RU2055889C1 - Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней - Google Patents
Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2055889C1 RU2055889C1 SU5038436A RU2055889C1 RU 2055889 C1 RU2055889 C1 RU 2055889C1 SU 5038436 A SU5038436 A SU 5038436A RU 2055889 C1 RU2055889 C1 RU 2055889C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- production
- gastroenteritis
- pig
- antigen
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Применение: ветеринарная вирусология, в частности технология получения антигенных препаратов, и может быть использовано в научно-исследовательских институтах, на предприятиях биологической промышленности при производстве средств специфической диагностики /ТГС/. Сущность: способ получения иммобилизированного антигенного препарата вируса ТГС включает выращивание вируса ТГС в клеточных культурах для получения вируссодержащей культуральной жидкости, извлчение антигена путем замораживания - оттаивания и последующую адсорбцию антигена на частицах твердофазного носителя. В качестве носителя используют частицы высокодисперсного глинистого минерала - бентонита в форме 5%-ного геля из расчета 0,150 - 0,350 мг сухого вещества на 1 мл вируссодержащей культуральной среды /рН = 5,0 - 6,0/. Адсорбция в течение 40 мин. Комплекс вирус - сорбент в дальнейшем используют для приготовления биопрепаратов, предназначенных для перорального применения.
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, в частности к технологии получения антигенных препаратов, и может быть использовано в научно-исследовательских институтах, на предприятих биологической промышленности при производстве средств специфической диагностики и профилактики против коронавируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГС).
Известен способ производства вакцины против вируса ТГС, предусматривающий получение вируссодержащей жидкости, выделение антигена-протеина РА и добавление в полученную вакцину адъюванта Фрейнда или гидроксида алюминия.
Предлагаемый способ получения иммобилизированных антигенных препаратов на основе природного алюмосиликата-бентонита для производства диагностических и лечебно-профилактических средств против возбудителя ТГС устраняет вышеизложенные недостатки и имеет ряд преимуществ. Установлено, что по величине удельной сорбции вирусов бентонит превосходит все известные сорбенты. Поэтому в последнее время этот высокодисперсный минерал находит более широкое применение в биотехнологии и вирусологии. Известно использование бентонита в качестве компонента питательной среды для клеточных культур с целью выявления бляшкообразующих вирусов, для изучения генетических свойств популяций вирусов, а также для очистки природных и сточных вод от возбудителей вирусных инфекций. Данные о структуре поверхности и химическом составе природного алюмосиликата, его нетоксичности для животных, культур клеток и микроорганизмов, опыт широкого и длительного применения бентонита в различных отраслях сельского хозяйства, пищевой промышленности и медицине, его высокая устойчивость к воздействию физико-химических факторов среды, лиофилизации и высушиванию все это позволяет использовать бентонит для получения высококонцентрированного антигенного препарата коронавируса ТГС в его иммобилизированной на носителе форме (1010-1011 БОЕ вируса на 1 г. сорбента).
Технический результат предлагаемого способа по сравнению с известными аналогами заключается в достижении более высокого уровня специфической активности диагностических и лечебно-профилактических препаратов против вируса ТГС при отсутствии неблагоприятного воздействия на организм животных. Способ отличается простотой и доступностью осуществления в производственных условиях, не требует применения дорогостоящей аппаратуры и высокоэнергоемких технологий.
Сущностью данного способа является концентрирование вирусного антигена путем адсорбции на частицах 5%-ного геля бентонита с последующим использованием комплекса вирус-сорбент для приготовления целевого продукта.
П р и м е р 1. Приготовление иммобилизированного антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней штамма Пурдью-115.
Взвесь клеток СПЭВ (перевиваемая культура почек эмбрионов свиней) в количестве 150-200 тыс. кл/мл в питательной среде, содержащей 45% среды 199,45% 5% -ного гемогидролизата и 10% сыворотки крупного рогатого скота, с добавлением антибиотиков вносят во вращающиеся бутыля и выращивают в устройстве для роллерного культивирования. На сформировавшийся через 48-72 ч монослой клеток, предварительно отмытый от сыворотки раствором Хенкса, наносят инфекционный вирус ТГС штамма Пурдью-115 в дозе 5-10 БОЕ/клетку и оставляют для адсорбции в течение 1 ч при 37оС. Затем инокулят удаляют, монослой клеток промывают раствором Хенкса и вносят поддерживающую среду (среда 199 без сыворотки с добавлением антибиотиков). После достижения цитопатического эффекта через 18-24 ч инфицированный монослой клеток вместе с культуральной средой трижды замораживают и оттаивают и центрифугируют при 10 тыс.g в течение 40 мин. Надосадочную жидкость отбирают, титруют, устанавливают рН 6,0 с помощью 1 М НСl и вносят 5%-ный гель бентонита в расчете 0,35 мг сухого вещества на 1 мл вируссодержащей среды с титром вируса 106-107 БОЕ/мл. При использовании указанной дозы сорбента адсорбируется 84,25± 8,74% вирусных частиц от их исходного количества. Дальнейшее увеличение дозы бентонита неэффективно, так как при этом концентрационная кривая зависимости величины удельной адсорбции от массы сорбента достигает стационарного уровня.
Затем смесь встряхивают на шуттель-аппарате в течение 40 мин до установления сорбционного равновесия и центрифугируют при 3,5 тыс. об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок отмывают раствором Хенкса (рН 5,0-6,0) для удаления неадсорбированных вирусных частиц и повторно центрифугируют при таком же режиме. Надосадочную жидкость снова удаляют, а осадок, представляющий собой комплекс вирус-сорбент, используют для приготовления целевого продукта. Так как коронавирус ТГС в иммобилизированной форме сохраняет свою инфекционную (бляшкообразующую) активность при инокуляции на чувствительную клеточную систему и при десорбции с поверхности носителя, то комплекс вирус-сорбент можно использовать для производства диагностических и лечебно-профилактических препаратов, предназначенных для перорального введения животным.
П р и м е р 2. Приготовление иммобилизированного антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней штамма Римс.
Вируссодержащую культуральную жидкость получают так же, как и в предыдущем примере. Затем устанавливают рН 5,0-5,5 с помощью 1 М НСl и вносят 5% -ный гель бентонита в количестве 0,15 мг/мл среды. Смесь встряхивают в течение 40 мин и центрифугируют при 3,5 тыс.об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок ресуспендируют в растворе Хенкса (рН 5,0-5,5) и повторно центрифугируют при 3,5 тыс.об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок в виде комплекса вирус-бентонит используют для приготовления биопрепаратов.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕННОГО ПРЕПАРАТА ВИРУСА ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОЭНТЕРИТА СВИНЕЙ, включающий получение вируссодержащей культуральной жидкости и выделение вирусного антигена, отличающийся тем, что полученный вирусный антиген адсорбируют на частицах 5 %-ного геля бентонита, взятого из расчета 0,15 - 0,35 мг сухого вещества на 1 мл вируссодержащей жидкости с титром 106 - 107 БОЕ/мл, при pH 5,0 - 6,0 и времени экспозиции на носителе не менее 40 мин.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU5038436 RU2055889C1 (ru) | 1992-03-10 | 1992-03-10 | Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU5038436 RU2055889C1 (ru) | 1992-03-10 | 1992-03-10 | Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2055889C1 true RU2055889C1 (ru) | 1996-03-10 |
Family
ID=21602395
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU5038436 RU2055889C1 (ru) | 1992-03-10 | 1992-03-10 | Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2055889C1 (ru) |
-
1992
- 1992-03-10 RU SU5038436 patent/RU2055889C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ЕР, N 0028804, кл. A 61K 39/225, опубл. 1981. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20230166019A1 (en) | Methods of using polymers | |
Clark et al. | In vitro studies on the use of clay, clay minerals and charcoal to adsorb bovine rotavirus and bovine coronavirus | |
CN1122531C (zh) | 抗日本脑炎疫苗的工业生产方法和所获得的疫苗 | |
KR101617464B1 (ko) | Ipv―dpt 백신 | |
RU2055889C1 (ru) | Способ получения антигенного препарата вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней | |
JPH03169893A (ja) | 精製方法 | |
RU2143921C1 (ru) | Вакцина против ящура типа а и способ ее изготовления | |
RU2142816C1 (ru) | Способ получения антигерпетической вакцины и лекарственная форма на ее основе | |
RU2329505C1 (ru) | Способ получения иммуносорбента для связывания вирусспецифических антител | |
US4471054A (en) | Process for inactivating foot-and-mouth disease virus | |
RU2181295C1 (ru) | Вирионная цитомегаловирусная вакцина и способ ее получения | |
CN114921419B (zh) | 一种鸭疫里氏杆菌噬菌体 | |
RU2077583C1 (ru) | Штамм "тапхар" вируса блютанга febris infecthiosa catarhaliss ovium, используемый для изготовления вакцины | |
RU2173344C2 (ru) | Вакцинный штамм вируса краснухи "орлов-д" и способ получения вакцины против краснухи | |
JPS63233929A (ja) | 抗原性細菌溶解質、その製造方法およびそれを含有する薬剤組成物 | |
Hare et al. | Adsorption of influenza virus | |
CN117417901A (zh) | 一种Dhakavirus属大肠杆菌噬菌体04086及其应用 | |
SU1150265A1 (ru) | Способ приготовлени среды покрыти дл вы влени вирусов методом бл шек | |
RU2014084C1 (ru) | Способ получения вирионной герпетической вакцины | |
SU770195A1 (ru) | Способ культивировани вирусов | |
RU2268937C1 (ru) | Штамм "вниизж" коронавируса крупного рогатого скота для изготовления диагностических, вакцинных и лечебных препаратов | |
RU2018322C1 (ru) | Вакцина против рожи свиней | |
RU2217496C2 (ru) | Способ получения антигенов аденовирусов птиц | |
RU1568520C (ru) | Штамм adenovirus canis 2 для изготовления и контроля инактивированной вакцины против аденовироза собак | |
Ziegler et al. | [79] Induction and partial purification of duck fibroblast interferon |