RU97110067A

RU97110067A - Модифицированные ингибиторы протеиназы

Info

Publication number: RU97110067A
Application number: RU97110067/13A
Authority: RU
Inventors: Хауард Джон Эткинсон; Майкл Джон Макферсон; Питер Эдвард Эрвин
Original assignee: Новартис Аг
Priority date: 1994-11-21
Filing date: 1995-11-20
Publication date: 2000-01-10

Claims

1. Цистатин, включающий по меньшей мере одну сайт-направленную аминокислотную делецию, причем указанная делеция представляет собой удаление аспарагиновой кислоты в положении 86 оризацистатина 1 или эквивалентного остатка в его гомологе или аналоге после сопоставления первичной структуры белковой последовательности указанного гомолога или аналога со структурой белковой последовательности оризацистатина 1.

2. Применение ингибитора протеиназы по п.1 для подавления действия соответствующей протеиназы.

3. Применение по п.2 ингибитора в качестве пестицида.

4. Ингибитор протеиназы по п.1 для применения в медицине.

5. Применение ингибитора протеиназы по п.1 при изготовлении лекарства для подавления действия соответствующей протеиназы.

6. Композиция для подавления действия протеиназы, содержащая по меньшей мере ингибитор протеиназы по п.1.

7. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит подходящий носитель.

8. Молекула ДНК, кодирующая ингибитор протеиназы по п.1.

9. Конструкция, включающая структуру ДНК-последовательности по п.8.

10. Нечеловеческий организм, трансформированный конструкцией по п.9.

11. Организм по п.10, отличающийся тем, что представляет собой растение.

12. Способ придания устойчивости к протеолитическому расщеплению, при котором нечеловеческий организм модифицируют или трансформируют таким образом, что он экспрессирует ингибитор по п.1.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанной экспрессией управляют с помощью выбранного промотора, выделенного из подходящего гена или модифицированного таким образом, чтобы экспрессия могла происходить временно или локально, так чтобы ингибитор экспрессировался либо в заданный выбранный момент времени, либо в заданном месте в зависимости от физиологических и/или анатомических особенностей организма.

14. Способ по п.12 или 13, отличающийся тем, что указанный организм является растением.

15. Способ по п.14, отличающийся тем, что указанное растение представляет собой зерновую культуру.

16. Способ получения ингибитора протеиназы по п.1, при котором нечеловеческий организм-хозяин трансформируют таким образом, чтобы его генетический материал включал ДНК, кодирующую ингибитор протеиназы по п.1, и затем выращивают и/или культивируют указанный трансформированный организм в условиях, при которых указанный ингибитор протеиназы экспрессируется с возможностью его сбора.

17. Способ борьбы с патогеном, паразитом или вредителем, при котором на указанного патогена, паразита или вредителя воздействуют ингибитором протеиназы по п.1.

18. Способ получения ингибитора протеиназы по п.1, при котором применяют один или несколько представленных в Таблице 2 праймеров, или праймеров, имеющих добавки, делеции или модификации, которые все же дают праймеру возможность продуцировать указанный ингибитор протеиназы.

19. Гибридный ингибитор протеиназы, включающий в себя
1) первую часть, состоящую из цистатина или его фрагмента;
2) вторую часть, состоящую из ингибитора протеиназы или его фрагмента;
3) возможно одну или большее число дополнительных частей, состоящих из ингибиторов протеиназы или их фрагментов.

20. Гибридный ингибитор протеиназы по п.19, отличающийся тем, что его вторая часть состоит из цистатина или его фрагмента.

21. Гибридный ингибитор протеиназы по п. 20, отличающийся тем, что его первая часть состоит из растительного цистатина или его фрагмента, а его вторая часть состоит из животного цистатина или его фрагмента.

22. Гибридный ингибитор протеиназы, состоящий из модифицированного растительного цистатина, у которого по меньшей мере один из N-конца, С-конца и активного сайта полностью или частично заменен эквивалентными областями из животного цистатина.

23. Гибридный ингибитор протеиназы по п. 21 или 22, отличающийся тем, что животный цистатин является цистатином белка куриного яйца
24. Гибридный ингибитор протеиназы по п. 21 или 22, отличающийся тем, что растительный цистатин является оризацистатином.

25. Гибридный ингибитор протеиназы по пп. 21, 22 или 24, отличающийся тем, что растительный цистатин является цистатином по п.1.

26. Молекула ДНК, кодирующая ингибитор протеиназы по любому из пп. 19-25.

27. Конструкция, включающая ДНК-последовательность по п. 26.

28. Нeчеловеческая клетка-хозяин, трансформированная ДНК по п. 26 и/или конструкцией по п. 27.

29. Применение ингибитора протеиназы по любому из пп. 19-25 для подавления действия соответствующей протеиназы.

30. Применение по п. 29 ингибитора в качестве пестицида.

31. Ингибитор протеиназы по любому из пп. 19-25 для применения в медицине.

32. Применение ингибитора протеиназы по любому из пп. 19-25 в изготовлении лекарства для подавления действия соответствующей протеиназы.

33. Композиция для подавления действия протеиназы, включающая по меньшей мере ингибитор протеиназы по любому из пп. 19-25.

34. Композиция по п.33, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит подходящий носитель.

35. Способ придания устойчивости к протеолитическому расщеплению, при котором модифицируют или трансформируют нечеловеческий организм таким образом, что он экспрессирует ингибитор по любому из пп. 19-25.

36. Способ по п.35, отличающийся тем, что указанной экспрессией управляют с помощью выбранного промотора, выделенного из подходящего гена или модифицированного таким образом, чтобы экспрессия могла происходить временно или локально, и ингибитор экспрессировался либо в заданный выбранный момент времени, либо в заданном месте в зависимости от физиологических и/или анатомических особенностей организма.

37. Способ по п.35 или 36, отличающийся тем, что указанный организм является растением.

38. Способ получения ингибитора протеиназы по любому из пп. 19-25, при котором нечеловеческий организм-хозяин трансформируют так, чтобы его генетический материал включал молекулу ДНК, кодирующую ингибитор протеиназы по любому из пп. 19-25, и затем выращивают и/или культивируют трансформированный организм в условиях, при которых указанный ингибитор протеиназы экспрессируется с возможностью его сбора.

39. Способ борьбы с патогеном, паразитом или вредителем, при котором на указанного патогена, паразита или вредителя воздействуют ингибитором протеиназы по любому из пп. 19-25.

40. Способ получения ингибитора протеиназы по любому из пп. 19-25, при котором применяют один или несколько представленных в Таблице 2а праймеров, или праймеров, имеющих добавки, делеции или модификации, которые все же дают праймеру возможность продуцировать указанный ингибитор протеиназы.