RU96103648A

RU96103648A - Биодатчик для обнаружения ионов нитрата или нитрита

Info

Publication number: RU96103648A
Application number: RU96103648/13A
Authority: RU
Inventors: Джефри Уильям Гернхэм
Original assignee: Бритиш Нуклеа Фюэл ПЛС
Priority date: 1994-05-28
Filing date: 1995-05-30
Publication date: 1998-05-10

Claims

1. Биодатчик для обнаружения ионов нитрата или нитрита, содержащий биохимический продукт, способный к осуществлению биохимической реакции в присутствии ионов нитрата или нитрита, и преобразователь, предназначенный для обнаружения преобразуемого выходного агента, который получен прямо или косвенно за счет реакции, вызванной биохимическим продуктом в присутствии ионов нитрата или нитрита, причем биохимический продукт включает в себя редуктазу для ионов нитрата или нитрита и кофактор, который окисляется за счет восстановления ионов нитрата или нитрита, отличающийся тем, что биохимический продукт включает в себя фотолюминесцентный ингредиент, который производит прямо или косвенно в качестве указанного выходного агента, фотоны, за счет окисления указанного кофермента, а указанный преобразователь содержит фотоприемник.

2. Биодатчик по п.1, отличающийся тем, что он содержит композицию иммобилизированного фермента, включающую в себя фермент редуктазы нитрата или нитрита, кофактор, который может принимать восстановленное состояние и окисленное состояние и который преобразуется из его восстановленного состояния в его окисленное состояние за счет восстановления указанного фермента редуктазы, дополнительный кофермент, способный возбуждать реакцию окисления в присутствии указанного кофактора в его указанном окисленном состоянии, за счет чего указанный кофактор преобразуется в его восстановленное состояние для поддержания поставки кофактора в его восстановленном состоянии, и возможности осуществления дальнейшего восстановления ферментом редуктазы, и средства для обнаружения степени окисления, вызванной вторым коферментом, причем степень окисления, вызванная вторым кофактором, является мерой образования кофактора в его окисленном состоянии, которая, в свою очередь, является мерой измерения количества ионов нитрата или нитрита, восстановленных ферментом редуктазы, причем указанные средства обнаружения содержат фотоприемник для обнаружения фотонов, испускаемых прямо или косвенно в результате окисления, вызванного вторым коферментом.

3. Биодатчик по п.2, отличающийся тем, что он содержит композицию иммобилизированного фермента, включающую в себя как кофермент нитрата, так и кофермент нитрита, так что нитрит, полученный восстановлением нитрата, далее восстанавливается редуктазой нитрита.

4. Биодатчик по одному из пп. 1 - 3, отличающийся тем, что указанный кофактор, который окислен, включает в себя фермент никотинамида NADPH, который окисляется в NADP⁺ в сочетании с восстановлением, обеспечиваемым редуктазой.

5. Биодатчик по одному из пп.1 - 4, отличающийся тем, что указанные фотоны вырабатываются при помощи одного или нескольких других коферментов, действующих в коферментной химической цепи.

6. Биодатчик по одному из пп. 1 - 5, отличающийся тем, что указанные фотоны вырабатываются при помощи фермента люциферазы, действующего в реакции биохимической цепи совместно с NADPH.

7. Биодатчик по одному из пп.2 - 6, отличающийся тем, что выработку NADP⁺ обнаруживают окислением органического спирта в его соответствующий альдегид в присутствии дегидрогеназы спирта.

8. Биодатчик по п.7, отличающийся тем, что альдегид обнаруживают реакцией с восстановленным флавином FMNH₂ в присутствии кислорода, совместно с ферментом люциферазы в качестве катализатора реакции.