RU2809188C2 - Аминонорборнановое производное и способ его получения, а также его применение - Google Patents
Аминонорборнановое производное и способ его получения, а также его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2809188C2 RU2809188C2 RU2021110593A RU2021110593A RU2809188C2 RU 2809188 C2 RU2809188 C2 RU 2809188C2 RU 2021110593 A RU2021110593 A RU 2021110593A RU 2021110593 A RU2021110593 A RU 2021110593A RU 2809188 C2 RU2809188 C2 RU 2809188C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mmol
- compound
- mixture
- ring
- solution
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 15
- MDFWXZBEVCOVIO-UHFFFAOYSA-N 4,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-3-amine Chemical class C1CC2(C)C(N)CC1C2(C)C MDFWXZBEVCOVIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 209
- 108010029445 Agammaglobulinaemia Tyrosine Kinase Proteins 0.000 claims abstract description 52
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 33
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 16
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 238000011161 development Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 10
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- -1 compound V hydrochloride Chemical class 0.000 claims description 58
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 10
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 claims description 8
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N boronic acid Chemical compound OBO ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 6
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 6
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 5
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 5
- FCSKOFQQCWLGMV-UHFFFAOYSA-N 5-{5-[2-chloro-4-(4,5-dihydro-1,3-oxazol-2-yl)phenoxy]pentyl}-3-methylisoxazole Chemical compound O1N=C(C)C=C1CCCCCOC1=CC=C(C=2OCCN=2)C=C1Cl FCSKOFQQCWLGMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N Compound IV Chemical compound O1N=C(C)C=C1CCCCCCCOC1=CC=C(C=2OCCN=2)C=C1 FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 206010052178 Lymphocytic lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 238000006069 Suzuki reaction reaction Methods 0.000 claims description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 4
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 102000001714 Agammaglobulinaemia Tyrosine Kinase Human genes 0.000 claims 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 142
- 102100029823 Tyrosine-protein kinase BTK Human genes 0.000 abstract description 51
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- VUFQYRAKSQTZEB-UHFFFAOYSA-N bicyclo[2.2.1]heptan-4-amine Chemical class C1CC2CCC1(N)C2 VUFQYRAKSQTZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 291
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 141
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 106
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 93
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 85
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 81
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 80
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 77
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 74
- 239000000047 product Substances 0.000 description 61
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 53
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 49
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 47
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 42
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 37
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 28
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 28
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 28
- XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N ibrutinib Chemical compound C1=2C(N)=NC=NC=2N([C@H]2CN(CCC2)C(=O)C=C)N=C1C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N 0.000 description 21
- 239000002177 L01XE27 - Ibrutinib Substances 0.000 description 19
- 229960001507 ibrutinib Drugs 0.000 description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 17
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 16
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 125000006272 (C3-C7) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- KPGPCQJRUAHIAN-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2I)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O KPGPCQJRUAHIAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- ZBSHLSVNDUWEGB-UHFFFAOYSA-N benzyl N-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)carbamate Chemical compound NC12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O ZBSHLSVNDUWEGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 7
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 7
- QBVDBRNHQFCTEA-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-2-methoxy-N-[[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)phenyl]methyl]benzamide Chemical compound CC1(OB(OC1(C)C)C1=CC=C(CNC(C2=C(C=CC(=C2)F)OC)=O)C=C1)C QBVDBRNHQFCTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940124291 BTK inhibitor Drugs 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 6
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 6
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- VIWZVFVJPXTXPA-UHFFFAOYSA-N N-(2-Carboxymethyl)-morpholine Chemical compound OC(=O)CN1CCOCC1 VIWZVFVJPXTXPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 5
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- QSIYAOXAXAQUPE-UHFFFAOYSA-N methyl 4-(phenylmethoxycarbonylamino)bicyclo[2.2.1]heptane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(C(=O)OC)(C2)CCC12NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 QSIYAOXAXAQUPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- 125000006583 (C1-C3) haloalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- KOFLVDBWRHFSAB-UHFFFAOYSA-N 1,2,4,5-tetrahydro-1-(phenylmethyl)-5,9b(1',2')-benzeno-9bh-benz(g)indol-3(3ah)-one Chemical compound C1C(C=2C3=CC=CC=2)C2=CC=CC=C2C23C1C(=O)CN2CC1=CC=CC=C1 KOFLVDBWRHFSAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWLBGMIXKSTLSX-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisobutyric acid Chemical compound CC(C)(O)C(O)=O BWLBGMIXKSTLSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HTNUUDFQRYBJPH-UHFFFAOYSA-N 3-methoxypropanehydrazide Chemical compound COCCC(=O)NN HTNUUDFQRYBJPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PMPZEEUNGQSAIQ-UHFFFAOYSA-N 3-methyloxetane-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(C)COC1 PMPZEEUNGQSAIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JDWISDBZCDPLBU-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-2-methoxy-N-[[4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)phenyl]methyl]benzamide Chemical compound CC1(OB(OC1(C)C)C1=CC=C(CNC(C2=C(C=C(C=C2)F)OC)=O)C=C1)C JDWISDBZCDPLBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 4
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MNJGCBKNSRJONZ-UHFFFAOYSA-N FC1=C(C=CC(=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)OB(O)O Chemical compound FC1=C(C=CC(=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)OB(O)O MNJGCBKNSRJONZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ILUJQPXNXACGAN-UHFFFAOYSA-N O-methylsalicylic acid Chemical compound COC1=CC=CC=C1C(O)=O ILUJQPXNXACGAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- RYKMZMAGLAOZGL-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(8-chloroimidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound ClC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O RYKMZMAGLAOZGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 4
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- XRNVSPDQTPVECU-UHFFFAOYSA-N (4-bromophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=C(Br)C=C1 XRNVSPDQTPVECU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZPYGQFFRCFCPP-UHFFFAOYSA-N 1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene Chemical compound [Fe+2].C1=CC=C[C-]1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=C[C-]1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KZPYGQFFRCFCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RWGBXAQMUBGGKQ-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)pyridin-2-amine Chemical compound NC1=CC(C(F)(F)F)=CC=N1 RWGBXAQMUBGGKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEUQPFNDPPPKPJ-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-n-pyridin-2-ylbenzamide Chemical compound C1=CC(Br)=CC=C1C(=O)NC1=CC=CC=N1 WEUQPFNDPPPKPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 3
- 101150003085 Pdcl gene Proteins 0.000 description 3
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- BFQWQKOPPQDARN-UHFFFAOYSA-N n-pyridin-2-yl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzamide Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CC=C(C(=O)NC=2N=CC=CC=2)C=C1 BFQWQKOPPQDARN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DQXKOHDUMJLXKH-PHEQNACWSA-N (e)-n-[2-[2-[[(e)-oct-2-enoyl]amino]ethyldisulfanyl]ethyl]oct-2-enamide Chemical compound CCCCC\C=C\C(=O)NCCSSCCNC(=O)\C=C\CCCCC DQXKOHDUMJLXKH-PHEQNACWSA-N 0.000 description 2
- ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 2-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=CC=N1 ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OESWRQLCODGCAP-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-n-pyridin-2-yl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzamide Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C(C=C1F)=CC=C1C(=O)NC1=CC=CC=N1 OESWRQLCODGCAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMNDYUVBFMFKNZ-UHFFFAOYSA-N 2-furoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CO1 SMNDYUVBFMFKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YFIVNTSORJFXHM-UHFFFAOYSA-N 4-(phenylmethoxycarbonylamino)bicyclo[2.2.1]heptane-1-carboxylic acid Chemical compound C1CC(C(=O)O)(C2)CCC12NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 YFIVNTSORJFXHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMUVFGHNKQXHNO-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2-fluoro-n-pyridin-2-ylbenzamide Chemical compound FC1=CC(Br)=CC=C1C(=O)NC1=CC=CC=N1 PMUVFGHNKQXHNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RMYOGXPGIDWJLU-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-3-fluorobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(Br)C(F)=C1 RMYOGXPGIDWJLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KVIKABYOBCHKNX-UHFFFAOYSA-N 4-methoxycarbonylbicyclo[2.2.1]heptane-1-carboxylic acid Chemical compound C1CC2(C(O)=O)CCC1(C(=O)OC)C2 KVIKABYOBCHKNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- RMEMAPXYBOLJAM-UHFFFAOYSA-N C1(=CC=CC=C1OC)C(=O)NCC1=CC=C(B2OC(C(O2)(C)C)(C)C)C=C1 Chemical compound C1(=CC=CC=C1OC)C(=O)NCC1=CC=C(B2OC(C(O2)(C)C)(C)C)C=C1 RMEMAPXYBOLJAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- YLBPDHZRDAOTDN-UHFFFAOYSA-N N-[(4-bromophenyl)methyl]-2-methoxybenzamide Chemical compound COC1=CC=CC=C1C(=O)NCC1=CC=C(Br)C=C1 YLBPDHZRDAOTDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Substances CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 229950009821 acalabrutinib Drugs 0.000 description 2
- WDENQIQQYWYTPO-IBGZPJMESA-N acalabrutinib Chemical compound CC#CC(=O)N1CCC[C@H]1C1=NC(C=2C=CC(=CC=2)C(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C2N1C=CN=C2N WDENQIQQYWYTPO-IBGZPJMESA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000001142 back Anatomy 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RLUDWNFVDFAWDD-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(4-chloro-5-iodopyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)N2C=C(C1=C2N=CN=C1Cl)I)=O RLUDWNFVDFAWDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- IPWKHHSGDUIRAH-UHFFFAOYSA-N bis(pinacolato)diboron Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 IPWKHHSGDUIRAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- MLIREBYILWEBDM-UHFFFAOYSA-N cyanoacetic acid Chemical compound OC(=O)CC#N MLIREBYILWEBDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- BJGJNDGITZHSEK-UHFFFAOYSA-N n-(4-fluoropyridin-2-yl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzamide Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CC=C(C(=O)NC=2N=CC=C(F)C=2)C=C1 BJGJNDGITZHSEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- YYVVOYJKQZWKFS-UHFFFAOYSA-N (3-chloropyrazin-2-yl)methanamine;hydrochloride Chemical compound Cl.NCC1=NC=CN=C1Cl YYVVOYJKQZWKFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFXUHRXGLWUOJT-UHFFFAOYSA-N (4-phenoxyphenyl)boronic acid Chemical compound C1=CC(B(O)O)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 KFXUHRXGLWUOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOJKRWXDNYZASL-NSCUHMNNSA-N (e)-4-methoxybut-2-enoic acid Chemical compound COC\C=C\C(O)=O ZOJKRWXDNYZASL-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- IVFIUBOAHQZQQJ-ONEGZZNKSA-N (e)-4-pyrrolidin-1-ylbut-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\CN1CCCC1 IVFIUBOAHQZQQJ-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- RAIPHJJURHTUIC-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazol-2-amine Chemical compound NC1=NC=CS1 RAIPHJJURHTUIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJVLVRYLIMQVDD-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazole-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=NC=CS1 IJVLVRYLIMQVDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSZMPVOOICIVGJ-UHFFFAOYSA-N 1-[[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamoyl]cyclopropane-1-carboxylic acid Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(CC1)C(=O)O WSZMPVOOICIVGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSJJMSKNZVXAND-UHFFFAOYSA-N 1-cyanocyclopropane-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(C#N)CC1 KSJJMSKNZVXAND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQXURJDNDYACGE-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxycyclopropane-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(O)CC1 GQXURJDNDYACGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAMBOSVZFMCLLT-UHFFFAOYSA-N 2-(1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolane Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1B1OCCO1 IAMBOSVZFMCLLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEBITPOSBYZLCY-UHFFFAOYSA-N 2-(4,6-dichloropyrimidin-5-yl)acetaldehyde Chemical compound ClC1=NC=NC(Cl)=C1CC=O QEBITPOSBYZLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEEAYLFEIFJFGP-UHFFFAOYSA-N 2-aminopyridine-4-carbonitrile Chemical compound NC1=CC(C#N)=CC=N1 GEEAYLFEIFJFGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDEFPFLTCXIVDH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanopropanoic acid Chemical compound N#CC(C)C(O)=O JDEFPFLTCXIVDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TWCXRVFSIAWFMA-UHFFFAOYSA-N 2-morpholin-4-ium-2-ylacetate Chemical compound OC(=O)CC1CNCCO1 TWCXRVFSIAWFMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QMPJRMJKDADLRX-UHFFFAOYSA-N 3-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-8-amine Chemical compound NC12CCC(CC1)(C2)C2=NC(=C1N2C=CN=C1N)C1=CC=C(C=C1)OC1=CC=CC=C1 QMPJRMJKDADLRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XOFCDPBTIUZPGZ-UHFFFAOYSA-N 3-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)-1-iodoimidazo[1,5-a]pyrazin-8-amine Chemical compound NC12CCC(CC1)(C2)C2=NC(=C1N2C=CN=C1N)I XOFCDPBTIUZPGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCTISZQLTGAYOX-UHFFFAOYSA-N 4,6-dichloro-5-nitropyrimidine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=C(Cl)N=CN=C1Cl HCTISZQLTGAYOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQSJHQXYQAUDFC-UHFFFAOYSA-N 4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical compound ClC1=NC=NC(Cl)=C1C=O XQSJHQXYQAUDFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IYDKBQIEOBXLTP-UHFFFAOYSA-N 4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzoic acid Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 IYDKBQIEOBXLTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOCXUWRCQSFHNJ-UHFFFAOYSA-N 4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzoyl chloride Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 WOCXUWRCQSFHNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCFKNJKDYKIAJN-UHFFFAOYSA-N 4-[4-amino-1-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)N KCFKNJKDYKIAJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MASHMKOCQUUPKB-UHFFFAOYSA-N 4-[4-amino-1-[4-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CN1CCOCC1)=O MASHMKOCQUUPKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTPYAZTVNPKRI-UHFFFAOYSA-N 4-[4-amino-7-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)N HTTPYAZTVNPKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTOYZMSZUPRPTR-UHFFFAOYSA-N 4-[4-amino-7-[4-(3-methoxypropanoylamino)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CCOC)=O BTOYZMSZUPRPTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GYPJNXSNDHBGEL-UHFFFAOYSA-N 4-[4-amino-7-[4-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CN1CCOCC1)=O GYPJNXSNDHBGEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILGHTGYVLDBXNM-UHFFFAOYSA-N 4-[6-amino-9-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)-8-oxopurin-7-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC1=C2N(C(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)N)=O)C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1 ILGHTGYVLDBXNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYOCETROHGEGHL-UHFFFAOYSA-N 4-[6-amino-9-[4-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-8-oxopurin-7-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC1=C2N(C(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1 RYOCETROHGEGHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CGBCLQRPHKOBBA-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)N CGBCLQRPHKOBBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNGKPRCTCDRBMY-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-(4-benzamido-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C1=CC=CC=C1)=O XNGKPRCTCDRBMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSSLOYQJBJFBRU-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-(2-cyanopropanoylamino)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C(C)C#N)=O BSSLOYQJBJFBRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PPXFSFAQHLKELK-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-(3-methoxypropanoylamino)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CCOC)=O PPXFSFAQHLKELK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVHSVVGAMXHAOL-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(1-cyanocyclopropanecarbonyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(CC1)C#N XVHSVVGAMXHAOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FSYKXLHUBKPCKL-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(1-hydroxycyclopropanecarbonyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(CC1)O FSYKXLHUBKPCKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVHJOGDWCCJDRS-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(2-cyanoacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CC#N)=O JVHJOGDWCCJDRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OJIHZTPCDBYEDW-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(2-hydroxy-2-methylpropanoyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C(C)(C)O)=O OJIHZTPCDBYEDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JIHRZOSZENHGGH-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(2-methoxyacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(COC)=O JIHRZOSZENHGGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INIQMRHZBNBVEF-UHFFFAOYSA-N 4-[8-amino-3-[4-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CN1CCOCC1)=O INIQMRHZBNBVEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKGBJWKJWKQNGI-NSCUHMNNSA-N 4-[8-amino-3-[4-[[(E)-4-methoxybut-2-enoyl]amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(\C=C\COC)=O LKGBJWKJWKQNGI-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- AILMBOXYVOBVHZ-ONEGZZNKSA-N 4-[8-amino-3-[4-[[(E)-4-pyrrolidin-1-ylbut-2-enoyl]amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]-N-[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(\C=C\CN1CCCC1)=O AILMBOXYVOBVHZ-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- ZQQSRVPOAHYHEL-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2-fluorobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(Br)C=C1F ZQQSRVPOAHYHEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEVXVBKBOFGKIN-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-3-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC(C(O)=O)=CC=C1Br UEVXVBKBOFGKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCLMLYLFDJEUJY-UHFFFAOYSA-N 4-cyanooxane-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(C#N)CCOCC1 RCLMLYLFDJEUJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUQDNAPKWPKHMK-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-2-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC(F)=CC=C1C(O)=O UUQDNAPKWPKHMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCCFLOQQACDOAX-UHFFFAOYSA-N 4-fluoropyridin-2-amine Chemical compound NC1=CC(F)=CC=N1 WCCFLOQQACDOAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORLGLBZRQYOWNA-UHFFFAOYSA-N 4-methylpyridin-2-amine Chemical compound CC1=CC=NC(N)=C1 ORLGLBZRQYOWNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYAQFHLUEMJOMF-UHFFFAOYSA-N 4-phenoxybenzoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)O)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 RYAQFHLUEMJOMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPXFJBPJUGMYOD-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-2-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(F)C=C1C(O)=O WPXFJBPJUGMYOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HXBPWEGQDLMIMD-YSURURNPSA-N ClC1=C(C(=NC=N1)NC12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)/C=N/O Chemical compound ClC1=C(C(=NC=N1)NC12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)/C=N/O HXBPWEGQDLMIMD-YSURURNPSA-N 0.000 description 1
- MRCBQWOJEQRGRQ-UHFFFAOYSA-N ClC1=C(C(=NC=N1)NC12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)C=O Chemical compound ClC1=C(C(=NC=N1)NC12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)C=O MRCBQWOJEQRGRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MXOSNOFXSVGHNF-UHFFFAOYSA-N ClC1=C2NC(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O Chemical compound ClC1=C2NC(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O MXOSNOFXSVGHNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000864342 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase BTK Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- IRZHAYAHVIDMEV-UHFFFAOYSA-N N-[4-(8-amino-1-iodoimidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]but-2-ynamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2I)C12CCC(CC1)(C2)NC(C#CC)=O IRZHAYAHVIDMEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VRRUYJCAQTYQAF-UHFFFAOYSA-N N-[4-[4-amino-5-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-3-methyloxetane-3-carboxamide Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(COC1)C VRRUYJCAQTYQAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRFFKPCHSYWVDE-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-2-hydroxy-2-methylpropanamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN1)C(=NC2C2=CC=C(C=C2)OC2=CC=CC=C2)C21CCC(CC2)(C1)NC(C(C)(C)O)=O SRFFKPCHSYWVDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGPCJHZDAQLPPM-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-2-morpholin-4-ylacetamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN1)C(=NC2C2=CC=C(C=C2)OC2=CC=CC=C2)C21CCC(CC2)(C1)NC(CN1CCOCC1)=O DGPCJHZDAQLPPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USTASIDAUZQAQI-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-3-methoxypropanamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN1)C(=NC2C2=CC=C(C=C2)OC2=CC=CC=C2)C21CCC(CC2)(C1)NC(CCOC)=O USTASIDAUZQAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVPXATHJLNISQS-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-3-methyloxetane-3-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)OC1=CC=CC=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(COC1)C IVPXATHJLNISQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FIIVRSQNXSXIPX-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-(4-phenoxyphenyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]but-2-ynamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)OC1=CC=CC=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C#CC)=O FIIVRSQNXSXIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHNHDJSFOLHWDC-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[(5-fluoro-2-methoxybenzoyl)amino]methyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-3-methyloxetane-3-carboxamide Chemical compound N(C(=O)C1(COC1)C)C12CCC(C=3N4C=CN=C(C4=C(N=3)C3=CC=C(CNC(=O)C4=C(OC)C=CC(F)=C4)C=C3)N)(CC1)C2 BHNHDJSFOLHWDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFFYARSBDVGVCG-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-1,3-thiazole-2-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C=1SC=CN=1 MFFYARSBDVGVCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXCLZZQNLAXYAY-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-2-methoxybenzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(C1=C(C=CC=C1)OC)=O KXCLZZQNLAXYAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AABYXJCZMWYZBG-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-3-methyloxetane-3-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(COC1)C AABYXJCZMWYZBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SSJSGRWLHAFBER-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]-4-cyanooxane-4-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1(CCOCC1)C#N SSJSGRWLHAFBER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BXMZBTSKCLFRCF-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]furan-2-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C=1OC=CC=1 BXMZBTSKCLFRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLPNQFQZYNPFRL-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]oxolane-2-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)C1OCCC1 XLPNQFQZYNPFRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJIWKEHFZKPRDM-UHFFFAOYSA-N N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]pyridine-2-carboxamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(C1=NC=CC=C1)=O FJIWKEHFZKPRDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIYVDVCXKXJXFL-UHFFFAOYSA-N N-[[4-[8-amino-3-(4-amino-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl)imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]phenyl]methyl]-5-fluoro-2-methoxybenzamide Chemical compound C12(CCC(C=3N4C=CN=C(N)C4=C(N=3)C3=CC=C(CNC(=O)C4=C(OC)C=CC(F)=C4)C=C3)(CC1)C2)N NIYVDVCXKXJXFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVKIKFONFFRUST-UHFFFAOYSA-N N-[[4-[8-amino-3-[4-(3-methoxypropanoylamino)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]phenyl]methyl]-5-fluoro-2-methoxybenzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(CNC(C2=C(C=CC(=C2)F)OC)=O)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(CCOC)=O CVKIKFONFFRUST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVYRKTCSJFAVDL-UHFFFAOYSA-N N-[[4-[8-amino-3-[4-[(2-hydroxy-2-methylpropanoyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]phenyl]methyl]-5-fluoro-2-methoxybenzamide Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(CNC(C2=C(C=CC(=C2)F)OC)=O)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C(C)(C)O)=O IVYRKTCSJFAVDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RPAXOZUJAKYHOI-UHFFFAOYSA-N N-[[4-[8-amino-3-[4-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-1-yl]phenyl]methyl]-5-fluoro-2-methoxybenzamide Chemical compound C1N(CC(=O)NC23CCC(C=4N5C=CN=C(C5=C(N=4)C4=CC=C(CNC(=O)C5=C(OC)C=CC(F)=C5)C=C4)N)(CC2)C3)CCOC1 RPAXOZUJAKYHOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QASVXBFIWBDBAI-UHFFFAOYSA-N NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O Chemical compound NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O QASVXBFIWBDBAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRWHGYLGDXFOAQ-UHFFFAOYSA-N NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2I)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O Chemical compound NC1=C2C(=NC=N1)N(N=C2I)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O QRWHGYLGDXFOAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PUAICIJVHQEQTG-UHFFFAOYSA-N NC1=C2N(C(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O)C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O Chemical compound NC1=C2N(C(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O)C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O PUAICIJVHQEQTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAXZSWIWJFQYOG-UHFFFAOYSA-N NC1=C2NC(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O Chemical compound NC1=C2NC(N(C2=NC=N1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O BAXZSWIWJFQYOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAHXMYDTCXXZNG-UHFFFAOYSA-N NC1=NC=NC2=C1C=NN2C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 Chemical compound NC1=NC=NC2=C1C=NN2C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 OAHXMYDTCXXZNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWRCTPYVTJWIIR-UHFFFAOYSA-N NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C(C)(C)O)=O Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C(=O)NC2=NC=CC(=C2)C(F)(F)F)C=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(C(C)(C)O)=O NWRCTPYVTJWIIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUQTVCQBJWMWPV-UHFFFAOYSA-N NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(C1=CN=CC=C1)=O Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(C1=CN=CC=C1)=O FUQTVCQBJWMWPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWGRWQDPWBHYKI-UHFFFAOYSA-N NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)OC1=CC=CC=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)OC1=CC=CC=C1)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O NWGRWQDPWBHYKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000042834 TEC family Human genes 0.000 description 1
- 108091082333 TEC family Proteins 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N [azido(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(N=[N+]=[N-])OC1=CC=CC=C1 SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRIUKPUCKCECPT-UHFFFAOYSA-N [hydroxy(phenyl)-$l^{3}-iodanyl] 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)OI(O)C1=CC=CC=C1 LRIUKPUCKCECPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004442 acylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- DQPBABKTKYNPMH-UHFFFAOYSA-N amino hydrogen sulfate Chemical compound NOS(O)(=O)=O DQPBABKTKYNPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- KSPLXEGSGJUUOX-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(4-amino-5-iodopyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)N2C=C(C1=C2N=CN=C1N)I)=O KSPLXEGSGJUUOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMMWLBFPICYDQU-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(4-chloropyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound ClC1=NC=NC2=C1C=NN2C12CCC(CC1)(C2)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 IMMWLBFPICYDQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTUAKBKKMICDIN-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(4-chloropyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)N2C=CC1=C2N=CN=C1Cl)=O UTUAKBKKMICDIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKAUXIRYHOJREI-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-(8-chloro-1-iodoimidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl)-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound ClC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2I)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O KKAUXIRYHOJREI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWKNWQPPECWEMI-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-[(3-chloropyrazin-2-yl)methylcarbamoyl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)C(NCC2=NC=CN=C2Cl)=O)=O QWKNWQPPECWEMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKSSCGAYPWXKGT-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-[(5-amino-6-chloropyrimidin-4-yl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)NC2=NC=NC(=C2N)Cl)=O AKSSCGAYPWXKGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKFRVAQUWMATNX-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-[(6-chloro-5-nitropyrimidin-4-yl)amino]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(NC12CCC(CC1)(C2)NC2=NC=NC(=C2[N+](=O)[O-])Cl)=O LKFRVAQUWMATNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWOWSDABXIZOEC-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-[4-amino-5-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound NC=1C2=C(N=CN=1)N(C=C2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O UWOWSDABXIZOEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLAFQTYMHOHPY-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[4-[8-amino-1-[4-[[4-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]carbamoyl]phenyl]imidazo[1,5-a]pyrazin-3-yl]-1-bicyclo[2.2.1]heptanyl]carbamate Chemical compound NC=1C=2N(C=CN=1)C(=NC=2C1=CC=C(C=C1)C(NC1=NC=CC(=C1)C(F)(F)F)=O)C12CCC(CC1)(C2)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O LBLAFQTYMHOHPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROVJNOFTJPHSIU-UHFFFAOYSA-N benzyl n-(1-carbamoyl-4-bicyclo[2.2.1]heptanyl)carbamate Chemical compound C1CC(C(=O)N)(C2)CCC12NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 ROVJNOFTJPHSIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- FDKLLWKMYAMLIF-UHFFFAOYSA-N cyclopropane-1,1-dicarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(C(O)=O)CC1 FDKLLWKMYAMLIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 210000003194 forelimb Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 102000053446 human BTK Human genes 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- RMIODHQZRUFFFF-UHFFFAOYSA-N methoxyacetic acid Chemical compound COCC(O)=O RMIODHQZRUFFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 102000037979 non-receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008046 non-receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N phosphinic chloride Chemical compound ClP=O RLOWWWKZYUNIDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 125000004528 pyrimidin-5-yl group Chemical group N1=CN=CC(=C1)* 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- UJJLJRQIPMGXEZ-UHFFFAOYSA-N tetrahydro-2-furoic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCO1 UJJLJRQIPMGXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N triphosgene Chemical compound ClC(Cl)(Cl)OC(=O)OC(Cl)(Cl)Cl UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к области органической химии и фармацевтики, а именно к аминонорборнановому производному в качестве ингибитора тирозинкиназы Брутона с высокой селективностью в отношении мутанта BTK(C481S). Раскрывается соединение с формулой I, или его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А, кольцо В, кольцо С и где значения L , R1, R2 и R5 такие, как представлено в формуле изобретения. Кроме того, раскрываются конкретное соединение, выбранное из группы, применение указанных выше соединений при производстве лекарственного препарата, фармацевтические композиции и составы для предупреждения развития или лечения гетероиммунного заболевания на основе данных соединений. Также раскрыт способ получения представленных соединений. Группа изобретений обеспечивает эффективное ингибирование тирозинкиназы Брутона с высокой селективностью в отношении мутанта BTK(C481S), что обеспечивает лечение гетероиммунного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака. 14 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 6 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области медицины и, в частности, относится к аминонорборнановому производному в качестве ингибитора тирозинкиназы Брутона с высокой селективностью в отношении мутанта C481S, к содержащей его фармацевтической композиции, к способу его получения и к их применению при производстве лекарственного препарата.
Уровень техники
Путь передачи сигналов с участием B-клеточного рецептора (BCR) играет ключевую роль в созревании, дифференцировке и развитии B-клеток. Аберрантная BCR-опосредованная передача сигнала может привести к нарушению регуляции активации B-клеток и/или к выработке патогенных аутоантител, что приводит в результате к развитию множества заболеваний у человека, в том числе рака, аутоиммунных заболеваний, в том числе красной волчанки, хронической лимфоцитарной лимфомы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или хронического лимфоцитарного лейкоза, гетероиммунных заболеваний, в том числе воспалительных заболеваний, астмы и др.
Тирозинкиназа Брутона (BTK) является представителем семейства TEC — нерецепторных тирозинкиназ. Она играет ключевую роль в активации сигнального пути с участием BCR и является ключевым регулятором ранних стадий формирования B-клеток и активации и выживания зрелых B-клеток (Khan et al., Immunity 1995 3:283; Ellmeier et al., J Exp Med 2000 192:1611). BTK играет важную роль в регуляции пролиферации и апоптоза B-клеток (Islam and Smith, Immunol Rev 2000 178:49; Davis et al., Nature 2010 463:88-94), и поэтому ингибирование BTK можно использовать для лечения некоторых форм В-клеточной лимфомы и лейкоза (Feldhahn et al., J Exp Med 2005 201:1837).
Роль BTK в аутоиммунных и воспалительных заболеваниях была подтверждена на модельных мышах с дефицитом BTK. В доклинической мышиной модели системной красной волчанки (SLE) у мышей с дефицитом BTK наблюдается значительное уменьшение прогрессирования заболевания. Кроме того, мыши с дефицитом BTK устойчивы к развитию индуцируемого коллагеном артрита (Jansson and Holmdahl, Clin Exp Immunol 1993 94:459). Селективные ингибиторы BTK на мышиных моделях артрита характеризуются четкой взаимосвязью между дозой и эффектом (Pan et al., Chem.Med.Chem. 2007 2:58-61). В настоящее время проводятся клинические исследования по лечению артрита ингибиторами BTK.
Ибрутиниб (торговое название «имбрувика»), первый вышедший на рынок ингибитор BTK, имеет большой успех, при этом его годовые продажи в 2017 году достигали 2,6 миллиарда долларов США. Однако, как и в случае со многими другими противораковыми лекарственными средствами, у некоторых пациентов имеет место устойчивость к данному лекарственному средству. Было обнаружено, что основной причиной устойчивости к лекарственному средству является мутация C481S в киназе BTK. Ибрутиниб в фармакодинамическом контексте действует путем необратимого ковалентного связывания с остатком триптофана C481 в киназе BTK; однако, поскольку мутация C481S заменяет триптофан на серин, способность ибрутиниба связываться с остатком триптофана утрачивается.
Согласно клинической статистике, мутация BTK(C481S) связана с 87% пациентов с рецидивирующей хронической лимфомой (CLL) (Woyach et al., J Clin Oncol 2017 35:1437-1443) и приблизительно 80% пациентов с рецидивом лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL) (Chiron et al., Cancer Discovery 2014 4(9): 1-14). Разработка ингибитора BTK, который эффективен против мутанта BTK(C481S), позволит преодолеть устойчивость к ибрутинибу, возникающую в результате мутации C481S.
Краткое описание изобретения
Техническая задача, которую необходимо решить с помощью настоящего изобретения, заключается в получении нового и нераскрытого соединения, являющегося ингибитором тирозинкиназы Брутона с высокой селективностью в отношении мутанта BTK(C481S), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, активного метаболита, полиморфа, сложного эфира, оптического изомера или пролекарства, в применении такого соединения в фармации и в создании способа предупреждения развития или лечения заболеваний, связанных с чрезмерной активностью BTK, у человека или млекопитающих путем применения раскрываемого в настоящем документе соединения.
Для решения данной технической задачи в настоящем изобретении взята на вооружение представленная далее техническая схема.
Предложено соединение с формулой (I):
(I),
или его фармацевтически приемлемая соль, сольват, активный метаболит, полиморф, сложный эфир, оптический изомер или пролекарство, где
кольцо A выбрано из одной из следующих структур:
при этом R5 выбран из водорода, галогена, циано, гидроксила, алкинила, амино, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-галогеналкила, C1-3-галогеналкокси, C1-3-галогеналкиламино, C3-7-циклоалкила, C3-7-циклоалкокси и C3-7-циклоалкиламино;
кольцо B представляет собой замещенное или незамещенное ароматическое кольцо или гетероароматическое кольцо; кольцо C представляет собой замещенное или незамещенное ароматическое кольцо или гетероароматическое кольцо;
L представляет собой одинарную связь или одну из следующих структур:
R1 выбран из R3 и одной из следующих структур:
при этом R3 выбран из водорода, замещенного или незамещенного C1-6-алкила, замещенного или незамещенного C1-6-алкинила, замещенного или незамещенного C1-6-алкенила, замещенного или незамещенного C6-10-арила, замещенного или незамещенного C1-9-гетероарила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила и замещенного или незамещенного C2-7-гетероциклоалкиламино; и
при этом R4 выбран из водорода, замещенного или незамещенного C1-6-алкила, замещенного или незамещенного C6-10-арила, замещенного или незамещенного C1-9-гетероарила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила и замещенного или незамещенного C3-7-гетероциклоалкила; и
R2 выбран из H, замещенного или незамещенного C1-3-алкила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила, замещенного или незамещенного C2-7-гетероциклоалкила, замещенного или незамещенного C6-10-арила и замещенного или незамещенного C1-9-гетероарила.
R1 и R2 вместе с присоединенным к ним N образуют замещенное или незамещенное C2-7-гетероциклическое кольцо, а R3 и R4 вместе с присоединенным к ним N образуют или не образуют C3-7-гетероциклиламино или C3-9-гетероариламино.
В случае R3, предпочтительно, заместитель у замещенного C1-6-алкила, замещенного C1-6-алкинила, замещенного C1-6-алкенила, замещенного C6-10-арила, замещенного C1-9-гетероарила, замещенного C3-7-циклоалкила или замещенного C2-7-гетероциклоалкила выбран из одного или нескольких из галогена, циано, гидроксила, амино, замещенного или незамещенного ациламино, замещенного или незамещенного аминоацила, замещенного или незамещенного C1-4-алкила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкокси, замещенного или незамещенного C1-4-алкиламино, ди[замещенного или незамещенного C1-4-алкил]амино, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкиламино, замещенного или незамещенного C3-7-гетероциклоалкиламино, замещенного или незамещенного C1-3-алкокси, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкокси, замещенного или незамещенного C6-10-арила и замещенного или незамещенного C3-7-гетероциклоалкила.
В случае R4, предпочтительно, заместитель у замещенного C1-6-алкила, замещенного C6-10-арила, замещенного C1-9-гетероарила, замещенного C3-7-циклоалкила или замещенного C3-7-гетероциклоалкила выбран из одного или нескольких из галогена, гидроксила, циано, амино, замещенного или незамещенного C1-4-алкенила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкокси, замещенного или незамещенного C1-4-алкиламино, ди[замещенного или незамещенного C1-4-алкил]амино, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкиламино, замещенного или незамещенного C3-7-гетероциклоалкиламино, замещенного или незамещенного C1-3-алкокси, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкокси, замещенного или незамещенного C6-10-арила и замещенного или незамещенного C3-7-гетероциклоалкила.
Предпочтительно, кольцо A представляет собой одну из следующих структур:
при этом R5 выбран из водорода, галогена, циано, гидроксила, алкинила, амино, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-галогеналкила, C1-3-галогеналкокси, C1-3-галогеналкиламино, C3-7-циклоалкила, C3-7-циклоалкокси и C3-7-циклоалкиламино;
в случае кольца B, предпочтительно, заместитель у замещенного ароматического кольца или гетероароматического кольца выбран из одного или нескольких из галогена, гидроксила, циано, амино, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-галогеналкила и C1-3-галогеналкокси.
Предпочтительно, кольцо B представляет собой одну из следующих структур:
В случае кольца С, предпочтительно, заместитель у замещенного ароматического кольца или гетероароматического кольца выбран из одного или нескольких из галогена, гидроксила, циано, амино, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-галогеналкила и C1-3-галогеналкокси.
Предпочтительно, кольцо C представляет собой одну из следующих структур:
Предпочтительно, R2 выбран из H, а R1 выбран из , где R3 выбран из водорода, замещенного или незамещенного C1-6-алкила, замещенного или незамещенного C1-6-алкинила, замещенного или незамещенного C1-6-алкенила, замещенного или незамещенного C6-10-арила, замещенного или незамещенного C1-9-гетероарила, замещенного или незамещенного C3-7-циклоалкила и замещенного или незамещенного C2-7-гетероциклоалкиламино.
Наиболее предпочтительно, соединение выбрано из любой из следующих структур:
Предложено применение соединения по любому из приведенных выше аспектов при производстве лекарственного препарата для предупреждения развития или лечения гетероиммунного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака,
где гетероиммунное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак связаны с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона, или
гетероиммунное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак связаны с аберрантной пролиферацией B-клеток.
Кроме того, гетероиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание или астму.
Кроме того, аутоиммунное заболевание представляет собой красную волчанку, хроническую лимфоцитарную лимфому, диффузную крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому или хронический лимфолейкоз.
Предложена фармацевтическая композиция, содержащая одно или несколько соединений согласно любому из приведенных выше аспектов.
Предложен фармацевтический состав, содержащий терапевтически эффективное количество соединения согласно любому из приведенных выше аспектов и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
Фармацевтический состав составлен для перорального введения, парентерального введения, трансбуккального введения, назального введения, местного применения или ректального введения.
Фармацевтический состав предназначен для применения при лечении заболевания или патологического состояния, связанного с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона, предусматривающего введение фармацевтического состава нуждающемуся в том человеку или млекопитающему; заболевание, связанное с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона, представляет собой гетероиммунное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак; гетероиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание или астму; аутоиммунное заболевание представляет собой красную волчанку, хроническую лимфоцитарную лимфому, диффузную крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому или хронический лимфолейкоз.
Настоящим изобретением предусмотрена стадия приведения фармацевтического состава в контакт с BTK, которая предусматривает анализ in vitro или in vivo.
Способ 1 получения указанного выше соединения I предусматривает: (S1) осуществление реакции сочетания Сузуки соединения IIIA с бороновой кислотой или боратом II с получением соединения IV; (S2) превращение соединения IV в гидрохлорид соединения V путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; и (S3) сочетание соединения V с органической кислотой с получением описанного выше соединения I;
где X = галоген, а R2, R3, L, кольцо A, кольцо B и кольцо C являются такими, как описано выше.
Способ 2 получения указанного выше соединения I предусматривает: (A1) превращение соединения IIIA в гидрохлорид соединения VI путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; (A2) сочетание соединения VI с органической кислотой с получением соединения VII; и (A3) осуществление реакции сочетания Сузуки соединения VII с бороновой кислотой или боратом II с получением описанного выше соединения I;
где X = галоген, а R2, R3, L, кольцо A, кольцо B и кольцо C являются такими, как описано выше.
Способ 3 получения указанного выше соединения I предусматривает: (B1) осуществление реакции сочетания Чана-Лама-Эванса соединения IIIB с бороновой кислотой II в присутствии катализа ацетатом меди с получением соединения VIII; (B2) превращение соединения VIII в гидрохлорид соединения IX путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; и (B3) сочетание соединения IX с органической кислотой с получением описанного выше соединения I;
где R2, R3, L, кольцо A, кольцо B и кольцо C являются такими, как описано выше.
Каждый из продуктов, образующихся в результате реакций в способах 1, 2 и 3, можно получить с помощью традиционных методик разделения, в том числе без ограничения путем фильтрации, дистилляции, кристаллизации, хроматографического разделения и тому подобного. Исходные материалы, необходимые для синтеза, можно синтезировать самостоятельно или приобрести в коммерческих учреждениях, таких как Adrich или Sigma. Эти материалы можно охарактеризовать с помощью таких традиционных средств, как физические константы и спектральные данные. Описываемые в настоящем документе соединения можно синтезировать с получением одного оптического изомера или смеси оптических изомеров.
Верхними индексами букв в настоящем изобретении указан порядковый номер группы, а нижними индексами указано количество атомов. Например: R1, R2 и R3 обозначают с 1-ой по 3-ю группы R, а C1-4-алкил обозначает алкил, содержащий 1-4 атома C. Количество атомов C в заместителе не учитывается в основной цепи.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлена ксенотрансплантатная модель опухоли OCI-LY10.
На фиг. 2 представлена ксенотрансплантатная модель опухоли TMD-8.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение можно лучше понять из приведенных далее примеров. Тем не менее, специалисты в настоящей области техники без труда поймут, что описанное в примерах используется лишь для иллюстрации настоящего изобретения, и оно не должно и не будет ограничивать настоящее изобретение, которое подробно описано в формуле изобретения.
Синтез промежуточного соединения I-5
Путь синтеза промежуточного соединения I-5
I-2: метил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-карбоксилат
К раствору 4-(метоксикарбонил)бицикло[2.2.1]гептан-1-карбоновой кислоты (I-1) (3,5 г, 17,7 ммоль) и TEA (1,78 г, 17,7 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли DPPA (5,34 г, 19,5 ммоль). Смесь нагревали до 90°C и выдерживали при этой температуре в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляли BnOH (1,9 г, 17,7 ммоль). Полученную в результате смесь перемешивали при температуре 90°С в течение 4 дней. После охлаждения до комнатной температуры смесь разводили этилацетатом и промывали водным раствором NaHCO3. Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (этилацетат/простой петролейный эфир = 1: 4) с получением искомого соединения I-2 (3 г, выход: 56%).
I-3: 4-(((бензилокси)карбонил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-карбоновая кислота
К раствору метил-4-(((бензилокси)карбонил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-карбоксилата (I-2) (3 г, 9,9 ммоль) добавляли NaOH (792 мг, 19,8 ммоль) и смесь нагревали до 60°C и выдерживали при этой температуре в течение 10 часов. Смесь концентрировали, добавляли к ней воду (50 мл), а затем добавляли 1 н. водный раствор HCl для доведения pH до 4. Для экстракции добавляли этилацетат (20 мл × 3), а органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали с получением искомого соединения I-3 (2,2 г, выход: 77%), который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
I-4: бензил-(4-карбамоилбицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору соединения I-3 (2 г, 6,9 ммоль) и Et3N (1 г, 10 ммоль) в DCM (20 мл) по каплям при 0°C добавляли изобутилхлорформиат (1,36 г, 10 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 минут, по каплям добавляли NH4OH (10 мл) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Полученную смесь выливали в воду (30 мл) и отделяли органическую фазу. Водный раствор подвергали экстракции посредством DCM (15 мл ×2) и объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (элюент: EA/PE (1:1)–EA/MeOH (10:1)) с получением искомого соединения I-4 (1,7 г, выход: 85%).
I-5: бензил-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор соединения I-4 (1,6 г, 5,55 ммоль) и [гидрокси(тозилокси)иод]бензола (2,17 г, 5,55 ммоль) в ACN (20 мл) кипятили в колбе с обратным холодильником в течение 1 часа. Выпаривали растворитель и добавляли 1 М NaOH (12 мл). Добавляли EA (15 мл × 2) для экстракции и органическую фазу сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (элюент: DCM/MeOH = 10:1) с получением искомого соединения I-5 (920 мг, выход: 64%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+.
Синтез промежуточной бороновой кислоты II
Путь синтеза промежуточного соединения II-1
4-бром-N-(пиридин-2-ил)бензамид
К смеси 4-бромбензойной кислоты (5 г, 24,8 ммоль) и пиридин-2-амина (4,68 г, 49 ммоль) в пиридине (30 мл) на ледяной бане по каплям добавляли POCl3 (11,4 г, 74 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (40 мл ×3). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl (50 мл ×2), сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:9-1:1) с получением продукта 4-бром-N-(пиридин-2-ил)бензамид (3,28 г, 48%). LC-MS m/z = 277,0 [M+1]+.
N-(пиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид
Смесь 4-бром-N-(пиридин-2-ил)бензамида (2 г, 7,22 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолана) (2,75 г, 10,83 ммоль), PdCl2(dppf) (527 мг, 0,72 ммоль) и KOAc (235 мг, 2,4 ммоль) в толуоле (30 мл) нагревали до 110°C и выдерживали ее при данной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь упаривали и добавляли к ней воду (100 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (40 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:4-1:1) с получением продукта N-(пиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (2 г, 85%).
II-1: (4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновая кислота
К раствору N-(пиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамида (2 г, 6,2 ммоль) в смешанном растворителе THF:H2O (24 мл:6 мл) добавляли NaIO4 (3,27 г, 18,6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляли 2 н. водный раствор HCl (1,65 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь разводили этилацетатом и промывали солевым раствором. Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1:10) с получением продукта (4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновая кислота (II-1) (1,4 г, 93%). LC-MS m/z = 243,1 [M+1]+.
Путь синтеза промежуточного соединения II-2
4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоилхлорид
К раствору 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойной кислоты (10 г, 40 ммоль) и 1 капли DMF в DCM (100 мл) на ледяной бане по каплям добавляли оксалилхлорид (10,2 г, 80 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, а затем нагревали до комнатной температуры и выдерживали при данной температуре в течение 3 ч. Затем смесь концентрировали с получением продукта, который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
N-(4-фторпиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид
К раствору 4-фторпиридин-2-амина (421 мг, 3,76 ммоль) в пиридинe (3 мл) добавляли раствор 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)бензоилхлорида (1 г, 3,76 ммоль) в DCM (6 мл) и данную суспензию перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Смесь выливали в воду и подвергали экстракции посредством DCM (20 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4 и упаривали, а остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:9) с получением продукта (1,04 г, 81%). LC-MS m/z = 343,2 [M+1]+.
II-2: (4-((4-фторпиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
К раствору N-(4-фторпиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамида (1,04 г, 3,04 ммоль) в смешанном растворителе THF:H2O (24 мл:6 мл) добавляли NaIO4 (1,9 г, 9,12 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляли водный раствор HCl (1,65 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь разводили этилацетатом и промывали солевым раствором. Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1:10) с получением продукта II-2 (648 мг, 82%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+.
II-3: (4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-(трифторметил)пиридин-2-амином (609 мг, 3,76 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)бензоилхлоридом (1 г, 3,76 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-2, с получением искомого соединения (607 мг). LC-MS m/z = 311,1 [M+1]+.
II-4: (4-((4-метилпиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-метил-пиридин-2-амином (406 мг, 3,76 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)бензоилхлоридом (1 г, 3,76 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-2, с получением искомого соединения (589 мг). LC-MS m/z = 257,1 [M+1]+.
II-5: (4-((4-цианопиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-цианопиридин-2-амином (447 мг, 3,76 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)бензоилхлоридом (1 г, 3,76 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-2, с получением искомого соединения (465 мг). LC-MS m/z = 268,0 [M+1]+.
Путь синтеза промежуточного соединения II-6
4-бром-2-фтор-N-(пиридин-2-ил)бензамид
К раствору 4-бром-2-фторбензойной кислоты (1 г, 4,56 ммоль) в DCM (30 мл) на ледяной бане по каплям добавляли оксалилхлорид (1,16 г, 9,13 ммоль), а затем добавляли 1 каплю DMF. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч смесь концентрировали и растворяли в DCM (6 мл). Полученный в результате раствор добавляли к раствору пиридин-2-амина (428 мг, 4,56 ммоль) в пиридинe (3 мл) при 0°C и данную суспензию перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Смесь выливали в воду и подвергали экстракции посредством DCM (20 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4 и упаривали, а остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:9) с получением продукта (1,05 г, 78%). LC-MS m/z = 295,0 [M+1]+.
2-фтор-N-(пиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид
Раствор 4-бром-2-фтор-N-(пиридин-2-ил)бензамида (1,05 г, 3,55 ммоль), (4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолана (1,36 г, 5,3 ммоль), PdCl2(dppf) (260 мг, 0,36 ммоль) и KOAc (1,04 г, 10,65 ммоль) в толуоле (30 мл) нагревали до 110°C и выдерживали при данной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь упаривали, а затем добавляли к ней воду (100 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (40 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:4-1:1) с получением продукта (971 мг, 80%).
II-6: (3-фтор-4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновая кислота
К раствору 2-фтор-N-(пиридин-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамида (970 мг, 2,84 ммоль) в смешанном растворителе THF:H2O (24 мл:6 мл) добавляли NaIO4 (1,8 г, 8,52 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли водный раствор HCl (1,65 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч смесь разводили этилацетатом и промывали солевым раствором. Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1:10) с получением продукта II-6 (605 мг, 82%). LC-MS m/z = 261,1 [M+1]+.
II-7: (4-(тиазол-2-илкарбамоил)фенил)бориновая кислота
С тиазол-2-амином (376 мг, 3,76 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)бензоилхлоридом (1 г, 3,76 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-2, с получением искомого соединения II-7 (580 мг). LC-MS m/z = 249,1 [M+1]+.
II-8: (2-фтор-4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-бром-3-фторбензойной кислотой и пиридин-2-амином в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-1, с получением искомого соединения II-8 (138 мг). LC-MS m/z = 261,0 [M+1]+.
II-9: (2-фтор-4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-бром-3-фтор-бензойной кислотой и 4-(трифторметил)-пиридин-2-амином в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-1, с получением искомого соединения II-9 (130 мг). LC-MS m/z = 329,0 [M+1]+.
II-10: (2-метокси-4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновая кислота
С 4-бром-3-метоксибензойной кислотой (1 г, 4,36 ммоль) и 4-(трифторметил)-пиридин-2-амином (706 мг, 4,36 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-6, с получением искомого соединения II-10 (440 мг). LC-MS m/z = 341,0 [M+1]+.
Путь синтеза промежуточного бората II-11
N-(4-бромбензил)-2-метоксибензамид
Раствор 4-бромбензиламина (1 г, 5,38 ммоль), 2-метоксибензойной кислоты (818 мг, 5,38 ммоль), HATU (2,45 г, 6,46 ммоль) и DIEA (1,39 г, 10,76 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливали в воду (50 мл), подвергали фильтрации, промывали водой (30 мл × 2) и сушили с получением искомого соединения (1,6 г, выход: 93%), который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
II-11: 2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамид
Раствор N-(4-бромбензил)-2-метоксибензамида (1,6 г, 5 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолана) (1,9 г, 7,5 ммоль), PdCl2(dppf) (365 мг, 0,5 ммоль) и KOAc (1,47 г, 15 ммоль) в диоксане (30 мл) нагревали до 100°C и выдерживали его при данной температуре в течение 6 ч. Смесь концентрировали, добавляли воду (100 мл) и затем подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:9) с получением искомого соединения II-11 (1,5 г, выход: 82%).
II-12: 5-фтор-2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамид
С 5-фтор-2-метоксибензойной кислотой (915 мг, 5,38 ммоль) и 4-бромбензиламином (1 г, 5,38 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-11, с получением искомого соединения II-12 (900 мг).
II-13: 4-фтор-2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамид
С 4-фтор-2-метоксибензойной кислотой (915 мг, 5,38 ммоль) и 4-бромбензиламином (1 г, 5,38 ммоль) в качестве исходных материалов использовали тот же способ синтеза, что и для II-11, с получением искомого соединения II-13 (1 г).
Путь синтеза промежуточного соединения A-4
A-1: бензил(4-(((3-хлорпиразин-2-ил)метил)карбамоил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор 4-(((бензилокси)карбонил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-карбоновой кислоты (2 г, 6,9 ммоль), HATU (2,89 г, 7,6 ммоль), DIEA (3,56 г, 27,6 ммоль) и гидрохлорида (3-хлорпиразин-2-ил)метиламина (1,3 г, 7,24 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Смесь выливали в воду (100 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1-1:0) с получением искомого соединения A-1 (2 г, выход: 70%). LC-MS m/z = 414,9 [M+1]+.
A-2: бензил(4-(8-хлоримидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору бензил(4N-(((3-хлорпиразин-2-ил)метил)карбамоил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (A-1) (2 г, 4,83 ммоль) в ACN (30 мл) добавляли пиридин (381 мг, 4,83 ммоль) и PCl5 (4 г, 19,32 ммоль) и смесь нагревали до 56°C и выдерживали ее при данной температуре в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь медленно выливали в ледяной насыщенный водный раствор NaHCO3 (100 мл). При поддержании pH на уровне 9 смесь подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (этилацетат/простой петролейный эфир = 1: 1) с получением искомого соединения A-2 (1,5 г, выход: 78%).
A-3: бензил(4-(8-хлор-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смешанный раствор бензил(4-(8-хлоримидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (A-2) (1,5 г, 3,79 ммоль) и NIS (1,13 г, 5,04 ммоль) в DMF (10 мл) нагревали до 60°C в условиях атмосферы N2 и перемешивали в течение 10 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь выливали в воду (100 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 2:3) с получением искомого соединения A-3 (1,52 г, выход: 77%).
A-4: бензил(4-(8-амино-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К суспензии соединения A-3 (1,5 г, 2,87 ммоль) в IPA (15 мл) добавляли NH4OH (3 мл) и смесь нагревали до 110°C и выдерживали при данной температуре в течение 6 ч. Затем смесь концентрировали и добавляли к ней насыщенный водный раствор NaHCO3 (20 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-4 (1,1 г, выход: 77%).
Путь синтеза промежуточного соединения B-3
B-1: бензил(4-(4-хлор-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор 2-(4,6-дихлорпиримидин-5-ил)ацетальдегида (735 мг, 3,8 ммоль), бензил(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (1 г, 3,8 ммоль) и Et3N (389 мг, 3,8 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 16 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали, а остаток очищали колоночной хроматографией (EA/PE = 1:4) с получением искомого соединения B-1 (1,25 г, выход: 83%). LC-MS m/z = 397,1 [M+1]+.
B-2: бензил(4-(4-хлор-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил) карбамат
К раствору соединения B-1 (1,25 г, 3,16 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли NIS (950 мг, 4,2 ммоль) и смесь нагревали до 60°C и выдерживали при данной температуре в течение 6 ч. Смесь выливали в воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали, а остаток очищали колоночной хроматографией (EA/PE = 1:4) с получением искомого соединения (1,09 г, выход: 66%). LC-MS m/z = 523,1 [M+1]+.
B-3: бензил(4-(4-амино-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору бензил(4-(4-хлор-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (B-2) (1,09 г, 2,08 ммоль) в IPA (10 мл) добавляли NH4OH (2 мл) и смесь нагревали до 110°C и выдерживали при данной температуре в течение 6 ч. Смесь затем концентрировали, выливали в водный раствор NaHCO3 и подвергали экстракции посредством DCM (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили, подвергали фильтрации и концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1:20) с получением искомого соединения B-3 (900 мг, выход: 86%).
Путь синтеза промежуточного соединения C-4
C-1: бензил(4-((6-хлор-5-нитропиримидин-4-ил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор 4,6-дихлор-5-нитропиримидина (518 мг, 2,68 ммоль), бензил(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (I-5) (698 мг, 2,68 ммоль) и Et3N (1,1 г, 10,72 ммоль) в DCM (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляли, а остаток обрабатывали этилацетатом (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором NaCl. Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (EA/PE = 1:4) с получением искомого соединения C-1 (633 мг, выход: 57%).
C-2: бензил(4-((5-амино-6-хлорпиримидин-4-ил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору соединения C-1 (400 мг, 0,96 ммоль) в смешанном растворителе (EtOH/H2O = 20 мл/4 мл) добавляли порошок Fe (268 мг, 4,8 ммоль) и NH4Cl (254 мг, 4,8 ммоль). Смесь нагревали до закипания в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь подвергали фильтрации и промывали посредством MeOH (10 мл). Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (EA/PE = 1:4) с получением искомого соединения C-2 (292 мг, выход: 79%).
C-3: бензил(4-(6-хлор-8-оксо-7,8-дигидропурин-9-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору соединения C-2 (290 мг, 0,75 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C добавляли Et3N (166 мг, 1,5 ммоль) и трифосген (291 мг, 0,9 ммоль) и смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Затем смесь выливали в воду (20 мл) и отделяли органическую фазу, а затем водный раствор подвергали экстракции посредством DCM (10 мл × 2) для отделения органической фазы. Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 подвергали фильтрации и концентрировали с получением неочищенного C-3 (316 мг), которое непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
C-4: бензил(4-(6-амино-8-оксо-7,8-дигидропурин-9-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору соединения C-3 (310 мг, 0,75 ммоль) в IPA (10 мл) добавляли NH4OH (2 мл) и смесь нагревали до 150°C и выдерживали при данной температуре в течение 24 ч. Затем смесь концентрировали, выливали в водный раствор NaHCO3 и подвергали экстракции посредством DCM (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили, подвергали фильтрации и концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (MeOH/DCM = 1:20) с получением искомого соединения C-4 (100 мг, выход: 34%). LC-MS m/z = 395,1 [M+1]+.
Путь синтеза промежуточного соединения D-5
D-1: бензил(4-((6-хлор-5-формилпиримидин-4-ил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смешанный раствор I-5 (1,47 г, 5,65 ммоль), 4,6-дихлорпиримидин-5-карбальдегида (1 г, 5,65 ммоль) и триэтиламина (1,15 г, 11,4 ммоль) DCM (20 мл) перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разводили посредством EA (50 мл) и промывали водой (30 мл × 2). Органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат = 1:1) с получением искомого продукта D-1 (1,24 г, 55%). LC-MS m/z = 401,0 [M+1]+.
D-2: бензил-(E)-(4-((6-хлор-5-((гидроксиимино)метил)пиримидин-4-ил)амино)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смешанный раствор из D-1 (1,2 г, 3,0 ммоль), гидроксиламин-O-сульфоновой кислоты (0,41 г, 3,6 ммоль) в DCM/ACN (50 мл/50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, а затем перемешивали при 50°C в течение 6 ч. После охлаждения смесь концентрировали до 10 мл и концентрат подвергали фильтрации и промывали посредством ACN (2 мл) с получением искомого продукта D-2 (1,0 г, 81%). LC-MS m/z = 416,0 [M+1]+.
D-3: бензил(4-(4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
К раствору D-2 (1,0 г, 2,41 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли DIEA (4 мл), а затем по каплям добавляли TsCl (0,23 мл, 2,9 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч реакционную смесь обрабатывали водой (100 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором (30 мл × 2), сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/простой петролейный эфир = 1:6) с получением искомого продукта D-3 (400 мг, 42%). LC-MS m/z = 398,1 [M+1]+.
D-4: бензил(4-(4-амино-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смесь из D-3 (400 мг, 1,0 ммоль) и гидроксида аммония (30%, 5 мл) в изопропаноле (20 мл) перемешивали в герметично закрытой пробирке при 120°C в течение 6 ч. Растворитель выпаривали, а остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: PE/EA = 2:1) с получением искомого продукта D-4 (280 мг, 73,4%).
D-5: бензил(4-(4-амино-3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смесь D-4 (190 мг, 0,5 ммоль), NIS (400 мг, 1,78 ммоль) и HBF4 (50%, 19,6 ммоль, 4 мл) в ACN (2,5 мл) нагревали до 85°C в герметично закрытой пробирке и перемешивали в течение 6 ч. После охлаждения смеси реакцию гасили с помощью насыщенного NaHCO3 и для экстракции добавляли EA (50 мл × 2). Органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: PE/EA = 1:1-1:0) с получением искомого продукта D-5 (96 мг, 38,1%). LC-MS m/z = 505,0 [M+1]+.
Пример 1
Путь синтеза соединения A-7-n
A-5: 3-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-8-амин
Раствор соединения A-4 (1 г, 1,99 ммоль) в смешанном растворителе TFA/DCM (10 мл/10 мл) нагревали до 60°C и выдерживали его при данной температуре в течение 6 ч. Смесь концентрировали и к ней добавляли DCM (20 мл × 2). Полученную в результате смесь концентрировали, растворяли в DCM (20 мл), добавляли к ней раствор HCl в диоксане (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь упаривали и добавляли к ней DCM (20 мл × 2), а полученную в результате смесь упаривали и добавляли к ней DME (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, подвергали фильтрации, а затем промывали посредством DME (10 мл × 2). Полученное соединение A-5 непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. LC-MS m/z = 370,1 [M+1]+.
A-6: N-(4-(8-амино-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)бут-2-инамид
Раствор соединения A-5 (1,35 г, 2,8 ммоль), DIEA (3,28 г, 25,2 ммоль), бут-2-иновой кислоты (235 мг, 2,8 ммоль) и HATU (1,06 г, 2,8 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Смесь выливали в воду (30 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 2:3) с получением искомого соединения A-6 (800 мг, выход: 65%).
A-7-1: 4-(8-амино-3-(4-(буд-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-1) (20 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли к ней воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-1 (10 мг, выход: 30%). LC-MS m/z = 506,2 [M+1]+.
A-7-2: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-фторпиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-((4-фторпиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-2) (22 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли к ней воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-2 (15 мг, выход: 34%). LC-MS m/z = 524,0 [M+1]+.
A-7-3: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-3) (26 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли к ней воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-3 (12 мг, выход: 31%). LC-MS m/z = 574,2 [M+1]+.
A-7-4: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-метилпиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-((4-метилпиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-4) (22 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли к ней воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-4 (14 мг, выход: 39%). LC-MS m/z = 520,2 [M+1]+.
A-7-5: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-цианопиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-((4-цианопиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-5) (23 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-5 (12 мг, выход: 33%). LC-MS m/z = 531,0 [M+1]+.
A-7-6: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-2-фтор-N-(пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (3-фтор-4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-6) (22 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-6 (15 мг, выход: 42%). LC-MS m/z = 524,2 [M+1]+.
A-7-7: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(тиазол-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (4-(тиазол-2-илкарбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-7) (28 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-7 (13 мг, выход: 37%). LC-MS m/z = 512,0 [M+1]+.
A-7-8: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-3-фтор-N-(пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (2-фтор-4-(пиридин-2-илкарбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-8) (22 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-8 (14 мг, выход: 39%). LC-MS m/z = 524,0 [M+1]+.
A-7-9: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-3-фтор-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (2-фтор-4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-9) (28 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-9 (19 мг, выход: 47%). LC-MS m/z = 592,0 [M+1]+.
A-7-10: 4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-3-метокси-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), (2-метокси-4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-10) (29 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-10 (16 мг, выход: 38%). LC-MS m/z = 604,0 [M+1]+.
A-7-11: N-(4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), 2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамида (II-11) (31 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-11 (21 мг, выход: 50%). LC-MS m/z = 549,3 [M+1]+.
A-7-12: N-(4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-5-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), 5-фтор-2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамида (II-12) (33 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-12 (24 мг, выход: 56%). LC-MS m/z = 567,0 [M+1]+.
A-7-13: N-(4-(8-амино-3-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-4-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), 4-фтор-2-метокси-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамида (II-13) (33 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-13 (26 мг, выход: 60%). LC-MS m/z = 567,1 [M+1]+.
A-7-14: N-(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)бут-2-инамид
Раствор соединения A-6 (30 мг, 0,069 ммоль), 4-феноксифенилбориновой кислоты (18 мг, 0,085 ммоль), Pd[PPh3]4 (8 мг, 0,0069 ммоль) и Cs2CO3 (45 мг, 0,138 ммоль) в смешанном растворителе DME/H2O (1,5 мл/0,3 мл) нагревали до 80°C и выдерживали его при данной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали, добавляли в нее воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат/простой петролейный эфир = 1:1) с получением искомого соединения A-7-14 (19 мг, выход: 49%). LC-MS m/z = 478,0 [M+1]+.
Путь синтеза соединения A-10-n
A-8: бензил(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор бензил(4-(8-амино-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (A-4) (300 мг, 0,6 ммоль), (4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-3) (229 мг, 0,738 ммоль), Pd[PPh3]4 (69 мг, 0,06 ммоль) и Cs2O3 (239 мг, 0,738 ммоль) в смешанном растворителе DME:H2O (2,5 мл:0,5 мл) нагревали до 80°C и перемешивали на протяжении ночи. Смесь концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (метанол/DCM = 1:30) с получением искомого соединения A-8 (265 мг, выход: 69%).
A-9: 4-(8-амино-3-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-8 (265 мг, 0,42 ммоль) в смешанном растворителе DCM/TFA (10 мл:10 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение 18 ч. После этого смесь упаривали до сухого состояния, добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали. Остаток растворяли в DCM (30 мл), а затем данный раствор добавляли к раствору HCl в диоксане. После этого смесь упаривали до сухого состояния, затем к нему добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали с последующим добавлением простого изопропилового эфира (30 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь подвергали фильтрации и промывали простым изопропиловым эфиром (10 мл × 2) с получением гидрохлорида искомого продукта A-9 (196 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
A-10-1: (E)-4-(8-амино-3-(4-(4-метоксибут-2-енамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и (E)-4-метоксибут-2-еновой кислоты (2,8 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (элюент: DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-1 (5 мг, выход: 35%). LC-MS m/z = 606,1 [M+1]+.
A-10-2: (E)-4-(8-амино-3-(4-(4-(тетрагидропиррол-1-ил)бут-2-енамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и (E)-4-(тетрагидропиррол-1-ил)-бут-2-еновой кислоты (4 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-2 (6 мг, выход: 38%). LC-MS m/z = 645,0 [M+1]+.
A-10-3: 4-(3-(4-акриламидбицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-8-аминоимидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и акриловую кислоту (2 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-3 (5 мг, выход: 38%). LC-MS m/z = 562,0 [M+1]+.
A-10-4: 4-(3-(4-ацетамидбицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-8-аминоимидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и уксусную кислоту (1,5 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-4 (4 мг, выход: 31%). LC-MS m/z = 550,0 [M+1]+.
A-10-5: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (3 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и промывали этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-5 (6 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 606,1 [M+1]+.
A-10-6: 4-(8-амино-3-(4-(2-гидрокси-2-метилпропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-гидрокси-2-метилпропионовую кислоту (2,5 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-6 (6 мг, выход: 41%). LC-MS m/z = 594,1 [M+1]+.
A-10-7: 4-(8-амино-3-(4-(2-метоксиацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-метоксиуксусную кислоту (2 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-7 (5 мг, выход: 36%). LC-MS m/z = 580,1 [M+1]+.
A-10-8: 4-(8-амино-3-(4-(3-метоксипропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 3-метоксипропионовую кислоту (2,5 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-8 (5 мг, выход: 35%). LC-MS m/z = 594,1 [M+1]+.
A-10-9: 4-(8-амино-3-(4-(1-гидроксициклопропанкарбоксамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 1-гидроксициклопропанкарбоновой кислоты (2,5 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-9 (5 мг, выход: 36%). LC-MS m/z = 592,0 [M+1]+.
A-10-10: 4-(8-амино-3-(4-(2-морфолиноацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-морфолинуксусную кислоту (3,5 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-10 (7 мг, выход: 47%). LC-MS m/z = 635,0 [M+1]+.
A-10-11: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)тетрагидрофуран-2-карбоксамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты (2,8 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-11 (5 мг, выход: 35%). LC-MS m/z = 606,0 [M+1]+.
A-10-12: 4-(8-амино-3-(4-(1-цианоциклопропанкарбоксамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 1-цианоциклопропанкарбоновую кислоту (2,7 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-12 (6 мг, выход: 42%). LC-MS m/z = 601,3 [M+1]+.
A-10-13: 4-(8-амино-3-(4-(2-цианоацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-цианоуксусную кислоту (2 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-13 (6 мг, выход: 44%). LC-MS m/z = 575,2 [M+1]+.
A-10-14: 4-(8-амино-3-(4-(2-цианопропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-цианопропионовую кислоту (2,4 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-14 (5 мг, выход: 36%). LC-MS m/z = 589,3 [M+1]+.
A-10-15: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-4-цианотетрагидро-2H-пиран-4-карбоксамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 4-цианотетрагидро-2H-пиран-4-карбоновую кислоту (3,7 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-15 (6 мг, выход: 39%). LC-MS m/z = 645,0 [M+1]+.
A-10-16: 1-((4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамоил)циклопропан-1-карбоновая кислота
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и циклопропан-1,1-дикарбоновой кислоты (3 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-16 (6 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 555,3 [M+1]+.
A-10-17: 4-(8-амино-3-(4-бензамидобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и бензойную кислоту (3 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-17 (8 мг, выход: 53%). LC-MS m/z = 612,2 [M+1]+.
A-10-18: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)пиколинамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-пиколиновую кислоту (3 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-18 (9 мг, выход: 60%). LC-MS m/z = 613,2 [M+1]+.
A-10-19: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)никотинамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и никотиновую кислоту (3 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-19 (8 мг, выход: 54%). LC-MS m/z = 613,2 [M+1]+.
A-10-20: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-2-метоксибензамид
Соединение A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и 2-метоксибензойную кислоту (3,6 мг, 0,024 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-20 (8 мг, выход: 52%). LC-MS m/z = 642,3 [M+1]+.
A-10-21: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)фуран-2-карбоксамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и фуран-2-карбоновой кислоты (2,7 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-21 (6 мг, выход: 43%). LC-MS m/z = 602,2 [M+1]+.
A-10-22: N-(4-(8-амино-1-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)тиазол-2-карбоксамид
Раствор соединения A-9 (15 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,12 мг, 0,024 ммоль), DIEA (16 мг, 0,12 ммоль) и тиазол-2-карбоновой кислоты (3 мг, 0,024 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-10-22 (6 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 619,2 [M+1]+.
Путь синтеза соединения A-13-n
A-11: бензил(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор бензил(4-(8-амино-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (A-4) (300 мг, 0,6 ммоль), 4-феноксибензойной кислоты (158 мг, 0,738 ммоль), Pd[PPh3]4 (69 мг, 0,06 ммоль) и Cs2O3 (239 мг, 0,738 ммоль) в смешанном растворителе DME:H2O (2,5 мл:0,5 мл) нагревали до 80°C и перемешивали на протяжении ночи. Затем смесь концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией с получением искомого соединения A-11 (268 мг, выход: 82%).
A-12: 3-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-8-амин
Раствор соединения A-11 (260 мг, 0,48 ммоль) в смешанном растворителе DCM/TFA (10 мл:10 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение 18 ч. После этого смесь упаривали до сухого состояния, добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали. Остаток растворяли в DCM (30 мл), а затем данный раствор добавляли к раствору HCl в диоксане. После этого смесь упаривали до сухого состояния, затем к нему добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали с последующим добавлением простого изопропилового эфира (30 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь подвергали фильтрации и промывали простым изопропиловым эфиром (10 мл × 2) с получением гидрохлорида искомого продукта A-12 (200 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
A-13-1: N-(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-2-гидрокси-2-метилпропанамид
Соединение A-12 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 2-гидрокси-2-пропионовой кислоты (3 мг, 0,029 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-13-1 (8 мг, выход: 57%). LC-MS m/z = 498,4 [M+1]+.
A-13-2: N-(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-3-метоксипропанамид
Соединение A-12 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 3-метоксипропионовую кислоту (3 мг, 0,029 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем данную смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-13-2 (6 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 498,7 [M+1]+.
A-13-3: N-(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид
Раствор соединения A-12 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (3,4 мг, 0,029 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-13-3 (8 мг, выход: 53%). LC-MS m/z = 510,2 [M+1]+.
A-13-4: N-(4-(8-амино-1-(4-феноксифенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-2-морфолиноацетамид
Раствор соединения A-12 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 2-морфолиноуксусной кислоты (4,2 мг, 0,029 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-13-4 (9 мг, выход: 58%).
Путь синтеза соединения A-16-n
A-14: бензил (4-(8-амино-1-(4-((5-фтор-2-метоксибензамидо)метил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор бензил(4-(8-амино-1-йодимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамата (A-4) (300 мг, 0,6 ммоль), 5-фтор-2-метокси-N-(4-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)бензамида (II-12) (284 мг, 0,738 ммоль), Pd[PPh3]4 (69 мг, 0,06 ммоль) и Cs2O3 (239 мг, 0,738 ммоль) в смешанном растворителе DME:H2O (2,5 мл:0,5 мл) нагревали до 80°C и перемешивали на протяжении ночи. Затем смесь концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией с получением искомого соединения A-14 (285 мг, выход: 75%).
A-15: N-(4-(8-амино-3-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-5-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-14 (280 мг, 0,44 ммоль) в смешанном растворителе DCM/TFA (10 мл:10 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение 18 ч. После этого смесь упаривали до сухого состояния, добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали. Остаток растворяли в DCM (30 мл), а затем данный раствор добавляли к раствору HCl в диоксане (10 мл). После этого смесь упаривали до сухого состояния, затем к нему добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали с последующим добавлением простого изопропилового эфира (30 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь подвергали фильтрации и промывали простым изопропиловым эфиром (10 мл × 2) с получением гидрохлорида искомого продукта A-15 (180 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
A-16-1: N-(4-(8-амино-3-(4-(2-гидрокси-2-метилпропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-5-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-15 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 2-гидрокси-2-пропионовой кислоты (2,6 мг, 0,025 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-16-1 (6 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 587,3 [M+1]+.
A-16-2: N-(4-(8-амино-3-(4-(3-метоксипропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-5-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-15 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 3-метоксипропионовой кислоты (2,6 мг, 0,025 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-16-2 (8 мг, выход: 40%). LC-MS m/z = 587,3 [M+1]+.
A-16-3: N-(4-(8-амино-1-(4-((5-фтор-2-метоксибензамидо)метил)фенил)имидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид
Раствор соединения A-15 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (2,9 мг, 0,025 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (5 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-16-3 (10 мг, выход: 66%). LC-MS m/z = 599,3 [M+1]+.
A-16-4: N-(4-(8-амино-3-(4-(2-морфолиноацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)имидазо[1,5-a]пиразин-1-ил)бензил)-5-фтор-2-метоксибензамид
Раствор соединения A-15 (15 мг, 0,025 ммоль), HATU (9,3 мг, 0,025 ммоль), DIEA (19 мг, 0,15 ммоль) и 2-морфолиноуксусной кислоты (3,6 мг, 0,025 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта A-16-4 (9 мг, выход: 57%). LC-MS m/z = 628,3 [M+1]+.
Путь синтеза соединения B-6-n
B-4: бензил(4-(4-амино-5-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор соединения B-3 (200 мг, 0,4 ммоль), (4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-3) (152 мг, 0,49 ммоль), Pd[PPh3]4 (46 мг, 0,04 ммоль) и Cs2CO3 (159 мг, 0,49 ммоль) в смешанном растворителе DME:H2O (2,5 мл:0,5 мл) нагревали до 80°C и перемешивали на протяжении ночи. Смесь концентрировали, а остаток очищали колоночной хроматографией (метанол/DCM = 1:40) с получением искомого соединения B-4 (187 мг, выход: 73%).
B-5: 4-(4-амино-7-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения B-4 (187 мг, 0,29 ммоль) в смешанном растворителе DCM/TFA (10 мл:10 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение 18 ч. После этого смесь упаривали до сухого состояния, добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали. К остатку добавляли DCM (30 мл), а затем данную смесь добавляли к раствору HCl в диоксане (10 мл). После этого смесь упаривали до сухого состояния, затем снова добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь упаривали до сухого состояния с последующим добавлением простого изопропилового эфира (30 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь подвергали фильтрации и промывали простым изопропиловым эфиром (10 мл × 2) с получением гидрохлорида искомого продукта B-5, который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
B-6-1: 4-(4-амино-7-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения B-5 (19 мг, 0,031 ммоль), HATU (12 мг, 0,031 ммоль), DIEA (24 мг, 0,19 ммоль) и бут-2-иновой кислоты (2,6 мг, 0,031 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта B-6-1 (11 мг, выход: 59%). LC-MS m/z = 574,3 [M+1]+.
B-6-2: 4-(4-амино-7-(4-(2-гидрокси-2-метилпропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения B-5 (19 мг, 0,031 ммоль), HATU (12 мг, 0,031 ммоль), DIEA (24 мг, 0,19 ммоль) и 2-гидрокси-2-метилпропионовой кислоты (3,2 мг, 0,031 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта B-6-2 (9 мг, выход: 49%). LC-MS m/z = 594,2 [M+1]+.
B-6-3: 4-(4-амино-7-(4-(3-метоксипропанамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения B-5 (19 мг, 0,031 ммоль), HATU (12 мг, 0,031 ммоль), DIEA (24 мг, 0,19 ммоль) и 3-метоксипропионовой кислоты (3,2 мг, 0,031 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта B-6-3 (12 мг, выход: 66%). LC-MS m/z = 594,2 [M+1]+.
B-6-4: N-(4-(4-амино-5-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид
Раствор соединения B-5 (19 мг, 0,031 ммоль), HATU (12 мг, 0,031 ммоль), DIEA (24 мг, 0,19 ммоль) и 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (3,6 мг, 0,031 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта B-6-4 (12 мг, выход: 64%). LC-MS m/z = 606,3 [M+1]+.
B-6-5: 4-(4-амино-7-(4-(2-морфолиноацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения B-5 (19 мг, 0,031 ммоль), HATU (12 мг, 0,031 ммоль), DIEA (24 мг, 0,19 ммоль) и 2-морфолиноуксусной кислоты (4,5 мг, 0,031 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта B-6-5 (11 мг, выход: 58%). LC-MS m/z = 635,2 [M+1]+.
Путь синтеза соединения C-7-n
C-5: бензил(4-(6-амино-8-оксо-7-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)-7,8-дигидро-9H-пурин-9-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Раствор соединения C-4 (100 мг, 0,25 ммоль), (4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)бориновой кислоты (II-3) (160 мг, 0,5 ммоль), ацетaта меди (60 мг, 0,3 ммоль) и Et3N (30 мг, 0,3 ммоль) в DCM (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем смесь выливали в воду (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (10 мл × 2). Органическую фазу отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (EA/PE = 1:1 – EA) с получением искомого соединения C-5 (47 мг, выход: 29%). LC-MS m/z = 657,3 [M-1]-.
C-6: 4-(6-амино-9-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-8-оксо-8,9-дигидро-7H-пурин-7-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения C-5 (45 мг, 0,09 ммоль) в смешанном растворителе DCM/TFA (10 мл:10 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение 18 ч. После этого смесь упаривали до сухого состояния, добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали. Остаток растворяли в DCM (30 мл), а затем данный раствор добавляли к раствору HCl в диоксане (10 мл). После этого смесь упаривали до сухого состояния, затем к нему добавляли DCM (20 мл × 2) и полученную в результате смесь концентрировали с последующим добавлением простого изопропилового эфира (30 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь подвергали фильтрации и промывали простым изопропиловым эфиром (10 мл × 2) с получением гидрохлорида искомого продукта C-6, который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
C-7-1: 4-(6-амино-9-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-8-оксо-8,9-дигидро-7H-пурин-7-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения C-6 (13 мг, 0,022 ммоль), HATU (9 мг, 0,022 ммоль), DIEA (16,8 мг, 0,13 ммоль) и бут-2-иновой кислоты (1,8 мг, 0,022 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта C-7-1 (5 мг, выход: 38%). LC-MS m/z = 591,2 [M+1]+.
C-7-2: 4-(6-амино-9-(4-(2-морфолиноацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-8-оксо-8,9-дигидро-7H-пурин-7-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Раствор соединения C-6 (13 мг, 0,022 ммоль), HATU (9 мг, 0,022 ммоль), DIEA (16,8 мг, 0,13 ммоль) и 2-морфолиноуксусной кислоты (3,2 мг, 0,022 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем смесь выливали в воду (1 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (5 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, отделяли, сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и упаривали до сухого состояния. Остаток очищали колоночной хроматографией (DCM/MeOH = 20:1) с получением продукта C-7-2 (6 мг, выход: 42%). LC-MS m/z = 652,2 [M+1]+.
Путь синтеза соединения D-8-n
D-6: бензил(4-(4-амино-3-(4-((4-(трифторметил)пиридин-2-ил)карбамоил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)карбамат
Смешанный раствор D-5 (96 мг, 0,19 ммоль), II-3 (73 мг, 0,234 ммоль), Pd[PPh3]4 (22 мг, 0,019 ммоль) и Cs2CO3 (76,4 мг, 0,234 ммоль) в DME/H2O (9 мл/1 мл) продували с помощью N2 в течение 1 минуты для удаления кислорода, а затем нагревали до 80°C в герметично закрытой пробирке и перемешивали в течение 12 ч. После этого смесь охлаждали, реакцию гасили солевым раствором (20 мл) и для экстракции добавляли EA (50 мл × 2). Органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: PE/EA = 1:1) с получением искомого продукта D-6 (42 мг, 34,4%). LC-MS m/z = 643,2 [M+1]+.
D-7: 4-(4-амино-1-(4-аминобицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Смесь D-6 (42 мг, 0,065 ммоль) в TFA/DCM (1 мл/1 мл) перемешивали при 60°C в течение 12 ч. После этого смесь охлаждали, удаляли растворитель путем упаривания. Затем добавляли раствор HCl в диоксане (2 мл) и полученную в результате смесь перемешивали в течение 10 минут и концентрировали. К остатку добавляли простой изопропиловый эфир (10 мл), перемешивали и концентрировали. Описанную выше процедуру повторяли два раза. Твердое вещество подвергали фильтрации, промывали простым изопропиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида искомого продукта D-7 (30 мг, 75%).
D-8-1: 4-(4-амино-1-(4-(бут-2-инамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Смешанный раствор D-7 (15 мг, 0,025 ммоль), бут-2-иновой кислоты (2 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,1 мг, 0,024 ммоль) и DIEA (0,041 мл, 0,241 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционный раствор разводили с помощью EA (30 мл) и промывали солевым раствором, а органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: PE/EA = 1:1) с получением искомого продукта D-8-1 (12 мг, 86%). LC-MS m/z = 575,1 [M+1]+.
D-8-2: 4-(4-амино-1-(4-(2-морфолиноацетамидо)бицикло[2.2.1]гептан-1-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-ил)-N-(4-(трифторметил)пиридин-2-ил)бензамид
Смешанный раствор D-7 (15 мг, 0,025 ммоль), 2-морфолиноуксусной кислоты (3,5 мг, 0,024 ммоль), HATU (9,1 мг, 0,024 ммоль) и DIEA (0,041 мл, 0,241 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционный раствор разводили с помощью EA (30 мл) и промывали солевым раствором, а органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, подвергали фильтрации и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: PE/EA = 1:1) с получением искомого продукта D-8-2 (8,5 мг, 56%). LC-MS m/z = 636,3 [M+1]+.
1. Ингибирующая активность in vitro в отношении BTK(wt)/BTK(C481S) (определение значения IC50)
(1) Способ
Раствор субстрата готовили путем добавления натриевой соли субстрата поли(Glu, Tyr) (Sigma Aldrich, Сент-Луис, Миссури) к реакционному буферу для субстрата (20 мМ Hepes (pH 7,5), 10 мМ MgCl2, 1 мМ EGTA, 0,02% Brij35, 0,02 мг/мл BSA, 0,1 мМ Na3VO4, 2 мМ DTT и 1% DMSO) (конечная концентрация субстрата в реакционном растворе составляла 0,2 мкМ). Тестируемое соединение составляли в виде маточных растворов с концентрацией 10 мМ со 100% DMSO и для 10 доз производили 3-кратное серийное разведение в 384-луночном микропланшете с LDV (нижним недействующим объемом) из циклоолефинового сополимера. Киназу BTK(wt) или BTK(C481S) (рекомбинантный человеческий полноразмерный белок с гистидиновой меткой, экспрессированный в клетках насекомых, Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) добавляли к раствору субстрата и осторожно перемешивали (конечная концентрация BTK в реакционном растворе составляла 8 нМ). Затем к реакционной смеси с киназой добавляли тестируемое соединение в 100% DMSO с помощью технологии акустического переноса жидкости (Echo 550; нанолитровый диапазон) (Labcyte Inc, Саннивейл, Калифорния) и инкубировали в течение 20 минут при комнатной температуре. Для инициации реакции к реакционной смеси добавляли 33P-ATP (удельная активность 10 мкКи/мкл) с последующей инкубацией при комнатной температуре в течение 2 часов. Небольшую часть реакционной смеси капали на ионообменную фильтровальную бумагу Р-81 (Whatman). После отмывания несвязанного фосфата от фильтровальной бумаги 0,75% фосфатным буфером (три раза) и сушки измеряли оставшуюся радиоактивность на фильтровальной бумаге. Киназную активность выражали как процент оставшейся киназной активности в тестируемом образце к киназной активности в холостом контроле в виде наполнителя (диметилсульфоксида). Значения IC50 рассчитывали путем аппроксимации кривой из полученных данных с использованием Prism (программного обеспечения GraphPad).
(2) Результаты
По сравнению с ингибитором BTK второго поколения акалабрутинибом, большинство раскрываемых в настоящем документе соединений обладали более сильной ингибирующей способностью в отношении активности фермента BTK(wt) дикого типа. Что еще более важно, большинство соединений характеризовались более высокой ингибирующей активностью в отношении мутантов BTK(C481S), а для некоторых даже наблюдали ингибирующую активность менее 0,1 нМ.
Таблица 1. Ингибирование активности фермента BTK(wt)/BTK(C481S) (A≤0,1 нМ; 0,1 нМ<B≤1 нМ; 1 нМ<C≤10 нМ; 10 нМ<D≤50 нМ)
| Номер соединения | IC50 BTK(wt) |
IC50 BTK(C481S) |
Номер соединения | IC50 BTK(wt) |
IC50 BTK(C481S) |
| A-7-2 | C | B | A-7-3 | B | B |
| A-7-5 | C | B | A-7-9 | C | B |
| A-7-12 | C | B | A-7-14 | C | B |
| A-10-1 | C | B | A-10-3 | C | B |
| A-10-5 | C | A | A-10-6 | C | A |
| A-10-7 | C | B | A-10-8 | C | A |
| A-10-10 | C | A | A-10-11 | C | B |
| A-10-12 | C | B | A-10-13 | C | A |
| A-10-14 | C | B | A-10-15 | C | B |
| A-10-17 | D | C | A-10-18 | D | C |
| A-10-19 | D | C | A-10-20 | D | C |
| A-10-21 | C | C | A-10-22 | C | C |
| A-13-1 | C | C | A-13-2 | C | B |
| A-13-3 | C | C | A-13-4 | D | C |
| A-16-1 | D | C | A-16-2 | C | C |
| A-16-3 | C | C | A-16-4 | C | C |
| B-6-1 | C | C | B-6-2 | D | C |
| B-6-3 | C | C | B-6-4 | C | C |
| B-6-5 | C | C | C-7-1 | C | C |
| C-7-2 | C | B | Акалабру-тиниб | 18,6 нM | 815 нM |
2. Эксперимент по ингибированию пролиферации опухолевых клеток in vitro
(1) Способ
• Линию опухолевых клеток (TMD-8/OCY-LY10) суспендировали в RPMI1640 + FBS10% и культивировали в термостате (37°C, 5% CO2). Клетки периодически пересевали, а клетки для посева собирали в фазе логарифмического роста.
• Проводили окрашивание клеток трипановым синим и подсчитывали жизнеспособные клетки.
• Концентрацию клеток доводили до 7000 клеток/лунка с помощью среды.
• 90 мкл клеточной суспензии вносили в 96-луночный планшет, а в холостые контрольные лунки вносили культуральную среду без клеток.
• Клетки в 96-луночном планшете инкубировали на протяжении ночи в термостате (37°C, 5% CO2, 100% относительная влажность).
• Подготовка планшетов для хранения с 400× концентрацией соединений: тестируемые соединения и эталонное лекарственное средство растворяли в DMSO и 3× разводили от наивысшей концентрации (400 мкМ) до наиболее низкой концентрации (0,61 мкМ).
• Приготовление рабочих растворов с 10× концентрацией соединения: 78 мкл среды для культивирования клеток вносили в 96-луночный планшет с V-образным дном и при помощи пипетки переносили 2 мкл соединения из планшета для хранения с 400× концентрацией соединений в 96-луночный планшет. В контрольные лунки с наполнителем и в холостые контрольные лунки добавляли 2 мкл DMSO. После добавления соединения или DMSO смесь тщательно перемешивали с помощью пипетки.
• Добавление соединения: 10 мкл рабочего раствора с 10× концентрацией соединения (как показано в таблице 1) вносили в планшет для культивирования клеток. 10 мкл смеси DMSO и раствора культуры клеток вносили в контрольные лунки с наполнителем и в холостые контрольные лунки. Конечная концентрация DMSO составляла 0,25%.
• 96-луночный планшет с клетками снова помещали в термостат на 72 часа культивирования.
• Размораживали буфер CellTiter-Glo и оставляли его отстаиваться до комнатной температуры.
• Субстрат CellTiter-Glo оставляли отстаиваться до комнатной температуры.
• С целью приготовления рабочего раствора CellTiter-Glo в колбу с субстратом CellTiter-Glo добавляли буфер CellTiter-Glo для растворения.
• Колбу подвергали медленному встряхиванию на вортексе до полного растворения субстрата.
• Вынимали планшет для культивирования клеток и оставляли на 30 минут для уравновешивания до комнатной температуры.
• В каждую лунку вносили 50 мкл (что равно половине объема среды для культивирования клеток в каждой лунке) рабочего раствора CellTiter-Glo. Планшет с клетками заворачивали в алюминиевую фольгу для защиты от света.
• Планшет встряхивали на орбитальном шейкере в течение 2 минут для индукции лизиса клеток.
• Планшет оставляли на 10 минут отстояться в условиях комнатной температуры для стабилизации люминесцентных сигналов.
• Люминесцентные сигналы детектировали на планшет-ридере 2104 EnVision.
• Анализ данных: степень ингибирования (IR) тестируемого соединения рассчитывали по следующей формуле: IR (%) = (1 – (RLU соединения – RLU холостого контроля) / (RLU контрольного наполнителя – RLU холостого контроля)) × 100%. Значения степени ингибирования соединениями в различных концентрациях рассчитывали в Excel, после чего строили кривые ингибирования и рассчитывали значения IC50 с помощью GraphPad Prism.
(2) Результаты
В эксперименте по ингибированию пролиферации клеток В-клеточной лимфомы TMD-8 и OCI-LY10 соединение A-10-10 и ибрутиниб характеризовались сильной ингибирующей активностью в отношении пролиферации опухолевых клеток.
Таблица 2. Ингибирующая активность соединения A-10-10/ибрутиниба в отношении пролиферации опухолевых клеток
| Номер соединения | IC50 (нМ) | |
| TMD-8 | OCI-LY10 | |
| A-10-10 | 2,9 | 10,3 |
| Ибрутиниб | 0,4 | 1,7 |
3. Фармакокинетическое исследование
(1) Способ
Самцов крыс SD не кормили на протяжении ночи перед тестом. Каждое из тестируемых лекарственных средств суспендировали в растворе 0,5% метилцеллюлозы (MC) и 0,1% SDS в деионизированной воде (вес/вес/объем) и внутрижелудочно вводили суспензию в количестве 5 мл/кг, в каждом случае с концентрацией 1 мг/мл. Через 15 минут, 30 минут, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов и 24 часа после введения из орбитального венозного сплетения животных брали примерно 0,4 мл цельной крови, а затем помещали ее в пробирки с гепариновым антикоагулянтом. В каждый момент времени брали пробы у трех животных, а затем их умерщвляли и за счет этого сбор проб производили у разных особей. Образец цельной крови центрифугировали в течение 15 минут и центрифугировали в условиях 4°C/4200 об./мин в течение 5 минут. Все образцы плазмы до анализа хранили в холодильнике при температуре –80±15°C. Перед анализом образца проводили LC-MS/MS-анализ (тандемную масс-спектрометрию UPLC-Xevo TQD Waters I) с целью выявления соединений. Собранную плазму анализировали количественно, данные о концентрации в плазме крови в зависимости от времени у животных анализировали с помощью программного обеспечения WinNonlin (профессиональное издание, версия 5.2), для анализа концентрации использовали некомпартментную модель и рассчитывали фармакокинетические параметры тестируемых соединений.
Трех взрослых самцов биглей не кормили на протяжении ночи перед тестом. Каждое из тестируемых лекарственных средств суспендировали в растворе 0,5% метилцеллюлозы (MC) и 0,1% SDS в деионизированной воде (вес/вес/объем) и внутрижелудочно вводили суспензию в количестве 5 мл/кг, в каждом случае с концентрацией 1 мг/мл. Кровь брали через 15 минут, 30 минут, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов и 24 часа после введения. Животных подвергали легкой анестезии хлоральгидратом, и из вены передних конечностей брали примерно 0,5 мл цельной крови, используя стеклянную пробирку для забора крови, и помещали в пробирку с гепариновым антикоагулянтом. Образец центрифугировали в условиях 4°C/4200 об./мин в течение 5 минут. Все образцы плазмы до анализа хранили в холодильнике при температуре –80±15°C. Перед анализом образца проводили LC-MS/MS-анализ (тандемную масс-спектрометрию UPLC-Xevo TQD Waters I) с целью выявления соединений. Собранную плазму анализировали количественно, данные о концентрации в плазме крови в зависимости от времени у животных анализировали с помощью программного обеспечения WinNonlin (профессиональное издание, версия 5.2), для анализа концентрации использовали некомпартментную модель и рассчитывали фармакокинетические параметры тестируемых соединений.
(1) Результаты
У соединения A-10-10 (вводимого внутрижелудочно, 5 мг/кг) наблюдали хорошее всасывание с Cmax 8323 нг/мл и 641 нг/мл у крыс и биглей соответственно, и оно имело довольно высокую концентрацию в крови (AUC0-INF = 73318 ч*нг/мл и 14867 ч*нг/мл).
Таблица 3. Фармакокинетические данные для крыс/биглей (самцов), подвергнутых внутрижелудочному введению (5 мг/кг) (t1/2: период полувыведения; Tmax: время пиковой концентрации; Cmax: максимальная концентрация в плазме; AUC0-INF: область под кривой зависимости времени 0-INF от концентрации)
| PK-параметры | Единица измерения | Соединение A-10-10 (перорально, 5 мг/кг) | |
| Крыса | Собака | ||
| t1/2 | ч | 3,74 | 14,2 |
| Tmax | ч | 2,00 | 8,00 |
| Cmax | нг/мл | 8323 | 641 |
| AUC0-INF | ч*нг/мл | 73318 | 14867 |
4. Эксперимент по ингибированию pBTK на клетках HEK293, трансфицированных посредством BTK(wt) и BTK(C481S)
Основная причина лекарственной устойчивости к ибрутинибу заключается в мутации C481S у киназы BTK, и для преодоления лекарственной устойчивости к ибрутинибу большое значение имеет разработка ингибитора BTK, который может эффективно ингибировать клетки с модификацией BTK(C481S).
(1) Способ
• Эмбриональные клетки почки человека HEK293 временно трансфицировали вектором с человеческой полноразмерной BTK или BTK(C481S).
• Клетки распределяли в 96-луночном планшете с заранее определенной плотностью клеток.
• Каждое тестируемое соединение подвергали 3-кратному серийному разведению восемь раз с помощью 100% DMSO.
• Затем соединение разводили в среде для культивирования тканей до 10-кратной конечной аналитической концентрации и 5% DMSO.
• К клеткам в 96-луночном планшете (10-кратное разведение в культуральной среде) добавляли соединение, и его конечной концентрацией была 1× концентрация соединения и 0,5% DMSO. В случае положительных (с высоким уровнем сигнала) контролей клетки обрабатывали только 0,5% DMSO. В случае отрицательных (с низким уровнем сигнала) контролей клетки обрабатывали 20 мкМ ибрутинибом, а конечная концентрация составляла 0,5% DMSO.
• Клетки инкубировали с соединениями в течение 2 ч при 37°C.
• Клетки лизировали, а лизат переносили в планшет для ИФА с предварительно нанесенным покрытием антитела, захватывающего субстрат (человеческую BTK или BTK(C481S)).
• Планшет промывали, а затем инкубировали с антителом, связанным с HRP, для детекции общего фосфорилирования тирозина.
• Промывали планшет, а затем вносили субстрат для HRP. Поглощение считывали на 450 нм.
• Исходя из полученных значений оптической плотности положительных и отрицательных контролей, рассчитывали %-значение ингибирования по следующей формуле: (%INH = ((положительный контроль - образец) / (положительный контроль - отрицательный контроль)) × 100.
• Значение Z' рассчитывали по следующей формуле: 1 – ((3 × стандартное отклонение положительного + 3 × стандартное отклонение отрицательного) / (среднее положительного – среднее отрицательного)).
• С помощью GraphPad Prism строили график зависимости логарифма %-значения ингибирования от значения концентрации соединения.
• Значения IC50 определяли после экстраполяции для построения сигмоидальной кривой зависимости ответа от дозы.
(2) Результаты
Мутация C481S снижала ингибирование ибрутинибом фосфорилирования BTK у клеток HEK293 с 0,021 мкМ до 1,58 мкМ, тогда как раскрываемое в настоящем документе соединение A-10-10 оказывало сильное ингибирование (0,077 мкМ) в отношении клеток HEK293, трансфицированных посредством BTK(wt), и еще более сильное ингибирование (0,066 мкМ) в отношении клеток HEK293, трансфицированных посредством BTK(C481S).
Таблица 4. Значения ингибирования pBTK (IC50) в отношении клеток HEK293, трансфицированных посредством BTK(wt) и BTK(C481S)
| Ингибиторы | Трансфицированы в клетки HEK293 | |
| IC50 pBTK BTK(wt) (мкМ) | IC50 pBTK BTK(C481S) (мкМ) | |
| A-10-10 | 0,077 | 0,063 |
| Ибрутиниб | 0,021 | 1,58 |
1. Фармакодинамический эксперимент 1
(1) Способ
Самок мышей CB17/SCID с серьезным иммунодефицитом приобретали у компании Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. и разводили в помещениях для SPF-животных (без специфической патогенной микрофлоры). Клетки OCI-LY10 человека (Shanghai Junrui-UFBN0102) культивировали в культуральной среде RPMI 1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, 100 ед./мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, методом монослойной культуры in vitro в термостате (37°C, 5% CO2). Для пересева два раза в неделю производили стандартную обработку. При насыщении клеток до 80-90% и необходимом их количестве клетки собирали и подсчитывали. В правую часть спины каждой мыши подкожно инокулировали 0,2 мл (1×107) клеток OCI-LY10 (вместе с матригелем в объемном соотношении 1:1), и размер опухоли можно было измерять приблизительно через одну неделю после инокуляции. Размер опухоли измеряли с помощью штангенциркуля, а объем опухоли рассчитывали по следующей формуле: объем опухоли = (длина × ширина2) / 2. При достижении среднего объема опухоли 109 мм3 мышей разделяли на четыре группы (8 мышей в группе) для введения, т. е. на контрольную группу для введения наполнителя (5% DMSO + 20% HP-β-CD), группу внутрижелудочного введения ибрутиниба (25 мг/кг, один раз в сутки) и группу внутрижелудочного введения соединения A-10-10 (25 мг/кг, 50 мг/кг, два раза в сутки). Ибрутиниб или соединение A-10-10 растворяли в 5% DMSO + 20% HP-β-CD и вводили внутрижелудочно в количестве 10 мл/кг в течение 28 последовательных суток.
(2) Результаты
В случае соединения A-10-10 и ибрутиниба наблюдали чрезвычайно сильную противоопухолевую активность на ксенотрансплантатной модели опухоли OCI-LY10 (фиг. 1). Соединение A-10-10, вводимое внутрижелудочно (доза составляла 25 мг/кг, два раза в сутки; 50 мг/кг, два раза в сутки), могло значительно ингибировать рост диффузного штамма OCI-LY10 клеток крупноклеточной В-клеточной лимфомы (TGI = 110%, 110%; p<0,001, p<0,001). Через 21 сутки после введения все ксенотрансплантатные опухоли OCI-LY10 полностью исчезали в группе, получавшей 50 мг/кг. Через 28 суток после введения все ксенотрансплантатные опухоли OCI-LY10 также полностью исчезали в группе, получавшей 25 мг/кг. На 28-е сутки значение TGI у группы, получавшей контрольное соединение ибрутиниб в количестве 25 мг/кг, составляло 94% (p<0,001).
Влияние тестируемого вещества на массу тела у мышей с опухолью показано на фиг. 1. Мыши с опухолями демонстрировали хорошую переносимость тестируемого лекарственного средства А-10-10 при всех дозировках, и во всех группах обработки не наблюдали значимой потери массы тела.
2. Фармакодинамический эксперимент 2
(1) Способ
Самок мышей CB17/SCID с серьезным иммунодефицитом приобретали у компании Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. и разводили в помещениях для SPF-животных (без специфической патогенной микрофлоры). Клетки TMD-8 человека (Shanghai Junrui-UFBN1682) культивировали в культуральной среде RPMI 1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, 100 ед./мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, методом монослойной культуры in vitro в термостате (37°C, 5% CO2). Для пересева два раза в неделю производили стандартную обработку. При насыщении клеток до 80-90% и необходимом их количестве клетки собирали и подсчитывали. В правую часть спины каждой мыши подкожно инокулировали 0,2 мл (1×107) клеток TMD-8 (вместе с матригелем в объемном соотношении 1:1), и размер опухоли можно было измерять приблизительно через одну неделю после инокуляции. Размер опухоли измеряли с помощью штангенциркуля, а объем опухоли рассчитывали по следующей формуле: объем опухоли = (длина × ширина2) / 2. При достижении среднего объема опухоли 107 мм3 мышей разделяли на четыре группы (8 мышей в группе) для введения, т. е. на контрольную группу для введения наполнителя (5% DMSO + 20% HP-β-CD), группу внутрижелудочного введения ибрутиниба (25 мг/кг, один раз в сутки) и группу внутрижелудочного введения соединения A-10-10 (25 мг/кг, 50 мг/кг, два раза в сутки). Ибрутиниб или соединение A-10-10 растворяли в 5% DMSO + 20% HP-β-CD и вводили внутрижелудочно в количестве 10 мл/кг в течение 27 последовательных суток.
(2) Результаты
В случае соединения A-10-10 и ибрутиниба наблюдали чрезвычайно сильную противоопухолевую активность на ксенотрансплантатной модели опухоли TMD-8 (фиг. 2). Соединение A-10-10, вводимое внутрижелудочно (доза составляла 25 мг/кг, два раза в сутки; 50 мг/кг, два раза в сутки), могло значительно ингибировать рост диффузного штамма TMD-8 клеток крупноклеточной В-клеточной лимфомы (TGI = 94%, 104%; p<0,001, p<0,001). Через 27 суток после введения 5/8 ксенотрансплантатных опухолей TMD-8 исчезали в группе, получавшей 50 мг/кг. Значение TGI у группы, получавшей контрольное соединение ибрутиниб в количестве 25 мг/кг, составляло 90% (p<0,001).
Влияние тестируемого вещества на массу тела у мышей с опухолью показано на фиг. 2. Мыши с опухолями демонстрировали хорошую переносимость тестируемого лекарственного средства А-10-10 при всех дозировках, и во всех группах обработки не наблюдали значимой потери массы тела.
Claims (43)
1. Соединение с формулой I
или его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А выбрано из одной из следующих структур:
при этом R5 представляет собой водород;
кольцо В представляет собой
кольцо С представляет собой одну из следующих структур:
L представляет собой одну из следующих структур:
R1 представляет собой
R2 выбран из Н.
2. Соединение, выбранное из одной из следующих структур:
3. Применение соединения по п. 1 или 2 при производстве лекарственного препарата для предупреждения развития или лечения гетероиммунного заболевания.
4. Применение по п. 3, где гетероиммунное заболевание связано с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона.
5. Применение по п. 3, где гетероиммунное заболевание связано с аберрантной пролиферацией В-клеток.
6. Применение по п. 3, где гетероиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание или астму.
7. Применение соединения по п. 1 или 2 при производстве лекарственного препарата для предупреждения развития или лечения аутоиммунного заболевания.
8. Применение по п. 7, где аутоиммунное заболевание связано с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона.
9. Применение по п. 7, где аутоиммунное заболевание связано с аберрантной пролиферацией В-клеток.
10. Применение по п. 7, где аутоиммунное заболевание представляет собой красную волчанку, хроническую лимфоцитарную лимфому, диффузную крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому или хронический лимфолейкоз.
11. Применение соединения по п. 1 или 2 при производстве лекарственного препарата для предупреждения развития или лечения рака.
12. Применение по п. 11, где рак связан с чрезмерной активностью тирозинкиназы Брутона.
13. Применение по п. 11, где рак связан с аберрантной пролиферацией В-клеток.
14. Фармацевтическая композиция для предупреждения развития или лечения гетероиммунного заболевания, содержащая эффективное количество соединения по п. 1 или 2.
15. Фармацевтическая композиция для предупреждения развития или лечения аутоиммунного заболевания, содержащая эффективное количество соединения по п. 1 или 2.
16. Фармацевтическая композиция для предупреждения развития или лечения рака, содержащая эффективное количество соединения по п. 1 или 2.
17. Фармацевтический состав для предупреждения развития или лечения гетероиммунного заболевания, содержащий терапевтически эффективное количество соединения по п. 1 или 2 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
18. Фармацевтический состав для предупреждения развития или лечения аутоиммунного заболевания, содержащий терапевтически эффективное количество соединения по п. 1 или 2 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
19. Фармацевтический состав для предупреждения развития или лечения рака, содержащий терапевтически эффективное количество соединения по п. 1 или 2 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
20. Способ получения соединения по п. 1 или 2, предусматривающий: (S1) осуществление реакции сочетания Сузуки соединения IIIA с бороновой кислотой или боратом II с получением соединения IV; (S2) превращение соединения IV в гидрохлорид соединения V путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; и (S3) сочетание соединения V с органической кислотой с получением I по п. 1:
где X=галоген, a R2, R1, L, кольцо А, кольцо В и кольцо С являются такими, как описано в п. 1 или 2.
21. Способ получения соединения по п. 1 или 2, предусматривающий: (А1) превращение соединения IIIA в гидрохлорид соединения VI путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; (А2) сочетание соединения VI с органической кислотой с получением соединения VII; и (A3) осуществление реакции сочетания Сузуки соединения VII с бороновой кислотой или боратом II с получением соединения I по п. 1:
где X=галоген, a R2, R1, L, кольцо А, кольцо В и кольцо С являются такими, как описано в п. 1 или 2.
22. Способ получения соединения по п. 1 или 2, предусматривающий: (В1) осуществление реакции сочетания Чана-Лама-Эванса соединения IIIB с бороновой кислотой II в присутствии катализа ацетатом меди с получением соединения VIII; (В2) превращение соединения VIII в гидрохлорид соединения IX путем удаления бензилоксикарбонила трифторуксусной кислотой; и (В3) сочетание соединения IX с органической кислотой с получением соединения I по п. 1;
где R2, R1, L, кольцо А, кольцо В и кольцо С являются такими, как описано в п. 1 или 2.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811153123.3 | 2018-09-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021110593A RU2021110593A (ru) | 2022-10-31 |
| RU2809188C2 true RU2809188C2 (ru) | 2023-12-07 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016109222A1 (en) * | 2014-12-31 | 2016-07-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Tertiary alcohol imidazopyrazine btk inhibitors |
| WO2016109223A1 (en) * | 2014-12-31 | 2016-07-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Benzamide imidazopyrazine btk inhibitors |
| EA201692176A1 (ru) * | 2014-04-29 | 2017-03-31 | Чжэцзян Дтрм Байофарма Ко., Лтд. | Полифторзамещенное соединение в качестве ингибитора тирозинкиназы брутона (btk) |
| CN106831789A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-06-13 | 南京亘泰医药技术有限公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂 |
| RU2016115803A (ru) * | 2013-09-30 | 2017-11-09 | Бэйджинг Иннокэа Фарма Тек Ко., Лтд. | Замещенные никотинимидные ингибиторы втк, их получение и применение в терапии раковых, воспалительных и аутоиммунных заболеваний |
| CN107602564A (zh) * | 2017-09-20 | 2018-01-19 | 南京亘泰医药技术有限公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂 |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2016115803A (ru) * | 2013-09-30 | 2017-11-09 | Бэйджинг Иннокэа Фарма Тек Ко., Лтд. | Замещенные никотинимидные ингибиторы втк, их получение и применение в терапии раковых, воспалительных и аутоиммунных заболеваний |
| EA201692176A1 (ru) * | 2014-04-29 | 2017-03-31 | Чжэцзян Дтрм Байофарма Ко., Лтд. | Полифторзамещенное соединение в качестве ингибитора тирозинкиназы брутона (btk) |
| WO2016109222A1 (en) * | 2014-12-31 | 2016-07-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Tertiary alcohol imidazopyrazine btk inhibitors |
| WO2016109223A1 (en) * | 2014-12-31 | 2016-07-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Benzamide imidazopyrazine btk inhibitors |
| CN106831789A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-06-13 | 南京亘泰医药技术有限公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂 |
| CN107602564A (zh) * | 2017-09-20 | 2018-01-19 | 南京亘泰医药技术有限公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109195602B (zh) | 用作免疫调节剂的对称或半对称化合物 | |
| US11420975B2 (en) | Substituted imidazo[1,5-a]pyrazines as Bruton's tyrosine kinase inhibitors | |
| JP6779371B2 (ja) | エンドソームＴｏｌｌ様受容体の阻害剤としての化合物および組成物 | |
| WO2020094104A1 (zh) | 一类含氮稠杂环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途 | |
| CN104910161B (zh) | 作为jak抑制剂的吡唑并嘧啶化合物和方法 | |
| KR20180048635A (ko) | Kit 및 pdgfr에 관련된 장애를 치료하는데 유용한 조성물 | |
| KR20170023156A (ko) | 단백질 키나제 저해제로서의 아미노피리다지논 화합물 | |
| KR20120002995A (ko) | ２―퓨리닐―３―톨릴―퀴나졸리논 유도체의 회전장애 이성질체 및 사용 방법 | |
| JP2009541241A (ja) | オキソ置換イミダゾ［１，２ｂ］ピリダジン、その調製方法、及び医薬としての使用 | |
| KR20090039757A (ko) | 약제학적 조성물용 피롤로피리미딘 | |
| WO2008129152A1 (fr) | Composes pyrrolo[2,3-b]pyridine, composes azaindoles utiles dans la synthese de ces composes pyrrolo[2,3-b]pyridine, leurs procedes de fabrication et leurs utilisations | |
| US11161854B2 (en) | Indazolyl-spiro[2.2]pentane-carbonitrile derivatives as LRRK2 inhibitors, pharmaceutical compositions, and uses thereof | |
| US20230210853A1 (en) | Targeted nek7 inhibition for modulation of the nlrp3 inflammasome | |
| CN111560012B (zh) | 一种作为irak抑制剂的化合物 | |
| WO2017148406A1 (zh) | 嘧啶类七元环化合物、其制备方法、药用组合物及其应用 | |
| AU2018201295A1 (en) | Benzhydrol-pyrazole derivatives having kinase inhibitory activity and uses thereof | |
| JP6392352B2 (ja) | リーシュマニア症などの寄生虫病を処置するための原生動物のプロテアソーム阻害剤としての［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体 | |
| CN114315839A (zh) | 嘧啶二酮类化合物及其用途 | |
| CN115843272A (zh) | Nek7激酶的抑制剂 | |
| KR20190104142A (ko) | 신규 옥소이소퀴놀린 유도체 | |
| RU2809188C2 (ru) | Аминонорборнановое производное и способ его получения, а также его применение | |
| CN111747927B (zh) | 作为免疫调节剂的化合物及其应用 | |
| WO2022062601A1 (zh) | 嘧啶并吡咯类化合物 | |
| WO2024059200A1 (en) | Nek7 inhibitors | |
| WO2022212326A1 (en) | Nek7 inhibitors |