RU2584600C2 - ШТАММ L.bulgaricus, СПОСОБНЫЙ ИНГИБИРОВАТЬ АДГЕЗИЮ ШТАММОВ Н.pylori К ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМ КЛЕТКАМ - Google Patents
ШТАММ L.bulgaricus, СПОСОБНЫЙ ИНГИБИРОВАТЬ АДГЕЗИЮ ШТАММОВ Н.pylori К ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМ КЛЕТКАМ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2584600C2 RU2584600C2 RU2014108605/10A RU2014108605A RU2584600C2 RU 2584600 C2 RU2584600 C2 RU 2584600C2 RU 2014108605/10 A RU2014108605/10 A RU 2014108605/10A RU 2014108605 A RU2014108605 A RU 2014108605A RU 2584600 C2 RU2584600 C2 RU 2584600C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pylori
- strain
- bulgaricus
- cncm
- strains
- Prior art date
Links
- 241000186672 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus Species 0.000 title claims abstract description 46
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 29
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 28
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 claims abstract description 5
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 17
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 12
- 241001473947 Helicobacter pylori SS1 Species 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 7
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 108010062877 Bacteriocins Proteins 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 2
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 2
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 208000011906 peptic ulcer disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YNBJCQVKLIMGKE-UHFFFAOYSA-M 2-[3-(3-docosyl-1,3-benzoxazol-2-ylidene)prop-1-enyl]-3-propyl-1,3-benzoxazol-3-ium;iodide Chemical compound [I-].O1C2=CC=CC=C2[N+](CCC)=C1/C=C/C=C1/N(CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)C2=CC=CC=C2O1 YNBJCQVKLIMGKE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 101100232400 Buchnera aphidicola subsp. Thelaxes suberi ibp gene Proteins 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 241000186031 Corynebacteriaceae Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010015137 Eructation Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 description 1
- 101000650817 Homo sapiens Semaphorin-4D Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101150092610 PKH2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 101100339902 Pseudomonas putida nicB gene Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 206010067171 Regurgitation Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 102100027744 Semaphorin-4D Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- TYXNQDAIWMHZAY-UHFFFAOYSA-N [C].NC(N)=O Chemical compound [C].NC(N)=O TYXNQDAIWMHZAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 1
- 208000027687 belching Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000004299 exfoliation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000021121 fermented vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 101150006844 groES gene Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 1
- 208000024798 heartburn Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 101150010713 hspA gene Proteins 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229940126409 proton pump inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000612 proton pump inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 101150080234 vacA gene Proteins 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
- C12N15/746—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for lactic acid bacteria (Streptococcus; Lactococcus; Lactobacillus; Pediococcus; Enterococcus; Leuconostoc; Propionibacterium; Bifidobacterium; Sporolactobacillus)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/123—Bulgaricus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
Предложен штамм Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (L. bulgaricus), способный ингибировать адгезию штаммов Helicobacter pylori к эпителиальным клеткам. Штамм депонирован в CNCM под номером I-4428. Предложен также молочный продукт, способный снижать нагрузку H. pylori у индивидуума, инфицированного H. pylori, и содержащий указанный штамм L. bulgaricus. Группа изобретений обеспечивает значительное уменьшение интенсивности инфицирования H. pylori. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к области пробиотиков. В частности, изобретение относится к новому штамму Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, пригодному для лечения или профилактики инфекции.
В соответствии с определением, недавно одобренным Национальной Ассоциацией производителей йогурта (National Yogurt Association (NYA)) или Международным Институтом биологических наук (International Life Science Institute (ILSI)) в США, пробиотики представляют собой живые микроорганизмы, которые при приеме внутрь в достаточном количестве оказывают пользу для здоровья помимо основного питания. Пробиотические бактерии были описаны среди разновидностей, принадлежащих к родам Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus и Lactococcus, обычно используемых в молочной промышленности. Считается, что пробиотики действуют на уровне кишечной флоры, препятствуя развитию патогенных микроорганизмов и/или действуя напрямую на иммунную систему.
Helicobacter pylori (H. pylori) представляет собой грамотрицательную спиралеобразную бактерию, которая заселяет слизистый слой желудка человека у более чем 50% мировой популяции. Тогда как у большинства индивидуумов, инфицированных H. pylori, не обнаруживаются симптомы заболевания, несмотря на то, что в их желудочном эпителии есть признаки воспаления, у 15-20% индивидуумов, инфицированных H. pylori, развиваются заболевания. Действительно, H. pylori является главным этиологическим фактором хронического активного гастрита, пептических язвенных болезней, атрофии, метаплазии, дисплазии, рака желудка и лимфомы лимфоидной ткани слизистой оболочки желудка (MALT) (см. для обзора Fox and Wang, 2007 и Polk and Peek, 2010).
Во время заражения H. pylori специфически прикрепляется к желудочным эпителиальным клеткам, выстилающим желудочный эпителий, посредством нескольких адгезивных молекул (адгезинов), продуцируемых данными бактериями, таких как белки BabA и SabA. Адгезия к эпителиальным клеткам желудка защищает бактерий от потока жидкости, перистальтических движений и отслоения слизистого слоя. Адгезия H. pylori к слизистой оболочке желудка индуцирует путь сигнальной трансдукции в пределах эпителиальных клеток желудка, что приводит к повреждению эпителиальной клетки желудка и атрофии посредством механизмов окислительного стресса, апоптоза и/или аутофагии. Соответственно, адгезия H. pylori эпителиальным клеткам является ключевой стадией в установлении инфекции слизистой оболочки желудка.
Стандартным лечением больных, инфицированных H. pylori, является прием двух антибиотиков вместе с ингибитором протонового насоса (PPI), так называемая тройная терапия. Тем не менее, степень эрадикации H. pylori после тройной терапии падает из-за устойчивости к антибиотику или недостаточного соблюдения больным режима и схемы лечения. Более того, несмотря на некоторые клинические испытания, в настоящее время на рынке нет эффективной вакцины.
Из вышеизложенного следует, что существует потребность в альтернативах или дополнениях к тройной терапии для лечения или профилактики инфекции H. pylori.
Было предложено, в качестве альтернативы, использование пробиотических молочнокислых бактерий (LAB), которые продуцируют молочную кислоту, бактериоцины и другие противомикробные субстанции. Boyanova et al. (2009) обнаружили несколько штаммов Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (L. bulgaricus), которые ингибируют рост штаммов H. pylori, в том числе штаммов, устойчивых к антибиотикам, in vitro (используя метод диффузии в агаре), в штамм-зависимой манере. Однако данные изученные штаммы L. bulgaricus не четко идентифицированы и не доступны публично. Simova et al. (2009) провели скрининг нескольких молочнокислых бактерий, продуцирующих бактериоцины. Затем они определили противомикробную активность указанных штаммов посредством анализа противомикробной активности бесклеточного супернатанта (CFS) этих штаммов двумя методами in vitro: методом диффузии в агаре и методом критических разведений Barefoot и Klaenhammer. Они обнаружили, что данный CFS штамма L. bulgaricus BB18 ингибирует рост широкого спектра патогенных микроорганизмов (бактерий или дрожжей), в том числе штамма H. pylori, благодаря своей противомикробной активности.
Авторы данного изобретения изолировали новый штамм Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus и обнаружили, in vitro и in vivo, что этот штамм ингибирует адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам. Этот штамм L. bulgaricus (называемый DN_100_0602 или CNCM I-4428), может, вследствие этого, быть использован для лечения или профилактики инфекции H. pylori, в результате таргетирования главной стадии в установлении этой инфекции, а именно ингибируя адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам.
Соответственно, предметом настоящего изобретения является штамм Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus, депонированный, в соответствии с Будапештской конвенцией, в CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, 25 rue du Docteur Roux, Paris) 3 февраля 2011 г., под входящим номером CNCM I-4428.
Этот штамм CNCM I-4428 имеет следующие характеристики:
- Морфология: грамположительный микроорганизм, неподвижная палочковидная длинная бацилла с зернистостью,
- Метаболизм: гомоферментативная, каталаза (-),
- Ферментация сахаров (результаты получены в тесте API 50 CH в среде MRS при 37°C в течение 48 ч): глюкоза, фруктоза, манноза и лактоза.
Более того, этот штамм способен ингибировать адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам in vitro и in vivo.
Используемый здесь термин «ингибирование адгезии штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам» означает значительное ингибирование (а именно, полное или частичное ингибирование) адгезии штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам. Данное ингибирование адгезии штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам можно оценить in vitro, как показано в Примере 1 далее.
Настоящее изобретение также включает в себя мутантные штаммы, или генетически трансформированные штаммы, происходящие из исходного штамма CNCM I-4428, при условии что они способны ингибировать адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам. Эти мутантные или генетически трансформированные штаммы, где один или несколько эндогенных генов данного исходного штамма были видоизменены, например, для модифицирования некоторых его метаболических характеристик (например, способность ферментировать сахар, резистентность к кислотности, выживаемость при транспортировании в желудочно-кишечном тракте, постокислительные свойства или продукция метаболитов). Они также могут представлять собой штаммы, полученные в результате генетической трансформации данного исходного штамма CNCM I-4428 в одном или нескольких генах, представляющих интерес, например, для того, чтобы придать указанным генетически трансформированным штаммам дополнительные физиологические характеристики или для обеспечения возможности экспрессировать белки терапевтического или вакцинного значения, которыми желают снабдить указанные штаммы. Эти штаммы могут быть получены из данного штамма CNCM I-4428 посредством стандартных технологий для случайного или сайт-направленного мутагенеза и генетической трансформации Lactobacilli, например, таких, которые описаны у Gury et al. (2004), или у Perea Velez et al., 2007, или посредством технологии, известной как «геномный шифтинг» (Patnaik et al., 2002 и Wang et al., 2007).
Предметом настоящего изобретения также является способ получения штамма Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, способного ингибировать адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам, включающий в себя этап мутагенеза или генетической трансформации данного штамма CNCM I-4428.
Предметом настоящего изобретения также являются клеточные фракции, которые могут быть получены из штамма L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамма CNCM I-4428, при условии, что они способны ингибировать адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам. Они представляют собой, в частности, препараты ДНК или препараты бактериальных клеток, полученные из культур указанного штамма. Они также могут представлять собой супернатанты культур или фракции этих супернатантов. В качестве примера, бесклеточный супернатант (CFS) данного штамма CNCM I-4428 может быть получен, используя способ получения CFS из другого штамма L. bulgaricus, описанного у Simova et al., 2009.
Предметом настоящего изобретения также является способ получения клеточной фракции, которая способна ингибировать адгезию штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам, включающий в себя стадии:
а) культивирование штамма L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамма CNCM I-4428, и
b) получение клеточной фракции из культуры стадии a).
Предметом настоящего изобретения также является композиция, включающая в себя штамм L. bulgaricus в соответствии с настоящим изобретением, предпочтительно данный штамм CNCM I-4428, или клеточную фракцию, полученную из указанного штамма в соответствии с настоящим изобретением.
В композиции по изобретению указанный штамм можно использовать в виде целой бактерии, которая может быть живой или мертвой. Альтернативно, указанный штамм можно использовать в виде бактериального лизата или в виде бактериальных фракций; бактериальные фракции, пригодные для этого применения, могут быть выбраны, например, в результате тестирования их качеств при адгезии штаммов H. pylori к эпителиальным клеткам. Предпочтительно бактериальные клетки представлены живыми, жизнеспособными клетками.
Композиции по изобретению могут быть в любой форме, подходящей для применения, в частности, для перорального применения. Это включает в себя, например, твердые вещества, полутвердые вещества, жидкости или порошки. Жидкие композиции являются обычно предпочтительными для более легкого применения, например, в виде напитков.
Композиция может содержать, по меньшей мере, 105 КОЕ, предпочтительно, по меньшей мере, 106 КОЕ, на г сухой массы, по меньшей мере, одного бактериального штамма, как указано выше.
Композиция, кроме того, может содержать другие штаммы бактерий, отличные от штаммов по настоящему изобретению, в частности пробиотический штамм(ы), такие как штамм(ы) Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus или Lactococcus.
Если бактерии представлены в форме живых бактерий, композиция может обычно содержать в себе от 105 до 1013 колониеобразующих единиц (КОЕ), предпочтительно, по меньшей мере, 106 КОЕ, более предпочтительно, по меньшей мере, 107 КОЕ, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 108 КОЕ, и наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 109 КОЕ на г сухой массы композиции. В случае жидкой композиции, это соответствует обычно от 104 до 1012 колониеобразующих единиц (КОЕ), предпочтительно, по меньшей мере, 105 КОЕ, более предпочтительно, по меньшей мере, 106 КОЕ, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 107 КОЕ, и наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 109 КОЕ/мл.
Композиция может представлять собой пищевую композицию, в том числе пищевые продукты, пищевые добавки и функциональный пищевой продукт. «Пищевая добавка» определяет продукт, полученный из соединений, обычно используемых в продуктах питания, но которые представлены в форме таблеток, порошка, капсул, питья или любой другой форме, обычно не связанной с питанием, и который имеет благоприятное воздействие на здоровье человека. «Функциональный пищевой продукт» представляет собой пищевой продукт, который также оказывает благоприятные воздействия на здоровье человека. В частности, пищевые добавки и функциональный пищевой продукт могут иметь физиологический эффект - защитный или лечебный - в отношении заболевания, например, по отношению к хроническому заболеванию.
Питательная композиция по изобретению также включает в себя продукты детского питания, молочную смесь для детского питания или молочную смесь второго уровня. Предпочтительно настоящая композиция представляет собой нутрицевтик или фармацевтический препарат, питательную добавку или лечебное питание.
Композиция может представлять собой молочный продукт, предпочтительно ферментированный молочный продукт. Ферментированный продукт может быть представлен в форме жидкости или в форме сухого порошка, полученного посредством высушивания ферментированной жидкости. Примеры молочных продуктов включают входящее внутрь ферментированное молоко и/или ферментированную сыворотку, перемешиваемую или питьевую форму, сыр и йогурт.
Ферментированным продуктом может быть ферментированный овощ, такой как ферментированная соя, злаки и/или фрукты, перемешиваемые или питьевые формы.
В предпочтительном варианте осуществления ферментированный продукт представляет собой свежий продукт. Свежий продукт, который не проходит стадии интенсивной термической обработки, имеет преимущество, потому что бактериальные штаммы присутствуют в живой форме.
Предметом настоящего изобретения также является штамм L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамм CNCM I-4428, или композиция, как определено выше, для использования в качестве лекарственного средства.
Предметом настоящего изобретения также является штамм L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамм CNCM I-4428, или композиция, как определено выше, для использования в качестве лекарственного средства для лечения или профилактики инфекции Helicobacter pylori.
Предметом настоящего изобретения также является штамм L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамм CNCM I-4428, или композиция, как определено выше, для использования в качестве лекарственного средства, предпочтительно лекарственного средства для лечения или профилактики инфекции H. pylori.
Предметом настоящего изобретения также является штамм L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамм CNCM I-4428, или композиция, как определено выше, для промышленного производства лекарственного средства, предпочтительно лекарственного средства для лечения или профилактики инфекции H. pylori.
Предметом настоящего изобретения также является способ лечения или профилактики инфекции H. pylori у нуждающегося в этом человека, указанный способ включает в себя введение в организм указанного человека терапевтически эффективного количества штамма L. Bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамма CNCM I-4428, или композиции, как определено выше.
Определение терапевтически эффективного количества хорошо известно специалисту в данной области, в особенности с учетом подробного описания, обеспеченного здесь.
Предметом настоящего изобретения также является способ промышленного производства лекарственного средства, предпочтительно лекарственного средства для лечения или профилактики инфекции H. pylori, указанный способ включает в себя объединение штамма L. bulgaricus, как определено выше, предпочтительно штамма CNCM I-4428, или композиции, как определено выше, с, по меньшей мере, одним фармацевтически приемлемым разбавителем, носителем или инертным наполнителем.
Как используется здесь, лечение или профилактика включают, среди прочего, профилактику инфекции, стабилизируя нагрузку H. pylori и/или снижая нагрузку H. pylori. Данное лечение или профилактика также обращены к, по меньшей мере, одному из симптомов, ассоциированных с H. pylori, упомянутых ниже.
Способы диагностики инфекции H. pylori известны в данной области. В качестве примера, диагноз инфекции H. pylori может быть поставлен посредством анализа антител в крови, анализа антигена в кале или углерод мочевинного дыхательного теста. Также он может быть поставлен посредством биопсии под эндоскопическим контролем с последующим уреазным тестом, гистологическим исследованием или микробным культивированием.
Симптомами и заболеваниями, ассоциированными с инфекцией H. pylori, являются боль в желудке, изжога, кислотный рефлюкс, боль в области живота, регургитация, рвота, отрыжка, метеоризм, тошнота, гастриты, например, хронический активный гастрит, пептические язвенные болезни, атрофия, метаплазия, дисплазия, рак желудка и лимфома лимфоидной ткани слизистой оболочки желудка (MALT).
Настоящее изобретение будет понятно более четко из последующего описания, которое включает в себя примеры, иллюстрирующие противоинфекционные свойства штамма CNCM I-4428, а также приложенные фигуры.
На Фигуре 1 представлено изменение массы (в граммах) мышей, инфицированных H. pylori SS1, получающих контролируемый продукт, или инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-4428, или инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-1632 (Lb 130), измеренное непосредственно перед лечением (первый столбец), через 3 недели после лечения (второй столбец) и непосредственно перед умерщвлением (третий столбец).
На Фигуре 2 представлена оценка инфекции в баллах, полученная в результате иммуногистохимического анализа с использованием анти-H. pylori антител у мышей (i), неинфицированных H. pylori, (ii) инфицированных H. pylori SS1, получающих контролируемый продукт (неферментированное молоко), (iii) инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-1632 (Lb 130) и (iv) инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-4428. Определение баллов: 0: нет инфицированных желез, 1: редкие инфицированные железы, 2: 25% инфицированных желез, 3: от 25 до 50% инфицированных желез, 4: >50 % инфицированных желез.
На Фигуре 3 представлено количественное определение ДНК H. pylori SS1, полученное посредством ПЦР в режиме реального времени у мышей (i), неинфицированных H. pylori, (ii) инфицированных H. pylori SS1, но получающих контролируемый продукт (неферментированное молоко), (iii) инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-4428 и (iv) инфицированных H. pylori SS1 и получающих лечение с помощью L. bulgaricus CNCM I-1632 (Lb 130).
Пример 1: Отбор штаммов L. bulgaricus по их действию на адгезию Helicobacter pylori к эпителиальным клеткам желудка
Способ, описанный у Oleastro et al. (2008), использовали с модификациями для оценки действия двух штаммов Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (CNCM I-4428 и CNCM I-1632, занесенных в CNCM 25 октября 1995 г.) на адгезивную способность H. pylori с эпителиальными клетками.
1.1 Материалы и методы
Были протестированы два штамма H. pylori: штамм J99 (BabA2; ATCC номер: 700824) и штамм 09.193 (BabA1, изолированный в Японии исследователем Yoshio Yamaoka, из Oita University). Эти штаммы были протестированы со значением MOI 50 (множественность заражения). Клетки H. pylori переносили в буфер PBS после культивирования в течение 24 ч в агаре Pylori (Biomerieux, France). Концентрация бактериальных суспензий данных двух штаммов H. pylori, соответственно, была нормализована при 2,108 КОЕ/мл (соответствует OD600nm = 1).
Две суспензии Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus были протестированы с MOI 50 (соответствует 25 мкл нормализованной суспензии L. bulgaricus на лунку).
100000 эпителиальных клеток AGS (ATCC номер: CRL-1739) были инокулированы накануне эксперимента по инфицированию в 500 мкл среды DMEM F12, дополненной фетальной телячьей сывороткой 10%.
Окрашивание суспензий H. pylori
1 мл суспензии H. pylori центрифугировали в течение 10 минут при 10000 g. осадок ресуспендировали в 1 мл разбавителя А (из набора PKH2 Green Fluorescent Cell Linker Kit, Sigma Aldrich, Saint-Louis) и добавляли 2,5 мкл PKH2 (Sigma Aldrich, Saint-Louis). Данную суспензию инкубировали в течение 2 минут и 30 секунд при комнатной температуре. Окрашивание останавливали посредством добавления 2 мл фетальной телячьей сыворотки. Затем добавляли 4 мл среды DMEM/F12 перед центрифугированием данной суспензии в течение 10 минут 10000 g. Осадок ресуспендировали в 4 мл культуральной среды и центрифугировали в течение 10 минут при 10000 g. Эту стадию отмывки повторяли дважды для удаления избытка флуорохрома.
Оценка адгезии
Эпителиальные клетки AGS были диссоциированы с помощью трипсина, следуя стандартным условиям после трех отмывок с помощью PBS для удаления неприлипших бактерий. Флуоресцентную эмиссию анализировали посредством проточной цитометрии. Флуоресценцию измеряли, используя проточный цитометр FACSCalibur (Becton Dickinson). Каждое условие исполняли в трех повторах.
Инфицирование с помощью H. pylori осуществляли в двух условиях:
- в условиях пре-инфицирования (пре-): тестируемую суспензию L. bulgaricus добавляли к данным эпителиальным клеткам AGS за 1 ч 30 мин перед инфицированием с помощью H. pylori. Проводили анализ клеток посредством проточной цитометрии через 1 ч 30 мин после инфицирования (общее время инкубации 3 ч);
- в условиях ко-инфицирования (ко-): тестируемую суспензию L. bulgaricus и штамм H. pylori добавляли к эпителиальным клеткам AGS одновременно и проводили анализ данных клеток посредством проточной цитометрии после времени инкубации 1 ч 30 мин.
Контроль
Контрольное значение интенсивности флуоресценции было получено с помощью эпителиальных клеток AGS, инкубированных со штаммами H. pylori в течение 1 ч 30 мин.
Значения процента адгезии были даны относительно адгезии H. pylori к эпителиальным клеткам AGS воздействия L. bulgaricus, которые были установлены за 100%.
Результаты были проанализированы из среднего значения, полученного из трех повторений, и они были оценены в баллах, когда они были значимо отличны в соответствии с критерием Стьюдента (P<0,05).
1.2 Результаты
Результаты представлены далее в Таблице 1.
| Таблица 1 Результаты получены для двух штаммов L. bulgaricus по их действию на адгезию H. pylori к эпителиальным клеткам AGS |
|
 |
|
| Определение баллов: -3: значимое повышение адгезии, 0: нет значимого эффекта на адгезию, 1: значимое ингибирование адгезии от 1 до 10%, 2: значимое ингибирование адгезии от 11 до 20%, 3: значимое ингибирование адгезии от 21 до 30%, 4: значимое ингибирование адгезии свыше 30%. |
Данные результаты демонстрируют, что бактериальная суспензия штамма CNCM I-4428 ингибирует адгезию двух штаммов H. pylori (J99 и 09.193) к эпителиальным клеткам AGS при двух разных условиях (пре- и ко-инкубировании), но бактериальная суспензия штамма CNCM I-1632 не обладает этой характеристикой.
Пример 2: действие штамма CNCM I-4428 на нагрузку H. pylori в экспериментальной модели на мышах
2.1 Материалы и методы
Helicobacter pylori
Использовали штамм H. pylori SS1, имеющий очень хорошую способность к колониеобразованию на слизистой оболочке желудка мыши (Lee et al., 1997). Абсолютное иммунологическое родство штамма проверяли посредством секвенирования генов glm и hspA и vacA.
Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
Молочные продукты, ферментированные 2 различными штаммами L. bulgaricus (CNCM I-4428 или CNCM I-1632), готовили следующим образом: первая культура в MRSn была приготовлена из замороженного штамма и инкубирована при 37°C в течение 17 ч. Вторая культура была приготовлена в обезжиренном молоке, обогащенным дрожжевым экстрактом (2 г/л), посредством инокуляции 1% из первой культуры и инкубировании при 37°C в течение 17 ч. Третья культура была приготовлена в молоке, обогащенном дрожжевым экстрактом (2 г/л), посредством инокуляции 1% из второй культуры и инкубировании при 37°C до достижения значения pH 4,7. Данный продукт был окончательно приготовлен посредством инокуляции молока, обогащенного дрожжевым экстрактом (2 г/л), 1% данной третьей культуры до достижения значения pH 4,7. Продукты хранили при -80°C. Определение количества бактерий осуществляли в MRSn после 48 ч инкубирования. Количество бактерий составляло 6×108 и 1,3×109 КОЕ/мл соответственно для штаммов CNCM I-4428 и CNCM I-1632.
МЫШИ
55 самок мышей BALB/cBy/J в возрасте 5 недель (Charles River, France), протестированные как SPF («свободные от специфической патогенной флоры»), разделили на группы: 3 группы по 15 мышей были инфицированы и 1 группу из 10 мышей использовали в качестве неинфицированного контроля. Мышей кормили кормом, бедным витаминами, для усиления развития патологического нарушения, индуцированного посредством H. pylori.
Инфицирование (8 недель)
Мыши в возрасте 6 недель, получавшие в течение 1 дня водную диету, и затем на следующее утро с принуждением накормлены 250 мкл обогащенной суспензии штамма H.pylori SS1 (1-2 чашки Петри H. pylori для 5 мышей). Затем мышей помещали в клетку и давали нормальный рацион. Затем данные мыши снова получали водную диету вечером. Этот протокол повторяли в течение 3 дней.
Лечение (6 недель)
Через восемь недель после инфицирования мыши в течение 6 недель получали лечение молочными продуктами, содержащими в себе штамм L. bulgaricus. Давали 120 г молочного продукта на клетку в день в бутылочках для кормления вместо воды. Данные бутылочки для кормления меняли каждый день. Для оценки количества продукта, съеденного каждым животным, данные бутылочки для кормления взвешивали. Более того, мышей взвешивали непосредственно перед лечением, через 3 недели после лечения и непосредственно перед умерщвлением (результаты представлены на Фигуре 1).
Мыши контрольных групп получали молоко, обогащенное дрожжевым экстрактом (2 г/л) (то есть без какого-либо штамма L. bulgaricus).
Умерщвление подопытных животных
Мышей умерщвляли посредством смещения шейных позвонков. Осуществляли лапаротомию. Выделяли желудки, и слизистую оболочку желудка отмывали в физиологической сыворотке.
Желудок разрезали посередине от пищевода до двенадцатиперстной кишки. Для правой половины желудка кардиальное отверстие было исключено, и затем эту половину желудка помещали в физиологическую сыворотку для использования в молекулярном исследовании. Левую половину желудка использовали для гистологического исследования.
Гистологическое исследование
Левую половину желудка фиксировали в течение 1 ночи в 3,7% формалине, и отмывали с помощью 70% этилового спирта, а затем заливали в парафин и делали срезы толщиной 3 мкм.
Иммуногистохимический анализ проводили с антителами к анти-H. pylori антигенами: первичное антитело: анти-H. pylori (Dako, Ref. B0471); вторичное антитело и DAB: Dako EnVision + System-HRP (DAB) (Dako, Ref. K4011).
Молекулярное исследование (qRT-PCR)
Правые половины желудков гомогенизировали (разрушали) в 0,2 мл физиологической сыворотки с Potter-Elvehjem (пробирку взвешивали с и без желудочной ткани для определения веса данной ткани).
Общую ДНК выделяли из измельченного желудка с использованием набора Arrow Stool DNA kit (NorDiag, Norvege), соблюдая рекомендации фирмы-поставщика. Общая ДНК каждого измельченного желудка была ресуспендирована в 180 мкл буфера TRIS (10 мМ).
Присутствие ДНК H. pylori было количественно определено в ДНК-экстрактах посредством ПЦР в режиме реального времени. Амплификацию проводили с праймерами, нацеленными на 23S рРНК, представленной в двух копиях в H. pylori, следуя методу, описанному у Oleastro et al. (2003). Для 20 мкл смеси (MgCl2 25 мМ, праймеры Hpy-A et Hpy-S 20 мкМ, описанные у Menard et al., 2002, сенсорный зонд, меченный с 5'-конца с помощью LC-Red 640 и 3'-фосфорилированный, и якорный зонд, меченный с 3'-конца флуоресцеином (оба зонда описаны у Oleastro et al. 2003) 20 мкМ, буфер, содержащий в себе фермент (10X, набор FastStart DNA Master Hybridization Probes, Roche Diagnostics), 5 мкл ДНК в концентрации 200 нг/мкл добавляли для амплификации в Light Cycler ROCHE, используя следующую программу:
| Денатурация: | 95°C | 10 мин | ||
| Амплификация: | 50 циклов | 20°C/сек | ||
| 95°C | 0 сек | |||
| 60°C | 20 с | |||
| 72°C | 12 сек | |||
| Синтез: | 95°C | 0 сек | ||
| 38°C | 50 сек | 20°C/сек | ||
2.2 Результаты
Результаты инфицирования, полученные посредством иммуногистохимического исследования для штаммов L. bulgaricus CNCM I-4428 и CNCM I-1632 (Lb 130), представлены на Фигуре 2. Эти результаты демонстрируют, что применение молочного продукта, ферментированного штаммом CNCM I-4428, у мышей, инфицированных H. pylori, значительно уменьшает интенсивность инфицирования, но лечение с помощью молочного продукта, ферментированного штаммом CNCM I-1632, не снижает нагрузки H pylori.
Результаты, полученные с помощью ПЦР в режиме реального времени для штаммов L. bulgaricus CNCM I-4428 и CNCM I-1632 (Lb 130), представлены на Фигуре 3. Эти результаты демонстрируют, что у мышей лечение с помощью молочного продукта, ферментированного штаммом CNCM I-4428, значительно снижает нагрузку H. pylori, но лечение с использованием молочного продукта, ферментированного штаммом CNCM I-1632, не снижает нагрузку H pylori.
Источники информации
- Boyanova L et al., Lett Appl Microbiol. 2009;48:579-84.
- Fox JG and Wang TC., J Clin Invest. 2007;117:60-9.
- Gury J et al., Arch Microbiol. 2004;182:337-45.
- Lee A et al., Gastroenterology. 1997;112:1386-97.
- Menard A et al., Antimicrob Agents Chemother. 2002;46:1156-7.
- Oleastro M et al., J Clin Microbiol. 2003;41:397-402.
- Oleastro M, et al., J Infect Dis. 2008;198:1379-87.
- Patnaik R et al., Nat Biotechnol. 2002;20:707-12.
- Perea Velez M et al., Appl Environ Microbiol. 2007;73:3595-604.
- Polk DB and Peek RM Jr., Nat Rev Cancer. 2010;10:403-14.
- Simova ED et al., J Appl Microbiol. 2009;106:692-701.
- Wang Y et al., J Biotechnol. 2007;129:510-5.
Claims (7)
1. Штамм Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (L. bulgaricus) CNCM I-4428, способный ингибировать адгезию штаммов Helicobacter pylori к эпителиальным клеткам.
2. Молочный продукт, содержащий штамм L. bulgaricus по п.1, способный снижать нагрузку H. pylori у индивидуума, инфицированного H. pylori.
3. Молочный продукт по п.2, отличающийся тем, что он содержит, по меньшей мере, 105 КОЕ, предпочтительно, по меньшей мере, 106 КОЕ, на грамм сухой массы, штамма L. bulgaricus по п.1.
4. Молочный продукт по п.2 или 3, отличающийся тем, что он представляет собой ферментированный молочный продукт.
5. Штамм по п.1 для использования в качестве лекарственного средства.
6. Штамм по п.5, отличающийся тем, что указанное лекарственное средство предназначено для лечения или профилактики инфекции H. pylori.
7. Молочный продукт по п.2 или 3 для использования в качестве средства для профилактики инфекции H. pylori.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IB2011/053552 WO2013021239A1 (en) | 2011-08-09 | 2011-08-09 | New strain of l. bulgaricus capable of inhibiting the adhesion of h. pylori strains to epithelial cells |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014108605A RU2014108605A (ru) | 2015-09-20 |
| RU2584600C2 true RU2584600C2 (ru) | 2016-05-20 |
Family
ID=44645757
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014108605/10A RU2584600C2 (ru) | 2011-08-09 | 2011-08-09 | ШТАММ L.bulgaricus, СПОСОБНЫЙ ИНГИБИРОВАТЬ АДГЕЗИЮ ШТАММОВ Н.pylori К ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМ КЛЕТКАМ |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9272007B2 (ru) |
| EP (1) | EP2742125B1 (ru) |
| JP (1) | JP5997769B2 (ru) |
| CN (1) | CN103987839B (ru) |
| AR (1) | AR087463A1 (ru) |
| BR (1) | BR112014002911B1 (ru) |
| ES (1) | ES2627767T3 (ru) |
| MX (1) | MX350212B (ru) |
| RU (1) | RU2584600C2 (ru) |
| WO (1) | WO2013021239A1 (ru) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9925225B2 (en) | 2014-09-26 | 2018-03-27 | Nubiome, Inc. | Treatment and prophylaxis for gastroesophageal reflux disease |
| CN111118106B (zh) * | 2019-12-20 | 2021-12-17 | 善恩康生物科技（苏州）有限公司 | 一株可以抑制幽门螺旋杆菌的嗜酸乳杆菌la-10a及其应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001079278A1 (en) * | 2000-04-17 | 2001-10-25 | Vrije Universiteit Brussel | Lactobacillus johnsonii bacteriocin, active against helicobacter pylori |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101314763B (zh) * | 2007-06-01 | 2011-06-08 | 统一企业(中国)投资有限公司 | 具有抗胃肠道致病菌、抗氧化和降血压作用的短双歧杆菌及其用途 |
| JP5679255B2 (ja) * | 2009-12-28 | 2015-03-04 | 株式会社明治 | 酸素耐性が増強された微生物およびその利用 |
-
2011
- 2011-08-09 MX MX2014001572A patent/MX350212B/es active IP Right Grant
- 2011-08-09 EP EP11755445.1A patent/EP2742125B1/en not_active Not-in-force
- 2011-08-09 BR BR112014002911-3A patent/BR112014002911B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2011-08-09 JP JP2014524456A patent/JP5997769B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-08-09 US US14/237,740 patent/US9272007B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-08-09 WO PCT/IB2011/053552 patent/WO2013021239A1/en active Application Filing
- 2011-08-09 RU RU2014108605/10A patent/RU2584600C2/ru active
- 2011-08-09 ES ES11755445.1T patent/ES2627767T3/es active Active
- 2011-08-09 CN CN201180072799.XA patent/CN103987839B/zh not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-08-03 AR ARP120102859A patent/AR087463A1/es not_active Application Discontinuation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001079278A1 (en) * | 2000-04-17 | 2001-10-25 | Vrije Universiteit Brussel | Lactobacillus johnsonii bacteriocin, active against helicobacter pylori |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BOYANOVA L. ET AL. Anti-Helicobacter pylori activity of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus strains: preliminary report // Lett Appl Microbiol. 2009;48(5):579-84. * |
| ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том III: Пробиотики и функциональное питание. - М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998, с. 84-85. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112014002911A2 (pt) | 2017-03-01 |
| ES2627767T3 (es) | 2017-07-31 |
| EP2742125B1 (en) | 2017-03-15 |
| US20140205571A1 (en) | 2014-07-24 |
| WO2013021239A1 (en) | 2013-02-14 |
| US9272007B2 (en) | 2016-03-01 |
| JP2014522667A (ja) | 2014-09-08 |
| CN103987839B (zh) | 2016-11-23 |
| MX2014001572A (es) | 2015-03-05 |
| CN103987839A (zh) | 2014-08-13 |
| BR112014002911B1 (pt) | 2020-12-08 |
| AR087463A1 (es) | 2014-03-26 |
| RU2014108605A (ru) | 2015-09-20 |
| JP5997769B2 (ja) | 2016-09-28 |
| EP2742125A1 (en) | 2014-06-18 |
| MX350212B (es) | 2017-08-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111484957B (zh) | 动物双歧杆菌乳亚种i797、其分离纯化方法及应用 | |
| EP2179028B1 (en) | A novel strain of bifidobacterium and active peptides against rotavirus infections | |
| JP3046303B1 (ja) | Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ除菌性飲食品 | |
| RU2567009C2 (ru) | ШТАММ Lactococcus lactis ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ РАССТРОЙСТВА ПИЩЕВАРЕНИЯ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | |
| KR102146429B1 (ko) | 비피도박테리움 아니말리스 아종 아니말리스 균주 | |
| TWI241912B (en) | Novel Acid-and bile salt-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol | |
| JP2005536197A (ja) | プロバイオティクス菌株、その選択方法、その組成物、およびその使用 | |
| RU2704133C2 (ru) | Применение lactobacillus paracasei для усиления восстановления разнообразия кишечной микрофлоры после дисбактериоза | |
| KR20180044245A (ko) | 변비 개선 효능을 갖는 신규한 유산균 및 이의 용도 | |
| CN112625979B (zh) | 一种对抗幽门螺杆菌的干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN113832077A (zh) | 鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
| CN113637603B (zh) | 一种肠道乳杆菌及其应用 | |
| CN109715181A (zh) | 细菌 | |
| US20150284675A1 (en) | Streptococcus thermophilus strains for treating helicobacter pylori infection | |
| JP5868519B2 (ja) | ロイテリン産生ラクトバチルス・ブレビス | |
| RU2584600C2 (ru) | ШТАММ L.bulgaricus, СПОСОБНЫЙ ИНГИБИРОВАТЬ АДГЕЗИЮ ШТАММОВ Н.pylori К ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМ КЛЕТКАМ | |
| JPWO2018034203A1 (ja) | 新規乳酸菌、新規乳酸菌を有効成分として含有する自然免疫活性化剤、及び新規乳酸菌を含有する飲食品 | |
| CN114686405B (zh) | 一株具有减少脂肪和缓解高血糖，调节肠道免疫力的两歧双歧杆菌及其应用 | |
| RU2546253C2 (ru) | Способ получения персонифицированного аутопробиотического продукта и способ лечения синдрома раздраженной кишки с использованием этого продукта | |
| US20050215471A1 (en) | Compositions of bacteria and alpha-lactalbumin and uses thereof | |
| CN114921383A (zh) | 一种具有清除胆固醇功能的益生菌制剂及其制备方法 | |
| WO2013027087A1 (en) | A non-reuterin-producing lactobacillus reuteri strain for treating helicobacter pylori infection | |
| JP2001002578A (ja) | Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ除菌性医薬品 | |
| BG112471A (bg) | Имуномодулиращ синбиотичен състав | |
| Baccigalupi et al. | Characterization of food-isolated strains of Lactobacillus fermentum with potential probiotic activity |