RU2348689C1 - Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri - Google Patents
Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri Download PDFInfo
- Publication number
- RU2348689C1 RU2348689C1 RU2007132283/13A RU2007132283A RU2348689C1 RU 2348689 C1 RU2348689 C1 RU 2348689C1 RU 2007132283/13 A RU2007132283/13 A RU 2007132283/13A RU 2007132283 A RU2007132283 A RU 2007132283A RU 2348689 C1 RU2348689 C1 RU 2348689C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- rhabdovirus
- sso
- cell line
- fish
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению перевиваемых линий клеток рыб, пригодных для выделения и изучения вирусов рыб разных таксономических групп. Постоянная клеточная линия SSO-2 пула паренхиматозных органов сеголетков сибирского осетра, Acipenser baeri, депонирована в Специализированной коллекции перевиваемых соматических культур клеток сельскохозяйственных и промысловых животных Российской коллекции культур клеток при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии (СХЖ РАСХН) под №67. Линия может быть использована как тест-культура для выделения, накопления, титрования и изучения герпесвируса сибирского осетра (SSHV), вирусов весенней виремии карпа (SVCV), вирусной геморрагической септицемии (VHSV), инфекционного некроза гемопоэтической ткани (IHNV), рабдовируса европейского угря (Rhabdovirus anguilla), рабдовируса мальков щуки (PFRV) и рабдовируса европейской озерной кумжи (ELTV).
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению перевиваемых линий клеток рыб, пригодных для выделения и изучения вирусов рыб разных таксономических групп, разводимых в условиях аквакультуры.
Вирусные болезни - один из главных факторов, тормозящих развитие мировой аквакультуры. На сегодня известны около 400 вирусов рыб, и число их продолжает расти. Десять вирусов выявлено у осетровых рыб за рубежом. Поэтому в настоящее время весьма актуальна задача получения постоянных (перевиваемых) линий клеток, чувствительных к широкому кругу вирусов культивируемых рыб. Сибирский осетр (Acipenser baeri) является одним из наиболее популярных объектов разведения в аквакультуре, однако проведение вирусологических исследований при его заболевании затрудняется острым недостатком клеточных линий, полученных от осетров этого вида.
Известна только одна клеточная линия сибирского осетра, полученная из клеток спинного плавника [1]. Однако чувствительность ее к вирусам рыб не была определена, что не позволяет использовать ее в работах по выделению и изучению вирусов, вызывающих опасные заболевания рыб.
Целью изобретения является получение постоянной линии клеток сибирского осетра, пригодной для проведения вирусологических исследований осетра данного вида и чувствительной к вирусам других видов рыб.
Поставленная цель достигается получением постоянной клеточной линии SSO-2 пула паренхиматозных органов сеголетков сибирского осетра, Acipenser baeri, используемая в вирусологических исследованиях и чувствительная к 7 вирусам разных видов рыб.
Постоянная клеточная линия SSO-2 получена путем многократного пассирования первично-трипсинизированной культуры клеток из пула паренхиматозных органов (почка, печень, селезенка) двух сеголетков сибирского осетра Acipenser baeri.
Постоянная клеточная линия SSO-2 характеризуется следующими признаками.
Культуральные свойства. Жизненный цикл клеточной линии SSO-2, при котором сохраняются ее основные биологические показатели составляет 197 пассажей. При посевной концентрации 35-60×103 клеток/см2 монослой формируется через сутки культивирования при 19-21°С и сохраняется без смены среды в течение 14-20 дней, если через 2-3 суток после его образования инкубацию продолжить при 15°С. Коэффициент пересева 1:4.
Клеточную линию SSO-2 культивируют в монослойных культурах в среде 199 с 10% сыворотки эмбрионов коров. Для диспергирования клеточного монослоя при пересевах используют смесь 0,25% раствора трипсина и 0,02% раствора версена в соотношении 1:1,5 при комнатной температуре. Урожай клеток с флакона площадью 20 см2 составляет около 1 млн клеток.
Для криоконсервирования при температуре -196°С применяют смесь, состоящую из 70% питательной среды 199, 20% сыворотки эмбрионов коров и 10% диметилсульфоксида, при концентрации клеток 1-2×106 в мл. Жизнеспособность клеток по тесту витального окрашивания трипановым синим после хранения в жидком азоте составляет 75-80%. Клетки восстанавливают исходные ростовые и морфологические свойства в течение 2-х пассажей.
Морфологические признаки. Культура SSO-2 растет в виде пучков крупных фибробластоподобных клеток типичной веретенообразной формы. Ядра крупные, овальные, число ядрышек 2-6, чаще 3-4.
Кариологическая характеристика (2n=248±5). Интервал варьирования хромосом от 190 до 371. Модальное число 363 хромосомы. Величина модального класса 38%.
Видовая идентичность подтверждена кариологическими методами.
Контроль клеточной линии SSO-2 на посторонние контаминанты. При исследовании клеточной линии SSO-2 на стерильность (наличие бактерий, грибов, микоплазм) получены отрицательные результаты.
Клеточная линия SSO-2 может быть использована для выделения, накопления, титрования и изучения следующих вирусов рыб: герпесвируса сибирского осетра (SSHV), вирусов весенней виремии карпа (SVCV), вирусной геморрагической септицемии (VHSV), инфекционного некроза гемопоэтической ткани (IHNV), рабдовируса европейского угря (Rhabdovirus anguilla), рабдовируса мальков щуки (PFRV) и рабдовируса европейской озерной кумжи (ELTV).
Постоянная клеточная линия SSO-2 депонирована в Специализированной коллекции перевиваемых соматических культур клеток сельскохозяйственных и промысловых животных Российской коллекции культур клеток при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии (СХЖ РАСХН) под №67.
Литература
1. Fontana F., Rossi R., Lanfredi M., Arlati G., Bronzi P. Cytogenetic characterization of cell lines from three sturgeon species. // Caryologia. - 1997. - V. 50. - N 1. - P. 91-95.
Claims (1)
- Постоянная клеточная линия SSO-2 пула паренхиматозных органов сеголетков сибирского осетра, Acipenser baeri, используемая в вирусологических исследованиях и чувствительная к 7 вирусам разных видов рыб, депонирована в Специализированной коллекции перевиваемых соматических культур клеток сельскохозяйственных и промысловых животных Российской коллекции культур клеток при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии (СХЖ РАСХН) под № 67.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007132283/13A RU2348689C1 (ru) | 2007-08-28 | 2007-08-28 | Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007132283/13A RU2348689C1 (ru) | 2007-08-28 | 2007-08-28 | Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2348689C1 true RU2348689C1 (ru) | 2009-03-10 |
Family
ID=40528638
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007132283/13A RU2348689C1 (ru) | 2007-08-28 | 2007-08-28 | Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2348689C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2488632C1 (ru) * | 2012-04-13 | 2013-07-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) | ПОСТОЯННАЯ ЛИНИЯ КЛЕТОК ИЗ ПЛАВНИКОВ СИБИРСКОГО ОСЕТРА (Acipenser baeri), ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ РЫБ |
RU2495120C1 (ru) * | 2012-03-05 | 2013-10-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Постоянная линия клеток omg из гонад радужной форели (oncorhynchus mykiss) |
CN112126619A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-12-25 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 弹状病毒敏感的黄鳝肾组织细胞系及应用 |
-
2007
- 2007-08-28 RU RU2007132283/13A patent/RU2348689C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
FONTANA F. et al., "Cytogenetic characterization of cell lines from three sturgeon species", Caryologia. - 1997 - V.50 - N1 - p.91-95. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2495120C1 (ru) * | 2012-03-05 | 2013-10-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Российской академии сельскохозяйственных наук | Постоянная линия клеток omg из гонад радужной форели (oncorhynchus mykiss) |
RU2488632C1 (ru) * | 2012-04-13 | 2013-07-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) | ПОСТОЯННАЯ ЛИНИЯ КЛЕТОК ИЗ ПЛАВНИКОВ СИБИРСКОГО ОСЕТРА (Acipenser baeri), ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ РЫБ |
CN112126619A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-12-25 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 弹状病毒敏感的黄鳝肾组织细胞系及应用 |
CN112126619B (zh) * | 2020-01-16 | 2021-09-07 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 弹状病毒敏感的黄鳝肾组织细胞系及应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Gwo et al. | Cryopreservation of a marine microalga, Nannochloropsis oculata (Eustigmatophyceae) | |
CN103667176A (zh) | 鲤疱疹病毒ⅱ型敏感的异育银鲫脑组织细胞系及其建立方法和应用 | |
CN105961251B (zh) | 一种耐低氧团头鲂的构建方法 | |
CA2789454A1 (en) | Method for acquiring genetically identical gamete from lethal fish haploid-derived germ cell via germ line chimera | |
CN101133725A (zh) | 白色虾夷扇贝新品系的培育方法 | |
Komura et al. | Fish cell culture: Establishment of two fibroblast-like cell lines (OL-17 and OL-32) from fins of the medaka, Oryzias latipes | |
CN104585091A (zh) | 日本白鲫与团头鲂亚科间远缘杂交的方法和四倍体杂交鱼的应用 | |
Liu et al. | Establishment and characterization of a cell line derived from fin of the endangered Yangtze sturgeon (Acipenser dabryanus) | |
Kumar et al. | Establishment and characterization of a caudal fin-derived cell line, AOF, from the Oscar, Astronotus ocellatus | |
RU2348689C1 (ru) | Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri | |
CN106434537A (zh) | 一种培养、诱导罗非鱼腹腔前脂肪细胞的方法及培养基 | |
CN110463626B (zh) | 一种轮状病毒感染斑马鱼模型建立的方法 | |
CN104152403B (zh) | 一种建立鹅胚上皮细胞系的方法及建立的鹅胚上皮细胞系 | |
CN104818241B (zh) | 鞍带石斑鱼皮肤组织细胞系及其构建方法 | |
Zenkteler et al. | Induction of androgenetic embryoids in the in vitro cultured anthers of several species | |
CN109207422B (zh) | 一种欧洲鳗鲡肾脏细胞系ek及其应用 | |
CN105483075A (zh) | 一种培养单环刺螠担轮幼虫细胞系的培养基及方法 | |
RU2353650C1 (ru) | Линия клеток ico яичников неполовозрелого карпа (cyprinus carpio) для вирусологических исследований | |
RU2348688C1 (ru) | Постоянная линия клеток sso-3 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri | |
CN106376501A (zh) | 一种生产泥鳅四倍体的方法 | |
CN102409021A (zh) | 金华猪成纤维细胞系的建立及其培养方法 | |
CN104805053B (zh) | 珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系及其构建方法、应用 | |
Li et al. | Establishment and characterization of a fibroblast cell line derived from Jining Black Grey goat for genetic conservation | |
CN103725644B (zh) | 樱桃谷鸭胚上皮细胞系及其建立方法 | |
CN115044532A (zh) | 一种脉红螺胚胎细胞系的构建与鉴定方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140829 |