RU2261274C2 - Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности - Google Patents
Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности Download PDFInfo
- Publication number
- RU2261274C2 RU2261274C2 RU2003101793/13A RU2003101793A RU2261274C2 RU 2261274 C2 RU2261274 C2 RU 2261274C2 RU 2003101793/13 A RU2003101793/13 A RU 2003101793/13A RU 2003101793 A RU2003101793 A RU 2003101793A RU 2261274 C2 RU2261274 C2 RU 2261274C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- virus
- immunogenicity
- ibd
- activity
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. Штамм вируса инфекционной бурсальной болезни (ИББ) «52/70-М» выделен из фабрициевых сумок больных и павших цыплят. Штамм обладает выраженной преципитирующей и инфекционной активностью. Изобретение может быть использовано для производства инактивированной вакцины против вируса ИББ и для оценки иммуногенных свойств вакцин против вируса ИББ. 4 табл.
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и может быть использовано при производстве инактивированной вакцины против инфекционной бурсальной болезни птиц (ИББ), а также в качестве контрольного вирулентного штамма для оценки иммуногенных свойств вакцинных штаммов указанного заболевания.
Основным направлением профилактики ИББ является применение вакцинных препаратов. Для этого используют живые и инактивированные вакцины, эффективность которых определяется качеством, главным образом их высокой иммуногенностью и безвредностью.
Вируссодержащая жидкость с высоким содержанием вируса является исходным материалом при производстве вакцин, оценки их качества и получении диагностических препаратов, а также инактивированной вакцины. Дальнейшая последовательная обработка вирусной жидкости зависит от требуемого конечного продукта и технологических условий. Вируссодержащая жидкость используется как составная часть диагностического или вакцинного препарата; антиген для иммунизации животных при получении гипериммунных диагностических сывороток; исходный материал для получения преципитирующего антигена вируса ИББ и изготовление инактивированной вакцины.
При оценке иммуногенной активности вакцинных штаммов учитываются результаты сероконверсии и данные по устойчивости привитой птицы к заражению вирулентным штаммом вируса ИББ. Штамм, предназначенный для контрольного заражения для оценки иммуногенности, должен быть стабильным, свободным от контаминации, достаточно вирулентным и обладать высокой биологической и антигенной активностью.
Согласно данным литературы для производства различных иммунобиологических свойств вируса ИББ используют различные штаммы вируса ИББ - штамм "СТ" [1], штамм "БГ" вируса ИББ [2] и штамм "Винтерфильд" [3].
Вместе с тем инфекционная активность штаммов вируса ИББ, приведенная в работах [1] и [3], не превышает 106,0 ТЦД50/мл, а преципитирующей активностью вовсе не обладают.
Наиболее близким предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является штамм "БГ" вируса ИББ птиц, предназначенный для производства иммунобиологических препаратов [2]. Штамм "БГ" культивируется заражением 10-суточных СПФ куриных эмбрионов при 37,7°С и влажности 54-66%. В течение 72-96 часов инкубирования вирус накапливается до 5,25-6,0 lg ЭИД50/0,2 мл, при этом преципитирующий титр не в одном из экспериментов не превышал 1:16. Следует отметить, что преципитирующая активность штамма "БГ" часто некоррелировала со значением инфекционного титра. Титр активности антигена в РДП составлял 1:4-1:16, причем максимальный титр 1:16 был установлен только в 3 из 10 опытов.
Нестабильность полученных результатов и низкий титр преципитирующей активности антигена затрудняют производство иммунобиологических препаратов вируса ИББ на основе этого штамма. Штамм "БГ" вследствие многократных пассажей на СПФ-эмбрионах потерял свои инфекционные свойства и по этой причине не может быть использован как контрольный вирулентный вирус в опытах по оценке рммуногенности вакцинных препаратов против ИББ.
Цель изобретения достигается получением стабильного вирулентного штамма вируса ИББ, обладающего высокой преципитирующей и инфекционной активностью, пригодного для изготовления инактивированной вакцины и в качестве контрольного вирулентного штамма при оценке иммуногенности вакцин против ИББ.
Штамм "52/70-М" депонирован в Государственной коллекции вирусов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) 03.04.1992 г. под регистрационным номером - вирус ИББ - "52/70-М-ДЭП".
Получение штамма. Материалом для выделения вируса ИББ служит гомогенат фабрициевых сумок больных или павших цыплят. Пораженные сумки гомогенизируются в 0,001 М фосфатно-буферном растворе (рН 7,2-7,4) в соотношении 1:1 (вес на объем), трижды замораживают и оттаивают, центрифугируют при 4000 об/мин в течение 30 мин, надосадочную жидкость стерильно отсасывают, проверяют на стерильность, биологическую и антигенную активность (таблица 1).
Выделение вируса проводят на СПФ-куринных эмбрионах 11-дневного возраста. Вирусный материал в объеме 0,2 мл инокулируют на хориоаллантоисные оболочки (ХАО) и инкубируют при 37-38°С в течение 96-120 часов. Просмотр эмбрионов осуществляют ежедневно, павшие эмбрионы в течение 3-5 суток гомогенизируют в фосфатно-солевом буфере (рН 7,2-7,4), трижды замораживают и оттаивают, центрифугируют при 4000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость стерильно отсасывают, проверяют на стерильность, биологическую и антигенную активность.
Характеристика штамма. Штамм "52/70-М" соответствует единной структуре вируса ИББ и обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ИББ: форма вириона экосаэдрическая, размер вириона - 58-60 нм. Его инфекционная активность подавляется физическими и химическими средствами (рН, тепло, ацетон, формалин, Уф-облучение). Вирус не проявляет геммаглютинирующей активности.
Типичным проявлением штамма является активное размножение на 11-суточных СПФ-эмбрионах, получение вируссодержащей жидкости с титром инфекционности 106,0-106,5 ЭИД50/мл и преципитирующей активности 1:32-1:64. Определение титра инфекционности проводят методом титрования на СПФ-куриных эмбрионах с 10-кратным разведением вирусной суспензии на физиологическом растворе. Окончательный учет проводят на 7-8 день путем учета патологоанатомических изменений в органах зараженных эмбрионов. Штамм "52/70-М" вируса ИББ нейтрализуется специфическими антителами. Реакцию нейтрализации проводят на куриных СПФ-эмбрионах.
Пример 1. В качестве специфической сыворотки используют гипериммунную сыворотку к вирусу ИББ, Для получения гипериммунной сыворотки к вирусу ИББ цыплят заражают вирулентным штаммом "52/70-М" в возрасте 35-40 суток и через 15 суток повторно вводят вирус в объеме 0,5 см в грудную мышцу. Сыворотку от цыплят получают через 14 суток после повторного введения штамма. Сыворотку проверяют на активность и специфичность в реакции диффузной преципитации и реакции нейтрализации (таблица 2).
Пример 2. Использование штамма "52/70-М" для оценки иммуногенности вакцин против ИББ.
Одним из требований в производстве вакцин является их проверка на иммуногенность, т.е. определение степени устойчивости вакцинированной птицы к заражению вирулентному штамму вируса гамологичного путем заражения птицы контрольным вирулентным штаммом данного возбудителя.
В таблице 3 представлены результаты контрольного заражения цыплят, привитых вакцинами разного производства, вирулентным штаммом "52/70-М". Вирулентный вирус вводили интраназально цыплятам всех групп в дозе 0,2 мл через 21 суток после иммунизации. После окончания наблюдения птиц убивали и производили вскрытие для выявления патологоанатомических изменений, характерных для вируса ИББ. Результаты опытов свидетельствуют, что вирулентный штамм "52/70-М" одинаково пригоден для оценки иммуногенности как живых, так и инактивированных вакцин против ИББ.
Пример 3. Изготовление и испытание инактивированной вакцины.
Инактивированную вакцину против вируса ИББ готовят из штамма вируса "52/70-М", выращенного в развивающихся СПФ-эмбрионах кур. Вируссодержащий материал инактивируют 0,1%-ным раствором В-пропиолактона с последующей проверкой на полноту инактивации. Готовится масляная эмульсия на основе минерального масла Маркол-52 с добавлением арлацела.
Результаты исследований по оценке иммуногенной активности инактивированной вакцины из штамма "52/70-М" представлены в таблице 4.
Источники информации
1. Годизов П.Х. Иммунобиологические свойства вакцинного штамма "СТ" и эффективность специфической профилактики бурсальной болезни птиц. - г. Тарту, Эстония СХА, 1990, с.21.
2. Патент РФ № 2127602, с.12, 24.11.1997 г.
3. Патент РФ № 2127604, с.12, 14.04.1998 г.
| Таблица 1 Преципитирующая и биологическая активность штамма "52/70-М" вируса ИББ |
||
| №№ опытов | Преципитирующая активность в РДП | Биологическая активность на СПФ-эмбрионах (ЭИД 50/мл) |
| 1 | 1:32 | 6,0 |
| 2 | 1:16 | 5,75 |
| 3 | 1:16 | 5,75 |
| 4 | 1:16 | 5,75 |
| 5 | 1:64 | 6,5 |
| 6 | 1:64 | 6,5 |
| 7 | 1:32 | 5,75 |
| 8 | 1:32 | 5,5 |
| 9 | 1:32 | 5,5 |
| 10 | 1:64 | 6,5 |
| Таблица 2 Активность иммунных сывороток в РДП и РН |
||
| №№ опытов | Титр антител | |
| РДП | РН | |
| 1 | 1:126 | 1:1024 |
| 2 | 1:64 | 1:512 |
| 3 | 1:126 | 1:1024 |
| 4 | 1:256 | 1:2048 |
| 5 | 1:126 | 1:1024 |
| 6 | 1:126 | 1:1024 |
| 7 | 1:64 | 1:512 |
| 8 | 1:64 | 1:512 |
| 9 | 1:64 | 1:512 |
| 10 | 1:64 | 1:512 |
| Таблица 3 Результаты контрольного заражения штаммом "52/70-М" СПФ-цыплят, привитых против ИББ |
|||
| Группа цыплят, привитая вакциной | Всего голов | Результаты заражения, заболело/пало | Процент иммуногенности |
| Д-78 | 20 | 1/1 | 95 |
| КБК | 20 | 0/0 | 100 |
| Бюр-706 | 20 | 0/0 | 100 |
| Инактивированной | 20 | 1/0 | 95 |
| Контроль, невакцинированной | 20 | 20/5 | 0 |
| Таблица 4 Иммуногенная активность инактивированной вакцины против ИББ из штамма "52/70-М" |
|||||
| №/№ опытов | Доза вируса на 1 гол. в ЭИД 50/мл | Вакцинированно | Результаты контрольного заражения | ||
| Заражено | Заболело | Процент сохранности | |||
| Первый опыт | |||||
| 1 | 10 | 10 | 10 | 2 | 80 |
| 2 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 3 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 4 | Контроль | 10 | 10 | 10 | 0 |
| Второй опыт | |||||
| 1 | 10 | 10 | 10 | 1 | 90 |
| 2 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 3 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 4 | Контроль | 10 | 10 | 10 | 0 |
| Третий опыт | |||||
| 1 | 10 | 10 | 10 | 2 | 80 |
| 2 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 3 | 10 | 10 | 10 | 0 | 100 |
| 4 | Контроль | 10 | 10 | 10 | 0 |
Claims (1)
- Штамм вируса инфекционной бурсальной болезни птиц Bursitis infectiosa gallinal cem. Birnaviridal, pog. Avibirnavirus, ВГНКИ серотип «52/70-М» для изготовления инактивированной вакцины и оценки иммуногенности вакцин против инфекционной бурсальной болезни.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003101793/13A RU2261274C2 (ru) | 2003-01-22 | 2003-01-22 | Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003101793/13A RU2261274C2 (ru) | 2003-01-22 | 2003-01-22 | Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2003101793A RU2003101793A (ru) | 2004-08-10 |
| RU2261274C2 true RU2261274C2 (ru) | 2005-09-27 |
Family
ID=35850210
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003101793/13A RU2261274C2 (ru) | 2003-01-22 | 2003-01-22 | Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2261274C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2736888C2 (ru) * | 2018-12-10 | 2020-11-23 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Федеральный научный центр "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства" Российской академии наук | Штамм "dd1" вируса инфекционной бурсальной болезни кур семейства birnaviridae, рода avibirnavirus, 1 серотипа для производства инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин |
-
2003
- 2003-01-22 RU RU2003101793/13A patent/RU2261274C2/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2736888C2 (ru) * | 2018-12-10 | 2020-11-23 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Федеральный научный центр "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства" Российской академии наук | Штамм "dd1" вируса инфекционной бурсальной болезни кур семейства birnaviridae, рода avibirnavirus, 1 серотипа для производства инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1204055A (en) | Infectious-bronchitis vaccines for poultry, combined infectious-bronchitis vaccines, process for preparing such vaccines, process for preventing infectious bronchitis and infectious-bronchitis virus strain | |
| CN106267195B (zh) | 一种猪病毒性腹泻三联抗原抗体复合物及其制备方法 | |
| JP3650634B2 (ja) | 家禽用ワクチン | |
| CN102220287B (zh) | 鸡传染性支气管炎冷适应致弱疫苗株及其应用 | |
| Boulter et al. | The nature of the immune state produced by inactivated vaccinia virus in rabbits | |
| BR112015012711B1 (pt) | Método para preparar uma composição imunogênica para o tratamento e/ou a profilaxia de infecções por mycoplasma | |
| CN103497934B (zh) | 鸡传染性支气管炎病毒疫苗株（hf2株）及其应用 | |
| CN109207436B (zh) | 一株i群4型禽腺病毒毒株及其应用 | |
| CN107854688A (zh) | 猪圆环病毒2型与猪圆环病毒3型二价灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN111671893B (zh) | 牛传染性鼻气管炎病毒与牛支原体二联灭活疫苗及其制备方法与所用悬浮mdbk细胞 | |
| CN103127497B (zh) | 猪圆环病毒2型、肺炎支原体二联灭活疫苗及其制备方法 | |
| BR112015015199B1 (pt) | Composição imunogênica compreendendo antígenos de micoplasma e uso | |
| EP0030063A2 (en) | Infectious-bronchitis vaccines for poultry, combined infectious-bronchitis vaccines, process for preparing such vaccines, process for preventing infectious bronchitis and infectious-bronchitis virus strains | |
| CN109097340A (zh) | 一种禽腺病毒、一种四联疫苗及其制备方法 | |
| RU2675995C1 (ru) | Штамм "ВН-3" вируса гепатита утят типа I рода Avihepatovirus семейства Picornaviridae для производства вакцинных препаратов и диагностических наборов | |
| RU2261274C2 (ru) | Штамм "52/70-м" вируса инфекционной бурсальной болезни для изготовления инактивированной вакцины и оценки их иммуногенности | |
| HU219311B (en) | New bacterium causing poultry disease and vaccine derived thereof | |
| CN112646750B (zh) | 一种血清18型鸭疫里默氏杆菌及应用 | |
| JP2892767B2 (ja) | イヌコロナウイルスワクチン | |
| RU2658351C1 (ru) | Штамм "гс-11" вируса инфекционного бронхита кур для производства инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин, а также диагностических целей | |
| KR102348853B1 (ko) | 락토바실러스 플란타룸 및 가금 아데노 바이러스를 포함하는 백신 조성물 | |
| CN108714211B (zh) | 一种鹅细小病毒和鸭2型腺病毒二联灭活疫苗 | |
| JPS6244528B2 (ru) | ||
| CN114891094A (zh) | 一种禽腺病毒和番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法 | |
| RU2158304C2 (ru) | Штамм "внивип-деп" для получения вакцины против реовирусного теносиновита кур |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120123 |