RU2550286C1 - Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе - Google Patents
Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе Download PDFInfo
- Publication number
- RU2550286C1 RU2550286C1 RU2014122633/14A RU2014122633A RU2550286C1 RU 2550286 C1 RU2550286 C1 RU 2550286C1 RU 2014122633/14 A RU2014122633/14 A RU 2014122633/14A RU 2014122633 A RU2014122633 A RU 2014122633A RU 2550286 C1 RU2550286 C1 RU 2550286C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hours
- phosphate buffer
- perfusion
- rat
- heart
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к регенеративной медицине, и может быть использовано в клеточной и молекулярной биологии, а также в торакальной хирургии для создания биоинженерного органа в качестве трансплантата. Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте включает введение крысе антикоагулянта, выделение органа, очищение его от окружающей жировой ткани, канюлирование аорты, осуществление децеллюляризации путем перфузии в биореакторе, а также контроль качества полученного каркаса на биосовместимость и жизнеспособность. При этом антикоагулянт гепарин вводят крысе интраперитонеально в дозе 100 ЕД перед забором органокомплекса сердце-легкие. Аорту канюлируют выше уровня отхождения левой подключичной артерии с последующим лигированием ветвей дуги аорты. Осуществляют лигирование устья полых вен, отсекают легкие. Перфузию для децеллюляризации осуществляют в течение 28 часов через аорту при атмосферном давлении и скорости потока реагентов через орган 2,4-3,6 мл/минуту. При этом перфузию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина и деионизированной водой проводят по 1,5 часа. Затем используют 4% раствор дезоксихолата натрия в комбинации с 0,002М Na-ЭДТА в течение 3,5 часов. Фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина используют в течение 1 часа, свиную панкреатическую ДНКазу-I 2000 ЕД /200 мл фосфатного буфера с кальцием и магнием - в течение 2,5 часов. Завершают децеллюляризацию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина со сменой раствора каждые 6 часов. Жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяют по наличию дифференциальн�
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к регенеративной медицине, и может быть использовано в клеточной биологии, молекулярной биологии, торакальной хирургии для создания технологии получения и использования в практических целях биоинженерного органа в качестве трансплантата.
Сердечно-сосудистые заболевания - основная причина инвалидизации и преждевременной смерти жителей экономически развитых стран [ВОЗ. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/ru/]. Рост заболеваемости, поражение людей все более молодого возраста делают эти болезни важнейшей медико-социальной проблемой здравоохранения [ВОЗ. http://www.who.int/gho/publications/world_health_statistics]. Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) - одно из самых частых осложнений заболеваний сердечно-сосудистой системы. Количество больных, которые достигают терминальной стадии ХСН, постоянно растет. Трансплантация сердца - хирургический способ лечения терминальной стадии ХСН. Каждый год в мире проводят более 5400 операций по пересадке сердца [ВОЗ. http://www.who.int/transplantation/gkt/statistics/en/]. В настоящее время, основные проблемы трансплантологии связаны с острой нехваткой донорских органов, сложностью их доставки, трудностью поиска иммунологически совместимых органов и пожизненным назначением иммуносупрессивной терапии [Fuchs J.R et al., 2001]. Поэтому одной из наиболее перспективных задач можно считать развитие тканевой инженерии, как одного из направлений регенеративной медицины [Murphy S.V. et al., 2012, Taylor D.A. 2009].
В развитии современной тканевой инженерии приоритетным направлением является разработка биоинженерных каркасов и биоматериалов, применение которых позволило бы решать как этические, так и иммунологические проблемы трансплантологии. Для создания органов и тканей будут использоваться каркасы или матриксы (биологические или искусственные), клетки (ауто-, алло-, ксеногенные), биореакторы и биоактивные молекулы [Fuchs J.R et al., 2001, McIntire L.V. et al. 2002., Langer R. et al. 1993., Skalak R. Et al. 1988., Amulya S. 2005., Atala A. 2005].
Децеллюляризация - это способ получения биологических каркасов, который направлен на удаление клеток с сохранением внеклеточного матрикса (ВКМ) и трехмерности структуры органа [Badylak S.F. et al. 2011]. Межклеточное вещество рыхлой волокнистой соединительной ткани состоит из волокон и аморфного вещества. Оно является продуктом деятельности клеток этой ткани, в первую очередь фибробластов. Архитектоника и состав ВКМ в каждой ткани являются уникальными, определяют функциональность этой ткани. Тем не менее, структура и состав каждого конкретного белка ВКМ остаются неизменными у различных видов [Exposito J.Y. et al. 1992., Bernard M.P. et al. 1983., Bernard M.P. et al. 1983]. Это способствуют тому, что ВКМ одних видов не вызывает иммунного отторжения у других. При правильном удалении клеточных антигенов, которые вызывают иммунное отторжение без повреждения ВКМ, полученный каркас может служить мощным источником сигналов и содействовать конструктивному ремоделированию тканей после повреждения. «Конструктивное ремоделирование» означает, что каркас ВКМ содействует формированию участка соответствующей ткани в месте имплантации, вместо образования рубцовой ткани [Badylak S.F. 2007]. Для создания соответствующего требованиям каркаса биоинженерного органа требуется: во-первых, воссоздать структуру, сходную с нативной; во-вторых, развитая сосудистая сеть, способная обеспечить адекватную перфузию тканей; в-третьих, необходимо, чтобы клетки, используемые при рецеллюляризации, были способны к дифференцировке во все паренхиматозные и сосудистые структуры органа; в-четвертых, иметь возможность управления микроокружением клеток для воздействия на их физиологию и функции; в-пятых, должна существовать возможность управления дифференцировкой и созреванием клеток in vitro [Taylor D., 2009].
С учетом высокой смертности от хронических заболеваний сердечнососудистой системы, весьма актуальной является разработка способа моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе.
В частности, известен способ децеллюляризации сердца свиньи [Wainwright J.M., Czajka С.А., Patel U.B. et al. Preparation of cardiac extracellular matrix from an intact porcine heart. Tissue engineering: Part C; 2010; 16(3): 525-532]. Протокол включает в себя заморозку сердца свиньи при -80°C, с последующей перфузией через аорту очищенной водой, фосфатно-буферным солевым раствором, детергентами и ферментами: растворами, содержащими 0,02% трипсина, 0,05% ЭДТА, 0,05% NaN3, 3% тритона Х-100, 4% дезоксихолата натрия, а также дезинфекцию каркаса перфузией раствора, содержащего 0,1% надуксусной кислоты и 4% этанола и отмывку каркаса фосфатно-буферным солевым раствором и очищенной водой с общей продолжительностью 25 часов. Контроль качества полученного каркаса определяют гистологическими методами, путем сканирующей электронной микроскопии, количественного определения остаточного уровня ДНК, гликозаминогликанов, а также изучением механических свойств.
Основными недостатками данного способа являются использование больших объемов дорогостоящих реагентов для проведения децеллюляризации, а также необходимость длительного размораживания нативного сердца после извлечения из морозильной камеры, повышающая риск бактериальной контаминации. Способ предусматривает контроль получаемого биоинженерного каркаса сердца только по данным гистологического исследования, по оценке механических и эластических свойств каркаса. Также в данном протоколе децеллюляризацию проводят на модели сердца свиньи, что, в связи с физиологическими отличиями животных, не может транслироваться на модель сердца крысы без изменений и дополнений.
За ближайший аналог принят способ проведения децеллюляризации сердца крысы [Ott Н.С, Matthiesen T.S, Goh S.K. et al. Perfusion decellularized matrix: using nature's platform to engineer a bioartificial heart. Nature Medicine. 2008; 14:213-21], заключающийся в выделении сердца крысы, очищении его от окружающей жировой клетчатки, канюлировании аорты до уровня отхождения плечеголовного ствола, проведении ретроградной перфузии сердца через аорту фосфатным буфером (PBS) с добавлением антикоагулянта гепарина, аденозина и антибиотика-антимикотика, деионизированной водой и растворами детергентов: 1% додецилсульфата натрия и 1% тритона Х-100 в течение ~137 часов. Контроль качества децеллюляризации проводился путем гистологического исследования, анализа морфологической структуры, количественного определения уровня ДНК и механических свойств полученного каркаса.
Основным недостатком данного способа является длительность проведения децеллюляризации, создающая угрозу бактериальной контаминации каркаса, нарушения структуры каркаса в связи с длительностью воздействия детергентов и их высокой концентрацией.
Задачи: максимальное сохранение гистологической структуры внеклеточного матрикса сердца, обеспечение щадящего режима обработки биологического материала, снижение концентрации детергентов, времени экспозиции растворов и вероятности бактериальной контаминации получаемого каркаса, т.е. повышение качества получаемого биоинженерного материала и обеспечение контроля его качества.
Сущностью предлагаемого способа моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе является то, что антикоагулянт гепарин вводят крысе интраперитонеально в дозе 100 ЕД перед забором органокомплекса сердце-легкие, аорту канюлируют выше уровня отхождения левой подключичной артерии с последующим лигированием ветвей дуги аорты, осуществляют лигирование устья полых вен, отсекают легкие, перфузию для децеллюляризации осуществляют в течение 28 часов через аорту при атмосферном давлении и скорости потока реагентов через орган 2,4-3,6 мл/минуту, при этом перфузию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина и деионизированной водой проводят по 1,5 часа, затем используют 4% раствор дезоксихолата натрия в комбинации с 0,002М Na2-ЭДТА в течение 3,5 часов, фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина - в течение 1 часа, свиную панкреатическую ДНКазу-I 2000 ЕД/200 мл фосфатного буфера с кальцием и магнием - 2,5 часов и завершают децеллюляризацию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина со сменой раствора каждые 6 часов, причем жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяют по наличию дифференциального окрашивания живых и мертвых клеток, по способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтераразола до голубого кристаллического фармазана, растворимого в диметилсульфоксиде.
Техническим результатом способа является сокращение времени экспозиции перфузионных растворов. Ранее использовавшиеся протоколы повреждали каркас сердца и несли высокий риск развития бактериальной контаминации, что крайне неблагоприятно сказывалось на качестве полученного каркаса сердца и возможности последующего создания биоинженерного органа. Применение дезоксихолата натрия, снижение времени воздействия децеллюляризирующих растворов полностью нивелирует негативные эффекты известных способов того же назначения. Кроме того, способ предусматривает оценку биосовместимости и жизнеспособности клеток, засеянных на каркас, по наличию дифференциального окрашивания живых и мертвых клеток, по способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтераразола до голубого кристаллического фармазана, растворимого в диметилсульфоксиде (МТТ-тест).
Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе осуществляют следующим образом: для децеллюляризации используют предварительно гепаринизированных крыс (интраперитонеально вводят 100 ЕД антикоагулянта гепарина). Выделяют органокомплекс сердце-легкие. Очищают от окружающей жировой ткани. Аорту канюлируют на расстоянии 3-3,5 см от сердца выше уровня отхождения левой подключичной артерии. Ветви дуги аорты: плечеголовной ствол, левую общую сонную и левую подключичную артерии лигируют. Переднюю и заднюю полые вены отсекают. Устья полых вен лигируют. Отсекают легкие. Для проведения децеллюляризации сердце помещают в биореактор и начинают ретроградную перфузию жидкости через аорту в течение 28 часов при атмосферном давлении и скорости потока реагентов 2,4-3,6 мл/мин. Этапы децеллюляризации: фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина - 1,5 часа, деионизированная вода - 1,5 часа, дезоксихолат натрия 4% в комбинации с 0,002М Na2 - ЭДТА - 3,5 часа, фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина - 1 час, свиная панкреатическая ДНКаза-I 2000 ЕД /200 мл фосфатного буфера с кальцием и магнием - 2,5 часа, фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина - 18 часов, со сменой раствора каждые 6 часов. Все растворы должны быть стерильными.
Контроль качества полученного биоинженерного каркаса осуществляют методами гистологического исследования (окрашивание гематоксилином и эозином, по Ван Гизон, трихромом по Массону, флуорофором DAPI (4′,6-диамидино-2-фенилиндолом)), сканирующей электронной микроскопии для подтверждения сохранности архитектоники внеклеточного матрикса сердца и отсутствия клеточных элементов на сердечном каркасе, количественного определения уровня оставшейся ДНК [Badylak S.F. et al., 2011], а также путем определения предельных биомеханических параметров на растяжение каркаса на универсальных испытательных машинах фирмы Инстрон модель 5965 (датчик 50 Н) и на Lloyd LRX (100 N load cell) [Witzenburg С. et al., 2012]. Сохранность белков внеклеточного матрикса и отсутствие внутриклеточных белков определяют при помощи иммуногистохимического исследования [Ott Н.С.et al., 2008]. Проходимость сосудистого русла определяют перфузией через аорту 0,4% раствора трипанового синего. Жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяют путем колориметрического анализа с использованием МТТ-реагента по способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтераразола до голубого кристаллического фармазана, растворимого в диметилсульфоксиде, в целях установления цитотоксичности полученного каркаса и проведения последующих экспериментов по рецеллюляризации. Колориметрический анализ проводят согласно рекомендациям в инструкции производителя (инструкция прилагается). Также для определения цитотоксичности каркаса проводят дифференциальное окрашивание живых и мертвых клеток с применением флуоресцентных красителей - кальцеина AM (окрашивает живые клетки) и гомодимера этидия (окрашивает мертвые клетки).
Способ апробирован в течение 2 лет на биологическом материале (сердце) экспериментальных животных (крысы). Результаты полностью подтвердили решаемые задачи. Получены естественные каркасы органов, с сохранным внеклеточным матриксом и отсутствием клеточных структур.
Данный способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе использован в эксперименте на 50 крысах-самцах линии Lewis. Выполнены забор и фиксация в биореакторе сердца с последующей децеллюляризацией по предлагаемому способу.
Пример: после проведения эвтаназии передозировкой наркотических средств в соответствии с этическими требованиями и интраперитонеального введения 100 ЕД гепарина произвели забор органокомплекса сердце-легкие у крысы-самца линии Lewis весом 200 г. Органокомплекс очистили от окружающей жировой ткани, лигировали устья полых вен, плечеголовной ствол, левую общую сонную артерию, левую подключичную артерию, отсекли легкие, канулировали аорту и фиксировали в биореакторе. Начали децеллюляризацию сердца путем перфузии сердца через аорту децеллюляризирующими растворами: фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина в течение 1,5 часов, деионизированной водой - 1,5 часа, 4% водным раствором дезоксихолата натрия в комбинации с 0,002М Na2-ЭДТА 3,5 часа, фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина в течение 1 часа, свиной панкреатической ДНКазой I (2000 ЕД растворили в 200 мл фосфатного буфера с кальцием и магнием - 2,5 часа, фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина в течение 18 часов со сменой раствора каждые 6 часов. Контроль качества полученного биоинженерного каркаса осуществляли методами гистологического исследования (окрашиванием гематоксилином и эозином, по Ван Гизон, трихромом по Массону, флуорофором DAPI (4′,6-диамидино-2-фенилиндолом)), путем применения сканирующей электронной микроскопии для подтверждения сохранности архитектоники внеклеточного матрикса сердца и отсутствия клеточных элементов на сердечном каркасе, количественно определили уровень оставшейся ДНК, установили предельные биомеханические параметры на растяжение каркаса на универсальных испытательных машинах фирмы Инстрон модель 5965 (датчик 50 Н) и на Lloyd LRX (100 N load cell). Сохранность белков внеклеточного матрикса (коллагена I, III и IV типов, ламинина, эластина, фибронектина) и отсутствие внутриклеточных белков (актина, тропомиозина, фактора Виллебранда) определили при помощи иммуногистохимического исследования, по наличию либо отсутствию специфичной реакции с антителами против данных белков. Проходимость сосудистого русла выявили перфузией через аорту 0,4% раствора трипанового синего, которая показала проходимость коронарных артерий и позволила визуализировать сосуды вплоть до артерий третьего-четвертого порядка. Жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяли путем колориметрического анализа с использованием МТТ-реагента по способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтераразола до голубого кристаллического фармазана, растворимого в диметилсульфоксиде (МТТ-тест) в целях установления цитотоксичности полученного каркаса и проведения последующих экспериментов по рецеллюляризации. Также для определения цитотоксичности каркаса провели дифференциальное окрашивание живых и мертвых клеток с применением флуоресцентных красителей - кальцеина AM (окрашивал живые клетки) и гомодимера этидия (окрашивал мертвые клетки).
В результате экспериментов по децеллюляризации получен каркас сердца с сохранением гистологической архитектоники и белков внеклеточного матрикса. Результаты рецеллюляризации показывают, что полученный каркас не является токсичным для клеток.
Claims (1)
- Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе, включающий введение крысе антикоагулянта, выделение органа, очищение его от окружающей жировой ткани, канюлирование аорты, осуществление децеллюляризации путем перфузии в биореакторе, а также контроль качества полученного каркаса на биосовместимость и жизнеспособность, отличающийся тем, что антикоагулянт гепарин вводят крысе интраперитонеально в дозе 100 ЕД перед забором органокомплекса сердце-легкие, аорту канюлируют выше уровня отхождения левой подключичной артерии с последующим лигированием ветвей дуги аорты, осуществляют лигирование устья полых вен, отсекают легкие, перфузию для децеллюляризации осуществляют в течение 28 часов через аорту при атмосферном давлении и скорости потока реагентов через орган 2,4-3,6 мл/минуту, при этом перфузию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина и деионизированной водой проводят по 1,5 часа, затем используют 4% раствор дезоксихолата натрия в комбинации с 0,002М Na2-ЭДТА в течение 3,5 часов, фосфатный буфер с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина - в течение 1 часа, свиную панкреатическую ДНКазу-I 2000 ЕД/200 мл фосфатного буфера с кальцием и магнием - 2,5 часов и завершают децеллюляризацию фосфатным буфером с добавлением 1% пенициллина-стрептомицина со сменой раствора каждые 6 часов, причем жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяют по наличию дифференциального окрашивания живых и мертвых клеток, по способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-4,5-диметилтиазол-2-ил-2,5-дифенилтераразола до голубого кристаллического фармазана, растворимого в диметилсульфоксиде.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014122633/14A RU2550286C1 (ru) | 2014-06-03 | 2014-06-03 | Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014122633/14A RU2550286C1 (ru) | 2014-06-03 | 2014-06-03 | Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2550286C1 true RU2550286C1 (ru) | 2015-05-10 |
Family
ID=53293917
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014122633/14A RU2550286C1 (ru) | 2014-06-03 | 2014-06-03 | Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2550286C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2654686C1 (ru) * | 2017-06-07 | 2018-05-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Минздрава России (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Способ восстановления функциональных свойств тканеинженерной конструкции диафрагмы |
RU2662083C1 (ru) * | 2017-10-05 | 2018-07-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ гетеротопической абдоминальной трансплантации сердца у крыс, снижающий вторичную тепловую ишемию миокарда донорского сердца |
RU187284U1 (ru) * | 2018-03-15 | 2019-02-28 | Александр Викторович Никольский | Учебная анатомическая модель сердца человека |
RU2713803C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2020-02-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ децеллюризации легкого для получения внеклеточного матрикса |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU54768U1 (ru) * | 2005-09-29 | 2006-07-27 | Владимир Андреевич Болсуновский | Комбинированный сосудистый гомографт и биологический сосудистый гомографт болсуновского |
RU2461622C2 (ru) * | 2007-11-28 | 2012-09-20 | Огенодженесис, Инк. | Биоинженерный конструкт для имплантации ткани и способ изготовления названного биоинженерного конструкта (варианты) |
RU2504334C1 (ru) * | 2012-11-28 | 2014-01-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный Центр сердца, крови и Эндокринологии имени В.А. Алмазова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ децеллюляризации кровеносных сосудов малого калибра |
US8666762B2 (en) * | 2006-09-21 | 2014-03-04 | Biomedical Synergies, Inc. | Tissue management system |
-
2014
- 2014-06-03 RU RU2014122633/14A patent/RU2550286C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU54768U1 (ru) * | 2005-09-29 | 2006-07-27 | Владимир Андреевич Болсуновский | Комбинированный сосудистый гомографт и биологический сосудистый гомографт болсуновского |
US8666762B2 (en) * | 2006-09-21 | 2014-03-04 | Biomedical Synergies, Inc. | Tissue management system |
RU2461622C2 (ru) * | 2007-11-28 | 2012-09-20 | Огенодженесис, Инк. | Биоинженерный конструкт для имплантации ткани и способ изготовления названного биоинженерного конструкта (варианты) |
RU2504334C1 (ru) * | 2012-11-28 | 2014-01-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный Центр сердца, крови и Эндокринологии имени В.А. Алмазова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ децеллюляризации кровеносных сосудов малого калибра |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
OTT Н.С. et al. Perfusion decellularized matrix: using nature’s platform to engineer a bioartificial heart. Nature Medicine. 2008; 14: 213-21. * |
ЧЕРКАВСКАЯ О. В. Клинические результаты применения новых биоинженерных технологий (стенты, захватывающие клетки-предшественники эндотелия) в лечении ишемической болезни сердца. Вестник рентгенологии и радиологии, 2012, N 1, С. 9-16. HUANG YC et al. Modulating the functional performance of bioengineered heart muscle using growth factor stimulation.Ann Biomed Eng. 2008 Aug;36(8):1372-82, реф. AMIEL G.E. et al. Engineering of blood vessels from acellular collagen matrices coated with human endothelial cells, Tissue Eng. 2006 Aug; 12(8):2355-65, реф * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2654686C1 (ru) * | 2017-06-07 | 2018-05-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный медицинский университет" Минздрава России (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России) | Способ восстановления функциональных свойств тканеинженерной конструкции диафрагмы |
RU2662083C1 (ru) * | 2017-10-05 | 2018-07-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ гетеротопической абдоминальной трансплантации сердца у крыс, снижающий вторичную тепловую ишемию миокарда донорского сердца |
RU187284U1 (ru) * | 2018-03-15 | 2019-02-28 | Александр Викторович Никольский | Учебная анатомическая модель сердца человека |
RU2713803C1 (ru) * | 2019-01-10 | 2020-02-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ децеллюризации легкого для получения внеклеточного матрикса |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Porzionato et al. | Tissue-engineered grafts from human decellularized extracellular matrices: a systematic review and future perspectives | |
Caralt et al. | Optimization and critical evaluation of decellularization strategies to develop renal extracellular matrix scaffolds as biological templates for organ engineering and transplantation | |
JP6609595B2 (ja) | 肺臓の組織工学 | |
Weymann et al. | Development and Evaluation of a Perfusion Decellularization Porcine Heart Model–Generation of 3-Dimensional Myocardial Neoscaffolds– | |
Zhang et al. | Decellularized skin/adipose tissue flap matrix for engineering vascularized composite soft tissue flaps | |
RU2635478C2 (ru) | Удаление и восстановление содержания клеток в органах и тканях | |
Crapo et al. | An overview of tissue and whole organ decellularization processes | |
Wu et al. | Optimizing perfusion-decellularization methods of porcine livers for clinical-scale whole-organ bioengineering | |
Milan et al. | Decellularization and preservation of human skin: A platform for tissue engineering and reconstructive surgery | |
RU2550286C1 (ru) | Способ моделирования биоинженерного каркаса сердца в эксперименте на крысе | |
Nari et al. | Preparation of a three-dimensional extracellular matrix by decellularization of rabbit livers | |
Shahabipour et al. | Novel approaches toward the generation of bioscaffolds as a potential therapy in cardiovascular tissue engineering | |
Ansari et al. | Development and characterization of a porcine liver scaffold | |
CN104587528A (zh) | 人心脏瓣膜组织脱细胞基质及其制备和应用 | |
JP2017128606A (ja) | 生物工学で作製された同種異系弁 | |
Łabuś et al. | Own experience from the use of a substitute of an allogeneic acellular dermal matrix revitalized with in vitro cultured skin cells in clinical practice | |
RU2547799C1 (ru) | Способ создания биоинженерного каркаса легкого крысы | |
KR102530336B1 (ko) | 개인맞춤 혈관을 제조하는 방법 | |
Kwon et al. | Decellularization | |
RU2654686C1 (ru) | Способ восстановления функциональных свойств тканеинженерной конструкции диафрагмы | |
RU2662554C2 (ru) | Способ подготовки материала для создания биоинженерной конструкции пищевода | |
DE112019002479B4 (de) | Verfahren zur herstellung einer kollagen-laminin-matrix zur heilung von hautgeschwüren, verbrennungen und wunden beim menschen | |
Akbarzadeh et al. | Coronary-Based Right Heart Flap Recellularization by Rat Neonatal Whole Cardiac Cells: A Viable Sheep Cardiac Patch Model for Possible Management of Heart Aneurysm | |
Sembiring et al. | Comparative Assessment of Various Concentration and Exposure Time of Sodium Dodecyl Sulfate as Decellularization Agents for Small-Vessels Vascular Tissue Engineering | |
US20230174942A1 (en) | Novel fabrication of coronary based decellularized heart flaps to treat aneurysm following myocardial infarction |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160604 |