RU2660352C2 - Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови - Google Patents

Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови Download PDF

Info

Publication number
RU2660352C2
RU2660352C2 RU2013156363A RU2013156363A RU2660352C2 RU 2660352 C2 RU2660352 C2 RU 2660352C2 RU 2013156363 A RU2013156363 A RU 2013156363A RU 2013156363 A RU2013156363 A RU 2013156363A RU 2660352 C2 RU2660352 C2 RU 2660352C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
scd14
infection
antibiotic
respiratory tract
threshold value
Prior art date
Application number
RU2013156363A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2013156363A (ru
Inventor
Камон ШИРАКАВА
Original Assignee
Мотида Фармасьютикал Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мотида Фармасьютикал Ко., Лтд. filed Critical Мотида Фармасьютикал Ко., Лтд.
Publication of RU2013156363A publication Critical patent/RU2013156363A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2660352C2 publication Critical patent/RU2660352C2/ru

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/12—Pulmonary diseases
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу диагностики инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией. Предложен способ диагностики инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, у нуждающегося в этом субъекта, включающий измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта; сравнение измеренного уровня sCD14-ST с пороговым значением; дифференциальную диагностику между бактериальной и вирусной инфекциями на основе измеренного уровня sCD14-ST, при этом повышение измеренного уровня sCD14-ST в сравнении с указанным пороговым значением является индикатором респираторной инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл. Предложены способ выбора пациентов с инфекцией нижних дыхательных путей для приема антибиотика, способ определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с инфекцией нижних дыхательных путей, принимающему антибиотик, а также способ лечения инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией. Вышеописанный способ позволяет эффективно диагностировать инфекции нижних дыхательных путей, связанные с бактериальной инфекцией в образце крови. 7 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 6 пр.

Description

Область техники
Настоящее изобретение относится к способу диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, способу выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика, а также способу определения времени прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик. Кроме того, настоящее изобретение также относится к способу лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
Уровень техники
Респираторная инфекция является заболеванием, часто встречающимся в медицинских учреждениях. Существуют два типа респираторной инфекции, а именно, респираторная инфекция, вызванная вирусной инфекцией, и респираторная инфекция, вызванная бактериальной инфекцией. Антибиотики не действуют на вирусную респираторную инфекцию. В принципе, перед введением антибиотиков сначала идентифицируют микроорганизм, являющийся причиной заболевания, а затем подбирают для него антибиотик в зависимости от чувствительности микроорганизма, являющегося причиной заболевания, к лекарственным средствам, и так далее. Однако, поскольку поиски такого микроорганизма, являющегося причиной заболевания, при помощи гемокультуры или исследования мокроты занимают много времени, на самом деле лечение с использованием антибиотиков в большинстве случаев начинают до определения патогена. Более того, поскольку определение чувствительности бактерий при таком использовании гемокультуры или исследовании мокроты не всегда бывает на высоте, то даже в случае отрицательных результатов нельзя исключать бактериальную инфекцию. Таким образом, антибиотики используют даже для пациентов с респираторной инфекцией при подозрении на бактериальную инфекцию. Однако введение антибиотиков пациентам, которые в них не нуждаются, способствует росту числа бактерий с лекарственной устойчивостью (не патентная литература 1).
Для правильного применения антибиотиков необходимо, чтобы наличие или отсутствие бактериальной инфекции в случае респираторной инфекции можно было быстро и точно диагностировать в клиниках. Была изучена возможность применения прокальцитонина в качестве такого диагностического маркера. Сообщалось, что, когда лечение инфекции нижних дыхательных путей или пневмонии проводят антибиотиками, использование в качестве индикатора концентрации прокальцитонина в крови позволяет снизить количество применяемых антибиотиков (не патентная литература 2 и не патентная литература 3).
Прокальцитонин также был использован как диагностический маркер сепсиса. В этом случае прокальцитонин используют как индикатор, например, если концентрация прокальцитонина в крови составляет 0,5 нг/мл или выше, считают, что у субъекта сепсис, а если концентрация прокальцитонина составляет 2,0 нг/мл или выше, считают, что у субъекта тяжелый сепсис. С другой стороны, если прокальцитонин используют в качестве маркера для инфекции нижних дыхательных путей или пневмонии, должно быть обнаружено изменение концентрации в крови прокальцитонина в диапазоне от 0,1 до 0,5 нг/мл, и таким образом, существует ограничение, заключающееся в использовании только высокочувствительного метода анализа. Кроме того, также сообщалось, что, поскольку прокальцитонин постоянно присутствует в крови, концентрация прокальцитонина в крови снижается относительно медленно даже в том случае, когда лечение было успешным (патентная литература 1). Считают, что вследствие длительного периода полураспада прокальцитонина в крови изменение концентрации обнаруживать сложно.
В качестве нового маркера сепсиса, который превосходит прокальцитонин, изучали возможность использования sCD14-ST (растворимая форма антигена CD14; альтернативное название: пресепсин). Сообщалось, что даже если sCD14-ST использовали для сравнения пациента с сепсисом и пациента с синдромом системного воспалительного ответа (SIRS), который трудно отличить от сепсиса, то его высокий уровень был показан в крови у пациента с сепсисом. Таким образом, был сделан вывод, что sCD14-ST может быть эффективен в качестве диагностического маркера сепсиса (не патентная литература 4 и не патентная литература 2).
Кроме того, также сообщалось, что sCD14-ST продуцируется в процессе, когда клетки обволакивают и переваривают чужеродные микроорганизмы или вещества, и что повышение концентрации sCD14-СТ в синовиальной жидкости может быть обнаружено при заболевании, которое включает фагоцитоз, сопровождаемый аутоиммунной реакцией, или инфекцию в местных зонах, например, артрит (патентная литература 3).
Список литературы
Патентная литература
Патентная литература 1: Международная публикация WO 2008/104321
Патентная литература 2: Международная публикация WO 2005/108429
Патентная литература 3: Международная публикация WO 2009/142303
Не патентная литература
Не патентная литература 1: Ball et al., Journal of Antimicrobial Chemotherapy 49: 31-40, 2002.
Не патентная литература 2: Christ-Crain et al., The Lancet 363: 600-607, 2004.
Не патентная литература 3: Christ-Crain et al., Am J Respire CritCare Med 174: 84-93, 2006.
Не патентная литература 4: Yaegashi et al., Journal of Infection and Chemotherapy 11: 234-238, 2005.
Сущность изобретения
Техническая проблема
Объектом настоящего изобретения является способ правильного выбора пациентов с респираторной инфекцией, которым следует вводить антибиотик, и способу регулирования периода введения антибиотика. То есть, настоящее изобретение направлено на достижение цели, заключающейся в правильном применении антибиотиков при респираторной инфекции. В частности, настоящее изобретение относится к способу диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, способу выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика, а также способу определения времени прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик. Для достижения этих целей было желательно разработать новый маркер, используемый для правильного выбора респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией. Кроме того, было также желательно разработать чувствительный маркер, концентрация которого быстро уменьшается при уменьшении и/или исчезновении бактериальной инфекции в дыхательных органах. Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
Решение проблемы
Автор настоящего изобретения обнаружил, что становится возможным правильно выбирать пациентов с респираторной инфекцией, которым следует вводить антибиотик, а также регулировать период введения антибиотика при использовании измеренного уровня sCD14-ST в крови в качестве индикатора, что явилось сущностью настоящего изобретения.
Более конкретно, настоящее изобретение включает следующие отличительные признаки.
Настоящее изобретение относится к следующим способам диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией:
(1-1) Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта.
(1-2) Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта; и
2) определение того, имеется ли у субъекта респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, путем использования измеренного уровня sCD14-ST в образце в качестве индикатора.
(1-3) Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта;
2) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце с нормальным уровнем; и
3) определение того, является ли измеренный уровень в образце более высоким, чем нормальный уровень.
(1-4) Способ по вышеуказанному абзацу (1-3), в котором в качестве нормального уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + 2SD.
(1-5) Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий стадию:
1) измерения sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта.
(1-6) Способ диагностики по вышеуказанному абзацу (1-5), дополнительно включающий следующую стадию:
2) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце крови с нормальным уровнем.
(1-7) Способ диагностики по вышеуказанному абзацу (1-6), дополнительно включающий следующую стадию:
3) определение того, является ли измеренный уровень более высоким, чем нормальный уровень.
(1-8) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (1-1)-(1-7), в котором респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, представляет собой инфекцию нижних дыхательных путей или пневмонию.
(1-9) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (1-1)-(1-8), в котором возможна дифференциальная диагностика респираторной инфекции, вызванной вирусной инфекцией.
(1-10) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (1-1)-(1-9), в котором, в дополнение к измерению sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта, проводят тест по меньшей мере на один вид микроорганизма, являющегося причиной заболевания.
(1-11) Способ по вышеуказанному абзацу (1-10), в котором тест на микроорганизм, являющийся причиной заболевания, представляет собой по меньшей мере один, выбранный из группы, состоящей из анализа окрашенного мазка, теста на антигены вируса гриппа, аденовируса, легионеллы, хламидий, микоплазмы, аспергилла, кандиды, криптококка, цитомегаловируса или пневмококка, а также анализа гемокультуры, мокроты или жидкости бронхоальвеолярного лаважа.
(1-12) Маркер респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий sCD14-ST.
(1-13) Маркер по вышеуказанному абзацу (1-12), дополнительно включающий по меньшей мере один маркер, выбранный из группы, состоящей из маркеров воспаления, включая TNF-α, лактатдегидрогеназу, сиаловую кислоту, IL-1β, IL-6 и IL-10, маркеров, связанных с тромбозом и гемостазом, включая активированное частичное тромбопластиновое время, количество тромбоцитов, фибриноген, отдельные диагностические критерии для ДВС (DIC), белок C, D-димер, комплекс тромбин-антитромбин III и протромбиновый фрагмент F1+2, маркеров инфекции, включая прокальцитонин (PCT), C-реактивный белок (CRP), азот мочевины крови, число белых кровяных клеток, эндотоксин, адреномедуллин, проадреномедуллин, MR-proADM, натрийуретический пептид В-типа, триггерные рецепторы, экспрессируемые на миелоидных клетках-1, и HMGB1, маркеров стресса, включая кортизон и копептин, а также маркеров для интерстициальной пневмонии, включая KL-6, SP-A, SP-D и MCP-1.
(1-14) Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, в котором в образце крови, полученном от субъекта, измеряют sCD14-ST и по меньшей мере один биомаркер, отличный от sCD14-ST.
(1-15) Способ по вышеуказанному абзацу (1-14), в котором биомаркер, отличный от sCD14-ST, представляет собой по меньшей мере один маркер, указанный в вышеприведенном абзаце (1-13).
Настоящее изобретение относится к следующим способам выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика:
(2-1) Способ выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика, включающий: измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов.
(2-2) Способ выбора пациентов c респираторной инфекцией для приема антибиотика, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов; и
2) определение того, имеется ли у пациентов респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, путем использования измеренных уровней sCD14-ST в образцах в качестве индикатора.
(2-3) Способ выбора пациентов c респираторной инфекцией для приема антибиотика, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов;
2) сравнение измеренных уровней sCD14-ST в образцах с нормальным уровнем; и
3) определение того, являются ли измеренные уровни в образцах более высокими, чем нормальный уровень.
(2-4) Способ по вышеуказанному абзацу (2-3), в котором в качестве нормального уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + 2SD.
(2-5) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (2-1)-(2-4), в котором респираторная инфекция представляет собой инфекцию нижних дыхательных путей или пневмонию.
Настоящее изобретение относится к следующим способам определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик.
(3-1) Способ определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик, в котором измеренный уровень sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента, используют в качестве индикатора.
(3-2) Способ определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента;
2) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце с заданным эталонным уровнем; и
3) если измеренный уровень в образце ниже, чем заданный эталонный уровень, принятие решения о прекращении введения антибиотика.
(3-3) Способ по вышеуказанному абзацу (3-2), в котором в качестве заданного эталонного уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + SD.
(3-4) Способ выбора пациентов, которым будет прекращено введение антибиотика, из пациентов с респираторной инфекцией, принимающих антибиотик, путем использования измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов, в качестве индикаторов.
(3-5) Способ выбора пациентов, которым будет прекращено введение антибиотика, из пациентов с респираторной инфекцией, принимающих антибиотик, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов;
2) сравнение измеренных уровней sCD14-ST в образцах с заданным эталонным уровнем; и
3) если измеренные уровни в образцах ниже, чем заданный эталонный уровень, принятие решения о прекращении введения антибиотика.
(3-6) Способ по вышеуказанному абзацу (3-5), в котором в качестве заданного эталонного уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + SD.
(3-7) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (3-1)-(3-6), в котором респираторная инфекция представляет собой инфекцию нижних дыхательных путей или пневмонию.
Настоящее изобретение относится к следующим способам лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
(4-1) Способ лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов;
2) выбор пациентов для приема антибиотика путем использования измеренных уровней sCD14-ST в образцах в качестве индикатора; и
3) введение антибиотика выбранным пациентам.
(4-2) Способ по вышеуказанному абзацу (4-1), в котором стадия выбора пациентов для приема антибиотика путем использования измеренных уровней sCD14-ST в образцах в качестве индикатора, включает следующие стадии:
1) сравнение измеренных уровней sCD14-ST в образцах с нормальным уровнем; и
2) выбор пациентов для приема антибиотика, у которых измеренные уровни в образцах выше, чем нормальный уровень.
(4-3) Способ по вышеуказанному абзацу (4-2), в котором в качестве нормального уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + 2SD.
(4-4) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (4-1)-(4-3), дополнительно включающий следующие стадии:
1) измерение с течением времени sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов, принимающих антибиотик;
2) сравнение измеренных уровней sCD14-ST в образцах с заданным эталонным уровнем; и
3) если измеренные уровни в образцах ниже, чем заданный эталонный уровень, принятие решения о прекращении введения антибиотика.
(4-5) Способ по вышеуказанному абзацу (4-4), в котором в качестве заданного эталонного уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + SD.
(4-6) Способ по любому из вышеуказанных абзацев (4-1)-(4-5), в котором респираторная инфекция представляет собой инфекцию нижних дыхательных путей или пневмонию.
Настоящее изобретение относится к следующим композициям для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
(5-1) Композиция для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, содержащая антибиотик в качестве активного ингредиента, которую используют таким образом, что измеряют sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента с подозрением на респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, измеренный уровень сравнивают с нормальным уровнем, и если измеренный уровень в образце выше, чем нормальный уровень, композицию вводят пациенту.
(5-2) Композиция для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по вышеуказанному абзацу (5-1), когда в качестве нормального уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + 2SD.
(5-3) Композиция для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, содержащая антибиотик в качестве активного ингредиента, которую используют таким образом, что измеряют sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента с подозрением на респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, измеренный уровень сравнивают с нормальным уровнем, и если измеренный уровень в образце выше, чем нормальный уровень, композицию вводят пациенту, и с течением времени на протяжении периода введения измеряют sCD14-ST в образцах крови, а когда измеренный уровень становится более низким, чем заданный уровень, введение композиции прекращают.
(5-4) Композиция для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по вышеуказанному абзацу (5-3), когда в качестве нормального уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + 2SD, а в качестве заданного эталонного уровня используют среднее значение измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов + SD.
(5-5) Композиция для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по любому из вышеуказанных абзацев (5-1)-(5-4), где респираторная инфекция представляет собой инфекцию нижних дыхательных путей или пневмонию.
(6) Способ, маркер или композиция по любому из вышеуказанных абзацев (1-1)-(5-5), в которых при измерении sCD-14 в образце крови среднее значение для измеренных уровней у пациентов с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией, выше, чем таковое у здоровых субъектов, а среднее значение для измеренных уровней у пациентов с вирусной пневмонией ниже, чем таковое у здоровых субъектов.
(7) Способ, маркер или композиция по любому из вышеуказанных абзацев (1-1)-(6), в которых период полураспада sCD-14 в образце крови составляет менее чем 1 час.
Эффекты изобретения
В соответствии с настоящим изобретением, благодаря использованию измеренного уровня sCD14-ST в крови в качестве индикатора становится возможным правильно выбирать пациентов с респираторной инфекцией, которым следует вводить антибиотик, а также регулировать период введения антибиотика. Антибиотики следует вводить при заболеваниях, сопровождающихся бактериальной инфекцией. Путем измерения sCD14-ST в крови, пациентов с респираторной инфекцией, связанной с бактериальной инфекцией, можно выявлять с высокой специфичностью и/или высокой чувствительностью. Более того, путем определения времени для прекращения введения антибиотика с использованием измеренного уровня sCD14-ST в крови в качестве индикатора, период введения антибиотика можно сокращать. Правильное применение антибиотика в случае респираторной инфекции с использованием измеренного уровня sCD14-ST в крови в качестве индикатора полезно тем, что оно позволяет избегать появления бактерий с множественной лекарственной устойчивостью, сокращать период лечения, уменьшать количество применяемого антибиотика и снижать расходы на медицинское обслуживание без ущерба для безопасности и полезности.
Краткое описание чертежей
На фигуре 1 приведена стандартная кривая для системы измерения уровня sCD14-ST в крови, полученная в примере 1.
На фигуре 2 изображено распределение концентраций sCD14-ST в крови пациентов с пневмонией, измеренных в примере 2. Горизонтальная ось указывает количество дней, прошедших после диагностирования пневмонии до сбора образцов, а вертикальная ось указывает концентрацию sCD14-ST в крови. На фигуре сплошная линия соответствует среднему уровню (577 пг/мл) у здоровых субъектов, а пунктирная линия соответствует среднему уровню + 2SD (895 пг/мл) у здоровых субъектов.
На фигуре 3 изображено распределение концентраций sCD14-ST в крови пациентов с пневмонией при бактериальной инфекции и пациентов с пневмонией при вирусной инфекции, которые были измерены в примере 5. Вертикальная ось указывает концентрацию sCD14-ST в крови.
На фигуре 4 показано изменение концентраций sCD14-ST в крови в случае внутривенного введения sCD14-ST, которые были измерены в примере 6. Горизонтальная ось указывает время, прошедшее после завершения введения, а вертикальная ось указывает концентрацию sCD14-ST в крови.
Описание вариантов осуществления
Далее настоящее изобретение будет описано подробно.
1. sCD14-ST
sCD14-ST (альтернативное название: пресепсин) является молекулярной формой растворимого CD14. sCD14-ST отличается тем, что молекулярная масса, измеренная при помощи SDS-ПААГ в восстанавливающих условиях, составляет 13±2 кДа, и в нем сохранена N-концевая часть CD14. Кроме того, если сравнивать такой sCD14-ST с полноразмерным CD14, то он имеет аминокислотную последовательность со значительной делецией С-концевой части последнего, и два вышеуказанных белка отличаются друг от друга по конформации. Таким образом, они обладают различной иммуногенностью. Вследствие этого, данные два белка можно различать при помощи антител, с которыми они связываются. sCD14-ST имеет свойство специфически связываться с антителом, полученным при использовании в качестве антигена пептида, состоящего из 16 аминокислотных остатков, приведенных в SEQ ID NO: 2. Кроме того, sCD14-ST может иметь любую одну или более характеристик, выбранных из того, что он специфически связывается с пептидом, состоящим из аминокислот в положениях 17-26 в аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 3, что он не связывается с антителом 3C10, что он не связывается с антителом MEM-18, что он не обладает способностью связывать ЛПС (LPS) и что он может быть получен из человеческой крови. Кроме того, sCD14-ST отличается тем, что он имеет аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в виде ее N-концевой последовательности. Более конкретно, sCD14-ST может быть охарактеризован тем, что N-конец sCD14-ST представляет собой аминокислоту в положении 1 аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 3, и что его C-конец представляет собой любую из аминокислот в положениях 59-90 аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 3. Такой sCD14-ST подробно описан в международной публикации WO 2005/108429. Термин «sCD14-ST» используют в настоящей спецификации для обозначения человеческого sCD14-ST, если не указано иное.
sCD14-ST в образце крови можно измерять с помощью известных методов. Например, можно использовать иммунологическую систему измерения для специфического определения sCD14-S, которая описана в международной публикации WO 2004/044005 или международной публикации WO 2005/108429. В частности, предпочтительно можно использовать систему иммунологического сэндвич-анализа, включающую сочетание антитела, полученного при использовании в качестве антигена пептида, состоящего из 16 аминокислотных остатков, приведенных в SEQ ID NO: 2, с антителом, связывающимся с пептидом, состоящим из аминокислот в положениях 17-26 аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 3, или с антителом, конкурирующим с вышеуказанным антителом (антитело F1106-13-3 или антитело F1031-8-3).
Измеренный уровень sCD14-ST в образце крови, в целом, можно назвать концентрацией sCD14-ST в крови. Измеренный уровень sCD14-ST может представлять собой любую количественную величину, полуколичественную величину и качественную величину. При использовании такой полуколичественной величины концентрацию sCD14-ST можно указывать как стадию 0, 1, 2 и 3, или +, ++ и +++. Поскольку такая стадия коррелирует с количественной концентрацией sCD14-ST, является ли полученная концентрация sCD14-ST более высокой, чем заданный эталонный уровень, можно определять на основе корреляции полуколичественной стадии с количественной концентрацией sCD14-ST. В противоположном случае, при использовании полуколичественного анализа уровень, более низкий, чем эталонный уровень, можно определять как стадию 0 или - (минус). При использовании количественной величины уровень, более низкий, чем эталонный уровень, можно определять как отрицательный, а уровень, более высокий, чем эталонный уровень, можно определять как положительный.
Тип образца крови не имеет особых ограничений, и можно использовать любой вариант из цельной крови, плазмы и сыворотки. Кроме того, такой образец крови может также быть образцом, полученным путем добавления антикоагулянта, такого как ЭДТА, гепарин или лимонная кислота, в собранную кровь после отбора крови.
2. Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
Настоящее изобретение относится к способу диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включающему измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта.
Предпочтительные примеры респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, включают инфекцию нижних дыхательных путей и пневмонию.
Инфекция нижних дыхательных путей включает острую инфекцию нижних дыхательных путей и хроническую инфекцию нижних дыхательных путей. Острая инфекция нижних дыхательных путей включает острый трахеит, острый бронхит и острый бронхиолит. Большинство этих заболеваний развиваются в результате распространения вирусной инфекции верхних дыхательных путей в нижние дыхательные пути. В некоторых из этих заболеваний затем развивается вторичная бактериальная инфекция. Если обнаружены симптомы такой вторичной бактериальной инфекции, применяют введение антибиотиков. Хроническая инфекция нижних дыхательных путей представляет собой патологическое состояние, при котором персистирующая бактериальная инфекция обнаруживается в нижних дыхательных путях, вызывая органические нарушения вследствие бронхоэктазии или хронической обструктивной болезни легких, и она включает персистирующую инфекцию и обострения. Заболевания, вызывающие органические нарушения в нижних дыхательных путях, включают бронхоэктазию, хроническую обструктивную болезнь легких, хронический бронхит, диффузный панбронхиолит, застарелый туберкулез легких, пневмокониоз, нетуберкулезную микобактериальную инфекцию, аллергический бронхолегочный аспергиллез, фиброз легких и хроническую бронхиальную астму. В обоих случаях стойкой инфекции и обострения применяют введение антибиотиков.
Пневмония включает внебольничную пневмонию и внутрибольничную пневмонию. По настоящему изобретению предпочтительной является внебольничная пневмония.
В данном документе тип субъекта не имеет особых ограничений. Предпочтительным субъектом является человек с основанным на клинических показателях подозрением на респираторную инфекцию. Такие клинические показатели включают по меньшей мере одышку или кашель. Кроме того, предпочтительные клинические показатели включают по меньшей мере один показатель, выбранный из группы, состоящей из выделения мокроты, боли в груди, затрудненного дыхания, теней при рентгенологическом обследовании грудной клетки, лихорадки и числа белых кровяных клеток.
Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по настоящему изобретению отличается тем, что он включает следующие стадии: 1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта; и 2) определение того, имеется ли у субъекта респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, путем использования измеренного уровня sCD14-ST в образце в качестве индикатора. В частности, вышеуказанная стадия 2) может включать следующие стадии: 3) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце с нормальным уровнем; и 4) определение того, является ли измеренный уровень в образце более высоким, чем нормальный уровень.
Путем сравнения измеренного уровня sCD14-ST в образце с заданным эталонным уровнем можно определять, имеется ли у субъекта респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией. Эталонный уровень, используемый в способе диагностирования респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по настоящему изобретению предпочтительно является нормальным уровнем, который был установлен на основании измеренного уровня sCD14-СТ в образце крови, полученном от здорового субъекта. В качестве такого нормального уровня можно использовать средний уровень по результатам измерения sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов, либо уровень, стандартизированный путем определения границ, и так далее. Если измеренный уровень в образце, полученном от здорового субъекта, почти такой же, как уровень фона в измерительной системе, можно использовать среднее значение уровней фона в измерительной системе, либо уровень, стандартизированный путем определения границ, и так далее. Уровень фона в измерительной системе означает измеренный уровень, полученный в случае, когда в измерительную систему добавлен не образец, а буфер, аналитический раствор или тому подобное. В качестве уровня, полученного стандартизацией измеренных уровней в образцах, полученных от субъектов, можно использовать средний уровень и от +0,5 SD до +5 SD (SD: стандартное отклонение) от измеренных уровней у здоровых субъектов, от 5 до 95, от 10 до 90, от 15 до 85 или от 25 до 75 процентилей от измеренных уровней у здоровых субъектов, или тому подобное. Предпочтительным уровнем является средний уровень +SD, +2SD или +3SD от измеренных уровней у здоровых субъектов.
При задании нормального уровня на основании измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов, в качестве эталона можно использовать уровень sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента, имеющего респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, который был измерен ранее. В данном случае пороговое значение, которое оптимизирует чувствительность и/или специфичность в диагностировании болезни, можно использовать в качестве нормального уровня. Оно составляет, например, 500 пг/мл.
Когда измеренный уровень в образце, полученном от субъекта, сравнивают с нормальным уровнем, и измеренный уровень в образце выше, чем нормальный уровень, можно определить, что субъект с большой степенью вероятности имеет респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, а именно, субъект является положительным. Более того, при возрастании измеренного уровня можно определить, что степень развития заболевания и/или тяжесть заболевания являются высокими.
sCD14-ST практически не образуется в крови в случае вирусной респираторной инфекции без бактериальной инфекции. Таким образом, путем измерения sCD14-ST в образце крови респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, можно отличать от вирусной респираторной инфекции.
Кроме того, в способе диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по настоящему изобретению можно проводить тест на по меньшей мере один микроорганизм, являющийся причиной заболевания, в дополнение к измерениям sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта. В качестве такого теста на микроорганизм, являющийся причиной заболевания, можно соответствующим образом выбирать и использовать метод из таких известных методов, как анализ окрашенного мазка, тест на антиген и культуральный тест.
Кроме того, в способе диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по настоящему изобретению можно измерять по меньшей мере один биомаркер, отличный от sCD14-ST, в дополнение к измерению sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта. В качестве такого биомаркера, отличного от sCD14-ST, подходящий маркер можно выбирать среди маркера воспаления, маркера, связанного с тромбозом/гемостазом, маркера инфекции, маркера интерстициальной пневмонии и тому подобных, а затем использовать. Предпочтительные примеры таких биомаркеров включают, но не ограничиваются ими, прокальцитонин, C-реактивный белок (CRP) и KL-6.
Способ диагностики респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, по настоящему изобретению можно также назвать способом выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика. Субъект, у которого была диагностирована респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, является пациентом, который с большой степенью вероятности имеет респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, и, таким образом, субъект может быть предпочтительно выбран для введения ему антибиотиков. Среди таких пациентов с подозрением на респираторную инфекцию, основанном на клинических показателях, пациентами, которым следует вводить антибиотики, являются те, которые имеют респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией. Путем использования измеренного уровня sCD14-ST в образце крови в качестве индикатора, можно диагностировать наличие или отсутствие респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, и, таким образом, становится возможным выбирать пациентов с респираторной инфекцией, которым следует вводить антибиотики. То есть, настоящее изобретение относится к способу выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика, отличающемуся тем, что он включает измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента. К способу выбора пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика по настоящему изобретению можно непосредственно применять аспект способа для диагностирования респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
3. Способ определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик.
Настоящее изобретение относится к способу определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с респираторной инфекцией, принимающему антибиотик, в котором измеренный уровень sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента, используют в качестве индикатора.
Тип пациента, к которому применяют способ определения времени для прекращения введения антибиотика по настоящему изобретению, не имеет особых ограничений, при условии, что он/она является пациентом с респираторной инфекцией, которому вводят антибиотик. Предпочтительным примером является субъект, у которого респираторная инфекция, связанная с бактериальной инфекцией, была диагностирована способом, описанным выше в пункте 2, и который был выбран в качестве пациента с респираторной инфекцией, которому вводят антибиотик.
Способ определения времени для прекращения введения антибиотика по настоящему изобретению отличается тем, что он включает следующие стадии: 1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента; и 2) определение времени для прекращения введения антибиотика пациенту путем использования измеренного уровня sCD14-ST в полученном образце в качестве индикатора. В частности, вышеуказанная стадия 2) может включать следующие стадии: 3) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце с заданным эталонным уровнем; и 4) если измеренный уровень в образце ниже, чем заданный эталонный уровень, принятие решения о прекращении введения антибиотика.
В способе определения времени для прекращения введения антибиотика по настоящему изобретению, если измеряют sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента, его можно измерять с течением времени. В целом, в случае респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, антибиотик вводят в течение периода примерно от 5 до 14 дней. В целях снижения нагрузки на пациентов и предотвращения появления резистентных бактерий желательно прекратить введение антибиотика, как только заживление или улучшение положения дел с инфекцией может быть подтверждено. Путем измерения sCD14-ST с течением времени, время для прекращения введения антибиотика можно определять более точно. Поскольку концентрация sCD14-ST в крови быстро уменьшается при уменьшении и/или исчезновении бактериальной инфекции в дыхательных органах, он полезен в качестве индикатора для определения времени прекращения лечения. Можно соответствующим образом установить период для измерений. Его можно сделать, например, ежедневным, раз в два дня, или на 3-й день, 5-й день или 7-й день после начала введения антибиотика.
Поскольку измерение уровня sCD14-ST в образце используют в качестве индикатора наличия или отсутствия бактериальной инфекции у пациента, то в случае, когда измеренный уровень в образце ниже, чем заданный эталонный уровень, можно определить, что инфекция была устранена или ослаблена, и таким образом определить время прекращения введения антибиотика. Эталонный уровень, используемый в способе для определения времени прекращения введения антибиотика по настоящему изобретению, не имеет особых ограничений, при условии, что его можно использовать для подтверждения эффективности антибиотика. Например, в качестве эталонного уровня можно использовать уровень, составляющий 1/2, 1/5 или 1/10 от уровня sCD14-ST, измеренного за период с момента перед началом введения антибиотика до 24 часов после начала введения антибиотика. В противоположном случае, в качестве эталонного уровня также можно использовать нормальный уровень, основанный на измеренном уровне sCD14-ST в образце крови, полученном от здорового субъекта, как описано выше в аспекте 2. Например, он соответствует среднему уровню +SD, +2SD или +3SD у здоровых субъектов. Если измеренный уровень sCD14-ST находится в диапазоне нормальных уровней, можно считать, что инфекция была устранена или ослаблена до состояния эквивалентного состоянию здоровых субъектов. Предпочтительно, при помощи измеренных ранее уровней sCD14-ST в образцах крови, полученных от здоровых субъектов и от пациентов, имеющих респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, устанавливают пороговый уровень таким образом, что можно оптимизировать чувствительность и/или специфичность в диагностировании болезни. Установленный таким образом пороговый уровень можно использовать в качестве эталонного уровня. Он составляет, например, 500 пг/мл.
Способ определения времени для прекращения введения антибиотика по настоящему изобретению можно также назвать способом выбора пациентов, которым следует прекратить вводить антибиотик, из пациентов с респираторной инфекцией, принимающих антибиотик. Путем определения времени для прекращения введения антибиотика, для пациента намечают прекращение введения антибиотика. Таким образом, способ определения времени для прекращения введения антибиотика имеет тот же смысл, что и смысл способа выбора пациентов, которым следует прекратить вводить антибиотик. То есть, настоящее изобретение относится к способу выбора пациентов, которым следует прекратить вводить антибиотик, из пациентов с респираторной инфекцией, принимающих антибиотик, путем использования измеренных уровней sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов, в качестве индикаторов. К способу выбора пациентов, которым следует прекратить вводить антибиотик, по настоящему изобретению можно непосредственно применять аспект способа определения времени для прекращения введения антибиотика.
4. Способ лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией.
Настоящее изобретение относится к способу лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией. Способ лечения по настоящему изобретению отличается тем, что он включает выбор пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика путем использования измеренного уровня sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта, в качестве индикатора, и он представляет собой способ лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, путем введения антибиотика выбранным таким образом пациентам. В частности, пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика выбирают способом, описанным выше в аспекте 2, а затем антибиотик вводят выбранным пациентам. Кроме того, время для прекращения введения антибиотика определяют способом, описанным выше в аспекте 3, обеспечивая таким образом более эффективное лечение.
Кроме того, настоящее изобретение относится к терапевтическому средству (или терапевтической фармацевтической композиции) для лечения респираторной инфекции, связанной с бактериальной инфекцией, отличающемуся тем, что в нем используют антибиотик способом, который соответствует вышеуказанному способу лечения. Настоящая терапевтическая композиция содержит антибиотик в качестве активного ингредиента. Настоящая терапевтическая композиция может содержать любые фармацевтически приемлемые добавки и/или носители, а также эффективное количество антибиотика.
Типы антибиотиков, используемых в изобретении согласно аспектам, описанным выше в пунктах 2-5, не имеют особых ограничений. Предпочтительными являются антибиотики, которые можно применять по меньшей мере в случае инфекции нижних дыхательных путей и/или пневмонии. Примеры таких антибиотиков включают пенициллиновые антибиотики, пенемовые антибиотики, карбапенемовые антибиотики, цефемовые антибиотики, монобактамовые антибиотики, фосфомициновые антибиотики, гликопептидные антибиотики, аминогликозидные антибиотики, макролидные антибиотики, кетолидные антибиотики, линкомициновые антибиотики, тетрациклиновые антибиотики, новые хинолоновые антибиотики, сульфонамидные антибиотики, оксазолидиновые антибиотики и стрептограминовые антибиотики. Один или несколько антибиотиков можно соответствующим образом выбирать из этих антибиотиков, а затем использовать. Для выбора антибиотиков можно применять известные методы, такие как метод, описанный в книге Японского респираторного общества «The Japanese Respiratory Society Guidelines for Management of Adult Community-Acquired Pneumonia» (Asu no Rinsho, Vol. 19, No. 1, pp. 41-61, 2007).
Далее настоящее изобретение будет более конкретно описано в следующих примерах. Однако данные примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Примеры
(Пример 1) Создание системы измерения sCD14-ST в крови
(1-1) Получение меченного пероксидазой антитела
Для создания системы ELISA сэндвич-типа, антитело F1106-13-3, описанное в международной публикации WO 2004/044005, метили пероксидазой. Во-первых, антитело F1106-13-3 расщепляли лизилэндопептидазой (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) для получения F(ab')2. В частности, антитело F1106-13-3 подвергали диализу против 50 мМ Трис-HCl (pH 8,5), а затем полученное антитело смешивали с лизилэндопептидазой (при молярном соотношении 10:1). Полученную смесь подвергали реакции при 37°C в течение 1 часа. После этого к продукту реакции добавляли TLCK (Sigma) до конечной концентрации 30 мМ, чтобы остановить реакцию. Затем для удаления Fc реакционный раствор наносили на колонку с протеином A (Prosep-A; Millipore) и выделяли неадсорбированный продукт. Полученную таким образом неадсорбированную фракцию концентрировали, а затем очищали гель-фильтрацией (Superdex 75; GE Healthcare) так, что содержащиеся в смеси F(ab')2 были отделены от Fab. Полученные F(ab')2 концентрировали, а затем проводили диализ против 10 мМ карбонатного буфера (рН 9,5).
После этого, в соответствии с методом Nakane et al. (J. Histochem. Cytochem., 22, 1084, 1974), 1 мг пероксидазы (Toyobo Co., Ltd.) растворяли в дистиллированной воде и затем добавляли туда 100 мМ йодной кислоты, растворенной в дистиллированной воде. Полученную смесь подвергали реакции при 25°С в течение 15 минут. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли 1,5% этиленгликоля, и полученную смесь подвергали реакции при 25°С в течение 20 минут. Затем проводили диализ реакционного раствора против 1 мМ ацетатного буфера (рН 4,4). На следующий день добавляли 0,2 M карбонатного буфера (рН 9,5) в расчете на 1 мг антитела F1106-13-3 F(ab')2, а затем 0,8 мг активированной пероксидазы смешивали с вышеуказанной смесью. Полученную таким образом смесь подвергали реакции при 25°С в течение 2 часов. Затем к реакционному раствору добавляли 4 мг/мл боргидрида натрия, и полученную смесь дополнительно подвергали реакции при 4°C в течение 2 часов. Проводили диализ реакционного раствора против PBS (pH 7,4) для получения меченного пероксидазой антитела. Количество жидкости измеряли и затем вычисляли концентрацию антитела, исходя из количества использованного антитела.
(1-2) Получение системы EIA сэндвич-типа
Поликлональное антитело к S68 пептиду, описанное в международной публикации WO 2004/044005, разводили в D-PBS (pH 7,4), получая концентрацию 5 мкг/мл, и затем 50 мкл раствора антитела добавляли в каждую лунку иммунологического планшета (Maxisorp; NUNC). Проводили реакцию антитела при 4°C в течение ночи и затем пять раз промывали ионообменной водой. Затем по 200 мкл D-PBS, содержащего 0,1% StabilGuard (SurModics, Inc.) и 0,1% Tween 20, добавляли в каждую лунку для блокирования. После этого D-PBS (pH 7,4), содержащий 1% CD14-адсорбированной сыворотки и 0,1% БСА, использовали в качестве разбавляющего раствора при получении серийных разведений белкового стандартного продукта sCD14-ST, каждое с концентрацией 0, 0,015, 0,031, 0,063, 0,125, 0,25 или 0,5 нг/мл. В качестве такового использовали белковый стандартный продукт sCD14-ST, rsCD14-ST, описанный в международной публикации WO 2005/108429. 50 мкл каждого из серийных разведений стандартного продукта добавляли в каждую лунку, и полученную смесь подвергали реакции при 25°C течение 1 часа (первая реакция). После завершения реакции реакционную смесь пять раз промывали нормальным физиологическим раствором, содержащим 0,05% Tween 20. После этого 50 мкл антитела F1106-13-3 F(ab')2, меченного пероксидазой, которое было разбавлено до концентрации 0,25 мкг/мл с помощью PBS (рН 7,4), содержащего 2% крысиной сыворотки, 1% мышиной сыворотки и 0,1% Tween 20, добавляли в каждую лунку. Полученную смесь подвергали реакции при 25 °С в течение 1 часа (вторая реакция), и после этого реакционную смесь промывали пять раз таким же образом, как описано выше. Затем в каждую лунку добавляли 50 мкл раствора тетраметилбензидина (TMB, BioFix), и полученную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение 20 минут. После этого к реакционной смеси добавляли 50 мкл 0,5 М серной кислоты для остановки реакции. Оптическую плотность при 450/630 нм измеряли с помощью планшетного спектрофотометра (Multiscan JX; Thermo Electron). Получали стандартную кривую, приведенную на фигуре 1.
(Пример 2) Измерение sCD14-ST в крови
Используя систему EIA сэндвич-типа, полученную в примере 1, измеряли концентрации sCD14-ST в сыворотках (20-кратное разведение) от 10 здоровых субъектов (приобретены у ProMedDx, LLC) и от 6 пациентов с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией (внебольничная пневмония) (приобретены у Bioreclamation, LLC). В результате, как показано в таблице 1, средний уровень концентрации sCD14-ST в образцах крови от здоровых субъектов составлял 577 пг/мл, и SD составляло 159 пг/мл. Средний же уровень у пациентов с пневмонией составлял от 729 до 1067 пг/мл. Как показано на фигуре 2, на которой количество дней после диагностирования пневмонии до дня взятия образцов отложено по оси абсцисс, а концентрация sCD14-ST по оси ординат, меньшее число дней с момента постановки диагноза соответствовало более высокой концентрации, а большее число дней с момента постановки диагноза соответствовало более низкой концентрации. В целом, рекомендовано начинать вводить антибиотик в течение 4 часов после диагностирования пневмонии. Таким образом, было продемонстрировано, что пациенты с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией, имели более высокую концентрацию sCD14-ST в крови, и что симптоматическое улучшение при лечении и снижение концентрации sCD14-ST в крови коррелируют. Таким образом, было продемонстрировано, что путем использования концентрации sCD14-ST в крови в качестве индикатора (например, путем использования среднего уровня у здоровых субъектов + 2SD в качестве порогового значения) можно диагностировать респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, и можно выбирать пациентов для приема антибиотика. Кроме того, было показано, что, если концентрация sCD14-ST в крови ниже, чем эталонный уровень (например, средний уровень у здоровых субъектов + 2SD, или для более жестких условий, средний уровень у здоровых субъектов + SD), можно определять время прекращения введения антибиотика.
Figure 00000001
(Пример 3) Выбор пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика путем использования концентрации sCD14-ST в качестве индикатора
Пациентов с по меньшей мере затрудненным дыханием или кашлем в качестве клинических показателей и с подозрением на наличие респираторной инфекции распределяли в контрольную группу для получения обычного лечения антибиотиком и в группу sCD14-ST для получения лечения антибиотиком с использованием концентрации sCD14-ST в качестве индикатора. В контрольной группе пациенты получали антибиотик по усмотрению врача, как обычно. В группе sCD14-ST пациенты получали антибиотик в зависимости от измеренного уровня sCD14-ST в образце крови; если измеренный уровень sCD14-ST был выше, чем нормальный уровень, введение антибиотика было рекомендовано, а если измеренный уровень sCD14-ST был равен нормальному уровню или ниже, чем нормальный уровень, введение антибиотика не было рекомендовано.
Симптоматическое улучшение в обеих группах пациентов оценивали через 2, 4, 6 или 8 недель после начала исследования. Также оценивали введение антибиотика до 2 или 4 недель после начала исследования. В качестве дополнительной информации, при необходимости, наличие пневмонии, бронхита, обострения хронической обструктивной болезни легких, бронхиальной астмы и тому подобного из инфекций дыхательных путей в обеих группах пациентов проверяли на основании наличия теней при рентгенологическом исследовании, анализа крови, тестирования дыхательной функции и тому подобного.
Симптоматическое улучшение оценивали как улучшение клинических показателей. В качестве дополнительных показателей эффективности можно добавить собственную оценку здоровья пациентами (VAS, анкета QOL и тому подобное) и измеренные уровни sCD14-ST.
В результате, не было никакой разницы в симптоматическом улучшении в обеих группах. Однако введение антибиотиков было значительно уменьшено в группе sCD14-ST. Кроме того, было продемонстрировано, что в группе sCD14-ST подгруппа пациентов с заболеванием, часто связанным с бактериальной инфекцией (например, пневмонией), имела более высокий процент приема антибиотиков, а другая подгруппа пациентов с заболеванием, редко связанным с бактериальной инфекцией (например, бронхиальной астмой), имела более низкий процент приема антибиотиков.
Таким образом, благодаря использованию концентрации sCD14-ST в качестве индикатора можно правильно выбирать пациентов с респираторной инфекцией для приема антибиотика, а применение антибиотика (количество пациентов, принимающих антибиотик, количество принимаемого антибиотика, продолжительность приема или количество рецептов) может быть снижено без ущерба для безопасности и полезности терапии антибиотиками.
(Пример 4) Оптимизация продолжительности приема антибиотика пациентами с пневмонией путем использования концентрации sCD14-ST в качестве индикатора
Пациентов, состояние которых было диагностировано как пневмония на основании клинических показателей, и которые должны были принимать антибиотик, распределяли в группу для получения обычного лечения антибиотиком и в группу sCD14-ST для получения лечения антибиотиком при использовании концентрации sCD14-ST в качестве индикатора. В контрольной группе пациенты прекращали прием антибиотика по усмотрению врача, как обычно. В группе sCD14-ST пациенты получали антибиотик в зависимости от измеренного уровня sCD14-ST в образце крови; если измеряемый уровень sCD14-ST был равен нормальному уровню или был ниже, чем нормальный уровень, было рекомендовано прекращение введения антибиотика. Измерение уровня sCD14-ST предпочтительно проводили с течением времени (например, каждый день после начала приема антибиотика).
Симптоматическое улучшение в обеих группах пациентов оценивали через 2, 4, 6 или 8 недель после начала введения антибиотика. Также оценивали период времени до прекращения введения антибиотика. В качестве дополнительной информации определяли степень тяжести пневмонии у пациентов обеих групп.
Симптоматическое улучшение оценивали как улучшение клинических показателей. В частности, предпочтительно проверяли излечение от пневмонии. В качестве дополнительных показателей эффективности можно добавить собственную оценку здоровья пациентами (VAS, анкета QOL и тому подобное) и измеренные уровни sCD14-ST.
В результате, не было никакой разницы в симптоматическом улучшении в обеих группах. Однако продолжительность введения антибиотика была значительно уменьшена в группе sCD14-ST.
Таким образом, благодаря использованию концентрации sCD14-ST в качестве индикатора можно правильно выбирать время для прекращения введения антибиотика, и продолжительность введения антибиотика можно уменьшать без ущерба для безопасности и полезности терапии антибиотиками.
(Пример 5) Измерение sCD14-ST в крови
Система EIA сэндвич-типа, полученная в примере 1, была пересмотрена и условия первой реакции, описанные в примере 1, были изменены на 25°C в течение 1 часа, а условия второй реакции изменены на 25°C в течение 2 часов. При помощи данной системы измеряли концентрации sCD14-ST в сыворотках (20-кратное разведение) у 9 пациентов с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией, и у 2 пациентов с вирусной пневмонией (приобретены у Bioreclamation, Inc.). В результате, концентрации sCD14-ST в крови пациентов с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией, составляли от 205 до 1680 пг/мл (в среднем, 612 пг/мл), а концентрации у пациентов с вирусной пневмонией составляли от 149 до 379 пг/мл (в среднем, 264 пг/мл). Соответственно, концентрации sCD14-ST в крови пациентов с вирусной пневмонией были ниже, чем средний уровень у здоровых субъектов, и были заметно ниже, чем концентрации у пациентов с пневмонией, связанной с бактериальной инфекцией, нуждающихся в приеме антибиотика (фигура 3). Таким образом, показано, что измерение sCD14-ST в образце крови позволяет отличать респираторную инфекцию, связанную с бактериальной инфекцией, от вирусной респираторной инфекции.
(Пример 6) Период полураспада sCD14-ST в крови
Определяли скорость выведения sCD14-ST из кровотока. 3 собакам (самцы собак породы бигль, возраст 7 или 8 месяцев, приобретены у Kitayama Labes Co., Ltd.) внутривенно вводили рекомбинантный sCD14-ST (rsCD14-ST, описанный в WO 2005/108429) в дозе 10 пг/кг массы тела, и кровь собирали с течением времени до 24 часов после введения. Используя систему EIA сэндвич-типа, описанную в примере 1, измеряли концентрации sCD14-ST в крови.
Кровь отбирали перед введением, через 5 минут, 10 минут, 30 минут, 60 минут, 90 минут, 120 минут, 4 часа и 24 часа после введения, и центрифугированную плазму использовали в качестве образца для измерения.
На фигуре 4 показано изменение концентраций sCD14-ST в крови. Период полураспада sCD14-СТ в крови составлял 25 минут в течение 1 часа после введения, а затем составлял 58 минут, и, таким образом, sCD14-СТ в крови демонстрировал двухфазную кинетику. Концентрация sCD14-СТ в крови через 120 минут после введения сокращалась до примерно 6% от таковой через 5 минут после введения, и sCD14-ST полностью исчезал из кровотока через 24 часа после введения. Таким образом, показано, что выведение sCD14-ST из кровотока происходит очень быстро, когда бактериальная инфекция в дыхательных органах уменьшается или исчезает, концентрация sCD14-ST в крови также быстро снижается, и ее можно соответствующим образом использовать для определения времени прекращения введения антибиотика, и тому подобного.

Claims (44)

1. Способ диагностики инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, у нуждающегося в этом субъекта, включающий:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта;
2) сравнение измеренного уровня sCD14-ST с пороговым значением;
3) дифференциальную диагностику между бактериальной и вирусной инфекциями на основе измеренного уровня sCD14-ST,
при этом повышение измеренного уровня sCD14-ST в сравнении с указанным пороговым значением является индикатором респираторной инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
2. Способ диагностики инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, у нуждающегося в этом субъекта, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от субъекта, и
2) определение того, имеется ли у субъекта респираторная инфекция нижних дыхательных путей, связанная с бактериальной инфекцией, путем сравнения измеренного уровня sCD14-ST в образце с пороговым значением,
при этом повышение измеренного уровня sCD14-ST в сравнении с указанным пороговым значением является индикатором респираторной инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
3. Способ по п.1 или 2, в котором респираторная инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
4. Способ выбора пациентов с инфекцией нижних дыхательных путей для приема антибиотика, включающий:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов;
2) определение того, имеется ли у пациентов инфекция нижних дыхательных путей, связанная с бактериальной инфекцией, путем сравнения измеренных уровней sCD14-ST с пороговым значением,
при этом повышение измеренного уровня sCD14-ST в сравнении с пороговым значением является индикатором инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией;
3) выбор пациентов c указанным повышенным измеренным уровнем sCD14-ST для приема антибиотика,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
5. Способ по п.4, в котором инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
6. Способ определения времени для прекращения введения антибиотика пациенту с инфекцией нижних дыхательных путей, принимающему антибиотик, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента;
2) сравнение измеренного уровня sCD14-ST в образце с пороговым значением, и
3) если измеренный уровень в образце ниже, чем пороговое значение, принятие решения о прекращении введения антибиотика,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
7. Способ по п.6, в котором инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
8. Способ выбора пациентов, которым будет прекращено введение антибиотика, из пациентов с инфекцией нижних дыхательных путей, принимающих антибиотик, включающий следующие стадии:
1) измерение sCD14-ST в образцах крови, полученных от пациентов;
2) сравнение измеренных уровней sCD14-ST в образцах с пороговым значением, и
3) если измеренные уровни в образцах являются более низкими, чем пороговое значение, принятие решения о прекращении введения антибиотика,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
9. Способ по п.8, в котором инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
10. Способ лечения инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, включающий:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента с подозрением на инфекцию нижних дыхательных путей, связанную с бактериальной инфекцией;
2) сравнение измеренного уровня с пороговым значением;
3) если измеренный уровень в образце выше, чем пороговое значение, введение антибиотика пациенту,
где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
11. Способ по п.10, где инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
12. Способ лечения инфекции нижних дыхательных путей, связанной с бактериальной инфекцией, включающий:
1) измерение sCD14-ST в образце крови, полученном от пациента с подозрением на инфекцию нижних дыхательных путей, связанную с бактериальной инфекцией;
2) сравнение измеренного уровня с пороговым значением, где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл;
3) если измеренный уровень в образце выше, чем пороговое значение, введение антибиотика пациенту, где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл;
4) измерение с течением времени sCD14-ST в образцах крови на протяжении периода введения;
5) если измеренный уровень становится более низким, чем пороговое значение, прекращение введения антибиотика, где указанное пороговое значение составляет 577 пг/мл.
13. Способ по п.12, где инфекция нижних дыхательных путей представляет собой пневмонию.
RU2013156363A 2011-05-19 2012-05-18 Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови RU2660352C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2011-112698 2011-05-19
JP2011112698 2011-05-19
PCT/JP2012/062796 WO2012157750A1 (ja) 2011-05-19 2012-05-18 血液検体を用いた呼吸器感染症の診断

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018122057A Division RU2723554C2 (ru) 2011-05-19 2012-05-18 Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2013156363A RU2013156363A (ru) 2015-06-27
RU2660352C2 true RU2660352C2 (ru) 2018-07-05

Family

ID=47177064

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018122057A RU2723554C2 (ru) 2011-05-19 2012-05-18 Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови
RU2013156363A RU2660352C2 (ru) 2011-05-19 2012-05-18 Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018122057A RU2723554C2 (ru) 2011-05-19 2012-05-18 Диагностика инфекционного заболевания дыхательных путей с использованием образцов крови

Country Status (13)

Country Link
US (2) US9291631B2 (ru)
EP (1) EP2711709B1 (ru)
JP (1) JP5956434B2 (ru)
KR (1) KR101935071B1 (ru)
CN (1) CN103649756B (ru)
AU (1) AU2012256682B2 (ru)
BR (1) BR112013029645B1 (ru)
CA (1) CA2836562C (ru)
ES (1) ES2634458T3 (ru)
MX (1) MX352621B (ru)
RU (2) RU2723554C2 (ru)
WO (1) WO2012157750A1 (ru)
ZA (1) ZA201308672B (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2733048C1 (ru) * 2020-07-22 2020-09-28 Рябикова Мария Алексеевна Способ лабораторной диагностики пневмонии
RU2781014C1 (ru) * 2021-12-06 2022-10-04 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Способ и набор праймеров для видоспецифической идентификации возбудителей бактериальной пневмонии человека

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX352625B (es) 2011-05-19 2017-12-01 Mochida Pharm Co Ltd Diagnostico de la enfermedad infecciosa del tracto respiratorio usando especimenes de orina.
JP6474730B2 (ja) * 2012-12-28 2019-03-06 株式会社Ｌｓｉメディエンス ｓＣＤ１４−ＳＴの、心血管疾患若しくは状態又はアテローム性動脈硬化症のマーカーとしての使用
EP3438668A1 (en) * 2017-08-04 2019-02-06 B.R.A.H.M.S GmbH Diagnosis and risk stratification of fungal infections

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2280279A1 (en) * 2008-05-23 2011-02-02 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Method for evaluation of function of phagocyte

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU771448B2 (en) * 1998-05-27 2004-03-25 Gemma Biotechnology Ltd. The induction of antibiotic proteins and peptides by LAIT/sCD14-protein
RU2181290C1 (ru) 2001-04-26 2002-04-20 Открытое акционерное общество "Химико-фармацевтический комбинат "Акрихин" Фармацевтическая композиция, обладающая антимикробным действием
US6984503B1 (en) * 2002-06-27 2006-01-10 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Agriculture Use of recombinant bovine CD14 in the treatment and prevention of coliform mastitis in dairy cows
ATE460430T1 (de) * 2002-11-12 2010-03-15 Mochida Pharm Co Ltd Kit zur untersuchung von menschlichem niedermolekulargewicht cd14 und antikörper
US7608684B2 (en) * 2002-11-12 2009-10-27 Mochida Pharmaceuticals Co., Ltd. Soluble CD14 antigen
CN1787741B (zh) * 2003-05-15 2011-08-17 唐纳士公司 用于预防和治疗败血症的方法与组合物
ES2541683T3 (es) * 2004-02-27 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Método para evaluar la artritis reumatoide mediante la medición del factor reumatoide y la interleuquina-6
CN1968962B (zh) 2004-05-11 2013-07-24 持田制药株式会社 新型可溶性cd14抗原
DE102007009751A1 (de) 2007-02-28 2008-09-04 B.R.A.H.M.S Aktiengesellschaft Verfahren zur selektiven Bestimmung von Procalcitonin 1-116 für diagnostische Zwecke sowie Antikörper und Kits zur Durchführung eines solchen Verfahrens
CN103403549B (zh) * 2011-01-11 2015-11-25 美迪恩斯生命科技株式会社 败血症的预后的预测方法
MX352625B (es) 2011-05-19 2017-12-01 Mochida Pharm Co Ltd Diagnostico de la enfermedad infecciosa del tracto respiratorio usando especimenes de orina.

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2280279A1 (en) * 2008-05-23 2011-02-02 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Method for evaluation of function of phagocyte

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EP 2280279 A1 (MOCHIDA PHARMACEUTICAL CO LTD), 02.02.2011. Современная медицинская энциклопедия. Санкт-Петербург. Норинт, Под ред Р.Беркоу, 2004, стр.154. *
Современная медицинская энциклопедия. Санкт-Петербург. Норинт, Под ред Р.Беркоу, 2004, стр.154. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2733048C1 (ru) * 2020-07-22 2020-09-28 Рябикова Мария Алексеевна Способ лабораторной диагностики пневмонии
RU2781014C1 (ru) * 2021-12-06 2022-10-04 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Способ и набор праймеров для видоспецифической идентификации возбудителей бактериальной пневмонии человека
RU2784653C1 (ru) * 2021-12-06 2022-11-29 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Способ обратной транскрипции, совмещенный с мультиплексной ПЦР для видеоспецифической идентификации возбудителей бактериальной, и вирусной пневмонии человека с иммобилизованными праймерами и биологический микрочип для его осуществления

Also Published As

Publication number Publication date
US20140213507A1 (en) 2014-07-31
AU2012256682B2 (en) 2017-02-02
EP2711709A1 (en) 2014-03-26
MX2013013391A (es) 2013-12-12
RU2723554C2 (ru) 2020-06-16
CN103649756B (zh) 2016-07-06
ZA201308672B (en) 2015-02-25
WO2012157750A1 (ja) 2012-11-22
RU2018122057A3 (ru) 2019-04-23
BR112013029645B1 (pt) 2023-01-24
CA2836562A1 (en) 2012-11-22
KR20140033438A (ko) 2014-03-18
EP2711709A4 (en) 2014-12-17
CN103649756A (zh) 2014-03-19
US20160161506A1 (en) 2016-06-09
US9291631B2 (en) 2016-03-22
AU2012256682A1 (en) 2014-01-16
EP2711709B1 (en) 2017-04-26
CA2836562C (en) 2021-04-27
RU2013156363A (ru) 2015-06-27
ES2634458T3 (es) 2017-09-27
JPWO2012157750A1 (ja) 2014-07-31
RU2018122057A (ru) 2019-03-12
MX352621B (es) 2017-12-01
JP5956434B2 (ja) 2016-07-27
KR101935071B1 (ko) 2019-01-03
BR112013029645A2 (pt) 2022-02-01
BR112013029645A8 (pt) 2022-02-15
US10024869B2 (en) 2018-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI449910B (zh) 評估罹患糖尿病腎病變風險、評估個體中糖尿病腎病變階段、監測個體中糖尿病腎病變發展、及評估個體中糖尿病腎病變的治療有效性之方法
AU2005207111A1 (en) Method of diagnosing infectious disease by measuring the level of soluble TREM-1 in a sample
España et al. Low level of circulating activated protein C is a risk factor for venous thromboembolism
US10024869B2 (en) Diagnosis of respiratory tract infectious disease using blood specimens
US10054585B2 (en) Diagnosis of respiratory tract infectious disease using urine specimens
JP2005106694A (ja) 敗血症早期検出及び重篤度評価
WO2014104305A1 (ja) プレセプシン測定による炎症性腸疾患の診断
JP6445969B2 (ja) プレセプシン測定による発熱性好中球減少症の診断
EP2887068A1 (en) Method for improving the diagnosis of invasive Candida infections by FBA1 protein detection
JP2016085198A (ja) プレセプシン測定による血球貪食症候群の検出