RU2465329C2 - Способ восстановления переэтерификационной активности липазы и способ переэтерификации - Google Patents
Способ восстановления переэтерификационной активности липазы и способ переэтерификации Download PDFInfo
- Publication number
- RU2465329C2 RU2465329C2 RU2008148843/10A RU2008148843A RU2465329C2 RU 2465329 C2 RU2465329 C2 RU 2465329C2 RU 2008148843/10 A RU2008148843/10 A RU 2008148843/10A RU 2008148843 A RU2008148843 A RU 2008148843A RU 2465329 C2 RU2465329 C2 RU 2465329C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lipase
- powder mixture
- lypase
- activity
- immobilized
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 title abstract description 24
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims abstract description 138
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims abstract description 138
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims abstract description 138
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims abstract description 138
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 74
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 51
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 19
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 12
- 241001285933 Thermomyces sp. Species 0.000 claims abstract description 11
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 claims description 49
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical group O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 6
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 3
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 claims description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 abstract 1
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 30
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 12
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 8
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 8
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- -1 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 4
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229940121343 tricaprilin Drugs 0.000 description 3
- VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N trioctanoin Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010048733 Lipozyme Proteins 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- FCCDDURTIIUXBY-UHFFFAOYSA-N lipoamide Chemical compound NC(=O)CCCCC1CCSS1 FCCDDURTIIUXBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical group 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N Triolein Natural products O([C@H](OCC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)C(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N 0.000 description 1
- PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N Trioleoylglycerol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000008173 hydrogenated soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000012051 hydrophobic carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000009527 percussion Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N triolein Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N 0.000 description 1
- 229940117972 triolein Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
- C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
- C11C3/02—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with glycerol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
- C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
- C11C3/04—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fats or fatty oils
- C11C3/10—Ester interchange
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6454—Glycerides by esterification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6458—Glycerides by transesterification, e.g. interesterification, ester interchange, alcoholysis or acidolysis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ восстановления переэтерификационной активности липазы, полученной из Thermomyces sp. и иммобилизованной на носителе, или липазной порошковой смеси, которая содержит вспомогательный фильтрующий материал и липазу, полученную из Thermomyces sp. и иммобилизованную на носителе. При этом липазную порошковую смесь измельчают до среднего размера частиц от 1 мкм до 300 мкм. Способ осуществляют путем промывания указанной липазы или липазной порошковой смеси триацилглицерином. Также предложен способ переэтерификации. Проводят реакцию переэтерификации с использованием вышеуказанной липазы или липазной порошковой смеси. Затем осуществляют отделение липазы или липазной порошковой смеси от реакционной системы и ее промывание триацилглицерином для восстановления переэтерификационной активности. Затем снова проводят реакции переэтерификации с использованием восстановленной липазы или липазной порошковой смеси. Способ позволяет эффективно восстанавливать сниженную переэтерификационную активность липазы или липазной порошковой смеси и повторно использовать их в реакции переэтерификации. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 3 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способам восстановления липазной активности, такой как способности конкретной иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси вступать в различные реакции этерификации или переэтерификации. Настоящее изобретение также относится к реакциям этерификации или способам переэтерификации масел и жиров, где применяется иммобилизованная липаза или липазная порошковая смесь.
Уровень техники
Липаза широко применяется в реакциях этерификации между различными карбоновыми кислотами, такими как жирные кислоты, и спиртами, такими как одноатомные и многоатомные спирты; или в реакции переэтерификации сложных эфиров карбоновых кислот. В том числе, реакция переэтерификации является важной технологией для модификации животных и растительных жиров и для производства эфиров различных жирных кислот, эфиров сахаров и стероидов. Когда липаза, которая является гидролазой жиров и масел, используется в качестве катализатора этих реакций, реакция переэтерификации может быть проведена в мягких условиях от комнатной температуры до примерно 70°С. Таким образом, по сравнению со стандартными химическими реакциями, липаза не только ингибирует побочные реакции и снижает энергетические затраты, но и имеет высокий уровень безопасности, поскольку липаза как катализатор является натуральным продуктом. Далее, целевые соединения могут эффективно производиться благодаря их позиционной и субстратной специфичности. Однако, хотя липазный порошок используется непосредственно в реакции переэтерификации, активность липазы проявляется не полностью. Кроме того, сложно равномерно диспергировать липазу, которая в основном растворима в воде, в сыром субстрате на масляной основе, и также сложно собрать ее. Таким образом, обычно липазу иммобилизуют на определенном носителе, таком как анионообменная смола (Патентный документ 1), фенолабсорбирующая смола (Патентный документ 2), гидрофобный носитель (Патентный документ 3), катионообменная смола (Патентный документ 4) и хелатирующая смола (Патентный документ 5), и используется в реакции этерификации или переэтерификации.
Однако так как при иммобилизации липазы на носителе ее липазная активность снижается, были разработаны различные технологии с применением липазного порошка.
В частности, предложен способ, который включает стадии диспергирования липазного порошка в сыром субстрате, содержащем эфир(ы) в присутствии или отсутствие неактивного органического растворителя, где в реакции переэтерификации от 90% частиц диспергированного липазного порошка имеют размер от 1 до 100 мкм; и затем проведения реакции переэтерификации (Патентный документ 6). Далее также предлагается использовать ферментный порошок, полученный в результате высушивания ферментной суспензии, содержащей фосфолипид(ы) и жирорастворимый(е) витамин(ы) (Патентный документ 7).
В то же время, так как липаза, которая является ферментом, стоит дорого, после завершения реакции ее собирают и используют повторно, и выбрасывают тогда, когда происходит значительное снижение липазной активности. Однако если сниженная липазная активность может быть восстановлена, практичность использования липаз значительно увеличится. Поэтому, с точки зрения промышленного производства, создание эффективного способа восстановления липазной активности имеет большой практический интерес.
Патентный документ 1: JP-A60-98984
Патентный документ 2: JP-A61-202688
Патентный документ 3: JP-A2-138986
Патентный документ 4: JP-A3-61485
Патентный документ 5: JP-A1-262795
Патентный документ 6: JP-B2668187
Патентный документ 7: JP-A2000-106873
Сущность изобретения
Цель данного изобретения - предоставить способы восстановления сниженной липазной активности.
Следующая цель настоящего изобретения - предоставить способы этерификации или способы переэтерификации, каждый из которых включает стадию использования иммобилизированной липазы или липазной порошковой смеси, каждая из которых имеет восстановленную липазную активность.
Настоящее изобретение было выполнено на основании выявления того факта, что исходная липазная активность иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси, которая содержит измельченный продукт из иммобилизованной липазы и вспомогательного фильтрующего материала, может быть восстановлена путем промывания указанных липаз или липазных порошковых смесей со сниженной активностью триацилглицерином.
В частности, настоящее изобретение предоставляет способ восстановления липазной активности, включающий стадии использования липазы, полученной из Thermomyces sp. и иммобилизованной на носителе, или липазной порошковой смеси, которая содержит вспомогательный фильтрующий материал и липазу, полученную из Thermomyces sp. и иммобилизованную на носителе, измельченной до среднего размера частиц от 1 мкм и более до менее чем 300 мкм в реакции этерификации или переэтерификации; и промывании указанной липазы или липазной порошковой смеси с триацилглицерином.
Настоящее изобретение также предоставляет способ этерификации или переэтерификации, включающий стадии использования липазы, полученной из Thermomyces sp. и иммобилизованной на носителе или липазной порошковой смеси, которая содержит вспомогательный фильтрующий материал и липазу, полученную из Thermomyces sp. и иммобилизованную на носителе, измельченной до среднего размера частиц от 1 мкм и более до менее чем 300 мкм в реакции этерификации или переэтерификации; отделения липазы или липазной порошковой смеси от реакционной системы и промывании их триацилглицерином для восстановления их липазной активности; и затем проведения реакции этерификации или переэтерификации с использованием полученной иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси.
Краткое описание чертежей
Фиг.1 иллюстрирует снижение переэтерификационной активности во времени при использовании липазной порошковой смеси в реакции переэтерификации (Пример 1(3)).
Фиг.2 иллюстрирует, что, в соответствии с настоящим изобретением, при отмывании липазной порошковой смеси, переэтерификационная активность которой была снижена, происходит восстановление ее переэтерификационной активности (Пример 1(4)).
Фиг.3 иллюстрирует, что, в соответствии с настоящим изобретением, при отмывании иммобилизованной липазы, переэтерификационная активность которой была снижена, происходит восстановление ее переэтерификационной активности (Пример 3(3-2)).
Лучший вариант осуществления изобретения
Липаза, применяемая в настоящем изобретении, была получена из Thermomyces sp. и иммобилизована на носителе, предпочтительно на носителе из диоксида кремния. В настоящем изобретении можно применять непосредственно указанную липазу или использовать указанную липазу, которая измельчена до среднего размера частиц от 1 мкм и более до менее чем 300 мкм. В частности, предпочтительно, чтобы липаза, иммобилизованная на носителе из диоксида кремния с размером частиц примерно от 300 до 1000 мкм, была измельчена до среднего размера частиц от 1 мкм до 300 мкм. Такая иммобилизованная липаза может быть получена, к примеру, от компании Novozymes A/S, которая производит продукт Lipozyme TL-IM.
При измельчении такой иммобилизованной липазы предпочтительно использовать стандартные мельницы и измельчать ее до среднего размера частиц от 1 мкм и более до менее чем 300 мкм, предпочтительно от 1 мкм до 200 мкм, предпочтительнее от 1 мкм до 100 мкм и в особенности предпочтительно от 20 мкм до 100 мкм. Примеры мельницы включают ступку, стержневую барабанную мельницу, фрезеровочную мельницу, жернов (Mycolloider, Masscolloider), кофейную мельницу, электрическую мельницу, штифтовую мельницу, ударную мельницу (молотковую мельницу или шаровую мельницу), вальцовую мельницу, электрическую мельницу, гомогенизатор и ультразвуковую мельницу.
Когда липаза, использованная в данном изобретении, является продуктом вышеуказанного измельчения, предпочтительно использовать ее в сочетании со вспомогательным фильтрующим материалом. Примеры вспомогательного фильтрующего материала включают неорганические фильтрующие материалы, такие как целит и органические вспомогательные фильтрующие материалы, такие как волокна, к примеру, целлюлоза, и их измельченные продукты. Среди них предпочтительны органические вспомогательные фильтрующие материалы, особенно предпочтительны органические полимерные вспомогательные фильтрующие материалы, в особенности предпочтительны целлюлоза и подобные ей материалы. Предпочтительные примеры таковых включают торговую марку: KC Flock, производимую Nippon paper Chemicals Co., Ltd. Предпочтительно, чтобы фильтрующий материал также был в порошковой форме и имел средний размер частиц от 10 до 90 мкм.
Предпочтительное массовое соотношение описанного выше продукта измельчения липазы к вспомогательному фильтрующему материалу составляет от 1/10 до 10/1 и в особенности предпочтительно соотношение от 1/7 до 2/1.
Хотя описанная выше иммобилизованная липаза или липазная порошковая смесь, применяемая в настоящем изобретении, могут применяться непосредственно в этерификации или переэтерификации масел и жиров, они могут быть очищены при взаимодействии их с триглицеридами жирных кислот с длинной цепью и триглицеридами жирных кислот со средней длиной цепи; после чего их можно отделить. В то же время возможно увеличить их липазную активность.
Поскольку здесь используются триглицерид жирных кислот с длинной цепью и триглицерид жирных кислот со средней длиной цепи для промывания иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси предпочтительно использовать те из них, которые указаны в следующем разделе.
Предпочтительно использование триглицерида жирных кислот с длинной цепью и триглицерида жирных кислот со средней длиной цепи в массовом соотношении от 95:5 до 50:50 и предпочтительно добавлять от 2 до 100 масс триглицерида на общую массу липазы.
Реакция этерификации, использующая липазу или липазную порошковую смесь, в предпочтительном воплощении представляет собой способ, включающий стадии этерификации жиров и масел в присутствии иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси; затем сбор иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси и их повторное использование.
В особенности, поскольку липазная активность и пригодность для реакции этерификации и переэтерификации вышеуказанной липазной порошковой смеси восстанавливается достаточно для ее переработки и повторного использования в реакциях, можно соответствующим образом использовать смесь в модификации жиров и масел в промышленном масштабе путем их переэтерификации.
Однако при повторяющейся переработке и использовании такой липазной порошковой смеси или иммобилизованной липазы в реакции этерификации или переэтерификации, их липазная активность, такая как способность к этерификации и переэтерификации, снижается в зависимости от кратности использования.
Настоящее изобретение делает возможным увеличение липазной активности такой иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси, липазная активность каждой из которых снижена, при промывании в специальных условиях, и для липазной порошковой смеси долгое время сохраняются повышенная липазная активность и возможность многократного использования.
В настоящем изобретении иммобилизованная липаза или липазная порошковая смесь, каждая из которых имеет сниженную липазную активность, может включать и такие, где исходная липазная активность даже немного снижена. Однако с точки зрения промышленного использования, предпочтительно выбирать такие липазы, исходная активность которых (100%) снижена до уровня от 70% до 50%.
Между тем, предпочтительно, чтобы триацилглицерин, используемый для промывания иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси, находился в жидком состоянии при комнатной температуре. Особенно предпочтительно использовать смесь триглицерида жирных кислот с длинной цепью и триглицерида жирных кислот со средней длиной цепи, каждый из которых используется для очистки липазной порошковой смеси.
Если используется триглицерид жирных кислот с длинной цепью, предпочтительно, чтобы остаток жирной кислоты такого триглицерида содержал от 14 до 24 атомов углерода, также наиболее предпочтительно, чтобы растительное масло было выбрано из группы, состоящей из канолового масла, соевого масла, подсолнечного масла, сафлорового масла и кукурузного масла.
Для триглицерида жирных кислот со средней длиной цепи предпочтительно, чтобы остаток жирной кислоты такого триглицерида содержал от 6 до 12 атомов углерода. Такие триглицериды жирных кислот можно получить общеизвестным способом или использовать для этих целей продукт, доступный на рынке. Примеры торговых марок продуктов, доступных на рынке, включают ODO, производимый The Nisshin OilliO Group, Ltd.
Предпочтительно использование триглицерида жирных кислот с длинной цепью и триглицерида жирных кислот со средней длиной цепи, в массовом соотношении от 95:5 до 50:50 и лучше добавлять от 2 до 100 масс. триглицерида на общую массу липазы, наиболее предпочтительно от 5 до 50 масс. триглицерида на общую массу липазы.
В частности, триацилглицерин, используемый для промывания, и предпочтительно является сырым маслом для переэтерификации.
Предпочтительно, чтобы иммобилизованная липаза или липазная порошковая смесь промывалась так, что вышеописанная липаза или липаза в липазной смеси могла в достаточной мере контактировать с описанным выше триацилглицерином. В частности, предпочтительно производить промывание с перемешиванием и диспергированием иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси, используемой в реакции этерификации или переэтерификации в триацилглицерине; и отделения их от триацилглицерина.
Контактирование, более конкретно перемешивание, предпочтительно проводить при температуре от 10 до 45°С, в особенности предпочтительно при комнатной температуре; предпочтительно от 2 часов или более, более предпочтительно в течение 10 часов или более, в особенности предпочтительно от 12 до 48 часов. При желании можно проводить ее от 48 часов и более. Выбор мешалки для перемешивания особенно не ограничен, и предпочтительно использовать пропеллерную мешалку, магнитную мешалку, трехфазный двигатель или подобные устройства.
Таким образом, иммобилизованная липаза или липазная порошковая смесь в достаточной мере контактирует с триацилглицерином; отфильтровывается обычным способом для отделения иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси от триацилглицерина; и затем снова используется в реакции этерификации или переэтерификации.
До настоящего времени липаза, липазная активность которой была снижена вследствие участия ее в различных реакциях, выбрасывалась. Однако по способу настоящего изобретения, так как липазная активность может быть восстановлена, продолжительность применения липазы может быть увеличена и стоимость продуктов, производимых с помощью липазы, может быть уменьшена. Таким образом, с точки зрения промышленного применения настоящее изобретение имеет много преимуществ.
Следующие примеры раскрывают настоящее изобретение.
Пример 1
(1) 1 кг Lypozyme TL-IM фирмы Novozymes A/S со средним размером частиц 800 мкм измельчали с помощью штифтовой мельницы (тонкая ударная мельница 100 UPZ) компании Hosokawa Micron Corporation при 17600 об/мин. Размер частиц измельченной липазы измеряли с помощью анализатора распределения размера частиц LA-500 фирмы Horiba, Ltd., и средний размер этих частиц был равен 13,8 мкм. Для приготовления липазной порошковой смеси к липазному порошку в качестве вспомогательного фильтрующего материала добавляли 1 кг целлюлозного порошка фирмы Nippon Paper Chemicals, Co., Ltd. со средним размером частиц 30 мкм.
(2) 90 г обесцвеченного канолового масла и 10 г ODO (триглицерид среднецепочечной жирной кислоты) компании Nisshin OilliO Group, Ltd. добавляли к 5 г полученной таким образом липазной смеси и перемешивали 24 часа при комнатной температуре. После этого смесь отфильтровывали для отбора липазной смеси. Затем с помощью следующего метода измеряли переэтерификационную активность этой липазной смеси, и ее относительная активность оказалась равной 714, если принять активность Lypozyme TL-IM перед измельчением за 100.
Метод измерения липазной активности
Липазную смесь добавляли к маслу, в котором триолеин и трикаприлин находились в соотношении 1:1 (по объему), и осуществляли реакцию при 60°С. По прошествии времени в качестве пробы отбирали 10 мкл реакционной смеси, разбавляли в 1,5 мл гексана и затем раствор, где была отфильтрована липазная смесь, брали в качестве пробы для газовой хроматографии (ГХ). Раствор анализировался с помощью газовой хроматографии (колонка DB-1ht), и скорость реакции рассчитывали по следующей формуле. Условия ГХ: исходная температура колонки 150°С, подъем температуры на 15°С/мин и конечная температура 370°С.
Скорость реакции (%)={площадь С34/(площадь С24+площадь С34)}×100, где С24 - это трикаприлин; С34 - это трикаприлин, где одна жирная кислота заменена на олеиновую; и площадь - это площадь каждого из них. На основании скорости реакции в каждый момент времени с помощью аналитического программного обеспечения (Origin ver. 6.1) была рассчитана константа скорости реакции k.
Активность липазы была представлена через относительную активность, принимая k для Lipozyme TL-IM равным 100.
(3) 1 масс.% липазной смеси, полученной выше в (2), добавляли к 85 г обесцвеченного канолового масла фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и 15 г ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd., и для проведения реакции переэтерификации перемешивали 19 часов при 60°С. По прошествии времени рассчитывали скорость переэтерификации и подтверждали прохождение реакции. Для реакции переэтерификации с помощью газовой хроматографии был проанализирован состав триглицеридов, также было рассчитано пропорциональное отношение реагирующего вещества реакции переэтерификации в измеренной пробе.
После завершения реакции липазная смесь была отфильтрована и собрана, и собранная липазная смесь повторно использовалась в реакции переэтерификации. В дальнейшем реакция проводилась еще несколько раз. Изменение скорости реакции, представленное в виде относительной скорости, показано на фиг.1.
По результатам фиг.1 стало понятным, что когда общее время реакции достигает 82 часов, липазная активность липазной смеси снижается примерно до 60%.
(4) Липазная смесь, описанная в (3), липазная активность которой снизилась примерно до 60%, была отфильтрована и собрана. Собранную таким образом липазную смесь добавляли к 18 г обесцвеченного канолового масла фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и 2 г ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и перемешивали с помощью магнитной мешалки 24 часа при комнатной температуре. После того как липазная смесь была собрана путем фильтрации, была повторно проведена реакция переэтерификации, как указано в (3). Изменение скорости реакции, представленное в виде относительной скорости, показано на фиг.2.
По результатам фиг.2 стало понятным, что липазная активность восстанавливается до исходной активности в 100% при промывании с перемешиванием липазной смеси со сниженной липазной активностью и что такая липазная смесь может быть переработана и использована большое количество раз.
Пример 2
(2-1) 90 г обесцвеченного канолового масла и 10 г ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. добавляли к 5 г липазной смеси, полученной в (1) примера 1, и перемешивали 2 часа при 60°С. Затем, чтобы собрать липазную смесь, смесь отфильтровывали. Переэтерификационную активность этой липазной смеси измеряли тем же способом, что и в примере 1, и она была равна 557.
(2-2) 1,2 масс.% липазной смеси, полученной выше в (2-1), добавляли к 100 г соевого масла и 25 г полностью гидрированного соевого масла фирмы Yokozeki Fat & Oil Corporation и перемешивали 120 часов при 70°С. Затем липазную смесь собирали с помощью фильтрации. Липазную активность части собранной липазной смеси измеряли тем же способом, что и в примере 1 (2-2а). Предварительно собранная липазная смесь была диспергирована в ацетоне и профильтрована. Ее осадок на фильтре был снова собран и диспергирован в 50 г масла, смешанного в соотношении обесцвеченное каноловое масло: ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd.=9:1 (по массе). Затем смесь была отфильтрована для ее промывания и замены, и была собрана липазная смесь. Переэтерификационная активность этой липазной смеси была измерена тем же способом, что и в примере 1(2-2b). Каждая полученная активность была отражена в относительных единицах в таблице 1.
| Таблица 1 | |
| Относительная липазная активность в расчете на массу липазного препарата | |
| Перед измельчением (TL-IM) | 100 |
| (2-1) | 557 |
| (2-2a) | 11 |
| (2-2b) | 200 |
Пример 3
5 масс.% Lypozyme TL-IM(иммобилизованная липаза) фирмы Novozymes A/S добавляли к 85 г обесцвеченного канолового масла фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и 15 г ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и перемешивали 19 часов при 60°С для проведения реакции переэтерификации. По прошествии времени рассчитывалась скорость переэтерификации и подтверждалось прохождение реакции. Для реакции переэтерификации с помощью газовой хроматографии был проанализирован состав триглицеридов, также было рассчитано пропорциональное отношение реагирующего вещества реакции переэтерификации в измеренной пробе.
После окончания реакции вышеописанная иммобилизованная липаза была отфильтрована и собрана, и собранная иммобилизованная липаза была повторно использована в реакции переэтерификации.
В дальнейшем реакция проводилась еще несколько раз. Изменение скорости реакции, представленное в виде относительной скорости, показано на фиг.3 (3-1).
Вышеописанная иммобилизованная липаза, липазная активность которой снизилась примерно до 60%, была отфильтрована и собрана. Собранная таким образом иммобилизованная липаза была добавлена к 18 г обесцвеченного канолового масла фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и 2 г ODO фирмы Nisshin OilliO Group, Ltd. и перемешивалась с помощью магнитной мешалки 24 часа при комнатной температуре. Затем путем фильтрации иммобилизованная липаза была собрана, и как указано в (3-1), была повторно проведена реакция переэтерификации. Изменение скорости реакции во времени, представленное в виде относительной скорости, показано на фиг.3 (3-2).
Claims (10)
1. Способ восстановления переэтерификационной активности липазы, полученной из Thermomyces sp. и иммобилизованной на носителе, или липазной порошковой смеси, которая содержит вспомогательный фильтрующий материал и липазу, полученную из Thermomyces sp. и иммобилизованную на носителе, измельченной до среднего размера частиц от 1 мкм до 300 мкм, путем промывания указанной липазы или липазной порошковой смеси триацилглицерином.
2. Способ по п.1, где триацилглицерин находится в жидком состоянии при комнатной температуре.
3. Способ по п.1, в котором триацилглицерин включает триглицерид(ы) жирных кислот со средней длиной цепи.
4. Способ по любому из пп.1-3, где триацилглицерин представляет собой сырое масло для переэтерификации.
5. Способ по любому из пп.1-3, где промывание проводят с помощью стадий перемешивания и диспергирования иммобилизованной липазы или липазной порошковой смеси, используемой в реакции переэтерификации, в триацилглицерине; и отделения липазы или липазной порошковой смеси от триацилглицерина.
6. Способ по любому из пп.1-3, где носителем является диоксид кремния.
7. Способ по любому из пп.1-3, где средний размер частиц измельченного носителя с иммобилизованной липазой составляет от 1 до 200 мкм.
8. Способ по любому из пп.1-3, где вспомогательным фильтрующим материалом является целлюлоза.
9. Способ по любому из пп.1-3, где вспомогательный фильтрующий материал находится в форме порошка, средний размер частиц которого составляет от 10 до 90 мкм.
10. Способ переэтерификации, включающий стадии использования липазы, полученной из Thermomyces sp. и иммобилизованной на носителе, или липазной порошковой смеси, которая содержит вспомогательный фильтрующий материал и липазу, полученную из Thermomyces sp. и иммобилизованную на носителе, измельченной до среднего размера частиц от 1 мкм до 300 мкм, в реакции переэтерификации; отделения липазы или липазной порошковой смеси от реакционной системы и промывание ее триацилглицерином для восстановления ее переэтерификационной активности; и затем проведение реакции переэтерификации с использованием полученной липазы или липазной порошковой смеси.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006132639A JP4917349B2 (ja) | 2006-05-11 | 2006-05-11 | リパーゼ活性の回復方法 |
| JP2006-132639 | 2006-05-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008148843A RU2008148843A (ru) | 2010-06-20 |
| RU2465329C2 true RU2465329C2 (ru) | 2012-10-27 |
Family
ID=38693868
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008148843/10A RU2465329C2 (ru) | 2006-05-11 | 2007-05-11 | Способ восстановления переэтерификационной активности липазы и способ переэтерификации |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7923224B2 (ru) |
| EP (1) | EP2019135B1 (ru) |
| JP (1) | JP4917349B2 (ru) |
| KR (1) | KR20090010048A (ru) |
| CN (1) | CN101490254B (ru) |
| AU (1) | AU2007250913B2 (ru) |
| CA (1) | CA2652076C (ru) |
| DK (1) | DK2019135T3 (ru) |
| ES (1) | ES2402902T3 (ru) |
| HK (1) | HK1131189A1 (ru) |
| MY (1) | MY145036A (ru) |
| NO (1) | NO20085072L (ru) |
| RU (1) | RU2465329C2 (ru) |
| TW (1) | TWI398521B (ru) |
| WO (1) | WO2007132775A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5586855B2 (ja) * | 2009-02-12 | 2014-09-10 | 花王株式会社 | モノアシルグリセロール高含有油脂の製造方法 |
| JP5494913B2 (ja) * | 2009-03-27 | 2014-05-21 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ粉末組成物の製造方法 |
| JP2012206084A (ja) * | 2011-03-30 | 2012-10-25 | Cci Corp | 油脂含有排水の処理方法およびその排水処理材 |
| JP5178888B2 (ja) * | 2011-08-02 | 2013-04-10 | 日清オイリオグループ株式会社 | エステル交換油の製造方法 |
| JP5258941B2 (ja) * | 2011-08-19 | 2013-08-07 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ活性の回復方法 |
| JP6990076B2 (ja) * | 2017-09-20 | 2022-02-03 | 花王株式会社 | 脂肪酸類の製造方法 |
| BR112020010347A2 (pt) * | 2017-11-24 | 2020-10-20 | Novozymes A/S | pequenas partículas enzimáticas para interesterificação |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7001749B2 (en) * | 2002-09-06 | 2006-02-21 | Kao Corporation | Regenerating method of immobilized enzyme |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK402583D0 (da) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | Novo Industri As | Fremgangsmade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat og anvendelse deraf |
| DK153762C (da) | 1985-02-27 | 1989-01-09 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat |
| GB8729890D0 (en) | 1987-12-22 | 1988-02-03 | Unilever Plc | Improvements in & relating to fat processes |
| JP2749587B2 (ja) | 1988-04-11 | 1998-05-13 | 花王株式会社 | 固定化酵素の製造方法 |
| DK638688D0 (da) * | 1988-11-16 | 1988-11-16 | Novo Industri As | Partikelformet immobiliseret lipase-praeparat, fremgangsmaade til fremstilling deraf og anvendelse deraf |
| JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1998-09-03 | 味の素株式会社 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
| JPH05137574A (ja) * | 1991-11-21 | 1993-06-01 | Nisshin Oil Mills Ltd:The | 固定化リパーゼの再活性化法 |
| JP2668187B2 (ja) * | 1993-09-17 | 1997-10-27 | 日清製油株式会社 | リパーゼ粉末を用いたエステル交換法 |
| US5902738A (en) * | 1996-04-18 | 1999-05-11 | Roche Vitamins Inc. | Enzymatic acylation |
| IL129086A0 (en) * | 1999-03-22 | 2000-02-17 | Enzymotec Ltd | Surfactant-lipase complex immobilized on insoluble matrix |
| US6156548A (en) * | 1997-12-23 | 2000-12-05 | Novo Nordisk A/S | Immobilization of enzymes with a fluidized bed for use in an organic medium |
| JP2000106873A (ja) | 1998-10-06 | 2000-04-18 | Nisshin Oil Mills Ltd:The | 熱安定性酵素およびその製造法 |
| US6372472B1 (en) * | 1999-09-24 | 2002-04-16 | Swim Pure Corporation | Filter media containing powered cellulose and immobilized lipase for swimming pool and spa water filteration |
| JP3690951B2 (ja) * | 1999-12-22 | 2005-08-31 | 日清オイリオグループ株式会社 | 油脂のエステル交換反応方法 |
| JP4530311B2 (ja) * | 2000-07-13 | 2010-08-25 | 日本水産株式会社 | リパーゼを用いたグリセライドの製造方法 |
-
2006
- 2006-05-11 JP JP2006132639A patent/JP4917349B2/ja active Active
-
2007
- 2007-05-09 TW TW096116396A patent/TWI398521B/zh not_active IP Right Cessation
- 2007-05-11 RU RU2008148843/10A patent/RU2465329C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-05-11 DK DK07743186.4T patent/DK2019135T3/da active
- 2007-05-11 CA CA2652076A patent/CA2652076C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-05-11 ES ES07743186T patent/ES2402902T3/es active Active
- 2007-05-11 WO PCT/JP2007/059751 patent/WO2007132775A1/ja active Application Filing
- 2007-05-11 KR KR1020087027503A patent/KR20090010048A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-05-11 EP EP07743186A patent/EP2019135B1/en active Active
- 2007-05-11 MY MYPI20084498A patent/MY145036A/en unknown
- 2007-05-11 AU AU2007250913A patent/AU2007250913B2/en not_active Ceased
- 2007-05-11 CN CN2007800260242A patent/CN101490254B/zh active Active
-
2008
- 2008-11-07 US US12/266,617 patent/US7923224B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-12-04 NO NO20085072A patent/NO20085072L/no unknown
-
2009
- 2009-11-25 HK HK09111004.2A patent/HK1131189A1/xx not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7001749B2 (en) * | 2002-09-06 | 2006-02-21 | Kao Corporation | Regenerating method of immobilized enzyme |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2007132775A1 (ja) | 2007-11-22 |
| US20090075349A1 (en) | 2009-03-19 |
| CA2652076A1 (en) | 2007-11-22 |
| US7923224B2 (en) | 2011-04-12 |
| ES2402902T3 (es) | 2013-05-10 |
| TWI398521B (zh) | 2013-06-11 |
| HK1131189A1 (en) | 2010-01-15 |
| AU2007250913A1 (en) | 2007-11-22 |
| JP2007300855A (ja) | 2007-11-22 |
| AU2007250913B2 (en) | 2012-06-28 |
| CA2652076C (en) | 2015-01-06 |
| MY145036A (en) | 2011-12-15 |
| EP2019135A4 (en) | 2009-11-11 |
| EP2019135B1 (en) | 2013-03-06 |
| JP4917349B2 (ja) | 2012-04-18 |
| DK2019135T3 (da) | 2013-04-15 |
| RU2008148843A (ru) | 2010-06-20 |
| EP2019135A1 (en) | 2009-01-28 |
| NO20085072L (no) | 2008-12-05 |
| CN101490254A (zh) | 2009-07-22 |
| CN101490254B (zh) | 2011-10-05 |
| TW200813229A (en) | 2008-03-16 |
| KR20090010048A (ko) | 2009-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2465329C2 (ru) | Способ восстановления переэтерификационной активности липазы и способ переэтерификации | |
| JP5145609B2 (ja) | リパーゼ粉末製剤、その製造方法及び使用 | |
| RU2412245C2 (ru) | Липазные порошковые составы | |
| CA3075814A1 (en) | A process for the cell-free enzymatic production of 10-hydroxystearic acid (10-hsa) from bio-based oils for lubricant formulation | |
| JP5494913B2 (ja) | リパーゼ粉末組成物の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160512 |