RU2453335C2 - Рекомбинантная вирусная вакцина - Google Patents
Рекомбинантная вирусная вакцина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2453335C2 RU2453335C2 RU2009101387/15A RU2009101387A RU2453335C2 RU 2453335 C2 RU2453335 C2 RU 2453335C2 RU 2009101387/15 A RU2009101387/15 A RU 2009101387/15A RU 2009101387 A RU2009101387 A RU 2009101387A RU 2453335 C2 RU2453335 C2 RU 2453335C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- imidazo
- quinolin
- amine
- nucleotide sequence
- encodes
- Prior art date
Links
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 50
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 104
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 104
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 104
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 36
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 36
- HQBUPOAKJGJGCD-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amine Chemical class NC1=NC2=CC=CC=C2C2=C1N=CN2 HQBUPOAKJGJGCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 30
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 26
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 55
- FQYRLEXKXQRZDH-UHFFFAOYSA-N 4-aminoquinoline Chemical compound C1=CC=C2C(N)=CC=NC2=C1 FQYRLEXKXQRZDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- -1 2-hydroxy-2-methylpropyl Chemical group 0.000 claims description 48
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 claims description 30
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 27
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 claims description 26
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 13
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 12
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 10
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 abstract description 41
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 17
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 72
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 71
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 68
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 55
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- 208000022361 Human papillomavirus infectious disease Diseases 0.000 description 40
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 40
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 39
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 33
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 26
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 26
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 26
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 26
- 229940060265 aldara Drugs 0.000 description 25
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 25
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 25
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 24
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 24
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 21
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 21
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 21
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 20
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 19
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 18
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 18
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 17
- 230000004044 response Effects 0.000 description 17
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 16
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 14
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 13
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 13
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 13
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 13
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 12
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 12
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 12
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 10
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 10
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 9
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 8
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 7
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 7
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 7
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 6
- 101100321817 Human parvovirus B19 (strain HV) 7.5K gene Proteins 0.000 description 5
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 5
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 5
- 208000031504 Asymptomatic Infections Diseases 0.000 description 4
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 4
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 4
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 description 4
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 4
- 125000005745 ethoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(Cl)=C2C(OP(O)(=O)O)=CNC2=C1 QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 3
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 description 3
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100034353 Integrase Human genes 0.000 description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 3
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 3
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 3
- 102100040396 Transcobalamin-1 Human genes 0.000 description 3
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 3
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 3
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 3
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000007951 cervical intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 3
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 108010078428 env Gene Products Proteins 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- ZAPSNGHNEPUZEG-UHFFFAOYSA-N 1-(4-amino-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl)-2-methylpropan-2-ol Chemical compound C1=CC=CC2=C(N(C(C)=N3)CC(C)(C)O)C3=C(N)N=C21 ZAPSNGHNEPUZEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CNBOKXFMODKQCT-UHFFFAOYSA-N 1-(4-aminoimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl)-2-methylpropan-2-ol Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)(O)C)C=NC3=C(N)N=C21 CNBOKXFMODKQCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102100036664 Adenosine deaminase Human genes 0.000 description 2
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 2
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 2
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 2
- 125000006374 C2-C10 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 101100506090 Caenorhabditis elegans hil-2 gene Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 208000000907 Condylomata Acuminata Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102100040578 G antigen 7 Human genes 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000893968 Homo sapiens G antigen 7 Proteins 0.000 description 2
- 101100232904 Homo sapiens IL2 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 2
- 101000954493 Human papillomavirus type 16 Protein E6 Proteins 0.000 description 2
- 101000767631 Human papillomavirus type 16 Protein E7 Proteins 0.000 description 2
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 2
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 2
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 101001044455 Rattus norvegicus Interferon gamma Proteins 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 2
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 208000025009 anogenital human papillomavirus infection Diseases 0.000 description 2
- 201000004201 anogenital venereal wart Diseases 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 201000010284 hepatitis E Diseases 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 2
- 231100001222 nononcogenic Toxicity 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZLCGUXUOFWCCN-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxynonadecane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(C(O)=O)C(O)(C(O)=O)CC(O)=O HZLCGUXUOFWCCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004105 2-pyridyl group Chemical group N1=C([*])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000003349 3-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 101800000504 3C-like protease Proteins 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000339 4-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([H])=C([*])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-3-(3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1C(F)=CNC(=O)N1C1C2=CC=CC=C2C(=O)O1 LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical group NC1=NC(N)=NC(Cl)=N1 FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108090000020 Alpha-catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000003730 Alpha-catenin Human genes 0.000 description 1
- 101100504181 Arabidopsis thaliana GCS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 206010004146 Basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710155856 C-C motif chemokine 3 Proteins 0.000 description 1
- 125000002853 C1-C4 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006577 C1-C6 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039510 Cancer/testis antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100028906 Catenin delta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 238000011238 DNA vaccination Methods 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 101100216227 Dictyostelium discoideum anapc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 101710181478 Envelope glycoprotein GP350 Proteins 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 241000700662 Fowlpox virus Species 0.000 description 1
- 101710160621 Fusion glycoprotein F0 Proteins 0.000 description 1
- 102100039717 G antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039699 G antigen 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710092267 G antigen 5 Proteins 0.000 description 1
- 102100039698 G antigen 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710092269 G antigen 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100039713 G antigen 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100029974 GTPase HRas Human genes 0.000 description 1
- 101710091881 GTPase HRas Proteins 0.000 description 1
- 102100030525 Gap junction alpha-4 protein Human genes 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 102000007390 Glycogen Phosphorylase Human genes 0.000 description 1
- 108010046163 Glycogen Phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000005331 Hepatitis D Diseases 0.000 description 1
- 208000001688 Herpes Genitalis Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889345 Homo sapiens Cancer/testis antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000886137 Homo sapiens G antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000886678 Homo sapiens G antigen 2D Proteins 0.000 description 1
- 101000886136 Homo sapiens G antigen 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001036406 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C1 Proteins 0.000 description 1
- 101001057156 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C2 Proteins 0.000 description 1
- 101001057159 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C3 Proteins 0.000 description 1
- 101001114057 Homo sapiens P antigen family member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000880770 Homo sapiens Protein SSX2 Proteins 0.000 description 1
- 101001062222 Homo sapiens Receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells Proteins 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 1
- 206010053317 Hydrophobia Diseases 0.000 description 1
- 101150027427 ICP4 gene Proteins 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010043496 Immunoglobulin Idiotypes Proteins 0.000 description 1
- 108091029795 Intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 1
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 description 1
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100039447 Melanoma-associated antigen C1 Human genes 0.000 description 1
- 102100027252 Melanoma-associated antigen C2 Human genes 0.000 description 1
- 102100027248 Melanoma-associated antigen C3 Human genes 0.000 description 1
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 1
- 108010008699 Mucin-4 Proteins 0.000 description 1
- 102000007270 Mucin-4 Human genes 0.000 description 1
- 101100499365 Mus musculus Dlk1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100346932 Mus musculus Muc1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000737052 Naso hexacanthus Species 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108700019961 Neoplasm Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000048850 Neoplasm Genes Human genes 0.000 description 1
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100023219 P antigen family member 1 Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102100040283 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Human genes 0.000 description 1
- 241000700667 Pigeonpox virus Species 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102100037686 Protein SSX2 Human genes 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 101150040459 RAS gene Proteins 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710100968 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100029165 Receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells Human genes 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000700565 Swinepox virus Species 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 241000710771 Tick-borne encephalitis virus Species 0.000 description 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 101800000385 Transmembrane protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMAKJMJXJYHDDQ-UHFFFAOYSA-N [Cl].CCCCO Chemical compound [Cl].CCCCO MMAKJMJXJYHDDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000009621 actinic keratosis Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 229940040563 agaric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002269 analeptic agent Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 125000001231 benzoyloxy group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O* 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940023860 canarypox virus HIV vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000004568 cement Substances 0.000 description 1
- 208000015698 cervical squamous intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- WUUCVVFSWNXYRD-UHFFFAOYSA-N chembl19191 Chemical class C1=CC=C2C3=NC=NC3=C(N)NC2=C1 WUUCVVFSWNXYRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 150000001840 cholesterol esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 108010015408 connexin 37 Proteins 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 229940099112 cornstarch Drugs 0.000 description 1
- 239000008278 cosmetic cream Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108010048032 cyclophilin B Proteins 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 108010031971 delta catenin Proteins 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940079360 enema for constipation Drugs 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 108010006620 fodrin Proteins 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010084448 gamma Catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000054078 gamma Catenin Human genes 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 201000004946 genital herpes Diseases 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000002767 hepatic artery Anatomy 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002434 immunopotentiative effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 230000011488 interferon-alpha production Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 239000003350 kerosene Substances 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101710130522 mRNA export factor Proteins 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 208000008588 molluscum contagiosum Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N n-heptadecyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCO GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 101800000607 p15 Proteins 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 108010044156 peptidyl-prolyl cis-trans isomerase b Proteins 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920006149 polyester-amide block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 229940116317 potato starch Drugs 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 108700042226 ras Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010014186 ras Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229950010550 resiquimod Drugs 0.000 description 1
- BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N resiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C(N(C(COCC)=N3)CC(C)(C)O)C3=C(N)N=C21 BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 229940100486 rice starch Drugs 0.000 description 1
- 102200015251 rs148489044 Human genes 0.000 description 1
- 239000005060 rubber Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000012439 solid excipient Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 125000005346 substituted cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003718 tetrahydrofuranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000037455 tumor specific immune response Effects 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/275—Poxviridae, e.g. avipoxvirus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55533—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/58—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation
- A61K2039/585—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation wherein the target is cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/14011—Baculoviridae
- C12N2710/14111—Nucleopolyhedrovirus, e.g. autographa californica nucleopolyhedrovirus
- C12N2710/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области медицины и касается рекомбинантных вирусных вакцин. Сущность изобретений включает рекомбинантные вирусные вакцины, содержащие рекомбинантный поксвирусный вектор, который экспрессирует в условиях in vivo, по крайней мере, одну гетерологичную последовательность нуклеотида, которая кодирует антиген и, по крайней мере, одно производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, при этом указанный поксвирусный вектор является MVA. В особенности, представленное изобретение раскрывает комбинированные вакцины, которые включают рекомбинантные вирусные векторы MVA, содержащие нуклеотид, кодирующий один или более антигенов HPV, которые являются способными усилить иммунную реакцию, которая возникает в условиях in vivo под воздействием указанных рекомбинантных вирусных векторов. Преимущество группы изобретений заключается в усилении иммунных реакций. 5 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 пр., 10 ил.
Description
Представленное изобретение обеспечивает новые рекомбинантные вирусные вакцины. В особенности, представленное изобретение обеспечивает конбинированные продукты, которые включают рекомбинантные вирусные векторы и специфичные составы, способные повысить иммунную реакцию, образующуюся в условиях in vivo на указанные рекомбинантные вирусные векторы.
Традиционные способы вакцинации, которые включают введение в систему животных антигена, который может вызвать имунную реакцию, и таким образом защитить животное от инфекции, были известны много лет назад. Эти способы включали существование как живых, так и инактивированных вакцин. Живые вакцины - это типично аттенуированные не патогенные версии инфекционного агента, которые способны к праймированию имунной реакции, направленной против патогенной версии инфекционного агента. В последние годы были достигнуты успехи в развитии рекомбинантных вакцин, особенно рекомбинантных живых вакцин, в которых нативные антигены, которые представляют интерес, закодированы и экспрессированы с помощью вектора. Среди них являются представленными те векторы, которые основаны на рекомбинантных вирусах, и они показали большую перспективу и играют важную роль в развитии новых вакцин. Многие из вирусов были исследованы относительно их способности экспрессировать белки, которые происходят от чужеродных болезнетворных микроорганизмов или от опухолевой ткани, и относительно способности вызывать специфичные иммунологические ответы против этих антигенов в условиях in vivo. В целом же, эти основанные на гене вакцины могут стимулировать мощные гуморальные и клеточные иммунные ответы, и вирусные векторы могли бы быть эффективной стратегией и для доставки кодирующих антиген генов, и для помощи в повышении презентации антигена. Для того чтобы быть использованным как носитель для вакцины, идеальный вирусный вектор должен быть безопасным и позволить эффективно презентировать необходимых патоген-специфичных для болезнетворного микроорганизма антигенов к иммунной системе. Это должно также показать низкосвойственную иммуногенность, чтобы учесть ее репредставление для того, чтобы повысить соответствующие специфичные иммунные ответы. Кроме того, векторная система должна соответствовать критериям, которые позволяют реализовывать ее производство на крупномасштабной основе. Несколько вирусных векторов вакцины таким образом появились до настоящего времени, все они имеют относительные преимущества и пределы в зависимости от предложенного применения, и к настоящему времени ни один из них, как оказалось, не был идеальными носителем для вакцины.
Рекомбинантные поксвирусные векторы явлются примерами вирусных векторов для вакцин. Они были использованы как индукторы как гуморальных, так и клеточных свободных ответов, индуцируя как СD4+, так и СD8+Т клетки, и поэтому представляют систему доставки, особенно предпочтительно для лечения рака или антивирусной иммунотерапии (Arlen и др., 2005, Semin Oncol., 32, 549-555 или Essajee и Kaufman, 2004, Expert Opin Biol Ther., 4, 575-588). Несмотря на преимущества, связанные с поксвирусной вакцинацией, и относительно других способов лечения вакцинированием (см., например, Souza и др., 2005, Braz J Med Biol Res 509-522), является, тем не менее, желательным выявить те адъювантные составы, которые адаптированы к этому вирусному вектору, и которые будут предназначены для того, чтобы усилить имунную реакцию, вызванную указанной вакциной.
Было предпринято серьезное усилие в последние годы, и завершившееся существенным успехом, которое было направлено на то, чтобы обнаружить новые составы препарата, которые действуют, стимулируя специфичные ключевые аспекты иммунной системы. Эти составы, известные как свободные модификаторы ответа (IRMs) или адъюванты, как предполагают, действуют через основные механизмы иммунной системы через Toll - подобные рецепторы (TLRs) для того, чтобы вызвать биосинтез различных специфичных цитокинов (например, это интерфероны, интерлейкины, факторы некроза опухоли и т.д.). Такие составы, как было показано, стимулировали быстро высвобождаемый выход специфичных моноцит / макрофаг - дочерних цитокинов и также способны к стимулированию В клеток для того, чтобы секретировать антитела, которые играют важную роль в антивирусной и антиопухолевой активности составов IRM. Один из преобладающих иммуностимулирующих ответов, вызванных IRMs, является индукцией интерферон IFN - альфа - продуцирования, которое, как полагают, очень важно в остром антивирусном и антиопухолевом действиях. Кроме того, регулирование других цитокинов, таких как, например, фактор некроза опухоли (TNF), IL-1 и IL-6 также имеет потенциально выгодную активность и, как полагают, способствует антивирусным свойствам и антиопухолевым свойствам этих составов. Свободные модификаторы ответа (IRMs) были раскрыты как такие, которые являются полезными для лечения большого количества болезней и расстройств, включая вирусные заболевания (например, вирус папилломы человека, гепатит, герпес), неоплазии (например, базальноклеточная карцинома, плоскоклеточная карцинома, актинический кератоз, меланома), и ТН 2 - медиированные заболевания (например, астма, аллергический ринит, атопический дерматит).
Примеры таких свободных модификаторов ответа (IRMs), включают Ср G олигонуклеотиды (см., например, US 6194388; US 2006094683; WO 2004039829), липополисахариды, кислотные комплексы полиинозил: полицитидил (Kadowaki и др., 2001, J. Immunol. 166, 2291-2295), и полипептиды и белки, известные как индуцирующие продукцию цитокинов из дендритных клеток и/или моноцит / макрофагов. Другими примерами таких свободных модификаторов ответа (IRMs) являются маленькие органические молекулы, такие как имидазолхинолин амины, имидазолпиридин амины, 6,7 сплавленные циклоалкил имидазолпиримидин амины, имидазол пиримидин амины, оксазолхинолин амины, триазолохинолин амины и 1,2 соединенные имидазолхинолин амины (см., например, US 4689338; US 5389640; US 6110929; и US 6331539).
В частности, имидазолхиполин амины продемонстрировали сильную потенцию в качестве индукторов интерферона альфа (IFN), фактора некроза опухоли альфа (TNF), интерлейкина бета IL-1, IL-6, альфа IL-1, антагониста рецептора IL-1, IL-10, фактора стимулирования колонии макрофагов гранулоцитов (GM-CSF), гранулоцит CSF (Г-CSF), и макрофаг воспалительных белков 1 альфа в условиях in vitro и в условиях in vivo (Gibson и др., 1995, J Interferon Cytokine Res., 15, 537-545; Tomai и др., 1995, Antiviral Res., 28, 253-264; Testerman и др., 1995, J Leukoc Biol., 58, 365-372) и, как показано, вызвали разнообразные биологические функции, включая антивирусную, антипролиферативную и антиопухолевую активность (для обзора, см. Syed, 2001, Expert Opin Pharmacother., 2, 877-882 или Li и др., 2005, J Drugs Dermatol., 4, 708-717). Более подробно, изобретатели заявки на патент WO 93/20847 показали, что имидазолхинолин амины были в состоянии усилить имунную реакцию к определенным антигенам, таким как живые вирусные и бактериальные иммуногены, полученные из опухоли, протозоа, полученные из организмов, грибковые и бактериальные иммуногены, токсоиды, токсины, полисахариды, белки, гликопротеины, пептиды и т.п., когда эти антигены были введены с составами этой категории. Антивирусная активность составов имидазолхинолин аминов была далее продемонстрирована относительно многих вирусов, особенно поксвирусов (Bikowski, 2004, Cutis., 73, 202-206; US 20050048072), и их клиническая эффективность была продемонстрирована против остроконечных бородавок (Scheinfeld и Lehman, 2006, Dermatol Online J., 12, 5), генитального герпеса (Miller и др., 2002, Int Immunopharmacol., 2, 443-451) и контагиозного моллюска (Stulberg и Galbraith Hutchinson, 2003, Am. Fam. Physician, 67, 1233-1240).
После наблюдения в начале 1990-х о том, что векторы ДНК плазмиды могли непосредственно трансфецировать клетки животных в условиях in vivo, были предприняты существенные усилия по исследованию, направленные на то, чтобы развить способы вакцинирования, основанные на использовании плазмид ДНК для того, чтобы вызвать имунную реакцию, прямым введением в животных ДНК, которая кодирует аллергенные пептиды. Такие способы, которые широко отнесены к ДНК вакцинации, теперь используются для того, чтобы выявить защитные иммунные ответы в большом количестве моделей болезней. Позже, имидазол хинолин амины были предложены как адъюванты для вакцинации ДНК (WO 02/24225), особенно в иммунотерапии рака (WO 2006/042254; Smorlesi и др, 2005, Gene Therapy, 12, 1324-1332). Для обзора ДНК вакцин, см. Reyes - Sandoval и Ertl, 2001 (Current Molecular Medicine, 1, 217-243).
Существующее изобретение имеет отношение к усовершенствованным рекомбинантным вирусным вакцинам, которые экспрессируют в условиях in vivo no крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно последовательность нуклеотида, которая кодирует антиген. Это имеет отношение в особенности к рекомбинантной вирусной вакцине, содержащей по крайней мере один рекомбинантный вирусный вектор, который экспрессирует по крайней мере один антиген и по крайней мере один адъювант, который способен к значительному усиление иммунности, ориентированной на указанный антиген относительно той же самой рекомбинантной вирусной вакцины без адъюванта, и который является совершенно подходящим для этого типа вакцины. Это далее имеет отношение к способам вакцинации.
Заявитель неожиданно пришел к выводу о том, что специфичные имидазолилхинолин аминовые составы способны обладать сильной антивирусной потенцией, которая явлется направленной на то, чтобы усилить имунную реакцию в ответ на действие рекомбинантных вирусных вакцин к антигену, закодированному рекомбинантным вирусным вектором, и, более подробно, для вакцины, основанной на рекомбинантном гене поксвирусного вектора, и это проявляется в неочевидных пропорциях.
Предметом существующего изобретения, посему, является рекомбинантная вирусная вакцина, содержащая (i) по крайней мере один рекомбинантный вирусный вектор, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно гетерологичную последовательность нуклеотида, которая кодирует антиген, и (ii) по крайней мере одну 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную.
Согласно одному воплощению существующего изобретения, указанная 1Н-имидазо[4,5-с]-хинолин-4-амин производная усиливает иммунные ответы у пациента к упомянутому антигену, где упомянутую рекомбинантную вирусную вакцину вводят указанному пациенту.
Так, как используется здесь по всему описанию, артикли используются в том смысле, что они подразумевают "по крайней мере один", "по крайней мере первое", "один или более" или "множество" составов, на которые ссылаются, или этапов, если контекст не имеет в виду иное. Например, термин "клетка" включает множество клеток, включая смесь указанных. Более определенно, "по крайней мере один" и "одно или более" средств являются значением, которое является единицей или более чем единица, со специальным предпочтением в единицу, два или три.
Термин "и/или" везде, как используется здесь, включает значение "и", "или" и "все или любая другая комбинация элементов, связанных указанным термином".
Термин "об" или "приблизительно" так, как используется здесь, означает средства в пределах 20%, предпочтительно в пределах 10%, и, более предпочтительно, в пределах 5% данного значения или диапазона.
Как используется здесь, термин "включение", "содержание" определяет те продукты, составы и способы, которые предназначены для того, чтобы означать, что продукты, составы и способы включают составы, на которые ссылаются, или этапы, но не исключая другие.
Термин "пациент" относится к позвоночному животному, особенно к тем членам семейства, которые относятся к разновидностям млекопитающих, и включает, но не ограничивает, домашних животных, диких животных, приматов, включая людей.
Термин "пациент" никоим образом не ограничен отдельным статусом болезни, он охватывает и пациентов, у которых уже развилась болезнь, представляющая интерес, и пациентов, которые еще не больны.
В том значении, как использующийся здесь, термин "лечить" или "лечение" охватывает профилактику и/или терапию. Соответственно, рекомбинантные вирусные вакцины существующего изобретения не ограничены терапевтическими применениями и могут использоваться для профилактики.
Согласно более преимущественному воплощению, рекомбинантный вирусный вектор согласно существующему изобретению - это поксвирусный вектор (см., например, Сох и др. in "Viruses in Human Gene Therapy" Ed J.M.Hos, Carolina Academic Press). Согласно другому преимущественному воплощению изобретения, он является выбранным из группы, состоящей из вируса коровьей оспы, подходящие вирусы коровьей оспы включают, однако не ограничены, Копенгагенский штамм (Goebel и др., 1990, Virol. 179, 247-266 и 517-563; Johnson и др., 1993, Virol. 196, 381-401), штамм Wyeth и сильно аттенутированный вирус, полученный из указанного, включая MVA (для обзора см. Mayr, А., и др., 1975, Infection 3, 6-14), а также производные указанного (такие как штаммы вируса коровьей оспы MVA 575 (ЕСАСС V00120707 - US 6913752), NYVAC (см. WO 92/15672 - Tartaglia и др., 1992, Virology, 188, 217-232). Он может также быть получен от любого другого представителя поксвирусов, при специфическом оспа - дифтерите птиц (TROVAC, см. Paoletti и др., 1995, Dev Biol Stand., 84, 159-163); вирус оспы канареек (ALVAC, WO 95/27780, Paoletti и др., 1995, Dev Biol Stand., 84, 159-163); вирус оспы голубей, вирус оспы свиней и т.п. Посредством примера специалисты, квалифицированные в данной отрасли техники, могут обратиться к WO 9215672 (включено здесь в качестве ссылки), в которой описано производство векторов экспрессии, основанных на поксвирусах, которые способны к экспрессии такой гетерологической последовательности нуклеотида, особенно последовательности нуклеотида, которая кодирует антиген.
В том значении, как используется здесь, термин "антиген" относится к любому веществу, которое является способным к тому, чтобы быть мишенью для иммунного ответа. Антиген может быть мишенью, например, для медиированных клеток и/или гуморальных имунных реакций, возникающих у пациентов. Термин "антиген" охватывает, например, вирусные антигены, опухоль - специфические или - связанные антигены, бактериальные антигены, антигены, происходящие от паразитов, аллергены и т.п.:
- вирусные антигены включают, например, антигены, происходящие из вирусов гепатита А, В, С, D и Е, ВИЧ, вирусы герпеса, цитомегаловирус, ветряная оспа зостер, вирусы папилломы, вирус Эпштейна Барра, вирусы гриппа, вирусы парагриппа, аденовирусы, вирусы коксаки, пикорна вирусы, рота вирусы, дыхательные сцинцитиальные вирусы, вирусы сифилиса, рино вирусы, вирус краснухи, папо вирусы, вирус свинки, вирус кори; некоторые не ограничивающие примеры известных вирусных антигенов включают следующее: антигены, полученные из ВИЧ 1 такие, как tat, nef, gp 120 или gp 160, gp 40, p 24, gag, env, vif, vpr, vpu, rev или часть и/или комбинации указанных; антигены, которые имеют происхождение из человеческих вирусов герпеса, такие как gH, gL gM gB gC gK gE или gD или часть и/или комбинации указанных или медиированный ранний белок такой, как as ICP27, ICP47, ICP4, ICP36 из HSV1 или HSV2; антигены, которые имеют происхождение из цитомегаловируса, особенно из человеческого цитомегаловируса, такие как gB или производные указанного; антигены, которые имеют происхождение из вируса Эпштейна Барра, такие как gp 350 или производные указанного; антигены, которые имеют происхождение из вируса Varicella Zoster, такие как asgp 1, 11, 111 и IE 63; антигены, которые имеют происхождение из вируса гепатита, такие как гепатит В, гепатит С или гепатит Е вирусные антигены (например, env белок Е1 или Е2, коровый белок, NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, p7, или часть и/или комбинации указанных HCV); антигены, которые имеют происхождение из человеческих вирусов папилломы (например, HPV 6, 11, 16, 18, например, L1, L2, Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, или часть и/или комбинации указанных); антигены, которые имеют происхождение из других вирусных болезнетворных микроорганизмов, таких как сцинцитиальный вирус дыхательных путей (например, F и белки Г или производные указанного), вирус пара гриппа, вирус кори, вирус свинки, флави вирусы (например, вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки, тик-борн энцефалитный вирус, вирус японского энцефалита) или вирусы гриппа, поражающие клетки (например, ХА, NP, NA или М белки, или части и/или комбинаций указанных);
- опухоль - специфичные или связанные антигены включают, например, антигены, которые имеют происхождение от рака молочной железы, рака ободочной кишки, ректального рака, рака головы и шеи, почечного рака, малигнизированной меланомы, гортанного рака, рака яичников, рака шейки матки, рака простаты. Антигены рака - это те антигены, которые могут потенциально стимулировать только специфичные для опухоли иммунные ответы. Некоторые из этих антигенов являются закодированными, хотя не обязательно являются выраженными, нормальными клетками. Эти антигены могут быть охарактеризованы как те, которые обычно спокойны (то есть не являются выраженными) в нормальных клетках, те, которые экспрессированы только на специфичных стадиях дифференцирования, и те, которые временно экспрессированы, такие как эмбриональные и эмбриональные антигены. Другие антигены рака закодированы мутантными клеточными генами такие, как онкогены (например, активизированный ras онкоген), гены супрессоры (например, мутантный р53), сплавляющиеся белки, возникающие благодаря существованию внутренних делеций или хромосомных аббераций. Тем не менее другие антигены рака могут быть закодированы вирусными генами, такими как продолженные РНК и вирусные опухолевые ДНК. Некоторые неограничивающие примеры специфичных опухолевых или связанных антигенов включают MART-1/Melan-A, gp100, дипептид пептидазу IV (DPPIV), аденозин деаминаз - обязательный белок (ADA bp), циклофилин b, колоректальный связанный антиген (CRC)-С017-1А/GA 733, эмбриокарциномный антиген (СЕА) и его иммуногенный кеп антигенных детерминант 1 и кеп 2, etv 6, am 11, простат - специфичный антиген (PSA) и его иммуногенные антигенные детерминанты PSA-1, PSA-2 и PSA-3, специфичный для простаты мембранный антиген (PSMA), Т-клеточный рецептор / CD3 - зетта цепи, MAGE - семейство антигенов опухоли (например, MAGE-А1, MAGE-А2, MAGE-А3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A7, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11, MAGE-A12, MAGE-Xp2 (MAGE-B2), MAGE-Xp3 (MAGE-В3), MAGE-Xp4 (MAGE-В4), MAGE-С1, MAGE-С2, MAGE-С3, MAGE-С4, MAGE-С5), GAGE - семейство антигенов опухоли (например, GAGE-1, GAGE-2, GAGE-3, GAGE-4, GAGE-5, GAGE-6, GAGE-7, GAGE-8, GAGE-9), BAGE, RAGE, LAGE-1, NAG, Gn Т-V, MUM-1, CDK4, тирозиназа, р53, семейство MUC (например, MUC-1), HER 2/neu, р21ras, RCAS1, альфа-фетопротеин, бета-катенин, альфа-катенин, бета-катенин и гамма-катенин, р120ctn, gp100.sup. Pme 1117, PRAME, NY-ESO-1, cdc27, аденоматный полиозный поли - белок (АРС), фодрин, Connexin 37, Ig-идиотип, р15, gp 75, GM2 и GD2 ганглиозиды, вирусные продукты, такие как человеческие вирусные папилломные белки, семейство Smad антигенов опухоли. Imp-1, P1A, EBV - закодированный ядерный антиген (EBNA)-1, брэйн гликоген фосфорилаза, SSX-1, SSX-2 (НОМ-MEL-40), SSX-1, SSX-4, SSX-5, SCP-1 и ЦЕМЕНТ 7, и с-erbB-2.;
- бактериальные антигены включают, например, антигены, которые имеют происхождение из Mycobacteria, порожденнные ТВ и лепрой, пневмоцисты, аэробные грамм - отрицательные бациллы, микоплазмы, стафилококковые инфекции, стрептококковые инфекции, сальмонеллы, хламидии, нейсеррии;
- другие антигены включают, например, антигены которые имеют происхождение от малярии, лейшманиоза, трипаносомы, токсоплазмы, шистозомиазы, филлариазы;
- аллергены являются таким веществом, которое может вызвать аллергический или астматический ответ в отношении к восприимчивому субъекту. Перечень аллергенов огромен и может включать пыльцу, яды насекомого, пыль от животных, грибковые споры и лекарственные средства (например, пенициллин). Примеры естественных, животных и аллергенных растений включают, но не являются ограниченными белками
В особенно преимущественном воплощении гетерологичная последовательность нуклеотида существующего изобретения, кодирует один или больше или часть из всех следующих антигенов HBV - PreS1 PreS2 и Surface env белки, коровый и polHIV - gp120, gp40, gp160, p24, gag, pol, env, vif, vpr, vpu, tat, rev, nef; HPV - E1, E2, E3, E4, E5, E6, E7, E8, L1, L2 (см., например, примеры из WO 90/10459, WO 98/04705, WO 99/03885); HCV env белок E1 или E2, коровый белок, NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, p7; Muc-1 (см., например, US 5861381; US 6054438; WO 98/04727; WO 98/37095).
Нуклеиновая кислота, которая кодирует антиген, является операбельно линкированной с последовательностью экспрессированного гена, которая направляет экспрессию нуклеиновой кислоты антигена в пределах эукариотической клетки. Последовательность экспрессированного гена - это любая регуляторная последовательность нуклеотида, такая как последовательность промотора или комбинация энхансер - промотор, которая облегчает эффективную транскрипцию и трансляцию нуклеиновой кислоты антигена, к операбельному линкеру. Последовательность экспрессии гена может, например, иметь отношение к млекопитающим или вирусным промоторам, таким как конститутивный или индуцибельный промотор. Конститутивные и те, которые имеют отношение к млекопитающим, промоторы включают, но не являются ограничеными, промоторы для следующих генов: гипоксантин фосфорибозил трансфераза (HPRT), аденозин деаминаза, пируават киназа, b - актиновый промотор и другие конститутивные промоторы. Среди ярких вирусных промоторов, которые функционируют конститутивным образом, в эукариотических клетках, например, являются промоторы из цитомегаловируса (CMV), обезьяноподобный вирус (например, SV40), вирус папилломы, аденовирус, вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вируса саркомы Роуса, цитомегаловирус, длинные терминальные повторения (LTR) вируса лейкемии Молони и другого ретровируса, и промотора киназы тимидина вируса герпеса простого. Другие конститутивные промоторы известны как таковые для средних специалистов данной отрасли техники. Среди промоторов, полезных как последовательности экспрессии гена изобретения, также являются индуцибельные промоторы. Индуцибельные промоторы экспрессированы в присутствии агента стимулирования. Например, металлотиониновый промотор вынужден способствовать транскрипции и трансляции в присутствии специфичных ионов металлов. Другие индуцибельные промоторы известны как таковые для средних специалистов данной отрасли техники. В целом же, последовательность экспрессии гена должна включать, по мере необходимости, 5' не - транскрибирующиеся и 5' не - транслирующиеся последовательности, которые являются связанными с инициированием транскрипции и трансляции, соответственно, такие как ТАТА box, последовательность кэпа, последовательность СААТ, и т.п. В особенности, такие 5' не - транскрибирующиеся последовательности будут включать регион промотора, который включает последовательность промотора для транскрипционного контроля операбельно присоединенной нуклеиновой кислоты антигена. Последовательности экспрессии гена произвольно включают последовательности энхансера или последовательности активатора в качестве преимущественных. Среди преимущественных промоторов для использования в поксвирусном векторе (см. ниже) без ограничения, используются, промоторы вируса коровьей оспы 7.5К, H5R, ТК, р28, р11 и K1L, химерные промоторы, которые расположены между ранними и поздними поксвирусными промоторами, так же как синтетические промоторы, такие, как описано в Chakrabarti и др. (1997, Biotechniques 23, 1094-1097), Hammond и др. (1997, J. Virological Methods 66, 135-138) и Kumar и Boyle (1990, Virology 179, 151-158).
Согласно другому особенному воплощению существующего изобретения, указанная гетерологичная последовательность нуклеотида кодирует все или часть антигена (ов) HPV, которые являются выбранными из группы, которая состоит из Е6, рано кодирующего региона HPV, Е7, рано кодирующего региона HPV и производных или комбинации указанного.
Антиген HPV, закодированный рекомбинантным вирусным вектором согласно изобретению, является выбранным из грппы, которая состоит из HPV Е6 полипептида, HPV Е7 полипептида или обоих, HPV Е6 полипептида и HPV Е7 полипептида. Существующее изобретение охватывает использование любого HPV Е6 полипептида, который является связанным с р53, является измененным или по крайней мере значительно уменьшенным и/или использование любого HPV Е7 полипептида, который является связанным с Rb, является измененным или по крайней мере значительно уменьшенным (Monger и др., 1989, EMBO J. 8, 4099-4105; Crook и др., 1991, Cell 67, 547-556; Heck и др., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 4442-4446; Phelps и др., 1992, J. Virol. 66, 2148-2427). У не онкогенного HPV-16 Е6 варианта, который является подходящим для целей существующего изобретения, является удаленным один или более остатков аминокислоты, которые являются расположенными от приблизительно положения 118 к приблизительно положению 122 (+1 представление первого остатка метионина нативного HPV-16 Е6 полипептида), со специальным преимуществом полного удаления остатков 118-122 (СРЕЕК). У не онкогенного HPV-16 Е7 варианта, который является подходящим для целей существующего изобретения, является удаленным один или более остатков аминокислоты, которые являются расположенными от приблизительно положения 21 к приблизительно положению 26 (+1 представление первой аминокислоты нативного HPV-16 Е7 полипептида, со специальным преимуществом полного удаления остатков от 21 к 26 (DLYCYE). Согласно преимущественному воплощению, одно или большее количеству HPV-16 раннего полипептида(-ов) в использовании для изобретения являются далее измененными для того, чтобы усилить класс I МНС и/или представление класса II МНС, и/или стимулировать анти - HPV иммунитет. HPV Е6 и Е7 полипептиды являются ядерными белками, и было ранее уже показано то, что мембранное представление разрешает усиливать их терапевтическую эффективность (см., например, WO 99/03885). Таким образом, может быть желательным изменение по крайней мере одного из HPV раннего полипептида(ов) для того, чтобы быть представленным на мембране клетки. Мембранное закрепление может быть легко реализовано путем инкорпорирования в HPV ранний полипептид мембран - презентированной последовательности и в том случае, если нативный полипептид испытывает недостаток секреторной последовательности (то есть сигнального пептида). Мембран - закрепленные и секреторные последовательности являются известными для специалистов данной отрасли техники. Вкратце, секреторные последовательности присутствуют на N - конце мембраны и являются представленными или секретированными полипептидами и их проникновение является инициированным на эндоплазматическом ретикулуме (ER). Они обычно включают 15-35 сильно гидрофобных аминокислот, которые потом могут быть разрушены определенным образом локализированной ER - эндопептидазой для того, чтобы дать возможность образоваться зрелому полипептиду. Мембран - закрепленные последовательности являются обычно сильно гидрофобными в природе и не природных условиях для того, чтобы закрепить на мембране полипептиды (см., например, Branden и Tooze, 1991, in Introduction to Protein Structure p.202-214, NY Garland).
Спектр мембран - закрепленных последовательностей и секреторных последовательностей, которые могут использоваться в контексте существующего изобретения, является широким. Они могут быть получены из любого мембранзакрепленного и/или секреторного полипептида, включающего такие полипептиды, как, например, клеточные или вирусные полипептиды, такие как гликопротеин вирусной гидрофобии, вирусный гликопротеин ВИЧ или F белок вируса кори, или могут быть синтетическими. У мембранзакрепленных последовательностей и/или секреторных последовательностей, инсертированных в каждый из ранних полипептидов HPV-16, используемых согласно изобретению, может быть общее или различное происхождение. Преимущественный участок вставки секреторной последовательности-N-терминальный конец в направлении вниз по ходу кодона для инициирования трансляции, а мембранзакрепленная последовательность является С-терминальным концом, например, по направлению вверх от стоп кодона.
HPV Е6 полипептид для использования в существующем изобретении предпочтительно изменен вставкой секреторных и мембранзакрепленных сигналов F белка кори. Произвольно или в комбинации, HPV E7 полипептид для использования в существующем изобретении предпочтительно изменен вставкой секреторных и мембранзакрепленных сигналов гликопротеина вирусной гидрофобии.
Терапевтическая эффективность рекомбинантного вирусного вектора может также быть усилена при использовании одной или более нуклеиновых кислот, кодирующих иммунопотенциирующие полипептид(ы). Например, может быть выгодно связать HPV ранний полипептид(ы) с полипептидом, таким как кальцийретикулярный полипептид (Chen и др., 2000, Cancer Res. 60, 1035-1042), убихитин (Rodriguez и др., 1997, J. Virol. 71, 8497-8503) или область перемещения бактериального токсина, такого как экхотоксин Pseudomonas (ETA(dIII)) (Hung и др., 2001 Cancer Res. 61, 3698-3703).
Согласно другому и предпочтительному воплощению существующего изобретения, рекомбинантный вирусный вектор согласно изобретению включает нуклеиновую кислоту, которая кодирует один или более ранний полипептид(ы), как было выше указано, и более подробно HPV-16 и/или HPV-18 ранние Е6 и/или полипептиды Е7.
Согласно другому специальному воплощению существующего изобретения, указанная гетерологичная последовательность нуклеотида, кодирует все или часть MUC1 антигена или производные указанного.
Если это является необходимым, то молекула нуклеиновой кислоты для использования в данном изобретении, может быть оптимизирована для того, чтобы обеспечить высокий уровень экспрессии антигена (например, HPV ранний полипептид(ы)) в специфической клетке хозяине или организме, например, в человеческой клетке хозяине или в организме. Как правило, оптимизация кодона является выполненной, заменяя один или более "нативных" (например, HPV) кодонов, которые являются соответствующими кодону, который является используемым в относящейся к млекопитающим клетке хозяине одним или более кодонами, кодирующими ту же самую аминокислоту, которая используется более часто. Это может быть достигнуто обычным мутагенезом или химическими синтетическими способами (например, приводящими к синтезу нуклеиновой кислоты). Не является необходимым заменить все нативные кодоны, соответствующие не часто используемым кодонам, так как усиленная экспрессия может быть достигнута даже с частичной заменой. Кроме того, некоторые отклонения от строгой придерженности к оптимизированному использованию кодона могут быть реализованы, если использовать введение сайта(ов) рестрикции.
Как уже было упомянуто выше, поксвирусный вектор является предпочтительным, и более определенно сильно аттенуированным штаммом вируса коровьей оспы. Определение полной последовательности генома MVA и сравнение с вирусный геном копенгагенским вирусом коровьей оспы позволило точно идентифицировать семь делеций (от I до VII), которые произошли в геноме MVA (Antoine и др., 1998, Virology 244, 365-396), любая из которых может использоваться для того, чтобы инсерцировать антиген (например, HPV ранний полипептид или MUC1), кодирующий нуклеиновую кислоту.
Основная техника, которая используется для того, чтобы инсерцировать нуклеиновую кислоту и связанные регулирующие элементы, требуемые для экспрессии в поксвирусном геноме, уже является описанной во многих документах, доступных для среднего специалиста, квалифицированного в данной отрасли техники (Paul и др., 2002, Cancer gene Ther. 9, 470-477; Piccini и др., 1987, Methods of Enzymology 153, 545-563; US 4769330; US 4772848; US 4603112; US 5100587 и US 5179993). Обычно, процедура реализуется благодаря гомологичной рекомбинации между наложившимися последовательностями (то есть желаемым сайтом рестрикции), и является представленной в вирусном геноме и в плазмиде, несущей нуклеиновую кислоту для инсерции.
Нуклеиновая кислота, которая кодирует антиген согласно существующему изобретению, является предпочтительно инсерцированной в несущественный локус поксвирусного генома для того, чтобы рекомбинантный поксвирусный ген остался жизнеспособным и инфекционным. Несущественные области не кодируют интегриновые области или любой ген, для которого инактивация или удаление значительно не ослабляют вирусный рост, репликацию или инфекцию. Можно также предусмотреть вставку в существенном вирусном местоположении при том условии, что дефектная функция будет супплиирована во время продуцирования вирусных частиц, например, при использовании клеточной линии адъюванта, несущей комплементарные последовательности, которые, соответственно, являются удаленными в поксвирусном геноме.
Можно использовать копенгагенский вирус коровьей оспы, который кодирует нуклеиновую кислоту антигена, предпочтительно вставленную в ген тимидин киназы (tk) (Hruby и др., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci USA 80, 3411-3415; Weir и др, 1983, J. Virol. 46, 530-537). Однако, другие участки вставки являются также соответствующими, например, в гемагглютининовом гене (Guo и др., 1989, J. Virol. 63, 4189-4198), в местоположении K1L, в и гене (Zhou и др., 1990, J. Gen. Virol. 71, 2185-2190) или в левом конце генома вирус коровьей оспы, где множество непосредственных или сконструированных делеций были уже описаны в литературных источниках (Altenburger и др., 1989, Archives Virol. 105, 15-27; Moss и др. 1981, J. Virol. 40, 387-395; Panicali и др., 1981, J. Virol. 37, 1000-1010; Perkus и др., 1989, J. Virol. 63, 3829-3836; Perkus и др., 1990, Virol. 179, 276-286; Perkus и др., 1991, Virol. 180, 406-410).
При использовании MVA, которая кодирует антиген нуклеиновая кислота может быть инсерцирована в любую из идентифицированных делеций от I к VII, так же как в местоположении D 4R, но вставка в удалении II или III является предпочтительной (Меуег и др., 1991, J. Gen. Virol. 72, 1031-1038; Sutter и др., 1994, Vaccine 12, 1032-1040).
Используя вирус fowlpox, хотя вставку в пределах гена тимидин киназы можно определить, нуклеиновая кислота, которая кодирует антиген, является предпочтительно введенной в интергенную область, которая расположена между ORFs 7 и 9 (см., например, ЕР 314569 и US 51806755).
Предпочтительно, нуклеиновая кислота, которая кодирует антиген, для использования в данном изобретении, находится в форме, подходящей для ее экспрессии в клетке хозяине или организме, и это означает то, что последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует антиген (например, полипептид Е6 и/или последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид Е7), помещена под контроль одной или более регуляторных последовательностей, необходимых для экспрессии в клетке хозяине или организме. В том значении, как используется в данном описании, термин "регуляторная последовательность" относится к любой последовательности, которая обеспечивает, привносит или модулирует экспрессию нуклеиновой кислоты в данной клетке хозяине, включая репликацию, дупликацию, транскрипцию, сплайсинг, трансляцию, стабилизацию и/или транспортирование нуклеиновой кислоты или одной из ее производных (то есть м РНК) в клетку хозяина. Это будет высоко оценено специалистами, которые являются квалифицированными в данной отрасли техники, потому что выбор регулирующих последовательностей может зависеть от факторов, таких как клетка хозяин, вектор и уровень желательной экспрессии.
Промотор имеет особое значение, и существующее изобретение охватывает использование конститутивных промоторов, которые непосредственно обеспечивают экспрессию нуклеиновой кислоты во многих типах клеток хозяина, и тех, которые непосредственно обеспечивают экспрессию только в специфичных клетках хозяина или в ответ на специфические явления или внешние факторы (например, температура, пищевые добавки, гормоны или другие лиганды). Подходящие промоторы широко описаны в литературных источниках, можно указать, более точно, такие вирусные промоторы, как RSV, SV40, CMV и промоторы MLP. Среди преимущественных промоторов для использования в поксвирусных векторах, но, не ограничиваясь ими, - это промоторы вируса коровьей оспы 7.5К, H5R, ТК, р28, р11 и K1L, химерные промоторы между ранними и поздними поксвирусными промоторами, а также, такие, как синтетические промоторы, такие как промоторы, которые описаны в Chakrabarti и др. (1997, Biotechniques 23, 1094-1097), Hammond и др. (1997, J. Virological Methods 66, 135-138) и Kumar и Boyle (1990, Virology 179, 151-158).
Специалисты, которые являются квалифицированными в данной отрасли техники, будут ценить то, что регулирующие элементы, которые контролируют экспрессию молекулы нуклеиновой кислоты согласно данному изобретению, могут далее включать дополнительные элементы для последующей инициации, регулирования и/или терминации транскрипции (например, поли А последовательности терминации транскрипции), транспорта м РНК (например, ядерные последовательности сигнальной локализации), процессинга (например, сплайсирующие сигналы), и стабилизации (например, интроны и некодирующие 5' и 3' последовательности), трансляции (например, сигнальные пептиды, пропептиды, трехсторонние лидерные последовательности, связывающие участки рибосомы, последовательности Шайн-далгамо, и т.д.) клетки хозяина или организма.
В альтернативном варианте, рекомбинантный вирусный вектор для использования в данном изобретении может далее включать по крайней мере одну нуклеиновую кислоту, которая кодирует по крайней мере один цитокин. Подходящие цитокины включают без ограничения IL-2, IL-7, IL-15, IL-18, IL-21 и IFN гамма, с преимущественным предпочтением IL-2. Те случаи, когда рекомбинантная вирусная вакцина, согласно данному изобретению, включает экспрессирующую цитокин нуклеиновую кислоту, указывают на то, что нуклеиновую кислоту может нести рекомбинантный вирусный вектор, кодирующий тот или иной HPV ранний полипептид(ы) или независимый рекомбинантный вектор, который может иметь то же самое или иное происхождение.
Преимущественное воплощение данного изобретения направлено на использование рекомбинантной вирусной вакцины, включающей вектор MVA, кодирующий HPV Е6 полипептид, помещенный под 7.5К промотор, HPV Е7 полипептид, помещенный под 7.5К промотор и ген человеческого IL-2, помещенный под контролем промотора Н 5R. Предпочтительно, нуклеиновые кислоты, кодирующие HPV Е6 полипептид, HPV Е7 полипептид и человеческий IL-2, являются инсерцированными в делению III генома MVA.
Другое преимущественное воплощение данного изобретения направлено на использование рекомбинантной вирусной вакцины, включающей вектор MVA, кодирующий MUC1 полипептид, помещенный под 7.5К промотор, и ген человека IL-2, помещенный под контролем промотора H5R.
Инфекционные вирусные частицы, включающие вышеописанный рекомбинантный вирусный вектор, могут быть произведены обычным способом. Тпичный способ включает шаги:
а) введение вирусного вектора в подходящую клеточную линию,
b) культивирование указанной клеточной линии при подходящих условиях для того, чтобы дать возможность продуцировать указаннные инфекционные вирусные частицы,
с) восстановление произведенной инфекционной вирусной частицы из культуры указанной клеточной линии, и
d) оптимальная очистка указанных восстановленных инфекционных вирусных частиц.
Клетки, которые являются соответствующими для того, чтобы размножить поксвирусные векторы, являются птичьими клетками, и наиболее предпочтительно первичными эмбрионами куриных фибробластов (СЕF), подготовленными из куриных эмбрионов, полученных из оплодотворенных яйцеклеток.
Инфекционные вирусные частицы могут быть восстановлены от супернатанта культуры или из клеток после лизиса (например, химическими средствами, замораживанием / размораживанием, осмотическим шоком, механическим воздействием, соникацией и т.п.). Вирусные частицы могут быть изолированы последовательными этапами очистки и затем последующей очисткой с использованием способов, известных в данной отрасли (хроматографические способы, ультрацентрифугирование в хлориде цезия или градиенте сахарозы).
Согласно другому воплощению, 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин-производная согласно существующему изобретению - это соединение, который является выбранным из одной из следующих общих формул I-V:
или аналоги, сольваты или соли указанного, причем
R11 является выбранным из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного алкила, гидроксиалкила, бензила, (фенил) этила и фенила, указанного бензила, (фенил) этила или заместителя фенила, произвольно замещенного на бензольное кольцо одного или двух радикалов, которые являются выбранными, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из С1-4 алкильного радикала, С1-4 алкоксильного радикала и галогена, при том условии что, если указанное бензольное кольцо является замещенным двумя из указанных радикалов, то указанные радикалы вместе содержат не больше, чем 6 атомов углерода;
R21 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, С1-8 алкильного радикала, бензила, (фенил) этила и фенила, бензил, (фенил) этила или заместителя фенила, произвольно замещенного на бензольное кольцо одного или двух радикалов, которые являются выбранными, независимо от друг друга, из группы, которая состоит из С1-4 алкильного радикала, С1-4 алкоксильного радикала и галогена, при том условии, что, если указанное бензольное кольцо заменено двумя из указанных радикалов, то указанные радикалы вместе содержат не больше, чем 6 атомов углерода;
и каждый R1 является выбранным, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из водорода, С1-4 алкоксильного радикала, галогена и С1-4 алкоксильного радикала, и где n - это целое число от 0 до 2, при том условии, что если n равняется 2, то указанный R1 является сгруппированным и таким, что содержит не больше, чем 6 атомов углерода;
или аналоги, сольваты или соли указанного,
причем
R12 является выбранным из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного С2-10 алкенила, и замененным на неразветвленный или разветвленный С2-10 алкенил, причем заместитель является выбранным из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного алкильного радикала С1-4 и циклоалкильного радикала С3-6; и циклоалкильного радикала С3-6, которой является замещенным неразветвленным или разветвленным алкильным радикалом C1-4; и
R22 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного С1-8 алкильного радикала, бензила, (фенил) этила и фенила, бензил, (фенил) этила или заместителя фенила, произвольно замещенного на бензольное кольцо одного или двух радикалов, которые являются выбранными, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного C1-4 алкильного радикала, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала и галогена, при том условии, что, если указанное бензольное кольцо заменено двумя из указанных радикалов, то указанные радикалы вместе содержат не больше, чем 6 атомов углерода;
и каждый R2 является выбранным, независимо от друг друга, из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, галогена и неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, и где n - это целое число от 0 до 2, при том условии, что, если n равняется 2, то указанный R2 является сгруппированным и таким, что содержит не больше, чем 6 атомов углерода;
или аналоги, сольваты или соли указанного, причем
R23 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного С1-8 алкильного радикала, бензила, (фенил) этила и фенила, бензил, (фенил) этила или заместителя фенила, произвольно замещенного на бензольное кольцо одного или двух радикалов, которые являются выбранными, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного C1-4 алкильного радикала, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала и галогена, при том условии, что, если указанное бензольное кольцо заменено двумя из указанных радикалов, то указанные радикалы вместе содержат не больше, чем 6 атомов углерода;
и каждый R3 является выбранным, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, галогена и неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, и n - это целое число от 0 до 2, при том условии, что, если n равняется 2, то указанный R2 является сгруппированным и таким, что содержит не больше, чем 6 атомов углерода;
или аналоги, сольваты или соли указанного,
причем
R14 является представленным CHR34R44, причем R44 - это водород или карбон -карбоновое соединение, при том условии, что когда R44 является водородом, R34 является C1-4 алкоксильным радикалом, C1-4 гидроксиалкильным радикалом, С2-10 1-алкинильным радикалом, тетрагидропиранилом, алкоксиалкилом, причем алкоксильный радикал является содержащим от одного до четырех углеродных атомов, и алкиловый радикал содержит от одного до четырех углеродных атомов, 2-, 3- или 4-пиридил, и при таком дальнейшем условии, что, когда R44 является карбон-карболовым соединением, то R44 и R34 вместе образуют тетрагидрофураниловую группу, которая произвольно является замещенной на один или более заместителей, которые являются независимо друг от друга выбранными из группы, которая состоит из гидрокси и C1-4 гидроксиалкильного радикала;
R24 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, C1-4 алкила, фенила, причем фенил произвольно является замещенным на один или два радикала, которые независимо друг от друга являются выбранными из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного C1-4 алкильного радикала, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала и галогена;
и R4 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, галогена и неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала;
или аналоги, сольваты или соли указанного,
причем
R15 является выбранным из группы, которая состоит из водорода; неразветвленного или разветвленного С1-10 алкильного радикала и замещенного неразветвленного или разветвленного С1-10 алкильного радикала, причем заместитель является выбранным из группы, которая состоит из С3-6 циклоалкила и С3-6 циклоалкила замещенного неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала; неразветвленного или разветвленного С2-10 алкенильного радикала, причем заместитель является выбранным из группы, которая состоит из С3-6 циклоалкила и С3-6 замещенного циклоалкила неразветвленным или разветвленным C1-4 алкильным радикалом; С1-6 гидроксиалкила; алкоксиалкила, причем алкоксильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода, и алкильный радикал содержит от одного до приблизительно шести атомов углерода; циклоалкила, причем ацилоксильный радикал является представленным алканилоксилом с приблизительно двумя атомами углерода или бензоилоксилом, и алкилированный радикал содержит от одного до приблизительно шести атомов углерода; бензила; (фенил) этила; и фенила; указанный бензил, (фенил) этил или заместитель фенила, произвольно являются замещенными в бензольном кольце одним или двумя радикалами, которые являются выбранными, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из C1-4 алкильного радикала, C1-4 алкоксильного радикала, и галогена, при том условии, что когда указанное бензольное кольцо является замещенным на два из указанных радикала, тогда оба радикала вместе содержат не больше, чем шесть атомов углерода;
R25 является представленным
причем
R35 является выбранным из группы, которая состоит из C1-4 алкоксильного радикала, алкоксиалкила, причем алкоксильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода; C1-4 алкоксильного радикала; алкиламидо, причем алкильная группа содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода; амино; амино замещенного C1-4 алкила или C1-4 гидроксиалкила; азидо; C1-4 алкилтио;
R55 и R45 являются выбранными, независимо из друг друга, из группы, которая состоит из водорода, C1-4 алкила, фенила, причем где указанный фенил является произвольно замещенным на один или два радикала, которые являются выбранными, независимо друг от друга, из группы, которая состоит из неразветвленного или разветвленного C1-4 алкильного радикала, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала и галогена;
R5 является выбранным из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, галогена, и неразветвленного или разветвленного С1-4 алкильного радикала.
Согласно отдельному воплощению, C1-4 алкильный радикал является, например представленным метилом, этилом, пропилом, 2-метил пропилом и бутилом. Согласно преимущественному воплощению, C1-4 алкильный радикал является, например представленным таким образом, что выбран из группы, которая состоит из метила, этила и 2-метил пропила.
Согласно отдельному воплощению, алкоксильный радикал является представленным таким образом, что выбран из группы, которая состоит из метокси, этокси и этокси метила.
Согласно преимущественному воплощению, n является представленным нолем или единицей.
Согласно преимущественному воплощению, группы R1-R5 являются представленными водородом.
Согласно преимущественному воплощению, группы R11-R15 являются представленными таким образом, что выбраны из группы, которая состоит из 2-метил пропила и 2-гидрокси-2-метил пропила.
Согласно преимущественному воплощению, группы R21-R25 являются представленными таким образом, что выбраны из группы, которая состоит из водорода, С1-6 алкильного радикала, алкокси алкила, причем, алкоксильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода, и алкильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода. В наиболее преимущественном воплощении группы R21-R25 являются представленными таким образом, что выбраны из группы, которая состоит из водорода, метила или этокси метила.
Согласно одному преимущественному воплощению, 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин-производное существующего изобретения является представленным соединением, который является определенным следующей общей формулой VI:
или аналоги, сольваты или соли указанного,
причем
Rt является выбранным из группы, которая состоит из водорода, неразветвленного или разветвленного C1-4 алкоксильного радикала, галогена, и неразветвленного или разветвленного C1-4 алкильного радикала;
Ru является представленным 2-метил пропилом или 2-гидрокси-2-метил пропилом; и
Rv является представленным водородом, С1-6 алкилом, или алкоксиалкилом, причем алкоксильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода, и алкильный радикал содержит от одного до приблизительно четырех атомов углерода.
Согласно преимущественному воплощению, в формуле VI Rt является представленным водородом, Ru является представленным 2-метил пропилом или 2 гидрокси-2-метил пропилом, и Rv является представленным водородом, метилом или этокси метилом.
Согласно другому преимущественному воплощению, 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производное существующего изобретения является представленным соединением, которое выбрано из следующей группы:
1-(2-метил пропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (соединение формулы VI, в котором Rt является представленным водородом, Ru является представленным 2 -метил пропилом и Rv является представленным водородом);
1-(2-гидрокси-2-метил пропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (соединение формулы VI, в котором Rt является представленным водородом, Ru является представленным 2-гидрокси-2-метил пропилом, и Rv является представленным метилом;
1-(2-гидрокси-2-метил пропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (соединение формулы VI, в котором Rt является представленным водородом, Ru является представленным 2-гидрокси-2-метил пропилом, и Rv является представленным водородом);
1-(2-гидрокси-2-метил пропил-2-этокси метил-1-Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (соединение формулы VI, в котором Rt является представленным водородом, Ru является представленным 2-гидрокси-2-метил пропилом, и Rv является представленным этокси метилом);
или аналоги, сольваты или соли указаного.
Средние специалисты, которые являются квалифицированными в данной отрасли техники, могут обратиться, например, к US 4689338, US 4929624, EP 0385630 или WO 94/17043 (которые включены в данное описание в качестве ссылки), в которых описаны соединения, о которых было упомянуто выше и способы, подходящие для их получения.
Более конкретно, 1-(2-метил пропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (также известный под названием имихимод или Aldara) был подробно описан, в качестве ссылки, могут быть, приведены Buck, 1998, Infect. Dis. Obstet. Gynecol., 6, 49-51; Dockrell и Kinghorn, 2001, J. Antimicrob. Chemother., 48, 751-755 или Garland, 2003, Curr. Opin. Infect. Dis., 16, 85-89; 1-(2-гидрокси-2-метил пропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин и 1-(2-гидрокси-2-метил пропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин был раскрыт в US 2004/0076633, и 1-(2-гидрокси-2-метил пропил)-2-этоксиметил-1-Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин (также известный под названием резиквимод) описан в Dockrell и Kinghorn, 2001, J. Antimicrob. Chemother. 48, 751-755 или Jones, Curr. Opin. Investig. Drugs., 2003, 4, 214-218.
Если иначе не обозначено, то указание на 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин-производное может иметь в виду то, что оно включает в свой состав любую фармацевтически приемлемую форму, включая любой изомер (например, диастереомер или энантиомер), соль, сольват, полиморф и т.п. В частности, в том случае, если состав является оптически активным, то указание на соединение включает в его состав каждый из энантиомеров состава так же, как рацемические смеси энантиомеров.
Согласно одному преимущественному воплощению, рекомбинантная вирусная вакцина и более подробно рекомбинантный вирусный вектор не включают иммуностимулирующие средства или основу, которая вызывает отдельно имунную реакцию, особенно последовательность нуклеотида, которая обладает иммуностимулирующими свойствами или основу, такую как Ср G, поли G, поли Т, ТG, метилированный Ср G, Ср I и Т или фосфортиолатовые основы (см. содержание US 2003/0139364, US 6207646 или WO 01/22972, которые включены в данное описание в качестве ссылки).
Согласно одному воплощению, концентрация 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производной в конечной рекомбинантной вирусной вакцине будет приблизительно от 0.0001% приблизительно до 10% (если иначе не обозначено, все проценты, которые указаны здесь, означают вес/вес относительно всей композиции), приблизительно от 0.01% приблизительно до 2%, более подробно от приблизительно 0.06 приблизительно до 1%, предпочтительно от приблизительно 0.1 приблизительно до 0.6%.
Согласно другому воплощению, соответствующая дозировка рекомбинантного вирусного вектора может быть отображена в качестве функции различных параметров, в особенности способ введения; используемый состав; возраст, состояние здоровье, и вес организма хозяина; природа и степень признаков; вид параллельного лечения; частота лечения; и/или потребность в профилактике или терапии. Дальнейшая обработка вычислений, необходимых для того, чтобы определить соответствующую дозировку для лечения, обычно делается на практике, в свете соответствующих обстоятельств. Для общего руководства подходящая дозировка для MVA -содержащего состава изменяется приблизительно от 104-1010 pfu (бляшко образующая единица), по желанию приблизительно от 105 и 108 pfu, тогда как включающий аденовирус состав изменяется приблизительно от 105-1013 iu (инфекционные единицы), по желанию приблизительно от 107 и 1012 iu. Составы, которые основаны на векторных плазмидах, можно назначать в дозах между 10 мкг и 20 мг, полезно между 100 мкг и 2 мг. Преимущественный состав назначают в дозе (ах), включающей от 5×105 pfu до 5×107 pfu вектора вируса коровьей оспы MVA.
Режим дозирования может зависеть, по крайней мере частично от многих факторов, известных для специалиста, квалифицированного в данной отрасли техники, которые включают, но не являются ограниченными, природой имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производной и используемым рекомбинантным вирусным вектором, природой носителя, количеством имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производной и применением рекомбинантного вирусного вектора, состоянием иммунной системы суббъекта (например, подавленный, находящийся под угрозой, стимулируемый), и способом применения имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производной и/или рекомбинантпых вирусных векторных составов. Соответственно это не является практичным, чтобы сформулировать вообще режим дозирования, который будет эффективным, для того, чтобы усилить эффективность рекомбинантной вирусной вакцины для всех возможных применений. Таковые являются известными для специалиста, квалифицированного в данной отрасли техники, однако, могут быть определены для соответствующего режима дозирования с определенным учетом некоторых факторов. В некоторых воплощениях существующего изобретения имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы можно применять, например, единожды, приблизительно один раз в день, хотя в некоторых воплощениях имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы можно применять так часто, что будет отличаться от указанного диапазона. В специфичных воплощениях имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы можно применять приблизительно от одного раза в неделю до приблизительно одного раза в день. В одном специфическом воплощении имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы применяют один раз каждую неделю. По желанию, имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы применяют 1-10 раз с интервалом в одну неделю. Предпочтительно, имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производные и/или рекомбинантные вирусные векторные составы, или любой состав, содержащий указанные, применяют 3 раза с еженедельным интервалом путем введения под кожу.
В дальнейшем аспекте существующее изобретение обеспечивает способ усиления иммунного ответа на антиген у пациентов, при этом указанный способ включает введение, или последовательно или одновременно, (i) рекомбинантного вирусного вектора, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно гетерологичную последовательность нуклеотида, который кодирует антиген и (ii) имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную.
В другом аспекте существующее изобретение обеспечивает способ профилактики возникновения и/или лечения рака у пациента, при этом указанный способ включает введение, или последовательно или одновременно, (i) рекомбинантного вирусного вектора, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно гетерологичную последовательность нуклеотида, который кодирует антиген и (ii) имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную.
В другом аспекте существующее изобретение обеспечивает способ профилактики возникновения и/или лечения инфекционного заболевания у пациента, при этом указанный способ включает введение, или последовательно или одновременно, (i) рекомбинантного вирусного вектора, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно гетерологичную последовательность нуклеотида, который кодирует антиген и (ii) имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную. Согласно преимущественному воплощению существующего изобретения указанное инфекционное заболевание является заболеванием, которое является вызванным вирусом, таким как, например, заболевания, которые вызваны ВИЧ, HCV, HBV, HPV и т.п.
В дальнейшем воплощении существующее изобретение обеспечивает использование имидазо[4,5-с]хинолин4-амина производной для изготовления рекомбинантной вирусной вакцины для усиления иммунного ответа на антиген, закодированный рекомбинантным вирусным вектором, при этом указанный рекомбинантный вирусный вектор, является введенным или последовательно или одновременно с указанной производной.
"Вводимый последовательно" в значении, которое используется в данном описании, означает то, что рекомбинантный вирусный вектор [состав (i)] и имидазо[4,5-с]хинолин 4-амина производная [состав (ii)] существующей рекомбинантной вирусной вакцины вводятся независимо от друг друга; например, первое введение одного из упомянутых составов и отдельное второе введение, состоящее во введении второго состава. Согласно существующему изобретению, первое введение может быть сделано до, одновременно с или последующим за вторым введением, и наоборот. Терапевтическое введение состава и второе введение могут быть выполнены различными или идентичными путями введения (системное введение и дробное введение, или системно-дробные введения, например). В преимущественном воплощении каждый должен быть поставлен в ту же самую целевую ткань и, что является наиболее предпочтительным, парентеральным путем введения.
В преимущественном воплощении введение рекомбинантного вирусного вектора и имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производной являются по сути одновременными. И более предпочтительно, оба состава являются со - вводимыми.
В другом воплощении имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную вводят перед применением рекомбинантного вирусного вектора. В этом специальном воплощении, "перед" средствами должно пройти приблизительно от 5 минут приблизительно до 2 недель, более подробно приблизительно от 1 часа приблизительно до 1 недели, более подробно приблизительно от 6 часов до приблизительно 48 часов.
Рекомбинантную вирусную вакцину согласно существующему изобретению вводят пациенту как фармацевтически приемлемый раствор, который может обычно содержать фармацевтически приемлемые концентрации соли, буферизующие агенты, консерванты, совместимые носители, адьюванты (например, квасцы, BCG, свободные модификаторы ответа), и, произвольно, другие терапевтические компоненты.
Термин «фармацевтически приемлемый носитель» в значении, которое является использукемым в данном описании, подразумевает один или более совместимых твердых или жидких наполнителей, разжижителей или веществ, которые являются заключенными в капсулу, и которые являются подходящими для применения для человека или другого позвоночного животного. Термин «носитель» в значении, которое является используемым в данном описании, подразумевает органический или неорганический компонент, естественный или синтетический, с которым активный компонент объединен для того, чтобы облегчить применение. Компоненты фармацевтических составов также могут быть способны к тому, чтобы быть смешанными с составами существующего изобретения, и друг с другом, таким образом, чтобы между ними не было никакого взаимодействия, которое существенно ослабило бы желаемую фармацевтическую эффективность.
Рекомбинантная вирусная вакцина может быть введена любым обычным путем введения, которые используются для того, чтобы вводить лекарства. Многие из путей введения являются доступными. Специфически выбранный путь введения будет зависеть, конечно, от специфического рекомбинантного вирусного содержимого вакцины, специфических условий, которые будут рассмотрены и дозировки, которая будет необходима для терапевтической эффективности. Способы этого изобретения, вообще говоря, могут быть осуществлены таким образом, что если использовать любой способ введения, который является с медицинской точки зрения приемлемым, и это означает любой способ, который дает эффективные уровни иммунного ответа, не вызывая при этом клинически недопустимые отрицательные воздействия. Преимущественные способы применения обсуждены в данном описании. Для использования в терапевтически эффективном количестве 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производная может быть введена пациенту любым способом, который поставляет агент на желаемую поверхность, например, на слизистую оболочку, системно или в любой другой форме, например, в форме крема, в форме раствора.
Рекомбинантная вирусная вакцина, или ее отдельные составы (i) и (ii), может использоваться согласно изобретению множеством способов применения, включая системное, местное и локальное применение. Инъекция может быть выполнена каким-либо образом, например под кожу, внутрь кожи, внутрь мышц, внутрь вены, внутрь брюшины, внутрь опухоли, внутрь сосуда, внутрь артерии инъекциями или прямой инъекцией в артерию (например, вливанием в печеночную артерию) или в вену, которая входит в печень (например, инъекция в портальную вену). Инъекции могут быть осуществлены обычными для вены сиринксами и иглами, или любыми другими соответствующими устройствами, доступными для специалиста, квалифицированного в данной отрасли техники. Альтернативно, активный состав или любой состав, содержащий указанное, можно вводить путем проникновения через слизистую оболочку, такую как пероральный / через пищевой тракт, через нос, внутри трахеальный, внутри легочный, внутри влагалищный или внутри ректальный пути введения. Актуальное применение может также быть выполнено, используя трансдермальные средства (например, в форме крема, сливок и т.п.). В контексте существующего изобретения внутримышечные и подкожные пути введения составляют преимущественные пути введения.
Для орального применения рекомбинантная вирусная вакцина может быть сформулирована таким образом, что активный состав(ы) является скомбинированным с фармацевтически приемлемыми носителями, известными для специалистов, квалифицированных в данной отрасли техники. Такие носители позволяют составам согласно данного изобретения быть сформулированными в таком виде, как таблетки, пилюли, драже, капсулы, жидкости, гели, сиропы, жидкие растворы, суспензии и т.п., в виде орального приема пациентом, которого будут лечить. Фармацевтические препараты для орального использования могут быть получены благодаря добавлению таких добавок, как твердый наполнитель, произвольно размолотый в полученную смесь, и обработанный в смесь гранул, после добавления подходящих вспомогательных добавок, если желательно получить ядра драже или таблетки. Подходящие наполнители представлены, в частности наполнителями, такими как сахар, включая лактозу, сахарозу, маннит, или сорбитол, препараты целлюлозы такие как, например, крахмал кукурузы, крахмал пшеницы, крахмал риса, картофельный крахмал, желатин, резина траггакант, метилцеллюлоза, гидроксипропилметил - целлюлоза, натрий карбокси метилцеллюлоза, и/или поливинилпирролидон (PVP). Если желательно, могут быть добавлены дезинтегрирующие агенты, такие как поперечно связанный поливинилпирролидон, агар, или альгиновая кислота или соль указанных, такая как альгинатный натрий. Произвольно оральные композиции могут также быть сформулированы в pane или буферах для того, чтобы нейтрализовать внутренние кислотные воздействия или могут быть введены без каких бы то ни было носителей. Рекомбинантная вирусная вакцина, которая может использоваться орально, включает твердые капсулы, сделанные из желатина, так же как и мягкие, запечатанные капсулы, сделанные из желатина и пластификатора, таких как глицерин или сорбитол. Пригодные твердые капсулы могут содержать активные компоненты в примеси с наполнителем, таким как лактоза, связывающие агенты, такие как крахмалы, и/или смазки, такие как тальк или стеарат магния и, произвольно, стабилизаторы. В мягких капсулах активные составы могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий керосин, или жидкие гликоли полиэтилена. Кроме того, могут быть добавлены стабилизаторы. Микросферы, сформулированные для орального применения, также могут быть использованы. Такие микросферы были хорошо раскрыты у данной отрасли техники. Все композиции для орального применения должны присутствовать в дозировках, подходящих для такого применения.
Рекомбинантная вирусная вакцина в том случае, когда является необходимой системная доставка, может быть сформулирована для парентерального введения инъекцией, например, болюсным вливанием или непрерывным вливанием. Композиции для инъекции могут быть представлены в форме дозированной единицы, например, в ампулах или в контейнерах мультидозы, с добавленным консервантом. Рекомбинантная вирусная вакцина может иметь такие формы как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных везикулах, и может содержать вспомогательные вещества, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Рекомбинантная вирусная вакцина для парентерального введения включает водные растворы активных составов в растворимой в воде форме. Дополнительно, суспензии активных составов (i) и/или (ii) могут быть подготовлены как соответствующие масляные суспензии для инъекции. Подходящие липофильные растворители или везикулы включают жирные масла, такие как кунжутное масло, или синтетические эстеры жирных кислот, такие как этил олеат или триглицериды, или липосомы. Водные суспензии для инъекции могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, такие как натрий карбоксиметил целлюлоза, сорбитол, или декстран. Произвольно, суспензия может также содержать подходящие стабилизаторы или такие агенты, которые увеличивают растворимость составов для того, чтобы обеспечить приготовление сильно сконцентрированных растворов.
Альтернативно, активные составы (i) и/или (ii) могут быть в порошковой форме для объединения перед использованием с подходящими везикулами, например, стерильной апирогенной водой. Рекомбинантная вирусная вакцина может также быть сформулирована в ректальных или влагалищных составах, таких как свечи или клизмы, например, содержащие обычные основы для свечей, такие как масло какао или другие глицериды. В дополнение к рекомбинантной вирусной вакцине, можно также приготовить и депо-препарат. Такие длительно сохраняющие активность композиции могут быть сформулированы с подходящими полимерными или гидрофобными материалами (например, такими как эмульсия в приемлемом масле) или смолы, получаемые путем ионного обмена, или как умеренно растворимые производные, например, как умеренно растворимая соль. Рекомбинантная вирусная вакцина также может включать подходящую твердую фазу или гелевый носитель или наполнитель. Примеры таких носителей или наполнителей включают, но не являются ограниченными, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара, крахмалы, производные целлюлозы, желатины, и полимеры, такие как гликоли полиэтилена.
Подходящие жидкие или твердые формы рекомбинантной вирусной вакцины являются, например, водными или солевыми растворами для ингаляции, микро инкапсулированными, хелатированными, нанесенными на микроскопические золотые частицы, содержавшиеся в липосомах, распыленными, аэрозолями, пеллетами для имплантации в кожу, или высушенными контрастными объектами, которые будут введены в кожу. Фармацевтические составы также включают гранулы, порошки, таблетки, покрытые таблетки, (микро) капсулы, свечи, сиропы, эмульсии, суспензии, кремы, лекарства или препараты с длительным высвобождением активных составов, в которых присутствуют вспомогательные добавки и наполнители такие, как дезинтегрирующие агенты, связующие агенты, агенты для покрытия, агенты для вспучивания, смазки, красители, подслащивающие вещества или солюбилизаторы, которые обычно используются так, как описано выше.
1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производная может быть введена по сути или в форме фармацевтически приемлемой соли. В тех случаях, когда используют фармацевтически приемлемые в медицине соли, они должны быть таковыми, но не фармацевтически приемлемыми солями, и могут быть использованы для того, чтобы подготовить фармацевтически приемлемые соли указанной производной. Такие соли включают, но не являются ограниченными, полученные из следующих кислот: хлористоводородная, гидробромистая, серная, азотная, фосфорная, малеиновая, уксусная, салициловая, р-толуол сульфоновая, винная, лимонная, метан сульфоновая, муравьиная, малоновая, сукциновая, нафтален-2-сульфоновая, и бензол сульфоновая. Кроме того, такие соли могут быть получены как щелочные металлические или щелочные земельные соли, такие как натрий, калий или соли кальция карбоксильной кислотной группы.
Подходящие буферизующие агенты включают следующее: уксусная кислота и соль (1-2% в/в); лимонная кислота и соль (1-3% в/в); борная кислота и соль (0.5-2.5% в/в); и фосфорная кислота и соль (0.8-2% в/в). Подходящие консерванты включают бензалконий хлорид (0.003-0.03% в/в); хлор бутанол (0.3-0.9% в/в); парабены (0.01-0.25% в/в) и тимеросал (0.004-0.02% в/в).
Рекомбинантная вирусная вакцина может удобно быть представлена в форме дозированной единицы и может быть подготовлена любым из способов, известных в фармацевтической отрасли техники. Все способы включают этап обеспечения составов (i) и (ii) в объединение с носителем, который составляет один или более дополнительных компонентов. Вообще, составы являются подготовленными однородными и тщательными при помощи составов путем ассоциирования с жидким носителем, потом разделенные твердым носителем, или обоими, и затем, в случае необходимости, с формированием продукта. Для жидких - единицами дозирования являются пузырьки или ампулы. Для твердых - единицами дозирования являются таблетки, капсулы и свечи. Для лечения пациента, в зависимости от активности состава, способа введения, цели иммунизации (то есть является это профилактикой или терапией), природы и серьезности заболевания, возраста и массы тела пациентов, могут различаться формы введения. Введение данной дозы может быть выполнено обоими способами, одноразовым введением в форме отдельной единицы дозы или другим способом в несколько меньших единицах дозы. Многократные введения доз в специфичных интервалах недель или месяцев, типично применяются для повышения специфичных антигенных реакций.
Другие системы доставки могут включать зависящие от времени, отсроченные введения или поддерживающие системы доставки лекарственного средства. Такие системы могут избежать повторных введений составов рекомбинантной вирусной вакцины, увеличивая удобство для пациента и для врача. Много типов систем доставки лекарственного средства доступны и являются уже известными для среднего специалиста, который квалифицирован в данной отрасли техники. Они включают системы, которые являются основанными на полимере, такие как поли (лактид-гликоцид), сополиоксадлаты, поликапролактоны, полиэстерамиды, полиортоэстеры, полигидроксибутировая кислота и полиангидриды. Микрокапсулы указанных полимеров, содержащих лекарственные средства, описаны в, например, US 5075109. Системы доставки также включают системы не полимерные по своей природе, которыми являются: липиды, включая при этом стерины, такие как холестерин, холестерин эстеры и жирные кислоты или нейтральные жиры, такие как моно- ди- и триглицериды; гидрогелевые высвобождающиеся системы даставки, силастичные системы; системы, которые являются основанными на пептидах; покрытые воском; пресованные таблетки, при использовании обычных смазочных агентов и наполнителей; частично расплавляющиеся имплантанты; и т.п. Специфичные примеры включают, но не являются ограничеными: (а) эрозионные системы, в которых вещество согласно данному изобретению содержится форма в пределах матрицы, такой как описанные в US 4452775, 4675189, и 5736152, и (b) диффузионные системы, в которых активный компонент проникает в контролируемом количестве из полимера, такого, как описано в US 3854480, 5133974 и 5407686. Кроме того, могут так же использоваться помповые системы доставки лекарственных средств, некоторые из которых являются пригодными для имплантации.
Форма введения рекомбинантного вирусного вектора [состав (i)] и 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производная [состав (ii)] может быть идентичным или различным для одной указанной рекомбинантной вирусной вакцины согласно данному изобретению (например, состав (i) вводимый в виде раствора и состав (ii) вводимый в виде крема).
В других аспектах днное изобретение имеет отношение к комплектам. Один комплект согласно изобретению включает контейнер, который содержит (i) по крайней мере один рекомбинантный вирусный вектор согласно изобретению и контейнер, который содержит (ii) по крайней мере одну 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную и инструкции для того, чтобы рассчитать применение состава. Контейнер может быть единственным контейнером и (i) по крайней мере содержать одну рекомбинантную вирусную вакцину и (ii) по крайней мере одну 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин производную вместе, или это могут быть многодозовые контейнеры или камеры, которые содержат индивидуальную дозу составов (i) и (ii), такие как прозрачная упаковка. В комплекте также есть инструкции для того, чтобы рассчитать применение состава рекомбинантной вирусной вакцины. Инструкции ориентируют пациента относительно того, как применить рекомбинантную вирусную вакцину в подходящее время. Для растворимых, подходящее время для доставки рекомбинантной вирусной вакцины может зависеть от симптоматических признаков. Альтернативно, подходящее время для введения рекомбинантной вирусной вакцины может быть и типичным, таким как ежемесячное или ежегодное. Составы (i) и (ii) могут быть введены одновременно или раздельно так долго, пока их вводят достаточно определенное время, чтобы вызвать синергистический имунную реакцию.
Если есть желание, то способ или использование изобретения могут быть выполнены в комбинации с одним или более обычными терапевтическими способами лечения (например, радиация, химиотерапия и/или хирургия). Использование многократных терапевтических подходов предоставляет пациенту более широкое, более основательное вмешательство. В одном воплощении способу согласно изобретения может предшествовать или способ может сопровождаться хирургическим вмешательством. В другом воплощении этому может предшествовать, или способ может сопровождаться радиотерапией (например, гамма радиация). Специалисты, которые являются квалифицированными в данной отрасли техники, могут с готовностью сформулировать соответствующие радиационные протоколы терапии и параметры, которые могут быть использованы (см., например, Perez и Brady, 1992, Principles и Practice of Radiation Oncology, 2nd Ed. JB Lippincott Co; использование соответствующей адаптации и модификаций будет проводиться так, как будет очевидно для специалистов, которые являются квалифицированными в данной отрасли техники). В еще одном воплощении, способе или использовании согласно данного изобретения, можно использовать объединение с химиотерапией с одним или более лекарственными средствами (например, лекарственные средства, которые традиционно используются для лечения или профилактики инфекций HPV, HPV - ассоциированных патологических состояний).
Далее существующее изобретение решает проблемы, которые направлены на способы, ориентированные на увеличение эффективности лечения больного раком, который подвергается химиотерапевтическому лечению химиотерапевтическим агентом, который включает совместное лечение указанного пациента рекомбинантной вирусной вакциной, как описано выше.
Существующее изобретение в дальнейшем имеет отношение к улучшению способа цитотоксической эффективности цитотоксических препаратов или радиотерапии, которая включает совместное лечение пациента, который нуждается в таком лечении, рекомбинантной вирусной вакциной, как описано выше.
В другом воплощении, способ или использования данного изобретения, является реализованным согласно основному повышению терапевтической модальности, которая включает последовательное введение одного или более составов(ов) праймера и одного или более составов(ов) вспомогательного вещества. Как правило, праймированный и улучшенный составы используют различных посредников, которые включают или кодируют по крайней мере аллергенную область вместе. Праймированный состав первоначально вводят в организм хозяина, и впоследствии вводят улучшенный состав тому же самому организму хозяина после истечения периода, который изменяется от одного дня до двенадцати месяцев. Способ согласно данному изобретению может включать от одного до десяти последовательных введений праймированного состава, который сопровождается от одного до десяти последовательных введений улучшенного состава. По желанию, интервалы между инъекциями могут составлять от одной недели до шести месяцев. Кроме того, праймированный и улучшенный составы можно вводить на том же самом участке или на альтернативных участках при том же самом пути введения или различными путями введения. Например, составы, основанные на HPV раннем полипептиде, могут включать путем введения через слизистую оболочку, тогда как рекомбинантная вирусная вакцина предпочтительно может быть введена, например, путем подкожной инъекции для вектора MVA.
Способность индуцировать или стимулировать анти-HPV имунную реакцию после введения в животный или человеческий организм может быть оценена в условиях in vitro или в условиях in vivo путем проведения ряда экспериментов, которые являются стандартными для данной отрасли техники. Для общего описания технических способов, доступных для того, чтобы оценить начало и активацию иммунной реакции, см., например, Coligan и др. (1992 и 1994, Current Protocols in Immunology; ed J Wiley & Sons Inc, National Institute of Health). Измерение клеточной иммунности может быть выполнено измерением профилей цитокина, секретированного эффекторными активированными клетками, которые включают полученные из CD4+ и CD8+Т - клетки (например, определение количества IL-10 или продуцирующих гамма IFN клеток при помощи ELI spot), определением статуса активации иммуноэффекторных клеток (например, Т-клеточная пролиферация клеток, которая оценена классическим [3Н] поглощением тимидина), путем оценки антиген-специфичных Т-лимфоцитов у чувствительных субъектов (например, пептид специфичный лизис в испытании на цитотоксичность). Способность стимулировать гуморальный ответ может быть определена в связывании антитела и/или конкуренцией в связывании (см., например, Harlow, 1989, Antibodies, Cold Spring Harbor Press). Способ согласно изобретению может также быть далее валидирован на моделях животных, которых активируют путем соответствующего индуцирующего опухоль агента (например, HPV-Е6 и Е7 - экспрессии клеток ТС1) для того, чтобы определить антиопухолевую активность, рефлексирование индукции или повышение анти-HPV иммунного ответа.
Примерами заболеваний, которые можно особенно рассматривать в соответствии с существующим изобретением, являются, например, рак шейки матки или повреждения прекурсора указанной малигнизированной неоплазии, которые называют цервикальной внутриэпителиальной неоплазией (CIN) или покрытой чешуйками внутриэпителиальной болезни (SIL). Рекомбинантная вирусная вакцина согласно данному изобретению может также быть полезной в лечении бессимптомных инфекций цервикального канала у пациентов, у которых проведено ДНК диагностику, или бессимптомных инфекций, которые, как предполагается, остаются после хирургического лечения рака шейки матки, CIN или SIL, или бессимптомных инфекций, которые, как предполагают, существовали после эпидемиологического расстройства. Примерами заболеваний, которые также можно рассматривать, включают генитальные бородавки, и обычные бородавки, и бородавки, которые располагаются на подошвах. Все эти расстройства также вызваны большим разнообразием других типов HPV, и агенты, составы и способы согласно данному изобретению, могут также быть эффективно применены против этих вирусов. Все эти расстройства, по-видимому, происходят в виде бессимптомных инфекций, которые чаще всего не являются диагностированными. Существующее изобретение может также быть эффективно применено относительно всех этих бессимптомных инфекций.
Изобретение было описано при помощи иллюстирования, и нужно понимать, что терминология, которая была использована, предназначена для того, чтобы понимать смысл согласно описания, а не ограничивая его. Очевидно, что возможны разнообразные модификации и изменения существующего изобретения в свете вышеупомянутого изложения. Поэтому нужно понимать, что в рамках приложенной формулы изобретения, изобретение может быть осуществлено по-разному исходя лишь из того, что было изложено.
Все вышеупомянутые процитированные раскрытия патентов, публикаций и баз данных определенным образом включены в данное описание в качестве ссылки в их всей полноте в той же самой степени, как будто каждый такой отдельный патент, публикация или база данных были бы специально и индивидуально указанным для того, чтобы быть включенными в качестве ссылки.
Описание фигур
Фиг.1а/b/c/d: Терапевтический эффект комбинации между местным применением имиквимода с подкожной инъекцией MVATG8042. Фиг.1b: Эксперимент 1: 2·105 TCI sc, 3 sc инъекции с 5·106 pfu, 15 мышей в группе; фиг.1с: Эксперимент 2: 2·105 TCI sc, 3 sc инъекции с 5·106 или 5·105 pfu, 15 мышей в группе; фиг.1d: Эксперимент 3: 2·105 TCI sc, 3 sc инъекции с 5·106 pfu, 15 мышей в группе.
Фиг.2а/2b: Степень частоты Е7/Е6 специфичных лимфоцитов, которые секретируют IFN гамма. Фиг.2b: Е7/Е6 специфичная IFN гамма / Elispot реакция.
Фиг.3: IL-4 ELISPOT анализ. Е7, специфичная IL-4/Elispot реакция Th 2.
Фиг.4а/4b: анализ проточной цитометрии R9F - специфичных CD8+Т клеток. Степень частоты Tet_R9F+Е7 специфичных CD8+Т клеток.
Фиг.5а/5b: Е7 - специфичная гуморальная имунная реакция. Степень Th 1/Th 2 появления изотипа Ig G.
Фиг.6: MVA - специфичный нейтрализирующий титр антитела (NAT 50).
Фиг.7: Терапевтический эффект Aldara+комбинация MVAT G 9931 на модели опухоли Ren Са-Muc1.
Фиг.8: Эффект имиквимода на MUC1 - специфичном Th 1 типе Т - клеток против коротких или длинных антигенных детерминант.
Фиг.9: IL-4 elispot анализ: Эффект имиквимода на специфичном ответе Th 2 MUC-1 типе Т-клеток.
Фиг.10: MUC1 специфичный гуморальный иммунный ответ (появление изотипа: эффект имиквимода на MUC1 специфичный гуморальный ответ.
Примеры
А - Рекомбинантный вирусный вектор, который экспрессирует антигены HPV.
1. Материалы и Способы
1.1. Перечень тестов
Название и краткое описание каждой рекомбинантной векторной конструкции (основанной на MVA)
Название вируса | Концентрация партии (pfu/мл) | Е6 tm / Е7 tm промотор | hIL-2 промотор |
MVAN33 | 4,5·109 pfu/мл | - | - |
MVATG8042 | 3.1·109 pfu/мл | Р7.5 | PH5R |
Условия хранения:
Вирусы были поддержаны при -80°С до дня инъекции. Вирусная суспензия быстро немедленно была поддана оттаиванию до растворения и введения.
Вирусы были растворены в буфере Tris / HCl 10 м М, сахароза 5% (в/в), 10 м М Na Glu, 50 - м М NaCl, pH 8,0 для того, чтобы получить необходимую дозу в 100 мкл объеме.
1.2. Животные модели
Разновидность / штамм/поставщик:
SPF здоровые мыши женского пола С57Bl/6 были получены от Charles River (Les Oncins, Франция). По прибытию животные находились в возрасте 6 недель. В начале эксперимента они находились в возрасте 7 недель. Животные были размещены в единственной, исключительной комнате, которая была поддана кондиционированию для того, чтобы обеспечить минимум 11 изменений объема воздуха в час. Диапазоны температурной и относительной влажности были в пределах 20°С и 24°С и 40-70% соответственно. Освещение управлялось автоматически для того, чтобы получить цикл 12 часов света и 12 часов темноты. Специфичный патогенный свободный статус был проверен регулярным контролем чувствительности животных.
В течение всего исследования у животных был свободный доступ к стерильному типу диеты RM 1 (Dietex Франция, Saint Gratien). Стерильная вода была обеспечена свободным доступом через бутылки.
Все животные были акклиматизированы в течение одной недели перед началом эксперимента.
1.3. Описание клеток опухоли
ТС 1 клетки опухоли, которые были получены из легкого мышей С57Вl6, были трансдуцированы с двумя ретровирусами: LXSN16E 6Е 7, который экспрессирует Е6 и Е7 от HPV16 и pVEJB, который экспрессирует ras ген. Клетки были культивированы в DMEM, которая содержала G418 0.5 мг/мл и гидромицина 0.2 мг/мл. Прилипающие клетки были удалены при помощи трипсиновой обработки и после того, как было проведено три промывки, проверка иммунности к специфическому опухолевому агенту была выполнена под кожу с 2·105 ТС 1 жизнеспособными клетками.
1.4. Aldara™ (3 М Pharmaceuticals)
Aldara™ является фирменным знаком для имиквимода. Каждый грамм 5%-го крема содержит 50 мг имиквимода в форме масло-в-воде белого цвета с сероватым оттенком, который является быстро впитывающимся косметическим кремом, который состоит из изостеариновой кислоты, цетил алкоголя, стеарил алкоголя, медицинского вазелина, полисобрата 60, сорбитан моностеарата, глицерина, ксантановой резины, очищенной воды, алкоголь бензила, метил парабена и полипропил парабена.
1.5. Протокол
Протокол иммунизации:
Для иммунотерапевтических экспериментов, 15 самкам мыши С57Вl6 было введено под кожу с расположением внутрь 2·105 ТСl cells в Dl. Мышей обрабатывали три раза, под кожу на трех отдельных участках, 5·106 pfu или 5·105 pfu вируса коровьей оспы по D8, D15 и D22. Имиквимод (крем 5% Aldara; 3 М Pharmaceuticals), был применен актуально как раз перед каждой иммунизацией на участках инъекции на побритой коже мышей (приблизительно 1 см2). Каждая мышь получила приблизительно 0,8 мг или 1,6 мг / мышь активного имиквимода на одну иммунизацию. Рост опухоли был проверен два раза в неделю в течение 80 дней, при помощи кронциркуля. Мыши были подвергнуты эвтаназии по этическим причинам, когда размер их опухоли превосходил 25 мм по диаметру или когда они испытывали боль, даже если опухоль была не большой по своему размеру.
Для исследования иммуногенности 3 самкам мыши С57Вl6 без опухолей были привиты под кожу отдельных участках 5·107 pfu или 5·106 pfu вируса коровьей оспы по D8, D15. Эта доза была использована для того, чтобы обнаружить клеточную иммунность против специфичных антигенов HPV. Имиквимод был применен местно как раз перед каждой иммунизацией на участках инъекции на побритой коже мышей (приблизительно 1 см2). Каждая мышь получила приблизительно 0,8 мг или 1,6 мг / мышь активного имиквимода на одну иммунизацию. Селезенка и сыворотка были удалены в D22 для иммунологического анализа.
Параметры контроля:
* Оценка числа/частоты IFN гамма (Th 1) или IL-4 (у Th 2 секретирующих клеток при помощи Elispot
Свежие клетки селезенки были приготовлены при использовании клеточного фильтра (BD Falcon). Все пептиды были синтезированы при помощи Neosystem на иммунном уровне (10 мг). Каждый из пептидов был растворен в диметилсульфоксиде в 10 мг/мл и был созранен при 4°С. Анализ Elispot был выполнен при использовании мыши Mabtech АВ и комплекта IFN гамма ELISPOTPLUS или мыши и комплекта IL-4 ELISPOTPLUS (Mabtech, Франция) согласно инструкциям изготовителя. 96 - ячеячная нитроцеллюлозная пластина была покрыта количеством в 3 мкг/мл моноклональным антимышиным крысиным антителом IFN гамма (Clone R4-6А2; Pharmingen, cat. nr551216, Lot M072862; 100 мкл/ячейку) в карбонатно натриевом буфере. Ячейки были быстро инкубированы при 4°С или в течение 1 часа при 37°С. Пластины были вымыты три раза с 10%-ным FCS DMEM и насыщены в течение 2 часов при 37°С с 100 мкл DMEM 10%-ный FCS/ячейку. Спленоциты были платированы при концентрации 106 клеток/100 мкл. Интерлейкин 2 был добавлен во все ячейки при концентрации 6 ЕД/50 мкл/ячейку (Системы R&D) 10 нг/мл). Конкавалин А был использован в качестве позитивного контроля (5 мкг/мл). HPV специфичные пептиды были использованы при концентрации 5 мкг/мл. Пластины были инкубированы в течение 48 часов при 37°С, в 5%-ном СО2. Пластины были далее промыты один раз с PBS 1X и 5 раз с PBS - Tween 0.05%. Антимышиный биотинилированный IFN гамма (клон XMG1.2, Pharmingen) был введен при концентрации 0.3 мкг/100 мкл/ячейку и был проинкубирован в течение 2 часов при комнатной температуре при медленной выдержке. Пластины была далее промыты один раз с PBS 1X и 5 раз с PBS - Tween 0.05%. Экстравидин АКР (Sigma, St. Louis, МО) был дилюированным в 1/5000 PBS - Tween 0.05% - FCS 1% и был далее добавлен к ячейкам (100 мкл/ячейку). Пластина была инкубирована в течение 45 минут при комнатной температуре и затем промыта 5 раз с PBS - Tween 0.05%. Секреция IFN гамма была продемонстрирована при помощи использования комплекта Biorad. 100 мкл субстрата (NBT+BCIP) было добавлено в ячейки, и далее пластину оставляли при комнатной температуре в течение ½ часов. Пластина была далее промыта с водой и размещена для того, чтобы быстро высохнуть при комнатной температуре. Пятна были посчитаны при помощи диссекционного микроскопа. Пятна были посчитаны, используя Elispot reader Bioreader 4000 Pro-X (BIOSYS-Gmbh; Serlabo Франция).
Листинг тестированных пептидов:
SCVYCKKEL (E6; Db): S9L пептид
RCIICQRPL (E6; Db): R9L пептид
SEYRHYQYS (E6; Kb): S9S пептид
ECVYCKQQL (E6; Db): E9L пептид
TDLHCYEQL (E7; Kb): T9L пептид
RAHYNIVTF (E7; Db): R9F пептид
Иррелеваптный пептид (MUC1 специфичный)
D 38L (E7; Db) является 38 удлиненный аминокислотой Е7 - специфичным пептидом.
Рекомбинантный очищенный Е7 белок был использован в сложном ELISPOT исследовании.
* Оценка частоты R9F тетрамера, специфичного к Т-клеткам CD8+
Свежие клетки селезенки были собраны и приготовлены для использования в BD фильтре с фитовидной трубкой. Спленоциты были стимулированы в течение 5 дней с пептидом R 9F (5 мкг/мл) в 24 ячеечных пластинах или были использованы непосредственно для специфичной маркировки. 1·106 клеток были покрыты 1 мкл АРС - мышиным CD8 специфичным антителом BD (Pharmingen 553035; клон 53-6.7; lot n° 32567) и 10 мкл специфичного тетрамера Н-2Db R9F (Beckman Coulter T20071; Н-2Db/РЕ; петид RAHYNIVTF; lot C507117; С602110) в течение 30 минут при 4°С. Клетки были промыты потом и растворены в PBS/0,5% PFA.
* Оценка Th 1/Th 2 связанного изотипа Is G против Е7 антигенов
* 96-ячеечные пластины были быстро покрыты при 4°С 3 мкг/мл очищенного белка Е7 (Р#2101 cahier PC00001; page 157; Oct.2002). Белок был растворен в покрывающем буфере (200 - мМ NaHCO3, 80 - мМ Na2CO3, pH фактор 9.5) и 100 мкл были добавлены в ячейку.
* Ячейки были промыты пять раз при помощи моечной машины для пластин (PBS, 0.1% Tween 20, 10 мМ ЭДТА) и сатурированы в течение 1 часа при комнатной температуре с 300 мкл PBS+3% BSA.
* Ячейки были промыты 5 раз и инкубированы с ½ последовательными разведениями сыворотки мыши (от 1/25 до 1/1600 в PBS+1% BSA) в течение 2 часов при комнатной температуре.
* Пластина была вымыта 5 раз. Конъюгированный пероксидазой антимышиный крысиный Ig G 2a (BD Pharmingen 553391) или антимышиный крысиный Ig G1 (BD Pharmingen 559626) были дилюированы в 1/1000 в % PBS+1 BSA и были добавлены (100 мкл/ячейку) и инкубированы в течение 1 часа при комнатной температуре.
* Ячейки были промыты пять раз и покрыты 100 мкл раствором субстрата (0.05 М лимонной кислоты, 0.05 М ацетат натрия, 1% тетраметил бензидина, H2O2 на 0.015%)/ячейку.
ТМВ раствор (10 мл)=140 мкл ТМВ+2 мкл H2O2+ацетат Na на 5 мл (0,1 М)+соль лимонной кислоты на 5 мл (0,1 М).
* Реакция была остановлена при помощи добавления 100 мкл 0.8 М H2SO4/ячейку. Спектральная поглотительная способность была измерена для 450 нм (система Genesys).
* Analysis MVA - нейтрализации антитела, которое является индуцированным вакцинацией
Клетки: ВНК-21 (фибробласт хомяка, Ref ATCC:CCL-10)
MVA-GFP (MVATG15938): Репортерный зеленый флуоресцентный белок был инсертирован в MVA делецию III под контролем р11 К7.5 промотора.
Этап 1: Нейтрализация сыворотки:
- Все сыворотки были декомплементированны при нагревании в течение 30 минут при 56°С перед использованием.
Позитивный контроль: сыворотка, полученная от кролика, иммунизированного с поксвирусом (штамм WR) (Ref. Ac WR IMVQC34).
Этап 2: анализ нейтрализации сыворотки (SOP измерение титра нейтрализации анти-MVA антител)
- Плазма была последовательно растворена в культуральной среде (диапазон растворения от 50× до 3200×) и инкубирована в 96-ячеечной микропластине с MVA-GFP (5×103 pfu/ячейку) в течение 1 часа при в 37°С (этап нейтрализации). Клетки ВНК-21 (105 клеток/ячейку) были далее селектированы и инкубированы в течение дополнительных 16-18 часов при 37°С, 5% СО2.
- На следующий день, 96-ячеечная микропластина была промыта с 250 мкл PBS, и 100 мкл РВ далее было добавлено в каждую ячейку для определения интенсивности флюоресценции микропластин (VICTOR™ PerkinElmer®). Титр нейтрализации антитела это такой титр, при котором происходит ингибирование 50%-ной вирусной активности. Титр нейтрализации антитела (NAT50) был определен при использовании способа Spearman - Kärber.
2 - Результаты
Три независимых терапевтических эксперимента были выполнены после модели, описанной в секции Материалы и Способы.
Во всех экспериментах последовательно заметили, что местное применение крема Aldara™ (5%) на участке вакцинации увеличивает значительно терапевтическую эффективность MVATG8042 (см. фиг.1а, b, с и d). В этом задании вакцинация с 5·106 pfu MVATG8042 давала в среднем 45% мышей, у которых не было опухоли к концу каждого эксперимента, в то время как 75% и 95% животных, у которых не было опухоли, были выявлены в том случае, когда MVATG 8042 использовался в комбинации с 0,8 мг или 1,6 мг имиквимода, соответственно.
В одной серии эксперимента (см. фиг.1с), также заметили, что дополнение Aldara™ позволяет достигать той же самой терапевтической эффективности при одной более низкой дозе вируса (5·105 pfu).
Статистические отличия в условиях in vivo в экспериментах выживания между различными группами были оценены, используя способ Log Rank (Statistica 5.1 software, Statsoft Inc.) по кривым выживания Kaplan - Meier. Те случаи, когда р≤0.05, являются статистически значимыми.
Параллельно были выполнены два независимых исследования для того, чтобы оценить индукцию и клеточных и гуморальных ответов против Е6 и Е7 HPV антигенов. Мыши были вакцинированы так, как описано в секции Протокол. В обоих экспериментах количество Е6 или Е7 - специфичных IFN гамма секретирующих клеток было вычислено при помощи анализа ELISPOT. Эти результаты показывают, что местное применение Aldara™ приводит к существенному усилению количеств рестрикций в классе I МНС СD8+Т клеток, относительно единицы, полученной с MVATG8042 (фиг.2а и b). Низкие ответы при более широком диапазоне антигенных детерминант присутствуют в Aldara™+группа MVATG8042 (пептид S9S и T9L). Параллельно, в отдельном эксперименте, количество Е7 - специфичных IL-4 секретирующих клеток было ниже в MVATG8042+Aldara™, чем в одной MVA группе (фиг.3). Взятые вместе, эти данные указывают на то, что комбинация MVATG8042+Aldara™ улучшает Th 1 - основанную клеточную имунную реакцию против Е6 и антигенов Е7.
Частота CD8+/R9F тетрамер+спленоциты была далее проанализирована при помощи проточной цитометрии, до того или после того, как в пробирке была стимулирована Е7 - специфичная иммуннодоминирующая антигенная детерминанта R9F (фиг.4а). Эти результаты указывают на то, что стумилирование R9F иммуннодоминирующей антигенной детерминанты ясно установлено для CD8+ специфичных Т-клеток. Частота R9F-Db-рестрикции в популяции CD8+ является низкой для селезенки, и эта популяция лучше обнаруживается после стимулирования с пептидом в пробирке. Предварительная обработка с Aldara™ улучшила значительно количество R9F-Db-специфичных CD8+Т-клеток в эксперименте, что показано в фиг.4b.
В конце концов, была также определена мера гуморального ответа против антигена Е7 при помощи ELISA. Для того чтобы лучше характеризовать тип ответа, вызванного комбинацией Aldara™+MVATG8042, был проанализирован пул изотипа Ig G. Были обнаружены Е7 - специфичные Ig G1 и Ig G2 а. Данные (фиг.5) показывают, что местное введение Aldara™ вызывает типичный профиль Th 1 (выше титр Ig G 2а, чем Ig G1, Фиг.5а), который мог иметь такие же значения эффективности, как для совместного применения. Эти результаты подтверждены во втором эксперименте (Фиг.5b).
В конце концов, был измерен уровень MVA - определенного нейтрализирующего антитела для того, чтобы проанализировать воздействие комбинации Aldara с MVATG8042 (фиг.6). Результаты указывают на то, что объединение MVATG8042 и Aldara™ уменьшает титр MVA - специфичного нейтрализирующего антитела, по сравнению с таким же отдельно введенным MVA. Это явление можно объяснить с учетом той среды, которую создает местное применение крема Aldara™, что может стать защитой против специфичных нейтрализирующих антител.
В - Рекомбинантный вирусный вектор, который экспрессирует опухолевый антиген MUC1.
2.1. Перечень тестов
Название и краткое описание каждой рекомбинантной векторной конструкции (основанной на MVA)
Наименование вируса | Номер партии | Концентрации партии (pfu/мл) | Кодирующий ген |
MVAN33 | Р925РВ | 2,4·109 pfu/мл | - |
MVATG9931 | P920W1 | 1,5·109 pfu/мл | MUC1; hIL-2 |
Условия хранения:
Вирусы были получены из Molecular Immunology Department и потом были поддержаны при - 80°С до дня инъекции. Вирусная суспензия быстро немедленно была поддана оттаиванию до растворения и введения.
Условия растворения перед использованием
Вирусы были растворены в буфере Tris/HCl 10 м М, сахароза 5% (в/в), 10 м М Na Glu, 50 - м М NaCl, pH 8,0 для того, чтобы получить необходимую дозу в 100 мкл объеме.
2.2. Животные модели
Разновидность / штамм/поставщик:
SPF здоровые мыши женского пола С57Bl/6 были получены от Charles River (Les Oncins, Франция). По прибытию животные находились в возрасте 6 недель. В начале эксперимента они находились в возрасте 7 недель. Животные были размещены в единственной, исключительной комнате, которая была поддана кондиционированию для того, чтобы обеспечить минимум 11 изменений объема воздуха в час. Диапазоны температурной и относительной влажности были в пределах 20°С и 24°С и 40-70% соответственно. Освещение управлялось автоматически для того, чтобы получить цикл 12 часов света и 12 часов темноты. В течение всего исследования у животных был свободный доступ к стерильному типу диеты RM1 (Dietex Франция, Saint Gratien). Стерильная вода была обеспечена свободным доступом через бутылки.
2.3. Описание клеток
Клетки опухоли Ren Са-MUC1: Ren Ca - экспериментальная крысиная почечная модель рака. Клетки Ren Са были трансфектированны с pH MG-ЕТА tm (MUC-1) и pY3 (стойкий к гидромоцину В) с использованием классического Са2+ способа фосфатной трансфекции. Клоны были отобраны после того, как было проведено клоновое растворение в DMEM (Dulbecco Modified), было добавлено 10% инактивированной фетальной сыворотки теленка, L-глутамина (2 мм), гентамицина (0,04 г/л) и гидромоцин (600 мкг/мл, Roche Diagnostic). Анализ экспрессии MUC-1 был осуществлен при помощи цитофлуориметрического анализа (при использовании FACScan, Becton Dickinson) с моноклональным антителом Н23. Прилипшие клетки были удалены обработкой PBS/EDTA и после того, как было проведено трехкратное промывание, необходимые жизнеспособные опухолевые клетки были введены под кожу 3·105 RenCa-MUC1 (клон 4).
2.4. Протокол
Протокол иммунизации
Для иммунотерапевтических экспериментов, 15 самкам мыши В6 D2 было введено под кожу с расположением внутрь 3·105 RenСа-MUC1 клеток в D1. Мышей обрабатывали три раза, под кожу на трех отдельных участках, 5·107 pfu поксвируса (MVA штамм) по D8, D15 и D22. Имиквимод (крем 5% Aldara; 3 М Pharmaceuticals), был применен как раз перед каждой иммунизацией на участках инъекции на побритой коже мышей (приблизительно 1 см2). Каждая мышь получила приблизительно 1 мг/мышь активного имиквимода на одну иммунизацию. Рост опухоли был проверен два раза в неделю в течение 80 дней, при помощи кронциркуля. Мыши были подвергнуты эвтаназии по этическим причинам, когда размер их опухоли превосходил 25 мм по диаметру или, когда они испытывали боль, даже если опухоль была не большой по своему размеру.
Для исследования иммуногенности 3 самкам мыши С57Вl6 без опухолей были привиты под кожу на отдельных участках 5·107 pfu поксвируса (MVA штамм) по D8, D15. Эта доза была использована для того, чтобы обнаружить клеточную иммунность против MUC1 специфичных антигенов, Имиквимод был применен местно как раз перед каждой иммунизацией на участках инъекции на побритой коже мышей (приблизительно 1 см2). Каждая мышь получила приблизительно 1 мг/мышь активного имиквимода на одну иммунизацию. Селезенка и сыворотка были удалены в D22 для иммунологического анализа.
Параметры контроля:
* Оценка числа/частоты IFN гамма секретирующих клеток при помощи Elispot
Свежие клетки селезенки были приготовлены, используя Lympholite очищающий буфер. Все пептиды были синтезированы при помощи Neosystem на иммунном уровне (10 мг). Каждый из пептидов был растворен в диметилсульфоксиде в 10 мг/мл и был сохранен при 4°С. Анализ Elispot был выполнен при использовании мыши Mabtech АВ и комплекта IFN гамма ELISPOTPLUS или мыши и комплекта IL-4 ELISPOTPLUS (Mabtech, Франция) согласно инструкциям изготовителя. 96-ячеечная нитроцеллюлозная пластина была покрыта количеством в 3 мкг/мл моноклонального антимышиного крысиного антитела IFN гамма (Clone R4-6А2; Pharmingen, cat. Nr 551216, Lot M072862; 100 мкл/ячейку) в карбонатно натриевом буфере. Клетки были быстро инкубированы при 4°С или в течение 1 часа при 37°С. Пластины были вымыты три раза с 10%-ным FCS DMEM и насыщены в течение 2 часов при 37°С с 100 мкл DMEM 10%-ный FCS/ячейку. Спленоциты были платированы при концентрации 106 клеток/100 мкл. Интерлейкин 2 был добавлен во все ячейки при концентрации 6 ЕД/50 мкл/ячейку (Системы R&D) 10 нг/мл). Конкавалин А был использован в качестве позитивного контроля (5 мкг/мл). MUC1 специфичные пептиды были использованы при концентрации 5 мкг/мл. Пластины были инкубированы в течение 48 часов при 37°С, в 5%-ном CO2. Пластины была далее промыты один раз с PBS 1X и 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Антимышиный биотинилированный IFN гамма (клон XMG1.2, Pharmingen) был введен при концентрации 0.3 мкг/100 мкл/ячейку и был проинкубирован в течение 2 часов при комнатной температуре при медленной выдержке. Пластины были далее промыты один раз с PBS 1X и 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Экстравидин АКР (Sigma, St. Louis, МО) был дилюированным в 1/5000 PBS-Tween 0.05%-FCS 1% и был далее добавлен в ячейки (100 мкл/ячейку). Пластина была инкубирована в течение 45 минут при комнатной температуре и затем промыта 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Секреция IFN гамма была продемонстрирована при помощи использования комплекта Biorad. 100 мкл субстрата (NBT+BCIP) было добавлено в ячейки, и далее пластину оставляли при комнатной температуре в течение ½ часов. Пластина была далее промыта с водой и размещена для того, чтобы быстро высохнуть при комнатной температуре. Пятна были посчитаны при помощи диссекционного микроскопа.
* Оценка числа/частоты IL-4 секретирующих клеток при помощи Elispot
Свежие клетки селезенки были приготовлены, используя Lympholite очищающий буфер. Все пептиды были синтезированы при помощи Neosystem на иммунном уровне (10 мг). Каждый из пептидов был растворен в диметилсульфоксиде в 10 мг/мл и был созранен при 4°С. Анализ Elispot был выполнен при использовании мыши Mabtech AB и комплекта IFN гамма ELISPOTPLUS или мыши и комплекта IL-4 ELISPOTPLUS (Mabtech, Франция) согласно инструкциям изготовителя. 96-ячеечная нитроцеллюлозная пластина была покрыта количеством в 3 мкг/мл моноклональным антимышиным IL-4 антителом (Pharmingen, cat. nr551878, Lot 27401; 100µl/well) 100 мкл/ячейку) в карбонатно натриевом буфере. Ячейки были быстро инкубированы при 4°С или в течение 1 часа при 37°С. Пластины были вымыты три раза с 10%-ным FCS DMEM и насыщены в течение 2 часов при 37°C с 100 мкл DMEM 10%-ный FCS/ячейку. Спленоциты были платированы при концентрации 106 клеток/100 мкл. Интерлейкин 2 был добавлен во все ячейки при концентрации 6 ЕД/50 мкл/ячейку (Системы R&D) 10 нг/мл). Конкавалин А был использован в качестве позитивного контроля (5 мкг/мл). MUC1 специфичные пептиды были использованы при концентрации 5 мкг/мл. Пластины были инкубированы в течение 48 часов при 37°С, в 5%-ном CO2. Пластины были далее промыты однин раз с PBS 1X и 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Антимышиный биотинилированный IL-4 (Pharmingen) был введен при концентрации 0.3 мкг/100 мкл/ячейку и был проинкубирован в течение 2 часов при комнатной температуре при медленной выдержке. Пластины была далее промыты один раз с PBS 1X и 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Экстравидин АКР (Sigma, St. Louis, МО) был дилюированным в 1/5000 PBS-Tween 0.05%-FCS 1% и был далее добавлен к ячейкам (100 мкл/ячейку). Пластина была инкубирована в течение 45 минут при комнатной температуре и затем промыта 5 раз с PBS-Tween 0.05%. Секреция IFN гамма была продемонстрирована при помощи использования комплекта Biorad. 100 мкл субстрата (NBT+BCIP) было добавлено в ячейки, и далее пластину оставляли при комнатной температуре в течение ½ часов. Пластина была далее промыта с водой и размещена для того, чтобы быстро высохнуть при комнатной температуре. Пятна были посчитаны при помощи диссекционного микроскопа.
Листинг тестированных пептидов:
F9L FLSFHISNL (Н-2Kb; Heukamp, 2001)
А9А APGSTAPPA (Н-2Db)
Т24Р TAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPP
G23D GQDVTLAPATEPASGSAATWGQD
V23S VTGSGHASSTPGGEKETSATQRS
Инрелевантный пептид/R9F RAHYNIVTF (E7; Db)
* Оценка Th 1/Th 2 связанного изотипа Ig G против MUC1 антигена
* 96-ячеечные пластины были покрыты быстро при 4°С 3 мкг/мл Т24Р MUC1 специфичного пептида. Пептид был растворен в покрывающем буфере (200-мМ NaHCO3, 80 - мМ Na2CO3, pH фактор 9.5) и 100 мкл были добавлены в ячейку.
* Ячейки были промыты пять раз при помощи моечной машины для пластин (PBS, 0.1% Tween 20, 10 мМ ЭДТА) и сатурированы в течение 1 часа при комнатной температуре с 300 мкл PBS+3% BSA.
* Ячейки были промыты 5 раз и инкубированы с ½ последовательными разведениями сыворотки мыши (от 1/25 до 1/1600 в PBS+1% BSA) в течение 2 часов при комнатной температуре.
* Пластина была вымыта 5 раз. Конъюгированный пероксидазой антимышиный крысиный Ig G 2a (BD Pharmingen 553391) или антимышиный крысиный Ig Gl (BD Pharmingen 559626) были дилюированы в 1/1000 в % PBS+1 BSA и были добавлены (100 мкл/ячейку) и инкубированы в течение 1 часа при комнатной температуре.
* Ячейки были промыты пять раз и покрыты 100 мкл раствором субстрата (0.05 М лимонной кислоты, 0.05 М ацетат натрия, 1% тетраметил бензидина, H2O2 на 0.015%)/ячейку.
ТМВ раствор (10 мл)=140 мкл ТМВ+2 мкл H2O2+ацетат Na на 5 мл (0,1 М)+соль лимонной кислоты на 5 мл (0,1 М).
* Реакция была остановлена при помощи добавления 100 мкл 0.8 М H2SO4/ячейку. Спектральная поглотительная способность была измерена в 450 нм (система Genesys).
3 - Результаты
Терапевтический эксперимент был выполнен на подкожной модели RenCa-MUC1, описанной в секции Протокол. Мы заметили, что предварительное лечение местным применением крема Aldara™ в 5% увеличивает значительно терапевтическую эффективность MVATG 9931 от 5% до 35% свободных от опухоли мышей в конце эксперимента. В этом эксперименте, никаких мышей не лечили только местным применением Aldara™. Однако, согласно опубликованной информации относительно сложных моделей рака (OVA экспрессирующие опухоли) описано, что местное применение Aldara™ на участке, который отличается от опухолевого, не имеет никакого терапевтического эффекта (Craft и др., 2005). Статистические отличия в условиях in vivo в экспериментах выживания между различными группами были оценены, используя Log Rank способ (Statistica 5.1 software, Statsoft Inc.) кривых выживания Kaplan-Meier. Случаи, когда р≤0.05 являются статистически значимыми.
Фиг.7 иллюстрирует терапевтический эффект комбинации Aldara+MVATG 9931 на модели опухоли renCa - MUC1.
Исследование иммуногенности было также выполнено параллельно для того, чтобы отыскать индукцию как клеточных, так и гуморальных ответов против антигена MUC1. Мыши были вакцинированы так, как было описано в секции Протокол.
В первой секции эксперимента было определено количество секретирующих MUC1 - специфичных IFN гамма клеток, при использовании анализа ELISPOT, MUC1 Н-2Db, Н-2Kb и длительно рестрикционные пептиды были использованы для мониторинга ответа обеих Т-клеток, и CD4 и CD8, после иммунизации. Заметили, что предварительное лечение местным применением Aldara не улучшает значительно количество класса I MHC и класса II и уменьшает количество Т-клеток CD4 и CD8, которые получены с MVATG 9931 (фиг.8).
Во второй секции эксперимента было определено количество MUC1 - специфичных секретирующих IL-4 клеток, при использовании анализа ELISPOT. MUC1 рестрикционные пептиды были использованы для мониторинга ответа обеих Т-клеток, и CD4 и CD8, после иммунизации. Заметили, что предварительное лечение местным применением Aldara сокращает значительно количество реагирующих Т-клеток, которые получены с MVATG 9931 (фиг.9).
В конце концов, степень гуморального ответа против антигена MUC1 также была определена при помощи ELISA. Для того чтобы лучше охарактеризовать тип ответа, который был индуцирован комбинацией Aldara™+MVATG 9931, был проанализирован пул изотипа Ig G. Были обнаружены MUC1 - специфичный Ig G1 и Ig G2a (фиг.10). Заметили, предварительное лечение местным применением Aldara™ вызывает типичный ответ по типу Th 1 (титр выше Ig G2a, чем Ig G1), что может быть использовано для эффективного лечения.
С - Заключения и Обсуждения
Представленные эксперименты впервые продемонстрировали, что лечение местным применением Aldara™ может усилить терапевтическую эффективность (усилить имунную реакцию) вакцины, которая основана на MVA антигенах.
Claims (18)
1. Рекомбинантная вирусная вакцина, которая содержит (i) по крайней мере один рекомбинантный поксвирусный вектор, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную последовательность нуклеотида, особенно гетерологичную нуклеотидную последовательность, которая кодирует антиген, и (ii) по крайней мере одно производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, где указанный поксвирусный вектор является MVA, а указанное производное
1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
2. Рекомбинантная вирусная вакцина по п.1, где указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует один или большее количество или часть антигенов HPV - Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, L1, L2.
3. Рекомбинантная вирусная вакцина по п.1 или 2, где указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует все или часть антигенов MUC1 или их производные.
4. Набор для вакцинации, который включает контейнер, который содержит (i) по крайней мере один рекомбинантный поксвирусный вектор, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность, особенно гетерологичную последовательность нуклеотида, которая кодирует антиген, и (ii) по крайней мере одно производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, где указанный поксвирусный вектор является MVA, а указанное производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
5. Набор по п.4, где указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует один или большее количество или часть антигенов HPV - Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, L1, L2.
6. Набор по п.4 или 5, где указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует все или часть антигенов MUC1 или их производные.
7. Способ применения по крайней мере одного производного 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, который включает приготовление рекомбинантной вирусной вакцины, которая включает (i) по крайней мере один рекомбинантный MVA, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность, которая кодирует антиген, и (ii) по меньшей мере одно производное 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина для усиления иммунного ответа к указанному антигену у пациента, которому вводят указанное производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, которое вводится независимо от другого введения, которое включает введение указанного рекомбинантного MVA, и которое выполняют до указанного второго введения, где указанный поксвирусный вектор является MVA, а указанное производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
8. Способ по п.7, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует один или несколько или часть антигенов HPV - Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, L1, L2.
9. Способ по п.8, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует все или часть антигенов MUC1 или их производные.
10. Способ по п.7, в котором производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина вводится местно.
11. Способ применения по крайней мере одного производного 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, который включает приготовление рекомбинантной вирусной вакцины, которая включает (i) по крайней мере один рекомбинантный MVA, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность, которая кодирует антиген, и (ii) по меньшей мере одного производного 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина для усиления иммунного ответа к указанному антигену у пациента, которому вводят указанное производное 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин, которое вводится в одно и то же время с другим введением, которое включает введение указанного рекомбинантного MVA, где указанный поксвирусный вектор является MVA, а указанное производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
12. Способ по п.11, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует один или несколько или часть антигенов HPV - Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, L1, L2.
13. Способ по п.12, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует все или часть антигенов MUC1 или их производные.
14. Способ по п.11, в котором производное 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина вводится местно.
15. Способ применения по крайней мере одного производного 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, который включает приготовление рекомбинантной вирусной вакцины, которая включает (i) контейнер, который содержит по крайней мере один рекомбинантный MVA, который экспрессирует в условиях in vivo по крайней мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность, которая кодирует антиген, и (ii) контейнер, который содержит по меньшей мере одно производное 1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина для усиления иммунного ответа к указанному антигену у пациента, которому вводят указанное производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина, которое вводят в одно и то же время с другим введением, которое включает введение указанного рекомбинантного MVA, а указанное производное 1H-имидазо[4,5-c]хинолин-4-амина выбрано из группы, включающей:
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин;
1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин,
или их сольваты, или соли.
16. Способ по п.15, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует один или несколько или часть антигенов HPV - Е1, Е2, Е3, Е4, Е5, Е6, Е7, Е8, L1, L2.
17. Способ по п.16, в котором указанная гетерологичная нуклеотидная последовательность (i) кодирует все или часть антигенов MUC1 или их производные.
18. Способ по п.15, в котором производное 1H-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амина вводится местно.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP06360028.2 | 2006-06-20 | ||
EP06360028 | 2006-06-20 | ||
US85296406P | 2006-10-20 | 2006-10-20 | |
US60/852,964 | 2006-10-20 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009101387A RU2009101387A (ru) | 2010-07-27 |
RU2453335C2 true RU2453335C2 (ru) | 2012-06-20 |
Family
ID=38657260
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009101387/15A RU2453335C2 (ru) | 2006-06-20 | 2007-06-15 | Рекомбинантная вирусная вакцина |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20100129403A1 (ru) |
EP (1) | EP2029169A2 (ru) |
JP (1) | JP2009541236A (ru) |
KR (1) | KR101141333B1 (ru) |
CN (1) | CN101472610A (ru) |
AU (1) | AU2007263281B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0713711A2 (ru) |
CA (1) | CA2656266C (ru) |
CR (1) | CR10571A (ru) |
IL (1) | IL195683A0 (ru) |
MA (1) | MA30581B1 (ru) |
MX (1) | MX2008016036A (ru) |
NO (1) | NO20090194L (ru) |
RU (1) | RU2453335C2 (ru) |
WO (1) | WO2007147529A2 (ru) |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SG178254A1 (en) | 2009-08-07 | 2012-03-29 | Transgene Sa | Composition for treating hbv infection |
WO2012145577A1 (en) * | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Merial Limited | Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile |
TWI575070B (zh) | 2011-07-12 | 2017-03-21 | 傳斯堅公司 | Hbv聚合酶突變體 |
TW201318637A (zh) | 2011-09-29 | 2013-05-16 | Transgene Sa | 免疫療法組成物及用於治療c型肝炎病毒感染之療程(一) |
WO2013045668A2 (en) | 2011-09-29 | 2013-04-04 | Transgene Sa | Immunotherapy composition and regimen for treating hepatitis c virus infection |
JP6333814B2 (ja) | 2012-07-10 | 2018-05-30 | トランジェーヌ、ソシエテ、アノニムTransgene S.A. | マイコバクテリア抗原ワクチン |
CN103409451A (zh) * | 2013-06-28 | 2013-11-27 | 扬州维克斯生物科技有限公司 | 一种向树突状细胞dc靶向加载肿瘤抗原肽的方法 |
JP6605480B2 (ja) | 2014-01-09 | 2019-11-13 | トランスジェン・ソシエテ・アノニム | ヘテロオリゴマーマイコバクテリア抗原の融合物 |
US10555981B2 (en) | 2014-07-16 | 2020-02-11 | Transgene S.A. | Oncolytic virus for expression of immune checkpoint modulators |
US20190134190A1 (en) | 2016-05-04 | 2019-05-09 | Transgene Sa | Combination therapy with cpg tlr9 ligand |
EP3522920A2 (en) | 2016-10-10 | 2019-08-14 | Transgene SA | Immunotherapeutic product and mdsc modulator combination therapy |
WO2018091680A1 (en) | 2016-11-18 | 2018-05-24 | Transgene Sa | Cowpox-based oncolytic vectors |
CN110168092A (zh) | 2016-12-28 | 2019-08-23 | 特朗斯吉有限公司 | 溶瘤病毒和治疗分子 |
WO2019020543A1 (en) | 2017-07-28 | 2019-01-31 | Transgene Sa | ONCOLYTIC VIRUSES EXPRESSING AGENTS TARGETING METABOLIC IMMUNE MODULATORS |
WO2020011754A1 (en) | 2018-07-09 | 2020-01-16 | Transgene | Chimeric vaccinia viruses |
US20220290179A1 (en) | 2019-08-29 | 2022-09-15 | Astellas Pharma Inc. | Genetically engineered oncolytic vaccinia viruses and methods of uses thereof |
EP4178605A1 (en) | 2020-07-13 | 2023-05-17 | Transgene | Treatment of immune depression |
WO2023213763A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Poxvirus encoding a binding agent comprising an anti- pd-l1 sdab |
WO2023213764A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Fusion polypeptide comprising an anti-pd-l1 sdab and a member of the tnfsf |
WO2024003353A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-01-04 | Transgene | Fusion protein comprising a surfactant-protein-d and a member of the tnfsf |
WO2024038175A1 (en) | 2022-08-18 | 2024-02-22 | Transgene | Chimeric poxviruses |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6331539B1 (en) * | 1999-06-10 | 2001-12-18 | 3M Innovative Properties Company | Sulfonamide and sulfamide substituted imidazoquinolines |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3854480A (en) | 1969-04-01 | 1974-12-17 | Alza Corp | Drug-delivery system |
US4675189A (en) | 1980-11-18 | 1987-06-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Microencapsulation of water soluble active polypeptides |
US4452775A (en) | 1982-12-03 | 1984-06-05 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules |
IL73534A (en) | 1983-11-18 | 1990-12-23 | Riker Laboratories Inc | 1h-imidazo(4,5-c)quinoline-4-amines,their preparation and pharmaceutical compositions containing certain such compounds |
US5075109A (en) | 1986-10-24 | 1991-12-24 | Southern Research Institute | Method of potentiating an immune response |
DK0385630T3 (da) | 1989-02-27 | 1997-05-12 | Riker Laboratories Inc | 1H-imidazo(4,5-c)quinolin-4-aminer som antivirale midler |
US4929624A (en) | 1989-03-23 | 1990-05-29 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Olefinic 1H-imidazo(4,5-c)quinolin-4-amines |
US5133974A (en) | 1989-05-05 | 1992-07-28 | Kv Pharmaceutical Company | Extended release pharmaceutical formulations |
US5756102A (en) | 1990-11-20 | 1998-05-26 | Virogenetics Corporation | Poxvirus-canine distemper virus (CDV) recombinants and compositions and methods employing the recombinants |
KR100242671B1 (ko) | 1991-03-07 | 2000-03-02 | 고돈 에릭 | 유전학적으로 처리한 백신 균주 |
GB9105383D0 (en) * | 1991-03-14 | 1991-05-01 | Immunology Ltd | An immunotherapeutic for cervical cancer |
US5407686A (en) | 1991-11-27 | 1995-04-18 | Sidmak Laboratories, Inc. | Sustained release composition for oral administration of active ingredient |
US5395937A (en) | 1993-01-29 | 1995-03-07 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Process for preparing quinoline amines |
US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
US5736152A (en) | 1995-10-27 | 1998-04-07 | Atrix Laboratories, Inc. | Non-polymeric sustained release delivery system |
DE60022665T2 (de) | 1999-09-25 | 2006-06-22 | Coley Pharmaceutical Gmbh | Immunstimulierende nukeinsäuren |
GB0023008D0 (en) * | 2000-09-20 | 2000-11-01 | Glaxo Group Ltd | Improvements in vaccination |
EE05680B1 (et) | 2000-11-23 | 2013-10-15 | Bavarian Nordic A/S | Muundatud vaktsiiniaviirus, selle valmistamine ja kasutamine, seda sisaldav farmatseutiline kompositsioon ning vaktsiin |
WO2003094836A2 (en) | 2001-10-12 | 2003-11-20 | University Of Iowa Research Foundation | Methods and products for enhancing immune responses using imidazoquinoline compounds |
ATE491471T1 (de) * | 2002-03-19 | 2011-01-15 | Powderject Res Ltd | Adjuvantien für dns impstoffe basierend auf imidazochinoline |
WO2005018574A2 (en) * | 2003-08-25 | 2005-03-03 | 3M Innovative Properties Company | Immunostimulatory combinations and treatments |
EP1804583A4 (en) * | 2004-10-08 | 2009-05-20 | 3M Innovative Properties Co | ADJUVANT FOR DNA VACCINE |
-
2007
- 2007-06-15 AU AU2007263281A patent/AU2007263281B2/en not_active Ceased
- 2007-06-15 WO PCT/EP2007/005303 patent/WO2007147529A2/en active Application Filing
- 2007-06-15 KR KR1020087030973A patent/KR101141333B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2007-06-15 JP JP2009515748A patent/JP2009541236A/ja not_active Ceased
- 2007-06-15 EP EP07764675A patent/EP2029169A2/en not_active Withdrawn
- 2007-06-15 RU RU2009101387/15A patent/RU2453335C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-06-15 MX MX2008016036A patent/MX2008016036A/es active IP Right Grant
- 2007-06-15 US US12/306,227 patent/US20100129403A1/en not_active Abandoned
- 2007-06-15 CN CNA2007800232312A patent/CN101472610A/zh active Pending
- 2007-06-15 BR BRPI0713711-7A patent/BRPI0713711A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-06-15 CA CA2656266A patent/CA2656266C/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-12-03 IL IL195683A patent/IL195683A0/en unknown
-
2009
- 2009-01-09 MA MA31557A patent/MA30581B1/fr unknown
- 2009-01-13 NO NO20090194A patent/NO20090194L/no not_active Application Discontinuation
- 2009-01-16 CR CR10571A patent/CR10571A/es not_active Application Discontinuation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6331539B1 (en) * | 1999-06-10 | 2001-12-18 | 3M Innovative Properties Company | Sulfonamide and sulfamide substituted imidazoquinolines |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Faynsod M. et al. CpG oligonucleotides enhance the effect of a poxvirus vaccine targeting p53 in murine tumor models, Abstracts: Annals of Surgical Oncology, 2004, v. 11, S 70. ALCAMF A. et al. Vaccinia virus strains Lister, USSR and Evans express soluble and cell-surface tumour necrosis factor receptors, J. of General Virology, 1999, v. 80, pp.949-959. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO20090194L (no) | 2009-03-10 |
MX2008016036A (es) | 2009-04-07 |
KR101141333B1 (ko) | 2012-05-23 |
CA2656266A1 (en) | 2007-12-27 |
KR20090016719A (ko) | 2009-02-17 |
JP2009541236A (ja) | 2009-11-26 |
WO2007147529A3 (en) | 2008-02-28 |
CA2656266C (en) | 2012-07-31 |
AU2007263281B2 (en) | 2012-12-06 |
CR10571A (es) | 2009-05-14 |
AU2007263281A1 (en) | 2007-12-27 |
EP2029169A2 (en) | 2009-03-04 |
IL195683A0 (en) | 2011-08-01 |
MA30581B1 (fr) | 2009-07-01 |
BRPI0713711A2 (pt) | 2012-10-30 |
CN101472610A (zh) | 2009-07-01 |
RU2009101387A (ru) | 2010-07-27 |
US20100129403A1 (en) | 2010-05-27 |
WO2007147529A2 (en) | 2007-12-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2453335C2 (ru) | Рекомбинантная вирусная вакцина | |
CN102483405B (zh) | 用于选择患者的生物标志物及相关方法 | |
JP2024050588A (ja) | パラポックスウイルスベクター | |
Otterhaug et al. | Photochemical internalization enhanced vaccination is safe, and gives promising cellular immune responses to an HPV peptide-based vaccine in a phase I clinical study in healthy volunteers | |
US20140141039A1 (en) | Biomarker for Monitoring Patients | |
US20200024316A1 (en) | Cacna1h-derived tumor antigen polypeptide and use thereof | |
TWI470225B (zh) | 用以評估muc1及il-2於癌症患者之治療效力的活體外方法 | |
JP5642666B2 (ja) | 患者選択のためのバイオマーカーおよび関連方法 | |
Loof | Results: 96 healthy volunteers were vaccinated with fimaporfin doses of 0.75–50 µg. Doses below 17.5 µg were safe and tolerable, higher doses exhibited local tolerability issues in some study subjects, mainly erythema, and pain during illumination. There were few, and only mild and expected systemic adverse events. The employment of PCI increased the number of subjects exhibiting a T-cell response to the HPV peptide vaccine | |
JP2010511647A (ja) | 改良された免疫応答を向上させる手段および方法 | |
WO2008046576A1 (en) | Use of glucocorticoid antagonists in vaccination | |
del Carmen Torréns et al. | A vaccine candidate against the human papillomavirus: an alternative to treat cervico-uterine tumors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140616 |