RU2460775C1 - Enriched nutrient medium for legionella cultivation - Google Patents
Enriched nutrient medium for legionella cultivation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2460775C1 RU2460775C1 RU2011127450/10A RU2011127450A RU2460775C1 RU 2460775 C1 RU2460775 C1 RU 2460775C1 RU 2011127450/10 A RU2011127450/10 A RU 2011127450/10A RU 2011127450 A RU2011127450 A RU 2011127450A RU 2460775 C1 RU2460775 C1 RU 2460775C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- potassium phosphate
- substituted
- legionella
- agar
- nutrient medium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, именно к получению питательных сред для выращивания легионелл.The invention relates to biotechnology, namely to obtain nutrient media for growing legionella.
Известна питательная среда для выращивания легионелл, основой которой является мясная вода до 1000,0 мл; пептон ферментативный 10,0 г; натрия хлорид 5,0 г; кровь 10,0 г; агар-агар 15,0-20,0 г, рН 7,3±0,2. Среду автоклавируют 30 мин при температуре 121°C (М.С.Поляк; В.И.Сухаревич; М.Э.Сухаревич. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2008. - С. 64-65; С. 269).Known nutrient medium for growing Legionella, the basis of which is meat water up to 1000.0 ml; peptone enzymatic 10.0 g; sodium chloride 5.0 g; blood 10.0 g; agar-agar 15.0-20.0 g, pH 7.3 ± 0.2. The medium is autoclaved for 30 min at a temperature of 121 ° C (M.S. Polyak; V.I. Sukharevich; M.E. Sukharevich. Nutrient media for medical and sanitary microbiology. St. Petersburg: ELBI-St. Petersburg. - 2008. - P. 64 -65; S. 269).
Недостатком данной среды является недостаточная эффективность.The disadvantage of this environment is the lack of effectiveness.
Наиболее близкой к предлагаемой питательной среде является среда, содержащая, г/л: ферментативный гидролизат легкого свиньи 260,0; калий фосфорнокислый 1-замещенный 0,9; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный 2,2; активированный уголь 2,0; L-цистеина гидрохлорид 0,4; эмбриональный стимулятор роста микроорганизмов 2,5; агар микробиологический 8,5; дистиллированная вода до 1 л (Патент РФ №2412240. Опубл. 20.02.2011. Бюл. №5).Closest to the proposed nutrient medium is a medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of pig lung 260,0; potassium phosphate 1-substituted 0.9; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous 2.2; activated carbon 2.0; L-cysteine hydrochloride 0.4; embryonic growth stimulator of microorganisms 2.5; microbiological agar 8.5; distilled water up to 1 liter (RF Patent No. 2412240. Publish. 02.20.2011. Bull. No. 5).
Недостатком данной среды является относительно высокая себестоимость.The disadvantage of this environment is the relatively high cost.
Целью настоящего изобретения является конструирование качественной питательной среды животного происхождения, которая обеспечивает ростовые свойства легионелл.The aim of the present invention is the construction of a high-quality nutrient medium of animal origin, which provides the growth properties of legionella.
Поставленная цель достигается тем, что питательная среда в качестве питательной основы содержит ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота; 0,01 М калий фосфатный буфер (состав калий фосфатного буфера: калий фосфорнокислый 1-замещенный; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный), а также активированный уголь; L-цистеин гидрохлорид; дистиллированную воду; агар микробиологический, с добавлением в среду в качестве стимулирующей добавки - железа сернокислого закисного 7-водного при следующем соотношении ингредиентов, г/л:This goal is achieved in that the nutrient medium as a nutrient base contains an enzymatic hydrolyzate of erythromass in cattle; 0.01 M potassium phosphate buffer (composition of potassium phosphate buffer: 1-substituted potassium phosphate; 2-substituted 3-aqueous potassium phosphate), as well as activated carbon; L-cysteine hydrochloride; distilled water; microbiological agar, added to the medium as a stimulating additive - ferrous acid sulfate 7-aqueous in the following ratio of ingredients, g / l:
Биологическая ценность эритромассы крупного рогатого скота состоит в наличии в среднем 95% протеина и макроэлементов, мг/кг: калия 0,12%, магния 0,04%; серы 0,02%; хлора 0,15%; фтора 0,8; железо находится в крови в виде органического соединения в молекуле гемоглобина, содержание его в крови равно 50-60 мг%, содержание витаминов, мг/кг: каротина 2,0; витамина B1 1,6; витамина В2 8,0; пантотеновой кислоты 55; витамина В5 3,0; содержание аминокислот, г/кг: аргинина 8,0; гистидина 3,0; лейцина 11,0; изолейцина 9,0; фенилаланина 7,0; треонина 6,0; валина 10,0; микроэлементов, мг/кг: цинка 14,0; марганца 0,8; меди 0,8; кобальта 0,07 (И.В.Петрухин. Корма и кормовые добавки. М.: Росагропромиздат, 1989. С. 39-44; 48).The biological value of cattle erythromass is the presence of an average of 95% protein and macronutrients, mg / kg: potassium 0.12%, magnesium 0.04%; sulfur 0.02%; chlorine 0.15%; fluorine 0.8; iron is in the blood in the form of an organic compound in the hemoglobin molecule, its content in the blood is 50-60 mg%, the content of vitamins, mg / kg: carotene 2.0; vitamin B 1 1.6; vitamin B 2 8.0; pantothenic acid 55; Vitamin B 5 3.0; amino acid content, g / kg: arginine 8.0; histidine 3.0; leucine 11.0; isoleucine 9.0; phenylalanine 7.0; threonine 6.0; valine 10.0; trace elements, mg / kg: zinc 14.0; Manganese 0.8; copper 0.8; cobalt 0.07 (I.V. Petrukhin. Feed and feed additives. M: Rosagropromizdat, 1989. S. 39-44; 48).
Железо сернокислое закисное 7-водное ГОСТ 4148-78. Железо (II) сульфат. Показатели качества: хч, чда, ч. Массовая доля основного вещества ≥99,0% (Химические реактивы и высокочистые вещества. Каталог. / О.А.Гольдина, Ю.С.Кузнецова, Т.Г.Иванова и др. - 3-е изд., перераб. и доп. М.: Химия, 1990. С. 212). В ходе многочисленных экспериментов первых исследователей по культивированию легионелл было обнаружено, что важнейшими факторами роста легионелл являются как аминокислоты, так и ионы железа (Легионеллезная инфекция / Н.Д.Темежникова, И.С.Тартаковский. М.: Медицина, 2007. - С.42; 120).Ferrous sulfate ferrous 7-water GOST 4148-78. Iron (II) sulfate. Quality indicators: hch, chda, h. Mass fraction of the main substance ≥99.0% (Chemical reagents and high-purity substances. Catalog. / O.A. Goldina, Yu.S. Kuznetsova, T.G. Ivanova, etc. - 3 -th ed., revised and revised M .: Chemistry, 1990.S. 212). In the course of numerous experiments by the first researchers on the cultivation of legionella, it was found that the most important factors for the growth of legionella are both amino acids and iron ions (Legionella infection / N.D.Temezhnikova, I.S. Tartakovsky. M .: Medicine, 2007. - С .42; 120).
Включение в состав среды 0,01 М калий фосфатного буфера (состав калий фосфатного буфера: калий фосфорнокислый 1 замещенный; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный) обосновано широким использованием фосфатов при приготовлении питательных сред, т.к. это единственные неорганические соединения, обладающие буферным действием в физиологически важном диапазоне рН, они малотоксичны. Кроме того, HPO4 компонент нуклеиновых кислот, фосфолипидов, нуклеотидов (Методические рекомендации по изготовлению и использованию питательных сред и растворов для микробиологических целей, культивирования клеток и вирусов. - М., 1989).The inclusion of 0.01 M potassium phosphate buffer (the composition of potassium phosphate buffer: potassium phosphate 1 substituted; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous) is justified by the widespread use of phosphates in the preparation of nutrient media, as these are the only inorganic compounds that have a buffering effect in the physiologically important pH range, they are low toxic. In addition, HPO 4 component of nucleic acids, phospholipids, nucleotides (Guidelines for the manufacture and use of culture media and solutions for microbiological purposes, the cultivation of cells and viruses. - M., 1989).
Ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота является основой питательной среды ввиду присутствия в нем 95% протеина, а это значит содержание большого количества витаминов, макро- и микроэлементов, железа, а также аминокислот, которые играют огромную роль в жизнедеятельности любых микроорганизмов.The enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass is the basis of the nutrient medium due to the presence of 95% protein in it, which means the content of a large number of vitamins, macro- and micronutrients, iron, and amino acids, which play a huge role in the life of any microorganisms.
При приготовлении питательной среды используют только дистиллированную воду, без применения растворов, содержащих ионы натрия, в виду их губительного действия на легионеллы.When preparing the nutrient medium, only distilled water is used, without the use of solutions containing sodium ions, in view of their destructive effect on legionella.
Сочетанное применение указанных компонентов обеспечивает получение чистых культур сплошного роста через 24 ч при посеве 100 м.к.The combined use of these components provides pure cultures of continuous growth after 24 hours with sowing of 100 MK
В отличие от прототипа предлагаемая среда обеспечивает оптимальные условия для размножения легионелл за 24 ч, а получение гидролизата осуществляется за 4,5 ч.Unlike the prototype, the proposed environment provides optimal conditions for the reproduction of legionella in 24 hours, and the hydrolyzate is produced in 4.5 hours
Приготовление ферментативного гидролизата эритроцитарной массы крупного рогатого скота.Preparation of enzymatic hydrolyzate of erythrocyte mass of cattle.
Размороженную эритроцитарную массу крупного рогатого скота в количестве 250,0 мл вливают в 3-литровый стеклянный баллон, заливают питьевой водой 1,750 л, подщелачивают 20% раствором гидроокиси калия до рН 8,2 в количестве 13 мл по фенолфталеину, затем добавляют коммерческий фермент панкреатин в количестве 12,0 г активностью 45 ед. В качестве консерванта добавляют хлороформ в количестве 1% к объему жидкости. Баллон закрывают ватно-марлевой пробкой, тщательно перемешивают и помещают в термокамеру при температуре 50±2°C. Содержимое баллона в течение первых суток перемешивают через 20±1 мин по 5 мин, в последующие 4,5 ч через 1,5-2,0 ч по 5 мин. В течение первого часа через каждые 15 мин измеряют рН, при изменении рН в кислую сторону обязательно корректируют рН 40% раствором гидроокиси калия до значения 8,0-8,2. После первого часа значение рН не измеряют. Через 4 ч ведут забор пробы в количестве 10 мл на определение аминного азота и по достижении аминного азота до 260±40 мг% гидролиз прекращают. В результате гидролиз идет в течение 4,5 ч с момента загрузки панкреатина. Ввиду резкого падения рН до 5 ед - добавляют 30 мл 20% гидроокиси калия до рН 8,2 по фенолфталеину. После этого гидролиз останавливают и отстаивают в течение 2х суток. Отстоявшийся верхний слой гидролизата декантируют с помощью резинового шланга и фильтруют через полотняный фильтр. Сбор фильтрата ведут в стеклянный баллон емкостью 3 л, для консервации добавляют хлороформ в количестве 1% к объему содержимого баллона, закрывают резиновой пробкой и транспортируют в холодовую камеру, где хранят при температуре от +2 до +8°C.The thawed erythrocyte mass of cattle in an amount of 250.0 ml is poured into a 3-liter glass bottle, filled with 1.750 l of drinking water, made alkaline with a 20% solution of potassium hydroxide to a pH of 8.2 in the amount of 13 ml of phenolphthalein, then the commercial pancreatin enzyme is added to the amount of 12.0 g with an activity of 45 units. Chloroform is added as a preservative in an amount of 1% to the volume of liquid. The cylinder is closed with a cotton-gauze stopper, mixed thoroughly and placed in a heat chamber at a temperature of 50 ± 2 ° C. The contents of the balloon during the first day are stirred after 20 ± 1 min for 5 minutes, in the next 4.5 hours after 1.5-2.0 hours for 5 minutes. During the first hour, the pH is measured every 15 minutes; when the pH changes to the acidic side, the pH is necessarily adjusted with a 40% potassium hydroxide solution to a value of 8.0-8.2. After the first hour, the pH value is not measured. After 4 hours, a sample is taken in an amount of 10 ml for determination of amine nitrogen, and upon reaching amine nitrogen up to 260 ± 40 mg% hydrolysis is stopped. As a result, hydrolysis proceeds within 4.5 hours from the moment of loading pancreatin. Due to a sharp drop in pH to 5 units - add 30 ml of 20% potassium hydroxide to a pH of 8.2 by phenolphthalein. After this, the hydrolysis is stopped and defended for 2 days. The settled upper layer of the hydrolyzate is decanted with a rubber hose and filtered through a linen filter. The filtrate is collected in a glass container with a capacity of 3 l, chloroform is added in an amount of 1% to the volume of the contents of the container for preservation, closed with a rubber stopper and transported to a cold chamber where it is stored at a temperature of +2 to + 8 ° C.
Питательную среду на ферментативной основе эритромассы крупного рогатого скота для выращивания легионелл готовят следующим способом. Берут ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота, разбавленного дистиллированной водой до показания аминного азота 0,12% - 190,0 мл, другие ингредиенты в соотношении, г/л: калий фосфорнокислый 1-замещенный - 0,83; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный - 1,16; железо сернокислое закисное 7-водное - 0,2; активированный уголь - 2,0; агар микробиологический - 10,0; дистиллированную воду - до 1 л. Смесь доводят до кипения и кипятят до полного расплавления агара в течение 2 мин, рН корректируют раствором соляной кислоты (1:1) в количестве 1,0 мл до рН 6,9±0,5. Приготовленную питательную среду разливают в градуированные флаконы по 200±0,5 мл, которые герметично укупоривают ватно-марлевыми пробками и бумагой крафт. Стерилизуют при 1 атм в течение 15 мин. В расплавленный на водяной бане и остуженный до 56°C агар добавляют L-цистеина гидрохлорида 0,4 г, простерилизованного автоклавированием при 112°C в течение 30 мин, затем разливают в стерильные чашки Петри. Просушивают в течение 30 минут и используют для посева.The nutrient-based culture medium of cattle erythromass for the cultivation of Legionella is prepared in the following way. Take the enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass diluted with distilled water to an amine nitrogen reading of 0.12% - 190.0 ml, other ingredients in the ratio, g / l: 1-substituted potassium phosphate - 0.83; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous 1.16; ferrous sulfate ferrous 7-aqueous - 0.2; activated carbon - 2.0; microbiological agar - 10.0; distilled water - up to 1 liter. The mixture is brought to a boil and boiled until the agar is completely melted for 2 minutes, the pH is adjusted with a solution of hydrochloric acid (1: 1) in an amount of 1.0 ml to a pH of 6.9 ± 0.5. The prepared nutrient medium is poured into graduated bottles of 200 ± 0.5 ml, which are hermetically sealed with cotton gauze plugs and Kraft paper. Sterilized at 1 atm for 15 minutes. 0.4 g of L-cysteine hydrochloride, sterilized by autoclaving at 112 ° C for 30 minutes, is added to the agar melted in a water bath and cooled to 56 ° C, then poured into sterile Petri dishes. Dry for 30 minutes and use for sowing.
Соляную кислоту ГОСТ-3118-77 (чда, хч) используют для установления рН. Массовая доля основного вещества, % 35-38.GOST-3118-77 hydrochloric acid (chda, hch) is used to establish pH. Mass fraction of the main substance,% 35-38.
Эффективность полученной питательной среды оценивали в соответствии с методическими указаниями «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза», (Москва, 2007), с использованием в качестве тест-культур легионелл Legionella pneumophilla АТСС 33155 Bloomington, Legionella pneumophilla ATCC 33152 Philadelphia.The effectiveness of the obtained culture medium was evaluated in accordance with the guidelines “Control of diagnostic culture media for biological indicators for plague, cholera, anthrax, tularemia, brucellosis, legionellosis” (Moscow, 2007), using Legionella pneumophilla ATCC as test cultures 33155 Bloomington, Legionella pneumophilla ATCC 33152 Philadelphia.
Испытуемые культуры выращивали на пластинках плотного агара контрольной среды СЭЛ рН 6,8 при температуре 36°C 24 ч. Из суточных культур готовили в стерильном 0,01 М калий фосфатном буфере 1 млрд. взвесь м.т. тест-штаммов, равной 10 ед. по оптическому стандарту мутности ОСО 42-28-85П (рН 6,8) ГИСК им. Л.А.Тарасовича, затем серийными десятикратными разведениями в калий фосфатном буфере в объеме 4,5 мл доводили до содержания в 1 мл 1000 (10-6). Из данных разведений взвесей культур высевали по 0,1 мл на 3 чашки Петри разлитого подсушенного испытуемого агара, и на контрольные среды СЭЛ и агар Хоттингера (отрицательный контроль - на нем нет роста в любые сроки наблюдения). Посевы инкубировали при 36±1°C в течение 5 суток. Через 24-120 ч учитывали результаты путем подсчета выросших колоний.The test cultures were grown on plates of solid agar of a control environment of SEL pH 6.8 at a temperature of 36 ° C for 24 hours. From daily cultures, 1 billion mt suspension was prepared in sterile 0.01 M potassium phosphate buffer. test strains equal to 10 units according to the optical turbidity standard OSO 42-28-85P (pH 6.8) GISK them. L.A. Tarasovich, then with serial ten-fold dilutions in potassium phosphate buffer in a volume of 4.5 ml was brought to a content of 1000 ml in 1 ml (10 -6 ). From these dilutions of the suspension of cultures, 0.1 ml was sown in 3 Petri dishes of the spilled dried test agar, and on control media SEL and Hottinger agar (negative control - there is no growth on it at any observation time). Crops were incubated at 36 ± 1 ° C for 5 days. After 24-120 hours, the results were taken into account by counting the grown colonies.
Контрольная среда СЭЛ (Питательная среда для культивирования и выделения возбудителя легионеллеза элективная) - состав, г/л: питательная основа животного происхождения - ферментолизат селезенки жидкий крупного рогатого скота в расчете на сухое вещество - 7,0; активированный уголь ОУ-А 4,0; агар микробиологический 17,0; калий фосфорнокислый однозамещенный 1,6; калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный 3,4; рН среды 7,1 (Производитель ФГУЗ Рост НИПЧИ Роспотребнадзора. 344002, Ростов-на-Дону, ул. М.Горького, 117).SEL control medium (Nutrient medium for cultivation and isolation of the causative agent of Legionellosis selective) - composition, g / l: nutrient base of animal origin - liquid spleen fermentolizate of cattle per dry matter - 7.0; activated carbon OU-A 4.0; microbiological agar 17.0; potassium phosphate monosubstituted 1.6; potassium phosphate disubstituted three-water 3.4; pH of 7.1 (Manufacturer FGUZ NIPSCH Growth Rospotrebnadzor. 344002, Rostov-on-Don, 117 M. Gorky St.).
Контрольный агар Хоттингера. Промышленный регламент №1707-05 на производство питательного агара для культивирования микроорганизмов, готового к применению (агара Хоттингера). Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05571 от 20 августа 2009 г. Срок действия не ограничен.Hottinger control agar. Industrial regulation No. 1707-05 for the production of nutrient agar for the cultivation of microorganisms, ready for use (Hottinger agar). Registration certificate No. ФСР 2009/05571 dated August 20, 2009. The validity period is unlimited.
Пример 1. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота, разбавленного дистиллированной водой до показания аминного азота 0,10% - 170,0 мл; калий фосфорнокислый 1-замещенный - 0,63; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный - 0,96; железо сернокислое закисное 7-водное - 0,18; активированный уголь - 1,0; L-цистеин гидрохлорид - 0,2; агар микробиологический - 8,0; дистиллированная вода - до 1 л.Example 1. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass diluted with distilled water to an amine nitrogen reading of 0.10% - 170.0 ml; potassium phosphate 1-substituted - 0.63; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous - 0.96; ferrous sulfate ferrous 7-aqueous - 0.18; activated carbon - 1.0; L-cysteine hydrochloride 0.2; microbiological agar - 8.0; distilled water - up to 1 liter.
При таком соотношении ингредиентов вырастало 100 плосковыпуклых, синевато-сероватых колоний диаметром 1,0 мм через 48 ч для обеих штаммов, взятых в опыт, тогда как на контрольной среде СЭЛ рост наблюдался только через 72 ч в количестве менее 50% колоний диаметром 1,0 мм, а на агаре Хоттингера рост отсутствовал.With this ratio of ingredients, 100 plano-convex, bluish-grayish colonies with a diameter of 1.0 mm grew after 48 hours for both strains taken in the experiment, while on the SEL control medium growth was observed only after 72 hours in an amount of less than 50% of colonies with a diameter of 1.0 mm, but there was no growth on the Hottinger agar.
Пример 2. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота, разбавленного дистиллированной водой до показания аминного азота 0,12% - 190,0 мл; калий фосфорнокислый 1-замещенный - 0,83; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный - 1.16; железо сернокислое закисное 7-водное - 0,2; активированный уголь - 2,0; L-цистеин гидрохлорид - 0,4; агар микробиологический - 10,0; дистиллированная вода - до 1 л.Example 2. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass diluted with distilled water to an amine nitrogen reading of 0.12% - 190.0 ml; potassium phosphate 1-substituted - 0.83; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous 1.16; ferrous sulfate ferrous 7-aqueous - 0.2; activated carbon - 2.0; L-cysteine hydrochloride - 0.4; microbiological agar - 10.0; distilled water - up to 1 liter.
При таком соотношении ингредиентов наблюдался сплошной рост в виде голубовато-серого налета через 24 ч для обеих тест-штаммов, взятых в опыт, тогда как на контрольной среде СЭЛ рост наблюдался только через 72 ч в количестве 100 колоний диаметром 1,2 мм соответственно, а на агаре Хоттингера рост отсутствовал.With this ratio of ingredients, a continuous growth in the form of bluish-gray plaque was observed after 24 hours for both test strains taken in experiment, whereas on the SEL control medium growth was observed only after 72 hours in the amount of 100 colonies with a diameter of 1.2 mm, respectively, and no growth on the Hottinger agar.
Пример 3. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативный гидролизат эритромассы крупного рогатого скота, разбавленного дистиллированной водой до показания аминного азота 0,14% - 210,0 мл; калий фосфорнокислый 1-замещенный - 1,03; калий фосфорнокислый 2-замещенный 3-водный - 1,36; железо сернокислое закисное 7-водное - 0,22; активированный уголь - 3,0; L-цистеин гидрохлорид - 0,6; агар микробиологический - 12,0; дистиллированная вода до 1 л.Example 3. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass diluted with distilled water to an amine nitrogen reading of 0.14% - 210.0 ml; potassium phosphate 1-substituted - 1.03; potassium phosphate 2-substituted 3-aqueous - 1.36; ferrous sulfate ferrous 7-aqueous - 0.22; activated carbon - 3.0; L-cysteine hydrochloride - 0.6; microbiological agar - 12.0; distilled water up to 1 liter.
При таком соотношении ингредиентов вырастало 92 плосковыпуклых, синевато-сероватых колоний диаметром 1,0 мм через 48 ч для обеих тест-штаммов, взятых в опыт, тогда как на контрольной среде СЭЛ рост наблюдался только через 72 ч в количестве менее 50% колоний, а на агаре Хоттингера рост отсутствовал.With this ratio of ingredients, 92 flat-convex, bluish-grayish colonies with a diameter of 1.0 mm grew after 48 hours for both test strains taken in experiment, whereas on the SEL control medium growth was observed only after 72 hours in an amount of less than 50% of the colonies, and no growth on the Hottinger agar.
Полученные результаты позволили определить оптимальный вариант питательной среды на основе ферментативного гидролизата эритромассы крупного рогатого скота (пример 2).The results obtained allowed us to determine the optimal variant of the nutrient medium based on the enzymatic hydrolyzate of cattle erythromass (example 2).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011127450/10A RU2460775C1 (en) | 2011-07-04 | 2011-07-04 | Enriched nutrient medium for legionella cultivation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011127450/10A RU2460775C1 (en) | 2011-07-04 | 2011-07-04 | Enriched nutrient medium for legionella cultivation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2460775C1 true RU2460775C1 (en) | 2012-09-10 |
Family
ID=46938924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011127450/10A RU2460775C1 (en) | 2011-07-04 | 2011-07-04 | Enriched nutrient medium for legionella cultivation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2460775C1 (en) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1359297A1 (en) * | 1986-07-15 | 1987-12-15 | Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии Имени Почетного Академика.Н.Ф.Гамалеи | Nutrient medium for growing legionella pneumophila |
| RU1614494C (en) * | 1989-01-20 | 1994-11-15 | Государственный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии | Nutrient medium for legionella pneumophila cultivation |
| RU97115622A (en) * | 1997-09-17 | 1999-08-10 | Ростовский-На-Дону Государственный Научно-Исследовательский Противочумный Институт | NUTRIENT ENVIRONMENT FOR ISOLATION AND CULTIVATION OF LEGIONELLES |
| RU2283347C2 (en) * | 2004-05-24 | 2006-09-10 | Людмила Дмитриевна Тимченко | Method for production of fetal microorganism growth stimulator |
| RU2307160C2 (en) * | 2005-11-30 | 2007-09-27 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУЗ РостНИПЧИ Роспотребнадзора) | Method for detection of legionella in vegetative and non-cultivating states |
| RU2412240C1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-02-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Culture medium for growing legionella |
-
2011
- 2011-07-04 RU RU2011127450/10A patent/RU2460775C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1359297A1 (en) * | 1986-07-15 | 1987-12-15 | Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии Имени Почетного Академика.Н.Ф.Гамалеи | Nutrient medium for growing legionella pneumophila |
| RU1614494C (en) * | 1989-01-20 | 1994-11-15 | Государственный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии | Nutrient medium for legionella pneumophila cultivation |
| RU97115622A (en) * | 1997-09-17 | 1999-08-10 | Ростовский-На-Дону Государственный Научно-Исследовательский Противочумный Институт | NUTRIENT ENVIRONMENT FOR ISOLATION AND CULTIVATION OF LEGIONELLES |
| RU2283347C2 (en) * | 2004-05-24 | 2006-09-10 | Людмила Дмитриевна Тимченко | Method for production of fetal microorganism growth stimulator |
| RU2307160C2 (en) * | 2005-11-30 | 2007-09-27 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУЗ РостНИПЧИ Роспотребнадзора) | Method for detection of legionella in vegetative and non-cultivating states |
| RU2412240C1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-02-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Culture medium for growing legionella |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2433170C1 (en) | Nutrient liquid medium for culturing plague microbe of vaccine strain eb | |
| RU2412240C1 (en) | Culture medium for growing legionella | |
| RU2626568C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain | |
| RU2580028C1 (en) | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella | |
| RU2460774C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2681285C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation | |
| RU2460775C1 (en) | Enriched nutrient medium for legionella cultivation | |
| US8911962B2 (en) | Method for neutralization of antibiotics in a culture medium | |
| RU2460768C1 (en) | Solid nutrient medium for legionella cultivation | |
| WO2023273019A1 (en) | Culture medium, preparation method therefor, and method for culturing bacteroides fragilis therewith | |
| RU2702174C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of vaccine strain of plague microbe yersinia pestis ev | |
| RU2425871C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2435842C1 (en) | Transport nutrient medium (liquid) for cultivation of brucellous microbe | |
| RU2748808C1 (en) | Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass | |
| RU2688335C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent | |
| RU2708029C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of yersinia pestis ev | |
| RU2528101C2 (en) | Nutrient medium for legionella culture | |
| RU2510828C1 (en) | Nutrient medium for growing legionella | |
| RU2410424C1 (en) | Culture medium for growing microorganism | |
| RU2748492C1 (en) | Dense nutrient medium for monitoring the number of live microbial cells of the vaccine strain of the plague microbe y.pestis ev | |
| RU2348686C2 (en) | Nutrient medium for microorganism cultivation | |
| RU2792438C1 (en) | Selective nutrient medium with mannitol, bile and polymyxin to detect bacteria of the genera proteus, morganella, providencia, dry | |
| RU2681116C2 (en) | Dense nutrient medium for storage of plague microbe | |
| RU2722071C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of bacillus subtilis vkpm b-12079 | |
| RU2725733C1 (en) | Transport liquid nutrient medium for maintaining the viability of the brucellous microbe |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150705 |