CN104837847B - 用于选择性检测水中的亚硝酸根离子的新型氮杂bodipy化合物及其制备方法 - Google Patents
用于选择性检测水中的亚硝酸根离子的新型氮杂bodipy化合物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了可用于检测水性介质中的亚硝酸根离子的具有式1的氮杂‑BODIPY化合物。本发明还提供了用于制备具有式1的氮杂‑BODIPY化合物的方法。为了检测亚硝酸根离子,使用通过将在氧化铝中的式1的试料粉末涂布在热塑性塑料或玻璃固体支撑物上制成的浸量尺装置。检测事件可以通过记录在浸量尺表面上的颜色变化来监测。当相比于所有其他生物学重要的离子如SO4 2‑、Cl‑、HSO3 ‑、CO3 2‑、CH3COO‑、NO3 ‑、S2O3 2‑、N3 ‑时,借助于颜色变化的检测事件对于亚硝酸根离子是选择性的。
Description
发明领域
本发明涉及新型的式1的氮杂BODIPY(4,4-二氟-4-硼杂-3a,4a-二氮杂-对称引达省(4,4-difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacenes))化合物。本发明还涉及用于制备氮杂-BODIPY染料的方法。本发明特别涉及比色亚硝酸根感测物(传感物或感测器,sensor)的制剂,及其作为感测物用于选择性和敏感性检测水性介质(含水介质或水介质,aqueousmedium)中的亚硝酸根离子的感测物的应用的证实。更具体地,本发明涉及现场(on thepot)选择性检测来自含有不同竞争性阴离子的水样品的亚硝酸根离子(NO2 -)。
本发明还提供了用于制备式1的氮杂-BODIPY染料和比色亚硝酸根感测物的制剂的方法。所述氮杂-BODIPY染料可以涂布在塑料/玻璃/纸背衬(衬垫,backing)支撑物(载体,support)上,用于制作浸量尺装置(浸量杆或浸量棍,dipstick device)。由此制备的装置尤其可以用于现场选择性检测来自含有不同竞争性阴离子的水样品的亚硝酸根离子(NO2 -)。
发明背景
由牲畜废物、有机废物和化学肥料造成的农村饮用水源的亚硝酸根(NO2 -)离子污染在全世界仍然是一个问题。亚硝酸根(NO2 -)是环境中对于植物生长来说是必需营养物的三种无机含氮离子(NH4 +、NO2 -和NO3 -)之一。同时,对科学家来说,主要担忧来自于,在以痕量水平慢性暴露期间或疏忽地摄取了高水平,它对动物和人类健康的不利影响。一项研究估计,多于一百万的美国人正在使用硝酸根浓度超过由环保局(EPA)规定的最大污染水平(MCL)的自供水。亚硝酸盐通常用作食物防腐剂,以延长加工好的肉类的货架期,然而,它们也已被认为是在与蛋白质的交互作用后产生对人类健康极为有害的致癌性N-亚硝胺的重要前体。水是另一种主要的易接近的通过其人类健康的安全性受到亚硝酸盐(或硝酸盐)的危险水平威胁的来源。它们通常存在于地下水而不是地表水中,并且主要的贡献者是牲畜粪便、化学肥料、以及天然沉积物的侵蚀。据信大量医学问题与亚硝酸盐(或硝酸盐)摄取有关。一个典型的实例是婴儿高铁血红蛋白症(infant methemoglobinemia),也称为“蓝婴综合征(blue baby syndrome)”,其特征在于皮肤显浅蓝色。考虑到亚硝酸盐的毒性,美国环保局(EPA)限定了在饮用水中亚硝酸根的最大污染水平(MCL)为1ppm(21.7μM),且世界卫生组织(WHO)设定的类似的指导值为3ppm。可以参考:M.J.Hill,Nitrates and Nitrites inFood and Water(水和食物中的硝酸盐和亚硝酸盐),1st Ed.,Woodhead PublishingLimited,England,1996;美国专利号005776715 A,1998;美国专利号007655473 B2,2010;美国专利号3802842,1974;B.Liang,M.Iwatsuki,T.Fukasawa,The Analyst,1994,119,2113-2117;Z.Xue,Z.Wu,S.Han,Anal.Methods,2012,4,2021-2026;M.C.Archer,S.D.Clark,J.E.Thilly,S.R.Tannenbaum,J.Am.Chem.Soc.2009,131,6362-6363;美国环保局.National Primary Drinking Water Regulations:Contaminant Specific FactSheets,Inorganic Chemicals,consumer version(国家基本饮用水规定:污染物具体事实表,无机化学品,消费者版本);Washington,DC,2009;世界卫生组织.Guidelines forDrinking Water Quality:incorporating 1st and 2 nd addenda,Vol.1,Recommendations.-3rd Ed.(饮用水质量指南:结合第1和第2附录,第1卷,提议-第3版),WHOPress,Geneva,Switzerland,2008。
已知亚硝酸盐在环境中是化学不稳定的。由于这种反应性,快速的检测程序是优选的,特别是对于现场分析。已经开发了多种技术,用于亚硝酸根离子的检测,包括光谱学(光度测定法和荧光测定法)、电化学、以及化学发光。分光光度分析法通常是简单的和选择性的,包括硝酸特有的芳族胺的重氮化以及后续的与合适的芳族试剂的偶联反应以生成高度有色的偶氮染料,其强度与初始亚硝酸根浓度有关。此方法起源于经典的格里斯(Griess)反应。通过在酸性条件下磺胺的亚硝酸根依赖性重氮化以及该原位产生的重氮离子与N-(1-萘基)-乙二胺的偶联以提供偶氮生色团,进行格里斯试验。格里斯试剂的主要缺点之一是使用了高浓度的危险试剂。除了环境忧虑,溶液pH和用于反应的温度也需要特别注意,从而使检测程序变复杂。电化学方法和化学发光是另外两种用于测定亚硝酸根的方法,但它们两者都需要在昂贵的仪器上进行,限制了它们在真实样品中的广泛应用。可以参考:M.J.Moorcroft,J.Davis,R.G.Compton,Talanta,2001,54,785-803;N.Wang,X.Cao,X.Cai,Y.Xu,L.Guo,Analyst,2010,135,2106-2110;W.Ko,W.Chen,C.Cheng,K.Lin,Sens.Actuators B,2009,137,437-441;Z.Lin,W.Xue,H.Chen,J.Lin,Anal.Chem.,2011,83,8245-8251;J.Li,Q.Li,C.Lu,L.Zhao,D.Ye,L.Luo,Y.Ding,Q.Chen,X.Liu,Analyst,2011,136,4563-4569。
在这方面,开发一种能够在水性介质中以及固态装置中充当有效的亚硝酸根感测物的单分子是有挑战性的任务。硼配合物4,4-二氟-4-硼杂-3a,4a-二氮杂-对称引达省(缩写为BODIPY)由于其有利的性质作为理想的敏化剂具有很大的前景。这些体系表现出在500-600nm范围内的强吸收,和显著的荧光量子产率和高的光稳定性。相反,当与BODIPY相比,氮杂-二吡咯甲川(aza-dipyrromethene)和它们的硼配合物(氮杂-BODIPY)显示约100nm的向红移移动的吸收,吸引了较少的注意,并且仅在过去十年才开始研究。可以参考:S.Ozlem,E.U.Akkaya,J.Am.Chem.Soc.2009,131,48-49;T.Yogo,Y.Urano,Y.Ishitsuka,F.Maniwa,T.Nagano,J.Am.Chem.Soc.2005,127,12162-12163;A.Gorman,J.Killoran,C.O′Shea,T.Kenna,W.M.Gallagher,D.F.O′Shea,J.Am.Chem.Soc.2004,126,10619-10631;A.Loudet,K.Burgess,Chem.Rev.2007,107,4891-4932;R.Ziessel,B.D.Allen,D.B.Rewinska,A.Harriman,Chem.Eur.J.,2009,15,7382-7393;N.Adarsh,R.R.Avirah,D.Ramaiah,Org.Lett.2010,12,5720-5723。
现有的用于检测在水性介质中的亚硝酸根离子的实际应用的分子探针的主要缺点是:
1.第一个缺点是检测仍然需要精确的溶液转移、使用复杂的仪器技术等,使得它对于不具有任何科学背景的人更(不)可用。
2.第二个缺点是对于不用仪器的观察来说,探针对亚硝酸根离子的低敏感性和选择性。
3.第三个缺点是不能够制备这些探针之外的通过其可以使检测简单得多并且方便的简单装置如浸量尺、条等。
4.第四个且重要的缺点是缺少作为用于亚硝酸根离子的探针的单一的且简单的分子,格里斯试剂,最普通的商用的亚硝酸根感测物是三种组分的混合物。
在本发明中,我们开发了基于氮杂-BODIPY的亚硝酸根感测物,其在宽范围的竞争性阴离子内显示对亚硝酸根离子的良好选择性。而且,与经典的亚硝酸根感测物格里斯试剂(LOD=1μM)比较,所述感测物显示大大提高的敏感性,检测极限值为300-500nM。在容许的误差极限的情况下,也可以进行给定样品中的亚硝酸根离子的定量评估。为了避免使用用于检测技术的复杂仪器,我们配制了用于亚硝酸根离子的现场感测(on the spotsensing)的简单且有效的浸量尺装置。
发明目的
本发明的主要目的是提供式1的单个分子氮杂-BODIPY染料,其可用于选择性检测溶液中的亚硝酸根离子。
本发明的另一个目的是提供用于制备式1的氮杂-BODIPY染料的方法。
本发明的另一个目的是提供一种使用式1的氮杂-BODIPY染料以相对简单和方便的方式检测亚硝酸根离子的技术,特别适合于分子探针如用于亚硝酸根离子的感测物的实际应用。
本发明的又一个目的是提供用于定量评估给定样品中的亚硝酸根离子的简单且精确的方法。
本发明的又一个目的是提供使用式1的氮杂-BODIPY的用于选择性检测亚硝酸根离子的简单且高效的浸量尺装置。
本发明的又一个目的是提供用于检测水性样品中的亚硝酸根离子的精确、快速、实时方法。
发明概述
因此,本发明提供了一种用于选择性检测溶液中的亚硝酸根离子的式1的氮杂-BODIPY化合物及其盐。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物显示高至280℃的温度的高热稳定性。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物可用于检测水性介质中的亚硝酸根离子。
本发明的一个实施方案提供了一种用于制备式1的氮杂-BODIPY化合物的方法,所述方法包括:
a)将4-氨基苯乙酮加入至NaOH的溶液并且搅拌10分钟,以获得反应混合物;
b)将3,4-二甲氧基苯甲醛滴加至所述反应混合物并且搅拌6小时,以获得沉淀物;
c)将所述沉淀物过滤并用水洗涤,以获得查耳酮(chalcone);
d)在活化的(activated)K2CO3存在下,将所述查耳酮在乙醇中与硝基甲烷反应,并且回流24小时的时间,以获得混合物;
e)将所述混合物用水洗涤并且用氯仿萃取;
f)去除溶剂以获得残余物,并且通过柱色谱法分离,以获得硝基甲烷加合物(硝基甲烷加成产物,nitromethane adduct);
g)将所述硝基甲烷加合物与乙酸铵在乙醇中反应,并且在回流下加热48小时的时间,以获得产物;
h)将所述产物过滤并用乙醇洗涤,干燥并从氯仿再结晶,以获得作为具有金属光泽的淡绿色晶体的氮杂二吡咯甲川(azadipyrromethene);
i)在二异丙基乙胺(DIEA)存在下,将氮杂二吡咯甲川在无水(干燥的,dry)二氯甲烷中与三氟化硼合二乙醚(三氟化硼二乙基醚合物,boron trifluoride diethyletherate)反应,并且在25℃的温度搅拌15小时的时间;
j)将溶剂蒸发并且将所获得的残余物用水洗涤,随后用氯仿萃取;和
k)通过柱色谱法分离,以获得作为紫色固体的氮杂-BODIPY。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物表现出高度强烈的紫色,在600-850nm范围内具有强NIR吸收,并且吸收最大值在750nm处(或具有在750nm处的吸收最大值)。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物表现出在700-900nm范围内的在甲醇中的NIR发射,并且发射最大值在约825nm处(或具有在约825nm处的发射最大值)。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物表现出消光系数为4.8±0.2x 104M-1cm-1的强吸收。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物可以通过加入稀酸,优选HCl被质子化。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物的质子化形式具有强烈的蓝色,具有在500-800nm范围内的宽的吸收带,并且最大值为570nm(或具有570nm的最大值)。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物的质子化形式可用于在溶液形式的选自由SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-和N3 -组成的组中的其他阴离子存在下检测NO2 -离子。
在本发明的一个实施方案中,所述化合物显示在水性介质中的500nM的检测极限(LOD)。
本发明的一个实施方案提供了一种使用本发明的化合物的可用于检测水中的NO2 -离子的浸量尺装置,其中所述装置包括固定在选自由塑料、玻璃和纸背衬的支撑物的表面上的式1的化合物。
本发明的另一个实施方案提供了一种用于制备浸量尺装置的方法,所述装置使用式1的化合物可用于选择性检测水中的NO2 -离子,所述方法包括以下步骤:
将式1的化合物溶解在二氯甲烷中,以获得混合物;
加入精细粉末化(细粉化,finely powdered)的二氧化硅或氧化铝,并且在静置(留置,leaving)10分钟之后允许所述二氯甲烷蒸发,以获得试料(assay);
将所述试料固定在支撑物的表面上,以获得浸量尺(测量棍,dipstick);和
将所述浸量尺暴露至HCl气体,随后将它浸入样品中,以检测亚硝酸根离子。
本发明的一个实施方案提供了一种用于制备浸量尺装置的方法,其中所述支撑物由选自由热塑性材料(thermoplastic)、吸收垫(absorption pad)、玻璃棒(glass rod)和条形纸(条纸,paper strip)组成的组中的塑料、玻璃或纸背衬制成。
本发明的一个实施方案提供了一种用于制备浸量尺装置的方法,所述浸量尺装置可用于测试含有浓度为低至2.0±0.5x10-5M的亚硝酸根离子的分析样品。
附图简述
图1式1的氮杂-BODIPY化合物。
图2通式1的氮杂-BODIPY化合物在甲醇中的标准化的吸收和荧光光谱。
图3A)通过连续加入在水中的亚硝酸根离子,氮杂-BODIPY染料的质子化形式的吸收光谱的变化。B)用于计算检测极限的线性图。
图4通过UV-Vis光谱确定在给定溶液中存在的亚硝酸根离子的未知浓度。A)通过加入从2.17μM(0.1ppm)至21.7μM(1ppm)的不同亚硝酸根浓度,氮杂-BODIPY化合物1的吸收光谱。B)吸光度相对于亚硝酸根离子的浓度的相关线性图;获得的未知浓度=15.34μM(Cuk=15.37μM)。C)通过向格里斯试剂(Griess reagent)加入从2.17μM(0.1ppm)至21.7μM(1ppm)的不同亚硝酸根浓度,格里斯反应的吸收光谱。D)吸光度相对于亚硝酸根离子的浓度的相关线性图;获得的未知浓度=15.0μM(Cuk=15.37μM)。
图5显示基于氮杂-BODIPY的亚硝酸根感测物对于各种竞争性阴离子如SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-、N3 -等的选择性的条形图。A)通过绘制由于加入不同阴离子导致的在570nm处的吸光度的降低所得到的选择性图。B)通过绘制由于加入不同阴离子导致的吸收最大值的红移移动所得到的选择性图。
图6浸量尺装置的照片,显示了其在亚硝酸根离子的水溶液[2×10-5M]中的性能;A)涂布在玻璃支撑物上的紫色的氮杂-BODIPY,B)在暴露至氯化氢蒸气之后的浸量尺,颜色上变成强烈的蓝色,C)通过浸入含有亚硝酸根离子的溶液中,浸量尺从强烈的蓝色至亮绿色的颜色变化。
图7提供了流程图,显示了合成策略和亚硝酸根感测。
发明详述
因此,本发明提供了一种新型的式1的氮杂-BODIPY化合物,其可用于选择性检测水性介质中的亚硝酸根离子。
本发明还提供一种用于制备式1的氮杂-BODIPY化合物的方法
所述方法包括:
a)通过在NaOH存在下使4-氨基苯乙酮和3,4-二甲氧基苯甲醛在乙醇-水(1∶1)混合物中反应,制备(E)-1-(4-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(查耳酮),
b)通过在活化的K2CO3存在下使在步骤(a)中获得的查耳酮与硝基甲烷在甲醇中反应,制备1-(4-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-4-硝基丁-1-酮,
c)使在步骤(b)中获得的1-(4-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-4-硝基丁-1-酮与乙酸铵在蒸馏的乙醇中反应以获得反应混合物,在回流下,持续24至36小时的时期,将反应混合物冷却至25℃至35℃的温度,并在减压下去除乙醇溶剂,以获得淡绿色的残余物,将该残余物悬浮在水中,并将它用二氯甲烷萃取,随后用盐水洗涤有机层,将它干燥并浓缩以获得粗产物,随后通过柱色谱法纯化,以获得想要的产物(Z)-5-(4-氨基苯基)-N-(5-(4-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-2H-吡咯-2-亚基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-1H-吡咯-2-胺(二吡咯甲川(dipyrromethene)),
d)在二异丙基乙胺(DIEA)存在下,通过使用无水二氯甲烷作为溶剂,在室温下,使二吡咯甲川与三氟化硼合二乙醚(BF3.OEt2)反应,搅拌15-24小时的时间,用水洗涤上述反应混合物,并将它用二氯甲烷萃取,将它干燥并浓缩,以获得作为紫色固体的粗产物,随后在碱性氧化铝中,使用EtOAc-己烷(1∶1)作为洗脱剂,通过柱色谱法纯化,以得到式1的氨基氮杂-BODIPY。
在本发明的一个实施方案中,在步骤(d)中所用的反应时间优选在15至24小时的范围内。
在本发明的另一个实施方案中,所获得的式1的氮杂-BODIPY化合物的收率为约65%。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物表现出高度强烈的紫色,其具有在750nm处的强NIR吸收。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物表现出在约825nm处的在甲醇中的NIR发射。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物表现出消光系数为4.8x 104M- 1cm-1的强吸收。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物表现出高至280℃的温度的高热稳定性。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物可用于检测溶液形式的NO2 -离子。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物可用于检测溶液中的NO2 -离子,并且具有500nM的检测极限。
在又一个实施方案中,式1的氮杂-BODIPY化合物可用于在其他竞争性阴离子存在下检测NO2 -离子。
本发明还提供了可用于选择性检测水中的亚硝酸根离子的浸量尺装置。
本发明还提供了用于制备浸量尺装置的方法,所述方法包括:
i)将式1的氮杂-BODIPY化合物吸附在陶瓷粉末二氧化硅或氧化铝上;和
ii)将步骤(i)的所述材料沉积或固定在条支撑物的表面上。
在本发明的一个实施方案中,所用的条支撑物由塑料、陶瓷或纸背衬组成。
在又一个实施方案中,浸量尺装置可用于检测溶液中的亚硝酸根离子。
在又一个实施方案中,浸量尺装置可用于测试含有亚硝酸根离子浓度低至2x10-5M的分析样品。
浸量尺在含有亚硝酸根离子的水性样品的现场检测中具有特别的应用,并且检测事件可以在样品所处的位置处进行,并且这不需要任何复杂的技术支持。由式1的氮杂-BODIPY染料组成的浸量尺,当它暴露至HCl蒸气时,其颜色从紫色变至强烈的蓝色。含有亚硝酸根离子的溶液将导致浸量尺的明显颜色变化,即从强烈的蓝色至深绿色,其中强烈的颜色的存在将指示样品中的高亚硝酸根离子水平,并且弱的颜色将指示样品中的低亚硝酸根水平。对于亚硝酸根离子,表面的颜色从亮蓝色变至深绿色。所有其他竞争性阴离子,如SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-、N3 -,将不会对固体表面给予任何颜色变化。所述装置可以以套件(kit)的形式提供。
本化验(assaying)是更简单的,并且不需要复杂的仪器。根据本发明的装置包括热塑性塑料或玻璃支撑物条,其通过测量吸收来测量在水性、临床和分析样品中的亚硝酸根离子的存在,其中为了实现式1的亚硝酸根选择性试料的吸收,将其预先涂布有二氧化硅/氧化铝。
图7提供了流程图,显示了合成策略和亚硝酸根感测。
在本发明中,合成了新型的式1的氮杂-BODIPY化合物。通过将溶解在1N HCl中将氮杂-BODIPY转化为其盐酸盐,将使得此化合物是用于检测水性介质中的亚硝酸根离子的有效感测物。
为了评价在饮用水、生物样品和分析样品中的亚硝酸根离子的量,本发明包括:
1)新型的具有式1的氮杂-BODIPY化合物。
2)称为“浸量尺装置”的实用装置,其中方便地加载试料(式1的化合物)。
3)亚硝酸根离子和试料(式1的化合物)之间的反应发生在浸量尺的表面上,并且可以通过在浸量尺的表面上的颜色的变化对检测发信号(signal)。
固体表面可以是任何固体表面,其包括热塑性塑料、吸收垫、玻璃棒和条形纸等。优选的支撑物是热塑性塑料和玻璃,它们可以由具有很少或不具有在先经验或培训的测试人员便利地使用。这样的测试系统的制备和使用很好地描述在专利和科学文献中。可以参考:(a)美国专利号6406862 B1(b)美国专利号20100284858 A1(c)Y.Takahashi,H.Kasai,H.Nakashini,T.M.Suzuki,Angew.Chem.Int.Ed.,2006,45,913。如果使用棍棒(stick),吸附在二氧化硅/氧化铝上的试料(式1)结合至该棍棒的一端,使得具有在二氧化硅/氧化铝中的试料的该端可以浸入样品溶液中,如对于全部离子的检测所述的。小心地允许试料吸附在二氧化硅/氧化铝上,并且将它涂布在热塑性塑料或玻璃支撑物上。由此制备的装置随时可用,并且可以浸入含有亚硝酸根离子的分析溶液中。可以检测低至2×10-5M和更高的亚硝酸根离子浓度。
我们选择了氮杂-BODIPY化合物作为用于亚硝酸根离子的探针,因为它显示出理想探针的全部有利性质。我们的初步研究表明,式1的氮杂-BODIPY化合物显示在NIR区(λmax=750nm)中的强吸收,具有4.8x 104M-1cm-1的高消光系数值。这些染料在甲醇中表现出在825nm处的荧光发射最大值。式1的氮杂-BODIPY染料在常见有机溶剂中具有良好的溶解性,并且具有更好的光稳定性。氮杂-BODIPY在稀酸中的质子化形式显示在区域570nm中的宽的蓝移吸收,具有强烈的蓝色。质子化物种的蓝色在亚硝酸根离子存在下变成绿色,从而所述化合物可以用作有效的亚硝酸根感测物。颜色变化是由于在质子化的氮杂-BODIPY和存在于水中的亚硝酸根离子之间的重氮化反应所致。通过反应形成的重氮盐经历在水性介质中的水解,从而得到在所述介质中沉淀的绿色的羟基取代产物。
实施例
以下实施例通过举例说明的方式给出,并且因此不应被解释为限制本发明的范围。
材料和方法
在随后的实施例中,使用以下材料和方法:
1.将热塑性塑料或玻璃支撑物切成具有10cm长度和4mm半径的小单元。取决于待分析的样品的性质,这可以以可变的长度制备。
2.将10mg的试料1(式1)溶解在15ml二氯甲烷中。向此溶液中加入2g的精细粉末化的氧化铝,并且花费10分钟使溶剂蒸发掉。含有精细粉末化的二氧化硅/氧化铝的试料在颜色上是紫色的。将精细粉末化的二氧化硅/氧化铝结合在棍棒上,直至从该棍棒的底部起5cm(图6A)。在HCl蒸气暴露后,浸量尺的颜色将变成强烈的蓝色,并且这可以用于亚硝酸根检测技术。在颜色上由蓝色至暗绿色的变化是亚硝酸根离子存在的指示。棍棒表面上的颜色变化可以在视觉上分级,或者可以拍摄照片用于永久记录。
实施例1代表通式1的氮杂-BODIPY染料的典型合成,而实施例2代表用来制作用于亚硝酸根检测的浸量尺装置的方法。
实施例3和4代表选择性研究以及亚硝酸根离子的定量。
实施例1
通式1的氮杂-BODIPY化合物的制备
步骤1
向NaOH的醇水溶液中,加入4-氨基苯乙酮,并且搅拌10min。向此搅拌过的溶液中滴加3,4-二甲氧基苯甲醛,并且将反应混合物在室温(25℃)搅拌6h。将沉淀的产物在真空下过滤,用冰冷水洗涤,并且干燥,得到作为黄色固体的查耳酮(90-95%)。Mp 120-122℃,IR(KBr)vmax 3352.28,1651.07,1600.92cm-1。1H-NMR(CDCl3,500MHz)δ7.941(2H,d,J=8.5Hz),7.755(1H,d,15.5Hz),7.423(1H,d,J=15.5Hz),7.231(1H,dd),7.157(1H,s),6.901(1H,d,J=8.5Hz),6.712(2H,d,J=8.5Hz),4.168(2H,s),3.918(6H,s)。13C NMR(CDCl3,125MHz)δ188.2,151.0,149.2,143.3,131.0,122.8,120.1,113.9,111.2,110.26,56.02;FAB-MS m/z对C18H18INO5的计算值283.12,测量值283.52。
步骤2
将查耳酮(5.76mmol)的溶液溶解在80mL的甲醇中,向其中加入活化的K2CO3和硝基甲烷(2mL),并且回流24小时。混合物用水洗涤,并且用氯仿萃取。去除溶剂,得到残余物,将其通过柱色谱法经硅胶分离。用乙酸乙酯和己烷的混合物(2∶8)的柱洗脱,以良好的收率得到产物(硝基甲烷加合物)。85%,Mp 138-140℃,IR(KBr)vmax 3400.50,1658.78,1598.99cm-1;1H-NMR(CDCl3,500MHz)δ7.778(2H,d,J=8.5Hz),6.807(2H,s),6.771(1H,s),6.634(2H,d,J=8.5Hz),4.838(1H,q),4.650(1H,q),4.180(2H,s),4.156(1H,t),3.862(3H,s),3.841(3H,s),3.363(2H,m);13C NMR(CDCl3,125MHz)δ194.9,151.6,149.3,148.6,132.4,130.6,127.0,119.3,113.8,111.7,111.2,79.9,56.1,41.1,39.4;FAB-MS m/z对C18H18INO5的计算值344.14,测量值344.75。
步骤3
将硝基甲烷加合物(2.45mmol)和乙酸铵(7.6g,95mmol)溶解在乙醇(20mL)中,并在回流下加热48h。将沉淀的产物过滤,用冷乙醇洗涤,干燥并从氯仿再结晶,得到作为具有金属光泽的淡绿色晶体的氮杂二吡咯甲川。40%,Mp 170-172℃;IR(KBr)vmax 3361.93,1600.92,1506.41cm-1;1H-NMR(CDCl3,300MHz)δ7.79(4H,d,J=8Hz),7.61(2H,d,J=8Hz),7.53(2H,s),6.99(2H,s),6.92(2H,d,J=8Hz),6.81(4H,d,J=8.5Hz),4.06(4H,s),3.93(6H,s),3.74(6H,s);13C NMR(CDCl3,75MHz)δ153.9,149.2,148.9,148.8,148.3,127.5,121.8,115.2,113.2,112.4,111.0,56.0,55.8;FAB-MS m/z对C36H31N3O4的计算值599.23,测量值599.26。
步骤4
将溶解在无水二氯甲烷(80mL)中的氮杂二吡咯甲川(0.45mmol)用DIEA(二异丙基乙胺)(0.8mL,4.6mmol)处理并在30℃搅拌10min。向此反应混合物中,加入三氟化硼合二乙醚(1mL,8.13mmol)并在室温(25℃)下搅拌10h。蒸发溶剂,用水洗涤(2×50mL),并用氯仿萃取。去除溶剂,得到残余物,通过柱色谱法经碱性氧化铝分离该残余物。用混合物(1∶1)乙酸乙酯和己烷的柱洗脱得到作为紫色固体的式1的氮杂-BODIPY。75%,Mp 192-194℃;IR(KBr)vmax 3360.00,1600.92,1498.69cm-1;1H-NMR(CDCl3,500MHz)δ8.00(4H,d,J=8.5Hz),7.64(2H,dd,J=8Hz),7.55(2H,d,J=2Hz),6.94(4H,d,J=6.5Hz),6.75(4H,d,J=8.5Hz),4.09(4H,s),3.95(6H,s),3.81(6H,s);13C NMR(CDCl3,125MHz)δ156.3,154.2,150.8,149.2,137.1,136.9,130.9,130.8,130.3,129.5,125.7,122.9,122.8,117.6,112.2,111.2,56.1,55.9;FAB-MS m/z对C36H30BF2N3O4的计算值647.25,测量值647.46。
实施例2
用于亚硝酸根离子的现场分析的浸量尺的制备
将10mg的化合物1(式1)溶解在15ml二氯甲烷中,向此溶液中,加入2gm的精细粉末化的氧化铝,并且花费10分钟蒸发掉溶剂。含有精细粉末化的二氧化硅/氧化铝的试料在颜色上是紫色的。将精细粉末化的二氧化硅/氧化铝结合在棍上,直至从棍的底部起5cm(图6A)。在HCl蒸气暴露后,浸量尺的颜色将变成强烈的蓝色(图6B),并且这可以用于亚硝酸根检测技术。在颜色上由蓝色至暗绿色的变化是亚硝酸根离子存在的指示(图6C)。棍的表面上的颜色变化可以在视觉上分级,或者可以拍摄照片用于永久记录。
将热塑性塑料或玻璃支撑物切成10cm长并具有4mm半径。将含有二氧化硅/氧化铝的试料小心地固定在支撑物的表面上,并且所述浸量尺随时可用。将棍暴露至HCl气体,随后浸入含有亚硝酸根离子的放在烧杯中的溶液(2×10-5M)中。无论分析物将在哪里接触所述棍,都将观察到从深蓝色至强烈的绿色的颜色变化,这表明亚硝酸根离子的存在。
实施例3
具有竞争性阴离子的选择性研究
制备式1的氮杂-BODIPY化合物在1N HCl中的储备溶液(2μM),并且制备不同竞争性阴离子如SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-、N3 -和NO2 -离子在水中的溶液。我们已经通过逐渐将在水中的各种阴离子加入至式1的氮杂-BODIPY,进行了滴定实验。仅仅亚硝酸根离子对式1的氮杂-BODIPY化合物的质子化形式诱导70%的减色度(hypochromicity)和60nm的红移移动(图3),而其他竞争性阴离子在吸收上也显示可忽略的变化,即使与亚硝酸根离子相比在100倍更高浓度下(图5)。例如,向试料溶液中加入硝酸根在吸收光谱中不造成任何明显变化,并且对溶液颜色也不造成任何明显变化。
实施例4
水中的亚硝酸根离子的定量
为了研究式1的氮杂-BODIPY化合物在确定亚硝酸根浓度方面的潜力,将探针用各种浓度(0至2ppm)的亚硝酸根离子处理。探针1的最终浓度保持在0.1ppm,而亚硝酸根离子的浓度从0至2ppm变化。亚硝酸根离子浓度相对于在570nm的吸光度遵循线性。未知样品的吸光度与该直线相交的点将给出在样品溶液中存在的亚硝酸根离子的量(图4)。我们将式1的氮杂-BODIPY的效力与商用变型格里斯试剂以类似方式进行比较,并且我们观察到,式1的氮杂-BODIPY化合物在亚硝酸根离子的定量方面给出精确的结果。式1的氮杂-BODIPY化合物可以以500nm(5×10-7M)的检测极限(LOD)检测到水中的亚硝酸根离子,而在浸量尺策略的情况下,LOD为20μM(2×10-5M)。
优点
用于本发明的氮杂-BODIPY染料具有理想感测物的令人满意的性质,并且可以用作简单、有效并且经济的用于亚硝酸根离子的感测物。本发明的主要优点是:
1.式1的氮杂-BODIPY化合物是新型的单一分子。
2.用于制备式1的氮杂-BODIPY染料的合成方法是商业上可行的。
3.式1的氮杂-BODIPY化合物具有在近红外区(500-750nm)中的吸收。
4.式1的氮杂-BODIPY化合物具有在近红外区(750-850nm)中的荧光发射。
5.式1的氮杂-BODIPY化合物显示高至280℃的热稳定性。
6.式1的氮杂-BODIPY化合物可以用于检测水性介质中的亚硝酸根离子。
7.式1的氮杂-BODIPY化合物在水性介质中的亚硝酸根离子的检测中显示500nM(5x 10-7M)的检测极限(LOD)。
8.在其他重要的竞争性离子如SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-、N3 -等中,具有式1的试料对亚硝酸根离子显示优异的选择性。
9.氮杂-BODIPY化合物可以用来通过光谱技术如UV-分光光度计对亚硝酸根离子的量进行定量。
10.除此之外,具有式1的化合物可以通过将在二氧化硅/氧化铝中的试料涂布在热塑性塑料或玻璃固体支撑物上,而更便利地用作装置,其可以用作浸量尺。
11.本发明使得本装置的制作如此适合,使得它可以非常容易地被处理和使用,并且不需要任何专门的或复杂的仪器。
12.使用该浸量尺技术可以检测2x 10-5M的最低浓度。
Claims (20)
1.一种式1的氮杂-BODIPY化合物及其盐,其可用于选择性检测溶液中的亚硝酸根离子,
2.根据权利要求1所述的式1的化合物用于选择性检测在水性介质中的亚硝酸根离子的用途。
3.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物表现出高至280℃的温度的高热稳定性。
4.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物表现出高度强烈的紫色,在600-850nm范围内具有强NIR吸收,并且具有在750nm处的吸收最大值。
5.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物表现出在700-900nm范围内的在甲醇中的NIR发射,并且具有在约825nm处的发射最大值。
6.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物表现出消光系数为4.8±0.2x104M-1cm-1的强吸收。
7.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物能够通过加入稀酸而被质子化。
8.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物能够通过加入稀HCl而被质子化。
9.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物的质子化形式具有强烈的蓝色,在500-800nm范围内具有宽的吸收带,并且最大值为570nm。
10.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物的质子化形式可用于在溶液形式的选自由SO4 2-、Cl-、HSO3 -、CO3 2-、CH3COO-、NO3 -、S2O3 2-和N3 -组成的组中的其他阴离子存在下检测NO2 -离子。
11.根据权利要求2所述的用途,其中所述化合物表现出在水性介质中的500nM的检测极限。
12.一种用于制备根据权利要求1所述的式1的氮杂-BODIPY化合物的方法,所述方法包括:
a)将4-氨基苯乙酮加入至NaOH的溶液并且搅拌10分钟,以获得反应混合物;
b)将3,4-二甲氧基苯甲醛滴加至所述反应混合物并且搅拌6小时,以获得沉淀物;
c)将所述沉淀物过滤并且用水洗涤,以获得查耳酮;
d)在活化的K2CO3存在下使所述查耳酮在甲醇中与硝基甲烷反应并且回流24小时的时间,以获得混合物;
e)将所述混合物用水洗涤并且用氯仿萃取;
f)从步骤(e)的所述混合物去除溶剂以获得残余物并且将所述残余物通过柱色谱法分离,以获得硝基甲烷加合物;
g)使所述硝基甲烷加合物与乙酸铵在乙醇中反应,并且在回流下加热48小时的时间段,以获得产物;
h)将所述产物过滤并用乙醇洗涤、干燥并从氯仿再结晶,以获得具有金属光泽的淡绿色晶体的氮杂二吡咯甲川;
i)在二异丙基乙胺(DIEA)存在下使所述氮杂二吡咯甲川在无水二氯甲烷中与三氟化硼合二乙醚反应,并且在25℃的温度搅拌15小时的时间;
j)将所述溶剂蒸发以获得残余物,并且将所述残余物用水洗涤,随后用氯仿萃取;和
k)将所述洗涤后的残余物通过柱色谱法分离,以获得紫色固体的氮杂-BODIPY化合物。
13.一种使用根据权利要求1所述的式1的化合物的用于选择性检测水中的NO2 -离子的浸量尺装置,其中所述装置包括固定在选自由塑料、玻璃和纸背衬的支撑物的表面上的所述式1的化合物。
14.一种用于制备根据权利要求13所述的浸量尺装置的方法,所述方法包括以下步骤:
a.将式1的化合物溶解在二氯甲烷中,以获得混合物;
b.将精细粉末化的二氧化硅或氧化铝加入至在步骤(a)中获得的所述混合物,并且在留置10分钟之后允许所述二氯甲烷蒸发,以获得试料;和
c.将在步骤(b)中获得的所述试料固定在支撑物的表面上,以获得所述浸量尺装置。
15.根据权利要求14所述的方法,其中所述支撑物由选自由热塑性材料、吸收垫、玻璃棒和条形纸组成的组中的塑料、玻璃或纸背衬制成。
16.一种用于选择性检测样品中的NO2 -离子的方法,所述方法包括:
将根据权利要求13的浸量尺装置暴露至HCl气体,随后将所述浸量尺装置浸入样品中,
其中所述浸量尺装置的从深蓝色至强烈绿色的颜色变化表明NO2 -离子的存在。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述样品是水性样品。
18.根据权利要求16所述的方法,其中所述样品是临床样品。
19.根据权利要求16所述的方法,其中所述样品是分析样品。
20.根据权利要求13所述的浸量尺装置用于检测浓度为低至2.0±0.5x10-5M的在分析样品中的亚硝酸根离子的用途。
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