RU2087155C1 - Изделие для парентеральной имплантации животному - Google Patents
Изделие для парентеральной имплантации животному Download PDFInfo
- Publication number
- RU2087155C1 RU2087155C1 SU884355449A SU4355449A RU2087155C1 RU 2087155 C1 RU2087155 C1 RU 2087155C1 SU 884355449 A SU884355449 A SU 884355449A SU 4355449 A SU4355449 A SU 4355449A RU 2087155 C1 RU2087155 C1 RU 2087155C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- growth hormone
- somatotropin
- cows
- days
- acc
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 18
- 238000002513 implantation Methods 0.000 title claims description 20
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 194
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 194
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 133
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 43
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 35
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 12
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 claims description 10
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 7
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 claims description 4
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 78
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 96
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 description 44
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 42
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 37
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 32
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 32
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 32
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 27
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 26
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 25
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 21
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 21
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 20
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 14
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 13
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 12
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 11
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 11
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 9
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 8
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 7
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 7
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 7
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- LIWMQSWFLXEGMA-WDSKDSINSA-N Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N LIWMQSWFLXEGMA-WDSKDSINSA-N 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 229940045870 sodium palmitate Drugs 0.000 description 6
- GGXKEBACDBNFAF-UHFFFAOYSA-M sodium;hexadecanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O GGXKEBACDBNFAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 5
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000011253 protective coating Substances 0.000 description 5
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 5
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 4
- -1 hydrochloric Chemical class 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 3
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 3
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 235000012438 extruded product Nutrition 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 229920000260 silastic Polymers 0.000 description 2
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 229920003176 water-insoluble polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical class O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- JPNZKPRONVOMLL-UHFFFAOYSA-N azane;octadecanoic acid Chemical class [NH4+].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O JPNZKPRONVOMLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 229920006217 cellulose acetate butyrate Polymers 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000007580 dry-mixing Methods 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 244000309465 heifer Species 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WABYCCJHARSRBH-UHFFFAOYSA-N metaclazepam Chemical group C12=CC(Br)=CC=C2N(C)C(COC)CN=C1C1=CC=CC=C1Cl WABYCCJHARSRBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 150000002942 palmitic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006069 physical mixture Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005597 polymer membrane Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001764 somatotrope Anatomy 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L zinc 5-[2,3-dihydroxy-5-[(2R,3R,4S,5R,6S)-4,5,6-tris[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxy]-2-[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxymethyl]oxan-3-yl]oxycarbonylphenoxy]carbonyl-3-hydroxybenzene-1,2-diolate Chemical compound [Zn++].Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)OC[C@H]1O[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H]1OC(=O)c1cc(O)c(O)c(OC(=O)c2cc(O)c([O-])c([O-])c2)c1 MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/27—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Silicon Polymers (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии. Изделие для парентеральной имплантации, содержащее эффективную дозу соматотропина, которое выполнено в форме твердого тела, приспособленного для парентерального введения животному, имеет по крайней мере одну непокрытую поверхность, причем твердый соматотропин выбирают из группы, состоящей из свиного соматотропина, бычьего соматотропина или микробно-экспрессированного соматотропина. 7 з.п. ф-лы, 13 табл., 3 ил.
Description
Изобретение относится к соматотропину пролонгированного действия, более конкретно к формованным изделиям, пригодным для парентерального введения соматотропинов, и к способам введения соматотропинов путем парентеральной имплантации таких формованных изделий.
Известно, что соматотропины при парентеральном введении усиливают рост, эффективность питания, молочную продуктивность и улучшают соотношение жир - постное мясо у различных животных. Хотя это может быть достигнуто путем ежедневных инъекций соматотропинов, системы пролонгированного действия являются более легкими для введения и иногда приводят к высоким результатам благодаря постоянной концентрации соматотропина в крови.
До настоящего времени используются различные методы для обеспечения пролонгированного выделения соматотропинов. Соматотропин диспергировали в биосовместимом масле, в некоторых случаях в присутствии обезвоживающего агента (см. Европейская заявка на патент 177478, опубликованная 9 апреля 1986 года). Получали комплекс соматотропина с водорастворимыми или вододиспергируемыми углеводными полимерами, такими как декстрин, декстран, различные смолы. Этот комплекс вводили парентерально в виде раствора, дисперсии или пасты (см. европейская заявка на патент 193917, опубликованная 10 сентября 1986 года). Соматотропин также вводили в состав с холестерином и прессовали в форму матричного имплантанта (см. патент США 4452775 Кента, выданный 5 июня 1984 года).
Известно большое количество систем парентеральной имплантации изделий для высвобождения различных биоактивных материалов. В европейской заявке ЕР-О-204476 описан состав, пригодный для имплантации, который обеспечивает контролируемое высвобождение макромолекулярного медикамента. Этот состав содержит ядро, состоящее из макромолекулярного медикамента и нерастворимого в воде полимера, и гомогенную порообразующую внешнюю полимерную мембрану. Мембрану получают путем нанесения на ядро раствора нерастворимого в воде полимера высокой молекулярной массы и водорастворимого порообразующего агента в органическом растворителе с последующим удалением этого растворителя.
В известных на данном уровне техники системах высвобождение активного вещества регулируется матричным агентом, связующим или покрытием. Высвобождение осуществляется путем диффузии через матричный агент, связующее или покрытие, или их эрозии. Пролонгированное высвобождение соматотропина происходит по системе, когда растворение активного соматотропина ингибируется одним веществом, а высвобождение регулируется другим.
Технический результат изобретения состоит в обеспечении парентерального введения соматотропина без необходимости в другом веществе для контроля его высвобождения. До настоящего изобретения из уровня техники не было известно парентерального введения соматотропина в виде формованного изделия, которое не имеет матрицы, не имеет связующего, но имеет по крайней мере одну непокрытую поверхность высвобождения.
Настоящее изобретение предлагает новую и полезную систему для парентерального введения соматотропина животному путем парентеральной имплантации формованного изделия, состоящего из эффективной дозы твердого соматотропина, который практически не содержит связующего, не содержит матрицы и имеет, по крайней мере, одну непокрытую поверхность высвобождения. В другом аспекте настоящее изобретение представляет собой формованное изделие для парентерального введения соматотропина животному, состоящее по существу из твердого соматотропина (иногда с эффективным количеством смазки и в некоторых случаях имеющее покрытие на одной или более поверхностях) и с, по крайней мере, одной непокрытой поверхностью для высвобождения. Использованная здесь фраза "состоящий по существу из" означает, что изделие не содержит каких-либо компонентов, которые действуют как матричный агент или связующее. Каждый из этих терминов определен ниже.
Изобретение иллюстрируется фигурами 1, 2, 3.
На фиг. 1 графически представлена молочная продуктивность обработанных и контрольных коров по примеру 2.
На фиг. 2 представлена концентрация соматотропина в сыворотке обработанных и контрольных кормов по примеру 2.
На фиг. 3 представлена концентрация соматотропина в сыворотке обработанных MBS нелактирующих коров по примеру 3.
Использованные в описании и в формуле изобретения слова имеют следующие значения:
Термин "матрица", упоминаемый также как "матричный агент", означает носитель, имеющий форму твердого тела, который образует сетку с диспергированными внутри частицами соматотропина, в результате чего ингибируется его растворение. Высвобождение соматотропина регулируется эрозией матричного агента или диффузией соматотропина через проходы в сетке матричного агента.
Термин "матрица", упоминаемый также как "матричный агент", означает носитель, имеющий форму твердого тела, который образует сетку с диспергированными внутри частицами соматотропина, в результате чего ингибируется его растворение. Высвобождение соматотропина регулируется эрозией матричного агента или диффузией соматотропина через проходы в сетке матричного агента.
Термин "связующее" относится к полимерным материалам синтетического или биологического происхождения, которые используются для повышения адгезии между частицами соматотропина или между частицами соматотропина и матричного агента.
Фразы "по существу не содержащий связующего" и "по существу не содержащий матрицы" означают, что формованное изделие не содержит достаточного количества связующего или матричного агента, чтобы оказать заметное воздействие на высвобождение соматотропина.
Фраза "по крайней мере одна непокрытая поверхность высвобождения" означает, что, по крайней мере, часть поверхности изделия не имеет покрытия, которое препятствует высвобождению соматотропина. Эта непокрытая поверхность высвобождения может быть как цельной поверхностью изделия, например одним или двумя концами цилиндрического изделия, или же непокрытой площадью на большей поверхности изделия, например одна или более непокрытых площадок на сферическом изделии, или одна или более непокрытых площадок на кривой поверхности цилиндрического изделия.
Термин "соматотропин" означает полипептид, имеющий биологическую активность и химическую структуру, подобную той, что имеет соматотропин, продуцируемый гипофизной железой животных. Такой соматотропин включает природный соматотропин, продуцируемый гипофизными соматотропными клетками, и альтернативно, соматотропин, получаемый с помощью техники рекомбинантной ДНК, при которой соматотропин экспрессируется с помощью генетически трансформированных клеток. Подходящие системы включают культуру ткани трансформированных клеток и экспрессию белка в трансформированных микробах, таких как E. coli, другие бактерии, дрожжи, и тому подобное. Из-за соображений продуктивности предпочтительным является использование соматотропина, экспрессированного в микробной клетке.
Соматотропин, продуцируемой такой рекомбинантной ДНК, может иметь аминокислотную последовательность, идентичную соматотропину природного происхождения. При этом встречаются варианты, у которых аминокислотные остатки или добавлены к, или извлечены из, или отличаются от аминокислотной последовательности встречающегося в природе соматотропина при условии, что такие вставки, делеции или замены в аминокислотной последовательности не оказывают вредного воздействия на биоактивность соматотропина. В объем изобретения также включены соматотропины, которые являются солями или комплексами с анионами или катионами. Эти комплексы могут быть осаждены или лиофилизированы в присутствии неорганического или органического соединения, такого как соль, с образованием гомогенной смеси или могут быть образованы при смачивании сухой смеси соматотропина и соединения, содержащего желаемый ион. Смеси соматотропинов или многослойные соматотропины входят в объем изобретения.
Примерами соматотропинов, полезных для настоящего изобретения, являются птичий соматотропин для обработки цыплят, индеек и т.п. соматотропины млекопитающих для обработки людей, коров, свиней, овец, коз и т.п. водный соматотропин для обработки рыб и т.п. Особенно полезными являются бычий соматотропин и свиной соматотропин.
Для получения значительного количества соматотропина предпочтительно использовать технику рекомбинантной ДНК с использованием микробных клеток в качестве системы экспрессии. Техника рекомбинантной ДНК позволяет продуцировать варианты соматотропина, которые имеют аминокислотную последовательность, совпадающую или отличающуюся от последовательностей природно встречающихся соматотропинов. Последовательности для природных бычьего и свиного соматотропинов приведены Seeburg и др. DNA, том 2, N 1, стр. 37-45 (1983). В приведенных ниже вариантах соматотропина N-метионин может быть удален во время или после экспрессии.
Примеры вариантов бычьего соматотропина включают, но не ограничиваются полипептидами, имеющими следующие последовательности аминокислот с неспецифическими аминокислотными остатками, являющимися подобными природно встречающемуся соматотропину:
NH2-met-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-ala-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-ala-phe(1(-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-met-asp-glu-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met-asp-glu-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-ser(5).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-ser(5).val(126).phe(190)-COOH
Как можно видеть из приведенного выше, эти варианты необязательно могут иметь метиониновый остаток на N-конце. Первый вариант в приведенном выше списке с метиониновым остатком у N-конца и лейциновым остатком в положении 126 упоминается здесь как метиониновый бычий соматотропин или "МБС", а третий вариант с аланиновым остатком на N-конце и валиновым остатком в положении 126 упоминается как аланил-валиновый бычий самототропин или "ала-вал БСТ".
NH2-met-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-ala-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-ala-phe(1(-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-met-asp-glu-phe(1)-pro(2).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met-asp-glu-phe(1)-pro(2).val(126).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-ser(5).leu(126).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-ser(5).val(126).phe(190)-COOH
Как можно видеть из приведенного выше, эти варианты необязательно могут иметь метиониновый остаток на N-конце. Первый вариант в приведенном выше списке с метиониновым остатком у N-конца и лейциновым остатком в положении 126 упоминается здесь как метиониновый бычий соматотропин или "МБС", а третий вариант с аланиновым остатком на N-конце и валиновым остатком в положении 126 упоминается как аланил-валиновый бычий самототропин или "ала-вал БСТ".
Примеры вариантов свиного соматотропина включают, но не ограничиваются полипептидами, имеющими следующие аминокислотные последовательности с неспецифическими аминокислотными остатками, подобными природно встречающемуся соматотропину:
NH2-ala-phe(1).phe(190)-COOH
NH2-met-phe(1).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-pro(5).phe(190)-COOH
NH2-met(6)-ser(190)-COOH
Первый вариант в приведенном списке с аланиновым остатком у N-конца упоминается здесь как аланиновый свиной соматотропин или "АСС". Второй вариант упоминается как метиониновый свиной соматотропин или "МСС".
NH2-ala-phe(1).phe(190)-COOH
NH2-met-phe(1).phe(190)-COOH
NH2-met(4)-pro(5).phe(190)-COOH
NH2-met(6)-ser(190)-COOH
Первый вариант в приведенном списке с аланиновым остатком у N-конца упоминается здесь как аланиновый свиной соматотропин или "АСС". Второй вариант упоминается как метиониновый свиной соматотропин или "МСС".
Хотя использование вариантов в некоторых случаях может быть полезным и выгодным, должна быть проявлена известная осторожность, чтобы вариант не отличался от природно встречающегося соматотропина до такой степени, чтобы не сохранилась его биологическая активность или чтобы вариант не вызывал неприемлемого продуцирования нежелательных антител.
При этом биологически активный соматотропин должен быть натуральным, то есть иметь складчатую структуру, приводящую в результате к биологической активности. Хотя предпочтительно свести к минимуму наличие неактивного полипептида и неактивного полипептидного агрегата, некоторое их количество может присутствовать при условии, что они не ингибируют биологическую активность соматотропина.
В известном уровне техники высвобождение соматотропина из системы пролонгированного действия регулируется механизмом, включающим другой компонент системы, например эрозию матрицы и т.п. В настоящем изобретении высвобождение соматотропина регулируется свойствами самого соматотропина и до некоторой степени может также осуществляться с помощью таких факторов, как размер и форма изделия и процесс его изготовления.
Свойствами соматотропина, которые оказывают наибольшее воздействие на характеристики высвобождения, являются его растворимость и скорость его растворения. Это сочетание свойств далее будет упоминаться как "присущая растворимость". Присущая растворимость и некоторые другие свойства соматотропина могут быть использованы различными путями. Различные варианты соматотропина часто обладают несколько различающимися растворителями и/или скоростями растворения и наличие присущей соматотропину растворимости иногда, до некоторой степени, может оказывать влияние на выбор варианта соматотропина. Способ выделения твердого соматотропина, например pH осаждения осаждаемого соматотропина или условия лиофилизации раствора лиофилизируемого соматотропина, могут также до некоторой степени оказывать воздействие на присущую растворимость. Присущая растворимость также может регулироваться использованием соматотропина, который ассоциирован с другим ионом или другим соединением, таким как соль. Действительная структура этого типа ассоциации не ясна, но полагают, что они являются солями, комплексами, гомогенными смесями, образовавшимися при соосаждении, или некоторым сочетанием этих трех форм. В этом описании и в формуле изобретения, когда желательно указать соматотропин, который ассоциирован с конкретным ионом или конкретной солью, следует указывать, например, ассоциированный с цинком бычий соматотропин, ассоциированный с медью свиной соматотропин, или ассоциированный с бикарбонатом натрия бычий соматотропин. При упоминании в общем виде он будет просто называться как ассоциированный соматотропин.
Ассоциированные соматотропины могут быть образованы с нетоксичными количествами различных катионов, включая как моновалентные металлы, так и поливалентные металлы. Примерами подходящих моновалентных металлов являются натрий, калий и т.п. Примерами подходящих поливалентных металлов являются цинк, железо, кальций, висмут, барий, магний, марганец, алюминий, медь, кобальт, никель, кадмий и т.п. Однако в отношении поливалентных металлов, которые в некоторых условиях могут быть токсичными, следует использовать нетоксичные количества этих веществ. Ассоциированные соматотропины также могут быть образованы с анионами, такими как бикарбонат, ацетат, глицин, борат и т. п. Также может быть использовано сочетание катионов, анионов и других соединений с соматотропином. Отношение катиона, аниона или другого соединения к соматотропину может меняться в зависимости от условий и используемого соматотропина. Некоторые или все ионы могут быть ассоциированы в соль одной из аминокислот в соматотропине, могут быть включены внутрь складок или кристаллов соматотропина, могут быть ассоциированы в виде ионного мостика между по крайней мере двумя молекулами соматотропина, могут быть ассоциированы в виде комплекса с соматотропином, или могут быть ассоциированы каким-либо другим образом.
Примерами других ассоциированных соматотропинов являются:
а) соли с кислотными примесями, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная, бромистоводородная, серная, фосфорная или азотная кислоты; или с органическими кислотами, такими как уксусная, щавелевая, винная, янтарная, малеиновая, фумаровая, глюконовая, лимонная, яблочная, аскорбиновая, бензойная, дубильная, альгиновая, pamoic, полиглютаминовая, нафталинсульфоновая, нафталиндисульфоновая или полигалактуроновая кислоты;
б) соли с полифункциональными органическими соединениями, такими как N, N'-дибензилэтилендиамин или этилендиамин или новокаин; или
в) сочетания двух или более вышеупомянутых типов солей, таких как таннат цинка.
а) соли с кислотными примесями, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная, бромистоводородная, серная, фосфорная или азотная кислоты; или с органическими кислотами, такими как уксусная, щавелевая, винная, янтарная, малеиновая, фумаровая, глюконовая, лимонная, яблочная, аскорбиновая, бензойная, дубильная, альгиновая, pamoic, полиглютаминовая, нафталинсульфоновая, нафталиндисульфоновая или полигалактуроновая кислоты;
б) соли с полифункциональными органическими соединениями, такими как N, N'-дибензилэтилендиамин или этилендиамин или новокаин; или
в) сочетания двух или более вышеупомянутых типов солей, таких как таннат цинка.
Многие из достоинств ассоциированных соматотропинов могут быть достигнуты при смешении порошкообразного соматотропина с солью желаемого катиона или аниона, или желаемым соединением до образования изделия. Ассоциированный соматотропин образуется in situ во время образования изделия или после введения изделия животному.
Если ассоциированный соматотропин является относительно мало растворимым он может быть получен при добавлении желаемой водорастворимой соли или водорастворимого соединения с желаемым ионом к раствору соматотропина при желаемом pH для осаждения желаемого ассоциированного соматотропина. Например, ассоциированный с цинком бычий или свиной соматотропин может быть получен при добавлении водорастворимой соли цинка к водному раствору соматотропина, забуферированному подходящим буферным агентом. Предпочтителен pH от примерно 9 до примерно 9,5.
Если ассоциированный соматотропин является относительно более растворимым, он может быть получен путем лиофилизации раствора соматотропина с желаемой солью или желаемыми ионами. Этот раствор может быть получен многократным диализом или диафильтрацией, например, раствора мочевины для обмена мочевины на желаемую соль с последующим диализом или диафильтрацией воды для снижения концентрации соли до желаемого уровня. Например, бычий соматотропин, ассоциированный с бикарбонатом натрия, может быть получен путем диафильтрации или диализа мочевинного раствора соматотропина для достижения полного обмена мочевины на раствор бикарбоната натрия с последующей дополнительной диафильтрацией воды для удаления избытка бикарбоната натрия и последующей лиофилизацией для получения соматотропина, ассоциированного с бикарбонатом натрия.
Соматотропины часто перерабатывают и очищают в буферном растворе, таком как бикарбонат натрия. Предпочтительно регулировать концентрацию бикарбоната натрия диализом или диафильтрацией до желаемой концентрации. Можно поддерживать pH в интервале, в котором соматотропин является растворимым при добавлении основания, такого как NaOH, для диализа воды или раствора соматотропина. Затем соматотропин может быть извлечен многими способами, такими как установление pH с помощью подходящей кислоты, такой как HCl, для осаждения соматотропина, с последующей диафильтрацией и лиофилизацией или путем прямой лиофилизации раствора соматотропина.
Предпочтительно, чтобы соматотропин, полученный таким образом, имел концентрацию буферной соли, например бикарбоната натрия, от примерно 0% до примерно 20% более предпочтительно от примерно 0% до примерно 5% а еще более предпочтительно около 1% или менее. Более высокие концентрации бикарбоната натрия повышают присущую растворимость соматотропина, приводя в результате к продукту, высвобождающемуся в течение более короткого периода времени. Более низкие концентрации бикарбоната натрия наоборот приводят в результате к продукту, высвобождающемуся в течение более длительного периода времени. Таким образом, продукт может быть подобран в соответствии с желаемым периодом времени высвобождения.
Другим способом получения соматотропина является выделение и очистка соматотропина, которую обычно проводят в щелочных условиях с последующим диализом для удаления некоторой части буфера и добавлением кислоты, такой как фосфорная кислота, для получения кислотного раствора соматотропина. Соматотропин затем может быть извлечен из этого кислотного раствора, например, при добавлении основания для увеличения pH раствора до точки, когда соматотропин будет осаждаться. При этом необходимо учитывать то, что pH нельзя снижать настолько, чтобы соматотропин денатурировался.
Свиной соматотропин обладает присущей растворимостью, которая иногда выше, чем у бычьего соматотропина. По этой причине предпочтительно использовать свиной соматотропин, ассоциированный с медью. Этот ассоциированный с медью соматотропин может содержать примерно 0,1-3% меди, предпочтительно 0,1-2% меди, а более предпочтительно примерно 0,1-1% меди. Особенно предпочтительно, чтобы свиной соматотропин, ассоциированный с медью, имел молярное отношение меди к соматотропину примерно 1:1, что соответствует примерно 0,3% Ассоциированный с медью свиной соматотропин обеспечивает повышение пролонгированного высвобождения и улучшенную эффективность высвобождения свиного соматотропина. Кроме того, имеется определенное указание, что свиной соматотропин, ассоциированный с медью, обладает пониженной тенденцией к образованию димеров и других агрегатов, особенно после введения животным. Предпочтительным вариантом является АСС.
Многие преимущества осажденного ассоциированного с медью свиного соматотропина могут быть достигнуты при использовании физической смеси свиного соматотропина с соответствующим количеством медной соли. При использовании сухой смеси в композицию следует добавить дополнительное количество медной соли по сравнению с количеством, требующимся для получения ассоциированного с медью соматотропина с желаемыми свойствами. Например, сухая смесь медной соли и свиного соматотропина при молярном соотношении 2:1 меди к соматотропину будет обладать характеристиками высвобождения, подобными осажденному ассоциированному с медью свиному соматотропину, имеющему молярное соотношение 1: 1. Ассоциированный с медью свиной соматотропин образуется in situ во время прессования или, более вероятно, после введения.
Высвобождение соматотропина также может регулироваться с помощью контроля геометрии изделия. Это может быть сделано, например, путем выбора размера и формы изделия или путем заключения части поверхности изделия в оболочку. Обе методики обсуждаются ниже.
Формованные изделия из соматотропина, заявленные в настоящем изобретении, могут быть получены с использованием традиционных методик, таких как сжатие, наращивание распылительной сушкой, комкование, формование влажной пасты и сушка формованного изделия и т.п. Поскольку сжатие является наиболее обычным используемым методом для образования парентеральных имплантантов и ради простоты в настоящем изобретении будет обсуждаться метод получения изделия путем сжатия.
Изделие может быть получено на традиционной таблетирующей машине с использованием матриц соответствующего размера и формы и применением давления в традиционных интервалах. Могут быть использованы традиционные приемы и процедуры таблетирования, например, соматотропин может быть предварительно сжат и измельчен в порошок для улучшения характеристик переработки и текучести.
Получение изделия может быть усовершенствовано при тщательном выборе его размера и формы. Изделие может быть цилиндрическим, сферическим, яйцеобразной формы или любой другой традиционной формы. Для того, чтобы довести до максимума период времени, в течение которого происходит высвобождение, предпочтительно использовать форму, которая имеет минимальную площадь поверхности для данной дозировки. Если используют одноразовое изделие, оно может быть выполнено в виде сферического имплантанта или в виде цилиндрического имплантанта, у которого высота цилиндра примерно равна его диаметру. Однако могут быть использованы другие формы и размеры, если по ряду причин желательно обеспечить более короткое время высвобождения. Например, выгодно получать изделие, которое может быть введено с использованием традиционных устройств, используемых для парентерального введения пилюль или таблеток. Если используют эти "приспособления для имплантации", предпочтительно, чтобы формованное изделие настоящего изобретения было цилиндрическим и имело диаметр между примерно 1 и 5 мм, а высоту между примерно 1 мм и 25 мм. Однако могут быть использованы диаметры от примерно 0,5 мм до примерно 12 мм и высота от примерно 1 мм до примерно 50 мм, но, при желании, можно использовать размеры, выходящие за эти пределы. В случае осуществления имплантации хирургически требуются определенные размеры и форма изделия в зависимости от места введения. Могут быть имплантированы многочисленные изделия, в случае, если желаемая доза слишком велика для традиционного введения в одном изделии, или по некоторым другим причинам, например большая гибкость дозы.
Предпочтительно, чтобы присущая растворимость и площадь поверхности высвобождения были регулируемыми для достижения средней дневной дозы высвобождения. Для повышения выхода молока средняя дневная зона высвобождения может быть от примерно 1 мг до примерно 75 мг или даже 100 мг в день, предпочтительно от примерно 3 мг до примерно 50 мг в день, а более предпочтительно от примерно 6 мг до примерно 40 мг в день. Для применения на свиньях средняя дневная доза высвобождения может быть от примерно 0,5 мг до примерно 25 или даже 30 мг в день, предпочтительно от примерно 1 мг до примерно 20 мг в день, более предпочтительно от примерно 2 мг до примерно 15 мг в день. Иногда может быть полезной средняя дневная доза высвобождения вне этих интересов, в зависимости от желаемого результата. Общая доза соматотропина должна быть достаточной для поддержания желаемой скорости выделения в течение желаемого периода времени, как обсуждается ниже.
Общая доза соматотропина определяется большим количеством факторов, таких как размер животного, характер действия соматотропина, время, в течение которого доза действует, и т.п. Эффективной дозой является доза биологически активного соматотропина, содержащаяся в одном изделии или в нескольких изделиях, предназначенных для введения вместе. Эта доза должна быть эффективной в течение определенного периода времени, иногда такого короткого, как 1-2 дня, но чаще более длинного (примерно 7 дней), в некоторых случаях примерно 28 дней или даже до 48 дней или более.
При введении соматотропина коровам для повышения их молочной продуктивности предпочтительно, чтобы доза составляла от примерно 5 мг до примерно 1000 мг или 1500 мг или более, предпочтительно от примерно 100 мг до примерно 800 мг. При этом она должна быть введена в интервалах от примерно 1 дня до примерно 28 дней или дольше, или более предпочтительно от примерно 7 дней до примерно 28 дней.
При введении свиного соматотропина при беременности свиней и при лактации свиней предпочтительно, чтобы доза составляла от примерно 5 мг до примерно 225 мг или более, более предпочтительно от примерно 75 мг до примерно 150 мг. Она вводится в интервале от примерно 1 дня до примерно 28 дней, предпочтительно примерно за 7-21 день. Для введения откармливаемым для убоя свиньям для увеличения выхода мяса и эффективности от корма или для улучшения соотношения жир постное мясо предпочтительно, чтобы дозы были от примерно 10 мг до примерно 200 мг или более, более предпочтительно от примерно 10 мг до примерно 90 мг. Дозу вводят в течение интервала от примерно 7 дней до примерно 60 дней, предпочтительно примерно за 14-42 дня. Откармливаемым свиньям желательно ввести дозу примерно за 7-60 дней до убоя. Введение с более частыми интервалами откормленным до убоя свиньям выгодно ближе к концу откорма. Это может обеспечить большую гибкость при введении по схеме. В некоторых случаях эффективно использовать более частое или менее частое введение, а в соответствующих условиях, большие или меньшие дозы.
Величина давления, используемого при создании сжатого изделия из соматотропина, не является критической, однако создание изделия может быть до некоторой степени проконтролировано тщательным подбором давления. Должно быть использовано такое давление, чтобы получить изделие достаточной прочности и целостности, таким образам, чтобы оно могло выдержать обработку и имплантацию.
Дополнительным методом контроля скорости высвобождения является покрытие части всей площади поверхности изделия для снижения величины поверхности, через которую происходит растворение.
Покрытие может быть использовано, чтобы ингибировать или почти полностью остановить высвобождение соматотропина из некоторых поверхностей объекта, чтобы контролировать геометрию поверхности высвобождения, например, чтобы поддерживать постоянную площадь поверхности высвобождения. Это может содействовать достижению пролонгированного нулевого порядка высвобождения соматотропина через непокрытую поверхность высвобождения, которая является первичной поверхностью высвобождения. Например, соматотропиновое изделие может быть цилиндром с покрытием на кривых поверхностях цилиндра, а на одном или на обоих концах цилиндра покрытие отсутствует. При таком варианте, пока соматотропин высвобождается и изделие эродирует, площадь поверхности высвобождения остается относительно постоянной, тогда как уменьшение происходило бы быстрее, если бы высвобождение происходило бы со всех поверхностей цилиндра. Кроме того, покрытие может закрывать большую часть изделия, включая одно или несколько "окон" для высвобождения, которые поддерживают практически постоянную площадь высвобождения в течение всего срока.
Например, для доведения до максимума этого эффекта, для цилиндрического изделия, покрытого по всей кривой поверхности, предпочтительно, чтобы покрытие по существу ингибировало высвобождение соматотропина по всей покрытой поверхности и чтобы покрытие оставалось интактным оставшейся кривой поверхности цилиндра, так как выделение происходит с непокрытого(тых) конца(ов). Покрытие также может эродировать с одного или с обоих концов, так как вымывается соматотропин. Предпочтительно, чтобы покрытие сохраняло свою эффективность в течение практически большей части срока службы изделия после введения. Однако можно достичь результатов с любым покрытием, которое обеспечивает по крайней мере существенное ингибирование высвобождения соматотропина при условии, что первичная поверхность высвобождения должна быть непокрытой. При повторном введении соматотропина животному предпочтительно, чтобы покрытие в некоторых случаях адсорбировалось животным и, разумеется, чтобы покрытие было биосовместимым. Примерами веществ, которые могут быть использованы для обеспечения такого частичного покрытия для соматотропинового изделия, являются, но не ограничиваются ими, пчелиный воск, ацетат бутират целлюлозы, полимолочная кислота, этилцеллюлоза, силиконы, сополимер этилена с винилацетатом, оксипропилцеллюлоза, поликарбонат, поликапролактон, ацетат целлюлозы, полиметилметакрилат и различные другие полимеры, известные для использования в качестве связующих покрытий.
Подобный результат может быть достигнут при получении изделия с внешним слоем, например, на кривой поверхности цилиндрического изделия из относительно менее растворимого ассоциированного соматотропина, такого как ассоциированный с цинком соматотропин.
Могут быть полезными временные защитные покрытия. Может быть выгодным обеспечить соматотропиновое изделие легким покрытием для защиты изделия во время хранения и обращения с ним и, возможно, для облегчения введения изделия в животное. Для того, чтобы покрытие этого типа было полезным, покрытие должно быть легко удаляемым перед введением животному, например, кратковременным замачиванием или промывкой, или должно быть удалено с изделия очень быстро при введении животному. Это временное защитное покрытие будет оказывать очень незначительное действие на контролируемое высвобождение соматотропина, а после удаления покрытия изделие будет высвобождать соматотропин с, по крайней мере, одной непокрытой поверхности высвобождения. Поскольку этот тип покрытия оказывает малое влияние или вовсе не оказывает влияния на высвобождение, оно не рассматривается как "покрытие" для целей настоящего описания и формулы изобретения. Это временное защитное покрытие также может быть использовано с более постоянным покрытием, обсужденным выше. Это защитное покрытие просто может быть намного тоньше покрывающих материалов, обсужденных выше, при условии, что такое намного более тонкое покрытие должно быть быстро удалено с изделия или до, или сразу после имплантации, или может быть покрытием, которое быстро удаляется с изделия, например, из-за его растворимости, потому что оно плавится при температуре тела, из-за сочетания растворимости и температуры плавления, или по некоторым другим причинам. Подходящими материалами для этого типа покрытия являются, но не ограничиваются ими, поливиниловый спирт, сахар, полиэтиленгликоль (такой как ПЭГ 8000) и другие вещества.
Кроме того, помимо соматотропина и необязательного защитного покрытия, изделие может включать другие вещества, входящие в композицию настоящего изобретения. Примерами являются смазки, бактериостатические препараты, антиоксиданты, противовоспалительные агенты, антибиотики и т.п. Могут быть использованы традиционные смазки для облегчения процесса прессования. Примерами таким смазок являются стеараты, такие как стеарат магния, пальмитаты, такие как пальмитат натрия, и другие традиционные смазки. Количество имеющейся смазки должно быть достаточным, чтобы позволить свободно течь соматотропину и легко проходить в матрицу и способствовать более легкому извлечению изделия из матрицы без опасности повреждения изделия. Однако смазка не должна находиться в количествах, достаточных для воздействия на матричный агент или каким-либо путем ингибировать высвобождение соматотропина. Например, стеарат магния оказывает малое или не оказывает никакого воздействия на высвобождение соматотропина при концентрации до примерно 10% При использовании концентраций, превышающих 30-50% стеарат магния заметно ингибирует высвобождение соматотропина из изделия. Подобным образом пальмитат натрия оказывает малое или не оказывает никакого воздействия на высвобождение соматотропина при концентрации до примерно 3% При использовании концентраций, превышающих примерно 10% пальмитат натрия заметно или полностью ингибирует высвобождение. Эффект концентраций между этими определенными концентрациями может быть определен путем традиционного тестирования. С помощью простой процедуры подобным образом может быть определен интервал эффективных концентраций для других традиционных смазок.
Другие ингредиенты, такие как антиоксиданты, противовоспалительные агенты, бактериостаты, антибиотики, агенты, ингибирующие агрегацию соматотропина, и тому подобные могут быть включены в изделие с использованием традиционных методик. Однако эти ингредиенты также не должны присутствовать в таком количестве, чтобы они работали как матричные агенты или ингибировали высвобождение соматотропина. Эти эффективные концентрации могут быть определены по процедуре, использованной для смазок, как обсуждалось выше. В некоторых случаях может быть использовано облучение для повышения стерильности, однако следует предусмотреть, что иногда облучение может снизить биодоступность соматотропина.
Для некоторых соматотропинов выгодно регулировать количество воды, имеющейся в соматотропине, или путем тщательного контроля методик сушки, таких как лиофилизация, или выдерживая лиофилизованный соматотропин в атмосфере, содержащей пары воды до тех пор, пока желаемое количество воды не будет присутствовать в композиции. Однако такие регулировки не должны проводиться в условиях, которые промотируют денатурацию соматотропина, образование агрегата или другое разложение соматотропина или отрицательно влияют на его активность. Это может быть осуществлено или до, или после образования изделия и может быть выполнено с помощью других методик. Изделие может быть введено традиционным образом или подкожно в жировые ткани или внутримышечно, может быть введено или хирургически, или с использованием традиционных устройств для имплантации.
Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение и не должны рассматриваться как ограничивающие. Все части и проценты являются массовыми, если нет других указаний.
Пример 1
Получают экспрессированный в микробе соматотропин рекомбинантной ДНК (см. пример А Европейской заявки на патент 177478, опубликованный 9 апреля 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники).
Получают экспрессированный в микробе соматотропин рекомбинантной ДНК (см. пример А Европейской заявки на патент 177478, опубликованный 9 апреля 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники).
Преломляющие тела были выделены путем разрушения клеток с последующим центрифугированием. Преломляющие тела затем солюбилизируют, складывают и окисляют в растворе мочевины и трисоксиметиламинометанового (ТРИС) буфера. Забуференный раствор МБС пропускают через хроматографическую колонку, содержащую ионообменную смолу ДЕ-52. Устанавливают концентрацию этого раствора 22 мг/мл МБС в растворе 4,5М мочевины и 50 мМ трисоксиметиламинометана (ТРИС) буфера при pH 9,3-9,5. Этот раствор стерилизуют, фильтруя через фильтрующий патрон 0,22 микрона. Отфильтрованный раствор диализируют против 7-кратного объема 25 мМ бикарбоната натрия буфера (при pH 9,5), заменяя буферный раствор 8 раз. Затем буферный раствор заменяют WF1-водой, заменяя каждые 8-12 часов. Так как pH падает до 8-8,5, МБС начинает осаждаться из раствора. Диализ продолжают с 4-6 дополнительными заменами воды, затем снижают концентрацию остаточных компонентов буфера до тех пор, пока pH не будет находиться в интервале 6,5-7,5. Осажденный МБС затем лиофилизируют и извлекают в виде сухого белого порошка. Полученный таким образом МБС используют для приготовления прессованных изделий из соматотропина для парентеральной имплантации лактирующим молочным коровам, как описано ниже.
Пример 2
Прессованные изделия из соматотропина готовят из МБС, полученного как описано в примере 1. 50 мг этого МБС помещают в таблетирующую матрицу с диаметром 6,4 мм и прессуют в таблетирующем прессе Carver Model-C 12 Ton с гидравлическим плунжером, имеющим площадь 21,25 см2 (3,294 дюйма2) при нагрузке 17790 ньютонов (4000 фунтов), как следует из размера. Десять из этих 50 г прессованных изделий хирургически имплантируют подкожно в залопаточную область 8 лактирующим коровам Голштинской породы в день 0, день 14 и день 28. Всего 30 прессованных изделий было имплантировано каждой из обработанных коров. Молочную продуктивность обработанных коров в течение 56 дней сравнивают с группой из 9 контрольных коров, которые не получали соматотропин. Повышение молочной продуктивности и скорректированное к молоку 3,5% жирности (3,5 FC) у обработанных коров по сравнению с необработанными коровами суммированы в таблице 1 и графически показано на фиг. 1.
Прессованные изделия из соматотропина готовят из МБС, полученного как описано в примере 1. 50 мг этого МБС помещают в таблетирующую матрицу с диаметром 6,4 мм и прессуют в таблетирующем прессе Carver Model-C 12 Ton с гидравлическим плунжером, имеющим площадь 21,25 см2 (3,294 дюйма2) при нагрузке 17790 ньютонов (4000 фунтов), как следует из размера. Десять из этих 50 г прессованных изделий хирургически имплантируют подкожно в залопаточную область 8 лактирующим коровам Голштинской породы в день 0, день 14 и день 28. Всего 30 прессованных изделий было имплантировано каждой из обработанных коров. Молочную продуктивность обработанных коров в течение 56 дней сравнивают с группой из 9 контрольных коров, которые не получали соматотропин. Повышение молочной продуктивности и скорректированное к молоку 3,5% жирности (3,5 FC) у обработанных коров по сравнению с необработанными коровами суммированы в таблице 1 и графически показано на фиг. 1.
Во время исследования ежедневно отбирали образцы крови и анализировали сыворотку крови с помощью радиоиммунологического анализа (РИА) на соматотропин. Определенные уровни соматотропина в сыворотке показаны графически на фиг. 2. Молочная продуктивность согласуется с наблюдаемым профилем соматотропина в сыворотке.
Пример 3
Группу из 14 нелактирующих Голштинских коров разделяют на 2 группы по 7. Одна группа получила хирургическую имплантацию, как описано в примере 2, из 10 изделий из 50 мг МБС, полученных, как описано в примере 2, а другая группа получала подделку хирургической процедуры. Затем отбирают 10 образцов крови через день, 6 образцов на 2 и 3 дни, 3 образца на 4 день, по 14 и 2 образца на 15 и 21 дни. Определяют уровень соматотропина в сыворотке крови с помощью РИА, результаты показаны на фиг. 3. Уровни сыворотки в этих исследованиях иногда реже, чем при исследовании лактации в примере 3. Причины этого более низкого уровня не понятны, но полагают, что это может быть отнесено к обычным флуктуациям в продуцировании природного соматотропина. Однако, наблюдалось устойчивое повышение этого уровня после 17 или 18 дней.
Группу из 14 нелактирующих Голштинских коров разделяют на 2 группы по 7. Одна группа получила хирургическую имплантацию, как описано в примере 2, из 10 изделий из 50 мг МБС, полученных, как описано в примере 2, а другая группа получала подделку хирургической процедуры. Затем отбирают 10 образцов крови через день, 6 образцов на 2 и 3 дни, 3 образца на 4 день, по 14 и 2 образца на 15 и 21 дни. Определяют уровень соматотропина в сыворотке крови с помощью РИА, результаты показаны на фиг. 3. Уровни сыворотки в этих исследованиях иногда реже, чем при исследовании лактации в примере 3. Причины этого более низкого уровня не понятны, но полагают, что это может быть отнесено к обычным флуктуациям в продуцировании природного соматотропина. Однако, наблюдалось устойчивое повышение этого уровня после 17 или 18 дней.
Пример 4
Хирургически имплантируют 5 изделий из 50 мг МБС, полученных, как описано в примере 2, 5 нелактирующих телкам Голштинской породы или в правую или в левую часть передней или задней послелопаточной области в дни исследования 0, 3, 7 и 14. На 14 день животных умерщвляют и проводят анализ тканей. Не было отмечено чрезмерной вредной реакции в тканях, что указывает на хорошую биосовместимость.
Хирургически имплантируют 5 изделий из 50 мг МБС, полученных, как описано в примере 2, 5 нелактирующих телкам Голштинской породы или в правую или в левую часть передней или задней послелопаточной области в дни исследования 0, 3, 7 и 14. На 14 день животных умерщвляют и проводят анализ тканей. Не было отмечено чрезмерной вредной реакции в тканях, что указывает на хорошую биосовместимость.
Пример 5
Готовят экспрессируемый в микробах АСС путем экспрессии рекомбинантной ДНК, практически как описано в примере 3В Европейской заявки на патент 193515, опубликованный 3 сентября 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники. АСС преломляющие тела были изолированы, солюбилизированы, натурированы и очищены, как описано в примере 1, через стадию с ионообменной смолой. Забуферированный раствор АСС диализуют против буферного раствора бикарбоната натрия и полученный в результате буферный бикарбонатный раствор стерилизуют фильтрованием и лиофилизируют. Этот материал упоминается в примерах как "АСС сыпучий порошок". Растворяют 5,4 г этого АСС в 250 мл деионизированной воды и диализуют против 4 взамен 16 объемов воды в течение 24 часов при 4oC. Диализованный АСС осаждают при pH 6-8 350 ммолями 100 мМ раствора сульфата меди. Осадок, образовавшийся при добавлении сульфата меди, изолируют центрифугированием и лиофилизируют. Полученный продукт содержит 0,43% меди.
Готовят экспрессируемый в микробах АСС путем экспрессии рекомбинантной ДНК, практически как описано в примере 3В Европейской заявки на патент 193515, опубликованный 3 сентября 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники. АСС преломляющие тела были изолированы, солюбилизированы, натурированы и очищены, как описано в примере 1, через стадию с ионообменной смолой. Забуферированный раствор АСС диализуют против буферного раствора бикарбоната натрия и полученный в результате буферный бикарбонатный раствор стерилизуют фильтрованием и лиофилизируют. Этот материал упоминается в примерах как "АСС сыпучий порошок". Растворяют 5,4 г этого АСС в 250 мл деионизированной воды и диализуют против 4 взамен 16 объемов воды в течение 24 часов при 4oC. Диализованный АСС осаждают при pH 6-8 350 ммолями 100 мМ раствора сульфата меди. Осадок, образовавшийся при добавлении сульфата меди, изолируют центрифугированием и лиофилизируют. Полученный продукт содержит 0,43% меди.
Пример 6
Готовят прессованные изделия из АСС сыпучего порошка и из ассоциированного с медью АСС, оба получены, как в примере 5. Ассоциированный с медью АСС получают, используя молярное соотношение меди к АСС 1,2-1,4:1. Использованная процедура прессования была практически такой же, как в примере 2, с тем исключением, что в качестве смазки используют 1% пальмитата натрия (NaP) или 5% стеарата магния (MgS), исключая, когда указано. Чтобы получить дозы 60 мг и 90 мг соматотропина достаточное количество рецептуры, содержащей соматотропин, помещают в матрицу диаметром 2,4 мм или 3,2 мм и прессуют, прикладывая нагрузку 4448 ньютон (1000 фунтов). Эти прессованные изделия парентерально имплантируют откормленным кроссбредным свиньям коммерческого типа. Были определены средний дневной привес в кг/день (ADG) и эффективность от корма (FE), которую определяют как принимаемый за день корм, разделенный на ADG (чем ниже FE, тем лучше FE), и улучшения FE у имплантированных свиней по сравнению с отрицательным контролем у свиней, которые не получали соматотропина. Эти результаты и результаты для положительного контроля группы свиней, которая получала ежедневные инъекции 2 мг АСС в растворе, суммированы в таблице II. Первая стадия периода испытаний составляла 14 дней, затем 7 дней промежуточного периода, затем вторая стадия испытаний в течение 14 дней. Результаты приведены в таблице II.
Готовят прессованные изделия из АСС сыпучего порошка и из ассоциированного с медью АСС, оба получены, как в примере 5. Ассоциированный с медью АСС получают, используя молярное соотношение меди к АСС 1,2-1,4:1. Использованная процедура прессования была практически такой же, как в примере 2, с тем исключением, что в качестве смазки используют 1% пальмитата натрия (NaP) или 5% стеарата магния (MgS), исключая, когда указано. Чтобы получить дозы 60 мг и 90 мг соматотропина достаточное количество рецептуры, содержащей соматотропин, помещают в матрицу диаметром 2,4 мм или 3,2 мм и прессуют, прикладывая нагрузку 4448 ньютон (1000 фунтов). Эти прессованные изделия парентерально имплантируют откормленным кроссбредным свиньям коммерческого типа. Были определены средний дневной привес в кг/день (ADG) и эффективность от корма (FE), которую определяют как принимаемый за день корм, разделенный на ADG (чем ниже FE, тем лучше FE), и улучшения FE у имплантированных свиней по сравнению с отрицательным контролем у свиней, которые не получали соматотропина. Эти результаты и результаты для положительного контроля группы свиней, которая получала ежедневные инъекции 2 мг АСС в растворе, суммированы в таблице II. Первая стадия периода испытаний составляла 14 дней, затем 7 дней промежуточного периода, затем вторая стадия испытаний в течение 14 дней. Результаты приведены в таблице II.
Имплантированные изделия настоящего изобретения по сравнению с ежедневными инъекциями показывают значительно улучшенный привес и эффективность от корма по сравнению с необработанными свиньями. Уровень 10% пальмитата натрия показывает ухудшение высвобождения соматотропина, так как 10% пальмитата натрия превышает эффективное количество смазки.
Пример 7
Готовят прессованные изделия из экспрессированного в микробе АСС сыпучего порошка, который был изолирован и очищен, как в примере 5. Использованная процедура в общем является такой же, как в примере 2, с тем исключением, что готовят изделия 30 мг с диаметром 6,4 мм, используя давление 17790 ньютонов (4000 фунтов) и изделия 60 мг с диаметром 6,4 мм, используя усилие 17790 ньютонов (4000 фунтов). Эти изделия хирургически имплантируют в жир шеи со стороны спины в первый день исследования. Вторую группу изделий диаметром 3,2 мм готовят при 4448 ньютонах (1000 фунтов) соответственно по 30 мг и 60 мг соматотропина. Эти изделия имплантируют в жир на шее со стороны с помощью приспособления для имплантации. Вторую группу изделий диаметром 3,2 мм имплантируют на 15 день исследования. Применяют кроссбредных откормочных свиней коммерческого типа, 10 свиней получали 30 мг изделия, 10 свиней получили 60 мг и 10 свиней являлись контрольными свиньями, которые получали имитацию хирургической процедуры, подобно обработанным свиньям, ADG, FE и улучшения FE были определены для трех групп свиней и показаны в таблице III.
Готовят прессованные изделия из экспрессированного в микробе АСС сыпучего порошка, который был изолирован и очищен, как в примере 5. Использованная процедура в общем является такой же, как в примере 2, с тем исключением, что готовят изделия 30 мг с диаметром 6,4 мм, используя давление 17790 ньютонов (4000 фунтов) и изделия 60 мг с диаметром 6,4 мм, используя усилие 17790 ньютонов (4000 фунтов). Эти изделия хирургически имплантируют в жир шеи со стороны спины в первый день исследования. Вторую группу изделий диаметром 3,2 мм готовят при 4448 ньютонах (1000 фунтов) соответственно по 30 мг и 60 мг соматотропина. Эти изделия имплантируют в жир на шее со стороны с помощью приспособления для имплантации. Вторую группу изделий диаметром 3,2 мм имплантируют на 15 день исследования. Применяют кроссбредных откормочных свиней коммерческого типа, 10 свиней получали 30 мг изделия, 10 свиней получили 60 мг и 10 свиней являлись контрольными свиньями, которые получали имитацию хирургической процедуры, подобно обработанным свиньям, ADG, FE и улучшения FE были определены для трех групп свиней и показаны в таблице III.
Эти данные показывают, что эти прессованные изделия обладают эффективным пролонгированным действием в течение примерно 1 недели. Во время второй недели цикла каждого имплантанта свиньи проявляют ожидаемое снижение эффективности от корма, обычно наблюдаемое, когда свиньям не вводили соматотропин. Даже с этими периодами снижения эффективности корма оба режима обработки показали увеличение эффективности от корма на 7,9% и 6,4% в течение 4 недель испытаний.
Пример 8
Готовят прессованные изделия из МБС, полученного как в примере 1. Процедура прессования проводилась по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 3,2 мм и усилие составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия в 50 мг имеют длину около 5 мм. Одна группа из 9 лактирующих коров получила 2 подкожных имплантации в посткапулярную область по 5 изделий каждая, всего 500 мг, а вторая группа из 9 коров получила 3 подобных имплантации, всего 750 мг. Повышение действительной молочной продуктивности, молочной продуктивности, скорректированной на молоко 3,5% жирности (FC молоко) и увеличения по FC молоку, у обработанных коров по сравнению с группой из 10 контрольных коров, которые не получали соматотропин в течение периода испытания в 28 дней приведены в таблице IV.
Готовят прессованные изделия из МБС, полученного как в примере 1. Процедура прессования проводилась по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 3,2 мм и усилие составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия в 50 мг имеют длину около 5 мм. Одна группа из 9 лактирующих коров получила 2 подкожных имплантации в посткапулярную область по 5 изделий каждая, всего 500 мг, а вторая группа из 9 коров получила 3 подобных имплантации, всего 750 мг. Повышение действительной молочной продуктивности, молочной продуктивности, скорректированной на молоко 3,5% жирности (FC молоко) и увеличения по FC молоку, у обработанных коров по сравнению с группой из 10 контрольных коров, которые не получали соматотропин в течение периода испытания в 28 дней приведены в таблице IV.
Пример 9
Готовят прессованные изделия из МБС, полученного как в примере 1, к которому добавлен 1% стеарата магния в качестве смазки. Процедура прессования проводится по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 4,0 мм и применяемое давление составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия 50 мг имеют длину около 3 мм. Группу из 10 изделий имплантируют группе из 8 лактирующих коров Голштинской породы в посткапулярную область в 0 день и 21 день. 10 контрольных коров не получали соматотропина. В течение 1 21 дней наблюдали увеличение молока, скорректированного на 3,5% жирности по сравнению с контролем на 8,5% а в течение 22 42 дней на 14,3% Результаты этого примера отчетливо показали снижение продуктивности по молоку у ряда коров в исследовании, когда они подходили к концу лактационного цикла.
Готовят прессованные изделия из МБС, полученного как в примере 1, к которому добавлен 1% стеарата магния в качестве смазки. Процедура прессования проводится по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 4,0 мм и применяемое давление составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия 50 мг имеют длину около 3 мм. Группу из 10 изделий имплантируют группе из 8 лактирующих коров Голштинской породы в посткапулярную область в 0 день и 21 день. 10 контрольных коров не получали соматотропина. В течение 1 21 дней наблюдали увеличение молока, скорректированного на 3,5% жирности по сравнению с контролем на 8,5% а в течение 22 42 дней на 14,3% Результаты этого примера отчетливо показали снижение продуктивности по молоку у ряда коров в исследовании, когда они подходили к концу лактационного цикла.
Пример 10
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают его по методике примера 1 со следующими исключениями. Путем добавления NaOH устанавливают pH концентрированного раствора МБС в мочевине и ТРИС-буфере около 10. Этот раствор подвергают диафильтрации против 10 объемов WF1-воды с дополнительной периодической добавкой NaOH для поддержания pH около 10. После диафильтрации раствор МБС лиофилизируют и получают сухой порошок. Этот продукт будет упоминаться как "лиофилизированный раствор МБС".
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают его по методике примера 1 со следующими исключениями. Путем добавления NaOH устанавливают pH концентрированного раствора МБС в мочевине и ТРИС-буфере около 10. Этот раствор подвергают диафильтрации против 10 объемов WF1-воды с дополнительной периодической добавкой NaOH для поддержания pH около 10. После диафильтрации раствор МБС лиофилизируют и получают сухой порошок. Этот продукт будет упоминаться как "лиофилизированный раствор МБС".
Пример 11
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают по методике примера 10 с тем исключением, что диафильтрованный раствор МБС при pH 10 нейтрализуют HCl для осаждения МБС. Осажденный МБС лиофилизируют для получения сухого порошка. Этот продукт будет упоминаться как "МБС, осажденный HCl".
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают по методике примера 10 с тем исключением, что диафильтрованный раствор МБС при pH 10 нейтрализуют HCl для осаждения МБС. Осажденный МБС лиофилизируют для получения сухого порошка. Этот продукт будет упоминаться как "МБС, осажденный HCl".
Пример 12
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают по методике примера 1 со следующими исключениями. Путем добавления H3PO4 устанавливают pH концентрированного раствора МБС в мочевине и ТРИС-буфере равным примерно 4. Этот раствор подвергают диафильтрации против 10 объемов WF1-воды. Этот диафильтрованный раствор нейтрализуют КОН для осаждения МБС, который лиофилизируют для получения сухого порошка. Этот продукт будет упоминаться как "МБС, осажденный КОН".
Готовят экспрессированный в микробе МБС и очищают по методике примера 1 со следующими исключениями. Путем добавления H3PO4 устанавливают pH концентрированного раствора МБС в мочевине и ТРИС-буфере равным примерно 4. Этот раствор подвергают диафильтрации против 10 объемов WF1-воды. Этот диафильтрованный раствор нейтрализуют КОН для осаждения МБС, который лиофилизируют для получения сухого порошка. Этот продукт будет упоминаться как "МБС, осажденный КОН".
Пример 13
Готовят прессованные соматотропиновые изделия из лиофилизированного раствора МБС, полученного по примеру 10, и из МБС, осажденного HCl, приготовленного по примеру 11. Процедура прессования проводится по методике примера 2 с тем исключением, что в качестве смазки используют 1% стеарата магния, диаметр матрицы равен 4 мм и давление составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделие 50 мг имеет длину около 3 мм. Одна группа из 7 коров Голштинской породы получала 10 имплантантов из изделий 50 мг (общая доза 500 мг) из лиофилизированного раствора МБС, а другая группа из 7 коров Голштинской породы получали 10 имплантантов из изделий 50 мг МБС, осажденного HCl. Имплантировали подкожно в посткапулярную область в 0 день и 21 день. Группа из 7 контрольных коров получала имитацию имплантации. Действительная молочная продуктивность и молочная продуктивность, скорректированная на молоке с жирностью 3,5% у обработанных коров по сравнению с контрольными коровами, которые не получали соматотропин, приведены в таблице V.
Готовят прессованные соматотропиновые изделия из лиофилизированного раствора МБС, полученного по примеру 10, и из МБС, осажденного HCl, приготовленного по примеру 11. Процедура прессования проводится по методике примера 2 с тем исключением, что в качестве смазки используют 1% стеарата магния, диаметр матрицы равен 4 мм и давление составляет 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделие 50 мг имеет длину около 3 мм. Одна группа из 7 коров Голштинской породы получала 10 имплантантов из изделий 50 мг (общая доза 500 мг) из лиофилизированного раствора МБС, а другая группа из 7 коров Голштинской породы получали 10 имплантантов из изделий 50 мг МБС, осажденного HCl. Имплантировали подкожно в посткапулярную область в 0 день и 21 день. Группа из 7 контрольных коров получала имитацию имплантации. Действительная молочная продуктивность и молочная продуктивность, скорректированная на молоке с жирностью 3,5% у обработанных коров по сравнению с контрольными коровами, которые не получали соматотропин, приведены в таблице V.
В течение 7 недель наблюдается незначительное увеличение молочной продуктивности у коров, обработанных лиофилизированным раствором МБС, по сравнению с контрольными коровами, но нет увеличения для МБС, осажденного HCl.
Пример 14
Проводят исследование, подобное примеру 13, с тем исключением, что 8 коров Голштинской породы получали лиофилизированный раствор МБС, 8 коров Голштинской породы получали МБС, осажденный HCl, 8 коров Голштинской породы получали МБС, осажденный KOH, приготовленный как в примере 12, а 8 коров Голштинской породы получали имитацию имплантации. В течение 42 дней исследования молочная продуктивность коров, получивших лиофилизированный раствор МБС, превышает таковую у контрольных коров на 4,5 кг/день, у коров, получавших МБС, осажденный HCl, превышает таковую у контрольных коров на 4,6 кг/день, а у коров, получавших KOH, осажденный МБС, превышает таковую у контрольных коров на 4,0 кг/день.
Проводят исследование, подобное примеру 13, с тем исключением, что 8 коров Голштинской породы получали лиофилизированный раствор МБС, 8 коров Голштинской породы получали МБС, осажденный HCl, 8 коров Голштинской породы получали МБС, осажденный KOH, приготовленный как в примере 12, а 8 коров Голштинской породы получали имитацию имплантации. В течение 42 дней исследования молочная продуктивность коров, получивших лиофилизированный раствор МБС, превышает таковую у контрольных коров на 4,5 кг/день, у коров, получавших МБС, осажденный HCl, превышает таковую у контрольных коров на 4,6 кг/день, а у коров, получавших KOH, осажденный МБС, превышает таковую у контрольных коров на 4,0 кг/день.
Пример 15
Готовят прессованные изделия из лиофилизированного раствора МБС, как в примере 13. Группа из 8 Голштинских коров получала подкожную посткапулярную имплантацию 6 изделий по 50 мг (доза 300 мг) каждые 14 дней, а другая группа из 8 Голштинских коров получала 10 изделий по 50 мг (доза 500 мг) каждые 21 день. В течение периода исследования в 42 дня группа, получавшая 300 мг каждые 14 дней, показала повышение молочной продуктивности на 5,4 кг/день по сравнению с молочной продуктивностью таких же необработанных коров. Подобным образом в течение 42 дней исследования группа, получавшая 500 мг каждые 21 день, показала повышение молочной продуктивности на 5,4 кг/день по сравнению с молочной продуктивностью таких же необработанных коров.
Готовят прессованные изделия из лиофилизированного раствора МБС, как в примере 13. Группа из 8 Голштинских коров получала подкожную посткапулярную имплантацию 6 изделий по 50 мг (доза 300 мг) каждые 14 дней, а другая группа из 8 Голштинских коров получала 10 изделий по 50 мг (доза 500 мг) каждые 21 день. В течение периода исследования в 42 дня группа, получавшая 300 мг каждые 14 дней, показала повышение молочной продуктивности на 5,4 кг/день по сравнению с молочной продуктивностью таких же необработанных коров. Подобным образом в течение 42 дней исследования группа, получавшая 500 мг каждые 21 день, показала повышение молочной продуктивности на 5,4 кг/день по сравнению с молочной продуктивностью таких же необработанных коров.
Пример 16
Готовят соматотропиновые изделия из 25 мг лиофилизированного раствора МБС, приготовленного как в примере 10. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 2 мм, прилагаемое давление составляет 1112 ньютонов (250 фунтов) и в качестве смазки добавляют 1% стеарата магния. Пять групп из 9 коров Голштинской породы каждая получала подкожно имплантанты в посткапулярную область с различными дозами и различными интервалами, а группа из 9 контрольных коров получала имитацию имплантанта каждые 14 дней. В течение 84 дней исследования молочная продуктивность у коров, получавших 100 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 5,6 кг/день, продуктивность коров, получавших 200 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 6,4 кг/день, продуктивность коров, получавших 400 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 7,7 кг/день, а продуктивность коров, получавших 600 мг каждые 21 день, превышает продуктивность контрольных коров на 7,9 кг/день.
Готовят соматотропиновые изделия из 25 мг лиофилизированного раствора МБС, приготовленного как в примере 10. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 с тем исключением, что матрица для таблеток имеет диаметр 2 мм, прилагаемое давление составляет 1112 ньютонов (250 фунтов) и в качестве смазки добавляют 1% стеарата магния. Пять групп из 9 коров Голштинской породы каждая получала подкожно имплантанты в посткапулярную область с различными дозами и различными интервалами, а группа из 9 контрольных коров получала имитацию имплантанта каждые 14 дней. В течение 84 дней исследования молочная продуктивность у коров, получавших 100 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 5,6 кг/день, продуктивность коров, получавших 200 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 6,4 кг/день, продуктивность коров, получавших 400 мг каждые 14 дней, превышала продуктивность контрольных коров на 7,7 кг/день, а продуктивность коров, получавших 600 мг каждые 21 день, превышает продуктивность контрольных коров на 7,9 кг/день.
Пример 17
Готовят две группы прессованных изделий из лиофилизированного раствора МБС, полученного как в примере 10, к которому добавлен в качестве смазки 1% стеарата магния. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 со следующими исключениями. Одну партию изделий по 25 мг диаметром 2 мм прессуют под давлением 1112 ньютонов (250 фунтов). Вторую партию изделий по 50 мг диаметром 4 мм прессуют под давлением 4448 ньютонов (1000 фунтов). Одна группа из 10 коров Голштинской породы получала 12 изделий по 25 мг (300 мг) каждые 14 дней. Другая группа из 10 коров Голштинской породы получала 6 изделий по 50 мг (300 мг) каждые 14 дней. Третья группа из 10 контрольных коров получала имитацию имплантанта каждые 14 дней. Имплантанты вводили подкожно в посткапулярную область. В течение 42 дней исследования молочная продуктивность коров, которые получали изделия по 25 мг, превышает продуктивность контрольных коров на 4,2 кг/день, а продуктивность коров, которые получали изделия по 50 мг, превышает продуктивность контрольных коров на 4,3 кг/день. Если первый имплантационный цикл рассматривать как переходный период между необработанным и обработанным состоянием, в течение 15-42 дней исследования молочная продуктивность возрастает на 5,0 и 5,4 кг/день по сравнению с контрольными коровами, для тех коров, которые получали изделия по 25 мг и 50 мг соответственно.
Готовят две группы прессованных изделий из лиофилизированного раствора МБС, полученного как в примере 10, к которому добавлен в качестве смазки 1% стеарата магния. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 со следующими исключениями. Одну партию изделий по 25 мг диаметром 2 мм прессуют под давлением 1112 ньютонов (250 фунтов). Вторую партию изделий по 50 мг диаметром 4 мм прессуют под давлением 4448 ньютонов (1000 фунтов). Одна группа из 10 коров Голштинской породы получала 12 изделий по 25 мг (300 мг) каждые 14 дней. Другая группа из 10 коров Голштинской породы получала 6 изделий по 50 мг (300 мг) каждые 14 дней. Третья группа из 10 контрольных коров получала имитацию имплантанта каждые 14 дней. Имплантанты вводили подкожно в посткапулярную область. В течение 42 дней исследования молочная продуктивность коров, которые получали изделия по 25 мг, превышает продуктивность контрольных коров на 4,2 кг/день, а продуктивность коров, которые получали изделия по 50 мг, превышает продуктивность контрольных коров на 4,3 кг/день. Если первый имплантационный цикл рассматривать как переходный период между необработанным и обработанным состоянием, в течение 15-42 дней исследования молочная продуктивность возрастает на 5,0 и 5,4 кг/день по сравнению с контрольными коровами, для тех коров, которые получали изделия по 25 мг и 50 мг соответственно.
Пример 18
Готовят экспрессированный в микробе ала-вал БСТ путем экспрессии рекомбинантной ДНК по методике, описанной в примере 3а Европейской заявки на патент 193515, опубликованной 3 сентября 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники. Изолируют преломляющие тела ала-вал БСТ, солюбилизируют, натурируют и очищают, как описано в примерах 10 и 1, в результате получают лиофилизированный раствор ала-вал БСТ.
Готовят экспрессированный в микробе ала-вал БСТ путем экспрессии рекомбинантной ДНК по методике, описанной в примере 3а Европейской заявки на патент 193515, опубликованной 3 сентября 1986 года, которая приведена здесь в качестве уровня техники. Изолируют преломляющие тела ала-вал БСТ, солюбилизируют, натурируют и очищают, как описано в примерах 10 и 1, в результате получают лиофилизированный раствор ала-вал БСТ.
Пример 19
Готовят прессованные изделия из лиофилизированного раствора МБС, полученного как в примере 10, и из лиофилизированного раствора ала-вал БСТ, приготовленного как в примере 18. Готовят изделия диаметром 2 мм, как описано в примере 16, включающие 1% стеарата магния. Четыре группы из 9 коров Голштинской породы каждая получали подкожно имплантанты лиофилизированного раствора МБС в посткапулярную область, дозы и интервалы указаны ниже. Одна группа из 9 коров Голштинской породы получали подкожно имплантанты лиофилизированного раствора ала-вал БСТ в посткапулярную область дозой 250 мг, имплантированной с интервалами 14 дней. Одна группа из 9 коров Голштинской породы получала подкожно имплантанты между задними ногами, на полпути между выменем и вульвой. Группа из 9 контрольных коров получала имитацию имплантанта в посткапулярной области с интервалом 14 дней. После 42 дней обработанные коровы показали следующее повышение молочной продуктивности по сравнению с контрольными коровами: 125 мг МБС каждые 14 дней увеличение 3,1 кг/день; 250 мг МБС каждые 14 дней увеличение 4,0 кг/день; 250 мг ала-вал БСТ каждые 14 дней увеличение 6,6 кг/день; 250 мг МБС, имплантированного выше вымени, каждые 14 дней 4,4 кг/ день; 375 мг МБС каждые 14 дней увеличение 5,0 кг/день и 500 мг МБС каждые 21 день увеличение 5,8 кг/день. Если первый имплантационный цикл рассматривать как переходный период между необработанным и обработанным состоянием, увеличение молочной продуктивности у обработанных коров по сравнению с контрольными коровами, исключая первый цикл обработки, является следующим: 125 мг МБС каждые 14 дней увеличение 3,7 кг/день; 250 мг МБС каждые 14 дней увеличение 4,7 кг/день; 250 мг ала-вал БСТ каждые 14 дней увеличение 7,4 кг/день; 250 мг МБС, имплантированных выше вымени, каждые 14 дней увеличение 5,1 кг/день; 375 мг МБС каждые 14 дней увеличение 5,5 кг/день и 500 мг МБС каждые 21 день увеличение 6,4 кг/день.
Готовят прессованные изделия из лиофилизированного раствора МБС, полученного как в примере 10, и из лиофилизированного раствора ала-вал БСТ, приготовленного как в примере 18. Готовят изделия диаметром 2 мм, как описано в примере 16, включающие 1% стеарата магния. Четыре группы из 9 коров Голштинской породы каждая получали подкожно имплантанты лиофилизированного раствора МБС в посткапулярную область, дозы и интервалы указаны ниже. Одна группа из 9 коров Голштинской породы получали подкожно имплантанты лиофилизированного раствора ала-вал БСТ в посткапулярную область дозой 250 мг, имплантированной с интервалами 14 дней. Одна группа из 9 коров Голштинской породы получала подкожно имплантанты между задними ногами, на полпути между выменем и вульвой. Группа из 9 контрольных коров получала имитацию имплантанта в посткапулярной области с интервалом 14 дней. После 42 дней обработанные коровы показали следующее повышение молочной продуктивности по сравнению с контрольными коровами: 125 мг МБС каждые 14 дней увеличение 3,1 кг/день; 250 мг МБС каждые 14 дней увеличение 4,0 кг/день; 250 мг ала-вал БСТ каждые 14 дней увеличение 6,6 кг/день; 250 мг МБС, имплантированного выше вымени, каждые 14 дней 4,4 кг/ день; 375 мг МБС каждые 14 дней увеличение 5,0 кг/день и 500 мг МБС каждые 21 день увеличение 5,8 кг/день. Если первый имплантационный цикл рассматривать как переходный период между необработанным и обработанным состоянием, увеличение молочной продуктивности у обработанных коров по сравнению с контрольными коровами, исключая первый цикл обработки, является следующим: 125 мг МБС каждые 14 дней увеличение 3,7 кг/день; 250 мг МБС каждые 14 дней увеличение 4,7 кг/день; 250 мг ала-вал БСТ каждые 14 дней увеличение 7,4 кг/день; 250 мг МБС, имплантированных выше вымени, каждые 14 дней увеличение 5,1 кг/день; 375 мг МБС каждые 14 дней увеличение 5,5 кг/день и 500 мг МБС каждые 21 день увеличение 6,4 кг/день.
Пример 20
Готовят прессованные изделия из АСС сыпучего порошка и из АСС, ассоциированного с медью, полученного по примеру 5. Ассоциированный с медью АСС был приготовлен с использованием молярного соотношения меди к АСС примерно 2:1. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 с тем исключением, что в качестве смазки используют 5% стеарата магния. Помещают в матрицу для таблеток диаметром 2,4 мм или 3,2 мм достаточное количество соматотропина, чтобы получить дозы 60 мг и 90 мг, прессуют с усилием 4448 ньютонов (1000 фунтов). Эти изделия имплантируют в жир на шее со стороны спины группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа с интервалами 14 и 21 день. Исследование длится 42 дня. В течение 42 дней определяют ADG, FE и улучшения эффективности от корма по сравнению с отрицательным контролем. Результаты приведены в таблице VI по сравнению с отрицательным контролем, когда коровы не получали соматотропин, и положительным контролем, когда они получали ежедневную инъекцию 2 мг АСС в растворе. Данные показывают эффективное пролонгированное высвобождение примерно в течение 1 недели с ожидаемым снижением по эффективности от корма после окончания периода высвобождения. Все режимы имплантации в течение полных 6 недель исследования показали улучшение эффективности от корма по сравнению с отрицательным контролем и, более того, показали примерную эквивалентность положительному контролю с ежедневными инъекциями.
Готовят прессованные изделия из АСС сыпучего порошка и из АСС, ассоциированного с медью, полученного по примеру 5. Ассоциированный с медью АСС был приготовлен с использованием молярного соотношения меди к АСС примерно 2:1. Процедуру прессования проводят по методике примера 2 с тем исключением, что в качестве смазки используют 5% стеарата магния. Помещают в матрицу для таблеток диаметром 2,4 мм или 3,2 мм достаточное количество соматотропина, чтобы получить дозы 60 мг и 90 мг, прессуют с усилием 4448 ньютонов (1000 фунтов). Эти изделия имплантируют в жир на шее со стороны спины группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа с интервалами 14 и 21 день. Исследование длится 42 дня. В течение 42 дней определяют ADG, FE и улучшения эффективности от корма по сравнению с отрицательным контролем. Результаты приведены в таблице VI по сравнению с отрицательным контролем, когда коровы не получали соматотропин, и положительным контролем, когда они получали ежедневную инъекцию 2 мг АСС в растворе. Данные показывают эффективное пролонгированное высвобождение примерно в течение 1 недели с ожидаемым снижением по эффективности от корма после окончания периода высвобождения. Все режимы имплантации в течение полных 6 недель исследования показали улучшение эффективности от корма по сравнению с отрицательным контролем и, более того, показали примерную эквивалентность положительному контролю с ежедневными инъекциями.
Пример 21
Готовят прессованные изделия из блок-порошка АСС и ассоциированного с медью АСС (мольное отношение меди к АСС равно 2:1), содержащие 5% стеарата магния в качестве смазки, по методике примера 2 с приведенными ниже исключениями. Прессованные изделия по 60 мг и 30 мг с диаметром 3,2 мм прессуют при давлении 4448 ньютонов (1000 фунтов) и диаметром 4 мм при давлении 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия диаметром 4 мм имеют высоту, примерно равную их диаметру, так что площадь поверхности цилиндра сведена к минимуму. Одну партию изделий по 60 мг диаметром 3,2 мм и одну партию изделий по 30 мг диаметром 3,2 мм помещают в удлиненную трубку из силастика при отсутствии покрытия на концах. Дозы 60 мг имплантируют кроссбредным свиньям коммерческого типа в жир на шее со стороны спины с интервалом 4 недели. Результаты в течение 5-недельного периода показаны в таблице VII по сравнению с контрольными свиньями, которые не получали соматотропина. Результаты для двух групп свиней, которые получили имплантанты с силастиковой трубкой демонстрируют манипуляцию выполнения посредством манипуляции с размером поверхности высвобождения. Свиньи, получившие 2 изделия по 30 мг, имеют улучшенные показатели по сравнению со свиньями, которые получили 1 из изделий по 60 мг. Поскольку они имеют открытые концы, имплантанты из изделий по 30 мг имеют вдвое большую поверхность высвобождения, чем изделие 60 мг, давая в результате улучшение показателей.
Готовят прессованные изделия из блок-порошка АСС и ассоциированного с медью АСС (мольное отношение меди к АСС равно 2:1), содержащие 5% стеарата магния в качестве смазки, по методике примера 2 с приведенными ниже исключениями. Прессованные изделия по 60 мг и 30 мг с диаметром 3,2 мм прессуют при давлении 4448 ньютонов (1000 фунтов) и диаметром 4 мм при давлении 8895 ньютонов (2000 фунтов). Изделия диаметром 4 мм имеют высоту, примерно равную их диаметру, так что площадь поверхности цилиндра сведена к минимуму. Одну партию изделий по 60 мг диаметром 3,2 мм и одну партию изделий по 30 мг диаметром 3,2 мм помещают в удлиненную трубку из силастика при отсутствии покрытия на концах. Дозы 60 мг имплантируют кроссбредным свиньям коммерческого типа в жир на шее со стороны спины с интервалом 4 недели. Результаты в течение 5-недельного периода показаны в таблице VII по сравнению с контрольными свиньями, которые не получали соматотропина. Результаты для двух групп свиней, которые получили имплантанты с силастиковой трубкой демонстрируют манипуляцию выполнения посредством манипуляции с размером поверхности высвобождения. Свиньи, получившие 2 изделия по 30 мг, имеют улучшенные показатели по сравнению со свиньями, которые получили 1 из изделий по 60 мг. Поскольку они имеют открытые концы, имплантанты из изделий по 30 мг имеют вдвое большую поверхность высвобождения, чем изделие 60 мг, давая в результате улучшение показателей.
Пример 22
Получают ассоциированный с медью АСС при растворении АСС сыпучего порошка, полученного как в примере 5, в деионизированной воде при дозе 60 мг/мл. Добавляют достаточное количество 100 мМ CuSO4, чтобы получить в результате желаемое молярное соотношение. Устанавливают pH равным 7 путем добавления серной кислоты для осаждения соматотропина. Осадок выделяют и лиофилизируют. Готовят прессованные изделия из этого ассоциированного с медью соматотропина, имеющего указанные молярные соотношения Cu:АСС. Процедура прессования по существу соответствует описанной в примере 2 с тем исключением, что их диаметр равен 3,2 мм, в качестве смазки добавляют 5% стеарата магния, давление прессования равно 4448 ньютонов (1000 фунтов), используют 60 мг и 30 мг соматотропина, как указано. Эти изделия имплантируют каждые 14 дней в жир на шее со стороны спины группе из 10 свиней. Свиней контролируют в течение 6 недель исследования, результаты показаны в таблице VIII по сравнению с отрицательным контролем, в котором не вводился соматотропин, и положительным контролем, когда соматотропин вводили в виде ежедневной инъекции АСС в растворе. Варьировали длительность каждой из обработок, но обработки с более низким соотношением меди были более длительными, чем обработки, содержащие более высокие соотношения.
Получают ассоциированный с медью АСС при растворении АСС сыпучего порошка, полученного как в примере 5, в деионизированной воде при дозе 60 мг/мл. Добавляют достаточное количество 100 мМ CuSO4, чтобы получить в результате желаемое молярное соотношение. Устанавливают pH равным 7 путем добавления серной кислоты для осаждения соматотропина. Осадок выделяют и лиофилизируют. Готовят прессованные изделия из этого ассоциированного с медью соматотропина, имеющего указанные молярные соотношения Cu:АСС. Процедура прессования по существу соответствует описанной в примере 2 с тем исключением, что их диаметр равен 3,2 мм, в качестве смазки добавляют 5% стеарата магния, давление прессования равно 4448 ньютонов (1000 фунтов), используют 60 мг и 30 мг соматотропина, как указано. Эти изделия имплантируют каждые 14 дней в жир на шее со стороны спины группе из 10 свиней. Свиней контролируют в течение 6 недель исследования, результаты показаны в таблице VIII по сравнению с отрицательным контролем, в котором не вводился соматотропин, и положительным контролем, когда соматотропин вводили в виде ежедневной инъекции АСС в растворе. Варьировали длительность каждой из обработок, но обработки с более низким соотношением меди были более длительными, чем обработки, содержащие более высокие соотношения.
Пример 23
Получают прессованные изделия из АСС сыпучего порошка, полученного как в примере 5, смешением всухую с достаточным количеством CuSO4, чтобы получить указанное мольное соотношение Cu к АСС, и из осажденного ассоциированного с медью АСС с указанным мольным соотношением Cu к АСС. Процедура прессования в общем соответствует описанной в примере 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния в качестве смазки, а давление составляет 1000 ньютонов (225 фунтов) или 2224 ньютонов (500 фунтов), как указано. Изделия имплантируют или каждую неделю, или каждые 2 недели, как указано, группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины.
Получают прессованные изделия из АСС сыпучего порошка, полученного как в примере 5, смешением всухую с достаточным количеством CuSO4, чтобы получить указанное мольное соотношение Cu к АСС, и из осажденного ассоциированного с медью АСС с указанным мольным соотношением Cu к АСС. Процедура прессования в общем соответствует описанной в примере 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния в качестве смазки, а давление составляет 1000 ньютонов (225 фунтов) или 2224 ньютонов (500 фунтов), как указано. Изделия имплантируют или каждую неделю, или каждые 2 недели, как указано, группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины.
Результаты исследования приведены в таблице IX.
Пример 24
Готовят прессованные изделия из осажденного ассоциированного с медью АСС при мольном соотношении Cu:АСС, равном 1:1, полученного как в примере 5, и из сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка АСС с молярным соотношением Cu:АСС, равным 4: 1. Использованный процесс прессования соответствует методике примера 2 с тем исключением, что прессованные изделия, содержащие 14 мг и 21 мг соматотропина, имеют диаметр 2,4 мм и содержат 5% стеарата магния в качестве смазки, прессование ведут под давлением 1000 ньютонов (225 фунтов). Имплантацию проводят ежедневно группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины. Результаты показаны в таблице X по сравнению с отрицательным контролем, когда животные не получали соматотропина, и положительным контролем, когда они получали 2 мг/день АСС, вводимого в виде раствора.
Готовят прессованные изделия из осажденного ассоциированного с медью АСС при мольном соотношении Cu:АСС, равном 1:1, полученного как в примере 5, и из сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка АСС с молярным соотношением Cu:АСС, равным 4: 1. Использованный процесс прессования соответствует методике примера 2 с тем исключением, что прессованные изделия, содержащие 14 мг и 21 мг соматотропина, имеют диаметр 2,4 мм и содержат 5% стеарата магния в качестве смазки, прессование ведут под давлением 1000 ньютонов (225 фунтов). Имплантацию проводят ежедневно группам из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины. Результаты показаны в таблице X по сравнению с отрицательным контролем, когда животные не получали соматотропина, и положительным контролем, когда они получали 2 мг/день АСС, вводимого в виде раствора.
Пример 25
Готовят прессованные изделия из сухой смеси сыпучего порошка АСС и CuSO4 (молочное отношение Cu:ACC равно 2:1) и из ассоциированного с медью ACC, который получен лиофилизацией раствора ACC и CuSO4, имеющего молочное соотношение Cu: ACC, равное 1: 1. Процедура прессования соответствует процедуре примера 2 с тем исключением, что диаметр равен 2,4 мм, 5% стеарата магния добавляют в качестве смазки, давление равно 1000 ньютонов (225 фунтов), используют 21 мг соматотропина на дозу. Имплантации проводят еженедельно в течение 4 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины. Результаты показаны в таблице XI по сравнению с отрицательным контролем, в котором свиньи не получали соматотропина, и с группой положительного контроля, в котором свиньи получали 2 мг/день ACC в растворе. Лиофилизированный раствор с мольным отношением ассоциированного с медью ACC 1:1 и сухая смесь 2:1 работают эквивалентно.
Готовят прессованные изделия из сухой смеси сыпучего порошка АСС и CuSO4 (молочное отношение Cu:ACC равно 2:1) и из ассоциированного с медью ACC, который получен лиофилизацией раствора ACC и CuSO4, имеющего молочное соотношение Cu: ACC, равное 1: 1. Процедура прессования соответствует процедуре примера 2 с тем исключением, что диаметр равен 2,4 мм, 5% стеарата магния добавляют в качестве смазки, давление равно 1000 ньютонов (225 фунтов), используют 21 мг соматотропина на дозу. Имплантации проводят еженедельно в течение 4 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в жир шеи со стороны спины. Результаты показаны в таблице XI по сравнению с отрицательным контролем, в котором свиньи не получали соматотропина, и с группой положительного контроля, в котором свиньи получали 2 мг/день ACC в растворе. Лиофилизированный раствор с мольным отношением ассоциированного с медью ACC 1:1 и сухая смесь 2:1 работают эквивалентно.
Пример 26
Готовят прессованные изделия, которые получают при использовании сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка ACC при указанных молярных отношениях и дозах. Процедура прессования аналогична описанной в примере 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния в качестве смазки, используют матрицу 2,4 мм и давление 1000 ньютонов (225 фунтов). Эти прессованные изделия имплантируют еженедельно в течение 6 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в шею со стороны спины, чуть сзади уха. Результаты исследования показаны в таблице XII по сравнению с отрицательным контролем, в котором группа не получала соматотропин, и с положительным контролем, в котором группа получала 2 мг/день соматотропина ACC в виде раствора.
Готовят прессованные изделия, которые получают при использовании сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка ACC при указанных молярных отношениях и дозах. Процедура прессования аналогична описанной в примере 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния в качестве смазки, используют матрицу 2,4 мм и давление 1000 ньютонов (225 фунтов). Эти прессованные изделия имплантируют еженедельно в течение 6 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в шею со стороны спины, чуть сзади уха. Результаты исследования показаны в таблице XII по сравнению с отрицательным контролем, в котором группа не получала соматотропин, и с положительным контролем, в котором группа получала 2 мг/день соматотропина ACC в виде раствора.
Пример 27
Готовят прессованные изделия из сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка ACC при мольном соотношении Cu:ACC, равном 2:1. Процедура прессования соответствует процедуре примера 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния или 1% стеарата магния в качестве смазки, давление составляет 1000 ньютонов (225 фунтов) и диаметр равен 2,4 мм. Проводят имплантацию 21 мг в неделю в течение 6 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в шею сразу сзади уха. Результаты показаны в таблице XIII по сравнению с отрицательным контролем, в котором группа не получала соматотропин, и с положительным контролем, в котором группа получала 2 мг ACC/день, вводимые в виде раствора. В течение 6 недель исследования обработки 1% стеарата магния и 5% стеарата магния дают аналогичные результаты.
Готовят прессованные изделия из сухой смеси CuSO4 и сыпучего порошка ACC при мольном соотношении Cu:ACC, равном 2:1. Процедура прессования соответствует процедуре примера 2 с тем исключением, что добавляют 5% стеарата магния или 1% стеарата магния в качестве смазки, давление составляет 1000 ньютонов (225 фунтов) и диаметр равен 2,4 мм. Проводят имплантацию 21 мг в неделю в течение 6 недель группами из 10 кроссбредных свиней коммерческого типа в шею сразу сзади уха. Результаты показаны в таблице XIII по сравнению с отрицательным контролем, в котором группа не получала соматотропин, и с положительным контролем, в котором группа получала 2 мг ACC/день, вводимые в виде раствора. В течение 6 недель исследования обработки 1% стеарата магния и 5% стеарата магния дают аналогичные результаты.
Пример 28
Получают ассоциированный с цинком ACC при растворении ACC сыпучего порошка, полученного как в примере 5, в деионизированной воде при дозе 60 мг/мл. Добавляют достаточное количество 100 мМ сульфата цинка, чтобы получить в результате молярное соотношение цинк: ACC, равное 2:1. Устанавливают pH равным 7 путем добавления серной кислоты для осаждения комплекса цинк/ACC. Осадок выделяют и лиофилизируют. Готовят прессованные соматотропиновые изделия из полученного в результате порошка в соответствии с описанной в примере 2 процедурой. Когда прессованные изделия имплантируют растущим свиньям в жир шеи со стороны спины, увеличивается эффективность от корма и улучшается соотношение жир постное мясо.
Получают ассоциированный с цинком ACC при растворении ACC сыпучего порошка, полученного как в примере 5, в деионизированной воде при дозе 60 мг/мл. Добавляют достаточное количество 100 мМ сульфата цинка, чтобы получить в результате молярное соотношение цинк: ACC, равное 2:1. Устанавливают pH равным 7 путем добавления серной кислоты для осаждения комплекса цинк/ACC. Осадок выделяют и лиофилизируют. Готовят прессованные соматотропиновые изделия из полученного в результате порошка в соответствии с описанной в примере 2 процедурой. Когда прессованные изделия имплантируют растущим свиньям в жир шеи со стороны спины, увеличивается эффективность от корма и улучшается соотношение жир постное мясо.
Пример 29
Метиониновый бычий соматотропин (МБС), полученный как в примере 1, растворяют в растворе 4,5 М мочевины и 0,09 М Трис-буфера при дозе 21,5 мг МБС на 1 мл, при температуре 4oC и pH 9,5. Раствор стерилизуют путем пропускания через фильтр с диаметром отверстий 0,2 микрон.
Метиониновый бычий соматотропин (МБС), полученный как в примере 1, растворяют в растворе 4,5 М мочевины и 0,09 М Трис-буфера при дозе 21,5 мг МБС на 1 мл, при температуре 4oC и pH 9,5. Раствор стерилизуют путем пропускания через фильтр с диаметром отверстий 0,2 микрон.
МБС переводят в соль цинка (ZnМБС) путем добавления 1M ZnCl2 при перемешивании раствора МБС. Выпавший в осадок ZnМБС содержит примерно 1% цинка. Раствор, содержащий твердые частицы ZnМБС, затем разбавляют стерильной водой до достижения концентрации мочевины 1M.
ZnМБС выделяют центирифугированием при 1000•g в течение 30 минут, при этом температуру раствора выдерживают при 4oC, а затем лиофилизируют с получением белого пушистого (объемного) порошка стерильного ZnМБС.
Готовят прессованные соматотропиновые изделия из порошка ZnМБС в соответствии с процедурой, описанной в примере 2. Когда прессованные изделия хирургически имплантируют подкожно в залопаточную область лактирующим коровам Голштинской породы, молочная продуктивность повышается в течение нескольких дней по сравнению с необработанными коровами.
Пример 30
Готовят прессованные изделия из сухой МБС сыпучего порошка и ZnSO4 (молярное соотношение Zn:МБС равно 2:1) в соответствии с описанной в примере 2 процедурой. Когда прессованные изделия хирургически имплантируют подкожно в залопаточную область лактирующим коровам Голштинской породы, молочная продуктивность повышается в течение нескольких дней по сравнению с необработанными коровами.
Готовят прессованные изделия из сухой МБС сыпучего порошка и ZnSO4 (молярное соотношение Zn:МБС равно 2:1) в соответствии с описанной в примере 2 процедурой. Когда прессованные изделия хирургически имплантируют подкожно в залопаточную область лактирующим коровам Голштинской породы, молочная продуктивность повышается в течение нескольких дней по сравнению с необработанными коровами.
Claims (6)
1. Изделие для парентеральной имплантации животному, содержащее твердый соматотропин, отличающееся тем, что оно содержит эффективную дозу соматотропина и выполнено в форме твердого тела, приспособленного для парентерального введения животному, и имеет по крайней мере одну непокрытую поверхность для высвобождения соматотропина.
2. Изделие по п.1, отличающееся тем, что твердый соматотропин выбирают из группы, состоящей из свиного соматотропина, бычьего соматотропина (БСТ) или микробно-экспрессированного соматотропина.
3. Изделие по п.1, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит медь или цинк в виде ассоциированного с металлом твердого свиного соматотропина (АСС) или в виде сухой смеси соли меди или цинка и свиного соматотропина с содержанием металла 0,1 3,0%
4. Изделие по п.2, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит цинк в виде ассоциированного с ним твердого бычьего соматотропина или в виде сухой смеси соли цинка и бычьего соматотропина с содержанием цинка 0,1 3,0%
5. Изделие по п.2, отличающееся тем, что в качестве микробно-экспрессированного соматотропина оно содержит микробно эксперссированный бычий соматотропин ала-вал-БСТ.
4. Изделие по п.2, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит цинк в виде ассоциированного с ним твердого бычьего соматотропина или в виде сухой смеси соли цинка и бычьего соматотропина с содержанием цинка 0,1 3,0%
5. Изделие по п.2, отличающееся тем, что в качестве микробно-экспрессированного соматотропина оно содержит микробно эксперссированный бычий соматотропин ала-вал-БСТ.
6. Изделие по п.2, отличающееся тем, что в качестве микробно экспрессированного свиного соматотропина оно содержит АСС.
7. Изделие по п. 1, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит эффективное количество смазки.
8. Изделие по п. 7, отличающееся тем, что смазку выбирают из группы, включающей стеарат или пальмитат.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US2609587A | 1987-03-16 | 1987-03-16 | |
| US026095 | 1987-03-16 | ||
| US146381 | 1988-02-03 | ||
| US07/146,381 US4863736A (en) | 1987-03-16 | 1988-02-03 | Somatotropin prolonged release |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2087155C1 true RU2087155C1 (ru) | 1997-08-20 |
Family
ID=26700778
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884355449A RU2087155C1 (ru) | 1987-03-16 | 1988-03-15 | Изделие для парентеральной имплантации животному |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4863736A (ru) |
| EP (2) | EP0283458B1 (ru) |
| JP (1) | JP2664398B2 (ru) |
| KR (1) | KR900006886B1 (ru) |
| CN (1) | CN1051716C (ru) |
| AT (2) | ATE92769T1 (ru) |
| AU (1) | AU609456B2 (ru) |
| BG (1) | BG83325A (ru) |
| BR (1) | BR8801163A (ru) |
| CA (1) | CA1322329C (ru) |
| DE (3) | DE3883254T2 (ru) |
| DK (1) | DK139288A (ru) |
| ES (2) | ES2053816T3 (ru) |
| FI (1) | FI881219A (ru) |
| GR (1) | GR3005504T3 (ru) |
| HU (1) | HU208403B (ru) |
| IE (2) | IE66927B1 (ru) |
| IL (1) | IL85742A (ru) |
| NO (1) | NO881131L (ru) |
| NZ (1) | NZ223878A (ru) |
| PL (1) | PL161857B1 (ru) |
| PT (1) | PT86978B (ru) |
| RU (1) | RU2087155C1 (ru) |
| YU (1) | YU51888A (ru) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5688519A (en) * | 1987-04-06 | 1997-11-18 | Leonard; Robert J. | Flash-flow fused medicinal implants |
| US5137669A (en) * | 1988-03-02 | 1992-08-11 | Endocon, Inc. | Manufacture of partially fused peptide pellet |
| ATE130195T1 (de) * | 1988-07-26 | 1995-12-15 | Univ Rutgers | Vorrichtungen und verfahren zur wachstumsförderung bei bratgeflügel. |
| US5637566A (en) * | 1988-08-24 | 1997-06-10 | Southern Cross Biotech Pty. Ltd. | Method of improving carcass quality by administering growth hormone |
| DK173142B1 (da) * | 1988-08-24 | 2000-02-07 | Natinco Nv | Fremgangsmåde til forbedring af kødkvaliteten og foderomsætningseffektiviteten for grise |
| PH30995A (en) * | 1989-07-07 | 1997-12-23 | Novartis Inc | Sustained release formulations of water soluble peptides. |
| US5538739A (en) * | 1989-07-07 | 1996-07-23 | Sandoz Ltd. | Sustained release formulations of water soluble peptides |
| US5182369A (en) * | 1990-02-28 | 1993-01-26 | Monsanto Company | Method for purifying somatotropin monomers |
| US5156851A (en) * | 1990-06-20 | 1992-10-20 | Monsanto Company | Coated veterinary implants |
| US5232708A (en) * | 1990-06-20 | 1993-08-03 | Monsanto Company | Coated veterinary implants |
| US5091185A (en) * | 1990-06-20 | 1992-02-25 | Monsanto Company | Coated veterinary implants |
| WO1992002211A1 (en) * | 1990-08-09 | 1992-02-20 | Endocon, Inc. | Multiple drug delivery system |
| US5169834A (en) * | 1990-11-30 | 1992-12-08 | American Cyanamid Company | Compositions and method for reducing vial breakage during lyophilization |
| ES2087337T3 (es) * | 1991-06-24 | 1996-07-16 | American Cyanamid Co | Composiciones de implantes que contienen una proteina, peptido o polipeptido biologicamente activos. |
| US5801141A (en) * | 1991-06-24 | 1998-09-01 | American Cyanamid Company | Implant compositions containing a biologically active protein, peptide or polypeptide |
| US5328697A (en) * | 1992-02-10 | 1994-07-12 | Mallinckrodt Veterinary, Inc. | Compositions and processes for the sustained release of drugs |
| US5429822A (en) * | 1992-03-13 | 1995-07-04 | Cambridge Scientific, Inc. | Biodegradable bursting release system |
| SE9303068D0 (sv) * | 1993-09-21 | 1993-09-21 | Kabi Pharmacia Ab | New use |
| ZA949350B (en) | 1994-01-25 | 1996-05-24 | Upjohn Co | Aqueous prolonged release formulation |
| NZ281797A (en) * | 1994-02-18 | 1997-04-24 | Innovac Co | Inoculation of animals by inserting dried pelleted biological materials into the animal's ear |
| US5633000A (en) * | 1994-06-23 | 1997-05-27 | Axxia Technologies | Subcutaneous implant |
| US5595752A (en) * | 1994-07-01 | 1997-01-21 | Monsanto Company | Increasing dressing percentage and carcass weight in finishing beef cattle |
| US5595760A (en) * | 1994-09-02 | 1997-01-21 | Delab | Sustained release of peptides from pharmaceutical compositions |
| US5582591A (en) * | 1994-09-02 | 1996-12-10 | Delab | Delivery of solid drug compositions |
| US5837276A (en) | 1994-09-02 | 1998-11-17 | Delab | Apparatus for the delivery of elongate solid drug compositions |
| FR2756493B1 (fr) * | 1996-12-02 | 2001-04-13 | Delab | Dispositif d'administration locale de formulations solides ou semi-solides |
| US20020111603A1 (en) | 1996-12-02 | 2002-08-15 | Societe De Conseils De Recherches Et D'application | Device for local administration of solid or semi-solid formulations and delayed-release formulations for proposal parental administration and preparation process |
| GB2326825A (en) * | 1997-04-10 | 1999-01-06 | William Leslie Porter | Bolus for supplying biologically beneficial substances to ruminant animals |
| AU725882B2 (en) * | 1997-06-27 | 2000-10-26 | Monsanto Technology Llc | Accelerating animal hoof growth with somatotropin |
| KR19990071255A (ko) | 1998-02-28 | 1999-09-15 | 성재갑 | 소마토트로핀과 비타민의 합제 조성물 |
| FR2770134B1 (fr) * | 1998-10-28 | 2002-06-07 | Delab | Formulations solides ou semi-solides pour administration locale |
| US6488649B1 (en) | 1998-11-24 | 2002-12-03 | Edward M. Lichten | Implant device |
| US6238706B1 (en) | 1999-05-06 | 2001-05-29 | Grofish L.L.C. | Method of stimulating growth in aquatic animals using growth hormones |
| ATE432689T1 (de) | 2002-03-04 | 2009-06-15 | Ipsen Pharma | Arzneimittelformulierungen mit verzögerter freisetzung mit einem trägerpeptid |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2517513A (en) * | 1943-02-27 | 1950-08-01 | Vaernet Carl | Pharmaceutical preparation for implantation |
| GB885798A (en) * | 1958-12-06 | 1961-12-28 | Organon Labor Ltd | Preparations of the growth hormone |
| US4164560A (en) * | 1977-01-05 | 1979-08-14 | Folkman Moses J | Systems for the controlled release of macromolecules |
| US4452775A (en) * | 1982-12-03 | 1984-06-05 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules |
| ES8702440A1 (es) | 1984-10-04 | 1986-12-16 | Monsanto Co | Un procedimiento para la preparacion de una composicion de polipeptido inyectable sustancialmente no acuosa. |
| US5037806A (en) | 1985-02-22 | 1991-08-06 | Monsanto Company | Biologically active method using somatotropins |
| EP0193917A3 (en) * | 1985-03-06 | 1987-09-23 | American Cyanamid Company | Water dispersible and water soluble carbohydrate polymer compositions for parenteral administration |
| US4670249A (en) * | 1985-04-12 | 1987-06-02 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth-promoting compositions |
| US4666704A (en) * | 1985-05-24 | 1987-05-19 | International Minerals & Chemical Corp. | Controlled release delivery system for macromolecules |
| US4786501A (en) * | 1985-07-15 | 1988-11-22 | International Minerals & Chemical Corp. | Cylindrical implants for the controlled release of growth hormones |
| IL79681A (en) * | 1985-08-12 | 1991-06-10 | Int Minerals & Chem Corp | Transition metal complexes of growth hormones and their prolonged release compositions |
| US4663147A (en) * | 1985-09-03 | 1987-05-05 | International Minerals & Chemical Corp. | Disc-like sustained release formulation |
| US4765980A (en) * | 1986-04-28 | 1988-08-23 | International Minerals & Chemical Corp. | Stabilized porcine growth hormone |
| CA1257199A (en) * | 1986-05-20 | 1989-07-11 | Paul Y. Wang | Preparation containing bioactive macromolecular substance for multi-months release in vivo |
-
1988
- 1988-02-03 US US07/146,381 patent/US4863736A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 CN CN88101301A patent/CN1051716C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1988-03-15 IL IL8885742A patent/IL85742A/xx not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 DE DE90202047T patent/DE3883254T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 ES ES88870047T patent/ES2053816T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 DE DE8888870047T patent/DE3872279T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-03-15 DK DK139288A patent/DK139288A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-03-15 PT PT86978A patent/PT86978B/pt unknown
- 1988-03-15 AU AU13110/88A patent/AU609456B2/en not_active Ceased
- 1988-03-15 DE DE9090202047A patent/DE3883254D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-03-15 ES ES90202047T patent/ES2044410T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 CA CA000561450A patent/CA1322329C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-03-15 NO NO88881131A patent/NO881131L/no unknown
- 1988-03-15 EP EP88870047A patent/EP0283458B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 AT AT90202047T patent/ATE92769T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 YU YU00518/88A patent/YU51888A/xx unknown
- 1988-03-15 IE IE930017A patent/IE66927B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 EP EP90202047A patent/EP0403032B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-15 JP JP63061749A patent/JP2664398B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-03-15 RU SU884355449A patent/RU2087155C1/ru active
- 1988-03-15 FI FI881219A patent/FI881219A/fi not_active Application Discontinuation
- 1988-03-15 BR BR888801163A patent/BR8801163A/pt not_active Application Discontinuation
- 1988-03-15 KR KR1019880002724A patent/KR900006886B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 IE IE75288A patent/IE62486B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 NZ NZ223878A patent/NZ223878A/xx unknown
- 1988-03-15 HU HU881226A patent/HU208403B/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-03-15 BG BG083325A patent/BG83325A/bg unknown
- 1988-03-15 AT AT88870047T patent/ATE77558T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-03-16 PL PL88271219A patent/PL161857B1/pl unknown
-
1992
- 1992-08-25 GR GR920401846T patent/GR3005504T3/el unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Заявка ЕПВ N 0204476, кл. A 61 K 9/00, 1986. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2087155C1 (ru) | Изделие для парентеральной имплантации животному | |
| KR940000002B1 (ko) | 코팅된 수의 이식정 | |
| CZ815687A3 (cs) | Nevodný prostředek na somatotropinové bázi | |
| EP1096962B1 (en) | Method of obscuring immune recognition | |
| EP0216485A1 (en) | Prolonged release of growth promoting hormones | |
| US4837202A (en) | Method for stimulating the immune system | |
| US5156851A (en) | Coated veterinary implants | |
| Cravener et al. | Effect of subcutaneous infusion of pituitary-derived chicken growth hormone on growth performance of broiler pullets | |
| US5232708A (en) | Coated veterinary implants | |
| NZ215730A (en) | Sustained-release peptide compositions containing proteins as carriers | |
| US5017560A (en) | Poultry growth promotion | |
| WO1992007556A1 (en) | Polyvinyl alcohol coated pellet of growth hormone | |
| US5028591A (en) | Method for stimulating the immune system | |
| EP1028747A1 (en) | Novel igf-i composition and its use | |
| HU203367B (en) | Process for obtaining somatotpropins from weak aqueous solution | |
| KR100270835B1 (ko) | 가축의 번식능력 및 지방 조정유 수율을 증가시키기 위한 소마토트로핀의 투여방법 | |
| KR920005688B1 (ko) | 생체내 활성을 갖는 폴리펩티드를 지속적으로 방출시키는 조성물 | |
| DD267910A5 (de) | Verfahren zur herstellung eines fuer die parenterale verarbeitung eines somatotorpins an ein tier angepassten formkoerper |