basf Plant Science Company Gmbh Expression cassettes for endosperm-specific expression in plants
CN102782141A (zh) 2009-12-03 2012-11-14 巴斯夫植物科学有限公司 用于在植物中胚-特异性表达的表达盒

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0537178T4 (da) * 1990-05-25 2007-07-16 Du Pont Nukleotidsekvens af sojabönne-stearoyl-ACP-desaturase-gen
EP0563191B2 (en) * 1990-12-20 2000-01-19 E.I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequences of soybean acyl-acp thioesterase genes
US5654402A (en) * 1994-10-26 1997-08-05 Michigan State University Methods and compositions relating to plant Δ6 palmitoyl-acyl carrier protein desaturase
US5705391A (en) * 1996-08-14 1998-01-06 Associated Universities, Inc. Modified acyl-ACP desaturase

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2461624C2 (ru) * 2006-03-21 2012-09-20 Монсанто С.А.С. Fad-2-мутанты и растения с высоким содержанием олеиновой кислоты

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU99104591A (ru) Модифицированная ацил-аср десатураза
CN101792749B (zh) 大肠杆菌AppA肌醇六磷酸酶突变体
RU2008141698A (ru) Fad-2-мутанты и растения с высоким содержанием олеиновой кислоты
Thompson et al. Primary structures of the precursor and mature forms of stearoyl-acyl carrier protein desaturase from safflower embryos and requirement of ferredoxin for enzyme activity.
DE69826944T2 (de) Konsensus-Phytasen
WO1996013591A3 (en) Methods and compositions relating to plant δ6 palmitoyl-acyl carrier protein desaturase
RU2008131947A (ru) Мутанты fad-2 и высокоолеиновые растения
CN100482797C (zh) 植物脂肪酸环氧化酶及其用途
CA2257198A1 (en) Suppression of specific classes of soybean seed protein genes
ATE60797T1 (de) Prokaryotische carbonyl-hydrolasen, verfahren, dna, vektoren und transformierte wirte zu ihrer herstellung und diese hydrolasen enthaltende detergenszusammensetzungen.
HUP9904364A2 (hu) Módosított acil-ACP-deszaturáz
HUP0203560A2 (hu) Eljárás kalendinsav, egy delta-8,10,12 konjugált kettős kötést tartalmazó zsírsav és vele rokon, a delta-9-helyzetben megváltozott szerkezetű zsírsavak előállítására
PL336077A1 (en) Methods of and compositions for synthesising long-chain polyunsaturated fatty acids in plants
EP0415296B2 (de) Neue hochalkalische Proteasen
ATE169338T1 (de) Chimäres gen zur transformation von pflanzen
WO1999004013A3 (en) The induction of stress-related factors in plants
CA2309131A1 (en) Plant-optimized genes encoding pesticidal toxins
WO1998056926A1 (fr) Systeme pour exprimer une proteine hyperthermostable
Visvader et al. Comparative sequence and structure of different isolates of citrus exocortis viroid
MXPA03000507A (es) Enzima de citocromo p450 asociada con la sintesis de grupos delta12-epoxi en acidos grasos de plantas..
ZA967411B (en) Blue copper oxidase mutants with enhanced activity
EP0763599A3 (en) DNA encoding thermostable pyrophosphatase
WO1994019454B1 (en) An amylolytic enzyme
LoDuca et al. A new noncalcified dasycladalean alga from the Silurian of Wisconsin
Doolittle Molecular evolution