RU2623062C2 - Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза - Google Patents
Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2623062C2 RU2623062C2 RU2014114930A RU2014114930A RU2623062C2 RU 2623062 C2 RU2623062 C2 RU 2623062C2 RU 2014114930 A RU2014114930 A RU 2014114930A RU 2014114930 A RU2014114930 A RU 2014114930A RU 2623062 C2 RU2623062 C2 RU 2623062C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- comt
- inhibitor
- ttr
- transthyretin
- group
- Prior art date
Links
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 title claims abstract description 156
- 102000009190 Transthyretin Human genes 0.000 title claims abstract description 156
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 title claims abstract description 73
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title 1
- 239000003543 catechol methyltransferase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 98
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 62
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 56
- MIQPIUSUKVNLNT-UHFFFAOYSA-N tolcapone Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(=O)C1=CC(O)=C(O)C([N+]([O-])=O)=C1 MIQPIUSUKVNLNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 55
- 229960004603 tolcapone Drugs 0.000 claims abstract description 53
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 38
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims abstract description 37
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 36
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical class O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 claims abstract description 34
- BCMCBBGGLRIHSE-UHFFFAOYSA-N 1,3-benzoxazole Chemical compound C1=CC=C2OC=NC2=C1 BCMCBBGGLRIHSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 102000006378 Catechol O-methyltransferase Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108020002739 Catechol O-methyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 claims abstract description 15
- HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N diflunisal Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(C=2C(=CC(F)=CC=2)F)=C1 HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229960000616 diflunisal Drugs 0.000 claims abstract description 13
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- BHTRKEVKTKCXOH-UHFFFAOYSA-N Taurochenodesoxycholsaeure Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)CC2 BHTRKEVKTKCXOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- BHTRKEVKTKCXOH-LBSADWJPSA-N tauroursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 BHTRKEVKTKCXOH-LBSADWJPSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 claims abstract 5
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 claims abstract 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 60
- TXEIIPDJKFWEEC-UHFFFAOYSA-N tafamidis Chemical group O1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2N=C1C1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1 TXEIIPDJKFWEEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- 229960001353 tafamidis Drugs 0.000 claims description 42
- -1 nitrocatechol compound Chemical class 0.000 claims description 33
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 229930014124 (-)-epigallocatechin gallate Natural products 0.000 claims description 26
- SSYOLLIRAAWGDJ-UHFFFAOYSA-N 5-(2,4-difluorophenyl)-2-hydroxy-3-iodobenzoic acid Chemical compound IC1=C(O)C(C(=O)O)=CC(C=2C(=CC(F)=CC=2)F)=C1 SSYOLLIRAAWGDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 201000007905 transthyretin amyloidosis Diseases 0.000 claims description 17
- 208000034846 Familial Amyloid Neuropathies Diseases 0.000 claims description 16
- 206010019889 Hereditary neuropathic amyloidosis Diseases 0.000 claims description 15
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 10
- 206010007509 Cardiac amyloidosis Diseases 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000006727 (C1-C6) alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000006728 (C1-C6) alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 claims description 4
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 208000027121 wild type ATTR amyloidosis Diseases 0.000 claims description 4
- 125000005023 xylyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229940099362 Catechol O methyltransferase inhibitor Drugs 0.000 claims 10
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- JRURYQJSLYLRLN-BJMVGYQFSA-N entacapone Chemical compound CCN(CC)C(=O)C(\C#N)=C\C1=CC(O)=C(O)C([N+]([O-])=O)=C1 JRURYQJSLYLRLN-BJMVGYQFSA-N 0.000 abstract description 12
- 229960003337 entacapone Drugs 0.000 abstract description 10
- UPMRZALMHVUCIN-UHFFFAOYSA-N Nitecapone Chemical compound CC(=O)C(C(C)=O)=CC1=CC(O)=C(O)C([N+]([O-])=O)=C1 UPMRZALMHVUCIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 229950008980 nitecapone Drugs 0.000 abstract description 5
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract description 5
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 abstract 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 abstract 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 102220472565 Melanoregulin_Y78F_mutation Human genes 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 8
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 7
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 6
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 5
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000000355 1,3-benzoxazolyl group Chemical group O1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000772194 Homo sapiens Transthyretin Proteins 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- YHKWFDPEASWKFQ-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobenzene-1,2-diol Chemical compound OC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1O YHKWFDPEASWKFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 3
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 3
- 102000056556 human TTR Human genes 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001049 Amyloid Human genes 0.000 description 2
- 108010094108 Amyloid Proteins 0.000 description 2
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 2
- 206010016202 Familial Amyloidosis Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101150091380 TTR gene Proteins 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 2
- 230000003942 amyloidogenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000576 arachnoid Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 206010061592 cardiac fibrillation Diseases 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 2
- 208000017105 hereditary amyloidosis Diseases 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 208000007538 neurilemmoma Diseases 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 102200049725 rs182983506 Human genes 0.000 description 2
- 206010039667 schwannoma Diseases 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVLLLIQSGCLRMX-UHFFFAOYSA-N 6-(3,4-dihydroxy-5-nitrophenyl)hex-5-ene-2,4-dione Chemical compound OC=1C=C(C=CC(CC(C)=O)=O)C=C(C=1O)[N+](=O)[O-] GVLLLIQSGCLRMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002023 Amyloidoses Diseases 0.000 description 1
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 1
- 206010003840 Autonomic nervous system imbalance Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000672609 Escherichia coli BL21 Species 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008238 Muscle Spasticity Diseases 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 206010048669 Terminal state Diseases 0.000 description 1
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical class IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 102100029290 Transthyretin Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001896 anti-amyloidogenic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003136 dopamine receptor stimulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940005501 dopaminergic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000035557 fibrillogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 1
- 210000003917 human chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000003367 kinetic assay Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 238000000424 optical density measurement Methods 0.000 description 1
- 208000035824 paresthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011422 pharmacological therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 description 1
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011607 retinol Substances 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 208000018198 spasticity Diseases 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000002723 toxicity assay Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/12—Ketones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
- A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
- A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
- A61K31/603—Salicylic acid; Derivatives thereof having further aromatic rings, e.g. diflunisal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
- A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Предложена группа изобретений: применение ингибитора катехол-O-метилтрансферазы (СОМТ) толкапона, энтакапона или нитекапона для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза; применение того же соединения для производства лекарственного препарата для того же назначения; применение комбинации того же соединения и дополнительного лекарственного средства, выбранного из другого указанного ингибитора СОМТ, или производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксициклина и эпигаллокатехин-3-галлата, для получения лекарственного препарата того же назначения; применение лечебного средства, выбранного из группы, состоящей из производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксициклина и эпигаллокатехин-3-галлата, для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с ингибитором СОМТ толкапоном, энтакапоном или нитекапоном для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза. Технический результат состоит в стабилизации тетрамера транстиретина и в дезинтеграции фибрилл из транстиретина. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл.
Description
Изобретение связано с областью амилоидных заболеваний и, в частности, с новыми соединениями для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Амилоидозом называют множество состояний, при которых амилоидные белки патологически откладываются в органах и/или тканях. Эти амилоидные белки иногда существуют в патологической волокнистообразной форме, называемой амилоидные фибриллы или отложения амилоида, которые встраиваются и постепенно нарушают структуру и функцию пораженных органов по всему организму. С различными типами амилоидного заболевания связаны различные белки, и лечение зависит от конкретного амилоидного белка.
Транстиретин-ассоциированный амилоидоз представляет собой общее название группы амилоидных заболеваний, которые, главным образом, связаны с патологическим неправильным сворачиванием, агрегацией (образованием фибрилл) и последующим отложением транстиретина. Белок транстиретин (TTR) представляет собой переносчик тиреоидного гормона тироксина и ретинола в сыворотке и спинномозговой жидкости. Мутации в гене TTR, который расположен на человеческой хромосоме 18q12.1-11.2, иногда приводят к дестабилизации белка TTR, что приводит к патологической агрегации и транстиретин-ассоциированному амилоидному заболеванию. Известно более 80 образующих амилоид вариантов TTR, наиболее часто встречающийся из них называется TTR V30M.
Семейная амилоидная полинейропатия (FAP), также называемая транстиретин-ассоциированный наследственный амилоидоз, транстиретиновый амилоидоз или болезнь Корино де Андраде, представляет собой аутосомное доминантное нейродегенеративное заболевание. Обычно проявляется в возрасте от 20 до 40 лет, характеризуется болью, парестезией, мышечной слабостью и вегетативной дисфункцией. В ее терминальном состоянии поражаются почки и сердце. FAP характеризуется системным отложением амилоидных вариантов белка TTR, особенно в периферической нервной системе, вызывая прогрессирующую сенсорную и двигательную полинейропатию. Это заболевание, вне всяких сомнений, является наиболее распространенным типом наследственного амилоидоза в мире.
Другие типы транстиретин-ассоциированного амилоидоза представляют собой семейную амилоидную кардиомиопатию и сенильный системный амилоидоз, вызванные отложением амилоидного TTR в сердце, и лептоменингеальный амилоидоз, при котором амилоидные отложения TTR обнаруживаются в стенках лептоменингеальных сосудов, в мягкой и паутинной оболочках мозга и также в отложениях, расположенных в пространстве под мягкой оболочкой мозга. Последнее состояние ассоциировано с клинической картиной проявления нарушения функций центральной нервной системы в виде деменции, атаксии и спастичности.
Хотя все еще отсутствует лечение, которое блокирует отложение амилоида или ускоряет его удаление, лечение амилоидных заболеваний направлено на поддержание функции ослабленных органов. Пересадку печени часто применяли в качестве лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза, в частности FAP, поскольку белок TTR в основном образуется в печени. Замещение печени, содержащей мутантный ген TTR, печенью, в которой образуется нормальный белок транстиретин, направлено на предупреждение образования дополнительного амилоида и может стабилизировать заболевание. Пересадка печени была проведена у пациентов с FAP в большинстве случаев с большим успехом. Однако не всегда пересадка печени является подходящим вариантом, и, кроме того, по мере приобретения опыта становится очевидным, что пересадку печени в случае FAP следует производить еще до того, как произошло слишком сильное повреждение нервов или сердца. К сожалению, последнее может происходить, не вызывая никаких симптомов.
Было описано очень немного соединений, проявляющих ингибиторную активность в отношении образования фибрилл и последующего отложения TTR. Среди них йододифлунизал, о котором сообщали как о сильном ингибиторе амилоида in vitro Gales et al. (Gales L, Macedo-Ribeiro S, Arsequell G, Valencia G, Saraiva MJ, Damas AM. "Human transthyretin in complex with iodoflusinal: structural features associated with a potent amyloid inhibitor". Biochem J, 2005, vol. 388, p. 615-621). Кроме того, в патентной заявке WO 2005/113523 раскрываются бензоксазольные соединения для стабилизации амилоидного белка TTR, предупреждающие тем самым образование амилоидных фибрилл из TTR. Заявляется, что эти соединения применимы для лечения транстиретин-ассоциированных амилоидных заболеваний.
В частности, было описано, что производное бензоксазола, называемое тафамидис, 2-(3,5-дихлорфенил)-1,3-беноксазол-6-карбоновая кислота, ингибирует патологическую агрегацию TTR и образование фибрилл, и оно проходит клинические испытания в отношении лечения FAP. Несмотря на то что он является многообещающей перспективой, тафамидис все еще проходит экспертизу в основных официальных медицинских органах регистрации. А значит, клиническую значимость тафамидиса все еще необходимо выяснять.
Несмотря на значительные усилия, которые были проделаны в данной области, до настоящего времени не существует эффективной фармакологической терапии для лечения FAP. Вследствие этого желательным было бы обеспечение альтернативных соединений для лечения FAP и других транстиретин-ассоциированных амилоидозов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что ингибиторы катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) пригодны для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза.
Как показано в примерах ниже, ингибитор СОМТ толкапон обладает сильной ингибирующей активностью в отношении образования амилоида из TTR. Хорошая ингибиторная активность толкапона выявляется по его низкому значению IC50 и высокому значению процента снижения амилоидоза (RA%).
Таким образом, первый аспект настоящего изобретения относится к ингибитору СОМТ для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза. Этот аспект можно переформулировать как применение ингибитора СОМТ для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза.
Частью настоящего изобретения также является способ предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза, включающий введение ингибитора СОМТ субъекту, нуждающемуся в этом. В конкретном варианте осуществления субъект, нуждающийся в предупреждении и/или лечении, является млекопитающим, в том числе человеком. В дополнительном предпочтительном варианте осуществления млекопитающее является человеком.
По сравнению с тафамидисом, который на сегодняшний день является наиболее передовым фармакологическим соединением для лечения FAP, толкапон обладает в четыре раза более низким IC50 in vitro, что означает, что концентрация толкапона, необходимая для 50% ингибирования образования фибрилл из TTR, намного ниже таковой тафамидиса (см. примеры ниже). Примеры ниже дополнительно демонстрируют, что толкапон связывается с TTR и предупреждает TTR-индуцированную цитотоксичность в большей степени, чем тафамидис. В соответствии с этими результатами толкапон более эффективен при снижении образования фибрилл из TTR, чем эталонное соединение тафамидиса. Кроме предупреждения образования фибрилл из TTR, авторы настоящего изобретения обнаружили, что толкапон проявляет значительную активность дезинтеграции в отношении существующих фибрилл из TTR. Результаты, представленные ниже, показывают, что активность толкапона, связанная с дезинтеграцией фибрилл из TTR, выше таковой тафамидиса.
Ингибиторы СОМТ хорошо известны из уровня техники как соединения, которые ингибируют действие катехол-О-метилтрансферазы, фермента, который вовлечен в деградацию нейротрансмиттеров (Mannisto and Kaakkola, Pharm. Rev., 1999, vol. 51, p. 593-628). Активность ингибитора СОМТ можно определять с помощью способов, известных в области техники, например способов, раскрытых в Zürcher et al. (Biomedical Chromatography, 1996, vol. 10, p.32-36). Ингибиторы СОМТ хорошо известны в области фармакологии для лечения болезни Паркинсона в сочетании с допаминэргическими средствами, такими как L-DOPA.
Было описано несколько ингибиторов СОМТ. Толкапон, энтакапон и нитекапон принадлежат к так называемым "ингибиторам СОМТ второго поколения", которые, как было показано, являются сильными, высокоселективными и активными при пероральном введении ингибиторами СОМТ. Нитрокатехол является ключевой структурой в этих молекулах (Pharm. Rev., 1999, vol. 51, p.593-628, выше). Таким образом, в одном варианте осуществления ингибитор СОМТ для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза представляет собой нитрокатехоловое соединение. В конкретном варианте осуществления нитрокатехоловое соединение характеризуется следующей формулой I:
или является его фармацевтически приемлемой солью, где
R=-C(O)-PhCH3, -CH=C(CN)-C(O)-NEt2 или -CH=C(C(O)CH3)2.
В другом варианте осуществления первого аспекта настоящего изобретения ингибитор СОМТ представляет собой толкапон, энтакапон или нитекапон или их фармацевтически приемлемые соли.
В конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. Толкапон (формула II) является желтым, не имеющим запаха, негигроскопичным, кристаллическим соединением с относительной молекулярной массой 273,25. Его эмпирическая формула C14H11NO5. Химическое название толкапона 3,4-дигидрокси-4'-метил-5-нитробензофенон, и его идентификационный номер по CAS 134308-13-7.
В другом варианте осуществления первого аспекта настоящего изобретения ингибитор СОМТ представляет собой энтакапон или его фармацевтически приемлемую соль. Энтакапон (формула III) является желтым кристаллическим соединением с молекулярной массой 305,29. Его эмпирическая формула C14H15N3O5. Химическое название энтакапона (2E)-2-циано-3-(3,4-дигидрокси-5-нитрофенил)-N,N-диэтил-2-пропенамид и его идентификационный номер по CAS 130929-57-6.
Поскольку эти соединения являются лекарственными средствами, которые были одобрены для медицинского применения при лечении болезни Паркинсона Управлением по контролю качества продуктов питания и лекарственных средств (FDA) и Европейским агентством по лекарственным средствам (ЕМА) в 1998 году, биодоступность и профиль безопасности толкапона и энтакапона были изучены в нескольких клинических испытаниях. Соответственно, эти соединения обладают приемлемым профилем безопасности для применения у человека и хорошей биодоступностью. Их профиль безопасности в сочетании с их высокой ингибиторной активностью в отношении образования фибрилл из TTR делает ингибиторы СОМТ весьма многообещающими лекарственными средствами для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза.
Кроме того, поскольку эти соединения уже были подвергнуты клиническим испытаниям в отношении лечения заболевания человека, клиническая проверка обоснованности концепции сопряжена с меньшими рисками (и более быстрая) в том, что касается осуществления, по сравнению с классической разработкой новых химических объектов. В этом смысле важно подчеркнуть, что значительно меньше исследований необходимо проводить на людях и животных, что, как следствие, предполагает более низкие затраты на разработку и, что более важно, уменьшение страданий людей и животных.
В другом варианте осуществления первого аспекта настоящего изобретения ингибитор СОМТ представляет собой нитекапон или его фармацевтически приемлемую соль. Нитекапон (формула IV) представляет собой соединение с молекулярной массой 265,21. Его эмпирическая формула C12H11NO6, химическое название 3-[(3,4-дигидрокси-5-нитрофенил)метилен]-2,4-пентандион и идентификационный номер по CAS 116313-94-1.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения TTR-ассоциированный амилоидоз представляет собой FAP. В другом варианте осуществления TTR-ассоциированный амилоидоз представляет собой сенильный системный амилоидоз. В другом варианте осуществления TTR-ассоциированный амилоидоз представляет собой семейную амилоидную кардиомиопатию. В еще одном варианте осуществления TTR-ассоциированный амилоидоз представляет собой лептоменингеальный амилоидоз.
Ингибиторы СОМТ, такие как те, которые определены выше, можно применять либо отдельно, либо в комбинации с другими лечебными средствами для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза. Таким образом, во втором аспекте настоящее изобретение относится к комбинации ингибитора СОМТ и дополнительного лечебного средства для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза. Этот вариант осуществления можно переформулировать как комбинация ингибитора СОМТ и дополнительного лечебного средства для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза. Кроме того, частью настоящего изобретения также является способ предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, комбинации ингибитора СОМТ и дополнительного лечебного средства. Неограничивающими примерами дополнительных лечебных средств для применения во втором аспекте настоящего изобретения являются другой ингибитор СОМТ, производное бензоксазола, йододифлунизал, дифлунизал, ресвератрол, тауроурсодезоксихолевая кислота, доксоциклин и эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG). Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Специалист в данной области техники поймет, что фармацевтически приемлемые соли вышеупомянутых дополнительных лечебных средств также можно применять в комбинации по второму аспекту настоящего изобретения.
В одном варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения предусматривается комбинация ингибитора СОМТ и дополнительного лечебного средства, выбранного из группы, состоящей из другого ингибитора СОМТ, производного бензоксазола и йододифлунизала, для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
Производные бензоксазола раскрыты в международной патентной заявке WO 2005113523 как соединения, которые стабилизируют нативное состояние TTR, тем самым ингибируя неправильное сворачивание белка. В одном варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения производные бензоксазола представляют собой соединения формулы V
или их фармацевтически приемлемую соль, где
Y представляет собой COOR, тетразолил, CONHOR, В(ОН)2 или OR;
X представляет собой О; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из водорода, галогена, OR, В(ОН)2 или CF3, и
при этом R представляет собой водород, C1-C6алкил, C1-C6алкенил, C1-C6алкинил, C1-C6циклоалкил, C1-C6гетероциклил, фенил, ксилил, нафтил, тиенил, индолил или пиридил.
В конкретном варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения, и дополнительное лечебное средство представляет собой производное бензоксазола формулы V или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше.
В другом варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения производное бензоксазола представляет собой соединение формулы VI,
или его фармацевтически приемлемую соль, где
Y представляет собой СООН или ОН; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из водорода, галогена, ОН, В(ОН)2 или CF3.
В конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения, и дополнительное лечебное средство представляет собой производное бензоксазола формулы VI или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше.
В другом варианте осуществления производное бензоксазола представляет собой тафамидис. В конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения, и дополнительное лечебное средство представляет собой тафамидис. В другом конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное лечебное средство представляет собой тафамидис.
В другом варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал. В конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения, и дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал. В другом конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль, и дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал.
В другом конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ объединяют с другим ингибитором СОМТ. Предпочтительно, ингибиторы СОМТ представляют собой нитрокатехоловые соединения формулы I или их фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Например, настоящее изобретение предусматривает комбинацию толкапона и энтакапона для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза.
В дополнительном варианте осуществления второго аспекта настоящего изобретения предусматривается комбинация ингибитора СОМТ и дополнительного лечебного средства, выбранного из группы, состоящей из дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксоциклина и EGCG, для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза. EGCG представляет собой основной и самый важный полифенол в зеленом чае. В контексте настоящего изобретения EGCG может применяться как выделенное соединение или входить в состав растительного экстракта, в частности экстракта чая. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Более предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. Конкретный вариант осуществления предусматривает комбинацию толкапона или его фармацевтически приемлемой соли и EGCG для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза.
Специалистам в данной области техники будет очевидно, что комбинация по настоящему изобретению является эффективной не только тогда, когда активные ингредиенты применяют в одной композиции, но также при применении их в двух различных композициях, которые вводятся либо одновременно, либо последовательно, либо отдельно после определенного периода времени. Более того, специалисты в данной области поймут, что ингибитор СОМТ могут прописывать для применения вместе с другим активным ингредиентом в комбинированной терапии для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза и наоборот.
Таким образом, третий аспект настоящего изобретения предусматривает ингибитор СОМТ для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с дополнительным лечебным средством. Этот вариант осуществления можно переформулировать как применение ингибитора СОМТ для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с дополнительным лечебным средством. Частью настоящего изобретения также является способ предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, ингибитора СОМТ в комбинации с дополнительным лечебным средством.
Неограничивающими примерами дополнительных лечебных средств для применения в третьем аспекте настоящего изобретения являются другой ингибитор СОМТ, производное бензоксазола, йододифлунизал, дифлунизал, ресвератрол, тауроурсодезоксихолевая кислота, доксоциклин и EGCG. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Специалист в данной области техники поймет, что фармацевтически приемлемые соли вышеупомянутых дополнительных лечебных средств также можно применять в комбинированной терапии по третьему аспекту настоящего изобретения.
В одном варианте осуществления третьего аспекта настоящего изобретения предусматривается ингибитор СОМТ для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с дополнительным лечебным средством, выбранным из группы, состоящей из другого ингибитора СОМТ, производного бензоксазола и йододифлунизала. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
В конкретном варианте осуществления третьего аспекта настоящего изобретения дополнительное лечебное средство представляет собой другой ингибитор СОМТ. Предпочтительно, ингибиторы СОМТ представляют собой нитрокатехоловые соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Например, настоящее изобретение предусматривает толкапон для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с энтакапоном. В другом конкретном варианте осуществления дополнительное лечебное средство представляет собой производное бензоксазола. Предпочтительно, указанное производное бензоксазола представляет собой соединение формулы V или VI или его фармацевтически приемлемые соли, как определено для второго аспекта настоящего изобретения. Например, настоящее изобретение предусматривает ингибитор СОМТ для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с тафамидисом. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Более предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. Таким образом, настоящее изобретение предусматривает толкапон для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с тафамидисом. В еще одном варианте осуществления дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал. В еще одном варианте осуществления дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал, и ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Настоящее изобретение, таким образом, предусматривает толкапон или его фармацевтически приемлемую соль для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с йододифлунизалом.
В дополнительном варианте осуществления третьего аспекта настоящего изобретения предусматривается ингибитор СОМТ для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с дополнительным лечебным средством, выбранным из группы, состоящей из дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксоциклина и EGCG, для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Более предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает толкапон или его фармацевтически приемлемую соль для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с EGCG.
Четвертый аспект настоящего изобретения предусматривает лечебное средство, выбранное из группы, состоящей из производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксоциклина и EGCG, для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с ингибитором СОМТ. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Специалист в данной области техники будет понимать, что фармацевтически приемлемые соли вышеупомянутых лечебных средств также можно применять в комбинированной терапии по четвертому аспекту настоящего изобретения.
В одном варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения предусматривается лечебное средство, выбранное из группы, состоящей из производного бензоксазола и йододифлунизала, для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с ингибитором СОМТ. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
В конкретном варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения лечебное средство представляет собой производное бензоксазола. Предпочтительно, указанное производное бензоксазола представляет собой соединение формулы V или VI или его фармацевтические соли, как определено для второго аспекта настоящего изобретения. Например, настоящее изобретение предусматривает тафамидис для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с ингибитором СОМТ. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено в отношении первого аспекта настоящего изобретения. Более предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. Таким образом, настоящее изобретение предусматривает тафамидис для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с толкапоном или его фармацевтически приемлемой солью. В еще одном варианте осуществления лечебное средство представляет собой йододифлунизал. В еще одном варианте осуществления дополнительное лечебное средство представляет собой йододифлунизал, и ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Настоящее изобретение предусматривает йододифлунизал для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинации с толкапоном или его фармацевтически приемлемой солью.
В дополнительном варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения предусматривается лечебное средство, выбранное из группы, состоящей из дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксоциклина и EGCG, для применения при предупреждении и/или лечении транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с ингибитором СОМТ. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения. Более предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль. Конкретный вариант осуществления предусматривает EGCG для применения при предупреждении и/или лечении TTR-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с толкапоном или его фармацевтически приемлемой солью.
Дополнительно, ингибитор СОМТ можно применять в качестве дополнительного лечения перед и/или после пересадки печени у пациента с TTR-ассоциированным амилоидозом. Предпочтительно, указанный ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
Настоящее изобретение также предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество ингибитора СОМТ вместе с фармацевтически приемлемыми наполнителями и/или носителями, для предупреждения и/или лечения TTR-ассоциированного амилоидоза. Предпочтительно, указанный ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
Выражение "терапевтически эффективное количество", также называемое "дозой", относится к количеству соединения, которое, при введении, является достаточным для предупреждения развития или облегчения, в какой-то степени, одного или нескольких симптомов заболевания, на которое направлено лечение. Конкретную дозу соединения, которую вводят в соответствии с данным изобретением, будут определять по конкретным обстоятельствам, связанным со случаем, в том числе вводимому соединению, пути введения, конкретному состоянию, подлежащему лечению, и подобным факторам.
Выражение "фармацевтически приемлемые наполнители и/или носители" относится к фармацевтически приемлемым материалам, композициям или средам. Каждый компонент должен быть фармацевтически приемлемым в том смысле, что он является совместимым с другими ингредиентами фармацевтической композиции. Он также должен подходить для применения в контакте с тканью или органом людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергического ответа, иммуногенности или других проблем или осложнений, сопоставимых с целесообразным соотношением польза/риск.
Любую фармацевтически приемлемую соль ингибитора СОМТ можно применять для целей настоящего изобретения. Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований. Предпочтительно, соль представляет собой соль щелочного или щелочноземельного металла.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор СОМТ вводят пациенту в пероральной единичной лекарственной форме. Лекарственные формы включают твердые лекарственные формы, такие как таблетки, порошки, капсулы, пакетики, а также жидкие сиропы, суспензии и эликсиры. Ингибиторы СОМТ и наполнители можно составлять в композиции и лекарственные формы в соответствии со способами, известными в данной области техники. В конкретном варианте осуществления ингибитор СОМТ вводят в виде таблетки, драже или капсулы. Однако ингибиторы СОМТ также можно вводить пациенту в качестве ингредиента инъекционных лекарственных форм. Инъекционные лекарственные формы могут включать жидкости для внутрикожной, внутривенной, внутримышечной или подкожной инъекции, растворы для перфузии, порошок для восстановления жидких инъекционных препаратов и предварительно заполненные шприцы. В контексте настоящего изобретения отвечающим требованиям также может быть составление ингибитора СОМТ для интраназального или ингаляционного введения или для местного нанесения в форме, например, крема, геля, мази или кожного пластыря. Способы получения этих составов известны в данной области техники. Кроме того, ингибитор СОМТ можно составлять в виде лекарственной формы с контролируемым высвобождением. Лекарственные формы с контролируемым высвобождением известны в данной области техники и, в частности, желательны для лечения хронических заболеваний или для введения активных средств, которые могут быть токсичными при высоких дозах или которые демонстрируют низкий период полувыведения при введении пациенту. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
Как упомянуто выше, терапевтически эффективное количество (или доза) ингибитора СОМТ, в контексте настоящего изобретения, представляет собой количество указанного соединения, которое достаточно для предупреждения или облегчения, в некоторой степени, одного или нескольких симптомов TTR-ассоциированного амилоидоза. Например, эффективная ежедневная доза толкапона для применения у человека может находиться в диапазоне от 20 до 600 мг, а эффективная ежедневная доза энтакапона для применения у человека может находиться в диапазоне от 1600 до 2000 мг.
Таким образом, доза ингибитора СОМТ, подлежащего введению, может составлять от 0,1 до 16000 мг/день, или от 0,1 до 12000 мг/день, или от 0,1 до 10000 мг/день, или от 0,1 до 5000 мг/день, или от 0,1 до 3000 мг/день. В конкретном варианте осуществления доза ингибитора СОМТ, подлежащего введению, составляет от 1 до 3000 мг/день. В другом варианте осуществления доза составляет от 1 до 2000 мг/день. Предпочтительно, ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, как определено для первого аспекта настоящего изобретения.
На протяжении всего описания и формулы изобретения подразумевается, что слово "содержит" и вариации этого слова не исключают других технических характеристик, добавок, компонентов или этапов. Дополнительные объекты, преимущества и особенности настоящего изобретения будут очевидны для специалистов в данной области техники при изучении описания или могут выясняться при осуществлении настоящего изобретения на практике. Следующие примеры представлены для иллюстрации, и они не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Более того, настоящее изобретение охватывает все возможные комбинации конкретных и предпочтительных вариантов осуществления, описанных в данном документе.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг. 1. Анализ конкуренции с T4 за связывание с TTR дикого типа (WT) с помощью гель-фильтрации: кривые вытеснения T4 от TTR WT с помощью различных соединений. Y-ось: количество T4, связавшегося с TTR/общее количество T4; Х-ось: log10 концентрации соединения (молярные единицы). Значения соответствуют типичному эксперименту, проведенному в двух повторностях, представлены как среднее +/-стандартное отклонение. Тестовые соединения: тироксин (T4), толкапон (SOM), тафамидис (TAF) и (-)-эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG).
Фиг. 2. Стабильность тетрамеров TTR в присутствии различных соединений с помощью IEF: плазму от контрольных индивидуумов (C) и от пациентов с семейной амилоидной полинейропатией, несущих мутацию V30M (V30M), обрабатывали тестовыми соединениями тафамидис (T); толкапон (S); эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG) или оставляли необработанной (nt) и подвергали IEF при полуденатурирующих условиях, как описано в тексте. Соотношение тетрамер TTR/общее TTR для каждого состояния рассчитывали и представляли как среднее +/- sem (стандартная ошибка среднего).
Фиг. 3. Активация каспазы-3. Клетки шванномы крысы (клеточная линия RN22) инкубировали 24 ч в отсутствие или в присутствии олигомеров TTR Y78F, полученных в отсутствие или в присутствии тестируемых соединений (из расчета 20 мкМ). Активацию каспазы-3 измеряли в клеточных лизатах и выражали как флуоресценция/содержание белка. Образцы: контрольные клетки (C1); клетки, обработанные EGCG (C2); клетки, обработанные тафамидисом (C3); клетки, обработанные толкапоном (C4); контрольные клетки, обработанные олигомером, полученным в отсутствие соединений (O1); клетки, обработанные олигомером, полученным в присутствии EGCG (O2); клетки, обработанные олигомером, полученным в присутствии тафамидиса (O3); клетки, обработанные олигомером, полученным в присутствии толкапона (O4). Результаты представляют собой среднее значение 4 повторностей и стандартное отклонение. Значимые отличия относительно контроля O1 рассчитывали с помощью Т-критерия Стьюдента: *: P<0,05; ***: P<0,005.
Фиг. 4. Анализ при помощи трансмиссионной электронной микроскопии предварительно образованной фибриллы из TTR после 4 дней инкубации с различными соединениями из расчета 36 мкМ. Сверху слева, по часовой стрелке: контроль, тафамидис, EGCG, толкапон.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Кинетический анализ помутнения
Материалы
Рекомбинантный белок Y78F TTR, который представляет собой высокоамилоидогенную вариацию человеческого TTR Tyr78Phe, получали, как описано в Dolado et al. (Dolado I, Nieto J, Saraiva MJ, Arsequell G, Valencia G, Planas A. "Kinetic Assay for High-Throughput Screening of In Vitro Transthyretin Amyloid Fibrillogenesis Inhibitors". J. Comb. Chem., 2005, vol. 7, p. 246-252).
Толкапон получали от Santa Cruz Biotechnology, Inc. Йододифлунизал получали из дифлунизала (Sigma) с помощью реакции с бис(пиридин)иодония тетрафторборатом (IPy2BF4), как описано Barluenga et al. (Barluenga J, González JM, Garcia-Martin MA, Campos PJ, Asensio G. "An expeditious and general aromatic iodination procedure. J Chem Soc Chem Commun, 1992, vol. 14, p. 1016-1017). Тафамидис можно получать с помощью способов, раскрытых в международной патентной заявке WO 2005113523. Основные растворы соединений, анализируемых в качестве ингибиторов, растворяли в DMSO (степень чистоты для спектрофотометрии от Sigma) из расчета концентрации 1,5 мМ. Рабочие растворы получали путем разведения основного раствора 1:4 в H2O/DMSO (2:1). Во всех случаях концентрацию DMSO доводили до 5% (объем/объем) в конечной реакционной смеси для анализа.
Методики
Анализ проводили согласно методике, описанной у Dolado et al. (выше). Анализ включал две стадии, первую стадию, на которой белок Y78F инкубировали вместе с ингибитором в течение 30 минут, и вторую стадию, на которой путем изменения pH индуцировали образование фибрилл и измеряли поглощение в течение 1,5 ч. Кратко, анализ проводили следующим образом.
Сначала получали следующие растворы: основной раствор белка Y78F: 4 мг/мл в 20 мМ фосфате, 100 мМ KCl, pH 7,6. Буфер для инкубации: 10 мМ фосфат, 100 мМ KCl, 1 мМ EDTA, pH 7,6. Буфер для разведения: 400 мМ ацетат натрия, 100 мМ KCl, 1 мМ EDTA, pH 4,2.
Для каждого ингибитора действовали в соответствии со следующим протоколом: точную концентрацию белка в основном растворе определяли с помощью Abs280 и в соответствии с этим значением рассчитывали объем основного раствора Y78F, который добавляли для получения конечной концентрации белка в лунке 0,4 мг/мл, и распределяли его в 6 лунок 96-луночного микропланшета. Различные объемы рабочего раствора ингибитора добавляли для получения конечных концентраций в диапазоне от 0 до 40 мкМ и конечное содержание DMSO в каждой лунке доводили до 5% путем добавления соответствующего объема раствора H2O/DMSO (1:1). Затем добавляли буфер для инкубации до объема 100 мкл. Планшет инкубировали при 37°C в термостатированном планшет-ридере с орбитальным встряхиванием по 15 с каждую минуту в течение 30 мин. В каждую лунку распределяли 100 мкл порцию буфера для разведения и смесь инкубировали при 37°C со встряхиванием (по 15 с каждую минуту) в планшет-ридере. Поглощение при 340 нм отслеживали в течение 1,5 ч с интервалами в 1 минуту. Данные собирали и анализировали с применением программного обеспечения Microsoft Excel. Все анализы осуществляли в двух повторностях.
Анализ результатов
После завершения общей процедуры, указанной выше, получали кривые зависимости от времени, на основании которых рассчитывали первоначальные скорости образования фибрилл (V0), как углы наклона линейного увеличения поглощения. При нанесении на график первоначальных скоростей против концентрации ингибитора в случае всех анализируемых ингибиторов наблюдали экспоненциальное затухание. По данным подбирали уравнение (1):
где V0 представляет собой первоначальную скорость образования фибрилл (в единицах поглощения в час, Abs⋅h-1), и [I] представляет собой концентрацию ингибитора (мкМ). Подгоняемые параметры представляют собой A (Abs⋅h-1), скорость остаточной агрегации при высокой концентрации ингибитора; B (Abs⋅h-1), амплитуда или максимальное снижение первоначальной скорости образования фибрилл; и C (мкМ-1), экспоненциальная константа. А+В равняется первоначальной скорости образования фибрилл в условиях анализа в отсутствие ингибитора.
Следующие параметры подсчитывали для оценки активности соединения как ингибитора образования фибрилл. IC50: концентрация ингибитора, при которой первоначальная скорость образования фибрилл составляет половину таковой без ингибитора. RA(%)=100⋅B/(A+B): процентное снижение скорости образования фибрилл при высокой концентрации ингибитора по сравнению со скоростью при [I]=0. Результаты оценки ингибиторных свойств анализируемых соединений обобщены в таблице 1.
| Таблица 1 | ||
| Значения IC50 и процента снижения амилоидоза (RA) для ингибиторов образования фибрилл из TTR | ||
| Соединение | IC50 (мкМ) | RA (%) |
| Толкапон | 4,8 | 85,8 |
| Йододифлунизал | 3,9 | 99,8 |
| Тафамидис | 16,9 | 99 |
При помощи вышеуказанных результатов можно наблюдать, что толкапон представляет собой эффективный ингибитор образования фибрилл из TTR, поскольку он демонстрирует низкую IC50 и высокий RA. На основании значений IC50 толкапон имеет способность к ингибированию, аналогичную йододифлунизалу, о котором сообщалось как об одном из наиболее сильных ингибиторов образования фибрилл из TTR in vitro. Кроме того, на основании IC50, толкапон более эффективен, чем тафамидис, поскольку он демонстрирует IC50 в четыре раза ниже, чем у тафамидиса. Эти результаты показывают, что толкапон представляет собой многообещающее лекарственное средство в отношении TTR-связанного амилоидоза, такого как FAP, семейная амилоидная кардиомиопатия, сенильный системный амилоидоз и лептоменингеальный амилоидоз.
Пример 2: Конечный анализ помутнения с мутантным вариантом TTR, вызывающим семейную амилоидную кардиомиопатию
Материалы
Рекомбинантный белок V122I TTR, который представляет собой амилоидогенную вариацию человеческого TTR, ассоциированную с семейной амилоидной кардиомиопатией (FAC), получали в соответствии с такой же процедурой, как описано для варианта Y78F, применяемого в примере 1. Плазмидную ДНК, экспрессирующую мутант V122I, получали с помощью сайт-направленного мутагенеза, как сообщали для Y78F у Dolado et al. (выше), но с применением следующих праймеров: 5'-GGATTGGTGATGACAGCCGT-3' и 5'-ACGGCTGTCATCACCAATCC-3'. Толкапон и йододифлунизал получали, как описано в примере 1.
Методики
Данный анализ применяли для вариантов TTR с более низкой амилоидогенностью, чем у варианта Y78F, когда кинетический анализ помутнения являлся недостаточно чувствительным для точных измерений. Методика, в соответствии с которой тестировали ингибиторы с помощью данного конечного анализа в 72 ч, описан у Dolado et al. (выше). V122I TTR инкубировали с ингибитором при таких же условиях, как описаны выше для кинетического анализа помутнения (пример 1), с применением белка V122I с концентрацией 0,4 мг/мл и трех различных концентраций ингибитора: 3,6, 7,2 и 21,8 мкМ, которые соответствуют 0,5×[белок], 1×[белок] и 3×[белок]. После индукции кислотой (добавления буфера для разведения) образцы инкубировали без встряхивания в течение 72 ч при 37°C и затем гомогенизировали путем перемешивания для ресуспендирования всех присутствующих фибрилл. Помутнение измеряли при 340 нм и нормализовали относительно амилоидогенеза в отсутствие ингибитора.
Результат
Ингибиторную активность тестируемых соединений оценивали как процент снижения поглощения образцов, содержащих ингибитор, при сравнении с контрольными образцами, не содержащими ингибитор.
| Таблица 2 | |||
| Значения % уменьшения фибрилл для ингибиторов образования фибрилл из V122I TTR | |||
| Концентрация ингибитора: | 0,5×[белок] | 1×[белок] | 3×[белок] |
| Толкапон | 79,3% | 84,3% | 100,0% |
| Йододифлунизал | 83,2% | 85,0% | 88,2% |
%уменьшения фибрилл = 100 × (1-помутнение образца/помутнение холостой пробы), где помутнение образца представляет собой помутнение, измеренное в присутствии ингибитора, и помутнение холостой пробы представляет собой таковое в отсутствие ингибитора.
Вышеприведенные результаты показывают, что толкапон эффективно ингибирует образование фибрилл мутантным V122I ATTR даже при молярном соотношении ингибитор:белок 1:2(0,5×[белок]). На основании этих значений толкапон имеет способность к ингибированию, аналогичную йододифлунизалу. Эти результаты показывают, что толкапон является многообещающим лекарственным средством в отношении TTR-связанного амилоидоза, в том числе семейной амилоидной кардиомиопатии, которая в основном вызывается мутацией V122I.
Примеры 3-6
Материалы для примеров 3-6
Толкапон и тафамидис получали, как описано в примере 1. Эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG, № по CAS 989-51-5) приобретали у Cayman Chemicals (# 70935). Рекомбинантные варианты TTR дикого типа (TTR WT), TTR Y78F и TTR L55P получали в бактериальной системе экспрессии с применением Escherichia coli BL21. Рекомбинантные TTR выделяли и очищали, как описано ранее (Ferreira et al., 2009, FEBS Lett, vol. 583, p. 3569-76). Цельную кровь от гетерозиготных носителей TTR V30M и от контрольных индивидуумов получали из коллекции образцов, доступных в Molecular Neurobiology Group, IBMC (Университет Порту). Образцы крови были собраны в присутствии EDTA, и их центрифугировали для отделения плазмы. Образцы плазмы держали замороженными при -20°C.
Пример 3: Анализ конкуренции с тироксином (T4) за связывание с TTR дикого типа (WT) с помощью гель-фильтрации
Связывание низкомолекулярных лигандов с участками связывания для T4 на TTR может стабилизировать тетрамер TTR и замедлять диссоциацию тетрамера и амилоидогенез in vitro. Для оценки связывания конкуренцию тестовых соединений с T4 (Sigma-Aldrich) за связывание с TTR WT оценивали количественно с помощью методики гель-фильтрации с применением постоянного количества TTR (100 мкл 60 нМ раствора), инкубируемого со следовым количеством меченного радиоактивной меткой [125I]T4 (соответствующего 50000 cpm; специфическая активность 125I-T4 1250 мкКи/мкг, от Perkin-Elmer, Массачуссетс, США) и с 100 мкл раствора каждого из тестовых соединений или T4 (положительный контроль) при различных концентрациях, а именно 0, 20, 60, 200, 600, 2000, 6000 и 20000 нМ (конечная концентрация 0-10 мкМ) (Ferreira et al., 2011, FEBS Lett., vol. 585, p. 2424-30). Отрицательный контроль получали с помощью белка, а также меченного T4, а также 100 мкл TNE (в отсутствие конкурента). Все растворы получали в буфере TNE (Tris 0,1 М, NaCl 0,1 M, EDTA 1 мМ). Все образцы получали в двух повторностях. Радиоактивность измеряли в каждом образце с помощью сцинтилляционного гамма-счетчика Wizard 14701, Wallac. Затем образцы инкубировали на протяжении ночи при 4°C. После инкубации T4, связавшийся с TTR, отделяли от несвязавшегося T4 путем фильтрации через колонку для гель-фильтрации P6DG (1 мл, BioRad). Радиоактивность измеряли в элюированных образцах. Результаты выражали как количество T4, связавшегося с TTR/общее количество T4 против Log общей концентрации тестовых соединений (конкурентов). По данным подбирали кривую нелинейной регрессии применительно к конкуренции за связывание по одному участку с помощью программного обеспечения GraphPad Prism с применением следующего уравнения: Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^(X-LogEC50)).
На фигуре 1 показаны результаты конкуренции с T4 за связывание с TTR дикого типа для конкурентов: тироксина (T4), толкапона (SOM), тафамидиса (TAF) и (-)-эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG). Результаты показаны как кривые вытеснения T4 от TTR WT с помощью различных соединений. На основании каждой кривой доза-ответ определяли значение EC50 (концентрация ингибитора, при которой вытесняется половина связанного T4) для каждого соединения. Кроме того, также рассчитывали относительную активность в отношении ингибирования связывания T4, определяемую как соотношение EC50 (T4)/EC50 (тестируемого соединения), и она показана в таблице 3.
| Таблица 3 | ||
| EC50 и относительная активность ингибирования лекарственным средством связывания Т4 | ||
| EC50 нМ | Относительная активность ингибирования лекарственным средством связывания Т4 | |
| Тироксин (T4) | 50,11 нМ | 1 |
| Толкапон | 41,85 нМ | 1,19 |
| Тафамидис | 214,4 нМ | 0,23 |
| EGCG | - | Аффинность отсутствует |
Эти результаты показывают, что толкапон и тафамидис имеют аналогичную аффинность связывания с TTR, тогда как EGCG не конкурирует с T4 за связывание с TTR. EC50 толкапона была в 4 раза ниже таковой тафамидиса, что показывает, что толкапон является более эффективным при связывании тетрамера TTR, что позволяет предположить более высокий противоамилоидогенный потенциал.
Пример 4: Оценка стабильности тетрамера TTR с помощью изоэлектрического фокусирования (IEF)
Для оценки эффекта тестируемых соединений на устойчивость тетрамера TTR к диссоциации стабильность TTR оценивали с помощью IEF в полуденатурирующих условиях, как описано ранее (Ferreira et al., 2009, FEBS Lett, vol. 583, p. 3569-76). Образцы получали следующим образом: 30 мкл человеческой плазмы от контрольных индивидуумов и носителей TTR V30M инкубировали с 5 мкл 10 мМ раствора тестовых соединений и контрольных (EGCG) соединений на протяжении ночи при 4°C с последующей инкубацией при RT в течение 1 ч. Препараты подвергали нативному PAGE (5% акриламид) и полоску геля, содержащую TTR, вырезали и наносили на гель для IEF (5% акриламид). IEF проводили в полуденатурирующих условиях (4 М мочевина) при содержании 5% (объем/объем) амфолитов с pH 4-6,5 (GE Healthcare) при 1200 B в течение 6 часов. Белки окрашивали Кумасси голубым, гели сканировали и подвергали измерению оптической плотности с применением программы ImageQuant (HP Scanjet 4470 с, Hewlett Packard). В отсутствие какого-либо соединения TTR плазмы имеет характерный паттерн полосок, образованный мономером, окисленным мономером и несколькими полосками с более низкой изоэлектрической точкой (pI), соответствующими различным формам тетрамеров. Всего 12 образцов плазмы (5 от контрольных индивидуумов и 7 от носителей TTR V30M) анализировали в 3 гелях для IEF. Для каждого условия обработки обрабатывали минимум по 4 образца от различных доноров. Соотношение тетрамера TTR к общему количеству TTR (тетрамер TTR + мономер) рассчитывали для каждого образца плазмы и представили на фигуре 2. Это соотношение в норме выше в плазме от нормальных индивидуумов, чем в плазме от гетерозиготных носителей TTR V30M, как видно на фигуре 2. Обработка толкапоном повышает количество тетрамера TTR относительно мономерных форм по сравнению с необработанными контрольными образцами плазмы как в случае нормального, так и мутантного TTR и в большей степени, чем тафамидис.
Повышение соотношения тетрамер/общее количество TTR, индуцированное путем обработки тестовыми соединениями, объединяли для всех образцов и представили в таблице 4 как % стабилизации. Эти значения рассчитывали после нормализации соотношения тетрамер/общее количество TTR, полученного для каждого образца, с соотношением, полученным для необработанной плазмы соответствующего индивидуального донора, как описано ниже: % стабилизации = 100×((соотношение образца - соотношение nt) / соотношение nt). При этом "соотношение образца" представляет собой соотношение тетрамер/общее количество TTR в присутствии соединения; а "соотношение nt" представляет собой соотношение тетрамер/общее количество TTR необработанной плазмы от того же донора.
| Таблица 4 | |
| Стабильность тетрамера TTR в присутствии соединений | |
| % стабилизации (среднее +/- sem) | |
| Толкапон | 29,9 +/- 7,64 |
| Тафамидис | 16,4 +/- 5,49 |
| EGCG | 51,26 +/- 14,21 |
Обработка стабилизатором TTR, таким как тафамидис или толкапон, повышает соотношение тетрамера к мономерным формам. Результаты, показанные выше, явно демонстрируют, что толкапон обеспечивает лучший эффект стабилизации на тетрамеры TTR, чем тафамидис.
Пример 5: Анализы клеточной токсичности
Для оценки TTR-индуцированной цитотоксичности и профилактического эффекта тестируемых соединений клетки шванномы крысы (RN22, полученные из Американской коллекции типовых культур АТСС), клетки с 80% конфлюентностью в минимальной питательной среде Дульбекко с 10% фетальной бычьей сывороткой в течение 24 часов подвергали воздействию 2 мкМ олигомеров TTR Y78F. Эти олигомеры получали путем инкубации растворимого TTR Y78F либо в отсутствие, либо в присутствии 10× молярного избытка (конечная концентрация составляет 20 мкМ) тестовых соединений или контроля (EGCG) при 37°C в течение 6 дней. Затем клетки трипсинизировали и клеточные лизаты применяли для определения активации каспазы-3 с помощью флуориметрической аналитической системы CaspACE на основе 96-луночного планшета (Sigma). Концентрацию белка в лизатах определяли с помощью набора для анализа белка Bio-Rad.
Результаты, полученные в отношении активности каспазы-3 и количественного определения белка в каждой лунке с клеточной культурой, представлены на фигуре 3. Внеклеточное добавление необработанных олигомеров TTR Y78F (контроль, 01) приводило к повышению внутриклеточных уровней каспазы-3 и, таким образом, к гибели клеток. Олигомеры TTR Y78F, полученные в присутствии соединений, которые ингибируют образование токсических разновидностей олигомеров (02-04), приводили к более низким уровням активации каспазы-3 в клетках RN22. Снижение клеточной токсичности в присутствии соединений (выраженное как 100% относительно контроля O1) показано в таблице 5. Можно наблюдать, что толкапон демонстрировал большее снижение клеточной токсичности (29%) по сравнению с тафамидисом (12%).
| Таблица 5 | |
| Снижение клеточной токсичности в присутствии соединений | |
| Толкапон | 29% |
| Тафамидис | 12% |
| EGCG | 50% |
Пример 6: Дезинтеграция фибрилл
Для изучения эффекта тестовых соединений на дезинтеграцию фибрилл из TTR применяли предварительно образованные фибриллы из TTR, полученные путем инкубации профильтрованного (через 0,2 мкм фильтры) раствора TTR L55P (2 мг/мл в PBS≈3,6 мкМ) в течение 15 дней при 37°C. Впоследствии образцы инкубировали либо в отсутствие (контроль), либо в присутствии 10× молярного избытка (36 мкМ) (конечная концентрация) тестовых соединений в течение 4 дней при 37°C. Эффект дезинтеграции оценивали с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (ТЕМ) и динамического рассеяния света (DLS), как описано ранее (Ferreira et al., 2009, FEBS Lett, vol. 583, p. 3569-76).
Наблюдали, что контрольный образец предварительно образованных фибрилл из TTR (контроль) в основном был образован крупными агрегатами и фибриллами (частицами с диаметром больше 1000 нм) и лишь небольшое количество белка находилось в растворимой форме (частицы диаметром 10 нм). Поскольку фибриллы подвергались дезинтеграции под действием тестируемых соединений, относительное количество крупных агрегатов уменьшалось, а малых агрегатов и растворимого белка увеличивалось (см. фигуру 4).
Активность дезинтеграции фибрилл определяли количественно на основании DLS-анализа как относительную интенсивность (%) по отношению к агрегатам и растворимым частицам после 4 дней обработки с помощью 36 мкМ соединений (таблица 6).
| Таблица 6 | |||
| DLS-анализ фибрилл из TTR | |||
| Относительная интенсивность (%) | |||
| Растворимые частицы (~10 нм) | Агрегаты (~10-100 нм) | Агрегаты (~1000 нм) | |
| Контроль | 28,2 | - | 71,8 |
| Толкапон | 56,1 | 5,9 | 38 |
| Тафамидис | 35,2 | 6,7 | 58,1 |
| EGCG | 49,1 | 26,3 | 24,6 |
Можно наблюдать, что в образцах, обработанных толкапоном, имелось в результате большее количество малых агрегатов и растворимых белков, таким образом проявлялась значительная активность дезинтеграции. Результаты также демонстрируют, что толкапон обладает более высокой активностью дезинтеграции фибрилл, чем тафамидис.
Результаты, полученные с помощью экспериментов 1-6, явно показывают, что толкапон обладает высокой ингибиторной активностью в отношении образования амилоидных фибрилл из TTR и такая ингибиторная активность является более высокой, чем у тафамидиса, который был описан для лечения FAP. Кроме того, толкапон может обеспечивать дезинтеграцию предварительно образованных амилоидных фибрилл из TTR эффективнее, чем тафамидис. В целом результаты указывают на то, что толкапон можно эффективно применять в качестве лекарственного препарата для лечения всех типов TTR-ассоциированного амилоидоза.
Claims (37)
1. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза, отличающееся тем, что указанный ингибитор СОМТ представляет собой нитрокатехоловое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль
где R выбран из группы, состоящей из -C(O)-PhCH3, -CH=C(CN)-C(O)-NEt2 и -СН=С(С(O)СН3)2.
2. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по п. 1, отличающееся тем, что ингибитор СОМТ представляет собой толкапон или его фармацевтически приемлемую соль.
3. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по любому из п. 1 или п. 2, отличающееся тем, что транстиретин-ассоциированный амилоидоз представляет собой семейную амилоидную полинейропатию.
4. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по любому из п. 1 или п. 2, отличающееся тем, что транстиретин-ассоциированный амилоидоз представляет собой сенильный системный амилоидоз.
5. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по любому из п. 1 или п. 2, отличающееся тем, что транстиретин-ассоциированный амилоидоз представляет собой лептоменингеальный амилоидоз.
6. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по любому из п. 1 или п. 2, отличающееся тем, что транстиретин-ассоциированный амилоидоз представляет собой семейную амилоидную кардиомиопатию.
7. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по п. 1, отличающееся тем, что ингибитор СОМТ вводится в виде инъекционной лекарственной формы, в виде пероральной лекарственной формы или в виде лекарственной формы с контролируемым высвобождением.
8. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), как он определен в п. 1, для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с дополнительным лечебным средством, выбранным из группы, состоящей из другого ингибитора СОМТ по п. 1, производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксициклина и эпигаллокатехин-3-галлата, где производное бензоксазола представляет собой соединение формулы V
или его фармацевтически приемлемую соль, где
Y выбран из группы, состоящей из COOR, тетразолила, CONHOR, В(ОН)2 и OR;
X представляет собой О; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, OR, В(ОН)2 и CF3, и где
R выбран из группы, состоящей из водорода,C1-C6алкила, C1-C6алкенила, C1-C6алкинила, C1-C6циклоалкила, C1-C6гетероциклила, фенила, ксилила, нафтила, тиенила, индолила и пиридила.
9. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по п. 8, отличающееся тем, что производное бензоксазола представляет собой соединение формулы VI
или его фармацевтически приемлемую соль, где
Y выбран из группы, состоящей из СООН и ОН; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, ОН, В(ОН)2 и CF3.
10. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по любому из п. 8 или п. 9, отличающееся тем, что производное бензоксазола представляет собой тафамидис.
11. Применение ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ) по п. 8, отличающееся тем, что ингибитор СОМТ вводится в виде инъекционной лекарственной формы, в виде пероральной лекарственной формы или в виде лекарственной формы с контролируемым высвобождением.
12. Применение комбинации ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), как он определен в п. 1, и дополнительного лечебного средства, выбранного из группы, состоящей из другого ингибитора СОМТ по п. 1, производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксициклина и эпигаллокатехин-3-галлата, для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза, где производное бензоксазола представляет собой соединение формулы V
или его фармацевтически приемлемую соль, где
Y выбран из группы, состоящей из COOR, тетразолила, CONHOR, В(ОН)2 и OR;
X представляет собой О; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, OR, В(ОН)2 и CF3, и где
R представляет собой водород, C1-C6алкил, C1-C6алкенил, C1-C6алкинил, C1-C6циклоалкил, C1-C6гетероциклил, фенил, ксилил, нафтил, тиенил, индолил или пиридил.
13. Применение лечебного средства, выбранного из группы, состоящей из производного бензоксазола, йододифлунизала, дифлунизала, ресвератрола, тауроурсодезоксихолевой кислоты, доксициклина и эпигаллокатехин-3-галлата, для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения транстиретин-ассоциированного амилоидоза в комбинированной терапии с ингибитором катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), как он определен в п. 1, где производное бензоксазола представляет собой соединение формулы V
или его фармацевтически приемлемую соль, где
Y выбран из группы, состоящей из COOR, тетразолила, CONHOR, В(ОН)2 и OR;
X представляет собой О; и
каждый из R1, R2 и R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, OR, В(ОН)2 и CF3, и где
R выбран из группы, состоящей из водорода, C1-C6алкила, C1-C6алкенила, C1-C6алкинила, C1-C6циклоалкила, C1-C6гетероциклила, фенила, ксилила, нафтила, тиенила, индолила и пиридила.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11382326.4 | 2011-10-24 | ||
| EP11382326 | 2011-10-24 | ||
| PCT/EP2012/070945 WO2013060668A1 (en) | 2011-10-24 | 2012-10-23 | New therapy for transthyretin-associated amyloidosis |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017119539A Division RU2747536C2 (ru) | 2011-10-24 | 2012-10-23 | Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014114930A RU2014114930A (ru) | 2015-12-10 |
| RU2623062C2 true RU2623062C2 (ru) | 2017-06-21 |
Family
ID=47076222
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017119539A RU2747536C2 (ru) | 2011-10-24 | 2012-10-23 | Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза |
| RU2014114930A RU2623062C2 (ru) | 2011-10-24 | 2012-10-23 | Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017119539A RU2747536C2 (ru) | 2011-10-24 | 2012-10-23 | Новая терапия транстиретин-ассоциированного амилоидоза |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US9610270B2 (ru) |
| EP (1) | EP2770988B1 (ru) |
| JP (1) | JP6068484B2 (ru) |
| KR (1) | KR102017354B1 (ru) |
| CN (1) | CN103889407B (ru) |
| AU (2) | AU2012327275B2 (ru) |
| BR (1) | BR112014009322B1 (ru) |
| CA (1) | CA2852808C (ru) |
| CL (1) | CL2014000893A1 (ru) |
| CY (1) | CY1118151T1 (ru) |
| ES (1) | ES2593038T3 (ru) |
| HK (1) | HK1198432A1 (ru) |
| IL (1) | IL231907B (ru) |
| MX (1) | MX347784B (ru) |
| PL (1) | PL2770988T3 (ru) |
| PT (1) | PT2770988T (ru) |
| RU (2) | RU2747536C2 (ru) |
| SG (2) | SG11201401215VA (ru) |
| WO (1) | WO2013060668A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201402546B (ru) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2770988B1 (en) * | 2011-10-24 | 2016-07-20 | Som Innovation Biotech S.L. | New therapy for transthyretin-associated amyloidosis |
| HUE059857T2 (hu) * | 2014-08-29 | 2023-01-28 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Patizirán transztiretin által közvetített amiloidózis kezelésében történõ alkalmazásra |
| EP3275433A1 (en) * | 2016-07-29 | 2018-01-31 | Som Innovation Biotech S.L. | Sustained release composition comprising micronized tolcapone |
| CA3093809A1 (en) * | 2018-03-12 | 2019-09-19 | Corino Therapeutics, Inc. | Combination therapy for ttr amyloidosis |
| MX2021014682A (es) * | 2019-05-31 | 2022-04-06 | Plex Pharmaceuticals Inc | Agentes farmacológicos para tratar enfermedades de agregación de proteínas de los ojos. |
| CN114324693B (zh) * | 2022-01-14 | 2023-01-13 | 大连博源医学科技有限公司 | 一种血液中转甲状腺素蛋白(ttr)四聚体浓度测定的预处理方法和检测方法 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5744368A (en) | 1993-11-04 | 1998-04-28 | Research Foundation Of State University Of New York | Methods for the detection of soluble amyloid β-protein (βAP) or soluble transthyretin (TTR) |
| AU5727798A (en) | 1996-12-23 | 1998-07-17 | Texas A & M University, The | Anti-amyloidogenic agents |
| FI20002044A0 (fi) * | 2000-09-15 | 2000-09-15 | Orion Yhtymae Oyj | Comt-entsyymiä estäviä naftaleenijohdannaisia |
| WO2003013442A2 (en) | 2001-03-15 | 2003-02-20 | Proteotech. Inc. | Catechins for the treatment of fibrillogenesis in alzheimer's disease, parkinson's disease, systemic aa amyloidosis, and other amyloid disorders |
| WO2004065614A2 (en) | 2002-01-29 | 2004-08-05 | Protemix Corporation Limited | Suppression of cytotoxic protein conformers |
| US20040175382A1 (en) | 2003-03-06 | 2004-09-09 | Schafer Peter H. | Methods of using and compositions comprising selective cytokine inhibitory drugs for the treatment and management of disorders of the central nervous system |
| KR20060124712A (ko) | 2004-02-20 | 2006-12-05 | 노파르티스 아게 | 신경퇴행 및 인지 장애를 치료하기 위한 ｄｐｐ ⅳ 억제제 |
| CN1921856A (zh) * | 2004-02-20 | 2007-02-28 | 诺瓦提斯公司 | 用于治疗神经变性疾病和认知障碍的dpp－iv抑制剂 |
| JP2007538103A (ja) * | 2004-05-20 | 2007-12-27 | ザ スクリップス リサーチ インスティテュート | トランスサイレチン安定化 |
| KR101414810B1 (ko) | 2004-08-30 | 2014-07-18 | 주식회사 유스팜인터내셔널 | 국소 허혈 모델에서의 가용화 ｕｄｃａ의 신경보호 효과 |
| GB2429645A (en) | 2006-03-10 | 2007-03-07 | Sekhsaria Chemicals Ltd | Solid pharmaceutical composition comprising a COMT inhibitor, a starch and a wetting agent |
| US20120016037A1 (en) | 2006-07-24 | 2012-01-19 | Frank Toppo | Method for prevention and treatment of Alzheimers |
| GB0718718D0 (en) | 2007-09-25 | 2007-11-07 | Pentraxin Therapeutics Ltd | Compound and use thereof |
| DE102010010572A1 (de) | 2010-03-08 | 2011-09-08 | Mahle International Gmbh | Trockenseparator |
| EP2770988B1 (en) * | 2011-10-24 | 2016-07-20 | Som Innovation Biotech S.L. | New therapy for transthyretin-associated amyloidosis |
-
2012
- 2012-10-23 EP EP12778323.1A patent/EP2770988B1/en active Active
- 2012-10-23 KR KR1020147010767A patent/KR102017354B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-23 PT PT127783231T patent/PT2770988T/pt unknown
- 2012-10-23 AU AU2012327275A patent/AU2012327275B2/en active Active
- 2012-10-23 CN CN201280051812.8A patent/CN103889407B/zh active Active
- 2012-10-23 ES ES12778323.1T patent/ES2593038T3/es active Active
- 2012-10-23 RU RU2017119539A patent/RU2747536C2/ru active
- 2012-10-23 BR BR112014009322-9A patent/BR112014009322B1/pt active IP Right Grant
- 2012-10-23 MX MX2014004863A patent/MX347784B/es active IP Right Grant
- 2012-10-23 RU RU2014114930A patent/RU2623062C2/ru active
- 2012-10-23 SG SG11201401215VA patent/SG11201401215VA/en unknown
- 2012-10-23 SG SG10201609933WA patent/SG10201609933WA/en unknown
- 2012-10-23 WO PCT/EP2012/070945 patent/WO2013060668A1/en active Application Filing
- 2012-10-23 JP JP2014536290A patent/JP6068484B2/ja active Active
- 2012-10-23 US US14/353,459 patent/US9610270B2/en active Active
- 2012-10-23 PL PL12778323T patent/PL2770988T3/pl unknown
- 2012-10-23 CA CA2852808A patent/CA2852808C/en active Active
-
2014
- 2014-04-03 IL IL231907A patent/IL231907B/en active IP Right Grant
- 2014-04-08 ZA ZA2014/02546A patent/ZA201402546B/en unknown
- 2014-04-09 CL CL2014000893A patent/CL2014000893A1/es unknown
- 2014-11-26 HK HK14111954.5A patent/HK1198432A1/xx unknown
-
2016
- 2016-09-20 CY CY20161100934T patent/CY1118151T1/el unknown
-
2017
- 2017-03-02 US US15/448,054 patent/US10045956B2/en active Active
- 2017-04-21 AU AU2017202670A patent/AU2017202670B2/en active Active
-
2018
- 2018-08-13 US US16/101,882 patent/US10449169B2/en active Active
-
2019
- 2019-09-12 US US16/569,055 patent/US10786473B2/en active Active
-
2020
- 2020-08-28 US US17/005,893 patent/US11564899B2/en active Active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| KLABUNDE T. et al. Rational design of potent transthyretin amyloid disease inhibitors. Nat.Struct.Biol. 2000 Apr;7(4): 312-21 [он лайн] [найдено 29.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10742177)WO03/013442 А2 20.02.2003US2010/0249233 A1 30.09.2010RU2394570 C2 20.07.2010GB2429645 A 07.03.2007GALES L. et al. Human transthyretin in complex with iododiflunisal: structural features associated with a potent amyloid inhibitor. Biochem.J. 2005 Jun 1;388(Pt 2); 615-21 Реферат [он лайн] [найдено 26.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1569188)RU2428987 C2 20.09.2011GUPTA S. et al. Design of mechanism-based inhibitors of transthyretin amyloidosis: studies with biphenyl ethers and new structural templates. J.Med.Chem. 2007 Nov 15; 50(23): 5589-99 Реферат [он лайн] [найдено 29.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17948976)Fx-1006A CID24970412 Реферат [он лайн] [найдено 29.08.2016] (Найдено из Интернет: pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/substa * |
| WO2003/063880 A1 07.08.2003WO2011/100396 A2 18.08.2011US2005/0282780 A1 22.12.2005WO2008/013764 A2 31.01.2008KLABUNDE T. et al. Rational design of potent transthyretin amyloid disease inhibitors. Nat.Struct.Biol. 2000 Apr;7(4): 312-21 [он лайн] [найдено 29.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10742177)WO03/013442 А2 20.02.2003US2010/0249233 A1 30.09.2010RU2394570 C2 20.07.2010GB2429645 A 07.03.2007GALES L. et al. Human transthyretin in complex with iododiflunisal: structural features associated with a potent amyloid inhibitor. Biochem.J. 2005 Jun 1;388(Pt 2); 615-21 Реферат [он лайн] [найдено 26.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1569188)RU2428987 C2 20.09.2011GUPTA S. et al. Design of mechanism-based inhibitors of transthyretin amyloidosis: studies with biphenyl ethers and new structural templates. J.Med.Chem. 2007 Nov 15; 50(23): 5589-99 Реферат [он лайн] [найдено 29.08.2016] (Найдено из Интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17948976)Fx-1 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11564899B2 (en) | Therapy for transthyretin-associated amyloidosis | |
| JP7242945B2 (ja) | 細胞生存率を向上させるための組成物およびその使用方法 | |
| Anand et al. | Therapeutics of Alzheimer's disease: Past, present and future | |
| EP2397139B1 (en) | Anti-neurodegenerative disease agent | |
| Bolognin et al. | Chelation therapy for neurodegenerative diseases | |
| KR100676124B1 (ko) | 엔-[2-히드록시-3-(1-피페리디닐)프로폭시]피리딘-1-옥사이드-3-카르복시미도일 클로라이드 및 인슐린 내성 치료에 있어서의 이의 용도 | |
| US9486430B2 (en) | Treatment of neurodegenerative disease | |
| DE69832695T2 (de) | Verwendung von r-enantiomeren nichtsteroidaler entzündungshemmer zur vorbeugung der alzheimerschen krankheit | |
| JP2005500346A (ja) | タウフィラメント形成重合を阻害するかまたは逆転させる方法 | |
| US20210069139A1 (en) | Stabilization of transthyretin tetramers in biological fluids | |
| NZ623267B2 (en) | New therapy for transthyretin-associated amyloidosis | |
| FR2819187A1 (fr) | Utilisation des substances chelatrices pour le traitement et la prevention de la deferrescence oculaire | |
| Hamo | MPTP model of Parkinson's disease: Mechanisms of neurodegeneration and potential neuroprotective compounds | |
| CA2213507A1 (en) | Pharmaceutical composition for treating transient ischemic attack |