RU2662986C1 - Новый бактериофаг clostridium perfringens clo-pep-1 и его применение для ингибирования пролиферации clostridium perfringens - Google Patents
Новый бактериофаг clostridium perfringens clo-pep-1 и его применение для ингибирования пролиферации clostridium perfringens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2662986C1 RU2662986C1 RU2017121455A RU2017121455A RU2662986C1 RU 2662986 C1 RU2662986 C1 RU 2662986C1 RU 2017121455 A RU2017121455 A RU 2017121455A RU 2017121455 A RU2017121455 A RU 2017121455A RU 2662986 C1 RU2662986 C1 RU 2662986C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- clostridium perfringens
- bacteriophage
- pep
- clo
- composition
- Prior art date
Links
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 title claims abstract description 129
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 title claims abstract description 87
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 title description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 40
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 29
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 claims description 19
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 claims description 16
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 claims description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 12
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 8
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 3
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 6
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 2
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 2
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 2
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 2
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006150 trypticase soy agar Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 2-[[bis(carboxymethyl)amino]methyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WZIMSXIXZTUBSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000588779 Bordetella bronchiseptica Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 206010061043 Clostridial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000037384 Clostridium Infections Diseases 0.000 description 1
- 244000309714 Clostridium perfringens type C Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- 241000606807 Glaesserella parasuis Species 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241000293871 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194021 Streptococcus suis Species 0.000 description 1
- 241000194054 Streptococcus uberis Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001714 calcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003340 calcium silicate Drugs 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229960003077 cycloserine Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- -1 flavorings Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940051027 pasteurella multocida Drugs 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229940115922 streptococcus uberis Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 231100000033 toxigenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
- A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/0005—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
- A61L2/0082—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using chemical substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
- C12N7/02—Recovery or purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
- C12N2795/10121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
- C12N2795/10122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
- C12N2795/10131—Uses of virus other than therapeutic or vaccine, e.g. disinfectant
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
- C12N2795/10132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10111—Myoviridae
- C12N2795/10171—Demonstrated in vivo effect
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Virology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Birds (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
Abstract
Представленные изобретения относятся, в частности, к миовирусному бактериофагу Clo-РЕР-1, выделенному из природы и имеющему геном, представленный нуклеотидной последовательностью SEQ. ID. NO: 1 (регистрационный №: KCTC 12664 BP). Изобретения также относятся к способу предупреждения или лечения инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, с использованием композиции, содержащей указанный бактериофаг в качестве активного ингредиента. Изобретения позволяют использовать заявленный бактериофаг, который способен специфически уничтожать клетки Clostridium perfringens, и могут быть использованы в медицинской промышленности. 3 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 8 пр.
Description
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Область изобретения
Настоящее изобретение относится к бактериофагу, выделенному из природы, инфицирующему и уничтожающему клетки Clostridium perfringens, и способу предупреждения и лечения инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, с использованием композиции, содержащей бактериофаг в качестве активного ингредиента. В частности, настоящее изобретение относится к миовирусному бактериофагу Clo-PEP-1, выделенному из природы и способному специфически уничтожать клетки Clostridium perfringens, имеющему геном, представленный нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 (регистрационный №: KCTC 12664 BP), и способу предупреждения инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, и их последующего лечения с использованием композиции, содержащей указанный бактериофаг в качестве активного ингредиента.
2. Описание уровня техники
Clostridium perfringens представляет собой облигатный анаэроб (редко выживающий в присутствии кислорода) и патогенную бактерию, вызывающую тяжелые заболевания, включающие некротический энтерит и пищевое отравление у людей и животных, таких как корова, свинья и коза, и т.д. Энтеротоксины, продуцируемые Clostridium perfringens, обычно представляют собой гемолитические токсины и некротические токсины, которые включают четыре вида основных токсинов, α, β, ε и ι. В зависимости от их присутствия, Clostridium perfringens классифицируют на шесть токсигенных типов от A до F. Clostridium perfringens типа A представляет собой основной возбудитель пищевого отравления, a Clostridium perfringens типа С представляет собой основной возбудитель некротического энтерита.
В последнее время инфекции, вызываемые Clostridium perfringens, все чаще встречаются в птицеводческой отрасли. Птицефермы страдают от таких случаев, поскольку они распространяются среди большой популяции цыплят, а также являются латентными, не проявляя симптомов в течение длительного времени. В особенности у бройлерных цыплят инфекции, вызываемые Clostridium perfringens, имеют тенденцию частого возникновения по всему миру, в связи с чем в настоящее время эта бактерия считается главным патогеном. Более того, сообщается о том, что в свиноводческой отрасли частота случаев инфицирования Clostridium perfringens возрастает. Учитывая существенный вред, который Clostridium perfringens наносит животноводческой отрасли, возникла острая потребность в разработке способа предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens. Для предупреждения или лечения таких инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, использовали различные антибиотики. Тем не менее, в связи с возрастающим в последнее время числом бактерий, устойчивых к антибиотикам, возникла острая потребность в эффективной альтернативе.
В последнее время внимание авторов привлекло применение бактериофагов в качестве нового способа лечения бактериальных инфекций. В частности, причиной повышенного интереса авторов к бактериофагам является то, что лечение, основанное на применении бактериофагов, является способом, дружественным к окружающей среде. Бактериофаги представляют собой чрезвычайно маленькие инфицирующие бактерии микроорганизмы, сокращенно называемые фагами. Как только бактериофаг инфицирует бактерию, бактериофаг пролиферирует внутри бактериальной клетки. После полной пролиферации потомки уничтожают бактериальную клеточную стенку, чтобы выйти из хозяина, что указывает на то, что бактериофаги обладают способностью уничтожать бактерии. Инфицирование бактериофагами характеризуется высокой специфичностью, так что конкретный бактериофаг инфицирует только определенную бактерию. То есть, число бактерий, которые могут быть инфицированы конкретным бактериофагом, ограничено, что указывает на то, что бактериофаг способен уничтожать только определенную бактерию, и не может нанести вред другим бактериям.
Бактериофаг был впервые обнаружен английским бактериологом Туортом в 1915 г., когда он заметил, что колонии Micrococcus под воздействием чего-то неизвестного стали плавиться и становиться прозрачными. В 1917 г. французский бактериолог Д' Эрелль обнаружил, что Shigella disentriae в фильтрате кала больного дизентерией расплавилась под воздействием чего-то, и впоследствии исследовал этот феномен. В результате он независимо обнаружил бактериофаг, и назвал его «бактериофагом», что означает «пожиратель бактерий». После этого были обнаружены бактериофаги, обладающие специфическим антибактериальным действием против таких патогенных бактерий, как Shigella, Salmonella Typhi и Vibrio cholerae.
По причине их уникальной способности уничтожать бактерии, бактериофаги исследовали и прогнозировали как более совершенный способ для лечения бактериальных инфекций. Однако после открытия пенициллина Флемингом исследования бактериофагов продолжились только в ряде западноевропейских стран и бывшем Советском Союзе по причине универсализации антибиотиков. После 2000 года достоинства общепринятых антибиотиков померкли по причине увеличения числа бактерий, устойчивых к антибиотикам. Таким образом, бактериофаги вновь оказались в центре внимания как новый антибактериальный агент, способный заменить общепринятые антибиотики.
Более того, недавнее регулирование использования антибиотиков поддерживается правительствами по всему миру. Интерес к бактериофагам все больше повышается, а также постоянно открываются их промышленные применения.
Таким образом, в настоящем изобретении реализована попытка разработать композицию, подходящую для предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с помощью бактериофага, выделенного из природы и способного селективно уничтожать Clostridium perfringens, и дополнительно обеспечить способ предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием композиции. В результате, авторы выделили бактериофаги, подходящие для этой цели, и установили нуклеотидную последовательность генома, позволяющую отличить бактериофаг по настоящему изобретению от других бактериофагов. Затем авторы разработали композицию, содержащую выделенный бактериофаг в качестве активного ингредиента, и подтвердили, что эта композиция может эффективно применяться для предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, что привело к созданию настоящего изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Целью настоящего изобретения является обеспечение миовирусного бактериофага Clo-PEP-1, выделенного из природы и способного специфически уничтожать клетки Clostridium perfringens, имеющего геном, представленный нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 (регистрационный №: KCTC 12664BP).
Еще одной целью настоящего изобретения является получение композиции, подходящей для предупреждения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, содержащей бактериофаг Clo-РЕР-1, способный инфицировать и уничтожать клетки Clostridium perfringens, в качестве активного ингредиента, и способа предупреждения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием указанной композиции.
Еще одной целью настоящего изобретения является получение композиции, подходящей для лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, содержащей бактериофаг Clo-РЕР-1, способный инфицировать и уничтожать клетки Clostridium perfringens, в качестве активного ингредиента, и способа лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием указанной композиции.
Еще одной целью настоящего изобретения является получение дезинфицирующего средства для предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием указанной композиции.
Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение добавки для питьевой воды для предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием указанной композиции.
Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение пищевой добавки, эффективной в сельском хозяйстве, для предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием указанной композиции.
Для достижения вышеуказанных целей в настоящем изобретении предложен миовирусный бактериофаг Clo-РЕР-1, выделенный из природы и способный специфически уничтожать клетки Clostridium perfringens, имеющий геном, представленный нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 (Accession NO: КСТС 12664BP), и способ предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием композиции, содержащей бактериофаг в качестве активного ингредиента.
Бактериофаг Clo-РЕР-1 был выделен авторами настоящего изобретения и затем депонирован в Корейской коллекции типовых культур Корейского научно-исследовательского института биологических наук и биотехнологии 21 августа 2014 г. (регистрационный №: KCTC 12664BP). В настоящем изобретении также предложены дезинфицирующее средство, добавка для питьевой воды и пищевая добавка, подходящие для предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, содержащие бактериофаг Clo-РЕР-1 в качестве активного ингредиента.
Поскольку бактериофаг Clo-РЕР-1, входящий в состав композиции по настоящему изобретению, эффективно уничтожает клетки Clostridium perfringens, его следует считать эффективным для предупреждения или лечения различных заболеваний, вызываемых Clostridium perfringens. Следовательно, композиция по настоящему изобретению может применяться для предупреждения и лечения заболеваний (инфекций), вызываемых Clostridium perfringens.
В настоящем описании термин «лечение» или «лечить» обозначает (i) подавление заболеваний, вызываемых клетками Clostridium perfringens; и (ii) облегчение заболеваний, вызываемых клетками Clostridium perfringens.
В настоящем описании термин «выделение» или «выделенный» обозначает все действия для отделения бактериофага с помощью различных экспериментальных техник, и для определения характеристик, позволяющих отличить данный бактериофаг от других, и дополнительно включает действие пролиферации бактериофага посредством биоинженерных технологий с тем, чтобы сделать его полезным.
Фармацевтически примемлемый носитель, входящий в состав композиции по настоящему изобретению, представляет собой носитель, обычно используемый для получения фармацевтического состава, примерами которого являются лактоза, декстроза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, гуммиарабик, фосфат кальция, альгинат, желатин, силикат кальция, микрокристаллическая целлюлоза, поливинилпирролидон, целлюлоза, вода, сироп, метилцеллюлоза, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло, но не всегда ограничиваясь перечисленным. Композиция по настоящему изобретению помимо вышеуказанных ингредиентов может дополнительно включать смазывающие вещества, смачивающие агенты, подсластители, вкусовые добавки, эмульгаторы, суспендирующие агенты и консерванты.
Бактериофаг Clo-РЕР-1 включен в состав композиции согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. При этом бактериофаг Clo-PEP-1 включен в концентрации от 1×101 БОЕ/мл до 1×1030 БОЕ/мл, или от 1×101 БОЕ/г до 1×1030 БОЕ/г, и предпочтительно в концентрации от 1×104 БОЕ/мл до 1×1015 БОЕ/мл, или от 1×104 БОЕ/г до 1×1015 БОЕ/г.
Композиция по настоящему изобретению может быть получена способом, осуществляемым специалистами в данной области, с использованием фармацевтически приемлемого носителя и/или эксципиента, в форме контейнера для однократной дозы или многократных доз. Состав может быть представлен в форме раствора, суспензии или эмульсии в масле или водорастворимой среде, экстракта, порошка, гранулы, таблетки или капсулы. При этом может быть дополнительно включен диспергирующий агент или стабилизатор.
Композиция по настоящему изобретению может быть изготовлена в виде дезинфицирующего средства, добавки для питьевой воды или пищевой добавки, в зависимости от цели использования, но не всегда ограничиваясь перечисленным.
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ
Способ предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, с использованием композиции, содержащей бактериофаг Clo-РЕР-1 в качестве активного ингредиента, обладает преимуществом высокой специфичности к Clostridium perfringens по сравнению с общепринятыми способами, основанными на химических веществах, включая общепринятые антибиотики. Это означает, что композиция по настоящему изобретению может специфически применяться для предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, не оказывая воздействия на другие имеющиеся полезные бактерии, и, соответственно, имеет меньше побочных эффектов. В общем, при использовании химических веществ, таких как антибиотики, основные имеющиеся бактерии также повреждаются, что приводит к ослаблению иммунитета у животных с различными сопутствующими побочными эффектами. В то же время, в композиции по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента используется бактериофаг, выделенный из природы, что является очень дружественным к окружающей среде.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Применение предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения более понятно со ссылкой на прилагаемые чертежи, где:
Фиг. 1 представляет собой снимок, полученный при помощи электронного микроскопа, демонстрирующий морфологию бактериофага Clo-РЕР-1.
Фиг. 2 представляет собой фотографию, иллюстрирующую способность бактериофага Clo-РЕР-1 уничтожать клетки Clostridium perfringens. Прозрачный участок на чашке представляет собой бляшки, образованные в результате лизиса бактериальных клеток.
ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Практические и предпочтительные в настоящий момент варианты осуществления настоящего изобретения являются иллюстративными, как показано в следующих Примерах.
Тем не менее, следует понимать, что специалисты в данной области с учетом настоящего описания могут создавать модификации и улучшения, оставаясь в рамках сущности и объема настоящего изобретения.
Пример 1: Выделение бактериофага, способного уничтожать клетки Clostridium perfringens
Образцы отбирали из природы для отбора бактериофага, способного уничтожать клетки Clostridium perfringens. Клетки Clostridium perfringens, использованные здесь для выделения бактериофага, представляли собой клетки, выделенные авторами настоящего изобретения и ранее идентифицированные как Clostridium perfringens.
Процедура выделения бактериофага подробно описана далее. Собранный образец добавляли к TSB (триптиказо-соевый бульон) среде (панкреатический гидролизат казеина, 17 г/л; папаиновый гидролизат соевых бобов, 3 г/л; декстроза, 2,5 г/л; хлорид натрия, 5 г/л; дикалийфосфат, 2,5 г/л), инокулированной клетками Clostridium perfringens в соотношении 1/1000, с последующим культивированием в анаэробных условиях при 37°C в течение 12 часов. После завершения культивирования осуществляли центрифугирование при 8000 об/мин в течение 20 минут, и собирали супернатант. Собранный супернатант инокулировали культурой Clostridium perfringens в соотношении 1/1000, с последующим культивированием в анаэробных условиях при 37°C в течение 12 часов. Когда образец содержал эффективный бактериофаг, для увеличения титра бактериофага вышеуказанную процедуру повторяли в общей сложности 5 раз. После повторения процедуры 5 раз культуральный раствор подвергали центрифугированию при 8000 об/мин в течение 20 минут и собирали полученный супернатант. Собранный супернатант фильтровали с использованием 0,45 мкм фильтра. Полученный фильтрат использовали в капельном анализе для исследования наличия способности бактериофага уничтожать клетки Clostridium perfringens.
Капельный анализ проводили следующим образом; среду TSB инокулировали клетками Clostridium perfringens cells в соотношении 1/1000 с последующим культивированием в анаэробных условиях при 37°C в течение ночи. 3 мл (OD600=2,0) культурального бульона Clostridium perfringens, полученного ранее, распределяли по пластинке с TSA (триптиказо-соевый агар; панкреатический гидролизат казеина, 17 г/л; папаиновый гидролизат соевых бобов, 3 г/л; хлорид натрия, 5 г/л; агар, 15 г/л). Пластинка находилась в анаэробной камере в течение приблизительно 30 минут для высыхания. После высыхания 10 мкл полученного фильтрата точечно наносили непосредственно на поверхность газонов Clostridium perfringens и сушили в течение приблизительно 30 минут. После сушки планшет инкубировали при 37°C в анаэробных условиях в течение суток, и затем исследовали образование прозрачных участков на поверхности газонов бактерий. Если прозрачный участок был образован в том месте, куда капали фильтрат, можно было сделать вывод, что в фильтрате находился бактериофаг, способный уничтожать клетки Clostridium perfringens. Фильтрат, содержащий бактериофаг, способный уничтожать клетки Clostridium perfringens, можно получать посредством вышеуказанного способа.
После чего бактериофаг выделяли из фильтрата, для которого ранее было подтверждено, что фильтрат содержит бактериофаг, способный уничтожать клетки Clostridium perfringens. Для выделения чистых бактериофагов использовали общепринятый анализ бляшкообразования. А именно, бляшки, образованные в ходе анализа бляшкообразования, собирали с использованием стерилизованного наконечника, и затем добавляли в культуральный раствор Clostridium perfringens, с последующим культивированием в анаэробных условиях при 37°C в течение 12 часов. После завершения культивирования проводили центрифугирование при 8000 об/мин в течение 20 минут с получением супренатанта. Собранный супернатант инокулировали культурой Clostridium perfringens в соотношении 1/50, с последующим культивированием в анаэробных условиях при 37°C в течение 12 часов. Для увеличения титра бактериофага вышеуказанную процедуру повторяли по меньшей мере 5 раз. Затем проводили центрифугирование при 8000 об/мин в течение 20 минут с получением супернатанта. С полученным супернатантом проводили анализ бляшкообразования. В общем, выделение чистого бактериофага не завершается однократной процедурой, поэтому вышеуказанную процедуру повторяли с использованием бляшек, образованных ранее. После повторения процедуры по меньшей мере 5 раз получали раствор, содержащий чистый бактериофаг. Процедуру выделения чистого бактериофага обычно повторяли до тех пор, пока образуемые бляшки не обладали схожими размерами и морфологиями. И последнее выделение чистого бактериофага подтверждали путем наблюдения с помощью электронного микроскопа. Вышеуказанную процедуру выполняли до тех пор, пока выделение чистого бактериофага не подтверждалось при помощи электронного микроскопа. Наблюдение при помощи электронного микроскопа проводили общепринятым способом. Вкратце, раствор, содержащий чистый бактериофаг, наносили на медную сетку с последующим негативным окрашиванием 2% уранилацетатом. После его сушки исследовали морфологию с помощью просвечивающего электронного микроскопа. Полученный при помощи электронного микроскопа снимок бактериофага, выделенного в настоящем изобретении, представлен на Фиг. 1. В результате морфологического исследования выделенный выше бактериофаг идентифицировали как принадлежащий к семейству миовирусов.
Раствор, содержащий чистый бактериофаг, подтвержденный ранее, подвергали очистке. Культуральный бульон клеток Clostridium perfringens добавляли к раствору, содержащему чистый бактериофаг, в объемном соотношении 1/50 от общего объема раствора бактериофага, затем вновь культивировали в течение 12 часов. После завершения культивирования проводили центрифугирование при 8000 об/мин в течение 20 минут с получением супернатанта. Эту процедуру повторяли 5 раз до получения раствора, содержащего достаточное количество бактериофага. Супернатант, полученный после последнего центрифугирования, фильтровали через 0,45 мкм фильтр, с последующим общепринятым осаждением полиэтиленгликолем (ПЭГ). В частности, ПЭГ и NaCl добавляли к 100 мл фильтрата до достижения 10% ПЭГ 8000/0,5 М NaCl, который выдерживали при 4°C в течение от 2 до 3 часов. Затем проводили центрифугирование при 8000 об/мин в течение 30 минут с получением преципитата бактериофага. Полученный преципитат бактериофага ресуспендировали в 5 мл буфера (10 мМ Трис-HCl, 10 мМ MgSO4, 0,1% желатина, pH 8,0). Этот раствор называли суспензией бактериофага или раствором бактериофага.
В результате чистый бактериофаг, очищенный ранее, собирали, называли бактериофагом Clo-РЕР-1 и затем депонировали в Корейской коллекции типовых культур Корейского научно-исследовательского института биологических наук и биотехнологии 21 августа 2014 г. (регистрационный №: КСТС 12664BP).
Пример 2: Выделение и секвенирование генома бактериофага Clo-РЕР-1
Геном бактериофага Clo-РЕР-1 выделяли следующим образом. Геном выделяли из суспензии бактериофага, полученной в Примере 1. Сначала для того, чтобы устранить ДНК и РНК клеток Clostridium perfringens, содержащихся в суспензии, добавляли ДНКазу I и РНКазу А по 200 Е каждая к 10 мл суспензии бактериофага, которую затем инкубировали при 37°C в течение 30 минут. 30 минут спустя для удаления активности ДНКазы I и РНКазы А к ней добавляли 500 мкл 0,5 М этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), и затем ее инкубировали в течение 10 минут. Суспензию дополнительно инкубировали при 65°C в течение 10 минут, и затем к ней добавляли 100 мкл протеиназы K (20 мг/мл) для разрыва внешней стенки бактериофага, с последующим инкубированием при 37°C в течение 20 минут. Затем к ней добавляли 500 мкл 10% раствора додецилсульфата натрия (SDS) с последующим инкубированием при 65°C в течение 1 часа. К ней добавляли 10 мл смеси фенол : хлороформ : изоамиловый спирт в соотношении 25:24:1, затем хорошо перемешивали. Смесь центрифугировали при 13000 об/мин в течение 15 минут для разделения всех слоев. Получали верхний слой, к которому добавляли изопропиловый спирт в 1,5-кратном объеме по отношению к объему верхнего слоя с последующим центрифугированием при 13000 об/мин в течение 10 минут для осаждения генома бактериофага. После сбора преципитата к нему добавляли 70% этанол с последующим центрифугированием при 13000 об/мин в течение 10 минут для промывки преципитата. Промытый преципитат собирали, сушили в вакууме и затем растворяли в 100 мкл воды. Эту процедуру повторяли с получением достаточного количества генома бактериофага Clo-РЕР-1.
Нуклеотидную последовательность генома бактериофага Clo-РЕР-1, полученного выше, анализировали по технологии Секвенирования нового поколения (NGS) с помощью устройства Mi-Seq от illumina в Национальном инструментальном центре Экологического управления Национального университета Сеула. В результате было предположено, что конечный геном бактериофага Clo-РЕР-1 имеет размер 50401 п. н., и нуклеотидная последовательность полного генома имеет SEQ ID NO: 1.
Схожесть геномной последовательности бактериофага Clo-РЕР-1, полученной выше, с ранее описанными геномными последовательностями бактериофагов была исследована с помощью BLAST, доступного из Интернет (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/). Из результатов BLAST оказалось затруднительным обнаружить последовательности бактериофагов, гомологичные более чем на 50% с последовательностью настоящего бактериофага. На основании этого результата заключили, что бактериофаг Clo-РЕР-1 должен быть новым бактериофагом, не описанным ранее.
Пример 3: Исследование способности бактериофага Clo-PEP-1 уничтожать Clostridium perfringens
Исследовали способность выделенного бактериофага Clo-РЕР-1 уничтожать Clostridium perfringens. Для этого наблюдали за образованием прозрачного участка посредством капельного анализа, таким же образом, как описано в Примере 1. Клетки Clostridium perfringens, использованные для этого исследования, составляли 15 штаммов, ранее выделенных и идентифицированных авторами настоящего изобретения как Clostridium perfringens. Бактериофаг Clo-PEP-1 демонстрировал способность уничтожать 12 штаммов клеток Clostridium perfringens, использованных в данном эксперименте. Показательный результат исследования способности к уничтожению представлен на Фиг. 2. В то же время, также исследовали активность бактериофага Clo-PEP-1 в отношении уничтожения Pasteurella multocida, Haemophilus parasuis, Bordetella bronchiseptica, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Streptococcus suis, Streptococcus uberis и Pseudomonas aeruginosa. В результате было решено, что бактериофаг Clo-PEP-1 не обладал активностью в отношении уничтожения этих микроорганизмов.
Следовательно, было подтверждено, что бактериофаг Clo-PEP-1 обладает специфической способностью уничтожать клетки Clostridium perfringens и широким антибактериальным спектром против Clostridium perfringens, указывая на то, что бактериофаг Clo-PEP-1 по настоящему изобретению мог бы применяться в качестве активного ингредиента композиции для предупреждения и лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens.
Пример 4: Эффект бактериофага Clo-PEP-1 в отношении предупреждения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens
100 мкл раствора бактериофага Clo-PEP-1 в концентрации 1×109 БОЕ/мл добавляли в пробирку, содержащую 9 мл TSB. В другую пробирку, содержащую 9 мл TSB, добавляли такой же объем только TSB. Затем в каждую пробирку добавляли культуру Clostridium perfringens с получением бактериальной суспензии с OD600, равной 0,5. После чего пробирки переносили в анаэробный инкубатор при 37°C с последующим культивированием, во время которого наблюдали рост клеток Clostridium perfringens. Как представлено в Таблице 1, рост клеток Clostridium perfringens ингибировался в пробирке, в которую был добавлен раствор бактериофага Clo-PEP-1, тогда как в пробирке, не содержащей раствор бактериофага Clo-PEP-1, рост клеток Clostridium perfringens не ингибировался.
Вышеприведенные результаты указывают на то, что бактериофаг Clo-PEP-1 не только ингибировал рост клеток Clostridium perfringens, но также способен их уничтожать. Следовательно, бактериофаг Clo-PEP-1 может применяться в качестве активного ингредиента в композиции для предупреждения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens.
Пример 5: Терапевтический эффект бактериофага Clo-PEP-1 в отношении инфекций, вызываемых Clostridium perfringens
Исследовали терапевтический эффект бактериофага Clo-PEP-1 на животных, пораженных клетками Clostridium perfringens. 40 цыплятам в возрасте 2 дней перорально вводили 1×107 КОЕ клеток Clostridium perfringens для инфицирования животных. Их случайным образом разделяли на 2 группы. Одну экспериментальную группу кормили смесью, содержащей 1×108 БОЕ бактериофага Clo-PEP-1 на 1 г корма. Другую контрольную группу кормили таким же образом, но без бактериофага Clo-PEP-1. После 2 дней исследования измеряли число клеток Clostridium perfringens в содержимом кала и слепой кишки животных. В этом измерении для того, чтобы избежать вмешательства других инфицирующих бактерий, использовали среду (TSC (триптоза-сульфит-циклосерин) агаровая пластинка: OXOID), селективную для клеток Clostridium perfringens. В результате было продемонстрировано, что для экспериментальной группы, получавшей бактериофаг Clo-PEP-1 с кормом, количество клеток Clostridium perfringens должно уменьшиться в содержимом кала более чем в 500 раз, и в содержимом слепой кишки - более чем в 300 раз, по сравнению с контрольной группой, не получавшей бактериофаг Clo-PEP-1. Исходя из вышеприведенных результатов было подтверждено, что бактериофаг Clo-PEP-1 по настоящему изобретению мог бы быть очень эффективным в лечении инфекционных заболеваний, вызываемых Clostridium perfringens.
Пример 6: Получение кормовых добавок и кормов
Кормовую добавку, содержащую бактериофаг Clo-PEP-1 в концентрации 1×108 БОЕ/г, получали, используя раствор бактериофага Clo-PEP-1. Способ ее получения представлял собой следующий: мальтодекстрин (40%, w/v) добавляли к раствору бактериофага, и затем добавляли трегалозу до конечной концентрации 10%. После хорошего перемешивания смесь лиофилизировали. Наконец, лиофилизированную смесь размалывали в мелкие порошки. Вышеуказанный процесс лиофилизации может быть заменен сушкой в вакууме, сушкой при повышенной температуре или сушкой при комнатной температуре. Для получения контрольной кормовой добавки для сравнения получали кормовую добавку, не содержавшую бактериофаг, а содержавшую только буфер (10 мМ Трис-HCl, 10 мМ MgSO4, 0,1% желатина, pH 8,0).
Два вышеуказанных типа кормовых добавок смешивали с 1000-кратным объемом корма для куроводства, соответственно, с получением двух типов конечных кормов.
Пример 7: Получение добавок для питьевой воды и дезинфицирующих средств Добавка для питьевой воды и дезинфицирующее средство различаются по своему назначению, однако имеют аналогичный состав, поэтому их получали аналогичным образом. Добавку для питьевой воды (или дезинфицирующее средство), содержащую бактериофаг Clo-PEP-1 в концентрации 1×108 БОЕ/мл, получали, используя раствор бактериофага Clo-PEP-1. В частности, для получения добавки для питьевой воды (или дезинфицирующего средства), раствор бактериофага Clo-PEP-1 добавляли к буферному раствору до достижения концентрации 1×108 БОЕ/мл, который хорошо перемешивали. Для сравнения, вышеуказанный буферный раствор сам по себе использовали в качестве добавки для питьевой воды (или дезинфицирующего средства), не содержащей бактериофаг.
Полученные два типа добавок для питьевой воды (или дезинфицирующих средств) разбавляли водой в соотношении 1:1000, и затем использовали как питьевую воду или дезинфицирующее средство.
Пример 8: Эффект в куроводстве
Исследовали эффект кормов, питьевой воды и дезинфицирующего средства, полученных в Примере 6 и Примере 7, в куроводстве. В частности, исследование фокусировалось на смертности. Всего 120 цыплят в возрасте 2 дней делили на три группы, и в каждой группе было по 40 цыплят (группа А: группа исследования корма, группа В: группа исследования питьевой воды; и группа С: группа исследование дезинфицирующего средства). Исследование проводили в течение 4 недель. Каждую группу делили на две подгруппы, каждая из которых содержала по 20 цыплят. Подгруппы делили в соответствии с тем, проводили ли лечение бактериофагом Clo-PEP-1, или нет (
: подвергалась лечению бактериофагом Clo-PEP-1; и 
: не подвергалась лечению бактериофагом Clo-РЕР-1). Цыплят, использованных в данном эксперименте, распределяли в каждую подгруппу и выращивали в отдельных помещениях, расположенных на достаточном расстоянии друг от друга. Каждую подгруппу разделяли и называли, как показано в Таблице 2.
Корма предоставляли в соответствии с общепринятым способом кормления, как представлено в Таблице 2, с кормами, полученными в Примере 6. Питьевую воду предоставляли в соответствии с традиционным способом снабжения водой, как представлено в Таблице 2, с питьевой водой, полученной в Примере 7. Обработку цыплят дезинфицирующим средством проводили трижды в неделю, по очереди с общепринятым дезинфицирующим средством. То есть, в день, когда распыляли дезинфицирующее средство по настоящему изобретению, не производили обработку общепринятым дезинфицирующим средством. Результаты представлены в Таблице 3.
Вышеприведенные результаты подтвердили, что корма, питьевая вода и дезинфицирующее средство, полученные согласно настоящему изобретению, были эффективны в снижении смертности животных. Следовательно, можно сделать вывод, что композиция по настоящему изобретению может эффективно применяться для улучшения продуктивности животноводства.
Специалистам в данной области понятно, что концепции и конкретные варианты осуществления, раскрытые в вышеизложенном описании, могут быть без труда использованы в качестве основы для модификации или разработки других вариантов осуществления для достижения тех же целей, которые достигаются в настоящем изобретении. Специалистам в данной области также понятно, что такие эквивалентные варианты осуществления не отступают от сущности и объема настоящего изобретения, как представлено в прилагаемой формуле изобретения.
Claims (5)
1. Миовирусный бактериофаг Clo-РЕР-1 (регистрационный №: KСТС 12664 ВР), выделенный из природы и способный специфически уничтожать Clostridium perfringens, имеющий геном, представленный нуклеотидной последовательностью SEQ. ID. NO: 1.
2. Композиция для предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, содержащая от 1×101 БОЕ/мл до 1×1030 БОЕ/мл или от 1×101 БОЕ/г до 1×1030 БОЕ/г бактериофага Clo-РЕР-1 по п. 1 в качестве активного ингредиента.
3. Композиция для предупреждения или лечения инфекций, вызываемых Clostridium perfringens, по п. 2, где указанную композицию используют для получения кормовой добавки, добавки для питьевой воды или дезинфицирующего средства.
4. Способ предупреждения или лечения инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, включающий стадию введения субъекту композиции по п. 2 или 3, содержащей бактериофаг Clo-РЕР-1 в качестве активного ингредиента.
5. Способ предупреждения или лечения инфекций, вызываемых клетками Clostridium perfringens, по п. 4, где композицию вводят субъекту в форме кормовой добавки, добавки для питьевой воды или дезинфицирующего средства.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2014-0191675 | 2014-12-29 | ||
| KR1020140191675A KR101649849B1 (ko) | 2014-12-29 | 2014-12-29 | 신규한 클로스트리디움 퍼프린젠스 박테리오파지 Ｃｌｏ-ＰＥＰ-1 및 이의 클로스트리디움 퍼프린젠스 증식 억제 용도 |
| PCT/KR2015/014326 WO2016108536A1 (ko) | 2014-12-29 | 2015-12-28 | 신규한 클로스트리디움 퍼프린젠스 박테리오파지 Ｃｌｏ-ＰＥＰ-1 및 이의 클로스트리디움 퍼프린젠스 증식 억제 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2662986C1 true RU2662986C1 (ru) | 2018-07-31 |
Family
ID=56284608
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017121455A RU2662986C1 (ru) | 2014-12-29 | 2015-12-28 | Новый бактериофаг clostridium perfringens clo-pep-1 и его применение для ингибирования пролиферации clostridium perfringens |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10028984B2 (ru) |
| KR (1) | KR101649849B1 (ru) |
| CN (1) | CN107109372B (ru) |
| BR (1) | BR112017013233A2 (ru) |
| CO (1) | CO2017006494A2 (ru) |
| MX (1) | MX2017008561A (ru) |
| RU (1) | RU2662986C1 (ru) |
| WO (1) | WO2016108536A1 (ru) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101761573B1 (ko) * | 2014-12-29 | 2017-07-26 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 신규한 장출혈성 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＨＰ-1 및 이의 장출혈성 대장균 증식 억제 용도 |
| KR101761578B1 (ko) * | 2014-12-30 | 2017-07-26 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 신규한 장병원성 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＨＰ-2 및 이의 장병원성 대장균 증식 억제 용도 |
| KR101761581B1 (ko) * | 2014-12-30 | 2017-07-26 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 신규한 장침입성 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＯＰ-4 및 이의 장침입성 대장균 증식 억제 용도 |
| KR101649851B1 (ko) * | 2014-12-30 | 2016-08-30 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 신규한 시가독소생산 F18형 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＯＰ-1 및 이의 시가독소생산 F18형 대장균 증식 억제 용도 |
| US11058131B2 (en) | 2015-04-16 | 2021-07-13 | Kennesaw State University Research And Service Foundation, Inc. | Escherichia coli O157:H7 bacteriophage Φ241 |
| KR102016920B1 (ko) * | 2016-12-23 | 2019-09-02 | 주식회사 옵티팜 | 신규한 클로스트리디움 퍼프린젠스 특이 박테리오파지 cp5 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR101993121B1 (ko) * | 2016-12-23 | 2019-06-26 | 주식회사 옵티팜 | 신규한 클로스트리디움 퍼프린젠스 특이 박테리오파지 cp3 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR101823860B1 (ko) | 2017-02-24 | 2018-01-31 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 신규한 클로스트리디움 퍼프린젠스 박테리오파지 Clo-PEP-2 및 이의 클로스트리디움 퍼프린젠스 균 증식 억제 용도 |
| KR102073086B1 (ko) * | 2018-06-04 | 2020-02-04 | (주)인트론바이오테크놀로지 | 신규한 스트렙토코커스 수이스 박테리오파지 Str-SUP-1 및 이의 스트렙토코커스 수이스 균 증식 억제 용도 |
| KR102073094B1 (ko) * | 2018-06-04 | 2020-02-04 | (주)인트론바이오테크놀로지 | 신규한 스트렙토코커스 수이스 박테리오파지 Str-SUP-3 및 이의 스트렙토코커스 수이스 균 증식 억제 용도 |
| KR102073088B1 (ko) * | 2018-06-04 | 2020-02-04 | (주)인트론바이오테크놀로지 | 신규한 스트렙토코커스 수이스 박테리오파지 Str-SUP-2 및 이의 스트렙토코커스 수이스 균 증식 억제 용도 |
| CN110129279B (zh) * | 2019-04-24 | 2022-02-18 | 昆明理工大学 | 一种粪肠球菌噬菌体及其分离、纯化、富集和应用 |
| CN110628727B (zh) * | 2019-10-12 | 2022-09-13 | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种新型产气荚膜梭菌噬菌体组合物及其应用 |
| KR102305636B1 (ko) * | 2019-10-28 | 2021-09-28 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대하여 용균력을 가지는 신규한 항균단백질 cpel-1 |
| CN111662880B (zh) * | 2020-05-25 | 2022-06-17 | 江苏省农业科学院 | 一株产气荚膜梭菌噬菌体、包括噬菌体的抑菌剂及制备方法和应用 |
| KR102586836B1 (ko) * | 2021-02-23 | 2023-10-10 | 씨제이제일제당 주식회사 | 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대한 특이적인 사멸능을 가지는 신규한 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR102586837B1 (ko) * | 2021-02-23 | 2023-10-10 | 씨제이제일제당 주식회사 | 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대한 특이적인 사멸능을 가지는 신규한 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR102586838B1 (ko) * | 2021-02-25 | 2023-10-10 | 씨제이제일제당 주식회사 | 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대한 특이적인 사멸능을 가지는 신규한 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR102586839B1 (ko) * | 2021-02-25 | 2023-10-10 | 씨제이제일제당 주식회사 | 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대한 특이적인 사멸능을 가지는 신규한 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| CN114621932B (zh) * | 2021-05-20 | 2023-11-24 | 青岛诺安百特生物技术有限公司 | 一株新型魏氏梭菌噬菌体、包含该噬菌体的噬菌体组合物及其在兔魏氏梭菌病中的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7625739B2 (en) * | 2007-08-14 | 2009-12-01 | Intralytix, Inc. | Clostridium perfringens bacteriophage and uses thereof |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB0202556D0 (en) * | 2002-02-04 | 2002-03-20 | Danisco | Novel Protein |
| KR20120076710A (ko) * | 2010-12-30 | 2012-07-10 | 주식회사 인트론바이오테크놀로지 | 클로스트리디움 퍼프린젠스 특이 박테리오파지 ｃｐｐ-3 |
| KR101381797B1 (ko) * | 2013-02-27 | 2014-04-07 | 씨제이제일제당 (주) | 신규 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| KR101381798B1 (ko) * | 2013-02-27 | 2014-04-07 | 씨제이제일제당 (주) | 신규 박테리오파지 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
-
2014
- 2014-12-29 KR KR1020140191675A patent/KR101649849B1/ko active IP Right Grant
-
2015
- 2015-12-28 WO PCT/KR2015/014326 patent/WO2016108536A1/ko active Application Filing
- 2015-12-28 BR BR112017013233-8A patent/BR112017013233A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-12-28 US US15/538,252 patent/US10028984B2/en active Active
- 2015-12-28 MX MX2017008561A patent/MX2017008561A/es unknown
- 2015-12-28 RU RU2017121455A patent/RU2662986C1/ru active
- 2015-12-28 CN CN201580071134.5A patent/CN107109372B/zh active Active
-
2017
- 2017-06-27 CO CONC2017/0006494A patent/CO2017006494A2/es unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7625739B2 (en) * | 2007-08-14 | 2009-12-01 | Intralytix, Inc. | Clostridium perfringens bacteriophage and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЖЕВЛАКОВА Ю.А. и др., Диагностика анаэробной инфекции, вызванной clostridium perfringens, у пациента с посттравматической флегмоной (клинический случай), Журнал Клиническая лабораторная диагностика, 2013, стр.51-53. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107109372B (zh) | 2020-09-11 |
| US10028984B2 (en) | 2018-07-24 |
| MX2017008561A (es) | 2017-10-26 |
| CO2017006494A2 (es) | 2017-09-20 |
| KR101649849B1 (ko) | 2016-08-22 |
| US20170340685A1 (en) | 2017-11-30 |
| CN107109372A (zh) | 2017-08-29 |
| BR112017013233A2 (pt) | 2018-08-07 |
| KR20160080175A (ko) | 2016-07-07 |
| WO2016108536A1 (ko) | 2016-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2662986C1 (ru) | Новый бактериофаг clostridium perfringens clo-pep-1 и его применение для ингибирования пролиферации clostridium perfringens | |
| RU2662985C1 (ru) | Новый бактериофаг шига-токсин продуцирующей e. coli типа f18 esc-cop-1 и его применение для ингибирования пролиферации шига-токсин продуцирующей e. coli типа f18 | |
| RU2662984C1 (ru) | Новый бактериофаг энтероинвазивной e. coli esc-cop-4 и его применение для ингибирования пролиферации энтероинвазивной e. coli | |
| RU2704864C1 (ru) | Новый бактериофаг pas-mup-1 pasteurella multocida и его применение для ингибирования размножения pasteurella multocida | |
| CN107250352B (zh) | 新型肠致病性大肠杆菌噬菌体Esc-CHP-2及其用于抑制肠致病性大肠杆菌增殖的用途 | |
| US10265353B2 (en) | Enterohemorrhagic E. coli bacteriophage Esc-CHP-1 and use thereof for inhibiting proliferation of enterohemorrhagic E. coli | |
| US11412760B2 (en) | Escherichia coli bacteriophage Esc-COP-7, and use thereof for suppressing proliferation of pathogenic Escherichia coli | |
| US11529406B2 (en) | Clostridium perfringens bacteriophage Clo-PEP-2 and use for inhibiting Clostridium perfringens proliferation of same | |
| US10898531B2 (en) | Vibrio parahaemolyticus bacteriophage Vib-PAP-5 and use thereof for suppressing proliferation of Vibrio parahaemolyticus bacteria | |
| CN108699532B (zh) | 副溶血弧菌噬菌体Vib-PAP-2及其用于抑制副溶血弧菌增殖的用途 | |
| US10751377B2 (en) | Vibrio parahaemolyticus bacteriophage Vib-PAP-1 and use thereof for inhibiting proliferation of vibrio parahaemolyticus | |
| US11457635B2 (en) | Pseudomonas aeruginosa bacteriophage Pse-AEP-3 and use thereof for inhibiting proliferation of Pseudomonas aeruginosa | |
| US11497216B2 (en) | Pseudomonas aeruginosa bacteriophage pse-AEP-4 and use thereof for inhibiting proliferation of Pseudomonas aeruginosa | |
| US20210138005A1 (en) | Novel vibrio parahaemolyticus bacteriophage vib-pap-7 and use of same for inhibiting vibrio parahaemolyticus bacteria proliferation | |
| CN108179136B (zh) | 大肠杆菌噬菌体Esc-COP-9及其致病性大肠杆菌增殖抑制用途 | |
| CN113166730B (zh) | 新型猪链球菌噬菌体str-sup-1及其在抑制猪链球菌细菌增殖方面的用途 | |
| US11844818B2 (en) | Aeromonas hydrophila bacteriophage Aer-HYP-3 and use thereof for inhibiting growth of Aeromonas hydrophila bacteria | |
| US11213050B2 (en) | Escherichia coli bacteriophage Esc-COP-9 and use for inhibiting proliferation of pathogenic Escherichia coli thereof | |
| US20190328803A1 (en) | Novel vibrio parahaemolyticus bacteriophage vib-pap-4 and use thereof in inhibiting proliferation of vibrio parahaemoliticus bacteria | |
| US12114664B2 (en) | Salmonella typhimurium bacteriophage STP-2 and use thereof for inhibiting proliferation of Salmonella typhimurium | |
| US11439677B2 (en) | Vibrio anguillarum bacteriophage VIB-ANP-1 and use thereof for inhibiting proliferation of Vibrio anguillarum bacteria | |
| US10894068B2 (en) | Bordetella bronchiseptica bacteriophage Bor-BRP-1, and use thereof for inhibition of proliferation of Bordetella bronchiseptica bacteria | |
| US11351210B2 (en) | Lactococcus garvieae bacteriophage Lac-GAP-3 and use thereof in inhibiting proliferation of Lactococcus garvieae bacteria |