RU2810102C1 - Способ получения ксеногенного биоматериала из аорты северного оленя - Google Patents
Способ получения ксеногенного биоматериала из аорты северного оленя Download PDFInfo
- Publication number
- RU2810102C1 RU2810102C1 RU2023100457A RU2023100457A RU2810102C1 RU 2810102 C1 RU2810102 C1 RU 2810102C1 RU 2023100457 A RU2023100457 A RU 2023100457A RU 2023100457 A RU2023100457 A RU 2023100457A RU 2810102 C1 RU2810102 C1 RU 2810102C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rpm
- washing
- biomaterial
- reindeer
- hours
- Prior art date
Links
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 title claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 18
- 241000282941 Rangifer tarandus Species 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 241000283011 Rangifer Species 0.000 claims abstract description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract 4
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 claims abstract 3
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 claims abstract 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- YRQNKMKHABXEJZ-UVQQGXFZSA-N chembl176323 Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@@]3(C)CC(N=C4C[C@]5(C)CCC6[C@]7(C)CC[C@@H]([C@]7(CC[C@]6(C)[C@@]5(C)CC4=N4)C)CCCCCCCC)=C4C[C@]3(C)CCC2[C@]2(C)CC[C@H](CCCCCCCC)[C@]21C YRQNKMKHABXEJZ-UVQQGXFZSA-N 0.000 claims 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 abstract description 8
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 abstract description 8
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 abstract description 8
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 abstract description 3
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 abstract description 3
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 abstract description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000481 chemical toxicant Toxicity 0.000 description 1
- 231100000045 chemical toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения ксеногенного биоматериала, заключающемуся в обработке аорты северного оленя путем промывки, фрагментации, мембранолиза клеток, элиминации гликозамингликанов, стерилизации. Способ получения ксеногенного биоматериала, заключающийся в обработке аорты северного оленя путем промывки, фрагментации, мембранолиза клеток, элиминации гликозамингликанов, стерилизации, отличающийся тем, что аорту северного оленя обрабатывают в 2 этапа водными растворами этилового спирта в концентрации 70% и 96%, соответственно, объем водного раствора этилового спирта должен составлять 10 объемов фрагмента аорты, при температуре 37°С в течение 4 часов с промывкой материала в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, проводят ферментативный гидролиз в шейкер-инкубаторе при температуре 37°С и 250 об/мин в течение 2 часов с применением 1% раствора коллагеназы II типа с активностью 230 ед/мг с дальнейшей трехкратной промывкой материала путем центрифугирования в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, обрабатывают 20% раствором додецилсульфата натрия в шейкер-инкубаторе при температуре 37°С и 250 об/мин в течение 20 часов, проводят пятикратную промывку материала центрифугированием в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, стерилизуют ионизирующим излучением и помещают в стеклянные емкости с консервантом. Вышеуказанное изобретение позволяет ускорить процесс получения биоматериала с минимальной антигенной активностью на основе эластина без использования токсичных реактивов.
Description
Изобретение относится к области медицины, а точнее к созданию нового ксеногенного биоматериала, применимого в качестве тканевого трансплантата для регенеративной хирургии.
Решаемая задача заключается в создании нового биоматериала на основе эластина аорты северного оленя, используемого в регенеративной хирургии и обладающего предельно низкими антигенными свойствами.
Известен способ выделения эластина из выйной связки животных [1], относящийся к области пищевой промышленности, в качестве дополнительного источника аминокислот и добавки, влияющей на консистенцию продукта, заключающийся в том, что сырье очищают от жира и других тканей, мелко нарезают, измельчают на мясорубке и заливают ацетоном, повторяя до тех пор, пока не исчезнет мутность, затем обрабатывают эфиром. Недостатками данного способа являются: потеря физико-механических свойств материала, полная растворимость в водном растворе, использование токсичных веществ при обработке материала.
Также известен способ получения эластина для нужд ветеринарии, зоотехники и косметической промышленности, заключающийся в том, что выйную связку животных измельчают, проводят термохимическую обработку в щелочной среде, кислотную обработку, перерастворение. Явными недостатками метода являются: химическая токсичность материала для использования в медицине, длительный процесс обработки, занимающий 3-5 суток, использование токсичных химических веществ [2].
Прототипом заявленного изобретения является способ получения ксеногенного биоматериала для регенеративной хирургии [3], в котором раскрывается способ получения ксеногенного биоматериала из выйной связки животных, заключающийся в освобождении сырья от жировой клетчатки и мышечной ткани, последовательной обработке анионными и катионными детергентами с целью мембранолиза клеток. Одновременно при осуществлении способа выполняют контроль за разблокированием связей протеогликанов и гликопротеинов в пучках коллагеновых волокон, элиминацией гликозаминогликанов. Контроль проводят гистохимическим методом. По достижении 80-90%-ного разблокирования связи протеогликанов и гликопротеинов, и не более 50%-ной элиминации гликозаминогликанов обработку прекращают. Биоматериал отмывают от реагентов, фасуют в стеклянные флаконы, заливают консервантом и проводят радиационную стерилизацию с использованием ускорителя электронов. Полученный материал подвергают бактериологическому и хирургическому контролю.
Задача предлагаемого изобретения: получение доступного биоматериала на основе эластина из возобновляемых биоресурсов для регенеративной хирургии. Технический результат предлагаемого изобретения: ускорение процесса получения биоматериала с минимальной антигенной активностью на основе эластина без использования токсичных реактивов.
Указанная задача в предлагаемом способе достигается тем, что предложенный материал обрабатывают водными растворами этилового спирта в два этапа, на первом этапе обрабатывают 70% этиловым спиртом в течение 4 часов в термостате при температуре 37°С, на втором этапе обрабатывают 96% этиловым спиртом в течение 4 часов в термостате при температуре 37°С, после каждого этапа материал промывают в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин, после второй промывки проводят ферментативный гидролиз материала коллагеназой II типа с активностью 230 ед/мг в шейкер-инкубаторе в течение 2 часов при температуре 37°С и 250 об/мин, затем проводят промывку в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин, промывку повторяют три раза, затем материал помещают в раствор детергента (20% додецилсульфат натрия) и выдерживают в шейкер-инкубаторе в течение 20 часов при температуре 37°С и 250 об/мин, затем проводят промывку в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин, промывку повторяют 5 раз, полученный материал подвергают стерилизации ионизирующим излучением и фасуют в стеклянные емкости, наполненные консервантом.
Указанный способ осуществляется следующим образом. Материал (аорту северного оленя, очищенную от крови и сгустков), разрезают на фрагменты требуемого размера, обрабатывают водными растворами этилового спирта в 2 этапа: 1 этап - обработка 70% этиловым спиртом в течение 4 часов в термостате при температуре 37°С, объем водного раствора этилового спирта должен составлять 10 объемов фрагмента материала, таким образом, биоматериал в емкости должен быть полностью погружен в раствор спирта; 2 этап - обработка 96% этиловым спиртом в течение 4 часов в термостате при температуре 37°С, объем водного раствора этилового спирта должен составлять 10 объемов фрагмента материала, таким образом, биоматериал в емкости должен быть полностью погружен в раствор спирта. После каждого этапа материал промывают в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин. После промывки промывные воды сливают и проводят ферментативный гидролиз материала 1% раствором коллагеназы II типа с ферментативной активностью 230 ед/мг. Емкость помещают в шейкер-инкубатор на 2 часа при температуре 37°С и 250 об/мин. После этого проводят промывку материала в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин 3 раза. Затем материал помещают в 20% раствор додецилсульфата натрия, выдерживают в шейкер-инкубаторе в течение 20 часов при температуре 37°С и 250 об/мин. После этого проводят промывку в дистиллированной воде в центрифуге при 3400 об/мин в течение 5 мин, цикл промывки повторяют 5 раз. Полученный материал подвергают стерилизации ионизирующим излучением, фасуют в стеклянные емкости, наполненные консервантом.
Способ позволяет получить доступный биоматериал на основе эластина из возобновляемых биоресурсов для регенеративной хирургии. Заявленный способ позволяет ускорить процесс получения биоматериала с минимальной антигенной активностью на основе эластина без использования токсичных реактивов.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Битуева Э.Б. Жамсаранова С.Д. Способ получения сухого гидролизата. Патент №2245078, заявка 2003123478/13, 23.07.2003.
2. Сапожникова А.И., Каспаръянц С.А., Месропова Н.В., Гордиенко Н.М. Способ получения эластина. Патент №2092071, заявка 95117244/13, 06.10.1995.
3. Мулдашев Э.Р., Нигматуллин Р.Т., Галимова В.У. и др. Ксеногенный биоматериал для регенеративной хирургии. Патент №2440148, заявка 2009147644/15, 21.12.2009.
Claims (1)
- Способ получения ксеногенного биоматериала, заключающийся в обработке аорты северного оленя путем промывки, фрагментации, мембранолиза клеток, элиминации гликозамингликанов, стерилизации, отличающийся тем, что аорту северного оленя обрабатывают в 2 этапа водными растворами этилового спирта в концентрации 70% и 96%, соответственно, объем водного раствора этилового спирта составляет 10 объемов фрагмента аорты, при температуре 37°С в течение 4 часов с промывкой материала в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, проводят ферментативный гидролиз в шейкер-инкубаторе при температуре 37°С и 250 об/мин в течение 2 часов с применением 1% раствора коллагеназы II типа с активностью 230 ед/мг с дальнейшей трехкратной промывкой материала путем центрифугирования в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, обрабатывают 20% раствором додецилсульфата натрия в шейкер-инкубаторе при температуре 37°С и 250 об/мин в течение 20 часов, проводят пятикратную промывку материала центрифугированием в дистиллированной воде при 3400 об/мин в течение 5 минут, стерилизуют ионизирующим излучением и помещают в стеклянные емкости с консервантом.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2810102C1 true RU2810102C1 (ru) | 2023-12-21 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2092071C1 (ru) * | 1995-10-06 | 1997-10-10 | Алла Ионовна Сапожникова | Способ получения эластина |
| RU2245078C1 (ru) * | 2003-07-23 | 2005-01-27 | Восточно-Сибирский государственный технологический университет | Способ получения сухого гидролизата эластина |
| EA200701377A1 (ru) * | 2004-12-24 | 2008-02-28 | Селксел Пти Лтд. | Имплантируемый биоматериал и способ его получения |
| RU2440148C2 (ru) * | 2009-12-21 | 2012-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Всероссийский центр глазной и пластической хирургии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Ксеногенный биоматериал для регенеративной хирургии |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2092071C1 (ru) * | 1995-10-06 | 1997-10-10 | Алла Ионовна Сапожникова | Способ получения эластина |
| RU2245078C1 (ru) * | 2003-07-23 | 2005-01-27 | Восточно-Сибирский государственный технологический университет | Способ получения сухого гидролизата эластина |
| EA200701377A1 (ru) * | 2004-12-24 | 2008-02-28 | Селксел Пти Лтд. | Имплантируемый биоматериал и способ его получения |
| RU2440148C2 (ru) * | 2009-12-21 | 2012-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Всероссийский центр глазной и пластической хирургии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Ксеногенный биоматериал для регенеративной хирургии |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10549010B2 (en) | Lipid-free scaffolds for human volume replacement or cell culture and use thereof | |
| US20220160937A1 (en) | Rapid allograft treatment systems and methods | |
| CN106701879A (zh) | 一种提取i型胶原蛋白的方法 | |
| JP2018523467A (ja) | 高純度コラーゲン粒子の製造及びその使用 | |
| CN108355172A (zh) | 一种软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质及其制备方法和应用 | |
| CN105524965A (zh) | 一种牛肌腱胶原蛋白的提取方法 | |
| CN110732042A (zh) | 一种皮肤生物材料 | |
| RU2810102C1 (ru) | Способ получения ксеногенного биоматериала из аорты северного оленя | |
| EP2236544A1 (en) | Collagen Implant | |
| RU2691983C1 (ru) | Способ очистки, модификации и стерилизации производных костной ткани и кожного матрикса с использованием сверхкритического флюида | |
| CN114796615B (zh) | 一种软骨脱细胞基质及其制备方法 | |
| CN115246879A (zh) | 一种制备特定分子量范围动物源细胞外基质提取物的方法 | |
| CN101307093B (zh) | 从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法 | |
| RU2686309C1 (ru) | Способ изготовления остеопластического материала из костной ткани | |
| KR101579233B1 (ko) | 면역성이 제거된 생체지방소재 및 이의 제조방법 | |
| US11499148B2 (en) | Fatty material from which immunity is removed and method for manufacturing same | |
| RU2304441C1 (ru) | Способ получения сульфатированных гликозаминогликанов из биологических тканей | |
| RU2782928C1 (ru) | Способ приготовления коллагенового порошка медицинского назначения из кожи животных | |
| EP3852822B1 (en) | Process for the treatment of connective tissues of a mammal | |
| RU2762550C1 (ru) | Способ получения высокомолекулярного коллагена | |
| CN117045865B (zh) | 一种戊二醛交联的生物材料中残留戊二醛脱除方法 | |
| CN102188745B (zh) | 抽取海狸鼠尾筋制作医用缝合线的制备方法 | |
| RU2619870C1 (ru) | Способ получения биологически активных имплантатов | |
| CN112957533A (zh) | 一种仿皮质骨修复材料的制备方法 | |
| Kıyak et al. | Advanced technologies for the collagen extraction from food waste–A review on recent progress |