RU2777933C2 - Штамм myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина и его применение - Google Patents
Штамм myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2777933C2 RU2777933C2 RU2020120912A RU2020120912A RU2777933C2 RU 2777933 C2 RU2777933 C2 RU 2777933C2 RU 2020120912 A RU2020120912 A RU 2020120912A RU 2020120912 A RU2020120912 A RU 2020120912A RU 2777933 C2 RU2777933 C2 RU 2777933C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- aflatoxin
- strain
- 3j2mo
- myroides odoratimimus
- degradation
- Prior art date
Links
- 241001291963 Myroides odoratimimus Species 0.000 title claims abstract description 55
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 title claims abstract description 31
- 230000004059 degradation Effects 0.000 title claims abstract description 31
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 241000228197 Aspergillus flavus Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000001963 growth media Substances 0.000 claims description 29
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 230000003042 antagnostic Effects 0.000 claims description 7
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 230000000593 degrading Effects 0.000 claims description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 230000001320 lysogenic Effects 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000004563 wettable powder Substances 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 claims 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002115 aflatoxin B1 Substances 0.000 description 11
- OQIQSTLJSLGHID-WNWIJWBNSA-N aflatoxin B1 Chemical compound C=1([C@@H]2C=CO[C@@H]2OC=1C=C(C1=2)OC)C=2OC(=O)C2=C1CCC2=O OQIQSTLJSLGHID-WNWIJWBNSA-N 0.000 description 11
- 240000005781 Arachis hypogaea Species 0.000 description 10
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 10
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 6
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 6
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 5
- XWIYFDMXXLINPU-WNWIJWBNSA-N Aflatoxin G1 Chemical compound O=C1OCCC2=C1C(=O)OC1=C2C(OC)=CC2=C1[C@@H]1C=CO[C@@H]1O2 XWIYFDMXXLINPU-WNWIJWBNSA-N 0.000 description 4
- WPCVRWVBBXIRMA-WNWIJWBNSA-N Aflatoxin G2 Chemical compound O=C1OCCC2=C1C(=O)OC1=C2C(OC)=CC2=C1[C@@H]1CCO[C@@H]1O2 WPCVRWVBBXIRMA-WNWIJWBNSA-N 0.000 description 4
- 239000002097 aflatoxin B2 Substances 0.000 description 4
- WWSYXEZEXMQWHT-WNWIJWBNSA-N aflatoxin B2 Chemical compound C=1([C@@H]2CCO[C@@H]2OC=1C=C(C1=2)OC)C=2OC(=O)C2=C1CCC2=O WWSYXEZEXMQWHT-WNWIJWBNSA-N 0.000 description 4
- 239000002098 aflatoxin G1 Substances 0.000 description 4
- 239000002100 aflatoxin G2 Substances 0.000 description 4
- 239000002108 aflatoxin M1 Substances 0.000 description 4
- MJBWDEQAUQTVKK-IAGOWNOFSA-N aflatoxin M1 Chemical compound C=1([C@]2(O)C=CO[C@@H]2OC=1C=C(C1=2)OC)C=2OC(=O)C2=C1CCC2=O MJBWDEQAUQTVKK-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 description 3
- 231100000765 Toxin Toxicity 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 108020003112 toxins Proteins 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004215 spores Anatomy 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 229920001670 16S ribosomal RNA Polymers 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 210000003608 Feces Anatomy 0.000 description 1
- 241000863420 Myxococcus Species 0.000 description 1
- 240000005158 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000122973 Stenotrophomonas maltophilia Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogens Species 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- -1 include adsorption Chemical compound 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 media Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 1
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к штамму Myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина, продуцируемого Aspergillus flavus, и его применению. Штамм 3J2MO Myroides odoratimimus депонирован в Китайском центре коллекции типовых культур (называемом CCTCC) 13 июня 2017 года под номером депонирования в CCTCC № M 2017329. Предложены также препарат для деградации афлатоксина, содержащий указанный штамм, а также способ деградации афлатоксина с использованием препарата. Штамм Myroides odoratimimus для биологического контроля обеспечивает эффективную деградацию афлатоксина. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 табл.
Description
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Область техники
[001] Настоящее изобретение относится к области микроорганизмов и, в частности, относится к штамму Myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина и его применению.
Описание известного уровня техники
[002] Aspergillus flavus представляет собой патогенный гриб, который может продуцировать тип в высокой степени канцерогенного и высокотоксичного грибного токсина, афлатоксина, включающего семейства B, G и M, где B1 является наиболее распространенным и наиболее токсичным. Афлатоксин может повсеместно загрязнять пищевые культуры, такие как виды арахиса, кукуруза и т. д., и серьезно угрожать здоровью людей и домашнего скота, что приводит к значительным экономическим потерям. Следовательно, необходимо срочно усовершенствовать обработку от загрязнения Aspergillus flavus и токсинами.
[003] Традиционные способы удаления афлатоксина B1 (AFB1) в основном включают адсорбцию, экстракцию, термическую обработку, радиационную обработку, кислотно-щелочную обработку и окислительно-восстановительную обработку, которые иногда затратны по времени и усилиям, имеют низкую скорость детоксикации и могут легко вызвать потерю питательных веществ. Однако биологический способ имеет преимущества в отношении безопасности, высокой эффективности и долгосрочности. Следовательно, для сельскохозяйственной промышленности и экономических выгод Китая очень важно увеличить количество исследований в области биологической обработки от афлатоксина.
[004] Бактериальная и метаболическая биодеградация афлатоксина не являются широко известными. Stenotrophomonas maltophilia, проверенный с применением куморовой среды, как проведено Guan Shu, Li Junxia et al., способен к деградации афлатоксина со скоростью деградации 82,5%. Wang Ning et al. изучили оранжево-красный штамм Myxococcus из фекалий серых тонкотелых обезьян и обнаружили, что скорость деградации AFB1 составляет 78,2% при оптимальных условиях культивирования. В существующем уровне техники не было сообщений о применении Myroides odoratimimus для деградации афлатоксина.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
[005] Техническая проблема, решаемая с помощью настоящего изобретения, заключается в предоставлении штамма 3J2MO Myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина и его применении ввиду недостатков существующего уровня техники. Штамм 3J2MO Myroides odoratimimus для биологического контроля по настоящему изобретению способен в значительной степени к деградации афлатоксина.
[006] С целью решения вышеупомянутой технической проблемы, техническое решение, принятое согласно настоящему изобретению, заключается в описанном ниже.
[007] Штамм 3J2MO Myroides odoratimimus для биологического контроля был депонирован в Китайском центре коллекции типовых культур (называемом CCTCC) 13 июня 2017 года с адресом депонирования: Уханьский университет, Ухань, Китай и под номером депонирования в CCTCC № M 2017329.
[008] По настоящему изобретению 100 мкл почвы после градиентного разбавления, собранной с арахисового поля в Хуангпи, Хубэй, размазывают по твердой культуральной среде лизогенного бульона (LB) для культивирования. Выращенные бактерии отбирают с помощью инокуляционной петли и переносят в свежую твердую культуральную среду LB для посева в чашку штрихами. После нескольких пересадок отбирают одну колонию. Штамм 3J2MO, характеризующийся значительным эффектом деградации в отношении афлатоксина, подвергают скринингу в эксперименте по деградации афлатоксина и депонируют в Китайском центре коллекции типовых культур (называемом CCTCC) с адресом депонирования: Уханьский университет, Ухань, Китай и под номером депонирования в CCTCC № M 2017329. Тип штамма идентифицируют с применением специфической в отношении 16S rDNA технологии амплификации в сочетании с морфологическими характеристиками и физиологическими и биохимическими экспериментами. Из результата видно, что штамм представляет собой штамм Myroides odoratimimus, принадлежащий к Актиномицетам, род Brevibacterium.
Таблица 1. Главные биологические характеристики Myroides odoratimimus 3J2MO
[009] Предоставлен препарат для деградации афлатоксина, который включает фермент Myroides odoratimimus 3J2MO.
[0010] В соответствии с решением, полученная форма препарата представляет собой жидкость, распыляемый порошок, сухой смачиваемый порошок или сухую смачиваемую гранулу.
[0011] В соответствии с решением препарат является жидким, и конечная концентрация Myroides odoratimimus 3J2MO в препарате составляет (1-9) × 107 КОЕ/мл.
[0012] В соответствии с решением препарат представляет собой ферментативный бульон c Myroides odoratimimus 3J2MO, а конечная концентрация Myroides odoratimimus 3J2MO в ферментативном бульоне c Myroides odoratimimus 3J2MO составляет (1-9) × 107 КОЕ/мл.
[0013] В соответствии с решением способ получения ферментативного бульона c Myroides odoratimimus 3J2MO заключается в следующем. Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28oC в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию Myroides odoratimimus, переносят в жидкую культуральную среду LB и культивируют со встряхиванием в течение от 12 часов до 24 часов. Захватывают от 1% до 3% культурального бульона, переносят в свежую жидкую культуральную среду LB и культивируют со встряхиванием в течение от 12 часов до 4 часов с получением ферментативного бульона c антагонистическим штаммом 3J2MO Myroides odoratimimus.
[0014] Представлен способ деградации афлатоксина, и конкретный способ применения заключается в следующем. Препарат для деградации афлатоксина наносят или распыляют на поверхность биологического образца или смешивают с биологическим образцом для деградации афлатоксина, для предотвращения и устранения загрязнения афлатоксином биологического образца.
[0015] Представлен способ деградации афлатоксина, и конкретный способ применения заключается в следующем. Ферментативный бульон c Myroides odoratimimus 3J2MO наносят или распыляют на поверхность биологического образца или смешивают с биологическим образцом для деградации афлатоксина, для предотвращения и устранения загрязнения афлатоксином биологического образца.
[0016] Благоприятные эффекты настоящего изобретения
[0017] В настоящем изобретении впервые предусмотрен штамм 3J2MO Myroides odoratimimus с хорошим эффектом деградации в отношении афлатоксина из почвы.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ РАСКРЫТЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
[0018] По настоящему изобретению 100 мкл почвы после градиентного разбавления, собранной с арахисового поля в Хуангпи, Хубэй, размазывают по твердой культуральной среде лизогенного бульона (LB) для культивирования. Выращенные бактерии отбирают с помощью инокуляционной петли и переносят в свежую твердую культуральную среду LB для посева в чашку штрихами. После нескольких пересадок отбирают одну колонию. Штамм 3J2MO, характеризующийся значительным эффектом деградации в отношении афлатоксина, подвергают скринингу в эксперименте по деградации афлатоксина и депонируют в Китайском центре коллекции типовых культур (называемом CCTCC) под номером депонирования в CCTCC № M 2017329.
[0019] Вариант осуществления 1
[0020] 1) Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию Myroides odoratimimus , переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов. Захватывают 1% культурального бульона, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов с получением ферментативного бульона с антагонистическим штаммом.
[0021] 2) Стандартный раствор афлатоксина B1 добавляют в ферментативный бульон с Myroides odoratimimus (с конечной концентрацией 1×107 КОЕ/мл) для совместного культивирования в культуральной среде LB при 28oC и 200 об./мин. в течение 5 дней с 3 повторами на обработку.
[0022] 3) Измеряют содержание афлатоксина B1 в культуральном бульоне (таблица 2).
Таблица 2. Эффект деградации бактерий для биологического контроля в отношении афлатоксина
[0023] Из результатов эксперимента видно, что скорость деградации штамма Myroides odoratimimus CCTCC № M 2017329 афлатоксина составляет приблизительно 95,61%, что указывает на то, что штамм обладает способностью к деградации афлатоксина.
[0024] Вариант осуществления 2
[0025] Бобы арахиса, полученные с арахисового поля Хубэй, измельчают в порошок и 0,5 г порошка арахиса взвешивают в чашке Петри. Добавляют 500 мкл раствора спор Aspergillus flavus, продуцирующего токсин (5 × 105/мл), и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 7 дней.
[0026] Ферментативный бульон из 500 мкл штамма CCTCC № M 20177329 добавляют к порошку арахиса, заполненному спорами, такое же количество культуральной среды LB используют в качестве контроля и культивируют в культуральной среде при 28oС в течение 5 дней с 3 повторами на эксперимент.
[0027] Добавляют 15 мл 70% метиловового спирта и помещают в шейкер на 30 минут после встряхивания. Добавляют 8 мл сверхчистой воды к 3 мл супернатанта для перемешивания и центрифугирования.
[0028] Отбирают 8 мл супернатанта и определяют содержание афлатоксина В1 с помощью иммуноаффинной колонки, способом высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) (таблица 3), с 3 повторами на эксперимент.
Таблица 3. Эффект обработки бактерий для биологического контроля в отношении арахиса, загрязненного Aspergillus flavus
[0029] Из результатов эксперимента видно, что уровень профилактики и контроля штамма CCTCC № M 2017329, влияющий на выработку токсина Aspergillus flavus на арахисе, составляет приблизительно 98,76%, что указывает на то, что штамм обладает хорошим эффектом обработки в отношении арахиса, загрязненного Aspergillus flavus.
[0030] Вариант осуществления 3
[0031] 1) Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию активированного Myroides odoratimimus, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов. Захватывают 1% культурального бульона, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов с получением ферментативного бульона с антагонистическим штаммом.
[0032] 2) Стандартный раствор афлатоксина B2 добавляют в ферментативный бульон с Myroides odoratimimus (с конечной концентрацией 1×107 КОЕ/мл) для совместного культивирования в культуральной среде LB при 28oC и 200 об./мин. в течение 5 дней с 3 повторами на обработку.
[0033] 3) Измеряют конечное содержание афлатоксина B2 в культуральной среде и рассчитывают скорость деградации.
[0034] После расчета экспериментального результата скорость деградации штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus афлатоксина B2 составляет 96,23%, что указывает на то, что штамм обладает способностью к деградации афлатоксина B2.
[0035] Вариант осуществления 4
[0036] 1) Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию активированного Myroides odoratimimus, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов. Захватывают 1% культурального бульона, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов с получением ферментативного бульона с антагонистическим штаммом.
[0037] 2) Стандартный раствор афлатоксина G1 добавляют в ферментативный бульон с Myroides odoratimimus (с конечной концентрацией 1×107 КОЕ/мл) для совместного культивирования в культуральной среде LB при 28oC и 200 об./мин. в течение 5 дней с 3 повторами на обработку.
[0038] 3) Измеряют конечное содержание афлатоксина G1 в культуральной среде и рассчитывают скорость деградации.
[0039] После расчета экспериментального результата скорость деградации штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus афлатоксина G1 составляет 96,73%, что указывает на то, что штамм обладает способностью к деградации афлатоксина G1.
[0040] Вариант осуществления 5
[0041] 1) Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию активированного Myroides odoratimimus, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов. Захватывают 1% культурального бульона, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов с получением ферментативного бульона с антагонистическим штаммом.
[0042] 2) Стандартный раствор афлатоксина G2 добавляют в ферментативный бульон с Myroides odoratimimus (с конечной концентрацией 1×107 КОЕ/мл) для совместного культивирования в культуральной среде LB при 28oC и 200 об./мин. в течение 5 дней с 3 повторами на обработку.
[0043] 3) Измеряют конечное содержание афлатоксина G2 в культуральной среде и рассчитывают скорость деградации.
[0044] После расчета экспериментального результата скорость деградации штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus афлатоксина G2 составляет 97,55%, что указывает на то, что штамм обладает способностью к деградации афлатоксина G2.
[0045] Вариант осуществления 6
[0046] 1) Myroides odoratimimus 3J2MO активируют в чашке с LB и культивируют в инкубаторе при 28°C в течение 24 часов. Посредством иглы отбирают одну колонию активированного Myroides odoratimimus, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов. Захватывают 1% культурального бульона, переносят в треугольную колбу, содержащую 15 мл жидкой культуральной среды LB, и культивируют со встряхиванием при 28oC и 200 об.·мин.-1 в течение 12 часов с получением ферментативного бульона с антагонистическим штаммом.
[0047] 2) Стандартный раствор афлатоксина M1 добавляют в ферментативный бульон с Myroides odoratimimus (с конечной концентрацией 1×107 КОЕ/мл) для совместного культивирования в культуральной среде LB при 28oC и 200 об./мин. в течение 5 дней с 3 повторами на обработку.
[0048] 3) Измеряют конечное содержание афлатоксина M1 в культуральной среде и рассчитывают скорость деградации.
[0049] После расчета экспериментального результата скорость деградации штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus афлатоксина M1 составляет 97,55%, что указывает на то, что штамм обладает способностью к деградации афлатоксина M1.
[0050] Вариант осуществления 7
[0051] Используется тот же способ, что и в патентном документе CN 105925513 A. Сравниваются эффекты деградации в отношении афлатоксина B1 штаммом Flavobacterium под номером депонирования в CICC 20907 в патентном документе и штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus по настоящему изобретению. Результаты сравнения показаны в таблице 4. Из результатов видно, что способность к деградации штаммом CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus афлатоксина B1, обеспечиваемая по настоящему изобретению, значительно превышает способность к деградации штаммом CICC 20907 Flavobacterium афлатоксина B1 по патентному документу CN 105925513 A.
Таблица 4. Сравнение способности к деградации афлатоксина B1 по настоящему изобретению и штаммом CICC 20907 Flavobacterium согласно патенту 105925513 A
[0052] В сочетании вариантов осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7 штамм CCTCC № M2017329 Myroides odoratimimus по настоящему изобретению обладает очень сильной способностью к деградации всех пяти типов распространенных афлатоксинов. После изучения отечественных и зарубежных ссылок, штамм с такой сильной способностью к деградации пяти типов распространенных афлатоксинов не был обнаружен внутри страны и за рубежом.
Claims (8)
1. Штамм 3J2MO Myroides odoratimimus для биологического контроля для деградации афлатоксина, продуцируемого Aspergillus flavus, депонированный в Китайском центре коллекции типовых культур (называемом CCTCC) 13 июня 2017 года под номером депонирования в CCTCC № M 2017329.
2. Препарат для деградации афлатоксина, где препарат cодержит штамм 3J2MO Myroides odoratimimus по п. 1.
3. Препарат по п. 2, где полученная форма препарата представляет собой жидкость, распыляемый порошок, сухой смачиваемый порошок или сухую смачиваемую гранулу.
4. Препарат по п. 2, где препарат представляет собой жидкость, и конечная концентрация штамма 3J2MO Myroides odoratimimus в препарате составляет 1×107 – 9×107 КОЕ/мл.
5. Препарат по п. 2, где препарат представляет собой ферментативный бульон с Myroides odoratimimus 3J2MO, и конечная концентрация Myroides odoratimimus 3J2MO в ферментативном бульоне с Myroides odoratimimus 3J2MO составляет 1×107 – 9×107 КОЕ/мл.
6. Препарат по п. 5, где способ получения ферментативного бульона со штаммом 3J2MO Myroides odoratimimus предусматривает: активацию штамма 3J2MO Myroides odoratimimus в чашке с лизогенным бульоном (LB) с последующим культивированием в инкубаторе при 28°C в течение 24 ч; отбор посредством иглы одной колонии Myroides odoratimimus, подлежащей переносу в жидкую культуральную среду и культивированию со встряхиванием в течение от 12 до 24 ч; захват от 1% до 3% культурального бульона, подлежащего переносу в свежую жидкую культуральную среду LB и культивированию со встряхиванием в течение от 12 до 24 ч; получение ферментативного бульона c антагонистическим штаммом 3J2MO Myroides odoratimimus.
7. Способ деградации афлатоксина, где препарат по п. 2 наносят или распыляют на поверхность биологического образца или смешивают с биологическим образцом для деградации афлатоксина.
8. Способ деградации афлатоксина, где препарат по п. 5 наносят или распыляют на поверхность биологического образца или смешивают с биологическим образцом для деградации афлатоксина.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711225506.2A CN107988097A (zh) | 2017-11-29 | 2017-11-29 | 一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用 |
CN201711225506.2 | 2017-11-29 | ||
CN201811409668.6 | 2018-11-23 | ||
CN201811409668.6A CN109321507B (zh) | 2017-11-29 | 2018-11-23 | 一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用 |
PCT/CN2018/118204 WO2019105416A1 (zh) | 2017-11-29 | 2018-11-29 | 一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2020120912A RU2020120912A (ru) | 2021-12-29 |
RU2020120912A3 RU2020120912A3 (ru) | 2021-12-29 |
RU2777933C2 true RU2777933C2 (ru) | 2022-08-12 |
Family
ID=
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103981132B (zh) * | 2014-05-14 | 2016-04-06 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一株节杆菌及其在降解黄曲霉毒素中的应用 |
CN105925513A (zh) * | 2016-07-11 | 2016-09-07 | 湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所 | 用于降解黄曲霉毒素b1的复合菌剂及其制备方法 |
CN106636017A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-05-10 | 河南工业大学 | 复合酶制剂高效降解黄曲霉毒素b1的制备方法 |
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103981132B (zh) * | 2014-05-14 | 2016-04-06 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一株节杆菌及其在降解黄曲霉毒素中的应用 |
CN105925513A (zh) * | 2016-07-11 | 2016-09-07 | 湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所 | 用于降解黄曲霉毒素b1的复合菌剂及其制备方法 |
CN106636017A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-05-10 | 河南工业大学 | 复合酶制剂高效降解黄曲霉毒素b1的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
XU L. ET AL. Novel Aflatoxin-Degrading Enzyme from Bacillus shackletonii L7. Toxins (Basel). 2017;9(1):36. Published 2017 Jan 14. doi:10.3390/toxins9010036 Найдено онлайн: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5308268/ Дата обращения 28.10.2021. ЩЕРБАКОВА Л.А. и др. Gliocladium roseum и Trichoderma viride как биодеструкторы афлатоксина В1 и антагонисты токсигенного гриба Aspergillus flavus. Сельскохозяйственная биология, 2016, том 51, 6, с. 946-950. Найдено онлайн: http://www.agrobiology.ru/articles/6-2016scherbakova-rus.pdf Дата обращения 28.10.2021. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108865953A (zh) | 一株广谱抑制水产病原性弧菌的芽孢杆菌及其复合菌制剂 | |
US11622560B2 (en) | Myroides odoratimimus biocontrol strain for efficiently degrading aflatoxin and application thereof | |
CN103602608B (zh) | 短小芽孢杆菌在对虾养殖中的应用 | |
CN110607251B (zh) | 一种降解呕吐毒素的海洋杆菌及其应用 | |
US20190159462A1 (en) | Serratia marcescens biocontrol strain efficiently inhibiting aflatoxins production by aspergillus flavus and application thereof | |
US20190159463A1 (en) | Enterobacter cloacae biocontrol strain capable of effectively inhibiting aspergillus flavus from synthesizing aflatoxins and application thereof | |
CN116083289B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌菌株4-4及其应用、产品和方法 | |
CN111647518A (zh) | 一种贝莱斯芽孢杆菌微生物菌剂及制备方法 | |
CN110791460B (zh) | 一株抑制黄曲霉生长及毒素产生的菌株 | |
CN110878265A (zh) | 一株降解黄曲霉毒素的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN111909878A (zh) | 一种具有清除展青霉素作用的干酪乳杆菌 | |
CN107779422B (zh) | 一株高效抑制黄曲霉合成黄曲霉毒素的非脱羧勒克菌生防菌株 | |
CN110583852A (zh) | 一种含山茶籽粕的菌酶协同发酵方法 | |
CN102660480B (zh) | 一株大豆抗原蛋白降解菌株及其应用 | |
CN107699503B (zh) | 一种异常威克汉姆酵母bt-1-1及其用途 | |
CN113980853A (zh) | 一株高产乳酸的格氏乳球菌wbt0008及其应用 | |
CN107058180B (zh) | 一种高寒草地牧草内生细菌枯草芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用 | |
CN115725471B (zh) | 一株沙福芽孢杆菌菌株05-2101及其应用、产品和方法 | |
CN106244480B (zh) | 一株假格里尼翁苍白杆菌及其防治植物寄生线虫的应用 | |
CN117106649A (zh) | 一株拮抗黄曲霉的菌株及其在黄曲霉生物防治中的应用 | |
RU2777933C2 (ru) | Штамм myroides odoratimimus для биологического контроля для эффективной деградации афлатоксина и его применение | |
CN111411053B (zh) | 一株协同产三种抗细菌代谢产物枯草芽孢杆菌jcl16及其筛选和应用 | |
CN113278541B (zh) | 一株水稻内生贝莱斯芽孢杆菌及其应用 | |
KR101919764B1 (ko) | 우수한 홍삼박 발효능을 갖는 바실러스 서브틸리스 hd 9098 균주, 이를 포함하는 면역증강용 생균제 조성물 및 그 제조방법 | |
CN110922974B (zh) | 一种卷枝毛霉在降解高效氯氟氰菊酯中的应用 |