RU2679361C1 - Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных - Google Patents

Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных Download PDF

Info

Publication number
RU2679361C1
RU2679361C1 RU2018111271A RU2018111271A RU2679361C1 RU 2679361 C1 RU2679361 C1 RU 2679361C1 RU 2018111271 A RU2018111271 A RU 2018111271A RU 2018111271 A RU2018111271 A RU 2018111271A RU 2679361 C1 RU2679361 C1 RU 2679361C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
testes
temperature
animals
biogenic
immune status
Prior art date
Application number
RU2018111271A
Other languages
English (en)
Inventor
Алла Егоровна Куцова
Андрей Васильевич Гребенщиков
Людмила Ивановна Василенко
Анна Юрьевна Корчагина
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет инженерных технологий" (ФГБОУ ВО "ВГУИТ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет инженерных технологий" (ФГБОУ ВО "ВГУИТ") filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет инженерных технологий" (ФГБОУ ВО "ВГУИТ")
Priority to RU2018111271A priority Critical patent/RU2679361C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2679361C1 publication Critical patent/RU2679361C1/ru

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способу получения биогенного стимулятора из семенников крупного рогатого скота. Способ включает промывание семенников проточной водой, очищение от соединительнотканных и жировых элементов, асептический автолиз при температуре 5-6°С с выдержкой 10 суток, измельчение до 2-3 мм, экстрагирование на водяной бане с добавлением изотонического раствора хлористого натрия при температуре 80-90°С в течение 30-40 минут, центрифугирование при 300 оборотах в минуту, фасовку полученной жидкой фракции в ампулы по 5 мл. Использование изобретения позволит получить эффективный биостимулятор-иммунокорректор для животных. 1 ил.

Description

Изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой биогенного симулятора нового вида для коррекции иммунного статуса у животных.
Известен способ получения биогенного стимулятора "Спленивита" из селезенки животных, включающий измельчение пульпы, экстрагирование физиологическим раствором, термическую обработку, отделение осадка, фильтрацию и стерилизацию, причем после измельчения пульпы ее замораживают[ авт. св. N 1695869, кл. А 23 К 1/00].
Также известен способ получения биостимулятора для кормления птицы, предусматривающий введение в основной рацион биостимулятора, приготовленного путем охлаждения при температуре 2-4°С в течение 4-5 суток, разведения водой в пятикратном объеме и отстаивания в течение суток с последующим автоклавированием полученной массы, при этом в качестве биостимулятора используют яичную скорлупу и после обработки вводят ее в рацион в количестве 0,2-0,3 мл на 1 кг живой массы с интервалом 6-7 дней [см. а.с. СССР №150163, кл. А 23 К 1/16].
Недостатком приведенных выше способов является высокая стоимость материалов, сложность и многоступенчатость технологии получения, высокие энергозатраты и себестоимость полученного препарата.
Технической задачей изобретения является создание эффективного чистого и безопасного биостимулятора-иммунокорректора для животных на основе белков малоценного сырья крупного рогатого скота, уменьшение себестоимости и упрощение технологии получения.
Для решения поставленной технической задачи предложен способ получения биогенного стимулятора из семенников КРС, включающий промывание семенников проточной водой, очищение от соединительнотканных и жировых элементов, асептический автолиз при температуре 5-6°С с выдержкой 10 суток, измельчение до 2-3 мм, экстрагирование на водяной бане с добавлением изотонического раствора хлористого натрия при температуре 80-90°С в течении 30-40 минут, центрифугирование при 300 оборотах в минуту, фасовку полученной жидкой фракции в ампулы по 5 мл.
Технический результат изобретения заключается в создании эффективного чистого и безопасного биостимулятора-иммунокорректора для животных на основе белков малоценного сырья крупного рогатого скота, уменьшение себестоимости и упрощение технологии получения.
При промышленном производстве на предприятиях остается большое количество малоценного сырья. Среднегодовой выход семенников КРС на предприятии 0,3% к живой массе животных.
Семенники – мужские половые железы КРС, в них происходит сперматогенез и вырабатываются половые гормоны, такие как тестостерон, небольшое количество женских половых гормонов эстрогенов и прогестинов, а также некоторые андрогены – андростендион и дигидроэпиандростерон.
В семенниках содержится фермент – гиалиронидаза, увеличивающая проникаемость тканей и способствующая ускорению всасывания лекарственных средств. В их химический состав входит: холин, витамины В1, В2, В5, В6, В9, В12, Е, Н и РР, а также необходимые организму минеральные вещества: калий, кальций, магний, цинк, медь, марганец, железо, хлор, серу, йод, хром, фтор, молибден, олово, кобальт, никель, фосфор, натрий.
Бычьи семенники являются поставщиком быстроусвояемого белка. Реализуются в розничную торговлю и ресторанный бизнес.
На фигуре 1 представлена технологическая схема, иллюстрирующая процесс получения биогенного стимулятора.
Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных осуществляется следующим образом.
Семенники крупного рогатого скота, полученные от здорового животного, прошедшие ветеринарно-санитарную экспертизу согласно требований технологического регламента по заготовке малоценного сырья промывают проточной водой, очищают от соединительнотканных и жировых элементов, выдерживают в асептических условиях при температуре 5-6°С в течении 10 суток, измельчают до 2-3 мм, экстрагирование проводят на водяной бане с добавлением изотонического раствора хлористого натрия при температуре 80-90 °С в течении 30-40 минут, центрифугирование при 300 оборотах в минуту, фасовка жидкой фракции в ампулы по 5 мл.
Эффективность использования биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных подтверждается в опытах на белых мышах. Опыты были проведены на белых мышах линии BALB/c массой 18-20г. Биогенный стимулятор животным вводили 2-кратно, подкожно, с интервалом между инъекциями 14 суток, в дозе 0,2 мл. Изучение иммуностимулирующей активности препарата проводили на фоне вакцинации мышей инактивированной вакциной против парвовирусного энтерита собак, (животным опытной группы биогенный стимулятор вводили одновременно с вакциной). В качестве контроля иммуностимулирующей активности были использованы белые мыши, привитые только одной вакциной (контроль №1), а в качестве общего контроля (контроль №2) были использованы интактные животные (не привитые вакциной и не обработанные иммуномодулятором).
Функциональное состояние Т-клеток оценивали в реакции Е-розеткообразования и ее модификации с теофилином. Изучение иммуностимулирующего эффекта мы также проводили методом локального гемолиза по Ерне, который дает возможность определить количество и функциональную активность клеточной кооперации В-лимфоцитов, из которых дифференцируются антителообразующиеся клетки (АОК).
Уровень иммуноглобулинов в плазме крови определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Уровень антител определяли в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) против парвовируса энтерита собак второго типа (CPV-2). Ранее нами также были проведены исследования сывороток крови мышей, в аналогичных опытах, где наличие специфических антител к парвовирусу собак (CPV) определяли методом непрямого твердофазного ИФА. При постановки ИФА был использован стандартный вариант непрямого ИФА, основанный на взаимодействии специфических антител с антигеном (очищенный CPV-2), иммобилизованным на твердом носителе с последующим выявлением иммунного комплекса с помощью антивидовогоиммунопероксидазногоконъюгата в ферментативной реакции.
Результаты ИФА оценивали с помощью фотометра при длине волны 492 нм по коэффициенту оптического поглощения (OD 492). Титры антител в испытуемых сыворотках определяли как последнее разведение, обеспечивающее окраску, превышающую в 2 раза интенсивность окраски в лунках с контрольной отрицательной сывороткой (сыворотка крови мышей, взятой до иммунизации).
Полученные данные показали, что введение вакцины без биогенного стимулятора вызывало достоверное снижение нейтрофилов (контроль №1-18,5%, контроль №2 - 33,1%) и повышение числа лимфоцитов (контроль №1- 55,6%; контроль №2 - 49,0%). Количество Т-лимфоцитов оставалось практически на том же уровне. Однако увеличение общего числа лимфоцитов произошло за счет повышения количества В-клеток. Это косвенно подтверждается повышением уровня иммуноглобулинов (IgG) почти в два раза по сравнению с контролем №2.
Адъювантные свойства исследуемого препарата изучали в реакции простой и радиальной иммунодиффузии, определяя содержание иммуноглобулинов в плазме крови и суспензиях спленоцитов мышей. Полученные данные показали, что иммуноадъювантный эффект наблюдался при введении биогенного стимулятора в сочетании с вакциной и без нее. Уровень IgG в опытной группе составил 3,7, тогда как в контрольной группе №1-3,2 и контрольной группе № 2 - 1,6.
При определении иммуностимулирующего эффекта методом локального гемолиза по Ерне было установлено, что разница уровней Т-зависимого антителообразования у животных контрольных и опытной групп была статистически достоверна (р<0,01).Индекс стимуляции составил 1,7.
Одновременно мы проводили исследования сывороток крови мышей опытной группы и контрольной группы №1 в реакции торможения гемагглютинации (РТГА). Реакцию ставили для каждой пробы при двойном разведении сывороток в двух вариантах: при первичном разведении 1/2 и 1/3 с целью более точного определения отличий в значениях титров при одинаковом логарифме разведений. В опыте установлено, что у животных контрольной группы №1 (мыши, иммунизированные только вакциной против парвовирусного энтерита собак) на 28 сутки после вакцинации титры специфических антител к парвовирусу собак второго типа составляли в первичном разведении 1/2 -1:512 и вторичном разведении 1/3 - 1:384. У мышей опытной группы, привитых вакциной в сочетании с биогенным стимулятором, эти показатели составляли в первичном разведении 1:1024 и вторичном разведении 1:1536. При исследовании сывороток крови мышей методом непрямого твердофазного ИФА было установлено, что титры антител к CPV-2 в среднем по группе животных, привитых только вакциной, составляли 1:4800 (12,22 log2). Однако, у мышей, вакцинированных в сочетании с биогенным стимулятором, этот показатель составил 1:14080 (13,78 log2).
Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных поясняется следующим примером.
Пример 1.
Получают биогенный стимулятор согласно технологической схемы, представленной на фиг.1.
Семенники крупного рогатого скота, полученные от здорового животного, прошедшие ветеринарно-санитарную экспертизу согласно требований технологического регламента по заготовке малоценного сырья промывают проточной водой, очищают от соединительнотканных и жировых элементов, выдерживают в асептических условиях при температуре 5-6°С в течении 10 суток, измельчают до 2-3 мм, экстрагирование проводят на водяной бане с добавлением изотонического раствора хлористого натрия при температуре 80-90 °С в течении 30-40 минут, центрифугирование при 300 оборотах в минуту, фасовка жидкой фракции в ампулы по 5 мл.
Предложенный способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных позволяет:
- расширить сырьевую базу для получения высокоактивных биогенных стимуляторов в ветеринарной практике;
- использовать малоценное сырье
- упростить технологическую схему производства
- создать эффективный чистый и безопасный биостимулятор-иммунокорректор.

Claims (1)

  1. Способ получения биогенного стимулятора из семенников крупного рогатого скота, включающий промывание семенников проточной водой, очищение от соединительнотканных и жировых элементов, асептический автолиз при температуре 5-6°С с выдержкой 10 суток, измельчение до 2-3 мм, экстрагирование на водяной бане с добавлением изотонического раствора хлористого натрия при температуре 80-90°С в течение 30-40 минут, центрифугирование при 300 оборотах в минуту, фасовку полученной жидкой фракции в ампулы по 5 мл.
RU2018111271A 2018-03-29 2018-03-29 Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных RU2679361C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018111271A RU2679361C1 (ru) 2018-03-29 2018-03-29 Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018111271A RU2679361C1 (ru) 2018-03-29 2018-03-29 Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2679361C1 true RU2679361C1 (ru) 2019-02-07

Family

ID=65273771

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018111271A RU2679361C1 (ru) 2018-03-29 2018-03-29 Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2679361C1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2395289C1 (ru) * 2008-11-24 2010-07-27 Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук Способ изготовления биогенного стимулятора из личинок трутневого расплода пчел
WO2010104418A1 (ru) * 2009-03-13 2010-09-16 Общество С Ограниченной Ответственностью "Парафарм" Биологически активная добавка к пище
RU2561863C1 (ru) * 2014-03-12 2015-09-10 Автономная некоммерческая организация содействия социально-экономическому развитию "ИНЖЭКОН-Тверь" Способ изготовления биологического стимулятора

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2395289C1 (ru) * 2008-11-24 2010-07-27 Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук Способ изготовления биогенного стимулятора из личинок трутневого расплода пчел
WO2010104418A1 (ru) * 2009-03-13 2010-09-16 Общество С Ограниченной Ответственностью "Парафарм" Биологически активная добавка к пище
RU2561863C1 (ru) * 2014-03-12 2015-09-10 Автономная некоммерческая организация содействия социально-экономическому развитию "ИНЖЭКОН-Тверь" Способ изготовления биологического стимулятора

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ГРЕБЕНЩИКОВ А.В., ВАСИЛЕНКО Л.И., ГОЛУБЕВ А.И. БИОГЕННЫЙ СТИМУЛЯТОР НА ОСНОВЕ ТКАНЕЙ СЕЛЕЗЕНКИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА. Электронный научно-образовательный Вестник "Здоровье и образование в XXI веке". 2016, том 18(5). *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lightowlers et al. Excretory–secretory products of helminth parasites: effects on host immune responses
CN106380518B (zh) 卵黄免疫球蛋白的提取工艺
CN112300275A (zh) 用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用
JP2019511571A (ja) 食用燕の巣抽出物および抽出方法
CN104606675B (zh) 一种禽用多联特异性卵黄抗体及转移因子的制备方法
Rathore et al. Recent advancements in snake antivenom production
CN105198989A (zh) 抗黄海希瓦氏菌卵黄抗体及其制备方法
RU2679361C1 (ru) Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных
CN106397586A (zh) 一种抗皮肤癣菌的特异性卵黄抗体及其制备方法和应用
CN107158374B (zh) 一种免疫增强剂、口蹄疫灭活疫苗及其制备方法
CN101979511B (zh) 一种抗重金属锌的单克隆抗体
CN1947727A (zh) 抗蝰蛇毒血清及其制备方法
CN109608541B (zh) 一种抗猪产肠毒素大肠杆菌卵黄抗体及其制备方法
CN1218962C (zh) 生长抑素卵黄抗体及其制备
Sutherland THE SYDNEY FUNNEL–WEB SPIDER (ATRAX ROBUSTUS) 2. FRACTIONATION OF THE FEMALE VENOM INTO FIVE DISTINCT COMPONENTS
CN110616196B (zh) 一株维吉尼亚霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株ysl及其应用
CN1858064A (zh) 抗孟加拉眼镜蛇毒鸡卵黄抗体及其制备
CN103341163B (zh) 狂犬病、破伤风双效马抗血清及其制备方法
CN103013926B (zh) 抗细胞型朊蛋白单克隆抗体及其在诊断检测试剂盒中的应用
Theodoridis Fluorescent antibody studies on ephemeral fever virus
CN1063091C (zh) 一种功能食品免疫牛奶
CN101081299A (zh) 一种防治贝氏隐孢子虫病的卵黄免疫球蛋白产品和应用
RU2648466C1 (ru) Способ получения биогенного стимулятора для лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных
JP5047431B2 (ja) 炎症を低減させるグルコサミンおよび卵
CN104450626B (zh) 抗chMDA5蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200330