RU2670882C9 - Непатогенный штамм f18 е. coli и его применение - Google Patents
Непатогенный штамм f18 е. coli и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2670882C9 RU2670882C9 RU2015105738A RU2015105738A RU2670882C9 RU 2670882 C9 RU2670882 C9 RU 2670882C9 RU 2015105738 A RU2015105738 A RU 2015105738A RU 2015105738 A RU2015105738 A RU 2015105738A RU 2670882 C9 RU2670882 C9 RU 2670882C9
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- coli
- pathogenic
- animals
- live
- Prior art date
Links
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 title claims abstract description 102
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 72
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 34
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims abstract description 28
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 9
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 125
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 38
- 241001076388 Fimbria Species 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 65
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 25
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 25
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 21
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 18
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 17
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 15
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 14
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 14
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 13
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 12
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 11
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 244000309720 Escherichia coli F4 Species 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108010090763 Shiga Toxin 2 Proteins 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 4
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 101000775071 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Peroxiredoxin AHP1 Proteins 0.000 description 3
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 3
- 239000006053 animal diet Substances 0.000 description 3
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 3
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 3
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 3
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 3
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 101100172211 Arabidopsis thaliana HAG3 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 2
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 230000036449 good health Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- -1 such as LT Proteins 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 241000609240 Ambelania acida Species 0.000 description 1
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 208000034309 Bacterial disease carrier Diseases 0.000 description 1
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 description 1
- 101001074449 Crotalus durissus terrificus Phospholipase A2 inhibitor CNF Proteins 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- QMLVECGLEOSESV-RYUDHWBXSA-N Danofloxacin Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2CN1C)N2C(C(=CC=1C(=O)C(C(O)=O)=C2)F)=CC=1N2C1CC1 QMLVECGLEOSESV-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- KDHHWXGBNUCREU-HOTGVXAUSA-N Ferric-aerobactin Chemical compound CC(=O)N(O)CCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN(O)C(C)=O KDHHWXGBNUCREU-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 108010000916 Fimbriae Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 101000978730 Homo sapiens Nephrin Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010091769 Shiga Toxin 1 Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002318 adhesion promoter Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229950006334 apramycin Drugs 0.000 description 1
- XZNUGFQTQHRASN-XQENGBIVSA-N apramycin Chemical compound O([C@H]1O[C@@H]2[C@H](O)[C@@H]([C@H](O[C@H]2C[C@H]1N)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](N)[C@@H](CO)O1)O)NC)[C@@H]1[C@@H](N)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O XZNUGFQTQHRASN-XQENGBIVSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000010905 bagasse Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 1
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 229960000427 carbadox Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 229960005229 ceftiofur Drugs 0.000 description 1
- ZBHXIWJRIFEVQY-IHMPYVIRSA-N ceftiofur Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC(=O)C1=CC=CO1 ZBHXIWJRIFEVQY-IHMPYVIRSA-N 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 1
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 1
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 229960004385 danofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 229960000740 enrofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011868 grain product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 108010037896 heparin-binding hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- BPMVRAQIQQEBLN-OBPBNMOMSA-N methyl n-[(e)-(1-hydroxy-4-oxidoquinoxalin-4-ium-2-ylidene)methyl]iminocarbamate Chemical compound C1=CC=C2N(O)C(=C/N=NC(=O)OC)/C=[N+]([O-])C2=C1 BPMVRAQIQQEBLN-OBPBNMOMSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3s,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12,15-bis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-h Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O.CCC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N polymyxin E1 Natural products CCC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N polymyxin E2 Natural products CC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000007894 restriction fragment length polymorphism technique Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000009881 secretory diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 1
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- XOXHILFPRYWFOD-UHFFFAOYSA-N sulfachloropyridazine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(Cl)N=N1 XOXHILFPRYWFOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008831 sulfachlorpyridazine Drugs 0.000 description 1
- 229960000973 sulfadimethoxine Drugs 0.000 description 1
- ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N sulfadimethoxine Chemical compound COC1=NC(OC)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001544 sulfathiazole Drugs 0.000 description 1
- JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N sulfathiazole Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=NC=CS1 JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 1
- 239000006150 trypticase soy agar Substances 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 238000004260 weight control Methods 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/185—Escherichia
- C12R2001/19—Escherichia coli
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Virology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к непатогенному штамму E. coli и его применению. Предложен выделенный живой штамм Ε. coli для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, внесенный в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получивший номер доступа 200613-01. Указанный штамм может быть использован для получения композиции для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, а также в способе предотвращения указанной инфекции. Группа изобретений может быть эффективно использована для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи. 4 н. и 20 з.п. ф-лы, 4 ил., 11 табл., 4 пр.
Description
Перекрестная ссылка на родственную заявку
По настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США № 61/674179, поданной 20 июля 2012 года, полное содержание которой включено в настоящее описание в полном объеме посредством ссылки.
Область техники
Настоящая заявка относится к непатогенному штамму F18 E. coli и к его применению.
Уровень техники
Отечное заболевание и диарея, как правило, являются распространенными заболеваниями среди животных, выращенных заводчиками. Например, отечное заболевание у отнятых поросят, как правило, вызвано кодирующими токсин Шига штаммами Escherichia coli (STEC), кодирующими токсин Шига типа 2e (Stx2e) (MacLeod et al., 1991, Vet Pathol 28:66-73), тогда как секреторная диарея у молочных и отнятых поросят, как правило, вызвана энтеротоксигенными штаммами Escherichia coli (ETEC), кодирующими термостабильные (STa, STb, EAST1) и/или термолабильные (LT) энтеротоксины (Gyles и Fairbrother, 2010, Escherichia coli. In: Pathogenesis of bacterial infections in animals, ed. Gyles CL, Prescott JF, Songer G, Thoen CO, 4th ed., pp 267-308. Blackwell Publishing, Ames, IA; Nagy et al., 1997, Microb Pathog 22:1-11). Некоторые патогенные штаммы экспрессируют как гены Stx2e, так и гены энтеротоксина и, следовательно, могут быть способны вызывать симптомы отечного заболевания и симптомы диареи у одного и того же животного (STEC/ETEC) (Barth et al., 2007, Berl Munch Tierarztl Wochenschr 120:307-316).
Недостатком, связанным со многими общепринятыми терапевтическими или профилактическими композициями и способами для интестинальных бактериальных инфекций, связанных с симптомами отечного заболевания и/или диарейного заболевания, является их низкая надежность или эффективность. Следовательно, существует потребность в улучшенных терапевтических или профилактических композициях и способах для отечного заболевания и/или диарейного заболевания.
Сущность изобретения
В неограничивающем обширном варианте предоставлен выделенный штамм Escherichia coli, который был внесен в Международный депозитарий Канады (International Depositary Authority of Canada, IDAC) 20 июня 2013 года и ему был присвоен номер доступа 200613-01.
В другом неограничивающем обширном варианте предоставлен способ предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной Escherichia coli (E. coli) у животного, содержащий интестинальную доставку животному эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01.
В другом неограничивающем обширном варианте предоставлен способ предотвращения отечного заболевания или диареи, вызванных инфекцией F18 патогенной Escherichia coli (E. coli), у животного, содержащий интестинальную доставку животному эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01.
В неограничивающем варианте осуществления живой штамм E. coli находится в лиофилизированной форме. В другом неограничивающем варианте осуществления живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем, например, живой штамм E. coli может быть разбавлен, включен в или суспендирован в приемлемом для кормления носителе. В другом неограничивающем варианте осуществления живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
Указанные и другие аспекты и свойства настоящего изобретения станут очевидными для специалиста в данной области при обзоре следующего описания конкретных вариантов осуществления изобретения в сочетании с прилагаемыми чертежами.
Краткое описание чертежей
Подробное описание вариантов осуществления настоящего изобретения предоставлено в данном документе далее со ссылкой на прилагаемые чертежи, в которых:
Фиг. 1: неограничивающий график, который иллюстрирует фекальную экскрецию непатогенного штамма F18 после введения живого непатогенного штамма F18 с соответствующими варьирующимися дозировками, показан в виде обратного log среднего логарифмических колониеобразующих единиц (КОЕ).
Фиг. 2: неограничивающий график, который иллюстрирует фекальную экскрецию патогенного штамма F18-STEC для стимуляции: сравнение между животными, подвергаемыми обработке с комбинированной композицией, и контрольными животными.
Фиг. 3: неограничивающий график, который иллюстрирует колонизацию патогенным штаммом F18-STEC для стимуляции в различных интестинальных сегментах: сравнение между животными, подвергаемыми обработке с комбинированной композицией, и контрольными животными.
Фиг. 4: неограничивающий график, который иллюстрирует иммунологическое детектирование IgM против фимбрий F18 в серологических образцах: сравнение между животными, подвергаемыми обработке с комбинированной композицией, и контрольными животными.
Подробное описание вариантов осуществления
Обычно свиной STEC и многие свиные штаммы ETEC экспрессируют детерминанту F18. Детерминанта F18 является фимбрией, которая облегчает бактериальную колонизацию поверхности слизистой кишечника (Fairbrother et al. 2006, Postweaning Escherichia coli diarrhea and edema disease. In: Diseases of swine, ed. Straw B, Zimmermann JJ, D'Allaire S, Taylor DJ, 9th ed., pp. 649-662. Blackwell Publishing, Ames, IA). Считается, что фимбрии F18 опосредуют адгезию экспрессирующей F18 бактериальной клетки к рецептору энтероцита, рецептору ECF18R, который экспонирован энтероцитами тонкого кишечника на их апикальной цитоплазматической мембране (Vogeli et al. 1996, Anim Genet 27:321-328; Waddell et al. 1996, Infect Immun 64:1714-1719).
Некоторые свиные штаммы STEC и STEC/ETEC могут экспрессировать другие цитоадгезивные фимбрии или нефимбриальные адгезины в дополнение к фимбриям F18, в частности фимбрии F4 или F5 или "адгезин, задействованный в диффузной адгезии" (AIDA) (Barth et al., 2007, Berl Munch Tierarztl Wochenschr 120:307-316; DebRoy et al. 2009, J Vet Diagn Invest 21:359-364; Fairbrother et al., указано выше, Niewerth et al.: 2001, Clin Diagn Lab Immunol 8:143-149). Тогда как адгезин AIDA встречается в обоих патогенах, фимбрии F4 или F5 являются редкими в этих штаммах.
На ферме диарея после отъема (post-weaning diarrhea, (PWD) и отечное заболевание (edema disease, ED) у свиней обычно происходят в первые 2 недели после отъема и связаны с инфекцией энтеротоксигенными патогенными штаммами E. coli (ETEC) F4 или F18 в отношении PWD и патогенными продуцирующими токсин Шига штаммами F18 E. coli (STEC) в отношении ED. Для обоих штаммов фимбрии (т.е. F4 или F18) позволяют адгезию бактерий к их специфическим рецепторам, расположенным на малых кишечных ворсинках с последующим делением бактерий и колонизацией кишечника.
При PWD рецепторы F4 экспрессируются у приблизительно от 30 до 40% свиней и рецепторы F18 детектированы у приблизительно от 70 до 80% свиней. Патогенные штаммы продуцируют комбинацию нескольких токсинов, таких как LT, STa и STb. Свиньи, инфицированные с ETEC-F4, в целом демонстрируют очень высокую заболеваемость, задержку роста, водянистую и реактивную диарею, что часто приводит к смерти инфицированного животного.
Для ED рецепторы F18 детектированы у приблизительно от 70 до 80% свиней. Токсином, связанным с STEC, является Stx2e, вазотоксин, который воздействует на васкулярные эндотелиальные клетки, приводя к отеку и последующим неврологическим признакам, включая атаксию, лежание и в конечном счете в отношении PWD часто приводит к смерти инфицированного животного.
В используемом в данном документе значении выражение "E. coli F18" или "штамм F18" относится к штамму E. coli, который экспрессирует детерминанту F18 (фимбрии).
В используемом в данном документе значении выражение "E. coli F4" или "штамм F4" относится к штамму E. coli, который экспрессирует детерминанту F4 (фимбрии).
Специалист в данной области без чрезмерных усилий распознает, что описанным в данном документе непатогенным штаммом F18 можно манипулировать так, чтобы получить мутант или вариант его штамма, штамм, который имеет все идентификационные характеристики штамма, описанного в данном документе. Способы создания мутантов или вариантов широко распространены и хорошо известны в данной области. Например, патент США № 7371558 (который полностью включен в данный документ посредством ссылки) раскрывает краткое изложение некоторых способов для создания "мутанта или его варианта". Конкретные способы для создания мутантов с применением радиации или химических агентов также хорошо задокументированы в данной области. См., например, Thomas D. Brock in Biotechnology: A Textbook of Industrial Microbiology, Second Edition (1989) Sinauer Associates, Inc., Sunderland, Mass., или Deshpande, Mukund V., Appl. Biochem. Biotechnol. 36, 227 (1992). Мутант или вариант его штамма может также быть идентифицирован как имеющий геном или его значительную часть, которая гибридизируется при очень жестких условиях с геном штамма, описанного в данном документе. Специалист в данной области распознает, насколько значительной должна быть часть генома, чтобы данный штамм можно было считать "мутантом или его вариантом". По существу, специалист в данной области может обоснованно ожидать, что данное изобретение может быть без чрезмерных усилий воплощено на практике с применением такого варианта или его мутанта.
В используемом в данном документе значении выражение "эффективное количество" относится к количеству, которое вызовет требуемый биологический ответ в ткани, системе или животном. Такое эффективное количество описанного в данном документе живого штамма E. coli F18 может являться, например, но без ограничения им, количеством, которого достаточно для предотвращения интестинальной бактериальной инфекции, минимизируя бактериальную экскрецию, предотвращая заболевание, вызванное интестинальной бактериальной инфекцией, и ему подобным. Применяемое эффективное количество может варьироваться в соответствии с рядом факторов. К примеру, ряд факторов может быть выбран по типу животного, начальному весу животного, фазе роста животного, условиям окружающей среды, приемлемому для кормления носителю, ассоциированному с живым штаммом, т.е. приспособления для животных, тип и управление производством, гигиеническое состояние приспособлений, стресс животного после отъема или вывода, применяемые питание и добавки, здоровье животного и сопутствующие заболевания или лечение и тому подобное. Например, эффективное количество может быть, но без ограничения ими, любым количеством, выбранным в диапазоне от приблизительно 5×106 до приблизительно 3×1010 КОЕ. Специалист в данной области будет способен определить пригодное эффективное количество без чрезмерных усилий.
В используемом в данном документе значении термин "животное" относится к любому молодому или взрослому животному, пригодному для применения в соответствии с данным изобретением. В неограничивающем варианте осуществления термин "животное" относится к свиньям. В неограничивающем варианте осуществления термин "животное" относится к свинье. В неограничивающем варианте осуществления свинья является свиньей перед отъемом. В другом неограничивающем варианте осуществления свинья является свиньей после отъема. Специалист в данной области будет способен определить пригодное животное без чрезмерных усилий.
В используемом в данном документе значении термин "интестинальная доставка" относится к форме введения, которая в конечном счете позволяет штамму достигнуть желудочно-кишечный тракт и более предпочтительно кишечник. В неограничивающем варианте осуществления интестинальная доставка выполняется оральным введением штамма. В другом неограничивающем варианте осуществления интестинальная доставка выполняется ректальным введением, например, посредством суппозитория. Специалист в данной области будет способен без чрезмерных усилий определить пригодную форму введения.
В используемом в данном документе значении выражение "приемлемый для кормления носитель" относится к любому носителю, разбавителю или наполнителю, совместимому с описанным в данном документе штаммом и может быть назначен животному без побочных явлений. Пригодные приемлемые для кормления носители, известные в данной области, содержат, но не ограничены ими, воду, физиологический раствор, глюкозу, декстрозу, забуференные растворы и тому подобное. Такой носитель предпочтительно является нетоксичным по отношению к штамму и невредным для животного. Он может также быть биодеградируемым. Носитель может быть твердым или жидким, приемлемым для кормления носителем. Пригодный твердый приемлемый для кормления носитель является нетоксичным перевариваемым носителем. К примеру, этот твердый приемлемый для кормления носитель может быть общераспространенным твердым кормовым продуктом, таким как компонент типичного рациона животного, состоящий из зерновых продуктов, таких как ячменная мука, кукурузная мука или кормовой продукт из пшеницы, продукты из орехов и семян, такие как жмых из очищенного земляного ореха, или хлопковые жмыхи, или извлеченные хлопковые жмыхи, вместе с незначительными количествами, например, перьевой муки, муки из морских водорослей, костной муки, костной пудры, мела, соли, мочевины и витаминов; или он может быть инертным твердым разбавителем или носителем без питательной ценности, например, каолином, тальком, карбонатом кальция, фуллеровой глиной, глинопорошком тонкого помола из аттапульгированной глины, молотыми ракушками устриц или молотым известняком; или он может быть крахмалом или лактозой. В другом конкретном варианте выполнения твердый приемлемый для кормления носитель может являться молотой кукурузой, соевой мукой, сывороткой, животным жиром и тому подобным. Пригодный жидкий приемлемый для кормления носитель является, например, водой и предпочтительно питьевой водой; молоком, таким как цельное или обезжиренное молоко; или культуральной средой, такой как трипсоновый соевый бульон (TSB). Специалист в данной области будет способен определить пригодный приемлемый для кормления носитель без чрезмерных усилий.
Объем формулы изобретения не должен быть ограничен предпочтительными вариантами осуществления, приведенными в последующих примерах, а это предусматривает ее расширенное истолкование, совместимое с описанием в целом.
Примеры
Пример 1
а) Непатогенный штамм F18 E. coli
Штамм E. coli, внесенный в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получивший номер доступа 200613-01, был выделен из экскрементов свиньи в 1996 году в справочной лаборатории ΟΙΕ для Escherichia coli (EcL) в Faculte de medicine veterinaire (FMV), Universite de Montreal (UdeM), Saint-Hyacinthe, Quebec, Canada Dr. J.M. Fairbrother.
Идентификация штамма была осуществлена с применением системы API. Кодом API 20E для Master Seed является 5004552. Серотипирование штамма выявило серотип 0141:K94:H-.
Виротипирование штамма было осуществлено гибридизацией колоний и/или полимеразной цепной реакцией (ПЦР). Результаты виротипирования продемонстрировали, что штамм являлся позитивным на F18 и AIDA, тогда как он был негативен на следующие токсины: STa, STb, LT, EAST1, Stx1, Stx2, CNF, F4, F5, F6, F17, F41, P, AFA, Eae, Paa, Tsh, гены Aerobactin. Этот штамм, таким образом, является непатогенным штаммом E. coli.
Штамм является резистентным к следующим антимикробным средствам: амоксициллин, ампициллин, клиндамицин, доксициклин, эритромицин, неомицин, пенициллин, спектиномицин, стрептомицин, сульфахлорпиридазин, сульфадиметоксин, сульфатиазол, тиамулин, тилмикозин, тетрациклин (хлор и окси) и тилозин, при этом является чувствительным к следующим антимикробным средствам: апрамицин, цефтиофур, колистин, данофлоксацин, энрофлоксацин и гентамицин.
b) Непатогенный штамм F4 E. coli
Непатогенный штамм F4 Ε. coli может также быть применен в комбинации с непатогенным штаммом F18, описанным в данном документе. В неограничивающем варианте осуществления непатогенный штамм F4 E. coli является любым непатогенным штаммом, который экспрессирует детерминанту F4. В неограничивающем варианте осуществления непатогенный штамм F4 E. coli является рекомбинантным штаммом, например, штаммом pMK005 (Kehoe et al., J Bacteriol. 1983 Sep;155(3):1071-7). В другом неограничивающем варианте осуществления непатогенный штамм F4 E. coli является природным штаммом, например, штаммом, внесенным в Международный депозитарий Канады 21 января 2005 года и получившим номер доступа IDAC 210105-01, как описано в патенте США 7981411 (его содержание полностью включено в данный документ посредством ссылки).
Пример 2
В обширном варианте целью этого исследования была оценка влияния различных оральных доз, описанных в данном документе, непатогенного штамма F18 на его фекальную экскрецию и на анти-F18 системный гуморальный ответ.
Следующая таблица 1 в общем суммирует план исследования:
| День | Событие |
| 0 | Поступление свиней в экспериментальный блок и распределение на 3 группы |
| 0-5 | Период акклиматизации |
| 2 и 5-19 | Отбор образцов фекалий для ПЦР |
| 5 | Вакцинация |
| 5-8, 10, 12, 14, 16, 18 и 19 | Отбор образцов фекалий для определения количества жизнеспособного вакцинного штамма (на основании гемолитических колоний) |
| 5, 10, 12, 15 и 19 | Отбор образца крови |
| 8 | Первая некропсия |
| 19 | Завершающая некропсия и конец эксперимента |
I - План исследования
а) Животные
Отбирали образцы крови 50 молочных поросят для детекционного анализа состояния рецептора F18 и уши поросят помечали. Выбранных отлученных от матери поросят (самцы и самки) возрастом между 17 и 20 днями, приобретали на местной ферме, расположенной в Монтережи, Квебек, Канада. Животных переносили в приспособления для отделения. На выбранной ферме не имели место недавних (менее чем 6 месяцев) свиного репродуктивного и респираторного синдрома (PRRS) и случаев заболевания после отъема. Поросята являлись здоровыми поросятами и весили между 4 и 6 кг. В общей сложности использовали двадцать одного (21) поросенка, позитивного по отношению к состоянию F18-рецептора, случайно разделенных с применением номеров, обозначенных на ушах на три (3) группы из 7 животных (три различные дозы композиции F18). На день 2 после отъема отбирали образец фекалий для определения существующей колонизации с F4 позитивными и F18 позитивными штаммами с применением ПЦР. Не было обнаружено ни одного животного, позитивного или на F4 позитивные, или на F18 позитивные бактерии на день 2 после отъема.
b) Распределение по загонам и вскармливание
Группы обработки выдерживали в отдельных помещениях. Животные имели неограниченный доступ к воде, и их кормили два раза в сутки во время исследования. Рацион животных был составлен из питания с высоким содержанием соевой муки, как описано патенте США 6355859 (его содержание полностью включено в данный документ посредством ссылки). Во время исследования не вводили сопутствующую лекарственную терапию или вакцинацию.
с) Приготовление и введение штамма
Подготавливали кривые роста таким же образом для оценки времени, требуемого для непатогенного штамма F18 для достижения оптимального выхода. Рабочую затравку (Working Seed,WS) применяли для подготовки кривой роста и культуры, которую применяли для приготовления композиции F18. Один миллилитр WS применяли для инокулирования 500 мл триптического соевого бульона без веществ животного происхождения. Культуру инкубировали примерно 6,5 часов при 37°C со взбалтыванием (180 об./мин). Определяли жизнеспособное количество для оценки выхода культуры штамма F18 и применяли реакцию ПЦР для демонстрации того, что подходящий штамм был применен во время анализа. На основании результатов культуру регулировали так, чтобы она удовлетворяла дозам, которые должны быть тестированы с применением стерильного TSB без веществ животного происхождения: группа 1,5×108 КОЕ/доза; группа 2,1×109 КОЕ/доза и группа 3,5×109 КОЕ/доза.
Девять (9) доз композиции непатогенного штамма F18 готовили для каждого состава, на 2 больше, чем количество поросят, которые должны быть обработаны для компенсации любой потери композиции. Шесть (6) мл композиции F18 вводили орально каждому поросенку. F18-композицию вводили на день 5 после отъема с применением пищеводной трубки.
II - Наблюдения и оценка
а) Общее состояние здоровья
За поросятами наблюдали два раза в сутки относительно общего состояния здоровья: поведение, обезвоживание, аппетит и общее физическое состояние. Также оценивали подвижность и состояние шерсти.
b) Диарея
Консистенцию фекалий оценивали раз в сутки следующим образом: 0, нормальная; 1, пастообразная; 2, наличие жидкости, но больше твердых частиц, чем жидких; 3, наличие большего количества жидкости, чем твердых частиц; и 4, полностью жидкая.
с) Экскреция введенного непатогенного штамма F18
На день 2 и дни 5-19 после отъема экскременты тестировали с ПЦР (multiplex: LT, STa, STb и F4; F18, Stx2e и AIDA) после обогащения в бульоне Луриа-Бертани (LB) для оценки наличия введенного непатогенного штамма F18 в каждой группе. Образец, позитивный на F18, считали позитивным на введенный непатогенный штамм F18. В дни 5-8, 10, 12, 14, 16, 18 и 19 после отъема, определение жизнеспособного количества осуществляли с образцами экскрементов с применением триптического соевого агара II (TSA II) - 5% овечьей крови для оценки уровня введенного непатогенного штамма F18, экскретированного после введения. Подсчитывали только гемолитические колонии с типичной морфологией E. coli.
d) Оценка иммунизации
Образцы крови отбирали в дни 5, 10, 12, 15 и 19 после отъема для оценки посредством ELISA оптимального иммунного ответа в соответствии с дозировкой введенного непатогенного штамма F18.
III - Некропсия
a) Некропсия
Первую некропсию проводили через 3 дня после вакцинации на день 8 после отъема на 2 животных, выбранных случайно, и оценивали общие отклонения. Вторую некропсию проводили в конце исследования, таким образом на день 19 после отъема, что являлось 14 днем после вакцинации всех оставшихся животных.
b) Консистенция интестинального содержимого
Консистенцию интестинального содержимого оценивали в тощей кишке, подвздошной кишке, слепой кишке, толстой кишке и прямой кишке следующим образом: 0, нормальная; 1, пастообразная; 2, наличие жидкости, но больше твердых частиц, чем жидких; 3, наличие большего количества жидкости, чем твердых частиц, или полностью жидкая.
c) Колонизация подвздошной кишки вакцинным штаммом
2 сантиметра участка подвздошной кишки отделяли в 10 см от илеоцекального соединения. Живой бактериальный подсчет выполняли с применением TSA II - 5% овечья кровь, где подсчитывали только гемолитические колонии с типичной морфологией E. coli.
IV - Результаты
Не наблюдали смертность как у обработанных, так и у контрольных животных во всем исследовании. Все выбранные свиньи являлись позитивными на F18 рецептор в соответствии со способом ПЦР-RFLP. В целом, поросята имели хорошее здоровье в течение всего исследования. Несколько животных демонстрировали сниженную подвижность, что проявлялось перед введением непатогенного штамма F18 или вследствие повреждений, таким образом, не связанную с введением непатогенного F18.
Во время этого исследования оценку 2 или более считали диареей. Из 21 животного 5 демонстрировали кратковременную умеренную диарею после введения F18. Одно животное (свинья 5 в группе 3) имело диарею (оценка 3) в течение 2 последовательных дней (таблицы 2a, 2b и 2c).
Образцы фекалий тестировали раз в сутки посредством ПЦР для детектирования наличия штамма с введенным F18; 3 животных в группе 2 (1×109 КОЕ/доза) являлись позитивными на введенный штамм F18, самое позднее на день 11 после вакцинации, где в группе 3 (5×109 КОЕ/доза) имел место 1 поросенок, позитивный на день 10, 1 на день 8, и 3 на день 7 после вакцинации. Для группы 1 (5×108 КОЕ/доза) 1 поросенок являлся позитивным на непатогенный штамм F18 на день 8 после вакцинации, 1 поросенок на день 7 и 2 на день 6 после вакцинации (таблицы 2a, 2b и 2c).
Фекальную экскрецию непатогенного штамма с введенным F18 также оценивали бактериальным подсчетом из образцов фекалий на день 5-8, 10, 12, 14, 16, 18 и 19. Фиг. 1 демонстрирует экскрецию штамма после введения. Уровень бактерий, экскретированных с более низкими дозами (5×108 КОЕ), был ниже, чем два других, при этом наивысшая экскреция наблюдалась с животными из группы 2, которым вводили дозу 1×109 КОЕ.
Не наблюдали никаких больших отклонений для внутренних органов. Консистенции интестинального содержимого оценивали на накопление жидкой среды.
В этом исследовании оценкой 2 или более считалось накопление жидкой среды в интестинальном сегменте в день некропсии. Таблицы 3a, 3b и 3c демонстрируют, что у одного животного в группе 1 были представлены два последовательных сегмента с накоплением жидкой среды (оценка 2). Другие животные не демонстрировали накопление жидкой среды.
Не наблюдали никаких нежелательных явлений, связанных с введением непатогенного штамма F18 во время исследования, что указывает на то, что тестируемые дозировки в целом являются безопасными.
На основании оценки экскреции штамма как ПЦР, так и подсчет бактерий предполагал, что 1×109 КОЕ/доза является пригодной дозировкой для получения пролонгированной фекальной экскреции этого штамма. Оба теста демонстрировали, что введение непатогенного штамма F18 при 1×109 КОЕ/доза экскретировалось в течение более длительного периода, чем другие тестируемые дозировки.
Пример 3
В обширном варианте целью этого исследования являлась оценка эффективности комбинированной композиции, включающей описанные в данном документе непатогенные штаммы E. coli F4 и F18.
Следующая таблица 4 в общем суммирует расписание исследования:
| Дней | Событие |
| 0 | Поступление свиней в экспериментaльный блок и распределение на 2 группы |
| 0-5 | Акклиматизационный период |
| 1,12, 14, 16,18 и 19 | Отбор образцов фекалий для ПЦР |
| 4, 12, 17 и 19 | Отбор образца крови |
| 5 | Оральное введение дозы или плацебо |
| 12,13 и 14 | Стимуляция |
| 12, 14,16, 18 и 19 | Отбор образцов фекалий для определения жизнеспособного количества штамма для стимуляции |
| 19 | Завершающая некропсия и конец эксперимента |
I - План исследования
a) Животные
Отбирали образцы крови 50 молочных поросят для детектционного анализа на рецептор F18 и уши поросят помечали. Выбранных отнятых поросят (самцы и самки) возрастом между 17 и 21 днями, приобретали в коммерческой ферме, расположенной рядом с Монтережи, Квебек, Канада. Животных переносили в приспособления для отделения. На ферме не было недавнего (менее чем 6 месяцев) свиного репродуктивного и респираторного синдрома (PRRS) и случаев заболевания после отъема. Поросята являлись здоровыми поросятами и весили между 4 и 6 кг.
В общей сложности использовали двадцать (20) поросят, случайно разделенных по номерам на бирках на ушах. Программное обеспечение рандомизатор применяли для случайного распределения 20 животных на две (2) группы из 10 животных (контрольная группа и группа введения). На день 1 после отъема образец фекалий отбирали для определения существующей колонизации с патогенным F4-ETEC позитивным штаммом и F18-ETEC/STEC позитивными штаммами, имеющим происхождение из фермы с применением анализа ПЦР. Мечеными генами являлись STa, STb, LT, F4, Stx2 и F18. Не было обнаружено ни одного животного, позитивного или на бактерии F4-ETEC, или на F18-ETEC/STEC на день 1 после отъема.
b) Распределение по загонам и вскармливание
Обработанные и контрольные группы выдерживали в отдельных помещениях. Животные имели неограниченный доступ к воде и питанию во время исследования. Рацион животных был составлен из муки с высоким содержанием сои как описано в патенте США 6355859. Во время исследования не вводили никакую сопутствующую лекарственную терапию или вакцинацию.
с) Приготовление и введение штамма
Регидратированную комбинированную композицию разбавляли для получения минимум 5×108 КОЕ/штамм в расчете на 6-мл дозу. Плацебо было составлено из 6 мл стерильной воды. Комбинированную композицию и плацебо вводили орально с применением шприца с резиновой трубкой.
d) Приготовление и введение штамма для стимуляции (F18-STEC EcL 14724)
Этот штамм для стимуляции был внесен в Международный депозитарий Канады (IDAC) 9 июля и получил номер доступа 090713-01.
Готовили культуру для получения инфекционной дозы 1×1011 КОЕ в расчете на поросенка. После введения 10 мл карбоната кальция 1,2% (CaCO3), каждому поросенку орально вводили пять (5) мл штамма для стимуляции с применением пищеводной трубки. Штамм для стимуляции вводили в течение трех (3) последовательных дней, т.е. день 12, 13 и 14 после отъема в концентрации 1×1011 КОЕ/доза каждый день.
e) Наблюдения и оценка
За поросятами наблюдали два раза в сутки относительно общего состояния здоровья: поведение, аппетит, общее физическое состояние, подвижность и состояние шерсти. Наблюдали за обезвоживанием и температурой тела раз в сутки. Экскрецию штамма для стимуляции оценивали по ПЦР и количеству жизнеспособных бактерий (КОЕ). Образцы крови анализировали с применением специфического фермент-связанного иммуносорбентного исследования (ELISA). Результаты представлены в виде процентов положительного результата анализа (PP%) относительно позитивного контроля.
II - Некропсия
Колонизацию подвздошной кишки и слепой кишки штаммом для стимуляции определяли следующим образом. 2 сантиметра участка подвздошной кишки отбирали в 10 см от илеоцекального соединения также как и для участка слепой кишки. Живой бактериальный подсчет выполняли с применением TSA II - 5% овечья кровь, где только гемолитические колонии с типичной морфологией E. coli подсчитывали после от 12 до 18 часов инкубирования при 37°C.
III - Результаты
a) Общая информация
Из тестированных 50 поросят 30 являлись восприимчивыми к адгезии штамма F18 и 20 животных случайно выбирали для испытаний. В целом поросята имели хорошее здоровье перед стимуляцией.
Следующая таблица 5 демонстрирует результаты ПЦР экскретированного штамма для стимуляции из экскрементов обработанных и контрольных животных:
| Свиньи (%), экскретирующие штамм для стимуляции в день после последней стимуляции (день после отъема) | ||||
| 0 (14) | 2 (16) | 4 (18) | 5 (19) | |
| Плацебо | 100% | 100% | 67% | 56% |
| Комбинированная композиция | 100% | 60% | 0% | 0% |
Как продемонстрировано в таблице 5, введение комбинированной композиции снижало экскрецию стимулирующих штаммов по сравнению со свиньями, которые получали плацебо. Более чем половина животных с плацебо (56%) все еще экскретировала штамм для стимуляции через 5 дней после последней стимуляции (конец исследования), тогда как штамм для стимуляции не был детектирован в животных, обработанных с комбинированной композицией уже через 4 дня после последней стимуляции.
Фиг. 2 демонстрирует количество жизнеспособных бактерий (КОЕ)/г экскретированного штамма для стимуляции из экскрементов обработанных и контрольных животных. Пик концентрации экскретированного штамма для стимуляции виден на день 14 после отъема (день 0 после стимуляции) как для обработанных, так и для контрольных животных. В обработанных животных концентрация штамма для стимуляции в экскрементах начинала снижаться на день 2 после последней стимуляции (день 16 после отъема), и дальнейшие снижения наблюдали по сравнению с плацебо в дни 4 и 5 после последней стимуляции. Эти результаты соответствуют результатам ПЦР. Более конкретно введение комбинированной композиции снижало уровень экскреции штамма для стимуляции на приблизительно 2 log через 5 дней после последней стимуляции (конец исследования).
b) Колонизация подвздошной кишки и слепой кишки штаммом для стимуляции
Различия в интестинальной колонизации между обработанными и животными с плацебо наблюдали для обоих сегментов интестинальной ткани (подвздошная кишка и слепая кишка). Фиг. 3 демонстрирует, что введение комбинированной композиции значительно снижало колонизацию кишечника штаммом для стимуляции. Более конкретно введение комбинированной композиции снижало колонизацию штаммом для стимуляции подвздошной кишки и слепой кишки на приблизительно 2 log через 5 дней после последней стимуляции (конец исследования).
c) Оценка иммунного ответа
Наличие системных IgM против фимбрий F18 оценивали в образцах сыворотки с применением специфического ELISA. Животные, обработанные комбинированной композицией, демонстрировали специфический иммунный ответ уже через 7 дней после введения (фиг. 4).
На основании полученного в результате снижения колонизации штаммом для стимуляции, снижения экскреции и стимуляции специфических анти-F18 антител, это исследование предполагает, что интестинальная доставка композиции, включая описанный в данном документе непатогенный штамм F18, способна к предотвращению интестинальной бактериальной инфекции E. coli F18.
Пример 4
В обширном варианте целью этого исследования являлась оценка эффективности описанного в данном документе непатогенного штамма F18 E. coli.
I - План исследования
a) Животные
Перед поступлением животных в приспособления десять молочных поросят из 10 приплодов в общей сложности 100 поросят подвергали отбору в опоросном блоке для выделения ДНК и скринировали на состояние F18 рецептора (RF18+) способом RFLP-PCR. Тридцать (30) RF18+ поросят случайно распределяли между группами блокированием по приплодам (соотношение 1:1) с генерированием размера блока n=6. Поросят распределяли в одну из следующих групп: T1, которым вводили непатогенный тестируемый штамм F18 (n=15); и T2, которым вводили плацебо (n=15).
Животных обработанной группы (T1) собирали в загоне экспериментального помещения и животных группы с плацебо (T2) собирали в загоне экспериментального помещения до фазы стимуляция. В день стимуляции, то есть через 11 дней после введения непатогенного штамма F18 или плацебо, животных групп T1 (n=15) и T2 (n=15) переносили перед стимуляцией в 2 раздельных загона, расположенных в помещении для стимуляции. Все 15 поросят конкретной группы обработки собирали в соответствующем загоне. Во время всего исследования животные имели неограниченный доступ к воде, за исключением приостановки доступа к воде перед вакцинацией. Животных кормили два раза в сутки нелекарственной мукой с высоким содержанием сои (патент США 6355859).
На день 1 после отъема отбирали образец фекалий для определения существующей колонизации патогенным F4-ETEC позитивным штаммом и F18-ETEC/STEC позитивными штаммами, имеющими происхождение с фермы с применением анализа ПЦР. Мечеными генами являлись STa, STb, LT, F4, Stx2 и F18. Не было обнаружено никаких животных, являющихся позитивными или на бактерии F4-ETEC, или на F18-ETEC/STEC на день 1 после отъема. Три (3) животных из группы T1 исключали из исследования в целях надлежащего ухода за животными. Эти нежелательные явления считались не являющимися связанными с введением непатогенного штамма F18.
Следующая таблица 6 в общем суммирует использованных животных:
| Разновидности: | Домашние свиньи (Pen Ar Lan Naїma). Эта порода свиней является гибридной породой, коммерциализированной в Америке, Европе и Азии. |
| Количество и пол: | 30 животных; кастрировано 30% самцов и 70% самок. |
| Поставщик: | Товарная ферма, Монтережи, Квебек, Канада |
| Возраст при тестировании: | Испытуемый образец был предназначен для введения тестового штамма для поросят возрастом от примерно 17 дней. |
| Диапазон веса в начале исследования: | 3,120-7,295 кг |
| Акклиматизация: | 1 день |
| Лекарственное лечение: | Ни одному из исследуемых животных не вводили никакую сопутствующую лекарственную терапию или вакцинацию в пределах 3 дней перед и во время исследования |
Следующая таблица 7 в общем суммирует план исследования:
| День активности | T1 | T2 |
| День -2 | Поступление свиней RF18+ в приспособления для отделения и случайное распределение, общий контроль здоровья и веса | |
| День 0 (возраст прибл. 17 дней) | введение непатогенного F18 | Плацебо |
| Дни 1-11 | Ежесуточный контроль здоровья | |
| День 11-12-13 | Стимуляция с F8-STEC | |
| День 11-18 | Наблюдения за здоровьем | |
| День 18 | Некропсия и микробиология | |
II - Процедура и оценка
Животные группы T1 и группы T2 не могли быть перемешаны из-за природы тестируемого продукта (т.е. живая вакцина), которая требует, чтобы обработанные животные располагались отдельно от контрольных с плацебо. Растворы непатогенного штамма F18 и плацебо готовили индивидуумы, не задействованные в фазе с животными. Код "A" и "B" случайно присваивали растворам непатогенного штамма F18 и плацебо. Помещения случайно распределяли для обработки и идентифицировали как помещения 1 и 2. В каждом помещении содержались все животные группы T1 или все группы T2, перемешанные в одном загоне. Для персонала, задействованного в животной фазе и осуществляющего обработку лабораторного анализа, расположение помещений было замаскировано. Для фазы некропсии последовательность животных, которые должны были подвергнуться некропсии, была случайно присвоена и животные были заново идентифицированы в виде A-AD. Для индивидуума, выполняющего некропсию поросенка, идентификация и обработка была замаскирована. Коды рандомизации в запечатанном конверте сохранял ответственный специалист по медико-санитарной статистике.
a) Приготовление и введение непатогенного штамма F18
Непатогенный штамм F18 культивировали в ферментере, затем бактерии замораживали и хранили при -78°C в 10 мл стеклянных флаконах, содержащих 200 номинальных доз. Замороженные бактерии перед применением разбавляли водой при комнатной температуре.
Дозу вводили один раз за одни сутки после отъема (день 0) при примерно 3×108 КОЕ в расчете на 2-мл дозу. Дозу вводили орально с применением шприца, оснащенного резиновой трубкой. Контрольные животные получали такое же количество раствора плацебо (вода).
b) Штамм для стимуляции (F18-STEC штамм EcL 14724)
Штамм для стимуляции, применяемый в этом анализе, заново выделяли из поросенка (#381), ранее стимулированного со штаммом EcL 14724 (позитивным на Stx2, F18ab, AIDA и Paa). Штамм для стимуляции вводили орально один раз в 3 последовательных дня 11, 12 и 13 исследования с примерно 1×1010 КОЕ в расчете на поросенка. Каждую стимулирующую дозу вводили с применением желатиновой капсулы в качестве замещения пищеводной инкубации. Карбадокс (антибиотик, стимулирующий высвобождение шигатоксина) вводили орально в желатиновой капсуле непосредственно после введения штамма для стимуляции для запускания высвобождения Шигатоксина.
c) Оценка общего состояния здоровья
За общим состоянием здоровья свиней наблюдали один раз в сутки перед периодом стимуляции. После первой стимуляции за животными наблюдали два раза в сутки, относительно общего состояния здоровья, включая депрессию, обезвоживание, аппетит и любые клинические признаки, связанные с отечным заболеванием: атаксия, отек морды и конечностей, внезапная смерть.
d) Оценка выделения штамма для стимуляции
Фекальное выделение штамма для стимуляции оценивали количественно с применением способа наиболее вероятной количественной ПЦР (MPN-PCR), метящего ген, кодирующий FedA, главный белок фимбрии F18.
e) Некропсия
Некропсии осуществляли через 7 дней после первой стимуляции. Колонизацию слепой кишки штаммом для стимуляции оценивали количественно с применением способа наиболее вероятной количественной ПЦР (MPN-PCR), метящего ген, кодирующий FedA, главный белок фимбрии F18 с применением участка ткани примерно 2 см2.
III - Результаты
Анализ ПЦР продемонстрировал эффективность введения непатогенного штамма F18 для предотвращения экскреции стимулирующего F18 шигатоксигенного патогенного штамма. Уменьшение приблизительно 2,5 log фекального выделения наблюдали для обработанных животных по сравнению с плацебо животными через 4 дня после последней стимуляции (таблица 8). Через 4 дня после последней стимуляции у 93% плацебо животных было выделено более 1×105 КОЕ штамма для стимуляции в расчете на грамм образца фекалий, тогда как среди обработанных животных было выделено у только 42% (таблица 9).
Следующая таблица 8 демонстрирует выделение штамма для стимуляции на день 4 после последней стимуляции:
| Медиана выделения (КОЕ штамма для стимуляции/г образца фекалий) | |
| Животные с плацебо | 7,8×106 |
| Обработанные животные | 5,2×104 |
Следующая таблица 9 демонстрирует процент свиней с выделением стимулирующего штамма при различной бактериальной нагрузке на день 4 после последней стимуляции:
| КОЕ стимулирующего штамма/г образцов фекалий | ||||
| <1×104 | 104 | 105 | >1×106 | |
| Животные с плацебо | 0% | 7% | 33% | 60% |
| Обработанные животные | 25% | 33% | 17% | 25% |
Снижение приблизительно 1 log штамма для стимуляции, детектированное в слепой кишке, наблюдали для обработанных животных (введенный непатогенный штамм F18) по сравнению с животными с плацебо через 5 дней после последней стимуляции (таблица 10). Через 5 дней после последней стимуляции более чем у 53% животных с плацебо было выделено более чем 1×105 КОЕ штамма для стимуляции в расчете на грамм ткани слепой кишки, тогда как у обработанных животных было выделено только у 8% (таблица 11). Более чем у 80% животных с плацебо была колонизирована слепая кишка с более чем 1×104 КОЕ штамма для стимуляции в расчете на грамм слепой кишки по сравнению с 50% обработанных животных через 5 дней после последней стимуляции (таблица 11).
Следующая таблица 10 демонстрирует колонизациию слепой кишки штаммами для стимуляции на день 5 после последней стимуляции:
| Медиана колонизации слепой кишки (КОЕ штамма для стимуляции/г ткани слепой кишки) | |
| Животные с плацебо | 3,4×105 |
| Обработанные животные | 1,5×104 |
Следующая таблица 11 демонстрирует процент свиней, слепая кишка которых была колонизирована штаммом для стимуляции при различной бактериальной нагрузке на день 5 после последней стимуляции:
| КОЕ стимулирующего штамма/г образцов слепой кишки | |||||
| <1×102 | 102 | 103 | 104 | >1×105 | |
| Животные с плацебо | 7% | 7% | 7% | 27% | 53% |
| Обработанные животные | 8% | 17% | 25% | 42% | 8% |
На основании полученного в результате уменьшения колонизации стимулирующим штаммом и уменьшения экскреции это исследование предполагает, что интестинальная доставка композиции, содержащей непатогенный штамм F18, способна к предотвращению интестинальной бактериальной инфекции F18 E. coli, вызывающей отек.
Следующие положения предоставляют дополнительное описание примеров неограничивающих вариантов осуществления в соответствии с данным изобретением:
Положения:
Положение 1: Выделенный штамм E. coli, внесенный в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получивший номер доступа 200613-01.
Положение 2: Выделенный штамм E. coli по положению 1 в лиофилизированной форме.
Положение 3: Выделенный штамм E. coli по положению 1 в замороженной форме.
Положение 4: Выделенный штамм E. coli по положению 1, в котором штамм ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
Положение 5: Композиция, содержащая выделенный штамм E. coli по любому из положений 1-3 и приемлемый для кормления носитель.
Положение 6: Композиция по положению 5, дополнительно содержащая выделенную живую непатогенную E. coli, которая экспрессирует фимбрии F4.
Положение 7: Композиция по положению 6, в котором указанная непатогенная E. coli, которая экспрессирует фимбрии F4 является штаммом, внесенным в Международный депозитарий Канады 21 января 2005 года и получившим номер доступа IDAC 210105-01.
Положение 8: способ предотвращения интестинальной F18 патогенной инфекции E. coli у животного, содержащий интестинальную доставку животному эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01
Положение 9: Способ по положению 8, в котором указанную интестинальную доставку получают оральным введением живого штамма E. coli.
Положение 10: Способ по положению 8 или 9, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в лиофилизированной форме.
Положение 11: Способ по положению 8 или 9, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
Положение 12: Способ по положению 8 или 9, в котором указанный живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
Положение 13: Способ в соответствии с любым из положений 8-12, в котором указанное эффективное количество составляет по меньшей мере 5×107 КОЕ.
Положение 14: способ в соответствии с любым из положений 8-12, в котором указанное животное является свиньей.
Положение 15: способ предотвращения отечного заболевания или диареи, вызванных инфекцией F18 патогенной E. coli, у животного, содержащий интестинальную доставку животному живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01.
Положение 16: Способ по положению 15, в котором указанную интестинальную доставку получают оральным введением живого штамма E. coli.
Положение 17: Способ по положению 15 или 16, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в лиофилизированной форме.
Положение 18: Способ по положению 15 или 16, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
Положение 19: Способ по положению 15 или 16, в котором указанный живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
Положение 20: способ в соответствии с любым из положений 15-19, в котором указанное эффективное количество составляет по меньшей мере 5×107 КОЕ.
Положение 21: способ в соответствии с любым из положений 15-20, в котором указанное животное является свиньей.
Положение 22: Применение для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у животного эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01, при этом штамм является адаптированным для интестинальной доставки животному.
Положение 23: Применение в производстве композиции для применения в предотвращении интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у животного эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01, при этом композиция является адаптированной для интестинальной доставки животному.
Положение 24: Применение для предотвращения отечного заболевания или диареи, вызванных инфекцией F18 патогенной E. coli у животного, эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01, при этом штамм является адаптированным для интестинальной доставки животному.
Положение 25: Применение в производстве композиции для применения в предотвращении отечного заболевания или диареи, вызванных инфекцией F18 патогенной E. coli у животного, эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01, при этом композиция является адаптированной для интестинальной доставки животному.
Положение 26: Применение по любому из положений 22-25, в котором указанный живой штамм E. coli адаптирован для орального введения.
Положение 27: Применение по любому из положений 22-26, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в лиофилизированной форме.
Положение 28: Применение по любому из положений 22-26, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
Положение 29: Применение по любому из положений 22-26, в котором указанный живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
Положение 30: Применение в соответствии с любым из положений 22-29, в котором указанное эффективное количество составляет по меньшей мере приблизительно 5×107 КОЕ.
Положение 31: Применение в соответствии с любым из положений 22-30, в котором указанное животное является свиньей.
Положение 32: Выделенный штамм E. coli по любому из положений 1-4, для применения в предотвращении интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у животного, при этом штамм адаптирован для интестинальной доставки животному.
Положение 33: Выделенный штамм E. coli по любому из положений 1-4, для применения в производстве композиции для применения в предотвращении интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у животного, при этом композиция адаптирована для интестинальной доставки животному.
Положение 34: Выделенный штамм E. coli по любому из положений 1-4, для применения в предотвращении отечного заболевания или диареи, вызванной инфекцией F18 патогенной E. coli у животного, при этом штамм адаптирован для интестинальной доставки животному.
Положение 35: Выделенный штамм E. coli по любому из положений 1-4, для применения в производстве композиции для применения в предотвращении отечного заболевания или диареи, вызванных инфекцией F18 патогенной E. coli у животного, при этом композиция адаптирована для интестинальной доставки животному.
Необходимо отметить, что заголовки и подзаголовки по всему данному документу предоставлены в целях удобства чтения, что никак не должно ограничивать объем изобретения. Кроме того, некоторые теории предложены и раскрыты в данном документе; однако они никоим образом независимо от того, правильные они или нет, не должны ограничивать объем изобретения при условии, что изобретение воплощено на практике в соответствии с раскрытием данного изобретения независимо конкретной теории или схемы действия.
Специалист в данной области признает, что во всем описании данного изобретения применение термина в единственном числе охватывает варианты осуществления, содержащие один или более терминов, к которому он относится. Специалист в данной области признает, что во всем описании данного изобретения термин "содержащий", который является синонимичным терминам "включающий", "содержащий в себе" или "характеризуемый тем, что" является включающим в себя или неограниченным и не исключает дополнительные неизложенные элементы или этапы способа.
Если особо не оговорено иное, все технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют такое же значение как общепринято среди рядовых специалистов в области, к которой относится данное изобретение. В случае несоответствия данный документ, включая определения, будет определяющим.
Хотя в описанных в данном документе исследованиях использовали отнятых свиней, специалист в данной области без труда поймет, что свиньи, которые будут обработаны, могут альтернативно являться свиньями до отъема.
В используемом в данном документе значении "около", "приблизительно" или "примерно" обычно означает в пределах 20 процентов, предпочтительно в пределах 10 процентов и более предпочтительно в пределах 5 процентов приведенной величины или диапазона. Численные величины, приведенные в данном документе, являются в целом приблизительными; что обозначает, что может подразумеваться термин "около", "приблизительно" или "примерно", если не предусмотрено иное.
Все ссылочные материалы, приведенные во всем данном описании, настоящим полностью включены в данный документ посредством ссылки.
Объем формулы изобретения не должен быть ограничен предпочтительными вариантами осуществления, описанными в примерах, но ему должна быть дана более широкая интерпретация в соответствии со всем описанием.
Claims (24)
1. Выделенный живой штамм Ε. coli для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, внесенный в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получивший номер доступа 200613-01.
2. Выделенный живой штамм E. coli по п.1 в лиофилизированной форме.
3. Выделенный живой штамм E. coli по п.1 в замороженной форме.
4. Композиция для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, содержащая эффективное количество выделенного живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01, и приемлемый для кормления носитель.
5. Композиция по п.4, дополнительно содержащая выделенную живую непатогенную E. coli, которая экспрессирует фимбрии F4.
6. Композиция по п.5, в которой указанная непатогенная E. coli, которая экспрессирует фимбрии F4, является штаммом, внесенным в Международный депозитарий Канады 21 января 2005 года и получившим номер доступа IDAC 210105-01.
7. Композиция по п.4, которая представлена в лиофилизированной форме.
8. Композиция по п.5, которая представлена в лиофилизированной форме.
9. Композиция по п.6, которая представлена в лиофилизированной форме.
10. Композиция по п.4, которая представлена в замороженной форме.
11. Композиция по п.5, которая представлена в замороженной форме.
12. Композиция по п.6, которая представлена в замороженной форме.
13. Композиция по любому из пп.4-12, в которой штамм E. coli, получивший номер доступа 200613-01, присутствует в количестве, достаточном для введения по меньшей мере 5·107 КОЕ на свинью.
14. Композиция по любому из пп.4-12, в которой штамм E. coli, получивший номер доступа 200613-01, присутствует в количестве, достаточном для введения от 5·106 до примерно 3·1010 КОЕ на свинью.
15. Способ предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, содержащий интестинальную доставку животному эффективного количества живого штамма E. coli, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01.
16. Способ по п.15, в котором указанную интестинальную доставку получают оральным введением живого штамма E. coli.
17. Способ по п.16, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в лиофилизированной форме.
18. Способ по п.16, в котором указанный живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
19. Способ по п.16, в котором указанный живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
20. Способ по п.16, в котором указанное эффективное количество является количеством, достаточным для введения по меньшей мере 5·107 КОЕ на свинью.
21. Применение выделенного живого непатогенного штамма E. coli для получения композиции для предотвращения интестинальной инфекции F18 патогенной E. coli у свиньи, внесенного в Международный депозитарий Канады (IDAC) 20 июня 2013 года и получившего номер доступа 200613-01.
22. Применение по п.21, где указанный живой штамм E. coli представлен в лиофилизированной форме.
23. Применение по п.21, где указанный живой штамм E. coli представлен в замороженной форме.
24. Применение по п.21, в котором указанный живой штамм E. coli ассоциирован с приемлемым для кормления носителем.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261674179P | 2012-07-20 | 2012-07-20 | |
| US61/674,179 | 2012-07-20 | ||
| PCT/CA2013/000660 WO2014012172A1 (en) | 2012-07-20 | 2013-07-18 | Non-pathogenic f18 e. coli strain and use thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015105738A RU2015105738A (ru) | 2016-09-10 |
| RU2670882C2 RU2670882C2 (ru) | 2018-10-25 |
| RU2670882C9 true RU2670882C9 (ru) | 2018-12-11 |
Family
ID=49948133
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015105738A RU2670882C9 (ru) | 2012-07-20 | 2013-07-18 | Непатогенный штамм f18 е. coli и его применение |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US9453195B2 (ru) |
| EP (1) | EP2875121B1 (ru) |
| JP (1) | JP6278960B2 (ru) |
| KR (1) | KR102171028B1 (ru) |
| CN (1) | CN104736695B (ru) |
| BR (1) | BR112015001175B1 (ru) |
| CA (1) | CA2879155C (ru) |
| DK (1) | DK2875121T3 (ru) |
| ES (1) | ES2663019T3 (ru) |
| HK (1) | HK1209780A1 (ru) |
| HU (1) | HUE036545T2 (ru) |
| MX (1) | MX363057B (ru) |
| PH (1) | PH12015500091B1 (ru) |
| PL (1) | PL2875121T3 (ru) |
| PT (1) | PT2875121T (ru) |
| RS (1) | RS57056B1 (ru) |
| RU (1) | RU2670882C9 (ru) |
| WO (1) | WO2014012172A1 (ru) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6278960B2 (ja) | 2012-07-20 | 2018-02-14 | プレヴテック マイクロビア インコーポレイテッド | 非病原性ｆ１８ｅ．ｃｏｌｉ株及びその使用 |
| WO2016127260A1 (en) * | 2015-02-11 | 2016-08-18 | Prevtec Microbia Inc | Improved dry matrix for embedding viable escherichia coli, method of making same and use thereof |
| KR101715625B1 (ko) * | 2015-06-02 | 2017-03-13 | 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) | 부종병 독소를 생산하는 대장균, 이를 이용한 부종병 독소의 생산방법 및 이를 포함하는 돼지 부종병 예방용 백신 조성물 |
| EP3468382A4 (en) * | 2016-06-14 | 2020-01-22 | Prevtec Microbia Inc | FOOD GRANULES FOR ANIMALS COMPRISING A FOOD ADDITIVE, METHOD FOR MANUFACTURING AND USING THE SAME |
| WO2019006246A1 (en) * | 2017-06-30 | 2019-01-03 | The Rockefeller University | N-ACYL AMIDES DERIVED FROM THE HUMAN MICROBIOTE FOR THE TREATMENT OF A HUMAN DISEASE |
| CN107523529B (zh) * | 2017-10-20 | 2021-03-12 | 林州中农颖泰生物肽有限公司 | 一种利用大肠杆菌生产肠杆菌肽的工艺及其应用 |
| CN109628361B (zh) * | 2018-11-27 | 2022-08-19 | 扬州大学 | 整合双拷贝功能性f4菌毛操纵子基因猪源益生菌ep1克隆株、构建方法及应用 |
| CN109504643B (zh) * | 2018-11-27 | 2022-06-10 | 扬州大学 | 整合四拷贝功能性f18菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法及应用 |
| CN114752531B (zh) * | 2022-04-29 | 2023-05-26 | 扬州大学 | 一株同时表达f4和f18菌毛的猪源大肠杆菌无毒分离株及其应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2125455C1 (ru) * | 1996-09-25 | 1999-01-27 | Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция | Способ профилактики диареи молодняка сельскохозяйственных животных |
| WO2000058476A1 (en) * | 1999-03-31 | 2000-10-05 | Mta Állatorvos-Tudományi K.I. | A strain suitable for producing a live, orally applicable escherichia coli vaccine for the prevention of postweaning diarrhoea in pigs and the procedure suitable for producing that strain |
| US20070218035A1 (en) * | 2004-02-03 | 2007-09-20 | Eric Nadeau | Use of Live Bacteria for Growth Promotion in Animals |
| WO2010005868A2 (en) * | 2008-07-08 | 2010-01-14 | South Dakota State University | A vaccine for porcine post-weaning diarrhea caused by enterotoxigenic escherichia coli |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6355859B1 (en) | 1997-05-20 | 2002-03-12 | Biotechnology Research And Development Corporation | Interactions between genotype and diet in swine that prevent E. coli associated intestinal disease |
| US5965128A (en) * | 1997-08-13 | 1999-10-12 | University Of Georgia Research Foundation Inc. | Control of enterohemorrhagic E. coli 0157:H7 in cattle by probiotic bacteria and specific strains of E. coli |
| EP1100950A4 (en) * | 1998-07-30 | 2002-10-16 | Wisconsin Alumni Res Found | GASTROINTESTINAL BACTERIAL ANTIBODY PLANTS |
| US6304216B1 (en) | 1999-03-30 | 2001-10-16 | Conexant Systems, Inc. | Signal detector employing correlation analysis of non-uniform and disjoint sample segments |
| IL130303A0 (en) * | 1999-06-03 | 2000-06-01 | M G Novobiotech Ltd | A bacterial strain processed plant extracts and probiotic compositions for human and veterinary use |
| AU2100402A (en) * | 2000-11-30 | 2002-06-11 | Bio Balance Corp | Bacterial strain, processed plant extracts, compositions containing same, processes for their preparation and their therapeutic and industrial applications |
| ATE493490T1 (de) | 2002-10-04 | 2011-01-15 | Du Pont | Verfahren zur biologischen herstellung von 1,3- propandiol mit hoher ausbeute |
| WO2005112658A1 (en) * | 2004-05-14 | 2005-12-01 | Agtech Products, Inc. | Method and composition for reducing e. coli disease and enhancing performance using bacillus |
| JP6278960B2 (ja) | 2012-07-20 | 2018-02-14 | プレヴテック マイクロビア インコーポレイテッド | 非病原性ｆ１８ｅ．ｃｏｌｉ株及びその使用 |
-
2013
- 2013-07-18 JP JP2015521918A patent/JP6278960B2/ja active Active
- 2013-07-18 HU HUE13819873A patent/HUE036545T2/hu unknown
- 2013-07-18 CA CA2879155A patent/CA2879155C/en active Active
- 2013-07-18 ES ES13819873.4T patent/ES2663019T3/es active Active
- 2013-07-18 RU RU2015105738A patent/RU2670882C9/ru active
- 2013-07-18 MX MX2015000905A patent/MX363057B/es unknown
- 2013-07-18 US US14/414,964 patent/US9453195B2/en active Active
- 2013-07-18 DK DK13819873.4T patent/DK2875121T3/en active
- 2013-07-18 EP EP13819873.4A patent/EP2875121B1/en active Active
- 2013-07-18 BR BR112015001175-6A patent/BR112015001175B1/pt active IP Right Grant
- 2013-07-18 KR KR1020157004177A patent/KR102171028B1/ko active IP Right Grant
- 2013-07-18 PT PT138198734T patent/PT2875121T/pt unknown
- 2013-07-18 RS RS20180360A patent/RS57056B1/sr unknown
- 2013-07-18 WO PCT/CA2013/000660 patent/WO2014012172A1/en active Application Filing
- 2013-07-18 CN CN201380038666.XA patent/CN104736695B/zh active Active
- 2013-07-18 PL PL13819873T patent/PL2875121T3/pl unknown
-
2015
- 2015-01-14 PH PH12015500091A patent/PH12015500091B1/en unknown
- 2015-10-20 HK HK15110279.4A patent/HK1209780A1/xx unknown
-
2016
- 2016-08-25 US US15/247,442 patent/US9775867B2/en active Active
-
2017
- 2017-09-25 US US15/714,969 patent/US10258654B2/en active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2125455C1 (ru) * | 1996-09-25 | 1999-01-27 | Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция | Способ профилактики диареи молодняка сельскохозяйственных животных |
| WO2000058476A1 (en) * | 1999-03-31 | 2000-10-05 | Mta Állatorvos-Tudományi K.I. | A strain suitable for producing a live, orally applicable escherichia coli vaccine for the prevention of postweaning diarrhoea in pigs and the procedure suitable for producing that strain |
| US20070218035A1 (en) * | 2004-02-03 | 2007-09-20 | Eric Nadeau | Use of Live Bacteria for Growth Promotion in Animals |
| WO2010005868A2 (en) * | 2008-07-08 | 2010-01-14 | South Dakota State University | A vaccine for porcine post-weaning diarrhea caused by enterotoxigenic escherichia coli |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| FAIRBROTHER J. M. ET AL. Escherichia coli in postweaning diarrhea in pigs: an update on bacterial types, pathogenesis, and prevention strategies// Animal Health Research Reviews, 2005, 6(1); 17-39. BERTSCHINGER H.U. ET AL. Active oral immunization of suckling piglets to prevent colonization after weaning by enterotoxigenic Escherichia coli with fimbriae F18 // Veterinary Microbiology 71 (2000) 255-267. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2670882C9 (ru) | Непатогенный штамм f18 е. coli и его применение | |
| Hayakawa et al. | Dietary administration of probiotics to sows and/or their neonates improves the reproductive performance, incidence of post‐weaning diarrhea and histopathological parameters in the intestine of weaned piglets | |
| Kyriakis et al. | The effect of probiotic LSP 122 on the control of post-weaning diarrhoea syndrome of piglets | |
| US9011836B2 (en) | Methods of treating pigs with Bacillus strains | |
| US8722058B2 (en) | Bacillus strains and methods for reducing E. coli disease and enhancing performance | |
| US9861665B2 (en) | Use of UVE bacteria for growth promotion in animals | |
| Nhi et al. | SWINE COLIBACILLOSIS IN PIG | |
| Thornton | Siderophore receptor and porin protein-based vaccine technology: an intervention strategy for pre-harvest control of Escherichia coli O157 in cattle | |
| Kantas et al. | A feed additive containing Bacillus toyonensis in weaning piglets |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TH4A | Reissue of patent specification | ||
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20210315 |