RU2176505C2 - Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения - Google Patents
Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2176505C2 RU2176505C2 RU2000103397A RU2000103397A RU2176505C2 RU 2176505 C2 RU2176505 C2 RU 2176505C2 RU 2000103397 A RU2000103397 A RU 2000103397A RU 2000103397 A RU2000103397 A RU 2000103397A RU 2176505 C2 RU2176505 C2 RU 2176505C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- silver
- solution
- gold
- nitrate
- tetramethylthiazine
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине. Водорастворимое противовирусное лекарственное средство на основе соединений серебра и золота с N, N1-тетраметилтиазином нитратом при мольном соотношении соответственно 1:1:2 и отвечающее составу: С32Н36N9O9S2Cl Ag Au. К нагретому до 80-95oС водному раствору N,N1-тетраметилтиазина хлорида добавляют нитрат серебра при мольном отношении 1: 1. Осадок отфильтровывают. К раствору при 80-95oС добавляют водный раствор нитрата серебра, затем водный раствор соединения золота в форме треххлористого золота или тригидрата золотохлористоводородной кислоты, этиловый спирт при мольном отношении 2:1:1:1 соответственно. Полученный раствор направляют на сушку. Изобретение позволяет реализовать назначение средства и упростить процесс его получения. 2 с.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Водорастворимое противовирусное лекарственное средство на основе соединения серебра и соединения золота с N,N'-тетраметилтиазином нитратом (метиленовый синий в нитратной форме) при мольном соотношении соответственно 1:1:2 и отвечающее составу: C32H36N9O9S2Cl Ag Au и способ его получения.
Использование. Изобретение относится к водорастворимым противовирусным лекарственным средствам, к области фармацевтической химии и медицины. Изобретение относится также к способу получения этих средств. Изобретение может быть использовано для лечения смешанных вирусно-бактериальных инфекций, включая ВИЧ-инфекцию.
Цель - создание высокоэффективных противовирусных лекарственных препаратов, в особенности для лечения микст-инфекций, включая ВИЧ-инфекцию.
Сущность изобретения. Предложено новое противовирусное средство на основе соединения нитрата серебра и соединения золота с N,N'-тетраметилтиазином нитратом (метиленовый синий в нитратной форме) при мольном соотношении соответственно 1:1:2 и отвечающее составу: C32H36N9O9S2Cl Ag Au (табл. 1a).
Предложен также способ получения нового водорастворимого противовирусного лекарственного средства, заключающийся в том, что синтез осуществляют при температуре 80-95oC и мольном соотношении N,N'-тетраметилтиазина нитрата, нитрата серебра, соединения золота и этилового спирта 2:1:1:1, при этом в воде сначала растворяют метиленовый синий (N,N'-тетраметилтиазина хлорид), который переводят в нитратную форму добавлением нитрата серебра при мольном соотношении 1: 1, с последующей фильтрацией осадка хлорида серебра, и к отфильтрованному горячему раствору нитрата N,N'-тетраметилтиазина вновь добавляют водный раствор нитрата серебра, затем водный раствор соединения золота в форме треххлористого золота или тригидрата золотохлористоводородной кислоты и этиловый спирт при мольном соотношении 2:1:1:1 и направляют полученный раствор целевого продукта на сушку.
Положительный эффект способа получения нового лекарственного средства, заявляемого нами, по сравнению с прототипами (см. ниже Патент Австрии и Патент Германии) в том, что исключается стадия кристаллизации продукта и не требуется тщательная фильтрация от примеси хлористого серебра, остающейся в небольшом количестве за счет образования коллоидной формы, так как рекомендуемый нами способ применения лекарственного средства не предусматривает внутривенного введения, а рассчитан на применение путем лечебных ректальных клизм (готовая лекарственная форма - порошок во флаконах) или в виде энтеросолюбильных желатиновых капсул.
Изобретение относится к водорастворимым лекарственным средствам с широким спектром противовирусного и антибактериального действия, цитостатической активностью в анаэробных условиях в присутствии НАД-Н (восстановленная форма никотинамидадениндинуклеотида).
Изобретение относится также к способу получения таких лекарственных средств.
Заявленное комплексное решение может найти использование для производства готовых лекарственных форм препаратов широкого медицинского спектра действия, превосходящих in vivo по действию азидотимидин - АЗТ (отечественный препарат тимазид), большинство современных антибиотиков, цитостатиков типа цисплатин и других.
Оба заявляемых объекта - лекарственное средство и способ его получения, объединены общим творческим замыслом, направленным на улучшение технологии получения и воспроизводимости физико- химических свойств как лекарственной субстанции, так и готовых лекарственных форм.
Известны коммерческий препарат под названием Аргохром фирмы Мерк (производившийся в Германии примерно с 1916 по 1945 годы и поступавший по импорту в бывший СССР в довоенный период), состав которого подпадает под действовавший с 1914 г. Патент Австрии N 69476 и называвшийся до 1920 г. по-немецки Silber methylene blau, а также запатентованный в 1922 г. в Германии препарат на основе комплекса HAuCl4 или AuCl3 с метиленовым синим, описанным в Патенте Германии N 347376.
Известны также из этих патентов способы получения этих лекарственных средств. Эти патенты нами выбраны как ближайшие аналоги-прототипы нашего нового лекарственного средства и способа его получения.
Известные составы этих лекарственных средств и способы их получения характеризуются тем, что процентное содержание серебра в Аргохроме составляет примерно 20 вес.%, а содержание золота в аналогичном препарате по патенту Германии составляет примерно 30 вес.%, а в заявляемом нами новом лекарственном средстве суммарное весовое содержание этих металлов составляет 27-28 вес.%.
Технология получения нового лекарственного средства отличается простотой химического синтеза, аппаратурной схемы производства, включающей стадию эффективной сушки реакционной массы до порошка, контроль за процессом химического синтеза методом редоксметрии по ионам Cl-, NO3 -, Ag+.
Известный способ получения комплекса AgNO3 с метиленовым синим реализуется следующими технологическими операциями.
1. Растворение в теплой воде метиленовой сини (хлорид) до концентрации 9-10 вес. % и добавление водного раствора AgNO3 с концентрацией 20-25 вес.% при мольном соотношении реагентов метиленовый синий: AgNO3 = 1:1.
2. Фильтрация полученного теплого раствора и отделение осадка AgCl.
3. Нагревание полученного фильтрата до кипения и смешивание его с раствором 9-10 вес.% AgNO3 при мольном соотношении нитрата метиленового синего, полученного после фильтрации, и AgNO3 = 1:1.
4. Выпаривание раствора до 1/20 первоначального объема.
5. Фильтрация выпавших кристаллов целевого продукта.
6. Растворение целевого продукта в горячей воде.
7. Фильтрация раствора от дополнительно выпавшего AgCl.
8. Упаривание раствора полностью на ротационном испарителе.
9. Сушка выпавших кристаллов.
Известный способ получения комплекса метиленового синего с ионным препаратом золота реализуется следующими технологическими операциями.
1. Спиртовый раствор HAuCl4•3H2O с концентрацией 35-40 вес.% смешивается со спиртовым раствором 9-10 вес.% метиленового синего при мольном соотношении реагентов 1:1.
2. Реакционная масса нагревается почти до кипения.
3. Упаривание раствора до 1/20 первоначального объема.
4. Охлаждение раствора и кристаллизация.
5. Сушка кристаллов.
Заявляемый способ получения нового лекарственного средства описывается следующим примером конкретной реализации
Пример.
Пример.
В защищенный от света стеклянный реакционный аппарат, снабженный полимерной мешалкой, капельной воронкой и барботером для продувки инертным газом, загружают 373,9 г метиленового синего в виде 9-10 вес.% водного раствора, нагретого до температуры 80-95oC и при этой температуре добавляют 169,9 г AgNO3 в виде 25 вес. % водного раствора комнатной температуры. Фильтруют реакционную массу от выпавшего в осадок AgCl. К нагретому почти до кипения раствору добавляют 9-10 вес.% раствор AgNO3 в количестве 84,95 г в расчете на безводный нитрат серебра. Полученный раствор смешивают при нагревании почти до кипения с водно-спиртовым раствором комнатной температуры HAuCl4•3H2O с концентрацией 35 вес.% в количестве 196,9 г в расчете на основное вещество в форме тригидрата. Затем полученную реакционную массу выдерживают при температуре 80-90oC в течение 30 минут. Полученный водный раствор целевого продукта упаривают досуха на ротационном испарителе.
Примечание. Водно-спиртовый раствор HAuCl4•3H2O содержит 23,03 г этилового спирта в пересчете на безводный.
При описанном выше способе потери драгоценных металлов составляют не более 0,01 вес.% от загруженных препаратов в пересчете на металлы.
Исследование анти-ВИЧ активности препаратов NN 1,2
Оценка цитотоксичности соединений.
Оценка цитотоксичности соединений.
Цитотоксичность исследуемых соединений оценивали на культуре перевиваемых Т лимфоцитов человека (линия МТ-4). Из исходных растворов исследуемых соединений готовили последовательные 10-кратные разведения на основе питательной среды RPMI-1640 (от 0,1% до 0,00001%) и в соответствующих разведениях вносили по 200 мкл в лунки 96-луночных планшетов (по три на каждое разведение) при рассеве клеток. Посевная концентрация клеток составляла 0,5•106 клеток/мл. Конечная концентрация препаратов в клеточной суспензии составляла от 0,01% до 0,000001%. Клетки культивировали в 96-луночных планшетах для культур клеток фирмы "Costar" (США) на ростовой питательной среде (среда RPMI-1640 с добавлением 10% сыворотки плода коровы, 0,06% L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина) при 37oC и 5% CO2 в течение 4 суток.
По окончании инкубации подсчитывали долю жизнеспособных клеток в камере Горяева после окрашивания трипановым синим. Строили дозозависимую кривую и определяли концентрацию соединений, вызывающую гибель 50% клеток - CD50 (см. табл. 1)
Оценка анти-ВИЧ активности соединений.
Оценка анти-ВИЧ активности соединений.
Для оценки анти-ВИЧ активности соединений клетки ИТ-4 (концентрация 2•106 клеток/мл) инфицировали штаммом ВИЧ-1EVK с множественностью заражения 0,2-0,5 инфекционных единиц на клетку. После адсорбции вируса в течение 1 часа при 37oC инфицированные и контрольные клетки (без вируса) разводили ростовой культуральной средой до посевной концентрации 5•105 клеток/мл и вносили в лунки 96-луночных культуральных планшетов. Затем в соответствующие лунки вносили растворы исследуемых соединений (по три лунки на каждое разведение) и далее культивировали, как описано выше. В качестве эталонного препарата использовали азидотимидин (АЗТ) - известный анти-ВИЧ агент - в концентрации 0,1 мкг/мл. Конечная концентрация исследуемых препаратов в клеточной суспензии составляла от 0,01% до 0,000001%.
Ингибирующий эффект соединений оценивали на 4-е сутки культивирования по ЦПД вируса исходя из степени защиты инфицированных клеток от гибели в результате вирусной инфекции. Для этого определяли долю жизнеспособных клеток подсчетом в камере Горяева после окрашивания трипановым синим. На основании полученных результатов рассчитывали количественные характеристики ингибирования репродукции ВИЧ: ID50 - концентрацию соединения, на 50% подавляющую продукцию вируса или вызывающую 50% защиту клеток; IS - индекс селективности - отношение токсичной дозы соединения CD50 к его эффективной дозе ID50.
Результаты проведенных исследований.
В результате проведенных экспериментов установлены для исследуемых препаратов NN 1, 2 цитотоксические дозы, которые составили для препарата N 1 CD50=0,0001%, для препарата N 2 CD50=0,0005%.
При исследовании анти-ВИЧ активности этих препаратов оказалось, что препарат N 1 в концентрации 0,00001% существенно снижает ЦПД вируса, т.е. защищает на 76% инфицированные клетки от гибели вследствие инфекции (см. табл. 2). Доля жизнеспособных клеток в других пробах с препаратами всюду практически не превышала, а в некоторых пробах была ниже таковой в контроле инфицированных клеток МТ-4(ВИЧ) - 42%. Эталонный препарат АЗТ в концентрации 0,1 мкг/мл в этом эксперименте обеспечивал на 100% защиту инфицированных клеток (доля жизнеспособных клеток в этой пробе 92,15%).
Для более полной характеристики анти-ВИЧ активности представленных препаратов была проведена количественная оценка вирусного антигена р24 иммуноферментным методом (см. табл. 3).
Согласно представленным в табл. 3 экспериментальным данным по оценке степени ингибирования накопления вирусспецифического белка р24 исследуемыми препаратами NN 1, 2 в культуре клеток МТ-4 оба препарата проявляют выраженную анти-ВИЧ активность в диапазоне концентраций от 0,01 до 0,0001%. Эталонный препарат АЗТ ингибирует репродукцию ВИЧ на 92% в концентрации 0,1 мкг/мл.
На основании проведенных исследований были определены все необходимые количественные характеристики ингибирования репродукции ВИЧ в культуре клеток МТ-4: ID50, CD50, IS, которые представлены в табл. 4.
Следует отметить, что оба препарата имеют невысокие индексы селективности - 5 и 7, но в случае препарата N 1 проявляется в отличие от препарата N 2 существенное защитное действие (IS=10).
При необходимости можно уточнить полученные количественные характеристики, взяв в эксперимент не 10-ти, а, например, 2-кратные разведения исходных препаратов.
Claims (2)
1. Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью на основе соединения серебра и соединения золота с N,N1-тетраметилтиазином нитратом при мольном соотношении соответственно 1:1:2 и отвечающее составу: С32Н36N9O9S2ClAgAu.
2. Способ получения водорастворимого средства, обладающего противовирусной активностью по п.1, заключающийся в том, что к нагретому до 80-95oС водному раствору N,N1-тетраметилтиазина хлорида добавляют нитрат серебра при мольном отношении 1:1 с последующей фильтрацией осадка хлорида серебра и к отфильтрованному раствору нитрата N,N1-тетраметилтиазина при 80-95oС вновь добавляют водный раствор нитрата серебра, затем водный раствор соединения золота в форме треххлористого золота или тригидрата золотохлористоводородной кислоты, этиловый спирт при мольном отношении 2:1:1:1 соответственно и полученный раствор направляют на сушку.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000103397A RU2176505C2 (ru) | 2000-02-15 | 2000-02-15 | Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000103397A RU2176505C2 (ru) | 2000-02-15 | 2000-02-15 | Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2000103397A RU2000103397A (ru) | 2001-09-20 |
RU2176505C2 true RU2176505C2 (ru) | 2001-12-10 |
Family
ID=20230528
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2000103397A RU2176505C2 (ru) | 2000-02-15 | 2000-02-15 | Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2176505C2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005054217A1 (en) * | 2003-11-28 | 2005-06-16 | Photopharmica Limited | Developments in biologically active methylene blue derivatives (2) |
WO2005110389A1 (fr) * | 2004-05-12 | 2005-11-24 | Germanov, Evgeny Pavlovich | Preparation medicinale |
-
2000
- 2000-02-15 RU RU2000103397A patent/RU2176505C2/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005054217A1 (en) * | 2003-11-28 | 2005-06-16 | Photopharmica Limited | Developments in biologically active methylene blue derivatives (2) |
WO2005110389A1 (fr) * | 2004-05-12 | 2005-11-24 | Germanov, Evgeny Pavlovich | Preparation medicinale |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101770011B1 (ko) | 5-아미노-2,3-디히드로프탈라진-1,4-디온 나트륨염에 대한 결정 형태, 이를 함유하는 약제학적 제제 및 상기 형태를 제조하기 위한 방법 | |
JP3219235B2 (ja) | 白金錯体 | |
JP3697210B2 (ja) | 二重ジカルボン酸ジアミノプラチン錯体の抗腫瘍誘導体、その調製方法、それを含む薬剤組成物及びその誘導体の適用方法 | |
SU886748A3 (ru) | Способ получени антрациклиновых гликозидов | |
CN111100006B (zh) | 一种3-咖啡酰奎尼酸衍生物及其制备方法和用途 | |
US5922689A (en) | Cisplatin analogs for cancer treatment | |
KR101700734B1 (ko) | 아미노산과 카르복실산을 포함한 게르마늄의 착체 및 이를 제조하는 방법 | |
WO2001076569A2 (en) | An improved pt(iv) antitumor agent | |
EP1289923A2 (en) | Epithelial cell cancer drug | |
RU2176505C2 (ru) | Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения | |
US4843161A (en) | Platinum-intercalative complexes for the treatment of cancer | |
JPH09505579A (ja) | イノシトール三燐酸エステルの薬剤調製への使用 | |
JP4598227B2 (ja) | 放射線および化学療法における感受性増強剤である化合物、並びにそれらの製造方法および使用 | |
RU2277908C1 (ru) | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения | |
CN101239990B (zh) | N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-l-氨基酸合铂、其制备方法及应用 | |
JP3595352B2 (ja) | 抗腫瘍剤及び抗菌剤 | |
CN111228276B (zh) | 一种具有抗菌活性的溴代草酰胺双核铜配合物及其组合物 | |
JPH04211016A (ja) | 抗−ウィルス活性を有する化合物及びそれを含む医薬組成物 | |
US5093327A (en) | Inhibition of HIV and other retroviruses by polyoxoanions | |
C. Tella et al. | Copper (II) Complexes of 4, 4‐Diaminodiphenylsulphone: Synthesis, Characterization and Biological Studies | |
CS269719B1 (en) | Platinum cytostatic | |
JPS62294616A (ja) | 抗真菌用薬剤 | |
JPS6252757B2 (ru) | ||
US9315476B2 (en) | Antiviral water-soluble product with anti-HIV effect, based on ionic silver and methylene blue compound; method of its production and examples of HIV-infected patients' treatment | |
AU647800B2 (en) | Antiviral agents containing heteropolytungstate |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080216 |