RU2194759C1 - ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА - Google Patents
ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2194759C1 RU2194759C1 RU2001128135A RU2001128135A RU2194759C1 RU 2194759 C1 RU2194759 C1 RU 2194759C1 RU 2001128135 A RU2001128135 A RU 2001128135A RU 2001128135 A RU2001128135 A RU 2001128135A RU 2194759 C1 RU2194759 C1 RU 2194759C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- poly
- hydroxybutyrate
- strain
- producer
- azotobacter chroococcum
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к новому штамму. Новый штамм Azotobacter chroococcum 7Б является продуцентом поли-β-оксибутирата (ПОБ). Штамм выращивают на питательной среде, содержащей сахара в качестве источника углерода. Выход ПОБ составляет 70-95%. Изобретение позволяет синтезировать высокомолекулярный ПОБ не только в лабораторных, но и в производственных условиях.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой новый штамм Azotobacter chroococcum, используемый для получения термопластичного, биодеградабельного и биосовместимого полимера поли-β-оксибутирата (ПОБ), который может найти применение в медицине, сельском хозяйстве и промышленности.
Известны продуценты ПОБ, принадлежащие к различным родам бактерий Azotobacter, Alkaligenes, Methylobacterium (1, 2). Они обладают высокотехнологическими показателями, такими как высокое содержание ПОБ в клетках, выход биомассы, скорость синтеза биомассы и накопления ПОБ. Однако они растут преимущественно на газообразных источниках углерода, большинство штаммов получено генетическим путем, что может приводить к потере способности синтезировать целевой продукт, максимальный выход полимера составляет обычно 75-80%.
В качестве прототипа выбран штамм Azotobacter vinelandii ATCC 53799, способный использовать в качестве источника углерода углеводы. Выход целевого продукта 60-70% (3).
Задачей изобретения является получение нового устойчивого штамма бактерий, способного с высоким выходом синтезировать высокомолекулярный ПОБ (1200-1500 кДа) не только в лабораторных, но и в производственных условиях.
Данная задача решается новым штаммом Azotobacter chroococcum 7Б, который является сверхпродуцентом ПОБ. Штамм хранится в коллекции Института им. А.Н. Баха РАН. Штамм выделен из ризосферы пшеницы дерново-подзолистой почвы Московской области.
Штамм имеет следующую характеристику.
Культурально-морфологические признаки
Крупные клетки овальной формы, грамотрицательные, размером 2,0-2,5 х 3,5-5,0 мкм с мелкозернистой цитоплазмой и компактным нуклеоидом. Молодые клетки имеют перитрихиальные жгутики, а также фимбрии, способны к движению. С возрастом культура становится полиморфной, клетки соединяются в цепочки, образуют нитчатые формы и сарциноподобные пакеты. В цитоплазме клеток появляется зернистость, связанная с накоплением гранул резервного соединения поли-β-оксибутирата. В этой стадии клетки агрегируются и в жидкой среде легко осаждаются, образуя плотный осадок. Стадия покоя характеризуется образованием цист и слизистых капсул. Колонии на агаризованной среде Эшби - полупрозрачные, беловатые, слизистые, со временем приобретают черный или темно-бурый цвет.
Крупные клетки овальной формы, грамотрицательные, размером 2,0-2,5 х 3,5-5,0 мкм с мелкозернистой цитоплазмой и компактным нуклеоидом. Молодые клетки имеют перитрихиальные жгутики, а также фимбрии, способны к движению. С возрастом культура становится полиморфной, клетки соединяются в цепочки, образуют нитчатые формы и сарциноподобные пакеты. В цитоплазме клеток появляется зернистость, связанная с накоплением гранул резервного соединения поли-β-оксибутирата. В этой стадии клетки агрегируются и в жидкой среде легко осаждаются, образуя плотный осадок. Стадия покоя характеризуется образованием цист и слизистых капсул. Колонии на агаризованной среде Эшби - полупрозрачные, беловатые, слизистые, со временем приобретают черный или темно-бурый цвет.
Физиолого-биохимические признаки
Отношение к источникам углерода - использует глюкозу, сахарозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, маннит, крахмал, метанол, этанол, уксусную, лимонную и пропионовую кислоты.
Отношение к источникам углерода - использует глюкозу, сахарозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, маннит, крахмал, метанол, этанол, уксусную, лимонную и пропионовую кислоты.
Облигатный аэроб.
Отношение к источникам азота - фиксирует атмосферный азот, использует нитратный азот.
Желатину не разжижает, нитраты не восстанавливает.
Растет при температуре от +10 до +40oС, оптимум роста в диапазоне 28-32oС.
Диапазон рН, при котором возможен рост от 5,0 до 8,6 с оптимумом 7,2-7,6.
Штамм продуцирует до 95% ПОБ.
Оптимум биосинтеза ПОБ при 30oС и рН 7,2.
Для получения ПОБ штамм Azotobacter chroococcum 7Б выращивают в аэробных условиях на питательной среде, содержащей углеводы в качестве источника углерода и минеральные соли. Через двое суток выход биомассы составляет 6-12 г/л (сух.в.), а содержание ПОБ - 70-95%.
Изобретение поясняется примерами.
Пример 1.
Штамм Azotobacter chroococcum 7Б поддерживают на питательной среде Эшби, содержащей, г/л: К2НРO4 - 0,2; MgSO4 - 0,2; NaCl - 0,2; Na2MoO4•2Н2О - 0,006; СаСО3 - 5,0; сахароза - 20; агар - 20. Культивирование осуществляют в колбах на качалке (180 об/мин) при температуре 28-30oС в течение 48 часов. Состав питательной среды, г/л: MgSO4•7Н2О - 0,4; FeSO4•7H2O - 0,01; Na2MoO4•2H2O - 0,006; цитрат Na - 0,5; СаСl2 - 0,1; K2HPO4•3H2O - 1,05; КН2РO4 - 0,2; сахароза - 40. В конце культивирования концентрация биомассы составляет 10 г сух. в. /л, а содержание ПОБ, определенного методом (4), составляет 86%.
Пример 2.
Способ осуществляется по примеру 1, но вместо сахара используют сахаросодержащие отходы пищевой промышленности, а именно мелассу - 50 г/л. В конце культивирования концентрация биомассы составляет 7 г сух. в./л, а содержание ПОБ, определенного методом (4), составляет 78%.
Источники информации
1. Патент РФ N2051967, кл. С 12 Р 1/04, 1992 г.
1. Патент РФ N2051967, кл. С 12 Р 1/04, 1992 г.
2. Патент РФ N2123048, кл. С 12 Р7/62, 1993 г.
3. Патент США N5096819, 1992.
4. Law J.H., Slepecky A. Assay of poly-β-hydroxybutyric acid // J. Bacteriol., V. 82. P 33-36.
Claims (1)
- Штамм бактерий Azotobacter chroococcum 7Б - продуцент поли- β-оксибутирата.
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001128135A RU2194759C1 (ru) | 2001-10-18 | 2001-10-18 | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА |
PCT/RU2002/000447 WO2003033715A1 (en) | 2001-10-18 | 2002-10-09 | Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001128135A RU2194759C1 (ru) | 2001-10-18 | 2001-10-18 | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2194759C1 true RU2194759C1 (ru) | 2002-12-20 |
Family
ID=20253800
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2001128135A RU2194759C1 (ru) | 2001-10-18 | 2001-10-18 | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2194759C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2740086C1 (ru) * | 2019-12-13 | 2021-01-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Полимерный материал (гидрогель) на основе бактериального альгината для размещения пробиотических бактерий и способ его получения |
-
2001
- 2001-10-18 RU RU2001128135A patent/RU2194759C1/ru active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2740086C1 (ru) * | 2019-12-13 | 2021-01-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Полимерный материал (гидрогель) на основе бактериального альгината для размещения пробиотических бактерий и способ его получения |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0582567B1 (en) | POLY-$g(b)-HYDROXY ALKANOATE (PHA) COPOLYMER, METHOD OF ITS PRODUCTION, THE MICROBE WHICH PRODUCES IT, AND PHA COPOLYMER BLEND | |
Gouda et al. | Production of PHB by a Bacillus megaterium strain using sugarcane molasses and corn steep liquor as sole carbon and nitrogen sources | |
US5200332A (en) | Process for preparation of copolymer | |
US5336617A (en) | Process for preparing trehalulose and isomaltulose | |
CA2203264A1 (en) | Process for producing polyhydroxylic fatty acids and recombinant bacterial strains for carrying out the process | |
KR100467208B1 (ko) | 원료로서의 치환된 지방산 에스테르로부터의폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법 | |
US5138029A (en) | Biodegradable or biocompatible copolymer and process for producing same | |
KR20210049865A (ko) | 생분해성 폴리머 조성물 및 이를 생산하는 방법 | |
JPH03180186A (ja) | 共重合体およびその製造法 | |
RU2194759C1 (ru) | ШТАММ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА | |
RU2201453C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИ-β-ОКСИБУТИРАТА ЗАДАННОЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ | |
Khanafari et al. | Production and recovery of poly-β-hydroxybutyrate from whey degradation by Azotobacter | |
Ezhov et al. | Biosynthesis of polyhydroxybutyrate/valerate with different molecular weights during the growth of Methylobacterium extorquens G-10 on a methanol-pentanol mixture | |
JP2756360B2 (ja) | トレハルロースおよびパラチノースの製造法 | |
RU2439143C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Cupriavidus eutrophus ВКПМ В-10646 - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ | |
JPH03130090A (ja) | ポリグルタミン酸およびその塩の製造法 | |
RU2307159C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Azotobacter chroococcum 12А - ПРОДУЦЕНТ ПОЛИ-3-ОКСИБУТИРАТА И СОПОЛИМЕРА 3-ОКСИБУТИРАТА С 3-ОКСИВАЛЕРАТОМ | |
JP2925385B2 (ja) | ポリヒドロキシ有機酸エステルの製造法 | |
US7273733B2 (en) | Process for the isolation of polyhydroxybutyrate from Bacillus mycoides RLJ B-017 | |
JPH01304891A (ja) | ポリエステル共重合体の製造方法 | |
Mahitha et al. | Microbial polyhydroxybutyrate production by using cheap raw materials as substrates | |
KR930009560B1 (ko) | Pha를 합성하는 알카리게네스 속 미생물 | |
JPH05260984A (ja) | 3−ヒドロキシ酪酸および/またはその3量体の製造方法 | |
KR0129117B1 (ko) | 폴리히드록시알카네이트를 합성하는 바씨러스속 미생물 | |
WO2003033715A1 (en) | Stock culture of an azotobacter chroococum - producer of poly-$g(b)-hydroxybutirate and method for producing said poly-$g(b)-hydroxybutirate having a predetermined molecular mass |