RU2572214C2

RU2572214C2 - Способ получения цинковых комплексов инсулина

Info

Publication number: RU2572214C2
Application number: RU2012148821/15A
Authority: RU
Inventors: Лене АНДЕРСЕН; Роза Ребекка Эрритсёэ ХАНСЕН; Пер ЙЕППЕСЕН
Original assignee: Ново Нордиск А/С
Priority date: 2010-05-10
Filing date: 2011-05-09
Publication date: 2015-12-27
Also published as: ES2612468T3; AU2011252127B2; JP6249773B2; CA2795091A1; US20170165327A1; KR20160105979A; JP2017203042A; WO2011141407A1; KR20130092972A; CN107029212A; US20150250857A1; EP2569002A1; CN102883743A; MX2012012943A; EP2569002B1; AU2011252127A1; US20130143803A1; JP2013526501A; RU2012148821A; BR112012028766A2

Abstract

Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины и касается способа получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, подведение рН раствора до значения выше рН 7,2, добавление содержащего цинк раствора в течение периода более чем одна минута при постоянном перемешивании и подведение рН до значения в диапазоне от 7,0 до 7,8 и при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, в которой имеется боковая цепь, присоединенная к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи инсулина человека или его аналога, при этом боковая цепь имеет общую формулу: W-X-Y-Z. Группа изобретений обеспечивает получение чистого и прозрачного раствора инсулина для лечения диабета. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 4 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей инсулин и цинк, к фармацевтической готовой лекарственной форме, полученной этим способом, и к применению этой готовой лекарственной формы для лечения диабета.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Инсулин - это состоящий из 51 аминокислоты пептидный гормон, вырабатываемый в островках Лангерганса в поджелудочной железе. Когда он действует в форме мономера, его основной функцией является облегчение переноса молекул глюкозы через клеточные мембраны в жировой и мышечной тканях посредством связывания с трансмембранным рецептором и его активации.

Готовые лекарственные формы инсулина обычно получают разведением инсулина в небольшом объеме воды в кислых условиях. Затем к готовой лекарственной форме добавляют цинк, после чего проводят нейтрализацию и добавляют консерванты, такие как фенол и m-крезол.

В публикации WO 2005/012347 раскрыты производные инсулина, содержащие отрицательно заряженную боковую цепь. В публикации WO 2007/074133 раскрыты растворимые фармацевтические готовые лекарственные формы, содержащие ацилированный инсулин и более 4 атомов цинка на 6 молекул ацилированного инсулина.

В настоящем изобретении удалось разрешить проблемы, характерные для прототипа.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, возможно, содержащей фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, с образованием раствора производного инсулина, подведение рН раствора до значения выше рН 7,2, добавление содержащего цинк раствора при постоянном перемешивании и подведение рН до целевого значения рН готовой лекарственной формы, и при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, в которой имеется боковая цепь, присоединенная к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина, при этом боковая цепь имеет общую формулу:

-W-X-Y-Z.

Изобретение дополнительно относится к полученному этим способом продукту и к применению полученного этим способом продукта.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Термин «фармацевтическая готовая лекарственная форма» при использовании в этом документе означает продукт, содержащий активное соединение или его соль вместе с фармацевтическими вспомогательными веществами, такими как буферизирующий агент, консервант и модификатор тоничности, при этом указанная фармацевтическая готовая лекарственная форма полезна для лечения, профилактики или уменьшения тяжести заболевания или нарушения посредством введения указанной фармацевтической готовой лекарственной формы субъекту. Таким образом, фармацевтическая готовая лекарственная форма также известна специалистам как фармацевтическая композиция.

Под «целевым значением рН готовой лекарственной формы» понимают значение рН, которое является требуемым значением рН в конечной фармацевтической готовой лекарственной форме.

Термин «фармацевтически приемлемый» при использовании в этом документе означает пригодный для стандартных фармацевтических применений, т.е. не вызывающий нежелательные явления у пациента и т.д

Термин «производное инсулина» при использовании в этом документе означает химически модифицированный исходный инсулин или его аналог, при этом модификация (или модификации) производится в форме присоединения амидов, углеводов, алкильных групп, ацильных групп, сложных эфиров, пегилирования и т.п. Одним из примеров является LysB29Me-гексадекандиоил-γ-Glu-дез-В30-инсулин человека.

Термин «инсулин человека» при использовании в этом документе означает гормон инсулин человека, чьи структура и свойства хорошо известны. Инсулин человека содержит две полипептидные цепи, называемые А-цепью и В-цепью. А-цепь представляет собой пептид из 21 аминокислоты, а В-цепь - пептид из 30 аминокислот, при этом две цепи соединены дисульфидными мостиками: первый мостик образован между цистеином в положении 7 в А-цепи и цистеином в положении 7 в В-цепи и второй мостик - между цистеином в положении 20 в А-цепи и цистеином в положении 19 в В-цепи. Третий мостик расположен между цистеинами в положениях 6 и 11 в А-цепи.

В организме человека гормон синтезируется в виде одноцепочечного предшественника проинсулина (пре-проинсулина), состоящего из пре-пептида длиной в 24 аминокислоты, за которым следует проинсулин, содержащий 86 аминокислот, в конфигурации: пре-пептид-B-Arg-Arg-C-Lys-Arg-A, где С - это соединительный пептид длиной в 31 аминокислоту. Arg-Arg и Lys-Arg являются сайтами расщепления для отщепления соединительного пептида от А- и В-цепей.

Термин «пептид инсулина» при использовании в этом документе означает либо инсулин человека, либо его аналог или производное, обладающие активностью инсулина.

Подразумевается, что термин «исходный инсулин» при использовании в этом документе означает инсулин до того, как в отношении него были осуществлены какие-либо модификации аминокислотной последовательности.

Термин «аналог инсулина» при использовании в этом документе означает модифицированный инсулин, в котором один или несколько аминокислотных остатков инсулина были заменены другими аминокислотными остатками, и/или в котором один или несколько аминокислотных остатков были удалены из инсулина, и/или в котором один или несколько аминокислотных остатков были добавлены и/или вставлены в инсулин.

В одном из вариантов воплощения аналог инсулина содержит менее чем 8 модификаций (замен, делеций, добавлений (включая вставки) в любом их сочетании) относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 7 модификаций относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 6 модификаций относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 5 модификаций относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 4 модификации относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 3 модификации относительно исходного инсулина, в соответствии с другим вариантом - менее чем 2 модификации относительно исходного инсулина. Одним из примеров аналога инсулина является AspB28 - инсулин человека.

При обозначении модификаций молекулы инсулина указывают цепь (А или В), положение и, с помощью одно- или трехбуквенного сокращения, - аминокислотный остаток, которым замещен аминокислотный остаток в нативной последовательности.

Под «дез-В30» или «В(1-29)» понимают природную В-цепь инсулина или ее аналог, в которых отсутствует аминокислота В30, а «А(1-21)» обозначает природную А-цепь инсулина. Таким образом, например, A21Gly, B28Asp, дез-В30-инсулин человека - это аналог инсулина человека, в котором аминокислота в положении 21 в А-цепи замещена на глицин, аминокислота в положении 28 в В-цепи замещена на аспарагиновую кислоту и аминокислота в положении 30 в В-цепи делетирована.

В этом документе термины типа «А1», «А2» и «A3» и т.д обозначают аминокислоту в положении 1, 2 и 3 и т.д. соответственно в составе А-цепи инсулина (при отсчете начиная с N-конца). Схожим образом, термины типа «В1», «В2» и «В3» и т.д. обозначают аминокислоту в положении 1, 2 и 3 и т.д. соответственно в составе В-цепи инсулина (при отсчете начиная с N-конца). При использовании однобуквенных сокращений аминокислот термины вроде А21А, A21G и A21Q означают, что аминокислота в положении А21 является A, G и Q соответственно. При использовании трехбуквенных сокращений аминокислот соответствующими выражениями будут: А21А1а, A21Gly и A21Gln соответственно.

В этом документе термины «А(0)» или «В(0)» указывают положения аминокислот с N-конца относительно А1 или В1 соответственно. Термины А(-1) или В(-1) указывают положения первых аминокислот с N-конца относительно А(0) или В(0) соответственно. Таким образом, А(-2) и В(-2) указывают положения аминокислот с N-конца относительно А(-1) и В(-1) соответственно, А(-3) и В(-3) указывают положения аминокислот с N-конца относительно А(-2) и В(-2) соответственно, и т.д.

В этом документе термины А(0) или В(0) указывают положения аминокислот с N-конца относительно А1 или В1 соответственно. Термины А(-1) или В(-1) указывают положения первых аминокислот с N-конца относительно А(0) или В(0) соответственно. Таким образом, А(-2) и В(-2) указывают положения аминокислот с N-конца относительно А(-1) и В(-1) соответственно, А(-3) и В(-3) указывают положения аминокислот с N-конца относительно А(-2) и В(-2) соответственно, и т.д. Термины А22 или В31 указывают положения аминокислот с C-конца относительно АН или В30 соответственно. Термины А23 или В32 указывают положения первых аминокислот с С-конца относительно А22 или В31 соответственно. Таким образом, А24 и В33 указывают положения аминокислот с С-конца относительно А23 и В32 соответственно, и т.д.

Термин «без снижения эффективности» при использовании в этом документе означает, что при объединении в одной готовой лекарственной форме как инсулина быстрого действия, так и ацилированного инсулина, профиль действия будет идентичным или в существенной степени идентичным профилю действия, наблюдаемому при введении инсулина быстрого действия и ацилированного инсулина в составе разных готовых лекарственных форм.

В этом документе термин «аминокислотный остаток» означает аминокислоту, у которой, формально, была удалена гидроксильная группа из состава карбоксильной группы и/или у которой, формально, был удален атом водорода из состава аминогруппы.

hGlu - это гомоглутаминовая кислота.

α-Asp является L-формой соединения -НМСН(СО-)СН₂СООН.

β-Asp является L-формой соединения -НМСН(СООН)СН₂СО-.

α-Glu является L-формой соединения -HNCH(CO-)CH₂CH₂COOH.

γ-Glu является L-формой соединения -НМСН(СООН)СН₂СН₂СО-.

α-hGlu является L-формой соединения -HNCl(CO-)-CH₂CH₂CH₂COOH).

δ-hGlu является L-формой соединения -HNCH(COOH)CH₂CH₂CH₂CO-.

β-Ala является соединением -NH-CH₂-CH₂-COOH.

Sar - это саркозин (М-метилглицин).

Выражение «аминокислотный остаток, содержащий карбоксильную группу в боковой цепочке» обозначает такие аминокислотные остатки, как Asp, Glu и hGlu. Аминокислоты могут иметь либо L-, либо D-конфигурацию. Если обозначение отсутствует, то при этом подразумевается, что аминокислотный остаток находится в L-конфигурации.

Термин «лечение заболевания» при использовании в этом документе означает проведение терапии и уход за пациентом, у которого развилось заболевание, состояние или нарушение. Целью лечения является борьба с заболеванием, состоянием или нарушением. Лечение включает введение активных соединений для прекращения или контроля заболевания, состояния или нарушения, а также для ослабления симптомов или осложнений, связанных с заболеванием, состоянием или нарушением.

Термин «болюсный инсулин», «инсулин, связанный с приемом пищи» или «инсулин быстрого действия» при использовании в этом документе означает пептид инсулина, который оказывает немедленное действие и пригоден для обеспечения потребности в инсулине во время и после приема пищи.

Термин «диабет» или «сахарный диабет» включает диабет 1 типа, диабет 2 типа, гестационный диабет (во время беременности) и другие состояния, которые вызывают гипергликемию. Термин применяется в отношении нарушения обмена веществ, при котором поджелудочная железа вырабатывает недостаточное количество инсулина, или при котором клетки организма не способны должным образом отвечать на инсулин, что не позволяет клеткам поглощать глюкозу. В результате, глюкоза накапливается в крови.

Диабет 1 типа, также называемый инсулинозависимым сахарным диабетом (ИЗСД) и ювенильным диабетом, вызывается разрушением В-клеток, что обычно приводит к полной недостаточности инсулина.

Диабет 2 типа, также известный как инсулиннезависимый сахарный диабет (НИЗСД) и диабет взрослых, связан с повышенной инсулинорезистентностью и, таким образом, с относительной недостаточностью инсулина и/или в основном с нарушением секреции инсулина, сопровождающимся инсулинорезистентностью.

Термин «буферизирующий агент» при использовании в этом документе означает химическое соединение в составе фармацевтической композиции, которое ослабляет тенденцию значения рН композиции к изменению с течением времени, что происходило бы в противном случае из-за прохождения химических реакций. Буферизирующие агенты включают такие химикаты, как фосфат натрия, трис, глицил-глицин, ацетат натрия и цитрат натрия.

Термин «консервант» при использовании в этом документе означает химическое соединение, которое добавляют в фармацевтическую готовую лекарственную форму для предотвращения или подавления микробной активности (роста и метаболизма). Примерами фармацевтически приемлемых консервантов являются фенол, метакрезол (m-крезол) и смесь фенола и m-крезола.

Термин «изотонический агент» применяется для обозначения химического соединения в составе фармацевтической готовой лекарственной формы, которое служит для изменения осмотического давления фармацевтической готовой лекарственной формы таким образом, чтобы осмотическое давление имело значение, близкое к значению осмотического давления плазмы человека. Изотонические агенты включают хлорид натрия, глицерол, маннитол, пропиленгликоль и т.д.

Термин «стабилизатор» при использовании в этом документе означает химикаты, добавляемые в содержащие пептид фармацевтические готовые лекарственные формы с целью стабилизации пептида, т.е. для повышения срока хранения и/или срока годности таких готовых лекарственных форм. Примерами стабилизаторов, применяемых в фармацевтических готовых лекарственных формах, являются L-глицин, L-гистидин, аргинин, полиэтиленгликоль и карбоксиметилцеллюлоза. Кроме того, как стабилизаторы могут действовать фенолы, ионы цинка и хлорид натрия.

Термин «поверхностно-активное вещество» при использовании в этом документе означает химическое соединение в составе фармацевтической готовой лекарственной формы, которое служит для изменения границы раздела фаз с воздухом и гидрофобными поверхностями таким образом, чтобы удалить или частично удалить инсулин, аналоги инсулина и производные инсулина с границы раздела фаз. Можно применять различные стандартные поверхностно-активные вещества, такие как сложные эфиры и спирты полиоксиэтилена и жирных кислот, а также сложные эфиры полиоксиэтилен-сорбитола и жирных кислот. Примером служит полисорбат 20.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, возможно, содержащей фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, с образованием раствора производного инсулина, подведение рН раствора до значения выше рН7,2, добавление содержащего цинк раствора при постоянном перемешивании и подведение рН до целевого значения рН готовой лекарственной формы, и при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, в которой имеется боковая цепь, присоединенная к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина, при этом боковая цепь имеет общую формулу:

-W-X-Y-Z,

где W является:

α-аминокислотным остатком, содержащим карбоксильную группу в боковой цепочке, при этом данный остаток образует, с участием одной из его карбоксильных групп, амидогруппу с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

цепью, состоящей из двух, трех или четырех α-аминокислотных остатков, соединенных вместе через карбамидные связи, при этом эта цепь - через амидную связь - соединена с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина, при этом аминокислотные остатки в составе W выбраны из группы аминокислотных остатков, имеющих нейтральную боковую цепочку, и аминокислотных остатков, имеющих карбоксильную группу в боковой цепочке, таким образом, что W содержит по меньшей мере один аминокислотный остаток, который имеет карбоксильную группу в боковой цепочке; или

ковалентной связью от Х к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

Х является:

-СО-;

-СН(СООН)СО-;

-СО-N(СН₂СООН)СН₂СО-;

-CO-N(CH₂COOH)CH₂CON(CH₂COOH)CH₂ CO-;

-CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

-CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂CON(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂CO-;

-CO-NHCH(COOH)(CH₂)₄NHCO-;

-CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CO-; или

-CO-N(CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

при этом

когда W является аминокислотным остатком или цепью аминокислотных остатков, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с аминогруппой в составе W, или,

когда W является ковалентной связью, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

Y является:

-(CH₂)_m-, где m - это целое число в диапазоне от 6 до 32;

двухвалентной углеводородной цепью, содержащей 1, 2 или 3 группы -СН=СН- и количество групп -CH₂-, достаточное для того, чтобы в суммарное количество атомов углерода в цепи составляло значение в диапазоне от 10 до 32;

и

Z является:

-СООН;

-CO-Asp;

-CO-Glu;

-CO-Gly;

-CO-Sar;

-CH(COOH)₂;

-N(CH₂COOH)₂;

-SO₃H; или

-РО₃Н

и любые ее комплексы с Zn²⁺, при условии, что когда W является ковалентной связью и Х является -СО-, то Z не является -СООН.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что при повышении значения рН раствора, содержащего производное инсулина, до значения выше рН7,2 практически не происходит преципитации производного инсулина, когда добавляют содержащий цинк раствор, что означает, что осадка не образуется или, если осадок образуется, потом он сразу же снова растворяется.

Преципитацию производного инсулина в растворе можно наблюдать с помощью визуального исследования раствора. Если производное инсулина преципитирует в растворе, из-за осадка раствор становится мутным. Если раствор чистый и прозрачный, то в нем отсутствует или в существенной степени отсутствует осадок производного инсулина.

Одной из особенностей изобретения является то, что вода, в которой растворяют производное инсулина, содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, когда производное инсулина растворяют в воде. Различные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, такие как фенол, m-крезол, глицерол, хлорид натрия и, возможно, трис- или фосфатный буферы, можно добавить к воде для получения водного раствора вспомогательных веществ и растворять производное инсулина в водном растворе.

Одной из особенностей изобретения является то, что одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ добавляют в водный раствор производного инсулина до того, как значение рН раствора подводят до целевого значения рН. Одной из особенностей изобретения является то, что фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества добавляют в готовую лекарственную форму после подведения до целевого значения рН.

Одной из особенностей изобретения является то, что фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества выбраны из группы, состоящей из фенола, т-крезола, глицерола и хлорида натрия.

Одной из особенностей изобретения является то, что целевое значение рН ниже, чем значение рН водного раствора, к которому добавляют содержащий цинк раствор. Одной из особенностей изобретения является то, что при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4. Одной из особенностей изобретения является то, что при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6. Одной из особенностей изобретения является то, что при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8. Одной из особенностей изобретения является то, что при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0.

Одной из особенностей изобретения является то, что целевое значение рН находится в диапазоне от 7,0 до 7,8. Одной из особенностей является то, что целевое значение рН находится в диапазоне от 7,2 до 7,8. Одной из особенностей является то, что целевое значение рН находится в диапазоне от 7,4 до 7,6.

Одной из особенностей изобретения является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,0-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,0-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,0-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,0-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,2, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,2-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,2-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,2-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,2-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,2-7,8.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,2, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,4-7,6.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,4-7,6.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,4-7,6.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,4-7,6.

Одной из особенностей является то, что значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0, а после добавления раствора инсулина значение рН корректируется до целевого значения рН в диапазоне 7,4-7,6.

Для подведения значения рН в водном растворе до целевого значения рН можно примерять различные кислоты и основания. Примерами пригодных кислот являются хлористоводородная кислота, уксусная кислота, серная кислота и фосфорная кислота. Примерами пригодных оснований являются гидроксид натрия, трис, карбонаты и фосфаты. В одном из вариантов воплощения трис, карбонаты и фосфаты также выступают в качестве буферизирующего агента.

Одной из особенностей изобретения является то, что содержащий цинк раствор добавляют к водному раствору в течение периода более чем одна минута. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем две минуты. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем три минуты. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем четыре минуты. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем пять минут. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем шесть минут. Одной из особенностей изобретения является то, что этот период составляет более чем семь минут. Одной из особенностей изобретения является то, что содержащий цинк раствор содержит ацетат цинка. Одной из особенностей изобретения является то, что содержащий цинк раствор выбран из группы, состоящей из ацетата цинка, хлорида цинка, сульфата цинка и глюконата цинка. Одной из особенностей изобретения является то, что содержащий цинк раствор является ацетатом цинка. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение содержащего цинк раствора и растворимого производного инсулина составляет от 4,3 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 4,5 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина.

Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 4,7 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 4,9 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 5,1 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 5,3 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 5,5 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 5,7 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 5,9 до 11,5 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 6,1 до 11,0 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 6,3 до 10,5 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина. Одной из особенностей изобретения является то, что соотношение составляет от 6,5 до 10,0 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина.

Одной из особенностей изобретения является то, что производное инсулина является LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулином человека.

Одной из особенностей изобретения является то, что в готовую лекарственную форму добавляют инсулин быстрого действия. Инсулин быстрого действия может быть выбран из группы, состоящей из AspB28-инсулина человека, LysB3 GlyB29-инсулина человека и/или LysB28 ProB29-инсулина человека. Одной из особенностей изобретения является то, что инсулин быстрого действия является AspB28-инсулином человека (Insulin Aspart (Инсулин Аспарт)). Изобретение дополнительно относится к продукту, который можно получить с применением способа для приготовления фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина. Продукт, который можно получить с применением способа по изобретению, может включать инсулин быстрого действия, такой как инсулин аспарт, и при этом не происходит снижения эффективности.

Одной из особенностей изобретения является то, что предложено применение для лечения диабета продукта, который можно получить с применением способа для приготовления фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина.

Дополнительной особенностью изобретения является то, что лекарственная форма дополнительно содержит фармацевтически приемлемый консервант, который может быть выбран из группы, состоящей из фенола, о-крезола, m-крезола, р-крезола, метил-р-гидроксибензоата, пропил-р-гидроксибензоата, 2-феноксиэтанола, бутил-р-гидроксибензоата, 2-фенилэтанола, бензилового спирта, хлоробутанола и тиомерсала, бронопола, бензойной кислоты, имидомочевины, хлоргексидина, дегидроацетата натрия, хлорокрезола, этил-р-гидроксибензоата, хлорида бензетония, хлорфенезина (3-(р-хлорфенокси)-пропан-1,2-диола) или их смесей. Дополнительной особенностью изобретения является то, что консервант присутствует в концентрации от 0,1 мг/мл до 20 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что консервант присутствует в концентрации от 0,1 мг/мл до 5 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что консервант присутствует в концентрации от 5 мг/мл до 10 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что консервант присутствует в концентрации от 10 мг/мл до 20 мг/мл. Каждый из этих указанных консервантов представляет собой отдельную особенность изобретения. Применение консерванта в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам в данной области. Для удобства приведена ссылка на публикацию: Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

Дополнительной особенностью изобретения является то, что лекарственная форма дополнительно содержит изотонический агент, который может быть выбран из группы, состоящей из соли (например, хлорида натрия), сахара или сахарного спирта, аминокислоты (например, глицина, L-гистидина, аргинина, лизина, изолейцина, аспарагиновой кислоты, триптофана, треонина), альдита (например, глицерола (глицерина), 1,2-пропандиола (пропиленгликоля), 1,3-пропандиола, 1,3-бутандиола), полиэтиленгликоля (например, ПЭГ400) или их смесей. Можно применять любой сахар, такой как моно-, ди-, или полисахариды или водорастворимые глюканы, включая, например, фруктозу, глюкозу, маннозу, сорбозу, ксилозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, трегалозу, декстран, пуллулан, декстрин, циклодекстрин, растворимый крахмал, гидроксиэтилкрахмал и карбоксиметилцеллюлозу-Na. Одной из особенностей является то, что добавка в виде сахара представлена сахарозой. Сахарные спирты определяют как углеводороды С4-С8, содержащие по меньшей мере одну группу -ОН, и они включают, например, манитол, сорбитол, инозитол, галактитол, дульцитол, ксилитол и арабитол. Одной из особенностей является то, что добавка в виде сахарного спирта представлена маннитолом. Сахара или сахарные спирты, упомянутые выше, можно применять по отдельности или в сочетании. Отсутствует установленное ограничение на применяемое количество, при условии, что сахар или сахарный спирт растворим в жидком препарате и не оказывает нежелательного воздействия на стабилизирующие эффекты, достигнутые благодаря применению способов по изобретению. Одной из особенностей является то, что концентрация сахара или сахарного спирта составляет от примерно 1 мг/мл до примерно 150 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что изотонический агент присутствует в концентрации от 1 мг/мл до 50 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что изотонический агент присутствует в концентрации от 1 мг/мл до 7 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что изотонический агент присутствует в концентрации от 8 мг/мл до 24 мг/мл. Дополнительной особенностью изобретения является то, что изотонический агент присутствует в концентрации от 25 мг/мл до 50 мг/мл. Каждый из этих указанных изотонических агентов представляет собой отдельную особенность изобретения. Применение изотонического агента в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам в данной области. Для удобства приведена ссылка на: Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

Типичными изотоническими агентами являются хлорид натрия, маннитол, диметилсульфон и глицерин, а типичными консервантами - фенол, m-крезол, метил-р-гидроксибензоат и бензиловый спирт.

Примерами пригодных буферизирующих агентов являются ацетат натрия, глицилглицин, HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота) и фосфат натрия.

Готовые лекарственные формы по настоящему изобретению можно применять при лечении состояний, чувствительных к инсулину. Таким образом, их можно применять при лечении диабета 1 типа, диабета 2 типа и гипергликемии, например, наблюдаемой иногда у пациентов с серьезными повреждениями или пациентов после обширного оперативного вмешательства. Оптимальный уровень дозы для каждого пациента будут зависеть от различных факторов, включая эффективность применяемого специфического производного инсулина, возраст, массу тела, физическую активность и диету пациента, от возможного сочетания с другими лекарствами и от степени тяжести состояния, которое планируется лечить. Рекомендуется, чтобы ежедневную дозу готовой лекарственной формы по настоящему изобретению определял для каждого конкретного пациента специалист в данной области способом, схожим с применяемыми способами для известных готовых лекарственных форм инсулина.

Там, где это целесообразно, производные инсулина по настоящему изобретению можно применять в смеси с другими типами инсулина, например с аналогами инсулина с более быстрым началом действия. Примеры таких аналогов инсулина описаны, например, в европейских заявках на патент с номерами ЕР 214826 (Novo Nordisk A/S), ЕР 375437 (Novo Nordisk A/S) и ЕР 383472 (Eli Lilly & Co.).

Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими далее примерами, которые, однако, не должны рассматриваться как ограничивающие объем охраны.

Изобретение резюмировано в следующих пунктах:

1. Способ получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, подведение рН раствора до значения выше рН7,2, добавление содержащего цинк раствора при постоянном перемешивании и подведение рН до целевого значения рН готовой лекарственной формы.

2. Способ по п.1, при этом вода содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

3. Способ по п.1, при этом одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ добавлены в готовую лекарственную форму после подведения рН до целевого значения.

4. Способ по любому из пп.1-3, при этом фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества выбраны из группы, состоящей из фенола, m-крезола, глицерола и хлорида натрия.

5. Способ по любому из пп.1-4, при этом целевое значение рН ниже значения рН воды.

6. Способ по любому из пп.1-5, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4.

7. Способ по любому из пп.1-6, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6.

8. Способ по любому из пп.1-7, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8.

9. Способ по любому из пп.1-8, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0.

10. Способ по любому из пп.1-9, при этом содержащий цинк раствор добавляют в течение периода более одной минуты.

11. Способ по любому из пп.1-10, при этом период составляет более чем две минуты, более чем три минуты, более чем четыре минуты, более чем пять минут, более чем шесть минут или более чем семь минут.

12. Способ по любому из пп.1-11, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,0 до 7,8.

13. Способ по любому из пп.1-12, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,2 до 7,8.

14. Способ по любому из пп.1-13, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,4 до 7,6.

15. Способ по любому из пп.1-14, при этом содержащий цинк раствор содержит ацетат цинка.

16. Способ по любому из пп.1-15, при этом соотношение содержащего цинк раствора и растворимого производного инсулина составляет от 4,3 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 4,5 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 4,7 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 4,9 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 5,1 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 5,3 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 5,5 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 5,7 до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 5,9 до 11,5 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 6,1 до 11,0 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина, от 6,3 до 10,5 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина или от 6,5 до 10,0 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина.

17. Способ по любому из пп.1-16, при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, имеющую боковую цепь, присоединенную к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в составе В-цепи инсулина человека или его аналога, при этом боковая цепь имеет общую формулу:

-W-X-Y-Z

где W является:

- α-аминокислотным остатком, содержащим карбоксильную группу в боковой цепочке, при этом данный остаток образует, с участием одной из его карбоксильных групп, амидогруппу с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

- цепью, состоящей из двух, трех или четырех α-аминокислотных остатков, соединенных вместе через карбамидные связи, при этом эта цепь - через амидную связь - соединена с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина, при этом аминокислотные остатки в составе W выбраны из группы аминокислотных остатков, имеющих нейтральную боковую цепочку, и аминокислотных остатков, имеющих карбоксильную группу в боковой цепочке, таким образом, что W содержит по меньшей мере один аминокислотный остаток, который имеет карбоксильную группу в боковой цепочке; или

- ковалентной связью от Х к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

Х является:

- -СО-;

- -СН(СООН)СО-;

- -CO-N(CH₂COOH)CH_2CO-;

- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CON(CH₂COOH)CH₂ CO-;

- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

- -СО-N(СН₂СН₂СООН)CH₂CH₂CON(СН₂СН₂СООН)СН₂СН₂ СО-;

- -CO-NHCH(COOH)(CH₂)₄NHCO-;

- -СО-N(СН₂СН₂СООН)СН₂ СО-; или

- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

при этом

а) когда W является аминокислотным остатком или цепью аминокислотных остатков, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с аминогруппой в составе W, или,

b) когда W является ковалентной связью, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;

Y является:

- -(СН₂)_m-, где m - это целое число в диапазоне от 6 до 32;

- двухвалентной углеводородной цепью, содержащей 1, 2 или 3 группы -СН=СН- и количество групп -СН₂-, достаточное для того, чтобы в суммарное количество атомов углерода в цепи составляло значение в диапазоне от 10 до 32;

и

Z является:

- -СООН;

- -CO-Asp;

-CO-Glu;

- -CO-Gly;

- -CO-Sar;

- -CH(COOH)₂;

- -N(CH₂COOH)₂;

- -SO₃H; или

- -РО₃Н

и любые ее комплексы с Zn²⁺ при условии, что когда W является ковалентной связью и Х является -СО-, то Z не является -СООН.

18. Способ по п.17, при этом W выбран из группы, состоящей из α-Asp, β-Asp, α-Glu, γ-Glu, α-hGlu и δ-hGlu.

19. Способ по п.17, при этом W выбран из группы, состоящей из α-Asp-Gly; Gly-α-Asp; β-Asp-Gly; Gly-β-Asp; α-Glu-Gly; Gly-α-Glu; γ-Glu-Gly; Gly-γ-Glu; α-hGlu-Gly; Gly-α-hGlu; δ-hGlu-Gly и Gly-δ-hGlu, α-Asp-α-Asp; α-Asp-α-Glu; α-Asp-α-DGlu; α-Asp-β-Asp; α-Asp-γ-Glu; α-Asp-δ-hGlu; β-Asp-α-Asp; β-Asp-α-Glu; β-Asp-α-hGlu; β-Asp-β-Asp; β-Asp-γ-Glu; β-Asp-δ-hGlu; α-Glu-α-Asp; α-Glu-α-Glu; α-Glu-α-hGlu; α-Glu-β-Asp; α-Glu-γ-Glu; α-Glu-δ-hGlu; γ-Glu-α-Asp; γ-Glu-α-Glu; γ-Glu-α-hGlu; γ-Glu-β-Asp; γ-Glu-γ-Glu; γ-Glu-δ-hGlu; α-hGlu-α-Asp; α-hGlu-α-Glu; α-hGlu-α-hGlu; α-hGlu-β-Asp; α-hGlu-γ-Glu; α-hGlu-δ-hGlu; δ-hGlu-α-Asp; δ-hGlu-α-Glu; δ-hGlu-α-hGlu; δ-hGlu-β-Asp; δ-hGlu-γ-Glu и δ-hGlu-δ-hGlu.

20. Способ по любому из пп.17-19, при этом Х является -СО- или -СН(СООН)СО-.

21. Способ по любому из пп.17-20, при этом Y является -(СН₂)_m-, где m - это целое число в диапазоне от 6 до 32, от 8 до 20, от 12 до 20 или от 12 до 16.

22. Способ по любому из пп.17-21, при этом Z является -СООН.

23. Способ по любому из пп.17, 18, 20, 21 и 22, при этом производное инсулина является LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулином человека.

24. Способ по любому из пп.1-23, при этом в готовую лекарственную форму добавлен инсулин быстрого действия.

25. Способ по любому из пп.1-24, при этом инсулин быстрого действия выбран из группы, состоящей из AspB28-инсулина человека, LysB3 GluB29-инсулина человека и/или LysB28 ProB29-инсулина человека.

26. Способ по п.25, при этом инсулин быстрого действия является AspB28-инсулином человека.

27. Продукт, который можно получить способом по любому из пп.1-27.

28. Применение продукта, который можно получить способом по любому из пп.1-27, для лечения диабета.

Особенности изобретения резюмированы в следующих пунктах.

1) Способ получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, подведение рН раствора до значения выше рН 7,2, добавление содержащего цинк раствора при постоянном перемешивании и подведение рН до целевого значения рН готовой лекарственной формы.

2) Способ по п.1, при этом вода содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

3) Способ по п.1, при этом одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ добавлены в готовую лекарственную форму после подведения рН до целевого значения.

4) Способ по любому из пп.1-3, при этом фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества выбраны из группы, состоящей из фенола, m-крезола, глицерола и хлорида натрия.

5) Способ по любому из пп.1-4, при этом целевое значение рН ниже значения рН воды.

6) Способ по любому из пп.1-5, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,4.

7) Способ по любому из пп.1-6, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,6.

8) Способ по любому из пп.1-7, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 7,8.

9) Способ по любому из пп.1-8, при этом при добавлении содержащего цинк раствора значение рН водного раствора корректируется до уровня выше 8,0.

10) Способ по любому из пп.1-9, при этом содержащий цинк раствор добавляют в течение периода более одной минуты.

11) Способ по любому из пп.1-10, при этом период составляет более чем две минуты, более чем три минуты, более чем четыре минуты, более чем пять минут, более чем шесть минут или более чем семь минут.

12) Способ по любому из пп.1-11, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,0 до 7,8.

13) Способ по любому из пп.1-12, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,2 до 7,8.

14) Способ по любому из пп.1-13, при этом целевое значение рН находится в диапазоне от 7,4 до 7,6.

15) Способ по любому из пп.1-14, при этом содержащий цинк раствор содержит ацетат цинка.

16) Способ по любому из пп.1-15, при этом соотношение содержащего цинк раствора и растворимого производного инсулина составляет от 4,3 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина до 12 атомов цинка на 6 молекул производного инсулина.

17) Способ по любому из пп.1-16, при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, имеющую боковую цепь, присоединенную к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в составе В-цепи инсулина человека или его аналога, при этом боковая цепь имеет общую формулу:

-W-X-Y-Z,

где W является:

Х является:

- -СО-;

- -СН(СООН)СО-;

- -CO-N(CH₂COOH)CH₂ CO-;

- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CON(CH₂COOH)CH₂ CO-;

- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

--СО-N(СН₂СН₂СООН)CH₂CH₂CON(СН₂СН₂СООН)СН₂СН₂ СО-;

- -CO-NHCH(COOH)(CH₂)₄NHCO-;

- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂ CO-; или.

- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;

при этом

a) когда W является аминокислотным остатком или цепью аминокислотных остатков, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с аминогруппой в составе W, или,

Y является:

- -(CH₂)_m-, где m - это целое число в диапазоне от 6 до 32;

- двухвалентной углеводородной цепью, содержащей 1, 2 или 3 группы -СН=СН- и количество групп -CH₂-, достаточное для того, чтобы в суммарное количество атомов углерода в цепи составляло значение в диапазоне от 10 до 32; и

Z является:

- -соон;

- -CO-Asp;

- -CO-Glu;

- -CO-Gly;

- -CO-Sar;

- -CH(COOH)₂;

- -N(CH₂COOH)₂;

- -SO₃H; или

- -РО₃Н

18) Способ по п.17, при этом производное инсулина является LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Glu-дез-В30-инсулином человека.

19) Способ по любому из пп.1-18, при этом в готовую лекарственную форму добавлен инсулин быстрого действия.

20) Способ по любому из пп.1-19, при этом инсулин быстрого действия выбран из группы, состоящей из AspB28-инсулина человека, LysB3 GluB29-инсулина человека и/или LysB28 ProB29-инсулина человека.

21) Продукт, который можно получить способом по любому из пп.1-20.

22) Применение продукта, который можно получить способом по любому из пп.1-20, для лечения диабета.

Все ссылки, включая публикации, заявки на патенты и патенты, процитированные в этом документе, таким образом включены сюда в качестве ссылок полностью и в той же степени, как если бы для каждой ссылки было отдельно и специально указано, что она включена в качестве ссылки и была полностью изложена в этом документе (в максимальной степени, разрешенной законом).

Все заголовки и подзаголовки используются в этом документе только для удобства и не должны трактоваться как ограничивающие изобретение каким-либо образом.

Использование любого и всех вместе примеров, или указание средствами языка на пример (например, словами «такой как»), представленный в этом документе, предназначены только для лучшего представления изобретения и не налагают ограничений на объем изобретения, если не указано иное. Ни одна формулировка в описании изобретения не должна толковаться как указывающая на какие-либо не заявленные в формуле изобретения элементы как на имеющие важное значение для практического применения изобретения.

Цитирование и внедрение патентных документов осуществлены в этом документе только для удобства и не отражают какого-либо взгляда на достоверность, патентоспособность и/или исковую силу таких патентных документов.

Настоящее изобретение включает все модификации и эквиваленты объектов, перечисленных в прилагаемой к этому документу формуле изобретения, насколько это позволено применимыми законами.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Способ получения готовой лекарственной формы, содержащей LvsB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулин человека. 600 нмоль/мл (100 ед./мл):

0,6 ммоль LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека растворили в 300 мл воды и смешали с 500 мл водного раствора, содержащего 16 ммоль фенола, 16 ммоль m-крезола и 213 ммоль глицерола. Значение рН подвели до 7,40 и в непрерывном режиме добавляли 50 мл 0,01 М ацетата цинка с помощью перистальтического насоса при перемешивании с умеренной скоростью. Добавление осуществляли примерно в течение 30 мин. После добавления ацетата цинка добавили воду для инъекций до объема 950 мл, подвели значение рН до 7,60 и, в завершение, добавили воду до конечного объема 1 литр.

Пример 2

Способ получения готовой лекарственной формы, содержащей LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулин человека, 1200 нмоль/мл (200 ед./мл):

1,2 ммоль LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека растворили в 300 мл воды и смешали с 500 мл водного раствора, содержащего 16 ммоль фенола, 16 ммоль m-крезола и 213 ммоль глицерола. Значение рН подвели до 7,50 и в непрерывном режиме добавляли 110 мл 0,01 М ацетата цинка с помощью перистальтического насоса при перемешивании с умеренной скоростью. Добавление осуществляли примерно в течение 40 мин. После добавления ацетата цинка добавили воду для инъекций до объема 950 мл, подвели значение рН до 7,60 и, в завершение, добавили воду до конечного объема 1 литр.

Пример 3

Способ получения готовой лекарственной формы, содержащей LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-CLy-дез-В30-инсулин человека и инсулин аспарт, 600 нмоль/мл (100 ед./мл):

раствор LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека: 0,42 ммоль LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека растворили в 210 мл воды и смешали с 350 мл водного раствора, содержащего 11,2 ммоль фенола, 11,2 ммоль m-крезола, 7 ммоль NaCl и 144 ммоль глицерола. Значение рН подвели до 7,40 и в непрерывном режиме добавляли 32,9 мл 0,01 М ацетата цинка с помощью перистальтического насоса при перемешивании с умеренной скоростью. Добавление осуществляли примерно в течение 30 мин. После добавления ацетата цинка добавили воду для инъекций до объема 630 мл и подвели значение рН до 7,40.

Раствор инсулина аспарт: 0,18 ммоль инсулина аспарт суспендировали в 15 мл воды и смешали с раствором, содержащим 9 мл 0,01 М ацетата цинка и 4,8 мл 0,2 н хлористоводородной кислоты, с получением прозрачного раствора. Довели объем до 35 мл добавлением воды. Затем добавили 180 мл раствора, содержащего 4,8 ммоль фенола, 4,8 ммоль m-крезола, 3 ммоль NaCl и 62 ммоль глицерола. В заключение подвели значение рН до 7,40 и довели объем до 270 мл добавлением воды.

Смешивание раствора LysB2Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека и раствора инсулина аспарт: смешали 630 мл раствора LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека и 270 мл раствора инсулина аспарт.Подвели значение рН до 7,40 и, в завершение, добавили воду до объема 1 литр.

Пример 4

Способ получения готовой лекарственной формы, содержащей LvsB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулин человека и инсулин аспарт, 1200 нмоль/мл (200 ед./мл):

раствор LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека: 0,84 ммоль LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека растворили в 210 мл воды и смешали с 350 мл водного раствора, содержащего 11,2 ммоль фенола, 11,2 ммоль m-крезола, 7 ммоль NaCl и 144 ммоль глицерола. Значение рН подвели до 7,40 и в непрерывном режиме добавляли 60,1 мл 0,01 М ацетата цинка с помощью перистальтического насоса при перемешивании с умеренной скоростью. Добавление осуществляли примерно в течение 30 мин. После добавления ацетата цинка добавили воду для инъекций до объема 630 мл и подвели значение рН до 7,40.

Раствор инсулина аспарт: 0,36 ммоль инсулина аспарт суспендировали в 15 мл воды и смешали с раствором, содержащим 18 мл 0,01 М ацетата цинка и 4,8 мл 0,2 н хлористоводородной кислоты, с получением прозрачного раствора. Довели объем до 35 мл добавлением воды. Затем добавили 180 мл раствора, содержащего 4,8 ммоль фенола, 4,8 ммоль m-крезола, 3 ммоль NaCl и 62 ммоль глицерола. В заключение подвели значение рН до 7,40 и довели объем до 270 мл добавлением воды.

Смешивание раствора LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека и раствора инсулина аспарт: смешали 630 мл раствора LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Gly-дез-В30-инсулина человека и 270 мл раствора инсулина аспарт. Подвели значение рН до 7,40 и, в завершение, добавили воду до объема 1 литр.

Claims

1. Способ получения фармацевтической готовой лекарственной формы, содержащей производное инсулина, при этом способ включает растворение производного инсулина в воде, подведение pH раствора до значения выше pH 7,2, добавление содержащего цинк раствора в течение периода более чем одна минута при постоянном перемешивании и подведение pH до значения в диапазоне от 7.0 до 7.8, и при этом производное инсулина содержит молекулу инсулина, в которой имеется боковая цепь, присоединенная к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи инсулина человека или его аналога, при этом боковая цепь имеет общую формулу:
-W-X-Y-Z,
где W является:
- α-аминокислотным остатком, содержащим карбоксильную группу в боковой цепочке, при этом данный остаток образует, с участием одной из его карбоксильных групп, амидогруппу с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;
- цепью, состоящей из двух, трех или четырех α-аминокислотных остатков, соединенных вместе через карбамидные связи, при этом эта цепь - через амидную связь - соединена с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина, при этом аминокислотные остатки в составе W выбраны из группы аминокислотных остатков, имеющих нейтральную боковую цепочку, и аминокислотных остатков, имеющих карбоксильную группу в боковой цепочке, таким образом, что W содержит по меньшей мере один аминокислотный остаток, который имеет карбоксильную группу в боковой цепочке; или
- ковалентной связью от X к ε-аминогруппе остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;
X является:
- -СО-;
- -СН(СООН)СО-;
- -CO-N(CH₂COOH)CH₂ CO-;
- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CON(CH₂COOH)CH₂ CO-;
- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;
- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂CON(CH₂CH₂COOH)CH₂CH₂ CO;
- -CO-NHCH(COOH)(CH₂)₄NHCO-;
- -CO-N(CH₂CH₂COOH)CH₂ CO-; или
- -CO-N(CH₂COOH)CH₂CH₂ CO-;
при этом
a) когда W является аминокислотным остатком или цепью аминокислотных остатков, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с аминогруппой в составе W, или,
b) когда W является ковалентной связью, посредством связи с подчеркнутым атомом углерода образуется амидная связь с ε-аминогруппой остатка Lys, присутствующего в В-цепи исходного инсулина;
Y является:
- -(CH₂)_m-, где m - это целое число в диапазоне от 6 до 32;
- двухвалентной углеводородной цепью, содержащей 1, 2 или 3 группы -CH=CH- и количество групп -CH₂-, достаточное для того, чтобы в суммарное количество атомов углерода в цепи составляло значение в диапазоне от 10 до 32; и
Z является:
- -СООН;
- -CO-Asp;
- -CO-Glu;
- -CO-Gly;
- -CO-Sar;
- -CH(COOH)₂;
- -N(CH₂COOH)₂;
- -SO₃H; или
- -PO₃H.

2. Способ по п. 1, при этом вода содержит одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

3. Способ по п. 1, при этом одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ добавлены в готовую лекарственную форму после подведения pH до целевого значения.

4. Способ по п. 1, при этом фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества выбраны из группы, состоящей из фенола, m-крезола, глицерола и хлорида натрия.

5. Способ по п. 1, при этом период составляет более чем две минуты, более чем три минуты, более чем четыре минуты, более чем пять минут, более чем шесть минут или более чем семь минут.

6. Способ по п. 1, при этом содержащий цинк раствор содержит ацетат цинка.

7. Способ по п. 6, при этом производное инсулина является LysB29Nε-гексадекандиоил-γ-Glu-дез-B30-инсулином человека.

8. Способ по п. 7, при этом в готовую лекарственную форму добавлен инсулин быстрого действия.

9. Способ по любому из пп. 1-8, при этом инсулин быстрого действия выбран из группы, состоящей из AspB28-инсулина человека, LysB3 GluB29-инсулина человека и/или LysB28 ProB29-инсулина человека.

10. Фармацевтическая готовая лекарственная форма, которую можно получить способом по любому из пп. 1-9.

11. Применение фармацевтической готовой лекарственной формы, которую можно получить способом по любому из пп. 1-9 для лечения диабета.