RU2080066C1 - Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров - Google Patents
Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров Download PDFInfo
- Publication number
- RU2080066C1 RU2080066C1 RU9494018420A RU94018420A RU2080066C1 RU 2080066 C1 RU2080066 C1 RU 2080066C1 RU 9494018420 A RU9494018420 A RU 9494018420A RU 94018420 A RU94018420 A RU 94018420A RU 2080066 C1 RU2080066 C1 RU 2080066C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- bacillus sphaericus
- designated
- preparing
- bacterium bacillus
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Использование: микробиологическая промышленность, производство препаратов против комаров. Сущность изобретения: штамм бактерий Bacillus sphaericus выделен из природных источников. Депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов под N B-6408. Препарат против комаров получают культивированием штамма на дрожже-полисахаридной среде в течение 48 ч при температуре 30oC. Москицидная активность штамма бактерий на личинках комаров Culex pipiens составляет: ЛК50 - 0,005 мг/л, ЛК90 - 0,01 мг/л. 2 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности и биотехнологии и может быть использовано для создания биоинсектицида для борьбы с комарами, мошками и т.д. переносчиками ряда тяжелых заболеваний: малярии, филариозов, лихорадки Денге и т.п.
Интенсификация антропогенной деятельности во всех климатогеографических зонах земного шара приводит к резкому увеличению заболеваний, вызванных двукрылыми насекомыми. Особенно опасны в этом плане страны с влажным и тропическим климатом. Кроме перечисленных болезней, массу неудобств людям в крупных и мелких городах, фермерам и туристам доставляют кровососущие комары Culex. Местом выплода этих кровососов являются затопленные подвалы домов, пруды. Борьба с возбудителями вышеперечисленных болезней ведется, в основном, с помощью химических инсектицидов, которым присущ целый комплекс недостатков, в том числе, они не безвредны для рыб, гидробионтов и человека, к ним у насекомых возникает устойчивость, они загрязняют окружающую среду. Альтернативным является способ борьбы с двукрылыми насекомыми с использованием экологически чистых биологических препаратов на основе энтомопатогенных бактерий. В последние годы интенсивно создаются биоинсектициды, действующим началом которых служат эндотоксины белковой природы, синтезируемые спорообразующими бактериями Bacilus thuringiensis и Bacillus sphaericus. Эндотоксины имеют различный спектр инсектицидной активности и могут быть использованы против двукрылых насекомых различных отрядов как отдельно, так и в комплексе.
Целью настоящего патента является создание высокоактивного штамма Bacillus sphaericus, обладающего инсектицидной активностью против комаров рода Culex и Anopheles, с возможным созданием на основе споро-кристаллического комплекса данного штамма биоинсектицида для борьбы с кровососущими насекомыми.
В настоящее время в мире зарегистрирован препарат против кровососущих насекомых "Сферимос" (Дания), сделанный на основе спорокристаллической смеси штамма Bacillus sphaericus шт. 2362. В нашей стране зарегистрирован штамм-продуцент Bacillus sphaericus B101, на основе которого сделана препаративная форма в виде смачивающегося порошка (Россия). Этот штамм взят в качестве прототипа с наиболее близким техническим решением.
Нами получен штамм Basillus sphaericus НИИ генетика 16-S25 (ВКМП-В-6408), высокоактивный против комаров. Штамм синтезирует два белковых эндотоксина, летальных для двукрылых насекомых. Предложенный штамм может являться основой для создания нового эффективного биоинсектицида для борьбы с кровососущими насекомыми.
Заявляемый штамм имеет следующие характеристики:
1. Культурально-морфологические признаки.
1. Культурально-морфологические признаки.
Грамположительные подвижные палочки размером 1-1,2 x 2-2,5 мкм. Сапрофит. Образует круглые споры и кристаллические включения на твердых и жидких питательных средах. На агаризованных средах через 24 ч роста образуют выпуклые блестящие колонии с ровными краями размером 3-4 мм.
При культивировании в жидких питательных средах (бульоне Хоттингера и т. д.) при аэрации штамм растет равномерно по всему объему.
При росте в богатых питательных средах, например в дрожже-полисахаридной среде (ДПС), pH 7,2, споро- и кристаллообразование завершаются к 48 ч культивирования при 26-30oC и аэрации. Титр термоустойчивых спор при культивировании в ДПС 3 млрд. спор/мл. При культивировании данного штамма выход фага не наблюдается.
2. Физиолого-биологические признаки.
Штамм 16-S 25 не утилизирует сахара, растет на обычных средах. Режим культивирования 26-30oC. Значения pH питательной среды для оптимального культивирования 6,8-7,2.
3. Генетические характеристики штамма.
Штамм устойчив к полимиксину 100 мкг/мл, стрептомицину 100 мкг/мл.
Кристаллические включения штамма состоят из белков с молекулярными массами 51 и 42 кDa.
4. Инсектицидные свойства.
Инсектицидные свойства штамма оценивали на личинках комаров лабораторной культуры Culex pipiens и Anopheles stephensi II возраста [1]
5. Способ получения штамма.
5. Способ получения штамма.
Штамм получен из природных источников. Инсектицидная активность штамма повышена путем многоступенчатой селекции.
Пример 1
Способ культивирования штамма.
Способ культивирования штамма.
Для культивирования штамма 16 S25 использовали дрожже-полисахаридную среду (ДПС). Состав дрожже-полисахаридной среды (ДПС), г/л:
Кормовые дрожжи (БВК) 30
Кукурузная мука 15
После стерилизации среды pH должна составлять 6,8-7,2. Засев среды производили с косяков в асептических условиях. После засева отбирали пробу для световой микроскопии для контроля концентрации (1%) и отсутствия посторонней микрофлоры. Культивирование проводили при температуре 30oC с аэрацией 48 ч. Начиная с 24 ч, одновременно образовывались споры и кристаллы, связанные со спорой (80% спор и 20% вегетативных клеток). На 48 ч роста почти все клетки споруются; соотношение спора кристалл 1:1. Контроль за спорообразованием и кристаллообразованием производили светооптическим методом.
Кормовые дрожжи (БВК) 30
Кукурузная мука 15
После стерилизации среды pH должна составлять 6,8-7,2. Засев среды производили с косяков в асептических условиях. После засева отбирали пробу для световой микроскопии для контроля концентрации (1%) и отсутствия посторонней микрофлоры. Культивирование проводили при температуре 30oC с аэрацией 48 ч. Начиная с 24 ч, одновременно образовывались споры и кристаллы, связанные со спорой (80% спор и 20% вегетативных клеток). На 48 ч роста почти все клетки споруются; соотношение спора кристалл 1:1. Контроль за спорообразованием и кристаллообразованием производили светооптическим методом.
В результате ферментации концентрация жизнеспособных спор в культуральной жидкости составляла 3 млрд. спор/мл.
Пример 2.
Оценка эффективности штамма на личинках комаров Culex и Anopheles в лабораторных условиях.
Инсектицидные свойства предложенного штамма испытывали на личинках лабораторных культур комаров Culex pipiens и Anopheles stephensi II возраста. Показателем активности штамма служили концентрации культуры, вызывающие 50 и 90% гибель личинок (ЛК50 и ЛК90) в сравнении с известными штаммами продуцентами. В качестве эталона использовали штаммы, выделенные из коммерческих препаратов "Сферимос" (Дания) и "Сферикс" (Россия).
Результаты исследований представлены в табл. 1.
Как видно из данных ЛК50 (табл. 1), предложенный нами штамм 16-S25 действует на личинок комаров Culex pipiens более чем в 30 раз эффективнее, чем штамм, выделенный из препарата "Сферикс", и более 1,5 раз активнее штамма, выделенного из "Сферимоса", а на личинках Anopheles stephensi он эффективнее в три раза, чем штамм, выделенный из "Сферикса".
Пример 3.
Сохранность препаратов лиофилизированных культур Bacillus sphaericus.
Для экспресс оценки сохранности препаратов биологических инсектицидов использовали хранение при повышенной температуре (56oC). Штаммы Bacillus sphaericus выращивали 48 ч в бульоне Хоттингера при 30oC, культуральные жидкости подвергали сушке на установке NEW BRUNSWICK, B-71, USA. Полученные лиофилизированные порошки хранили в термостате при 56oC в течение 30 дн. Результаты представлены в табл. 2.
Приведенные в табл. 2 данные показывают, что активность лиофилизированных препаратов штаммов 16-S25 и штамма из "Сферикса" при хранении в течение 30 дн при повышенной температуре снижается одинаково (8 и 7 раз соответственно), в то время как активность штамма из Сферимоса падает в 40 раз (приведенные цифры рассчитаны по ЛК50). Эти результаты позволяют сделать вывод о том, что предложенный нами штамм 16-S25 имеет относительно высокую способность к хранению при повышенной температуре.
ЛИТЕРАТУРА
Войцик А.А. Расницин Н.С. 11 Мед. паразит. и паразит. бол. 1992, N 4, с. 55-57.
Войцик А.А. Расницин Н.С. 11 Мед. паразит. и паразит. бол. 1992, N 4, с. 55-57.
Claims (1)
- Штамм бактерии Bacillus sphaericus ВКПМ В-6408, предназначенный для получения препарата, активного против комаров.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9494018420A RU2080066C1 (ru) | 1994-04-19 | 1994-04-19 | Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9494018420A RU2080066C1 (ru) | 1994-04-19 | 1994-04-19 | Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94018420A RU94018420A (ru) | 1996-03-10 |
RU2080066C1 true RU2080066C1 (ru) | 1997-05-27 |
Family
ID=20156142
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU9494018420A RU2080066C1 (ru) | 1994-04-19 | 1994-04-19 | Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2080066C1 (ru) |
-
1994
- 1994-04-19 RU RU9494018420A patent/RU2080066C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Медицинская паразитология и паразитарные болезни.- 1992, № 4, с.55 - 57. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU596125B2 (en) | Improvements in or relating to organic compounds | |
JPH0558833A (ja) | 新規な双翅類害虫に活性の新規なバシラス・チユーリンゲンシス単離体 | |
AU659199B2 (en) | Biological control of molluscs | |
US11096392B2 (en) | Bacteria and uses thereof | |
NO832466L (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av rene mutanter med insekticid virkning | |
JPH10504451A (ja) | 新規の双翅類活性化合物及びバチルス チューリングエンシス株 | |
RU2701502C1 (ru) | Кристаллообразующий штамм бактерий brevibacillus laterosporus с широким спектром антагонистической активности и его применение | |
JPH05260954A (ja) | 微生物の単離方法並びにそれによって単離された微生物及びその用途 | |
Mwamburi | Isolation and assessment of stability of six formulations of entomopathogenic Beauveria bassiana | |
RU2080066C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus sphaericus, предназначенный для получения препарата, активного против комаров | |
RU2453595C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis для получения биоинсектицида для борьбы с большой восковой молью | |
JPH0358904A (ja) | 新規なバシラス・スリンギエンシス分離体 | |
Chobchuenchom et al. | Isolation and characterization of pathogens attacking Pomacea canaliculata | |
KR100280380B1 (ko) | 바실러스투린지엔시스 엔티0423 균주의 내독소단백질 및 이를 이용한 미생물 살충제 | |
RU2422511C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Brevibacillus laterosporus, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ШИРОКИЙ СПЕКТР БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ | |
RU2122791C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. israelensis, предназначенный для получения препарата, активного против личинок комаров | |
RU2559548C2 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis для борьбы с колорадским жуком | |
CN112574901A (zh) | 苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种Btk-KN-R8及其应用 | |
RU2807482C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp. aizawai, проявляющий инсектицидную активность против вредителей - насекомых отряда Lepidoptera | |
KR20160052266A (ko) | 살충 활성이 있는 바실러스 투린지엔시스 아종 아이자와이 cab566 균주 및 이의 용도 | |
RU2179392C1 (ru) | Штамм бактерий bac. thuringiensis var. kurstaki вкм в-2248д, используемый для получения энтомопатогенных препаратов | |
CN111116723B (zh) | 野生稻抗菌肽OrR214及其应用 | |
CN111116722B (zh) | 野生稻抗菌肽OrR935及其应用 | |
RU2278159C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes | |
RU2813789C1 (ru) | Биопрепарат для защиты сельскохозяйственных и декоративных растений от листогрызущих насекомых и способ получения этого биопрепарата |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090520 |