RU2496875C2 - Мoдифицированные протеазы - Google Patents

Мoдифицированные протеазы Download PDF

Info

Publication number
RU2496875C2
RU2496875C2 RU2009137600/10A RU2009137600A RU2496875C2 RU 2496875 C2 RU2496875 C2 RU 2496875C2 RU 2009137600/10 A RU2009137600/10 A RU 2009137600/10A RU 2009137600 A RU2009137600 A RU 2009137600A RU 2496875 C2 RU2496875 C2 RU 2496875C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
protease
specified
modified
host cell
amino acid
Prior art date
Application number
RU2009137600/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2009137600A (ru
Inventor
Дэвид А. ЭСТЕЛЛ
Эудженио ФЕРРАРИ
Original Assignee
ДАНИСКО ЮЭс ИНК.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=39743046&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2496875(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ДАНИСКО ЮЭс ИНК. filed Critical ДАНИСКО ЮЭс ИНК.
Publication of RU2009137600A publication Critical patent/RU2009137600A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2496875C2 publication Critical patent/RU2496875C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C07K14/08—RNA viruses
    • C07K14/18—Togaviridae; Flaviviridae
    • C07K14/19—Rubella virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой выделенный модифицированный полинуклеотид, кодирующий модифицированную полноразмерную протеазу. При этом часть указанного модифицированного полинуклеотида, которая кодирует про-участок указанной полноразмерной протеазы, содержит мутацию, кодирующую замену в одном аминокислотном положении, выбранном из положений, эквивалентных аминокислотным положениям 28-108 и 109 SEQ ID NO:5, 13 или 244, где указанный полинуклеотид имеет нуклеотидную последовательность, идентичную, по меньшей мере, приблизительно на 95% полинуклеотидной последовательности SEQ ID NО:4, 12 или 243 с учетом вырожденности генетического кода, где указанная модифицированная полноразмерная протеаза представляет собой сериновую протеазу, где указанная модифицированная полноразмерная протеаза представляет собой щелочную сериновую протеазу, полученную из предшественника щелочной сериновой протеазы дикого типа, где указанный предшественник щелочной сериновой протеазы представляет собой щелочную сериновую протеазу В. clausii или В. lentus, и где указанная модифицированная полноразмерная протеаза имеет повышенную активность продукции по сравнению с полипептидом указанного предшественника. Изобретение позволяет расширить арсенал высокоэффективных протеаз. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 9 ил., 2 табл., 4 пр.

Description

Текст описания приведен в факсимильном виде.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030
Figure 00000031
Figure 00000032
Figure 00000033
Figure 00000034
Figure 00000035
Figure 00000036
Figure 00000037
Figure 00000038
Figure 00000039
Figure 00000040
Figure 00000041
Figure 00000042
Figure 00000043
Figure 00000044
Figure 00000045
Figure 00000046
Figure 00000047
Figure 00000048
Figure 00000049
Figure 00000050
Figure 00000051
Figure 00000052
Figure 00000053
Figure 00000054
Figure 00000055
Figure 00000056
Figure 00000057
Figure 00000058
Figure 00000059
Figure 00000060
Figure 00000061
Figure 00000062
Figure 00000063
Figure 00000064
Figure 00000065
Figure 00000066
Figure 00000067
Figure 00000068
Figure 00000069
Figure 00000070
Figure 00000071
Figure 00000072
Figure 00000073
Figure 00000074
Figure 00000075
Figure 00000076
Figure 00000077
Figure 00000078
Figure 00000079
Figure 00000080
Figure 00000081
Figure 00000082
Figure 00000083
Figure 00000084
Figure 00000085
Figure 00000086
Figure 00000087
Figure 00000088
Figure 00000089
Figure 00000090
Figure 00000091
Figure 00000092
Figure 00000093
Figure 00000094
Figure 00000095
Figure 00000096
Figure 00000097
Figure 00000098
Figure 00000099
Figure 00000100
Figure 00000101
Figure 00000102
Figure 00000103
Figure 00000104
Figure 00000105
Figure 00000106
Figure 00000107
Figure 00000108
Figure 00000109
Figure 00000110
Figure 00000111
Figure 00000112
Figure 00000113
Figure 00000114
Figure 00000115
Figure 00000116
Figure 00000117
Figure 00000118
Figure 00000119
Figure 00000120
Figure 00000121
Figure 00000122
Figure 00000123
Figure 00000124
Figure 00000125
Figure 00000126
Figure 00000127
Figure 00000128
Figure 00000129
Figure 00000130
Figure 00000131
Figure 00000132
Figure 00000133
Figure 00000134
Figure 00000135
Figure 00000136
Figure 00000137
Figure 00000138
Figure 00000139
Figure 00000140
Figure 00000141
Figure 00000142
Figure 00000143
Figure 00000144
Figure 00000145
Figure 00000146
Figure 00000147
Figure 00000148
Figure 00000149
Figure 00000150
Figure 00000151
Figure 00000152
Figure 00000153
Figure 00000154
Figure 00000155
Figure 00000156
Figure 00000157
Figure 00000158
Figure 00000159
Figure 00000160
Figure 00000161
Figure 00000162
Figure 00000163
Figure 00000164
Figure 00000165
Figure 00000166
Figure 00000167
Figure 00000168
Figure 00000169
Figure 00000170
Figure 00000171
Figure 00000172
Figure 00000173
Figure 00000174
Figure 00000175
Figure 00000176
Figure 00000177
Figure 00000178
Figure 00000179
Figure 00000180
Figure 00000181
Figure 00000182
Figure 00000183
Figure 00000184
Figure 00000185
Figure 00000186
Figure 00000187
Figure 00000188
Figure 00000189
Figure 00000190
Figure 00000191
Figure 00000192
Figure 00000193
Figure 00000194
Figure 00000195
Figure 00000196
Figure 00000197
Figure 00000198
Figure 00000199
Figure 00000200
Figure 00000201
Figure 00000202
Figure 00000203
Figure 00000204
Figure 00000205
Figure 00000206
Figure 00000207
Figure 00000208
Figure 00000209
Figure 00000210
Figure 00000211
Figure 00000212
Figure 00000213
Figure 00000214
Figure 00000215
Figure 00000216
Figure 00000217
Figure 00000218

Claims (16)

1. Выделенный модифицированный полинуклеотид, кодирующий модифицированную полноразмерную протеазу, где часть указанного модифицированного полинуклеотида, которая кодирует проучасток указанной полноразмерной протеазы, содержит мутацию, кодирующую замену в одном аминокислотном положении, выбранном из положений, эквивалентных аминокислотным положениям 28-108 и 109 SEQ ID NO:5, 13 или 244,
где указанный полинуклеотид имеет нуклеотидную последовательность, идентичную, по меньшей мере, приблизительно на 95% полинуклеотидной последовательности SEQ ID NO:4, 12 или 243 с учетом вырожденности генетического кода,
где указанная модифицированная полноразмерная протеаза представляет собой сериновую протеазу,
где указанная модифицированная полноразмерная протеаза представляет собой щелочную сериновую протеазу, полученную из предшественника щелочной сериновой протеазы дикого типа,
где указанный предшественник щелочной сериновой протеазы представляет собой щелочную сериновую протеазу В. clausii или В. Lentus, и
где указанная модифицированная полноразмерная протеаза имеет повышенную активность продукции по сравнению с полипептидом указанного предшественника.
2. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.1, где полинуклеотид, кодирующий протеазу-предшественника, имеет последовательность, указанную в SEQ ID NO:1, 9 или 240.
3. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.1, где указанная часть указанного модифицированного полинуклеотида, которая кодирует проучасток, содержит мутацию, кодирующую замену, по меньшей мере, в одном аминокислотном положении, выбранном из Е33, Е43, А44, Е47, V49, Е57, А59, Е63, Е70, Е74, Е84 и Е88 SEQ ID NO:5, 13 или 244.
4. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.3, где указанная замена Е33 выбрана из E33D, E33I, E33S, E33N, Е33К, Е33Н, E33Q и E33R.
5. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.3, где указанная замена Е57 выбрана из E57F, E57W, Е57К, E57R, E57D, Е57М, Е57С, E57Q, E57S, Е57Н, E57N и E57G.
6. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.1, где указанная мутация, кодирующая замену, по меньшей мере, в одном аминокислотном положении, выбранном из положений, эквивалентных аминокислотным положениям 28-108 и 109 SEQ ID NO:5, 13 или 244, кодирует замену, выбранную из группы, состоящей из: A28Q, А28Т, Е29Т, E29Y, E29V, E29Q, Е29К, Е29М, Е29Р, E29N, E29S, E29G, Е29А, E30Q, Е30К, Е30М, Е30А, E30G, E30R, E30S, Е30Н, E30N, Е30Т, A31R, A31G, A31S, А31К, А31Р, E33R, E33Q, E33G, Е33Н, E33N, E33S, E33D, E33I, Е33К, Е33М, K34R, N40V, N40K, N40E, N40Q, N40H, N40Y, N40T, N40A, N40L, N40W, N40F, N40R, Е41А, E41S, E41N, Е41Т, Е41Н, E41R, Q42M, Q42R, Q42P, Q42W, E43S, E43R, E43D, Е43Н, Е43А, A44D, A44Q, А44Е, A44S, V45L, V45A, V45C, S46H, S46R, S46T, S46A, S46Q, S46Y, S46W, E47D, E47R, Е47К, E47Q, Е47Н, F48W, V49G, Е50Н, Q51M, Q51R, V52L, V52W, Е53А, Е53К, E53R, Е53Н, A54L, A54S, D56G, D56S, D56K, D56R, E57N, Е57Н, E57S, E57G, E57Q, Е57С, Е57М, E57D, E57R, Е57К, E57W, E57F, V58R, V58Y, V58H, V58M, V58K, V58C, V58L, V58A, V58F, A59R, A59Y, A59V, A59I, A59F, A59W, А59М, A59L, А59Н, I60L, L61M, L61T, L61A, L61I, L61V, L61G, L61P, L61D, S62V, S62W, S62M, S62P, S62N, S62H, S62Q, S62D, S62G, S62I, S62A, S62L, S62C, S62R, S62T, Е63А, E63G, E63D, E63R, Е63Т, E63Q, Е63С, Е63К, .Е63Н, E63I, E63S, Е64Т, E64R, E64S, Е64А, Е65М, E65R, E65Q, Е65А, E65V, E65Y, E66S, Е66А, Е66Т, Е66Р, E66R, E66Y, Е66К, E66G, E66V, Е66М, E66Q, V67I, Е68К, E68Q, I69V, Е70Т, E70R, E70N, E70S, E70V, L71V, L71I, E74Q, E74R, E74V, Е74К, Е74А, E74I, F75Y, Е76К, E76S, Е76Т, Е76Н, E76N, E76D, T77N, Т77Н, I78T, S82L, S82Q, S82V, V83N, V83Y, E84L, Е84К, E84V, Е84М, E84S, Е84А, E84G, Е84Т, E84R, E84F, E84Q, L85F, S86R, S86D, S86K, S86N, S86A, Е88Р, E88D, D89K, D89H, D91E, D91P, D91A, D91T, D91N, D91K, D91W, D91R, D91F, A92R, А92К, А92Т, А92М, A92V, A92Q, A92I, A92L, A92S, Е94А, Е94М, Е94Т, E94R, E94S, E94L, L95E, L95R, L95K, L95S, L95C, L95A, L95T, L95D, L95G, L95V, L95H, D96Y, D96H, D96C, D96S, D96L, D96E, D96I, D96W, D96Y, A98R, A98K, A98D, A98L, S100A, E103T, E103P, E104P, A106F, A106K, A106V, A106L, A106M, E107Q, E107P, T109Y, T109E, T109G, T109N, T109S, T109M, T109R, T109Q и T109W.
7. Выделенный модифицированный полинуклеотид по п.6, где указанная мутация кодирует, по меньшей мере, одну замену указанных положений SEQ ID NO:13.
8. Вектор экспрессии, содержащий модифицированный полинуклеотид по п.1.
9. Клетка-хозяин, способная экспрессировать экзогенный генетический материал, трансформированная вектором по п.8,
где необязательно указанная клетка-хозяин представляет собой микроорганизм,
и где необязательно указанная клетка-хозяин представляет собой микроорганизм, выбранный из группы, состоящей из Bacillus sp., Streptomyces sp., Escherichia sp.H Aspergillus sp.
10. Клетка-хозяин по п.9, где указанная клетка-хозяин представляет собой клетку В. subtilis.
11. Протеаза, продуцируемая клеткой-хозяином по п.9.
12. Способ получения гетерологичной протеазы в микроорганизме, включающий стадии:
(a) культивирования клетки-хозяина Bacillus в пригодных условиях, где клетка-хозяин Bacillus содержит модифицированный полинуклеотид по п.1, кодирующий модифицированную протеазу; и
(b) позволения микроорганизму продуцировать указанную протеазу,
где необязательно указанную гетерологичную протеазу, продуцируемую указанным хозяином Bacillus, выделяют.
13. Способ по п.12, где указанная модифицированная протеаза содержит мутацию, соответствующую аминокислотной замене, выбранной из E33D, E33I, E33S, E33N, Е33К, Е33Н, E33Q, E33R, E57F, E57W, Е57К, E57R, E57D, Е57М, Е57С, E57Q, E57S, Е57Н, E57N и E57G.
14. Способ по п.12, где указанная клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из В. licheniformis, В. lentus, В. subtilis, В. amyloliquefaciens, В. brevis, В. stearothermophilus,, В. clausii, В. alkalophilus, В. halodurans, В. coagulans, В. circulans, В. pumilus и В. Thuringiensis,
где необязательно указанная гетерологичная протеаза представляет собой протеазу В. clausii или В. lentus.
15. Способ по п.12, где указанная гетерологичная протеаза обладает отношением продукции, равным, по меньшей мере, 1.
16. Способ по п.12, где указанная модифицированная протеаза содержит мутацию, соответствующую аминокислотной замене, выбранной из группы, состоящей из: A28Q, А28Т, Е29Т, E29Y, E29V, E29Q, Е29К, Е29М, Е29Р, E29N, E29S, E29G, E29A, E30Q, Е30К, Е30М, Е30А, E30G, E30R, E30S, Е30Н, E30N, Е30Т, A31R, A31G, A31S, А31К, А31Р, E33R, E33Q, E33G, Е33Н, E33N, E33S, E33D, E33I, Е33К, Е33М, K34R, N40V, N40K, N40E, N40Q, N40H, N40Y, N40T, N40A, N40L, N40W, N40F, N40R, Е41А, E41S, E41N, Е41Т, Е41Н, E41R, Q42M, Q42R, Q42P, Q42W, E43S, E43R, E43D, Е43Н, Е43А, A44D, A44Q, А44Е, A44S, V45L, V45A, V45C, S46H, S46R, S46T, S46A, S46Q, S46Y, S46W, E47D, E47R, Е47К, E47Q, Е47Н, F48W, V49G, Е50Н, Q51M, Q51R, V52L, V52W, Е53А, Е53К, E53R, Е53Н, A54L, A54S, D56G, D56S, D56K, D56R, E57N, Е57Н, E57S, E57G, E57Q, Е57С, Е57М, E57D, E57R, Е57К, E57W, E57F, V58R, V58Y, V58H, V58M, V58K, V58C, V58L, V58A, V58F, A59R, A59Y, A59V, A59I, A59F, A59W, А59М, A59L, А59Н, I60L, L61M, L61T, L61A, L61I, L61V, L61G, L61P, L61D, S62V, S62W, S62M, S62P, S62N, S62H, S62Q, S62D, S62G, S62I, S62A, S62L, S62C, S62R/S62T, E63A, E63G, E63D, E63R, E63T, E63Q, E63C, E63K, E63H, E63I, E63S, E64T, E64R, E64S, E64A, E65M, E65R, E65Q, E65A, E65V, E65Y, E66S, E66A, E66T, E66P, E66R, E66Y, E66K, E66G, E66V, E66M, E66Q, V67I, E68K, E68Q, I69V, E70T, E70R, E70N, E70S, E70V, L71V, L71I, E74Q, E74R, E74V, E74K, E74A, E74I, F75Y, E76K, E76S, E76T, E76JH, E76N, E76D, T77N, T77H, I78T, S82L, S82Q, S82V, V83N, V83Y, E84L, E84K, E84V, E84M, E84S, E84A, E84G, E84T, E84R, E84F, E84Q, L85F, S86R, S86D, S86K, S86N, S86A, E88P, E88D, D89K, D89H, D91E, D91P, D91A, D91T, D91N, D91K, D91W, D91R, D91F, A92R, A92K, A92T, A92M, A92V, A92Q, A92I, A92L, A92S, E94A, E94M, E94T, E94R, E94S, E94L, L95E, L95R, L95K, L95S, L95C, L95A, L95T, L95D, L95G, L95V, L95H, D96Y, D96H, D96C, D96S, D96L, D96E, D96I, D96W, D96V, A98R, A98K, A98D, A98L, S100A, E103T, E103P, E104P, A106F, A106K, A106V, A106L, A106M, E107Q, E107P, T109Y, T109E, T109G, T109N, T109S, T109M, T109R, T109Q и T109W,
и где необязательно указанная мутация кодирует, по меньшей мере, одну замену указанных положений SEQ ID NO:13.
RU2009137600/10A 2007-03-12 2008-03-12 Мoдифицированные протеазы RU2496875C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US90673407P 2007-03-12 2007-03-12
US60/906,734 2007-03-12
PCT/US2008/003291 WO2008112258A2 (en) 2007-03-12 2008-03-12 Modified proteases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009137600A RU2009137600A (ru) 2011-04-20
RU2496875C2 true RU2496875C2 (ru) 2013-10-27

Family

ID=39743046

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009137600/10A RU2496875C2 (ru) 2007-03-12 2008-03-12 Мoдифицированные протеазы

Country Status (10)

Country Link
US (2) US8779112B2 (ru)
EP (1) EP2129779B2 (ru)
JP (1) JP5867984B2 (ru)
KR (1) KR20090129425A (ru)
CN (2) CN103667323B (ru)
AU (1) AU2008226792B2 (ru)
CA (1) CA2680563A1 (ru)
HK (1) HK1139982A1 (ru)
RU (1) RU2496875C2 (ru)
WO (1) WO2008112258A2 (ru)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2008226792B2 (en) * 2007-03-12 2013-06-06 Danisco Us Inc. Modified proteases
CA2743060C (en) * 2008-11-11 2017-03-07 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising a subtilisin variant
EP2421973B1 (en) 2009-04-24 2018-05-23 Danisco US Inc. Proteases with modified pro regions
CN102575242B (zh) * 2009-07-31 2015-03-25 丹尼斯科美国公司 具有经修饰的前原区域的蛋白酶
GB0915572D0 (en) * 2009-09-07 2009-10-07 Reckitt Benckiser Nv Detergent composition
WO2011130222A2 (en) * 2010-04-15 2011-10-20 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising variant proteases
US20170298302A1 (en) * 2014-10-30 2017-10-19 Novozymes A/S Protease Variants and Polynucleotides Encoding Same
CN107922934A (zh) * 2015-06-17 2018-04-17 丹尼斯科美国公司 具有经修饰的前肽区域的蛋白酶
CN109055288B (zh) * 2018-06-30 2020-06-23 浙江工业大学 一种重组枯草芽孢杆菌及其应用
KR102316445B1 (ko) * 2019-11-29 2021-10-26 씨제이제일제당 주식회사 신규 세린 프로테아제 변이체
WO2021247851A2 (en) * 2020-06-03 2021-12-09 Molecular Assemblies, Inc. Modified template-independent enzymes for polydeoxynucleotide synthesis
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
WO2023192953A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Danisco Us Inc. Pro-region mutations enhancing protein production in gram-positive bacterial cells
CN114836408B (zh) * 2022-05-28 2023-09-19 湖北大学 含有前肽突变体的碱性蛋白酶及应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002016547A2 (en) * 2000-08-21 2002-02-28 Novozymes A/S Subtilase enzymes
US20050009167A1 (en) * 2001-12-22 2005-01-13 Angrit Weber Alkaline protease from Bacillus sp. (DSM 14390) and washing and cleaning products comprising said alkaline protease
US20050170488A1 (en) * 2002-01-16 2005-08-04 Poulose Ayrookaran J. Multiply-substituted protease variants
RU2269572C2 (ru) * 1997-10-23 2006-02-10 Джененкор Интернэшнл, Инк. Варианты протеазы, замещенные в нескольких положениях

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4302544A (en) * 1979-10-15 1981-11-24 University Of Rochester Asporogenous mutant of B. subtilis for use as host component of HV1 system
US4450235A (en) * 1982-04-21 1984-05-22 Cpc International Inc. Asporogenic mutant of bacillus subtilis useful as a host in a host-vector system
US5310675A (en) * 1983-06-24 1994-05-10 Genencor, Inc. Procaryotic carbonyl hydrolases
US4760025A (en) * 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
DE3480411D1 (en) 1983-07-06 1989-12-14 Gist Brocades Nv Molecular cloning and expression in industrial microorganism species
US5264366A (en) * 1984-05-29 1993-11-23 Genencor, Inc. Protease deficient bacillus
US5700676A (en) * 1984-05-29 1997-12-23 Genencor International Inc. Modified subtilisins having amino acid alterations
WO1987004461A1 (en) * 1986-01-15 1987-07-30 Amgen THERMALLY STABLE AND pH STABLE SUBTILISIN ANALOGS AND METHOD FOR PRODUCTION THEREOF
US4980288A (en) * 1986-02-12 1990-12-25 Genex Corporation Subtilisin with increased thermal stability
HU213220B (en) 1987-02-27 1997-03-28 Gist Brocades Nv Method for enhanced production of serine protease in transformed bacillus cells and production of the transformed cells
US4914031A (en) * 1987-04-10 1990-04-03 Amgen, Inc. Subtilisin analogs
DK6488D0 (da) 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
PT89702B (pt) * 1988-02-11 1994-04-29 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos enzimas proteoliticos e de detergentes que os contem
US5665587A (en) * 1989-06-26 1997-09-09 Novo Nordisk A/S Modified subtilisins and detergent compositions containing same
DK97190D0 (da) * 1990-04-19 1990-04-19 Novo Nordisk As Oxidationsstabile detergentenzymer
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
US5858757A (en) * 1991-05-01 1999-01-12 Novo Nordisk A/S Stabilized enzymes and detergent compositions
DE4411223A1 (de) * 1994-03-31 1995-10-05 Solvay Enzymes Gmbh & Co Kg Verwendung alkalischer Proteasen in gewerblichen Textilwaschverfahren
PT985042E (pt) 1997-06-04 2007-01-31 Genecor Int Inc Enzimas proteases para limpeza difícil e/ou redução de manchas e filmes e composições incluindo as mesmas
MA25044A1 (fr) 1997-10-23 2000-10-01 Procter & Gamble Compositions de lavage contenant des variants de proteases multisubstituees.
CA2313950A1 (en) 1997-12-24 1999-07-08 James T. Kellis, Jr. An improved method of assaying for a preferred enzyme and /or preferred detergent composition
US6835550B1 (en) * 1998-04-15 2004-12-28 Genencor International, Inc. Mutant proteins having lower allergenic response in humans and methods for constructing, identifying and producing such proteins
US6376450B1 (en) * 1998-10-23 2002-04-23 Chanchal Kumar Ghosh Cleaning compositions containing multiply-substituted protease variants
US7109016B2 (en) * 2000-08-21 2006-09-19 Novozymes A/S Subtilase enzymes
DE10162728A1 (de) * 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
EP2341070A3 (en) * 2002-03-29 2011-10-19 Genencor International, Inc. Ehanced protein expression in bacillus
JP4210548B2 (ja) * 2002-06-26 2009-01-21 花王株式会社 アルカリプロテアーゼ
AU2004265613B2 (en) * 2003-08-06 2010-12-09 University Of Maryland, College Park Engineered proteases for affinity purification and processing of fusion proteins
US20080090747A1 (en) * 2006-07-18 2008-04-17 Pieter Augustinus Protease variants active over a broad temperature range
AU2008226792B2 (en) * 2007-03-12 2013-06-06 Danisco Us Inc. Modified proteases
EP2421973B1 (en) * 2009-04-24 2018-05-23 Danisco US Inc. Proteases with modified pro regions

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2269572C2 (ru) * 1997-10-23 2006-02-10 Джененкор Интернэшнл, Инк. Варианты протеазы, замещенные в нескольких положениях
WO2002016547A2 (en) * 2000-08-21 2002-02-28 Novozymes A/S Subtilase enzymes
US20050009167A1 (en) * 2001-12-22 2005-01-13 Angrit Weber Alkaline protease from Bacillus sp. (DSM 14390) and washing and cleaning products comprising said alkaline protease
US20050170488A1 (en) * 2002-01-16 2005-08-04 Poulose Ayrookaran J. Multiply-substituted protease variants

Also Published As

Publication number Publication date
WO2008112258A2 (en) 2008-09-18
CN101641438B (zh) 2013-12-25
AU2008226792A1 (en) 2008-09-18
HK1139982A1 (en) 2010-09-30
US8779112B2 (en) 2014-07-15
JP2010521152A (ja) 2010-06-24
WO2008112258A3 (en) 2008-11-20
CN103667323A (zh) 2014-03-26
EP2129779B2 (en) 2018-12-26
JP5867984B2 (ja) 2016-02-24
CN101641438A (zh) 2010-02-03
US9523088B2 (en) 2016-12-20
EP2129779A2 (en) 2009-12-09
US20090075332A1 (en) 2009-03-19
US20140295526A1 (en) 2014-10-02
CA2680563A1 (en) 2008-09-18
AU2008226792B2 (en) 2013-06-06
EP2129779B1 (en) 2016-03-09
KR20090129425A (ko) 2009-12-16
CN103667323B (zh) 2016-02-03
RU2009137600A (ru) 2011-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2496875C2 (ru) Мoдифицированные протеазы
US10731144B2 (en) Proteases with modified propeptide regions
JP2010521152A5 (ru)
US9593320B2 (en) Proteases with modified pro regions
Strausberg et al. Directed evolution of a subtilisin with calcium-independent stability
Fang et al. Cloning, heterologous expression and characterization of two keratinases from Stenotrophomonas maltophilia BBE11-1
MX2009003936A (es) Variantes de mutacion multiple de serina-proteasa.
EP2284259A3 (en) Protease variants
CN102575242A (zh) 具有经修饰的前原区域的蛋白酶
DE60321901D1 (de) Verbesserte bacillus-wirtszelle
Ribitsch et al. C-terminal truncation of a metagenome-derived detergent protease for effective expression in E. coli
KR20160068950A (ko) 안정성이 증가된 프로테아제 변이체
RU2013158458A (ru) Экспрессионные векторы для улучшенной секреции белка
US20170362628A1 (en) Enhanced protein expression
US10287591B2 (en) Enhanced protein expression
PL423299A1 (pl) Sposób oczyszczania środowiska zanieczyszczonego estrami siarkowymi, nowe szczepy bakteryjne, nowe białka, konstrukt kwasu nukleinowego, wektor, komórka gospodarz, sposób wytwarzania szczepów bakteryjnych i nowych białek, kompozycja ich zastosowania oraz sposób bioremediacji środowiska
JP2007074933A (ja) 組換え微生物
AR124633A1 (es) Nuevas serina proteasas

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20160313