RU2760521C2 - Негенетическая модификация оболочечных вирусов - Google Patents
Негенетическая модификация оболочечных вирусов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2760521C2 RU2760521C2 RU2019110407A RU2019110407A RU2760521C2 RU 2760521 C2 RU2760521 C2 RU 2760521C2 RU 2019110407 A RU2019110407 A RU 2019110407A RU 2019110407 A RU2019110407 A RU 2019110407A RU 2760521 C2 RU2760521 C2 RU 2760521C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- seq
- peptide
- tumor
- viral envelope
- Prior art date
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 118
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 title description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 164
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 87
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 60
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 claims abstract description 59
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 48
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims abstract description 42
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims abstract description 35
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 claims abstract description 27
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 claims abstract description 27
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 claims abstract description 27
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 77
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 66
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 claims description 42
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 claims description 42
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 38
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 7
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 3
- XUNKPNYCNUKOAU-VXJRNSOOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]a Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XUNKPNYCNUKOAU-VXJRNSOOSA-N 0.000 claims description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 2
- BHONFOAYRQZPKZ-LCLOTLQISA-N chembl269478 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BHONFOAYRQZPKZ-LCLOTLQISA-N 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 241001372913 Maraba virus Species 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 23
- SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N Ile-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N 0.000 description 15
- PSKRILMFHNIUAO-JYJNAYRXSA-N Phe-Glu-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N PSKRILMFHNIUAO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 15
- XOZYYXMHMIEJET-XIRDDKMYSA-N Arg-Trp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XOZYYXMHMIEJET-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 13
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 12
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 12
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ZZHGKECPZXPXJF-PCBIJLKTSA-N Ile-Asn-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZZHGKECPZXPXJF-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 10
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 10
- ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 9
- BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 9
- PRSBSVAVOQOAMI-BJDJZHNGSA-N Lys-Ile-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN PRSBSVAVOQOAMI-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- AGGIYSLVUKVOPT-HTFCKZLJSA-N Ile-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N AGGIYSLVUKVOPT-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 7
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 7
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 7
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 7
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 7
- DNBMCNQKNOKOSD-DCAQKATOSA-N Arg-Pro-Gln Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DNBMCNQKNOKOSD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCNC(N)=N KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 6
- 108700003968 Human immunodeficiency virus 1 tat peptide (49-57) Proteins 0.000 description 6
- KVMULWOHPPMHHE-DCAQKATOSA-N Leu-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O KVMULWOHPPMHHE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- LFSQWRSVPNKJGP-WDCWCFNPSA-N Leu-Thr-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LFSQWRSVPNKJGP-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 6
- 108010075205 OVA-8 Proteins 0.000 description 6
- HDOVUKNUBWVHOX-QMMMGPOBSA-N Valacyclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCOC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C=N2 HDOVUKNUBWVHOX-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 6
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 6
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical group OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 5
- YKBUCXNNBYZYAY-MNXVOIDGSA-N Glu-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YKBUCXNNBYZYAY-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 5
- HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- FMXFHNSFABRVFZ-BZSNNMDCSA-N Tyr-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FMXFHNSFABRVFZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 5
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 5
- QVVDVENEPNODSI-BTNSXGMBSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylidene Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QVVDVENEPNODSI-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QEKBCDODJBBWHV-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QEKBCDODJBBWHV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- JCAISGGAOQXEHJ-ZPFDUUQYSA-N Arg-Gln-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JCAISGGAOQXEHJ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 3
- NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N Arg-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- ISVACHFCVRKIDG-SRVKXCTJSA-N Arg-Val-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O ISVACHFCVRKIDG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 3
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 3
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 3
- IDGRADDMTTWOQC-WDSOQIARSA-N Leu-Trp-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IDGRADDMTTWOQC-WDSOQIARSA-N 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- GFWLIJDQILOEPP-HSCHXYMDSA-N Lys-Ile-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N GFWLIJDQILOEPP-HSCHXYMDSA-N 0.000 description 3
- RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- UMKYAYXCMYYNHI-AVGNSLFASA-N Phe-Gln-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N UMKYAYXCMYYNHI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 3
- BGHVVGPELPHRCI-HZTRNQAASA-N Thr-Trp-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)N)O BGHVVGPELPHRCI-HZTRNQAASA-N 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- OBAMASZCXDIXSS-SZMVWBNQSA-N Trp-Glu-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N OBAMASZCXDIXSS-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 3
- UUIYFDAWNBSWPG-IHPCNDPISA-N Trp-Lys-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N UUIYFDAWNBSWPG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 3
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 108010043322 lysyl-tryptophyl-alpha-lysine Proteins 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IBIDRSSEHFLGSD-UHFFFAOYSA-N valinyl-arginine Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N IBIDRSSEHFLGSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N Ala-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N Ala-Gly-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N 0.000 description 2
- VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Lys Natural products NCCCCC(NC(=O)C(N)C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JTKLCCFLSLCCST-SZMVWBNQSA-N Arg-Arg-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 JTKLCCFLSLCCST-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- RAUPFUCUDBQYHE-AVGNSLFASA-N Asn-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RAUPFUCUDBQYHE-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 2
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- BNRHLRWCERLRTQ-BPUTZDHNSA-N Cys-Arg-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N BNRHLRWCERLRTQ-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- XGIAHEUULGOZHH-GUBZILKMSA-N Cys-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N XGIAHEUULGOZHH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N Leu-Ala-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 2
- WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N Lys-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- KYNNSEJZFVCDIV-ZPFDUUQYSA-N Lys-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KYNNSEJZFVCDIV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N Lys-Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005890 Neuroma Diseases 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N Ser-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 2
- HBTCFCHYALPXME-HTFCKZLJSA-N Ser-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HBTCFCHYALPXME-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 2
- GVIGVIOEYBOTCB-XIRDDKMYSA-N Ser-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 GVIGVIOEYBOTCB-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- VULNJDORNLBPNG-SWRJLBSHSA-N Thr-Glu-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N)O VULNJDORNLBPNG-SWRJLBSHSA-N 0.000 description 2
- HOJPPPKZWFRTHJ-PJODQICGSA-N Trp-Arg-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N HOJPPPKZWFRTHJ-PJODQICGSA-N 0.000 description 2
- IYHRKILQAQWODS-VJBMBRPKSA-N Trp-Trp-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N IYHRKILQAQWODS-VJBMBRPKSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 201000000052 gastrinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 108010077158 leucinyl-arginyl-tryptophan Proteins 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 2
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 108010078580 tyrosylleucine Proteins 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWINFPQUSSHSFS-UVBJJODRSA-N Ala-Arg-Trp Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O DWINFPQUSSHSFS-UVBJJODRSA-N 0.000 description 1
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- SGYSTDWPNPKJPP-GUBZILKMSA-N Arg-Ala-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SGYSTDWPNPKJPP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YYOVLDPHIJAOSY-DCAQKATOSA-N Arg-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N YYOVLDPHIJAOSY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PAPSMOYMQDWIOR-AVGNSLFASA-N Arg-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PAPSMOYMQDWIOR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010007270 Carcinoid syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010007275 Carcinoid tumour Diseases 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000004178 Cathepsin E Human genes 0.000 description 1
- 108090000611 Cathepsin E Proteins 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 208000005243 Chondrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000006332 Choriocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- SRZZZTMJARUVPI-JBDRJPRFSA-N Cys-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N SRZZZTMJARUVPI-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006168 Ewing Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- QVXWAFZDWRLXTI-NWLDYVSISA-N Glu-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O QVXWAFZDWRLXTI-NWLDYVSISA-N 0.000 description 1
- 206010018404 Glucagonoma Diseases 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- 208000022120 Jeavons syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N Leu-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 206010062038 Lip neoplasm Diseases 0.000 description 1
- VUTWYNQUSJWBHO-BZSNNMDCSA-N Lys-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VUTWYNQUSJWBHO-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 201000010133 Oligodendroglioma Diseases 0.000 description 1
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 description 1
- 208000000035 Osteochondroma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000009565 Pharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010036832 Prolactinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 208000004337 Salivary Gland Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010041329 Somatostatinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010043515 Throat cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000728 Thymus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010062129 Tongue neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006842 Tonsillar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- ICNFHVUVCNWUAB-SZMVWBNQSA-N Trp-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N ICNFHVUVCNWUAB-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- KXFYAQUYJKOQMI-QEJZJMRPSA-N Trp-Ser-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KXFYAQUYJKOQMI-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- DTPWXZXGFAHEKL-NWLDYVSISA-N Trp-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DTPWXZXGFAHEKL-NWLDYVSISA-N 0.000 description 1
- 208000023915 Ureteral Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046392 Ureteric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000008629 Zollinger-Ellison syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 201000007696 anal canal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 description 1
- 208000025188 carcinoma of pharynx Diseases 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000860 cochlear nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical group 0.000 description 1
- 201000010918 connective tissue cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 208000024519 eye neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000002060 fluorescence correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000015419 gastrin-producing neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 201000005459 gum cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000010235 heart cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024348 heart neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940091204 imlygic Drugs 0.000 description 1
- 229940126546 immune checkpoint molecule Drugs 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 206010022498 insulinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 210000001985 kidney epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 201000006721 lip cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004904 long-term response Effects 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- -1 lysine or arginine Chemical class 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 208000026045 malignant tumor of parathyroid gland Diseases 0.000 description 1
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000002418 meninge Anatomy 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008026 nephroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 201000008106 ocular cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000003254 palate Anatomy 0.000 description 1
- 208000021255 pancreatic insulinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000001219 parotid gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 108010042234 peptide SVYDFFVWL Proteins 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 208000028591 pheochromocytoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002511 pituitary cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000009832 plasma treatment Methods 0.000 description 1
- 201000003437 pleural cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 208000030153 prolactin-producing pituitary gland adenoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 206010062261 spinal cord neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 201000009377 thymus cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000029387 trophoblastic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010045269 tryptophyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 230000037455 tumor specific immune response Effects 0.000 description 1
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 201000011294 ureter cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 206010046885 vaginal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013139 vaginal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000006542 von Hippel-Lindau disease Diseases 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16611—Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
- C12N2710/16632—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16611—Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
- C12N2710/16641—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Описан модифицированный оболочечный вирус, выбранный из группы, состоящей из: вируса простого герпеса 1 (HSV-1), вируса простого герпеса 2 (HSV-2), вируса осповакцины, вируса везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вируса кори (MeV), вируса Мараба и вируса болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку. Также представлена фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая: модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-17 и подходящий носитель. Кроме того, описаны способы лечения рака. Изобретение расширяет арсенал средств лечения рака. 4 н. и 20 з.п. ф-лы, 13 ил., 1 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к модифицированному оболочечному вирусу, где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку; к фармацевтической композиции, содержащей его; и к методу лечения рака с его использованием.
Предшествующий уровень техники
Недавнее одобрение антител, нацеленных на молекулы иммунных контрольных точек, такие как PD-1 (белок запрограммированной клеточной смерти 1), PD-L1 (лиганд белка запрограммированной клеточной смерти 1) и CTLA-4 (антиген цитотоксических Т-лимфоцитов 4 типа), функцией которых является прерывание систем отрицательной обратной связи в микроокружении опухоли для усиления уже имеющихся противоопухолевых иммунных ответов, было встречено с огромным энтузиазмом клиницистов. Применение этих антител-ингибиторов иммунных контрольных точек может вызвать длительные ответы у 10-20% раковых пациентов. Однако, остальные 80-90% пациентов не реагируют на них из-за отсутствия противоопухолевых иммунных ответов или других иммуносупрессивных аспектов микроокружения опухоли. Для расширения популяции пациентов, реагирующих на терапию ингибиторами контрольных точек, авторы изобретения разработали платформу векторов на основе оболочечных вирусов, называемую PeptiENV, для усиления или создания широкого противоопухолевого иммунитета и привлечения опухолеспецифических Т-эффекторных клеток в микроокружение опухоли.
Предпочтительно, путем лечения пациентов комбинацией иммуностимулирующих вирусов PeptiENV и антител, подавляющих иммунные контрольные точки, авторы изобретения планируют увеличить количество пациентов, отвечающих на терапию ингибиторами иммунных контрольных точек.
В данной патентной заявке описана платформа PeptiENV, которая включает новый способ нанесения на поверхность и встраивания иммуномодулирующих пептидов на вирусную оболочку, которая затем может быть легко перекрестно представлена на антигенпредставляющих клетках. В настоящее время не существует способов негенетического присоединения пептидов к вирусной оболочке с целью активации иммунной системы. В WO 2005/060541 описаны антивирусные пептиды, которые введены в вирусную оболочку с целью разрушения вирусной мембраны и уничтожения вируса.
У некоторых вирусов есть вирусные оболочки, покрывающие их защитные белковые капсиды. Оболочки обычно происходят из частей мембран клетки-хозяина (фосфолипидов и белков), но включают некоторые вирусные гликопротеины. Они могут помочь вирусам избежать иммунной системы хозяина. Гликопротеины на поверхности оболочки служат для идентификации и связывания с рецепторными сайтами на мембране хозяина. Затем вирусная оболочка сливается с мембраной хозяина, позволяя капсиду и вирусному геному проникать в и инфицировать хозяина. В дополнение к проникновению в клетку-хозяина через слияние мембран вируса и клетки-хозяина, некоторые вирусы альтернативно могут использовать эндоцитоз в качестве механизма проникновения.
По существу, авторы изобретения нашли новый способ повышения противоопухолевого иммунитета за счет противовирусного иммунитета с использованием терапевтических и клинически одобренных вирусов.
Изложение сущности изобретения
Согласно первому аспекту предложен модифицированный оболочечный вирус, выбранный из группы, содержащей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку.
Ссылка в данном описании изобретения на модифицированный оболочечный вирус относится к вирусу, который негенетически модифицирован так, чтобы содержать указанный по меньшей мере один противоопухолевый опухолеспецифический пептид в его вирусной оболочке. Во избежание неоднозначности, указанный вирус может включать или не включать какую(ие)-либо другую(ие) генетическую(те) модификацию(и), которые делают его пригодным для этой цели, но присоединение указанного по меньшей мере одного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида к вирусной оболочке или через нее осуществлено негенетически.
Специалистам в данной области понятно, что некоторые вирусы имеют вирусные оболочки, покрывающие их защитные белковые капсиды. Оболочки обычно происходят из частей мембран клеток-хозяев (фосфолипидов и белков), но включают некоторые вирусные гликопротеины. Они могут помочь вирусам избежать иммунной системы хозяина. Гликопротеины на поверхности оболочки служат для идентификации и связывания с рецепторными сайтами на мембране хозяина. Во время инфекции вирусная оболочка сливается с мембраной хозяина, позволяя капсиду и вирусному геному проникать в хозяина и инфицировать его. Таким образом, пептиды, присоединенные к, введенные в, или проходящие через вирусную оболочку, можно использовать в качестве антигенов для инициации иммунного ответа.
Ссылка в данном описании изобретения на противоопухолевый пептид относится к пептиду, который может вызывать иммунный ответ против опухоли.
Ссылка в данном описании изобретения на опухолеспецифический пептид относится к пептиду, который может вызывать иммунный ответ против конкретной(ых) одной или более опухоли(ей).
В предпочтительном воплощении указанный пептид является идентифицированный у пациента или специфичным для пациента.
Специалистам в данной области очевидно, что точная природа пептида может варьироваться в зависимости от природы опухоли, подлежащей лечению, в действительности специфика технологии подразумевает, что разные противоопухолевые, опухолеспецифические пептиды будут использованы для лечения субъектов с разными типами рака и даже разные противоопухолевые, опухолеспецифические пептиды можно использовать для лечения субъектов с одним и тем же типом рака.
В еще одном воплощении изобретения указанный пептид имеет длину от 8 до 50 аминокислот, в идеальном случае длину от 15 до 35 аминокислот. В наиболее идеальном случае указанный пептид имеет длину, выбранную из группы, включающей:
8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33,
34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 и 50 аминокислот.
В наиболее идеальном случае множество указанных пептидов присоединено к или встроено в/через вирусную оболочку. Эти пептиды могут быть идентичными или представлять один и тот же антиген с лишь незначительной модификацией, то есть иметь более 90% идентичность последовательности друг с другом и в наиболее идеальном случае более чем 92%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичности последовательности друг с другом. Альтернативно, ряд разных противоопухолевых, опухолеспецифических пептидов негенетически присоединен или введен в/через вирусную оболочку.
Более предпочтительно, указанный пептид также содержит по меньшей мере один сайт расщепления, например, но без ограничения ими, сайт расщепления катепсином или сайт расщепления фурином. Еще более предпочтительно, указанный пептид содержит по меньшей мере один сайт процессинга иммунопротеосомы. Примеры этих сайтов и их расположение относительно структуры конъюгированного пептида показаны на Фиг. 7. В идеальном случае один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид расположен между парой сайтов обработки иммунопротеасомами, и выше него находится по меньшей мере один сайт расщепления, в идеальном случае сайт расщепления фурином, за которым следует (еще выше) сайт расщепления катепсином.
Преимуществом является обнаруженный авторами изобретения факт, что эти пептиды, будучи присоединенными или введенными в/через выбранные оболочечные вирусы (HSV-1 и -2, вирус осповакцины, VSV, MeV, вирус Мараба и NDV) могут вызывать усиленные опухолеспецифические иммунные ответы и в значительной степени повышать противоопухолевую эффективность путем преобразования противовирусного иммунитета в противоопухолевый иммунитет.
Элегантность этой платформы по сравнению с другими заключается в том, что путем прикрепления или введения негенетическим образом идентифицированных у пациента индуцирующих противоопухолевый ответ, опухолеспецифических пептидов к/в/через вирусную оболочку, можно клинически использовать одобренный с медицинской точки зрения вирус. Это означает, что можно очень быстро реагировать на изменения опухолевых антигенов пациента, которые презентируются на MHC-I, просто покрывая вирус новым набором опухолеспецифических пептидов, полученных от указанного пациента.
Еще одна важная особенность изобретения заключается в том, что вирус, выбранный для этой платформы, должен пройти строгие этапы контроля качества и одобрения только один раз, что экономит время и деньги по сравнению с другими платформами, где вирусы, имеющие генетически введенные модификации, должны проходить этапы проверки каждый раз, когда вводят новую модификацию или пептид, что делает практически невозможным использование этих платформ в персонализированной медицине.
В дополнительном предпочтительном воплощении изобретения указанный(е) пептид(ы) присоединен(ы) или введен(ы) в/через указанную вирусную оболочку с использованием либо пептида, проникающего в клетку, либо пептида, конъюгированного с холестерином (приобретенного в PepScan или Ontores).
Как известно специалистам в данной области техники, проникающие в клетку пептиды (CPP) представляют собой короткие пептиды, которые облегчают клеточное введение/поглощение различных молекулярных агентов (от частиц наноразмера до небольших химических молекул и больших фрагментов ДНК). Этот "груз" ассоциирован с пептидами либо посредством химического связывания ковалентными связями, либо посредством нековалентных взаимодействий. Функция CPP заключается в доставке груза в клетки, процессе, который обычно происходит через эндоцитоз.
CPP, как правило, имеют аминокислотный состав, который либо содержит большое относительное количество положительно заряженных аминокислот, таких как лизин или аргинин, либо имеет последовательности, которые содержат чередующийся набор полярных/заряженных аминокислот и неполярных гидрофобных аминокислот. Эти два типа структур называются поликатионными или амфипатическими соответственно. Третий класс CPP представляет собой гидрофобные пептиды, содержащие только неполярные остатки, с низким суммарным зарядом, или имеющие гидрофобные аминокислотные группы, которые имеют решающее значение для клеточного поглощения.
Изобретение предусматривает использование любого известного CCP, связанного с указанным противоопухолевым, опухолеспецифическим пептидом.
Не желая быть связанными объяснением механизма действия, авторы считают, что хотя CPP обычно доставляет свой груз через липидный бислой, пептид, состоящий из последовательности CPP вместе с иммуногенным пептидом по изобретению, частично проходит через липидный бислой, в то время как часть его, по-видимому, прилипает, возможно посредством физических гидрофобных/гидрофильных взаимодействий, на мембране в достаточной степени для целей изобретения, или даже всецело.
Пример CPP, конъюгированного с указанным пептидом, показан на Фиг. 7B.
Специалистам в данной области техники также известно, что конъюгированные с холестерином пептиды являются короткими пептидами, присоединенными к холестерину. Авторы изобретения обнаружили, что они могут проникать в вирусную оболочку и таким образом закреплять конъюгированный пептид в вирусной оболочке. Эти пептиды могут быть конъюгированы с холестерином по N- или C-концу.
Опять, не желая быть связанными объяснением механизма действия, авторы изобретения считают, что, поскольку холестерин является компонентом липидной мембраны, конъюгированные с холестерином пептиды находят свое “нормальное” расположение в мембране. Фактически авторы изобретения предполагают, что гидроксигруппа холестерина взаимодействует с полярными концевыми группами мембранных фосфолипидов и сфинголипидов, в то время как объемный стероид и углеводородная цепь встроены в мембрану, наряду с неполярной жирнокислотной цепью других липидов.
Пример конъюгированного с холестерином пептида показан на Фиг. 7А.
В предпочтительном воплощении изобретения пептид для присоединения или встраивания в/через указанную оболочку содержит:
GRKKRRQRRRPQ (SEQ ID NO: 1) последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
RQIKIWFQNRRMKWKK (SEQ ID NO: 2) последовательность CPP на N- или C-
конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
KLALKLALKALKAALKLA (SEQ ID NO: 3) последовательность CPP на N- или
C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида; RRRRRRRRR (SEQ ID NO: 4) последовательность CPP на N- или C-конце
указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида; KETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 5) последовательность CPP на
N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида; AGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 6) последовательность CPP на N-
или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида; AGLWRALWRLLRSLWRLLWRA (SEQ ID NO: 7) последовательность CPP на
N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида; или холестериновую группировку на N- или C-конце указанного
противоопухолевого, опухолеспецифического пептида.
В еще одном предпочтительном воплощении изобретения пептид для присоединения к или встраивания в/через указанную оболочку, содержит одну из следующих последовательностей, где последовательность SIINFEKL является просто представителем MHC-I рестриктированный эпитоп или пептид:
CPP пептиды:
GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 8)
RQIKIWFQNRRMKWKKRWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 9)
KLALKLALKALKAALKLARWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 10)
RRRRRRRRRRWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 11)
RWEKISIINFEKLYKLRRRRRRRRR (SEQ ID NO: 12)
RWEKISIINFEKLYKLKETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 13)
RWEKISIINFEKLYKLAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 14)
AGLWRALWRLLRSLWRLLWRA RWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 15)
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKLYKL (SEQ ID NO: 16)
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 17)
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 18) (где RWEKI и YKLRWEKI представляют собой сайты иммунопротеосомного процессинга). Конъюгированные с холестерином пептиды:
LEQLESIINFEKLTEWRVRRALISC-холестерин (SEQ ID NO: 19)
холестерин-CRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 20)
холестерин-CSIINFEKL (SEQ ID NO: 21)
холестерин-CRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 22) или
холестерин-CRWEKISVYDFFVWLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 23)
Соответственно, наиболее предпочтительно, указанный(е) противоопухолевый(е), опухолеспецифический(е) пептид(ы) присоединен(ы) к или введен в/через указанную вирусную оболочку с использованием либо пептида, проникающего в клетку, либо пептида, конъюгированного с холестерином.
Как правило, вирусные частицы образуют комплекс с указанным СРР-пептидом или холестерин-конъюгированным пептидом при инкубации их в течение примерно
15 мин при 37°С.
В еще одном предпочтительном воплощении предложен указанный модифицированный оболочечный вирус по меньшей мере с одним противоопухолевым, опухолеспецифическим пептидом, который является MHC-I-специфичным и, таким образом, в идеальном случае вызывает иммунный ответ путем MHC-I-презентации на антигенпредставляющих клетках (APC) для активации эффекторных T-клеток,
называемых CD8+ T-клетками, в частности цитотоксических T-лимфоцитов (CTL).
Дополнительно или альтернативно, предложен указанный модифицированный оболочечный вирус по меньшей мере с одним противоопухолевым, опухолеспецифическим пептидом, который является MHC-II-специфичным и, таким образом, в идеальном случае вызывает иммунный ответ посредством MHC-II- презентации на антигенпредставляющих клетках (APC) для активации CD4+ (T- хелперного) клеточного ответа.
Соответственно, данное изобретение также позволяет использовать разные эпитопы MHC-II, нанесенные на вирусную оболочку, для усиления, отдельно или в сочетании с эпитопами MHC-I, иммунного ответа субъекта.
Дополнительно или в качестве альтернативы, изобретение также позволяет использовать пептид(ы), который(е) содержит(ат) слитую молекулу, включающую множество разных антигенов.
Еще более предпочтительно, предлагается комбинация разных модифицированных таким образом оболочечных вирусов, где указанные вирусы выбраны из группы, включающей: вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Hьюкасла (NDV). Таким образом, изобретение касается применения по меньшей мере любых двух вышеуказанных вирусов, а также распространяется на применение комбинации любых 3, 4, 5, 6 или 7 вышеуказанных вирусов.
Соответственно, изобретение относится к использованию двух разных типов вирусов или вирусных каркасов, позволяющих использовать способ "прайм-буст" иммуновиротерапии, когда после лечения "прайм" (праймирующим) вирусом определенного вида/рода, покрытого указанными пептидами, следует лечение "буст" (бустерным) вирусом другого конкретного вида/рода (иммунологически отличным вирусом), покрытым теми же указанными пептидами. Метод "прайм-буст" иммуновиротерапии может дополнительно значительно увеличивать опухолеспецифические Т-клеточные иммунные ответы, направляя большинство иммунных ответов, созданных "прайм-буст" методом, на указанные пептиды.
При использовании изобретения оболочечный вирус, модифицированный, как описано здесь, можно использовать в "прайм-буст" иммуновиротерапии в комбинации с другим оболочечным вирусом, модифицированным, как описано здесь, но презентирующим те же самые пептиды, или любым другим вирусом, таким как аденовирус, который также был модифицирован, генетически или негенетически, чтобы презентировать те же самые пептиды.
Специалистам в данной области понятно, что, поскольку оболочечный вирус, а именно вирус простого герпеса 1 (HSV-1), является наиболее изученным онколитическим оболочечным вирусом, и сконструированная форма HSV-1, называемая T-VEC (Imlygic), является первым онколитическим вирусом, демонстрирующим эффективность в фазе III клинических испытаний и является первым онколитическим вирусом, одобренным и FDA (Управление по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами США), и EMEA (Европейское агентство лекарственных средств) для лечения неоперабельной меланомы, крайне важно вводить новые способы повышения противоопухолевого иммунитета за счет противовирусного иммунитета этих терапевтических и клинически одобренных вирусов.
В соответствии со вторым аспектом изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая:
1) модифицированный оболочечный вирус, выбранный из группы, включающей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Hьюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку; а также
2) подходящий носитель.
В соответствии с третьим аспектом изобретения предложен способ лечения рака, включающий воздействие на субъекта модифицированным оболочечным вирусом, выбранным из группы, включающей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Hьюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку.
Еще более предпочтительно, указанный способ включает, после выбранного периода, воздействие на указанного субъекта другого модифицированного оболочечного вируса, выбранного из группы, содержащей: вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку и, кроме того, где указанный вирус отличается от вируса, который использовали для предварительного воздействия. Альтернативно, в "прайм-буст" иммуновиротерапии указанный способ включает, после выбранного периода, воздействие на указанного субъекта любого другого вируса, такого как аденовирус, который также был модифицирован, в том числе генетически или негенетически, для презентации тех же пептидов. В качестве альтернативы, еще раз, указанный способ может быть осуществлен на практике путем использования сначала любого вируса, который был модифицирован любым образом, включая генетический или негенетический, для экспрессии выбранных пептидов, с последующим использованием модифицированного вируса по изобретению, имеющего такие же пептиды, для обеспечения бустерной терапии.
Таким образом можно применять на практике "прайм-буст" иммуновиротерапию.
В идеальном случае указанная стадия воздействия вируса на субъекта включает внутриопухолевую, внутриузловую, внутрибрюшинную или внутривенную инъекцию.
Наиболее предпочтительно рак, упоминаемый здесь, включает одно или более из следующих раковых заболеваний: рак носоглотки, синовиальный рак, гепатоцеллюлярный рак, рак почки, рак соединительной ткани, меланому, рак легкого, рак кишечника, рак толстой кишки, рак прямой кишки, колоректальный рак, рак головного мозга, рак горла, рак полости рта, рак печени, рак коси, рак поджелудочной железы, хориокарциному, гастриному, феохромоцитому, пролактиному, Т-клеточный лейкоз/лимфому, неврому, болезнь Гиппеля-Линдау, синдром Золлингера-Эллисона, рак надпочечников, рак анального канала, рак желчных протоков, рак мочевого пузыря, рак мочеточника, рак головного мозга, олигодендроглиому, нейробластому, менингиому, опухоль спинного мозга, рак кости, остеохондрому, хондросаркому, саркому Юинга, рак неизвестной первичной локализации, карциноидную опухоль, карциноид желудочно-кишечного тракта, фибросаркому, рак молочной железы, болезнь Педжета, рак шейки матки, колоректальный рак, рак прямой кишки, рак пищевода, рак желчного пузыря, рак головы, рак глаз, рак шеи, рак почки, опухоль Вильмса, рак печени, саркому Капоши, рак простаты, рак легкого, рак яичка, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, рак ротовой полости, рак кожи, мезотелиому, множественную миелому, рак яичников, эндокринный рак поджелудочной железы, глюкагоному, рак поджелудочной железы, рак паращитовидной железы, рак полового члена, рак гипофиза, саркому мягких тканей, ретинобластому, рак тонкой кишки, рак желудка, рак тимуса, рак щитовидной железы, трофобластический рак, хорионаденому, рак матки, рак эндометрия, рак влагалища, рак вульвы, нейрому слухового нерва, грибовидный микоз, инсулиному, карциноидный синдром, соматостатиному, рак десен, рак сердца, рак губ, рак мозговых оболочек, рак рта, рак нерва, рак неба, рак околоушной железы, рак брюшины, рак глотки, рак плевры, рак слюнной железы, рак языка и рак миндалин.
В еще одном воплощении изобретения, либо после воздействия на субъекта модифицированным вирусом, который экспрессирует по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид или после воздействия на указанного субъекта оболочечным вирусом, выбранным из группы, содержащий вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита(VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Hьюкасла (NDV), где указанный вирус имеет такой же или большую часть того(тех) же самого(ых) указанного(ых) пептида(ов), негенетически присоединенного(ых) к вирусной оболочке или введенного(ых) в/через вирусную оболочку, подвергая указанного субъекта воздействию ингибитора контрольной точки. Ингибитор контрольной точки ингибирует иммунные молекулы контрольной точки, такие как PD-1, PD-L1 и CTLA-4.
В прилагаемой формуле изобретения и в предшествующем описании изобретения, за исключением случаев, когда контекст требует иного из-за сформулированного выражения или необходимо подразумеваемого значения, слово “содержать” или его варианты, такие как “содержит” или “содержащий”, используют в инклюзивном смысле, т.е. описывают наличие указанных признаков, но не исключают наличия или добавления дополнительных признаков в различных воплощениях изобретения.
Все ссылки, в том числе любые патенты или патентные заявки, указанные в данном описании изобретения, включены в него посредством ссылки. Не допускается, чтобы какая-либо ссылка представляла собой предшествующий уровень техники. Кроме того, не допускается, чтобы какой-либо документ из уровня техники являлся частью общих знаний в данной области.
Предпочтительные признаки каждого аспекта изобретения могут быть такими,
как описанные в отношении любых других аспектов.
Другие признаки настоящего изобретения станут очевидными из следующих ниже примеров. Вообще говоря, изобретение распространяется на любой новый признак, или на любую новую комбинацию признаков, раскрытых в этом описании (включая прилагаемую формулу изобретения и фигуры). Таким образом, признаки, целые числа, характеристики, соединения или химические группировки, описанные в связи с конкретным аспектом, воплощением или примером изобретения, следует понимать как применимые к любому другому аспекту, воплощению или примеру, описанному в данном описании, если они не являются несовместимыми с ними.
Кроме того, если не указано иное, любой признак, раскрытый в данном документе, может быть заменен альтернативным признаком, служащим той же или аналогичной цели.
Во всем описании изобретения и формуле изобретения единственное число включает множественное число, если контекст не требует иного. В частности, когда используется неопределенный артикль, описание следует понимать как предполагающее множественность, а также единственность, если контекст не требует иного.
Воплощение настоящего изобретения ниже будет описано посредством примера со ссылкой на следующее, где:
На Фиг. 1 представлено краткое изложение данных, полученных, когда противоопухолевый, опухолеспецифический пептид прикреплен к разным вирусным оболочкам с использованием либо CPP, либо конъюгированного с холестерином пептида;
На Фиг. 2 показано, что CPP-содержащие пептиды могут быть присоединены к оболочке вируса простого герпеса 1. CPP-содержащий и FITC-меченый пептид образовывали комплекс с HSV-1 и для обнаружения комплексов использовали сэндвич- вариант твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Антитело против HSV-1 наносили на дно 96-луночного планшета и комплексы PeptiENV инкубировали в лунках. После отмывки несвязанной фракции анти-FITC-HRP-конъюгированное антитело использовали для обнаружения комплекса PeptiENV. На нижней панели Фиг. 2 показано, что CPP-содержащие пептиды имеют уменьшенное время диффузии в комплексе с HSV-1. Флуоресцентную корреляционную спектроскопию использовали для анализа кинетики диффузии пептидов в комплексе с HSV-1.
На Фиг. 3 на верхней панели показано, что холестерин-содержащие пептиды могут быть присоединены к оболочке вируса осповакцины. Холестерин-содержащие и FITC-меченые пептиды образовывали комплекс с вирусом осповакцины. После очистки комплексов PeptiENV с помощью 36% сахарозной подушки и ультрацентрифугирования, очищенные комплексы анализировали посредством проточной цитометрии. A. Вирус осповакцины без комплекса с пептидами и B. Вирус осповакцины в комплексе с холестерин-содержащими FITC-мечеными пептидами. На Фиг. 3, средняя панель, показано, что холестерин-содержащие пептиды могут быть прикреплены к оболочке вируса осповакцины. Холестерин-содержащие и FITC- меченые пептиды образовывали комплекс с вирусом осповакцины, и для обнаружения комплексов использовали сэндвич-вариант ELISA. Антитело против вируса осповакцины наносили на дно 96-луночного планшета, и комплексы PeptiENV инкубировали в лунках. После отмывки несвязанной фракции анти-FITC-HRP- конъюгированное антитело использовали для обнаружения комплексов PeptiENV. На Фиг. 3, нижняя панель, показано, что холестерин-содержащие SIINFEKL-пептиды легко презентируются дендритными клетками. В мышиные спленоциты вводили холестерин-содержащие SIINFEKL-пептиды и презентацию MHC-I эпитопа SIINFEKL с помощью CD11 c положительной DC-популяцией определяли посредством проточной цитометрии.
На Фиг. 4, верхняя панель, показано, что CPP-содержащие пептиды могут быть присоединены к оболочке вируса осповакцины. СРР-содержащие и FITC-меченые пептиды образовывали комплекс с вирусом осповакцины. После очистки комплексов PeptiENV с помощью 36% сахарозной подушки и ультрацентрифугирования очищенные комплексы анализировали посредством проточной цитометрии. A. HSV-1 без комплекса с пептидами и B. HSV-1 в комплексе с CPP-содержащими FITC- мечеными пептидами. На Фиг. 4, средняя панель, показано, что CPP-содержащие пептиды могут быть присоединены к оболочке вируса осповакцины. CPP-содержащий и FITC-меченый пептид образовывал комплекс с вирусом осповакцины, и для обнаружения комплексов использовали сэндвич-ELISA. Антитело против вируса осповакцины наносили на дно 96-луночного планшета и в лунках инкубировали комплексы PeptiENV. После отмывки несвязанной фракции, анти-FITC-HRP- конъюгированное антитело использовали для обнаружения комплекса PeptiENV. На Фиг. 4, нижняя панель, показано, что CPP-содержащие SIINFEKL-пептиды явно презентируются дендритными клетками. Спленоциты мыши были активированы с помощью CPP-содержащих SIINFEKL-пептидов, а презентация эпитопа MHCI SIINFEKL с помощью CD11c-положительной DC-популяции была определена с помощью проточной цитометрии.
На Фиг. 5, нижняя панель, показано, что PeptiENV может индуцировать активацию DC даже с очень низким количеством вируса. Вирус осповакцины образовывал комплекс с CPP- или холестерин-содержащими SIINFEKL-пептидами и его использовали для инфицирования мышиных спленоцитов. Через два часа после инфицирования дендритные клетки анализировали с помощью проточной цитометрии в отношении экспрессии маркеров активации DC. На нижней панели Фиг. 5 показано, что PeptiENV может индуцировать презентацию специфических противоопухолевых эпитопов MHC класса I CD11c-положительными DC даже при очень низком количестве вируса. Вирус осповакцины образовывал комплекс с CPP- или холестерин- содержащими SIINFEKL-пептидами и его использовали для инфицирования мышиных спленоцитов. Через два часа презентацию MHCI-эпитопа SIINFEKL посредством CD11c положительной DC-популяции определяли с помощью проточной цитометрии.
На Фиг. 6 показано, что комплексообразование PeptiENV вирус-пептид не влияет на вирусную инфекционность. Инфекционность PeptiENV сравнивали с нормальным не образующим комплекс вирусом, а жизнеспособность клеток измеряли через 3 суток после заражения.
На Фиг. 7 схематично представлены A) холестерин-конъюгированный иммуномодулирующий пептид, и B) иммуномодулирующий пептид, имеющий N- концевую пептидную последовательность проникновения в клетку. Обозначение разных функциональных последовательностей объектов: (1): холестерин (A) или последовательность проникновения в клетку (B); (3): сайт расщепления катепсином D/E. (2): сайт расщепления фурином (4): сайты иммунопротеасомного процессинга. (5): MHC-I рестриктированный эпитоп.
На Фиг. 8 показано, что различные CPP-последовательности можно использовать для присоединения противоопухолевых пептидов к вирусной оболочке. CPP-содержащие и FITC-меченые пептиды образовывали комплекс с вирусом осповакцины, и для обнаружения этих комплексов использовали сэндвич-ELISA. Антитело против вируса осповакцины наносили на дно 96-луночного планшета, и комплексы PeptiENV инкубировали в лунках. После отмывки несвязанной фракции анти-FITC-HRP-конъюгированное антитело использовали для обнаружения комплексов PeptiENV.
На Фиг. 9 показано, что CPP-содержащие пептиды не имеют каких-либо противовирусных эффектов и могут быть безопасно присоединены к вирусной оболочке без потери инфекционности или онколитического эффекта. В четырех разных клеточных линиях, A549, MDMBA436, B16F10 и B16-OVA, определяли вирусную инфекционность и PeptiENV сравнивали с немодифицированным вирусом.
На Фиг. 10 показано, что противоопухолевые пептиды, закрепленные в вирусной оболочке с помощью CPP или холестериновых группировок, индуцируют мощный противоопухолевый иммунитет, что приводит к усилению контроля за ростом опухоли и увеличению выживаемости. A. Сравнение опухолевого роста между группами имитации (обработка только инъекционной средой), только вируса осповакцины, PeptiENV с противоопухолевыми пептидами, присоединенными к вирусной оболочке с помощью холестериновой группировки (PeptiENV VACV/chol), и PeptiENV с противоопухолевыми пептидами, присоединенными к вирусной оболочке с помощью CPP-группировки (PeptiENV VACV/cpp). B. кривая выживаемости Каплана-
Мейера для групп мышей, обработанных PeptiENV VACV/cpp, только вирусом осповакцины, одним противоопухолевым пептидом (без вируса) или имитатором. C. Анализ посредством проточной цитометрии опухолеспецифических T-клеток в обработанной опухоли. PeptiENV может индуцировать множественную фильтрацию опухолеспецифических эффекторных Т-клеток в микроокружение опухоли. D. Анализ посредством проточной цитометрии вирус-специфических T-клеток в микроокружении опухоли. PeptiENV индуцирует противовирусный иммунитет, сравнимый с немодифицированным вирусом осповакцины, при этом специфически индуцирует мощный противоопухолевый иммунитет, не представленный немодифицированным вирусом осповакцины.
На Фиг. 11 показано, что у мышей, обработанных PeptiENV VACV/chol и PeptiENV VACV/cpp, наблюдается сильный противоопухолевый иммунный ответ и они защищены от повторного появления опухоли, при этом мыши, обработанные имитатором, не защищены. 500000 B16-OVA клеток инъецировали в противоположный бок относительно предыдущей имплантации опухоли и следили за мышами в течение 14 суток. У мышей, получавших PeptiENV, опухолевого роста не наблюдалось, в то время как в группе, получавшей имитатор, частота возникновения опухолей составляла 100%.
На Фиг. 12 показано, что противоопухолевые пептиды, закрепленные в оболочке вируса простого герпеса 1 (ВПГ-1) при помощи СРР-группировки, индуцируют сильный противоопухолевый иммунитет, приводящий к усиленному контролю роста опухоли. A. Кривая роста опухолей в группах, обработанных PeptiENV HSV-1/cpp, только HSV-1 и имитатором. B. Проточно-цитометрический анализ опухолеспецифических Т-клеток в обработанной опухоли. PeptiENV может индуцировать множественную фильтрацию опухолеспецифических эффекторных Т- клеток в микроокружение опухоли.
На Фиг. 13 показаны измерения поверхностного плазмонного резонанса (SPR) для подтверждения высокого сродства CPP-содержащих противоопухолевых пептидов к вирусной оболочке. Для анализа данных SPR использовали подобранную модель кинетики двухсайтового связывания.
Конкретное описание Материалы и методы: Пептиды:
Пептиды, использованные в этом исследовании, перечислены ниже, и все они были приобретены у PepScan:
CPP пептиды:
GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 8)
GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW-FITC (SEQ ID NO: 24)
RQIKIWFQNRRMKWKKRWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 25)
KLALKLALKALKAALKLARWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 26)
RRRRRRRRRRWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 27)
FITC -RWEKISIINFEKLYKLRRRRRRRRR (SEQ ID NO: 28)
FITC-RWEKISIINFEKLYKLKETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 29)
FITC-RWEKISIINFEKLYKLAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 30)
GLWRALWRLLRSLWRLLWRARWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 31)
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 17)
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 18)
Холестерин-конъюгированные пептиды: LEQLESIINFEKLTEWRVRRALISC-холестерин (SEQ ID NO: 19)
FITC-LEQLESIINFEKLTEWRVRRALISC-холестерин (SEQ ID NO: 32)
холестерин-CRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 20)
холестерин-CRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW-FITC (SEQ ID NO: 33)
холестерин-CSIINFEKL (SEQ ID NO: 21)
холестерин-CRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 22)
холестерин-CRWEKISVYDFFVWLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 23)
Клеточные линии
Клеточную линию карциномы легкого человека A549, эпителиальную клеточную линию почек африканской зеленой мартышки Vero (B) и клеточные линии меланомы мыши B16 / OVA и B16-F10 культивировали в среде DMEM с 10% эмбриональной телячьей сывороткой (FBS) (Life Technologies), 1% L-глутамина и 1% пенициллина/стрептомицина при 37°С/5% СО2. Линию клеток трижды негативного рака молочной железы человека MDMBA436 культивировали в RPMI с 10% эмбриональной сывороткой теленка (FBS) (Life Technologies), 1% L-глутамина и 1% пенициллина/стрептомицина при 37°C/5% CO2.
Получение вирусов
Вирус простого герпеса 1 получали в клетках Vero, очищали ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы и элюировали в 20 мМ MES, 100 мМ NaCl, 30 мМ Tris-HCl (pH 7,2). Штамм вируса осповакцины Western reserve (VVDD- mDAI-RFP) получали в клетках A549, очищали ультрацентрифугированием на 36% сахарозной подушке и элюировали в 1 мМ Tris (pH 9,0).
ELISA
2,5×107 частиц вируса осповакцины образовывали комплекс с 8 мкг либо CPP- пептида-FITC, либо холестерин-конъюгированного пептида-FITC в 100 мкл DMEM в течение 15 минут при 37°C. После комплексообразования несвязанные пептиды удаляли ультрацентрифугированием (20,000 г, 40-80 мин) на 36% сахарозной подушке в 1 мМ Tris (pH 9,0). Для ELISA 96-луночные иммунопланшеты Maxisorb покрывали поликлональными антителами против вируса осповакцины (Abcam) в течение ночи при 4°C в концентрации 2 мкг/мл. Комплексы вирус осповакцины-пептид инкубировали в течение 30-60 мин при 37°C или при комнатной температуре и три раза промывали 1xPBS. Комплексы определяли с помощью анти-FITC антител, конъюгированных с пероксидазой хрена (Abcam) (разведение 1:5000 в 2% BSA(бычий сывороточный альбумин)-PBS).
2,5×107 частиц вируса простого герпеса 1 образовывали комплекс с 8 мкг либо CPP-пептида-FITC, либо холестерин-конъюгированного пептида-FITC в 100 мкл DMEM в течение 15 минут при 37°C. Для ELISA 96-луночные иммунопланшеты Maxisorb покрывали поликлональными антителами против HSV-1 (Abcam) в течение ночи при 4°C в концентрации 2 мкг/мл. Комплексы HSV-1-пептид инкубировали в течение 30-60 мин при 37°C или при комнатной температуре и промывали 1xPBS три раза. Комплексы определяли с помощью анти-FITC антитела, конъюгированного с пероксидазой хрена (Abcam) (разведение 1:5000 в 2% BSA-PBS)
Проточная цитометрия
5×107 частиц вируса осповакцины образовывали комплекс с 24 мкг либо CPP- пептида-FITC, либо холестерин-конъюгированного пептида-FITC в 200 мкл DMEM в течение 15 минут при 37°C. После комплексообразования несвязанные пептиды удаляли ультрацентрифигированием (20,000 г, 40-80 мин) с помощью 36% сахарозной подушки в 1 мМ Tris (pH 9,0) и элюировали в 2% формалин в PBS. После фиксации формалин удаляли с помощью еще одного ультрацентрифугирования (20,000 г, 40-80 мин) на 36% подушке сахарозы и осадок элюировали в 1x сверхчистом PBS (Gibco). Проточную цитометрию проводили с использованием микропроточного цитометра Apogee A50 (Apogee), и для оценки комплексов использовали FITC-детекцию.
Эксперименты с перекрестной презентацией 2×106 спленоцитов в 800 мкл 10% культуральной среды RPMI-1640 инкубировали с 200 мкл разведения пептидов (0,19 мкг/мкл) GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 8), LEQLESIINFEKLTEWRVRRALISC-холестерин (SEQ ID NO: 19) или холестерин- CRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 20).
Комплексы вирус осповакцины-пептид получали, как описано для ELISA. После 2 ч инкубации клетки промывали и окрашивали либо APC антимышиным H-2Kb, связанным с SIINFEKL, либо APC мышиным IgG1, контроль изотипа κ (BioLegend, San Diego, CA, USA), и образцы анализировали с помощью проточной цитометрии.
Анализ жизнеспособности клеток
Жизнеспособность клеток измеряли с использованием анализа пролиферации клеток CellTiterGlo 96 AQueous One Solution (Promega) и многолуночного планшетного ридера (Varioscan; ThermoLabsystems) для определения люминесценции образцов.
Поверхностный плазмонный резонанс
Измерение проводили с использованием многопараметрического прибора SPR Navi™ 220A (Bionavis Ltd, Tampere, Finland). В качестве электродного буфера использовали фосфатно-солевой буфер (PBS) (pH 7,4). В ходе экспериментов использовали постоянную скорость потока 20 мкл/мин, и температура была установлена на + 20°C. Лазерное излучение с длиной волны 670 нм использовали для поверхностного плазмонного возбуждения.
Сенсорный слайд с поверхностью диоксида кремния активировали путем 5- минутной плазменной обработки с последующим покрытием APTES ((3- аминопропил)триэтоксисилан) путем инкубации сенсора в 50 мМ APTES в изопропаноле в течение 4 ч. Затем сенсор промывали и помещали в устройство SPR и вирусы иммобилизовывали in situ на поверхности сенсора двух испытательных каналов путем введения 1,1×107 БОЕ (бляшкообразующих единиц) VACV в PBS (pH 7,4) в течение примерно 12 мин, с последующим 3-минутным промыванием PBS. CPP- содержащий противоопухолевый пептид или пептид без CPP-последовательности (не взаимодействующий контроль) затем вводили в оба проточных канала проточной кюветы параллельно, с увеличением концентрации пептида в диапазоне от 1,23 мкМ до 100 мкМ.
Эксперименты на животных
Во всех экспериментах на животных использовали линию мышей C57BL/6JOlaHsd. 350000 клеток B16-OVA инъецировали в правый бок мышей (в эксперименте по повторному заражению клетки инъецировали в левый бок) и, когда размер опухоли достигал примерно 50 мм3 (через 10-12 дней после инъекции), мышей лечили немодифицированными вирусами, PeptiENV-платформой, только пептидами или средой для инъекции (имитатор). Мышей лечили в сутки 0, 2, а затем на 8-10 сутки вводили бустерное лечение. Опухоли измеряли каждые вторые сутки, пока размер опухоли не достигал максимально допустимого размера.
--->
SEQUENCE LISTING
<110> Cerullo, Vicenzo
Capasso, Christian
Ylosmaki, Erkko
<120> Envelope Virus Platform PeptiENV
<130> 4599P/WO
<150> GB1616365.1
<151> 2016-09-27
<160> 33
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 1
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln
1 5 10
<210> 2
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 2
Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys
1 5 10 15
<210> 3
<211> 18
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 3
Lys Leu Ala Leu Lys Leu Ala Leu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Leu Lys
1 5 10 15
Leu Ala
<210> 4
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 4
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg
1 5
<210> 5
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 5
Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys
1 5 10 15
Lys Lys Arg Lys Val
20
<210> 6
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 6
Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu Lys Ala Leu Ala Ala Leu
1 5 10 15
Ala Lys Lys Ile Leu
20
<210> 7
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 7
Ala Gly Leu Trp Arg Ala Leu Trp Arg Leu Leu Arg Ser Leu Trp Arg
1 5 10 15
Leu Leu Trp Arg Ala
20
<210> 8
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell pentrating peptide
<400> 8
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln Arg Val Arg Arg
1 5 10 15
Ala Leu Ile Ser Leu Glu Gln Leu Glu Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys
20 25 30
Leu Thr Glu Trp
35
<210> 9
<211> 33
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 9
Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys
1 5 10 15
Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
20 25 30
Lys
<210> 10
<211> 35
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 10
Lys Leu Ala Leu Lys Leu Ala Leu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Leu Lys
1 5 10 15
Leu Ala Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr
20 25 30
Lys Leu Lys
35
<210> 11
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 11
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile
1 5 10 15
Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu Lys
20 25
<210> 12
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 12
Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
1 5 10 15
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg
20 25
<210> 13
<211> 37
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 13
Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
1 5 10 15
Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys
20 25 30
Lys Lys Arg Lys Val
35
<210> 14
<211> 37
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 14
Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
1 5 10 15
Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu Lys Ala Leu Ala Ala Leu
20 25 30
Ala Lys Lys Ile Leu
35
<210> 15
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 15
Ala Gly Leu Trp Arg Ala Leu Trp Arg Leu Leu Arg Ser Leu Trp Arg
1 5 10 15
Leu Leu Trp Arg Ala Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu
20 25 30
Lys Leu Tyr Lys Leu Lys
35
<210> 16
<211> 28
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 16
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln Arg Trp Glu Lys
1 5 10 15
Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
20 25
<210> 17
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 17
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln Arg Trp Glu Lys
1 5 10 15
Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu
20 25
<210> 18
<211> 41
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<400> 18
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln Arg Trp Glu Lys
1 5 10 15
Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu Arg Trp Glu Lys
20 25 30
Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu
35 40
<210> 19
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (26)..(26)
<223> cholesterol
<400> 19
Leu Glu Gln Leu Glu Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Thr Glu Trp
1 5 10 15
Arg Val Arg Arg Ala Leu Ile Ser Cys Xaa
20 25
<210> 20
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> cholesterol
<400> 20
Xaa Cys Arg Val Arg Arg Ala Leu Ile Ser Leu Glu Gln Leu Glu Ser
1 5 10 15
Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Thr Glu Trp
20 25
<210> 21
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> cholesterol
<400> 21
Xaa Cys Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu
1 5 10
<210> 22
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> cholsterol
<400> 22
Xaa Cys Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu
1 5 10 15
<210> 23
<211> 32
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> cholesterol
<400> 23
Xaa Cys Arg Trp Glu Lys Ile Ser Val Tyr Asp Phe Phe Val Trp Leu
1 5 10 15
Tyr Lys Leu Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu
20 25 30
<210> 24
<211> 37
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (37)..(37)
<223> FITC
<400> 24
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Gln Arg Val Arg Arg
1 5 10 15
Ala Leu Ile Ser Leu Glu Gln Leu Glu Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys
20 25 30
Leu Thr Glu Trp Xaa
35
<210> 25
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (34)..(34)
<223> FITC
<400> 25
Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys
1 5 10 15
Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu
20 25 30
Lys Xaa
<210> 26
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (36)..(36)
<223> FITC
<400> 26
Lys Leu Ala Leu Lys Leu Ala Leu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Leu Lys
1 5 10 15
Leu Ala Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr
20 25 30
Lys Leu Lys Xaa
35
<210> 27
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (27)..(27)
<400> 27
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile
1 5 10 15
Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys Leu Lys Xaa
20 25
<210> 28
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> FITC
<400> 28
Xaa Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys
1 5 10 15
Leu Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg
20 25
<210> 29
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> FITC
<400> 29
Xaa Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys
1 5 10 15
Leu Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro
20 25 30
Lys Lys Lys Arg Lys Val
35
<210> 30
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (1)..(1)
<223> FITC
<400> 30
Xaa Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Tyr Lys
1 5 10 15
Leu Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu Lys Ala Leu Ala Ala
20 25 30
Leu Ala Lys Lys Ile Leu
35
<210> 31
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> X
<222> (38)..(38)
<223> FITC
<400> 31
Gly Leu Trp Arg Ala Leu Trp Arg Leu Leu Arg Ser Leu Trp Arg Leu
1 5 10 15
Leu Trp Arg Ala Arg Trp Glu Lys Ile Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys
20 25 30
Leu Tyr Lys Leu Lys Xaa
35
<210> 32
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> Z
<222> (1)..(1)
<223> FITC
<220>
<221> X
<222> (27)..(27)
<223> cholesterol
<400> 32
Glx Leu Glu Gln Leu Glu Ser Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Thr Glu
1 5 10 15
Trp Arg Val Arg Arg Ala Leu Ile Ser Cys Xaa
20 25
<210> 33
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cell penetrating peptide
<220>
<221> Z
<222> (1)..(1)
<223> cholesterol
<220>
<221> X
<222> (27)..(27)
<223> FITC
<400> 33
Glx Cys Arg Val Arg Arg Ala Leu Ile Ser Leu Glu Gln Leu Glu Ser
1 5 10 15
Ile Ile Asn Phe Glu Lys Leu Thr Glu Trp Xaa
20 25
<---
Claims (57)
1. Модифицированный оболочечный вирус, выбранный из группы, состоящей из: вируса простого герпеса 1 (HSV-1), вируса простого герпеса 2 (HSV-2), вируса осповакцины, вируса везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вируса кори (MeV), вируса Мараба и вируса болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку.
2. Модифицированный оболочечный вирус по п. 1, где длина указанного пептида выбрана из группы, включающей: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 и 50 аминокислот.
3. Модифицированный оболочечный вирус по п. 1 или 2, где множество указанных пептидов негенетически присоединено к вирусной оболочке или введено в/через вирусную оболочку.
4. Модифицированный оболочечный вирус по п. 3, где указанные пептиды идентичны; указанные пептиды имеют более чем 90%, 91%, 92%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности друг с другом или указанные пептиды представляют несколько разных антигенов.
5. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-4, где указанный(е) пептид(ы) являет(ют)ся MHC-I-рестриктированным(и).
6. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-5, где указанный(е) пептид(ы) являет(ют)ся MHC-II рестриктированным(и).
7. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 3-6, где указанные пептиды содержат смесь MHC-I рестриктированных пептидов и MHC-II рестриктированных пептидов.
8. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-7, где указанный(е) пептид(ы) содержит(ат) слитую молекулу, включающую множество разных антигенов.
9. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-8, где указанный пептид дополнительно содержит по меньшей мере один сайт расщепления.
10. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-9, где указанный пептид дополнительно содержит по меньшей мере один сайт процессинга иммунопротеосомы.
11. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-10, где указанный пептид расположен между парой сайтов процессинга иммунопротеосомы и выше или ниже его находится по меньшей мере один сайт расщепления.
12. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-11, где указанный(е) пептид(ы) нековалентно прикреплен(ы) к вирусной оболочке или введен(ы) в/через вирусную оболочку.
13. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-12, где указанный(е) пептид(ы) являет(ют)ся негенетически присоединенным(и) к указанной вирусной оболочке или введенным(и) в/через указанную вирусную оболочку с использованием либо пептида, проникающего в клетку, либо холестерин-конъюгированного пептида.
14. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-13, где указанный(е) пептид(ы) являет(ют)ся негенетически присоединенным(и) к указанной вирусной оболочке или введенным(и) в/через указанную вирусную оболочку с использованием либо пептида, проникающего в клетку (CPP), либо холестерин-конъюгированного пептида, выбранного из группы, содержащей:
GRKKRRQRRRPQ (SEQ ID NO: 1), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
RQIKIWFQNRRMKWKK (SEQ ID NO: 2), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
KLALKLALKALKAALKLA (SEQ ID NO: 3), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
RRRRRRRRR (SEQ ID NO: 4), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
KETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 5), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
AGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 6), последовательность CPP на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида;
AGLWRALWRLLRSLWRLLWRA (SEQ ID NO: 7), последовательность CPP на N- или C-конце
указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида и
холестериновую группировку на N- или C-конце указанного противоопухолевого, опухолеспецифического пептида.
15. Модифицированный оболочечный вирус по п. 14, где указанный(е) пептид(ы) выбран(ы) из группы, содержащей:
GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 8);
RQIKIWFQNRRMKWKKRWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 9);
KLALKLALKALKAALKLARWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 10);
RRRRRRRRRRWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 11);
RWEKISIINFEKLYKLRRRRRRRRR (SEQ ID NO: 12);
RWEKISIINFEKLYKLKETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 13);
RWEKISIINFEKLYKLAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 14);
AGLWRALWRLLRSLWRLLWRA RWEKISIINFEKLYKLK (SEQ ID NO: 15);
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKLYKL (SEQ ID NO: 16);
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 17);
GRKKRRQRRRPQRWEKISIINFEKLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 18);
LEQLESIINFEKLTEWRVRRALISC-холестерин (SEQ ID NO: 19);
холестерин-CRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW (SEQ ID NO: 20);
холестерин-CSIINFEKL (SEQ ID NO: 21);
холестерин-CRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 22);
холестерин-CRWEKISVYDFFVWLYKLRWEKISIINFEKL (SEQ ID NO: 23);
GRKKRRQRRRPQRVRRALISLEQLESIINFEKLTEW-FITC (SEQ ID NO: 24);
RQIKIWFQNRRMKWKKRWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 25);
KLALKLALKALKAALKLARWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 26);
RRRRRRRRRRWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 27);
FITC -RWEKISIINFEKLYKLRRRRRRRRR (SEQ ID NO: 28);
FITC-RWEKISIINFEKLYKLKETWWETWWTEWSQPKKKRKV (SEQ ID NO: 29);
FITC-RWEKISIINFEKLYKLAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 30) и
GLWRALWRLLRSLWRLLWRARWEKISIINFEKLYKLK-FITC (SEQ ID NO: 31).
16. Модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-15, где представлена комбинация различных негенетически модифицированных оболочечных вирусов, выбранных из группы, содержащей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Ньюкасла (NDV).
17. Модифицированный оболочечный вирус по п. 16, где указанная комбинация содержит любые 2, 3, 4, 5, 6 или 7 из указанных вирусов, модифицированных так, чтобы содержать по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку указанного вируса.
18. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая: модифицированный оболочечный вирус по любому из пп. 1-17 и подходящий носитель.
19. Способ лечения рака, включающий воздействие на субъекта модифицированного оболочечного вируса, выбранного из группы, состоящей из: вируса простого герпеса 1 (HSV-1), вируса простого герпеса 2 (HSV-2), вируса осповакцины, вируса везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вируса кори (MeV), вируса Мараба и вируса болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку.
20. Способ по п. 19, включающий, после выбранного периода, воздействие на указанного субъекта другого модифицированного оболочечного вируса, выбранного из группы, содержащей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, негенетически присоединенный к вирусной оболочке или введенный в/через вирусную оболочку, и где указанный вирус отличается от вируса, использованного для предыдущего воздействия.
21. Способ по п. 20, где указанный другой модифицированный оболочечный вирус покрыт теми же или в большинстве теми же самыми указанными пептидами, что и первый модифицированный оболочечный вирус.
22. Способ по любому из пп. 19-21, в котором, после воздействия указанного одного или более вирусов, указанного субъекта дополнительно подвергают воздействию ингибитора контрольной точки.
23. Способ лечения рака, включающий воздействие на субъекта модифицированного вируса, который экспрессирует по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, и затем, после выбранного периода, воздействие на указанного субъекта оболочечного вируса, выбранного из группы, состоящей из: вируса простого герпеса 1 (HSV-1), вируса простого герпеса 2 (HSV-2), вируса осповакцины, вируса везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вируса кори (MeV), вируса Мараба и вируса болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет такой(ие) же пептид(ы) или в большинстве такие же указанные пептиды, который(е) негенетически присоединен(ы) к вирусной оболочке или встроен(ы) в/через вирусную оболочку.
24. Способ по п. 23, где после воздействия на субъекта модифицированного вируса, который экспрессирует по меньшей мере один противоопухолевый, опухолеспецифический пептид, или после воздействия на субъекта оболочечного вируса, выбранного из группы, содержащей вирус простого герпеса 1 (HSV-1), вирус простого герпеса 2 (HSV-2), вирус осповакцины, вирус везикулярного стоматита (лихорадки Индианы) (VSV), вирус кори (MeV), вирус Мараба и вирус болезни Ньюкасла (NDV), где указанный вирус имеет такой(ие) же пептид(ы) или в большинстве такие же указанные пептиды, который(е) негенетически присоединен(ы) к вирусной оболочке или введен(ы) в/через вирусную оболочку, указанного субъекта подвергают воздействию ингибитора контрольной точки.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB1616365.1A GB201616365D0 (en) | 2016-09-27 | 2016-09-27 | Non-genetic modification of enveloped viruses |
| GB1616365.1 | 2016-09-27 | ||
| PCT/EP2017/072366 WO2018059896A1 (en) | 2016-09-27 | 2017-09-06 | Non-genetic modification of enveloped viruses |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019110407A RU2019110407A (ru) | 2020-10-29 |
| RU2019110407A3 RU2019110407A3 (ru) | 2021-05-13 |
| RU2760521C2 true RU2760521C2 (ru) | 2021-11-26 |
Family
ID=57539741
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019110407A RU2760521C2 (ru) | 2016-09-27 | 2017-09-06 | Негенетическая модификация оболочечных вирусов |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10982194B2 (ru) |
| EP (1) | EP3519565A1 (ru) |
| JP (2) | JP7258746B2 (ru) |
| KR (1) | KR102599401B1 (ru) |
| CN (1) | CN109890957A (ru) |
| AU (2) | AU2017337753B2 (ru) |
| BR (1) | BR112019005825A2 (ru) |
| CA (1) | CA3035104A1 (ru) |
| GB (1) | GB201616365D0 (ru) |
| RU (1) | RU2760521C2 (ru) |
| WO (1) | WO2018059896A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201902388B (ru) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB201907413D0 (en) * | 2019-05-24 | 2019-07-10 | Univ Helsinki | Viral vector |
| US20220305099A1 (en) * | 2019-08-27 | 2022-09-29 | Turnstone Biologics Corp. | Methods for inducing an immune response against neoantigens |
| GB202013834D0 (en) * | 2020-09-03 | 2020-10-21 | Valo Therapeutics Oy | PeptiVAX therapy |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1477964A (zh) * | 1999-04-15 | 2004-02-25 | 应用病毒治疗肿瘤 | |
| RU2245163C2 (ru) * | 1998-11-30 | 2005-01-27 | Сайтос Байотекнолэджи АГ | Композиция (варианты), способ получения не природной упорядоченной и содержащей повторы антигенной матрицы, способ терапевтического лечения и способ иммунизации |
| EA012984B1 (ru) * | 2003-12-17 | 2010-02-26 | Вайет | Конъюгаты иммуногенных пептидных носителей и способы их получения |
| RU2404993C2 (ru) * | 2003-07-02 | 2010-11-27 | Иннейт Фарма | Композиции и способы регуляции клеточной активности nk |
| RU2447145C2 (ru) * | 2006-11-13 | 2012-04-10 | Этерна Центарис ГмбХ | Микроорганизм-носитель нуклеотидных последовательностей, кодирующих антигены и белковые токсины |
| EP2349296A4 (en) * | 2008-08-21 | 2012-09-19 | Ottawa Hospital Res Inst | SYNTHETIC ONCOLYTIC VIRAL SYMBIOSIS OBTAINED BY GENETIC ENGINEERING |
| WO2015066042A1 (en) * | 2013-10-28 | 2015-05-07 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Oncolytic hsv vector |
| RU2560976C2 (ru) * | 2009-05-12 | 2015-08-20 | Трансген Са | Способ продуцирования и очистки ортопоксвируса |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL141500A0 (en) | 1998-08-27 | 2002-03-10 | Aventis Pharma Sa | Targeted adenovirus vectors for delivery of heterologous genes |
| CA2374237A1 (en) | 1999-05-06 | 2000-11-16 | Wake Forest University | Compositions and methods for identifying antigens which elicit an immune response |
| DK1453471T3 (da) | 2001-11-07 | 2011-03-28 | Mannkind Corp | Ekspressionsvektorer, der koder for epitoper af antigener, og fremgangsmåde til deres konstruktion |
| GB0203285D0 (en) * | 2002-02-12 | 2002-03-27 | Brown Susanne M | An herpes simplex virus complex |
| WO2004000220A2 (en) | 2002-06-21 | 2003-12-31 | Genetix Pharmaceuticals, Inc. | Methods for purifying viral particles for gene therapy |
| US20070243170A1 (en) * | 2002-10-07 | 2007-10-18 | The University Of Chicago | Targeting of Herpes Simplex Virus to Specific Receptors |
| ZA200507063B (en) * | 2003-03-26 | 2007-03-28 | Cytos Biotechnology Ag | Packaging of immunostimulatory oligonucleotides into virus-like particles: Method of preparation and use |
| WO2005060541A2 (en) | 2003-12-01 | 2005-07-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Peptides and methods for inducing cellular resistance to infection |
| JP2008136381A (ja) * | 2006-11-30 | 2008-06-19 | Japan Health Science Foundation | 改変型アデノウイルスベクター及びその作製方法 |
| WO2009117656A2 (en) | 2008-03-21 | 2009-09-24 | Vectorlogics,Inc. | Capsid-incorporated antigen for novel adenovirus vaccine |
| ES2667622T3 (es) * | 2008-05-29 | 2018-05-11 | Alma Mater Studiorum - Università di Bologna | Virus del herpes simple (VHS) con tropismo modificado, utilizaciones y procedimiento de preparación del mismo |
| ES2335077B1 (es) | 2008-12-30 | 2011-02-02 | Instituto Aragones De Ciencias De La Salud | Formulaciones para el recubrimiento y transporte de diversos elementos hacia los tumores. |
| AU2011306845C1 (en) | 2010-09-24 | 2015-05-14 | Oncos Therapeutics Oy | Oncolytic adenoviral vectors coding for monoclonal anti - CTLA - 4 antibodies |
| US20140140962A1 (en) | 2011-04-29 | 2014-05-22 | The Research Foundation Of State University Of New York | Viruses modified with unnatural moieties and methods of use thereof |
| US20140349944A1 (en) * | 2013-05-23 | 2014-11-27 | Musc Foundation For Research Development | Chaperone-based integrin inhibitors for the treatment of cancer and inflammatory diseases |
| PE20160673A1 (es) | 2013-08-22 | 2016-07-21 | Univ Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Terapias inmuno-oncoliticas |
| CN107073089A (zh) | 2014-05-19 | 2017-08-18 | 瓦洛治疗公司 | 用于癌症疫苗的包被的溶瘤腺病毒 |
-
2016
- 2016-09-27 GB GBGB1616365.1A patent/GB201616365D0/en not_active Ceased
-
2017
- 2017-09-06 JP JP2019515292A patent/JP7258746B2/ja active Active
- 2017-09-06 EP EP17765150.2A patent/EP3519565A1/en active Pending
- 2017-09-06 BR BR112019005825A patent/BR112019005825A2/pt unknown
- 2017-09-06 CN CN201780056649.7A patent/CN109890957A/zh active Pending
- 2017-09-06 AU AU2017337753A patent/AU2017337753B2/en active Active
- 2017-09-06 KR KR1020197012062A patent/KR102599401B1/ko active IP Right Grant
- 2017-09-06 WO PCT/EP2017/072366 patent/WO2018059896A1/en unknown
- 2017-09-06 US US16/337,220 patent/US10982194B2/en active Active
- 2017-09-06 RU RU2019110407A patent/RU2760521C2/ru active
- 2017-09-06 CA CA3035104A patent/CA3035104A1/en active Pending
-
2019
- 2019-04-15 ZA ZA2019/02388A patent/ZA201902388B/en unknown
-
2022
- 2022-12-09 JP JP2022197406A patent/JP2023029997A/ja active Pending
-
2023
- 2023-09-29 AU AU2023237201A patent/AU2023237201A1/en active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2245163C2 (ru) * | 1998-11-30 | 2005-01-27 | Сайтос Байотекнолэджи АГ | Композиция (варианты), способ получения не природной упорядоченной и содержащей повторы антигенной матрицы, способ терапевтического лечения и способ иммунизации |
| CN1477964A (zh) * | 1999-04-15 | 2004-02-25 | 应用病毒治疗肿瘤 | |
| RU2404993C2 (ru) * | 2003-07-02 | 2010-11-27 | Иннейт Фарма | Композиции и способы регуляции клеточной активности nk |
| EA012984B1 (ru) * | 2003-12-17 | 2010-02-26 | Вайет | Конъюгаты иммуногенных пептидных носителей и способы их получения |
| RU2447145C2 (ru) * | 2006-11-13 | 2012-04-10 | Этерна Центарис ГмбХ | Микроорганизм-носитель нуклеотидных последовательностей, кодирующих антигены и белковые токсины |
| EP2349296A4 (en) * | 2008-08-21 | 2012-09-19 | Ottawa Hospital Res Inst | SYNTHETIC ONCOLYTIC VIRAL SYMBIOSIS OBTAINED BY GENETIC ENGINEERING |
| RU2560976C2 (ru) * | 2009-05-12 | 2015-08-20 | Трансген Са | Способ продуцирования и очистки ортопоксвируса |
| WO2015066042A1 (en) * | 2013-10-28 | 2015-05-07 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Oncolytic hsv vector |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2023237201A1 (en) | 2023-12-14 |
| KR102599401B1 (ko) | 2023-11-06 |
| US10982194B2 (en) | 2021-04-20 |
| JP7258746B2 (ja) | 2023-04-17 |
| AU2017337753A1 (en) | 2019-03-21 |
| JP2019532631A (ja) | 2019-11-14 |
| RU2019110407A (ru) | 2020-10-29 |
| BR112019005825A2 (pt) | 2019-06-11 |
| RU2019110407A3 (ru) | 2021-05-13 |
| EP3519565A1 (en) | 2019-08-07 |
| GB201616365D0 (en) | 2016-11-09 |
| CA3035104A1 (en) | 2018-04-05 |
| ZA201902388B (en) | 2020-10-28 |
| WO2018059896A1 (en) | 2018-04-05 |
| AU2017337753B2 (en) | 2023-09-28 |
| KR20190053260A (ko) | 2019-05-17 |
| US20200010811A1 (en) | 2020-01-09 |
| CN109890957A (zh) | 2019-06-14 |
| JP2023029997A (ja) | 2023-03-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Deres et al. | In vivo priming of virus-specific cytotoxic T lymphocytes with synthetic lipopeptide vaccine | |
| KR100457647B1 (ko) | 펩티드및애쥬번트에기초한면역조절용약제학적조성물 | |
| JP2023029997A (ja) | エンベロープウイルスの非遺伝的改変 | |
| CN107050440B (zh) | 疫苗组合物和其使用方法 | |
| Minev et al. | Insertion signal sequence fused to minimal peptides elicits specific CD8+ T-cell responses and prolongs survival of thymoma-bearing mice | |
| Hamley | Peptides for vaccine development | |
| JP2003529319A (ja) | ＨＩＶ−１ｇｐ４１を標的化する広範に中和する抗体を誘発する方法 | |
| KR20210104745A (ko) | 합성 펩티드 면역원에 대한 면역 자극제로서 인공 무차별적 t 헬퍼 세포 에피토프 | |
| Zhang et al. | Impact of dose, route, and composition on the immunogenicity of immune polyelectrolyte multilayers delivered on gold templates | |
| Sabatino | Medicinal Chemistry and Methodological Advances in the Development of Peptide-Based Vaccines: Miniperspective | |
| US10925960B2 (en) | Antigen delivery system | |
| CN107223136B (zh) | 一种将抗体导入细胞内的方法 | |
| McGuire et al. | A library-selected, Langerhans cell-targeting peptide enhances an immune response | |
| Alberto et al. | In silico and in vivo studies of gp120-HIV-derived peptides in complex with G4-PAMAM dendrimers | |
| Kim et al. | In vitro induction of HLA-A2402-restricted and carcinoembryonic-antigen-specific cytotoxic T lymphocytes on fixed autologous peripheral blood cells | |
| Tohumeken et al. | A modular antigen presenting peptide/oligonucleotide nanostructure platform for inducing potent immune response | |
| WO2022235678A1 (en) | Human anti-coronavirus peptide vaccines and methods of their use | |
| EP3055322B1 (en) | Ubiquitinylated proteins | |
| KIM et al. | A single amino acid variation within an immunodominant AKR/Gross MuLV cytotoxic T-lymphocyte epitope leads to a loss in immunogenicity | |
| WO2022053703A1 (en) | Heterologous prime boost vaccine | |
| Nicoli et al. | ORCA–Online Research@ Cardiff | |
| WO2015066020A1 (en) | Methods of monitoring immune responses | |
| Schultz et al. | peptide Assembly on the Membrane Determines the HIV-1 Inhibitory Activity of Dual-Targeting Fusion Inhibitor Peptides |