RU2687136C1 - Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы - Google Patents

Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы Download PDF

Info

Publication number
RU2687136C1
RU2687136C1 RU2018136036A RU2018136036A RU2687136C1 RU 2687136 C1 RU2687136 C1 RU 2687136C1 RU 2018136036 A RU2018136036 A RU 2018136036A RU 2018136036 A RU2018136036 A RU 2018136036A RU 2687136 C1 RU2687136 C1 RU 2687136C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
methane
strain
gbs
heterotrophic bacteria
stenotrophomonas acidaminiphila
Prior art date
Application number
RU2018136036A
Other languages
English (en)
Inventor
Елена Сергеевна Бабусенко
Валерий Алексеевич Быков
Нина Борисовна Градова
Маргарита Витальевна Лалова
Леонид Евгеньевич Левитин
Александр Иванович Сафонов
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ"
Priority to RU2018136036A priority Critical patent/RU2687136C1/ru
Priority to EA201900128A priority patent/EA036408B1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2687136C1 publication Critical patent/RU2687136C1/ru
Priority to JP2019115160A priority patent/JP6919910B2/ja
Priority to PCT/RU2019/050162 priority patent/WO2020076190A1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

Изобретение относится к микробиологической промышленности. Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 обладает способностью использовать продукты соокисления гомологов метана, присутствующие в природном газе. Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов Г.К. Скрябина РАН под регистрационным номером VKM B-3264D. Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila VKM B-3264D может быть использован для получения микробной белковой массы. 5 пр.

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к штамму гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 для получения белковой биомассы ассоциативной культурой, включающей метанокисляющие бактерии и бактерии-гетеротрофы. Микробная белковая масса может быть использована в сельском хозяйстве для кормления животных, а также в качестве сырья для глубокой переработки.
На сегодняшний день общая картина в России по производству кормовых белков неблагоприятна. Согласно подписанной президентом России доктрины для обеспечения собственным продовольствием на 80-90%, дефицит кормовых продуктов может составить не менее 2 млн. тонн в год.
Основным источником белкового продукта является соевый шрот. Однако природные условия нашей страны не подходят для выращивания сои в достаточных количествах. Специалистам приходится искать другие способы производства кормового белка.
Среди продуцентов кормовой биомассы известны различные микроорганизмы, относящиеся к различным таксономическим группам, способные расти на различных субстратах.
Использование бактерий в качестве продуцентов кормового белка является более эффективным, так как бактерии накапливают до 79% белка по массе, в то время как дрожжи - не более 60%.
В качестве продуцентов белка и биомассы применяют штаммы бактерий, известные как продуценты белка на основе метанола и относящиеся к роду Acetobacter: Acetobactermethylicum ВСБ-924 ЦМПМ В-2942 (патент РФ №116363); Acetobactermethylicum ВСБ-867 ЦМПМ В-1947 (патент РФ №925112); Acetobactermethylovorans ВСБ-914 ЦМПМ В-2479 (патент РФ №1070916). Все штаммы характеризуются содержанием белка до 76% по АСВ.
Штаммы различаются чувствительностью к типовым фагам и термоустойчивостью: оптимальный рост у Acetobactermethylicum ВСБ-867 при 28-30°С, у Acetobactermethylicum ВСБ-924 - 30-36°С и Acetobactermethylovorans ВСБ-914 при 36-40°С.
Однако, при нестерильном культивировании в ферментере на ферментолизатах отрубей и/или муки в кислой среде при рН ниже 6,0 происходит, как показали опыты, быстрое инфицирование дрожжами и грибами и вытеснение продуцента из процесса на 30-40% и более от общего числа клеток. В результате в получаемом продукте в сильной степени снижается содержание белка.
Одним из перспективных путей получения полноценного белкового кормового продукта является использование метанокисляющих бактерий. Метанотрофные бактерии в подходящих условиях активно перерабатывают метан природного газа, быстро размножаются и наращивают биомассу, богатую ценным белком, витаминами и иными биологически активными соединениями.
Использование метана природного газа для получения белка одноклеточных имеет ряд преимуществ по сравнению с жидкими углеводородами и другими субстратами, а именно: большие запасы природного газа, хорошая его транспортабельность, возможность получения кормового продукта без дополнительной очистки от субстрата.
Учитывая, что в России большие газовые запасы недр, по некоторым данным они составляют до 40% мировых, внедрение микробиологического производства белка одноклеточных на российских предприятиях сулит не только экономический эффект, но и способно обеспечить продовольственную безопасность страны.
Облигатные метанокисляющие бактерии, содержат фермент метанмонооксигеназу, который не является субстратспецифичным и окисляет не только метан, но и гомологи метана (например, этан, пропан и бутан), содержащиеся в природном газе.
В зависимости от состава природного газа, видовых особенностей метанокисляющих бактерий и условий культивирования среди продуктов неполного окисления метана и его гомологов могут присутствовать в разных соотношениях в среде культивирования метанол, формальдегид, формиат, этанол, ацетальдегид, ацетат, пропионовый альдегид, пропионовая кислота, масляный альдегид. Данные продукты при их накоплении в среде культивирования в определенной концентрации оказывают ингибирующее воздействие на метанокисляющую культуру, на окисление метана.
Стабильное непрерывное культивирование на природном газе возможно только при использовании ассоциативной культуры метанокисляющих микроорганизмов и гетеротрофных микроорганизмов - спутников, использующих продукты неполного окисления гомологов метана, возможно и продуктов автолиза клеток микроорганизмов.
В настоящее время установлено, что даже при использовании моносубстрата, в случае накопления в среде продуктов неполного окисления, целесообразно использовать не чистую культуру, а ассоциативную. При культивировании ассоциативной культуры заметно повышается активность роста основной культуры и ее устойчивость к стрессовым воздействиям некоторых физико-химических параметров.
Известен штамм бактерий Stenotrophomonas maltophilia СНБС-3, обладающий способностью быстро утилизировать нефть и нефтепродукты (дизельное топливо, масло моторное, масло гидравлическое, газовый конденсат) в широком диапазоне температур от +5 до +37°С. Штамм бактерий Stenotrophomonas maltophilia депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-12247 и может быть использован как для очистки почвы, так и для очистки воды от загрязнений нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, масло моторное, масло гидравлическое, газовый конденсат). Изобретение позволяет повысить эффективность и сократить сроки очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов в широком диапазоне температур от +5 до +37°С (РФ №2617950).
Известен штамм Stenotrophomonas acidaminiphila BJ1, используемый для биологического контроля болезней яблони (CN №102851225).
Известен штамм Methylococcus capsulatus ВСБ-874 - продуцент кормовой биомассы. Штамм хранится в коллекции культур института «ВНИИГенетика» под коллекционным номером ЦМПМ В-1743 (авт. свид. СССР №770200). В качестве источника углерода и энергии штамм использует метан, как чистый, так и в составе природного газа. Недостатком данного штамма является его чувствительность к продуктам, образующимся при соокислении гомологов метана, которые неизменно, в большем или меньшем количестве, присутствуют в природном газе. Образующиеся продукты ингибируют рост продуцента.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15, регистрационный номер ВКПМ В-12549 во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (патент РФ 2613365).
Целью изобретения является повышение производительности и высокой продуктивности при культивировании на метансодержащем газе метанокисляющих бактерий в присутствии гетеротрофных бактерий в качестве ассоцианта продуцента микробной белковой массы.
Техническим результатом изобретения является выявление нового штамма, который является ассоциантом метанокисляющих бактерий и способен использовать продукты соокисления гомологов метана, присутствующие в природном газе, а также может использовать белки, аминокислоты и полисахариды, выделяющиеся в процессе лизиса бактерий.
Технический результат достигнут при использовании штамма гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2, депонированного во Всероссийской коллекции микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов Г.К Скрябина РАН под регистрационным номером VKM B-3264D, в качестве компонента ассоциативной культуры метанокисляющих бактерий для получения микробной белковой массы.
Обозначение штамма, присвоенное депозитором GBS-15-2.
Штамм Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 используется в качестве одного из компонентов ассоциативной культуры метанокисляющих бактерий для промышленного получения на основе природного газа кормовой биомассы для кормления животных, а также в качестве сырья для глубокой переработки.
Источник выделения штамма: Штамм выделен из ассоциации, включающей метанокисляющие бактерии Methylococcus capsulatus ГБС-15. Для селекции быстрорастущей смешанной культуры бактерий была использована смесь активных накопительных культур, выделенных из подземных вод ряда газо- и нефтеносных районов Российской Федерации. При ферментации штамм растет как ассоциант основного продуцента метанокисляющих бактерий на минеральной среде и при физико-химических условиях, оптимальных для продуцента, потребляет продукты соокисления гомологов метана, присутствующие в природном газе, а также продукты метаболизма основного продуцента.
Штамм не является генетически модифицированным.
Информация о биологической опасности (безопасности) штамма: вид Stenotrophomonas acidaminiphila не значится в списках 1-4 групп патогенности (Приложение 1 «Классификация микроорганизмов - возбудителей инфекционных заболеваний…» к Санитарно-эпидемиологическим правилам СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами», в ред. Дополнений и изменений N 2, утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 29.06.2011 N 86).
Другие сведения о патогенности или вирулентности штамма: штамм Stenotrophomonas acidaminiphila GBC-15-2 является авирулентным, не токсигенным, не токсичным и безвредным.
ХАРАКТЕРНЫЕ ПРИЗНАКИ:
I. Культурально-морфологические: Грамотрицательный. На питательном агаре (рН 7,0-7,2) формирует непрозрачные колонии беловато-бежеватого цвета, с ровным краем, ∅ 2-3 мм, консистенция мягкая, легко снимаются с агара. С возрастом могут образовывать коричневый пигмент. По форме клетки могут быть прямые или слегка изогнутые палочки, расположенные одиночно или парами, длиной от 0,5 до 1,5 мкм, неспорообразующие.
II. Физиолого-биохимические: Растет в диапазоне температуры 25-50°С, оптимальная температура роста 32-35°С; диапазон рН 5,0-8,0 оптимальное значение рН 6,8-7,0. Облигатный аэроб. Стабильно сохраняет свои характеристики при варьировании условий культивирования и сред - замена источника углерода, низкие или высокие значения активной реакции среды, повышение температуры, изменение скорости протока (0,15-0,42 ч-1). Обладает широким потенциалом. Использует для роста продукты лизиса штамма-продуцента (ГБС-15): полипептиды, аминокислоты, органические кислоты, спирты. Специфических факторов роста не требует.
Рекомендуемые среды и условия культивирования:
Варианты питательных сред:
Вариант 1:
Состав минеральной среды (г/л): (NH4)2SO4 - 0,52; MgSO4 - 0,02; K2SO4 - 0,06; NH4H2PO4 - 1,53. Раствор микроэлементов (готовится отдельно) (г/л): ZnSO4 - 0,43; MnSO4 - 0,88; CuSO4 - 0,78; Н3ВО3 - 0,4; Na2MoO4×2H2O - 0,25; CoSO4×7H2O - 0,25; FeSO4×7H2O - 4,97. 1 мл приготовленного раствора микроэлементов добавить на 1000 мл минеральной среды.
Стерилизовать при температуре 121°С в течение 15 мин. рН доводят до 6.0-6,2.
В качестве субстрата (источника углерода и энергии) могут быть использованы - бутанол, пропанол или этанол (0,15-1,0%). Температура культивирования 32-35°С; аэробные условия.
Вариант 2:
Питательный бульон или питательный агар.
Питательный агар, состав (в пересчете на 1 л готовой среды): гидролизат ферментативный белковый, сухой - 10,5 г; пептон ферментативный, сухой - 10,5 г; экстракт автолизированных дрожжей осветленный - 2,0 г; натрий хлористый - 5,0 г;
агар микробиологический - 12,0 г. Стерилизовать при температуре 121°С в течение 15 мин.
Питательный бульон, состав (в пересчете на 1 л готовой среды): гидролизатфермативный белковый, сухой - 9,1 г; пептон ферментативный сухой - 9,9 г; экстракт автолизированных дрожжей осветленный - 4,7 г; натрия хлористый - 5,0 г; натрий углекислый - 0,3 г. Стерилизовать при температуре 121°С в течение 15 мин.
Рекомендуемые метод и условия хранения: Штамм хранят на питательном агаре (при температуре 4±2°С), пересевы осуществляются 1 раз в 3 месяца, возможно хранение штамма в лиофильно высушенном состоянии, а также при температуре жидкого азота.
Таким образом, для заявляемого штамма характерны: устойчивый продуктивный рост на средах различного состава; способность длительно сохранять активность в лиофилизированном состоянии; отсутствие вирулентности, токсигенности, токсичности и безвредность
Штамм Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 используется в качестве компонента ассоциативной культуры метанокисляющих бактерий для промышленного получения кормовой биомассы на основе природного газа, а также в качестве сырья для глубокой переработки.
Гетеротрофные бактерии Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 используют образующиеся продукты (этанол, пропанол, бутанол) в качестве источника углерода, тем самым снимая ингибирующее действие на основной продуцент. Кроме того, гетеротроф может использовать белки, аминокислоты и полисахариды, выделяющиеся в процессе лизиса бактерий.
Метанокисляющие бактерии развиваются за счет метана природного газа, а другой компонент ассоциативной культуры - за счет продуктов соокисления гомологов метана в природном газе и за счет продуктов жизнедеятельности метанотрофа.
В процессе совместного выращивания их содержание независимо от величины засева находится на уровне, определяемом количеством используемых продуктов, образующихся в результате соокисления газообразных гомологов метана, находящихся в природном газе, так как на минеральной среде эти продукты являются единственным доступным источником углерода для не использующего метан компонента ассоциативной культуры. В результате такой саморегуляции содержания культур в процессе выращивания начальное соотношение клеток культур в засевном материале не имеет существенного значения, но рекомендуется вносить не окисляющих метан микроорганизмов не менее 0,1% и не более 15% от общего числа клеток. Отклонение от этих значений в ту или иную сторону может привести в первом случае к задержке развития метанокисляющих бактерий, а во втором к задержке роста гетеротрофных бактерий. В смеси с подобранными не использующими метан бактериями выход биомассы увеличивается в 3-5 раз по сравнению с чистой культурой метанокисляющих бактерий. Таким образом, добавление к метанокисляющим бактериям подобранных не использующих метан гетеротрофов, растущих за счет продуктов соокисления гомологов метана, может повысить выход биомассы на метане. Добавление не окисляющих метан гетеротрофных бактерий не влияет на качество биомассы, так как даже при введении в высокой концентрации гетеротрофов, не использующих метан, их содержание в растущей культуре ограничивается количеством доступного источника углерода, которым являются продукты соокисления гомологов метана, и обычно не превышает 1-15% от общего числа клеток.
Пример 1.
Штамм Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 VKM-3264D выращивают на жидкой минеральной среде, содержащей (г/л): (NH4)2SO4 - 0,52; MgSO4 - 0,02; K2SO4 - 0,06; NH4H2PO4 - 1,53.
Среду стерилизуют при температуре 121°С в течение 15 мин.
Раствормикроэлементов (готовятистерилизуютотдельно) (г/л): ZnSO4 - 0,43; MnSO4 - 0,88; CuSO4 - 0,78; H2BO3 - 0,4; Na2MoO4×2H2O - 0,25; CoSO4×7H2O - 0,25; FeSO4×7H2O - 4,97. 1 мл приготовленного раствора микроэлементов добавляют на 1000 мл минеральной среды.
рН доводят до 6.0-6,2.
В качестве субстрата (источника углерода и энергии) используют этанол - 1,0%.
Культивирование штамма проводят в периодическом режиме в колбах из термостойкого стекла, объемом 1 л при коэффициенте заполнения 0,3-0,4 в термостатируемой качалке. Культивирование проводят в течение 48 ч при 35°С и рН 6,2. По окончании культивирования концентрация сухих веществ 7 г АСВ/л. Полученную культуру используют в качестве инокулята для последующего выращивания бактерий в автоматизированном ферментационном комплексе объемом 10 л (рабочий объем 7 л) или в ферментере эжекционного типа объемом 40 л (рабочий объем 28 л).
Пример 2. Культивирование штамма проводят аналогично Примеру 1, но в качестве источника углерода и энергии используют пропанол - 0,8%. Физико-химические условия и время культивирования те же, концентрация сухих веществ - 2,5 г АСВ/л.
Пример 3. Культивирование штамма проводят аналогично Примеру 1, но в качестве источника углерода и энергии используют бутанол - 0,15%. Физико-химические условия и время культивирования те же, концентрация сухих веществ - 0,8 г АСВ/л.
Пример 4. Ассоциативную культуру, состоящую из метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 и гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 выращивают в автоматизированном ферментационном комплексе объемом 10 л (рабочий объем 7 л) на минеральной среде следующего состава (г/л): H3PO4 (80%) - 17,2; K2SO4 - 5,0; MgSO4×7H2O - 4,0; FeSO4×7H2O - 0,21; CuSO4 - 0,78; MnSO4×4Н2О - 0,38; ZnSO4×7H2O - 0,06; Н3ВО3 - 0,25; Na2MoO4×2H2O - 0,009; CoSO4×7H2O - 0,0095.
В качестве источника азота и титрующего агента подают аммиачную воду. Процесс ведут при температуре 41-43°С, рН 5,5-5,7 и непрерывной подаче газовой смеси, содержащей метан и кислород. При достижении концентрации биомассы 10 г АСВ/л переходят на непрерывный процесс культивирования с коэффициентом разбавления среды D=0,25 ч-1. Доминирование метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 составляло 92% при концентрации биомассы 16 г АСВ/л.
Пример 5. Ассоциативную культуру, состоящую из метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 и гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 выращивают в ферментере эжекционного типа объемом 40 л (рабочий объем 28 л) на минеральной среде следующего состава (г/л): H3PO4 (80%) - 17,2; K2SO4 - 5,0; MgSO4×7H2O - 4,0; FeSO4×7H2O - 0,21; CuSO4 - 0,78; MnSO4×4Н2О - 0,38; ZnSO4×7H2O - 0,06; Н3ВО3 - 0,25; Na2MoO4×2H2O - 0,009; CoSO4×7H2O - 0,0095.
В качестве источника азота и титрующего агента подают аммиачную воду. Процесс ведут при температуре 41-45°С, рН 5,5-5,7 и непрерывной подаче газовой смеси, содержащей метан и кислород. При достижении концентрации биомассы 10 г АСВ/л осуществляют постепенное повышение давления до 0,8 МПа. С увеличением давления постепенно увеличивают подачу газообразных источников питания микроорганизмов. При этом показатели процесса были следующими: D=0,28 ч-1, концентрация биомассы 43 г АСВ/л,доминирование метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 93%.

Claims (1)

  1. Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila, депонированный во Всероссийской коллекции микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов Г.К. Скрябина РАН под регистрационным номером VKM B-3264D в качестве компонента ассоциативной культуры метанокисляющих бактерий для получения микробной белковой массы.
RU2018136036A 2018-10-11 2018-10-11 Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы RU2687136C1 (ru)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018136036A RU2687136C1 (ru) 2018-10-11 2018-10-11 Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы
EA201900128A EA036408B1 (ru) 2018-10-11 2019-03-28 Штамм гетеротрофных бактерий stenotrophomonas acidaminiphila gbs-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы
JP2019115160A JP6919910B2 (ja) 2018-10-11 2019-06-21 微生物タンパク質を得るための共棲菌 従属栄養細菌Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ａｃｉｄａｍｉｎｉｐｈｉｌａ ＧＢＳ−１５−２菌株
PCT/RU2019/050162 WO2020076190A1 (ru) 2018-10-11 2019-10-01 Штамм stenotrophomonas acidaminiphila для получения микробной биомассы

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018136036A RU2687136C1 (ru) 2018-10-11 2018-10-11 Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2687136C1 true RU2687136C1 (ru) 2019-05-07

Family

ID=66430680

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018136036A RU2687136C1 (ru) 2018-10-11 2018-10-11 Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы

Country Status (4)

Country Link
JP (1) JP6919910B2 (ru)
EA (1) EA036408B1 (ru)
RU (1) RU2687136C1 (ru)
WO (1) WO2020076190A1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2717991C1 (ru) * 2019-07-22 2020-03-27 Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ"ООО " ГИПРОБИОСИНТЕЗ" Белковая кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и рыб
RU2784971C1 (ru) * 2021-12-15 2022-12-01 Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" Способ получения устойчивой метанотрофной ассоциации для производства кормового белка на метане

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2763052C1 (ru) * 2021-03-19 2021-12-27 Общество с ограниченной ответственностью «Управляющая компания Группы компаний «КОМИТА» Штамм бактерий Methylococcus capsulatus ВКПМ B-13554 - источник кормового белка
CN116987614B (zh) * 2023-04-13 2024-05-28 四川省食品发酵工业研究设计院有限公司 寡养单胞菌及其在制作窖泥中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2370531C1 (ru) * 2008-06-16 2009-10-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей metschnikowia pulcherrima - продуцент кормового белка
RU2370528C1 (ru) * 2008-06-16 2009-10-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей metschnikowia pulcherrima - продуцент кормового белка
RU2390554C2 (ru) * 2007-12-21 2010-05-27 Общество с ограниченной ответственностью "БИОПРОТЕИН" ШТАММ Lactobacillus plantarum - ПРОДУЦЕНТ КОРМОВОГО БЕЛКА
RU2613365C1 (ru) * 2016-04-07 2017-03-16 Ооо "Гипробиосинтез" Штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 для получения микробной белковой массы

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1463295A (en) * 1973-04-12 1977-02-02 British Petroleum Co Fermentation processes for converting methane into proteina ceous material
JPS5221591B2 (ru) * 1973-12-26 1977-06-11
RU2064016C1 (ru) * 1992-11-26 1996-07-20 Акционерное общество открытого типа "Биотех" Способ получения биомассы метанокисляющих микроорганизмов и способ управления непрерывным процессом получения биомассы метанокисляющих микроорганизмов
US6689601B2 (en) * 2000-09-01 2004-02-10 E. I. Du Pont De Nemours And Company High growth methanotropic bacterial strain
CA2927829C (en) * 2013-10-18 2019-06-04 Lanzatech New Zealand Limited Microbial conversion of methane
CN104774792B (zh) * 2015-04-13 2017-12-19 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株耐受高浓度甲醇的甲基单胞菌及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2390554C2 (ru) * 2007-12-21 2010-05-27 Общество с ограниченной ответственностью "БИОПРОТЕИН" ШТАММ Lactobacillus plantarum - ПРОДУЦЕНТ КОРМОВОГО БЕЛКА
RU2370531C1 (ru) * 2008-06-16 2009-10-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей metschnikowia pulcherrima - продуцент кормового белка
RU2370528C1 (ru) * 2008-06-16 2009-10-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей metschnikowia pulcherrima - продуцент кормового белка
RU2613365C1 (ru) * 2016-04-07 2017-03-16 Ооо "Гипробиосинтез" Штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 для получения микробной белковой массы

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2717991C1 (ru) * 2019-07-22 2020-03-27 Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ"ООО " ГИПРОБИОСИНТЕЗ" Белковая кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и рыб
WO2021015648A3 (ru) * 2019-07-22 2021-05-14 Общество с ограниченной ответственностью "ГИПРОБИОСИНТЕЗ" Белковая кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и рыб
RU2784971C1 (ru) * 2021-12-15 2022-12-01 Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" Способ получения устойчивой метанотрофной ассоциации для производства кормового белка на метане
RU2797596C1 (ru) * 2023-02-05 2023-06-07 Общество с ограниченной ответственностью "БИОФОРТЕ-ЛАБ" Штамм дрожжей Pichia kudriavzevii ВКПМ Y-4975 - ассоциант для получения микробного белка

Also Published As

Publication number Publication date
EA036408B1 (ru) 2020-11-06
EA201900128A3 (ru) 2020-10-30
WO2020076190A1 (ru) 2020-04-16
JP2020058340A (ja) 2020-04-16
JP6919910B2 (ja) 2021-08-18
EA201900128A2 (ru) 2020-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2613365C1 (ru) Штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus ГБС-15 для получения микробной белковой массы
RU2687136C1 (ru) Штамм гетеротрофных бактерий Stenotrophomonas acidaminiphila GBS-15-2 - ассоциант для получения микробной белковой массы
CN112226373B (zh) 一株产蛋白的菌株及其应用
Shipman et al. Single‐cell protein production by photosynthetic bacteria cultivation in agricultural by‐products
US8592198B2 (en) Method for culturing microorganisms on a growth substrate comprising biomass obtained from methanotrophic bacteria
RU2728345C1 (ru) Штамм Methylococcus capsulatus ВКПМ В-13479 - продуцент микробной белковой массы, устойчивый к агрессивной среде
RU2706074C9 (ru) Штамм бактерий Methylococcus capsulatus CONCEPT-8 - продуцент белковой биомассы
RU2687135C1 (ru) Штамм гетеротрофных бактерий Cupriavidus gilardii - ассоциант для получения микробной белковой массы
RU2687137C1 (ru) Штамм гетеротрофных бактерий Klebsiella pneumonia - ассоциант для получения микробной белковой массы
US3981774A (en) Fermentation of oxygenated hydrocarbon compounds with thermophilic microorganisms
KOUNO et al. Isolation of new Methanol-utilizing bacteria and its Thiamine-requirement for growths
CN111187744A (zh) 同温层芽孢杆菌高密度工业发酵培养基及其发酵方法
RU2745093C1 (ru) Штамм метанокисляющих бактерий Methylococcus capsulatus BF19-07 - продуцент для получения микробной белковой массы
RU2763052C1 (ru) Штамм бактерий Methylococcus capsulatus ВКПМ B-13554 - источник кормового белка
RU2760288C1 (ru) Штамм methylococcus capsulatus mc19 - продуцент белковой массы
RU2773502C1 (ru) Штамм метанолокисляющих бактерий Acidomonas methanolica BF 21-05М - продуцент для получения микробной белковой массы
US4707449A (en) Pichia pastoris yeast strains of enhanced tryptophan content
SU908092A1 (ru) Способ получени рибофлавина
Tsymbal et al. Study of the scaling possibility of the process of obtaining feed protein from natural gas
USRE30965E (en) Fermentation of oxygenated hydrocarbon compounds with thermophilic microorganisms and microorganisms therefor
RU2796923C1 (ru) Штамм дрожжей Ogataea parapolymorpha ВКПМ Y-5081 - продуцент белковой биомассы
CN114672437B (zh) 一株产有机酸的枯草芽孢杆菌g-1及其应用
RU2796376C1 (ru) Штамм Methylobacterium extorquens ВКПМ В-14231 - продуцент микробной белковой массы
Mamatkulovich et al. Selection of nutrient media for the cultivation of bacterial strains of Bacillus thuringiensis against caterpillars of gypsy moth (Lymantria dispar)
CN105112323A (zh) 一种产多种氨基酸的广东棒状杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20201012

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20211006