RU2632199C2

RU2632199C2 - Функционализированные производные тиеноиндола для лечения ракового заболевания

Info

Publication number: RU2632199C2
Application number: RU2014143992A
Authority: RU
Inventors: Итало Берия; Микеле Карузо; Виттория ЛУПИ; Паоло Орсини; Маттео Сальса
Original assignee: НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л.
Priority date: 2012-04-05
Filing date: 2013-03-28
Publication date: 2017-10-03
Also published as: US9561290B2; CN104203956B; WO2013149946A1; US20150080316A1; EP2836493A1; HK1204605A1; CN104203956A; RU2014143992A; JP6251236B2; EP2836493B1; ES2686683T3; JP2015512430A

Abstract

Настоящее изобретение относится к новым функционализированным производным тиеноиндола формулы (II) и его фармацевтически приемлемым солям, которые могут быть использованы для получения лекарственного средства для лечения ракового заболевания. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.

Description

Настоящее изобретение относится к новым функционализированным производным тиеноиндола, способам их получения, к содержащей их фармацевтической композиции и к применению этих производных для лечения некоторых опухолей у млекопитающих. Данное изобретение также относится к применению этих производных для получения конъюгатов.

Недостаток селективности химиотерапевтических агентов является главной проблемой при лечении ракового заболевания.

Противораковая терапия в значительной степени основана на цитотоксических лекарственных средствах, воздействующих на быстро пролиферирующие клетки с помощью различных механизмов.

Цитотоксические лекарственные средства ингибируют пролиферацию раковых клеток, обычно посредством вмешательства, прямо или непрямо, в процесс репликации ДНК.

Несмотря на то что эта терапия эффективна при различных типах опухолей, однако она «страдает» от некоторых ограничений: вмешательство в клеточную пролиферацию в самом деле также повреждает нормальные клетки, которые часто пролиферируют. Они включают костный мозг, клетки желудочно-кишечного тракта и волосяные фолликулы. Ограничивающие дозу побочные эффекты часто наблюдаются в этих тканях, приводя к иммуносупрессии, токсичности в желудочно-кишечном тракте и потере волос. Следовательно, концентрации лекарственного средства, которые должны полностью уничтожать опухоль, не могут быть достигнуты из-за вышеуказанных, ограничивающих дозу, побочных эффектов.

В дополнение к недостатку селективности по отношению к опухолевым клеткам цитотоксические лекарственные средства в некоторых случаях проявляют не являющиеся оптимальными физико-химические свойства и отсутствие подходящих фармакокинетических свойств, ограничивая их применение в случае пациентов.

Лекарственное конъюгирование цитотоксических лекарственных средств с молекулами, способными нести лекарственное средство и, таким образом, улучшающими нацеливание на опухоль, или способными модифицировать его фармакокинетические свойства, представляет собой одну из стратегий, которая гарантирует решение вышеуказанных проблем.

Известны различные примеры конъюгирования цитотоксических лекарственных средств с белками, пептидами, аптамерами, полимерами или наночастицами, позволяющего лучше осуществлять доставку к мишени, улучшать растворимость и, в некоторых случаях, другие фармакокинетические свойства, такие как увеличение периода полувыведения из организма или увеличение локальной концентрации лекарственного средства и улучшение рабочих характеристик лекарственного средства. На самом деле, получаемые в результате конъюгаты обладают улучшенными характеристиками с точки зрения растворимости, проницаемости в клетку, in vivo в терапевтическое окно, контролируемого высвобождения, способности достигать мишени в соответствии с природой конкретной молекулы, конъюгированной с цитотоксическим агентом, и т.д.

По этой причине имеется возрастающая потребность в разработке функционализированных цитотоксических агентов, пригодных для конъюгирования с различными типами молекул.

Производные тиеноиндолов, в качестве цитотоксических средств, описаны в патенте Великобритании GB2344818.

Первый объект настоящего изобретения относится к функционализированным производным тиеноиндола, которые, иначе, чем обладающие цитотоксической активностью, также являются пригодными для конъюгирования.

Соответственно, первый объект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I) или (II):

или

где

R₁ и R₂, взятые вместе, образуют группу (D) или (G):

где R₅ означает водород или С₁-С₄-алкил с линейной или разветвленной цепью;

R₃ и R₄, каждый, независимо, означают водород, С₁-С₄-алкил с линейной или разветвленной цепью или С₁-С₄-гидроксиалкил с линейной или разветвленной цепью;

n означает 0, 1 или 2;

каждый из Х независимо означает -О-, -S- или -NR₄-, где R₄ имеет значение, как описано выше;

каждый из Y независимо означает -СН= или -N=;

R₇ и R₈ независимо означают водород, галоген, гидрокси, С₁-С₄-алкокси с линейной или разветвленной цепью, циано, -NHCOOR₃, -C(NH)NH₂ или -NR₃R₄, где R₃ и R₄ имеют значения, как описано выше;

А означает -О-, -NH- или -СО-;

L отсутствует или представляет собой условно-расщепляемый остаток, необязательно расщепленный, после одной или более стадий активации, посредством химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса;

W отсутствует или представляет собой самоудаляющуюся систему, содержащую одну или более самоудаляющихся групп;

Z отсутствует или представляет собой пептидный, непептидный или гибридный, пептидный и непептидный линкер;

RM отсутствует или представляет собой реакционноспособный остаток, присоединенный к одной или более из групп А, L, W или Z;

R₆ представляет собой удаляемую группу;

А₁ отсутствует или представляет собой А, где А имеет значение, как описано выше;

L₁ означает водород или L, где L имеет значение, как описано выше;

или к его фармацевтически приемлемым солям,

при условии, что:

1) когда L₁ означает водород, тогда А₁ означает А;

2) когда А₁ отсутствует, тогда RM не отсутствует.

Отмечают, что, когда L₁ означает водород или условно-расщепляемый остаток и связь О-L₁ является разрушенной, образуя, таким образом, функцию -ОН, тогда соединения формулы (II) могут быть превращены в соединения формулы (I) через посредство полностью изученного механизма реакции, о котором сообщено в литературе (см., например, Baiard R. и др., J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 567-578; Zhao R.Y. и др., J. Med. Chem., 2012, 55, 766-782).

Нужно заметить, что соединение формулы (I) имеет одну функционализацию

так как, согласно определению А, необходимо, чтобы по меньшей мере один из L, W, Z, RM не отсутствовал;

тогда как соединение формулы (II) может иметь одну или две фунционализацию(и).

В особенности, соединение формулы (II) имеет одну функционализацию,

когда А₁ отсутствует

или когда L₁ означает водород:

Соединение формулы (II) имеет две функционализации,

когда А₁ не отсутствует и L₁ не означает водород

Настоящее изобретение также относится к способам синтеза функционализированных производных тиеноиндола, представленных формулой (I) или (II), получаемых способом, состоящим из стандартных синтетических превращений, и к их изомерам, таутомерам, гидратам, сольватам, комплексам, метаболитам, пролекарствам, носителям, N-оксидам.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения ракового заболевания, который включает введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или (II), как описано выше. Млекопитающим, нуждающимся в этом, может быть, например, человек.

Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или (II), как описано выше, для применения в случае способа лечения ракового заболевания, нарушений клеточной пролиферации и вирусных инфекций.

Предпочтительно, соединение формулы (I) или (II), как описано выше, применяют в случае способа лечения раковых заболеваний, таких как: карцинома, как, например, карцинома мочевого пузыря, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, легких, включая мелкоклеточный рак легких, пищевода, желчного пузыря, яичников, поджелудочной железы, желудка, шеи, щитовидной железы, предстательной железы и кожи, включая карциному сквамозных клеток; гемопоэтические опухоли лимфатического происхождения, включая лейкемию, острый лимфоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, лимфому В-клеток, лимфому Т-клеток, лимфому Ходжкина, не относящуюся к лимфоме Ходжкина лимфому, лейкоз ворсистых клеток и лимфому Беркитта; гемопоэтические опухоли миелоидного происхождения, включая острую и хроническую миелогенную лейкемию, миелодиспластический синдром и промиелоцитную лейкемию; опухоли мезенхимного происхождения, включая фибросаркому и рабдомиосаркому; опухоли центральной и периферической нервной системы, включая астроцитому, нейробластому, глиому и шванному; другие опухоли, включая меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоксантому, фолликулярный рак щитовидной железы, саркому Капоши и мезотелиому.

Кроме того, соединение формулы (I) или (II), как описано выше, применяют в случае способа лечения специфических нарушений клеточной пролиферации, таких как, например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы, семейный аденоматоз (диффузный полипоз, FAP), нейрофиброматоз, псориаз, васкулярная гладкомышечная клеточная пролиферация, связанная с атеросклерозом, фиброз легких, артрит, гломерулонефрит и послеоперационный стеноз и рестеноз.

В дополнение, соединение формулы (I) или (II), как описано выше, применяют в случае способа ингибирования ангиогенеза и метастазирования опухоли, а также в случае способа лечения отторжения трансплантата органа и реакции «трансплантат против хозяина».

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединений формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемых солей, как описано выше, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель и/или разбавитель.

Настоящее изобретение, далее, относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) или (II) и один или более химиотерапевтических агентов.

Настоящее изобретение, далее, относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) или (II), в комбинации с известными противораковыми терапиями, как, например, схемы лечения путем лучевой терапии или химиотерапии, в комбинации с цитостатическими или цитотоксическими агентами, агентами типа антибиотиков, алкилирующими агентами, антиметаболитами, гормональными агентами, иммунологическими агентами, агентами типа интерферона, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторы СОХ-2), ингибиторами матриксметаллопротеазы, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, агентами рецептора против фактора роста, анти-HER2-агентами, анти-EGFR-агентами, агентами против ангиогенеза (например, ингибиторы ангиогенеза), ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами пути сигнальной трансдукции ras-raf, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, агентами связывания тубулина, ингибиторами топоизомеразы I, ингибиторами топоизомеразы II, и т.п.

Дополнительно, данное изобретение относится к продукту, содержащему соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль, как описано выше, и один или более химиотерапевтических агентов, в виде комбинированного готового лекарственного средства для одновременного, раздельного или последовательного применения при противораковой терапии.

Еще в другом аспекте данное изобретение относится к соединению формулы (I) или (II) или к его фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, для применения в качестве лекарственного средства.

Кроме того, данное изобретение относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, при получении лекарственного средства с противораковой активностью.

В заключение, данное изобретение относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, для получения конъюгатов.

За исключением иначе указанного, следующие термины и фразы, как используемые в данном контексте, имеют следующие значения.

Соединение формулы (I), где R₁ и R₂, взятые вместе, означают (D), R₅ означает метил, R₃, R₄, R₇ и R₈ означают водород, n означает 0 или 1, Х означает -NH-, Y означает -СН=, и А, L, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, представляет собой соединение формулы (Ia):

Соединение формулы (II), где R₁ и R₂, взятые вместе, означают (D), R₅ означает метил, R₃, R₄, R₇, R₈ и L₁ означают водород, n означает 0 или 1, Х означает -NH-, Y означает -СН=, R₆ означает хлор, и А₁, L, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, представляет собой соединение формулы (IIa):

Соединение формулы (II), где R₁ и R₂, взятые вместе, означают (D), R₅ означает метил, R₃, R₄, R₇ и R₈ означают водород, n означает 0 или 1, Х означает -NH-, Y означает -СН=, R₆ означает хлор, L₁ имеет значение, как описано выше, за исключением водорода, и А₁, L, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, представляет собой соединение формулы (IIb):

Под термином «С₁-С₄-алкил с линейной или разветвленной цепью» авторы данного изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил.

Под термином «С₁-С₄-гидроксиалкил с линейной или разветвленной цепью» авторы данного изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, 2-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил, 2-гидроксипропил, 4-гидроксибутил, 3-гидроксибутил, 2-гидроксибутил.

Под термином «С₁-С₄-алкокси с линейной или разветвленной цепью» авторы данного изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, метокси, этокси, пропокси и т.д.

Под термином «галоген» авторы данного изобретения подразумевают фтор, хлор, бром или иод.

Под термином «С₁-С₄-аминоалкил с линейной или разветвленной цепью» авторы данного изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 2-аминоэтил, 4-аминобутил, 3-аминобутил, 3-аминобутил и т.д.

Термин «С₃-С₈-циклоалкил», как используемый в данном контексте, относится к насыщенному или ненасыщенному неароматическому полностью углеродному моноциклу, который может состоять из одного цикла или двух или более циклов, конденсированных вместе. Примеры включают, но не исчерпывающим образом, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклопентадиенил, циклогексил, циклогексенил, 1,3-циклогексадиенил, декалинил и 1,4-циклогексадиенил.

Термин «гетероциклил», как используемый в данном контексте, относится к насыщенному или ненасыщенному неароматическому С₄-С₈-карбоциклу, который может состоять из одного цикла или двух или более циклов, конденсированных вместе, где от 1 до 4 атомов углерода заменены гетероатомами, такими как атомы азота, кислорода, серы, где вышеуказанные гетероатомы могут быть непосредственно связаны друг с другом, атомы азота и серы необязательно могут быть окислены и атом азота необязательно может быть кватернизирован. Неисчерпывающие примеры гетероциклильных групп представляют собой, например, тетрагидрофуранил, пирролидинил, пиперидинил, 1,4-диоксанил, декагидрохинолинил, пиперазинил, оксазолидинил и морфолинил.

Термин «арил», как используемый в данном контексте, относится к моно-, би- или поликарбоциклическим углеводородным системам с 1-4 циклами, далее, необязательно конденсированными или связанными друг с другом с помощью одинарных связей, где по меньшей мере один из карбоциклов является ароматическим, где термин «ароматический» относится к полностью конъюгированной системе с π-электронной связью. Неисчерпывающие примеры таких арильных групп представляют собой фенил, α- или β-нафтил или антраценил.

Термин «гетероарил», как используемый в данном контексте, относится к ароматическим гетероциклам, обычно 4-7-членным гетероциклам, с 1-4 гетероатомами, выбираемыми из атомов кислорода, азота и серы, где атомы азота и серы необязательно могут быть окислены и атом азота необязательно может быть кватернизирован; вышеуказанный гетероарильный цикл необязательно, далее, может быть конденсированным или связанным с одним или двумя или более циклами, конденсированными вместе, ароматическими и неароматическими карбоциклами и гетероциклами. Гетероатомы могут быть непосредственно связаны друг с другом. Примеры гетероарильных групп включают, но неисчерпывающим образом, пиридинил, пиримидил, фуранил, пирролил, триазолил, пиразолил, пиразинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, имидазолил, тиенил, индолил, бензофуранил, бензимидазолил, бензотиазолил, пуринил, индазолил, бензотриазолил, бензизоксазолил, хиноксалинил, изохинолил и хинолил. В одном воплощении гетероарильная группа содержит 1-4 гетероатома. Нужно заметить, что термин «С₁-гетероарильная группа» означает, что имеется только один атом углерода, присутствующий в циклической системе гетероароматической группы (таким образом, не считаются атомы углерода в необязательных заместителях). Пример такой гетероароматической группы представляет собой тетразолильную группу.

Термин «удаляемая группа» относится к группе, которая может быть заменена другой группой по реакции замещения. Такие удаляемые группы являются хорошо известными в данной области, и примеры включают, но не исчерпывающим образом, галогенид (фторид, хлорид, бромид и иодид), азид, сульфонат (например, необязательно замещенный С₁-С₆-алкансульфонат, такой как метансульфонат и трифторметансульфонат, или необязательно замещенный С₇-С₁₂-алкилбензолсульфонат, такой как п-толуолсульфонат), сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, карбоксилат, аминокарбоксилат (карбамат) и алкоксикарбоксилат (карбонат). Для замещений в случае насыщенного атома углерода, галогениды и сульфонаты являются предпочтительными удаляемыми группами. Для замещений в случае карбонильного углерода, галогенид, сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, карбоксилат или алкоксикарбоксилат (карбонат), например, могут быть использованы в качестве удаляемой группы. Термин «удаляемая группа» также относится к группе, которую удаляют в результате реакции элиминирования, например, при реакции электронного каскада или реакции спироциклизации. В этом случае галогенид, сульфонат, азид, аминокарбоксилат (карбамат) или алкоксикарбоксилат (карбонат), например могут быть использованы в качестве удаляемой группы.

Термин «активный сложный эфир» относится к функциональной группе, в которой алкоксильная группа сложноэфирного остатка представляет собой подходящую удаляемую группу. Примеры таких алкоксильных групп включают, но не исчерпывающим образом, сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, 1-гидроксибензотриазол и 1-гидрокси-7-азабензотриазол, и группы со сравнимой способностью к удалению. Незамещенные алкоксильные группы на основе алкила, такие как метокси, этокси, изопропокси и трет-бутокси, не квалифицируют как подходящие удаляемые группы, и, следовательно, метиловые, этиловые, изопропиловые и трет-бутиловые сложные эфиры не рассматриваются как являющиеся активными сложными эфирами.

Термин «нуклеофилы» относится к молекулам, которые имеют нуклеофильную группу. Термин «нуклеофильная группа» относится к группам, которые отдают электронную пару электрофильной группе с образованием химической связи при химической реакции. Примеры таких нуклеофильных групп включают, но не исчерпывающим образом, галогены, амины, нитриты, азиды, спирты, алкоксид-анионы, карбоксилат-анионы, тиолы, тиоляты и т.д.

Термин «электрофильная группа» относится к группам, которые принимают электронную пару от нуклеофильной группы с образованием химической связи при химической реакции. Примеры таких электрофильных групп включают, но не исчерпывающим образом, сложные эфиры, альдегиды, амиды, кетоны и т.д.

Термин «алкилирующий остаток» относится к структуре, которая остается после разрыва одной или более расщепляемых связей и которая может или не может представлять собой ковалентную связь в случае нити нуклеиновой кислоты.

Термин «неприродная аминокислота» относится к D-стереоизомеру встречающейся в природе аминокислоты.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) или (II) включают аддитивные соли с неорганическими или органическими кислотами, например с азотной, соляной, бромоводородной, серной, хлорной, фосфорной, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой, фумаровой, молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансульфоновой, изетионовой и салициловой кислотой.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) или (II) также включают соли с неорганическими или органическими основаниями, например с гидроксидами, карбонатами или бикарбонатами щелочных или щелочноземельных металлов, в особенности натрия, калия, кальция, аммония или магния, ациклическими или циклическими аминами.

Если стереогенный центр или другая форма изомерного центра присутствует в соединении согласно настоящему изобретению, подразумевают, что все формы такого изомера или изомеров, включая энантиомеры и диастереомеры, включены в данный контекст. Соединения, содержащие стереогенный центр, могут быть использованы в виде рацемической смеси, энантиомерно-обогащенной смеси, или рацемическая смесь може быть разделена, используя хорошо известные способы, и может быть использован исключительно индивидуальный энантиомер. В случаях где соединения имеют ненасыщенные двойные связи «углерод-углерод», как цис(Z)-, так и транс(Е)-изомеры входят в рамки данного изобретения.

В случаях когда соединения могут существовать в таутомерных формах, каждую форму рассматривают как включенную в рамки данного изобретения, существующую ли в равновесии или, преимущественно, в одной форме.

Условно-расщепляемый остаток L

Остаток L, если присутствует, представляет собой условно-расщепляемую группу, которая может быть расщеплена посредством химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса после введения в процесс или при некоторых условиях. Одним из таких условий может быть, например, введение соединения согласно данному изобретению в водную среду, что приводит к гидролизу остатка L, или введение соединения согласно данному изобретению в среду, которая содержит фермент, который распознает и расщепляет остаток L, или введение соединения согласно данному изобретению в условия восстановления, что приводит к восстановлению и/или удалению остатка L, или введение соединения согласно данному изобретению в условия окисления, что приводит к окислению и удалению остатка L, или введение соединения согласно данному изобретению в контакт с излучением, как, например, УФ-излучение, что приводит к расщеплению остатка L, или введение соединения согласно данному изобретению в контакт с нагревом, что приводит к расщеплению остатка L. Это условие может встречаться непосредственно после введения соединения согласно данному изобретению животному, например млекопитающему, например человеку, вследствие присутствия повсеместных ферментов в системе кровообращения. Альтернативно, вышеуказанное условие может встречаться, когда соединение локализуется в определенном органе, ткани, клетке, субклеточной мишени или бактериальной, вирусной или микробной мишени, например, за счет присутствия внутренних факторов (например, конкретные ферменты-мишени или гипоксия) или за счет наложения внешних факторов (например, радиация, магнитные поля).

Расщепление остатка L означает, что связь между А и L в соединении формулы (I), или между А₁ и L, или между кислородом и L₁ в соединении формулы (II) разорвана:

или

Отмечают, что в соединении формулы (II) могут присутствовать две условно-расщепляемые группы. В этом случае два остатка могут или не могут быть одинаковыми и могут или не могут нуждаться в одних и тех же условиях для расщепления.

В одном воплощении L может представлять собой остаток, который расщепляется за счет фермента или гидролитического условия, имеющегося поблизости от или внутри клеток-мишеней, по сравнению с другими частями организма, или за счет фермента или гидролитического условия, которое имеется только поблизости от или внутри клеток-мишеней. Важно понимать, что, если специфичность места-мишени достигается, только базируясь на селективном превращении и/или расщеплении относительно вышеуказанного L в месте-мишени, условие, вызывающее расщепление, должно быть, предпочтительно, по меньшей мере до некоторой степени, специфическим для места-мишени. В одном воплощении расщепление L происходит внутриклеточно.

В другом воплощении расщепление L происходит внеклеточно.

В другом воплощении расщепление L происходит с помощью повсеместного внутриклеточного фермента.

В одном предпочтительном воплощении L может представлять собой остаток, который расщепляется с помощью повсеместных ферментов, как, например, эстеразы, которые присутствуют в системе кровообращения, или внутриклеточные ферменты, такие как, например, протеазы и фосфатазы, или посредством контролируемого по рН гидролиза. Следовательно, L может образовывать, необязательно вместе с присоединенным атомом А или атомом кислорода, карбонат, карбамат, карбамид, сложный эфир, амид, имин, гидразон, гидразид, дисульфид, простой эфир, ацеталь, кеталь или фосфатную группу, которая может быть расщеплена in vivo.

В более предпочтительном воплощении А означает -О- и L представляет собой группу, выбираемую из -NHCOR₉ (IIIa); -NHCONHR₉ (IIIb); -NHCOOR₉ (IIIc); -NHR₉ (IIId);

и

где:

R₉ и R₁₀, каждый, независимо, отсутствуют, означают водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбираемую из группы, состоящей из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью;

n₁ представляет собой целое число от 0 до 4, и n имеет значение, как описано выше.

В соответствии с настоящим изобретением и за исключением иначе предусмотренного вышеуказанные группы R₉ и R₁₀ могут быть необязательно замещены, в любом из их свободных положений, с помощью одной или более групп, например с помощью 1-3 групп, независимо выбранных из: галогена, С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, полифторированного алкила, С₁-С₄-алкокси с линейной или разветвленной цепью, полифторированного алкокси, гидрокси, амино, С₁-С₄-алкиламино с линейной или разветвленной цепью, диалкиламино, С₁-С₄-алкилкарбонила, С₃-С₈-циклоалкила, циклоалкилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила.

В другом более предпочтительном воплощении А означает -N- и L представляет собой группу, выбранную из:

и

где:

R₉ и n₁ имеют значения, как описано выше.

В другом более предпочтительном воплощении А означает С=О и L представляет собой группу, выбираемую из:

и

где:

R₉, R₁₀ и n₁ имеют значения, как описано выше.

В другом более предпочтительном воплощении L отсутствует.

Самоудаляющаяся система W

Группа W, если присутствует, представляет собой самоудаляющуюся систему, содержащую одну или более самоудаляющихся групп, которая в соединении формулы (I) устойчиво связана, с одной стороны, с остатком L или А (если L отсутствует) и, с другой стороны, с Z или RM (если Z отсутствует); в соединении формулы (II) группа W устойчиво связана, с одной стороны, с остатком L или А₁ (если L отсутствует), или с остатком L₁, и, с другой стороны, с Z или RM (если Z отсутствует). Связь между W и L (или А) или между W и L₁ (или кислородом) может становиться лабильной после активации посредством химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса, после введения в процесс или при некотором условии, как описано выше, необязательно приводя к высвобождению соответствующих остатков:

или

Отмечают, что в соединении формулы (II) могут присутствовать две самоудаляющиеся системы. В этом случае две системы могут или не могут быть одинаковыми и могут или не могут нуждаться в одних и тех же условиях для расщепления.

Самоудаляющуюся систему можно вводить в соединение формулы (I) или (II), например, для улучшения растворимости или для увеличения расстояния между алкилирующим остатком и реакционноспособным остатком (RM); в дополнение, вышеуказанная самоудаляющаяся система может модулировать реакционноспособность RM против нуклеофилов.

Самоудаляющиеся системы известны квалифицированному специалисту в данной области: см., например, таковые, описанные в Международных заявках WO 2002/083180 и WO 2004/043493; или таковые, описанные Tranoy-Opalinsi A. и др., Anticancer Agents in Medicinal Chemistry, 2008, 8. 618-637. Другие примеры самоудаляющихся систем включают, но не исчерпывающим образом, необязательно замещенные амиды 4-аминомасляной кислоты, соответствующим образом замещенные бицикло[2,2,1]- и бицикло[2,2,2]-циклические системы или амиды 2-аминофенилпропионовой кислоты (см. Международные заявки WO 2005/079398, WO 2005/105154 и WO 2006/012527; Greenwald R.B. и др., Adv. Drug Delivery Rev., 2003, 55, 217-250; Kingsbury W.D. и др., J. Med. Chem., 1984, 27, 1447-1451).

В одном предпочтительном воплощении W может образовывать, вместе с присоединенными группами L, Z или RM, карбонатную, карбаматную, карбамидную, сложноэфирную, амидную, простую эфирную или тиоамидную связующую группу, которая может быть необязательно подвергнута расщеплению после активации.

В более предпочтительном воплощении W представляет собой самоудаляющуюся систему, содержащую одну или более самоудаляющихся групп, независимо выбранных из:

и

где

один из R₉ и R₁₀ отсутствует, а другой имеет значение, как описано выше;

R₁₁ и R₁₂, каждый, независимо, означают водород, галоген, метил, этил или С₁-С₄-гидроксиметил с линейной или разветвленной цепью;

m представляет собой целое число от 0 до 3; и

А₂ означает -СН₂, -СН₂NR₁₂ или -NR₁₂-, где R₁₂ имеет значение, как описано выше.

В другом более предпочтительном воплощении W представляет собой группу, выбранную из:

и

где

один из R₉ и R₁₀ отсутствует, а другой имеет значение, как описано выше; и

R₁₁ имеет значение, как описано выше.

В другом более предпочтительном воплощении W отсутствует.

Линкер Z

Линкер Z, если присутствует, может быть пептидным (Z₁), непептидным (Z₂) или гибридным (Z₃), где вышеуказанный гибридный линкер представляет собой пептидный и непептидный линкер; в соединении формулы (I) или (II), вышеуказанный линкер Z может быть отщеплен от W за счет химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса, после введения в процесс или при некоторых условиях, как описано выше:

или

Линкер Z может быть линейным или разветвленным.

Связь между Z и остатком с его левой стороны или между Z и, необязательно, RM может представлять собой амидную, карбонатную, дисульфидную или карбаматную связь.

В одном воплощении Z представляет собой пептидный линкер Z₁, который может быть расщеплен с помощью протеолитического фермента, например плазмина, катепсина, как, например, катепсин В, β-глюкуронидазы, галактозидазы, простат-специфического антигена (PSA), активатора плазминогена типа урокиназы (u-PA) или члена семейства матриксметаллопротеиназ.

В другом воплощении Z представляет собой непептидный линкер Z₂, который может содержать один или более непептидных растворимых в воде остатков: в этом случае линкер способствует растворимости в воде соединения формулы (I) или (II).

В другом воплощении Z₂ представляет собой непептидный линкер, который может содержать один или более непептидных остатков, которые уменьшают агрегацию соединения формулы (I) или (II), которая может или не может быть остатком/остатками, который(ые) также увеличивает(ют) растворимость в воде соединения формулы (I) или (II).

Например, непептидные растворимые в воде линкеры Z₂ могут содержать остаток олигоэтиленгликоля или полиэтиленгликоля или его производное.

В другом воплощении Z представляет собой гибридный линкер Z₃, который может содержать оба, пептидный и непептидный остатки общей формулы:

Z₁-Z₂ или Z₂-Z₁,

где Z₁ и Z₂ имеют значения, как описано выше. Гибридные линкеры могут способствовать растворимости соединения формулы (I) или (II) и/или могут быть субстратом, расщепляемым протеолитическим ферментом, например, с помощью члена семейства матриксметаллопротеиназ.

В предпочтительном воплощении Z₁ представляет собой отдельную аминокислоту, остаток дипептида, трипептида, тетрапептида или олигопептида, включая природные L-аминокислоты, неприродные D-аминокислоты, синтетические аминокислоты или любую их комбинацию, где один из С-терминального или N-терминального аминокислотного остатка связан с W (L или А или -О-), а другие терминальные аминокислотные концы с группой -СООН или -NH₂ связаны с RM.

В более предпочтительном воплощении Z₁ представляет собой дипептид или трипептид, связанный через его С-терминальный конец с W или L, когда W отсутствует, или с А, когда W и L, оба, отсутствуют.

В другом более предпочтительном воплощении С-терминальный аминокислотный остаток дипептида или трипептида выбирают из глицина, аланина, аргинина и цитруллина; и N-терминальный аминокислотный остаток выбирают из любой природной или неприродной аминокислоты; предпочтительно, в случае трипептида, средний аминокислотный остаток выбирают из аланина, валина, лейцина, изолейцина, метионина, фенилаланина и пролина.

В другом более предпочтительном воплощении Z₁ включает пентапептид, где С-терминальный аминокислотный остаток выбирают из любой природной или неприродной аминокислоты, а N-терминальный аминокислотный остаток представляет собой 6-аминогексановую кислоту.

В предпочтительном воплощении Z₂ может содержать остаток олигоэтиленгликоля или полиэтиленгликоля или его производное.

В более предпочтительном воплощении Z₂ представляет собой группу, выбранную из:

и

где

р представляет собой целое число от 1 до 20.

В предпочтительном воплощении Z₃ представляет собой гибридный остаток, содержащий:

пептидный остаток Z₁, где Z₁ представляет собой отдельную аминокислоту, трипептид или тетрапептид, включая природные L-аминокислоты и неприродные D-аминокислоты; и

непептидный остаток Z₂, содержащий остаток олигоэтиленгликоля или полиэтиленгликоля или его производное.

В другом воплощении Z отсутствует.

Реакционноспособный остаток RM

Остаток RM, если присутствует, представляет собой электрофильную группу, которая может вступать во взаимодействие с нуклеофилами при относительно мягких условиях и без необходимости предшествующей функционализации реакционноспособного остатка; вышеуказанная реакция между реакционноспособным остатком и вышеуказанным нуклеофилом требует только использования некоторого количества тепла, давления, катализатора, кислоты и/или основания.

Следовательно, когда остаток RM присутствует, соединение формулы (I) или (II) образует конъюгаты с различными видами нуклеофилов.

Когда остаток RM отсутствует, соединение формулы (I) или (II) образует конъюгаты с различными видами электрофилов за счет одной или более нуклеофильных групп, которые имеются в остатке(остатках) А, А₁, L, W и Z.

В соединении формулы (I) RM присоединен к одной из групп А, L, W или Z; в соединении формулы (II) RМ присоединен к одной из групп А₁, L, L₁, W, Z или к атому кислорода:

или

Примеры реакционноспособных остатков включают, но не исчерпывающим образом, карбамоилгалогенид, ацилгалогенид, активный сложный эфир, ангидрид, α-галогенацетил, α-галогенацетамид, малеимид, изоцианат, изотиоцианат, дисульфид, тиол, гидразин, гидразид, сульфонилхлорид, альдегид, метилкетон, винилсульфон, галогенметил и метилсульфонат.

В одном предпочтительном воплощении данного изобретения, когда нуклеофильная группа у нуклеофила представляет собой -NH-, -NH₂ или -OH, реакционноспособный остаток RM представляет собой, не исчерпывающим образом, группу, выбранную из:

и

где R₁₃ означает С₁-С₃-алкил или электроноакцепторную группу, включающую группы -NO₂ и -CN;

r представляет собой целое число от 0 до 7; и

R₁₁ и R₁₂ имеют значения, как описано выше.

В другом предпочтительном воплощении данного изобретения, когда нуклеофильная группа у нуклеофила представляет собой СООН, реакционноспособный остаток RM представляет собой, не исчерпывающим образом, группу, выбираемую из:

и

В другом предпочтительном воплощении данного изобретения, когда нуклеофильная группа у нуклеофила представляет собой -SH, реакционноспособный остаток RM представляет собой, не исчерпывающим образом, группу, выбираемую из:

и

где R₁₃ имеет значение, как описано выше.

Особенно предпочтительными являются соединения формулы (Ia):

где

А означает -О- или -NH-;

L отсутствует или представляет собой:

W отсутствует или представляет собой:

Z отсутствует или представляет собой:

или

RM отсутствует или представляет собой:

Другими, особенно предпочтительными, соединениями являются соединения формулы (IIa):

где

А₁ означает А и А означает -О- или -NH-;

L отсутствует или представляет собой:

W отсутствует или представляет собой:

Z отсутствует или представляет собой:

или

RM отсутствует или представляет собой:

Другими, особенно предпочтительными соединениями являются соединения формулы (IIb):

где

А₁ означает А и А означает -О- или -NH-;

L отсутствует или представляет собой:

W отсутствует или представляет собой:

Z отсутствует или представляет собой:

или

RM отсутствует или представляет собой:

Конкретные, не исчерпывающие, предпочтительные соединения (соед.) согласно настоящему изобретению, необязательно в виде фармацевтически приемлемой соли, представляют собой следующие:

1. (8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,

2. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамид,

3. (8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилат,

4. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид,

5. (8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,

6. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамид,

7. (8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилат,

8. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид,

9. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамид,

10. N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамид,

11. N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамид,

12. N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамид,

13. (8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,

14. (8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,

15. (8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилат,

16. (8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилат,

17. N-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид, и

18. N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-фенилаланинамид.

В отношении ссылки на какое-либо конкретное соединение формулы (I) или (II) согласно данному изобретению, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, см. экспериментальную часть и прилагаемую формулу изобретения.

Настоящее изобретение также относится к способу получения соединения формулы (I) или (II), как описано выше, посредством использования путей реакций и схем синтеза, описанных ниже, применяя методики, имеющиеся в распоряжении в области техники, к которой относится данное изобретение, и легко доступные исходные вещества. Получение соединений согласно некоторым воплощениям настоящего изобретения описано в нижеследующих примерах, однако квалифицированным специалистам в данной области должно быть понятно, что описанные получения могут быть без труда адаптированы к получению соединений согласно другим воплощениям настоящего изобретения. Например, синтез не проиллюстрированных примерами соединений согласно данному изобретению может быть осуществлен путем модификаций, очевидных квалифицированным специалистам в данной области, например с помощью соответственной защиты интерферирующих групп, путем замены на другие подходящие реагенты, известные в данной области, или за счет осуществления рутинных модификаций условий реакции. Альтернативно, другие реакции, указанные в данном контексте или известные в данной области, должны быть признаны как обладающие адаптируемостью к получению других соединений согласно данному изобретению.

Всем квалифицированным специалистам в данной области должно быть понятно, что любое превращение, осуществляемое в соответствии с вышеуказанными способами, может требовать стандартных модификаций, таких как, например, защита интерферирующих групп, замена на другие подходящие реагенты, известные в данной области, или осуществление рутинных модификаций условий реакции.

Настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I) или (II), как описано выше, отличающемуся тем, что способ включает следующие стадии:

b) введение во взаимодействие соединения формулы (Х):

где Х, Y, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, и А₁ означает А, где А представляет собой насыщенную группу, выбранную из ОН, NH₂ и COOH,

с соединением формулы (XIII):

где R₁₆ отсутствует, означает водород, галоген, -ОН или -OR₁₇, где R₁₇ представляет собой активирующий остаток карбоксильной группы, например, активирующие сложные эфиры, или представляет собой активирующую группу -NH, предпочтительно, тозил, и

L, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, и по меньшей мере один из них присутствует;

с) введение во взаимодействие полученного соединения формулы (VIII):

где Х, Y, A₁, R₇, R₈, L, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше, с соединением формулы (IX):

где R₁₄ означает водород или защитную группу и R₁, R₂, R₃, R₄ и R₆ имеют значения, как описано выше;

необязательно,

d) введение во взаимодействие полученного соединения формулы (II)’:

где R₁, R₂, R₃, R₄, R₆, Х, Y, A₁, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, и L, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, и по меньшей мере один из них присутствует, с соединением формулы (XIII), как описано выше, с получением соединения формулы (II)”:

где L₁ имеет значение, как описано выше, за исключением водорода,

R₁, R₂, R₃, R₄, R₆, Х, Y, A₁, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, и

или

b’) введение во взаимодействие соединения формулы (Х), как описано выше, с соединением формулы (IX), как описано выше;

c’) введение во взаимодействие полученного соединения формулы (XIV):

где R₁, R₂, R₃, R₄, R₆, Х, Y, A₁, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, с соединением формулы (XIII), как описано выше;

необязательно,

d) введение во взаимодействие полученного соединения формулы (II)’, как описано выше, или

d’) введение во взаимодействие полученного соединения формулы (II)””:

где R₁, R₂, R₃, R₄, R₆, Х, Y, A₁, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, и

L₁, W, Z и RM имеют значения, как описано выше, и по меньшей мере один из них присутствует,

с соединением формулы (XIII), как описано выше, с получением соединения формулы (II)”, как описано выше;

необязательно,

а) превращение соединения формулы (II)’, полученного на стадии с) или c’), с получением соединения формулы (I), как описано выше,

или его фармацевтически приемлемых солей.

Соответственно, получение соединения формулы (I) или (II) представлено на нижеприводимой схеме 1.

Схема 1

В соответствии со стадией а), введение во взаимодействие осуществляют с помощью хорошо известной методики, описанной в области техники, к которой относится данное изобретение (см., например, Boger D.L.; J. Am. Chem. Soc., 1996, 118, 2301-2302). В примере, который не предназначен для ограничения данного способа, используют щелочные условия, такие как, например, использование ТЕА, NaHCO₃ или DBU. Введение во взаимодействие осуществляют в DCM или ДМФА или в их смеси, при температуре в диапазоне от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов.

В соответствии со стадиями b), c), d), b’), c’) и d’), реакцию связывания осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно, ДМФА, необязательно, в присутствии конденсирующего агента, такого как, например, DCС, EDC; предпочтительно, введение во взаимодействие осуществляют при температуре в диапазоне от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов (в отношении обычных реагентов связывания, см., например, Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry: Building Blocks, Catalysis and Coupling Chemistry, том 3; Andrew B. Hugnes, Ayman El-Faham, Fernando Albericio). См. также конкретные химические условия, описанные в нижеприводимой экспериментальной части.

В соответствии со стадией с’), реакция связывания соединения формулы (II)’” c соединением формулы (XIII) может быть направлена на получение соединения формулы (II)’ или (II)”” в соответствии с положением защитных групп.

Предпочтительно, соединение формулы (II), где RM отсутствует, а L₁, R₁, R₂, R₃, R₄, R₆, Х, Y, A₁, R₇, R₈, L, W, Z и n имеют значения, как описано выше, вводят во взаимодействие:

е) с соединением формулы (VII):

R₁₆-RM (VII)

где R₁₆ имеет значение, как описано выше, и RM имеет значение, как описано выше, но не отсутствует, с получением соответствующего соединения формулы (II), где RM имеет значение, как описано выше, но не отсутствует.

В соответствии со стадией е), связывание осуществляют, как описано в п. b) выше.

Предпочтительно, соединение формулы (Х), где А₁ означает -ОН и Х, Y, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, вводят во взаимодействие:

f) с соединением формулы (XIII):

где R₁₆ отсутствует,

L представляет собой группу формулы (IIIf)’ или (IIIg)’:

или

где R₉ означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбираемую из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью, и

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₉ отсутствует и,

по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,

с получением соединения формулы (VIII):

где А₁ означает -О-, L представляет собой группу формулы (IIIf) или (IIIg), и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше;

или

g) с соединением формулы (XIII):

где R₁₆ отсутствует,

L представляет собой группу формулы (IIIh)’ или (IIIi)’:

или

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₉ отсутствует и

с получением соединения формулы (VIII):

где А₁ означает -О-, L представляет собой группу формулы (IIIh) или (IIIi), и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше;

или

h) с соединением формулы (XIII):

где R₁₆ представляет собой активирующую группу -NH-, предпочтительно, тозил,

L представляет собой группу формулы -NHCOR₉ (IIIa), -NHCONHR₉ (IIIb), -NHCOOR₉ (IIIc) или -NHR₉ (IIId);

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₉ отсутствует и,

с получением соединения формулы (VIII):

где А₁ означает -О-, L представляет собой группу формулы (IIIа)-(IIId), и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше;

или

i) с соединением формулы (XIII):

где R₁₆ означает -ОН,

L представляет собой группу формулы (IIIе):

,

где

R₉ и R₁₀, каждый, независимо, означают водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбираемую из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью, и

W, Z и RM отсутствуют,

или

один из R₉ или R₁₀ отсутствует и,

с получением соединения формулы (VIII):

,

где А₁ означает -О-, L представляет собой группу формулы (IIIе) и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше.

В соответствии со стадиями f) и g), введение во взаимодействие осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM или ДМФА, при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов. Удаление защитной группы осуществляют, используя известные методики, описанные в литературе (см., например, Protective Groups in Organic Synthesis; Theodora W. Greеen, Peter G.M. Wuts).

В соответствии со стадией h), введение во взаимодействие осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно диэтиловом эфире, диоксане или их смеси, с LiHMDS в присутствии PTSA при температуре в диапазоне от -10°С до 50°С и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов. Удаление защитной группы осуществляют, используя известные методики, описанные в литературе (см., например, Protective Groups in Organic Synthesis; Theodora W. Greеen, Peter G.M. Wuts).

В соответствии со стадией i), введение во взаимодействие осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, ТГФ, CH₃CN или CCl₄, в присутствии основания, предпочтительно DIPEA, при температуре в диапазоне от -10°С до 50°С и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов.

Предпочтительно, соединение формулы (Х), где А₁ означает -ОН или -NH₂, и Х, Y, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, вводят во взаимодействие:

j) с соединением формулы (XIII):

,

где R₁₆ означает галоген, предпочтительно хлор, -ОН или -OR₁₇, где R₁₇ представляет собой активирующую карбоксильную группу, предпочтительно, пирролидин-2,5-дион-1-ил,

L представляет собой группу формулы (IIIj) или (IIIk):

или

,

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₉ отсутствует и,

с получением соединения формулы (VIII):

,

где А₁ означает -О- или -NH-, L представляет собой группу формулы (IIIj) или (IIIk), и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше.

В соответствии со стадией j), реакцию связывания осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, в щелочных условиях, например ТЕА, и необязательно в присутствии конденсирующего агента, такого как, например, DCC и EDC. Введение во взаимодействие осуществляют при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов.

Предпочтительно, соединение формулы (Х), где А₁ означает СООН и Х, Y, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, вводят во взаимодействие:

k) с соединением формулы (XIII):

,

где R₁₆ означает водород,

L представляет собой группу формулы (IIIm) или (IIIn):

или

,

где

R₉ и R₁₀, каждый, независимо, означают водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью, и

W, Z и RM отсутствуют,

или

один из R₉ или R₁₀ отсутствует и

с получением соединения формулы (VIII):

,

где А₁ означает -СО-, L представляет собой группу формулы (IIIm) или (IIIn), и Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше;

или

l) с соединением формулы (XIII):

,

где R₁₆ отсутствует,

L отсутствует,

W представляет собой группу формулы (IVa)-(IVe), (IVh)-(IVj):

или

,

где R₉ означает водород,

R₁₀ означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбираемую из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью, и

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₁₀ отсутствует и,

R₁₁ и R₁₂ имеют значения, как описано выше,

А₂ означает -СН₂, -CH₂NR₁₂ или -NR₁₂-, где R₁₂ имеет значение, как описано выше,

с получением соединения формулы (VIII):

,

где А₁ означает -СО-, L отсутствует, W представляет собой группу формулы (IVa)-(IVe) или (IVh)-(IVj), Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше.

В соответствии со стадией k), введение во взаимодействие осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, в щелочных условиях, например ТЕА, и необязательно в присутствии конденсирующего агента, такого как, например, DCC или EDC, при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени в диапазоне от 30 минут до примерно 24 часов.

В соответствии со стадией l), реакцию связывания осуществляют, используя условия, хорошо известные из литературы (см., например, Scott C.J. и др., J. Med. Chem., 2005, 48, 1344-1358; Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry: Building Blocks, Catalysis and Coupling Chemistry, том 3; Andrew B. Hugnes, Ayman El-Faham, Fernando Albericio).

Предпочтительно, соединение формулы (Х), где А₁ означает -ОН или -NН₂ и Х, Y, R₇, R₈ и n имеют значения, как описано выше, вводят во взаимодействие

m) с соединением формулы (XIII)

,

где R₁₆ отсутствует,

L отсутствует,

W представляет собой группу формулы (IVa)-(IVj):

или

,

где R₁₀ означает -OH,

R₉ означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из С₁-С₄-алкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-гидроксиалкила с линейной или разветвленной цепью, С₁-С₄-сульфгидрилалкила с линейной или разветвленной цепью и С₁-С₄-аминоалкила с линейной или разветвленной цепью, и

W, Z и RM отсутствуют,

или

R₉ отсутствует и

R₁₁, R₁₂, m и А₂ имеют значения, как описано выше,

с получением соединения формулы (VIII):

,

где А₁ означает -О- или -NН-, L отсутствует, W представляет собой группу формулы (IVa)-(IVj), Х, Y, R₇, R₈, W, Z, RM и n имеют значения, как описано выше.

В соответствии со стадией m), реакцию связывания осуществляют, как описано в п. l) выше.

Соединения формулы (IX) и формулы (X) являются известными или могут быть получены способами, известными квалифицированному специалисту в данной области, или как описано в патенте Великобритании GB2344818, процитированном выше, или в J. Med. Chem., 2003, (46), сс.634-637.

Соединения формулы (XIII) и (VII) являются известными или могут быть получены способами, известными квалифицированному специалисту в данной области, или как описано в Anticancer Agents, в Med. Chem., 2008, (8), сс.618-637, или в Международной заявке на патент под номером WO2010/009124.

Из всего вышесказанного квалифицированному специалисту понятно, что, когда получают соединения формулы (I) или (II), в соответствии с любым одним из вышеуказанных вариантов способа, необязательные функциональные группы в исходных веществах или их промежуточных продуктах, которые могут приводить к увеличению нежелательных побочных реакций, должны быть должным образом защищены в соответствии со стандартными способами. Также конверсию этих последних в свободные соединения со снятой защитой можно осуществлять в соответствии с известными способами.

Как должно быть легко понятно, если соединения формулы (I), получаемые в соответствии с вышеописанным способом, получены в виде смеси изомеров, их разделение, используя стандартные способы, на отдельные изомеры формулы (I) входит в рамки настоящего изобретения.

ФАРМАКОЛОГИЯ

Функционализированные производные тиеноиндола согласно настоящему изобретению пригодны в качестве противоопухолевых агентов.

Млекопитающее, как, например, человек или животное, следовательно, можно подвергать лечению посредством способа, включающего введение ему фармацевтически эффективного количества функционализированного производного тиеноиндола формулы (I) или (II).

Состояние человека или животного может быть улучшено или уменьшена интенстивность симптомов заболевания этим путем.

Оценку цитотоксичности соединений формулы (I) или (II) определяют, как описано ниже.

Анализ in vitro клеточной пролиферации

Раковые клетки яичников человека А2780 и раковые клетки молочной железы человека MCF7 (1250 клеток на лунку) высевали на прозрачные 384-луночные планшеты с полной средой (RPMI1640 или ЕМЕМ плюс 10% фетальной телячьей сыворотки) и обрабатывали с помощью соединений, растворенных в 0,1% ДМСО, спустя 24 часа после посева. Клетки инкубировали при температуре 37°С и в атмосфере с 5% СО₂, и, спустя 72 часа, планшеты обрабатывали, используя анализ Cell Titer-Glo (Promega), следуя инструкции производителя.

Анализ Cell Titer-Glo представляет собой общий способ, базирующийся на определении количества присутствующего АТФ, индикатора метаболически активных клеток. Количество АТФ определяли, используя систему, базирующуюся на люциферазе и D-люциферине, приводящих в результате к возникновению свечения. Люминесцентный сигнал пропорционален числу клеток, присутствующих в культуре.

Вкратце, 25 мкл/лунка раствора реагента добавляли в каждую лунку и после встряхивания в течение 5 минут микропланшеты считывали с помощью люминометра. Люминесцентный сигнал являлся пропорциональным числу клеток, присутствующих в культуре.

Типичные соединения формулы (I) или (II) согласно данному изобретению тестировали посредством специфического анализа in vitro клеточной пролиферации, описанного выше.

Все тестируемые соединения имеют значение IC₅₀<0,5 мкМ.

Как может быть оценено квалифицированным специалистом, все эти типичные соединения, таким образом, являются особенно полезными в случае противоопухолевой терапии.

Кроме того, функционализированные производные тиеноиндола согласно настоящему изобретению пригодны для конъюгирования.

Способность функционализированных производных формулы (I) или (II) к конъюгированию оценивали путем конъюгирования этих соединений с белком МСМ2.

Получение конъюгата МСМ2

1,5 мг (0,045 мкмоль) белка МСМ2 (соответствующего остаткам 10-294 полноразмерной последовательности (см. UniProtKB, под номером доступа Р49736, и Ishimi и др., 2001, Journal Biological Chemistry, том 276, сс.42744-42752) растворяли в 0,5 мл забуференного фосфатом физиологического раствора (рН=7,2), значение рН доводили до 8,5 путем добавления 55 мкл 1 М раствора NaHCO₃ (рН=8,5) и 0,5 мг соединения 1 добавляли к 10 мг/мл раствора ДМСО. Реакционную смесь инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре, затем реакционную смесь обессоливали на колонке NAP-10, кондиционированной забуференным фосфатом физиологическим раствором, и фракции, содержащие белок, собирали и объединяли.

Прореагировавший белок МСМ2 охарактеризовывали с помощью ВЭЖХ/ESI-масс-спектрометрии.

Способ ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка Poroshell C3, размером 75 × 2,1 мм, прибор для ВЭЖХ 1100 Agilent) соединяли с детектором одинарного квадрупольного масс-спектрометра Agilent 1946 с ортогональным источником ESI.

На фигуре 1 представлен подвергнутый деконволюции масс-спектр непрореагировавшего белка МСМ2 с указанием молекулярной массы (m/z) по оси х, в то время как интенсивность, выраженная числом импульсов в секунду (имп/с), указана по оси y.

Непрореагировавший белок МСМ2 обладает молекулярной массой, составляющей 33055 Да.

На фигуре 2 представлен подвергнутый деконволюции масс-спектр белка МСМ2, прореагировавшего с соединением 1, с указанием молекулярной массы (m/z) по оси х, в то время как интенсивность, выраженная числом импульсов в секунду (имп/с), указана по оси y.

Прореагировавший белок МСМ2 обладает молекулярной массой, составляющей 33944 Да.

Увеличение на 889 Да молекулярной массы белка указывает на присоединение одной молекулы соединения 1 к одному остатку цистеина, имеющегося у белка МСМ2.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть введены или в виде отдельных агентов или, альтернативно, в комбинации с известными противораковыми терапиями, такими как режим лучевой терапии или химиотерапии, в комбинации с цитостатическими или цитотоксическими агентами, агентами типа антибиотиков, алкилирующими агентами, антиметаболитами, гормональными агентами, иммунологическими агентами, агентами типа интерферона, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторы СОХ-2), ингибиторами матриксметаллопротеазы, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, рецепторными агентами против фактора роста, анти-HER2-агентами, анти-EGFR-агентами, агентами анти-ангиогенеза (например, ингибиторы ангиогенеза), ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами пути сигнальной трансдукции ras-raf, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, агентами связывания с тубулином, ингибиторами топоизомеразы I, ингибиторами топоизомеразы II и т.п.

Если лекарственное средство приготовляют в виде фиксированной дозы, в таких комбинированных продуктах используют соединения согласно данному изобретению в диапазоне дозировки, описанном ниже, а другой фармацевтически активный агент используют в санкционированном диапазоне дозировки.

Соединения формулы (I) или (II) могут применяться последовательно с известными противораковыми агентами, когда комбинированная готовая лекарственная форма является неуместной.

Соединения формулы (I) или (II) согласно настоящему изобретению, пригодные для введения млекопитающему, например людям, могут быть введены обычными путями, и уровень дозировки зависит от возраста, массы тела, состояний пациента и пути введения.

Например, подходящая доза, принятая для перорального введения соединения формулы (I), может находиться в диапазоне от примерно 1 мг до примерно 300 мг на дозу, 1-5 раз в сутки. Соединения согласно данному изобретению можно вводить в различных лекарственных формах, например перорально, в форме таблеток, капсул, покрытых сахаром или пленкой таблеток, жидких растворов или суспензий; ректально, в форме суппозиториев; парентерально, например подкожно, внутримышечно или посредством внутривенной, и/или интратекальной, и/или интраспинальной инъекции или инфузии.

Настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, в сочетании с фармацевтически приемлемым эксципиентом, который может быть носителем или разбавителем.

Фармацевтические композиции, содержащие соединения согласно данному изобретению, обычно получают посредством стандартных способов и вводят в подходящей фармацевтической форме. Например, твердые пероральные формы могут содержать, вместе с активным соединением, разбавители, как, например, лактоза, декстроза, сахароза, целлюлоза, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазочные вещества, как, например, диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния или кальция, и/или полиэтилен-гликоли; связующие агенты, как, например, крахмалы, гуммиарабик, желатин, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза или поливинилпирролидон; дезинтегрирующие агенты, как, например, крахмал, альгиновая кислота, альгинаты или натрийкрахмалгликолят; вспенивающие смеси; красители; подсластители; смачиватели, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, вообще, нетоксические и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических готовых лекарственных формах. Эти фармацевтические готовые лекарственные формы могут быть получены известным образом, например путем смешения, гранулирования, таблетирования, способов нанесения сахарного покрытия или пленочного покрытия.

Жидкие дисперсии для перорального введения могут быть, например, в виде сиропов, эмульсий и суспензий. В качестве примера, сиропы могут содержать, в качестве носителя, сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннит и сорбит.

Суспензии и эмульсии могут содержать, в качестве примеров носителей, природную камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например, пропиленгликоль, и, если желательно, подходящее количество лидокаингидрохлорида. Растворы для внутривенных инъекций или инфузий могут содержать, в качестве носителя, стерильную воду или, предпочтительно, могут быть в виде стерильных, водных, изотонических, физиологических растворов или могут содержать пропиленгликоль в качестве носителя. Суппозитории могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например масло какао, полиэтиленгликоль, полиоксиэтилен, сорбитановый эфир жирной кислоты, поверхностно-активное вещество или лецитин.

С целью лучшего иллюстрирования настоящего изобретения, без какого-либо его ограничения, теперь приводятся следующие примеры.

ПРИМЕРЫ

Получение путем синтеза некоторых соединений формулы (I) согласно данному изобретению описано в следующих примерах.

Соединения согласно настоящему изобретению, как получаемые в соответствии со следующими примерами, также характеризуются с помощью ¹Н-ЯМР-спектра и/или данных в отношении точной массы, ESI(+).

¹Н-ЯМР-спектры регистрировали, при постоянной температуре 28°С, на спектрометре Varian INOVA 400, работающем при 400,50 МГц и снабженном зондом непрямого детектирования PFG с 5 мм z-осью (¹H{¹⁵N-³¹P}).

Химические сдвиги указывали, принимая во внимание сигналы остаточного растворителя (ДМСО-d₆: 2,50 м.д. для ¹Н, если не указано другим образом). Данные предоставляли следующим образом: химический сдвиг (δ), мультиплетность (с=синглет, д=дублет, т=триплет, кв.=квартет, уш.с=уширенный синглет, тд=триплет дублетов, дд=дублет дублетов, ддд=дублет дублетов дублетов, м=мультиплет, спт=септет), константы связывания (J, Гц) и число протонов.

Данные точной массы ESI(+) получали на масс-спектрометре Waters Q-Tof Ultima, непосредственно связанном с системой микро-ВЭЖХ Agilent 1100, как ранее описано (M. Colombo, F. Riccardi-Sirtori, V. Rizzo, Rapid Commun. Mass Spectrom., 2004, 18, 511-517).

В нижеприводимых примерах, а также на протяжении всего описания следующие аббревиатуры имеют следующие значения. Если не определено, термины имеют свои обычные общепринятые значения.

Аббревиатуры
DCC	N,N’-дициклогексилкарбодиимид
DBU	диазабициклоундецен
DCM	дихлорметан
DIPEA	N,N-диизопропилэтиламин
DMF (ДМФА)	N,N-диметилформамид
DMSO (ДМСО)	диметилсульфоксид
EDCI	N-этил-N’,N’-диизопропилкарбодиимид-гидрохлорид
EDC	1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид
Et2O	диэтиловый эфир
EtOAc	этилацетат
EtOH	этанол
HCl	хлороводородная кислота
HOBt	1Н-бензотриазол-1-ол
LiHMDS	бис(триметилсилил)амид лития
МеОН	метанол
Na2SO4	сульфат натрия
NaHCO3	гидрокарбонат натрия
NaOH	гидроксид натрия
ТЕА	триэтиламин
TFA (ТФУК)	трифторуксусная кислота
THF (ТГФ)	тетрагидрофуран

Пример 1

трет-Бутил-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамат (XIV)

Стадия с, стадия с’, снятие защиты, стадия е.

Стадия с

Раствор (8S)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ола ((IX), 11,4 мг, 0,045 ммоль), полученного, как описано в патенте Великобритании GB2344818, растворяют в безводном ДМФА (1 мл) и обрабатывают с помощью EDCI (35 мг, 4 экв.) и 5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1Н-индол-2-карбоновой кислоты (VIII), полученной, как описано в J. Med. Chem., 2003, (46), сс.634-637 (29 мг, 1,5 экв.). Смесь перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре и затем гасят путем добавления насыщенного водного раствора NaCl. Выделение продукта осуществляют путем экстракции с помомщью EtOAc (4 раза) и потом объединенные органические слои промывают 2 М водным раствором HCl (3 раза), насыщенным водным раствором Na₂CO₃ (3 раза) и насыщенным водным раствором NaCl (3 раза). Органический слой сушат (Na₂SO₄), концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение 1, которое затем очищают с помощью флэш-хроматографии (гексан-ацетон, 1:1).

ESI MS: m/z 670 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 1,50 (с, 9H) 1,79 (дт, J=6,4, 3,3 Гц, 1H) 2,61 (с, 2H) 3,53-3,66 (м, 1H) 3,89 (дд, J=11,4, 2,8 Гц, 1H) 4,25 (м, 1H) 4,73 (м, 1H) 4,84 (д, J=10,6 Гц, 1H) 7,21 (с, 1H) 7,26 (с, 1H) 7,34 (м, 2H) 7,49 (д, J=8,8 Гц, 1H) 7,56 (м, 1H) 7,61 (м, 1H) 7,96 (уш. с, 2H) 8,21 (уш. с, 1H) 8,34 (с, 1H) 9,28 (с, 1H) 9,52 (с, 1H) 10,73 (уш. с, 1H) 10,80 (уш. с, 1H).

С помощью аналогичной методики получают следующий продукт:

трет-бутил{2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамат (XIV)

ESI MS: m/z 670 (МН⁺).

Стадия с’

(8S)-6-({5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат (XV)

К раствору промежуточного продукта XIV (42 мг, 0,064 ммоль) в безводном DCM (6 мл) добавляют 4-метилпиперазин-1-карбонилхлоридгидрохлорид (XIII) (39 мг, 0,193 ммоль) и N,N-диметиламинопиридин (27 мг, 0,212 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре, в атмосфере азота, в течение 16 часов. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в EtOAc, полученный органический слой промывают насыщенным солевым раствором (3 раза), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют в вакууме. Сырой остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (DCM-МеОН, 95:5), получая промежуточный продукт XV (30 мг, выход 59%).

ESI MS: m/z 796 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 2,22 (с, 3H) 2,65 (д, J=0,9 Гц, 3H) 2,39-2,91 (м, 4H) 3,72 (дд, J=11,6, 9,5 Гц, 1H) 3,96 (дд, J=11,6, 3,1 Гц, 1H) 3,49-4,14 (м, 4H) 4,37 (м, 1H) 4,79-4,85 (м, 1H) 4,87-4,93 (м, 1H) 7,27 (д, J=1,5 Гц, 1H) 7,28 (с, 1H) 7,34-7,38 (м, 1H) 7,41 (с, 1H) 7,50 (д, J=8,8 Гц, 1H) 7,56 (д, J=8,5 Гц, 1H) 7,62-7,65 (м, 1H) 7,96 (уш. с, 1H) 8,38 (с, 1H) 9,60 (с, 1H) 10,86 (уш. с, 1H) 10,90 (уш. с, 1H)

(8R)-6-({5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат

ESI MS: m/z 796 (МН⁺).

Снятие защиты

(8S)-6-[(5-{[(5-амино-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилатгидрохлорид (XVI)

Раствор промежуточного продукта XV (22 мг, 0,0276 ммоль) в 3,5 М растворе HCl-EtOAc (5 мл) перемешивают в течение 30 минут, перед удалением растворителя с помощью непрерывного тока азота, и получают гидрохлорид промежуточного продукта XVI (18 мг, 89%).

ESI MS: m/z 696 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д. 2,59 (с, 3H) 2,76 (уш. с, 3H) 3,05-3,42 (м, 4H) 3,75 (дд, J=10,8, 7,9 Гц, 1H) 3,95-4,01 (м, 1H) 3,58-4,08 (м, 4H) 4,32-4,40 (м, 1H) 4,67 (д, J=11,1 Гц, 1H) 4,75-4,83 (м, 1H) 6,92 (уш. с, 1H) 7,21 (уш. с, 1H) 7,23 (с, 1H) 7,30 (уш. с, 1H) 7,37 (д, J=8,4 Гц, 1H) 7,49-7,52 (м, 1H) 7,55 (с, 1H) 7,57-7,60 (м, 1H) 8,16 (с, 1H) 8,24 (с, 1H) 10,15 (уш. с, 1H) 11,67 (уш. с, 1H) 11,70 (с, 1H)

(8R)-6-[(5-{[(5-амино-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилатгидрохлорид

ESI MS: m/z 696 (МН⁺).

Стадия е

(8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(IIb), А₁=NH, L, W и Z отсутствуют; RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁=4-метил-пиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 1)

К раствору дигидрохлорида промежуточного продукта XVI (6 мг, 0,0078 ммоль) в безводном ДМФА (0,5 мл) добавляют 1-{6-[(2,5-диоксопирролидин-1-ил)окси]-6-оксогексил}-1Н-пиррол-2,5-дион (2,9 мг, 0,0094 ммоль) и триэтиламин (0,003 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 96 часов в атмосфере азота. Растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (DCM-МеОН, 95:5), получая конечное соединение 1 (2 мг, выход 29%).

ESI MS: m/z 889 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 1,39 (м, 2H) 1,62 (дт, J=14,9, 7,5 Гц, 2H) 1,73 (дт, J=15,3, 7,6 Гц, 2H) 2,23-2,67 (м, 7H) 2,37 (т, J=7,3 Гц, 2H) 2,65 (д, J=0,9 Гц, 3H) 3,49 (т, J=7,2 Гц, 2H) 3,72 (дд, J=11,4, 9,6 Гц, 2H) 3,97 (дд, J=11,3, 3,1 Гц, 1H) 4,38 (м, 1H) 3,44-3,95 (м, 4H) 4,83 (м, 1H) 4,91 (м, 1H) 6,85 (с, 1H) 7,27 (д, J=1,5 Гц, 1H) 7,28 (с, 1H) 7,35 (дд, J=8,8, 1,8 Гц, 1H) 7,41 (с, 1H) 7,49 (д, J=8,8 Гц, 1H) 7,55 (м, 1H) 7,63 (м, 1H) 8,18 (с, 1H) 8,27 (с, 1H) 8,38 (с, 1H) 9,00 (с, 1H) 9,60 (уш. с, 1H) 10,88 (уш. с, 2H)

С помощью аналогичной методики получают следующие продукты:

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамид [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, W представляет собой -СООСН₂-(р-Ph)-NH-, Z представляет собой -(СО)-цитруллин-валин-(NH)-, RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁ означает 4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 2)

ESI MS: m/z 1294 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, метанол-d₄) δ м.д. 0,92 (м, 6H) 1,49-1,75 (м, 10H) 2,25 (м, 2H) 2,32 (с, 4H) 2,48 (уш. с, 2H) 2,54 (уш. с, 2H) 2,60 (д, J=1,1 Гц, 3H) 3,06 (м, 1H) 3,19 (м, 1H) 3,42 (м, 2H) 3,55 (уш. с, 2H) 3,61 (дд, J=11,5, 9,5 Гц, 1H) 3,78 (уш. с, 2H) 3,89 (дд, J=11,5, 2,7 Гц, 1H) 4,18 (д, J=7,1 Гц, 1H) 4,52 (дд, J=9,2, 4,6 Гц, 1H) 4,75 (м, 1H) 4,83 (м, 1H) 5,11 (с, 2H) 6,77 (м, 2H) 7,20 (с, 1H) 7,24 (с, 1H) 7,27 (м, 1H) 7,35 (д, J=1,1 Гц, 1H) 7,36 (д, J=8,6 Гц, 2H) 7,40 (д, J=8,7 Гц, 1H) 7,50 (м, 1H) 7,55 (м, 1H) 7,63 (д, J=8,6 Гц, 2H) 7,86 (д, J=6,7 Гц, 1H) 8,15 (уш. с, 1H) 8,18 (м, 1H) 8,50 (с, 2H)

(8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁=NH, L, W и Z отсутствуют, RM, связанный с А₁, представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁ означает 4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 5)

ESI MS: m/z 889 (МН⁺).

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамид [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, W представляет собой -СООСН₂-(р-Ph)-NH-, Z представляет собой -(СО)-цитруллин-валин-(NH)-, RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁=4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 6)

ESI MS: m/z 1294 (МН⁺).

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамид [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, W отсутствует, Z представляет собой -(СО)-глицин-лейцин-фенилаланин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁=4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 9)

ESI MS: m/z 1206 (МН⁺).

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамид [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, W отсутствует, Z представляет собой -(СО)-глицин-лейцин-фенилаланин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил; L₁=4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 10)

ESI MS: m/z 1206 (МН⁺).

(8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, Z представляет собой -СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил; L₁=4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 13)

ESI MS: m/z 1080 (МН⁺).

(8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁=NH, L отсутствует, Z представляет собой -СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил; L₁=4-метилпиперазин-1-карбонил, и W, Z и RM, связанные с L₁, отсутствуют] (соединение 14)

ESI MS: m/z 1080 (МН⁺).

Пример 2

Связывание, снятие защиты, стадия е.

Связывание

Получение трет-бутил-(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-илпиперазин-1,4-дикарбоксилата

N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)-1Н-индол-2-карбоксамид (111 мг, 0,2 ммоль), полученный, как описано в патенте Великобритании GB2344818, растворяют в безводном DCM (15 мл) и к этому раствору добавляют трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилат (100 мг, 0,4 ммоль) и N,N-диметиламинопиридин (55 мг, 0,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 часов. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в EtOAc, полученный органический слой промывают насыщенным солевым раствором (4 раза), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют в вакууме. Сырой остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (гексан-ацетон, 7:3), получая указанное в заголовке соединение (30 мг, 19%).

ESI MS: m/z 767 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 1,48 (с, 9H) 2,65 (д, J=1,01 Гц, 3H) 3,55 (уш. с, 4H) 3,60 (уш. с, 2H) 3,73 (дд, J=11,36, 9,59 Гц, 1H) 3,79 (уш. с, 2H) 3,97 (дд, J=11,36, 2,78 Гц, 1H) 4,33-4,42 (м, 1H) 4,80-4,86 (м, 1H) 4,89-4,94 (м, 1H) 7,10 (т, J=7,19 Гц, 1H) 7,23-7,27 (м, 1H) 7,28 (с, 1H) 7,34 (д, J=1,51 Гц, 1H) 7,42 (с, 1H) 7,53-7,57 (м, 1H) 7,60 (д, J=8,08 Гц, 1H) 7,61-7,65 (м, 1H) 7,67 (д, J=8,08 Гц, 1H) 8,29 (с, 1H) 8,38 (д, J=1,26 Гц, 1H) 9,56 (с, 1H) 10,89 (уш. с, 2H).

Снятие защиты

(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-илпиперазин-1-карбоксилат

Раствор промежуточного продукта (25 мг, 0,0326 ммоль) в 3,5 М растворе HCl-EtOAc (5 мл) перемешивают в течение 2 часов. После выпаривания растворителя посредством постоянного тока азота, остаток высушивают в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (11 мг, 48%).

ESI MS: m/z 667 (МН⁺).

Стадия е

(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W и Z, связанные с L₁, отсутствуют, и RM, связанный с L₁, представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 3)

К раствору производного со снятой защитой, полученного на предыдущей стадии в виде гидрохлорида (11 мг, 0,0156 ммоль), в безводном ДМФА (1 мл) добавляют 1-{6-[(2,5-диоксопирролидин-1-ил)окси]-6-оксогексил}-1Н-пиррол-2,5-дион (7 мг, 0,020 ммоль) и ТЕА (0,006 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов в атмосфере азота. Растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (DCM-МеОН, 96:4), получая конечное соединение 3 (6 мг, 43%).

ESI MS: m/z 860 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 1,36 (м, 2H) 1,49-1,69 (м, 4H) 2,44 (м, 2H) 2,63 (с, 3H) 3,47 (м, 2H) 3,69 (м, 1H) 3,52-3,88 (уш. с, 8H) 3,94 (дд, J=11,5, 2,6 Гц, 1H) 4,35 (м, 1H) 4,80 (м, 1H) 4,88 (м, 1H) 6,84 (с, 2H) 7,08 (т, J=7,5 Гц, 1H) 7,24 (м, 2H) 7,32 (с, 1H) 7,39 (с, 1H) 7,54 (м, 2H) 7,60 (м, 1H) 7,65 (д, J=8,1 Гц, 1H) 8,23 (с, 1H) 8,30 (д, J=1,5 Гц, 1H)

Аналогично, при использовании подходящих активированных производных, получают следующие соединения:

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W представляет собой -СООСН₂-(р-Ph)-NH-, Z представляет собой -(СО)-цитруллин-валин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 4)

ESI MS: m/z 1265 (МН⁺).

¹H ЯМР (500 МГц, ацетон-d₆) δ м.д. 0,94 (д, J=6,8 Гц, 3H) 0,96 (д, J=6,8 Гц, 3H) 1,29 (м, 2H) 1,55 (квин, J=7,5 Гц, 4H) 1,63 (м, 2H) 1,71 (м, 1H) 1,91 (м, 1H) 2,12 (м, 1H) 2,27 (м, 2H) 2,61 (с, 3H) 3,08 (м, 1H) 3,27 (м, 1H) 3,43 (т, J=7,1 Гц, 2H) 3,58 (уш. с, 6H), 3,67 (м, 1H), 3,79 (уш. с, 2H) 3,93 (дд, J=11,4, 2,78 Гц, 1H) 4,24 (д, J=6,5 Гц, 1H) 4,33 (м, 1H) 4,60 (дд, J=9,3, 4,3 Гц, 1H) 4,79 (м, 1H) 4,86 (м, 1H) 5,10 (с, 2H) 6,81 (с, 2H) 7,08 (т, J=7,6 Гц, 1H) 7,23 (м, 2H) 7,32 (с, 1H) 7,35 (д, J=8,3 Гц, 2H) 7,37 (д, J=0,5 Гц, 1H) 7,53 (м, 2H) 7,57 (м, 1H) 7,65 (д, J=8,1 Гц, 1H) 7,70 (д, J=8,6 Гц, 2H) 8,22 (с, 1H) 8,29 (д, J=1,8 Гц, 1H)

(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W и Z отсутствуют и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 7)

ESI MS: m/z 860 (МН⁺).

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W представляет собой -СООСН₂-(р-Ph)-NH-, Z представляет собой -(СО)-цитруллин-валин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 8)

ESI MS: m/z 1265 (МН⁺).

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамид [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W отсутствует, Z представляет собой -(СО)-глицин-лейцин-фенилаланин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 11)

ESI MS: m/z 1177 (МН⁺).

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамид [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W отсутствует, Z представляет собой -(СО)-глицин-лейцин-фенилаланин-(NH)- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил] (соединение 12)

ESI MS: m/z 1177 (МН⁺).

(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W отсутствует, Z представляет собой -СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил] (соединение 15)

ESI MS: m/z 1065 (МН⁺).

(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилат [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W отсутствует, Z представляет собой -СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил] (соединение 16)

ESI MS: m/z 1065 (МН⁺).

N-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид [(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W представляет собой -СООСН₂-(р-Ph)-NH-, Z представляет собой -(СО)-цитруллин-валин-(NH)-СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил] (соединение 17)

ESI MS: m/z 1470 (МН⁺).

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-фенилаланинамид

[(IIb), A₁, L, W, Z и RM отсутствуют; L₁=пиперазин-1-карбонил, W отсутствует, Z представляет собой -(СО)-глицин-лейцин-фенилаланин-(NH)-СО-[CH₂-CH₂-O-]₄-CH₂CH₂-NH- и RM представляет собой (2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пропаноил] (соединение 18)

ESI MS: m/z 1382 (МН⁺).

Claims

1. Соединение формулы (II):

где

R₁ и R₂, взятые вместе, образуют группу (D):

где R₅ означает метил;

R₃ и R₄ означают водород;

n означает 1;

каждый из X независимо означает -NR₄-, где R₄ имеет значение, как описано выше;

каждый из Y означает -СН=;

R₇ и R₈ означают водород;

R₆ представляет собой хлор; и где

когда L₁ представляет собой группу

где R₉ представляет собой метил,

тогда W, Z, RM отсутствуют в группе [L₁-W-Z]-RM,

и в группе [A₁-L-W-Z]-RM

A₁ представляет собой -NH-,

L отсутствует,

W отсутствует или означает

Z отсутствует или означает группу, выбранную из

и

RM представляет собой

или

когда L₁ представляет собой группу

тогда группа [A₁-L-W-Z]-RM отсутствует, и

в группе [L₁-W-Z]-RM W, Z и RM имеют значения, определенные выше;

или его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение по п. 1, или его фармацевтически приемлемая соль, выбираемое из группы, состоящей из:

(8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамида,

(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилата,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамида,

(8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-(4-{[({2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}карбамоил)окси]метил}фенил)-L-орнитинамида,

(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]пиперазин-1-карбоксилата,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамида,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамида,

N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-{2-[(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-4-{[(4-метилпиперазин-1-ил)карбонил]окси}-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-6-ил]карбонил}-1Н-индол-5-ил)карбамоил]-1Н-индол-5-ил}глицинамида,

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2 оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамида,

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа -[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланинамида,

(8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата,

(8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-{[1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,18-диоксо-7,9,12,15-тетраокса-4-азаоктадекан-18-ил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]амино}-1Н-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата,

(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилата,

(8R)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил-4-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]пиперазин-1-карбоксилата,

N-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-валил-N-5-карбамоил-N-{4-[({[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]карбонил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамида и

N-[(2S)-1-({2-[4-({[(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1Н-индол-2-илкарбонил)амино]-1Н-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6Н-тиено[3,2-е]индол-4-ил]окси}карбонил)пиперазин-1-ил]-2 оксоэтил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-N-альфа-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-фенилаланинамида.

3. Фармацевтическая композиция, обладающая цитотоксической активностью, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы (II) по п. 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.

4. Соединение формулы (I) или (II) по п. 1 для применения в качестве лекарственного средства для лечения ракового заболевания.