RU2599495C2 - Способ активации регуляторных т-клеток агонистами альфа-2в адренергических рецепторов - Google Patents

Способ активации регуляторных т-клеток агонистами альфа-2в адренергических рецепторов Download PDF

Info

Publication number
RU2599495C2
RU2599495C2 RU2013110877/15A RU2013110877A RU2599495C2 RU 2599495 C2 RU2599495 C2 RU 2599495C2 RU 2013110877/15 A RU2013110877/15 A RU 2013110877/15A RU 2013110877 A RU2013110877 A RU 2013110877A RU 2599495 C2 RU2599495 C2 RU 2599495C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
alpha
cells
compound
group
receptor
Prior art date
Application number
RU2013110877/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2013110877A (ru
Inventor
Дэниел В. ДЖИЛ
Джон Е. ДОНЕЛЛО
Лорен М.Б. ЛУРС
Веена ВИСВАНАТ
Original Assignee
Аллерган, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Аллерган, Инк. filed Critical Аллерган, Инк.
Publication of RU2013110877A publication Critical patent/RU2013110877A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2599495C2 publication Critical patent/RU2599495C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/17—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4168—1,3-Diazoles having a nitrogen attached in position 2, e.g. clonidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/421—1,3-Oxazoles, e.g. pemoline, trimethadione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использована для лечения болезни сухого глаза. Для этого пациенту вводят агонист альфа-2В рецепторов, который выбирают из группы, состоящей из: имидазолина или имидазола. Группа изобретений относится также к лечению болезни сухого глаза агонистами альфа-2 рецепторов пациента, испытывающего недостаток существенной активности агониста альфа-2А рецепторов. Использование данной группы изобретений, а именно указанных соединений, запускает механизм иммуномодуляции путем регуляции Т-клеток, сокращения уровня цитокинов ИЛ-17 и ФНО, снижения потери бокаловидных клеток. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 12 ил., 4 табл.

Description

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ
Данная заявка заявляет права в пользу предварительной заявки на патент США серийный №61/374124, поданной 16 августа 2010 г., которая включена сюда в качестве ссылки в полном объеме.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Описанное здесь является открытием, что есть альфа-2B адренорецепторы на подтип Т-клеток, и что агонисты альфа-2 рецепторов могут быть использованы для модуляции активности таких Т-клеток и тем самым лечения тех заболеваний, при которых Т-клеточная дисфункция играет роль, в том числе неврита, синдрома Гийена-Барре, ревматоидного артрита, сахарного диабета типа I, рассеянного склероза (MS), болезни трансплантат против хозяина (РТПХ), аутоиммунного увеита, глазного воспаления, сухого кератоконъюнктивита (синдром сухого глаза), синдрома Шегрена, атопического дерматита, псориаза, воспалительного заболевания кишечника, синдрома раздраженного кишечника, астмы и апластической анемии.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к способу положительной регуляции регуляторной функции Т-клеток у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в такой регуляции, агониста альфа-2B рецепторов.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу положительной регуляции регуляторной T-клеточной функции у пациента, включающему введение пациенту, нуждающемуся в такой регуляции, агониста альфа-2 рецепторов, испытывающего недостаток существенной активности альфа-2A рецепторов.
В другом варианте воплощения, регуляторная T-клетка, упомянутая в предыдущих двух пунктах, является CD25+, FoxP3+ T-клеткой.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания, выбранного из неврита, синдрома Гийена-Барре, ревматоидного артрита, сахарного диабета типа I, рассеянного склероза, болезни трансплантат против хозяина, аутоиммунного увеита, глазного воспаления, синдрома сухого глаза, атопического дерматита, псориаза, воспалительного заболевания кишечника, астмы и апластической анемии путем введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, агониста альфа-2B рецептора.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания, выбранного из неврита, синдрома Гийена-Барре, ревматоидного артрита, сахарного диабета типа I, рассеянного склероза, болезни трансплантат против хозяина, аутоиммунного увеита, глазного воспаления, синдрома сухого глаза, атопического дерматита, псориаза, воспалительного заболевания кишечника, астмы и апластической анемии путем введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, агониста альфа-2 рецепторов, испытывающего недостаток существенной активности альфа-2A рецепторов.
В другом варианте воплощения, антагонист альфа-2 рецепторов настоящего изобретения вводят в течение начального периода, а затем снова вводят в течение второго периода после истечения периода отмены.
В другом варианте воплощения, антагонист альфа-2 рецепторов настоящего изобретения вводят в течение начального периода, а затем снова вводят в течение второго периода после истечения периода отмены, в котором первоначальный, второй, и период отмены - это один, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать, двенадцать, тринадцать или четырнадцать дней, или один, два, три или четыре недели.
В другом варианте воплощения, антагонист альфа-2 рецепторов настоящего изобретения выбран из группы, состоящей из:
Figure 00000001
,
Figure 00000002
,
Figure 00000003
,
Figure 00000004
,
Figure 00000005
,
Figure 00000006
и
Figure 00000007
;
или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист выбран из группы, состоящей из тиомочевины, имидазола, имидазолина, оксазола и оксазолина; или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист выбран из группы, состоящей из тиомочевины, имидазола, имидазолина и оксазолина; или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист тиомочевины представляет собой соединение формулы
Figure 00000001
или его фармацевтически приемлемую соль.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист имидазолина представляет собой соединение формулы
Figure 00000003
или его фармацевтически приемлемую соль.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист имидазола представляет собой соединение, выбранное из группы, состоящей из
Figure 00000002
,
Figure 00000006
и
Figure 00000007
; или его фармацевтически приемлемую соль.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист оксазолина представляет собой соединение формулы
Figure 00000004
или его фармацевтически приемлемую соль.
В другом варианте воплощения, альфа-2 агонист настоящего изобретения представляет собой соединение Формулы I
Figure 00000008
или его фармацевтически приемлемую соль,
где R и R1 представляют собой независимо галоген или алкил;
R2 представляет собой Н или алкил, который может быть или незамещен,
или замещен гетероарилом или арилом; и
Het представляет собой гетероциклил группу, выбранную из группы,
состоящей из имидазолинила и оксазолинила.
В другом варианте воплощения в Формуле I:
R и R1 представляют собой независимо галоген или метил; и
R2 алкил представляет собой метил, который замещен гетероарилом, который является пиридилом.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фигуре 1 показана экспрессия α2B-рецепторов, но не α2a-рецепторов в человеческом T подмножестве клеток через КПЦР.
На Фигуре 2 показан устойчивый рост частоты CD4+Т-клеток селезенки, которые являются CD4+/CD25+Treg клетками соединения B в SNL крысиной модели аллодинической нейропатической боли.
Фигура 3 показывает, что агонист а2в - рецептора соединение B - это обезболивающее при боли в установленном MS и показывает модуляцию Treg клеток.
Фигура 4 показывает, что соединение B имеет значительное влияние на клиническое течение заболевания в протеолипид-индуцированной модели рецидивирующего стихающего ЭАЭ (экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита).
На Фигуре 5 показано, что соединение B значительно сократило присутствие иммунных клеток в ЦНС в PLP-индуцированной модели рецидивирующего стихающего ЭАЭ.
Фигура 6 показывает, что соединение C оказывает существенное влияние на клиническое течение заболевания в протеолипид-индуцированной модели рецидивирующего стихающего ЭАЭ.
Фигура 7 показывает, что соединение C значительно увеличивает частоту регуляторных Т-клеток в спинном мозге в PLP-индуцированной модели рецидивирующего стихающего ЭАЭ.
Фигура 8 показывает, что соединение B имеет значительное влияние на клиническое заболевание и на количество воспалительных клеток во внутриглазной жидкости крыс EAAU.
На Фигуре 9 показано, что соединение B имеет значительное влияние на концентрацию белка во внутриглазной жидкости крыс EIU.
На Фигуре 10 показано, что соединение B нормализует уровни нейтрофилов крови и лимфоцитов в крысиной модели EIU.
На Фигуре 11 показано, что лечение донора Соединением B, начиная с начала осушающего стресса, значительно снижает уровни ФНО-альфа и ИЛ 17 в получаемой слезе.
На Фигуре 12 показано, что лечение Соединением C в терапевтическом режиме, начиная после подвержения мышей осушающему стрессу, значительно снижает потерю бокаловидных клеток и Т клеточную инфильтрацию в конъюнктиву.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Агонисты альфа-2 рецепторов.
Агонисты альфа-2 рецепторов являются теми соединениями, которые активируют альфа-2 адренергические рецепторы. Есть три подтипа этого рецептора, обозначенные A, B и C. Соединение представляет собой "агонист альфа-2B рецепторов", если оно имеет больше чем 25% эффективности по отношению к бримонидину на альфа-2B адренергическом рецепторе; соединение представляет собой "агонист альфа-2C рецепторов", если оно имеет больше чем 25% эффективности по отношению к бримонидину на альфа-2С адренергическом рецепторе; и соединение представляет собой " агонист альфа-2B/2C рецепторов", если оно имеет больше чем 25% эффективности по отношению к бримонидину на альфа-2B и альфа-2С адренергических рецепторах. Определения не являются взаимоисключающими: соединение, которое является агонистом альфа-2B рецепторов, также может быть агонистом альфа-2B/2С рецепторов, и соединение, которое является агонистом альфа-2С рецепторов, также может быть агонистом альфа-2B/2С рецепторов.
В одном варианте воплощения способы настоящего изобретения используют альфа-2-агонисты, испытывающие недостаточность существенной активности на альфа-2A подтипе рецепторов. Агонист истывает недостаточность существенной активности альфа-2A рецепторов, если агонист имеет меньше чем 40% эффективности бримонидина на альфа-2A подтипе рецепторов. Соединения по изобретению включают, таким образом, агонисты альфа-2B рецепторов; агонисты альфа-2B рецепторов, испытывающие существенную недостаточность альфа-2A активности; агонисты альфа-2C рецепторов; агонисты альфа-2С рецепторов, испытывающие существенную недостаточность активности альфа-2А; агонисты альфа-2B/2С рецепторов; и агонисты альфа-2B/2С рецепторов, испытывающие существенную недостаточность альфа-2А активности. Любое из вышеуказанных соединений может быть использовано, даже если они связывают рецепторы, отличные от рецепторов альфа-2; например, агонисты альфа-1 рецепторов могут быть использованы при условии, что альфа-1 агонисты также имеют более чем 25% эффективности по отношению к бримонидину на один или оба альфа-2B и альфа-2С подтипа рецепторов, а также отсутствие значительной активности альфа-2А рецепторов.
Эффективность, также известная как внутренняя активность, является мерой максимальной активации рецептора, которая достигается за счет соединения и может быть определена с помощью любого принятого анализа альфа-адренергической активации рецепторов, такого как сАМР или Технологии выбора рецептора и амплификации (RSAT). Эффективность представлена в виде отношения или в процентах от максимального эффекта препарата для максимального эффекта стандартного агониста для рецепторов каждого подтипа. Бримонидин, сам собой агонист альфа-2B рецептора (он имеет 100% эффективности бримонидина на альфа-2B адренергическом рецепторе), используется в качестве стандартного агониста альфа-2B адренергических рецепторов.
Активность агонистов может быть охарактеризована с использованием любого из множества рутинных анализов, в том числе, например, анализов Технологии выбора рецептора и амплификации (RSAT) (Messier et al., Pharmacol. Toxicol. 76:308-11 (1995); анализов циклической AMP (Shimizu et al., J. Neurochem. 16:1609-1619 (1969)); и цитосенсорных микрофизиометрических анализов (Neve et al., J. Biol. Chem. 267:25748-25753 (1992)). Такие анализы как правило, выполняются с использованием клеток, которые естественно экспрессируют только один подтип альфа-адренергического рецептора, или с использованием трансфицированных клеток, экспрессирующих один рекомбинантный подтип альфа-адренергических рецепторов. Адренергический рецептор может быть человеческим рецептором или гомологом рецептора человека с такой же фармакологией.
RSAT анализ измеряет рецептор-опосредованную потерю контактного ингибирования, в результате чего имеет место селективное распространение рецепторов клеток, содержащихся в смешанной популяции вырожденных клеток. Увеличение количества клеток оценивается с соответствующим обнаруживаемым геном-маркером, таким как бета-галактозидаза, при желании, в высокой пропускной способности или сверхвысоком формате анализа пропускной способности. Рецепторы, которые активируют G белок, Gq, вызывают пролиферативный ответ.Альфа-адренергические рецепторы, которые обычно парные к Gi, активируют RSAT ответ, когда коэкспрессируются с гибридным Gq белком, содержащим Gi область распознавания рецептора, обозначенную Gq/i5. Conklin et al., Nature 363:274-6 (1993)).
В качестве примера RSAT анализ может быть выполнен в основном следующим образом. NIH-3T3 клетки высевали при плотности 2×106 клеток в 15 см чашки и поддерживали в среде Игла, модифицированной Дулбекко, с добавлением 10% телячьей сыворотки. Один день спустя клетки котрансфицировали посредством кальция фосфата преципитации с экспрессирующими плазмидами млекопитающих, кодирующими p-SV-β-галактозидазу (5-10 мкг), рецептор (1-2 мкг) и G белок (1-2 мкг). Транспортер ДНК, например, ДНК 40 мкг спермы лосося, также может быть включен для увеличения эффективности трансфекции. Свежая среда была добавлена на следующий день; один-два дня спустя клетки собирали и замораживали в 50 аликвоты анализа.
Трансфицированные клетки размораживали, и 100 мкл клеток добавляли к 100 мкл аликвотам тестируемого соединения с различными концентрациями анализируемыми в трех экземплярах, например, в 96-луночных планшетах. Инкубация продолжалась в течение от 72 до 96 часов при 37°C. После промывки фосфатно-солевым буфером, активность β-галактозидазы определялась путем добавления 200 мкл хромогенного субстрата (3,5 мм О-нитрофенил-β-D-галактопиранозид/0,5% NP-40 в фосфатном буферном растворе), инкубации в течение ночи при температуре 30°C, и измерения оптической плотности при 420 нм. Абсорбция является мерой активности фермента, которая зависит от числа клеток и отражает рецептор-опосредованную клеточную пролиферацию. ЕС5о и максимальный эффект (т.е. эффективность) каждого препарата для каждого рецептора определяется.
Агонисты альфа-2B и -2С рецепторов, в том числе испытывающие недостаточность существенной активности альфа-2А рецептора, известны в данной области. Подробную информацию об альфа-2-агонистах, включая их структуру, синтез и активность, можно найти в патентах США №6329369, №6534542, №6545182, №6787517, №6841684 и №7091232, в публикациях заявки на патент США №2003/0092766, №2004/0132824, №2004/0220402, №2005/0075366 и №2005/0267186; и в заявке на патент США №11/172229, №11/232323, №11/232341, №60/613870, №60/695650, №60/747444, №60/884718, №60/917828, №60/911422, №60/911478 и №60/948389, раскрытые всех из которых включено сюда посредством ссылки.
Можно использовать в способах по изобретению любую фармацевтически приемлемую соль, пролекарство, изомер или рацемат любого агониста альфа-2 рецепторов.
"Алкил" означает алифатическую углеводородную группу, которая может быть прямой или разветвленной и содержит от около 1 до около 20 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкильные группы содержат от приблизительно 1 до приблизительно 12 атомов углерода в цепи. Более предпочтительные алкильные группы содержат от приблизительно 1 до приблизительно 6 атомов углерода в цепи. Разветвленная означает, что одна или более низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил, присоединены к линейной алкильной цепи. "Низший алкил" означает группу, имеющую от около 1 до около 6 атомов углерода в цепи, которые могут быть линейными или разветвленными. "Алкил" может быть незамещенным или необязательно замещенным одним или более заместителей, которые могут быть одинаковыми или разными, где каждый заместитель независимо выбран из группы, состоящей из галогена, алкила, арила, гетероциклила, гетероарила, циклоалкила, циано, гидрокси, алкокси, алкилтио, амино, оксима (например,=N-OH), -NH (алкил), -NH (циклоалкил), -N(алкил)2, -O-С(O)-алкил, -O-С(O)-арил, -O-С(O)-циклоалкил, -SF5-, карбокси и -С(O)O-алкил. Неограничивающие примеры подходящих алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил и трет-бутил.
"Алкенил" означает алифатическую углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, и которая может быть прямой или разветвленной и содержит от примерно 2 до примерно 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкенильные группы имеют от примерно 2 до примерно 12 атомов углерода в цепи, и более предпочтительно от около 2 до около 6 атомов углерода в цепи. Разветвленная означает, что одна или более низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил, присоединены к линейной цепочке алкенила. "Низший алкенил" означает от примерно 2 до примерно 6 атомов углерода в цепи, которые могут быть линейными или разветвленными. "Алкенил" может быть незамещенным или необязательно замещенным одним или более заместителей, которые могут быть одинаковыми или разными, где каждый заместитель независимо выбран из группы, состоящей из галогена, алкила, арила, циклоалкила, циано, алкокси и -S (алкил). Неограничивающие примеры подходящих алкенильных групп включают этенил, пропенил, н-бутенил, 3-метилбут-2-енил, н-пентенил, октенил и деценил.
"Алкилен" означает бифункциональную группу, полученную путем удаления атома водорода от алкильной группы, которая определена выше. Неограничивающие примеры алкилена включают метилен, этилен и пропилен.
"Алкинил" означает алифатическую углеводородную группу, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь и которая может быть прямой или разветвленной и содержит от примерно 2 до примерно 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкинильные группы имеют от примерно 2 до примерно 12 атомов углерода в цепи, и более предпочтительно приблизительно от 2 до приблизительно 4 атомов углерода в цепи. Разветвленная означает, что одна или более низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил, присоединены к линейной цепочке алкинила. "Нижний алкинил" означает примерно от 2 до примерно 6 атомов углерода в цепи, которые могут быть линейными или разветвленными. Неограничивающие примеры подходящих алкинильных групп включают этинил, пропинил, 2-бутинил и 3-метилбутинил. "Алкинил" может быть незамещенным или необязательно замещенным одним или более заместителей, которые могут быть одинаковыми или разными, где каждый заместитель независимо выбран из группы, состоящей из алкила, арила и циклоалкила.
«Арил» означает ароматическую моноциклическую или полициклическую кольцевую систему, включающую от примерно 6 до примерно 14 атомов углерода, предпочтительно от примерно 6 до примерно 10 атомов углерода. Арильная группа может быть замещена одним или более" заместителей кольцевой системы", которые могут быть одинаковыми или разными, и как определено здесь. Неограничивающие примеры подходящих арильных групп включают фенил и нафтил.
"Гетероарил" означает ароматическую моноциклическую или полициклическую кольцевую систему, включающую от примерно 5 до примерно 14 атомов кольца, предпочтительно примерно от 5 до примерно 10 кольцевых атомов, в которых один или более атомов в кольце являются элементом, отличным от углерода, например, азотом, кислородом или серой, отдельно или в комбинации. Популярные гетероарилы содержат примерно от 5 до примерно 6 атомов кольца. "Гетероарил" может быть необязательно замещен одним или более" заместителей кольцевой системы", которые могут быть одинаковыми или разными, и как определено здесь. Префикс аза, окса или тиа до корневого имени гетероарила означает, что по меньшей мере атом азота, кислорода или серы, соответственно, присутствует в виде атома кольца. Атом азота гетероарила может быть необязательно окислен до соответствующего N-оксида. "Гетероарил" может также включать гетероарил, как указано выше, слитый с арилом, как определено выше. Неограничивающие примеры подходящих гетероарилов включают пиридил, пиразинил, фуранил, тиенил, пиримидинил, пиридон (в том числе N-замещенные пиридоны), изоксазолил, изотиазолил, оксазолил, тиазолил, пиразолил, фуразанил, пирролил, пиразолил, триазолил, 1,2,4 -тиадиазолил, пиразинил, пиридазинил, хиноксалинил, фталазинил, оксиндолил, имидазо [1,2-a] пиридинил, имидазо [2,1-b] тиазолил, бензофуразанил, индолил, азаиндолил, бензимидазолил, бензотиенил, хинолинил, имидазолил, тиенопиридил, хиназолинил, тиенопиримидил, пирролопиридил, имидазопиридил, изохинолинил, бензоазаиндолил, 1,2,4-триазинил, бензотиазолил и тому подобное. Термин "гетероарил" также относится к частично насыщенным гетероарильным группам, таким как, например, тетрагидроизохинолил, тетрагидрохинолил и тому подобное.
"Аралкил" или "арилалкил" означает арил-алкил-группу, в которой арил и алкил такие, как описано выше. Предпочтительные аралкилы включают низшую алкильную группу. Неограничивающие примеры подходящих аралкил групп включают бензил, 2-фенэтил и нафталенилметил. Связь с родительским фрагментом - через алкил.
"Алкиларил" означает алкил-арил-группу, в которой алкил и арил такие, как описано выше. Предпочтительные алкиларилы составляют низшую алкильную группу. Неограничивающий пример подходящей алкиларил группы - толил. Связь с родительским фрагментом - через арил.
"Циклоалкил" означает неароматическую моно- или полициклическую кольцевую систему, включающую от примерно 3 до примерно 10 атомов углерода, предпочтительно от примерно 5 до примерно 10 атомов углерода. Предпочтительные циклоалкильные кольца содержат примерно от 5 до примерно 7 кольцевых атомов. Циклоалкил может быть необязательно замещен одним или более " заместителей кольцевой системы", которые могут быть одинаковыми или разными, и являются такими как указано выше. Неограничивающие примеры подходящих моноциклических циклоалкилов включают циклопропил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и тому подобное. Неограничивающие примеры подходящих полициклических циклоалкилов включают 1-декалинил, норборнил, адамантил и тому подобное.
"Циклоалкилалкил" означает циклоалкильную группу, как определено выше, связанную через алкильную группу (определено выше), чтобы образовать родительское ядро. Неограничивающие примеры подходящих циклоалкилалкилов включают циклогексилметил, адамантилметил и тому подобное.
"Циклоалкенил" означает неароматическую моно- или полициклическую кольцевую систему, включающую от примерно 3 до примерно 10 атомов углерода, предпочтительно от примерно 5 до примерно 10 атомов углерода, которая содержит по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Предпочтительные циклоалкенил кольца содержат примерно от 5 до примерно 7 атомов кольца. Циклоалкенил необязательно может быть замещен одним или более "заместителей кольцевой системы", которые могут быть одинаковыми или разными, и являются такими как как указано выше. Неограничивающие примеры подходящих моноциклических циклоалкенилов включают циклопентенил, циклогексенил, циклогепта-1,3-диенил, и тому подобное. Неограничивающим примером подходящего полициклического циклоалкенила является норборниленил.
"Циклоалкенилалкил" означает циклоалкенил группу, как определено выше, связанную через алкильную группу (определена выше), с родительским ядром. Неограничивающие примеры подходящих циклоалкенилалкилов включают циклопентенилметил, циклогексенилметил и тому подобное.
"Галоген" означает фтор, хлор, бром или йод. Предпочтительными являются фтор, хлор и бром.
"Заместитель кольцевой системы" означает заместитель, присоединенный к ароматической или неароматической кольцевой системе, которая, например, заменяет доступный водород в кольцевой системе. Заместители кольцевой системы могут быть одинаковыми или разными, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, аралкила, алкиларила, гетероаралкила, гетероарилалкенила, гетероарилалкинила, алкилгетероарила, гидрокси, гидроксиалкила, алкокси, арилокси, аралкокси, ацил, ароил, галогена, нитро, циано, карбокси, алкоксикарбонила, арилоксикарбонила, аралкоксикарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, гетероарилсульфонила, алкилтио, арилтио, гетероарилтио, аралкилтио, гетероаралкилтио, циклоалкила, гетероциклила, -SF5, -OSF5 (для арил), - О-С(O)-алкила,-O-С(O)-арила,-0-С(O)-циклоалкила, -С (=N-CN)-NH2, -С(=NH)-NH2, -С(=NH)-NH (алкил), оксим (например, =N-OH), -NY1Y2, алкил-NY1Y2, -С(О)NY1Y2, SO2NY1Y2 и -SO2NY1Y2, где Y1 и Y2 могут быть одинаковыми или разными и независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, арила, циклоалкила и аралкила. "Заместитель кольцевой системы" может также означать одну группу, которая одновременно заменяет два атома водорода, доступных на двух соседних атомах углерода (один Н на каждый углерод) в кольцевой системе. Примерами такого фрагмента являются метилендиокси, этилендиокси, -С(СН3)2- и т.п., которые формируют фрагменты, такие как, например:
Figure 00000009
Figure 00000010
и
Figure 00000011
.
Тетероарилалкил" означает гетероарильную группу, как определено выше, связанную через алкильную группу (определено выше), с родительским ядром. Неограничивающие примеры подходящих гетероарилов включают 2-пиридинилметил, хинолинилметил и тому подобное. Тетероциклил" означает неароматическую насыщенную моноциклическую или полициклическую кольцевую систему, включающую от примерно 3 до примерно 10 атомов кольца, предпочтительно примерно от 5 до примерно 10 атомов кольца, в которых один или более атомов кольцевой системы является элементом, отличным от углерода, например, азотом, кислородом или серой, отдельно или в комбинации. В кольцевой системе нет соседних атомов кислорода и/или серы.
Предпочтительные гетероциклилы содержат примерно от 5 до примерно 6 атомов кольца. Префикс аза, окса или тиа перед корневым именем гетероциклила означает, что по меньшей мере, атом азота, кислорода или серы соответственно присутствует в виде атома кольца. Любая -NH в гетероциклическом кольце может быть защищена, как, например, -N (Вос), -N (CBz), -N (Tos) группы и т.п.; такие защиты также считаются частью этого изобретения. Тетероциклил может быть необязательно замещен одним или более" заместителей кольцевой системы", которые могут быть одинаковыми или разными, и такими как определено здесь.
Атом азота или серы гетероциклила может быть необязательно окислен до соответствующих N-оксида, S-оксида или S.S-диоксида. Неограничивающие примеры подходящих моноциклических гетероциклил колец включают пиперидил, пирролидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, тиазолидинил, 1,4-диоксанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, лактам, лактон, и тому подобное. "Гетероциклил" также включает в себя гетероциклил кольца, как описано выше, где =О заменяет два атома водорода, доступных на том же атоме кольца углерода. Примером такого фрагмента является пирролидон:
Figure 00000012
.
"Гетероциклилалкил" означает гетероциклил группу, как определено выше, связанную через алкильную группу (определено выше), с родительским ядром. Не ограничивающие примеры подходящих гетероциклилалкилов включают пиперидинилметил, пиперазинилметил и тому подобное.
Тетероцикленил" означает неароматическую моноциклическую или полициклическую кольцевую систему, содержащую от примерно 3 до примерно 10 атомов кольца, предпочтительно примерно от 5 до примерно 10 атомов кольца, в которых один или более атомов кольцевой системы является элементом, отличным от углерода, например атомом азота, кислорода или серы, отдельно или в комбинации, и которая содержит по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь или двойную связь углерод-азот. В кольцевой системе нет соседних атомов кислорода и/или серы. Предпочтительные тетероцикленил кольца содержат примерно от 5 до примерно 6 атомов кольца. Префикс аза, окса или тиа перед корневым именем гетероцикленила означает, что по меньшей мере атом азота, кислорода или серы соответственно присутствует как кольцевой атом. Тетероцикленил может необязательно быть замещен одним или более заместителей кольцевой системы, в которой " заместитель кольцевой системы " является таким, как определено выше. Атом азота или серы гетероцикленила необязательно может быть окислен до соответствующих N-оксида, S-оксида или S,S-диоксида. Неограничивающие примеры подходящих тетероцикленил групп включают в себя 1,2,3,4-тетрагидропиридинил, 1,2-дигидропиридинил, 1,4-дигидропиридинил, 1,2,3,6-тетрагидропиридинил, 1,4,5,6-тетрагидропиримидинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, 2-имидазолинил, 2-пиразолинил, дигидроимидазолил, дигидрооксазолил, дигидрооксадиазолил, дигидротиазолил, 3,4-дигидро-2Н-пиранил, дигидрофуранил, фтордигидрофуранил, 7-оксабицикло [2.2.1] гептенил, дигидротиофенил, дигидротиопиранил и тому подобное. Тетероцикленил" также включает тетероцикленил кольца, как описано выше, где=О заменяет два атома водорода, доступных на том же атоме кольца углерода. Примером такого фрагмента является пирролидинон:
Figure 00000013
.
Тетероцикленилалкил" означает тетероцикленил группу, как определено выше, связанную через алкильную группу (определена выше), с родительским ядром.
Следует отметить, что в кольцевых системах, содержащих гетероатомы, по данному изобретению, нет гидроксильных групп на атомах углерода, прилегающих к N, О или S, а также нет N или S групп на углероде, соседнем с другим гетероатомом. Так, например, в кольце:
Figure 00000014
нет -OH группы, присоединенной непосредственно к углеродам, отмеченным как 2 и 5.
Следует также отметить, что таутомерные формы такие как, например, фрагменты:
Figure 00000015
и
Figure 00000016
считаются эквивалентными в некоторых вариантах воплощения данного изобретения.
"Алкинилалкил" означает алкинил-алкил-группу, в которой имеется алкинил и алкил, как это описано выше. Предпочтительные алкинилалкилы содержат низший алкинил и низшую алкильную группу. Связь с родительским фрагментом - через алкил. Неограничивающие примеры подходящих алкинилалкил групп включают пропаргилметил.
Тетероаралкил" означает гетероарил-алкил-группу, в которой имеется гетероарил и алкил, как это описано выше. Предпочтительные гетероаралкилы содержат низшую алкильную группу. Неограничивающие примеры подходящих аралкильных групп включают пиридилметил и хинолин-3-илметил. Связь с родительским фрагментом - через алкил.
Тидроксиалкил" означает НО-алкил-группу, в которой содержится алкил, как это определено ранее. Предпочтительные гидроксиалкилы содержат низший алкил. Неограничивающие примеры подходящих гидроксиалкильных групп включают гидроксиметил и 2-гидроксиэтил.
"Ацил" означает Н-C(О)-, алкил-С(О)- или циклоалкил-С(О)-, группу, в которой содержатся различные группы, как это описано выше. Связь с родительским фрагментом - через карбонил. Предпочтительные ацилы содержат низший алкил. Неограничивающие примеры подходящих ацильных групп включают формил, ацетил и пропаноил.
"Ароил" означает арил-C(О)-группу, в которой содержится арил группа, как это описано выше. Связь с родительским фрагментом - через карбонил. Неограничивающие примеры подходящих групп включают бензоил и 1-нафтоил.
"Алкокси" означает алкил-О-группу, в которой содержится алкил группа такая, как описано выше. Неограничивающие примеры подходящих алкоксигрупп включают метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси и н-бутокси. Связь с родительским фрагментом - через эфирный кислород.
"Арилокси" означает арил-О-группу, в которой содержится арил группа, как это описано выше. Неограничивающие примеры подходящих арилокси групп включают фенокси и нафтокси. Связь с родительским фрагментом - через эфирный кислород.
"Аралкилокси" означает аралкил-О-группу, в которой содержащаяся группа аралкила является такой, как описано выше. Неограничивающие примеры подходящих аралкилокси групп включают бензилокси и 1- или 2-нафталинметокси. Связь с родительским фрагментом - через эфирный кислород.
"Алкилтио" означает алкил-S-группу, в которой содержится алкильная группа, как это описано выше. Неограничивающие примеры подходящих групп алкилтио включают метилтио и этилтио. Связь с родительским фрагментом - через серу.
"Арилтио" означает арил-S-группу, в которой содержится арил группа, как это описано выше. Неограничивающие примеры подходящих арилтио групп включают фенилтио и нафтилтио. Связь с родительским фрагментом - через серу.
"Аралкилтио" означает аралкил-S-группу, в которой содержится аралкильная группа, как это описано выше. Неограничивающим примером подходящей аралкилтио группы является бензилтио. Связь с родительским фрагментом - через серу.
"Алкоксикарбонил" означает алкил-О-СО-группу. Неограничивающие примеры подходящих алкоксикарбонил групп включают метоксикарбонил и этоксикарбонил. Связь с родительским фрагментом - через карбонил.
"Арилоксикарбонил" означает арил-О-С(О)-группу. Неограничивающие примеры подходящих арилоксикарбонильных групп включают феноксикарбонил и нафтоксикарбонил. Связь с родительским фрагментом - через карбонил.
"Аралкоксикарбонил" означает аралкил-О-С(О)-группу. Неограничивающим примером подходящей аралкоксикарбонил группы является бензилоксикарбонил. Связь с родительским фрагментом - через карбонил.
"Алкилсульфонил" означает алкил-S(O2)-группу. Предпочтительными группами являются те, в которых алкильная группа - низший алкил. Связь с родительским фрагментом - через сульфонил.
"Арилсульфонил" означает арил-S(O2)-группу. Связь с родительским фрагментом - через сульфонил.
Термин "замещенный" означает, что один или более атомов водорода на указанном атоме заменяется с выбором из указанной группы, при условии, что нормальная валентность назначенного атома при существующих обстоятельствах не превышена, и что замещение приводит к стабильному соединению. Комбинации заместителей и/или переменных допустимы, только если результатом таких комбинации есть устойчивые соединения. Под "устойчивым соединением" или "стабильной структурой" подразумевается соединение, которое является достаточно надежным, чтобы пережить выделение до полезной степени чистоты из реакционной смеси и композиции в эффективное терапевтическое средство.
Термин "необязательно замещенный" означает необязательное замещение указанными группами, радикалами или остатками.
Термин "очищенный", "в очищенном виде" или "в выделенной и очищенной форме" для соединения относится к физическому состоянию указанного соединения после того, как оно выделено из синтетического процесса (например, из реакционной смеси), или естественного источника или комбинации из них. Таким образом, термин «очищенный», «в очищенном виде" или "в выделенной и очищенной форме" для соединения относится к физическому состоянию указанного соединения после того, как оно получено в результате процесса очистки или процесса, описанного в настоящем документе или хорошо известного специалистам в данной области (например, хроматографии, перекристаллизации и т.п.) в достаточной чистоте, чтобы быть характеризуемым стандартными аналитическими способами, описанными в настоящем документе или хорошо известными специалистам в данной области.
Следует также отметить, что любые углероды, а также гетероатомы с неудовлетворенными валентностями в тексте, схемах, таблицах и примерах здесь, как предполагается, имеют достаточное количество атомов водорода для удовлетворения валентностей. И один или более из этих атомов водорода может быть дейтерием.
Если функциональная группа в соединении называется "защищенной", это означает, что эта группа находится в измененном виде, чтобы исключить нежелательные побочные реакции на защищаемом сайте, когда соединение подвергается реакции. Подходящие защитные группы известны специалистам в данной области, а также по ссылкам на стандартные учебники такие как, например, Т.W.Greene et al, Protective Groups in organic Synthesis (1991), Wiley, New York.
Когда любая переменная (например, арил, гетероцикл, R2 и т.д.) встречается более чем один раз в любом компоненте или в Формуле I, ее определение в каждом случае не зависит от ее определения в любом другом случае.
Как здесь используется, термин "композиция" предназначен для охвата продукта, содержащего указанные ингредиенты в указанных количествах, а также любого продукта, который получается, прямо или косвенно, из комбинации определенных ингредиентов в указанных количествах.
Фармацевтически приемлемые соли Агонисты альфа-2 рецепторов могут быть использованы в качестве их фармацевтически приемлемых солей.
"Фармацевтически приемлемая соль" означает любую соль, которая сохраняет активность исходного соединения и не распространяет никаких дополнительных вредных или неблагоприятных эффектов на субъект, которому она вводится, и в контексте, в котором она вводится по сравнению с исходным соединением. Фармацевтически приемлемая соль также относится к любой соли, которая может образовываться в естественных условиях в результате введения кислоты, другой соли, или пролекарства, которое преобразуется в кислоту или соль.
Фармацевтически приемлемые соли кислых функциональных групп могут быть получены из органических или неорганических оснований. Соль может содержать моно- или поливалентный ион. Особый интерес представляют неорганические ионы лития, натрия, калия, кальция и магния. Органические соли могут быть получены с аминами, в частности, соли аммония, такие как моно-, ди- и триалкиламины или этаноламины. Соли могут быть образованы с кофеином, трометамином и подобными молекулами. Соляная кислота или некоторые другие фармацевтически приемлемые кислоты могут образовывать соль с соединением, которое включает в себя основную группу, такую как амин или кольцо пиридина.
Пролекарства
Можно использовать в композициях и способах по изобретению пролекарство любого агониста альфа-2 рецептора.
"Пролекарство" представляет собой соединение, которое превращается в терапевтически активное соединение после введения, а термин следует интерпретировать так широко здесь, как обычно понимается в данной области. Не желая ограничивать объем изобретения, преобразование может происходить путем гидролиза эфирной группы или некоторых других биологически лабильных групп. Как правило, но не обязательно, пролекарство неактивно или менее активно, чем терапевтически активное соединение, в которое оно преобразовано. Эфирные пролекарства соединений, описанных в данном документе, в частности, рассматриваются. Эфир может быть получен из карбоновой кислоты С1 (т.е. терминальной карбоновой кислоты природного простагландина), или эфир может быть получен из функциональной группы карбоновой кислоты на другой части молекулы, например, на фенильном кольце. Без ограничений, эфир может быть алкилэфиром, арилэфиром или гетероарильным эфиром. В этом контексте (определение "пролекарства"), термин "алкил" имеет значение, как правило, понятное специалистам в данной области и относится к линейным, разветвленным или циклическим алкильным фрагментам. C1-6алкильные эфиры особенно полезны, где алкильная часть эфира имеет от 1 до 6 атомов углерода, и включает, но не ограничивается ими, метил-, этил-, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изо-бутил, трет-бутил, пентил изомеры, гексил изомеры, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и их комбинации, имеющие от 1-6 атомов углерода, и т.д.
Агонисты альфа-2 рецепторов настоящего изобретения могут быть синтетическими или могут быть получены в организме после введения пролекарства. Таким образом, термин " агонист альфа-2 рецептора" охватывает как соединения, получаемые в процессе производства, так и те соединения, которые образуются в естественных условиях только тогда, когда вводят другой препарат.
Изомеры и рацематы Можно использовать в композициях и способах по изобретению энантиомер, стериоизомер или другой изомер агониста альфа-2 рецепторов. Можно также использовать в композициях и способах по изобретению рацемическую смесь одного или обоих рацематов в любой пропорции.
Доза
Точная доза и частота введения зависит от тяжести и характера состояния пациента, от способа введения, потенции и фармакодинамики конкретного используемого соединения, а также решения лечащего врача. Определение дозы является обычным делом, которое находится в пределах возможностей специалиста в данной области. В общем, агонисты альфа-2 рецепторов вводят в терапевтически эффективных дозах, то есть в дозе, достаточной для получения желаемого терапевтического эффекта.
В одном варианте воплощения соединения по изобретению (агонисты альфа-2B рецепторов; агонисты альфа-2B рецепторов, испытывающие недостаток существенной альфа-2А активности; агонисты альфа-2С рецепторов; агонисты альфа-2С рецепторов, испытывающие недостаток существенной альфа-2А активности; агонисты альфа 2B/2С рецепторов; и агонисты альфа-2B/2С рецепторов, испытывающие недостаток существенной альфа-2Ф активности) обеспечивают долгосрочную помощь - то есть облегчение, которое длится в течение одного или более дней после того, как соединения отменены. Таким образом, в одном варианте воплощения способ по изобретению включает введение пациенту соединения по изобретению на протяжении начального периода, а затем введение соединения снова в течение второго периода после того, как период отмены истек. Первоначальный, второй и период отмены могут длиться один, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать, двенадцать, тринадцать или четырнадцать дней, или одну, две, три, или четыре недели, и могут быть одинаковыми или разными. Таким образом, например, можно вводить соединение по изобретению в течение трех дней, а затем вводить соединение снова в течение трех дней, не раньше, чем через три дня после последнего введения соединения; или можно вводить соединение по изобретению в течение двух недель, а затем вводить соединение снова в течение одной недели, не раньше, чем через неделю после того, как соединение последний раз вводили.
В другом варианте воплощения первоначальный и второй периоды являются переменными, а период отмены фиксирован. В таких вариантах воплощения первоначальный и второй период представляют собой по меньшей мере один, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать, двенадцать, тринадцать или четырнадцать дней, или одну, две, три или четыре недели. Таким образом, например, можно вводить соединение по изобретению по меньшей мере три дня, а затем вводить соединение снова по меньшей мере три дня, не раньше, чем через шесть дней после последнего введения соединения; или можно вводить соединение по изобретению по меньшей мере одну неделю, а затем вводить соединение снова, по меньшей мере неделю, не раньше, чем через неделю после последнего введения соединения.
Вспомогательные вещества и лекарственные формы Специалистам в данной области будет легко понять, что агонисты альфа-2 рецепторов могут быть смешаны с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, которые хорошо известны в данной области.
Фармацевтическая композиция для введения системно может быть приготовлена в виде порошка, пилюли, таблетки или т.п., или в виде раствора, эмульсии, суспензии, аэрозоля, сиропа или эликсира, подходящего для перорального или парентерального введения, ингаляции или местного введения в глаз или кожу.
Для твердых лекарственных форм или лекарственных средств, нетоксичные твердые носители включают, но не ограничиваются этим, фармацевтические категории маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, натрия сахарина, полиалкиленгликолей, талька, целлюлозы, глюкозы, сахарозы и карбоната магния. Твердые лекарственные формы могут быть без покрытия или они могут быть покрыты с помощью известных способов, чтобы задержать распад и поглощение в желудочно-кишечном тракте и тем самым обеспечить устойчивое действие в течение более длительного периода. Например, материалы, задерживающие высвобождение, такие как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, могут быть использованы. Они также могут быть покрыты с помощью способа, описанного в патенте США №4256108, №4166452 и №4265874, чтобы сформировать осмотические терапевтические таблетки для контроля высвобождения. Жидкие фармацевтически вводимые лекарственные формы могут, например, содержать раствор или суспензию из одного или более из ныне полезных соединений и необязательных фармацевтических адъютантов в носителе, таком как, например, вода, физиологический раствор, водная декстроза, глицерин, этанол и т.п., в результате чего образуется раствор или суспензия. При желании, фармацевтическая композиция для введения может также содержать небольшие количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, агенты pH буферизации и тому подобное. Типичными примерами таких вспомогательных агентов являются ацетат натрия, сорбитан монолаурат, триэтаноламин, ацетат натрия, триэтаноламина олеат и т.д. Актуальные способы получения таких лекарственных форм известны или должны быть очевидны специалистам в данной области, см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 16th Edition, 1980. Состав препарата для введения в любом случае содержит количество одного или более в настоящее время полезного соединения в количестве, достаточном для обеспечения желаемого терапевтического эффекта.
Парентеральное введение обычно характеризуется путем инъекции, либо подкожно, либо внутримышечно, либо внутривенно. Инъекции могут быть получены в обычной форме, либо в виде жидких растворов или суспензий, твердых форм, пригодных для раствора или суспензии в жидкости перед инъекцией, или в виде эмульсий. Подходящими вспомогательными веществами являются, например, вода, физиологический раствор, декстроза, глицерин, этанол и тому подобное. Кроме того, при желании, инъекции фармацевтических композиций для введения могут также содержать небольшие количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие агенты или эмульгаторы, pH-буферные агенты и тому подобное.
Активация Т-клеток
Т-клетки представляют собой класс лимфоцитов, имеющих специфические T-клеточные рецепторы (TCR), которые образуются в результате генной перестройки. Т-клетки имеют различные роли, которые осуществляются путем дифференциации различных подмножеств Т-клеток, распознаваемых дискретными моделями экспрессии генов. Несколько крупных подмножеств Т-клеток признаются на основании экспрессии рецепторов, таких как TCR-α/β, и TCRγ/δ и инвариантных естественных клеток-киллеров. Другие подмножества T клеток определяются поверхностными молекулами и цитокинами, выделяемыми из них. Например, клетки T-хелперы (CD4 клетки) выделяют цитокины, и помогают В-клеткам и цитотоксическим Т-клеткам выживать и выполнять эффекторные функции. Цитотоксические Т-клетки (CTL), как правило, являются CD8 клетками, и они специализированы, чтобы убивать клетки-мишени, такие как инфицированные клетки или клетки опухоли. Природные киллеры (NK) клетки связаны с Т-клетками, но не имеют TCR, и имеют более короткую продолжительность жизни, хотя они имеют некоторые функции Т-клеток и способны секретировать цитокины и убивать некоторые виды клеток-мишеней.
Периферическая кровь человека и мыши содержит небольшую популяцию лимфоцитов Т-клеток, которые экспрессируют T регуляторный фенотип ("Treg"), т.е. положительный для CD4 и CD25 антигенов (т.е. тех CD4+ T-клеток, которые также являются явно положительными для CD25). Первые характерны для мышей, где они составляют 6-10% лимфатического узла и селезенки CD4+ T-клеточных популяций; эта популяция CD4+ CD25+ клеток составляет примерно только 5-10% человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (МПК), или 2-7% CD4+ Т-клеток, хотя некоторые доноры проявляют более четко популяцию CD4+ и CD25+ клеток. Около 1-2% человеческой периферической крови МПК являются CD4 положительными (CD4+) и CD25 выраженно положительными (CD25+) клетками.
Есть несколько подмножеств Treg клеток (Bluestone et al., Nature Rev. Immunol., 3:253 (2003)). Одно подмножество регуляторных клеток развивается в тимусе. Полученные из тимуса Treg клетки функционируют посредством цитокин-независимого механизма, который включает в себя контакт клетки с клеткой (Shevach, Nature Rev. Immunol. 2:389 (2002)). Они необходимы для индукции и поддержания собственной терпимости и для профилактики аутоиммунных заболеваний (Shevach, Annu. Rev. Immunol. 18:423-449 (2000); Stephens et al., 2001; Taams et al., 2001; Thornton et al., 1998; Salomon et al., Immunity 12:431-440 (2000); Sakaguchi et al., Immunol. Rev. 182:18-32 (2001). Эти профессиональные регуляторные клетки предотвращают активацию и пролиферацию аутореактивных Т-клеток, которые избежали удаления тимуса, или распознают экстратимусовые антигены, таким образом, они имеют важное значение для гомеостаза и иммунной регуляции, а также для защиты хозяина от развития аутоиммунных заболеваний (Suri-Payer et al., J. Immunol. 157:1799-1805 (1996); Asano et al., J. Exp.Med. 184:387-396 (1996); Bonomo et al., J. Immunol. 154:6602-6611 (1995); Willerford et al., Immunity 3:521-530 (1995); Takahashi et al., Int. Immunol. 10:1969-1980 (1998); Salomon et al., Immunity 12:431-440 (2000); Read et.al., J. Exp. Med. 192:295-302 (2000). Таким образом, иммунные регуляторные CD4+ CD25+ Т-клетки часто называют «профессиональными супрессорными клетками».
Тем не менее, Treg клетки также могут быть получены путем активации зрелых, периферических CD4+ Т-клеток. Исследования показали, что полученные периферически Treg клетки опосредуют свою ингибирующую активность с помощью производства иммуносупрессивных цитокинов, таких как трансформирующий фактор роста-бета (TGF-B) и ИЛ-10 (Kingsley et al., J. Immunol. 168:1080 (2002); Nakamura et al., J. Exp.Med. 194:629-644 (2001)). После антиген-специфической активации, эти Treg клетки могут неспецифически подавлять распространение либо CD4+ либо CD25+ T-клеток (продемонстрировано FACS сортировкой в низкой дозе иммобилизованными анти-CD3 совместного культивирования супрессорного анализа на основе МАБ по Baecher-Allan и соавт., J. Immunol. 167 (3):1245-1253 (2001)).
Недавно Riley и соавт.("Human T regulatory cell therapy: take a billion or so and call me in the morning," Immunity, 30(5), 656-665 (2009)) показали, что регуляторные Т-клетки имеют решающее значение при ряде патологических состояний, сопровождающихся активацией иммунной системы (Riley et al., 2009). CD25+, FoxP3+Tregs обладают способностью блокировать ответы иммунного воспаления и разрушения ткани путем подавления функций массива типов клеток, в том числе обычных CD4+ Т-хелперов, производство антител В-клеток, CD8+цитотоксическую активность и антигенпредставляющую функцию клеток и созревание (Tang & Bluestone, 2008). Об уменьшении частоты или дисфункции Tregs сообщалось для многих болезней человека (Тгап и Shevach, 2009).
В одном варианте воплощения способ по изобретению включает введение агониста альфа-2 для повышающей регуляции регуляторной Т-клеточной функции у пациента, для котрого такая повышающая регуляция была бы полезной. В другом варианте воплощения, регуляторная Т-клетка является CD25+, FoxP3+ Т-клеткой. В другом варианте воплощения способ поизобретению включает введение агониста альфа-2 для лечения таких заболеваний, как неврит, синдром Гийена-Барре, ревматоидный артрит, диабет I типа, рассеянный склероз (MS), болезнь трансплантат против хозяина (РТПХ), аутоиммунный увеит, глазное воспаление, заболевание сухого глаза, атопический дерматит, псориаз, воспалительное заболевание кишечника, астма и апластическая анемия.
Примеры
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. Это предусмотрено только для иллюстрации; возможны многие другие варианты воплощения.
Свидетельство альфа-2B действия на регуляторные T-клетки.
Изобретатели проверяли, действительно ли α2B-селективные соединения регулируют невропатические болевые состояния через иммунно-связанные механизмы. Лечение α2B агонистом, Соединением A, ослабило вызванное операцией по лигатуре спинального нерва увеличение уровней ИЛ-2 (табл.1). ИЛ-2 является провоспалительным цитокином, что очень важно для регулирования пролиферации Т-лимфоцитов. Это открытие указывает на то, что эффект а2в агониста на инверсию острой и хронической аллодинии (как описано в патенте США №7345065, раскрытие которого включено сюда в качестве ссылки), может быть опосредовано иммунными клетками, в частности, Т-клетками. Изобретатели также наблюдали экспрессию рецептора α2B, но не рецептора α2А, в разных подтипах человеческих T-лимфоцитов через КПЦР. Насколько известно изобретателям это первая демонстрация экспрессии подтипа α2B-рецепторов в T-клетках (Фиг.1). Дополнительное доказательство роли иммунных клеток в механизмах смягчения постоянной боли, опосредованных агонистами α2B-рецепторов, было получено на основании того факта, что обезболивающий эффект второго α2B агониста с отличающейся структурой, Соединения B, был блокируем иммунодепрессантным препаратом FK506 (табл.2). Этот факт позволяет предположить, что α2B-рецептор-индуцированная долгосрочная реверсия аллодинии требует наличия активированных лимфоцитов, поскольку FK506, как было продемонстрировано, может быть мощным блокатором активации Т-лимфоцитов (Small et al, 1996). Этот вывод был подтвержден еще одним α2B агонистом с другой структурой, Соединением C, где в FK506 смог заблокировать долгосрочную анальгетическую активность Соединения C в модели лигатуры спинального нерва (таблица 3).
Кроме того, изобретатели изучили подтип Т-клеток, участвующих в α2B-рецептор-опосредованных эффектах, и наблюдали значительный и постоянный рост числа регуляторных Т-клеток (Tregs) в лимфатических органах у животных с невропатической болью, которые были обработаны агонистами α2B-рецепторов (Фиг.2). Изобретатели не наблюдали эффекта соединения на численность Treg клеток у нативных животных. Это говорит о том, что эффект агонистов α2B-рецепторов на клетки Treg зависит от антигенной стимуляции, и может иметь место антиген-избирательная экспансия Treg клеток.
Влияние альфа-2B агонистое в модели рассеянного склероза
Изобретатели показали, что этот механизм агонистов α2B-рецепторов может распространяться на вторую модель патологической активации Т-клеток, модель рассеянного склероза, и второй вид. У мышей, иммунизированных протеолипидным белком, который вызывает рецидивирующе-ремиттирующую форму экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, соединение B (3 мг/кг/сут посредством осмотического мининасоса) выборочно увеличило число Treg и снизило боль [Фигура 3].
Таблица 1
Ослабление уровней ИЛ-2 в различных тканях SNL крыс, обработанных соединением A (2,4 мг/кг/день с помощью осмотического мининасоса) или носителем.
  Ипсилатеральный DRGL4 Ипсилатеральный DRGL5, L6 Ипсилатеральный спинной мозг Сыворотка
Нативный 68±8,5 138±0,88 397,33±44,58 233,33±56,25
SNL крысы Носитель 139,33±15,76 586±7,21 523±44,80 768,33±271,94
SNL крысы Соединение A 24 часа 101,63±20,55 211±33,72** 345±19,34 978±77,13
SNL крысы Соединение A 5 дней 69,52±9,42 ** 138,35±22,59** 351,75±17,19* 380,25±61,67
Данные выражены как среднее значение пг/ мл±стандартная ошибка среднего значения, n=3-4 во всех группах.
Уровни значимости относительно носителя: *p<0,05; **p<0,01.
Таблица 2
Реверсирование боли Соединением B+/-FK506 в модели SNL крыс аллоди ни ческой нейропатической боли.
  % реверсирования аллодинии
Доза лекарства для SNL крыс (скрытая) 24 часа после 7 дней после
Носитель (50% ДМСО) -1,98±6,90 -7,23±6,22
3 мг/кг FK506 BID SC -5,77±3,43 -6,39±4,85
1 мг/кг/день Соединение B осмотический мининасос (лечение в течение 7 дней) 78,50±7,85 ** 73,35±11,95 **
1 мг/кг/день Соединение B осмотический мининасос +3 мг/кг FK506 BID SC (лечение Соединением B в течение 7 дней и лечение FK506 в течение 5 дней) 57,06±14,52* 16,43±19,42
Таблица 3
Реверсирование боли Соединением C+/-FK506 в SNL крысиной модели аллодинической нейропатической боли.
  % реверсирования аллодинии
Доза лекарства для SNL крыс (скрытая) 24 часа после 23дней после
Носитель (50% ДМСО) 0,94±5,65 1,72±5,08
3 мг/кг FK506 BID SC -0,53±6,21 2,01±5,86
1 мг/кг/день Соединение C TID орально в течение 5 дней 66,06±10,71 ** 81,48±6,00 **
1 мг/кг/день Соединение C TID орально в течение 5 дней +3 мг/кг FK506 BID SC в течение 5 дней 49±13,15* 21,82±4,26
Данные выражены как среднее значение % ПДВ, который представляет собой % реверсии аллодинии из прелекарственного базового уровня,±стандартная ошибка среднего
значения, п=6 во всех группах. Уровни значимости по сравнению с носителем: *p<0,05; **p<0,01.
Таблица 4, ниже, демонстрирует структуры соединений A, B и C:
Соединение Структура
A
Figure 00000001
B
Figure 00000002
C
Figure 00000003
Исследования, проведенные на других моделях заболевания, опосредованных Т-клетками.
Исследования механизма эффектов, опосредованных агонистами агв-рецепторов в модели невропатической боли Chung и в модели MS-индуцированной боли указывают на значительное и стойкое повышение числа предполагаемых регуляторных Т-клеток (Tregs) в лимфатических органах. Изобретатели изучили агонисты α2B-рецепторов в дальнейшем в модели MS для воздействия на клиническое течение заболевания и при аутоиммунных увеитах, эндотоксин-индуцированном увейте и болезни сухого глаза. У мышей, иммунизированных протеолипидным белком, который вызывает рецидивирующе-ремиттирующую форму экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ), лечение Соединением B в процессе развития клинической картины заболевания оказывает существенное влияние на ослабление симптомов MS (Фиг.4). Лечение от 7-10 дней сократило клиническую оценку во время рецидивов на 14 (p<0,01) и 24 день. Аналогичные результаты получают, когда мышей лечат непрерывно. В ЭАЭ, провоспалительные CD4+ T-клетки и другие воспалительные клетки размножаются на периферии, проникают в центральную нервную систему (ЦНС), что приводит к демиелинизации, характеризующейся прогрессирующим параличом. Анализ иммунной клеточной инфильтрации в ЦНС с помощью проточной цитометрии в конце исследования показал, что лечение Соединением В значительно сократило присутствие иммунных клеток (Фиг.5). Это означает, что Соединение В помешало присутствию патогенных T клеток в ЦНС, в результате чего имело место ослабление энцефаломиелита. Соединение C также показало аналогичную эффективность в ЭАЭ. После перорального приема TID (3 мг/кг/день) от дней 7-13, клиническая оценка была значительно снижена по сравнению с мышами, обработанными носителем от дней 13-24 (Фиг.6). Анализ иммунных клеток в ЦНС с помощью проточной цитометрии на 37 день показал, что Соединение С увеличило частоту регуляторных Т-клеток (CD4+ CD25 hiFoxP3+) в спинном мозге (Фиг.7). Изобретатели также выполнили исследования для изучения полезности агониста альфа-2B в моделях воспаления, опосредованного глазными Т клетками. Экспериментальный аутоиммунный увеит (EAAU) представляет собой антиген-специфический опосредовании Т клетками аутоиммунный ответ, который приводит к болезни в переднем сегменте. Соединение B, дозированное в дозе 1 мг/кг/день от дней 1-18 или дней 7-18 после EAAU индукции (3 дня орального TID дозирования с последующим дозированием с помощью осмотического мининасоса), было эффективным для частичной отмены переднего воспаления.
Соединение B снизило клинические показатели переднего увеита и снизило число воспалительных клеток во внутриглазной жидкости (Фиг.8). Кроме того, Соединение B оказалось эффективным в нормализации иммунного ответа, как видно по снижению количества клеток нейтрофилов в крови, нормализированным популяциям лимфоцитов в крови и нормализированной CD4+ Т-клеточной популяции в селезенке. Аналогичный эффект Соединения B наблюдался также в модели острого эндотоксин-индуцированного увеита (EIU). Соединение B (1 мг/кг/день, доставленное посредством осмотического мининасоса) значительно ингибирует экссудацию белка во внутриглазную жидкость у EIU крыс по сравнению с необработанными или обработанными носителем (солевым раствором) контролями (Фиг.9). Увеличение в крови нейтрофилов и снижение популяций лимфоцитов крови в результате стимуляции LPS было значительно нормализовано Соединением B, но не лечением носителя (Фиг.10). Исследование адоптивного переноса в модели заболевания сухого глаза показывает, что эффект α2B агониста на глазное воспаление включает Т-клетки. После 10 дней вентилятор-индуцированного осушающего стресса у мышей, получавших 3 мг/кг/день Соединения B или носителя (3 дня орального TID дозирования с последующим дозированием с помощью осмотического мининасоса), CD4+ Т-клетки были собраны и переданы в сингенных голых мышей. У мышей-реципиентов, получивших Т-клетки из мышей, обработанных Соединением B (в течение 10 дней при воздействии воздуходувки) значительно сократились уровни цитокинов ИЛ-17 и ФНО, ключевых цитокинов, которые способствуют заболеванию сухого глаза (Фиг.11). Соединение B было также протестировано в терапевтическом режиме, в котором лечение (3 мг/кг/сут через осмотический мининасос) было дано мышам, которые подвергались воздействию вентилятора ранее. В этом режиме также Соединение B в значительной степени предотвращало потерю бокаловидных клеток и Т-клеточной инфильтрации в конъюнктиву, сопоставимое с циклоспорином A (Фиг.12). Эти исследования подтверждают гипотезу о том, что механизм действия Соединения B, Соединения C и других агонистов агв включает в себя иммунную модуляцию.
Способы
Модель лигатуры спинального нерва у крыс
SNL (или Chung) модель у крыс является общепринятой стандартной животной моделью нейропатической боли и, как полагают, имитирует человеческое состояние каузалгии в отношении симптомов (защитное поведение, механическая аллодиния) и смягчение сиптомов с помощью фармакологических агентов. Например, морфин не смягчает тактильную аллодинию, в то время как габапентин (30 мг/кг перорально) приводит к 50% сокращению аллодинии. Модель SNL осуществляется посредством плотного лигирования L-5 и L-6 спинномозговых нервов, которое провоцирует тактильную аллодинию или чувствительность к легкому прикосновению, как описано (Kim и Chung, 1992). Самцов аутбредных крыс CD (100-120 г; Charles River, Уилмингтон, Массачусетс) анестезировали путем вдыхания изофлуоран/кислородной смеси. Хирургическое место побрили и подготовили с бетадином. Разрез был сделан от грудного позвонка XIII по направлению вниз крестца. Мышцы отделяются от спинного позвонка (слева) на L4-S2 уровнях. Было установле местоположение L6 позвонка, а затем поперечный процесс был тщательно удален небольшими костными кусачками для визуального определения L4-L6 спинномозговых нервов. L5 и L6 спинномозговые нервы были изолированы и крепко сшиты 6-0 шелковыми нитями. Полный гомеостаз был подтвержден, а затем рана была зашита. Продолжительность операции составила около 20 минут. Небольшое количество мази с антибиотиком было применено к врезанной области и животные были перемещены в пластиковую клетку восстановления при регулируемой температуре тепла лампы. Животным не дали никаких топикальных или локальных анастетиков после операции, потому что они тормозят развитие болевого синдрома, который является явлением для изучения.
Аллодиния определялась количественно у животных, получивших операции Chung путем стимуляции серией из 8 волосков Von Frey на середине подошвенной области хирургической операции на задних лапах способом вверх-вниз, как описано в литературе (Dixon, 1980). Von Frey волосы применяются способом вверх-вниз в зависимости от реакции до установления 50% порога. Von Frey волосы наносят на подошвенную поверхности оперируемой лапы с достаточной силой, чтобы согнуть ее. Положительный ответ записывается, если лапа резко отдернута. Восемь VonFrey волосков были использованы 3,61; 3,84; 4,08; 4,31; 4,56; 4,74; 4,93 и 5,18, уступая грамм-силе в 0,25 - 15 граммов. Von Frev Анализ
Figure 00000017
Среднее значение±SEM:
Среднее значение=средняя реверсивность аллодинии
SEM=STDEV/SQ ROOT от n
Тестирование с помощью соединений производится через 2-3 недели после операции, чтобы установить стабильную аллодинию. У всех экспериментальных животных, основные измерения были сделаны до введения препарата, а затем на 24 ч и 5-23 дней после введения Alzet осмотическим мининасосом. Исследователь был ослеплен по отношению к идентичности групп препарата. % реверсивности аллодинии рассчитывается по формуле: [(постпрепаратный порог-препрепаратный порог)/(15-препрепаратный порог)]×100.
Протеолипид-индуцированный экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит у мышей.
Мышиная модель экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ) широко используется, чтобы дать возможность понять механизмы, лежащие в основе иммунопатогенеза MS. Мыши, иммунизированные миелиновыми белками, такими как связывающий белок миелина (МВР), протеолипидный белок (PLP) и миелин олигодендроцитов гликопраотеин (MOG) имеют много общих черт с пациентами с MS (Friese et al., 2006). Компоненты иммунной системы, включая Т-клетки, макрофаг, и антитела играют важную роль в разрушении миелина у ЭАЭ мышей. Кроме того, воспаление приводит также к мультифокальной региональной демиелинизации с кульминацией клинических признаков неврологической дисфункции, которые включают потерю тонуса хвоста, нарушение походки и частичный до полного паралич задних конечностей. PLP-индуцированная ЭАЭ модель предлагает возможность одновременно исследовать патогенетические механизмы воспаления ЦНС и демиелинизации и MS-ассоциированной боли, мультицелевой концепции, которую мы оптимизировали здесь, в Allergan. С использованием стерильного способа миелиновый пептид протеолипидного белка (PLP) (139-159: CHCLGKWLGHPDKFVGITYAL) смешивают 1:1 с неполным адъювантом Фрейнда (IFA) (до конечной концентрации 2 мг/мл PLP). 8-10 недельным самкам SJL мышей (Taconic) вводят подкожно 100 мкл PLP/IFA (200 мкг PLP/инъекция) и на правый и левый задние фланги (день 0), используя 26G иглу. Мыши, иммунизированные с использованием этого опытного протокола, демонстрируют рецидивирующе-ремиттирующее клиническое течение с эпизодами двигательного нарушения, которые чередуются с периодами ремиссии/клинического улучшения. Кроме того, эти мыши демонстрируют надежный фенотип боли, которая наиболее ярко проявляется в периоды клинической ремиссии.
С использованием этого протокола, начало PLP-индуцированной ЭАЭ у SJL мышей происходит с частотой (~90-100%) и, как правило, очевидно на ~12 день после иммунизации, достигнув пика болезни на 14-21 день. PLP-ЭАЭ мыши демонстрируют физические симптомы неврологического нарушения, которое прогрессирует от частичной потери тонуса хвоста, до частичного до полного паралича задних конечностей. До 75% мышей будет испытывать рецидивирующе-ремиттирующее клиническое течение с периодами ремиссии в окружении эпизодов двигательного нарушения (слабость и паралич задних конечностей). Гистологически мыши демонстрируют обширное воспаление в трактах белого вещества (районы, содержащие миелиновые аксоны) головного и спинного мозга, прогрессивное проникновение и накопление воспалительных клеток, демиелинизацию и аксональные потери. Мыши с тяжелым ЭАЭ демонстрируют обширную клеточную инфильтрацию, широко распространенные очаги демиелинизации. PLP-иммунизированные мыши обычно демонстрируют наиболее тяжелую клиническую картину заболевания в течение первого эпизода неврологического нарушения (дни 14-21). В общем, фенотип боли является наиболее выраженным вначале после освобождения от начального демиелинизирующего события и поддерживается до эвтаназии мышей.
Мыши обычно визуально отбираются по поведенческим отклонениям по шкале от 0-5, 0 - нет аномалий, 1 - частичная потеря тонуса хвоста (частичная хромота хвоста), 2 - потеря тонуса хвоста и слабость задних конечностей, 3 - неустойчивость походки и частичный паралич задних конечностей, 4 - полный паралич задних конечностей и 5-умирающие или мертвые. Скоринг был проведен каждый второй - каждый третий день, начиная с 7 дня после иммунизации до сакрификации мышей. Аллодинию измеряли способом Von Frey волос, как описано выше. В конце исследования селезенку, шейный лимфатический узел, спинной и головной мозг были собраны для выполнения проточной цитометрии.
Сухой, осушающий стресс (DS) у мышей.
C57BL76 (C57BL/6NTac) и B6.Cg/NTac-Foxn1nuNE9 были приобретены у Taconic, Inc (Germantown, NY). Мыши были использованы в 6-10 недельном возрасте. Разрешение провести исследование на животных было получено от Allergan Animal Care and Use Committee. Все исследования проводились в соотвествии с требованиями Ассоциации утверждения исследований в области зрения и офтальмологии для использования животных в офтальмологических и визуальных исследованиях. Как описано в литературе, сухой глаз был вызван обработкой мышей подкожными инъекциями скополамина гидробромида (0,5 мг/0.2 мл, Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури) три раза в день, чередуя левый и правый фланги (Neiderkorn et al., 2006). Мышей помещали в клетку, содержащую перфорированные пластиковые экраны на каждой стороне клетки, чтобы пропустить поток воздуха от вентиляторов (по одному вентилятору на каждой стороне клетки) в течение 16 ч/день в капюшоне (AirClean Systems, Роли, Северная Каролина). Влажность в помещении находилась на уровне ниже 40%. Осушающий стресс (DS) вызывали в течение 10 дней подряд. Селезенка и лимфатические узлы шеи (CLN) были собраны у мышей, подвергавшихся DS и NS, и один донор-эквивалент селезенки или CLN CD4+ клеток был передан интраперитониально в сингенных голых мышей. Один эквивалент T-клеток селезенки был равен 5×107 клеток. Три дня спустя были взяты пробы для анализа. Для коллекции слезы, 1,5 мкл PBS было нанесено на каждый глаз, а затем 1 мкл слезы был собран из обоих глаз и помещено в 8 мкл буфера для анализа цитокинов (Beadlyte; Millipore, Billerica, MA). Буфер и слезная жидкость были собраны под действием капиллярных сил с использованием 1 мкл стеклянной капиллярной трубки (Drummond Scientific, Broomhall, РА), которая была помещена в мениск слезы бокового угла глазной щели. Образцы замораживали при - 80°C до времени анализа. Гистологический анализ был проведен путем окрашивания образцов слезной железы антителом к CD4 и Н&Е окрашивания для измерения бокаловидных клеток и Т-клеток в конъюнктиве. Для проверки соединений в терапевтическом режиме, животных подвергали осушающему стрессу в течение двух недель, а затем позволили отдохнуть в течение 7 дней в обычных жилых клетках. Животные были затем вновь подвергнуты осушающему стрессу в течение дополнительных 7 дней, чтобы имитировать рецидивирующую форму хронического заболевания сухого глаза. Медикаментозное лечение Соединением B было запущено за 2 дня до повторного воздействия осушающего стресса. В обоих исследованиях Соединение B вводили в дозе 3 мг/кг/день. Адаптивный перенос, анализ цитокинов слезы и гистологический анализ проводили, как описано выше.
Экспериментальный аутоиммунный передний увеоретинит у крыс.
Самцы крыс Lewis (180-200 г) были иммунизированы путем одной левой задней инъекции в подушечку стопы150 мкг (в 100 мкл) очищенного МАА комплекса из бычьего глаза. МАА белки были суспендированы в фосфатно-солевом буфере (PBS, pH 7,2) и эмульгированы (1:1 об/об) в полном адъюванте Фрейнда (CFA, VWR Scientific), содержащем 1 мкг/100 мкл коклюшного токсина (РТх) в эмульсионной смеси. Контрольным животным вводили PBS, эмульгированный с CFA и PTx.
Оценка внутриглазного воспаления была проведена, начиная с 7 дня после иммунизации, животные были обследованы раз в два дня между днями 7 и 19 после иммунизации на клинические признаки и симптомы увеита с использованием микроскопа со щелевой лампой. Водная тканевая жидкость была собрана, чтобы оценить количество воспалительных клеток и уровней белка. Клетки были подсчитаны в 10 мкл в гемацитометре под световым микроскопом. Концентрацию белка измеряли с помощью раствора для анализа белка от Bio-Rad, используя BSA в качестве белкового стандарта. Уровни провоспалительных цитокинов и хемокинов были измерены на Luminex (Biosource-lnvitrogen, Carlsbad, CA). Кровь, селезенка, и глаза были собраны в дни 11, 14 и 19, чтобы определить дифференциацию лейкоцитов крови, статус активации T клеток селезенки с помощью проточной цитометрии, а также гистопатологии.
Эндотоксин-индуцированный увеит у крыс:
Женские особи крыс Льюиса (180-200 граммов) были приобретены у лаборатории Charles River. Крысы были инъекцированы в подушечки стопы (задняя левая часть) 100 мкл 1 мг/мл LPS (Sigma) раствора (в стерильном апирогенном физиологическом растворе) или 150 мкл стерильного апирогенного физиологического раствора. Животных забивали через 24 часа после введения LPS. Водная тканевая жидкость была собрана и проанализирована, чтобы определить количество воспалительных клеток, уровни концентрации цитокинов и хемокинов, а также общие концентрации белка. Дифференциация лейкоцитов крови и гистопатология также определялись в случае необходимости.
Составы:
Соединение A было введено в 50% ДМСО (Sigma, Сент-Луис, Миссури). Этот раствор был загружен в осмотические мининасосы (модель 1007D, Alzet Corp, Пало-Альто, Калифорния), установленные для доставки препарата в дозе 0,5 мкл/ч, в результате чего последняя доза составила 2,4 мг/кг/день. Носитель для этих исследований составляет 50% ДМСО, который вводили через осмотические мининасосы в дозе 0,5 мкл/ч/кг.
Соединение B была введено в 50% ДМСО (диметилсульфоксид; Sigma, Сент-Луис, Миссури). Этот раствор дозировался перорально TID в дозе 0,3 или 1 мг/кг. Для дозирования соединение было загружено в осмотические мининасосы (модель 1007D, Alzet Corp, Пало-Альто, Калифорния), на насосах была установлена окончательная доза 1 или 3 мг/кг/день. Носитель для этих исследований представляет собой 50% ДМСО.
Соединение C было введено во-первых в 100% ДМСО (Sigma, Сент-Луис, Миссури), затем разбавлено в 30% ДМСО до 10 мг/мл раствора; 15% ДМСО до 3 мг/мл раствора, и дальнейшие разведения были сделаны в воде. Соединение дозировали перорально TID в дозе либо 0,3, либо 1 мг/кг в общей суточной дозе 1 или 3 мг/кг/день, соответственно.
Проточная цитометрия
Поверхностные клетки шейки лимфатических узлов и селезенки были получены посредством нежной механической обработки. CD4+ клетки были изолированы с помощью CD4+ изоляционной колонки (Miltenyi Biotech, Auburn, CA) в соответствии с протоколом производителя. Головной и спинной мозг были механически разбиты, и мононуклеарные клетки центральной нервной системы были выделены с использованием 37,5% Percoll (Sigma-Aldrich).
Для определения поверхностной экспрессии CD4 (Т-хелперы), CD8 (киллер Т-клетки), CD25 (активированные Т-хелперы и регуляторные Т-клетки), CD45 (макрофаги и клетки микроглии) и F4/80 (макрофаги и клетки микроглии) 5×105 клеток/100 мкл буфера FACS (PBS, 0,02% азид натрия [Sigma-Aldrich] и 2% бычьего сывороточного альбумина) инкубировали с соответствующими антителами от BD Biosciences, Mountain View, CA. Антитела для контроля изотипа использовали для каждого из антител. Клетки промывали два раза в буфере FACS и ресуспендировали в буфере 5×105 клеток/100 мкл. Пробирки, содержащие биотин-меченое антитело, получили 1,5 мкл вспомогательного окрашивающего пигмента (стрептавидин PerCP; BD-Pharmingen) и были размещены на льду в течение 20 мин в темноте. Экспрессия была проанализирована (FACSCalibur с CellQuest программным обеспечением; BD Biosciences, Mountain View, CA). Люминесцентный анализ цитокинов
Уровни цитокинов были измерены посредством анализа с чувствительными, люминесцентными мультиплексными иммунобусинами (Luminex; Biosource-lnvitrogen, Carlsbad, СА). 9-плексная панель крысиных цитокинов/хемокинов (RCYTO-80K-09) от Millipore была использована. Уровни цитокинов в образцах были проанализированы с помощью соответствующих пар цитокинов Millipore Beadmate. Для анализа Luminex, 96-луночный планшет (Millipore) был предварительно смочен 25 мкл буфера для анализа Beadlyte цитокинов. Вакуумный коллектор (Millipore, Billerica, MA) был использован для аспирации буфера из лунок. 25 мкл образца помещают в каждую лунку. Бусины (25 мкл) были пипетированы в лунки. Стандартные кривые для каждого цитокина были получены в двух экземплярах путем размещения 25 мкл соответствующего разведения стандартов, приобретенных у Millipore. Планшет инкубировали в течение ночи при осторожном встряхивании в темноте при 4°C. Бисер промывали Beadlyte буфером для анализа цитокинов (Millipore), и промывочный буфер был удален с помощью вакуумного коллектора. 25 мкл соответствующего биотинсопряженного вторичного антитела (Millipore) добавляли к каждой лунке в течение 90 минут при комнатной температуре при осторожном встряхивании. Бисер инкубировали с Beadlyte стрептавидин-фикоэритрин (1:25 разведения в Beadlyte буфере для анализа) в течение 30 минут при комнатной температуре при осторожном встряхивании. Бисер промывали, ресуспендировали в 125 мкл буфера Beadlyte и анализировали на Luminex 100 приборе (Luminex Corporation, Austin, ТХ). Средняя интенсивность флуоресценции, полученная от 50 бусин на минимум цитокина, была проанализирована с помощью программного обеспечения Upstate Beadview. Стандартные кривые были получены (8 точек данных, в том числе нулевое стандартное выполнение в двух экземплярах) с помощью четырех- или пяти-параметрической логистической кривой. R-квадрат значения были между 0,99 и 1. Данные выражены в пг/мл или нг/мл значениях.

Claims (4)

1. Способ лечения болезни сухого глаза путем введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, агониста альфа-2В рецепторов, который выбирают из группы, состоящей из:
i) имидазолина, представляющего собой соединение формулы
Figure 00000018

или его фармацевтически приемлемой соли; и
ii) имидазола, представляющего собой соединение формулы
Figure 00000019

или его фармацевтически приемлемой соли.
2. Способ лечения болезни сухого глаза путем введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, агониста альфа-2 рецепторов, испытывающего недостаток существенной активности агониста альфа-2А рецепторов и выбранного из группы, состоящей из:
i) имидазолина, представляющего собой соединение формулы
Figure 00000020

или его фармацевтически приемлемой соли; и
ii) имидазола, представляющего собой соединение формулы
Figure 00000021

или его фармацевтически приемлемой соли.
3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что агонист вводят в первоначальный период и затем агонист вводят во второй период после истечения периода отмены.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что первоначальный, второй и период отмены представляют собой один, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать, двенадцать, тринадцать или четырнадцать дней, или одну, две, три или четыре недели.
RU2013110877/15A 2010-08-16 2011-08-11 Способ активации регуляторных т-клеток агонистами альфа-2в адренергических рецепторов RU2599495C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US37412410P 2010-08-16 2010-08-16
US61/374,124 2010-08-16
PCT/US2011/047426 WO2012024161A1 (en) 2010-08-16 2011-08-11 Method of activating regulatory t cells with alpha-2b adrenergic receptor agonists

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016134989A Division RU2016134989A (ru) 2010-08-16 2011-08-11 Применение агонистов альфа-2в рецепторов для получения лекарственного средства и способы лечения (варианты)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2013110877A RU2013110877A (ru) 2014-09-27
RU2599495C2 true RU2599495C2 (ru) 2016-10-10

Family

ID=44543836

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013110877/15A RU2599495C2 (ru) 2010-08-16 2011-08-11 Способ активации регуляторных т-клеток агонистами альфа-2в адренергических рецепторов
RU2016134989A RU2016134989A (ru) 2010-08-16 2011-08-11 Применение агонистов альфа-2в рецепторов для получения лекарственного средства и способы лечения (варианты)

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016134989A RU2016134989A (ru) 2010-08-16 2011-08-11 Применение агонистов альфа-2в рецепторов для получения лекарственного средства и способы лечения (варианты)

Country Status (18)

Country Link
US (5) US8575207B2 (ru)
EP (2) EP2605771B1 (ru)
JP (3) JP5938407B2 (ru)
KR (3) KR102013086B1 (ru)
CN (3) CN108272797B (ru)
AU (1) AU2011292296B2 (ru)
BR (1) BR112013003590A2 (ru)
CA (1) CA2808307C (ru)
DK (1) DK2605771T3 (ru)
ES (1) ES2676194T3 (ru)
HK (2) HK1256823A1 (ru)
HU (1) HUE038366T2 (ru)
PL (1) PL2605771T3 (ru)
PT (1) PT2605771T (ru)
RU (2) RU2599495C2 (ru)
SI (1) SI2605771T1 (ru)
TR (1) TR201809456T4 (ru)
WO (1) WO2012024161A1 (ru)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8329918B2 (en) * 2009-07-30 2012-12-11 Allergan Inc. Selective alpha 2B/2C agonists
DK2605771T3 (en) 2010-08-16 2018-07-16 Allergan Inc PROCEDURE FOR ACTIVATING REGULATORY T CELLS WITH ALPHA-2B-ADDRENGE RECEPTOR AGONISTS
US20150313896A1 (en) * 2013-07-26 2015-11-05 Galderma Research & Development Method for treating cell proliferation disorders
US9877964B2 (en) 2015-02-24 2018-01-30 Ocugen, Inc. Methods and compositions for treating dry eye disease and other eye disorders
US9597328B2 (en) * 2015-02-24 2017-03-21 Ocugen, Inc. Methods and compositions for treating dry eye disease and other eye disorders
WO2017044979A2 (en) * 2015-09-11 2017-03-16 Ventria Bioscience Inc. Lactoferrin compositions and methods for modulation of t cell subtypes and treatment of autoimmune diseases
CN108367163A (zh) * 2015-10-05 2018-08-03 黄静峰 用于治疗干眼及相关眼表疾病的治疗性组合物
US20190134069A1 (en) * 2016-04-22 2019-05-09 Viking Therapeutics, Inc. Use of thyroid beta-agonists
EP3624773A4 (en) 2017-05-19 2021-04-07 Ocugen, Inc. OPHTHALMIC COMPOSITIONS AND METHOD OF USE

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006036512A2 (en) * 2004-09-28 2006-04-06 Allergan, Inc. Unsubstituted and substituted 4-benzyl-1,3-dihydro-imidazole-2-thiones acting as specific or selective alpha2 adrenergic agonists and methods for using the same
WO2006036480A1 (en) * 2004-09-24 2006-04-06 Allergan, Inc. 4-(phenylmethyl and substituted phenylmethyl)-imidazole-2-thiones acting as specific alpha2 adrenergic agonists
US20090306161A1 (en) * 2008-06-09 2009-12-10 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4166452A (en) 1976-05-03 1979-09-04 Generales Constantine D J Jr Apparatus for testing human responses to stimuli
US4256108A (en) 1977-04-07 1981-03-17 Alza Corporation Microporous-semipermeable laminated osmotic system
DE2835423A1 (de) 1978-08-12 1980-03-06 Hoechst Ag Beton- und moertelzusatzmittel und dessen verwendung
US4265874A (en) 1980-04-25 1981-05-05 Alza Corporation Method of delivering drug with aid of effervescent activity generated in environment of use
US6841684B2 (en) 1997-12-04 2005-01-11 Allergan, Inc. Imidiazoles having reduced side effects
US6329369B1 (en) 1997-12-04 2001-12-11 Allergan Sales, Inc. Methods of treating pain and other conditions
US6040292A (en) * 1999-06-04 2000-03-21 Celtrix Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating diabetes
US7335803B2 (en) 2001-10-19 2008-02-26 Allergan, Inc. Methods and compositions for modulating alpha adrenergic receptor activity
US6313172B1 (en) * 2000-04-13 2001-11-06 Allergan Sales, Inc. Methods and compositions for modulating alpha adrenergic receptor activity
US6545182B2 (en) * 2000-04-13 2003-04-08 Allergan Sales, Inc. Methods and compositions for modulating alpha adrenergic receptor activity
WO2002058730A2 (en) 2000-11-01 2002-08-01 Allergan, Inc. Compositions for treatment of ocular neovascularization
US6787517B1 (en) 2000-12-29 2004-09-07 Allergan, Inc. Agent and methods for treating pain
US6534542B2 (en) 2001-02-27 2003-03-18 Allergen Sales, Inc. (2-hydroxy)ethyl-thioureas useful as modulators of α2B adrenergic receptors
US7345065B2 (en) * 2002-05-21 2008-03-18 Allergan, Inc. Methods and compositions for alleviating pain
US7276522B2 (en) 2002-05-21 2007-10-02 Allergan, Inc. 4-(substituted cycloalkylmethyl) imidazole-2-thiones, 4-(substituted cycloalkenylmethyl) imidazole-2-thiones, 4-(substituted cycloalkylmethyl) imidazol-2-ones, 4-(substituted cycloalkenylmethyl) imidazol-2-ones and related compounds
US7091232B2 (en) 2002-05-21 2006-08-15 Allergan, Inc. 4-(substituted cycloalkylmethyl) imidazole-2-thiones, 4-(substituted cycloalkenylmethyl) imidazole-2-thiones, 4-(substituted cycloalkylmethyl) imidazol-2-ones and 4-(substituted cycloalkenylmethyl) imidazol-2-ones and related compounds
EP2335734A3 (en) 2003-09-12 2012-01-11 Allergan, Inc. Treatment of pain and other alpha 2 adrenergic-mediated conditions
US7105183B2 (en) * 2004-02-03 2006-09-12 The Regents Of The University Of California Chlorite in the treatment of neurodegenerative disease
EP1928848A2 (en) * 2005-08-04 2008-06-11 Apogee Biothechnology Corporation Sphingosine kinase inhibitors and methods of their use
CN101432281B (zh) * 2006-04-19 2013-08-28 诺瓦提斯公司 6-0-取代的苯并*唑和苯并噻唑化合物以及抑制csf-1r信号传导的方法
MX2009005920A (es) * 2006-12-13 2009-06-16 Hoffmann La Roche Nuevos 2-imidazoles como ligandos para receptores asociados con trazas de amina.
US20080269241A1 (en) * 2007-02-15 2008-10-30 Darin Allen Bicyclic aminopropyl tetrahydro-pyrazolo-pyridine modulators of cathepsin s
WO2009020576A1 (en) 2007-08-03 2009-02-12 The Mill Steel Co. Apparatus for determining gauge profile for flat rolled material
WO2009020578A1 (en) 2007-08-06 2009-02-12 Schering Corporation Alpha2c adrenoreceptor agonists
US20110160265A1 (en) * 2007-10-18 2011-06-30 Luhrs Lauren M B Method of treating motor disorders with alpha-2b adrenergic receptor agonists
US8809379B2 (en) * 2008-01-18 2014-08-19 Allergan, Inc. Selective subtype alpha 2 adrenergic agents and methods for use thereof
EP2242753B1 (en) * 2008-01-18 2015-04-08 Allergan, Inc. Oxazolidine and thiazolidine selective subtype alpha 2 adrenergic agents and methods for use thereof
US9034910B2 (en) 2008-06-09 2015-05-19 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions
US8063231B2 (en) * 2008-06-09 2011-11-22 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions
US8329918B2 (en) * 2009-07-30 2012-12-11 Allergan Inc. Selective alpha 2B/2C agonists
DK2605771T3 (en) 2010-08-16 2018-07-16 Allergan Inc PROCEDURE FOR ACTIVATING REGULATORY T CELLS WITH ALPHA-2B-ADDRENGE RECEPTOR AGONISTS

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006036480A1 (en) * 2004-09-24 2006-04-06 Allergan, Inc. 4-(phenylmethyl and substituted phenylmethyl)-imidazole-2-thiones acting as specific alpha2 adrenergic agonists
WO2006036512A2 (en) * 2004-09-28 2006-04-06 Allergan, Inc. Unsubstituted and substituted 4-benzyl-1,3-dihydro-imidazole-2-thiones acting as specific or selective alpha2 adrenergic agonists and methods for using the same
US20090306161A1 (en) * 2008-06-09 2009-12-10 Allergan, Inc. Methods of treating alpha adrenergic mediated conditions

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MINAMI N. et al. The mechanism responsible for hypertension in a patient with Guillain-Barr&eacute; syndrome // Clin Exp Hypertens.,1995, May;17(4), abstract. *

Also Published As

Publication number Publication date
AU2011292296A1 (en) 2013-03-14
DK2605771T3 (en) 2018-07-16
KR101847669B1 (ko) 2018-05-24
US20120041031A1 (en) 2012-02-16
EP3332782A1 (en) 2018-06-13
JP5938407B2 (ja) 2016-06-22
RU2013110877A (ru) 2014-09-27
CN114073696A (zh) 2022-02-22
US10251865B2 (en) 2019-04-09
CN108272797A (zh) 2018-07-13
AU2011292296B2 (en) 2015-09-03
CA2808307C (en) 2022-06-21
US9545394B2 (en) 2017-01-17
US20170079956A1 (en) 2017-03-23
US20180071259A1 (en) 2018-03-15
TR201809456T4 (tr) 2018-07-23
RU2016134989A3 (ru) 2020-02-17
KR20190097323A (ko) 2019-08-20
US8575207B2 (en) 2013-11-05
JP2013534246A (ja) 2013-09-02
HUE038366T2 (hu) 2018-10-29
CA2808307A1 (en) 2012-02-23
JP6509307B2 (ja) 2019-05-08
SI2605771T1 (sl) 2018-09-28
PT2605771T (pt) 2018-07-09
JP2018027984A (ja) 2018-02-22
US20160158199A1 (en) 2016-06-09
JP6250728B2 (ja) 2017-12-20
HK1258043A1 (zh) 2019-11-01
HK1256823A1 (zh) 2019-10-04
CN108272797B (zh) 2021-04-27
PL2605771T3 (pl) 2018-10-31
US20140066483A1 (en) 2014-03-06
KR102013086B1 (ko) 2019-08-21
BR112013003590A2 (pt) 2016-05-31
CN103153296B (zh) 2018-02-13
KR20130108301A (ko) 2013-10-02
RU2016134989A (ru) 2018-12-11
CN103153296A (zh) 2013-06-12
EP2605771B1 (en) 2018-04-04
EP2605771A1 (en) 2013-06-26
JP2016117781A (ja) 2016-06-30
KR20180040710A (ko) 2018-04-20
US9289420B2 (en) 2016-03-22
WO2012024161A1 (en) 2012-02-23
ES2676194T3 (es) 2018-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2599495C2 (ru) Способ активации регуляторных т-клеток агонистами альфа-2в адренергических рецепторов
US20080280954A1 (en) Method of Improving Wakefulness
WO2011131705A1 (en) Treatment of multiple sclerosis with masitinib
RU2330649C2 (ru) Агонисты альфа-2в или 2в/2с адренорецепторов для лечения нейродегенеративных заболеваний
AU2015255182B2 (en) Method of activating regulatory t cells with alpha-2b adrenergic receptor agonists
KR20230050363A (ko) 질환의 치료에 있어서 btk 저해제의 용도
US20240043396A1 (en) Methods of treating ocular fibrotic pathologies
JPH04247036A (ja) 縮瞳をおこすことなく眼圧を下げる治療方法
KR20050059274A (ko) 신경섬유 재생 촉진제