RU2689865C1

RU2689865C1 - Method for simulating gastric and duodenal ulcers in small laboratory animals

Info

Publication number: RU2689865C1
Application number: RU2018124365A
Authority: RU
Inventors: Вячеслав Николаевич Никитин; Владимир Леонидович Полуэктов; Татьяна Петровна Храмых; Любовь Олеговна Барская; Владислав Андреевич Путинцев
Priority date: 2018-07-02
Filing date: 2018-07-02
Publication date: 2019-05-29

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention refers to experimental surgery. Laparotomy is performed. Acetic acid is exposed to the stomach wall. Upper median mini-laparotomy is performed. Intraorganic intraluminal injection device is inserted through an animal's mouth into a lumen of a target organ. Injector stroke limiter is set to 0.5 mm that corresponds to injection depth, 70 % acetic acid solution is injected into target organs wall from mucosa side. Integrity of the serous membrane of the target organs from the mini-laparotomic wound is monitored.EFFECT: method enables reliably and less traumatic modelling of stomach and duodenal ulcer in small laboratory animals.1 cl, 5 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, а именно: к экспериментальной хирургии и может быть использовано для исследования влияния различных патогенетических факторов и лекарственных препаратов на формирование и течение язвенного дефекта, в том числе и на процессы регенерации стенки желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных, в частности, у белых беспородных крыс.The invention relates to medicine, namely to experimental surgery and can be used to study the effect of various pathogenetic factors and drugs on the formation and course of the ulcer defect, including the processes of regeneration of the stomach wall and duodenal ulcer in small laboratory animals, in particular in white mongrel rats.

Известны различные способы моделирования язвы желудка в эксперименте.There are various ways to simulate stomach ulcers in the experiment.

В частности, известен и наиболее часто применяется в различных модификациях способ моделирования язвы в эксперименте, предложенный Okabe S. с соавт., включающий лапаротомию, нанесение 100% уксусной кислоты на серозную оболочку стенки желудка или двенадцатиперстной кишки с последующей экспозицией для желудка - 60 секунд, а для двенадцатиперстной кишки - 30 секунд. После чего обработанную уксусной кислотой поверхность высушивают и зашивают брюшную полость. Через 3 суток в зоне, обработанной уксусной кислотой, формируется язвенный дефект с вовлечением всех слоев стенки органа [Okabe S., Pfeiffer C.J., Roth J.L.R. A method for experimental penetrating gastric and duodenal ulcers in rats / S. Okabe, C.J. Pfeiffer, J.L.R. Roth // Am. J. Dig. Dis. - 1971. - №16. - p. 277-284].In particular, the method of modeling ulcers in the experiment proposed by Okabe S. et al., Including laparotomy, applying 100% acetic acid on the serous membrane of the stomach wall or duodenum, followed by exposure for the stomach - 60 seconds, is known and most often used in various modifications, and for the duodenum - 30 seconds. After that, the surface treated with acetic acid is dried and the abdominal cavity is sutured. After 3 days, in the zone treated with acetic acid, an ulcerous defect forms, involving all layers of the organ wall [Okabe S., Pfeiffer C.J., Roth J.L.R. A method for experimental penetrating the gastric and duodenal ulcers in rats / S. Okabe, C.J. Pfeiffer, J.L.R. Roth // Am. J. Dig. Dis. - 1971. - №16. - p. 277-284].

Однако известный способ имеет следующие недостатки: 1) лапаротомия увеличивает травматичность эксперимента, а, следовательно, влияет на формирование язвы в зоне альтерации стенки желудка; 2) полноценная язва возникает лишь спустя трое суток после операции, поскольку повреждение формируется со стороны серозной оболочки; 3) противоестественность формирования язвенного дефекта со стороны серозной оболочки, что не соответствует возникновению язвы у человека, когда процесс язвообразования начинается со слизистой оболочки, а серозная вовлекается в последнюю очередь; 4) способ имеет ограничение по локализации моделирования язвенного дефекта, в частности, на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки и малой кривизне желудка, что сужает спектр изучения осложнений язвы, в том числе перфорации и кровотечения.However, the known method has the following disadvantages: 1) laparotomy increases the invasiveness of the experiment, and, therefore, affects the formation of an ulcer in the alteration zone of the stomach wall; 2) a full-fledged ulcer occurs only three days after the operation, since the damage is formed from the side of the serous membrane; 3) unnatural formation of an ulcerative defect on the part of the serous membrane, which does not correspond to the appearance of an ulcer in a person when the process of ulcer formation begins with the mucous membrane, and the serous one is involved in the latter; 4) the method has a restriction on the localization of the modeling of the ulcerative defect, in particular, on the back wall of the duodenal bulb and the lesser curvature of the stomach, which narrows the spectrum of the study of ulcer complications, including perforation and bleeding.

Наиболее близким по совокупности существенных признаков к предлагаемому способу является способ моделирования язвы желудка в эксперименте, предложенный Шалимовым С.А. с соавт., включающий механическое повреждение слизистого слоя стенки желудка [Шалимов С.А., Радзиховский А.П., Кейсевич Л.В. Руководство по экспериментальной хирургии / С.А. Шалимов, А.П. Радзиховский, Л.В. Кейсевич // М.: Медицина, 1989. - С. 174].The closest set of essential features of the proposed method is a method for simulating gastric ulcers in the experiment, proposed by S. Shalimov. et al., including mechanical damage to the mucous layer of the stomach wall [Shalimov S.A., Radzikhovsky A.P., Keisevich L.V. Guide to experimental surgery / S.A. Shalimov, A.P. Radzikhovsky, L.V. Keisevich // M .: Medicine, 1989. - p. 174].

Способ осуществляют следующим образом: под внутримышечным наркозом экспериментальному животному выполняют лапаротомию, гастротомию, после чего проводят иссечение участка слизистой оболочки по задней стенки желудка с обнажением мышечного слоя. Площадь повреждения составляет 0,5 см².The method is carried out as follows: under intramuscular anesthesia, an experimental animal is subjected to laparotomy, gastrotomy, followed by excision of the mucous membrane section along the posterior wall of the stomach with the muscular layer exposed. The damage area is 0.5 cm ² .

Однако известный способ имеет следующие недостатки: 1) лапаротомия и гастротомия увеличивают травматичность эксперимента, а, следовательно, влияют на течение репаративных процессов в зоне альтерации стенки желудка; 2) способ имеет ограничение по локализации моделирования язвенного дефекта (задняя стенка желудка), что сужает спектр изучения осложнений язвы, в том числе перфорации; 3) способ не предусматривает моделирования острого язвенного кровотечения, так как мышечный слой в стенке желудка не повреждается; 4) быстрая эпителизация дефекта слизистой, составляющая 24-48 ч.However, the known method has the following disadvantages: 1) laparotomy and gastrotomy increase the invasiveness of the experiment, and, therefore, affect the course of reparative processes in the area of alteration of the stomach wall; 2) the method has a restriction on the localization of the modeling of the ulcerative defect (posterior wall of the stomach), which narrows the spectrum of the study of ulcer complications, including perforation; 3) the method does not allow for the modeling of acute ulcerative bleeding, since the muscle layer in the wall of the stomach is not damaged; 4) rapid epithelialization of the mucosal defect, component 24-48 hours.

Исходя из вышеизложенного, задачей данного изобретения является создание надежного малотравматичного способа моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных.Based on the foregoing, the objective of the present invention is to create a reliable low-impact method for simulating gastric and duodenal ulcers in small laboratory animals.

Поставленная задача решается тем, что в эксперименте производится внутрипросветное введение 70% раствора уксусной кислоты в полость желудка с последующим воздействием на слизистую оболочку.The task is solved by the fact that in the experiment the intraluminal injection of a 70% solution of acetic acid into the cavity of the stomach with the subsequent impact on the mucous membrane.

На фиг. 1 показано схематичное изображение УДИВИ.FIG. 1 shows a schematic depiction of AMAZING.

На фиг. 2 показан этап верхней срединной мини-лапаротомии с выведением в рану органа-мишени (желудок, ДНК);FIG. 2 shows the stage of the upper median mini-laparotomy with the removal of the target organ (stomach, DNA) into the wound;

на фиг. 3 изображен этап введения наружной трубки (тубуса) УДИВИ;in fig. 3 shows the step of introducing the UDIVI outer tube (tube);

на фиг. 4 показан вид расположения торцовой части тубуса УДИВИ в желудок или ДНК контролируемый из мини-лапаротомной раны.in fig. 4 shows the arrangement of the end portion of the UDIVI tube in the stomach or DNA controlled from a mini-laparotomy wound.

на фиг. 5 показан завершающий этап введения раствора уксусной кислоты через инъектор.in fig. 5 shows the final stage of the introduction of the acetic acid solution through the injector.

Где: 1 - стандартная игла для внутримышечных инъекций, 2 - внутренняя трубка поверх иглы для внутримышечных инъекций, 3 - ограничитель хода внутренней трубки, 4 - стандартная укороченная инсулиновая игла, 5 - тубус (наружная трубка), 6 - мини-лапаротомная рана, 7 - желудок, 8 - двенадцатиперстная кишка, 9. - торцовая часть УДИВИ, 10. - стандартный инсулиновый шприц, 11 - острие укороченной инсулиновой иглы, имеющей скос 45°.Where: 1 is a standard needle for intramuscular injections, 2 is an inner tube over the needle for intramuscular injections, 3 is a stroke limiter of the inner tube, 4 is a standard shortened insulin needle, 5 is a tube (outer tube), 6 is a mini-laparotomy wound, 7 - stomach, 8 - duodenum, 9. - end part of UDIVI, 10. - standard insulin syringe, 11 - tip of shortened insulin needle, which has a 45 ° bevel.

Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.

В эксперимент берут животных через 24 часа после приема пищи при свободном доступе к воде. Операцию проводят под общим наркозом с использованием диэтилового эфира. После обработки операционного поля в асептических условиях производят верхнюю срединную мини-лапаротомию (длиной 1-1,5 см), в рану выводят орган (желудок, ДНК). Через пасть и пищевод в просвет желудка или двенадцатиперстной кишки вводят тубус устройства для интраорганных внутрипросветных инъекций (далее УДИВИ), торец тубуса со стороны слизистой упирается в заданный участок стенки органа-мишени, контроль локализации торца тубуса осуществляют со стороны мини-лапаротомной раны, далее в просвет тубуса вводят инъектор, заполненный раствором 70% уксусной кислоты, ограничитель хода расположенный на проксимальной части инъектора устанавливают на 0,5 мм, что соответствует глубине инъекции, после того как инсулиновая игла проникает в стенку органа-мишени инсулиновым шприцом с делением 0,01 мл вводят заданный объем раствора, при этом контролируя целостность серозной оболочки органа-мишени из мини-лапаротомной раны. После проведения инъекции УДИВИ удаляют из просвета желудочно-кишечного тракта. Мини-лапаротомную рану послойно ушивают наглухо.In the experiment, animals are taken 24 hours after eating with free access to water. The operation is performed under general anesthesia using diethyl ether. After processing the operative field under aseptic conditions, an upper median mini-laparotomy (1-1.5 cm long) is produced, an organ (stomach, DNA) is brought into the wound. Through the mouth and esophagus, a device tube for intraorgan intraluminal injections is introduced into the lumen of the stomach or duodenum, the end of the tube on the mucosal side rests against a given portion of the wall of the target organ, and the location of the tube end is monitored from The lumen of the tube is injected with an injector, filled with a solution of 70% acetic acid, the stroke limiter located on the proximal part of the injector is set to 0.5 mm, which corresponds to the depth of the injection, after An insulin needle penetrates into the wall of the target organ with a 0.01 ml division using an insulin syringe to inject a prescribed volume of the solution, while controlling the integrity of the serous membrane of the target organ from the mini-laparotomy wound. After the injection, UDIVI are removed from the lumen of the gastrointestinal tract. Mini-laparotomic wound is sutured in layers tightly.

Предлагаемый способ моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных, в отличие от других способов, имеет следующие преимущества: 1) уменьшение размеров лапаротомной раны (мини-лапаротомия) способствует снижению болевого синдрома после операции, ранней активизации животных, снижение риска развития гнойно-септических осложнений со стороны послеоперационной раны; 2) позволяет моделировать язву запрограммированной (любой отдел желудка и ДНК) локализации, за счет возможности производить инъекцию раствора в строго заданную зону под мини-лапаротомным контролем; 3) позволяет моделировать язву запрограммированной глубины поражения за счет применения ограничителя хода УДИВИ; 4) предусматривает моделирование осложнений язвы (кровотечение, перфорация, стеноз) за счет изменения объема вводимого раствора в стенку органа.The proposed method of modeling gastric and duodenal ulcers in small laboratory animals, unlike other methods, has the following advantages: 1) reducing the size of the laparotomy wound (mini-laparotomy) helps to reduce pain after surgery, early activation of animals, reducing the risk of pus development. septic complications from a postoperative wound; 2) allows you to simulate the ulcer programmed (any part of the stomach and DNA) localization, due to the ability to inject the solution into a strictly defined area under the mini-laparotomy control; 3) allows you to simulate an ulcer programmed depth of damage due to the use of the stroke stop UDIVI; 4) provides for the modeling of ulcer complications (bleeding, perforation, stenosis) by changing the volume of the injected solution into the wall of the organ.

По указанному способу в ОмГМУ на базе кафедры топографической анатомии и оперативной хирургии произведено моделирование язв желудка и двенадцатиперстной кишки у 24 лабораторных белых крыс, определены критические объемы вводимого 70% раствора уксусной кислоты, при которых происходит тотальный некроз стенки органа, определены сроки заживления сформированных язв.On the basis of the Department of Topographic Anatomy and Operative Surgery, the method of gastric and duodenal ulcers in 24 laboratory white rats was simulated using the indicated method, critical volumes of 70% acetic acid solution administered were determined, at which total necrosis of the organ wall occurs, healing time for formed ulcers is determined.

Claims

The method of modeling gastric and duodenal ulcers in small laboratory animals, including laparotomy, the impact of acetic acid on the stomach wall, characterized in that they perform the upper median mini-laparotomy, install a device for intraorganization of intraorganization injections into the lumen of the target organ, insert a limiter the stroke of the injector 0.5 mm, which corresponds to the depth of the injection, in the wall of the target organs on the mucosal side, an injection of 70% acetic acid solution is performed; ontroliruyut integrity of the serous membrane of the target organs of mini laparotomic wound.