RU2298791C2 - Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок - Google Patents
Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок Download PDFInfo
- Publication number
- RU2298791C2 RU2298791C2 RU2005106491/15A RU2005106491A RU2298791C2 RU 2298791 C2 RU2298791 C2 RU 2298791C2 RU 2005106491/15 A RU2005106491/15 A RU 2005106491/15A RU 2005106491 A RU2005106491 A RU 2005106491A RU 2298791 C2 RU2298791 C2 RU 2298791C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reaction
- drop
- hormone
- pregnancy
- serum
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к методам диагностики беременности и бесплодия коров и телок. Метод состоит в установлении стельности и бесплодия на основании обнаружения в сыворотке крови плацентарного гормона - хорионического гонадотропина в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител. Время, затрачиваемое на исследование одной пробы, не превышает 10 минут, что позволяет снизить трудоемкость диагностических исследований и использовать метод в условиях животноводческой фермы или комплекса. 1 табл.
Description
Изобретение относится к методам ранней диагностики беременности и бесплодия коров и телок.
Известен иммунологический метод диагностики стельности и бесплодия, заключающийся в обнаружении в сыворотке крови коров и телок гормона прогестерона при помощи иммуноферментного анализа, который позволяет установить беременность с 19-24 дня после осеменения [1].
Однако иммуноферментный анализ, как и многие существующие методы лабораторной диагностики беременности и бесплодия, трудоемок и сложен, требует наличия специального оборудования.
Техническим результатом изобретения является упрощение метода ранней иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок, а также снижение трудоемкости диагностических исследований.
Указанный результат достигается тем, что в качестве гормона, подвергающегося исследованию, используют плацентарный гормон - хорионический гонадотропин, который определяют в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител при помощи диагностикума. Для изготовления диагностикума кролик массой 1,5-2 кг 4-кратно с интервалом 7 дней подкожно в область лопатки иммунизируется антигеном «Гонадотропин хорионический человека» в дозе - 2000 ЕД, разведенным в 1 мл стерильного адъюванта Фрейда. Через 10 дней после последней инъекции гормона получают сыворотку методом отстаивания. Затем 2 мл полученной иммунной сыворотки, разведенной 1:5 в 1%-ном растворе борной кислоты добавляют к 10 мл суспензии мелкодисперсных частиц (1-1,6 мкм) ализарина, смесь выдерживают 2 ч при температуре 37°С и еще 13 ч при 4-8°С. После этого смесь центрифугируют до просветления, к осадку добавляют 10 мл 2%-ного раствора нормальной кроличьей сыворотки в 0,5%-ной борной кислоте на физиологическом растворе и консервируют хинозолом (мертиолятом) в соотношении 1 часть консерванта на 10000 частей реактива. При постановке реакции на чистое обезжиренное предметное стекло наносят слева (опыт) и справа (контроль) по 1 капле суспензии ализариновых антител. Затем в опытную каплю добавляют 1-2 капли испытуемой сыворотки крови, а в контрольную - такое же количество физиологического раствора. Капли перемешивают отдельными стеклянными палочками и осторожно подогревают над пламенем горелки, покачивая стекло круговыми движениями в горизонтальной плоскости, при этом реакция завершается течение 5-10 минут. Учет результата реакции осуществляют визуально по изменению гомогенности кирпично-красной мутной капли реагентов на предметном стекле: при положительной реакции на стельность в капле появляются оранжево-желтые зерна агглютината, и жидкость при этом просветляется, при отрицательной реакции вид капли не изменяется.
Испытание метода диагностики беременности и бесплодия по наличию плацентарного гормона - хорионического гонадотропина в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител проводили в учебно-опытном хозяйстве Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. Для опыта было взято 100 проб сыворотки крови коров и телок (50 от стельных в ранней стадии беременности и 50 от бесплодных животных). Предварительно пробы подверглись исследованию при помощи иммуноферментного анализа. Затем эти же пробы исследовались с помощью разработанного метода диагностики беременности и бесплодия.
Результаты определения диагностической эффективности методов иммунологической диагностики беременности и бесплодия приведены в таблице.
Простота метода иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок позволяет использовать его для раннего определения или исключения стельности в условиях животноводческих ферм и комплексов при одинаковой с прототипом точности исследований. Также снижается трудоемкость диагностических исследований, поскольку время, затрачиваемое на исследование одной пробы, не превышает пятнадцати минут, в то время как иммуноферментный анализ предусматривает наличие специального оборудования и осуществляется, как правило, в условиях специализированных лабораторий.
Группы животных | Общее количество проб | Результаты исследований (подтверждение стельности) | |||||||
иммуноферментный анализ | разработанный метод иммунологической диагностики | ||||||||
положительный | отрицательный | положительный | отрицательный | ||||||
количество проб | % | количество проб | % | количество проб | % | количество проб | % | ||
Стельные | 50 | 48 | 96 | 2 | 4 | 49 | 98 | - | - |
Бесплодные | 50 | - | - | 50 | 100 | - | - | 50 | 100 |
Источник информации
1. Преображенский О.Н. Современные методы диагностики беременности и бесплодия животных. - Ветеринария, 2003. №7, с.32-33.
Claims (1)
- Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок, включающий обнаружение в сыворотке крови полового гормона, отличающийся тем, что в качестве гормона используют плацентарный гормон - хорионический гонадотропин, который определяют в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин - антител при помощи диагностикума, для изготовления которого кролик массой 1,5-2 кг 4-кратно с интервалом 7 дней, подкожно в область лопатки иммунизируется антигеном «Гонадотропин хорионический человека» в дозе 2000 Ед, разведенным в 1 мл стерильного адъюванта Фрейда, через 10 дней после последней инъекции гормона получают сыворотку крови методом отстаивания, затем 2 мл полученной иммунной сыворотки, разведенной 1:5 в 1%-ном растворе борной кислоты добавляют к 10 мл суспензии мелкодисперсных частиц (1-1,6 мкм) ализарина, смесь выдерживают 2 ч при температуре 37°С и еще 13 ч при 4-8°С, затем смесь центрифугируют до просветления, к осадку добавляют 10 мл 2%-ного раствора нормальной кроличьей сыворотки в 0,5%-ной борной кислоте на физиологическом растворе и консервируют хинозолом (мертиолятом) в соотношении 1 часть консерванта на 10000 частей реактива, при постановке реакции на чистое обезжиренное предметное стекло наносят слева (опыт) и справа (контроль) по 1 капле суспензии ализариновых антител, затем в опытную каплю добавляют 1-2 капли испытуемой сыворотки крови, а в контрольную - такое же количество физиологического раствора, капли перемешивают отдельными стеклянными палочками и осторожно подогревают над пламенем горелки, покачивая стекло круговыми движениями в горизонтальной плоскости, при этом реакция завершается в течение 5-10 мин, учет результатов реакции осуществляется визуально по изменению гомогенности кирпично-красной мутной капли реагентов на предметном стекле: при положительной реакции на стельность в капле появляются оранжево-желтые зерна агглютината и жидкость при этом просветляется, при отрицательной реакции вид капли не изменяется.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005106491A RU2005106491A (ru) | 2006-08-20 |
RU2298791C2 true RU2298791C2 (ru) | 2007-05-10 |
Family
ID=37060203
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2298791C2 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2471421C1 (ru) * | 2011-11-03 | 2013-01-10 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Способ диагностики беременности у коров |
RU2500341C1 (ru) * | 2012-07-17 | 2013-12-10 | Анатолий Петрович Бахтинов | Способ диагностики уротензин 2-зависимого бесплодия позвоночных животных и человека |
RU2662926C1 (ru) * | 2017-05-22 | 2018-07-31 | Общество с ограниченной ответственностью "НТЦ "ПромТехЭнерго" | Способ получения лиофилизированного препарата для иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
RU2775205C1 (ru) * | 2021-05-04 | 2022-06-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Диагностический набор для определения беременности и бесплодия коров |
-
2005
- 2005-03-09 RU RU2005106491/15A patent/RU2298791C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Преображенский О.Н. Современные методы диагностики беременности и бесплодия животных. Ветеринария, 2003, №7, с.32-33. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2471421C1 (ru) * | 2011-11-03 | 2013-01-10 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Способ диагностики беременности у коров |
RU2500341C1 (ru) * | 2012-07-17 | 2013-12-10 | Анатолий Петрович Бахтинов | Способ диагностики уротензин 2-зависимого бесплодия позвоночных животных и человека |
RU2662926C1 (ru) * | 2017-05-22 | 2018-07-31 | Общество с ограниченной ответственностью "НТЦ "ПромТехЭнерго" | Способ получения лиофилизированного препарата для иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
RU2775205C1 (ru) * | 2021-05-04 | 2022-06-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Диагностический набор для определения беременности и бесплодия коров |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2005106491A (ru) | 2006-08-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US3565987A (en) | Immunochemical determinations of antigens and antibodies | |
PT88615B (pt) | Equipamento e metodo de dosagem imunometrica aplicavel a celulas completas | |
RU2298791C2 (ru) | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок | |
US20050170445A1 (en) | Methods of establishing profiles for use in evaluating wound healing and biocompatibility of implant materials and microarrays useful therefor | |
CN103267851B (zh) | 一种检测胎膜早破的试剂盒及其制备方法 | |
EP2210097B1 (de) | Verfahren zur in vitro-diagnose und/oder in vitro-therapieverfolgung von infektionen | |
RU2737336C1 (ru) | Способ определения иммунологической реактивности организма животных | |
Orsolini et al. | Characterization of sperm cell membrane charge and selection of high-quality sperm using microfluidics in stallions | |
RU2560684C1 (ru) | Средство для диагностики лейкоза крупного рогатого скота и способ его применения | |
Haimovici et al. | Variables affecting toxicity of human sera in mouse embryo cultures | |
CN108948185B (zh) | 蒜氨酸抗原及其免疫应答获得的家兔蒜氨酸抗体 | |
RU2750787C1 (ru) | Способ определения изоантигенной нагрузки в функциональной системе "мать-плод-новорожденный" | |
RU2330286C1 (ru) | Способ диагностики герпес-вирусной инфекции у беременных путем подсчета герпесных телец в периферической крови | |
RU2741239C1 (ru) | Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота | |
CA3097360A1 (en) | Sample clarification and reduction of background fluorescence for fluorescent detection of analytes | |
RU2749026C1 (ru) | Способ диагностики изоиммунизации животных | |
RU2752766C1 (ru) | Способ определения иммунологической толерантности у животных | |
RU2548729C1 (ru) | Способ экспресс-диагностики генитальной формы инфекционного ринотрахеита у коров | |
RU2810589C1 (ru) | Способ постановки реакции иммунофлюоресценции для диагностики лейкоза крупного рогатого скота | |
CN104459134A (zh) | 脑损伤早期诊断s100胶体金免疫测试盒及其制备方法 | |
RU2485516C1 (ru) | Способ постановки реакции иммунологического анализа | |
JPS6045519A (ja) | 精液抗原画分及びその製造方法 | |
Mahmood et al. | Assessment of Cortisol Hormonal Level and Relation with Age in Infertile Women With ICSI Outcome | |
RU2731521C1 (ru) | Способ диагностики радиационных поражений организма и способ получения противолучевого антительного бентонитового препарата для диагностики радиационных поражений организма | |
RU2730980C1 (ru) | Способ диагностики лямблиоза |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080310 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20100527 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110310 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20120510 |
|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20120706 |
|
TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -PC4A- IN JOURNAL: 23-2012 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150310 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160220 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200310 |