RU2201959C2 - Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований - Google Patents
Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований Download PDFInfo
- Publication number
- RU2201959C2 RU2201959C2 RU2001116513A RU2001116513A RU2201959C2 RU 2201959 C2 RU2201959 C2 RU 2201959C2 RU 2001116513 A RU2001116513 A RU 2001116513A RU 2001116513 A RU2001116513 A RU 2001116513A RU 2201959 C2 RU2201959 C2 RU 2201959C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- cells
- piglet
- virology
- transplantable
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к вирусологии, в частности к культивированию клеток и тканей для наработки и изучения вирусов. Штамм клеток РК-15/В5 получают путем клонирования линии клеток почки поросенка РК-15 методом предельных разведений и пассирования в среде Игла МЕМ с 5% фетальной сыворотки крови телят или сыворотки крови новорожденных телят. Кариотип стабилен на протяжении 50 пассажей. Модальный класс представлен клетками, содержащими 31 хромосому (61%). Культура клеток РК-15/В5 чувствительна к различным штаммам вируса классической чумы свиней и является тест-системой, используемой в диагностике и титровании вируса КЧС. Изобретение позволяет получить штамм перевиваемых клеток почки поросенка РК-15/В5, стабильный по биологическим характеристикам, пригодный для научно-исследовательской и диагностической работы. 1 табл.
Description
Изобретение относится к вирусологии, в частности к культивированию клеток и тканей с целью наработки и изучения вирусов.
Известна перевиваемая линия клеток почки поросенка РК-15, изолированная в 1957 году М. Harris из культуры клеток РК-2а почки взрослой свиньи Sus scrofa (АТСС, CCL 33) (1, 2).
Штамм перевиваемых клеток РК-15 из-за того, что его культивировали в лабораториях мира при нестандартных режимах и в различных по составу питательных средах, стал нестабильным по культуральным, морфологическим, цитогенетическим характеристикам и чувствительности к вирусу классической чумы свиней.
Целью изобретения является получение штамма перевиваемых клеток почки поросенка РК-15/В5, стабильного по биологическим характеристикам, пригодного для научно-исследовательской и диагностической работы, обладающего высокой чувствительностью к вирусу классической чумы свиней.
Штамм клеток РК-15/В5 получен из перевиваемой линии клеток почки поросенка РК-15 клонированием методом предельных разведении в питательной среде Игла MEM, содержащей 20% фетальной сыворотки крови телят, с отбором и селекцией высокочувствительного к вирусу классической чумы свиней и генетически однородного клона.
Штамм РК-15/В5 характеризуется следующими признаками.
Культуральные свойства. Жизненный цикл штамма, при котором сохраняются основные биологические показатели, составляет 50±5 пассажей. При посевной дозе - 100-120•103 клеток/мл монослой формируется на 2-3 сутки культивирования и сохраняется без смены среды в течение 10-12 дней. Коэффициент пересева - 1:2-1:3.
Штамм РК-15/В5 культивируют в монослойных культурах в среде Игла MEM с 5% сыворотки крови новорожденных телят. Для диспергирования клеточного пласта при пересевах используют смесь 0,02% раствора версена и 0,25% раствора трипсина в соотношении 3:1 при температуре 37oС. Урожай клеток с литрового матраса составляет 50-55 млн. клеток.
Для криоконсервирования при температуре -196oС применяют смесь, состоящую из 70% среды Игла MEM, 20% сыворотки крови новорожденных телят и 10% диметилсульфоксида, при концентрации клеток 6-8•106 в мл. Жизнеспособность клеток по тесту витального окрашивания трипановой синью после хранения в жидком азоте составляет 85-90%. Клетки восстанавливают исходные ростовые и морфологические свойства в течение 2-3 пассажей.
Создан банк рабочих клеток изготовителя (БРКИ) в количестве 250 млн. клеток. Клетки криоконсервированы в жидком азоте на уровне 5, 8, 11 и 18 пассажа во ВНИИВВиМ (регистрационный 2.10).
Морфологические признаки. Культура клеток представлена эпителиоподобными клетками средних размеров с мелкозернистой цитоплазмой и четко очерченными границами. Ядро округлой формы с 1-3 ядрышками.
Кариологическая характеристика. Популяция гипоплоидная. Варьирование хромосомных наборов от 27 до 33. Модальный класс (61%) составляют клетки, содержащие 31 хромосому. Маркерной хромосомой является большой метацентрик с разрывом.
Гистохимическим методом азосочетания (с использованием в качестве субстрата α-нафтилацетата) установлена высокая активность неспецифических эстераз.
Видовая идентичность подтверждена кариологическими методами.
Прививаемость изогенным животным отсутствует.
Контроль штамма PK-15/B5 на посторонние контаминанты. При обследовании клеток штамма РК-15/В5 на стерильность (наличие бактерий, грибов, микоплазм) получены отрицательные результаты.
Чувствительность к вирусам. Клетки штамма РК-15/В5 чувствительны к различным штаммам вируса классической чумы свиней (см. таблицу).
Штамм перевиваемых клеток РК-15/В5 может быть использован в вирусологических исследованиях для наработки и изучения вируса классической чумы свиней, а также в диагностических целях.
Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa РК-15/В5 депонирован в Специализированной коллекции перевиваемых соматических культур клеток сельскохозяйственных и промысловых животных Российской коллекции культур клеток при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии (СХЖ РАСХН) под 55.
Список литературы
1. Pirtle EC and Woods LK. Cytogenetic alterations in swine kidney cells persistenty infected with hog cholera virus and propagated with and without antiserum in the medium // Am. J. Vet. Res. 1968.29:153-164;
2. Armstrong J.A. et al. C-type virus particles in pig kidney cell lines // J. Genet. Virol. 1971. 10:195-198.
1. Pirtle EC and Woods LK. Cytogenetic alterations in swine kidney cells persistenty infected with hog cholera virus and propagated with and without antiserum in the medium // Am. J. Vet. Res. 1968.29:153-164;
2. Armstrong J.A. et al. C-type virus particles in pig kidney cell lines // J. Genet. Virol. 1971. 10:195-198.
Claims (1)
- Штамм перевиваемых клеток почки поросенка Sus scrofa РК-15/В5 депонирован в Специализированной коллекции перевиваемых соматических культур клеток сельскохозяйственных и промысловых животных Российской коллекции культур клеток при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии (СХЖ РАСХН) под 55, используемый для вирусологических исследований.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001116513A RU2201959C2 (ru) | 2001-06-19 | 2001-06-19 | Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001116513A RU2201959C2 (ru) | 2001-06-19 | 2001-06-19 | Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2201959C2 true RU2201959C2 (ru) | 2003-04-10 |
Family
ID=20250796
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2001116513A RU2201959C2 (ru) | 2001-06-19 | 2001-06-19 | Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2201959C2 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2702178C1 (ru) * | 2018-10-24 | 2019-10-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" | Пробиотический препарат для интенсивного откорма сельскохозяйственных животных и птицы |
RU2720113C1 (ru) * | 2019-02-28 | 2020-04-24 | Публичное акционерное общество «Татнефть» имени В.Д. Шашина | Эмульгатор инвертной эмульсии для увеличения нефтеотдачи пластов |
RU2720857C1 (ru) * | 2019-02-28 | 2020-05-13 | Публичное акционерное общество «Татнефть» имени В.Д. Шашина | Эмульгатор инвертной эмульсии для увеличения нефтеотдачи пластов |
-
2001
- 2001-06-19 RU RU2001116513A patent/RU2201959C2/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
PIRTLE E.C. et al., Cytogenetic alteration in swine kidney cells persistenty infected with hog cholera virus and propagated and without antiserum in the medium. - Am. J. Vet. Res., 1968, v.29, p.153-164. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2702178C1 (ru) * | 2018-10-24 | 2019-10-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" | Пробиотический препарат для интенсивного откорма сельскохозяйственных животных и птицы |
RU2720113C1 (ru) * | 2019-02-28 | 2020-04-24 | Публичное акционерное общество «Татнефть» имени В.Д. Шашина | Эмульгатор инвертной эмульсии для увеличения нефтеотдачи пластов |
RU2720857C1 (ru) * | 2019-02-28 | 2020-05-13 | Публичное акционерное общество «Татнефть» имени В.Д. Шашина | Эмульгатор инвертной эмульсии для увеличения нефтеотдачи пластов |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109609460B (zh) | 一种人脑胶质瘤细胞系及其建立方法和应用 | |
CN111778204B (zh) | 卵母细胞体外成熟培养液添加剂及其应用 | |
CN104152403B (zh) | 一种建立鹅胚上皮细胞系的方法及建立的鹅胚上皮细胞系 | |
CN109294974A (zh) | 一种异育银鲫脊髓组织细胞系及其构建方法与其应用 | |
RU2201959C2 (ru) | Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa pk-15/b5, используемый для вирусологических исследований | |
CN109207422B (zh) | 一种欧洲鳗鲡肾脏细胞系ek及其应用 | |
RU2201960C2 (ru) | Штамм перевиваемых клеток почки поросенка sus scrofa рк-15/а11, используемый для вирусологических исследований | |
RU2348689C1 (ru) | Постоянная линия клеток sso-2 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri | |
Li et al. | Establishment and characterization of a fibroblast cell line derived from Jining Black Grey goat for genetic conservation | |
CN109402068A (zh) | 一种制备无血清残留的猪伪狂犬病毒的方法 | |
RU2353650C1 (ru) | Линия клеток ico яичников неполовозрелого карпа (cyprinus carpio) для вирусологических исследований | |
CN108624553A (zh) | 一种高效转染青鳉肌肉细胞系 | |
CN103725644B (zh) | 樱桃谷鸭胚上皮细胞系及其建立方法 | |
RU2506310C1 (ru) | ШТАММ ДИПЛОИДНЫХ КЛЕТОК СИНОВИАЛЬНОЙ МЕМБРАНЫ ПОРОСЕНКА Sus scrofa, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ | |
Seto et al. | The chromosomes of Necturus maculosus as revealed in cultures of leukocytes | |
RU2488631C1 (ru) | ЛИНИЯ КЛЕТОК ПОЧКИ ТЕЛЕНКА Bos taurus RBT (Rene Bos Taurus) ДЛЯ РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСОВ ЖИВОТНЫХ | |
CN102174577A (zh) | 一种利用慢病毒载体生产转基因水牛的方法 | |
CN104805053A (zh) | 珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系及其构建方法、应用 | |
RU2082758C1 (ru) | Штамм внутривидовых гибридных клеток suis domesfice, используемый для выделения и культивирования вируса классической чумы свиней | |
Hirumi et al. | Cell culture of Hemiptera | |
RU2061753C1 (ru) | Штамм культивируемых клеток гонад capra hircus l-продуцент вирусов животных | |
RU2348688C1 (ru) | Постоянная линия клеток sso-3 пула паренхиматозных органов сибирского осетра acipenser baeri | |
RU2339693C1 (ru) | ШТАММ КЛОНАЛЬНОЙ ПЕРЕВИВАЕМОЙ ЛИНИИ КЛЕТОК ПОЧКИ САЙГИ Saiga tatarica ПС/с4, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ | |
Манин et al. | Biological, cytomorphological and karyological heterogeneity of transformed cell lines derived from domestic pig (Sus scrofa L.) organs | |
Galnbek et al. | The new sheep ovarian cell culture and the prospect its application in virology |