RU2565539C2 - АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 - Google Patents
АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2565539C2 RU2565539C2 RU2012139829/10A RU2012139829A RU2565539C2 RU 2565539 C2 RU2565539 C2 RU 2565539C2 RU 2012139829/10 A RU2012139829/10 A RU 2012139829/10A RU 2012139829 A RU2012139829 A RU 2012139829A RU 2565539 C2 RU2565539 C2 RU 2565539C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- ανβ8
- tgfβ
- seq
- antibodies
- Prior art date
Links
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 title description 25
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 title description 25
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 title description 7
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims abstract description 173
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims abstract description 169
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 69
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 50
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 29
- 108010021506 integrin beta8 Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 102100033336 Integrin beta-8 Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 42
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 41
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 41
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 37
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 37
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 22
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 claims description 22
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 21
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 17
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims description 17
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 14
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 13
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 claims description 13
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 9
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 8
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 claims description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 8
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 8
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000036110 Neuroinflammatory disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 7
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 7
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 claims description 7
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 claims description 6
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 6
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 6
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 6
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 claims description 6
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 208000009174 transverse myelitis Diseases 0.000 claims description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 5
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims description 5
- 208000027932 Collagen disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 claims description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 4
- 230000001496 desquamative effect Effects 0.000 claims description 4
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 201000004071 non-specific interstitial pneumonia Diseases 0.000 claims description 4
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010060902 Diffuse alveolar damage Diseases 0.000 claims description 3
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 201000002793 renal fibrosis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims 2
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 27
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 abstract description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 90
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 78
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 62
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 61
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 59
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 47
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 38
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 38
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 35
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 34
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 25
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 22
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 22
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 22
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 21
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 20
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 19
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 18
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 17
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 13
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 12
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 12
- -1 adhesion of ανβ8 Chemical compound 0.000 description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 11
- 208000036065 Airway Remodeling Diseases 0.000 description 10
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 9
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 9
- 108060008245 Thrombospondin Proteins 0.000 description 9
- 102000002938 Thrombospondin Human genes 0.000 description 9
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 101000997670 Homo sapiens Integrin beta-8 Proteins 0.000 description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 7
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 7
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 7
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 6
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 6
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 5
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 5
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 5
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 5
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 5
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 5
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 4
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 4
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 4
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 4
- 208000037883 airway inflammation Diseases 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 4
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 4
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 4
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- YOKXDNNIFSAXBY-QAETUUGQSA-N (2s)-6-amino-n-[(2s)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O YOKXDNNIFSAXBY-QAETUUGQSA-N 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 3
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 102000008121 Latent TGF-beta Binding Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010049807 Latent TGF-beta Binding Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102100025751 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710143123 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100025748 Mothers against decapentaplegic homolog 3 Human genes 0.000 description 3
- 101710143111 Mothers against decapentaplegic homolog 3 Proteins 0.000 description 3
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical class OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 3
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 3
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 3
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 3
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- RNMCCPMYXUKHAZ-UHFFFAOYSA-N 2-[3,3-diamino-1,2,2-tris(carboxymethyl)cyclohexyl]acetic acid Chemical compound NC1(N)CCCC(CC(O)=O)(CC(O)=O)C1(CC(O)=O)CC(O)=O RNMCCPMYXUKHAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 108010076557 Matrix Metalloproteinase 14 Proteins 0.000 description 2
- 102100030216 Matrix metalloproteinase-14 Human genes 0.000 description 2
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 201000010001 Silicosis Diseases 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108091005735 TGF-beta receptors Proteins 0.000 description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016715 Transforming Growth Factor beta Receptors Human genes 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 2
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 2
- 210000000424 bronchial epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 2
- 229950007919 egtazic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 2
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 230000003352 fibrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 2
- 102000046660 human ITGB8 Human genes 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 2
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBPPRVHXOZRESW-UHFFFAOYSA-N 1,4,7,10-tetraazacyclododecane Chemical compound C1CNCCNCCNCCN1 QBPPRVHXOZRESW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDKIEBFIMCSCBB-UHFFFAOYSA-N 1-(6,7-dimethoxy-3,4-dihydro-1h-isoquinolin-2-yl)-3-(1-methyl-2-phenylpyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)prop-2-en-1-one;hydrochloride Chemical compound Cl.C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CCN1C(=O)C=CC(C1=CC=CN=C1N1C)=C1C1=CC=CC=C1 CDKIEBFIMCSCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIYWOHBEPVGIQN-UHFFFAOYSA-N 1h-benzo[g]indole Chemical class C1=CC=CC2=C(NC=C3)C3=CC=C21 HIYWOHBEPVGIQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RPNMGUBLKCLAEK-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorophenyl)sulfanyl-n,n-diethylethanamine;hydrochloride Chemical compound [Cl-].CC[NH+](CC)CCSC1=CC=C(Cl)C=C1 RPNMGUBLKCLAEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRQUFUKTQHISJB-YYADALCUSA-N 2-[(E)-N-[2-(4-chlorophenoxy)propoxy]-C-propylcarbonimidoyl]-3-hydroxy-5-(thian-3-yl)cyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCC\C(=N/OCC(C)OC1=CC=C(Cl)C=C1)C1=C(O)CC(CC1=O)C1CCCSC1 KRQUFUKTQHISJB-YYADALCUSA-N 0.000 description 1
- URDCARMUOSMFFI-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(2-hydroxyethyl)amino]acetic acid Chemical compound OCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O URDCARMUOSMFFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-J 2-[4,7,10-tris(carboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetate Chemical compound [O-]C(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 25,26,27,28-tetrazahexacyclo[16.6.1.13,6.18,11.113,16.019,24]octacosa-1(25),2,4,6,8(27),9,11,13,15,17,19,21,23-tridecaene Chemical class N1C(C=C2C3=CC=CC=C3C(C=C3NC(=C4)C=C3)=N2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005065 3' Flanking Region Proteins 0.000 description 1
- OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 3',6'-dihydroxy-2',4',5',7'-tetraiodo-3h-spiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3-one Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(I)=C(O)C(I)=C1OC1=C(I)C(O)=C(I)C=C21 OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGWWSDMOHSQNRR-UHFFFAOYSA-N 3-pyridin-2-yl-2-N-(pyridin-2-ylmethyl)propane-1,2-diamine Chemical compound N1=C(C=CC=C1)CC(CN)NCC1=NC=CC=C1 KGWWSDMOHSQNRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005029 5' Flanking Region Proteins 0.000 description 1
- IBJAOCSITSPKFU-UHFFFAOYSA-N 5-[[2-[[5-(diaminomethylideneazaniumyl)-1-[(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-oxopentanoate Chemical compound C1=C(NC(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)CNC(=O)CCCC(O)=O)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C IBJAOCSITSPKFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 101150095401 AURKA gene Proteins 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 description 1
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 1
- KSSJBGNOJJETTC-UHFFFAOYSA-N COC1=C(C=CC=C1)N(C1=CC=2C3(C4=CC(=CC=C4C=2C=C1)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC(=CC=C1C=1C=CC(=CC=13)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC=C(C=C1)OC Chemical compound COC1=C(C=CC=C1)N(C1=CC=2C3(C4=CC(=CC=C4C=2C=C1)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC(=CC=C1C=1C=CC(=CC=13)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC=C(C=C1)OC KSSJBGNOJJETTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000741929 Caenorhabditis elegans Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 101100407060 Caenorhabditis elegans par-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100243399 Caenorhabditis elegans pept-2 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000007590 Calpain Human genes 0.000 description 1
- 108010032088 Calpain Proteins 0.000 description 1
- 208000013627 Camurati-Engelmann disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101800001318 Capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000003858 Chymases Human genes 0.000 description 1
- 108090000227 Chymases Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N D-galactopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 239000004338 Dichlorodifluoromethane Substances 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101001024703 Homo sapiens Nck-associated protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 101150023691 ITGB8 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123038 Integrin antagonist Drugs 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 206010023421 Kidney fibrosis Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000001826 Marfan syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010050513 Metastatic renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102100025725 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710143112 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Proteins 0.000 description 1
- 108090000143 Mouse Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100036946 Nck-associated protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 241000772415 Neovison vison Species 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 208000016012 Phenotypic abnormality Diseases 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004257 Potassium Channel Human genes 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 1
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 102100031289 Riboflavin kinase Human genes 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000043168 TGF-beta family Human genes 0.000 description 1
- 108091085018 TGF-beta family Proteins 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000011117 Transforming Growth Factor beta2 Human genes 0.000 description 1
- 102000004060 Transforming Growth Factor-beta Type II Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010082684 Transforming Growth Factor-beta Type II Receptor Proteins 0.000 description 1
- 101800000304 Transforming growth factor beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000056172 Transforming growth factor beta-3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000097 Transforming growth factor beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- 101000980463 Treponema pallidum (strain Nichols) Chaperonin GroEL Proteins 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001251 acridines Chemical class 0.000 description 1
- FZEYVTFCMJSGMP-UHFFFAOYSA-N acridone Chemical class C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3NC2=C1 FZEYVTFCMJSGMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010023082 activin A Proteins 0.000 description 1
- 206010069351 acute lung injury Diseases 0.000 description 1
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C21 MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004056 anthraquinones Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013059 antihormonal agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 208000007474 aortic aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000001545 azulenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000002680 canonical nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N carboxyglutamic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 208000015100 cartilage disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000005081 chemiluminescent agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 150000004035 chlorins Chemical class 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000000599 controlled substance Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 201000009803 desquamative interstitial pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N dichlorodifluoromethane Chemical compound FC(F)(Cl)Cl PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019404 dichlorodifluoromethane Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJAJDJDODCWPNS-UHFFFAOYSA-N dotp Chemical compound O=C1N2CCOC2=NC2=C1SC=C2 BJAJDJDODCWPNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008846 dynamic interplay Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006353 environmental stress Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007705 epithelial mesenchymal transition Effects 0.000 description 1
- 230000008508 epithelial proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 201000005206 focal segmental glomerulosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 231100000854 focal segmental glomerulosclerosis Toxicity 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 206010061989 glomerulosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 230000008889 homeostatic pathway Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 108700016226 indium-bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007919 intrasynovial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 1
- 125000001434 methanylylidene group Chemical group [H]C#[*] 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O methylsulfide anion Chemical compound [SH2+]C LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002539 nanocarrier Substances 0.000 description 1
- 208000008795 neuromyelitis optica Diseases 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 150000005053 phenanthridines Chemical class 0.000 description 1
- 150000005036 phenoselenazines Chemical class 0.000 description 1
- 125000001484 phenothiazinyl group Chemical class C1(=CC=CC=2SC3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- 125000001644 phenoxazinyl group Chemical class C1(=CC=CC=2OC3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- 239000005080 phosphorescent agent Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020001213 potassium channel Proteins 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002206 pro-fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 238000001853 pulsed-field electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000012857 radioactive material Substances 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 108091000042 riboflavin kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000022379 skeletal muscle tissue development Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000010009 steroidogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N triacetic acid Chemical compound CC(=O)CC(=O)CC(O)=O ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N triphenylmethane Chemical compound C1=CC=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000004862 vasculogenesis Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 description 1
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/70546—Integrin superfamily, e.g. VLAs, leuCAM, GPIIb/GPIIIa, LPAM
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к ανβ8 антагонистам. Заявлено анти-ανβ8-антитело для уменьшения активации TGFβ у индивида. Антитело ингибирует высвобождение активного, зрелого пептида TGFβ, и практически не ингибирует адгезию латентного TGFβ к ανβ8 на ανβ8-экспрессирующей клетке. Представлена композиция, содержащая анти-ανβ8-антитело. Также представлены способы применения антитела для уменьшения активации TGFβ у индивида и для определения присутствия интегрина β8 в образце. Изобретение позволяет с высокой эффективностью подавлять интегрин-ανβ8-опосредованную активацию TGF-β. 8 н. и 15 з.п. ф-лы, 9 пр.
Description
Перекрестные ссылки на родственные заявки
В настоящей заявке испрашивается приоритет по предварительной заявке США №61/305,749, поданной 18 февраля 2010 г., и приоритет по предварительной заявке США №61/428,814, поданной 30 декабря 2010 г., раскрытие которых включено в данный документ в полном объеме в виде ссылки.
Заявление относительно прав на изобретения, сделанные в соответствии с финансируемыми федеральным правительством исследованиями и разработками
Настоящее изобретение было сделано при поддержке Правительства США по грантам №HL63993, NS-44155, U01 AI075443, выданным Национальным Институтом Здравоохранения. Правительство США имеет прямые права на настоящее изобретение.
Уровень техники
Трансформирующий фактор роста-β (TGF-β) - многофункциональный цитокин, играющий важные роли в биологии иммунных, эндотелиальных, эпителиальных и мезенхимальных клеток при развитии и во взрослой жизни у беспозвоночных и позвоночных видов. У млекопитающих эти функции опосредованы тремя изоформами TGF-β1, 2, и 3, каждая из которых широко представлена. Все три изоформы взаимодействуют с одними и теми же рецепторами клеточной поверхности (TGFBR2 и ALK5) и передают сигнал через одни и те же внутриклеточные сигнальные пути, которые включают в себя либо канонические (т.е. SMADS) или неканонические (т.е., МАРК, JUN, PI3K, РР2А, Rho, Par6) сигнальные эффекторы. Наиболее интенсивно изучались канонические сигнальные пути TGF-β, в которых сигнализация TGF-β передается от рецепторного аппарата TGF-β посредством фосфорилирования цитоплазматических SMAD-2/3, образования комплекса с SMAD-4, ядерной транслокации комплекса SMAD-2/3/4, и связывания с элементами ответа SMAD, которые расположенным в промоторных регионах многих генов, вовлеченных в фиброгенный ответ.
Однако, несмотря на наличие сходных партнеров передачи сигналов, каждая изоформа служит для индивидуальной биологической функции, возможно, из-за различий в аффинности связывания с рецепторами TGF-β, в механизме активации, в интенсивности или продолжительности передачи сигнала, или в пространственном и/или временном распределении.
Модели нокаута и модели условного удаления изоформ TGF-β, рецепторов, и сигнальных медиаторов, а также направленные на все изоформы TGF-β реагенты, блокирующие их функции, выявили существенную роль TGF-β в Т-клетках и в клетках сердца, легких, сосудов, и развития неба. Например, мыши, дефицитные по TGF-β1 либо умирают внутриутробно вследствие дефектов васкулогенеза в желточном мешке или рождаются и выживают до взрослого состояния, но у них развивается тяжелые полиорганные аутоиммунные заболевания. Генетическое удаление сигнальных медиаторов TGF-R показало существенную роль SMAD2 в раннем формировании и образовании мезодермы, и мыши, лишенные SMAD3, оказываются жизнеспособными и фертильными, но демонстрируют наличие пороков развития конечностей, нарушение иммунной регуляции, колиты, рак толстой кишки, и расширение альвеол. В тканях взрослого организма путь TGF-β, как полагают, регулирует динамическое взаимодействие между иммунными, мезенхимальными и эпителиальными клетками для поддержания гомеостаза в ответ на экологический стресс.
Нормальные гомеостатические пути опосредованные TGF-β, нарушаются в ответ на хронические повторяющиеся повреждения. В случаях повреждения, TGF-β становится основным профиброгенным цитокином, задерживая эпителиальное заживление раны путем ингибирования пролиферации эпителия и миграции и стимуляции апоптоза и расширения мезенхимного компартмента, индуцируя рекрутинг фибробластов, сократительную способность фибробластов, и отложение внеклеточного матрикса. Действительно, интратрахеальное введение рекомбинантного TGF-β1 в составе аденовируса в легкие грызунов резко увеличивает накопление фибробластов и экспрессию коллагена I типа и III типа вокруг дыхательных путей и в легочном интерстиции, а нейтрализующие анти-TGF-β антитела могут блокировать экспериментально вызванный блеомицином или радиацией фиброз легких.
Возросшая активность пути TGF-β также вовлечена в фиброзные заболевания легких, гломерулосклероз, и рестеноз сосудов сердца. Большинство патологических изменений опосредованных TGFβ, как представляется, связаны с изоформой TGF-β1. Сложность функционирования TGF-β1 в организме человека объясняется наличием наследственных заболеваний с генерализованным или клеточно-специфичным повышением или недостатком непосредственно TGF-β1 или его сигнальных эффекторов. Мутации, повышающие активность путей TGF-β, приводят к дефектам костного метаболизма (напр. болезни Камурати-Энгельмана) и соединительной ткани (т.е. синдром Марфана), и к аневризме аорты (т.е. синдроме Лойе-Дитца), в то время как мутации, которые приводят к снижению активности пути TGF-β коррелируют с возникновением рака и его прогнозом. Роль TGF-β, как подавителя раковой опухоли не является однозначной, поскольку TGF-β может также увеличить рост опухоли и вызвать метастазирование, возможно, посредством его участия в подавлении иммунитета, клеточной инвазии, эпителиально-мезенхимального перехода, или ангиогенеза.
Несмотря на многочисленные важные функции TGF-β, одноразовое введение или краткосрочное назначение нейтрализующих антител пан-TGF-β, как сообщается, хорошо переносится в дозах, которые препятствуют фиброзу органа или экспериментальному росту раковых клеток и метастазов, без возникновения побочных эффектов у взрослых мышей и крыс. Данное лечение показало терапевтическую эффективность в подавлении экспериментального фиброза. Ввиду этих многообещающих результатов, проводятся клинические испытания I и II фазы разовых доз нейтрализующих пан-TGF-β антител для метастатической почечно-клеточной карциномы, меланомы, фокального сегментарного гломерулосклероза, и идиопатического легочного фиброза (Genzyme Corporation, genzymeclinicalresearch.com, последнее обращение 27 августа 2009 г.). Для минимизации системных эффектов весьма желательной целью является направленное воздействие на путь TGF-β.
Краткое описание сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к способу уменьшения активации TGF-β, у индивида, например, человека или не человека, путем введения антагониста интегрина ανβ8 нуждающемуся в нем индивиду, тем самым, снижая активацию TGF-β у индивида. В некоторых вариантах осуществления антагонист уменьшает активацию TGF-β (например, рекрутинг протеазы, расщепляющей латентный TGF-β, тем самым освобождая зрелые, активные пептиды TGF-β), но практически не ингибируют адгезию ανβ8 к TGF-β (например, адгезию ανβ8, который экспрессируется на клеточной поверхности, к латентному TGF-β, который связан с клеточным матриксом).
В некоторых вариантах осуществления антагонист представляет собой антитело. Таким образом, изобретение предоставляет изолированные антитела, которые ингибируют высвобождение активного, зрелого пептида TGFβ (активацию TGF-β), но практически не ингибируют адгезию TGFβ к ανβ8 на ανβ8-экспрессирующей клетке. В некоторых вариантах осуществления антитело специфически связывается с ανβ8, например, специфично с β8. В некоторых вариантах осуществления антитело связывается с эпитопом на β8, в пределах SEQ ID NO:11. В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из аминокислот I125, R128, R175, F179 и F180 человеческого β8. В некоторых вариантах осуществления антитело связывается, по меньшей мере, с одной аминокислотой, выбранной из аминокислот, R79, I85, S95, Р100, I108, Р109, R128, Н140 и F179 человеческого β8. В некоторых вариантах осуществления антитело связывает, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из аминокислот I74, N88, I107, T110, I125, R175 и F180 человеческого β8. В некоторых вариантах осуществления антитело связывает человеческий β8, но не связывает мышиный β8. В некоторых вариантах осуществления антитело уменьшает активацию TGFβ, но практически не ингибирует ανβ8 - опосредованную адгезию клеток к TGFβ.
В некоторых вариантах осуществления антитело конкурирует за связывание с ανβ8 с антителом, имеющим вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR легкой цепи с SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи с SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах осуществления антитело имеет вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи с SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи с SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10. Например, в некоторых вариантах осуществления антитело имеет вариабельную область легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 3 или 4 и вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 1 или 2. Конкретные примеры антител по настоящему изобретению включают в себя антитело, имеющее вариабельную область легкой цепи с SEQ ID NO: 3 и вариабельную область тяжелой цепи с SEQ ID NO: 1, и антитело, имеющее вариабельную область легкой цепи с SEQ ID NO: 4 и вариабельную область тяжелой цепи с SEQ ID NO: 2.
Антитела могут быть различных изотипов, например, IgG1, IgG2, IgG2a, IgG или IgG4. Могут быть использованы как моноклональные, так и поликлональные антитела. В некоторых вариантах осуществления это антитела человека, гуманизированные или химерные антитела.
Настоящее изобретение также дополнительно представляет выделенную нуклеиновую кислоту, вектор или векторы, и клетки-хозяева, подходящие для экспрессии антитела по настоящему изобретению.
В настоящее изобретение также дополнительно предлагается фармацевтическая композиция, содержащая антитела по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый наполнитель. В некоторых вариантах фармацевтическая композиция представляет собой диагностическую композицию, например, содержащую меченые антитела. В некоторых вариантах фармацевтическая композиция является терапевтической.
В некоторых вариантах осуществления антитело используется для обнаружения, например, для определения наличия β8 in vivo или т vitro. В таких вариантах осуществления антитело прямо или опосредованно помечено обнаруживаемым фрагментом. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение предоставляет способы определения присутствия интегрина β8 в биологическом образце (in vitro или in vivo), включающий в себя контакт биологического образца с мечеными антителами в соответствии с настоящим изобретением и обнаружение присутствия меченого антитела, тем самым определяя присутствие интегрина β8. В некоторых вариантах осуществления, метод используется для диагностики состояния, выбранного из группы, состоящей из артрита, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), астмы, фиброзного расстройства, аутоиммунного воспалительного заболевания мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующего заболевания (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспаления, заболевания почек, аденокарциномы, плоскоклеточного рака, глиомы, рака молочной железы, и роста рака и метастазов.
Настоящее изобретение также относится к трансгенной мыши, которая экспрессирует человеческий интегрин β8. В некоторых вариантах, трансгенные мыши по изобретению не экспрессируют интегрин мыши β8.
Композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для уменьшения активации TGF-β у индивидов, имеющих одно или несколько состояний, выбранных из группы, состоящей из артрита, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), астмы, фиброзных расстройств, аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующих заболеваний (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспалений, заболеваний почек, аденокарциномы, плоскоклеточного рака, глиомы, рака молочной железы, и роста рака и метастазов, и в которых уменьшение содержания TGF-β улучшает состояние больных. В некоторых вариантах осуществления фиброзные расстройства дыхательных путей представляют собой фиброз, идиопатический легочный фиброз, неспецифическую интерстициальную пневмонию, постинфекционный фиброз легких, диффузное альвеолярное повреждение, связанный с фиброзом легких коллагеноз, индуцированный лекарствами фиброз легких, силикоз, связанный с асбестом фиброз легких, дыхательный бронхиолит, дыхательный бронхиолит ассоциированный с интерстициальным заболеванием легких, десквамативный интерстициальный фиброз, криптогенную пневмонию, хроническую аллергическую пневмонию, медикаментозный фиброз легких, фиброз почек или печени.
Подробное описание изобретения
Введение
Настоящее изобретение основано, частично, на открытии того, что определенные анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты избирательно нарушают опосредованную ανβ8 активацию TGF-β, но не адгезию ανβ8 - экспрессирующей клетки к иммобилизованному TGF-β.Соответственно, настоящее изобретение предоставляет способы уменьшения активации TGF-β у индивида посредством введения антагониста ανβ8 (например, малых молекул, антител анти-ανβ8 или иммуноконъюгатов) индивиду, который в этом нуждается, тем самым снижая активацию TGF-β в его организме. Настоящее изобретение также предусматривает новые антитела, имеющие вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи: SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи: SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10.
Определения
Термин "интегрин β8" используется взаимозаменяемо с itgb8, ITGB8, β8, и им подобными терминами. ITGB8, как правило, используют для обозначения последовательности человека, в то время itgb8 относится к последовательности мыши. Последовательности человеческого белка можно найти в базе Uniprot, код доступа Р26012, а последовательности белков мышей имеются в базе Uniprot под кодом доступа Q0VBD0.
Термин "антагонист", по настоящему изобретению, относится к агенту, который ингибирует экспрессию полипептида или полинуклеотида изобретения или связывается с ним, частично или полностью блокируя стимуляцию, снижая, предотвращая, задерживая активацию, инактивируя, уменьшая чувствительность, или понижая активность полипептида или полинуклеотида по настоящему изобретению. Антагонист может нейтрализовать активность (например, предотвратить связывание и активацию природным лигандом) или принудительно уменьшить активность.
Термины "идентичные" или процент "идентичности" в контексте двух или более нуклеиновых кислот или полипептидных последовательностей, относятся к двум или более последовательностям или подпоследовательностям, которые являются одинаковыми или имеют определенный процент аминокислотных остатков или нуклеотидов, которые являются такими же (т.е. около 60% идентичности, предпочтительно 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более идентичности в пределах определенного региона, при сравнении и выравнивании для максимального соответствия в окне сравнения или в определенной области), и измеряется с помощью алгоритмов сравнения последовательностей BLAST или BLAST 2.0 с параметрами по умолчанию описанными ниже, или с помощью ручного выравнивания и визуального осмотра (см., например, веб-сайт NCBI http://ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/ или подобный). Такие последовательности, далее называют, "по существу идентичными". Настоящее изобретение предоставляет, например, антитела, имеющие полинуклеотидные или полипептидные последовательности, которые имеют, по меньшей мере, 80% идентичности, предпочтительно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, или 100% идентичности, по отношению к эталонной последовательности, например, SEQ ID NO:1-10. Данное определение относится, или может быть применено в качестве дополнения к тестовой последовательности. Данное определение также включает в себя последовательности, которые имеют делеции и/или вставки, а также те, которые имеют замены. Как описано ниже, предпочтительные алгоритмы могут учитывать пробелы и т.п. Предпочтительно, идентичность существует в области, которая состоит, по меньшей мере, примерно из 25 аминокислот или нуклеотидов в длину, или более предпочтительно, в области, составляющей 50-100 аминокислот или нуклеотидов в длину.
Для сравнения последовательности, как правило, одна последовательность выступает в качестве эталонной последовательности, с которой сравниваются тестовые последовательности. При использовании алгоритма сравнения исследуемая последовательность и эталонная последовательность вводятся в компьютер, если необходимо назначаются координаты подпоследовательности, и устанавливаются параметры алгоритма программы. Предпочтительно, могут быть использованы параметры по умолчанию, или могут быть установлены альтернативные параметры. Алгоритм сравнения последовательностей затем вычисляет основанный на параметрах программы процент идентичностей последовательности для тестовой последовательности по отношению к эталонной последовательности.
Термин "окно сравнения", как он использован в данном документе, включает в себя ссылку на сегмент, состоящий из некоторого количества смежных позиций, примерно из от 20 до 600, как правило, от около 50 до около 200, более обычно от около 100 до 150, последовательность которых может быть сравнена с эталонной последовательностью того же числа смежных позиций, после того как две последовательности оптимально выровняют. Методы выравнивания последовательностей для сравнения хорошо известны в данной области техники. Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно проводить, например, с помощью алгоритма локальной гомологии Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 2:482 (1981), с помощью алгоритма гомологии выравнивания Needleman и Wunsch, J. Mol. Biol. 48:443 (1970), способом поиска сходства Pearson & Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:2444 (1988), по компьютеризированной реализации этих алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA, и TFASTA на программном обеспечении Wisconsin Genetics, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI), или ручным выравниванием и визуальной инспекцией (см., например. Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel и др., ред. 1995 года, дополнение)).
Алгоритмы, которые подходят для определения процента идентичности и подобия последовательностей представляют собой алгоритмы BLAST и BLAST 2.0, которые описаны в Altschul и др., Nuc. Acids Res. 25:3389-3402 (1977) и Altschul и др., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990), соответственно. BLAST и BLAST 2.0, используются, с параметрами, описанными здесь, чтобы определить процент идентичности последовательности нуклеиновых кислот и белков по изобретению. Программное обеспечение для проведения анализа BLAST является общедоступным через Национальный центр по биотехнологической информации (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). Этот алгоритм включает первичную идентификацию пар последовательностей с максимальным сходством (HSP) посредством идентификации коротких слов с длиной W в представляющей интерес последовательности, которые либо совпадают, либо удовлетворяют некоторому оцениваемому положительно порогу значения Т при выравнивании со словом такой же длины в последовательности из базы данных. Т определяется как порог значений для соседних слов (Altschul (1990) выше). Эти изначальные совпадения соседних слов выступают в роли затравок для начала поиска при обнаружении более длинных HSP, содержащих их. Поиск совпадений слов распространяется в обоих направлениях вдоль каждой последовательности до тех пор, пока суммарное значение для выравнивания может повышаться. Суммарные значения вычисляются с использованием для нуклеотидных последовательностей параметров М (значение компенсации за пару совпавших остатков; всегда >0) и N (штрафной балл за несоответствие остатков, всегда <0). Для аминокислотных последовательностей для вычисления суммарного значения используется оценочная матрица. Продолжение поиска совпадений слов в каждом направлении останавливают, если суммарное значение для выравнивания снижается по величине Х ниже максимально достижимого значения; суммарное значение снижается до нуля или ниже при накоплении одного или нескольких выровненных остатков с отрицательным значением или если достигнут конец любой последовательности. Параметры алгоритма BLAST W, Т и Х определяют чувствительность и скорость выравнивания. Программа BLASTN (для нуклеотидных последовательностей) использует в качестве параметров по умолчанию длину слова (W) 11, ожидаемое значение (Е) 10, М=5, N=-4 и сравнение обеих цепей. Для аминокислотных последовательностей программа BLASTP использует в качестве параметров по умолчанию длину слова 3 и ожидаемые значения (Е) 10 и оценочную матрицу BLOSUM62 (см. Henikoff& Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 89:10915), фрагменты для выравнивания (В) 50, ожидаемое значение (Е) 10, М=5, N=-4 и сравнение обеих цепей.
Термин нуклеиновые "кислоты" относится к дезоксирибонуклеотидам или рибонуклеотидам и их полимерам в одно-или двуцепочечной форме, и к их наборам. Этот термин охватывает нуклеиновые кислоты, содержащие известные нуклеотидные аналоги или модифицированные остатки остова или связи, которые являются синтетическими, природными, и не встречающимися в природе, которые имеют аналогичные связывающие свойства, что и эталонная нуклеиновая кислота, и которые метаболизируются способом, сходным с эталонными нуклеотидами. Примеры таких аналогов включают, без ограничения фосфоротиоаты, фосфорамидаты, метилфосфонаты, хиральные-метилфосфонаты, 2-O-метилрибонуклеотиды, пептид-нуклеиновые кислоты (PNA).
Если не указано иное, последовательности нуклеиновых кислот помимо непосредственно приведенной последовательности также включают в себя консервативно модифицированные варианты (например, вырожденные замены кодонов) и комплементарные последовательности. В частности, вырожденные замены кодонов могут быть получены путем создания последовательности, в которых третье положение одного или нескольких (или всех) выбранных кодонов заменяется любым из канонических нуклеотидов или и/или дезоксинозиновыми остатками (Batzer et al. Nucleic Acids Res. 19:5081 (1991); Ohtsuka и др., J. Biol Chem 260:2605-2608 (1985);. Rossolini и др., Moll. Cell. Probes 8:91-98 (1994)). Термин "нуклеиновые кислоты" используется наравне с геном, ДНК РНК, олигонуклеотидом, и полинуклеотидом.
Последовательности нуклеиновых кислот также безусловно включает в себя "сплайс-варианты". Аналогично, белок, кодируемый нуклеиновой кислотой, безусловно, включает в себя любой белок, кодируемый сплайс-вариантом данной нуклеиновой кислоты. "Сплайс-варианты", как следует из названия, являются продуктами альтернативного сплайсинга гена. После транскрипции, исходный транскрипт нуклеиновой кислоты может быть спайсирован так, что различные (альтернативные) нуклеиновые кислоты - продукты сплайсинга будут кодировать различные полипептиды. Механизмы получения сплайс-вариантов различаются, но включают в себя альтернативный сплайсинг экзонов. Альтернативные полипептиды, полученные из одной и той же нуклеиновой кислоты сквозной транскрипцией, также охватываются этим определением. Любые продукты реакции сплайсинга, в том числе рекомбинантные формы продуктов сплайсинга, включены в данное определение. Например, сплайс варианты калиевого канала обсуждаются в Leicher et al., J. Biol. Chem. 273(52):35095-35101 (1998).
Термин "полипептид", "пептид" и "белок" используют в данном документе взаимозаменяемо для обозначения полимера аминокислотных остатков. Данные термины распространяются и на полимеры аминокислот, в которых один или несколько аминокислотных остатков являются искусственным химическим миметиком, соответствующим природным аминокислотам, а также встречающиеся в природе аминокислотные полимеры и не встречающиеся в природе аминокислотные полимеры.
Термин "аминокислота" относится к природным и синтетическим аминокислотам, а также аналогам аминокислот и миметикам аминокислот, которые функционируют способом, сходным с встречающимися в природе аминокислотами. Встречающиеся в природе аминокислоты это аминокислоты кодируемые генетическим кодом, а также аминокислоты, которые впоследствии были модифицированы, например, гидроксипролин, гамма-карбоксиглутамат, и O-фосфосерин. Аналоги аминокислот относится к соединениям, которые имеют ту же основную химическую структуру, что и природная аминокислота, т.е. α-углерод, который связан с водородом, карбоксильные группы, аминогруппы, и R-группу, например, гомосерин, норлейцин, метионинсульфоксид, метионинметилсульфоний. Такие аналоги содержат измененные R группы (например, норлейцин) или модифицированные пептидные остовы, но сохраняют такую же основную химическую структуру, что и природные аминокислоты. Миметики аминокислот относятся к химическим соединениям, которые имеют структуру, отличную от общей химической структуры аминокислот, но функционально похожи на природные аминокислоты.
Аминокислоты могут быть представлены в настоящем документе общеизвестными трехбуквенными или однобуквенными символами рекомендованными Комиссией Биохимической Номенклатуры IUPAC-IUB. Нуклеотиды представлены их общепринятыми однобуквенными обозначениями.
Термин "консервативно модифицированные варианты" относится как аминокислотным, так и к нуклеотидным последовательностям. Что касается конкретных последовательностей нуклеиновых кислот, консервативно модифицированные варианты относятся к тем нуклеиновым кислотам, которые кодируют идентичные или по существу идентичные аминокислотные последовательности, или в случае, когда нуклеиновая кислота не кодирует аминокислотную последовательность, то по существу идентичную последовательность. Из-за вырожденности генетического кода, большое число функционально идентичных нуклеиновых кислот кодируют один белок. Например, все кодоны GCA, GCC, GCG и GCU кодируют аминокислоту аланин. Таким образом, в каждом месте, где аланин задается кодоном, кодон может быть изменен на любой из описанных соответствующих кодонов без изменения кодируемого полипептида. Такие вариации нуклеиновых кислот являются "молчащими вариациями", которые являются одним из видов консервативно модифицированых вариантов. Каждая описанная в настоящем документе последовательность нуклеиновых кислот, которая кодирует полипептид, также включает все возможные "молчащие вариации" нуклеиновых кислот. Специалистам в данной области должны быть понятно, что каждый кодон в нуклеиновой кислоте (за исключением AUG, который обычно является только кодоном метионина, и TGG, который обычно является только кодоном триптофана) может быть модифицирован для получения функционально идентичных молекул. Соответственно, каждая "молчащая вариация" нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, включается в каждую описанную последовательность в отношении продукта экспрессии, но не в отношении последовательностей зондов.
Что касается аминокислотных последовательностей, специалистами в данной области должно быть понятно, что отдельные замены, делеции или вставки в нуклеиновую кислоту, пептид, полипептидную или белковую последовательность, которые изменяют, добавляют или удаляют одну аминокислоту или небольшой процент аминокислот в закодированной последовательности являются "консервативно-модифицированными вариантами", если изменение приводит к замене аминокислоты на химически подобную аминокислоту. Таблицы консервативных замен, в которых представлены функционально аналогичные аминокислоты, хорошо известны в данной области. Такие консервативно модифицированные варианты, дополнительно не исключают полиморфных вариантов, межвидовых гомологов, и аллелей по настоящему изобретению.
Каждая из следующих восьми групп содержит аминокислоты, которые являются консервативными заменами друг для друга: 1) аланин (А), глицин (G), 2) аспарагиновая кислоты (D), глутаминовая кислота (Е), 3) аспарагин (N), глютамин (Q), 4) аргинин (R), лизин (K), 5) изолейцин (I), лейцин (L), метионин (М), валин (V); 6) фенилаланин (F), тирозин (Y), триптофан (W); 7) серии (S), треонин (Т) и 8) цистеин (С), метионин (М) (см., например, Creighton, Proteins (1984)).
"Метка" или "обнаруживаемая часть" представляет собой соединение, обнаруживаемое спектроскопическими, фотохимическими, биохимическими, иммунохимическими, химическими или другими физическими средствами. Например, полезные метки включают в себя 32Р, флуоресцентные красители, электронно-плотные реагенты, ферменты (например, используемые в ELISA), биотин, дигоксигенин, или гаптены и белки, которые могут быть обнаружены, например, путем введения радиоактивной метки в пептид или использоваться для обнаружения антител, специфически связывающихся с пептидом.
Термин "рекомбинантный", при использовании по отношению, например, к клетке, или нуклеиновой кислоте, белку, или вектору, указывает, что клетка, нуклеиновая кислота, белок, или вектор были изменены путем введения гетерологичной нуклеиновой кислоты или белка или путем изменения нативной нуклеиновой кислоты или белка. Также данный термин применим к клетке, которая была получена от модифицированной указанным способом клетки. Так, например, рекомбинантные клетки экспрессируют гены, которых нет в нативных (нерекомбинантных) формах клеток или экспрессируют нативные гены, которые в противном случае экспрессируют аномально, недостаточно или не экспрессируют вообще.
Термин "гетерологичный" при использовании по отношению к участку нуклеиновой кислоты указывает, что нуклеиновая кислота содержит две или более подпоследовательности, которые не встречаются в таком же соотношении друг с другом в природе. Например, такие нуклеиновые кислоты, как правило, получают рекомбинацией и они, как правило, содержат две или более последовательности от неродственных генов соединенные, так, чтобы образовывать новую функциональную нуклеиновую кислоту, например, промотор из одного источника и кодирующую область из другого источника. Также, «гетерологичный белок» указывает на то, что данный белок состоит из двух или более последовательностей, которые не находятся в таком же соотношении друг с другом в природе (например, гибридный белок).
Термин "антитело" относится к полипептиду, который содержит область каркаса, кодируемую генами иммуноглобулинов, или к его фрагменту, который специфически связывает и распознает антиген. Распознанные гены иммуноглобулинов включают гены константной области каппа, лямбда, альфа, гамма, дельта, эпсилон и мю, а также множество генов иммуноглобулинов вариабельной области. Легкие цепи классифицируются как каппа или лямбда. Тяжелые цепи классифицируются как гамма, мю, альфа, дельта, или эпсилон, которые, в свою очередь, определяют класс иммуноглобулина IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, соответственно. Как правило, антигенсвязывающий участок антитела, будет наиболее важным для специфичности и аффинности связывания.
Антитело связывается с эпитопом антигена. Эпитоп является сайтом антигена специфическим связывающим антитело, и может включать в себя несколько аминокислот или несколько областей, состоящих из нескольких аминокислот, например, 5 или 6, или более, например, 20 или более аминокислот, или участки этих аминокислот. В некоторых случаях, эпитоп включает в себя небелковые компоненты, например, углеводы, нуклеиновые кислоты или липиды. В некоторых случаях, эпитоп представляет собой трехмерный фрагмент. Так, например, где мишенью является белок, эпитоп может содержать последовательно соединенные аминокислоты, или аминокислоты из разных частей белка, перенесенных в непосредственную близость вследствие фолдинга белка (например, эпитоп прерывистого типа). То же самое верно и для других типов молекул-мишеней, которые образуют трехмерные структуры.
Структурная единица примерного иммуноглобулинов (антитела) включает в себя тетрамер. Каждый тетрамер состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, каждая пара имеет одну "легкую" (около 25 кДа) и одну "тяжелую" цепь (около 50-70 кДа). N-конец каждой цепи определяет вариабельную область примерно из 100-110 или более аминокислот, в первую очередь ответственных за распознавание антигена. Термины вариабельная легкая цепь (VL) и вариабельная тяжелая цепь (VH) относятся к данным легким и тяжелым цепям соответственно.
Антитела существуют, например, в виде интактных иммуноглобулинов или в виде ряда широко известных фрагментов, полученных путем гидролиза различными пептидазами. Так, например, пепсин расщепляет антитела ниже дисульфидных связей в шарнирной области для получения F(ab)'2 - димера Fab, который сам по себе является легкой цепью, соединенной с VH-CH1 дисульфидной связью. F(ab)'2 может быть восстановлен в мягких условиях с разрывом дисульфидных связей в шарнирной области, тем самым димер F(ab)'2 превращается в мономер Fab'. Мономер Fab' это по существу Fab с частью шарнирной области (см. Fundamental Immunology (Paul изд., 3-е изд., 1993). Хотя различные фрагменты антитела определяют в терминах расщепления интактного антитела, специалистам в данной области должно быть понятно, что такие фрагменты могут быть синтезированы de novo либо химически, либо с помощью методов рекомбинантной ДНК. Таким образом, термин "антитело", как он используется в данном документе, также включает в себя фрагменты антител, полученные либо путем модификации целых антител, или синтезированные de novo с использованием методологии рекомбинантных ДНК (например, единая цепь Fv), или те, которые были получены с использованием библиотек фагового дисплея (см., например, McCafferty и др., Nature 348:552-554 (1990)).
Для приготовления подходящих антител по настоящему изобретению, например, рекомбинантных, моноклональных, или поликлональных антител, и для их применения в соответствии с настоящим изобретением, в данной области может быть использовано много известных способов (см., например, Coler Milstein, Nature 256:495-497 (1975); Kozbor и др., Immunology Today 4: 72 (1983); Cole и др., стр.77 - 96, Monoclonal antibodies in cancer therapy Alan P. Liss, Inc (1985); Coligan, Current Protocols in immunology (1991); Harlow & Lane, (1988), Antibodies, A Laboratory Manual, а также Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice (2d ed. 1986)). Гены, кодирующие тяжелые и легкие цепи представляющего интерес антитела могут быть клонированы из клеток, например, гены, кодирующие моноклональные антитела, могут быть клонированы из гибридомы и используются для производства рекомбинантных моноклональных антител. Генетические библиотеки, кодирующие тяжелые и легкие цепи моноклональных антител, также могут быть получены из гибридомы или из плазматических клеток. Случайное сочетание тяжелой и легкой цепи генных продуктов генерирует большой пул антител с различной антигенной специфичностью (см., например, Kuby, Immunology (3-е изд. 1997)). Способы для производства антител одной цепи или рекомбинантных антител (патент США 4946778, патент США №4816567) могут быть адаптированы для производства антител к полипептидам по настоящему изобретению. Кроме того, трансгенные мыши или другие организмы, такие как прочие млекопитающие, могут быть использованы для экспрессии гуманизированных или человеческих антител (см., например. Патенты США №5545807, 5545806, 5569825, 5625, 126, 5633425, 5661, 016, Marks и др., Bio/Technology 10:779-783 (1992); Lonberg и др., Nature 368:856-859 (1994), Morrison, природа 368:812-13 (1994); Fishwild и др., Nature Biotechnology 14:845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology 14:826 (1996) и Lonberg и Huszar, Inter. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995)). Кроме того, технология фагового дисплея может быть использована для выявления антител и гетеромерных фрагментов Fab, которые специфически связываются с выбранным антигеном (см., например, McCafferty и др., Nature 348:552-554 (1990); Marks и др., Bio/Technology 10:779-783 (1992)). Антитела также могут быть сделаны биспецифическими, т.е. способными распознавать два различных антигена (см., например, WO 93/08829, Traunecker и др., EMBO J. 10:3655-3659 (1991) и Suresh и др., Methods in Enzimology 121: 210 (1986)). Антитела могут быть также гетероконъюгатами, например, двумя ковалентно связанными антителами или иммунотоксинами (см., например, патент США №4676980, WO 91/00360, WO 92/200373 и ЕР 03089).
Методы гуманизации или приматизации не человеческих антител хорошо известны в данной области. Как правило, гуманизированное антитело имеет один или несколько аминокислотных остатков, введенных в него из источника, который не является человеком. Эти «не являющиеся человеческими» аминокислотные остатки часто упоминаются как импортные остатки, которые обычно берутся из импортированного вариабельного домена. Гуманизация может главным образом выполняться в соответствии со способом Winter and co-workers (см., например, Jones и др., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann и др., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen и др., Science 239: … 1534-1536 (1988) и Presta, Curr Op Struct Biol 2:593-596 (1992)), путем замены CDR грызунов или CDR последовательностей на соответствующие последовательности человеческого антитела. Соответственно, такие гуманизированные антитела представляют собой химерные антитела (патент США №4816567), в которых существенно меньше, чем интактный человеческий вариабельный домен был заменен на соответствующую последовательностью из нечеловеческих видов. На практике гуманизированные антитела, как правило, представляют собой человеческие антитела, в которых некоторые остатки CDR и, возможно, некоторые остатки FR заменены остатками из аналогичных участков антител грызунов.
"Химерное антитело" является молекулой антитела, в котором (а) константная область или ее часть изменены, перемещены или заменены так, что сайт связывания антигена (вариабельная область) связана с константной областью других антител, или антител другого класса, антител с другой эффекторной функцией и/или антител другого вида, или с совершенно другой молекулой, которая придает новые свойства химерным антителам, например, ферментом, токсином, гормоном, фактором роста, медикаментом и т.д., или (b) вариабельная область или ее участок, изменена, перемещена или заменена на вариабельную область, имеющую отличную или измененную антигенную специфичность. Предпочтительные антитела, по настоящему изобретению, и для использования согласно настоящему изобретению, включают гуманизированные и/или химерные моноклональные антитела.
В одном варианте осуществления антитело конъюгировано с "эффекторной" частью. Эффекторной частью может быть любое количество молекул, в том числе метящие фрагменты, такие как радиоактивные метки или флуоресцентные метки, или может быть терапевтической группой. В одном аспекте антитело модулирует активность белка. Такие эффекторные фрагменты включают, но этим не ограничены, противоопухолевое лекарство, токсин, радиоактивный агент, цитокин, второе антитело или фермент. Кроме того, настоящее изобретение предоставляет вариант осуществления, в котором антитело по настоящему изобретению связано с ферментом, который превращает пролекарство в цитотоксический агент.
Иммуноконъюгат может быть использован для нацеливания эффекторных групп на ανβ8 положительные клетки, в частности, клетки, которые экспрессируют ανβ8. Такие различия могут быть очевидны при просмотре гелевых полосок с одинаковой загрузкой тестовых и контрольных образцов. Примеры цитотоксических агентов включают, но этим не ограничены: рицин, доксорубицин, даунорубицин, таксол, бромистый этидий, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, дигидрокси антрацин дион, актиномицин D, токсин дифтерии, экзотоксин Pseudomonas (РЕ), РЕ40, абрин, глюкокортикоидное и иное химиотерапевтическое средство, а также радиоизотоп. Подходящие обнаруживаемые маркеры включают, но не этим не ограничены, радиоизотопы, флуоресцентные соединения, биолюминесцентные соединения, хемилюминесцентные соединения, хелаты металлов или ферменты.
В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение предоставляет антитела к ανβ8. Анти-ανβ8 антитела могут быть использованы для системного уменьшения активации TGFβ у индивида самостоятельно или при конъюгации с обнаруживаемой меткой или эффекторной частью. Анти-ανβ8 антитела, конъюгированные с токсичными веществами, такими как рицин, а также неконъюгированные антитела могут быть полезны в качестве терапевтических агентов.
Кроме того, рекомбинантный белок по настоящему изобретению, содержащий антигенсвязывающую область из любого моноклонального антитела настоящего изобретения могут быть использованы для обнаружения и лечения рака. В такой ситуации, антигенсвязывающая область рекомбинантного белка присоединяется, по меньшей мере, к функционально активному участку второго белка, обладающего терапевтической активностью. Второй белок может включать, но этим не ограничен, фермент, лимфокин, онкостатин или токсин. Подходящие токсины включают доксорубицин, даунорубицин, таксол, бромистый этидий, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, дигидроксиантрацин дион, актиномицин D, токсин дифтерии, экзотоксин Pseudomonas (РЕ), РЕ40, рицин, абрин, глюкокортикоид и радиоизотоп.
"Метка" или "обнаруживаемый фрагмент" является диагностическим агентом или компонентом, обнаруживаемым спектроскопическими, радиологическими, фотохимическими, биохимическими, иммунохимическими, химическими или другими физическими средствами. Примерны меток включают в себя радиоактивные метки (например, 111In, 99mTc, 131I, 67Ga) и другие утвержденные FDA (управление по контролю за продуктами и лекарствами) визуализирующие средства. Дополнительные метки включают в себя 32P, флуоресцентные красители, электронно-плотные реагенты, ферменты, биотин, дигоксигенин, или гаптены и белки или другие вещества, которые могут быть обнаружены, например, путем включения радиоактивной метки в целевой агент. Для конъюгации нуклеиновой кислоты или наноносителя с меткой может быть использован любой способ, известный в данной области, например, способы, описанные в Hermanson, Bioconjugate Technologies 1996 г., Academic Press, Inc, Сан-Диего.
"Меченым" или "помеченным" антителом или агентом является связанный с меткой, ковалентно, через линкер или через химическую связь, или нековалентно, через ионные связи, связи Ван-дер-Ваальса, электростатические связи или водородные связи, так что присутствие антител или агента может быть обнаружено путем обнаружения присутствия метки, связанной с антителом или агентом.
Методы конъюгации обнаруживаемых и терапевтических агентов с антителами хорошо известны (см., например, Amon и др., "Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (Ред.), стр.243-56 (Alan R. Liss, Inc 1985); Hellstrom и др., "Antibodies For Drug Delivery" in Controlled Drug Delivery (2-е изд), Robinson и др. (ред.), стр.623 - 53 (Marcel Dekker, Inc 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review" in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera и др. (ред.), стр.475-506. (1985), а также Thorpe и др., "The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev.. 62:. 1. 19-58 (1982)).
Фраза "специфично (или селективно) связывается" с антителом или "специфично (или селективно) иммунореактивен с", когда речь идет о белке или пептиде, относится к реакции связывания, определяющей присутствие белка, часто в гетерогенной популяции белков и других биопрепаратов. Таким образом, при указанных условиях иммуноанализа, специфичные антитела связываются с конкретным белком, по меньшей мере, в два раза и что более типично, более чем в 10-100 раз сильнее, чем фон. Специфическое связывание с антителом в таких условиях требует антитела, которые выбирают по его специфичности к конкретному белку. Например, можно провести отбор среди поликлональных антител для получения только тех поликлональных антител, которые специфически иммунореактивны с выбранным антигеном, но не с другим белком. Этот отбор может быть осуществлен путем изымания из пула тех антител, которые перекрестие реагируют с другими молекулами. Могут быть использованы различные форматы иммуноанализа для отбора антител, специфически иммунореактивных с определенным белком. Например, для отбора антител, специфически иммунореактивных с белком, обычно используются твердофазный иммуноферментный анализ ELISA (см., например, Harlow & Lane, Using Antibodies, A Laboratory Manual (1998) для описания иммунологического форматов и условий, которые могут быть использованы для определения специфической иммунореактивности).
Под "терапевтически эффективной дозой или количеством" подразумевают дозу, которая производит эффекты, для которых она вводится. Точная доза и технология приготовления данного лекарственного средства будет зависеть от целей лечения, и может быть установлена специалистом в данной области с использованием известных способов (см., например, Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (т.1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Gennaro, Editor (2003), and Pickar, Dosage Calculations (1999)).
Термин "фармацевтически приемлемые соли" или "фармацевтически приемлемый носитель" означает включение солей активных соединений, которые приготовлены из относительно нетоксичных кислот или оснований, в зависимости от конкретных заместителей, найденных в соединениях, описанных в данном документе. Когда соединения по настоящему изобретению содержат относительно кислые функциональные группы, соли присоединения оснований можно получить при контактировании нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством желаемого основания, либо в чистом виде или в подходящем инертном растворителе. Примерами фармацевтически приемлемых солей присоединения основания включают натриевую, калиевую, кальциевую, аммониевую, органическую амино или магниевую соли, или сходные соли. Когда соединения по настоящему изобретению содержат относительно основные функциональные группы, соли присоединения кислот можно получить при контактировании нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством желаемой кислоты либо в чистом виде или в подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты включают в себя соли, полученные из неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, азотная, карбоновая, моногидрокарбоновая, фосфорная, моногидрофосфорная, дигидрофосфорная, серная, моногидросерная, йодистоводородная, или фосфористая кислота и т.п., а также соли, полученные из относительно нетоксичных органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, изомасляная, малеиновая, малоновая, бензойная, янтарная, субериновая, фумаровая, молочная, миндальная, фталевая, бензолсульфоновая, п-толилсульфоновая, лимонная, винная, метансульфоновая, и тому подобное. Также включены соли аминокислот, такие как аргинат и т.п., а также соли органических кислот, таких как глюкуроновой или галактуроновой кислоты и т.п. (см., например, Berge et al., Журнал Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Определенные специфические соединения по настоящему изобретению содержат как основные, так и кислые функциональные группы, которые позволяют данным соединениям быть преобразованными в соли присоединения оснований или кислот. Другие фармацевтически приемлемые носители, известные специалистам в данной области также являются подходящими для настоящего изобретения.
Нейтральные формы соединений могут быть восстановлены контактированием соли с основанием или кислотой и выделения исходного соединения обычным способом. Исходная форма соединения отличается от различных форм его солей по определенным физическим свойствам, таким, как растворимость в полярных растворителях, но в противном случае соли эквивалентны исходной форме соединения в контексте настоящего изобретения.
В дополнение к солевым формам, настоящее изобретение предоставляет соединения, которые находятся в пролекарственной форме. Пролекарственными соединениями, описанные в настоящем документе, являются те соединения, которые легко вступают в химические изменения в физиологических условиях для обеспечения соединений по настоящему изобретению. Кроме того, пролекарства могут быть преобразованы в соединения по настоящему изобретению с помощью химических или биохимических методов в среде ex vivo. Например, пролекарства могут медленно превращаться в соединения по настоящему изобретению, когда их помещают в резервуар трансдермального пластыря с подходящим ферментом или химическим реагентом.
Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах, включая гидратированные формы. В целом, сольватированные формы эквивалентны несольватированным формы и охватываются объемом настоящего изобретения. Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в нескольких кристаллических или аморфных формах. В целом, все физические формы эквивалентны для применений, предусмотренных настоящим изобретением, и охватываются объемом настоящего изобретения.
Некоторые соединения по настоящему изобретению имеют асимметричные атомы углерода (оптические центры) или двойные связи; рацематы, диастереомеры, геометрические изомеры и индивидуальные изомеры охватываются объемом настоящего изобретения.
Термин "уменьшение", "снижение" или "сокращение", когда он используется в контексте оуβ8-опосредованной активации TGFR относится к любому обнаруживаемому отрицательному изменению или уменьшению количества параметра, который отражает активацию TGFβ, no сравнению со стандартным значением, полученным в тех же условиях, но в отсутствие агента, описанного выше (например, анти-ανβ8 антагониста, анти-аνβ8 антитела и иммуноконъюгата). Уровень данного снижения после воздействия агента, как описано в настоящем документе (например, анти- аνβ8 антагониста, анти-ανβ8 антитела и иммуноконъюгата) составляет, в некоторых вариантах, по меньшей мере, 10% или 20%, а более предпочтительно, по меньшей мере, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90%, и наиболее предпочтительно 100%.
Термин "конкурировать", как он используется в данном документе в связи с антителами, означает, что первое антитело или его антигенсвязывающая часть, конкурирует за связывание со вторым антителом или его антигенсвязывающей частью, где связывание первого антитела с распознаваемым им эпитопом детектируемо снижается в присутствии второго антитела по сравнению со связыванием первого антитела в отсутствие второго антитела. В качестве необязательной альтернативы, где связывание второго антитела с его эпитопом также детектируемо снижается в присутствии первого антитела. То есть, в некоторых случаях первое антитело может ингибировать связывание второго антитела с его эпитопом без ингибирования связывания вторым антителом первого антитела с соответствующим эпитопом. Однако, в других случаях каждое антитело детектируемо ингибирует связывание другого антитела с распознаваемым им эпитопом или лигандом, в той же, большей, или меньшей степени, в этих случаях антитела называются "перекрестно-конкурирующими" друг с другом за связывание соответствующего эпитопа(ов). Конкурирующие и перекрестно-конкурирующие антитела охватываются настоящим изобретением. Независимо от механизма, посредством которого происходит подобная конкуренция или перекрестная конкуренция (например, стерических препятствий, конформационных изменений, или связывания с общим эпитопом, или его частью, и т.п.), специалистам в данной области должно быть понятно, на основании сведений из данного документа, что подобные конкурирующие и/или перекрестно конкурирующие антитела включены в объем настоящего изобретения и могут применяться в способах, раскрытых в данном документе.
Известны многочисленные типы анализа конкурентного связывания, например: твердофазный прямой или непрямой радиоиммуноанализ (RIA), твердофазазный прямой или непрямой иммуноферментный анализ (EIA), анализ конкуренции типа сэндвич (см. Stahli и др., (Methods in Enzymology 9:242-253 (1983)); твердофазный прямой EIA биотин-авидин (см. Kirkland и др., J. Immunol 137:3614-3619 (1986 год.)); твердофазный анализ прямого мечения, твердофазный сэндвич-анализ прямого мечения (см. Harlow и Lane, Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988)); твердофазный RIA прямого меченого с использованием 1-125 меток (see Morel et al, Molec. Immunol. 25(1):7- 1 5 (1988)); твердофазный Е1А с прямым мечением биотин-авидин (Cheung и др., Virology 176:546-552 (1990)); RIA с прямым мечением (Moldenhauer и др., Scand. J. Immunol. 32:77-82 (1990)). Как правило, такой анализ предполагает использование очищенных антигенов, связанных с твердой поверхностью или клеткой, несущей один из непомеченных тестовых иммуноглобулинов или помеченный эталонный иммуноглобулин. Конкурентное ингибирование измеряется путем определения количества меток, связанных с твердой поверхностью или с клетками в присутствии тестового иммуноглобулина. Обычно тестовый иммуноглобулин присутствует в избытке. Антитела, определенные конкурентным анализом (конкурирующие антитела) включают в себя антитела, связывающиеся с тем же эпитопом, что и эталонные антитела, и антитела, связывающиеся с соседними эпитопами достаточно близко к эпитопу с которым связывается эталонное антитело для осуществления стерического препятствия. Обычно, когда конкурирующие антитела присутствуют в избытке, они будут препятствовать специфическому связыванию эталонного антитела с общим антигеном, не менее чем на 50 или 75%.
Активация TGFβ
Трансформирующий фактор роста β (TGFβ) первоначально был охарактеризован как белок (секретировавшийся из линии опухолевых клеток), который был способен индуцировать трансформированный фенотип в неопухолевых клетках в культуре. Этот эффект был обратимым, как показало возвращение клеток к нормальному фенотипу при последующем удалении TGFβ. На сегодня идентифицированы TGFβ1-TGFβ5. Эти белки имеют сходные аминокислотные участки.
TGFβ оказывают пролиферативные эффекты на многие мезенхимальные и эпителиальные типы клеток. При определенных условиях TGFβ демонстрирует анти-пролиферативное воздействие на эпителиальные клетки, эндотелиальные клетки, макрофаги и Т- и В- лимфоциты. Такие эффекты включают снижение секреции иммуноглобулина и подавление кроветворения, миогенеза, адипогенеза и адреналового стероидогенеза. Несколько членов семейства TGFβ являются мощными индукторами мезодермальной дифференциации в ранних эмбрионах, в частности, TGF-β и активина А.
TGFβ, в частности, TGFβ1, 2, и 3, являются мультипотентными цитокинами, которые являются важными модуляторами роста клеток, воспаления, синтеза матрикса, иммунной системы, ангиогенеза и апоптоза (Taipale et al.). Дефекты в функции TGFβ связаны с рядом патологических состояний, в том числе иммуносупрессии, ростом опухолевых клеток, фиброзом и аутоиммунными заболевания (Blobe et al.). TGFβ являются прототипами надсемейства TGFβ, которое состоит более чем из 40 членов, которые контролируют ключевые события раннего развития, структурировании, восстановления тканей и ран. TGFβ высвобождается как часть латентного комплекса, в котором цитокин не может взаимодействовать с его рецептором.
Чтобы TGFβ получил возможность передавать сигнал он должен быть освобожден от своих неактивного комплекса процессом, называемым активацией TGFβ. Латентный комплекс TGF включает в себя 3 составляющие: активный (зрелый) димер TGFβ, LAP (латентно-ассоциированный пептид) и LTBP (латентный TGFβ, связывающий белок). LAP является димером с дисульфидной связью, который представлен N-концевой частью белка-предшественника TGFβ. Зрелый белок TGFβ представляет С-концевую часть (около 25 кДа) предшественника. Связь между TGFβ и LAP протеолитически расщепляется в комплексе Гольджи, но пропептид TGFβ остается связанным с TGFβ нековалентными взаимодействиями. Комплекс TGFβ и LAP называется малым латентным комплексом (SLC). Эта ассоциация LAP и TGF придает латентность. Связывание LAP - TGFβ является обратимым и изолированные очищенные компоненты могут комбинироваться с образованием неактивного SLC. SLC и более большой комплекс называются в данном документе латентным TGFβ, так как оба являются неактивными.
Необычность свойств TGFR состоит в том, что его активность ограничивается путем превращения латентного TGFβ в активный TGFR (этот процесс называется активацией латентного TGFβ). Ткани содержат значительные количества латентных TGFβ и активация лишь небольшой части данных латентных TGFβ генерирует максимальные клеточные реакции (Annes et al. (2003) J. Cell Sci. 116:217). Латентность обеспечивается путем нековалентного взаимодействия пропептида TGFβ, которая также называют латентно ассоциированным белком (LAP). Активация происходит при расщеплении связи между зрелыми TGFβ и LAP. Латентный TGFβ, является, таким образом, белком-предшественником зрелого, активного TGFβ.После активации TGFβ связывает и сближает свои высокоаффинные рецепторы серин/треонин киназы типа I и типа II и инициирует каскад передачи сигнала.
Имеется различие между терминами "активация TGFβ" и "процессинг TGFβ". Для TGF-β, термин "процессинг TGFβ" относится к протеолитическому расщеплению связи между TGF-β и LAP. Без расщепления при любых условиях активность TGF-R не может быть обнаружена в предшественнике TGF-β. Расщепление является необходимым условием для активности TGFβ. Термин "активация TGFβ" относится к освобождению димера TGF-β от его взаимодействия с LAP. Таким образом, "процессированный" предшественник TGF-β имеет потенциал, чтобы быть активированым, то есть высвободить TGF-β, в то время как непроцессированный TGF-β не может быть активирован без первоначального расщепления (процесинга) пропептидной связи.
Некоторые молекулы были описаны как активаторы латентного TGFβ. Первый это осуществляемый за счет протеаз клеточный процесс активации, в нем несколько типов клеток преобразуют LLC, который конститутивно производится большинством клеток, в активный TGFβ протеазозависимой реакцией. Для активации латентного TGFβ требуется: а) протеаза - урокиназный активатор плазминогена (uPA), b) активация субстрата uPA - плазминогена (зимогена из протеазы плазмина), с) связывание LAP с манноза-6 (М6Р) фосфат/IGF-Il рецепторами клеточной поверхности, d) LTBP (белок, связывающий латентный TGFR), и д) трансглутаминазы, так как антитела и/или ингибиторы каждого из этих реагентов блокируют активацию латентного TGFβ. Ряд других протеаз, в том числе ММР-2, ММР-9, плазмин, кальпаин, химаза, и эластаза впоследствии были описаны как активаторы латентного TGFβ (Koli, и др. (2001)).
Второй механизм для активации латентного TGF включает в себя взаимодействие белка клеточного матрикса тромбоспондина (TSP-1) с латентным TGFβ в мульти-молекулярном комплексе, содержащем рецепторы TSP-1, а также CD36, и, в некоторых случаях, плазмин. Активация латентного TGFβ включает в себя прямое взаимодействие между TSP-1 и LAP, и включает в себя трипептид последовательности RFK, найденный в повторах TSP-1 типа 1. Этот пептид, как полагают, взаимодействуют с консервативным тетра-пептидом LSKL на амино-конце LAP, разрушая нековалентные связи между LAP и TGF-β. Тетра-пептид KRFK будет активировать латентные TGF-β m vitro и in vivo, в то время как добавление пептида LAP (LSKL) в избытке блокирует активацию латентного TGF-β. Мыши TSP-1 -/- проявляют частично перекрывающийся фенотип с мышами TGF-β -/- в отношении усиленного воспаления. Назначение пептида блокирующего LSKL мышам дикого типа вызывает патологию поджелудочной железы и легких, аналогичные наблюдаемым у животных TGF-β -/-, в то время как добавление активирующего пептида KRTK к мышам TSP-1 -/- возвращает фенотип к норме. Тем не менее, фенотип мыши TSP-1 -/- не полностью повторяет фенотип мыши TGF-β1 -/-, также фенотип TSP-1 -/- не проявляет сходство с фенотипом мышей TGFβ2 -/- или TGF-β3 -/-. Эти расхождения позволяют снова предположить, что возможны множественные и изоформ-специфичные механизмы активации латентного TGF-β.
Латентный TGF-β может быть активирован слабой кислотой (рН 4,5), которая, вероятно, дестабилизирует взаимодействия между LAP и TGF-β. Однако, за исключением особых ситуаций, например таких, когда внеклеточный компартмент образован остеокластами в процессе костной резорбции, такой рН, вероятно, редко достигается во внеклеточной среде in vivo. Таким образом, рН вряд ли будет общим механизмом для активации TGF-β.
Пропептиды TGF-β1 и β3, но не пропептид TGF-β2, содержат последовательность узнавания интегрина RGD. TGF-β1 и TGFβ3 LAP взаимодействуют с клетками, экспрессирующими интегрины ανβ4 и ανβ5. Хотя связывание латентного TGF-β с этими интегринами не приводит к активации, связывание латентного TGF-β с ανβ6 приводит к активации (Munger et al. (1999) Cell 96:319). Активация латентного TGF-β1 или β3 посредством ανβ6 требует последовательность RGD, так как мутантные формы TGF-β1 или β3, содержащие RGE, не могут быть активированы.
Интегрин ανβ8, в сочетании с МТ1-ММР, активизирует латентный TGFβ (Mu et al. (2002) J. Cell Biol. 159:493). Интегрин ανβ8 экспрессируется прежде всего в нормальном эпителии (например, в эпителии дыхательных путей), мезенхимальных клетках и нейронах тканей. Взаимодействие экспрессированного на поверхности клеток ανβ8 с латентным TGFβ в клеточном матриксе, что вызывает рекрутинг МТ1-ММР в комплекс, где протеаза расщепляет латентный TGFβ и высвобождает активный, зрелый TGFβ пептид, считается уникальным механизмом.
Биоанализ TGFβ
Для определения активации TGFβ в анализе сокультивирования, тестируемые клетки, экспрессирующие νβ8, совместно культивируют с TMLC клетками, которые являются эпителиальными клетками легкого норки, стабильно трансфицированные геном люциферазы под контролем промотора ингибитора активатора плазминогенна-1, чувствительного к TGF-β (Abe et al. (1994) Annal Biochem 216:276). TMLC клетки сильно реагируют на TGF-β и дают очень низкий фон. TMLC клетки, таким образом, могут быть использованы для сокультивирования с другими клеточными линиями или в бесклеточной фракции, для проверки на присутствие активных TGF-β с использованием люминесценции для считывания данных. Анализы проводят в присутствии или отсутствие анти-TGF-β-блокирующих антител (10 мкг/мл, 1D11, R & D Systems), анти-β8 (20 мкг/мл, 37E 1 В5) или анти-β8 (150 мкг/мл, 10D5), как описано (Abe (1994); Munger (1999).
Для измерения активного TGF-β в опухолевой ткани, равную массу опухолевой ткани измельчают и инкубируют в стерильном DME в течение 30 мин при 4°С. Супернатанты, содержащие активные TGF-β, собирают после центрифугирования (20 g) при 4°С. Осадки затем инкубируют в бессывороточной DME течение 20 мин при 80°С, чтобы активировать SLC, после чего отбирают супернатант. Супернатанты, содержащие активный или тепло-активированный (латентный) TGF-β, затем добавляют к предварительно посеянным клеткам TMLC с или без 1D11. Для анализа ингибитора протеазы, ингибиторы добавляются при начале сокультивирования. Максимальная доза каждого ингибитора определяется как наибольшая концентрация, которых не подавляет способность TMLC клеток реагировать на рекомбинантные активные TGF-β. Для измерения активности растворимых TGF-β в культивируемых клеток, клетки инкубируют в 100 мкл полной среды с или без 37Е1 или 10D5 в течение 1 ч при температуре 37°С при легким вращении. Бесклеточные супернатанты отбирают путем центрифугирования (20 g) в течение 5 мин при 4°С и затем добавляют к предварительно посеянным клеткам TMLC в присутствии или отсутствии 1D11. Для анализа растворимого рецептора, используют кондиционированную среду полученную из суточных культур клеток. Относительные единицы люциферазы определяют как активность минус фоновая активность репортерных клеток TMLC.
Антитела по настоящему изобретению
Настоящее изобретение предоставляет антитела, которые специфически связываются с интегрином ανβ8, но практически не связываются с другими интегринами (например, ανβ6, ανβ3 и т.д.). Антитела по изобретению могут связываться с конкретным эпитопом или в области эпитопа в пределах ανβ8. Эпитоп может быть конформационным (нелинейным) или неконформационным эпитопом. Такие антитела могут связываться только с β8, т.е. эпитоп находится внутри β8. Связывание антитела по изобретению может потребовать область эпитопа вне β8, например, конформационный эпитоп, или зависящий от элементов как внутри αν, так и внутри β8.
В некоторых вариантах осуществления антитело связывается с β8 и ингибирует активацию TGFR, например, по сравнению с активацией TGFβ в отсутствие антител. В некоторых вариантах осуществления антитело не уменьшает адгезию клеток, экспрессирующих ανβ8, к TGFβ, то есть антитела не уменьшают опосредованную ανβ8 адгезию клеток к TGFβ. В некоторых вариантах осуществления антитело может уменьшить связывание растворимого ανβ8 с TGFβ, по сравнению со связыванием ανβ8 при отсутствии антител. В некоторых вариантах осуществления антитела могут связываться с эпитопом на β8, находящимся в пределах SEQ ID NO:11. В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из аминокислот, R79, I85, S95, Р100, I108, Р109, R128, Н140 и F179 человеческого β8. В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из аминокислот 174, N88, I107, T110, I125, R175 или F180 человеческого β8. В некоторых вариантах эпитоп содержит, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из аминокислот, 1125, R128, R175, F179 и F180 человеческого β8. В некоторых вариантах осуществления антитело связывается с человеческим β8, но не с β8 мышей.
Сайт связывания, т.е. эпитоп, антитела, направленного против данного антигена можно определить с помощью способов, известных в данной области. Например, конкурентный анализ (например, конкурентный ELISA) может быть осуществлен с использованием антитела к известному эпитопу. Если тестовые антитела конкурируют за связывание антигена, то, вероятно они делят, по меньшей мере, часть одинакового эпитопа. Эпитоп также может быть локализован с использованием перетасовки доменов или селективного мутагенеза антигена. То есть, любая область, или любая аминокислота данного антигена могут быть перетасованы, или замещены аминокислотами или компонентами, которые, как известно, не взаимодействуют с тестовыми антителами. Если замена данной области или аминокислоты уменьшает связывание тестовых антител с замещенным антигеном по сравнению с незамещенным антигеном, то данная область или аминокислота, вероятно, содержаться в эпитопе.
Настоящее изобретение относится к антителам, которые селективно нарушают ανβ8-опосредованную активацию TGF-β (например, выход зрелых, активных TGFβ из латентного TGFβ на поверхность клетки), но, в некоторых вариантах осуществления, антитело значительно не воздействует на адгезию ανβ8 (например, на ανβ8-экспрессирующих клетках) к латентному TGFR. Некоторые антитела характеризуются высокой степенью селективности в нарушении только интегрин ανβ8-опосредованной активации TGF-β, а не свойств клеточной адгезии, что может быть нежелательно ингибировать. Некоторые антитела блокируют TGFβ активацию локально, где экспрессирует интегрин ανβ8.
Примерные антитела по изобретению имеет вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи: SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи: SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10. Антитела по настоящему изобретению также включают в себя антитела, конкурирующие за связывание с ανβ8 с антителом, имеющим вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи: SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи: SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10. Первый остаток SEQ ID NO:9 может быть либо R или Y. Предполагается, что другие консервативные замены R или Y также будет работать. Изотип антитела может быть IgG1, IgG2, IgG2a, IgG3 или IgG4.
Соответственно, антителами по настоящему изобретению может быть антитело, имеющее вариабельный участок легкой цепи либо с SEQ ID NO:3 либо с SEQ ID NO:4 и вариабельный участок тяжелой цепи либо с SEQ ID NO:1 либо с SEQ ID NO:2. В некоторых вариантах осуществления антитела настоящего изобретения имеют вариабельный участок легкой цепи из SEQ ID NO:3 и вариабельный участок тяжелой цепи SEQ ID NO:1. В некоторых вариантах осуществления антитела по настоящему изобретению имеют вариабельный участок легкой цепи SEQ ID NO:4 и вариабельный участок тяжелой цепи из SEQ ID NO:2. Двумя образцами антител являются 37Е1 и 37Е1В5.
Антитела по настоящему изобретению могут быть поликлональными или моноклональными. Поликлональные сыворотки, как правило, содержат смешанные популяции антител, специфически связывающиеся с несколькими эпитопами по всей длине ανβ8. Тем не менее, поликлональная сыворотка может быть специфичной для определенного сегмента ανβ8. Примерные антитела представляют собой химерные, гуманизированные (см. Queen и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 10029-10033 (1989) и WO 90/07861, US 5,693,762, US 5,693,761, US 5,585,089, US 5,530, 101 and Winter, US 5,225,539), или человеческие (Lonberg и др., WO 93/12227 (1993); US 5,877,397, US 5,874,299, US 5,814,318, US 5,789,650, US 5,770,429, US 5,661,016, US 5,633,425, US 5,625,126, US 5,569,825, US 5,545,806, Nature 148, 1547-1553 (1994), Nature Biotechnology 14, 826 (1996), Kucherlapati, WO 91/10741 (1991)) EP 1481008, Bleck, Bioprocessing Journal 1 (Sept/Oct. 2005), US 2004132066, US 2005008625, WO 2004072266, WO 2005065348, WO 2005069970, and W02006055778. В некоторых вариантах осуществления антитела, являются гуманизированными или химерными формами 37Е1, или 37Е1В5. Человеческий изотип IgGI, IgG2, IgG3 или IgG4 может быть в гуманизированных или химерных антителах. Некоторые антитела специфически связываются с ανβ8 с аффинностью связывания большей или равной приблизительно 107, 108, 109, 1010, 10 или 10-12 М-1.
Антагонисты интегрина ανβ8
Кроме того, предполагается, что могут быть использованы различные антагонисты интегрина ανβ8, природные или синтетические. Такие антагонисты включают, например, пептиды или малые молекулы. Антагонисты могут включать, в себя, например, фармацевтические препараты, терапевтические средства, экологические, сельскохозяйственные, промышленные агенты, загрязняющие вещества, космецевтики, медикаменты, органические соединения, липиды, глюкокортикоиды, антибиотики, пептиды, белки, сахара, углеводы и химерные молекулы. В некоторых вариантах осуществления антагонист интегрина ανβ8 является пептидом, например, TGFβ1-специфичным пептидом например, TGFβ3-специфичным пептидом. Примеры TGFβ-специфичных пептидов включают, но этим не ограничены, пептиды, содержащие GRRGDLATIH (Mu et al. (2002) Journal of Cell Biology 157:493-507), и пептид, содержащий HGRGDLGRLK. В некоторых вариантах осуществления антагонист снижает активацию TGFR, но практически не ингибируют аура-опосредованную адгезию клеток к TGFβ.
Показания
Предполагается, что анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для выявления, лечения или профилактики хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и астмы.
Кроме того, предполагается, что анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для выявления, лечения или предотвращения воспалительных аутоиммунных заболеваний мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующих заболеваний (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспаления, болезни почек, или глиомы.
Кроме того, предполагается, что анти-ανβ8 антагонисты, анти- ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для выявления, лечения или предотвращения артрита.
Кроме того, предполагается, что анти-ανβ8 антагонисты, анти- ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для выявления, лечения или предотвращения различных фиброзных расстройств, таких как фиброз дыхательных путей, идиопатический легочный фиброз, неспецифическая интерстициальная пневмония, постинфекционный фиброз легких, диффузное альвеолярное повреждения, связанный с фиброзом легких коллагеноз, индуцированный лекарствами фиброз легких, силикоз, фиброз легких, связанный с асбестом, дыхательный бронхиолит, дыхательный бронхиолит ассоциированный с интерстициальным заболеванием легких, десквамативный интерстициальный фиброз, криптогенная пневмония, хроническая аллергическая пневмония, медикаментозный фиброз легких, фиброз почек, фиброз печени.
Кроме того, предполагается, что анти-ανβ8 антагонисты, анти- ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, композиции и способы по настоящему изобретению могут быть использованы для выявления, лечения или предотвращения аденокарциномы, плоскоклеточного рака, рака молочной железы и роста раковой опухоли и метастазов.
Диагностические композиции
Обнаруживаемая группа может быть связана с антителом по настоящему изобретению, либо непосредственно, либо косвенно, например, через хелатор или линкер. Меченые антитела могут быть введены индивиду для определения применимости намеченной терапии. Например, меченые антитела могут быть использованы для обнаружения плотности интегрина β8 внутри пораженной области, где плотность, как правило, высока по сравнению с непораженной тканью. Меченые антитела могут также указывать, на доступность пораженной области для терапии. Таким образом, на основании результатов визуализации пациентам может быть назначена терапия. Анатомические характеристики, такие, как определение точных границ раковой опухоли, может быть осуществлено с использованием стандартных методов визуализации (например, СТ (компьютерной томографии (КТ)), MRI (магнитно-резонансной томографии (МРТ)), PET (позитронно-эмиссионной томографии ПЭТ) и др.
Диагностическое средство, содержащее антитела по настоящему изобретению, может включать в себя любое диагностическое средство известное в данной области, как это предусмотрено, например, в следующих источниках: Armstrong и др., Diagnostic Imaging, 5th Ed., Blackwell Publishing (2004); Torchilin, V.P., Ed., Targeted Delivery of Imaging Agents, CRC Press (1995); Vallabhajosula, S., Molecular Imaging: Radiopharmaceuticals for PET and SPECT, Springer (2009). Диагностическое средство может быть обнаружено с помощью различных способов, в том числе с помощью средства, обеспечивающего и/или усиливающего обнаруживаемый сигнал. Обнаруживаемые сигналы включают, но не этим не ограничены, гамма-излучающие, радиоактивные, эхогенные, оптические, люминесцентные, абсорбирующие, магнитные или томографические сигналы. Способы визуализации диагностического средства могут включать, но не этим не ограничены, SPECT (однофотонную эмиссионную компьютерную томографию), магнитно-резонансное исследование MRI, оптическую визуализацию, позитронно-эмисионную томографию PET, компьютерной томографию (КТ), визуализацию в рентгеновских лучах, визуализацию в гамма-лучах, и тому подобное. Термины "обнаруживаемый агент", "обнаруживаемый фрагмент", "метка", "визуализирующий агент" и подобные термины настоящем документе использованы в качестве синонимов.
Радиоизотопы могут быть включены в диагностические средства, описанные в настоящем документе, и могут включать в себя радионуклиды, испускающие гамма-лучи, позитроны, бета- и альфа- частицы и рентгеновское излучение. Подходящие радионуклиды включают в себя, но этим не ограничены: 225Ас, 72As, 211At, 11В, 128Ва, 212Bi, 75Br, 77Br, 14C, 109Cd, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 18F, 67Ga, 68Ga, 3H, 166Ho, 123I, 124I, 125I, 130I, 131I, 111In, 177Lu, 13N, 150, 32P, 33P, 212Pb, 103Pd, 186Re, 188Re, 47Sc, 153Sm, 89Sr, 99mTc, 88Y and 90Y. В некоторых вариантах осуществления радиоактивные вещества могут включать в себя 111In-DTPA, 99mTc(СО)3-ОТРА, 99mTc(CO)3-ENPy2, 62/64/67Cu-ТЕТА, 99mTc(CO)3-IDA, и 99mTc(CO)3-триамины (циклические или линейные). В других вариантах осуществления агенты могут включать DOTA (1,4,7,10-тетрааза-циклододекан-тетрауксусную кислоту) и его различные аналоги с 11In, 177Lu, 153Sm, 88/90Y, 62/64/67Cu, или 67/68Gu. В некоторых вариантах осуществления, наночастицы могут быть помечены включением липидов прикрепленных к хелатам, таким как ВТРА(диэтилентриаминпентаацетат)-липиды, как это предусмотрено в следующих источниках: Phillipsn др., Wiley Interdisciplinary Reviews: Nanomedicine and Nanobiotechnology, 1 (I): 69-83 (2008); Torchilin, V.P. & Weissig, V., Eds. Liposomes 2nd Ed.: Oxford Univ. Press (2003); Elbayoumi, T.A. & Torchilin, V.P., Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging 33: 1196-1205 (2006); Mougin-Degraef M. и др., Int'l. J. Pharmaceutics 344: 110-117(2007).
В некоторых вариантах осуществления диагностический агент может включать в себя, хелаторы, связывающиеся, например, с ионами металла, используемые для различных диагностических методов визуализации. Примеры хелаторов включают в себя, но этим не ограничены: этилендиаминтетрауксусную кислоту (EDTA), 4-(1,4,8,11-тетраазациклотетрадек-1-ил-метил бензойную кислоту (СРТА), циклогександиаминтетрауксусную кислоту (CDTA), этиленгликольтетрауксусную кислоту (EGTA), диэтилентриаминпентауксусную кислота (DTPA), лимонную кислоту, этилендиамингидроксиэтилтриацетат (HEDTA), иминодиуксусную кислоту (IDA), триэтиленгликольтетраамингексаацетат (ТТНА), 1,4,7, 10-тетраазациклодо декан-1,4,7,10-тетра(метиленфосфорную кислоту) (DOTP), 1,4,8,1,1-тетраазациклотетрадекан-1,4,8,11-тетраацетат (ТЕТА), 1,4,7,10-тетраазациклодо декан-1, 4,7,10-тетраацетат (DOTA), N1,N1-бис-(пиридин-2-ил-метил)этан-1,2-диамин (ENPy2) и их производные.
В некоторых вариантах диагностический агент может быть связан с вторичным связывающим лигандом или ферментом (ферментной меткой), которые будут генерировать окрашенный продукт при контакте с хромогенным субстратом. Примеры подходящих ферментов включают уреазу, щелочную фосфатазу, пероксидазу хрена и оксидазы глюкозы. Вторичные связывающие лиганды включают в себя, например, биотин и авидин или стрептавидин или соединения, известные в данной области.
В некоторых вариантах осуществления, диагностические средства могут включать в себя оптические агенты, такие как флуоресцентные агенты, фосфоресцирующие агенты, хемилюминесцентные агенты, и тому подобное. Многочисленные агенты (например, красители, датчики, метки, или индикаторы) известны в данной области и могут быть использованы в настоящем изобретении. (См., например, Invitrogen, The Handbook - A Guide to Fluorescent Probes and Labeling Technologies, Tenth Edition (2005)). Флуоресцентные агенты могут включать в себя различные органические и/или неорганические малые молекулы или различные флуоресцентные белки и их производные. Например, флуоресцентные агенты могут включать, но этим не ограничены, цианины, фталоцианины, порфирины, индоцианины, родамины, феноксазины, фенилксантены, фенотиазины, феноселеназины, флуоресцеины, бензопорфирины, сквараины, дипирролопиримидоны, тетрацены, хинолины, пиразины, коррины, соли крокониевой кислоты, акридоны, фенантридины, родамины, акридины, антрахиноны, аналоги халькогенпирилиевых солей, хлорины, нафталоцианины, метиновых красители, индолиновые красители, азосоединения, азулены, азаазулены, трифенилметановые красители, индолы, бензоиндолы, индокарбоцианины, бензоиндокарбоцианины, и производные BODIPY™ (флуоресцентные красители класса бор дипиррометен).
Способы введения и технология приготовления
Анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антител или иммуноконъюгаты вводят пациенту в соответствии с известными способами, такими как внутривенное введение, например, в виде болюса или непрерывной инфузии в течение некоторого периода времени, внутримышечно, внутрибрюшинно, интрацереброспинально, подкожно, внутрисуставно, интрасиновиально, интратекального, перорального, местно (например, трансдермально), или ингаляторно. Внутривенное или подкожное введение антител является предпочтительным. Введение может быть местным или системным.
Композиции для введения будут, как правило, содержать агент, как описано выше (например, анти-ανβ8 антагонист, анти-ανβ8 антитело и иммуноконъюгат), растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, предпочтительно в водном носителе. Могут быть использованы различные водные носители, например, буферный солевой раствор и т.п. Эти растворы являются стерильными и в целом свободны от нежелательных веществ. Данные композиции могут быть стерилизованы обычными, хорошо известными методами стерилизации. Композиции могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, необходимые для приближения к физиологическим условиям, такие как корректирующие рН и буферные агенты, агенты коррекции токсичности такие как, например, ацетат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция, лактат натрия и т.п. Концентрация активного вещества в этих препаратах может широко варьироваться, и будет выбрана в первую очередь на основе объемов жидкости, вязкости, веса тела и т.п., в соответствии с конкретным выбранным способом введения и потребностей пациента.
Таким образом, типичная фармацевтическая композиция для внутривенного введения будет варьировать в зависимости от вводимого агента. Методы получения парентеральных композиций будут известны или очевидны специалистам в данной области техники и описаны более подробно в таких изданиях, Remington's Pharmaceutical Science, 15th ed., Mack Publishing Company.
Фармацевтические композиции могут быть введены в различных стандартных лекарственных формах в зависимости от способа введения. Например, стандартные лекарственные формы для перорального введения включают, но не этим не ограничены, порошки, таблетки, пилюли, капсулы и таблетки. Следует признать, что антитела при пероральном введении, должны быть защищены от переваривания. Это обычно достигается либо путем комплексообразования молекул с составом, чтобы сделать их устойчивыми к кислотному и ферментативному гидролизу, или упаковкой молекул в надлежащий устойчивый носитель, такой как липосомы или защитный барьер. Средства защиты агентов от переваривания хорошо известны в данной области.
Фармацевтические препараты, в частности, антитела, иммуноконъюгаты и ингибиторы для использования по настоящему изобретению могут быть получены путем смешивания антитела, имеющего требуемую степень чистоты, с возможными фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями или стабилизаторами. Такие препараты могут быть лиофилизированными препаратами или водными растворами. Приемлемые носители, наполнители или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях. Приемлемыми носителями, наполнителями или стабилизаторами могут быть ацетаты, фосфаты, цитраты и другие органические кислоты; антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота), сохраняющие полипептиды с низкой молекулярной массой; белки, такие как сывороточный альбумин или желатин, или гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатообразователи, а также ионные и неионные поверхностно-активные вещества (например, полисорбат); солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, цинк-белковые комплексы), и/или неионные поверхностно-активные вещества. Антитела могут быть приготовлены в концентрации от 0,5-200 мг/мл, или между 10-50 мг/мл.
Препарат может также содержать дополнительные активные соединения, в том числе, химиотерапевтические препараты, цитостатики, цитокины, ингибирующие рост агентов, и антигормональный агент. Активные ингредиенты могут также быть приготовлены из препаратов с замедленным высвобождением (например, полупроницаемой матрицы из твердых гидрофобных полимеров (например, из сложных полиэфиров, гидрогеля (например, поли-2-гидроксиэтилметакрилат), или поливинилового спирта), полилактиды. Антитела и иммуноконъюгаты также может быть помещены в микрокапсулы, полученные, например, путем коацервации или межфазной полимеризации, например, гидроксиметилцеллюлозы или желатиновые микрокапсулы и полиметилметацилатные микрокапсулы, соответственно, в коллоидные системы доставки лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии.
Композиции могут быть введены для терапевтических или профилактических процедур. При терапевтическом применении композиции вводят пациенту, страдающему от заболевания (например, рак, фиброз, ХОБЛ, артрит и др.) в "терапевтически эффективной дозе". Количества, эффективные для данной цели будут зависеть от тяжести заболевания и общего состояния здоровья пациента. Один или несколько введений композиции могут быть назначены в зависимости от дозировки и частоты по мере необходимости и переносимости пациентом. "Пациент" или "объект" в контексте настоящего изобретения включает в себя как человека, так и животных, в частности млекопитающих. Таким образом, данные способы применимы как к терапии человека и ветеринарному применению. В предпочтительном варианте осуществления пациент является млекопитающим, предпочтительно приматом, а в наиболее предпочтительном варианте больным человеком. Другие известные способы лечения рака могут быть использованы в сочетании со способами по настоящему изобретению. Например, композиции для использования в соответствии с изобретением могут также быть использованы для нацеливания на клетку или для повышения чувствительности клетки к другим противораковым терапевтическим агентам, таким как 5-FU (фторурацил), винбластин, актиномицин D, цисплатин, метотрексат, и т.п.
Комбинированное назначение предполагает одновременное, с использованием отдельных композиций или одной фармацевтической композиции, или последовательное введение в любом порядке, в котором предпочтительно есть период времени, когда оба (или все) активные вещества одновременно оказывают свое биологическое действие.
Идентифицированные молекулы и соединения способны прямо или косвенно модулировать экспрессию и/или функции ανβ8, что может быть полезно в уменьшении активации TGFβ у человека. Анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты могут быть введены самостоятельно или совместно в сочетании с традиционной химиотерапией, лучевой терапией или иммунотерапией, так же как и принятыми на данный момент терапевтическими способами.
Композиции, пригодные для перорального введения могут состоять из (а) жидких растворов, например, представлять собой упаковку с эффективным количеством нуклеиновой кислоты, суспендированной в разбавителе, таком как вода, физиологический раствор или PEG-400 (полиэтиленгликоль), (b) капсул, саше или таблеток, каждая из которых содержит заданное количество активного ингредиента в виде жидкости, твердого вещества, гранул или желе; (с) суспензии в соответствующей жидкости, и (g) подходящие эмульсии. Таблетированные формы могут включать в себя один или несколько ингредиентов, выбранных из лактозы, сахарозы, маннита, сорбита, фосфата кальция, кукурузного крахмала, картофельного крахмала, микрокристаллической целлюлозы, желатина, коллоидного диоксида кремния, талька, стеарата магния, стеариновой кислоты и других эксципиентов, красителя, наполнителя, связующего вещества, разбавителя, буферного агента, увлажняющего агента, консерванта, ароматизатора, красителя, разрыхлителя, и фармацевтически совместимого носителя. Формы пастилок могут содержать активный ингредиент в ароматизаторе, например, в сахарозе, а также пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик эмульсии, гели и т.п., содержащих в дополнение к активному ингредиенту, носители, известные в данной области.
Выбранные соединения, отдельно или в комбинации с другими подходящими компонентами, могут быть сделаны в виде аэрозольных препаратов (то есть, они могут "распыляться") для введения путем ингаляции. Аэрозольные препараты могут быть помещены в находящийся под давлением приемлемый пропеллент, такой как дихлордифторметан, пропан, азот, и т.п.
Подходящие композиции для ректального введения включают, например, суппозитории, которые состоят из нуклеиновой кислоты, упакованной в основание суппозитория. Подходящие основы для суппозиториев, включают природные или синтетические триглицериды или парафиновые углеводороды. Кроме того, также можно использовать желатиновые ректальные капсулы, которые состоят из комбинации выбранного соединения и основы, включающей, например, жидкие триглицериды, полиэтиленгликоли, и предельные углеводороды.
Композиции, пригодные для парентерального введения, такие как, например, внутрисуставные (в сустав), внутривенные, внутримышечные, внутриопухолевые, внутрикожные, внутрибрюшинные, и подкожные, включают водные и безводные, изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические, и растворенные вещества, которые делают препарат изотоническим по отношению к крови предполагаемого реципиента, и водные и безводные стерильные суспензии, которые могут включать в себя суспендирующие агенты, растворители, загустители, стабилизаторы и консерванты. В практике настоящего изобретения, композиции могут быть введены, например, путем внутривенной инфузии, перорально, местно, внутрибрюшинно, интравезикально или интратекально. Парентеральное введение, пероральное введение, и внутривенное введение являются предпочтительными методами введения. Композиции соединений могут быть представлены в однодозовой форме или в герметичных контейнерах для нескольких доз, таких как ампулы и флаконы.
Растворы для инъекций и суспензий могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток того типа, как было описано ранее. Клетки, траснформированные нуклеиновыми кислотами для терапии ex vivo также можно вводить внутривенно или парентерально, как описано выше.
Фармацевтический препарат предпочтительно находится в форме разовой дозы. В такой форме препарат разделен на стандартные дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Лекарственная форма может представлять собой упакованный препарат, пакет, содержащий дискретные количества препарата, такие как упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, однодозовая форма может представлять собой капсулу, таблетку, саше или пастилку, или это может быть соответствующее число любого из них в упакованном виде. Композиция может, при желании, также содержать и другие совместимые терапевтические агенты.
Предпочтительные фармацевтические препараты доставляют один или более анти-ανβ8 антагонистов, анти-ανβ8 антител или иммуноконъюгатов, возможно в сочетании с одним или несколькими химиотерапевтическими агентами или иммунотерапевтическими агентами, с замедленным высвобождением препарата.
При терапевтическом применении для лечения рака, анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты, используемые в фармацевтическом способе по настоящему изобретению, вводят в начальной дозе около 0,001 мг/кг до примерно 1000 мг/кг в сутки. В дневном диапазоне доз могут быть использованы около 0,01 мг/кг до 500 мг/кг, или примерно 0,1 мг/кг до 200 мг/кг, или примерно 1 мг/кг до 100 мг/кг, или примерно 10 мг/кг около 50 мг/кг. Дозировка, однако, может варьироваться в зависимости от потребностей пациента, тяжести состояния, которое лечат, и используемого соединения. Например, дозировки могут быть определены эмпирически с учетом типа и стадии рака, диагностированного у конкретного пациента. Доза, вводимая пациенту в контексте настоящего изобретения, должна быть достаточной для осуществления благотворного терапевтического ответа у пациентов с течением времени. Размер дозы также будет определяться наличием, характером и степенью любых неблагоприятных побочных эффектов, сопутствующих назначению отдельного вектора, или типа трансдуцированных клеток, у отдельного пациента. Определение правильной дозировки для конкретной ситуации находится в компетенции практикующего врача. Как правило, лечение начинают с меньших доз, которые меньше, чем оптимальная доза данного соединения. После этого доза увеличивается малыми приращениями до достижения оптимального эффекта при данных обстоятельствах. Для удобства, общая суточная доза может быть разделена и вводится порциями в течение дня, если это необходимо.
Фармацевтические препараты (например, анти-ανβ8 антагонисты, анти-ανβ8 антитела или иммуноконъюгаты) для использования согласно настоящему изобретению, как правило, вводят млекопитающим, включая людей и других млекопитающих. Другие млекопитающие, которых можно лечить заявленными способами, включают в себя домашних животных (например, собак, кошек, зайцеобразных, мышей и других грызунов,) и сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, лошадей, овец, свиней).
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры представлены только для целей иллюстрации, но не для ограничения заявленного изобретения.
Пример 1. Исследование роли интегрина ανβ8 в ремоделировании дыхательных путей
Трансформирующий фактор роста В (TGF-β), является цитокином, участвующим в воспалительном и фиброзном ответе. Ранее нами было показано, что IL-1β повышает экспрессию β8, и что экспрессия β8 увеличивается в дыхательных путях пациентов с ХОБЛ. Тем не менее взаимодействие β8, TGF-β и IL-1β недостаточно изучено in vivo, что привело нас к разработке мышиной модели β8-опосредованного ремоделирования дыхательных путей. Здесь мы показываем, что индуцированная IL-1-β, β8-опосредованная активация TGF-β играет решающую роль в ремоделировании дыхательных путей.
Роль β8 в качестве посредника ремоделирования дыхательных путей оценивали путем делеции β8 с помощью Cre/LoxP системы, используя интратрахеальное введение аденовирусного IL-1β в качестве модели для воспаления. Были использованы 6- и 9-недельные мыши с одной аллелью интегрина β8 фланкированного loxP сайтами и одним нокаутированным аллелем (Floxed/-) на генетическом фоне С57В1/6. Либо аденовирус с человеческим IL-1β (Ad-hiL-1β), или контрольный аденовирус вводили внутритрахеально с или без Ad-Cre. Кроме того, мыши, экспрессирующие гибридную рекомбиназу Cre-ER(T) под контролем промотора Коллагена Iα2 использовались, чтобы показать, что фибробласты играют важную роль в ανβ8-опосредованной активации TGF-β в индуцированном блеомицином фиброзе легких, индуцированном овальбумином ремоделировании дыхательных путей, и Ad-IL1β-индуцированном ремоделировании дыхательных путей. Изменения в морфометрии дыхательных путей оценивали гистологически, а анализ экспрессии генов ряда воспалительных цитокинов в различные моменты времени после введения Ad-IL1β, обнаружил последовательную индукцию генов, которые определяют воспалительный ответ.
У модели с условным нокаутом β8, β8 необходим для индуцированного человеческим IL-1β временного воспаления дыхательных путей и фиброза. Добавление человеческого IL-Iβ приводит к β8-опосредованной активации TGF-β, индукции мышиных генов сс12 и сс120, рекрутингу дендритных клеток, и инициированию и поддержанию адаптивного иммунного ответа.
Эти данные показывают, что условное исключение интегрина β8 привело к снижению воспаления и фиброзного ответа как на Ad-hiL-Iβ, так и на овальбумин, что привело к защите дыхательных путей от ремоделирования. Мы определили ключевую роль IL-1β - индуцированной или овальбумин-индуцированной, β8-опосредованной активации TGF-β и в ремоделировании дыхательных путей, и для блеомицин-индуцированного острого повреждения легких.
Пример 2. Антитело 37Е1
Мы создали мышиное моноклональное антитело (название клона 37Е1, изотип IgG2a), который избирательно блокирует взаимодействие человеческого интегрина βνβ8 с его лигандом, трансформирующим фактором роста β (TGF-β). TGF-β повсеместно экспрессируется у млекопитающих в трех изоформах (TGF-β1-3), но сохраняется в неактивной форме из-за нековалентного взаимодействия со своим пропептидом - связанным с латентностью доменом TGF-β (LA). Интегрин ανβ8 связывается с LAP из TGF-β и опосредует активацию TGF-β1 и 3. Исследования условных генетических делеций или генетических делеций в зародышевой линии показали, что интегрин ανβ8-опосредованная активация TGF-β имеет важное значение для активации TGF-β in vivo, и, следовательно, ανβ8 является "посредником" функции TGF-β. В частности, интегрин ανβ8-опосредованная активация TGF-β, вероятно, участвуют в патогенезе хронической обструктивной болезни легких, фиброза легких, фиброза почек, воспалительных аутоиммунных заболеваний мозга (рассеянного склероза и димиелинизирующих заболеваний), нейровоспаления, болезни почек, и роста раковой опухоли и метастазов. В целом, интегрины являются молекулами адгезии, которые опосредуют прикрепление клеток к белкам внеклеточного матрикса. Клон 37Е1 отличается тем, что он избирательно нарушает ανβ8-опосредованную активацию TGF-β, но не связывание ανβ8 с иммобилизованным или секретированным TGF-β. Это дает высокую степень избирательности в нарушении только интегрин ανβ8-опосредованной активации TGF-β, а не свойств клеточной адгезии, которые весьма нежелательно ингибировать. Кроме того, глобальная инактивации TGF-β может иметь нежелательные побочные эффекты, так как TGF-β является одним из важнейших эпителиальных эффекторов гомеостаза и иммунным эффектором.
Пример 3. Антитело 37Е1В5
Мы сконструировали вариабельные области тяжелых и легких цепей клона 37Е1, и использовали случайный мутагенез и рекомбинирование цепей в системе дрожжевого дисплея, чтобы повысить аффинность антител. Мы определили конкретные аминокислотные замены, которые придают большую аффинность к тем же антигенам, и мы классифицировали эти мутации в соответствии с функцией. Один из данных мутантов был назван 37Е1В5. Он проявляет повышенную аффинность in vitro и более высокую эффективность в подавлении интегрин-ανβ8-опосредованной активации TGF-β в культивируемых клетках. Эффективная терапевтическая доза антител 37Е1 В5 in vitro находится в пикомолярном диапазоне. Для лучшего диагностического и терапевтического применения, мы создали три версии 37Е1В5: мышиный IgG1, мышиный IgG2a, и частично гуманизированный IgG1. Все были произведены в трансформированных клетках СНО.
Пример 4. Создание трансгенных мышей ITGB8 ВАС
Мы создали трансгенных мышей с гуманизированным ВАС, которые экспрессируют человеческий β8 и скрестили их с мышами β8 ko, чтобы избавиться от летальных эффектов удаления мышиного интегрина ανβ8. Эта гуманизированная мышь будет использоваться для проверки токсичности и эффективности высокоаффинных клонов в моделях заболеваний легких, мозга, печени и почек.
Клон RP 11-431K20, который содержит 72315 5' и 30,683 3' соответствующих 5' и 3' фланкирующих областей гена ITGB8 был получен в виде бактериальной культуры (научно-исследовательский институт детской больницы Окленда научно-исследовательский институт, Окленд, Калифорния). На чашки (LB с хлорамфениколом, 12,5 мкг/мл) штрихом нанесли культуру и отобрали колонии с помощью PCR колоний с использованием сконструированных праймеров, направленных на 5' и 3' концы ВАС. Последовательность была подтверждена на 5' и 3' концах, и в областях 5' UTR - первый интрон, 9-й экзон - 9-й интрон и 10-й экзон/интрон. Отдельные колонии выросли и были выделена плазмидная ДНК ВАС (система NucleoBond). Плазмиды были линеаризованы Pi-See (NEB), очищены на колонке NAP5 и подвергнуты электрофорезу в пульсирующем поле, чтобы подтвердить концентрацию и целостность ДНК. ДНК вводили в эмбрионы FVB/N в UCSF (Калифорнийский Университет, Сан-Франциско) Раковый Центр Трансгенных Услуг. Из более чем двухсот инъецированных эмбрионов, были получены 24 мыши, из которых 4 были идентифицированы как основатели с помощью анализа ДНК, путем tail-PCR с праймерами к 5' и 3' концам ВАС.
Три из этих линий (В, С и D), наследуют материал зародышевой линии. Линии В, С, D и были скрещены с мышами itgb8 C57B/6, чтобы иметь один itgb8 с нокаутом аллели. F2 поколение было скрещено для получения ITGB8 ВАС tg мышей на itgb8 -/- фоне.
Эти мыши (линия В, С, и D) не проявляли фенотипические аномалии на 3-м или 6-м месяцах жизни. Эти результаты показывают, что все необходимые регуляторные элементы содержаться выше или ниже элемента, содержащегося в ВАС RP11-431K20 чтобы обеспечить соответствующую экспрессию в ткани, чтобы избежать летального фенотипа itgb8 -/- мышей. Эти мыши также обеспечивают экспериментальную систему для определения биомаркеров, дальнейшего изучения механизмов болезни in vivo, моделирования заболеваний человека, и тестирования эффектов терапии направленной против ανβ8-опосредованной TGF-β активации.
Пример 5. Нейтрализация анти-интегрина β8 снижает Col 1
Увеличение продуцирования внеклеточного матрикса (ЕСМ) и повышение сократительной способности фибробластов являются отличительными чертами фиброзных ответов, что наблюдается как утолщение стенок дыхательных путей, возрастание коллагена типа 1 (Col 1) и повышение SA (αSMA), которые являются ключевыми биохимических маркерами данного ответа. Для оценки вклада аутокринной ανβ8-опосредованной активации TGF-β в фенотип профибротических фибробластов, мы использовали нейтрализующие анти-β8. Аутокринная ανβ8-опосредованная активация TGF-β влияет на фенотип миофибробластов, поскольку обработка фибробластов дыхательных путей β8 блокирующими антителами ингибировала αSMA экспрессию и секрецию Col 1. Совместное культивирование фибробластов дыхательных путей с плоскоклеточными метапластическими бронхиальными эпителиальными клетками человека привела к увеличению транскрипции Col 1 и синтезу белка фибробластами дыхательных путей. Возросший синтез коллагена был зависим от IL-1β и от фибробластов β8. Увеличение экспрессии Col 1, индуцированное совместным культивированием с плоскоклеточными метапластическими бронхиальными эпителиальными клетками человека может быть почти полностью подавлено лечением путем совместного культивирования с IL-1 RA, или трансфекцей фибробластов дыхательных путей с миРНК β8.
Пример 6. Характеристика эпитопа 37Е1В5
Конструкции химерного интегрина β8, в которых поменяли мышиные последовательности на человеческий ITGB8, были использованы для локализации эпитопа, связывающего 37Е1В5. Эпитоп был локализован путем связывания антитела, окрашивания клеточной поверхности, и детекции с помощью проточной цитометрии. Эпитоп 37Е1 В5 заключен внутри аминокислот 74-180 человеческого интегрина β8. 37Е1В5 связывается с человеческим, а не с мышиным β8. Таким образом, по меньшей мере, одна из 9 неконсервативных аминокислотных различий или из 7 незначительных аминокислотных различий (обозначаемые как + в средней линии последовательности) входят в связывающий эпитоп. Эти области отражают часть того, что известно в данной области, как Psi, гибридная и альфа-1-спираль Бета-1 домена субъединицы интегрина β8, находящаяся на поверхности молекулы.
В SEQ ID NO:11 представлена часть человеческого интегрина β8, которая включает в себя эпитоп 37Е1В5 (аминокислоты 74-180). В SEQ ID NO:12 представлена гомологичная мышиную последовательность, которая не связывается с антителом 37Е1В5. R в положении 140 мышиной последовательностей является полиморфной, и также может быть Н.
В дальнейшем мы выполнили исследование по замене домена внутри данной области, заменив мышиные последовательности на человеческие, чтобы определить, какая аминокислота(ы) включены в эпитоп 37Е1В5. Мы обнаружили, что замена мышиных аминокислот 125-180 интегрина β8 значительно уменьшает связывание 37Е1В5. Таким образом, эпитоп включает в себя, по меньшей мере, одну аминокислоту, выбранную из 1125, R128, R175, F179 и F180 человеческого интегрина β8.
Пример 7. Экспрессия интегрина β8 в фибробластах ХОБЛ
Мы обнаружили, что экспрессия интегрина β8 возрастает в фибробластах легких человека у пациентов с ХОБЛ, как показали окрашивания тканей в первичной культуре. Кроме того, экспрессия интегрина β8 значительно возрастает в фибробластах, выделенных у больных с идиопатическим легочным фиброзом по сравнению с фибробластами обычных пациентов. Мы также обнаружили, что ХОБЛ фибробласты имеют повышенную IL-1β-зависимую экспрессию белка интегрина ανβ8 по сравнению с фибробластами нормальных легких. Эти данные показывают, что ανβ8 является одновременно нижестоящей мишенью, и медиатором патологических IL-1β эффектов.
Антитела 37Е1В5 могут быть использованы в терапевтических и диагностических целях при заболеваниях, где экспрессируется интегрин β8, и IL-1β и/или TGF-β играют патологическую роль.
Пример 8. Антитело, нейтрализующее интегрин β8, уменьшает индуцированное воспаление дыхательных путей
Мы создали три линии трансгенных мышей ВАС с использованием человеческого клона ВАС RP11-431К20. Эти мыши были выведены с одной функционирующей аллелью мыши itgb8 для получения поколения мышей F1 с человеческим ITGB8 и одной функциональной копией мышиной itgb8. Эти мыши были скрещены для получения поколения F2, в котором были получены жизнеспособные ВАС ITGB8, то есть мыши itgb8-/- с человеческой копией гена, демонстрирующие избавление от летальности itgb8-/-.
Эти мыши были использованы, чтобы вызвать ремоделирование дыхательных путей с использованием интратрахеальной модели доставки аденовирусной-IL-lp. В этой модели индуцированного аденовирусной-IL-1β воспаления стенки дыхательных путей, устойчивое ремоделирование дыхательных путей с иммунологическим профилем сходно с человеческой хроническая обструктивной болезнью легких и является воспроизводимо индуцированным.
Мы обнаружили, что антитела 37Е1В5, в дозе 7 мг/кг, что значительно блокируют воспаление дыхательных путей, при значительном снижении числа нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости. Гистологически воспаление и фиброз стенки дыхательных путей значительно снижается посредством 37Е1В5. Эти данные дополняют другие данные, показывающие, что фибробласт-специфичные делеции itgb8 могут существенно ингибировать индуцированное аденовирусом-IL-1β ремоделирование дыхательных путей.
Кроме того, мы обнаружили, что аллергическое ремоделирование дыхательных путей (овальбумин-индуцированное воспаление дыхательных путей, фиброзная и мукозная метаплазии), значительно уменьшается у мышей с фибробласт-специфичной делецией itgb8. Аллергическая модель также зависит и от IL-1β и от TGF-β. Эти данные свидетельствуют о ведущей роли itgb8 в усилении патологического врожденного и адаптивного иммунного ответа, где участвуют IL-1β и TGF-β. IL-1β приводит к увеличению интегрина β8 в разных типах клеток, включая фибробласты из дыхательных путей и легких, и астроцитах. Эта индуцированная IL-1β экспрессия интегрина β8 наблюдается и у мышей и у человека.
Пример 9. Человеческие суставные хондроциты экспрессируют интегрин ανβ8
Взрослый суставной хрящ был взят из суставного пространства колена у пациента, проходящего элективное лечение колена при хроническом остеоартрите. Первичные хондроциты были выращены до 70% конфюэнтности затем определялась экспрессия рецепторов интегрина путем окрашивания клеток и проточной цитометрией. Были использованы антитела anti-β8 (37Е1В5), и анти-β6 (Е7Р6). Стойкое окрашивание было обнаружено с 37Е1В5, а с Е7Р6 окрашивания не было. Первичные хондроциты были совместно культивированы с TMLC - репортерными клетками для TGF-β (Annes и др. (2004) J. Cell Biol. 165:723) в TGF-β биоанализе в присутствии или отсутствии анти-β8 (37Е1 В5) или нейтрализующих анти-β6. Anti-p8 надежно блокировали активацию TGF-β, в то время как анти-β6 не дали такого эффекта.
Результаты показывают не только, что ανβ8 о экспрессируется в хондроцитах, но и что эта экспрессия приводит к активации TGFβ. Таким образом, ингибирование ανβ8 может быть использовано для лечения нарушений хряща, связанных с активацией TGFR, таких как артрит и синовиальной фиброз (см., например, Bakker и др. (2001) Osteoarthritis and Cartilage 9: 128).
Следует понимать, что примеры и варианты осуществления, описаны здесь только для иллюстративных целей, и что различные модификации или изменения, которые могут быть предложены специалистом в данной области, должны быть включены в объем настоящего изобретения и входят в рамки настоящей заявки и в объем прилагаемой формулы изобретения. Все публикации, патенты и патентные заявки, цитируемые в данном документе, включены сюда путем ссылки в полном объеме для любых целей.
Claims (23)
1. Изолированное антитело для ингибирования ανβ8-опосредованной активации TGFβ, где антитело специфически связывается с эпитопом ανβ8 человека в пределах последовательности SEQ ID NO: 11, но не связывается с эпитопом ανβ8 мыши в SEQ ID NO: 12, где антитело ингибирует высвобождение активного, зрелого пептида TGFβ, и практически не ингибирует адгезию латентного TGFβ к ανβ8 на ανβ8-экспрессирующей клетке.
2. Изолированное антитело по п.1, в котором указанное антитело конкурирует за связывание с ανβ8 с антителом, имеющим вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи с SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи с SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10.
3. Изолированное антитело по п.1, где антитело имеет вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три CDR тяжелой цепи с SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую три CDR легкой цепи с SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10.
4. Изолированное антитело по п.1, где антитело имеет вариабельную область легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 3 или 4 и вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 1 или 2.
5. Изолированное антитело по п.1, в котором антитело относится к изотипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4.
6. Изолированное антитело по п.1, в котором антитело является моноклональным антителом.
7. Изолированное антитело по п.1, в котором антитело является человеческим, гуманизированным или химерным антителом.
8. Фармацевтическая композиция для ингибирования αvβ8-опосредованной активации TGFβ, где фармацевтическая композиция содержит антитело по п.1 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый наполнитель.
9. Изолированная нуклеиновая кислота для продукции антитела, которое ингибирует ανβ8-опосредованную активацию TGFβ, где нуклеиновая кислота кодирует антитело по п.1.
10. Изолированный экспрессирующий вектор для продукции антитела, которое ингибирует ανβ8-опосредованную активацию TGFβ, где экспрессирующий вектор содержит нуклеиновую кислоту по п.9.
11. Изолированная клетка-хозяин для продукции антитела, которое ингибирует ανβ8-опосредованную активацию TGFβ, где клетка-хозяин содержит вектор по п.10.
12. Способ уменьшения активации у TGFβ у индивида, включающий введение антитела по любому из пп.1-7 индивиду, который в этом нуждается, тем самым снижая активацию TGFβ у индивида.
13. Способ по п.12, в котором индивид является человеком.
14. Способ по п.12, в котором индивид имеет, по крайней мере, одно состояние, выбранное из группы, состоящей из хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), астмы, артрита, фиброзного расстройства, воспалительного аутоиммунного заболевания головного мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующего заболевания (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспаления, заболевания почек, аденокарциномы, плоскоклеточного рака, глиомы, рака молочной железы, и роста рака и метастазов, где уменьшение TGFβ приводит к улучшению состояния.
15. Способ по п.14, в котором фиброзное заболевание выбирают из группы, состоящей из фиброза дыхательных путей, идиопатического легочного фиброза, неспецифической интерстициальной пневмонии, постинфекционного фиброза легких, диффузного альвеолярного повреждения, связанного с фиброзом легких коллагеноза, индуцированного лекарствами фиброза легких, силикоза, связанного с асбестом фиброза легких, дыхательного бронхиолита, дыхательного бронхиолита, ассоциированного с интерстициальным заболеванием легких, десквамативного интерстициального фиброза, криптогенной пневмонии, хронической аллергической пневмонии, медикаментозного фиброза легких, фиброза почек и фиброза печени.
16. Способ определения присутствия интегрина β8 в биологическом образце, включающий
контактирование биологического образца с антителом по любому из пп.1-7, прикрепленным к обнаруживаемой метке, для формирования меченых антител; и
обнаружение присутствия меченых антител, тем самым определяя присутствие интегрина β8.
контактирование биологического образца с антителом по любому из пп.1-7, прикрепленным к обнаруживаемой метке, для формирования меченых антител; и
обнаружение присутствия меченых антител, тем самым определяя присутствие интегрина β8.
17. Способ по п.16, в котором указанное определение проводят in vitro.
18. Способ по п.16, в котором указанное определение проводят in vivo.
19. Способ по п.16, в котором указанный метод используется для определения состояния, выбранного из группы, состоящей из хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), астмы, артрита, фиброзного расстройства, воспалительного аутоиммунного заболевания головного мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующего заболевания (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспаления, заболевания почек, аденокарциномы, плоскоклеточного рака, глиомы, рака молочной железы, и роста рака и метастазов.
20. Применение антитела по любому из пп.1-7 для уменьшения активации TGFβ у индивида.
21. Применение по п.20, в котором индивид является человеком.
22. Применение по п.20, в котором индивид имеет, по меньшей мере, одно состояние, выбранное из группы, состоящей из артрита, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), астмы, фиброзного расстройства, аутоиммунного воспалительного заболевания мозга, рассеянного склероза, демиелинизирующего заболевания (например, поперечного миелита, болезни Девика, синдрома Гийена-Барре), нейровоспаления, заболевания почек, аденокарциномы, плоскоклеточного рака, глиомы, рака молочной железы, и роста рака и метастазов, и где уменьшение TGFβ приводит к улучшению состояния.
23. Применение по п.22, в котором фиброзное заболевание выбирают из группы, состоящей из фиброза дыхательных путей, идиопатического легочного фиброза, неспецифической интерстициальной пневмонии, постинфекционного фиброза легких, диффузного альвеолярного повреждения, связанного с фиброзом легких коллагеноза, индуцированного лекарствами фиброза легких, силикоза, связанного с асбестом фиброза легких, дыхательного бронхиолита, дыхательного бронхиолита, ассоциированного с интерстициальным заболеванием легких, десквамативного интерстициального фиброза, криптогенной пневмонии, хронической аллергической пневмонии, медикаментозного фиброза легких, фиброза почек и фиброза печени.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US30574910P | 2010-02-18 | 2010-02-18 | |
US61/305,749 | 2010-02-18 | ||
US201061428814P | 2010-12-30 | 2010-12-30 | |
US61/428,814 | 2010-12-30 | ||
PCT/US2011/025514 WO2011103490A2 (en) | 2010-02-18 | 2011-02-18 | INTEGRIN αVβ8 NEUTRALIZING ANTIBODY |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012139829A RU2012139829A (ru) | 2014-03-27 |
RU2565539C2 true RU2565539C2 (ru) | 2015-10-20 |
Family
ID=44483602
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012139829/10A RU2565539C2 (ru) | 2010-02-18 | 2011-02-18 | АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9290572B2 (ru) |
EP (2) | EP4219560A3 (ru) |
JP (2) | JP2013520173A (ru) |
KR (1) | KR101838763B1 (ru) |
CN (2) | CN102834412B (ru) |
AU (1) | AU2011217848B8 (ru) |
BR (1) | BR112012020790B1 (ru) |
CA (1) | CA2790488C (ru) |
MX (1) | MX342270B (ru) |
RU (1) | RU2565539C2 (ru) |
SG (1) | SG183356A1 (ru) |
WO (1) | WO2011103490A2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2812478C2 (ru) * | 2018-09-07 | 2024-01-30 | Пфайзер Инк. | АНТИ-αvβ8 АНТИТЕЛА И КОМПОЗИЦИИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2565539C2 (ru) * | 2010-02-18 | 2015-10-20 | Те Риджентс Оф Те Юниверсити Оф Калифорния | АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 |
RU2614252C2 (ru) * | 2011-08-17 | 2017-03-24 | Те Риджентс Оф Те Юниверсити Оф Калифорния | Антитела, которые связывают интегрин альфа-v бета-8 |
CA2871152A1 (en) * | 2012-05-02 | 2013-11-07 | New York University | Methods of treating and preventing staphylococcus aureus infections and associated conditions |
WO2014165524A2 (en) * | 2013-04-01 | 2014-10-09 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for treating and preventing disease associated with avb8 integrin |
ES2779412T3 (es) * | 2014-06-17 | 2020-08-17 | Medimmune Ltd | Anticuerpos Alfa-V Beta-8 mejorados |
EP3009147A1 (en) | 2014-10-16 | 2016-04-20 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Method for treating resistant glioblastoma |
WO2017182834A1 (en) | 2016-04-19 | 2017-10-26 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | New method for treating resistant glioblastoma |
US10954304B2 (en) | 2016-09-29 | 2021-03-23 | The Regents Of The University Of California | Neutralizing antibodies to the αvβ8 integrin complex for immunotherapy |
AU2019336197A1 (en) * | 2018-09-07 | 2021-02-18 | Pfizer Inc. | Anti-avb8 antibodies and compositions and uses thereof |
WO2020210650A1 (en) * | 2019-04-12 | 2020-10-15 | Medimmune, Llc | Neutralization of tgf-beta or alpha-v-beta-8 integrin for s. aureus infections |
TW202140554A (zh) * | 2020-01-27 | 2021-11-01 | 英商梅迪繆思有限公司 | 用於治療腎臟疾病之抗αvβ8整聯蛋白抗體 |
WO2024056668A1 (en) | 2022-09-12 | 2024-03-21 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | New anti-itgb8 antibodies and its uses thereof |
CN117126282B (zh) * | 2023-10-26 | 2024-01-12 | 迈威(上海)生物科技股份有限公司 | 抗体及其在制备阻断αvβ8与Latent TGF-β的结合的药物中的应用 |
CN117143241B (zh) * | 2023-10-26 | 2024-02-23 | 迈威(上海)生物科技股份有限公司 | 与人整合素蛋白itgav/itgb8特异性结合的单克隆抗体 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2232771C2 (ru) * | 1998-11-24 | 2004-07-20 | Институто Сьентифико И Текнолохико Де Наварра, С.А. | Пептиды, ингибирующие трансформирующий фактор роста tgfбета1 |
EP1740615B1 (en) * | 2004-03-31 | 2014-11-05 | Genentech, Inc. | Humanized anti-tgf-beta antibodies |
Family Cites Families (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2413974A1 (fr) | 1978-01-06 | 1979-08-03 | David Bernard | Sechoir pour feuilles imprimees par serigraphie |
US4816567A (en) * | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
CA2000048A1 (en) * | 1988-10-03 | 1990-04-03 | Edward F. Plow | Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand bindin g |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
IL162181A (en) | 1988-12-28 | 2006-04-10 | Pdl Biopharma Inc | A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
DK0479909T3 (da) | 1989-06-29 | 1997-04-07 | Medarex Inc | Bispecifikke reagenser til AIDS-behandling |
EP1690935A3 (en) | 1990-01-12 | 2008-07-30 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
WO1992000373A1 (en) | 1990-06-29 | 1992-01-09 | Biosource Genetics Corporation | Melanin production by transformed microorganisms |
WO1993012227A1 (en) | 1991-12-17 | 1993-06-24 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
DK0546073T3 (da) | 1990-08-29 | 1998-02-02 | Genpharm Int | Frembringelse og anvendelse af transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5874299A (en) | 1990-08-29 | 1999-02-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
EP0575554A1 (en) * | 1991-03-14 | 1993-12-29 | Genentech, Inc. | Novel beta integrin subunit |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
DK0719859T3 (da) * | 1994-12-20 | 2003-10-20 | Merck Patent Gmbh | Anti-alfa V-integrin monoklonalt antistof |
KR20010034327A (ko) * | 1998-01-23 | 2001-04-25 | 플레믹 크리스티안 | 모노클로날 항체 항 αν-인테그린, 및 피브로넥틴에 대한ανβ6-인테그린 부착을 억제하기 위한 그의 용도 |
US6160099A (en) | 1998-11-24 | 2000-12-12 | Jonak; Zdenka Ludmila | Anti-human αv β3 and αv β5 antibodies |
US7432063B2 (en) | 2002-02-14 | 2008-10-07 | Kalobios Pharmaceuticals, Inc. | Methods for affinity maturation |
AR038568A1 (es) | 2002-02-20 | 2005-01-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-a beta y su uso |
AU2003295411A1 (en) | 2002-11-07 | 2004-06-03 | Celltech R & D | Human monoclonal antibodies to heparanase |
WO2004072266A2 (en) | 2003-02-13 | 2004-08-26 | Kalobios Inc. | Antibody affinity engineering by serial epitope-guided complementarity replacement |
EP2316487B1 (en) | 2003-04-11 | 2014-06-11 | MedImmune, LLC | Recombinant IL-9 antibodies & uses thereof |
WO2005023870A1 (ja) | 2003-09-04 | 2005-03-17 | Riken | TGF-β活性化制御領域の切断面を認識する抗体 |
EP1702071B1 (en) | 2003-12-31 | 2012-02-22 | Kalobios Inc. | Transactivation system for mammalian cells |
KR101352853B1 (ko) | 2004-01-07 | 2014-02-04 | 조마 테크놀로지 리미티드 | M-csf-특이적 단일클론 항체 및 그것의 사용 |
EP2990053A1 (en) | 2004-01-20 | 2016-03-02 | KaloBios Pharmaceuticals, Inc. | Antibody specificity transfer using minimal essential binding determinants |
US20060134098A1 (en) | 2004-11-16 | 2006-06-22 | Kalobios, Inc. | Immunoglobulin variable region cassette exchange |
GB0520068D0 (en) * | 2005-10-03 | 2005-11-09 | Cancer Res Technology | av peptide ligand |
WO2008141274A1 (en) * | 2007-05-11 | 2008-11-20 | Centocor, Inc. | Anti-alpha v immunoliposome composition, methods and uses |
EP2328932A1 (en) | 2008-08-29 | 2011-06-08 | Symphogen A/S | Anti-cd5 antibodies |
RU2565539C2 (ru) * | 2010-02-18 | 2015-10-20 | Те Риджентс Оф Те Юниверсити Оф Калифорния | АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 |
RU2614252C2 (ru) * | 2011-08-17 | 2017-03-24 | Те Риджентс Оф Те Юниверсити Оф Калифорния | Антитела, которые связывают интегрин альфа-v бета-8 |
-
2011
- 2011-02-18 RU RU2012139829/10A patent/RU2565539C2/ru active
- 2011-02-18 KR KR1020127024165A patent/KR101838763B1/ko active IP Right Grant
- 2011-02-18 EP EP23151118.9A patent/EP4219560A3/en active Pending
- 2011-02-18 JP JP2012554069A patent/JP2013520173A/ja active Pending
- 2011-02-18 CN CN201180018213.1A patent/CN102834412B/zh active Active
- 2011-02-18 EP EP11745373.8A patent/EP2536762A4/en not_active Withdrawn
- 2011-02-18 CN CN201510810531.1A patent/CN105315370A/zh active Pending
- 2011-02-18 US US13/580,105 patent/US9290572B2/en active Active
- 2011-02-18 BR BR112012020790-3A patent/BR112012020790B1/pt active IP Right Grant
- 2011-02-18 WO PCT/US2011/025514 patent/WO2011103490A2/en active Application Filing
- 2011-02-18 AU AU2011217848A patent/AU2011217848B8/en active Active
- 2011-02-18 CA CA2790488A patent/CA2790488C/en active Active
- 2011-02-18 SG SG2012060893A patent/SG183356A1/en unknown
- 2011-02-18 MX MX2012009564A patent/MX342270B/es active IP Right Grant
-
2016
- 2016-01-21 US US15/003,642 patent/US9845357B2/en active Active
- 2016-04-13 JP JP2016079967A patent/JP6212159B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2232771C2 (ru) * | 1998-11-24 | 2004-07-20 | Институто Сьентифико И Текнолохико Де Наварра, С.А. | Пептиды, ингибирующие трансформирующий фактор роста tgfбета1 |
EP1740615B1 (en) * | 2004-03-31 | 2014-11-05 | Genentech, Inc. | Humanized anti-tgf-beta antibodies |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
MU D. et al., The integrin αvβ8 mediates epithelial homeostasis through MT1-MMP-dependent activation of TGF-β1, The Journal of Cell Biology, 2002, vol.157, no.3, pp.493-507. MOYLE M. et al., Cloning and expression of a divergent integrin subunit β8, J. Biol. Chem., 1991; vol.266 no.29, pp.19650-19658. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2812478C2 (ru) * | 2018-09-07 | 2024-01-30 | Пфайзер Инк. | АНТИ-αvβ8 АНТИТЕЛА И КОМПОЗИЦИИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US9845357B2 (en) | 2017-12-19 |
CA2790488A1 (en) | 2011-08-25 |
MX342270B (es) | 2016-09-21 |
US9290572B2 (en) | 2016-03-22 |
BR112012020790B1 (pt) | 2021-09-28 |
AU2011217848A1 (en) | 2012-09-13 |
KR101838763B1 (ko) | 2018-03-14 |
EP2536762A2 (en) | 2012-12-26 |
US20130064837A1 (en) | 2013-03-14 |
BR112012020790A2 (pt) | 2016-05-03 |
AU2011217848B8 (en) | 2015-09-24 |
CA2790488C (en) | 2018-09-25 |
WO2011103490A2 (en) | 2011-08-25 |
MX2012009564A (es) | 2013-01-29 |
JP6212159B2 (ja) | 2017-10-11 |
CN105315370A (zh) | 2016-02-10 |
EP4219560A2 (en) | 2023-08-02 |
EP4219560A3 (en) | 2023-08-23 |
RU2012139829A (ru) | 2014-03-27 |
CN102834412A (zh) | 2012-12-19 |
JP2013520173A (ja) | 2013-06-06 |
SG183356A1 (en) | 2012-09-27 |
KR20120137482A (ko) | 2012-12-21 |
JP2016196457A (ja) | 2016-11-24 |
AU2011217848A8 (en) | 2015-09-24 |
AU2011217848B2 (en) | 2015-08-27 |
US20160137737A1 (en) | 2016-05-19 |
EP2536762A4 (en) | 2014-01-01 |
WO2011103490A3 (en) | 2011-10-27 |
CN102834412B (zh) | 2016-01-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2565539C2 (ru) | АНТИТЕЛА, НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ ИНТЕГРИН ανβ8 | |
KR102421427B1 (ko) | 항-클라우딘 18.2 항체 및 이의 사용 | |
US11684673B2 (en) | Peptides and antibodies for the removal of biofilms | |
ES2677367T3 (es) | Anticuerpos anti-Axl y usos de los mismos | |
JP6233933B2 (ja) | 葉酸リセプターα及びβを認識する抗体 | |
AU2012273954A1 (en) | Anti-Axl antibodies and uses thereof | |
US20220275064A1 (en) | Antibody compositions for disrupting biofilms | |
ES2731665T3 (es) | Agentes para tratar cáncer de mama triple negativo | |
JP5881085B2 (ja) | 膵臓癌の治療用及び診断用の組成物 | |
US20130230899A1 (en) | Therapeutic agent for arteriosclerosis or arteriosclerotic disease, and diagnostic agent for arteriosclerosis or arteriosclerotic disease |