RU2580028C1 - Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella - Google Patents

Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella Download PDF

Info

Publication number
RU2580028C1
RU2580028C1 RU2014153616/10A RU2014153616A RU2580028C1 RU 2580028 C1 RU2580028 C1 RU 2580028C1 RU 2014153616/10 A RU2014153616/10 A RU 2014153616/10A RU 2014153616 A RU2014153616 A RU 2014153616A RU 2580028 C1 RU2580028 C1 RU 2580028C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
brucella
medium
hydrolyzate
nutrient medium
gelatin
Prior art date
Application number
RU2014153616/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Юрий Сергеевич Ковтун
Александр Николаевич Куличенко
Анна Алексеевна Курилова
Людмила Семеновна Катунина
Геннадий Иванович Лямкин
Татьяна Викторовна Таран
Original Assignee
Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека filed Critical Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority to RU2014153616/10A priority Critical patent/RU2580028C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2580028C1 publication Critical patent/RU2580028C1/en

Links

Landscapes

  • Fodder In General (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: culture medium for fermentation comprises culturing Brucella gelatin hydrolyzate, enzymatic hydrolyzate of fish meal, yeast extract, sodium chloride, glucose, sodium sulfite pyro, microbiological agar and distilled water in a predetermined ratio of components.
EFFECT: invention allows to reduce the terms of the culture of Brucella.
1 cl, 1 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, а именно к получению питательных сред для выращивания бруцелл.The invention relates to microbiology and biotechnology, in particular to the production of culture media for growing brucella.

Известна питательная среда-заменитель «Альбими»-агара, состав которой следующий: 20 г сухого пептона, 20 мл дрожжевой воды, 5 г химически чистого хлористого натрия, 20 г агар-агара, 1 г глюкозы, 0,1 г бисульфита натрия, 1 л дистиллированной воды (МУ 3.1.7.1189-03 «Профилактика и лабораторная диагностика бруцеллеза людей»).Known nutrient medium substitute "Albimi" -agar, the composition of which is as follows: 20 g of dry peptone, 20 ml of yeast water, 5 g of chemically pure sodium chloride, 20 g of agar-agar, 1 g of glucose, 0.1 g of sodium bisulfite, 1 l of distilled water (MU 3.1.7.1189-03 "Prevention and laboratory diagnosis of brucellosis in humans").

Недостатком данной питательной среды является ее нестандартность, в ряде случаев непрозрачность, что мешает изучению вырастающих колоний, при ее использовании отмечается замедленный и непостоянный рост бруцелл.The disadvantage of this nutrient medium is its non-standard, in some cases, opacity, which interferes with the study of growing colonies, when it is used, slow and unstable growth of brucella is noted.

Известна питательная среда для выделения и культивирования бруцелл сухая (эритрит агар), выпускаемая филиалом ФГУП «Микроген», г. Махачкала, состоящая из следующих компонентов, г/л: питательный агар сухой - 35,0; тиаминбромид - 0,005; эритрит - 0,0122; глюкоза - 1,0; натрий хлористый - 5,9; агар микробиологический - 11,2; вода дистиллированная до 1 л.Known nutrient medium for isolation and cultivation of dry brucella (erythritol agar), manufactured by the branch of the Federal State Unitary Enterprise "Microgen", Makhachkala, consisting of the following components, g / l: dry nutrient agar - 35.0; thiamine bromide - 0.005; erythritol - 0.0122; glucose - 1.0; sodium chloride - 5.9; microbiological agar - 11.2; distilled water up to 1 liter.

Недостатками данной среды являются возможность диссоциации изучаемых культур бруцелл при пересевах на этом агаре, а также появление колоний бруцелл диаметром 0,5-1,5 мм только через 72 ч инкубации.The disadvantages of this medium are the possibility of dissociation of the studied brucella cultures during reseeding on this agar, as well as the appearance of brucella colonies with a diameter of 0.5-1.5 mm only after 72 hours of incubation.

Наиболее близкой к предлагаемому изобретению является питательная среда для культивирования бруцелл сухая (бруцеллагар), выпускаемая ФГУН ГНЦ ПМБ (Оболенск), содержащая, г/л: панкреатический гидролизат рыбной муки - 7,5; пептон ферментативный - 7,5; панкреатический гидролизат казеина - 10,0; стимулятор роста гемофильных микроорганизмов - 5,0; глюкозу - 2,0; дрожжевой экстракт - 3,0; натрий хлористый - 3,5; тиамина хлорид - 0,005; эритрит - 0,012; агар микробиологический - 10,0±3,0; воду дистиллированную до 1 л, совокупность существенных признаков которой наиболее близка к совокупности существенных признаков плотной питательной среды предлагаемого изобретения.Closest to the proposed invention is a nutrient medium for the cultivation of dry brucella (brucellar), produced by the Federal State Institution of Science and Science of the Russian Academy of Medical Sciences (Obolensk), containing, g / l: pancreatic hydrolyzate of fish meal - 7.5; enzymatic peptone - 7.5; casein pancreatic hydrolyzate - 10.0; growth stimulator of hemophilic microorganisms - 5.0; glucose - 2.0; yeast extract - 3.0; sodium chloride - 3.5; thiamine chloride - 0.005; erythritol - 0.012; microbiological agar - 10.0 ± 3.0; distilled water to 1 liter, the set of essential features of which is closest to the set of essential features of a dense nutrient medium of the invention.

Недостатком данной среды является то, что разлитая по чашкам Петри она имеет коричневый цвет, может содержать темно-коричневые вкрапления. Высокая цветность, неудовлетворительная прозрачность наряду с малым размером колоний (0,1-0,5 мм) через 48 часов инкубации затрудняют обнаружение колоний бруцелл в указанный срок.The disadvantage of this medium is that it spilled on Petri dishes has a brown color, may contain dark brown blotches. High color, poor transparency along with the small size of the colonies (0.1-0.5 mm) after 48 hours of incubation make it difficult to detect brucella colonies at the indicated time.

Целью предлагаемого изобретения является создание питательной среды, имеющей незначительную опалесценцию, слабоокрашенной, обеспечивающей через 46 часов инкубации рост лабораторных штаммов бруцелл в виде колоний размером, не менее чем в 1,5 раза превышающем размер колоний, вырастающих на используемых в настоящее время средах (среде-прототипе).The aim of the invention is to create a nutrient medium with slight opalescence, slightly colored, ensuring after 46 hours of incubation the growth of laboratory strains of brucella in the form of colonies with a size not less than 1.5 times the size of the colonies growing on currently used media (medium prototype).

Поставленная цель достигается тем, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется ферментативный гидролизат желатина в сочетании с ферментативным гидролизатом рыбной муки, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и глюкоза, для поддержания изотоничности среды и окислительно-восстановительного потенциала - натрий хлористый и метабисульфит натрия соответственно, для гелеобразования - агар микробиологический, а также дистиллированную воду, при следующем соотношении ингредиентов, г/л:This goal is achieved in that the enzyme hydrolyzate of gelatin in combination with the enzymatic hydrolyzate of fish meal is used as the main source of nitrogen nutrition in the proposed medium, yeast extract and glucose are used as growth stimulators, and sodium chloride and sodium metabisulfite, respectively, for gelation - microbiological agar, as well as distilled water, in the following ratio of ingredients, g / l:

Ферментативный гидролизат желатина (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ)Enzymatic gelatin hydrolyzate (based on the content of dry substances in 1 liter of medium) 7,0-9,07.0-9.0 Ферментативный гидролизат рыбной муки (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ)Enzymatic hydrolyzate of fish meal (based on the content of dry substances in 1 liter of medium) 3,0-5,03.0-5.0 Дрожжевой экстрактYeast extract 1,0-3,01.0-3.0 Натрий хлористыйSodium Chloride 4,0-6,04.0-6.0 ГлюкозаGlucose 0,5-2,00.5-2.0 Метабисульфит натрияSodium metabisulfite 0,05-0,20.05-0.2 Агар микробиологическийMicrobiological agar 7,0-11,07.0-11.0 Вода дистиллированнаяDistilled water до 1 лup to 1 l

В качестве исходного сырья используют желатин ГОСТ 11293-89, марка П-11, приготовленный из костной ткани и мягкого коллагенсодержащего сырья от переработки шкур крупного рогатого скота и свиней. Желатин, в отличие от других белковых продуктов, содержит повышенное количество глицина, однако в нем почти нет серосодержащих аминокислот и триптофана (Скурихин И.М., Тутельян В.А. Таблицы химического состава и калорийности российских продуктов питания: Справочник. - М.: ДеЛи принт, 2007. - 276 с.).GOST 11293-89 gelatin, grade P-11, made from bone tissue and soft collagen-containing raw materials from processing hides of cattle and pigs, is used as feedstock. Gelatin, unlike other protein products, contains an increased amount of glycine, however, it contains almost no sulfur-containing amino acids and tryptophan (Skurikhin I.M., Tutelyan V.A. Tables of the chemical composition and calorie content of Russian food: Reference. - M .: DeLi Print, 2007 .-- 276 p.).

Рыбную муку по ГОСТ 2116-2000 изготавливают из рыб, морских млекопитающих, ракообразных, беспозвоночных, а также из отходов, полученных при их переработке. В ней, в зависимости от вида исходного сырья, регламентировано содержание сырого протеина (не менее 36-50%), влаги (не более 10-13%), жира (не более 10-18%), фосфора (не более 5,0-5,5%), натрия хлорида (не более 5%), кальция (не более 13%). Кормовая ценность рыбной муки обусловлена высоким содержанием полноценного по аминокислотному составу белка, витаминов группы В, микроэлементов.According to GOST 2116-2000, fishmeal is made from fish, marine mammals, crustaceans, invertebrates, as well as from waste obtained from their processing. It, depending on the type of feedstock, regulates the content of crude protein (not less than 36-50%), moisture (not more than 10-13%), fat (not more than 10-18%), phosphorus (not more than 5.0 -5.5%), sodium chloride (not more than 5%), calcium (not more than 13%). The feed value of fish meal is due to the high content of a protein with full amino acid composition, B vitamins, microelements.

Дрожжевой экстракт используют в качестве полноценного и дешевого источника факторов роста микроорганизмов, что повышает ростовые свойства предлагаемой питательной среды. Дрожжи содержат до 53% белка, 25-40% углеводов и являются богатым источником витаминов группы В, витамина Д и других факторов роста - пуриновых и пиримидиновых оснований (Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской микробиологии. - СПб.: Элби - СПб., 2002, с. 14).Yeast extract is used as a complete and cheap source of microorganism growth factors, which increases the growth properties of the proposed nutrient medium. Yeast contains up to 53% protein, 25-40% carbohydrates and is a rich source of B vitamins, vitamin D and other growth factors - purine and pyrimidine bases (Polyak M.S., Sukharevich V.I., Sukharevich M.E. Nutrients environment for medical microbiology. - SPb .: Elby - SPb., 2002, p. 14).

Глюкоза является легкодоступным источником углерода для обеспечения роста бруцеллезного микроба. Она также выполняет роль редуцирующего вещества, связывающего токсичные перекисные соединения.Glucose is an readily available carbon source for brucellosis microbe growth. It also acts as a reducing substance that binds toxic peroxide compounds.

Натрий хлористый поддерживает осмотическое давление среды на уровне, необходимом для сохранения жизнедеятельности микроорганизмов.Sodium chloride maintains the osmotic pressure of the medium at the level necessary to preserve the vital activity of microorganisms.

Натрий сернистокислый пиро регулирует окислительно-восстановительный потенциала среды и является серосодержащим веществом.Sodium sulfite pyro regulates the redox potential of the medium and is a sulfur-containing substance.

Агар микробиологический обеспечивает требуемую консистенцию препарата.Microbiological agar provides the required consistency of the drug.

Определение сухих веществ основано на удалении влаги путем выпаривания исследуемого раствора и последующего взвешивания остатка, высушенного до постоянного веса (МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред»).The determination of solids is based on the removal of moisture by evaporation of the test solution and subsequent weighing of the residue, dried to a constant weight (MUK 4.2.2316-08 "Methods for controlling bacteriological nutrient media").

Дополнительное использование в предлагаемой питательной среде в качестве белковой основы гидролизата желатина и введение в ее рецептуру натрия сернистокислого пиро является отличительным признаком и позволяет улучшить качественные показатели, а также упростить и удешевить получение среды.The additional use of gelatin hydrolyzate as a protein base in the proposed nutrient medium and the introduction of sodium pyro sulfate in its formulation is a distinctive feature and allows to improve quality indicators, as well as simplify and reduce the cost of production of the medium.

Технология приготовления ферментативных гидролизатов белкового сырьяThe technology of preparation of enzymatic hydrolysates of protein raw materials

Ферментативный гидролиз белкового сырья - желатина и рыбной муки, проводят однотипно. Желатин пищевой и рыбную муку взвешивают по 0,8 кг, помещают в кастрюли эмалированные емкостью 9 л, приливают по 7,0 л холодной дистиллированной воды, перемешивают и отставляют на 1 час для набухания. Затем содержимое кастрюль нагревают до температуры 40°С, устанавливают рН 8,0-8,4 20% раствором натрия гидроокиси, добавляют 0,4 кг фарша поджелудочной железы, дважды пропущенной через мясорубку, переливают в стеклянные бутыли вместимостью 10 л. В бутыли добавляют по 80 мл хлороформа, закрывают их резиновыми пробками, перемешивают, помещают в термостатную. В течение первых 2-х часов рН гидролизатов каждые 15 мин проверяют и поддерживают в пределах 7,6-8,0. Через 2 часа от начала гидролиза проверяют и при необходимости устанавливают рН в пределах 7,6-7,8 20% раствором натрия гидроокиси, перемешивают и помещают в термостатную комнату с температурой (38±1)°С. Последующие перемешивания проводят через каждые 30-60 мин. Длительность гидролиза 1-2 сут. Об окончании гидролиза судят по достижению аминного азота 0,35-0,45% в гидролизате желатина и 0,3-0,4% в гидролизате рыбной муки.Enzymatic hydrolysis of protein raw materials - gelatin and fish meal, is carried out the same way. Edible gelatin and fish meal are weighed at 0.8 kg, placed in enamel pans with a capacity of 9 l, poured into 7.0 l of cold distilled water, mixed and set aside for 1 hour to swell. Then the contents of the pots are heated to a temperature of 40 ° C, the pH is adjusted to 8.0-8.4 with a 20% sodium hydroxide solution, 0.4 kg of minced pancreas, twice passed through a meat grinder, is added, poured into glass bottles with a capacity of 10 l. 80 ml of chloroform are added to the bottles, they are closed with rubber stoppers, mixed, placed in a thermostat. During the first 2 hours, the pH of the hydrolysates is checked every 15 minutes and maintained in the range of 7.6-8.0. After 2 hours from the start of hydrolysis, the pH is checked and, if necessary, adjusted within the range of 7.6-7.8 with a 20% sodium hydroxide solution, mixed and placed in a thermostatic room with a temperature of (38 ± 1) ° С. Subsequent mixing is carried out every 30-60 minutes. The duration of hydrolysis is 1-2 days. The end of hydrolysis is judged by the achievement of amino nitrogen of 0.35-0.45% in the gelatin hydrolyzate and 0.3-0.4% in the hydrolyzed fish meal.

По окончании процесса гидролиза рН гидролизатов устанавливают в пределах 4,5-4,7 18% раствором соляной кислоты, гидролизаты нагревают до кипения и кипятят в течение 1 мин, охлаждают в течение 5-10 мин и фильтруют через бумажные или полотняные фильтры. Затем гидролизаты защелачивают до рН 7,8-8,0 20% раствором гидроокиси натрия, нагревают до кипения, кипятят в течение 1-2 мин, охлаждают до 60-70°С и фильтруют через бумажные или полотняные фильтры в стеклянные бутыли вместимостью 10 л. К профильтрованным гидролизатам после их охлаждения добавляют 2% хлороформа. Бутыли герметично закрывают резиновыми пробками, перемешивают и помещают в холодовую, где хранят при температуре 2-8°С.At the end of the hydrolysis process, the pH of the hydrolysates is adjusted within 4.5-4.7 with an 18% hydrochloric acid solution, the hydrolysates are heated to boiling and boiled for 1 minute, cooled for 5-10 minutes and filtered through paper or linen filters. Then the hydrolysates are alkalinized to pH 7.8-8.0 with a 20% sodium hydroxide solution, heated to boiling, boiled for 1-2 minutes, cooled to 60-70 ° C and filtered through paper or linen filters into glass bottles with a capacity of 10 l . To the filtered hydrolysates, after cooling, add 2% chloroform. The bottles are hermetically sealed with rubber stoppers, mixed and placed in the cold, where they are stored at a temperature of 2-8 ° C.

Питательную среду на основе ферментативных гидролизатов желатина и рыбной муки для выращивания бруцелл готовят следующим способом.A nutrient medium based on enzymatic hydrolysates of gelatin and fish meal for growing brucella is prepared in the following way.

Берут ферментативные гидролизаты желатина и рыбной муки из расчета содержания сухих веществ в 1 л среды 8,0 г гидролизата желатина и 4,0 г гидролизата рыбной муки, вливают их в эмалированную кастрюлю, добавляют дрожжевой экстракт 2,0 г; натрия хлорид 5,0 г; глюкозу 1,0 г; натрий сернистокислый пиро 0,1 г; агар микробиологический 8,0 г; дистиллированную воду до 1 л, устанавливают рН в пределах 7,1-7,3 20% раствором натрия гидроокиси или 18% раствором соляной кислоты. Тщательно перемешивая, нагревают до кипения и кипятят в течение 2 мин. Фильтруют через ватно-марлевый фильтр.Take enzymatic hydrolysates of gelatin and fish meal based on the dry matter content in 1 liter of medium 8.0 g of gelatin hydrolyzate and 4.0 g of fish meal hydrolyzate, pour them into an enamel pan, add 2.0 g of yeast extract; sodium chloride 5.0 g; glucose 1.0 g; sodium sulfite pyro 0.1 g; microbiological agar 8.0 g; distilled water to 1 liter, set the pH in the range of 7.1-7.3 with 20% sodium hydroxide solution or 18% hydrochloric acid solution. Mixing thoroughly, heat to a boil and boil for 2 minutes. Filter through a cotton-gauze filter.

Профильтрованную среду разливают по 150 или 300 мл в бутылки вместимостью 250 или 450 мл соответственно, которые укупоривают ватно-марлевыми пробками, сверху закрывают пергаментной бумагой и бумагой крафт. Стерилизуют при 1,0 атм в течение 15 мин, остужают, затем разливают в стерильные чашки Петри, просушивают в течение 30 мин и используют для посева.Filtered medium is poured into 150 or 300 ml into bottles with a capacity of 250 or 450 ml, respectively, which are corked with cotton-gauze plugs, covered with parchment paper and kraft paper. It is sterilized at 1.0 atm for 15 minutes, cooled, then poured into sterile Petri dishes, dried for 30 minutes and used for inoculation.

Оценку ростовых свойств питательной среды плотной для культивирования бруцелл проводили путем измерения диаметра и подсчета количества выросших колоний бруцелл при посеве.The growth properties of the nutrient medium dense for the cultivation of brucella were assessed by measuring the diameter and counting the number of brucella colonies grown during sowing.

Ростовые свойства полученной среды оценивали с помощью тест-культур В.abortus 19 ВА и В.melitensis Rev I. Тест-культуры выращивали на поверхности скошенного эритрит-агара при температуре 37°С в течение (46±2) ч. Двухсуточные культуры тест-штаммов бруцелл смывали с поверхности скошенного агара 0,9% раствором натрия хлорида, доводили концентрацию микробных взвесей до 10 единиц эквивалентных 1,7×109 бруцелл в 1 мл, по оптическому стандарту мутности ОСО 42-28-85П ГИСК им. Л.А. Тарасевича, полученные микробные взвеси культур разводили сначала до концентрации 1×109 м.к./мл и затем десятикратными разведениями до 1×103 м.к./мл. В процессе разведения перенос взвеси в следующую пробирку производили стерильной пипеткой объемом 1 мл, меняя пипетку для каждого разведения.The growth properties of the obtained medium were evaluated using test cultures of B. abortus 19 VA and B. melitensis Rev I. Test cultures were grown on the surface of beveled erythritol agar at 37 ° C for (46 ± 2) h. Two-day cultures of test Brucella strains were washed off the surface of mowed agar with 0.9% sodium chloride solution, the concentration of microbial suspensions was adjusted to 10 units equivalent to 1.7 × 10 9 brucella in 1 ml, according to the optical turbidity standard OSO 42-28-85P GISK named after L.A. Tarasevich, the obtained microbial suspension of cultures was diluted first to a concentration of 1 × 10 9 MK./ml and then ten-fold dilutions to 1 × 10 3 MK./ml. During the dilution process, the suspension was transferred to the next test tube with a 1 ml sterile pipette, changing the pipette for each dilution.

Контроль плотных питательных сред. По 0,1 мл взвеси каждого тест-штамма В.melitensis Rev I, В.abortus 19 ВА из разведений 10-6 (100 м.к./мл) высевали на 9 чашек Петри каждого варианта предлагаемой среды и среды сравнения и равномерно распределяли покачиванием по всей поверхности. Средой сравнения служил заранее проверенный агар высокого качества (Бруцеллагар). Посевы инкубировали при температуре (37±1)°С. Учет результатов посевов проводили через 46 и 72 ч инкубации.Control of solid nutrient media. 0.1 ml of suspension of each test strain B. melitensis Rev I, B. abortus 19 VA from dilutions of 10 -6 (100 mk / ml) were sown on 9 Petri dishes of each variant of the proposed medium and the comparison medium and evenly distributed swaying over the entire surface. The comparison medium was a pre-tested high-quality agar (Brucellagar). Crops were incubated at a temperature of (37 ± 1) ° С. The results of crops were taken into account after 46 and 72 hours of incubation.

Пример 1. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативного гидролизата желатина (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 7,0; ферментативного гидролизата рыбной муки (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 3,0; дрожжевого экстракта 1,0; натрия хлорида 4,0; глюкозы 0,5; натрия сернистокислого пиро 0,05; агара микробиологического 7,0; воды дистиллированной 1 л.Example 1. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of gelatin (based on the content of dry substances in 1 l of the medium) 7.0; enzymatic hydrolyzate of fish meal (based on the content of dry substances in 1 liter of medium) 3.0; yeast extract 1.0; sodium chloride 4.0; glucose 0.5; sodium sulfite pyro 0.05; microbiological agar 7.0; distilled water 1 l.

Пример 2. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативного гидролизата желатина (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 8,0; ферментативного гидролизата рыбной муки (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 4,0; дрожжевого экстракта 2,0; натрия хлорида 5,0; глюкозы 1,0; натрия сернистокислого пиро 0,1; агара микробиологического 9,0; воды дистиллированной 1 л.Example 2. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: gelatin enzymatic hydrolyzate (based on the content of dry substances in 1 l of the medium) 8.0; enzymatic hydrolyzate of fish meal (based on the content of dry substances in 1 liter of medium) 4.0; yeast extract 2.0; sodium chloride 5.0; glucose 1.0; sodium sulfite pyro 0.1; microbiological agar 9.0; distilled water 1 l.

Пример 3. Тест-штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: ферментативного гидролизата желатина (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 9,0; ферментативного гидролизата рыбной муки (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 5,0; дрожжевого экстракта 2,0; натрия хлорида 6,0; глюкозы 2,0; натрия сернистокислого пиро 0,2; агара микробиологического 11,0; воды дистиллированной 1 л.Example 3. Test strains were grown on a nutrient medium containing, g / l: enzymatic hydrolyzate of gelatin (based on the content of 1 liter of dry matter) 9.0; enzymatic hydrolyzate of fish meal (based on the content of dry substances in 1 liter of medium) 5.0; yeast extract 2.0; sodium chloride 6.0; glucose 2.0; sodium sulfite pyro 0.2; microbiological agar 11.0; distilled water 1 l.

Полученные в примерах результаты обобщены в таблице 1.The results obtained in the examples are summarized in table 1.

Таким образом, заявленная питательная среда для культивирования бруцелл (пример №2) является оптимальной по количеству подобранных ингредиентов, что позволяет получить достаточное количество колоний максимального размера в ранние сроки (через 46±2 ч).Thus, the claimed nutrient medium for the cultivation of brucella (example No. 2) is optimal in the number of selected ingredients, which allows to obtain a sufficient number of colonies of maximum size in the early stages (after 46 ± 2 hours).

Предлагаемая среда обладает более оптимальными ростовыми свойствами по сравнению с известной: при приблизительно одинаковом количестве колоний их диаметр через 46 и 72 ч инкубации на предлагаемой среде в 1,5-2 раза превышал диаметр колоний, выросших на известной среде. По показателям прозрачности и цветности предлагаемая среда также превосходит известную.The proposed medium has more optimal growth properties compared to the known one: with approximately the same number of colonies, their diameter after 46 and 72 hours of incubation on the proposed medium was 1.5-2 times the diameter of the colonies grown on the known medium. In terms of transparency and color, the proposed environment also surpasses the known.

Улучшенные биологические свойства предлагаемой среды наряду с ее прозрачностью и незначительной цветностью облегчают обнаружение возбудителей бруцеллеза при бактериологических исследованиях, повышают эффективность работ, связанных с культивированием бруцелл. Среда проста в приготовлении, не содержит дефицитных и дорогостоящих компонентов.Improved biological properties of the proposed environment, along with its transparency and low color, facilitate the detection of pathogens of brucellosis in bacteriological studies, increase the efficiency of work related to the cultivation of brucella. The medium is easy to prepare, does not contain scarce and expensive components.

Рентабельность среды составляет 31%.The profitability of the environment is 31%.

Figure 00000001
Figure 00000001

Claims (1)

Питательная среда плотная для культивирования бруцелл, содержащая, г/л:
ферментативный гидролизат желатина (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 7,0-9,0 ферментативный гидролизат рыбной муки (из расчета содержания в 1 л среды сухих веществ) 3,0-5,0 дрожжевой экстракт 1,0-3,0 натрия хлорид 4,0-6,0 глюкоза 0,5-2,0 натрий сернистокислый пиро 0,05-0,3 агар микробиологический 7,0-11,0 вода дистиллированная до 1 л
Dense culture medium for the cultivation of brucella, containing, g / l:
gelatin enzymatic hydrolyzate (based on the content of 1 liter of dry matter) 7.0-9.0 enzymatic hydrolyzate of fish meal (based on the content of 1 liter of dry matter) 3.0-5.0 yeast extract 1.0-3.0 sodium chloride 4.0-6.0 glucose 0.5-2.0 sodium sulfite pyro 0.05-0.3 microbiological agar 7.0-11.0 distilled water up to 1 l
RU2014153616/10A 2014-12-26 2014-12-26 Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella RU2580028C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014153616/10A RU2580028C1 (en) 2014-12-26 2014-12-26 Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014153616/10A RU2580028C1 (en) 2014-12-26 2014-12-26 Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2580028C1 true RU2580028C1 (en) 2016-04-10

Family

ID=55793849

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014153616/10A RU2580028C1 (en) 2014-12-26 2014-12-26 Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2580028C1 (en)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2681285C1 (en) * 2017-12-04 2019-03-05 Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation
RU2688335C1 (en) * 2017-12-04 2019-05-21 Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent
RU2701504C1 (en) * 2018-03-26 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан" Nutrient medium for cultivation of brucellous microbe
RU2748808C1 (en) * 2020-09-21 2021-05-31 Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2435842C1 (en) * 2010-06-15 2011-12-10 Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Transport nutrient medium (liquid) for cultivation of brucellous microbe

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2435842C1 (en) * 2010-06-15 2011-12-10 Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Transport nutrient medium (liquid) for cultivation of brucellous microbe

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Питательная среда для культивирования бруцелл (Бруцелл агар), Оболенск, 2013г. ПОЛЯК М.С., СУХАРЕВИЧ В.И., СУХАРЕВИЧ М.Э. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии, СПб, ЭЛБИ-СПб, 2008, стр. 142-143. СИДОРОВ М.А. СКОРОДУМОВ Д.И., ФЕДОТОВ В.Б., Справочник. Определитель зоопатогенных микроорганизмов, М Колос, 1995, с. 181-184. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2681285C1 (en) * 2017-12-04 2019-03-05 Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation
RU2688335C1 (en) * 2017-12-04 2019-05-21 Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent
RU2701504C1 (en) * 2018-03-26 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан" Nutrient medium for cultivation of brucellous microbe
RU2748808C1 (en) * 2020-09-21 2021-05-31 Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106011036B (en) One plant of bacillus coagulans HEW-B379 and its application with prebiotic effect
RU2580028C1 (en) Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella
RU2433170C1 (en) Nutrient liquid medium for culturing plague microbe of vaccine strain eb
CN104263663B (en) A kind of culture medium for cultivating chicken ancestral home intestinal microbial population and preparation method thereof
RU2412240C1 (en) Culture medium for growing legionella
RU2626568C1 (en) Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain
RU2415923C1 (en) Method for production of fermentative hydrolysate of fresh white cabbage and nutritive medium for cultivation lactobacteria based thereon
RU2681285C1 (en) Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation
CN115927040B (en) Intestinal bacillus subtilis strain and preparation method and application thereof
CN104212745B (en) Chicken microecological preparation and preparation method thereof
RU2518282C1 (en) Nutrient medium for submerged cultivation of tularemia microbe
RU2352134C1 (en) Method of manufacturing hydrolizate out of salmons milts
RU2702174C1 (en) Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of vaccine strain of plague microbe yersinia pestis ev
RU2701343C1 (en) Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions)
RU2348686C2 (en) Nutrient medium for microorganism cultivation
RU2410424C1 (en) Culture medium for growing microorganism
RU2764139C1 (en) Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella
RU2680702C1 (en) Nutritional environment for cultivation of bacillus subtilis vkpm b-12079
RU2415922C1 (en) Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation
RU2460774C1 (en) Nutrient medium for legionella cultivation
RU2722071C1 (en) Nutrient medium for cultivation of bacillus subtilis vkpm b-12079
RU2729389C1 (en) Method of producing a nutrient base of media for extracting and cultivating legionella
RU2425871C1 (en) Nutrient medium for legionella cultivation
CN109355226A (en) Zengjing Granule for Legionella and the biphasic culture and preparation method thereof that is separately cultured
RU2460768C1 (en) Solid nutrient medium for legionella cultivation

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20161227